專利名稱：與離子通道尤其是Kv家族離子通道相互作用的5-羧酰胺基取代的噻唑衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及與離子通道相互作用的化合物。
具體而言，本發(fā)明涉及與Kv家族尤其是Kv4亞家族的離子通道相互作用的化合物。
本發(fā)明還涉及制備所述化合物的方法、涉及包含所述化合物的藥物組合物、以及涉及所述化合物在治療人和動(dòng)物體的方法中的用途和/或所述化合物在制備這種藥物組合物中的用途。
本發(fā)明的化合物例如可用于預(yù)防和/或治療與離子通道相關(guān)的病況或疾病，尤其可用于預(yù)防和/或治療與Kv家族離子通道相關(guān)的病況或疾病，以及更尤其可用于預(yù)防和/或治療與Kv4家族離子通道相關(guān)的病況或疾病。
本發(fā)明的其他方面、實(shí)施方案、用途和優(yōu)勢(shì)從以下進(jìn)一步描述中將變得清楚。

背景技術(shù)：
Kv4通道、及其編碼序列、其生物功能/活性及其疾病關(guān)聯(lián)性在本領(lǐng)域中已有描述，參見(jiàn)例如Bahring et al.，J.Biol.Chem.，Vol.276，no.26，233888-23894(2001)；Baldwin et al.，Neuron 7471-483(1991)；Dixonet al.，Circ.Res.79659-688(1996)；Dilks et al.，J.Neurophysiol.811974-1977(1999)；Kuo et al.，Cell，Vol.107，801-813(2001)；Pak etal.，Proc.Natl.Acad.Sci USA 88；4386-4390(1991)；Ohya et al.，F(xiàn)EBSLett.42047-53(1997)；Roberts and Tamkun，Proc.Natl.Acad.Sci USA881798-1802；Rudy et al.，Mol.Cell.Neurosci.2；89-102(1991)；Serodioet al.，J.Neurophysiol，752174-2179(1996)；Serodio和Rudy，J.Neurophysiol.791081-1091(1998)；和Takimoto et al.，Circ.Res.81553-539(1997)以及其中引用的進(jìn)一步參考。
通常，Kv4通道作為電壓門控鉀通道參與膜去級(jí)化和復(fù)極化事件，例如，作為神經(jīng)元放電的一部分和/或在此之后，和/或作為肌肉收縮/松弛循環(huán)的一部分。
具體而言，以及如上述參考中所述，認(rèn)為Kv4通道參與多種類型原代細(xì)胞產(chǎn)生的天然A型電流(Dilks et al.，同上)，尤其是在肌肉和神經(jīng)元細(xì)胞中。已在大多數(shù)神經(jīng)元、尤其是CNS神經(jīng)元(見(jiàn)Serodio和Rudy，同上，其中討論了Kv4通道在大鼠腦中的分布)、以及心肌中(見(jiàn)Dixonet al.以及Serodio et al.，同上，其中討論了Kv4轉(zhuǎn)錄本在大鼠、狗和人心臟中的豐度和分布)中發(fā)現(xiàn)Kv4.2和Kv4.3轉(zhuǎn)錄本。還發(fā)現(xiàn)，與其他家族的Kv-型通道如Kv1-型通道相比，Kv4通道在閾下電位時(shí)活化并失活，失活的時(shí)間常數(shù)作為電壓函數(shù)變化非常小(甚至在極負(fù)的電位時(shí))，并且從失活中非?？斓鼗謴?fù)過(guò)來(lái)(見(jiàn)Rudy和Serodio，同上)。
神經(jīng)元細(xì)胞中，尤其在腦神經(jīng)元中，認(rèn)為Kv4通道在調(diào)節(jié)放電速率、激發(fā)動(dòng)作電位、形成脈沖模式以及突觸后信號(hào)整合中發(fā)揮重要作用(Dilks et al.，和Bahring et al.，同上)，并且認(rèn)為與這種活性導(dǎo)致的生理狀態(tài)/疾病有關(guān)(Serodio和Rudy，同上)。
心臟中，認(rèn)為Kv4通道在心肌尤其在心室肌肉的非鈣依賴性A-型電流(“瞬時(shí)外向電流(transient outward current)”或“Ito”)中發(fā)揮主要作用，因而被認(rèn)為參與早期復(fù)極化以及因此全部動(dòng)作電位期間和不應(yīng)期的長(zhǎng)度(Serodio和Rudy，同上)。因此，認(rèn)為Kv4通道與(易感)心臟疾病例如心率不齊以及其他類型心衰相關(guān)(Kuo et al.，同上)。
目前為止，已經(jīng)克隆并表征了三種哺乳動(dòng)物Kv4基因-分別稱為Kv4.1(也作mSha1)、Kv4.2(也作RK5)以及Kv4.3，即來(lái)自大鼠和狗(Dixon et al，Serodio et al.，Ohya et al.以及Takimoto et al.，同上)以及來(lái)自人(Dilks et al.，以及Bahring et al.，同上；也參見(jiàn)例如WO98/42833以及US-A-6,395,477)。
編碼哺乳動(dòng)物Kv4通道的基因序列也可從公共數(shù)據(jù)庫(kù)例如GenBank/NCBI中獲得，如來(lái)自小鼠的Kv4.1(登記號(hào)NP_032449以及A38372)；來(lái)自人的Kv4.1(登記號(hào)BAA96454、AAF65617以及AF65516)；來(lái)自小鼠的Kv4.2(登記號(hào)NP_062671以及AAD16972)，來(lái)自大鼠的Kv4.2(登記號(hào)NP_113918)；來(lái)自人的Kv4.2(登記號(hào)AAD22053以及CAB56841)；來(lái)自小鼠的Kv4.3(登記號(hào)NM_019931以及AF384170)，來(lái)自大鼠的Kv4.3(登記號(hào)U42975)以及來(lái)自人的Kv4.3(登記號(hào)XM_052127)。
上述參考還表明將來(lái)可鑒定和克隆Kv4家族的其他通道，例如從腦的神經(jīng)元中，所述腦呈現(xiàn)Kv4-樣閾下工作型A通道，但沒(méi)有出現(xiàn)Kv4.1、Kv4.2和/或Kv4.3轉(zhuǎn)錄本的豐富表達(dá)(見(jiàn)Serodio和Rudy，同上)，或者從其他合適的組織/細(xì)胞中。
如上所述，哺乳動(dòng)物中的Kv4通道與Shal-樣基因產(chǎn)物具有高度序列一致性(＞70％)，因而認(rèn)為與其緊密相關(guān)，其中Shal-樣基因產(chǎn)物在黑腹果蠅(Drosophila melanogaster)中編碼鉀通道(見(jiàn)Baldwin et al，同上，另見(jiàn)WO 01/58952)。
申請(qǐng)人:的國(guó)際申請(qǐng)WO 03/097682中描述了確定化合物對(duì)Kv通道影響的分析，其中使用表達(dá)異源Kv通道如人Kv4.3通道的秀麗隱桿線蟲(Caenorhabditis elegans)的轉(zhuǎn)基因系。本領(lǐng)域技術(shù)人員清楚，并且在WO 03/097682中也提到，用于確定受試化合物一般地對(duì)離子通道、具體地對(duì)Kv通道的影響的其他分析和技術(shù)，比如FLIPR-技術(shù)以及應(yīng)用卵母細(xì)胞。這類分析可用于確定化合物是否與這種離子通道“相互作用”。如下所述并且對(duì)于本說(shuō)明書和所附權(quán)利要求，如果化合物作為所述離子通道和/或所述離子通道相關(guān)生物功能和/或通路的拮抗劑起作用，尤其是如果這種化合物可以完全或部分“阻斷”這種離子通道，則認(rèn)為這種化合物與所述離子通道，例如Kv家族尤其是Kv4亞家族離子通道，“相互作用”。
考慮到上述生物功能和疾病關(guān)聯(lián)性，發(fā)現(xiàn)與離子通道相互作用的化合物可以作為藥物活性劑的用途，尤其是用于預(yù)防和/或治療與該化合物相互作用的離子通道相關(guān)的疾病和病癥。通過(guò)非限定性實(shí)施例，與Kv4亞家族離子通道尤其是與Kv4.3離子通道相互作用的化合物(例如，本文中此后進(jìn)一步描述的化合物)可用于(制備藥物組合物用于)預(yù)防和/或治療心臟疾病如心率不齊、高血壓誘導(dǎo)的心臟疾病如高血壓誘導(dǎo)的心臟肥大(如心室肥大)，以及神經(jīng)系統(tǒng)疾病如癲癇、中風(fēng)、創(chuàng)傷性腦損傷、脊髓損傷、焦慮、失眠、阿爾茨海默病、腦脊髓炎、多發(fā)性硬化癥、脫髓鞘病、以及帕金森氏綜合征。
有些已知化合物的主要缺點(diǎn)涉及藥物不是以選擇性方式工作，即，它們不在不同離子通道之間進(jìn)行選擇。例如很多這些化合物還阻斷被稱作人eàg相關(guān)基因(human ether-à-go-go related gene)(hERG)鉀通道的鉀通道。以高活性阻斷這種通道的化合物可引起致命性反應(yīng)。這種不期望的阻斷可引起獲得性長(zhǎng)QT綜合征，這種疾病使患者處于危及生命的心率不齊風(fēng)險(xiǎn)之中。根據(jù)美國(guó)心臟學(xué)會(huì)報(bào)道，在美國(guó)猝死的首要原因是心率不齊?，F(xiàn)在FDA要求每種藥物在批準(zhǔn)之前應(yīng)當(dāng)進(jìn)行hERG阻斷分析。即使對(duì)大多數(shù)患者有益的藥物，如果它們阻斷hERG，也不能上市或已從市場(chǎng)上撤出。
因此，除了能夠調(diào)節(jié)特定Kv通道，期望發(fā)現(xiàn)與hERG通道相比較對(duì)Kv通道有選擇性的化合物。因此，需要發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)Kv通道、而不抑制hERG通道的化合物。
本領(lǐng)域中仍然迫切需要發(fā)現(xiàn)克服上述缺點(diǎn)的新型化合物。
所以本發(fā)明的一個(gè)目的是提供與離子通道相互作用的化合物，尤其是在脊椎動(dòng)物、更尤其是在溫血?jiǎng)游?、甚至更尤其是在哺乳?dòng)物、特別是在人中、與尤其是Kv家族離子通道、更尤其是Kv4亞家族離子通道、特別是Kv4.3通道相互作用的化合物。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供與離子通道尤其是Kv離子通道相互作用并且與hERG通道相比對(duì)Kv離子通道具有選擇性的化合物。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的第一方面涉及式I、II、III或IV的化合物、其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、外消旋體、前藥、代謝物、或其藥物可接受的鹽和/或溶劑化物，
其中當(dāng)X是O時(shí)，Y1選自N或CH＝，并且n是0， 其中當(dāng)X是N時(shí)，Y1選自S、O、N或CH＝，并且n是0或Y1選自N或CH＝并且n是1， 其中當(dāng)X是S時(shí)，Y1選自N或CH＝，并且n是0， 其中當(dāng)X是CH＝時(shí)，Y1選自O(shè)、N或S，并且n是0或1， 其中Y2選自C(R2)-或N， 其中n是選自0或1的整數(shù)， 其中在式I中Z1選自-N(R3)-、-O-、-N(R3)-NH-、或-CH2-，而在式II、III或IV中Z1選自N、或CH， 其中Z2選自-N(R1)-、-O-、或-S-， 其中R1和R3各自獨(dú)立地選自氫、烷基、烷基羰基、環(huán)烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基、芳烷基、環(huán)烷基烷基或?；?，任選地被一個(gè)或多個(gè)取代基所取代， 其中R2選自氫、烷基、環(huán)烷基、烯基或炔基，任選地被一個(gè)或多個(gè)取代基所取代， 其中Ar1選自芳基、雜環(huán)基或雜芳基，任選地被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、硝基、氨基、疊氮、氰基、烷基、環(huán)烷基、烷氨基、烷氧基、-SO2-NH2、芳基、雜芳基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、鹵代芳基、羧基、烷氧基羰基、烷基氨基羰基、雜芳基烷基、烷基磺酰胺、雜環(huán)基、烷基羰基氨基烷基、芳氧基、烷基羰基、?；?、芳基羰基、氨基羰基、烷基亞砜、-SO2R15、或烷硫基的取代基所取代，其中R15是烷基或環(huán)烷基， 其中Ar2選自芳基、雜環(huán)基或雜芳基，任選地被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、硝基、氨基、疊氮、氰基、烷基、環(huán)烷基、烷氨基、烷氧基、-SO2-NH2、-SO2R15、芳基、雜芳基、雜芳基烷基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、鹵代芳基、羧基、烷氧基羰基、烷基氨基羰基、烷基磺酰胺、雜環(huán)基、烷基羰基氨基烷基、芳氧基、烷基羰基、酰基、芳基羰基、氨基羰基、烷基亞砜、或烷硫基的取代基所取代，其中R15是烷基或環(huán)烷基， 其中L2是選自單鍵、式-R8-R9-的基團(tuán)、次烷基(alkylyn)、N、亞環(huán)烷基、-NH-(C(R4)(R4))q-、-(C(R4)(R4))q-、-C(R4)＝、-(C(R4)(R4))v-O-(C(R4)(R4))w-、-(C(R4)(R4))v-(C(R4))w＝、-(C(R4)(R4))q-(C＝O)-、或亞環(huán)烷基氧基亞烷基的連接基團(tuán)，其中-(C(R4)(R4))q-、(C(R4)(R4))w以及-(C(R4)(R4))v-各自獨(dú)立地是脂肪族基團(tuán)或形成環(huán)烷基，其中每個(gè)R4獨(dú)立地選自氫、烷基、羥基、烷氨基烷基、羧基、羥烷基、烷氧基烷基、烷氨基、或烷氧羰基；q是0和6之間的整數(shù)；v是0和6之間的整數(shù)以及w是0和6之間的整數(shù)， 其中L1是選自單鍵、-(C(R4)(R4))q-、或-(C(R4)(R4))q-(C＝O)-的連接基團(tuán)，其中每個(gè)R4獨(dú)立地選自氫、烷基、羥基、烷氨基烷基、羧基、羥烷基、烷氧基烷基、烷氨基、或烷氧羰基；q是0和6之間的整數(shù)； 其中R8是次烷基、-(C(R4)(R4))p-C(R14)或-(C(R4)(R4))p-C(R4)＝C，其中R9選自單鍵、-(C(R4)(R4))q-、或C(＝O)-，其中R14選自氫、羥基或烷基，其中p是0和3之間的整數(shù)， 其中R10選自-(C(R4)(R4))m-、-(C(R4)(R4))m-C(＝O)O-(C(R4)(R4))q-、或-(C(R4)(R4))m-N(R12)-(C(R4)(R4))q-，其中m是1和6之間的整數(shù)，其中R12選自氫、烷基、芳基、芳烷基或烷基羰基，和 其中虛線環(huán)代表位于成環(huán)鍵的任何特定位置的一個(gè)或幾個(gè)雙鍵。
第二方面，本發(fā)明涉及合成具有結(jié)構(gòu)式I、II、III或IV的化合物的方法，包括將式XXX的化合物
與式XXXI、XXXII、XXXIII或XXXIV的化合物
縮合的步驟，從而獲得式I、II、III或IV的化合物
其中Ar1、Ar2、L1、L2、X、Y1 Y2、R10、R8和R9具有此前定義中相同的含義。
驚奇地發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的化合物與如隨后實(shí)施例所示的離子通道相互作用，尤其是Kv家族離子通道，更尤其是Kv4亞家族的離子通道，特別是Kv4.3通道。Kv4.3離子通道與多種病況和疾病有關(guān)。另一方面，本發(fā)明提供用作藥物的式I、II、III或IV的化合物。
本發(fā)明的化合物尤其可用于制備預(yù)防和/或治療與Kv4家族離子通道相關(guān)的病況或疾病的藥物。所述與Kv4家族離子通道相關(guān)病況或疾病的非限定性實(shí)例可選自包含以下的組心臟疾病，包括心率不齊；高血壓誘導(dǎo)的心臟疾病，包括高血壓誘導(dǎo)的心臟肥大；神經(jīng)系統(tǒng)疾病和神經(jīng)病，包括癲癇、中風(fēng)、創(chuàng)傷性腦損傷、脊髓損傷、焦慮、失眠、腦脊髓炎、阿爾茨海默病多發(fā)性硬化癥、脫髓鞘病、和帕金森氏綜合征。一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供本發(fā)明的化合物用于制備治療心臟疾病的藥物的用途。另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供本發(fā)明的化合物用于制備治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥物的用途。
另一方面，本發(fā)明提供包含藥物可接受賦形劑以及治療有效量的根據(jù)本發(fā)明化合物的藥物組合物。所述組合物尤其可用于預(yù)防和/或治療如此處所引用的與Kv4家族離子通道相關(guān)的病況和疾病。所述組合物尤其適用于例如治療心臟疾病以及神經(jīng)系統(tǒng)疾病。
還驚奇地發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物與Kv1亞家族離子通道、特別是Kv1.5通道相互作用。
本發(fā)明還提供治療心臟疾病的方法，包括向需要這種治療的個(gè)體施用根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物。另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的方法，包括向需要這種治療的個(gè)體施用根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物。
發(fā)明描述 因此，第一方面，本發(fā)明涉及式I、II、III或IV的化合物、
其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、外消旋體、前藥、代謝物、或其藥物可接受的鹽和/或溶劑化物， 其中當(dāng)X是O時(shí)，Y1選自N或CH＝，并且n是0， 其中當(dāng)X是N時(shí)，Y1選自S、O、N或CH＝，并且n是0或Y1選自N或CH＝并且n是1， 其中當(dāng)X是S時(shí)，Y1選自N或CH＝，并且n是0， 其中當(dāng)X是CH＝時(shí)，Y1選自O(shè)、N或S，并且n是0或1， 其中Y2選自C(R2)-或N， 其中n是選自0或1的整數(shù)， 其中在式I中Z1選自-N(R3)-、-O-、-N(R3)-NH-、或CH2-，而在式II、III或IV中Z1選自N、或CH，和 其中Z2選自N(R1)-、-O-、或-S-。
其中虛線環(huán)代表位于成環(huán)鍵的任何特定位置的一個(gè)或多個(gè)雙鍵。
在一個(gè)實(shí)施方案中，X是氮，Y1是硫，Y2是C(R2)-，并且n是0，其中R2具有如此處定義中相同的含義。本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，X是硫，Y1是氮，Y2是C(R2)-，并且n是0，其中R2具有如此處定義中相同的含義。在另一實(shí)施方案中，X是氧，Y1是氮，Y2是C(R2)-，并且n是0，其中R2具有如此處定義中相同的含義。在另一實(shí)施方案中，X是氮，Y1是氮，Y2是C(R2)-，并且n是0，其中R2具有如此處定義中相同的含義。根據(jù)另一實(shí)施方案，X是硫，Y1是CH-，Y2是C(R2)-，并且n是0，其中R2具有如此處定義中相同的含義。在另一實(shí)施方案中，X是氮，Y1是氮，Y2是C(R2)-，并且n是1，其中R2具有如此處定義中相同的含義。在另一實(shí)施方案中，X是氧，Y1是氮，Y2是氮，并且n是0。
R1和R3可各自獨(dú)立地選自氫、烷基、烷基羰基、環(huán)烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基、芳烷基、環(huán)烷基烷基或酰基，任選被一個(gè)或多個(gè)取代基所取代。R2可以是氫或任選被取代的烷基、環(huán)烷基、烯基或炔基。例如，所包括的R2基團(tuán)可選自氫、烷基、或環(huán)烷基，優(yōu)選氫或C1-C4烷基。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，R2是氫或甲基。
Ar1和Ar2可各自獨(dú)立地選自芳基、雜環(huán)基或雜芳基，任選地被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、硝基、氨基、疊氮、氰基、烷基、環(huán)烷基、烷氨基、烷氧基、-SO2-NH2、芳基、雜芳基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、鹵代芳基、羧基、烷氧基羰基、烷基氨基羰基、雜芳基烷基、烷基磺酰胺、雜環(huán)基、烷基羰基氨基烷基、芳氧基、烷基羰基、?；?、芳基羰基、氨基羰基、烷基亞砜、-SO2R15、或烷硫基的取代基所取代，其中R15是烷基或環(huán)烷基。Ar1未取代或者被1至5個(gè)、優(yōu)選1至3個(gè)以及最優(yōu)選1或2個(gè)芳香取代基所取代。Ar2未取代或者被1至5個(gè)、優(yōu)選1至3個(gè)以及最優(yōu)選1或2個(gè)芳香取代基所取代。
L2代表選自單鍵、式-R8-R9-的基團(tuán)、次烷基、亞環(huán)烷基、-NH-(C(R4)(R4))q-、-(C(R4)(R4))q-、-C(R4)＝、-(C(R4)(R4))v-O-(C(R4)(R4))w-、-(C(R4)(R4))v-(C(R4))w＝、-(C(R4)(R4))q-(C＝O)-、或亞環(huán)烷基氧基亞烷基的連接基團(tuán)，其中-(C(R4)(R4))q-、(C(R4)(R4))w以及-(C(R4)(R4))v-是各自獨(dú)立的脂肪族或形成環(huán)烷基，其中每個(gè)R4獨(dú)立地選自氫、烷基、羥基、烷氨基烷基、羧基、羥烷基、烷氧烷基、烷氨基、或烷氧羰基；q是0和6之間的整數(shù)，優(yōu)選0、1、2、3或4，優(yōu)選0、1或2；v是0和6之間的整數(shù)，優(yōu)選0、1、2、3或4，優(yōu)選0、1或2；以及w是0和6之間的整數(shù)，優(yōu)選0、1、2、3或4，優(yōu)選0、1或2，其中R8是次烷基、-(C(R4)(R4))p-C(R14)或-(C(R4)(R4))p-C(R4)＝C，其中R9選自單鍵、-(C(R4)(R4))q-、或C(＝O)-，其中R14選自氫、羥基或烷基，其中p是0和3之間的整數(shù)，和 其中R10選自-(C(R4)(R4))m-、-(C(R4)(R4))m-C(＝O)O-(C(R4)(R4))q-、或-(C(R4)(R4))m-N(R12)-(C(R4)(R4))q-，其中m是1和6之間的整數(shù)，優(yōu)選1、2或3，其中R12選自氫、烷基、芳基、芳烷基或烷基羰基。
L1代表選自單鍵、-(C(R4)(R4))q-、或-(C(R4)(R4))q-(C＝O)-的連接基團(tuán)，其中每個(gè)R4獨(dú)立地選自氫、烷基、羥基、烷氨基烷基、羧基、羥烷基、烷氧烷基、烷氨基、或烷氧羰基；q是0和6之間的整數(shù)，優(yōu)選0、1、2或3。
當(dāng)描述本發(fā)明的化合物時(shí)，所用術(shù)語(yǔ)應(yīng)根據(jù)以下定義解釋，除非另有指明 術(shù)語(yǔ)“烷基”自身或作為其他取代基的一部分，表示由碳-碳單鍵連接的直鏈或分支飽和烴基團(tuán)，其具有1至10個(gè)碳原子，例如1至8個(gè)碳原子，例如1至6個(gè)碳原子，優(yōu)選1至4個(gè)碳原子。當(dāng)本文中在碳原子后使用下標(biāo)時(shí)，下標(biāo)表示所命名基團(tuán)可包含的碳原子的數(shù)目。因此，例如，C1-4烷基表示1至4個(gè)碳原子的烷基。烷基基團(tuán)的實(shí)例是甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、2-甲基丁基、戊基、異戊基及其異構(gòu)體、己基及其異構(gòu)體、庚基及其異構(gòu)體以及辛基及其異構(gòu)體。
術(shù)語(yǔ)“任選取代的烷基”表示在任何可用附著位點(diǎn)任選被一個(gè)或多個(gè)取代基(例如1至4個(gè)取代基，或1至2個(gè)取代基)取代的烷基基團(tuán)。這種取代基的非限定性實(shí)例包括鹵素、羥基、羰基、硝基、氨基、肟、亞氨基、疊氮、肼基、氰基、烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基、?；?、烷氨基、烷氧基、巰基、烷硫基、羧酸、?；被⑼榛?、氨基甲酸酯/鹽、硫代酰胺、脲、磺酰胺等。
當(dāng)術(shù)語(yǔ)“烷基”在其他術(shù)語(yǔ)后用作后綴時(shí)，如在“羥烷基”中，這旨在表示，如上面所定義的，用一個(gè)或兩個(gè)(優(yōu)選一個(gè))選自也在此處定義的其他具體指明的取代基所取代的烷基基團(tuán)。例如，“羥烷基”包括2-羥乙基、1-(羥甲基)-2-甲基丙基、3，4-二羥丁基等。“烷氧烷基”表示用一至兩個(gè)OR’取代的烷基基團(tuán)，其中R’是如下定義的烷氧基。例如，“芳烷基”或“(芳基)烷基”表示如上定義的取代烷基基團(tuán)，其中至少一個(gè)烷基取代基是如下定義的芳基，如苯甲基。
術(shù)語(yǔ)“羥烷基”表示-Ra-OH基團(tuán)，其中Ra是此處定義的亞烷基。
術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”自身或作為其他取代基的一部分，包括全飽和或部分飽和的(含1或2個(gè)雙鍵)包含1至3個(gè)環(huán)的烴基，所述環(huán)包括單環(huán)、雙環(huán)或多環(huán)烷基基團(tuán)，其中每個(gè)環(huán)結(jié)構(gòu)有3至8個(gè)碳原子，例如3至7個(gè)碳原子，例如3至6個(gè)碳原子，例如3至5個(gè)碳原子。多環(huán)環(huán)烷基的其他環(huán)可以被稠合、橋接和/或通過(guò)一個(gè)或多個(gè)螺原子來(lái)連接。單環(huán)環(huán)烷基的實(shí)例包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基等。多環(huán)環(huán)烷基的實(shí)例包括十氫萘基、雙環(huán)[5.4.0]十一烷基、金剛烷基等?！叭芜x取代的環(huán)烷基”表示任選具有一個(gè)或多個(gè)取代基(例如1至3個(gè)取代基，或1至2個(gè)取代基)的環(huán)烷基，所述取代基選自如上對(duì)取代烷基定義的取代基。當(dāng)后綴“亞基(ene)”和環(huán)基聯(lián)合使用時(shí)，旨在表示此處定義的環(huán)基有兩個(gè)單鍵作為連接至其他基團(tuán)的點(diǎn)。
術(shù)語(yǔ)“烯基”自身或作為其他取代基的一部分，表示直鏈或分支的烷基鏈，其包含至少一個(gè)單個(gè)碳碳雙鍵形式的不飽和鍵并且具有2至10個(gè)碳原子，例如2至8個(gè)碳原子，優(yōu)選2至6個(gè)碳原子，更優(yōu)選2至4個(gè)碳原子。烯基基團(tuán)的實(shí)例是乙烯基、2-丙烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-戊烯基及其異構(gòu)體、2-己烯基及其異構(gòu)體、2-庚烯基及其異構(gòu)體、2-辛烯基及其異構(gòu)體、2，4-戊二烯等。任選取代的烯基表示任選具有一個(gè)或多個(gè)取代基(例如1至3個(gè)取代基，或1至2個(gè)取代基)的烯基，所述取代基選自以上對(duì)取代烷基定義的取代基。
術(shù)語(yǔ)“炔基”自身或作為其他取代基的一部分，表示直鏈或分支的烷基鏈，其包含至少一個(gè)單個(gè)碳碳三鍵形式的不飽和鍵并且具有2至10個(gè)碳原子，例如2至8個(gè)碳原子，優(yōu)選2至6個(gè)碳原子，更優(yōu)選2至4個(gè)碳原子。炔基基團(tuán)的實(shí)例是乙炔基、2-丙炔基、2-丁炔基、3-丁炔基、2-戊炔基及其異構(gòu)體、2-己炔基及其異構(gòu)體、2-庚炔基及其異構(gòu)體、2-辛炔基及其異構(gòu)體等。任選取代的炔基表示任選具有一個(gè)或多個(gè)取代基(例如1至4個(gè)取代基，或1至2個(gè)取代基)的炔基，所述取代基選自以上對(duì)取代烷基定義的取代基。
當(dāng)定義的烷基基團(tuán)是二價(jià)時(shí)，即，具有兩個(gè)用于附著兩個(gè)其他基團(tuán)的單鍵，則稱為“亞烷基”基團(tuán)。亞烷基的非限定性實(shí)例包括亞甲基、亞乙基、甲基亞甲基、三亞甲基、亞丙基、四亞甲基、乙基亞乙基、1，2-二甲基亞乙基、五亞甲基和六亞甲基。相似地，當(dāng)以上定義的烯基基團(tuán)和以上定義的炔基基團(tuán)分別是具有用于附著兩個(gè)其他基團(tuán)的單鍵的二價(jià)基團(tuán)時(shí)，則分別稱為“亞烯基”和“亞炔基”。
當(dāng)所定義的烷基基團(tuán)是三價(jià)時(shí)，即具有用于附著三個(gè)其他基團(tuán)的三個(gè)單鍵時(shí)，則稱為“次烷基”(“alkylyne”或“alkyline”)基團(tuán)。這種次烷基的非限定性實(shí)例包括次甲基、1，1，2-次乙基等。
此處所用術(shù)語(yǔ)“芳基”自身或作為其他基團(tuán)的一部分，涉及但不限于5至14個(gè)碳原子的同素環(huán)(即烴)單環(huán)、雙環(huán)或三環(huán)芳香環(huán)或環(huán)系，其包含彼此稠合或共價(jià)連接的1至4個(gè)環(huán)，典型地包含5至8個(gè)原子；其中至少一個(gè)是芳香性的。該芳環(huán)可任選地包括一至三個(gè)與其稠合的附加環(huán)(環(huán)烷基、雜環(huán)或雜芳基)。
芳基的非限定性實(shí)例包括苯基、聯(lián)苯基、聯(lián)亞苯基(biphenylenyl)、5-或6-四氫萘基(tetralinyl)、1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-薁基(azulenyl)、1-或2-萘基、1-、2-或3-茚基、1-、2-或9-蒽基、1-、2-、3-、4-或5-苊基(acenaphtylenyl)、3-、4-或5-苊基(acenaphtenyl)、1-、2-、3-、4-或10-菲基、1-或2-并環(huán)戊二烯基(pentalenyl)、1、2-、3-或4-芴基或4-或5-茚滿基、5-、6-、7-或8-四氫化萘基、1，2，3，4-四氫化萘基、1，4-二氫化萘基、二苯并[a，d]環(huán)庚烯基、1-、2-、3-、4-或5-芘基。
芳環(huán)可任選地被一個(gè)或多個(gè)取代基所取代。“任選取代的芳基”涉及在任何可用附著位點(diǎn)任選具有一個(gè)或多個(gè)取代基(例如1至5個(gè)取代基，或1至2個(gè)取代基)的芳基。這種取代基的非限定性實(shí)例選自鹵素、羥基、羰基、硝基、氨基、疊氮、肼基、氰基、烷基、芳基、雜芳基、雜芳基烷基、環(huán)烷基、酰基、烷氨基、烷基氨基羰基、-SO2R15、烷基羰基氧基、稠合雜環(huán)基、鹵代烷基、烷基羰基、芳氧基、芳基羰基、鹵代烷氧基、烷氧基、巰基、烷硫基、鹵代芳基、羧基、?；被⑼榛?、氨基甲酸酯/鹽、硫代酰胺、脲或磺酰胺等，其中R15是烷基或環(huán)烷基。
此處所用術(shù)語(yǔ)“芳氧基”表示基團(tuán)-O-芳基，其中芳基如上所定義。
此處所用術(shù)語(yǔ)“芳?；?aroyl)”表示基團(tuán)-C(O)-芳基，其中芳基如上所定義。
此處所用術(shù)語(yǔ)“雜芳基”自身或作為其他基團(tuán)的一部分涉及但不限于5至12個(gè)碳原子的芳香環(huán)或環(huán)系，其包含彼此稠合的或共價(jià)連接的1至3個(gè)環(huán)，典型地包含5至8個(gè)原子；其中至少一個(gè)環(huán)是芳香性的，其中在一個(gè)或多個(gè)這些環(huán)中的一個(gè)或多個(gè)碳原子可替換為氧、氮或硫原子，其中氮和硫雜原子可任選被氧化并且氮雜原子可任選被季銨化。這種環(huán)可以和芳基、環(huán)烷基、雜芳基或雜環(huán)基環(huán)稠合。“任選取代的雜芳基”表示任選具有一個(gè)或多個(gè)取代基(例如1至4個(gè)取代基，或者1至2個(gè)取代基)的雜芳基，所述取代基選自以上對(duì)取代芳基定義的取代基。
雜芳基的非限定性實(shí)例可以是2-或3-呋喃基、2-或3-噻吩基、1-、2-或3-吡咯基、1-、2-、4-或5-咪唑基、1-、3-、4-或5-吡唑基、3-、4-或5-異噁唑基、2-、4-或5-噁唑基、3-、4-或5-異噻唑基、2-、4-或5-噻唑基、1，2，3-三唑-1-、-2-、-4-或-5-基、1，2，4-三唑-1-、-3-、-4-或-5-基、1，2，3-噁二唑-4-或-5-基、1，2，4-噁二唑-3-或-5-基、1，2，5-噁二唑基、1，3，4-噁二唑基、1，2，3-噻二唑-4-或-5-基、1，2，4-噻二唑-3-或-5-基、1，2，5-噻二唑-3-或-4-基、1，3，4-噻二唑基、1-或5-四唑基、2-、3-或4-吡啶基、3-或4-噠嗪基、2-、4-、5-或6-嘧啶基、2-、3-、4-、5-、6-2H-噻喃基、2-、3-或4-4H-噻喃基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并呋喃基、1-、3-、4-或5-異苯并呋喃基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并噻吩基、1-、3-、4-或5-異苯并噻吩基、1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基、2-或3-吡嗪基、1，4-噁嗪-2-或-3-基、1，4-二氧六環(huán)-2-或-3-基、1，4-噻嗪-2-或-3-基、1，2，3-三嗪基、1，2，4-三嗪基、1，3，5-三嗪-2-、-4-或-6-基、噻吩并[2，3-b]呋喃-2-、-3-、-4-或-5-基、1-、2-、4-或5-苯并咪唑基、1-、3-、4-、5-、6-或7-苯并吡唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并異噁唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噁唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并異噻唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基、1-、2-噻蒽基、3-、4-或5-異苯并呋喃基、1-、2-、3-、4-或9-呫噸基、1-、2-、3-或4-phenoxathiinyl、2-、3-吡嗪基、1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-吲哚啉基(indolizinyl)、2-、3-、4-或5-異吲哚基、1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲唑基、2-、6-、7-或8-嘌呤基、4-、5-或6-酞嗪基、2-、3-或4-萘啶基、2-、5-或6-喹喔啉基、2-、4-、5-、6-、7-或8-喹唑基、1-、2-、3-或4-喹嗪基、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基(喹啉基)、2-、4-、5-、6-、7-或8-喹唑基、1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-異喹啉基(異喹啉基)、3-、4-、5-、6-、7-或8-噌啉基、2-、4-、6-或7-蝶啶基、1-、2-、3-、4-或9-咔唑基、1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-或9-咔啉基、1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-、9-或10-菲啶基、1-、2-、3-或4-吖啶基、1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-或9-

啶基(perimidinyl)、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-、9-或10-(1，7)菲咯啉基、1-或2-吩嗪基、1-、2-、3-、4-或10-吩噻嗪基、3-或4-呋咱基(furazanyl)、1-、2-、3-、4-或10-吩噁嗪基、氮雜基(azcpinyl)、二氮雜基、二苯并[b，f]氮雜?；⒍f烷基、硫雜環(huán)丁基、噁唑基二苯并[a，d]環(huán)庚烯基、或其附加取代衍生物。
此處所用術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)基”或“雜環(huán)”自身或作為其他基團(tuán)的一部分表示非芳香的、全飽和或部分不飽和的環(huán)基(例如，3至13員單環(huán)、7至17員雙環(huán)、或10至20員三環(huán)環(huán)系、或總共包含3至10個(gè)環(huán)原子)，其中在至少一個(gè)含碳原子的環(huán)中具有至少一個(gè)雜原子。包含雜原子的雜環(huán)基團(tuán)的每個(gè)環(huán)可有1、2、3或4個(gè)選自氮原子、氧原子和/或硫原子的雜原子，其中氮和硫雜原子可任選地被氧化并且氮雜原子可任選地被季銨化?；蟽r(jià)允許時(shí)，雜環(huán)基團(tuán)可附著于環(huán)或環(huán)系的任何雜原子或碳原子。多環(huán)雜環(huán)的環(huán)可以被稠合、橋接和/或通過(guò)一個(gè)或多個(gè)螺原子連接?！叭芜x取代的雜環(huán)基”表示任選具有一個(gè)或多個(gè)取代基(例如1至4個(gè)取代基，或1至2個(gè)取代基)的雜環(huán)，所述取代基選自以上對(duì)取代芳基定義的取代基。
示例性雜環(huán)基團(tuán)包括哌啶基(piperidinyl)、氮雜環(huán)丁烷基、咪唑啉基、咪唑烷基(imidazolidinyl)、異噁唑啉基、噁唑烷基、異噁唑烷基、噻唑烷基、異噻唑烷基、哌啶基(piperidyl)、琥珀酰亞胺基、3H-吲哚基、吲哚啉基、異吲哚啉基、色烯基、異色烷基、呫噸基、2H-吡咯基、1-吡咯啉基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、吡咯烷基、4H-喹嗪基、4aH-咔唑基、2-氧哌嗪基、哌嗪基、高哌嗪基、2-吡唑啉基、3-吡唑啉基、吡喃基、二氫-2H-吡喃基、4H-吡喃基、3，4-二氫-2H-吡喃基、三嗪基、噌啉基、酞嗪基、氮雜?；⒀蹼s環(huán)丁基、硫雜環(huán)丁基、3-二氧戊環(huán)基、1，4-二氧六環(huán)基、2，5-二氧咪唑烷基、2，2，4-哌啶酮基、2-氧哌啶基、2-氧吡咯烷基(oxopyrrolodinyl)、2-氧氮雜基、吲哚啉基、四氫吡喃基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、四氫喹啉基、四氫異喹啉基、硫代嗎啉基、硫代嗎啉基亞砜、硫代嗎啉基砜、1，3-二氧戊環(huán)基、1，4-氧硫雜環(huán)己烷基(oxathianyl)、1，4-二噻烷基、1，3，5-三噁烷基、6H-1，2，5-噻二嗪基、2H-1，5，2-二噻嗪基、2H-oxocinyl、1H-吡咯嗪基、四氫-1，1-二氧噻吩基、N-甲?；哙夯?、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-2-基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-6-基、以及嗎啉基。
術(shù)語(yǔ)“芳烷基”自身或作為其他取代基的一部分，涉及這樣一種基團(tuán)，其具有作為烷基結(jié)構(gòu)連接至前述芳環(huán)之一的前述烷基。芳烷基的實(shí)例包括苯甲基、苯乙基、二苯甲基甲基、甲基苯基甲基、3-(2-萘基)-丁基等。
術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基烷基”自身或作為其他取代基的一部分，表示具有連接至前述烷基鏈之一的前述環(huán)烷基之一的基團(tuán)。這種環(huán)烷基烷基的實(shí)例包括環(huán)丙基甲基、環(huán)丁基甲基、環(huán)戊基甲基、環(huán)己基甲基、1-環(huán)戊基乙基、1-環(huán)己基乙基、2-環(huán)戊基乙基、2-環(huán)己基乙基、環(huán)丁基丙基、環(huán)戊基丙基、3-環(huán)戊基丁基、環(huán)己基丁基等。
術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)基-烷基”自身或作為其他取代基的一部分，表示具有連接至前述烷基之一的前述雜環(huán)基之一的基團(tuán)、即連接至基團(tuán)-Rb-Rc的基團(tuán)，其中Rb是亞烷基、或烷基基團(tuán)取代的亞烷基，并且Rc是雜環(huán)基。
術(shù)語(yǔ)“酰基”自身或作為其他取代基的一部分表示具有2至6個(gè)碳原子的烷?；?alkanoyl)基團(tuán)、或其烷酰基部分有1至4個(gè)碳原子的苯基烷?；鶊F(tuán)，即連接至例如但不限于烷基、芳基的基團(tuán)的羰基基團(tuán)，更具體而言基團(tuán)COR11，其中R11可選自如此處所定義的烷基、芳基、取代烷基或取代芳基。因此術(shù)語(yǔ)酰基包括基團(tuán)烷基羰基(COR11)，其中R11是烷基。所述?；缈梢允且阴；?、丙?；⒍□；⑽祯；托挛祯；?、苯甲?；?、苯乙?；⒈交；捅交□；?。
術(shù)語(yǔ)“烷氨基”自身或作為其他取代基的一部分表示由連接至一個(gè)或兩個(gè)獨(dú)立選擇并任選取代的烷基基團(tuán)、環(huán)烷基基團(tuán)、芳烷基或環(huán)烷基烷基基團(tuán)的氨基組成的基團(tuán)，即N(R6)(R7)，其中R6和R7分別獨(dú)立地選自氫、環(huán)烷基、芳烷基、環(huán)烷基烷基或烷基。烷氨基基團(tuán)的非限定性實(shí)例包括甲基氨基(NHCH3)、乙基氨基(NHCH2CH3)、正丙基氨基、異丙基氨基、正丁基氨基、異丁基氨基、仲丁基氨基、叔丁基氨基、正己基氨基等。
此處所述術(shù)語(yǔ)“酮”表示基團(tuán)＝O。
術(shù)語(yǔ)“氨基”涉及基團(tuán)NH2。
術(shù)語(yǔ)“氨基羰基”涉及基團(tuán)-(C＝O)-NH2。
術(shù)語(yǔ)“氨基烷基”涉及基團(tuán)-Rb-NRdRe，其中Rb是亞烷基或取代亞烷基，Rd是氫或此處定義的烷基或取代烷基，Re是氫或此處定義的烷基。
術(shù)語(yǔ)“烷氨基羰基”涉及基團(tuán)-(C＝O)-NRdRe，其中Rd是氫或此處定義的烷基或取代烷基，Re是此處定義的烷基或取代烷基。
術(shù)語(yǔ)“烷氨基羰基氨基”涉及基團(tuán)-NH(C＝O)-NRdRe或-NR′(C＝O)-NRdRe，其中Rd是氫或此處定義的烷基或取代烷基，Re是此處定義的烷基或取代烷基，其中R是烷基或取代烷基。
術(shù)語(yǔ)“羧基”涉及基團(tuán)-CO2H。因此，羧基烷基是具有至少一個(gè)-CO2H取代基的如上定義的烷基基團(tuán)。
術(shù)語(yǔ)“烷氧羰基”涉及連接至烷基的羧基，即形成C(＝O)OR11，其中R11如上對(duì)?；亩x。
術(shù)語(yǔ)“烷基羰基氧基”涉及O-C(＝O)R11，其中R11如上對(duì)?；亩x。
術(shù)語(yǔ)“烷基酰胺基”或“烷基酰胺”涉及式-NH(C＝O)R或-NR′(C＝O)R的烷基羰基氨基基團(tuán)，其中R和R各自獨(dú)立地是烷基或取代烷基。
術(shù)語(yǔ)“烷基羰基氨基烷基”涉及基團(tuán)-Rb-NRd-C(＝O)-Re，其中Rb是亞烷基或烷基取代的亞烷基，Rd是氫或此處定義的烷基，Re是此處定義的烷基。
術(shù)語(yǔ)“烷氨基(烷基取代)烷基”涉及基團(tuán)-Rf-NRdRe，其中Rf是烷基取代的亞烷基，Rd是氫或此處定義的烷基或取代烷基，Re是此處定義的烷基或取代烷基。
術(shù)語(yǔ)“烷氧基”自身或作為其他取代基的一部分，涉及由連接至一個(gè)任選取代的直鏈或分支烷基基團(tuán)、環(huán)烷基基團(tuán)、芳烷基或環(huán)烷基烷基基團(tuán)的氧原子組成的基團(tuán)。合適的烷氧基團(tuán)的非限定性實(shí)例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、己氧基等。
術(shù)語(yǔ)“烷硫基”自身或作為其他取代基的一部分，涉及由連接至一個(gè)任選取代的烷基基團(tuán)、環(huán)烷基基團(tuán)、芳烷基或環(huán)烷基烷基基團(tuán)的硫原子組成的基團(tuán)。烷硫基團(tuán)的非限定性實(shí)例包括甲基硫基(SCH3)、乙基硫基(SCH2CH3)、正丙基硫基、異丙基硫基、正丁基硫基、異丁基硫基、仲丁基硫基、叔丁基硫基、正己基硫基等。
術(shù)語(yǔ)“?；被弊陨砘蜃鳛槠渌〈囊徊糠?，涉及由連接至一個(gè)或兩個(gè)獨(dú)立選擇的前述?；鶊F(tuán)的氨基組成的基團(tuán)。在二羧酸的兩個(gè)?；B接至同一氨基基團(tuán)的情況下，其代表酰亞胺，如鄰苯二甲酰亞胺、馬來(lái)酰亞胺等，并且也包括在術(shù)語(yǔ)?；被暮x之內(nèi)。
術(shù)語(yǔ)“鹵”或“鹵素”作為基團(tuán)或基團(tuán)的一部分是氟、氯、溴或碘的通稱。
術(shù)語(yǔ)“鹵代烷基”單獨(dú)或組合，涉及具有如上定義含義的烷基，其中一個(gè)或多個(gè)氫被以上定義的鹵素所替換。這種鹵代烷基的非限定性實(shí)例包括氯甲基、1-溴乙基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、1，1，1-三氟乙基等。
術(shù)語(yǔ)“鹵代芳基”單獨(dú)或組合，涉及具有如上定義含義的芳基，其中一個(gè)或多個(gè)氫被上面定義的鹵素所替換。
術(shù)語(yǔ)“鹵代烷氧基”單獨(dú)或組合，涉及式為-O-烷基的基團(tuán)，其中烷基基團(tuán)被1、2、或3個(gè)鹵素原子取代。例如“鹵代烷氧基”包括-OCF3和-OCHF2。
術(shù)語(yǔ)“磺酰胺”單獨(dú)或組合，涉及式SO2-NRdRe的基團(tuán)，其中Rd是氫或此處定義的烷基或取代烷基，Re是氫或此處定義的烷基。
此處所用術(shù)語(yǔ)“任選取代的烷基、環(huán)烷基、烯基或炔基”表示任選取代的烷基、任選取代的環(huán)烷基、任選取代的烯基或任選取代的炔基，其中所述取代基與以上針對(duì)取代烷基描述的相同。
當(dāng)本發(fā)明使用術(shù)語(yǔ)“取代”時(shí)，其意思是指使用“取代”的表達(dá)式中所指原子上的一個(gè)或多個(gè)氫被選自指定的基團(tuán)所替換，條件是不超過(guò)所指原子的正?；蟽r(jià)，并且取代導(dǎo)致化學(xué)穩(wěn)定的化合物，即化合物在經(jīng)受從反應(yīng)混合物中分離直至有用純度以及配制成治療劑中足夠穩(wěn)定。
當(dāng)本發(fā)明中使用術(shù)語(yǔ)“本發(fā)明的化合物”或相似的術(shù)語(yǔ)時(shí)，意在包括通式I、II、III或IV的化合物及其任意亞組。這一術(shù)語(yǔ)還涉及表1和13中描述的化合物及其衍生物、N-氧化物、鹽、溶劑化物、水合物、立體異構(gòu)體形式、外消旋混合物、互變異構(gòu)體形式、光學(xué)異構(gòu)體、類似物、前藥、酯和代謝物、以及其季銨化氮類似物。所述化合物的N-氧化物形式意思包括其中一個(gè)或多個(gè)氮原子被氧化成所謂N-氧化物的化合物。
如說(shuō)明書和附屬權(quán)利要求中所用，除非文中明確指出，否則單數(shù)形式“一”包括對(duì)應(yīng)的復(fù)數(shù)形式。作為實(shí)例，“化合物”意思是指一種化合物或多于一種化合物。
此處所用星號(hào)(*)表示在此點(diǎn)處單、雙或三價(jià)基團(tuán)連接至其相關(guān)結(jié)構(gòu)的點(diǎn)，并且所述基團(tuán)形成相關(guān)結(jié)構(gòu)的一部分。
此處所用術(shù)語(yǔ)“前藥”是指制藥接受的衍生物，如酯、酰胺和磷酸鹽/酯，使得該衍生物產(chǎn)生的體內(nèi)生物轉(zhuǎn)化產(chǎn)物是該活性藥物。在此并入一般性描述前藥的參考Goodman和Gilman(The PharmacologicalBasis of Therapeutics，8th Ed，McGraw-Hill，Int.Ed.1992，″Biotransformation of Drugs，p 13-15)?？梢酝ㄟ^(guò)以一定方式修飾所述組分中存在的官能團(tuán)來(lái)制備本發(fā)明化合物的前藥，其修飾方式使得以常規(guī)操作或體內(nèi)將修飾成分切割成母體成分。例如WO 99/33795、WO99/33815、WO 99/33793和WO 99/33792描述了前藥的典型實(shí)例并通過(guò)引用全部并入此處。前藥的特征在于增加生物利用度以及容易在體內(nèi)代謝成活性抑制劑。
在一個(gè)具體實(shí)施方案中，本發(fā)明提供式I、II、III或IV的化合物，其中Y1、Y2、Z1、Z2具有和以上定義相同的含義，并且其中Ar1選自2-或3-呋喃基、2-或3-噻吩基、1-、2-或3-吡咯基、1-、2-、4-或5-咪唑基、1-、3-、4-或5-吡唑基、3-、4-或5-異噁唑基、2-、4-或5-噁唑基、3-、4-或5-異噻唑基、2-、4-或5-噻唑基、1，2，3-三唑-1-、-2-、-4-或-5-基、1，2，4-三唑-1-、-3-、-4-或-5-基、1，2，3-噁二唑-4-或-5-基、1，2，4-噁二唑-3-或-5-基、1，2，3-噻二唑-4-或-5-基、1，2，4-噻二唑-3-或-5-基、1，2，5-噻二唑-3-或-4-基、1-或5-四唑基、苯基、2-、3-或4-吡啶基、3-或4-噠嗪基、2-、4-、5-或6-嘧啶基、2-、3-、4-、5-、6-2H-噻喃基、2-、3-或4-4H-噻喃基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并呋喃基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并噻吩基、苯并咪唑酮基、1，3-苯并二氧戊環(huán)基、1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基、1-、2-、4-或5-苯并咪唑基、1-、3-、4-、5-、6-或7-苯并吡唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并異噁唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噁唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并異噻唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基、1-或2-萘基、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-喹啉基、2-、4-、5-、6-、7-或8-喹唑基、1-、3-、4-、5-、6-、7-、8-異喹啉基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-2-基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-6-基、2，3-二氫苯并呋喃-5-基、茚滿基、1，3-二氫苯并咪唑2-酮、1，2，3，4-四氫化萘-1-基(1，2，3，4-tetrahydronapthtlanel-1-yl)或1-、2-、3-、4-或9-咔唑基，任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、硝基、氨基、疊氮、氰基、烷基、環(huán)烷基、烷氨基、烷氧基、-SO2-NH2、芳基、雜芳基、雜芳基烷基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、鹵代芳基、羧基、烷氧基羰基、烷基氨基羰基、烷基磺酰胺、雜環(huán)基、烷基羰基氨基烷基、芳氧基、烷基羰基、酰基、芳基羰基、氨基羰基、烷基亞砜、或烷硫基的取代基所取代， 其中Ar2選自2-或3-呋喃基、2-或3-噻吩基、1-、2-或3-吡咯基、1-、2-、4-或5-咪唑基、1-、3-、4-或5-吡唑基、3-、4-或5-異噁唑基、2-、4-或5-噁唑基、3-、4-或5-異噻唑基、2-、4-或5-噻唑基、1，2，3-三唑-1-、-2-、-4-或-5-基、1，2，4-三唑-1-、-3-、-4-或-5-基、1，2，3-噁二唑-4-或-5-基、1，2，4-噁二唑-3-或-5-基、1，2，3-噻二唑-4-或-5-基、1，2，4-噻二唑-3-或-5-基、1，2，5-噻二唑-3-或-4-基、1-或5-四唑基、苯基、2-、3-或4-吡啶基、3-或4-噠嗪基、2-、4-、5-或6-嘧啶基、2，3-二氫苯并1，4]二氧六環(huán)-2-基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-6-基、2，3-二氫苯并呋喃-5-基、茚滿基、1，3-二氫苯并咪唑2-酮、1，2，3，4-四氫化萘-1-基、2-、3-、4-、5-、6-2H-噻喃基、2-、3-或4-4H-噻喃基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并呋喃基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并噻吩基、苯并咪唑酮基、1，3-苯并二氧戊環(huán)基、1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基、1-、2-、4-或5-苯并咪唑基、1-、3-、4-、5-、6-或7-苯并吡唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并異噁唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噁唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并異噻唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基、1-或2-萘基、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-喹啉基、2-、4-、5-、6-、7-或8-喹唑基、1-、3-、4-、5-、6-、7-、8-異喹啉基、或1-、2-、3-、4-或9-咔唑基，任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、硝基、氨基、疊氮、氰基、烷基、環(huán)烷基、烷氨基、烷氧基、-SO2-NH2、芳基、雜芳基、雜芳基烷基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、鹵代芳基、羧基、烷氧基羰基、烷基氨基羰基、烷基磺酰胺、雜環(huán)基、烷基羰基氨基烷基、芳氧基、烷基羰基、?；⒎蓟驶?、氨基羰基、烷基亞砜、或烷硫基的取代基所取代， 其中L2是選自單鍵、式-R8-R9-的基團(tuán)、次烷基(alkylyn)、N、亞環(huán)烷基、-NH-(C(R4)(R4))q-、-(C(R4)(R4))q-、-C(R4)＝、-(C(R4)(R4))v-O-(C(R4)(R4))w-、-(C(R4)(R4))v-(C(R4))w＝、-(C(R4)(R4))q-(C＝O)-、或亞環(huán)烷基氧基亞烷基的連接基團(tuán)，其中-(C(R4)(R4))q-、(C(R4)(R4))w以及-(C(R4)(R4))v-各自獨(dú)立地是脂肪族基團(tuán)或形成環(huán)烷基，其中每個(gè)R4獨(dú)立地選自氫、烷基、羥基、烷氨基烷基、羧基、羥烷基、烷氧基烷基、烷氨基、或烷氧羰基；q是0和6之間的整數(shù)；v是0和6之間的整數(shù)以及w是0和6之間的整數(shù)， 其中L1是選自單鍵、-(C(R4)(R4))q-、或-(C(R4)(R4))q-(C＝O)-的連接基團(tuán)，其中每個(gè)R4獨(dú)立地選自氫、烷基、羥基、烷氨基烷基、羧基、羥烷基、烷氧烷基、烷氨基、或烷氧羰基；q是0和6之間的整數(shù)； 其中R8是次烷基、-(C(R4)(R4))p-C(R14)或-(C(R4)(R4))p-C(R4)＝C，其中R9選自單鍵、-(C(R4)(R4))q-、或C(＝O)-，其中R14選自氫、羥基或烷基，其中p是0和3之間的整數(shù)， 其中R10選自-(C(R4)(R4))m-、-(C(R4)(R4))m-C(＝O)O-(C(R4)(R4))q-、或-(C(R4)(R4))m-N(R12)-(C(R4)(R4))q-，其中m是1和6之間的整數(shù)，其中R12選自氫、烷基、芳基、芳烷基、或烷基羰基， 其中R1和R3各自獨(dú)立地選自氫、C1-C8烷基、芳基、芳烷基、C3-C8環(huán)烷基、烷基羰基、或?；?，和 其中R2選自氫、C1-C8烷基或C3-C8環(huán)烷基。
根據(jù)一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案，本發(fā)明提供式V至XIII的化合物，
其中X、Y1、Y2、R1、n、R3、R8、R9、R10、L1、L2、Ar1和Ar2具有和此前定義中相同的含義。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，本發(fā)明提供式XIV至XXIX的化合物，
其中Ar1選自2-或3-呋喃基、2-或3-噻吩基、1-、2-或3-吡咯基、1-、2-、4-或5-咪唑基、1-、3-、4-或5-吡唑基、3-、4-或5-異噁唑基、2-、4-或5-噁唑基、3-、4-或5-異噻唑基、2-、4-或5-噻唑基、1，2，3-三唑-1-、-2-、-4-或-5-基、1，2，4-三唑-1-、-3-、-4-或-5-基、1，2，3-噁二唑-4-或-5-基、1，2，4-噁二唑-3-或-5-基、1，2，3-噻二唑-4-或-5-基、1，2，4-噻二唑-3-或-5-基、1，2，5-噻二唑-3-或-4-基、1-或5-四唑基、苯基、2-、3-或4-吡啶基、3-或4-噠嗪基、2-、4-、5-或6-嘧啶基、2-、3-、4-、5-、6-2H-噻喃基、2-、3-或4-4H-噻喃基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并呋喃基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并噻吩基、苯并咪唑酮基、1，3-苯并二氧戊環(huán)基、1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基、1-、2-、4-或5-苯并咪唑基、1-、3-、4-、5-、6-或7-苯并吡唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并異噁唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噁唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并異噻唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基、1-或2-萘基、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-喹啉基、2-、4-、5-、6-、7-或8-喹唑基、1-、3-、4-、5-、6-、7-、8-異喹啉基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-2-基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-6-基、2，3-二氫苯并呋喃-5-基、茚滿基、1，3-二氫苯并咪唑2-酮、1，2，3，4-四氫化萘-1-基或1-、2-、3-、4-或9-咔唑基，任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、硝基、氨基、疊氮、氰基、烷基、環(huán)烷基、烷氨基、烷氧基、-SO2-NH2、芳基、雜芳基、雜芳基烷基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、鹵代芳基、羧基、烷氧基羰基、烷基氨基羰基、烷基磺酰胺、雜環(huán)基、烷基羰基氨基烷基、芳氧基、烷基羰基、酰基、芳基羰基、氨基羰基、烷基亞砜、或烷硫基的取代基所取代， 其中Ar2選自2-或3-呋喃基、2-或3-噻吩基、1-、2-或3-吡咯基、1-、2-、4-或5-咪唑基、1-、3-、4-或5-吡唑基、3-、4-或5-異噁唑基、2-、4-或5-噁唑基、3-、4-或5-異噻唑基、2-、4-或5-噻唑基、1，2，3-三唑-1-、-2-、-4-或-5-基、1，2，4-三唑-1-、-3-、-4-或-5-基、1，2，3-噁二唑-4-或-5-基、1，2，4-噁二唑-3-或-5-基、1，2，3-噻二唑-4-或-5-基、1，2，4-噻二唑-3-或-5-基、1，2，5-噻二唑-3-或-4-基、1-或5-四唑基、苯基、2-、3-或4-吡啶基、3-或4-噠嗪基、2-、4-、5-或6-嘧啶基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-2-基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-6-基、2，3-二氫苯并呋喃-5-基、茚滿基、1，3-二氫苯并咪唑2-酮、1，2，3，4-四氫化萘-1-基、2-、3-、4-、5-、6-2H-噻喃基、2-、3-或4-4H-噻喃基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并呋喃基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并噻吩基、苯并咪唑酮基、1，3-苯并二氧戊環(huán)基、1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基、1-、2-、4-或5-苯并咪唑基、1-、3-、4-、5-、6-或7-苯并吡唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并異噁唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噁唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并異噻唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基、1-或2-萘基、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-喹啉基、2-、4-、5-、6-、7-或8-喹唑基、1-、3-、4-、5-、6-、7-、8-異喹啉基、或1-、2-、3-、4-或9-咔唑基，任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、硝基、氨基、疊氮、氰基、烷基、環(huán)烷基、烷氨基、烷氧基、-SO2-NH2、芳基、雜芳基、雜芳基烷基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、鹵代芳基、羧基、烷氧基羰基、烷基氨基羰基、烷基磺酰胺、雜環(huán)基、烷基羰基氨基烷基、芳氧基、烷基羰基、?；⒎蓟驶?、氨基羰基、烷基亞砜、或烷硫基的取代基所取代， 其中L2是選自單鍵、式-R8-R9-的基團(tuán)、次烷基(alkylyn)、N、亞環(huán)烷基、-NH-(C(R4)(R4))q-、-(C(R4)(R4))q-、-C(R4)＝、-(C(R4)(R4))v-O-(C(R4)(R4))w-、-(C(R4)(R4))v-(C(R4))w＝、-(C(R4)(R4))q-(C＝O)-、或亞環(huán)烷基氧基亞烷基的連接基團(tuán)，其中-(C(R4)(R4))q-、(C(R4)(R4))w以及-(C(R4)(R4))v-各自獨(dú)立地是脂肪族基團(tuán)或形成環(huán)烷基，其中每個(gè)R4獨(dú)立地選自氫、烷基、羥基、烷氨基烷基、羧基、羥烷基、烷氧基烷基、烷氨基、或烷氧羰基；q是0和6之間的整數(shù)；v是0和6之間的整數(shù)以及w是0和6之間的整數(shù)， 其中L1是選自單鍵、-(C(R4)(R4))q-、或-(C(R4)(R4))q-(C＝O)-的連接基團(tuán)，其中每個(gè)R4獨(dú)立地選自氫、烷基、羥基、烷氨基烷基、羧基、羥烷基、烷氧烷基、烷氨基、或烷氧羰基；q是0和6之間的整數(shù)； 其中R8是次烷基、-(C(R4)(R4))p-C(R14)或-(C(R4)(R4))p-C(R4)＝C，其中R9選自單鍵、-(C(R4)(R4))q-、或C(＝O)-，其中R14選自氫、羥基或烷基，其中p是0和3之間的整數(shù)， 其中R10選自-(C(R4)(R4))m-、-(C(R4)(R4))m-C(＝O)O-(C(R4)(R4))q-、或-(C(R4)(R4))m-N(R12)-(C(R4)(R4))q-，其中m是1和6之間的整數(shù)，其中R12選自氫、烷基、芳基、芳烷基、或烷基羰基，和 其中R1和R3各自獨(dú)立地選自氫、C1-C8烷基、芳基、芳烷基、C3-C8環(huán)烷基、烷基羰基、或酰基，R2選自氫、C1-C8烷基或C3-C8環(huán)烷基。
根據(jù)另一實(shí)施方案，本發(fā)明提供具有選自式XIV至XXVI的結(jié)構(gòu)式的化合物，其中Ar1選自苯基、6-吲哚基、1-萘基、2-萘基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-2-基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-6-基、茚滿基、1，3-二氫苯并咪唑2-酮、1，2，3，4-四氫化萘-1-基、2-苯并呋喃-5-基、吡啶-4-基、1，3-苯并二氧戊環(huán)基、苯并咪唑酮基、3-苯硫基、或5-(2，3-二氫)苯并呋喃基，任選被一至四個(gè)選自F、Cl、Br、-CH3、t-bu、-OCH3、-NO2、-CO2H、-C(＝O)-N(CH3)2、-O-C(＝O)-CH3、

-CH2-CH3、苯基、N-嗎啉代、-SO2-CH3、-CF3、-OCF3、-CH2-NH-C(＝O)-CH3、-S-CH3、-C(＝O)-CH3、-C(＝O)O-CH3、-C(＝O)O-CH2-CH3、-C(＝O)NH2、-N(CH3)2、-SO2-N(CH3)2、苯氧基、苯甲?；?C(CH3)3、-O-(CH2)2-CH3、-OH或CN的取代基所取代， 其中L2選自單鍵、-CH2-、-(CH2)2-、-(CH2)3-、-CH(CH2OH)-、-CH(CH2-O-CH3)-、-CH(CH3)-、-CH(CH2-CH3)-、-CH(CO2H)-、-CH(CO2CH3)-、-(CH2)2-O-CH2-、-CH(，CH2-N(CH3)2)-、-(CH2)2-CH＝或

或其中L2-Ar2是

或
其中Ar2選自苯基、1-萘基或2-萘基、吡啶-4-基、1，3-苯并二氧戊環(huán)基、苯并咪唑酮基、吡啶-3-基、吡啶-2-基、5-吲哚基、8-喹啉基、2-苯硫基、2，3-二氫苯并呋喃-5-基、2-噻吩基、3-噻吩基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-2-基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-6-基、茚滿基、1，3-二氫苯并咪唑2-酮、苯并(1，3)二氧戊環(huán)-5-基、茚滿-1-基、1，2，3，4-四氫化萘-1-基、2-苯并呋喃-5-基、吡啶-4-基、2-苯并噁唑基、或5-苯并呋喃基，任選被一或多個(gè)選自硝基、-SO2-NH2、F、Cl、Br、OH、-CH3、-OCH3、-NO2、-CO2H、-C(＝O)-N(CH3)2、-O-C(＝O)-CH3、


N-嗎啉代、-CH2-CH3、苯基、-SO2-CH3、-CF3、-OCF3、-CH2-NH-C(＝O)-CH3、-S-CH3、-C(＝O)-CH3、-C(＝O)O-CH3、-C(＝O)O-CH2-CH3、-C(＝O)NH2、-N(CH3)2、-SO2-N(CH3)2、苯氧基、苯甲酰基、-C(CH3)3、-O-(CH2)2-CH3、或CN的取代基所取代， 其中L1是單鍵或C(＝O)-， 其中R1選自氫、-CH3、或-C(＝O)-CH3， 其中R3選自氫、-CH3、苯基、苯甲基或-C(＝O)-CH3，和 其中R2選自氫、-CH3、或-C(＝O)-CH3。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供具有選自式XXVII至XXIX的結(jié)構(gòu)式的化合物， 其中基團(tuán)

選自


或
其中基團(tuán)

選自

或
其中基團(tuán)

選自


或
其中R12選自氫、CH3-C(＝O)-、CH3-、或苯甲基， 其中Ar1選自苯基、6-吲哚基、1-萘基、2-萘基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-2-基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-6-基、茚滿基、1，3-二氫苯并咪唑2-酮、1，2，3，4-四氫化萘-1-基、2-苯并呋喃-5-基、吡啶-4-基、3-噻吩基、1，3-苯并二氧戊環(huán)基、苯并咪唑酮基、或5-(2，3-二氫)苯并呋喃基，任選被一至四個(gè)選自F、Cl、Br、-CH3、t-bu、-OCH3、-NO2、-CO2H、-C(＝O)-N(CH3)2、-O-C(＝O)-CH3、

N-嗎啉代、-CH2-CH3、苯基、-SO2-CH3、-CF3、-OCF3、-CH2-NH-C(＝O)-CH3、-S-CH3、-C(＝O)-CH3、-C(＝O)O-CH3、-C(＝O)NH2、-N(CH3)2、-SO2-N(CH3)2、苯氧基、苯甲?；?、-C(CH3)3、-O-(CH2)2-CH3、-OH或CN的取代基所取代， 其中Ar2選自苯基、1-萘基或2-萘基、吡啶-4-基、吡啶-3-基、吡啶-2-基、5-吲哚基、8-喹啉基、2-苯硫基、2-苯并噁唑基、1，3-苯并二氧戊環(huán)基、2，3-二氫苯并呋喃-5-基、2-噻吩基、3-噻吩基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-2-基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-6-基、茚滿基、1，3-二氫苯并咪唑2-酮、苯并(1，3)二氧戊環(huán)-5-基、茚滿-1-基、1，2，3，4-四氫化萘-1-基、2-苯并呋喃-5-基、吡啶-4-基、苯并咪唑酮基、或5-苯并呋喃基，任選被一或多個(gè)選自硝基、-SO2-NH2、F、Cl、Br、OH、-CH3、-OCH3、-NO2、-CO2H、-C(＝O)-N(CH3)2、-O-C(＝O)-CH3、


N-嗎啉代、-CH2-CH3、苯基、-SO2-CH3、-CF3、-OCF3、-CH2-NH-C(＝O)-CH3、-S-CH3、-C(＝O)-CH3、-C(＝O)O-CH3、-C(＝O)O-CH2-CH3、-C(＝O)NH2、-N(CH3)2、-SO2-N(CH3)2、苯氧基、苯甲?；?C(CH3)3、-O-(CH2)2-CH3、或CN的取代基所取代，其中R1選自氫、-CH3、或-C(＝O)-CH3， 其中L1是單鍵或C(＝O)-， 其中R3選自氫、-CH3、苯基、苯甲基或-C(＝O)-CH3，和 其中R2選自氫、-CH3、或-C(＝O)-CH3。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式V的化合物，其中X、Y1、Y2、R1、n、R3、R8、R9、R10、L1、L2、Ar1和Ar2具有和此前定義中相同的含義，優(yōu)選式XVII的化合物，其中Ar1選自2-或3-呋喃基、2-或3-噻吩基、1-、2-或3-吡咯基、1-、2-、4-或5-咪唑基、1-、3-、4-或5-吡唑基、3-、4-或5-異噁唑基、2-、4-或5-噁唑基、3-、4-或5-異噻唑基、2-、4-或5-噻唑基、1，2，3-三唑-1-、-2-、-4-或-5-基、1，2，4-三唑-1-、-3-、-4-或-5-基、1，2，3-噁二唑-4-或-5-基、1，2，4-噁二唑-3-或-5-基、1，2，3-噻二唑-4-或-5-基、1，2，4-噻二唑-3-或-5-基、1，2，5-噻二唑-3-或-4-基、1-或5-四唑基、苯基、2-、3-或4-吡啶基、3-或4-噠嗪基、2-、4-、5-或6-嘧啶基、2-、3-、4-、5-、6-2H-噻喃基、2-、3-或4-4H-噻喃基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并呋喃基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并噻吩基、苯并咪唑酮基、1，3-苯并二氧戊環(huán)基、1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基、1-、2-、4-或5-苯并咪唑基、1-、3-、4-、5-、6-或7-苯并吡唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并異噁唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噁唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并異噻唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基、1-或2-萘基、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-喹啉基、2-、4-、5-、6-、7-或8-喹唑基、1-、3-、4-、5-、6-、7-、8-異喹啉基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-2-基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-6-基、2，3-二氫苯并呋喃-5-基、茚滿基、1，3-二氫苯并咪唑2-酮、1，2，3，4-四氫化萘-1-基或1-、2-、3-、4-或9-咔唑基，任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、硝基、氨基、疊氮、氰基、烷基、環(huán)烷基、烷氨基、烷氧基、-SO2-NH2、芳基、雜芳基、雜芳基烷基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、鹵代芳基、羧基、烷氧基羰基、烷基氨基羰基、烷基磺酰胺、雜環(huán)基、烷基羰基氨基烷基、芳氧基、烷基羰基、酰基、芳基羰基、氨基羰基、烷基亞砜、或烷硫基的取代基所取代，其中Ar2選自2-或3-呋喃基、2-或3-噻吩基、1-、2-或3-吡咯基、1-、2-、4-或5-咪唑基、1-、3-、4-或5-吡唑基、3-、4-或5-異噁唑基、2-、4-或5-噁唑基、3-、4-或5-異噻唑基、2-、4-或5-噻唑基、1，2，3-三唑-1-、-2-、-4-或-5-基、1，2，4-三唑-1-、-3-、-4-或-5-基、1，2，3-噁二唑-4-或-5-基、1，2，4-噁二唑-3-或-5-基、1，2，3-噻二唑-4-或-5-基、1，2，4-噻二唑-3-或-5-基、1，2，5-噻二唑-3-或-4-基、1-或5-四唑基、苯基、2-、3-或4-吡啶基、3-或4-噠嗪基、2-、4-、5-或6-嘧啶基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-2-基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-6-基、2，3-二氫苯并呋喃-5-基、茚滿基、1，3-二氫苯并咪唑2-酮、1，2，3，4-四氫化萘-1-基、2-、3-、4-、5-、6-2H-噻喃基、2-、3-或4-4H-噻喃基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并呋喃基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并噻吩基、苯并咪唑酮基、1，3-苯并二氧戊環(huán)基、1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基、1-、2-、4-或5-苯并咪唑基、1-、3-、4-、5-、6-或7-苯并吡唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并異噁唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噁唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并異噻唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基、1-或2-萘基、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-喹啉基、2-、4-、5-、6-、7-或8-喹唑基、1-、3-、4-、5-、6-、7-、8-異喹啉基、或1-、2-、3-、4-或9-咔唑基，任選被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基、硝基、氨基、疊氮、氰基、烷基、環(huán)烷基、烷氨基、烷氧基、-SO2-NH2、芳基、雜芳基、雜芳基烷基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、鹵代芳基、羧基、烷氧基羰基、烷基氨基羰基、烷基磺酰胺、雜環(huán)基、烷基羰基氨基烷基、芳氧基、烷基羰基、?；?、芳基羰基、氨基羰基、烷基亞砜、或烷硫基的取代基所取代，其中L2是選自單鍵、式-R8-R9-的基團(tuán)、次烷基(alkylyn)、N、亞環(huán)烷基、-NH-(C(R4)(R4))q-、-(C(R4)(R4))q-、-C(R4)＝、-(C(R4)(R4))v-O-(C(R4)(R4))w-、-(C(R4)(R4))v-(C(R4))w＝、-(C(R4)(R4))q-(C＝O)-、或亞環(huán)烷基氧基亞烷基的連接基團(tuán)，其中-(C(R4)(R4))q-、(C(R4)(R4))w以及-(C(R4)(R4))v-各自獨(dú)立地是脂肪族基團(tuán)或形成環(huán)烷基，其中每個(gè)R4獨(dú)立地選自氫、烷基、羥基、烷氨基烷基、羧基、羥烷基、烷氧基烷基、烷氨基、或烷氧羰基；q是0和6之間的整數(shù)；v是0和6之間的整數(shù)以及w是0和6之間的整數(shù)，其中L1是選自單鍵、-(C(R4)(R4))q-、或-(C(R4)(R4))q-(C＝O)-的連接基團(tuán)，其中每個(gè)R4獨(dú)立地選自氫、烷基、羥基、烷氨基烷基、羧基、羥烷基、烷氧烷基、烷氨基、或烷氧羰基；q是0和6之間的整數(shù)； 其中R8是次烷基、-(C(R4)(R4))p-C(R14)或-(C(R4)(R4))p-C(R4)＝C，其中R9選自單鍵、-(C(R4)(R4))q-、或C(＝O)-，其中R14選自氫、羥基或烷基，其中p是0和3之間的整數(shù)， 其中R10選自-(C(R4)(R4))m-、-(C(R4)(R4))m-C(＝O)O-(C(R4)(R4))q-、或-(C(R4)(R4))m-N(R12)-(C(R4)(R4))q-，其中m是1和6之間的整數(shù)，其中R12選自氫、烷基、芳基、芳烷基、或烷基羰基，和 其中R1和R3各自獨(dú)立地選自氫、C1-C8烷基、芳基、芳烷基、C3-C8環(huán)烷基、烷基羰基、或?；?，R2選自氫、C1-C8烷基或C3-C8環(huán)烷基。
優(yōu)選地，本發(fā)明涉及式XVII的化合物，其中Ar1選自苯基、6-吲哚基、1-萘基、2-萘基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-2-基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-6-基、茚滿基、1，3-二氫苯并咪唑2-酮、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-喹啉基、2-、4-、5-、6-、7-或8-喹唑基、1-、3-、4-、5-、6-、7-、8-異喹啉基、1，2，3，4-四氫化萘-1-基、2-苯并呋喃-5-基、吡啶-4-基、1，3-苯并二氧戊環(huán)基、苯并咪唑酮基、3-苯硫基、或5-(2，3-二氫)苯并呋喃基，任選被一至四個(gè)選自F、Cl、Br、-CH3、t-bu、-OCH3、-NO2、-CO2H、-C(＝O)-N(CH3)2、-O-C(＝O)-CH3、

-CH2-CH3、苯基、N-嗎啉代、-SO2-CH3、-CF3、-OCF3、-CH2-NH-C(＝O)-CH3、-S-CH3、-C(＝O)-CH3、-C(＝O)O-CH3、-C(＝O)O-CH2-CH3、-C(＝O)NH2、-N(CH3)2、-SO2-N(CH3)2、苯氧基、苯甲?；?C(CH3)3、-O-(CH2)2-CH3、-OH或CN的取代基所取代， 其中L2選自單鍵、-CH2-、-(CH2)2-、-(CH2)3-、-CH(CH2OH)-、-CH(CH2-O-CH3)-、-CH(CH3)-、-CH(CH2-CH3)-、-CH(CO2H)-、-CH(CO2CH3)-、-(CH2)2-O-CH2-、-CH(，CH2-N(CH3)2)-、-(CH2)2-CH＝或

或其中L2-Ar2是

或

其中Ar2選自苯基、1-萘基或2-萘基、吡啶-4-基、1，3-苯并二氧戊環(huán)基、苯并咪唑酮基、吡啶-3-基、吡啶-2-基、5-吲哚基、8-喹啉基、2-苯硫基、2，3-二氫苯并呋喃-5-基、2-噻吩基、3-噻吩基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-2-基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-6-基、茚滿基、1，3-二氫苯并咪唑2-酮、苯并(1，3)二氧戊環(huán)-5-基、茚滿-1-基、1，2，3，4-四氫化萘-1-基、2-苯并呋喃-5-基、吡啶-4-基、2-苯并噁唑基、或5-苯并呋喃基，任選被一或多個(gè)選自硝基、-SO2-NH2、F、Cl、Br、OH、-CH3、-OCH3、-NO2、-CO2H、-C(＝O)-N(CH3)2、-O-C(＝O)-CH3、

N-嗎啉代、-CH2-CH3、苯基、-SO2-CH3、-CF3、-OCF3、-CH2-NH-C(＝O)-CH3、-S-CH3、-C(＝O)-CH3、-C(＝O)O-CH3、-C(＝O)O-CH2-CH3、-C(＝O)NH2、-N(CH3)2、-SO2-N(CH3)2、苯氧基、苯甲?；?、-C(CH3)3、-O-(CH2)2-CH3、或CN的取代基所取代，其中L1是單鍵或C(＝O)-，其中R1選自氫、-CH3、或-C(＝O)-CH3，其中R3選自氫、-CH3、苯基、苯甲基或-C(＝O)-CH3，其中R2選自氫、-CH3、或-C(＝O)-CH3。
優(yōu)選地，本發(fā)明涉及式XVII的化合物，其中Ar1選自2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-喹啉基、2-、4-、5-、6-、7-或8-喹唑基、1-、3-、4-、5-、6-、7-、8-異喹啉基，任選被一至四個(gè)選自F、Cl、Br、-CH3、t-bu、-OCH3、-NO2、-CO2H、-C(＝O)-N(CH3)2、-O-C(＝O)-CH3、

-CH2-CH3、苯基、N-嗎啉代、-SO2-CH3、-CF3、-OCF3、-CH2-NH-C(＝O)-CH3、-S-CH3、-C(＝O)-CH3、-C(＝O)O-CH3、-C(＝O)O-CH2-CH3、-C(＝O)NH2、-N(CH3)2、-SO2-N(CH3)2、苯氧基、苯甲?；?C(CH3)3、-O-(CH2)2-CH3、-OH或CN的取代基所取代，其中L2是

其中Ar2選自苯基、1-萘基或2-萘基、吡啶-4-基、吡啶-3-基、吡啶-2-基、8-喹啉基，任選被一或多個(gè)選自硝基、-SO2-NH2、F、Cl、Br、OH、-CH3、-OCH3、-NO2、-CO2H、-C(＝O)-N(CH3)2、-O-C(＝O)-CH3、

N-嗎啉代、-CH2-CH3、苯基、-SO2-CH3、-CF3、-OCF3、-CH2-NH-C(＝O)-CH3、-S-CH3、-C(＝O)-CH3、-C(＝O)O-CH3、-C(＝O)O-CH2-CH3、-C(＝O)NH2、-N(CH3)2、-SO2-N(CH3)2、苯氧基、苯甲?；?C(CH3)3、-O-(CH2)2-CH3、或CN的取代基所取代，其中L1是C(＝O)-，其中R1是氫，其中R3是氫，并且其中R2選自氫、-CH3、或-C(＝O)-CH3。最優(yōu)選地。本發(fā)明涉及化合物944-甲基-2-(喹啉-8-基氨基)-噻唑-5-羧酸((1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺。
本發(fā)明包括所有具有選自式I至XXIX的式的化合物，以及表13中列出的具體化合物。
本發(fā)明還涉及利用例如結(jié)構(gòu)相關(guān)的化合物來(lái)制備根據(jù)本發(fā)明的化合物的方法。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，可以利用以下描述的以及實(shí)施例中的非限定性方法制備本發(fā)明的化合物。
在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，制備本發(fā)明化合物的方法包括將式XXX的化合物
與式XXXI、XXXII、XXXIII或XXXIV的化合物縮合的步驟
從而獲得式I、II、III或IV的化合物，
其中Ar1、Ar2、L1、L2、X、Y1、Y2、R10、R8和R9具有此前定義中相同的含義。
通?？梢酝ㄟ^(guò)式XXX的化合物與式XXXI、XXXII、XXXIII或XXXIV的化合物縮合來(lái)實(shí)施反應(yīng)。
可通過(guò)形成式XXX酸的酰氯然后通過(guò)所述酰氯與式XXXI、XXXII、XXXIII或XXXIV的胺偶聯(lián)來(lái)實(shí)施縮合。在另一個(gè)實(shí)施方案中，可通過(guò)在合適的堿存在下、利用合適的偶聯(lián)劑在合適的溶劑中實(shí)施縮合。合適的偶聯(lián)劑可以選自包含以下的組二環(huán)己基碳二亞胺、羥基苯并三唑、o-苯并三唑-1-基-N，N，N，N-4-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽等及其混合物。合適的溶劑可以選自包含以下的組二氯甲烷、二甲基甲酰胺等或其混合物。合適的堿的非限定性實(shí)例包括碳酸鉀、二異丙基乙胺、三乙胺、三異丙胺等。
如上所述，可以通過(guò)形成相應(yīng)的酰氯然后與期望的胺偶聯(lián)來(lái)實(shí)現(xiàn)縮合。在另一個(gè)實(shí)施方案中，縮合的實(shí)施可以利用合適的偶聯(lián)劑，如羥基苯并三唑(HOBT)、o-苯并三唑-1-基-N，N，N，N-4-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽(TBTU)等以合適的摩爾比，例如相對(duì)于酸衍生物在1∶1至1∶3之間；在合適的溶劑或溶劑混合物中，例如二氯甲烷(DCM)或二甲基甲酰胺(DMF)等中；在合適的溫度下，通常在0℃和所用溶劑沸點(diǎn)之間；持續(xù)合適的一段時(shí)間，通常0.25小時(shí)至48小時(shí)之間；在合適的堿存在下，例如有機(jī)堿如碳酸鉀(K2CO3)、二異丙基乙胺(DIEA)、三乙胺(TEA)、三異丙胺等，在0.1和5.0當(dāng)量的量之間。
該反應(yīng)的起始物是可商業(yè)獲得的或可以通過(guò)本身已知方式制備。
本發(fā)明的化合物可隨后從反應(yīng)混合物中分離，并且可任選地使用公知技術(shù)進(jìn)行進(jìn)一步純化，例如溶劑蒸發(fā)、洗、研碎、從合適的溶劑或溶劑混合物中重結(jié)晶，以及色譜技術(shù)，如柱色譜-例如使用硅膠或C18作為固定相-或制備型薄層色譜。
此處所用術(shù)語(yǔ)“立體異構(gòu)體”，定義由相同原子按相同鍵次序鍵合組成的但具有不可互換的不同三維結(jié)構(gòu)的所有可能化合物，其中本發(fā)明的化合物可以具有這些結(jié)構(gòu)。本領(lǐng)域技術(shù)人員知道本發(fā)明的有些化合物可以包括一個(gè)或多個(gè)個(gè)作為手性中心的非對(duì)稱碳原子，手性中心可導(dǎo)致不同光學(xué)形式(如對(duì)映體或非對(duì)映異構(gòu)體)。除非另有提及或指明，化合物的化學(xué)命名此處包含所述化合物可能具有的、所有可能構(gòu)型的所有這些光學(xué)形式以及所有可能的立體化學(xué)異構(gòu)形式的混合物。所述混合物可包含所述化合物基本分子結(jié)構(gòu)的所有非對(duì)映異構(gòu)體和/或?qū)τ丑w。本發(fā)明化合物的所有立體化學(xué)異構(gòu)形式無(wú)論是純形式或彼此混合的形式都落入本發(fā)明的范圍內(nèi)。
更一般地，從上所述，本領(lǐng)域技術(shù)人員知道本發(fā)明的有些化合物能以不同異構(gòu)體和/或互變異構(gòu)體形式存在，包括但不限于幾何異構(gòu)體、構(gòu)象異構(gòu)體和立體化學(xué)異構(gòu)體(即對(duì)映體和非對(duì)映異構(gòu)體)以及對(duì)應(yīng)本發(fā)明化合物中所存在環(huán)上不同位置上存在相同取代基的異構(gòu)體。所有這些可能的異構(gòu)體、互變異構(gòu)體及其混合物都包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
須知曉當(dāng)期望的本發(fā)明化合物和/或用于制備所述化合物的起始物質(zhì)、前體和/或中間體，包含對(duì)制備本發(fā)明化合物中所用反應(yīng)條件敏感的官能團(tuán)(即，如果沒(méi)有適當(dāng)保護(hù)，官能團(tuán)可能在這些條件下經(jīng)受非期望的反應(yīng))，官能團(tuán)在所述反應(yīng)期間可以用一個(gè)或多個(gè)合適的保護(hù)基團(tuán)進(jìn)行保護(hù)，所述保護(hù)基團(tuán)可以隨后在完成所述反應(yīng)以后和/或制備本發(fā)明化合物的后期或最終步驟之后被適當(dāng)去除。本發(fā)明化合物的受保護(hù)形式包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。合適的保護(hù)基團(tuán)，以及插入和去除保護(hù)基團(tuán)的方法和條件對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見(jiàn)的，并且已經(jīng)一般性地在有機(jī)化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)手冊(cè)中描述，如Greene和Wuts，“Protective groups inorganic synthesis”，3rd Edition，Wiley和Sons，1999，其通過(guò)參考全部并入此處。本領(lǐng)域技術(shù)人員還了解已經(jīng)用適當(dāng)官能團(tuán)保護(hù)一個(gè)或多個(gè)官能團(tuán)的本發(fā)明化合物可以用作生產(chǎn)和/或合成本發(fā)明化合物的中間體，因而形成本發(fā)明的另一方面。
本發(fā)明還包括通過(guò)根據(jù)本發(fā)明的方法可獲得的化合物。
驚奇地發(fā)現(xiàn)，如下實(shí)施例所示本發(fā)明化合物同離子通道相互作用，尤其是與Kv家族離子通道、更尤其是與Kv4亞家族的離子通道，特別是與Kv4.3通道相互作用。
“相互作用”表示本發(fā)明的化合物可作為所述離子通道和/或與這些通道相關(guān)的生物功能和/或通路的拮抗劑，尤其是本發(fā)明的化合物能夠完全或部分“阻斷”所述通道。優(yōu)選地，本發(fā)明的化合物與動(dòng)物的離子通道相互作用，優(yōu)選脊椎動(dòng)物，更優(yōu)選溫血?jiǎng)游?，更加?yōu)選哺乳動(dòng)物，最優(yōu)選人類。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物可作為所述離子通道和/或與之相關(guān)的生物功能或通路的拮抗劑。優(yōu)選地，本發(fā)明的化合物阻斷所述離子通道。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物可作為Kv家族離子通道和/或與之相關(guān)的生物功能或通路的拮抗劑。并且優(yōu)選本發(fā)明的化合物阻斷Kv家族離子通道。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物可作為Kv4亞家族離子通道和/或與之相關(guān)的生物功能或通路的拮抗劑。并且優(yōu)選本發(fā)明的化合物阻斷Kv4亞家族離子通道。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，本發(fā)明的化合物可作為Kv4.3離子通道和/或與之相關(guān)的生物功能或通路的拮抗劑。并且最優(yōu)選本發(fā)明的化合物阻斷Kv4.3離子通道。
根據(jù)另一個(gè)方面，阻斷Kv4.3離子通道的本發(fā)明化合物還阻斷Kv1亞家族離子通道，特別是Kv1.5離子通道。
本發(fā)明的化合物是否與離子通道相互作用可以利用合適的技術(shù)或分析來(lái)確定，如實(shí)施例中描述的分析。
因此本發(fā)明的化合物通?？捎米?1)離子通道和/或與之相關(guān)的生物功能或通路的拮抗劑，即在體外、體內(nèi)或治療環(huán)境中；(2)離子通道的阻斷劑，即在體外、體內(nèi)或治療環(huán)境中；和/或(3)藥物活性劑，尤其是用于(制備藥物組合物用于)預(yù)防和/或治療與所述離子通道相關(guān)的病況或疾病。
具體來(lái)說(shuō)，與Kv家族離子通道相互作用的本發(fā)明化合物可用作(1)Kv家族離子通道和/或與之相關(guān)的生物功能或通路的拮抗劑，即在體外、體內(nèi)或治療環(huán)境中；(2)Kv家族離子通道的阻斷劑，即在體外、體內(nèi)或治療環(huán)境中；和/或(3)藥物活性劑，尤其是用于(制備藥物組合物用于)預(yù)防和/或治療與Kv家族離子通道相關(guān)的病況或疾病。
具體地，與Kv4亞家族離子通道相互作用的本發(fā)明化合物可用作(1)Kv4亞家族離子通道和/或與之相關(guān)的生物功能或通路的拮抗劑，即在體外、體內(nèi)或治療環(huán)境中；(2)Kv4亞家族離子通道的阻斷劑，即在體外、體內(nèi)或治療環(huán)境中；和/或(3)藥物活性劑，尤其是用于(制備藥物組合物用于)預(yù)防和/或治療Kv4亞家族離子通道相關(guān)的病況或疾病。
甚至更具體地，與Kv4亞家族的Kv4.3離子通道相互作用的本發(fā)明化合物尤其可用作(1)Kv4亞家族的Kv4.3家族離子通道和/或與之相關(guān)的生物功能或通路的拮抗劑，即在體外、體內(nèi)或治療環(huán)境中；(2)Kv4.3離子通道的阻斷劑，即在體外、體內(nèi)或治療環(huán)境中；和/或(3)藥物活性劑，尤其是用于(制備藥物組合物用于)預(yù)防和/或治療Kv4.3離子通道相關(guān)的病況或疾病。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，與Kv1亞家族離子通道相互作用的本發(fā)明化合物可用作(1)Kv1亞家族離子通道和/或與之相關(guān)的生物功能或通路的拮抗劑，即在體外、體內(nèi)或治療環(huán)境中；(2)Kv1亞家族離子通道的阻斷劑，即在體外、體內(nèi)或治療環(huán)境中；和/或(3)藥物活性劑，尤其是用于(制備藥物組合物用于)預(yù)防和/或治療Kv1亞家族離子通道相關(guān)的病況或疾病。
更具體地，與Kv1亞家族的Kv1.5離子通道相互作用的本發(fā)明化合物尤其可用作(1)Kv1.5家族離子通道和/或與之相關(guān)的生物功能或通路的拮抗劑，即在體外、體內(nèi)或治療環(huán)境中；(2)Kv1.5家族離子通道的阻斷劑，即在體外、體內(nèi)或治療環(huán)境中；和/或(3)藥物活性劑，尤其是用于(制備藥物組合物用于)預(yù)防和/或治療Kv1.5家族離子通道相關(guān)的病況或疾病。
另一方面，本發(fā)明提供式I、II、III或IV的化合物用作藥物。而且，本發(fā)明提供式I、II、III或IV的化合物用作離子通道阻斷劑。此外，本發(fā)明提供式I、II、III或IV的化合物用作Kv4家族離子通道的離子通道阻斷劑。具體而言，本發(fā)明提供式I、II、III或IV的化合物用作Kv4.3家族離子通道的離子通道阻斷劑。而且，本發(fā)明提供式I、II、III或IV的化合物用作Kv1家族離子通道的離子通道阻斷劑。具體而言，本發(fā)明提供式I、II、III或IV的化合物用作Kv1.5家族離子通道的離子通道阻斷劑。
本發(fā)明還提供根據(jù)本發(fā)明的化合物用于制備預(yù)防和/或治療與Kv4和/或Kv1家族離子通道相關(guān)病況或疾病的藥物的用途。
這些疾病和障礙對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是清楚的。例如，與Kv4.3離子通道相關(guān)的病況或疾病，尤其是對(duì)于人類，包括心臟疾病如心率不齊、高血壓誘導(dǎo)的心臟疾病如高血壓誘導(dǎo)的心臟肥大(如室性肥大)，以及神經(jīng)系統(tǒng)疾病如神經(jīng)病，其非限定性實(shí)例包括癲癇、中風(fēng)、創(chuàng)傷性腦損傷、脊髓損傷、焦慮、失眠、腦脊髓炎、阿爾茨海默病、多發(fā)性硬化癥、脫髓鞘病和帕金森氏綜合征；并且與Kv4.3離子通道相互作用的本發(fā)明化合物可用于預(yù)防和/或治療這些病況和疾病。
相似的病況和疾病與Kv1.5離子通道相關(guān)，并且可用于預(yù)防和/或治療這些病況和疾病。例如，III型抗心律不齊藥物通過(guò)阻斷心肌鉀通道而發(fā)揮作用，導(dǎo)致延長(zhǎng)復(fù)極化和不應(yīng)期。在人的心房而不是心室組織中鑒定出了超快延遲整流電流(delayed rectifier current)I(Kur)。因此，它僅有助于動(dòng)作電位在心房中的復(fù)極化。Kv1.5蛋白質(zhì)被認(rèn)為是形成I(Kur)的關(guān)鍵的心臟電壓門控鉀通道。抑制Kv1.5的化合物將延遲動(dòng)作電位在心房中的復(fù)極化并因而延長(zhǎng)心房不應(yīng)期。假定Kv1.5抑制劑相對(duì)hERG具有高選擇性，這種抑制劑將不會(huì)干擾室性復(fù)極化，而室性復(fù)極化與促心率不齊如尖端扭轉(zhuǎn)型室性心動(dòng)過(guò)速(torsades de pointes)相關(guān)。因此，Kv1.5抑制劑在治療房性心律失常(atrial tachyarrhythmia)如心房纖維顫動(dòng)中特別受關(guān)注。因此，根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，本發(fā)明還涉及與Kv1.5離子通道相互作用的化合物用于預(yù)防和/或治療上面給出的病況和疾病以及與Kv4.3離子通道相關(guān)疾病中的用途。用于治療這些病況或疾病的優(yōu)選化合物是對(duì)Kv4.3和Kv1.5離子通道都表現(xiàn)活性的化合物。例如，所述化合物適于治療和/或預(yù)防多種疾病心率不齊，包括室上性心率不齊、房性心率不齊、心房纖維顫動(dòng)、心房撲動(dòng)、心肌缺血并發(fā)癥。例如，所述化合物還可以應(yīng)用于終止現(xiàn)有的心房纖維顫動(dòng)或撲動(dòng)以便恢復(fù)竇性心律(心臟節(jié)律cardioversion)。而且，所述物質(zhì)可以降低形成新纖維事件的易感性(維持竇性心律，預(yù)防性治療)， 根據(jù)本發(fā)明的化合物還可用作心率控制劑，心絞痛，包括緩解Prinzmetal癥狀、血管痙攣癥狀以及變異型癥狀、腸胃病，包括反流、食管炎、功能性消化不良、動(dòng)力障礙(包括便秘和腹瀉)以及腸易激綜合征、血管和內(nèi)臟平滑肌障礙，包括哮喘、慢性阻塞性肺病、成人呼吸窘迫綜合征、外周血管疾病(包括間歇性跛行)、靜脈機(jī)能不全、陽(yáng)萎、腦和冠狀動(dòng)脈痙攣以及雷諾氏病、炎性和免疫疾病，包括炎性腸病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、移植排斥、哮喘、慢性阻塞性肺病、囊性纖維化和動(dòng)脈粥樣硬化、細(xì)胞增殖性疾病，包括再狹窄和癌癥(包括白血病)、聽(tīng)覺(jué)系統(tǒng)疾病、視覺(jué)系統(tǒng)疾病，包括黃斑變性和白內(nèi)障、糖尿病，包括糖尿病性視網(wǎng)膜病、糖尿病性腎病和糖尿病性神經(jīng)病、肌肉疾病，包括肌強(qiáng)直和萎縮病、外周神經(jīng)病、認(rèn)知障礙、偏頭痛、記憶喪失，包括阿爾茨海默病和癡呆、CNS介導(dǎo)的運(yùn)動(dòng)機(jī)能紊亂，包括帕金森氏病、和共濟(jì)失調(diào)、癲癇、以及其他離子通道介導(dǎo)的病癥。
作為K1亞家族電壓門控K+通道的抑制劑，根據(jù)本發(fā)明的化合物用于治療多種病癥，包括器官或組織移植排斥、骨髓移植帶來(lái)的移植物抗宿主病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、橋本甲狀腺炎、多發(fā)性硬化癥、重癥肌無(wú)力、I型糖尿病葡萄膜炎、幼年發(fā)作的或新近發(fā)作的糖尿病、后部葡萄膜炎、過(guò)敏性腦脊髓炎、腎小球性腎炎、病原微生物引起的傳染性疾病、炎性和過(guò)度增殖性皮膚病、牛皮癬、特應(yīng)性皮炎、接觸性皮炎、濕疹性皮炎、seborrhoeis皮炎、扁平苔蘚、天皰瘡、大皰性類天皰瘡、大皰性表皮松解癥、風(fēng)疹、血管性水腫、脈管炎、紅斑、皮膚嗜酸性細(xì)胞增多癥、紅斑狼瘡、痤瘡、斑禿、角膜結(jié)膜炎、春季結(jié)膜炎、白塞病相關(guān)的葡萄膜炎、角膜炎、皰疹性角膜炎、圓錐形角膜、角膜上皮營(yíng)養(yǎng)不良、角膜白斑、眼天皰瘡、蠶蝕性角膜潰瘍、鞏膜炎、甲狀腺相關(guān)性眼病、Vogt-Koyanagi-Harada綜合征、肉狀瘤病、花粉過(guò)敏、可逆性阻塞性氣道疾病、支氣管哮喘、過(guò)敏性哮喘、內(nèi)源性哮喘、外源性哮喘、塵粒哮喘、慢性或頑固性哮喘、晚發(fā)哮喘和氣道高反應(yīng)性、支氣管炎、胃潰瘍、缺血性疾病和血栓引起的血管損傷、缺血性腸病、炎癥性腸病、壞死性小腸結(jié)腸炎、與熱傷以及白三烯B4-介導(dǎo)疾病相關(guān)的腸道損傷、Coeliaz病、直腸炎、嗜酸性細(xì)胞腸胃炎、肥大細(xì)胞增生病、克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎、偏頭痛、鼻炎、濕疹、間質(zhì)性腎炎、肺出血-腎炎綜合征(Good-pasture’s syndrome)、溶血性尿毒綜合征、糖尿病性腎病、多發(fā)性肌炎、格林-巴利綜合征、美尼爾氏病、多神經(jīng)炎、多發(fā)性神經(jīng)炎、單神經(jīng)炎、神經(jīng)根病、甲狀腺功能亢進(jìn)、巴塞杜氏病、純紅細(xì)胞再生障礙性貧血、再生障礙性貧血、再生不良性貧血、自發(fā)性血小板減少性紫癜、自身免疫性溶血性貧血、粒性白血球缺乏癥、惡性貧血、巨幼紅細(xì)胞性貧血、紅細(xì)胞發(fā)生不能、骨質(zhì)疏松癥、肉狀瘤病、纖維肺、特發(fā)性間質(zhì)性肺炎、皮肌炎、尋常型白斑(leukodermavulgaris)、尋常型魚鱗病、光過(guò)敏性敏感、皮膚T細(xì)胞淋巴瘤、動(dòng)脈硬化、動(dòng)脈粥樣硬化、主動(dòng)脈炎綜合征、結(jié)節(jié)性多動(dòng)脈炎、非炎性心肌病、硬皮病、Wegener肉芽腫、干燥綜合征、肥胖病、嗜酸性細(xì)胞筋膜炎、齒齦、牙周組織、、牙槽骨損傷、substantia osses dentis、腎小球性腎炎、通過(guò)防止脫發(fā)或提供育發(fā)和/或促進(jìn)毛發(fā)發(fā)生和毛發(fā)生長(zhǎng)的男性型脫發(fā)或老年性脫發(fā)、肌營(yíng)養(yǎng)不良、膿皮病以及Sezary綜合征、艾迪生氏病、保存、移植或缺血性疾病時(shí)發(fā)生的器官的缺血再灌注損傷、內(nèi)毒素休克、偽膜性結(jié)腸炎、藥物或放射引起的結(jié)腸炎、缺血性與急性腎功能不全、慢性腎功能不全、肺-氧或藥物引起的中毒病、肺癌、肺氣腫、白內(nèi)障、肺鐵末沉著癥、視網(wǎng)膜炎、色素變性、老年性黃斑變性、玻璃體創(chuàng)傷、角膜堿灼傷、多形性紅斑皮炎、線狀I(lǐng)gA大皰性皮膚病以及水泥皮炎、齒齦炎、牙周炎、膿毒病、胰腺炎、環(huán)境污染、衰老、癌發(fā)生、癌轉(zhuǎn)移和低氣壓病引起的疾病、組胺或白三烯-C4釋放引起的疾病、白塞病、自身免疫性肝炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化、硬化性膽管炎、部分肝臟切除、急性肝壞死、毒素引起的壞死、病毒性肝炎、休克或缺氧癥、乙肝病毒性肝炎、非甲/非乙型肝炎、肝硬化、酒精性肝硬化、肝衰竭、爆發(fā)性肝衰竭、遲發(fā)性肝功能衰竭、″慢加急性(acute-on-chronic)″肝衰竭、化療作用的增強(qiáng)、細(xì)胞巨化病毒感染、HCMV感染、AIDS、癌癥、老年癡呆、創(chuàng)傷以及慢性細(xì)菌感染。
本發(fā)明的化合物是抗心率不齊劑，用于預(yù)防和治療(包括部分緩解和治愈)心率不齊。作為Kv1.5的抑制劑，本發(fā)明范圍內(nèi)的化合物尤其用于選擇性預(yù)防和治療室上性心率不齊如心房纖維顫動(dòng)和心房撲動(dòng)。
可以通過(guò)合適的技術(shù)或分析來(lái)確定本發(fā)明的化合物是否分別與離子通道相互作用，如與Kv家族離子通道，例如Kv4或Kv1亞家族的離子通道，如Kv4.3或Kv1.5離子通道，如此處參考的分析和技術(shù)或本領(lǐng)域已知的其他合適的分析或技術(shù)。
對(duì)于制藥用途，本發(fā)明的化合物可用作游離的酸或堿、和/或制藥可接受的酸加成和/或堿加成鹽的形式(如，用無(wú)毒性有機(jī)或無(wú)機(jī)酸或堿獲得)、水合物、溶劑化物和/或配合物的形式、和/或潛藥或前藥(pro-drug或pre-drug)的形式，如酯。如此處所用，并且除非另有指明，術(shù)語(yǔ)“溶劑化物”包括可由本發(fā)明的化合物與合適的無(wú)機(jī)溶劑(如水合物)或有機(jī)溶劑例如但不限于醇、酮、酯等形成的任何組合物。這些鹽、水合物、溶劑化物等及其制備對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見(jiàn)的；例如可以參考在US-A-6,372,778、US-A-6,369,086、US-A-6,369,087以及US-A-6,372,733中描述的鹽、水合物、溶劑化物等。
根據(jù)本發(fā)明的化合物的制藥可接受的鹽，即以水-、油-溶性或分散性產(chǎn)物形式，包括如從無(wú)機(jī)或有機(jī)酸或堿形成的常規(guī)無(wú)毒鹽或季銨鹽。這些酸加成鹽的實(shí)例包括醋酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、二葡萄糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙基磺酸鹽、延胡索酸鹽、葡萄糖庚酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、乳酸鹽、馬來(lái)酸鹽、甲基磺酸鹽、2-萘-磺酸鹽、煙酸鹽、草酸鹽、雙羥萘酸鹽、果膠酸鹽、過(guò)硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、苦味酸鹽、三甲基乙酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽以及十一酸鹽。堿鹽包括銨鹽、堿金屬鹽如鈉和鉀鹽、堿土金屬鹽如鈣和鎂鹽、有機(jī)堿鹽如二環(huán)己基銨鹽、N-甲基-D-葡糖胺、氨基酸鹽如精氨酸、賴氨酸等。并且，可用這些藥劑將堿性含氮基團(tuán)季銨化，作為低級(jí)烷基鹵化物，如甲基、乙基、丙基、和丁基氯、溴和碘；二烷基硫酸鹽如二甲基、二乙基、二丁基；和二戊基硫酸鹽，長(zhǎng)鏈鹵化物如癸基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂基氯、溴和碘，芳烷基鹵化物如苯甲基和苯乙基-溴等。其他藥物可接受的鹽包括硫酸鹽、乙醇酸鹽和硫酸鹽。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及包含制藥可接受賦形劑和治療量的根據(jù)本發(fā)明化合物的藥物組合物。
此處所用術(shù)語(yǔ)“治療有效量”表示活性化合物或組分或藥物劑在組織、系統(tǒng)、動(dòng)物或人中引發(fā)生物或藥物反應(yīng)的量，其包括緩解待治療疾病的癥狀，這由研究人員、獸醫(yī)、醫(yī)師或其他臨床人員努力發(fā)現(xiàn)。
可以通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方式制備藥物組合物。為此，至少一種具有式I、II、III或IV的化合物、一種或更多種固體或液體制藥賦形劑以及如果期望還聯(lián)合其他藥物活性化合物一起帶入合適的施用形式或給藥形式，其可用作人醫(yī)學(xué)和獸醫(yī)學(xué)中的藥物。
通常，對(duì)于制藥用途，本發(fā)明的化合物可制成包含至少一種本發(fā)明化合物和至少一種制藥可接受的載體、稀釋劑或賦形劑和/或輔劑以及任選地一種或更多種其他藥物活性化合物的藥物制劑。通過(guò)非限定性實(shí)例，這種制劑可以是適于口服施用、腸胃外施用(如靜脈、肌肉或皮下注射或靜脈輸注)、局部施用、吸入施用、皮膚貼、植入、栓劑等的形式。這些合適的施用形式-根據(jù)施用方式其可以是固體、半固體或液體-以及制備這些施用形式所用的方法和載體、稀釋劑和賦形劑，因此對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見(jiàn)的；例如可再次參考US-A-6,372,778、US-A-6,369,086、US-A-6,369,087和US-A-6,372,733，以及標(biāo)準(zhǔn)手冊(cè)，如最新版的Remington′s Pharmaceutical Sciences。
這些制劑的一些優(yōu)選、但非限定性的實(shí)例包括片劑、丸劑、粉劑、錠劑、香囊(sachet)、扁囊(cachet)、酏劑、混懸劑、乳液劑、溶液劑、糖漿、氣霧劑、軟膏劑、霜?jiǎng)?、洗劑、軟和硬明膠膠囊、栓劑、用于推注和/或連續(xù)施用的無(wú)菌注射溶液和無(wú)菌包裝粉末(通常在使用之前重新配制)，所述制劑可以用適合這種劑型的載體、賦形劑和稀釋劑來(lái)配制，如乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯膠、磷酸鈣、藻酸鹽、黃蓍膠、明膠、硅酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、纖維素、(無(wú)菌)水、甲基纖維素、甲基-和丙基羥基苯甲酸鹽、滑石、硬脂酸鎂、食用油、植物油和礦物油或其合適的混合物。所述劑型可任選地包含其他藥物活性物質(zhì)(其可以導(dǎo)致或不導(dǎo)致與本發(fā)明化合物的協(xié)同作用)以及藥物制劑中常用的其它物質(zhì)，如潤(rùn)滑劑、潤(rùn)濕劑、乳化和助懸劑、分散劑、崩解劑、填充劑、填料、防腐劑、甜味劑、著味劑、流動(dòng)調(diào)節(jié)劑、釋放劑等。還可將所述組合物配制成用于提供快速、持續(xù)或延遲釋放所含活性化合物，例如利用基于天然凝膠或合成聚合物的脂質(zhì)體或親水聚合物基質(zhì)。為了增強(qiáng)根據(jù)本發(fā)明藥物組合物的化合物的溶解度和/或穩(wěn)定性，可以有利地使用α-、β-或γ-環(huán)糊精或其衍生物。此外，共溶劑如醇可以改進(jìn)所述化合物的溶解度和/或穩(wěn)定性。制備水性組合物時(shí)，由于其水溶性增加，可以更適合加入本發(fā)明化合物的鹽。
適當(dāng)?shù)沫h(huán)糊精是α-、β-或γ-環(huán)糊精(CDs)或其醚及其混合醚，其中環(huán)糊精的無(wú)水葡萄糖單元的一個(gè)或多個(gè)羥基基團(tuán)用烷基取代，尤其是甲基、乙基或異丙基，如隨機(jī)甲基化的β-CD；羥烷基、尤其是羥乙基、羥丙基或羥丁基；羧烷基，尤其是羧甲基或羧乙基；烷基羰基，尤其是乙酰基；烷氧羰基烷基或羧基烷氧基烷基，尤其是羧甲氧基丙基或羧基乙氧基丙基；烷基羰基氧基烷基，尤其是2-乙酰氧基丙基。特別值得注意作為配位劑和/或增溶劑的是β-CD、隨機(jī)甲基化的β-CD、2，6-二甲基-β-CD、2-羥乙基-β-CD、2-羥乙基-γ-CD、2-羥丙基-γ-CD和(2-羧甲氧基)丙基-β-CD，尤其是2-羥丙基-β-CD(2-HP-β-CD)。術(shù)語(yǔ)混合醚表示環(huán)糊精衍生物，其中至少兩個(gè)環(huán)糊精的羥基基團(tuán)被不同基團(tuán)例如羥丙基和羥乙基醚化。EP-A-721,331中描述了一種有趣的將化合物和環(huán)糊精或其衍生物聯(lián)合配制的方式。雖然其中描述的制劑是用抗真菌活性成分的，但是對(duì)于配制本發(fā)明化合物來(lái)說(shuō)同樣有意義。通過(guò)向所述制劑中添加制藥可接受的甜味劑和/或著味劑還可使其更加可口。尤其是，本發(fā)明涵蓋包含有效量的根據(jù)本發(fā)明化合物以及制藥可接受環(huán)糊精的藥物組合物。本發(fā)明還涵蓋由根據(jù)本發(fā)明的化合物與環(huán)糊精組成的環(huán)糊精配合物。
更具體地，所述組合物可以配制成藥物制劑，其中包含治療有效量的由本發(fā)明化合物與一種或多種制藥可接受的水溶性聚合物的固體分散系組成的顆粒。
術(shù)語(yǔ)“固體分散系”定義一種包含至少兩種組分的固態(tài)系統(tǒng)(相對(duì)于液態(tài)或氣態(tài))，其中一種組分或多或少均勻分散于其他組分中。當(dāng)所述組分的所述分散系使得該系統(tǒng)在化學(xué)或物理上完全均一或均勻時(shí)，或由熱力學(xué)定義的一個(gè)相組成時(shí)，這種固體分散系稱作“固態(tài)溶液”。固態(tài)溶液是優(yōu)選的物理系統(tǒng)，因?yàn)槠渲械慕M分通常容易被施用對(duì)象生物體所生物利用。術(shù)語(yǔ)“固體分散系”還包括與固態(tài)溶液相比較不太均勻的分散系。這種分散系在化學(xué)和物理上不是完全均一的或包括不止一個(gè)相。
方便而言，所述水溶性聚合物是一種當(dāng)溶解在20℃的2％水溶液中時(shí)具有1至100mPa·s表觀粘度的聚合物。優(yōu)選的水溶性聚合物是羥丙基甲基纖維素或HPMC。具有甲氧基取代度約0.8至約2.5以及羥丙基摩爾取代度約0.05至約3.0的HPMC通常是水溶的。甲氧基取代度表示纖維分子每個(gè)無(wú)水葡萄糖單元中所存在甲醚基團(tuán)的平均數(shù)。羥丙基的摩爾取代度表示與纖維素分子的每個(gè)無(wú)水葡萄糖單元反應(yīng)的環(huán)氧丙烷的平均摩爾數(shù)。
還可方便地將所述化合物配制成納米顆粒的形式，所述納米顆粒具有吸附于顆粒表面的表面改性劑，其量足以將有效平均顆粒大小維持在小于1000nm。合適的表面改性劑可優(yōu)選地選自已知的有機(jī)和無(wú)機(jī)藥物賦形劑。這些賦形劑包括多種聚合物、低分子量寡聚物、天然產(chǎn)物和表面活性劑。優(yōu)選的表面改性劑包括非離子和陰離子型表面活性劑。
然而另一種配制根據(jù)本發(fā)明化合物的有趣方式涉及一種藥物組合物，其中將所述化合物摻入親水聚合物中并將這種混合物作為涂膜施加到很多小珠表面，因而獲得便于制造并且適于制備口服施用藥物給藥形式的具有良好生物利用度的組合物。所述小珠包含(a)中央、圓形或球形的核、(b)親水聚合物和抗逆轉(zhuǎn)錄病毒劑的涂膜、以及(c)封閉包衣聚合物層。適用作小珠核心的材料有很多，只要所述材料是制藥可接受的并且具有適宜的尺度和硬度。
這些材料的實(shí)例是聚合物、無(wú)機(jī)物、有機(jī)物、和糖類及其衍生物。
可以按照公知方式制備上述制劑，通常包括將待用活性物質(zhì)與一種或更多種制藥可接受的載體混合，必要時(shí)在無(wú)菌條件下。再次參考US-A-6,372,778、US-A-6,369,086、US-A-6,369,087和US-A-6,372,733和上述公知技術(shù)，以及標(biāo)準(zhǔn)手冊(cè)，如最新版的Remington′sPharmaceutical Sciences。
本發(fā)明的藥物制劑優(yōu)選是單位劑量形式，并可以適當(dāng)包裝，例如盒、泡罩、小管、瓶、香囊(sachet)、安瓿或任何其它合適的單劑量或多劑量保持器或容器(可適當(dāng)加標(biāo)簽)；任選地帶有一頁(yè)或多頁(yè)含有產(chǎn)品信息和/或使用說(shuō)明的單。通常，這些單位劑量將包含1至1000mg，通常5至500mg的至少一種本發(fā)明化合物，例如每單位劑量約10、25、50、100、200、300或400mg。
可通過(guò)多種途徑施用所述化合物，包括口服、直腸、透皮、皮下、靜脈、肌肉或鼻內(nèi)途徑，這主要取決于所用的具體制劑以及待治療或預(yù)防的病況，通常優(yōu)選口服和靜脈施用。
通常施用有效量的本發(fā)明化合物，其經(jīng)適當(dāng)施用，足以在被施用個(gè)體中獲得期望的治療或預(yù)防作用。通常，依據(jù)待預(yù)防或治療的病況和施用途徑，這種有效量通常在0.01至1000mg之間，更經(jīng)常在0.1和500mg之間，如0.1和250mg間，例如約0.1、1、5、10、20、50、100、150、200或250mg每千克患者體重每天，其可作為單次日劑量施用、分開(kāi)經(jīng)一次或更多次日劑量、或基本上連續(xù)施用如輸注。受訓(xùn)醫(yī)師將根據(jù)如年齡、性別和患者一般狀況以及待治療疾病/癥狀的性質(zhì)和嚴(yán)重性等因素來(lái)確定待施用的量、施用途徑以及進(jìn)一步治療方案。再次參考US-A-6,372,778、US-A-6,369,086、US-A-6,369,087和US-A-6,372,733和其他上述公知技術(shù)，以及標(biāo)準(zhǔn)手冊(cè)，如最新版的Remington′sPharmaceutical Sciences。但是須知曉，針對(duì)任何特定患者的具體劑量水平和給藥頻率可以變化，并且這取決于多種因素，包括所用特定化合物的活性、該化合物的代謝穩(wěn)定性和作用時(shí)間長(zhǎng)度、年齡、體重、一般健康狀況、性別、飲食、施用的模式和時(shí)間、清除速率、藥物組合、特定病況的嚴(yán)重性。
因此，另一方面，本發(fā)明涉及一種組合物尤其是藥物用途的組合物，其包含至少一種本發(fā)明的化合物以及至少一種合適的載體(即適于制藥用途的載體)。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的化合物在制備這種組合物中的用途。
根據(jù)本發(fā)明的方法，可以在治療期間不同時(shí)間分別施用所述藥物組合物，或同時(shí)以分開(kāi)或單個(gè)組合形式施用所述藥物組合物。因此本發(fā)明應(yīng)當(dāng)理解為包括所有這些同時(shí)或交替治療的方案，并且術(shù)語(yǔ)“施用”應(yīng)作相應(yīng)解釋。
對(duì)于口服施用形式，本發(fā)明的組合物可以與適當(dāng)?shù)奶砑觿┫嗷旌?，如賦形劑、穩(wěn)定劑或惰性稀釋劑，并通過(guò)常規(guī)方法制成合適的施用形式，如片劑、包衣片劑、硬膠囊、水性、醇性或油性溶液。適當(dāng)?shù)亩栊暂d體的實(shí)例是阿拉伯膠、氧化鎂、碳酸鎂、磷酸鉀、乳糖、葡萄糖、或淀粉，尤其是玉米淀粉。這種情況下，可作為干和濕顆粒來(lái)實(shí)現(xiàn)所述制備。合適的油性賦形劑或溶劑是植物或動(dòng)物油，如向日葵油或魚肝油。適合水性或醇性溶液的溶劑是水、乙醇、糖溶液、或其混合物。聚乙二醇和聚丙二醇還可用作其他施用形式的進(jìn)一步助劑。作為立即釋放片劑，這些組合物可以含有本領(lǐng)域已知的微晶纖維素、磷酸二鈣、淀粉、硬脂酸鎂和乳糖和/或其他賦形劑、粘合劑、增補(bǔ)劑、崩解劑、稀釋劑和潤(rùn)滑劑。
當(dāng)通過(guò)鼻氣霧劑或吸入劑施用時(shí)，可以根據(jù)藥物制劑領(lǐng)域公知的技術(shù)制備這些組合物，并且可以使用芐醇或其他適當(dāng)?shù)姆栏瘎?、增?qiáng)生物利用度的吸收促進(jìn)劑、氟碳化合物和/或其他本領(lǐng)域已知的助溶劑或分散劑來(lái)制備成鹽的溶液。適合氣霧劑或噴霧劑形式施用的藥物制劑是例如本發(fā)明化合物或其生理可耐受的鹽在制藥可接受的溶劑如乙醇或水或這些溶劑的混合物中的溶液、混懸劑或乳液劑。如果需要，所述制劑還可額外包含其他制藥輔劑如表面活性劑、乳化劑和穩(wěn)定劑以及拋射劑。
對(duì)于皮下或靜脈施用，根據(jù)本發(fā)明的化合物，如果期望連同慣用物質(zhì)如穩(wěn)定劑、乳化劑或其他輔劑一起加入溶液、混懸劑、或乳液劑中。還可以凍干本發(fā)明的化合物并使用所得凍干物用于例如生產(chǎn)注射或輸注制劑。適當(dāng)?shù)娜軇┦抢缢?、生理鹽水溶液或醇如乙醇、丙醇、甘油，此外還有糖溶液如葡萄糖或甘露醇溶液，或作為替代前述各種溶劑的混合物?？梢愿鶕?jù)已知技術(shù)，使用適當(dāng)?shù)臒o(wú)毒、消化道外可接受的稀釋劑或溶劑如甘露醇、1，3-丁二醇、水、Ringer’s溶液或等滲氯化鈉溶液、或適當(dāng)?shù)姆稚⒒驖?rùn)濕和助懸劑，如無(wú)菌、非刺激、不揮發(fā)性油、包括合成甘油單或二酯，以及脂肪酸、包括油酸，來(lái)制備注射溶液或混懸劑。
當(dāng)以栓劑形式經(jīng)直腸施用時(shí)，可通過(guò)將根據(jù)本發(fā)明的化合物與適當(dāng)?shù)姆谴碳ば再x形劑如可可脂、合成甘油酯或聚乙二醇混合來(lái)制備這些制劑，其中這些賦形劑在常溫下是固態(tài)，但是在直腸腔中被液化和/或溶解從而釋放藥物。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的化合物可作為Kv家族尤其是Kv4亞家族離子通道和/或與之相關(guān)生物功能或通路的拮抗劑。還發(fā)現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的化合物可作為Kv1亞家族離子通道和/或與之相關(guān)生物功能或通路的拮抗劑。
因此本發(fā)明的化合物通常可用作(1)離子通道和/或與之相關(guān)的生物功能或通路的拮抗劑，即在體外、體內(nèi)或治療環(huán)境中；(2)離子通道的阻斷劑，即在體外、體內(nèi)或治療環(huán)境中；和/或(3)藥物活性劑，尤其是用于(制備藥物組合物用于)預(yù)防和/或治療與所述離子通道相關(guān)的病況或疾病。此外，根據(jù)本發(fā)明的化合物表現(xiàn)出極低或者沒(méi)有hERG通道相關(guān)活性，因而是選擇性的。
如上所示，由于對(duì)上述離子通道的阻斷活性，根據(jù)本發(fā)明的化合物尤其可用于預(yù)防和/或治療與Kv家族離子通道相關(guān)的病況或疾病。這些疾病和病癥對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見(jiàn)的。例如，與Kv4.3離子通道相關(guān)的病況和疾病，尤其在人中，包括心臟疾病如心率不齊、高血壓誘導(dǎo)的心臟疾病如高血壓誘導(dǎo)的心臟肥大(如心室肥大)，以及神經(jīng)系統(tǒng)疾病如癲癇、中風(fēng)、創(chuàng)傷性腦損傷、脊髓損傷、焦慮、失眠、腦脊髓炎、阿爾茨海默病、多發(fā)性硬化癥、脫髓鞘病和帕金森氏綜合征。根據(jù)本發(fā)明的化合物與Kv4.3離子通道相互作用并且可用于預(yù)防和/或治療這些病癥和疾病。此外，與Kv1.5離子通道相關(guān)的病癥和疾病，尤其在人中，包括與上述對(duì)Kv4.3離子通道相同的病癥和疾病。與Kv1.5離子通道相互作用的根據(jù)本發(fā)明化合物尤其可用于預(yù)防和/或治療房性心動(dòng)過(guò)速如心房纖維顫動(dòng)。
因此，在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明還涉及根據(jù)本發(fā)明的化合物或包含所述化合物的藥物組合物的用途，用于治療心臟疾病，如心率不齊、高血壓誘導(dǎo)的心臟疾病如高血壓誘導(dǎo)的心臟肥大(如心室肥大)、以及神經(jīng)系統(tǒng)疾病如癲癇、中風(fēng)、創(chuàng)傷性腦損傷、焦慮、失眠、腦脊髓炎、阿爾茨海默病、多發(fā)性硬化癥、脫髓鞘病和帕金森氏綜合征。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明還涉及根據(jù)本發(fā)明的化合物或包含所述化合物的藥物組合物用于治療心臟疾病如心率不齊的用途。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明還涉及根據(jù)本發(fā)明的化合物或包含所述化合物的藥物組合物用于治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的用途。
治療心臟疾病的方法包括向需要這種治療的個(gè)體施用包含根據(jù)本發(fā)明化合物的藥物組合物。治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的方法包括向需要這種治療的個(gè)體施用包含根據(jù)本發(fā)明化合物的藥物組合物。
還可以設(shè)想上述化合物和組合物在獸醫(yī)領(lǐng)域也有價(jià)值，為此其不僅包括預(yù)防和/或治療動(dòng)物疾病，還包括對(duì)于有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的動(dòng)物如牛、豬、羊、雞、魚等，增強(qiáng)動(dòng)物的生長(zhǎng)和/或體重和/或從動(dòng)物獲得的肉或其他產(chǎn)品的品質(zhì)和/或量。因此，另一方面，本發(fā)明還涉及獸醫(yī)用途的組合物，其包含至少一種本發(fā)明化合物(即使用線蟲或此處描述的方法已經(jīng)鑒定、發(fā)現(xiàn)和/或開(kāi)發(fā)的化合物)以及至少一種適當(dāng)?shù)妮d體(即適于獸醫(yī)用途的載體)。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的化合物用于制備這種組合物的用途。還可以設(shè)想以上化合物和組合物可具有作為殺蟲劑的價(jià)值。
將通過(guò)以下合成和生物學(xué)實(shí)施例來(lái)舉例說(shuō)明本發(fā)明，這些實(shí)施例無(wú)論如何不限制本發(fā)明的范圍。
實(shí)施例 實(shí)施例1制備根據(jù)本發(fā)明的化合物 除非另有指明，實(shí)施本發(fā)明將使用合成有機(jī)化學(xué)、生物學(xué)測(cè)試等領(lǐng)域的常規(guī)技術(shù)，它們?cè)诒绢I(lǐng)域一般技術(shù)人員能力范圍內(nèi)。文獻(xiàn)中已經(jīng)充分解釋了這些技術(shù)。除非另有指明，根據(jù)如下方法A或方法B通過(guò)液相色譜/質(zhì)譜(LC/MS)來(lái)確證化合物的純度 方法A(5分鐘梯度) HPLC具有光電=-/二極管陣列檢測(cè)器Waters 996的WatersAlliance 2690。質(zhì)譜儀Micromass Platform ZMD LC。離子化電噴霧(極性負(fù)極和正極)。
方法 相Tosohaas TSK-gel super ODS(

2μm)，柱4.6×50mm；溶劑A水和甲酸(26.5mM)；溶劑B乙腈和甲酸(17mM)；流速2.75ml/min；梯度5分鐘3分鐘內(nèi)從100％A和0％B到20％A和80％B。恒定80％B持續(xù)1分鐘。0.5分鐘內(nèi)從80％B和20％A到0％B和100％A。恒定100％A持續(xù)0.5分鐘 方法B(12分鐘梯度) HPLC具有光電二極管陣列檢測(cè)器Waters 2996的WatersAlliance 2525。質(zhì)譜儀Micromass Platform ZQ。離子化電噴霧(極性負(fù)極和正極)。
方法 相X-Terra C18 MS(

，5μm)，4.6×100mm；溶劑A水和甲酸(26.5mM)；溶劑B乙腈和甲酸(17mM)；流速1.75ml/min；梯度12分鐘恒定95％A和5％B持續(xù)1分鐘。5分鐘內(nèi)從95％A和5％B到5％A和95％B。恒定95％B持續(xù)2分鐘。0.1分鐘內(nèi)從95％B和5％A到5％B和95％A。恒定95％A和5％B持續(xù)3.9分鐘 在Varian Mercury 300MHz NMR上使用指定溶劑作為內(nèi)參照物來(lái)確定NMR譜。在Büchi B-540上確定熔點(diǎn)并且不經(jīng)校正。所用的所有試劑均是商業(yè)獲得或按照公知方式制備。
制備方法 根據(jù)如下路線設(shè)計(jì)以及本領(lǐng)域技術(shù)人員的知識(shí)可以制備式I、II、III或IV的化合物。

路線設(shè)計(jì)1 操作方案A 2-氯乙?；?乙酸乙酯(1.2eq，12mmol)加入到硫脲(10mmol)的乙醇(20ml)溶液中。混合物在65℃下攪拌過(guò)夜。反應(yīng)混合物冷卻至室溫并且在減壓條件下除去溶劑。酯(10mmol)溶于乙醇(4ml)，并且加入2N NaOH(20ml)。反應(yīng)混合物在65℃下攪拌過(guò)夜。反應(yīng)混合物冷卻至室溫并且在減壓條件下除去乙醇。殘留物用水(20ml)稀釋并且用EtOAc(2×20ml)萃取。水層冷卻至0℃，并用濃HCl酸化。過(guò)濾沉淀物，用水(3×10ml)洗滌，減壓條件下干燥。

路線設(shè)計(jì)2 操作方案B 溴代丙酮酸乙酯(6mmol)加入到硫脲(5mmol)的乙醇(12ml)溶液中?；旌衔镌?5℃下攪拌過(guò)夜。反應(yīng)混合物冷卻至室溫并且在減壓條件下除去溶劑。酯(10mmol)溶于乙醇(1.5ml)，并且加入2N NaOH(10ml)。反應(yīng)混合物在65℃下攪拌過(guò)夜。反應(yīng)混合物冷卻至室溫并且在減壓條件下除去乙醇。殘留物用水(20ml)稀釋并且用EtOAc(2×20ml)萃取。水層冷卻至0℃，并用濃HCl酸化。過(guò)濾沉淀物，用水(3×10ml)洗滌，減壓條件下干燥。

路線設(shè)計(jì)3 基團(tuán)R3、和Ar2具有此處定義中相同的含義，且L是L2并且R5是選自包含以下的組氫、鹵素、羥基、硝基、氨基、疊氮、氰基、烷基、環(huán)烷基、烷氨基、烷氧基、-SO2-NH2、芳基、雜芳基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、羧基、烷氧基羰基、烷基氨基羰基、雜芳基烷基、烷基磺酰胺、雜環(huán)基、烷基羰基氨基烷基、芳氧基、烷基羰基、?；⒎蓟驶?、氨基羰基、烷基亞砜、-SO2R15、或烷硫基，其中R15是烷基或環(huán)烷基，z是1和3之間的整數(shù)。
操作方案C 酸衍生物(0.5mmol)溶于DMF(0.5ml)和DIEA(1.5mmol)的混合物。加入溶于DMF(0.5ml)的TBTU(0.5mmol)和HOBt(0.1mmol)的溶液并且在室溫下攪拌混合物30分鐘。加入胺(0.5mmol)并且反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3至24個(gè)小時(shí)。減壓條件下除去DMF。殘留物(0.48mmol)用EtOAc(5ml)或DCM(5ml)稀釋并且用0.5NHCl(2×5ml)、0.5N NaOH(2×5ml)和水(2×5ml)或用1N NaHCO3(2×5ml)和水(2×5ml)洗滌。有機(jī)相經(jīng)MgSO4干燥，溶劑在真空下蒸發(fā)。通過(guò)快速色譜、半制備級(jí)HPLC或重結(jié)晶來(lái)純化殘留物。
操作方案D(路線設(shè)計(jì)4) 酸衍生物(4.8mmol)溶于DMF(10滴)和DCM(20ml)的混合物。加入草酰氯(11.6mmol)并且在室溫下攪拌溶液1.5個(gè)小時(shí)。減壓條件下蒸發(fā)溶劑。殘留物(0.48mmol)溶于DCM(1ml)并加入到含有DIEA(0.59mmol)的胺(0.55mmol)的DMF(1ml)溶液中?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?6個(gè)小時(shí)。用DCM(15ml)稀釋混合物，用水(2×15ml)、1 N HCl(15ml)、1N NaOH(15ml)以及鹽水(2×15ml)洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，溶劑在減壓條件下除去。
操作方案E(路線設(shè)計(jì)4) 溴衍生物(0.23mmol)、Pd(OAc)2(0.023mmol)、BINAP(0.026mmol)以及Cs2CO3溶于干燥的1，4-二氧六環(huán)(2.5ml)。加入鄰氨基苯甲醚(o-anisidine)(0.33mmol)，混合物在氬氣氛中110℃下攪拌4小時(shí)?；旌衔镉盟?15ml)稀釋并且用EtOAc(3×15ml)萃取。合并的有機(jī)相用水(2×15ml)、鹽水(2×15ml)以及1N HCl(2×15ml)洗滌。有機(jī)相經(jīng)MgSO4干燥，減壓條件下除去溶劑。用半制備級(jí)HPLC純化殘留物。
操作方案F(路線設(shè)計(jì)6) 丙酮醛二甲基乙縮醛(125mmol)和二甲基甲酰胺二甲基乙縮醛(437.5mmol)的混合物在氮?dú)夥罩?00℃下攪拌18小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻至室溫并在減壓下蒸發(fā)至干。
操作方案G(路線設(shè)計(jì)7) 硝酸(18ml70％水溶液)在攪拌下逐滴加入至鄰氨基苯甲醚(250ml)的EtOH(60ml)的冰冷混合物。完全加入后，加入氨腈(50ml 50％水溶液)并且混合物在氮?dú)夥罩?00℃下加熱18小時(shí)。冷卻至室溫后，混合物傾入過(guò)量叔丁基甲基醚(100ml)中。過(guò)濾沉淀，用叔丁基甲基醚(2×100ml)洗滌并真空干燥。
操作方案H(路線設(shè)計(jì)5) 乙醇鈉(55mmol)加至鄰甲氧苯基硝酸胍(55mmol)和(E)-4-二甲基氨基-1，1-二甲氧基-丁-3-烯-2-酮(55mmol)的EtOH(165ml)的混合物中?；旌衔镌诘?dú)夥罩袛嚢?0小時(shí)。溶劑在減壓條件下除去并加入水(200ml)。用濃HCl將pH調(diào)節(jié)至中性，混合物用EtOAc(3×200ml)萃取。合并的有機(jī)相用鹽水(3×200ml)洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，溶劑在減壓下除去。
操作方案I(路線設(shè)計(jì)5) 2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-嘧啶-二甲基乙縮醛(40mmol)和1N HCl(400ml)的混合物在氮?dú)夥罩?0℃下加熱3小時(shí)。冷卻至室溫后，30分鐘內(nèi)將混合物逐滴加入95℃的H2O(200ml)、NaOH(0.6mol)和KMnO4(0.2mol)的攪拌溶液中。95℃下再攪拌混合物30分鐘，然后冷卻至室溫。過(guò)濾MnO2之后，用濃HCl將pH調(diào)整至4并且在減壓下除去水。殘留物經(jīng)溫MeOH(2×100ml)萃取，減壓條件下除去溶劑。通過(guò)快速色譜來(lái)純化殘留物。
操作方案J SOCl2(7ml)和DMF(1滴)加至所述羧酸(0.5mmol)，混合物在45℃下攪拌30分鐘。減壓條件下除去多余的SOCl2。痕量SOCl2通過(guò)從DCM(2×3ml)中蒸餾除去。所述酰氯溶于DCM(3ml)，然后在0℃在氮?dú)夥障录拥饺苡贒CM(3ml)的胺(0.5mmol)、Et3N(2.5mmol)或DIEA(2.5mmol)的攪拌混合物中。混合物在0℃下攪拌30分鐘，然后允許升至室溫。將混合物傾入水(20ml)中，然后用DCM(3×20ml)萃取。合并的有機(jī)相經(jīng)MgSO4干燥，在減壓下除去溶劑。通過(guò)快速色譜或半制備級(jí)HPLC來(lái)純化殘留物。
操作方案K(路線設(shè)計(jì)8) SOCl2(20ml)和DMF(4滴)加至2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(3.8mmol)，混合物在50℃下攪拌2小時(shí)。減壓條件下除去多余的SOCl2。痕量SOCl2通過(guò)從DCM(2×10ml)中蒸餾除去。所述酰氯溶于干燥THF(5ml)中，逐滴加至溶于干燥THF(19ml)的1M NaHDMS(19mmol)和苯基乙酸乙酯(19mmol)的冷卻(0℃)混合物中。反應(yīng)混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，在室溫下攪拌16小時(shí)。將混合物傾入水(50ml)中，然后用叔丁基甲基醚(3×50ml)萃取。合并的有機(jī)相用鹽水(3×100ml)洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，在減壓下除去溶劑。通過(guò)快速色譜來(lái)純化殘留物。
操作方案L(路線設(shè)計(jì)8) 在氮?dú)夥障聦I(1.66mmol)和LiCl(1.66mmol)加至在二甲基吡啶(3ml)中的3-[2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-基]-3-氧-2-苯基-丙酸乙酯(0.83mmol)的懸液?；旌衔镌?50℃下加熱8小時(shí)。冷卻至室溫后，減壓條件下濃縮反應(yīng)混合物，通過(guò)快速色譜來(lái)純化殘留物。
操作方案M 2-溴-4-甲基-噻唑-5-羧酸乙酯(0.8mmol)和親核試劑(0.8mmol)溶于DMF(1ml)。加入K2CO3(0.96mmol)，混合物在80℃下攪拌3小時(shí)。冷卻至室溫后，在減壓下除去溶劑。殘留物溶于乙醇(5ml)并且加入2N NaOH(10ml)?；旌衔镌?5℃下攪拌4小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻至室溫后，傾入20％KHSO4溶液(100ml)中。過(guò)濾沉淀物，用水(3×100ml)洗滌并且在減壓條件下干燥。
操作方案N 親核試劑(0.36mmol)和親電試劑(0.36mmol)溶于DMF(3ml)。加入K2CO3(0.43mmol)，混合物在80℃下攪拌24小時(shí)。冷卻至室溫后，在減壓下除去溶劑。殘留物用MeOH(2×20ml)洗滌，在減壓條件下除去濾出物的溶劑。通過(guò)快速色譜來(lái)純化殘留物。
操作方案O 2-氯乙酰基-乙酸乙酯(1.6mmol)加入至溶于EtOH(5ml)的硫脲(1.3mmol)溶液。混合物在65℃下攪拌4小時(shí)。冷卻至室溫后，在減壓下除去溶劑。殘留物溶于THF(8ml)和DMF(2ml)的混合物，加入1N LiOH(10ml)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?8小時(shí)。加入水(50ml)并且用1N HCl將pH調(diào)節(jié)至中性。用EtOAc(3×50ml)萃取水層。合并的有機(jī)相經(jīng)MgSO4干燥，在減壓下除去溶劑。
操作方案P(設(shè)計(jì)路線9) Na2CO3(0.62mmol)加入至溶于THF(5ml)的[4-({[2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羰基]-氨基}-甲基)-苯甲基]-羧酸叔丁基酯(0.57mmol)的溶液。逐滴加入苯甲基氯甲酸酯(1.37mmol)，混合物在室溫下攪拌3天時(shí)間。減壓下除去溶劑并且殘留物溶于DCM(50ml)。用水(3×50ml)洗滌有機(jī)層，經(jīng)MgSO4干燥并且在減壓條件下除去溶劑。通過(guò)快速色譜來(lái)純化殘留物。
操作方案Q(路線設(shè)計(jì)9) {5-[4-(叔丁氧羰基氨基-甲基)-苯甲基氨基甲酰基]-4-甲基-噻唑-2-基}-(2-甲氧基-苯基)-氨基甲酸苯甲基酯(0.46mmol)溶于乙腈(2.5ml)和2N HCl(2.5ml)的混合物。溶液在50℃下攪拌3小時(shí)。減壓條件下除去溶劑，通過(guò)快速色譜來(lái)純化殘留物。
操作方案R(路線設(shè)計(jì)9) 吡啶(0.29mmol)和乙酸酐(0.29mmol)加入至溶于DCM(2ml)的胺(0.29mmol)的溶液?；旌衔镌谑覝叵聰嚢柽^(guò)夜。用DCM(20ml)稀釋混合物并用0.5M HCl洗滌。有機(jī)相經(jīng)MgSO4干燥，在減壓下除去溶劑。
操作方案S(路線設(shè)計(jì)9) {5-[4-(乙?；被?甲基)-苯甲基氨基甲?；鵠-4-甲基-噻唑-2-基}-(2-甲氧基-苯基)-氨基甲酸苯甲基酯(0.16mmol)溶于甲醇(2ml)和1M HCl(2ml)的混合物。加入一匙Pd/C，混合物在氫氣氛中室溫下攪拌6小時(shí)。過(guò)濾Pd/C，并在減壓條件下除去溶劑。通過(guò)快速色譜來(lái)純化殘留物。
操作方案T 相應(yīng)的酯(0.87mmol)溶于乙醇(4ml)并加入1N LiOH(0.87mmol)?；旌衔镌?0℃下攪拌5個(gè)小時(shí)。用2N HCl將pH調(diào)節(jié)至2。過(guò)濾沉淀物，用水(2×20ml)洗滌并在減壓條件下干燥。
操作方案U 將酰氯(1.2mmol)溶于DCM(2ml)中并在氮?dú)夥罩?℃下加至溶于DCM(3ml)的胺(1.2mmol)和DIEA(3.6mmol)的攪拌混合物中。混合物在0℃下攪拌30分鐘，然后升至室溫。將混合物傾入水(20ml)中，然后用DCM(3×20ml)萃取。合并的有機(jī)相經(jīng)MgSO4干燥，在減壓下除去溶劑。通過(guò)從乙醇中重結(jié)晶來(lái)純化殘留物。乙醇(2ml)和1N LiOH(10mmol)加至酯(0.7mmol)中?；旌衔镌谑覝叵聰嚢柽^(guò)夜。反應(yīng)混合物傾入20％KHSO4溶液(100ml)。過(guò)濾沉淀物，用水(3×100ml)洗滌并在減壓條件下干燥。
操作方案V 2-氯乙?；?乙酸乙酯(0.6mmol)加至溶于EtOH(20ml)的硫脲(0.5mmol)溶液?；旌衔镌?5℃下攪拌16小時(shí)。冷卻至室溫，在減壓下除去溶劑。
獲得的酯(0.44mmol)溶于甲醇(1ml)和甲醇鈉(1.32mmol)，加入甲基碘(2.64mmol)?；旌衔镌?0℃下攪拌5天。反應(yīng)混合物冷卻至室溫，減壓下除去溶劑。通過(guò)半制備級(jí)HPLC來(lái)純化殘留物。
產(chǎn)物(0.27mmol)溶于乙醇(0.7ml)，加入2N NaOH(0.7ml)。反應(yīng)混合物在50℃下攪拌16小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻至室溫，減壓下除去乙醇。用水(20ml)稀釋殘留物，用EtOAc(2×20ml)萃取。水層冷卻至0℃，用濃HCl酸化。過(guò)濾沉淀物，用水(3×10ml)洗滌，在減壓下干燥。
本發(fā)明還包括表13中舉例說(shuō)明的第15至181號(hào)和210至226號(hào)化合物、及其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、外消旋體、前藥、代謝物、或其制藥可接受的鹽和/或溶劑化物。
本發(fā)明還包括合成中間體1至14，和182至209。
化合物15、16、17、67、70和71從酸1而制備?；衔?8、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65和66從酸2而制備?；衔?9從酸8而制備?；衔?0、52和54從酸3而制備。
化合物31、53、55、68、82、83、84、85、86、97、98、102、103、104、105、106、108、118、123、124、125、130、131、132、136、137、138、140、141、142、143、144、145、146、147、149、150、151、152、154、156、157、158、159、160、161、162、163、164、165、166、168、170、173、174、175、176、177、214、215、216、217、218、219和220從酸5而制備?；衔?2從酸4而制備?；衔?3和69從酸6而制備?；衔?4和35從酸7而制備?；衔?6、37和38從酸9而制備?；衔?9從酸10而制備?；衔?0、41、42和72從酸11而制備?；衔?3、44、45和46從酸12而制備?；衔?7、48和49從酸13而制備?；衔?0和51從酸14而制備?；衔?10從酸182而制備。
化合物75根據(jù)路線設(shè)計(jì)4從中間體200而制備。

路線設(shè)計(jì)4 化合物76從由中間體203制備的酸183而制備(路線設(shè)計(jì)5)。

路線設(shè)計(jì)5 化合物203根據(jù)路線設(shè)計(jì)6和7從中間體201和202而制備。

路線設(shè)計(jì)6
路線設(shè)計(jì)7 化合物79根據(jù)路線設(shè)計(jì)8從中間體204而制備。

路線設(shè)計(jì)8 化合物80從酸184而制備。酸184從苯酚和2-溴-4-甲基-噻唑-5-羧酸乙酯而制備?；衔?1從酸185而制備。酸185從苯硫酚和2-溴-4-甲基-噻唑-5-羧酸乙酯而制備。
化合物88從中間體205而制備。中間體205從酸5而制備?；衔?9從酸186而制備?；衔?2從酸187而制備?；衔?3從酸188而制備。化合物94從酸189而制備?；衔?5從酸190而制備?；衔?6根據(jù)路線設(shè)計(jì)9從中間體206、207和208而制備。

路線設(shè)計(jì)9 化合物114從中間體204而制備?；衔飶?26從酸191而制備。化合物為211從酸192而制備。化合物129從化合物68而制備。化合物133從酸193而制備?；衔?53從酸194而制備?；衔?12從化合物151而制備?；衔?72從2-鄰甲苯基氨基-噻唑-4-羧酸而制備?；衔?79從酸195而制備?；衔?80從酸196而制備?；衔?81從酸197而制備?；衔?13從酸198而制備?；衔?21、222和223從酸182而制備?；衔?24、225和226從酸199而制備。
化合物12-(4-氟-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸 本化合物根據(jù)操作方案A從(4-氟-苯基)-硫脲和乙基2-氯乙酰乙酸酯獲得。
化合物22-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸 本化合物根據(jù)操作方案A從(4-溴-苯基)-硫脲和乙基2-氯乙酰乙酸酯獲得。
化合物32-(4-氯-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸 本化合物根據(jù)操作方案A從(4-氯-苯基)-硫脲和乙基2-氯乙酰乙酸酯獲得。
化合物42-(2-甲基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸 本化合物根據(jù)操作方案A從(2-甲基-苯基)-硫脲和乙基2-氯乙酰乙酸酯獲得。
化合物52-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸 本化合物根據(jù)操作方案A從(2-甲氧基-苯基)-硫脲和乙基2-氯乙酰乙酸酯獲得。
化合物62-(2，4-二甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸 本化合物根據(jù)操作方案A從(2，4-二甲氧基-苯基)-硫脲和乙基2-氯乙酰乙酸酯獲得。
化合物72-(5-氯-2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸 本化合物根據(jù)操作方案A從(5-氯-2-甲氧基-苯基)-硫脲和乙基2-氯乙酰乙酸酯獲得。
化合物82-(4-溴-苯基-甲基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸 20ml溶于乙醇的乙基2-氯乙酰乙酸酯(1.2eq；0.6mmole)加入至含有硫脲(0.5mmol)的圓底燒瓶。反應(yīng)混合物在65℃下加熱過(guò)夜。體系冷卻至室溫，在真空條件下蒸發(fā)溶劑。
所獲得的酯(150mg；0.44mmole)溶于干燥甲醇(0.5M溶液)。加入甲醇鈉(3eq；1.32mmole)然后是甲基碘(6eq；2.64mmole)，混合物在50℃下攪拌5天。反應(yīng)在減壓條件下蒸發(fā)，通過(guò)HPLC來(lái)純化殘留物。
用2N NaOH(5eq；1.35mmol；0.68ml)和乙醇(0.67ml)稀釋產(chǎn)物(0.27mmol)。反應(yīng)混合物在50℃下加熱過(guò)夜。體系冷卻至室溫，在減壓條件下蒸發(fā)乙醇。用乙酸乙酯洗滌水層兩次，冷卻至0℃，然后用濃HCl酸化。過(guò)濾收集沉淀的酸，最后用水(10ml)洗滌3次。
化合物92-(4-氟-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸 本化合物根據(jù)操作方案B從(4-氟-苯基)-硫脲和乙基溴代丙酮酸酯獲得。
化合物102-(4-溴-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸 本化合物根據(jù)操作方案B從(4-溴-苯基)-硫脲和乙基溴代丙酮酸酯獲得。
化合物112-(4-氯-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸 本化合物根據(jù)操作方案B從(4-氯-苯基)-硫脲和乙基溴代丙酮酸酯獲得。
化合物122-(3，5-二甲基-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸 本化合物根據(jù)操作方案B從(3，5-二甲基-苯基)-硫脲和乙基溴代丙酮酸酯獲得。
化合物132-苯基氨基-噻唑-4-羧酸 本化合物根據(jù)操作方案B從苯基-硫脲和乙基溴代丙酮酸酯獲得。
化合物142-(5-氯-2-甲氧基-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸 本化合物根據(jù)操作方案B從(5-氯-2-甲氧基-苯基)-硫脲和乙基溴代丙酮酸酯獲得。
中間體的結(jié)構(gòu)式列于表1。下面使用了如下縮寫。P操作方案，Rt保留時(shí)間，PU純度。ES+正離子模式下電噴霧所獲得的分子離子。
表1 化合物152-(4-氟-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(S)-1-(萘-2-基)乙基酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和(S)-1-萘-2-基-乙胺獲得。
化合物162-(4-氟-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(R)-1-(萘-2-基)乙基酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-氟-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和(R)-1-萘-2-基-乙胺獲得。
化合物172-(4-氟-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(4-硝基-苯甲基)-丙基酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-氟-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和(4-硝基-苯甲基)-丙基-胺獲得。
化合物182-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(S)-1-(萘-2-基)乙基酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和(S)-1-萘-2-基-乙基胺獲得。
化合物192-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(R)-1-(萘-2-基)乙基酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和(R)-1-萘-2-基-乙基胺獲得。
化合物202-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸苯甲基酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-溴苯基氨基)-4-甲基噻唑-5-羧酸和苯甲基胺獲得。
化合物212-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(R)-1-(3-甲氧苯基)乙基酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和(R)-1-(3-甲氧基-苯基)乙基胺獲得。
化合物222-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(R)-1-(4-硝基苯基)乙基酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和(R)-1-(4-硝基-苯基)-乙基胺獲得。
化合物232-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸4-硝基苯甲基酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和4-硝基-苯甲基胺獲得。
化合物242-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸3，5-雙-三氟甲基-苯甲基酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和3，5-雙-三氟甲基-苯甲基胺獲得。
化合物252-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(1R，2R)-2-(苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和(1R，2R)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基胺獲得。
化合物262-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(1S，2S)-2-(苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和(1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基胺獲得。
化合物272-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸萘-1-基甲基酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-溴苯基氨基)-4-甲基噻唑-5-羧酸和甲基-萘-1-甲基-胺獲得。
化合物282-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(4-硝基-苯甲基)-丙基-酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-溴苯基氨基)-4-甲基噻唑-5-羧酸和(4-硝基-苯甲基)-丙基-胺獲得。
化合物292-(4-溴-苯基-甲基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(1R，2R)-2-(苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-溴-苯基-甲基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和(1R，2R)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基胺獲得。
化合物302-(4-氯-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(1R，2R)-2-(苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-氯-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和(1R，2R)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基胺獲得。
化合物312-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(1R，2R)-2-(苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和(1R，2R)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基胺獲得。
化合物322-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(S)-1-(萘-2-基)乙基酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(2-甲基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和(S)-1-萘-2-基-乙基胺獲得。
化合物332-(2，5-二甲氧基苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(1R，2R)-2-(苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(2，5-二甲氧基苯基氨基)-4-甲基噻唑-5-羧酸和(1R，2R)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基胺獲得。
化合物342-(5-氯-2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(R)-2-(3-甲氧基-苯基)乙基酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(5-氯-2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和(R)-1-(3-甲氧基-苯基)乙基胺獲得。
化合物352-(5-氯-2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(1R，2R)-2-(苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(5-氯-2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和(1R，2R)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基胺獲得。
化合物362-(4-氟-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸(R)-1-(4-硝基-苯基)乙基酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-氟-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸和(R)-1-(4-硝基-苯基)乙基胺獲得。
化合物372-(4-氟-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸(1R，2R)-2-(苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-氟-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸和(1R，2R)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基胺獲得。
化合物382-(4-氟-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸(1R，2R)-2-(苯甲氧基環(huán)己-1-基)酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-氟-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸和(1R，2R)-2-苯甲氧基環(huán)己-1-基胺獲得。
化合物392-(4-溴-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸(1R，2R)-2-(苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-溴-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸和(1R，2R)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基胺獲得。
化合物402-(4-氯-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸(1R，2R)-2-(苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-氯-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸和(1R，2R)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基胺獲得。
化合物412-(4-氯-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸(1S，2S)-2-(苯甲氧基環(huán)己-1-基)酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-氯-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸和(1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)己-1-基胺獲得。
化合物422-(4-氯-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸(4-硝基-苯甲基)-丙基酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-氯-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸和(4-硝基-苯甲基)-丙基胺獲得。
化合物432-(2，6-二甲基-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸(R)-1-(4-硝基-苯基)乙基酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(2，6-二甲基-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸和(R)-1-(4-硝基-苯基)乙基胺獲得。
化合物442-(3，5-二甲基-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸(S)-(1-甲氧基甲基-2-苯基-乙基)-酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(3，5-二甲基-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸和(S)-1-甲氧基甲基-2-苯基-乙基胺獲得。
化合物452-(3，5-二甲基-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸(1R，2R)-2-(苯甲氧基環(huán)戊-1-基)-酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(3，5-二甲基-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸和(1R，2R)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基胺獲得。
化合物462-(3，5-二甲基-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸(1S，2S)-2-(苯甲氧基環(huán)己-1-基)酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(3，5-二甲基-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸和(1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)己-1-基胺獲得。
化合物472-苯基氨基-噻唑-4-羧酸1-((R)-4-硝基苯基-乙基)-酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-苯基氨基-噻唑-4-羧酸和(R)-1-(4-硝基-苯基)-乙基胺獲得。
化合物482-苯基氨基噻唑-4-羧酸(1R，2R)-2-(苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-苯基氨基-噻唑-4-羧酸和(1R，2R)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基胺獲得。
化合物492-苯基氨基-噻唑-4-羧酸(1S，2S)-2-(苯甲氧基環(huán)己-1-基)酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-苯基氨基-噻唑-4-羧酸和(1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)己-1-基胺獲得。
化合物502-(5-氯-2-甲氧基-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸(1S，2S)-2-(苯甲氧基環(huán)己-1-基)酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(5-氯-2-甲氧基-苯基氨基)噻唑-4-羧酸和(1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)己-1-基胺獲得。
化合物512-(5-氯-2-甲氧基-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸(1R，2R)-2-(苯甲氧基環(huán)己-1-基)酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(2-甲氧基-5-氯苯基氨基)噻唑-4-羧酸和(1R，2R)-2-苯甲氧基環(huán)己-1-基胺獲得。
化合物522-(4-氯-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(R)-1-(2-萘-2-基-乙基)-酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-氯-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和(R)-1-(2-萘基)乙基胺獲得。
化合物532-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(R)-1-(2-萘-2-基-乙基)-酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和(R)-1-(2-萘基)乙基胺獲得。
化合物542-(4-氯-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(S)-1-(2-萘-2-基-乙基)-酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-氯-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和(S)-1-(2-萘基)乙基胺獲得。
化合物552-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(S)-1-(2-萘-2-基-乙基)-酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和(S)-1-(2-萘基)乙基胺獲得。
化合物562-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(萘-1-基-甲基)-酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和2-(氨基甲基)萘獲得。
化合物572-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(吡啶-4-基甲基)-酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和4-(氨基甲基)吡啶獲得。
化合物582-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(吡啶-3-基甲基)-酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和3-(氨基甲基)吡啶獲得。
化合物592-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(吡啶-2-基甲基)-酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和2-(氨基甲基)吡啶獲得。
化合物602-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸4-甲氧基-苯甲基酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和4-甲氧基-苯甲基胺獲得。
化合物612-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸3，4-二甲氧基-苯甲基酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和3，4-二甲氧基-苯甲基胺獲得。
化合物622-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸3-三氟甲氧基-苯甲基酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和4-三氟甲氧基-苯甲基胺獲得。
化合物632-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸4-氟-3-三氟甲基-苯甲基酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和4-氟-3-三氟甲基-苯甲基胺獲得。
化合物642-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸4-二甲基氨基-苯甲基酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和4-二甲基氨基-苯甲基胺獲得。
化合物652-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸3，5-二甲氧基-苯甲基酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和3，5-二甲氧基苯甲基胺獲得。
化合物662-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸1，2，3，4-四氫異喹啉酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和1，2，3，4-四氫異喹啉獲得。
化合物672-(4-氟-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(1S，2S)-2-(苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-氟-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和(1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基胺獲得。
化合物682-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(1S，2S)-2-(苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和(1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基胺獲得。
化合物692-(2，5-二甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(R)-1-(2-萘-2-基-乙基)酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(2，5-二甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和(R)-1-(2-萘基)乙基胺獲得。
化合物702-(4-氟-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸4-二甲基氨基-苯甲基酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-氟-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和4-二甲基氨基苯甲基胺獲得。
化合物712-(4-氟-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸4-氨磺?；?苯甲基酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-氟-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸和4-(氨基甲基)苯磺酰胺鹽酸鹽獲得。
化合物722-(4-氟-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸4-二甲基氨基-苯甲基酰胺 本化合物根據(jù)操作方案C從2-(4-氟-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸和4-二甲基氨基苯甲基胺獲得。
實(shí)施例2利用秀麗隱桿線蟲(C. elegans)篩選的生物學(xué)測(cè)試 基于秀麗隱桿線蟲的對(duì)Kv4.3調(diào)節(jié)劑的高通量篩選已經(jīng)用于建立根據(jù)本發(fā)明化合物對(duì)Kv4.3的體內(nèi)SAR(結(jié)構(gòu)-活性關(guān)系化學(xué)結(jié)構(gòu)對(duì)生物活性的作用)。
該測(cè)試應(yīng)用了在咽中功能性表達(dá)人Kv4.3以及在體壁肌肉中表達(dá)可視篩選GFP標(biāo)記的穩(wěn)定轉(zhuǎn)基因秀麗隱桿線蟲株。
描述構(gòu)建表達(dá)人Kv4.3的轉(zhuǎn)基因秀麗隱桿線蟲株的方法在WO03/097682中已有描述。簡(jiǎn)言之，將5ng/μl pGV8質(zhì)粒(人Kv4.3)、20ng/μl pDW2821(GFP-標(biāo)記物)和40ng/μl基因組秀麗隱桿線蟲DNA顯微注射入野生株N2的生殖腺來(lái)產(chǎn)生實(shí)際應(yīng)用的株UG1755。分離轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，并將染色體外陣列整合入秀麗隱桿線蟲基因組。50％傳遞功能性表達(dá)的人Kv4.3的細(xì)胞系經(jīng)鈷源gamma輻照誘變。分離開(kāi)約12000個(gè)F2動(dòng)物，篩選100％傳遞GFP標(biāo)記物的后代。認(rèn)為100％傳遞GFP的系是潛在整合的。進(jìn)一步測(cè)試這些系，并且和N2株遠(yuǎn)交(out-cross)兩次。測(cè)試所有獲得的細(xì)胞系的生活力、GFP和人Kv4.3表達(dá)。在篩選過(guò)程結(jié)尾，UG1755被鑒定是最適于經(jīng)受高通量篩選(HTS)的秀麗隱桿線蟲株。經(jīng)咽電圖(electropharyngeograms，EPG)分析確定這一穩(wěn)定株表達(dá)人Kv4.3。WO 03/097682中描述了這種方法。簡(jiǎn)言之，制備UG 1755秀麗隱桿線蟲動(dòng)物的解剖的咽并使用Axopatch-1 D放大器(Axon instruments)記錄咽電圖(EPG)。咽在浸液(含0.5％DMSO的Dent鹽水)中平衡約2分鐘直至觀察到穩(wěn)定的EPG記錄。將化合物溶液(DMSO或100μM氟卡尼)加入到浸液中。分析并按照百分比給出超短EPG(10-20ms)和正常EPG(100-200ms)的數(shù)目。超短EPG數(shù)目的減少表示部分逆轉(zhuǎn)為野生型EPG以及最終抑制人Kv4.3。50-80％的EPG是超短EPG(表2)。人Kv4.3在UG1755中誘導(dǎo)可用氟卡尼調(diào)節(jié)的超短EPG。此外，標(biāo)準(zhǔn)qRT-PCR證實(shí)，UG1755中存在人Kv4.3轉(zhuǎn)基因，以及人Kv4.3蛋白質(zhì)在UG1755動(dòng)物的咽中用人Kv4.3抗體P0358檢測(cè)到。
表2氟卡尼在轉(zhuǎn)基因秀麗隱桿線蟲株UG1755中調(diào)節(jié)人Kv4.3活性。
分析背景 咽是秀麗隱桿線蟲的進(jìn)食器官，每秒節(jié)律性收縮3-4次。咽的收縮由神經(jīng)系統(tǒng)通過(guò)類似于人肌細(xì)胞的動(dòng)作電位來(lái)控制，因此可用于在秀麗隱桿線蟲體內(nèi)研究人離子通道生理。
向秀麗隱桿線蟲咽中引入人Kv4.3離子通道以特征性方式影響秀麗隱桿線蟲的動(dòng)作電位。額外數(shù)目的鉀通道增加鉀離子外流，增強(qiáng)復(fù)極化，從而縮短動(dòng)作電位期。用非特異性鉀通道阻斷劑4-氨基吡啶、或SCN5a和Kv4.3阻斷劑氟卡尼，可以將人Kv4.3轉(zhuǎn)基因秀麗隱桿線蟲咽的超短動(dòng)作電位恢復(fù)至正常動(dòng)作電位。秀麗隱桿線蟲咽動(dòng)作電位的縮短是由于人Kv4.3表達(dá)引起的，其改變了咽收縮-松弛循環(huán)并最終降低這些轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的泵送/進(jìn)食。泵送的這種變化是適于高通量篩選技術(shù)的終點(diǎn)。通過(guò)使用前熒光染料可以在技術(shù)上將泵送終點(diǎn)轉(zhuǎn)譯為高通量輸出。前熒光染料根據(jù)泵送活性被秀麗隱桿線蟲吸收，并被位于其腸內(nèi)的酶轉(zhuǎn)化成熒光染料。一段孵育期之后，可以通過(guò)平板閱讀器來(lái)測(cè)量腸中熒光強(qiáng)度的變化。
基于上述對(duì)Kv4.3調(diào)節(jié)劑的高通量篩選在秀麗隱桿線蟲中實(shí)施對(duì)根據(jù)本發(fā)明化合物的篩選。用表達(dá)人Kv4.3的秀麗隱桿線蟲株測(cè)試根據(jù)本發(fā)明化合物對(duì)人Kv4.3的活性的方法與WO 03/097682中描述的方法相同。在不表達(dá)人Kv4.3的野生型秀麗隱桿線蟲株中測(cè)試所述化合物的方法與WO 00/63427中描述的方法相同。簡(jiǎn)言之，UG1755動(dòng)物大量生長(zhǎng)，并在篩選當(dāng)日收獲分級(jí)的(staged)年輕成蟲(子宮中沒(méi)有或僅有少量卵)?！癠”形96-孔化合物板的每個(gè)孔中在80μl緩沖液中分散入大約125只動(dòng)物?；衔锇逡呀?jīng)包含終濃度為0.3％DMSO中30μM的化合物物質(zhì)。孵育1小時(shí)后，加入10μl熒光標(biāo)記Calcein AM(CAM)，至終濃度為5μM CAM和0.8％DMSO。20℃下再孵育4小時(shí)后，通過(guò)加入10μl 60μM伊維菌素(Ivermectin)溶液停止秀麗隱桿線蟲動(dòng)物的吸收(或通過(guò)CAM吸收測(cè)量的“反應(yīng)”)。加入伊維菌素后40分鐘，利用Wallac平板閱讀器在波長(zhǎng)535nm下(485nm激發(fā)之后)測(cè)量熒光強(qiáng)度(每秒計(jì)數(shù))。
通過(guò)劑量-效應(yīng)分析鑒定并確認(rèn)活性化合物。計(jì)算EC50，結(jié)果列于表3中。在濃度為30μM時(shí)獲得劑量-效應(yīng)曲線。使用XLfit 2.09軟件包計(jì)算EC50。
還利用秀麗隱桿線蟲野生型株N2在相同分析模式下測(cè)試了這些化合物，并計(jì)算相應(yīng)的EC50。化合物在兩株(表達(dá)人Kv4.3的轉(zhuǎn)基因型和野生型)上獲得的EC50的比例指示所述化合物是否對(duì)人Kv4.3有作用。判定化合物對(duì)Kv4.3有潛在活性的截?cái)嘀凳潜壤秊?.8(對(duì)N2的EC50除以表達(dá)Kv4.3的株的EC50)。根據(jù)本發(fā)明化合物的比例的結(jié)果列于表3。
表3 所有受試化合物在極低濃度時(shí)對(duì)Kv4.3有活性。如實(shí)施例4中進(jìn)一步說(shuō)明，本發(fā)明的化合物還對(duì)Kv1.5離子通道有活性。
實(shí)施例3膜片鉗分析 細(xì)胞培養(yǎng) 對(duì)于該試驗(yàn)，使用穩(wěn)定表達(dá)人Kv4.3/KChIP2.2鉀通道的重組CHO-K1細(xì)胞系。本試驗(yàn)中所用細(xì)胞在標(biāo)準(zhǔn)條件(37℃，補(bǔ)充7％CO2的空氣)下維持于連續(xù)培養(yǎng)中。CHO-K1 Kv4.3/KChIP2.2細(xì)胞維持于Iscove改良DMEM(Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基)培養(yǎng)基(IMEM)中，其中培養(yǎng)基補(bǔ)充100 U/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素、7％胎牛血清(FCS)、2.5μg/ml兩性霉素、400μg/ml G418以及400μg/ml ZeocinTM。每3-4天用胰蛋白酶溶液脫落后對(duì)細(xì)胞傳代。通過(guò)生活力和污染測(cè)試確保培養(yǎng)細(xì)胞的質(zhì)量。按照此后操作方案D中所述進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。
操作方案D細(xì)胞在5％CO2和37℃培養(yǎng)條件下培養(yǎng)于94mm培養(yǎng)皿中。通過(guò)除去培養(yǎng)基然后用8ml PBS(磷酸鹽緩沖液)漂洗平皿，每3-4天進(jìn)行傳代培養(yǎng)。除去PBS，向細(xì)胞中加入1ml胰蛋白酶/EDTA。細(xì)胞在37℃下孵育約2分鐘或室溫下孵育5分鐘，然后輕敲平皿使細(xì)胞脫落并分散成單個(gè)細(xì)胞。加入9ml培養(yǎng)基使酶失活，反復(fù)吹吸溶液以打散細(xì)胞團(tuán)。然后將部分懸液轉(zhuǎn)移至新94mm平皿，加入培養(yǎng)基至終體積為8ml。如果必要，細(xì)胞可以接種至35mm平皿或94mm平皿(每35mm平皿2ml培養(yǎng)基，每94mm平皿8ml培養(yǎng)基)。每2-3天更換培養(yǎng)基。所用培養(yǎng)基是上述培養(yǎng)細(xì)胞的溶液。對(duì)于穩(wěn)定細(xì)胞，不加抗生素G418、潮霉素、殺稻瘟菌素或Zeocin。
所用PBS是不含Ca和Mg的Dulbecco’s PBS(1×)。10×胰蛋白酶/EDTA溶液含5g/l胰蛋白酶、2g/l EDTA和8.5g/l NaCl。通過(guò)向50ml10×胰蛋白酶/EDTA加入450ml PBS來(lái)制備1×胰蛋白酶/EDTA。
在電生理實(shí)驗(yàn)之前至少18小時(shí)，通過(guò)施用冰冷PBS或胰蛋白酶使細(xì)胞脫落，并重新鋪板于蓋玻片上。
按如下操作方案E中所述準(zhǔn)備用于電生理實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞。
操作方案E利用冷PBS將轉(zhuǎn)染細(xì)胞和穩(wěn)定細(xì)胞從35mm細(xì)胞培養(yǎng)平皿轉(zhuǎn)移至蓋玻片上除去培養(yǎng)基，加入0.3ml PBS(4-10℃)。細(xì)胞在室溫下孵育5分鐘。輕敲平皿使細(xì)胞脫落并分散成單個(gè)細(xì)胞，加入1.7ml培養(yǎng)基，吹吸溶液從而打散細(xì)胞團(tuán)。然后將部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至有蓋玻片和培養(yǎng)基的35 mm平皿。也可利用胰蛋白酶將轉(zhuǎn)染細(xì)胞和穩(wěn)定細(xì)胞從35mm細(xì)胞培養(yǎng)平皿轉(zhuǎn)移至蓋玻片上除去培養(yǎng)基，用3mlPBS漂洗平皿。除去PBS并加入0.3ml 1×胰蛋白酶/EDTA，細(xì)胞在室溫下孵育5分鐘。輕敲平皿使細(xì)胞脫落并分散成單個(gè)細(xì)胞，加入1.7 ml培養(yǎng)基，吹吸溶液從而打散細(xì)胞團(tuán)。然后將部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至有蓋玻片和培養(yǎng)基的35mm平皿。
溶液的準(zhǔn)備 在DMSO中制備10mM化合物的貯備溶液。通過(guò)將貯備溶液稀釋于浸液中來(lái)制備化合物溶液。如果要求的貯備溶液體積理論上低于1μl，則用具有較高化合物濃度的浸液用于稀釋。實(shí)驗(yàn)期間DMSO的最高濃度是0.1％(v/v)。
對(duì)于膜片鉗實(shí)驗(yàn)，使用在去礦化水中的如下溶液作為載體(濃度mM) 浸(外)液4 KCl、135 NaCl、2 CaCl2、1 MgCl2、10D(+)-葡萄糖、5 HEPES、pH7.4(NaOH)。
吸管(內(nèi))液130 KCl、1MgCl2、10 EGTA、5 Na2ATP、5 HEPES、pH7.4(KOH)。
電生理測(cè)量 利用膜片鉗技術(shù)在全細(xì)胞模式下研究人Kv4.3/KChIP2.2通道的活性。這表示對(duì)鉗住表達(dá)K+-通道蛋白質(zhì)的完整細(xì)胞至特定電位所需的電流進(jìn)行測(cè)量。利用膜片鉗裝置實(shí)施實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞操作所需的技術(shù)設(shè)備安放于振動(dòng)隔離桌上，并用法拉第籠屏蔽來(lái)盡可能減小電噪音。放大和控制系統(tǒng)置于法拉第籠外的架子中。系統(tǒng)由以下組成EPC9或EPC 10膜片鉗放大器(HEKA，Lambrecht，德國(guó))，以及由安裝于個(gè)人電腦的Pulse軟件包(HEKA，Lambrecht，德國(guó))控制的灌流系統(tǒng)DADVC8(ALAScientific，New York，USA)。用于膜片鉗的吸液管是硼硅酸鹽玻璃制成的。
室溫(20-25℃)下實(shí)施測(cè)量。各實(shí)驗(yàn)(即各細(xì)胞)中，僅研究化合物的一種濃度-而不是累計(jì)劑量。各個(gè)細(xì)胞用作自身對(duì)照。在一種濃度(2μM)下研究化合物對(duì)Kv4.3/KChIP2.2所介導(dǎo)電流的作用，各一式兩份(c＝1，n＝2)。
電壓脈沖之間，將細(xì)胞鉗在-80mV(內(nèi))的保持電位。測(cè)試操作如

圖1和表4所示。圖1a所示的測(cè)試操作方案用于表征Kv4.3/KChIP2.2通道的性質(zhì)以及檢查單個(gè)膜片鉗實(shí)驗(yàn)(電壓控制)的質(zhì)量。圖1b所示的測(cè)試操作方案顯示用于確定通道活性的標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試脈沖。每個(gè)測(cè)試操作方案由4階段組成。階段持續(xù)時(shí)間和電壓列于表4。
表4人Kv4.3/KChIP2.2通道的電生理研究的測(cè)試操作方案 當(dāng)全細(xì)胞配置建立之后，在用浸液進(jìn)行恒定表面灌流(superfusion)下記錄電流-電壓曲線(IV激活1；圖1a和表4a)用以檢查Kv4.3/KChIP2.2的表達(dá)以及各獨(dú)立膜片鉗實(shí)驗(yàn)(電壓控制)的質(zhì)量。隨后，在用浸液進(jìn)行恒定表面灌流下，以0.1Hz施加14個(gè)測(cè)試脈沖(系列1；圖1b和表4b)。通過(guò)電壓跳躍至-100mV(400ms)來(lái)起始操作以實(shí)現(xiàn)完全失活。然后經(jīng)300毫秒去極化至+40mV(激活)將Kv4.3/KChIP2.2通道轉(zhuǎn)變?yōu)殚_(kāi)放狀態(tài)。只有產(chǎn)生電流強(qiáng)度在1 nA和50nA之間的細(xì)胞才用于實(shí)驗(yàn)程序。沒(méi)有觀察到衰減(rundown)或者可以忽略。
然后，在用溶于浸液的化合物進(jìn)行恒定表面灌流下，以0.1Hz施加36個(gè)測(cè)試脈沖(系列2)。最終，在化合物存在條件下(IV激活2)記錄另一條電流-電壓曲線。
如果實(shí)驗(yàn)參數(shù)仍能令人滿意，則拓展實(shí)驗(yàn)用以研究化合物的洗除(washout)。為此，再次用浸液對(duì)細(xì)胞進(jìn)行表面灌流，同時(shí)以0.1Hz施加最多30個(gè)測(cè)試脈沖(系列3)。洗除程序?qū)τ谡_的數(shù)據(jù)分析不是必須的。
所有數(shù)據(jù)用n＝5的P/n操作方案進(jìn)行泄漏校正(見(jiàn)數(shù)據(jù)分析)。
本實(shí)驗(yàn)中獲得的典型Kv4.3/KChIP2.2電流如圖2所示。圖2表示由圖1和表4所述測(cè)試方案引起的Kv4.3/KChIP2.2通道介導(dǎo)的電流。圖2a表示在存在和不存在測(cè)試化合物(2μM化合物23，細(xì)胞2)時(shí)對(duì)測(cè)試脈沖的典型電流響應(yīng)。圖2b表示存在或不存在測(cè)試化合物(2μM化合物23)時(shí)每次電壓跳躍后75ms測(cè)定的典型IV曲線。階段持續(xù)時(shí)間和電壓列于表4，電壓操作方案描述于圖1。
所有測(cè)試操作方案/系列及其在數(shù)據(jù)分析中的應(yīng)用總結(jié)于表5。
表5測(cè)試操作方案/系列及其在電生理測(cè)量的數(shù)據(jù)分析中的用途 使用最高濃度(0.1％)的化合物載體(DMSO)，試驗(yàn)期間在分開(kāi)的實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行載體對(duì)照(n＝2)。
數(shù)據(jù)分析 用經(jīng)典的P/n方案進(jìn)行泄漏校正。泄漏脈沖不應(yīng)到達(dá)通道的激活水平，因而按比例縮減至原脈沖強(qiáng)度的1/n。此處，使用n＝5。然后將細(xì)胞對(duì)泄漏脈沖的電流響應(yīng)乘以n用以計(jì)算細(xì)胞對(duì)測(cè)試序列的理論被動(dòng)響應(yīng)。然后從真實(shí)響應(yīng)中減去此計(jì)算曲線，僅留下響應(yīng)的活性部分。
使用三種不同類型的分析在峰值電流處抑制、抑制電荷轉(zhuǎn)移以及+40mV激活后抑制75ms(持續(xù)電流)。用HEKA脈沖軟件包的在線分析工具確定峰電流/電荷/75ms時(shí)電流。放置光標(biāo)的方式使得峰值電流被包括住，選擇全階段“激活”(見(jiàn)表5)或?qū)⒐鈽?biāo)置于時(shí)間75ms處。所得的電流峰值強(qiáng)度/轉(zhuǎn)移電荷/75ms時(shí)電流強(qiáng)度作為ASCII文件輸出。
將所得ASCII文件輸入軟件包Prism(Graphpad Software，SanDiego，USA)并按如下所述進(jìn)行進(jìn)一步分析。不必進(jìn)行洗除校正。施用化合物溶液之前，求最后5個(gè)電流峰值強(qiáng)度/轉(zhuǎn)移電荷/75ms處電流強(qiáng)度的平均值并用作100％活性值。在化合物溶液存在條件下求取最后5個(gè)電流峰值強(qiáng)度/轉(zhuǎn)移電荷/75ms處電流強(qiáng)度的平均值，以給出抑制值。
所有數(shù)據(jù)點(diǎn)通過(guò)三個(gè)獨(dú)立參數(shù)經(jīng)Hill方程擬合，其中ymax是以％表示的最大抑制值，IC50是半數(shù)最大抑制時(shí)的濃度以及hill是Hill系數(shù)。
擬合參數(shù)ymax、IC50和hill表征CHO-K1細(xì)胞中表達(dá)的Kv4.3/KChIP2.2-通道與受試化合物的相互作用。所得曲線擬合如圖(％抑制vs濃度的對(duì)數(shù))所示，平均結(jié)果帶誤差條平均標(biāo)準(zhǔn)誤差(SEM)，其中 為了比較結(jié)果，估計(jì)IC50值。因此，用Hill系數(shù)為固定值(hill＝1)以及在高濃度處最大抑制(ymax＝100)的Hill方程對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合。圖3舉例說(shuō)明化合物23和化合物18的劑量-效應(yīng)曲線。
表13表示膜片鉗實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。
發(fā)現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的化合物尤其具有抗Kv4.3離子通道的活性。
為了在治療中最為有效，評(píng)價(jià)可能發(fā)生的副反應(yīng)同樣重要。因此，除了能調(diào)節(jié)特定鈣通道，根據(jù)本發(fā)明的化合物還表現(xiàn)出對(duì)Kv4.3比hERG通道具有高選擇性。
hERG實(shí)驗(yàn)的測(cè)試系統(tǒng)和測(cè)試方法 測(cè)試系統(tǒng) 對(duì)于該試驗(yàn)，使用HEK 293 T-REx HERG細(xì)胞(#23)。此細(xì)胞系由IonGate制備，其特征在于hERG基因的可誘導(dǎo)表達(dá)。T-RExTM系統(tǒng)(Invitrogen，Karlsruhe，Germany)是四環(huán)素-調(diào)節(jié)的哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)，此系統(tǒng)使用來(lái)自E.coli Tn10-編碼的四環(huán)素(Tet)抗性操縱子的調(diào)節(jié)元件。缺少Tet時(shí)表達(dá)受到抑制。
T-RExTM系統(tǒng)中的四環(huán)素調(diào)節(jié)基于四環(huán)素和Tet阻遏物的結(jié)合，從而解除對(duì)控制hERG基因表達(dá)的啟動(dòng)子解除阻遏。向細(xì)胞培養(yǎng)基中加入Tet導(dǎo)致hERG鉀通道的表達(dá)。
為了構(gòu)建HEK 293 T-REx HERG細(xì)胞系，將hERG基因連接入誘導(dǎo)表達(dá)載體pcDNA4/TO(→pc4TO-HERG)并轉(zhuǎn)染入HEK 293 T-REx細(xì)胞(此細(xì)胞系穩(wěn)定表達(dá)Tet阻遏物并且從Invitrogen購(gòu)買)。經(jīng)殺稻瘟菌素(5μg/ml)和ZeocinTM(300μg/ml)選擇之后分離出穩(wěn)定的細(xì)胞克隆。1μg/ml Tet誘導(dǎo)之后，對(duì)克隆實(shí)施電生理表征?？寺?23表現(xiàn)出hERG鉀通道的最佳表達(dá)。
測(cè)試方法 利用膜片鉗裝置實(shí)施實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞操作所需的技術(shù)設(shè)備安放于振動(dòng)隔離桌上，并用法拉第籠屏蔽至最小電噪音。放大和控制系統(tǒng)置于法拉第籠外的架子中。系統(tǒng)由以下組成EPC9或EPC10膜片鉗放大器(HEKA，Lambrecht，德國(guó))、以及由安裝于個(gè)人電腦的Pulse軟件包(HEKA，Lambrecht，德國(guó))控制的灌流系統(tǒng)DADVC8(ALA Scientific，New York，USA)。
細(xì)胞培養(yǎng) 此實(shí)驗(yàn)所用細(xì)胞在標(biāo)準(zhǔn)條件下(37℃，補(bǔ)充有5％CO2的空氣)保持于連續(xù)培養(yǎng)中。HEK 293 T-REx HERG細(xì)胞保持于最小基本培養(yǎng)基(MEM)中，其中補(bǔ)充100U/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素、10％胎牛血清(FCS)、1％非必需氨基酸(NEAA)、2.5μg/ml兩性霉素、300μg/mlZeocinTM和5μg/ml殺稻瘟菌素。每3-4天用胰蛋白酶溶液脫落細(xì)胞后將其傳代。通過(guò)生活力和污染測(cè)試確保培養(yǎng)細(xì)胞的質(zhì)量。按照上述操作方案D中所述進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。
在電生理實(shí)驗(yàn)之前至少18小時(shí)，通過(guò)應(yīng)用冰冷PBS(磷酸鹽緩沖液)或胰蛋白酶使細(xì)胞脫落，并重新鋪板于蓋玻片上。向細(xì)胞加入1μg/ml Tet來(lái)誘導(dǎo)hERG表達(dá)。
根據(jù)以上操作方案E所述準(zhǔn)備細(xì)胞用于電生理實(shí)驗(yàn)。按照上述溶液制備的段落制備溶液。
電生理測(cè)量 利用膜片鉗技術(shù)在全細(xì)胞模式下研究心臟hERG通道的活性。這表示對(duì)鉗住表達(dá)K+-通道蛋白質(zhì)的完整細(xì)胞至特定電位所需的電流進(jìn)行測(cè)量。用于膜片鉗的吸液管是硼硅酸鹽玻璃制成的。室溫(20-25℃)下進(jìn)行測(cè)量。各實(shí)驗(yàn)(即各細(xì)胞)中，僅研究化合物的一種濃度-而不是累計(jì)劑量。各個(gè)細(xì)胞用作自身對(duì)照。-種濃度下(10μM)用兩個(gè)復(fù)本(c＝1，n＝2)研究所述化合物對(duì)hERG介導(dǎo)電流的作用。
電壓脈沖之間，細(xì)胞鉗在-80mV(內(nèi)側(cè))保持電位。
hERG K+-通道電生理研究的測(cè)試方案如圖4和表6所示。表6和圖4中，(a)是用于確定通道活性的標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試脈沖。(b)和(c)用于表征hERG通道的性質(zhì)以及檢查獨(dú)立膜片鉗實(shí)驗(yàn)(電壓控制)的質(zhì)量。每個(gè)測(cè)試方案由6階段組成。階段持續(xù)時(shí)間和電壓列于表6。
表6 當(dāng)全細(xì)胞配置建立之后，施加一系列脈沖用以檢查hERG表達(dá)以及優(yōu)化放大器設(shè)置。然而，僅使用如下測(cè)量用于數(shù)據(jù)分析在用浸液進(jìn)行恒定表面灌流下，以0.1Hz(系列1)施加15個(gè)測(cè)試脈沖(圖4a和表6a)。通過(guò)-40mV(50ms)泄漏測(cè)試來(lái)起始操作方案。回復(fù)至保持電位(-80mV，0.25秒)后，經(jīng)2.5秒(激活)去極化至+40mV將hERG通道轉(zhuǎn)變?yōu)闊o(wú)活性狀態(tài)。在-40mV測(cè)量最大hERG尾電流強(qiáng)度(尾電流測(cè)試，1.5秒)。只有產(chǎn)生尾電流強(qiáng)度在300pA和10nA之間的細(xì)胞才用于實(shí)驗(yàn)程序。
hERG通道介導(dǎo)由圖5中hERG通道測(cè)試的測(cè)試方案激發(fā)的電流。圖5a顯示有和無(wú)10μM測(cè)試化合物21(上部跡線，upper trace)時(shí)的通道活性測(cè)試。圖5b和5c是對(duì)表6b(IV激活)和表6c(IV尾電流)操作方案的電流響應(yīng)。
隨后，在用浸液進(jìn)行表面灌流下，利用兩組脈沖系列研究電流-電壓曲線(IV-曲線)?！癐V激活”脈沖系列在系列的每個(gè)連續(xù)脈沖(從-60至+60mV，20mV間隔，圖4b和表6b)之間改變激活脈沖的電位。+60mV激活后的尾電流強(qiáng)度必須在用+40mV激活電位發(fā)現(xiàn)值的±20％之內(nèi)?！癐V尾電流”脈沖系列在系列的各連續(xù)脈沖(從-100至+20mV，20mV間隔，圖4c和表6c)之間改變尾電流測(cè)試脈沖的電位。必須在40mV(±10％Imax)處測(cè)量最大尾電流強(qiáng)度(Imax)。以0.1Hz施加系列“IV激活”和“IV尾電流”的測(cè)試脈沖。
成功表征電流之后，用浸液對(duì)細(xì)胞進(jìn)行表面灌流，同時(shí)以0.1Hz再施加10個(gè)測(cè)試脈沖(系列2)。系列1和2用于將數(shù)學(xué)函數(shù)擬合至尾電流峰值，以便確定信號(hào)強(qiáng)度的衰減。用含有期望濃度的化合物的浸液對(duì)細(xì)胞進(jìn)行表面灌流，并再施加30個(gè)測(cè)試脈沖(系列3)。如果需要再施加更多測(cè)試脈沖(系列4)。
如果實(shí)驗(yàn)參數(shù)仍令人滿意，則拓展實(shí)驗(yàn)來(lái)研究化合物的洗除。為此，再次用浸液對(duì)細(xì)胞進(jìn)行表面灌流，同時(shí)以0.1Hz施加最多20個(gè)測(cè)試脈沖(系列5)。然而，因?yàn)橥ㄟ^(guò)對(duì)系列1和2(衰減-校正)的擬合程序建立了基線，洗除程序?qū)τ谡_的數(shù)據(jù)分析不是必要的。
所有測(cè)試操作方案/系列及其在電生理測(cè)量的數(shù)據(jù)分析中的用途總結(jié)于表7。
表7 使用實(shí)驗(yàn)所用最高濃度(0.1％)的化合物載體(DMSO)，在分析期間在獨(dú)立實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行載體對(duì)照(n＝2)。
數(shù)據(jù)分析 數(shù)據(jù)分析基于+40mV激活后-40mV處由hERG K+通道介導(dǎo)的尾電流峰值強(qiáng)度。用HEKA脈沖軟件包的在線分析工具確定峰電流。光標(biāo)放置方式使得峰值電流被包括住。泄漏測(cè)試脈沖(各個(gè)測(cè)試脈沖中的階段2)處發(fā)現(xiàn)的電流設(shè)定為0。獲得的尾電流峰值強(qiáng)度作為ASCII數(shù)據(jù)文件輸出。
將所得ASCII文件輸入軟件包Prism(Graphpad Software，SanDiego，USA)并按如下所述進(jìn)行進(jìn)一步分析。用合適的函數(shù)(即，單-或雙指數(shù)衰減)來(lái)擬合系列1和2。所得函數(shù)用于通過(guò)分組對(duì)數(shù)據(jù)組(系列1至5)進(jìn)行衰減校正。求得施用化合物溶液之前最后5個(gè)尾電流峰值強(qiáng)度的平均值并用作100％活性值。求得化合物溶液存在條件下最后5個(gè)尾電流峰值強(qiáng)度的平均值，用以給出抑制值。所有數(shù)據(jù)點(diǎn)用具有三個(gè)獨(dú)立參數(shù)的Hill方程擬合，其中ymax是以％表示的最大抑制值，IC50是半數(shù)最大抑制時(shí)的濃度以及hill是Hill系數(shù)。
擬合參數(shù)ymax、IC50和hill表征HEK 293細(xì)胞表達(dá)的hERG K+-通道和受試化合物的相互作用。所得曲線擬合如圖(％抑制vs濃度的對(duì)數(shù))所示，平均結(jié)果帶誤差條平均標(biāo)準(zhǔn)誤差(SEM)，其中 為了比較結(jié)果，估計(jì)IC50值。因此，用Hill系數(shù)為固定值(hill＝1)以及在高濃度處最大抑制(ymax＝100)的Hill方程對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合。圖6說(shuō)明化合物25和化合物33的劑量-效應(yīng)曲線。
表示通道活性的結(jié)果如表8所示。
表8 對(duì)Kv4.3 vs hERG(膜片鉗實(shí)驗(yàn))表現(xiàn)出選擇性＞5(比例值)的化合物被認(rèn)為對(duì)Kv4.3通道有非常高的選擇性。
因此，除了在極低濃度對(duì)Kv4.3離子通道有活性以外，根據(jù)本發(fā)明的化合物被證明當(dāng)與hERG通道相比較時(shí)對(duì)Kv4.3通道選擇性很高。
此外，表13顯示非限定性數(shù)目的本發(fā)明另外的化合物對(duì)Kv4.3和hERG的作用。除非另外提供，按照實(shí)施例3所述操作方案，在膜片鉗分析中，在-種濃度下(1μM)研究本發(fā)明化合物對(duì)Kv4.3-介導(dǎo)的鉀通道的作用。結(jié)果如表13所示。表13中，以％表示的Kv4.3負(fù)荷表示施用化合物后測(cè)量并相對(duì)于空白的殘余電流，以％表示的Kv4.3峰值表示施用化合物后測(cè)量并相對(duì)于空白的殘余峰高。如此處所用術(shù)語(yǔ)“ND”表示未測(cè)試。除非另有指明，在1μM下測(cè)試Kv4.3負(fù)荷和峰值。除非另外提供，在膜片鉗分析中在10μm濃度下研究非限定性數(shù)目的本發(fā)明的其他化合物對(duì)hERG通道的作用。
實(shí)施例4利用Kv1.5離子通道的膜片鉗分析 將編碼Kv1.5的cDNA(GenBank Acc.No.M55513)克隆至pcDNA6-載體(Invitrogen，Leek，荷蘭)。通過(guò)PCR引入C-端表位標(biāo)簽。質(zhì)粒經(jīng)測(cè)序后引入細(xì)胞。建立穩(wěn)定表達(dá)Kv1.5通道的克隆細(xì)胞系。通過(guò)免疫熒光方法，利用抗表位標(biāo)簽的抗體分析蛋白質(zhì)的表達(dá)。離子通道的功能性表達(dá)經(jīng)電生理學(xué)確認(rèn)。
細(xì)胞培養(yǎng) 使用穩(wěn)定表達(dá)人Kv1.5鉀通道的CHO細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
細(xì)胞于25ml培養(yǎng)瓶(Greiner Bioone，Cellstar，Cat.No.690160)的6ml MEM ALPHA培養(yǎng)基(Sigma，Taufkirchen，Germany，Cat NoM8042)中，于37℃和5％CO2條件下生長(zhǎng)，其中培養(yǎng)基補(bǔ)充有10％(v/v)熱滅活胎牛血清(Sigma，Cat.No.F9665)、1％(v/v)P/S/G-溶液(Sigma，Cat.No.G6784)以及G-418(750μg每毫升培養(yǎng)基，Sigma，Germany，Cat.No.A1720；50mg/ml水中，Sigma，Germany，Cat.No.W3500)。
電生理學(xué) Kv1.5介導(dǎo)電流的刺激方案 從-60mV的HP，細(xì)胞經(jīng)100ms超極化至70mV，隨后經(jīng)500ms去極化至+50mV。測(cè)試脈沖結(jié)束至+50mV時(shí)使用電流強(qiáng)度用于分析。脈沖循環(huán)速率為10s(0.1Hz)。
Kv1.5介導(dǎo)電流的測(cè)試項(xiàng)目應(yīng)用方案 測(cè)試化合物的應(yīng)用方案描述于圖7。實(shí)現(xiàn)穩(wěn)態(tài)電流強(qiáng)度需要首先14個(gè)刺激。計(jì)算非特異性電流降低并在數(shù)據(jù)分析期間用于校正程序。第14個(gè)刺激之后，開(kāi)始經(jīng)特富龍(teflon)和硅酮管施加測(cè)試化合物(箭頭指示)，并假定再刺激6次之后達(dá)到細(xì)胞。通過(guò)使用10滴/10-12s的確定滴加速率調(diào)節(jié)灌流。依次向一個(gè)細(xì)胞施加最多三個(gè)濃度，隨后洗滌5分鐘。刺激總數(shù)是140。對(duì)于第一濃度在第21和50次刺激之間(5分鐘，長(zhǎng)虛線)分析測(cè)試化合物的作用，在第51和80次刺激之間(5分鐘，短虛線)再進(jìn)行5分鐘。如果細(xì)胞仍然穩(wěn)定，隨后再進(jìn)行洗滌。用箭頭指示在給定濃度開(kāi)始施加測(cè)試化合物。每單個(gè)過(guò)程中的刺激數(shù)顯示于圖7的方案中。
陰性對(duì)照 在研究期間并在相同的條件下進(jìn)行載體(DMSO)對(duì)照實(shí)驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證電流隨時(shí)間的穩(wěn)定性并評(píng)價(jià)細(xì)胞狀態(tài)。
測(cè)試化合物對(duì)Kv1.5介導(dǎo)電流的作用 在一種濃度下(2μM或1μM)研究測(cè)試化合物對(duì)Kv1.5-介導(dǎo)的鉀通道的作用。為了比較，對(duì)Kv1.5-介導(dǎo)鉀通道的載體對(duì)照實(shí)驗(yàn)的結(jié)果如表9所示。
表9 實(shí)施例5大鼠和豚鼠中的離體器官研究 研究化合物在分離的大鼠左心房(Rat LA)中對(duì)收縮力、刺激閾以及功能不應(yīng)期(FRP)的作用。大鼠左心房功能性表達(dá)Kv4.3離子通道，產(chǎn)生動(dòng)作電位的Ito電流。此外，在不表達(dá)Kv4.3的豚鼠分離右心室乳頭肌(GP pap.肌肉)中研究化合物的這些作用。對(duì)于不應(yīng)期電流，豚鼠的動(dòng)作電位受hERG樣通道主導(dǎo)。因此，應(yīng)當(dāng)在GP乳頭肌制備物中見(jiàn)到hERG通道的體內(nèi)活性。
方法大鼠LA(相同方法應(yīng)用于GP pap.肌肉) 分析原理 左心房垂直安置于含100ml緩沖溶液(以mM表示NaH2PO40.6、MgSO4 0.6、KCl 4.7、NaHCO3 25、葡萄糖4.5、NaCl 120、CaCl22.4)的兩室器官浴中。用含95％O2和5％CO2的混合氣體使溶液飽和并循環(huán)。溫度恒定保持在30℃。心房的預(yù)負(fù)載設(shè)為約8mN。通過(guò)持續(xù)1.5ms、強(qiáng)度為3.5×閾值的矩形脈沖來(lái)實(shí)現(xiàn)1Hz電刺激。通過(guò)連接至放大器的力換能器測(cè)量制備物的等長(zhǎng)收縮力(isometric force)，通過(guò)筆式記錄儀記錄并傳輸?shù)接?jì)算機(jī)中用以評(píng)價(jià)。于基線(pre)、加入化合物后20分鐘、實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)洗除之后測(cè)量收縮力(FC)、刺激閾值(TS)和功能不應(yīng)期(FRP)。刺激閾代表組織的可興奮性，通過(guò)改變電刺激所施加電壓來(lái)評(píng)價(jià)。TS定義為誘導(dǎo)組織收縮的最低電壓。功能不應(yīng)期代表復(fù)極化所需時(shí)間，通過(guò)從前次正常節(jié)律刺激(regular pacing stimulus)起在不同時(shí)間間隔施加額外刺激來(lái)評(píng)價(jià)。FRP定義為正常和額外刺激之間的導(dǎo)致組織響應(yīng)額外刺激而收縮的最短間隔。
施用化合物 至少60分鐘的平衡期之后開(kāi)始，以20分鐘間隔通過(guò)五次累積施用來(lái)測(cè)試化合物。化合物最高濃度下測(cè)試后進(jìn)行兩次洗除間隔。結(jié)果如圖8和9以及表10所述。
圖8表示對(duì)于化合物68，分離的大鼠左心房的功能不應(yīng)期。
圖9表示對(duì)于相同化合物，分離的豚鼠乳頭肌的功能不應(yīng)期。
表10 實(shí)施例6小鼠體內(nèi)研究 發(fā)射器植入和ECG記錄 用異氟烷、一氧化二氮和氧氣的混合氣體麻醉雄性小鼠(NRMI)。通過(guò)縫合在劍狀軟骨和腹側(cè)頸區(qū)中固定連接至遙測(cè)發(fā)射器(TA10EA-F20，DSI，St.Paul，USA)的引線。遙測(cè)發(fā)射器置于背部皮膚下。按層閉合傷口，讓動(dòng)物恢復(fù)至少1周。
通過(guò)吸入鹵烷麻醉法來(lái)麻醉雌性豚鼠(Charles River，Crl:HA(BR)。遙測(cè)發(fā)射器(TA11CTA-F40，DSI，St.Paul，USA)的負(fù)極生物電勢(shì)引線固定于右肩區(qū)域的肌肉組織中，正極引線固定于胸腔左側(cè)第六根肋骨的區(qū)域，模擬標(biāo)準(zhǔn)引線II的構(gòu)造。遙測(cè)發(fā)射器置于腹腔中，固定至腹膜肌肉，分層縫合切口。植入發(fā)射器以后，動(dòng)物恢復(fù)至少一周。
實(shí)驗(yàn)研究設(shè)計(jì)，腹腔內(nèi)(i.p.)施用 實(shí)驗(yàn)當(dāng)日動(dòng)物以60分鐘給藥間隔經(jīng)腹腔接受連續(xù)劑量的載體。用Data Sciences A.R.T系統(tǒng)記錄ECG蹤跡(持續(xù)12s)。完成實(shí)驗(yàn)后，用Data Sciences ECG軟件(DSI，St.Paul，USA)自動(dòng)分析ECG。在保存的ECG中人工測(cè)量QT和QRS間期。使用Bazett方程從QT間隔和對(duì)應(yīng)心率計(jì)算QTc。從在線分析中獲取心率，由DSI Labpro和DSI A.R.T.系統(tǒng)(DSI，St.Paul，USA)給出。最后，將ECG間期轉(zhuǎn)移至Excel工作表，檢查似然性并轉(zhuǎn)化為15分鐘平均值。
小鼠中的結(jié)果 連續(xù)施用本發(fā)明化合物在小鼠ECG中導(dǎo)致顯著、劑量依賴性、但是遲發(fā)的QT和QTc間期延長(zhǎng)。載體和化合物68的結(jié)果分別如圖10和11所示(腹腔注射載體和對(duì)照(3-15μM/kg))。PQ和QRS沒(méi)有表現(xiàn)出劑量依賴性變化。心率呈現(xiàn)微小而不顯著的降低。每次隨后注射之后，運(yùn)動(dòng)活性表現(xiàn)出重復(fù)性升高。平均值±SD，n＝5。
結(jié)論 QT和QTc的劑量依賴性延長(zhǎng)在小鼠中依賴于Kv4.2和Kv4.3，連續(xù)施用化合物后發(fā)現(xiàn)缺乏對(duì)PQ和QRS的作用，這表明阻斷了復(fù)極化K+電流，這可以與本發(fā)明化合物作為Kv4.3阻斷劑的特征相容。值得注意的是在該實(shí)驗(yàn)中最高測(cè)試劑量是15μmol/kg，甚至可在這種模型中測(cè)試更高的乃至30μmol/kg的劑量。
實(shí)施例7兔中的離體器官研究 本實(shí)施例檢查所述化合物對(duì)以下的影響QT間期、大致接近于復(fù)極化透壁傳播(TDR)的Tp-e間期(Yan和Antzelevitch，Circulation1998；981928-1936；Yah et al，Circulation 2001；1032851-2856)、影響在心下-和/或心內(nèi)膜中發(fā)生去極化后早期(EAD)第2期電勢(shì)的Tp-e/QT比例(Joshi et al，Journal of Electrocardiology，2004，34(suppl)7-14)以及在分離動(dòng)脈灌流的兔心室楔形制備物中依賴第2期EAD的現(xiàn)象(即R-on-T性期外收縮和TdP)。
方法 動(dòng)脈灌流的兔左心室楔形制備物 體重2.5-3kg的雌兔用肝素抗凝血并且用戊巴比妥(30-35mg/kg，i.v.)麻醉。通過(guò)左胸廓切開(kāi)術(shù)打開(kāi)胸腔，切除心臟置于由標(biāo)準(zhǔn)Tyrode溶液(以mmol/l表示NaCl 129、KCl 4.0、CaCl2 1.8、NaH2PO4 0.9、MgSO4 0.5、NaHCO3 20、葡萄糖5.5)組成的冷(4℃)心臟麻痹溶液中。從左心室解剖出大約1.5cm寬和2-3cm長(zhǎng)的透壁楔形組織，快速通過(guò)左前降支動(dòng)脈或回旋支動(dòng)脈插入導(dǎo)管，并用心臟麻痹溶液灌流小于4分鐘。制備物轉(zhuǎn)移至組織浴(100ml)并用含4mM K+用95％O2和5％CO2緩沖的溫(35.7±0.1℃)Tyrode溶液灌流。使用蠕動(dòng)泵將灌流壓力設(shè)為40-50mmHg。制備物節(jié)拍設(shè)為基本循環(huán)長(zhǎng)度1000ms并允許平衡約1h，即實(shí)現(xiàn)電穩(wěn)定所必需的時(shí)間。通過(guò)除尖端以外絕緣并施加至心臟內(nèi)表面的雙極型銀電極傳遞電節(jié)拍。
實(shí)驗(yàn)方案 制備物平衡1小時(shí)后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。輸注化合物期間，從輸注開(kāi)始至第20分鐘以基本循環(huán)長(zhǎng)度1000ms然后從第20分鐘至第30分鐘以基本循環(huán)長(zhǎng)度2000ms從心臟內(nèi)膜刺激制備物。在每個(gè)節(jié)拍循環(huán)長(zhǎng)度結(jié)束時(shí)，以1562Hz取樣速率(Spike 2軟件，CED，英國(guó))對(duì)ECG信號(hào)取樣1至2分鐘。
兔心室楔形制備物的電生理記錄 在所有實(shí)驗(yàn)中記錄透壁ECG信號(hào)。QT間期定義為從QRS發(fā)作開(kāi)始至跨等電位線的T波最終向下斜的時(shí)間。QT間期值來(lái)自四次連續(xù)心跳的平均值。(Yan and Antzelevitch，Circulation 1998；Yan et al，Circulation 2001；1032851-2856；和Antzelevitch，Journal ofElectrocardiology 2004；37(Suppl)15-24)。
當(dāng)在1和3μmol/l濃度下灌流30分鐘時(shí)，化合物對(duì)QT或Tp-e間期沒(méi)有表現(xiàn)出顯著作用?；衔镌跍y(cè)試濃度下沒(méi)有誘導(dǎo)任何EAD、R-on-T異常心跳或TdP。
例如化合物68的結(jié)果描述于表11中。
結(jié)論在測(cè)試濃度范圍內(nèi)，本發(fā)明的化合物在動(dòng)脈灌流的兔左心室楔形制備物中不產(chǎn)生任何QT或Tp-e延長(zhǎng)，表明該化合物不可能在人中引發(fā)發(fā)生TdP的任何風(fēng)險(xiǎn)(Joshi et al，Journal of Electrocardiology,2004，34(suppl)7-14)。
表11化合物68對(duì)QT或Tp-θ間期的作用，以及對(duì)用2000ms BCL在節(jié)拍速率測(cè)量的EAD-依賴性事件的作用。
實(shí)施例9人心房肌細(xì)胞中的體外研究 在人心房肌細(xì)胞的以下通道上測(cè)定本發(fā)明化合物的阻斷特征INa、Ito、Isus、IK1通道電流。
方法 細(xì)胞制備 人心房肌細(xì)胞在搭橋手術(shù)中，從具有大體正常解剖面的標(biāo)本制備肌細(xì)胞，所述標(biāo)本從具有正常P波心電圖的患者心臟中切除。經(jīng)過(guò)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)后獲得人心房樣品。心房組織樣品快速浸在心臟麻痹溶液(以mM表示50KH2PO4、8MgSO4、10NaHCO3、5腺苷、25?；撬帷?40葡萄糖、和100甘露醇，滴定至pH7.4并在0-4℃用100％O2鼓泡)中并快速送至實(shí)驗(yàn)室。然后在切除過(guò)程后30分鐘內(nèi)將組織切成0.5-1mm2的塊并轉(zhuǎn)移至50ml錐形管中的不含Ca2+的洗液(以mM表示137NaCl、KH2PO4、1MgSO4、10?；撬?、10葡萄糖、5HEPES以及100μmol/L(μM)EGTA；pH＝7.4，室溫22-24℃)中。然后將組織孵育于5ml溶液(以mM表示137 NaCl、5 KH2PO4、1 MgSO4、10?；撬?、10葡萄糖、5 HEPES)中，所述溶液還補(bǔ)充有0.1％牛白蛋白、2.2mg/ml V型膠原酶、和1.0mg/ml XXIV型蛋白酶(Sigma Chemical)，pH＝7.4，37℃)，并連續(xù)用100％O2鼓泡。孵育20分鐘后離心如此獲得的懸液，棄去上清，在37℃下含100μM CaCl2的消化溶液中的～1mg/ml膠原酶中孵育組織塊。每5-10分鐘進(jìn)行孵育介質(zhì)的顯微檢查來(lái)確定分離細(xì)胞的數(shù)目和質(zhì)量。當(dāng)表現(xiàn)出最高產(chǎn)率時(shí)，在10,000-20,000g下離心2分鐘細(xì)胞懸液，所得沉淀重懸于改良Kraftbruhe溶液(以mM表示25 KCl、10KH2PO4、25?；撬?、0.5 EGTA、22葡萄糖、55谷氨酸以及0.1％牛白蛋白，pH＝7.3(22-24℃)(Crimb和Cavero，2003)中。通常，分離過(guò)程產(chǎn)生初始產(chǎn)量為～40-60％的棒狀、鈣耐受的細(xì)胞，該細(xì)胞在其制備后14小時(shí)內(nèi)用于膜片鉗實(shí)驗(yàn)。
鉗住的肌細(xì)胞僅僅是那些分散的并且是棒狀的沒(méi)有可見(jiàn)泡(肌膜外凸)的細(xì)胞。
溶液 K電流為了記錄鉀電流(Ito、Isus、IK1、IHERG)用于表面灌流HEK293或人心房細(xì)胞的水溶液(外液)的離子組成是(以mM表示)137NaCl、4KCl、1.8CaCl2、1.2MgCl2、11右旋糖、10HEPES，用NaOH將pH調(diào)節(jié)至7.4。ICa是加至本溶液的阻斷的CdCl2(200mM)。鉗吸液管的內(nèi)液的離子組成是(以mM表示)130 KCl；1 MgCl2、5NaATP、7 NaCl、5 EGTA、5 HEPES，用KOH將調(diào)節(jié)至pH＝7.2。
鈉電流為了研究人心房肌細(xì)胞中的鈉電流(INa)，用外液對(duì)細(xì)胞表面灌流，外液由以下組成(以mM表示)115 TMA氯化(四甲基銨)、10NaCl、5CsCl、1.8CaCl2、1.2MgCl2、10HEPES、11右旋糖、用TMA-OH將pH調(diào)節(jié)至7.4，而內(nèi)液組成是(以mM表示)115CsF、20CsCl、10NaF、10HEPES、5EGTA；用CsOH將pH調(diào)節(jié)至7.2。
試劑 用于制備外和內(nèi)液的化學(xué)品從Sigma-Aldrich化學(xué)公司購(gòu)買(Natick，MA 01760-2447，USA)。用DMSO(二甲亞砜)將本發(fā)明的化合物制備為這些化合物的10mM儲(chǔ)液。每個(gè)研究濃度時(shí)的DMSO終濃度決不超過(guò)0.1％。
離子電流的測(cè)量 在室溫下(20-25℃)對(duì)INa進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，在32-34℃對(duì)Ito、Isus、IK1進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。用膜片鉗方法的全細(xì)胞變型測(cè)量電流。用水平拉伸器(SutterInstruments，USA)從硼硅酸鹽玻璃拉制成玻璃吸液管，然后用火拋光來(lái)獲得1至2μm的頂端開(kāi)口。充滿內(nèi)液的這些吸液管的電阻達(dá)約1至2MΩ。
用與插入浴中靠近所研究細(xì)胞的電熱調(diào)節(jié)器相耦合的電熱設(shè)備(型號(hào)806-7243-01，Cambion/Midland Ross，Cambridge，MA)來(lái)控制浴溫。
使用Axopatch 1-B放大器(Axon instruments，F(xiàn)oster City，CA)用于全細(xì)胞電壓鉗。電壓鉗脈沖傳遞和數(shù)據(jù)獲得由運(yùn)行pClamp軟件(Axon Instruments)的IBM PC控制。
細(xì)胞膜破裂后進(jìn)入全細(xì)胞模式，開(kāi)始實(shí)驗(yàn)過(guò)程之前允許電流強(qiáng)度和動(dòng)力學(xué)穩(wěn)定3-7分鐘。對(duì)于Ito和Isus，由從-50mV保持電位至+60mV的500ms脈沖引發(fā)從人心房肌細(xì)胞記錄的K+電流。測(cè)量Ito作為峰電流強(qiáng)度，而Isus作為500ms電壓脈沖結(jié)束時(shí)出現(xiàn)的電流。此外，在整個(gè)脈沖期間測(cè)量化合物之前和之后的曲線下面積。通過(guò)遞送-75mV保持電位至-100mV的500ms脈沖來(lái)產(chǎn)生峰值IK1電流。
通過(guò)以0.1Hz頻率遞送從-140mV保持電位至-20mV的40ms持續(xù)時(shí)間的脈沖來(lái)產(chǎn)生從人心房肌細(xì)胞的峰值內(nèi)向INa。
在如下濃度測(cè)試化合物0.01μM、0.1μM、0.3μM、1μM、3μM、10μM。
載體 載體和用于制備含測(cè)試化合物的溶液的相同。本實(shí)驗(yàn)中，載體是DMSO并且從Sigma化學(xué)獲得。在典型實(shí)驗(yàn)(約10分鐘)過(guò)程中，加入最高濃度的100∶1稀釋載體被期望可產(chǎn)生hERG電流強(qiáng)度(1.4％±1.5％，n＝11)的輕微降低。
結(jié)果表達(dá)和統(tǒng)計(jì)分析 給出原始數(shù)據(jù)和平均值+SEM。數(shù)據(jù)表示為電流強(qiáng)度的降低％。相對(duì)于引入藥物之前(對(duì)照)的電流強(qiáng)度，這將測(cè)量作為藥物存在時(shí)到達(dá)穩(wěn)態(tài)作用之后的電流降低。各個(gè)細(xì)胞作為自身的對(duì)照。用MicroCal Origin版本6.0軟件通過(guò)成對(duì)Student t檢驗(yàn)比較藥物作用的顯著性(p＜0.05)。制作測(cè)試濃度下平均百分比阻斷±SEM的對(duì)數(shù)-線性圖。如果可能的話，用MicroCal Origin版本6.0軟件，利用非線性曲線擬合程序?qū)⑷?參數(shù)Hill方程擬合至結(jié)果。所述方程是 其中Vmax、k、和n是非限定性的變量(除Vmax＞0以外)。由于Vmax參數(shù)不限制到100％，所以參數(shù)k不代表離子通道阻斷的IC50。因此根據(jù)前面方程的反函數(shù)來(lái)計(jì)算IC50 陽(yáng)性對(duì)照 氟卡尼用作陽(yáng)性對(duì)照來(lái)確定細(xì)胞對(duì)Ito阻斷的敏感性。
結(jié)果 表12和圖12表示化合物68對(duì)離子通道電流的抑制。圖12表示對(duì)ITO和Kv1.5電流的抑制?；衔?8對(duì)ITO電流的劑量-效應(yīng)分析揭示IC50＝0.8μM(菱形)。化合物68對(duì)Kv1.5的劑量-效應(yīng)分析揭示IC50＝1.4μM(方形)。脈沖結(jié)束時(shí)電流強(qiáng)度減去殘留電流獲得對(duì)Kv1.5的活性。
表12化合物68對(duì)離子通道的作用 §Isus是在電壓脈沖至+60mV結(jié)尾處測(cè)量的電流。它由KV1.5以及非-選擇性陽(yáng)離子電流組成。這兩種電流的比例依細(xì)胞而不同。脈沖結(jié)束時(shí)電流強(qiáng)度減去殘留電流獲得Kv1.5。殘留電流對(duì)4-AP(1mM)不敏感。
表13受試化合物對(duì)Kv4.3介導(dǎo)電流的作用 本發(fā)明涵蓋式I至的化合物，尤其是化合物15至181、210至226。在一個(gè)具體實(shí)施方案中，本發(fā)明涵蓋化合物16，18，19，20，21，23，25，26，27，28，29，30，31，32，33，34，35，40，47，48，52，53，54，55，56，57，58，59，60，61，63，64，65，66，67，68，75，76，81，82，83，84，85，86，88，89，93，94，95，96，97，98，102，103，104，105，106，108，114，118，123，124，125，126，142，160，161，165，170，180，210，211.
權(quán)利要求
1.具有結(jié)構(gòu)式I、II、III或IV的化合物、其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、外消旋體、前藥、代謝物、或其制藥可接受的鹽和/或溶劑化物，
其中當(dāng)X是O時(shí)，Y1選自N或CH＝，并且n是0，
其中當(dāng)X是N時(shí)，Y1選自S、O、N或CH＝，并且n是0或Y1選自N或CH＝并且n是1，
其中當(dāng)X是S時(shí)，Y1選自N或CH＝，并且n是0，
其中當(dāng)X是CH＝時(shí)，Y1選自O(shè)、N或S，并且n是0或1，
其中Y2選自-C(R2)-或N，
其中n是選自0或1的整數(shù)，
其中在式I中Z1選自-N(R3)-、-O-、-N(R3)-NH-、或-CH2-，而在式II、III或IV中Z1選自N、或CH，
其中Z2選自N(R1)-、-O-、或-S-，
其中R1和R3各自獨(dú)立地選自氫、烷基、烷基羰基、環(huán)烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基、芳烷基、環(huán)烷基烷基或?；?，任選地被一個(gè)或多個(gè)取代基所取代，
其中R2選自氫、烷基、環(huán)烷基、烯基或炔基，任選地被一個(gè)或多個(gè)取代基所取代，
其中Ar1選自芳基、雜環(huán)基或雜芳基，任選地被一個(gè)或多個(gè)選自下述的取代基所取代鹵素、羥基、硝基、氨基、疊氮、氰基、烷基、環(huán)烷基、烷氨基、烷氧基、-SO2-NH2、芳基、雜芳基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、鹵代芳基、羧基、烷氧基羰基、烷基氨基羰基、雜芳基烷基、烷基磺酰胺、雜環(huán)基、烷基羰基氨基烷基、芳氧基、烷基羰基、酰基、芳基羰基、氨基羰基、烷基亞砜、-SO2R15、或烷硫基，其中R15是烷基或環(huán)烷基，
其中Ar2選自芳基、雜環(huán)基、或雜芳基，任選地被一個(gè)或多個(gè)選自下述的取代基所取代鹵素、羥基、硝基、氨基、疊氮、氰基、烷基、環(huán)烷基、烷氨基、烷氧基、-SO2-NH2、-SO2R15、芳基、雜芳基、雜芳基烷基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、鹵代芳基、羧基、烷氧基羰基、烷基氨基羰基、烷基磺酰胺、雜環(huán)基、烷基羰基氨基烷基、芳氧基、烷基羰基、?；?、芳基羰基、氨基羰基、烷基亞砜、或烷硫基，其中R15是烷基或環(huán)烷基，
其中L2是選自下述的連接基團(tuán)單鍵、式-R8-R9-的基團(tuán)、次烷基、N、亞環(huán)烷基、-NH-(C(R4)(R4))q-、-(C(R4)(R4))q-、-C(R4)＝、-(C(R4)(R4))v-O-(C(R4)(R4))w-、-(C(R4)(R4))v-(C(R4))w＝、-(C(R4)(R4))q-(C＝O)-、或亞環(huán)烷基氧基亞烷基，其中-(C(R4)(R4))q-、(C(R4)(R4))w以及-(C(R4)(R4))v-各自獨(dú)立地是脂肪族基團(tuán)或形成環(huán)烷基，其中每個(gè)R4獨(dú)立地選自氫、烷基、羥基、烷氨基烷基、羧基、羥烷基、烷氧基烷基、烷氨基、或烷氧羰基；q是0和6之間的整數(shù)；v是0和6之間的整數(shù)以及w是0和6之間的整數(shù)，
其中L1是選自單鍵、-(C(R4)(R4))q-、或-(C(R4)(R4))q-(C＝O)-的連接基團(tuán)，其中每個(gè)R4獨(dú)立地選自氫、烷基、羥基、烷氨基烷基、羧基、羥烷基、烷氧基烷基、烷氨基、或烷氧羰基；q是0和6之間的整數(shù)；
其中R8是次烷基、-(C(R4)(R4))p-C(R14)或-(C(R4)(R4))p-C(R4)＝C，其中R9選自單鍵、-(C(R4)(R4))q-、或C(＝O)-，其中R14選自氫、羥基或烷基，其中p是0和3之間的整數(shù)，
其中R10選自-(C(R4)(R4))m-、-(C(R4)(R4))m-C(＝O)O-(C(R4)(R4))q-、或-(C(R4)(R4))m-N(R12)-(C(R4)(R4))q-，其中m是1和6之間的整數(shù)，其中R12選自氫、烷基、芳基、芳烷基或烷基羰基，和
其中虛線環(huán)代表位于成環(huán)鍵的任何特定位置的一個(gè)或幾個(gè)雙鍵。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中X是氮，Y1是硫，Y2是C(R2)-，并且n是0，其中R2具有如權(quán)利要求1中定義的相同含義。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中X是硫，Y1是氮，Y2是C(R2)-，并且n是0，其中R2具有如權(quán)利要求1中定義的相同含義。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中X是氧，Y1是氮，Y2是C(R2)-，并且n是0，其中R2具有如權(quán)利要求1中定義的相同含義。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中X是氮，Y1是氮，Y2是C(R2)-，并且n是0，其中R2具有如權(quán)利要求1中定義的相同含義。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中X是硫，Y1是CH-，Y2是C(R2)-，并且n是0，其中R2具有如權(quán)利要求1中定義的相同含義。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中X是氮，Y1是氮，Y2是C(R2)-，并且n是1，其中R2具有如權(quán)利要求1中定義的相同含義。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中X是氧，Y1是氮，Y2是氮，并且n是0。
9.根據(jù)權(quán)利要求1至8任一項(xiàng)的化合物，其中Ar1選自2-或3-呋喃基、2-或3-噻吩基、1-、2-或3-吡咯基、1-、2-、4-或5-咪唑基、1-、3-、4-或5-吡唑基、3-、4-或5-異噁唑基、2-、4-或5-噁唑基、3-、4-或5-異噻唑基、2-、4-或5-噻唑基、1，2，3-三唑-1-、-2-、-4-或-5-基、1，2，4-三唑-1-、-3-、-4-或-5-基、1，2，3-噁二唑-4-或-5-基、1，2，4-噁二唑-3-或-5-基、1，2，3-噻二唑-4-或-5-基、1，2，4-噻二唑-3-或-5-基、1，2，5-噻二唑-3-或-4-基、1-或5-四唑基、苯基、2-、3-或4-吡啶基、3-或4-噠嗪基、2-、4-、5-或6-嘧啶基、2-、3-、4-、5-、6-2H-噻喃基、2-、3-或4-4H-噻喃基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并呋喃基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并噻吩基、苯并咪唑酮基、1，3-苯并二氧戊環(huán)基、1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基、1-、2-、4-或5-苯并咪唑基、1-、3-、4-、5-、6-或7-苯并吡唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并異噁唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噁唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并異噻唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基、1-或2-萘基、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-喹啉基、2-、4-、5-、6-、7-或8-喹唑基、1-、3-、4-、5-、6-、7-、8-異喹啉基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-2-基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-6-基、2，3-二氫苯并呋喃-5-基、茚滿基、1，3-二氫苯并咪唑2-酮、1，2，3，4-四氫化萘-1-基或1-、2-、3-、4-或9-咔唑基，其任選被一個(gè)或多個(gè)選自下述的取代基所取代鹵素、羥基、硝基、氨基、疊氮、氰基、烷基、環(huán)烷基、烷氨基、烷氧基、-SO2-NH2、芳基、雜芳基、雜芳基烷基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、鹵代芳基、羧基、烷氧基羰基、烷基氨基羰基、烷基磺酰胺、雜環(huán)基、烷基羰基氨基烷基、芳氧基、烷基羰基、酰基、芳基羰基、氨基羰基、烷基亞砜、或烷硫基，
其中Ar2選自2-或3-呋喃基、2-或3-噻吩基、1-、2-或3-吡咯基、1-、2-、4-或5-咪唑基、1-、3-、4-或5-吡唑基、3-、4-或5-異噁唑基、2-、4-或5-噁唑基、3-、4-或5-異噻唑基、2-、4-或5-噻唑基、1，2，3-三唑-1-、-2-、-4-或-5-基、1，2，4-三唑-1-、-3-、-4-或-5-基、1，2，3-噁二唑-4-或-5-基、1，2，4-噁二唑-3-或-5-基、1，2，3-噻二唑-4-或-5-基、1，2，4-噻二唑-3-或-5-基、1，2，5-噻二唑-3-或-4-基、1-或5-四唑基、苯基、2-、3-或4-吡啶基、3-或4-噠嗪基、2-、4-、5-或6-嘧啶基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-2-基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-6-基、2，3-二氫苯并呋喃-5-基、茚滿基、1，3-二氫苯并咪唑2-酮、1，2，3，4-四氫化萘-1-基、2-、3-、4-、5-、6-2H-噻喃基、2-、3-或4-4H-噻喃基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并呋喃基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并噻吩基、苯并咪唑酮基、1，3-苯并二氧戊環(huán)基、1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基、1-、2-、4-或5-苯并咪唑基、1-、3-、4-、5-、6-或7-苯并吡唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并異噁唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噁唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并異噻唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基、1-或2-萘基、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-喹啉基、2-、4-、5-、6-、7-或8-喹唑基、1-、3-、4-、5-、6-、7-、8-異喹啉基、或1-、2-、3-、4-或9-咔唑基，其任選被一個(gè)或多個(gè)選自下述的取代基所取代鹵素、羥基、硝基、氨基、疊氮、氰基、烷基、環(huán)烷基、烷氨基、烷氧基、-SO2-NH2、芳基、雜芳基、雜芳基烷基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、鹵代芳基、羧基、烷氧基羰基、烷基氨基羰基、烷基磺酰胺、雜環(huán)基、烷基羰基氨基烷基、芳氧基、烷基羰基、酰基、芳基羰基、氨基羰基、烷基亞砜、或烷硫基，
其中L2是選自下述的連接基團(tuán)單鍵、式-R8-R9-的基團(tuán)、次烷基、N、亞環(huán)烷基、-NH-(C(R4)(R4))q-、-(C(R4)(R4))q-、-C(R4)＝、-(C(R4)(R4))v-O-(C(R4)(R4))w-、-(C(R4)(R4))v-(C(R4))w＝、-(C(R4)(R4))q-(C＝O)-、或亞環(huán)烷基氧基亞烷基，其中-(C(R4)(R4))q-、(C(R4)(R4))w以及-(C(R4)(R4))v-各自獨(dú)立地是脂肪族基團(tuán)或形成環(huán)烷基，其中每個(gè)R4獨(dú)立地選自氫、烷基、羥基、烷氨基烷基、羧基、羥烷基、烷氧基烷基、烷氨基、或烷氧羰基；q是0和6之間的整數(shù)；v是0和6之間的整數(shù)以及w是0和6之間的整數(shù)，
其中L1是選自單鍵、-(C(R4)(R4))q-、或-(C(R4)(R4))q-(C＝O)-的連接基團(tuán)，其中每個(gè)R4獨(dú)立地選自氫、烷基、羥基、烷氨基烷基、羧基、羥烷基、烷氧烷基、烷氨基、或烷氧羰基；q是0和6之間的整數(shù)；
其中R8是次烷基、-(C(R4)(R4))p-C(R14)或-(C(R4)(R4))p-C(R4)＝C，其中R9選自單鍵、-(C(R4)(R4))q-、或C(＝O)-，其中R14選自氫、羥基或烷基，其中p是0和3之間的整數(shù)，
其中R10選自-(C(R4)(R4))m-、-(C(R4)(R4))m-C(＝O)O-(C(R4)(R4))q-、或-(C(R4)(R4))m-N(R12)-(C(R4)(R4))q-，其中m是1和6之間的整數(shù)，其中R12選自氫、烷基、芳基、芳烷基、或烷基羰基，
其中R1和R3各自獨(dú)立地選自氫、C1-C8烷基、芳基、芳烷基、C3-C8環(huán)烷基、烷基羰基、或酰基，和
其中R2選自氫、C1-C8烷基或C3-C8環(huán)烷基。
10.根據(jù)權(quán)利要求1至9任一項(xiàng)的化合物，具有結(jié)構(gòu)式V至XIII，
其中X、Y1、Y2、R1、n、R3、R8、R9、R10、L1、L2、Ar1和Ar2具有與前面任何權(quán)利要求中定義相同的含義。
11.根據(jù)權(quán)利要求1至10任一項(xiàng)的化合物，具有結(jié)構(gòu)式XIV至XXIX，
其中Ar1選自2-或3-呋喃基、2-或3-噻吩基、1-、2-或3-吡咯基、1-、2-、4-或5-咪唑基、1-、3-、4-或5-吡唑基、3-、4-或5-異噁唑基、2-、4-或5-噁唑基、3-、4-或5-異噻唑基、2-、4-或5-噻唑基、1，2，3-三唑-1-、-2-、-4-或-5-基、1，2，4-三唑-1-、-3-、-4-或-5-基、1，2，3-噁二唑-4-或-5-基、1，2，4-噁二唑-3-或-5-基、1，2，3-噻二唑-4-或-5-基、1，2，4-噻二唑-3-或-5-基、1，2，5-噻二唑-3-或-4-基、1-或5-四唑基、苯基、2-、3-或4-吡啶基、3-或4-噠嗪基、2-、4-、5-或6-嘧啶基、2-、3-、4-、5-、6-2H-噻喃基、2-、3-或4-4H-噻喃基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并呋喃基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并噻吩基、苯并咪唑酮基、1，3-苯并二氧戊環(huán)基、1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基、1-、2-、4-或5-苯并咪唑基、1-、3-、4-、5-、6-或7-苯并吡唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并異噁唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噁唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并異噻唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基、1-或2-萘基、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-喹啉基、2-、4-、5-、6-、7-或8-喹唑基、1-、3-、4-、5-、6-、7-、8-異喹啉基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-2-基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-6-基、2，3-二氫苯并呋喃-5-基、茚滿基、1，3-2二氫苯并咪唑2-酮、1，2，3，4-四氫化萘-1-基或1-、2-、3-、4-或9-咔唑基，其任選被一個(gè)或多個(gè)選自下述的取代基所取代鹵素、羥基、硝基、氨基、疊氮、氰基、烷基、環(huán)烷基、烷氨基、烷氧基、-SO2-NH2、芳基、雜芳基、雜芳基烷基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、鹵代芳基、羧基、烷氧基羰基、烷基氨基羰基、烷基磺酰胺、雜環(huán)基、烷基羰基氨基烷基、芳氧基、烷基羰基、?；⒎蓟驶?、氨基羰基、烷基亞砜、或烷硫基，
其中Ar2選自2-或3-呋喃基、2-或3-噻吩基、1-、2-或3-吡咯基、1-、2-、4-或5-咪唑基、1-、3-、4-或5-吡唑基、3-、4-或5-異噁唑基、2-、4-或5-噁唑基、3-、4-或5-異噻唑基、2-、4-或5-噻唑基、1，2，3-三唑-1-、-2-、-4-或-5-基、1，2，4-三唑-1-、-3-、-4-或-5-基、1，2，3-噁二唑-4-或-5-基、1，2，4-噁二唑-3-或-5-基、1，2，3-噻二唑-4-或-5-基、1，2，4-噻二唑-3-或-5-基、1，2，5-噻二唑-3-或-4-基、1-或5-四唑基、苯基、2-、3-或4-吡啶基、3-或4-噠嗪基、2-、4-、5-或6-嘧啶基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-2-基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-6-基、2，3-二氫苯并呋喃-5-基、茚滿基、1，3-二氫苯并咪唑2-酮、1，2，3，4-四氫化萘-1-基、2-、3-、4-、5-、6-2H-噻喃基、2-、3-或4-4H-噻喃基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并呋喃基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并噻吩基、苯并咪唑酮基、1，3-苯并二氧戊環(huán)基、1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基、1-、2-、4-或5-苯并咪唑基、1-、3-、4-、5-、6-或7-苯并吡唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并異噁唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噁唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并異噻唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基、1-或2-萘基、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-喹啉基、2-、4-、5-、6-、7-或8-喹唑基、1-、3-、4-、5-、6-、7-、8-異喹啉基、或1-、2-、3-、4-或9-咔唑基，其任選地被一個(gè)或多個(gè)選自下述的取代基所取代鹵素、羥基、硝基、氨基、疊氮、氰基、烷基、環(huán)烷基、烷氨基、烷氧基、-SO2-NH2、芳基、雜芳基、雜芳基烷基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、鹵代芳基、羧基、烷氧基羰基、烷基氨基羰基、烷基磺酰胺、雜環(huán)基、烷基羰基氨基烷基、芳氧基、烷基羰基、?；?、芳基羰基、氨基羰基、烷基亞砜、或烷硫基，
其中L2是選自下述的連接基團(tuán)單鍵、式-R8-R9-的基團(tuán)、次烷基、N、亞環(huán)烷基、-NH-(C(R4)(R4))q-、-(C(R4)(R4))q-、-C(R4)＝、-(C(R4)(R4))v-O-(C(R4)(R4))w-、-(C(R4)(R4))v-(C(R4))w＝、-(C(R4)(R4))q-(C＝O)-、或亞環(huán)烷基氧基亞烷基，其中-(C(R4)(R4))q-、(C(R4)(R4))w以及-(C(R4)(R4))v-各自獨(dú)立地是脂肪族基團(tuán)或形成環(huán)烷基，其中每個(gè)R4獨(dú)立地選自氫、烷基、羥基、烷氨基烷基、羧基、羥烷基、烷氧基烷基、烷氨基、或烷氧羰基；q是0和6之間的整數(shù)；v是0和6之間的整數(shù)以及w是0和6之間的整數(shù)，
其中L1是選自單鍵、-(C(R4)(R4))q-、或-(C(R4)(R4))q-(C＝O)-的連接基團(tuán)，其中每個(gè)R4獨(dú)立地選自氫、烷基、羥基、烷氨基烷基、羧基、羥烷基、烷氧烷基、烷氨基、或烷氧羰基；q是0和6之間的整數(shù)；
其中R8是次烷基、-(C(R4)(R4))p-C(R14)或-(C(R4)(R4))p-C(R4)＝C，其中R9選自單鍵、-(C(R4)(R4))q-、或C(＝O)-，其中R14選自氫、羥基或烷基，其中p是0和3之間的整數(shù)，
其中R10選自-(C(R4)(R4))m-、-(C(R4)(R4))m-C(＝O)O-(C(R4)(R4))q-、或-(C(R4)(R4))m-N(R12)-(C(R4)(R4))q-，其中m是1和6之間的整數(shù)，其中R12選自氫、烷基、芳基、芳烷基、或烷基羰基，
其中R1和R3各自獨(dú)立地選自氫、C1-C8烷基、芳基、芳烷基、C3-C8環(huán)烷基、烷基羰基、或?；?，和
其中R2選自氫、C1-C8烷基或C3-C8環(huán)烷基。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的化合物，具有選自式XIV至XXVI的結(jié)構(gòu)式，其中Ar1選自苯基、6-吲哚基、1-萘基、2-萘基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-2-基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-6-基、茚滿基、1，3-二氫苯并咪唑2-酮、1，2，3，4-四氫化萘-1-基、2-苯并呋喃-5-基、吡啶-4-基、1，3-苯并二氧戊環(huán)基、苯并咪唑酮基、3-噻吩基、或5-(2，3-二氫)苯并呋喃基，其任選地用一至四個(gè)選自下述的取代基所取代F、Cl、Br、-CH3、t-bu、-OCH3、-NO2、-CO2H、-C(＝O)-N(CH3)2、-O-C(＝O)-CH3、
-CH2-CH3、苯基、嗎啉代、-SO2-CH3、-CF3、-OCF3、-CH2-NH-C(＝O)-CH3、-S-CH3、-C(＝O)-CH3、-C(＝O)O-CH3、-C(＝O)NH2、-N(CH3)2、-SO2-N(CH3)2、苯氧基、苯甲?；?、-C(CH3)3、-O-(CH2)2-CH3、-OH或CN，
其中L2選自單鍵、-CH2-、-(CH2)2-、-(CH2)3-、-CH(CH2OH)-、-CH(CH2-O-CH3)-、-CH(CH3)-、-CH(CH2-CH3)-、-CH(CO2H)-、-CH(CO2CH3)-、-(CH2)2-O-CH2-、-CH(，CH2-N(CH3)2)-、-(CH2)2-CH＝或
或其中L2-Ar2是
或
其中Ar2選自苯基、1-萘基或2-萘基、吡啶-4-基、1，3-苯并二氧戊環(huán)基、苯并咪唑酮基、吡啶-3-基、吡啶-2-基、5-吲哚基、8-喹啉基、2-苯硫基、2，3-二氫苯并呋喃-5-基、2-噻吩基、3-噻吩基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-2-基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-6-基、茚滿基、1，3-二氫苯并咪唑-2-酮、苯并(1，3)二氧戊環(huán)-5-基、茚滿-1-基、1，2，3，4-四氫化萘-1-基、2-苯并呋喃-5-基、吡啶-4-基、2-苯并噁唑基、或5-苯并呋喃基，其任選地被一或多個(gè)選自下述的取代基所取代硝基、-SO2-NH2、F、Cl、Br、OH、-CH3、-OCH3、-NO2、-CO2H、-C(＝O)-N(CH3)2、-O-C(＝O)-CH3、
-N-嗎啉代、-CH2-CH3、苯基、-SO2-CH3、-CF3、-OCF3、-CH2-NH-C(＝O)-CH3、-S-CH3、-C(＝O)-CH3、-C(＝O)O-CH3、-C(＝O)O-CH2-CH3、-C(＝O)NH2、-N(CH3)2、-SO2-N(CH3)2、苯氧基、苯甲?；?C(CH3)3、-O-(CH2)2-CH3、或CN，
其中L1是單鍵或C(＝O)-，
其中R1選自氫、-CH3、或-C(＝O)-CH3，
其中R3選自氫、-CH3、苯基、苯甲基或-C(＝O)-CH3，和
其中R2選自氫、-CH3、或-C(＝O)-CH3。
13.根據(jù)權(quán)利要求11的化合物，具有選自式結(jié)構(gòu)式XXVII至XXIX的結(jié)構(gòu)式，
其中基團(tuán)
選自
其中基團(tuán)
選自
其中基團(tuán)
選自
其中R12選自氫、CH3-C(＝O)-、CH3-、或苯甲基，
其中Ar1選自苯基、6-吲哚基、3-苯硫基、1，3-苯并二氧戊環(huán)基、苯并咪唑酮基、或5-(2，3-二氫)苯并呋喃基，其任選地用一至四個(gè)選自下述的取代基所取代F、Cl、Br、OH、-CH3、t-bu、-OCH3、-NO2、-CO2H、-C(＝O)-N(CH3)2、-O-C(＝O)-CH3、
-N-嗎啉代、-CH2-CH3、苯基、-SO2-CH3、-CF3、-OCF3、-CH2-NH-C(＝O)-CH3、-S-CH3、-C(＝O)-CH3、-C(＝O)O-CH3、-C(＝O)NH2、-N(CH3)2、-SO2-N(CH3)2、苯氧基、苯甲?；?C(CH3)3、-O-(CH2)2-CH3、-OH或CN，
其中Ar2選自苯基、1-萘基或2-萘基、吡啶-4-基、吡啶-3-基、吡啶-2-基、5-吲哚基、8-喹啉基、2-苯硫基、2-苯并噁唑基、1，3-苯并二氧戊環(huán)基、2，3-二氫苯并呋喃-5-基、2-噻吩基、3-噻吩基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-2-基、2，3-二氫苯并[1，4]二氧六環(huán)-6-基、茚滿基、1，3-二氫苯并咪唑-2-酮、苯并(1，3)二氧戊環(huán)-5-基、茚滿-1-基、1，2，3，4-四氫化萘-1-基、2-苯并呋喃-5-基、吡啶-4-基、苯并咪唑酮基、或5-苯并呋喃基，其任選地被一或多個(gè)選自下述的取代基所取代硝基、-SO2-NH2、F、Cl、Br、OH、-CH3、-OCH3、-NO2、-CO2H、-C(＝O)-N(CH3)2、-O-C(＝O)-CH3、
N-嗎啉代、-CH2-CH3、苯基、-SO2-CH3、-CF3、-OCF3、-CH2-NH-C(＝O)-CH3、-S-CH3、-C(＝O)-CH3、-C(＝O)O-CH3、-C(＝O)O-CH2-CH3、-C(＝O)NH2、-N(CH3)2、-SO2-N(CH3)2、苯氧基、苯甲?；?C(CH3)3、-O-(CH2)2-CH3、或CN，其中R1選自氫、-CH3、或-C(＝O)-CH3，
其中L1是單鍵或C(＝O)-，
其中R3選自氫、-CH3、苯基、苯甲基或-C(＝O)-CH3，和
其中R2選自氫、-CH3、或-C(＝O)-CH3。
14.根據(jù)權(quán)利要求1至13任一項(xiàng)的化合物，其選自包含以下的組2-(4-氟-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸((S)-1-萘-2-基-乙基)-酰胺；2-(4-氟-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸((R)-1-萘-2-基-乙基)-酰胺；2-(4-氟-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(4-硝基-苯甲基)-丙基-酰胺；2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸((S)-1-萘-2-基-乙基)-酰胺；2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸((R)-1-萘-2-基-乙基)-酰胺；2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸苯甲基酰胺；2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸[(R)-1-(3-甲氧基-苯基)-乙基]酰胺；2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸[(R)-1-(4-硝基-苯基)-乙基]酰胺；2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸4-硝基-苯甲基酰胺；2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸3，5-雙-三氟甲基-苯甲基酰胺；2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸((1R，2R)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸((1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸甲基-萘-1-基甲基-酰胺；2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(4-硝基-苯甲基)-丙基-酰胺；2-[(4-溴-苯基)-甲基-氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸((1R，2R)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；2-(4-氯-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸((1R，2R)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸((1R，2R)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；4-甲基-2-鄰甲苯基氨基-噻唑-5-羧酸((S)-1-萘-2-基-乙基)-酰胺；2-(2，5-二甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸((1R，2R)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；2-(5-氯-2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸[(R)-1-(3-甲氧基-苯基)-乙基]-酰胺；2-(5-氯-2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸((1R，2R)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；2-(4-氟-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸[(R)-1-(4-硝基-苯基)-乙基]酰胺；2-(4-氟-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸((1R，2R)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；2-(4-氟-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸((1R，2R)-2-苯甲氧基環(huán)己-1-基)酰胺；2-(4-溴-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸((1R，2R)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；2-(4-氯-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸((1R，2R)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；2-(4-氯-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸((1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)己-1-基)酰胺；和2-(4-氯-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸(4-硝基-苯甲基)-丙基-酰胺。
15.根據(jù)權(quán)利要求1至13任一項(xiàng)的化合物，其選自包含以下的組2-(3，5-二甲基-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸[(R)-1-(4-硝基-苯基)-乙基]酰胺；2-(3，5-二甲基-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸((S)-1-甲氧基甲基-2-苯基-乙基)酰胺；2-(3，5-二甲基-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸((1R，2R)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；2-(3，5-二甲基-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸((1 S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)己-1-基)酰胺；2-苯基氨基-噻唑-4-羧酸[(R)-1-(4-硝基-苯基)-乙基]酰胺；3-苯基氨基-噻唑-4-羧酸((1R，2R)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；3-苯基氨基-噻唑-4-羧酸((1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)己-1-基)酰胺；2-(5-氯-2-甲氧基-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸((1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)己-1-基)酰胺；2-(5-氯-2-甲氧基-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸((1R，2R)-2-苯甲氧基環(huán)己-1-基)酰胺；2-(4-氯-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸((R)-1-萘-2-基-乙基)-酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸((R)-1-萘-2-基-乙基)-酰胺；2-(4-氯-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸((S)-1-萘-2-基-乙基)-酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸((S)-1-萘-2-基-乙基)-酰胺；2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(萘-1-基甲基)-酰胺；2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(吡啶-4-基甲基)-酰胺；2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(吡啶-3-基甲基)-酰胺；2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(吡啶-2-基甲基)-酰胺；2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸4-甲氧基-苯甲基酰胺；2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸3，4-二甲氧基-苯甲基酰胺；2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸3-三氟甲氧基-苯甲基酰胺；和2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸4-氟-3-三氟甲基-苯甲基酰胺。
16.根據(jù)權(quán)利要求1至13任一項(xiàng)的化合物，其選自包含以下的組2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸4-二甲基氨基-苯甲基酰胺；2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸3，5-二甲氧基-苯甲基酰胺；[2-(4-溴-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-基]-(3，4-二氫-1H-異喹啉-2-基)-甲酮；2-(4-氟-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸((1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸((1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；2-(2，5-二甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸((R)-1-萘-2-基-乙基)-酰胺；2-(4-氟-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸4-二甲基氨基-苯甲基酰胺；2-(4-氟-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸4-氨磺酰基-苯甲基酰胺；2-(4-氯-苯基氨基)-噻唑-4-羧酸4-二甲基氨基-苯甲基酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噁唑-5-羧酸((1 S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-噻吩-5-羧酸((1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-嘧啶-4-羧酸((1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；1-[2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-基]-2-苯基-乙酮；4-甲基-2-苯氧基-噻唑-5-羧酸((1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；4-甲基-2-苯硫基-噻唑-5-羧酸((1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸苯基酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸茚滿-2-基酰胺；(1，3-二氫-異吲哚-2-基)-[2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-基]-甲酮；(3，4-二氫-1H-異喹啉-2-基)-[2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-基]-甲酮；(2-苯甲基-哌啶-1-基)-[2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-基]-甲酮。
17.根據(jù)權(quán)利要求1至13任一項(xiàng)的化合物，其選自包含以下的組2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(2-苯甲氧基-乙基)-酰胺；
3-[5-((1S，2S)-2-苯甲氧基-環(huán)戊-1-基氨基甲?；?-4-甲基-噻唑-2-基氨基]-苯甲酸乙酯；4-甲基-2-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-噻唑-5-羧酸
((1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；4-甲基-2-(萘-1-基氨基)-噻唑-5-羧酸((1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；4-甲基-2-(喹啉-8-基氨基)-噻唑-5-羧酸((1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；2-(2，3-二氫-苯并[1，4]二氧六環(huán)-6-基氨基-4-甲基-噻唑-5-羧酸((1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸4-(乙?；被?甲基)-苯甲基酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸2-甲基硫基-苯甲基酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸2-氯-6-甲基-苯甲基酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸4-苯氧基-苯甲基酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸4-噻吩-2-基-苯甲基酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(2，3-二氫-苯并呋喃-5-基甲基)-酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸4-二甲基氨基-苯甲基酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸4-叔丁基-苯甲基酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸4-溴-苯甲基酰胺；(S)-{[2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羰基]-氨基}-苯基-乙酸；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(噻吩-3-基甲基)-酰胺；2-(4-氯-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸N-(2，4-二硝基-苯基)-酰肼；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸苯甲基酯；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸苯甲基酰胺；((S)-2，4-二苯甲基-哌嗪-1-基)-[2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-基]-甲酮；2-(苯并呋喃-5-基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸((1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；2-苯甲基氨基-4-甲基-噻唑-5-羧酸((1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；2-[乙?；?(2-甲氧基-苯基)-氨基]-4-甲基-噻唑-5-羧酸((1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(1-苯基-乙基)-酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸((R)-1-苯基-丙基)-酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸((S)-1-苯基-丙基)-酰胺；2-(3-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸((1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸4-甲基硫基-苯甲基酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸4-二甲基氨基甲酰基-苯甲基酰胺。
18.根據(jù)權(quán)利要求1至13任一項(xiàng)的化合物，其選自包含以下的組
[3-({[2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羰基]-氨基}-甲基)-苯甲酸甲酯；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸2-甲基-苯甲基酰胺；
2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸3-甲基-苯甲基酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸4-甲基-苯甲基酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(聯(lián)苯-2-基甲基)-酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(聯(lián)苯-3-基甲基)-酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(聯(lián)苯-4-基甲基)-酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸2-溴-苯甲基酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸3-溴-苯甲基酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸((S)-2-甲氧基-1-苯基-乙基)-酰胺；2-[(2-甲氧基-苯基)-甲基-氨基]-4-甲基-噻唑-5-羧酸((S)-2-羥基-1-苯基-乙基)-酰胺；(R)-{[2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羰基]-氨基}-苯基-乙酸甲酯；(S)-{[2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羰基]-氨基}-苯基-乙酸甲酯；4-甲基-2-(吡啶-4-基氨基)-噻唑-5-羧酸((1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；
[4-({[2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羰基]-氨基}-甲基)-苯甲酸甲酯；[3-({[2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羰基]-氨基}-甲基)-苯甲酸；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸2-三氟甲氧基-苯甲基酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸3-三氟甲氧基-苯甲基酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸4-三氟甲氧基-苯甲基酰胺；(R)-{[2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羰基]-氨基}-苯基-乙酸；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸2，5-二甲基-苯甲基酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸4-[1，2，3]噻二唑-4-基-苯甲基酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(苯并[1，3]二氧戊環(huán)-5-基甲基)-酰胺；[4-(4-氟-苯基)-3，6-二氫-2H-吡啶-1-基]-[2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-基]-甲酮；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸茚滿-1-基酰胺；[2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-基]-[4-(2-甲氧基-苯基)-哌啶-1基]-甲酮；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(4-吡唑-1-基甲基-苯基)-酰胺；[2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-基]-[4-對(duì)甲苯基-哌啶-1基]-甲酮；1-{1-[2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羰基]-哌啶-4-基}-1，3-二氫-苯并咪唑-2-酮。
19.根據(jù)權(quán)利要求1至13任一項(xiàng)的化合物，其選自包含以下的組2-鄰甲苯基氨基-噻唑-4-羧酸((1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)-酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(1，2，3，4-四氫-萘-1-基)-酰胺；(4-苯甲基-哌啶-1-基)-[2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-基]-甲酮；[4-(4-氟-苯甲?；?-哌啶-1-基]-[2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-基]-甲酮；[2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-基]-(2-苯基-吡咯烷-1-基)-甲酮；[2-(4-氟-苯基)-吡咯烷-1-基]-[2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-基]-甲酮；2-苯甲?；被?4-甲基-噻唑-5-羧酸((1 S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；2-(4-叔丁基-苯甲酰基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸((1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；2-(4-氰基-苯甲酰基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸((1S，2S)-2-苯甲氧基環(huán)戊-1-基)酰胺；N-[5-((1S，2S)-2-苯甲氧基-環(huán)戊基氨基甲?；?-4-甲基-噻唑-2-基]-對(duì)苯二甲酰胺；[4-(2，5-二甲氧基-苯甲基)-哌嗪-1-基]-[2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-基]-甲酮；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(1-苯甲基-吡咯烷-3-基)酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸苯甲基-苯基-酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(2，3-二氫-苯并[1，4]二氧六環(huán)-2-基甲基)酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸4-甲氧基苯甲基酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸(萘-1-基甲基)-酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噻唑-5-羧酸2，4-二氯-6-甲基-苯甲基酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噁唑-5-羧酸苯甲基酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噁唑-5-羧酸2，4-二甲氧基-苯甲基酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-4-甲基-噁唑-5-羧酸4-氟-3-三氟甲基-苯甲基酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-3H-咪唑-4-羧酸-苯甲基酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-3H-咪唑-4-羧酸2，4-二甲氧基-苯甲基酰胺；2-(2-甲氧基-苯基氨基)-3H-咪唑-4-羧酸4-氟-3-三氟甲基-苯甲基酰胺。
20.合成具有結(jié)構(gòu)式I、II、III或IV的化合物的方法，包括將式XXX的化合物
與式XXXI、XXXII、XXXIII或XXXIV的化合物縮合的步驟
從而獲得式I、II、III或IV的化合物，
其中Ar1、Ar2、L1、L2、X、Y1、Y2、R10、R8和R9具有如權(quán)利要求1至13任一項(xiàng)中定義相同的含義。
21.根據(jù)權(quán)利要求20的方法，其中通過(guò)形成式XXX化合物的酰氯然后通過(guò)所述酰氯與式XXXI、XXXII、XXXIII或XXXIV的化合物偶聯(lián)來(lái)實(shí)施所述縮合。
22.根據(jù)權(quán)利要求20的方法，其中在合適的堿存在下、在合適的溶劑中、利用合適的偶聯(lián)劑實(shí)施所述縮合。
23.根據(jù)權(quán)利要求22的方法，其中所述合適的偶聯(lián)劑選自包含以下的組羥基苯并三唑、鄰苯并三唑-1-基-N，N，N，N-4-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽等。
24.根據(jù)權(quán)利要求22或23的方法，其中所述合適的溶劑選自包含以下的組二氯甲烷、二甲基甲酰胺等或其混合物。
25.根據(jù)權(quán)利要求22至24任一項(xiàng)的方法，其中所述合適的堿選自包含以下的組碳酸鉀、二異丙基乙胺、三乙胺、三異丙胺等。
26.根據(jù)權(quán)利要求22至25任一項(xiàng)的方法，其中所述堿的用量在0.1和5.0當(dāng)量之間。
27.可通過(guò)權(quán)利要求20至26任一項(xiàng)的方法獲得的化合物。
28.根據(jù)權(quán)利要求1至19和27任一項(xiàng)的化合物，用作藥物。
29.根據(jù)權(quán)利要求1至19和27任一項(xiàng)的化合物用作離子通道阻斷劑的用途。
30.根據(jù)權(quán)利要求29的化合物用作Kv4家族離子通道的離子通道的阻斷劑的用途。
31.根據(jù)權(quán)利要求29的化合物用作Kv1家族離子通道的離子通道的阻斷劑的用途。
32.根據(jù)權(quán)利要求29或30的化合物用作Kv4.3家族離子通道的離子通道的阻斷劑的用途。
33.根據(jù)權(quán)利要求29或31的化合物用作Kv1.5家族離子通道的離子通道的阻斷劑的用途。
34.根據(jù)權(quán)利要求1至19和27任一項(xiàng)的化合物用于制備預(yù)防和/或治療與Kv4家族離子通道相關(guān)的病況或疾病的藥物中的用途。
35.根據(jù)權(quán)利要求34的用途，其中所述與Kv4家族離子通道、優(yōu)選Kv4.3離子通道相關(guān)的病況或疾病選自包含以下的組心臟疾病，包括心率不齊；高血壓誘導(dǎo)的心臟疾病，包括高血壓誘導(dǎo)的心臟肥大；神經(jīng)系統(tǒng)疾病，包括癲癇、中風(fēng)、脊髓損傷、創(chuàng)傷性腦損傷、焦慮、失眠、腦脊髓炎、阿爾茨海默病、多發(fā)性硬化癥、脫髓鞘病和帕金森氏綜合征。
36.根據(jù)權(quán)利要求1至19和27任一項(xiàng)的化合物用于制備預(yù)防和/或治療與Kv1家族離子通道相關(guān)病況或疾病的藥物中的用途。
37.根據(jù)權(quán)利要求36的用途，其中所述與Kv1家族離子通道、優(yōu)選Kv1.5離子通道相關(guān)的病況或疾病選自包含以下的組心臟疾病，包括心率不齊；高血壓誘導(dǎo)的心臟疾病，包括高血壓誘導(dǎo)的心臟肥大；神經(jīng)系統(tǒng)疾病，包括癲癇、中風(fēng)、脊髓損傷、創(chuàng)傷性腦損傷、腦脊髓炎、焦慮、失眠、阿爾茨海默病、多發(fā)性硬化癥、脫髓鞘病和帕金森氏綜合征。
38.根據(jù)權(quán)利要求34或37的用途，用于制備治療心臟疾病的藥物。
39.根據(jù)權(quán)利要求34或37的用途，用于制備治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥物。
40.包含制藥可接受賦形劑以及治療有效量的權(quán)利要求1至19和27任一項(xiàng)所述化合物的藥物組合物。
41.權(quán)利要求40的藥物組合物用于治療與Kv4家族離子通道、優(yōu)選Kv4.3離子通道相關(guān)的病況或疾病的用途。
42.權(quán)利要求37的用途，其中所述與Kv4家族離子通道相關(guān)的病況或疾病選自包含以下的組心臟疾病，包括心率不齊；高血壓誘導(dǎo)的心臟疾病，包括高血壓誘導(dǎo)的心臟肥大；神經(jīng)系統(tǒng)疾病，包括癲癇、中風(fēng)、脊髓損傷、創(chuàng)傷性腦損傷、腦脊髓炎、焦慮、失眠、阿爾茨海默病、多發(fā)性硬化癥、脫髓鞘病和帕金森氏綜合征。
43.根據(jù)權(quán)利要求40的藥物組合物用于治療與Kv1家族離子通道、優(yōu)選Kv1.5離子通道相關(guān)的病況或疾病的用途。
44.根據(jù)權(quán)利要求40的藥物組合物用于治療心臟疾病的用途。
45.根據(jù)權(quán)利要求40的藥物組合物用于治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的用途。
46.治療心臟疾病的方法，其包括向需要這種治療的個(gè)體施用根據(jù)權(quán)利要求40的藥物組合物。
47.治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的方法，其包括向需要這種治療的個(gè)體施用根據(jù)權(quán)利要求40的藥物組合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及與離子通道相互作用的化合物。具體而言，本發(fā)明涉及具有結(jié)構(gòu)式(I)、(II)、(III)或(IV)的化合物、其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、外消旋體、前藥、代謝物、或其制藥可接受的鹽和/或溶劑化物，其中X、Y1、Y2、R1、n、R3、R8、R9、R10、L1、L2、Ar1和Ar2具有權(quán)利要求1中所定義的含義。本發(fā)明還涉及制備所述化合物的方法、包含所述化合物的藥物組合物、以及所述化合物在治療人和動(dòng)物體的方法中的用途。
文檔編號(hào)C07D233/90GK101098698SQ200580046009
公開(kāi)日2008年1月2日 申請(qǐng)日期2005年12月1日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月1日
發(fā)明者彼得拉·布洛姆, 揚(yáng)·奧克塔夫·德·克佩爾, 埃里克·皮埃爾·保羅·勒內(nèi)·富曼特羅, 蒂圖斯·揚(yáng)·卡萊塔, 迪爾克·萊森 申請(qǐng)人:德福根有限公司