專利名稱：二氫吡啶衍生物的制作方法
二氳吡啶4汁生物
本發(fā)明描述了選擇性對(duì)FSH受體具有拮抗活性的低分子量激素類 似物的制備。
促性腺激素在各項(xiàng)機(jī)體功能(包括新陳代謝、溫度調(diào)節(jié)和生殖過程) 中具有重要作用。促性腺激素作用于特定類型的生殖腺細(xì)胞，啟動(dòng)卵 巢和睪丸的分化及類固醇的形成。例如，垂體的促性腺激素FSH (促 卵泡激素)在刺激卵泡的發(fā)育和成熟中具有關(guān)鍵作用，而LH (黃體生 成素)誘導(dǎo)排卵(Sharp, R. M. CI in Endocr inol. 33:787-807， 1990; Dorrington和Armstrong, Recent Prog. Horm. Res. 35: 301-342， 19")。目前，F(xiàn)SH在臨床上與LH結(jié)合用于刺激卵巢，也就是高度刺 激卵巢以體外受精(IVF)和誘導(dǎo)不育性不排卵婦女排卵(Insler， V., Int. J. Fertility, 33: 85-97， 1988, Navot and Rose麵ks， J. Vitro Fert. Embryo Transfer 5:3-13， 1988)，以及還可用于男性性腺機(jī) 能減退和男性不育。
促性腺激素FSH是在促性腺釋放激素和雌二醇的影響下由腺垂體 釋放，并且是在妊娠期間由胎盤釋放出來的。在女性中，F(xiàn)SH作用于 卵巢，促進(jìn)卵泡發(fā)育的卵巢，因而是調(diào)節(jié)雌激素分泌的主要激素。在 男性中，F(xiàn)SH決定生精小管的完整性，同時(shí)作用于支持細(xì)胞以支撐配 子形成。純化FSH在臨床上被用于治療女性的不育癥和男性的某些類 型的精子形成的衰竭。用于治療目的的促性腺激素可以由人尿源分離 得到，但純度較低(Morse等人，Amer. J. Reproduct. Immunol, and Microbiology 17:143, 1988)。或者，也可以將它們制備為重組促性 腺激素。重組人類FSH可商購得到，并且可用于輔助生殖(01ijve等 人Mol. Hum. Reprod. 2:371， 1996; Devroey等人Lancet 339:1170， 1992)。
FSH激素的作用是由屬于G蛋白偶聯(lián)受體家族中的一員的特異性
質(zhì)膜受體介導(dǎo)的。這些受體由單一的多肽與七個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域構(gòu)成，能
夠與Gs蛋白相互作用，例如導(dǎo)致腺苷酸環(huán)化酶的激活。
FSH受體是在卵泡生長過程中具有高度特異性的靶標(biāo)，且唯一表 達(dá)在卵巢中。通常是在激活由FSH介導(dǎo)的受體之后開始誘導(dǎo)阻斷這種 受體或者抑制該信號(hào)發(fā)出，這樣將干擾卵泡的發(fā)育進(jìn)而干擾排卵和生 育。低分子量的FSH拮抗劑可能構(gòu)成了新型避孕藥的基礎(chǔ)，而低分子 量的FSH激動(dòng)劑則可用于與天然FSH相同的臨床目的，也就是可用于 治療不育及體外受精所需的卯巢過度興奮。
具有拮抗特性的低分子量FSH類似物公開在國際申請(qǐng)W0 2000/08015 (Applied Research Systems ARS Holding N.V.)和WO 2002/09706 (Affymax Research Institute)中。
某些四氬唾啉衍生物最近作為FSH調(diào)節(jié)物質(zhì)，即具有激動(dòng)或拮抗 特性的物質(zhì)被公開在國際申請(qǐng)WO2003/004028 (AKZO NOBEL N. V.)中。
本發(fā)明描述了選擇性激活FSH受體的低分子量激素類似物的制備。
因此業(yè)已發(fā)現(xiàn)，下面一類的式I的二氫吡啶化合物或其可藥用鹽 具有FSH受體激動(dòng)活性
<formula>formula see original document page 6</formula>式I
其中
r是(l-6C)烷基、(2-6C)烯基、(2-6C)炔基、苯基或(1-5C)雜芳
基；
R2、 R3獨(dú)立地是(1-4C)烷基、(2-4C)烯基、(2-4C)炔基、(l-4C) 烷氧基、(2-4C)烯氧基、(3-4C)炔氧基、鹵素；
X是S。2、 CH2、 C(O)或者X是化學(xué)鍵;
R4是(1-6C)烷基、(2-6C)烯基、(2-6C)炔基、(3-6C)環(huán)烷基、(3-6C) 環(huán)烯基、(3-6C)環(huán)烷基(1-4C)烷基、(2-6C)雜環(huán)烷基、(2-6C)雜環(huán)烷 基(1-4C)烷基、(6-10C)芳基、(6-10C)芳基(1-4C)烷基、(l-9C)雜芳 基或(1-9C)雜芳基(l-4C)烷基。
如果X是CH2，則R4可以另外是115-氧基羰基或R5-羰基。
如果R4是苯基，則除了定義(6-10C)芳基中提及的取代基之外， 該苯基任選被一個(gè)或多個(gè)選自下述的取代基取代(l-4C)烷硫基、 (1-4C)烷磺?；?、Rs-氧基羰基、R5-羰基或R5，R6-氨基羰基。
R5、R6獨(dú)立地是H、 (1-4C)烷基、(2-4C)烯基、(2-4C)炔基、(3-6C) 環(huán)烷基、(3-6C)環(huán)烷基(1-4C)烷基、(2-6C)雜環(huán)烷基、(2-6C)雜環(huán)烷 基(l-4C)烷基、(1-4C)烷氧羰基(1-4C)烷基、(1-4C) (二)烷氨基羰基 (1-4C)烷基、(6-IOC)芳基、(l-9C)雜芳基、(6-10C)芳基(1-4C)烷基、 (1-9C)雜芳基(1-4C)烷基、(6-10C)芳氨基羰基(l-4C)烷基、(1-9C) 雜芳氨基羰基(1-4C)烷基或者R5、 R6可以聯(lián)合形成(2-6C)雜環(huán)烷基環(huán)。
根據(jù)本發(fā)明的化合物可以調(diào)節(jié)FSH受體功能，由于它們表現(xiàn)得類似 激動(dòng)劑，因而可用于與天然FSH相同的臨床目的，其優(yōu)勢在于，它們顯 示出改變了的穩(wěn)定性并且可以通過不同途徑給藥。
因此，本發(fā)明的FSH受體激動(dòng)劑可用于治療不育。優(yōu)選地，本發(fā)明 化合物可用于激活FSH受體。
定義中使用的術(shù)語(1-4C)烷基是指具有1-4個(gè)碳原子的支鏈或非 支鏈烷基，例如曱基、乙基、丙基、異丙基、丁基、仲丁基和叔丁基。
術(shù)語(1-6C)烷基是指具有1-6個(gè)碳原子的支鏈或非支鏈烷基，例 如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、仲丁基、叔丁基和己基。優(yōu)選 (l-5C)烷基，最優(yōu)選(1-4C)烷基。
術(shù)語(2-6C)烯基是指具有2-6個(gè)碳原子的支鏈或非支鏈烯基，例 如乙烯基、2-丁烯基和正戊烯基。
術(shù)語(2-4C)烯基是指具有2-4個(gè)碳原子的支鏈或非支鏈烯基，例 如乙烯基、正丙烯基和2-丁烯基。術(shù)語(2-6C)炔基是指具有2-6個(gè)碳原子的支鏈或非支鏈炔基，例 如乙炔基、丙炔基和正戊炔基。
術(shù)語(2-4C)炔基是指2-4個(gè)碳原子的炔基，例如乙炔基和丙炔基。
術(shù)語(3-6C)環(huán)烷基是指具有3-6個(gè)碳原子的環(huán)烷基，例如環(huán)丙基、 環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基。
術(shù)語(3-6C)環(huán)烯基是指具有3-6個(gè)碳原子的環(huán)烯基，例如環(huán)丙烯 基、環(huán)戊烯基和環(huán)己烯基。
術(shù)語(3-6C)環(huán)烷基(l-4C)烷基是指環(huán)烷基烷基，其中環(huán)烷基具有 3-6個(gè)碳原子且具有與前面相同的定義，烷基具有1-4個(gè)碳原子且具 有與前面相同的定義。
術(shù)語(2-6C)雜環(huán)烷基是指具有2-6個(gè)碳原子、優(yōu)選3-5個(gè)碳原子 和至少包括一個(gè)選自N、 0和/或S中的雜原子的雜環(huán)烷基，其可以通 過雜原子(如果可行的話)或碳原子相連。優(yōu)選的雜原子是N或O。最 優(yōu)選的是哌啶基、嗎啉基、吡咯烷基和哌嗪基。
術(shù)語(2-6C)雜環(huán)烷基(l-4C)烷基是指雜環(huán)烷基烷基，其中雜環(huán)烷 基具有2-6個(gè)碳原子且具有與前面相同的定義，烷基具有1-4個(gè)碳原 子且具有與前面相同的定義。
術(shù)語(1-4C)烷氧基是指具有1-4個(gè)碳原子的烷氧基，其中烷基部 分具有與前面相同的定義。優(yōu)選(1-2C)烷氧基。
術(shù)語(1-4C)烷硫基是指具有1-4個(gè)碳原子的烷硫基，其中烷基部 分具有與前面相同的定義。
術(shù)語(2-4C)烯氧基是指具有2-4個(gè)碳原子的烯氧基，其中烯基部 分具有與前面相同的定義。
術(shù)語(3-4C)炔氧基是指具有3-4個(gè)碳原子的炔氧基，其中炔基部 分具有與前面相同的定義。
術(shù)語(6-10C)芳基是指具有6-10個(gè)碳原子的芳香烴基，例如苯基、 萘基、四氫萘基或茚基，其可以任選被一個(gè)或多個(gè)選自下述的取代基 取代羥基、氨基、卣素、硝基、三氟曱基、氰基、(l-化)烷基、(2-化) 烯基、(2-4C)炔基、(l-化)烷氧基、或(l-化)(二)烷氨基，其中烷基 部分具有與前面相同的定義。優(yōu)選的芳香烴基是苯基。
術(shù)語(l-9C)雜芳基是指被取代或未被取代的具有1-9個(gè)碳原子、 至少包括一個(gè)選自N、 0和/或S中的雜原子的芳香基團(tuán)，例如四唑基、 咪唑基、噻二唑基、吡啶基、(苯并)噻吩基、(苯并)呋喃基、(異)喹 啉基、四氫(異)喹啉基、香豆素基、喹喔啉基或吲哚基。(1-9C)雜芳 基上的取代基可以選自(6-10C)芳基所列的取代基。優(yōu)選(1-5C)雜芳 基。(1-9C)雜芳基可以通過碳原子或雜原子(如果可行的話)連接。
術(shù)語(1-5C)雜芳基是指被取代或未被取代的具有1-5個(gè)碳原子、 至少包括一個(gè)選自N、 0和/或S中的雜原子的芳香基團(tuán)，例如四唑基、 咪唑基、噻二唑基、吡啶基、噻吩基或呋喃基，最優(yōu)選呋喃基。優(yōu)選 的雜芳基是噻吩基、呋喃基和吡啶基。(1-5C)雜芳基上的取代基可以 選自(6-10C)芳基所列的取代基。
術(shù)語(6-10C)芳基(l-4C)烷基是指芳烷基，其中烷基含有6-IO個(gè) 碳原子且具有與前面相同的定義，其中烷基含有l(wèi)-4個(gè)碳原子且具有 與前面相同的定義。最優(yōu)選的是千基。
術(shù)語(1-9C)雜芳基(1-4C)烷基是指雜芳烷基，其中雜芳基含有 1-9個(gè)碳原子且具有與前面相同的定義，其中烷基含有1-4個(gè)碳原子 且具有與前面相同的定義。
術(shù)語(1-4C)烷磺?；侵竿榛酋；?，其中烷基含有1-4個(gè)碳原 子且具有與前面相同的定義。
術(shù)語(1-4C)烷氧羰基是指(1-4C)烷氧羰基，其中烷氧基含有l(wèi)-4 個(gè)碳原子且具有與前面相同的含義。優(yōu)選(1-2C)烷氧羰基。
術(shù)語(l-4C)烷氧羰基(l-4C)烷基是指烷氧羰基烷基，其中烷基含 有1-4個(gè)碳原子且具有與前面相同的定義。
術(shù)語(l-4C) (二)烷氨基羰基(l-4C)烷基是指(二)烷氨基羰基烷 基，其中烷基含有1-4個(gè)碳原子且具有與前面相同的定義。
術(shù)語卣素是指氟、氯、溴或碘。
術(shù)語可藥用鹽是指那些落入醫(yī)學(xué)判斷范圍之內(nèi)適合以接觸方式用 于人體或低級(jí)動(dòng)物組織而無異常毒性、刺激性、變態(tài)反應(yīng)等的鹽，并 且它們與合理的益處/風(fēng)險(xiǎn)比例相適應(yīng)。可藥用鹽是本領(lǐng)域眾所周知 的。它們可以在本發(fā)明化合物的最終分離和純化過程中獲得，或者如 果存在游離堿官能團(tuán)的話，通過將該游離堿官能團(tuán)與鹽酸、磷酸、或 硫酸、或者與有機(jī)酸例如抗壞血酸、檸檬酸、酒石酸、乳酸、馬來酸、 丙二酸、富馬酸、羥基乙酸、琥珀酸、丙酸、乙酸、甲磺酸等反應(yīng)而 獲得。如果存在的話，還可以將酸官能團(tuán)與有機(jī)或無機(jī)堿例如氬氧化 鈉、氫氧化鉀或氫氧化鋰反應(yīng)。
本發(fā)明還涉及式I化合物，其中r'是(1-6C)烷基、苯基或(1-5C) 雜芳基，它們均任選被定義中提及的取代基取代。更具體地說，本發(fā) 明涉及其中^是(1-4C)烷基、苯基或4C-雜芳基的化合物。本發(fā)明還 涉及其中W是正丙基或呋喃基的化合物。
本發(fā)明另一方面是根據(jù)式I的化合物，其中r2、 113是鹵素和/或 (1-4C)烷氧基。
在又一方面，本發(fā)明涉及式I化合物，其中X是CH2。
本發(fā)明另一方面是這樣的化合物，其中R4是任選被定義中提及的
取代基取代的苯基。在另一方面，本發(fā)明涉及這樣的化合物，其中r4 是在鄰和/或間位上取代的苯基。在又一方面，本發(fā)明涉及式I化合物，
其中W是被R5，R6-氨基羰基、(l-4C)烷氧基和/或囟素取代的苯基。在 又一方面，本發(fā)明涉及這樣的化合物，其中Rs，r氨基羰基中的R5，R6 是(1-4C) (二)烷氨基、(l-4C)烷氧羰基(l-4C)烷基或(1-9C)雜芳基
(1-4C)烷基。在又一方面，R5,w氨基羰基中r5，w中的至少一個(gè)是h。
在另一方面，本發(fā)明涉及其中R4中的(6-10C)芳基、(6-10C)芳基 (l-4C)烷基、(l-9C)雜芳基或(l-9C)雜芳基(1-4C)烷基未被取代的化 合物。
本發(fā)明又一方面涉及其中X-CH2且其中f是任選被定義中提及的 取代基取代的苯基的化合物。
本發(fā)明再一方面涉及其中上述基團(tuán)！^-R4和X的所有特定定義在式 I的二氫吡淀化合物中被組合的化合物。
排除于本發(fā)明之外的是化合物2-甲基-5-氧代-7-苯基
-4-(3, 4， 5-三甲氧苯基)-l， 4， 5， 6， 7， 8-六氬會(huì)啉-3-甲腈。
被放棄的化合物涉及CAS330674-72-l ，可由商業(yè)渠道例如
Chembridge Corp 、 MicroChemistry Ltd 、 Ambinter 、 Asinex 、
Scientific Exchange Inc和ChemDiv Inc獲得。 制備本發(fā)明化合物的適宜方法概述如下。
本發(fā)明的1，4-二氫吡啶衍生物I可以由通式II的環(huán)己烷-1， 3-二 酮、通式III的苯甲醛和3-氨基巴豆腈(crotonitrile) IV (其中R1、 R2、 R3、 ^和X定義同上)通過文獻(xiàn)記載的三組分Hantzsch類型環(huán)縮合 反應(yīng)制備得到。
<formula>formula see original document page 11</formula>相關(guān)的Hantzsch類型環(huán)縮合反應(yīng)可以參見Bioorg. Med. Chem. Lett. 12 (2002) 1481-1484， J. Chem. Soc. ， Perkin Trans. 1 (2002) 1141-1156， Synlett (2002) 89-92， Drug Dev. Res. 51 (2000) 233-243， J. Med. Chem. 42 (1999) 1422-1427，同上.5266-5271， 同上.41 (1998) 2643—2650， WO 9408966， Arzneim.-Forsch./Drug Res. 45 (1995) 1054-1056， J. Med. Chem. 34 (1991) 2248-2260， 同上.17 (1974) 956-65, Chem. Rev. 72 (1972)， 1-42。上述反應(yīng) 通常在高溫下和質(zhì)子溶劑例如乙酸、(異)丙醇、乙醇、曱醇或其混合 物中進(jìn)行。
或者，通式I化合物可以通過首先將式II的環(huán)己烷-1, 3-二酮與 式III的苯甲醛在堿例如但不限于醋酸銨的存在下反應(yīng)，然后將中間 體通式V的2-苯亞甲基-環(huán)己烷-l，3-二酮(其中R1、 R2、 R3、纊和X具 有上述相同定義)與3-氨基巴豆腈IV反應(yīng)合成得到。
4 、
R-x
其中X =得到化學(xué)鍵且R4 - H的通式I-a化合物可以通過^烷 基化、屮(雜)芳基化、矢?；蝈酋；磻?yīng)，利用本領(lǐng)域技術(shù)人員 熟知的標(biāo)準(zhǔn)條件用于制備化合物I-b-e。
在典型試驗(yàn)中，將化合物I-a在溶劑例如二氯甲烷、《^二甲基
I-a:X-化學(xué)鍵，R4=H
I-b I-c I-d I—e
X-C仏，R、定義同上
X-化學(xué)鍵,R^定義同上 X=C (0),114=定義同上 X-S02,R、定義同上
曱酰胺、二甲亞砜、乙醇、四氫呋喃、二嚅烷、曱苯、1-甲基-吡咯烷
-2-酮或吡啶中與烷基卣化物或酰基lg化物或酸酐或磺?；婊锘?br> 者(雜)芳基鹵化物在堿例如但不限于三乙胺、W^二異丙基乙基胺
(DiPEA)、碳酸鉀、碳酸銫或氫化鈉存在下，任選在催化用量的碘化鉀 或碘化四丁基銨和/或Cu-或Pd-催化劑存在下反應(yīng)，分別得到式I-b、 I-c、 I-d和I-e的^"烷基化、^"(雜)芳基化、^?；騉"磺?；?化衍生物。
通過堿介導(dǎo)(例如NaOH)皂化相應(yīng)的烷基酯得到的其中X = CH2且 R4=烷基酸衍生物或(雜)芳基酸衍生物的式I-f化合物可以與通式結(jié) 構(gòu)R5，R6NH的醇或通式結(jié)構(gòu)R50H的醇，使用偶聯(lián)試劑二異丙基碳二亞 胺(DIC)、 (3-二曱氨基丙基)-乙基-碳二亞胺(EDCI)、 O"(苯并三唑-l-基)-乂#,#， ，#，-四甲基脲六氟磷酸鹽(TBTU)或6^(7-氮雜苯并三唑
-1-基)-乂 ^ #， ， #， -四曱基脲六氟磷酸鹽(HATU)和叔胺堿(例如DiPEA) 在溶劑例如A滬二甲基甲酰胺或二氯曱烷中在環(huán)境溫度或高溫下縮 合，得到式I-g和I-h化合物。
卜f: Y = CH，或X-Ph
-g: Y = X-Ph, A= NR5,R6 'h:丫二CH2或X-Ph, A = OR5
通式II的被取代的環(huán)己烷-1， 3-二酮可商購得到，也可以由本領(lǐng) 域已知的文獻(xiàn)步驟制備得到。相關(guān)實(shí)例參見J. Med. Chem. 43 (2000) 4678-4693， Tetrahedron 56 (2000) 4753-4758， J. Med. Chem. 35 (1992) 3429—3447，同上.24 (1981) 1026—1034， Org. Synt. Coll. Vol. V (1973) 400， Chem. Ber. 88 (1955) 316-327， Justus Liebig Ann. Chem. 570 (1950) 15-31。
通式III的苯甲醛同樣可商購得到，也可以根據(jù)文獻(xiàn)步驟制備得 到J. Chem. Soc. ， Perkin Trans. 2 (2000) 1119—1124; J. Chem. Soc. ， Chem. Commun. 4 (1993) 419-420; Synth. Commun. 20 (l"O) 2659-2666; Chem. Pharm. Bull. 34 (1986) 121-129; IndUn J. Chem. Sect. B 20 (1981) 1010-1013 ; Monatsh. Chem. 106 (1975) 1191-1201; DE 1070162; J. Org. Chem. 23 (1958) 120。
4
cr 、h
III-a:XH匕學(xué)鍵，R4=H
CT 、H
III-b: X-CH!,R^定義同上 III-c: XH匕學(xué)鍵,R^定義同上 III-d: X吒(0),R^定義同上 III-e: X-S0:,R^定義同上<formula>formula see original document page 13</formula>
或者，其中X -化學(xué)鍵且R4 - H的化合物III-a可以通過^烷 基化、^"芳基化、^?；騘磺?；磻?yīng)，利用與上述化合物I-a相 同的標(biāo)準(zhǔn)條件用于合成化合物III-b-e。
本發(fā)明化合物具有至少兩個(gè)手性碳原子，因而可以以純對(duì)映體、 或?qū)τ钞悩?gòu)體的混合物、或者非對(duì)映異構(gòu)體的混合物形式獲得。獲得 純對(duì)映體的方法是本領(lǐng)域眾所周知的，例如將由光學(xué)活性酸和外消旋 混合物獲得的鹽結(jié)晶，或者利用手性柱的色譜法。分離非對(duì)映異構(gòu)體， 可以利用正相或反相柱。
本發(fā)明化合物可以形成水合物或溶劑化物。本領(lǐng)域技術(shù)人員已知， 當(dāng)進(jìn)料化合物使用水凍干時(shí)會(huì)形成水合物質(zhì)，或者當(dāng)其在含有適宜有 機(jī)溶劑的溶液中濃縮時(shí)會(huì)形成溶劑化物。本發(fā)明化合物包括上面所列 舉的化合物的水合物或溶劑化物。
對(duì)于活性化合物的選擇而言，在1(TM下測試必須獲得比使用FSH 作為參比時(shí)所獲得的最大活性高20%的活性。另一種標(biāo)準(zhǔn)可以是EC5。 值，它必須< 105 M,優(yōu)選< l(T7 M，更優(yōu)選< 10—9 M。
本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解，理想的ECs。值取決于;f皮測試的化合物。 例如，通常認(rèn)為ECs。值小于10—5 M的化合物是供藥物選擇的候選化合 物。優(yōu)選該值小于l(T7 M。然而，具有更高ECs。的化合物如果對(duì)于特 定受體具有選擇性，可能甚至也是更好的候選化合物。
測定受體結(jié)合的方法、以及測定促性腺激素的生物活性的體外和 體內(nèi)測定方法都是眾所周知的。通常，將被表達(dá)的受體與待測化合物 接觸，然后測定對(duì)功能應(yīng)答的結(jié)合或刺激或抑制情況。
為了測定功能應(yīng)答，將離體的編碼有FSH受體基因的DNA (優(yōu)選 為人受體)表達(dá)在適宜的寄主細(xì)胞中。這種細(xì)胞可以是中國倉鼠卵巢細(xì)
胞，不過其它細(xì)胞也是適宜的。優(yōu)選該細(xì)胞是哺乳動(dòng)物來源的細(xì)胞(na
等人，Mol. Endocrin. ， 5:759-776， 1991)。
構(gòu)建重組FSH表達(dá)細(xì)胞系的方法是本領(lǐng)域眾所周知的(Sambrook 等人，Molecular Cloning: a Laboratory Manual, Cold Spring
Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, 最新版)。受體的 表達(dá)是通過表達(dá)編碼所需蛋白質(zhì)的DM實(shí)現(xiàn)的。定點(diǎn)誘變、附加序列 的連接、PCR、以及合適的表達(dá)系統(tǒng)的構(gòu)建技術(shù)都是迄今本領(lǐng)域眾所周 知的。可利用標(biāo)準(zhǔn)固相合成方法構(gòu)建編碼所需蛋白質(zhì)的部分或全部 DNA，優(yōu)選包括容易連接的限制位點(diǎn)?？蓪?duì)DNA編碼序列提供用來轉(zhuǎn)錄 和翻譯包含的編碼序列的適當(dāng)控制因子。眾所周知的是，現(xiàn)在可以獲 得與各種宿主相容的表達(dá)系統(tǒng)，所述宿主包括原核宿主例如細(xì)菌、
和真核宿主例如酵母、植物細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞、哺乳動(dòng)物細(xì)胞、禽類細(xì) 胞等。
然后，將表達(dá)受體的細(xì)胞與測試化合物接觸以觀察對(duì)功能應(yīng)答的 結(jié)合、或刺激或抑制情況。
或者，也可利用包含所表達(dá)受體的離體細(xì)胞膜測定化合物的結(jié)合情況。
為了測定結(jié)合情況，可以利用放射性標(biāo)記的或熒光標(biāo)記的化合物。 可以使用人類重組FSH作為參考化合物。 另外還可以進(jìn)行竟?fàn)幮越Y(jié)合測定。
另一種測定法涉及通過測定受體介導(dǎo)的cAMP積累的刺激情況來 篩選FSH受體激動(dòng)劑化合物。因此，這種方法包括在宿主細(xì)胞表面上 表達(dá)受體，以及將細(xì)胞曝露于測試化合物下。然后測量cAMP的含量。 cAMP的水平可以因測試化合物與受體結(jié)合后的刺激效應(yīng)而升高。
除了直接測定在曝露細(xì)胞中的例如cAMP水平之外，還可以利用這 樣的細(xì)胞系，也就是它們除了用受體編碼的DNA轉(zhuǎn)染之外，還用編碼 報(bào)道基因的第二DNA轉(zhuǎn)染，其表達(dá)相應(yīng)于cAMP水平。這樣的報(bào)道基因 可能是cAMP可誘導(dǎo)的，或者可以以使得與新cAMP應(yīng)答部分相連的方 式構(gòu)建。 一般來說，報(bào)道基因可能受對(duì)cAMP水平改變起反應(yīng)的任何反 應(yīng)元件控制。適宜的報(bào)道基因例如是LacZ、堿性磷酸酶、火螢熒光素 酶和綠焚光蛋白。這類反式激活測定法的原理是本領(lǐng)域眾所周知的， 描迷在例如Stratowa， Ch. ， Himmler， A.和Czernilof sky， A. P.， (1995) Curr. Opin. Biotechnol. 6:574中。
本發(fā)明還涉及藥物組合物，其中含有與可藥用輔劑和任選的其它 治療劑混合的具有通式I的二氫吡啶衍生物或其可藥用鹽。在與組合 物中的其它組分相容的角度來說，所述輔劑必須是"可接受的"并且
對(duì)其接受者無害。藥物組合物中還可以含有2-曱基-5-氧代-7-苯基 -4-(3， 4， 5-三曱氧苯基)-l， 4, 5， 6， 7， 8-六氬全啉-3-曱腈。
組合物包括例如適合口服、舌下、皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、局部、 或者直腸給藥等的組合物，它們均以單位劑量形式給藥。
對(duì)于口服給藥而言，活性組分可以以獨(dú)立的單元提供，例如片劑、 膠嚢劑、散劑、顆粒劑、溶液劑、混懸劑等。
對(duì)于非腸道給藥而言，本發(fā)明的藥物組合物可以以單劑量或多劑 量容器的形式提供，例如預(yù)定量的注射液，如裝在密閉小瓶或安瓿中， 還可以在冷凍干燥的(凍干)條件下貯存，使用前只需要加入無菌液體 載體例如水。
按照例^口4苗述在才示〉焦文獻(xiàn)Gennaro， A. R.等人，Remington: 7"力e 5We"ce a/2t/尸rac〃ce 0尸？力sr則c7 (笫20版，Lippincott Williams & Wilkins， 2000， 尤其參見第 5 部分Pharmaceutical Manufacturing)中的方法，與這類可藥用輔劑混合之后，活性劑可以 被壓制成固體單元?jiǎng)┝啃问?，例如丸、片，或者加工成膠嚢劑或栓劑。 通過借助于可藥用液體，活性劑可以液體組合物的形式使用，例如為 溶液劑、混懸劑、乳劑形式的注射制劑，或者噴霧劑例如鼻腔噴霧劑。
為了制備固體劑量單元，預(yù)期可利用常規(guī)添加劑，例如填充劑、 著色劑、聚合物粘合劑等。通常，可以利用不對(duì)所述活性化合物的功 能產(chǎn)生干擾的任何一種可藥用添加劑?？膳c本發(fā)明的活性劑一起作為 固體組合物施用的適當(dāng)載體包括以適當(dāng)含量使用的乳糖、淀粉、纖維 素衍生物等或其混合物。對(duì)于非腸道給藥而言，可利用含水混懸劑、 等滲鹽溶液劑和無菌注射溶液劑，它們含有可藥用分散劑和/或潤濕 劑，例如丙二醇或丁二醇。
本發(fā)明進(jìn)一步包括前述的藥物組合物，它與適合于所述組合物的 包裝材料相結(jié)合，所述包裝材料包括使用該組合物用于前述用途的說明。
使用活性組分或其藥物組合物的精確劑量和給藥方案可以隨特定 化合物、給藥途徑、以及服用該藥物的個(gè)體患者年齡和病況不同而不同。
一般來說，非腸道給藥要求比更依賴于吸收的其它給藥方法更低
的劑量。然而，人的適宜劑量可以是0. 05-25 mg/kg體重。所需劑量 可以是單劑量形式或者作為多個(gè)亞劑量形式，在一天內(nèi)以適當(dāng)間隔給 藥，或者就女性受治療者而言，所需劑量還可以是在月經(jīng)周期中以適 當(dāng)?shù)娜臻g隔給藥的多個(gè)亞劑量形式。劑量和給藥方案可以隨女性和男 性受治療者不同而不同。
因此，根據(jù)本發(fā)明的化合物可用于治療。
本發(fā)明進(jìn)一方面還涉及具有通式I的二氫吡啶衍生物化合物在制 造用于治療對(duì)FSH受體介導(dǎo)途徑具有響應(yīng)的疾病的藥物中的用途，優(yōu) 選用于治療不育。
通過下面的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行描述。
實(shí)施例
實(shí)施例l
4-(3-溴-4-乙氧基-5-曱氧苯基)-2-曱基-5-氧代-7-苯基 -l， 4， 5， 6， 7, 8-六氬會(huì)啉-3-曱腈
a) 4-(3-溴-4-羥基-5-曱氧苯基)-2-曱基-5-氧代-7-苯基 -1, 4， 5, 6， 7， 8-六氫查啉-3-曱腈
將5-苯基環(huán)己烷-l， 3-二酮(0. 51 g)、 3-溴-5-曱氧基-4-羥基苯曱醛 (0.62 g)和3-氨基巴豆腈(O. 22 g)在20 mL絕對(duì)乙醇中的混合物在 75°C下攪拌3 h。反應(yīng)混合物濃縮，快速柱色譜法處理后得到標(biāo)題化 合物，為白色固體(硅膠，庚烷/乙酸乙酯(3/7， v/v)， Rf = 0.36)。 收率0.95 g。 MS-ESI: [M-H]— = 463/465。
b) 4- (3-溴-4-乙氧基-5-曱氧苯基)-2-曱基-5_氧代-7-苯基 -l， 4， 5， 6， 7， 8-六氬會(huì)啉-3-曱腈
將步驟a的產(chǎn)物(15mg)、乙基碘(6.4 ju L)、氫化鈉(2. 6 mg， 60% 油溶液)和碘化四丁基銨(l. 2 mg)在0.5 mL NMP中的混合物在80。C 下攪拌2 h。加入水，反應(yīng)混合物用乙酸乙酯萃取。有機(jī)相濃縮后， 快速柱色鐠法處理后得到標(biāo)題化合物(硅膠，庚烷/乙酸乙酯(1/4， v/v)， Rf = 0. 52)。
收率2.2 mg。 MS-ESI: [M-H廠=491/493。
實(shí)施例2
4-(3-溴-4-環(huán)己基曱氧基-5-曱氧苯基)-2-曱基-5-氧代-7-苯基 -l，4，5，6,7，8-六氫喹啉-3-曱腈
類似于實(shí)施例lb得到標(biāo)題化合物，由實(shí)施例la的產(chǎn)物(15 mg) 和溴甲基環(huán)己烷(12 juU出發(fā)。
收率12 mg。 Rf (庚烷/乙酸乙酯(1/4, v/v)) - 0.59。 MS-ESI: [M-H]一 = 559/561。
實(shí)施例3
4-[3-渙-5-曱氧基-4-(3-曱基丁氧基)-苯基]-2-甲基-5-氧代-7-苯基 -1,4，5，6,7, 8-六氫喹啉-3-曱腈
類似于實(shí)施例lb得到標(biāo)題化合物，由實(shí)施例la的產(chǎn)物(15 mg) 和1-捵-3-甲基丁烷(4. 7 jaL)出發(fā)。
收率14 mg。 Rf (庚烷/乙酸乙酯(1/4， v/v)) - 0.56。 MS-ESI: [M-H]— - 533/535。
實(shí)施例4
4- [3-溴-4- (5-氯噻吩-2-基曱氧基)-5-甲氧苯基]-2-甲基-5-氧代 -7-苯基-1， 4， 5， 6， 7, 8-六氫會(huì)啉-3-甲腈
將實(shí)施例la的產(chǎn)物(15 mg)、 2-氯-5-氯甲基噻吩(4. 3 |a L)和碳
酸銫(21 mg)在l mL二p惡烷中的混合物在80。C下攪拌4 h。反應(yīng)混合 物濃縮，快速柱色譜法處理后得到標(biāo)題化合物(硅膠，庚烷/乙酸乙酯 (3/7， v/v)， Rf = 0. 38)。
收率4.7 mg。 MS-ESI: [M—H廣- 593/595/597。
實(shí)施例5-乙酸甲酯
類似于實(shí)施例4得到標(biāo)題化合物，由實(shí)施例la的產(chǎn)物(O. 47 g) 和溴代乙酸甲酯(l.O mL )出發(fā)。
收率0, 32 g。 Rf (庚烷/乙酸乙酯(1/4, v/v)) =0.46。 MS-ESI: [M-H廠=535/537。
實(shí)施例6
3-甲氧基苯曱酸2-溴-4-(3-氰基-2-曱基-5-氧代-7-苯基 -l， 4， 5, 6， 7， 8-六氫壹啉-4-基)-6-甲氧苯基酯
類似于實(shí)施例4得到標(biāo)題化合物，由實(shí)施例la的產(chǎn)物(15 mg)和
3- 曱氧基-苯甲酰氯(5.4 jiL)出發(fā)。
收率7.4mg。 Rf (庚烷/乙酸乙酯(1/4， v/v)) -0.48。 MS-ESI: [M-H]一 = 597/599。
實(shí)施例7
4- [3-溴-4- (3-氰基芐氧基)-5-曱氧苯基]-2-曱基-5-氧代-7-苯基 -1， 4， 5， 6， 7， 8-六氬奮啉-3-曱腈
類似于實(shí)施例4得到標(biāo)題化合物，由實(shí)施例la的產(chǎn)物(15 mg)和 3-溴甲基苯甲腈(7.6 mg)出發(fā)。
收率15 mg。 Rf (庚烷/乙酸乙酯(1/4, v/v)) - 0.51。 MS-ESI: [M-Hr = 578/580。
實(shí)施例8
4- [3-溴-5-甲氧基-4- (萘-2-基甲氧基)-苯基]-2-甲基-5-氧代-7-苯 基-1， 4， 5， 6， 7， 8-六氫喹啉-3-曱腈
類似于實(shí)施例4得到標(biāo)題化合物，由實(shí)施例la的產(chǎn)物(15 mg)和 2-溴甲基萘(8.6 mg)出發(fā)。
收率11 mg。 Rf (庚烷/乙酸乙酯(1/4， v/v)) = 0.60。 MS-ESI: [M-H]— = 603/605。
實(shí)施例9
苯基曱磺酸2-溴-4-(3-氰基-2-曱基-5-氧代-7-苯基-1, 4， 5， 6， 7， 8-六氫會(huì)啉-4-基)-6-曱氧苯基酯
將實(shí)施例la的產(chǎn)物(15 mg)、苯甲磺酸氯(9.2 mg)和三乙胺(9. 4 mL)在1 mL二氯甲烷中的混合物在室溫下攪拌2 h。反應(yīng)混合物濃縮， 快速柱色謙法處理后得到標(biāo)題化合物(硅膠，庚烷/乙酸乙酯(1/4， v/v), Rf = 0. 41)。
收率15 mg。 MS-ESI: [M+H]+ = 619/621。
實(shí)施例IO
噻吩-2-磺酸2-溴-4- (3-氰基-2-曱基-5-氧代-7-苯基-l， 4， 5， 6， 7， 8-六氫喹啉-4-基)-6-曱氧苯基酯
類似于實(shí)施例9得到標(biāo)題化合物，由實(shí)施例la的產(chǎn)物(15 mg)和 瘞吩-2-磺酰氯(8. 8 mg)出發(fā)。
收率20 mg。 Rf (庚烷/乙酸乙酯(1/4， v/v)) = 0.30。 MS-ESI: [M-H]- - 611/613。
實(shí)施例ll
4-[3，5-二溴-4-(3-曱氧芐氧基)-苯基]-7-乙基-2-曱基-5-氧代
-1, 4， 5， 6， 7， 8-六氫喹啉-3-曱腈
a) 3， 5-二溴-4-(3-曱氧芐氧基)-苯甲醛
將3，5-二溴-4-羥基苯曱醛(0.28 g)、l-溴甲基-3-甲氧基苯(0. 15 mL)、碳酸鉀(O. 29 g)和碘化鉀(42 mg)在10 mL絕對(duì)乙醇中的混合物 在8Q。C下攪拌2天。反應(yīng)混合物濃縮，快速柱色譜法處理后得到標(biāo)題 化合物，為白色固體(硅膠，庚烷/乙酸乙酯(3/7， v/v))， Rf = 0. 51)。
收率0.24 g。 MS-ESI: [M-H]-= 463/465。 ^ NMR (CDC13): 5 =9.88 (s， 1H)， 8.06 (s， 1H)， 7.34 (t， 1H)， 7.18 (bs， 1H)， 7.15 (d， 1H)， 6.93 (dd, 1H)， 5.10 (s， 2H) ， 3.85 (s， 3H)。
b) 4- [3， 5-二溴-4- (3-曱氧芐氧基)-苯基]-7-乙基-2-甲基-5-氧 代-l, 4， 5， 6， 7， 8-六氫喹啉-3-甲腈
類似于實(shí)施例la得到標(biāo)題化合物，由5-乙基環(huán)己烷-l， 3-二酮 (8.5 mg)和步驟a的產(chǎn)物(24 mg)出發(fā)。
收率26 mg。 Rf (庚烷/乙酸乙酯(3/7， v/v)) = 0.40。 MS-ESI: [M+H]+ = 585/587/589。
實(shí)施例12
4- {3-溴-5-乙氧基-4- [2- (3-硝基苯基)-2-氧代乙氧基]-苯基} -2-曱 基-5-氧代-7-苯基-l， 4， 5， 6, 7， 8-六氫喹啉-3-曱腈 a) 4-(3-淡-5-乙氧基-4-羥基苯基)-2-曱基-5-氧代-7-苯基 -1， 4， 5， 6， 7, 8-六氬會(huì)啉-3-曱腈
類似于實(shí)施例la得到標(biāo)題化合物，由3-溴-5-乙氧基-4-羥基苯 曱醛(O. 15 g)出發(fā)。
收率0.15g。 Rf (庚烷/乙酸乙酯(4/6, v/v)) =0.18。 MS-ESI: [M+H]+ - 479/481。
b) 4- {3-溴-5-乙氧基-4- [2- (3-硝基苯基)-2-氧代乙氧基] -苯 基} -2-曱基-5-氧代-7-苯基-1， 4， 5， 6， 7， 8-六氫喹啉-3-甲腈
類似于實(shí)施例4得到標(biāo)題化合物，由步驟a的產(chǎn)物(15 mg)和2-溴-1-(3-硝基苯基)-乙酮(8. 4 mg)出發(fā)。 收率<formula>formula see original document page 22</formula>實(shí)施例13
3-[2-渙-4-(3-氰基-2-曱基-5-氧代-7-苯基-l， 4, 5, 6， 7， 8-六氬奮啉 -4-基)-6-曱氧苯氧基曱基]-N-多吩-2-基曱基苯曱酰胺
a) 3- [2-溴-4- (3-氰基-2-曱基-5-氧代-7-苯基-1, 4， 5， 6， 7， 8-六 氫喹啉-4-基)-6-曱氧苯氧基曱基]-苯甲酸曱酯
類似于實(shí)施例4得到標(biāo)題化合物，由實(shí)施例la的產(chǎn)物(O. 35 g) 和3-溴甲基苯曱酸甲酯(0. 18 g)出發(fā)。
收率0. 35 g。 Rf (庚烷/乙酸乙酯(3/7， v/v)) -0.34。 MS-ESI: [M+H]+ =613/615。
b) 3-[2-溴-4-(3-氰基-2-曱基-5-氧代-7-苯基-l， 4， 5, 6， 7， 8-六 氫奮啉-4-基)-6-曱氧苯氧基甲基]-苯曱酸
將步驟a的產(chǎn)物(O. 35 g)溶解于20 mL二p惡烷/水C7/3， v/v)中， 加入2 niL 2 M NaOH的水溶液。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5天。反應(yīng) 混合物傾入水，用2 M HC1的水溶液酸化至pH 2,用乙酸乙酯萃取數(shù) 次。有機(jī)相用水和飽和鹽水洗滌，Na2S0,干燥并蒸發(fā)得到標(biāo)題化合物。
收率0.35 g。 MS-ESI: [M+H〗+ = 599/601。
c) 3-[2-溴-4-(3-氰基-2-曱基-5-氧代-7-苯基-1， 4， 5, 6， 7， 8-六 氳奮啉-4-基)-6-曱氧苯氧基甲基]噻吩-2-基甲基苯甲酰胺
向步驟b的產(chǎn)物(20 mg)的2 mL 二氯甲烷溶液中加入EDCI (7. 0 mg)、 DiPEA (7 |i L)和2-瘞吩曱基胺(4. 1 n L)，反應(yīng)混合物在室溫 下攪拌3 h。反應(yīng)混合物濃縮，快速柱色譜法處理后得到標(biāo)題化合物(硅 膠，庚烷/乙酸乙酯(1/4， v/v)， Rf - 0.78)。
收率11 mg。 MS-ESI: [M+H]+ = 694/696。
實(shí)施例14
3- [2-溴-4-(3-氰基-2-曱基-5-氧代-7-苯基-1， 4， 5， 6， 7， 8-六氫喹啉 -4-基)-6-曱氧苯氧基曱基]-苯曱酸2-嗎啉-4-基乙酯
向?qū)嵤├?3b的產(chǎn)物(20 mg)的2 mL二氯曱烷溶液中加入TBTU (12 mg)、 DiPEA (7 uL)和2-嗎啉-4-基乙醇(4. 8 m L)，反應(yīng)混合物在室 溫下攪拌3 h。反應(yīng)混合物濃縮，快速柱色譜法處理后得到標(biāo)題化合 物(硅膠，庚烷/乙酸乙酯(1/4， v/v)， Rf = 0.48)。
收率11 mg。 MS-ESI: [M+H]+ = 694/696。
實(shí)施例15
4- {3-溴-5-乙氧基-4- [3-(哌啶-l-羰基)-芐氧基]-苯基} -2-曱基-5-氧代-7-苯基-l， 4， 5， 6， 7， 8-六氫喹啉-3-曱腈
a) 3- (2-溴-6-乙氧基-4-曱酰基苯氧甲基)-苯曱酸曱酯
將3-溴甲基苯甲酸甲酯(0. 77 g)、 K2C03 (1.0 g)和催化用量的 /2-Bu4NI加入至5-溴-3-乙氧基-4-羥基苯甲醛(0. 75 g)的10 raL DMF 溶液中，反應(yīng)混合物在70。C下攪拌1 h。加入3°/。檸檬酸的水溶液，反 應(yīng)混合物用乙酸乙酯萃取。有機(jī)相用水和鹽水洗滌，MgS04干燥并濃縮。 快速柱色譜法處理后得到標(biāo)題化合物(硅膠，庚烷/乙酸乙酯(1/4， v/v)， Rr = 0. 25)。
收率1.08 g。力NMR (CDCh): 5 =9.84 (s， 1H)， 8.20 (bs， 1H)， 8.02 (bd， 1H)， 7.77 (d， 1H)， 7.65 (d， 1H) ， 7.47 (t， 1H)， 7.39 (d， 1H)， 5.21 (s， 2H) ， 4.17 (q， 2H), 3.94 (s， 3H)， 1.51 (t, 3H)。
b) 3-[2-溴-4-(3-氰基-2-曱基-5-氧代-7-苯基-l， 4， 5, 6, 7, 8-六 氫會(huì)啉-4-基)-6-乙氧苯氧曱基]-苯甲酸曱酯
類似于實(shí)施例la得到標(biāo)題化合物，由步驟a的產(chǎn)物(O. 26 g)出發(fā)。 收率0,27 g。 Rf (庚烷/乙酸乙酯(3/7， v/v)) =0.34。 MS-ESI: [M+H]+ = 613/615。
c) 3- [2-溴-4- (3-氰基-2-曱基-5-氧代-7-苯基-1， 4, 5， 6， 7， 8-六 氫喹啉-4-基)-6-乙氧苯氧曱基]-苯曱酸
類似于實(shí)施例13b得到標(biāo)題化合物，由步驟b的產(chǎn)物(O. 27 g)出發(fā)。
收率0.27 g。 MS-ESI: [M+H]+ = 599/601。
d) 4- {3-溴-5-乙氧基-4- [3- (哌啶-l-羰基)-芐氧基]-苯基} -2-甲基-5-氧代-7-苯基-l， 4, 5， 6， 7， 8-六氫喹啉-3-曱腈
類似于實(shí)施例13c得到標(biāo)題化合物，由步驟c的產(chǎn)物(20mg)和哌 啶(3. 9 juL)出發(fā)。
收率15 mg。 Rf (庚烷/乙酸乙酯(1/4， v/v)) = 0.25。 MS-ESI: [M+H]+ = 680/682。
實(shí)施例16
甘氨酸，N-3-[2-溴-4-(3-氰基-2-曱基-5-氧代-7-苯基 -l， 4， 5， 6， 7， 8-六氪奮啉-4-基)-6-乙氧苯氧甲基]苯曱?；?，甲酯
類似于實(shí)施例13c得到標(biāo)題化合物，由實(shí)施例15c的產(chǎn)物(20mg) 和甘氨酸曱酯鹽酸鹽(4. 9 mg)出發(fā)。
收率9.9mg。 Rf (庚烷/乙酸乙酯(3/7， v/v)) =0.16。 MS-ESI: [M+H]+ = 684/686。
實(shí)施例17
3-[2-溴-4-(3-氰基-7-乙基-2-甲基-5-氧代-l， 4， 5， 6， 7， 8-六氫喹啉 -4-基)-6-乙氧苯氧曱基] -苯曱酸曱酯
類似于實(shí)施例la得到標(biāo)題化合物，由5-乙基環(huán)己烷-l， 3-二酮 (0.25 g)和步驟15a的產(chǎn)物(O. 64 g)出發(fā)。
收率0.45 g。 Rf (庚烷/乙酸乙酯(1/4， v/v)) -0.25。 MS-ESI: [M+H]+ = 579/581。
實(shí)施例18
3-[2-溴-4-(3-氰基-7-乙基-2-曱基-5-氧代-l， 4， 5， 6， 7, 8-六氫-喹 啉-4-基)-6-乙氧苯氧曱基]-苯甲酸
類似于實(shí)施例13b得到標(biāo)題化合物，由實(shí)施例17的產(chǎn)物(0. 43g) 出發(fā)。
收率0.38 g。 Rf (庚烷/乙酸乙酯(1/4， v/v)) =0.17。 MS-ESI: [M+H]+ - 563/565。
實(shí)施例19
3-[2-溴-4-(3-氰基-7-乙基-2-甲基-5-氧代-l， 4， 5， 6， 7， 8-六氫喹啉 -4-基)-6-乙氧苯氧曱基]-N-叔丁基苯曱酰胺
向?qū)嵤├?8的產(chǎn)物(O. 35 g)的lOmL二氯甲烷溶液中加入叔丁胺 (0.12 mL)、 DiPEA (0.39 mL)和HATU (0.30 g)，反應(yīng)混合物在35°C 下攪拌3 h。加入3。/。檸檬酸的水溶液，所得到的混合物用乙酸乙酯萃 取數(shù)次。有機(jī)相用水和鹽水洗滌，MgSO,干燥并濃縮?？焖僦V法處 理后得到標(biāo)題化合物(硅膠，庚烷/乙酸乙酯(1/4， v/v)， Rf-O. 34)。
收率0.28 g。 MS-ESI: [M+H]+ = 620/622。
實(shí)施例2 0
3-[2-溴-4-(3-氰基-7-乙基-2-曱基-5-氧代-l， 4， 5， 6， 7， 8-六氫喹啉 -4-基)-6-乙氧苯氧曱基]-N-環(huán)己基苯甲酰胺
類似于實(shí)施例13c制備標(biāo)題化合物，由實(shí)施例18的產(chǎn)物(20 mg) 和環(huán)己胺(4. 9 uL)出發(fā)。
收率7.9 mg。 Rf (硅膠，庚烷/乙酸乙酯(1/4， v/v)) = 0.43。 MS-ESI: [M+H]+ = 646/648。
實(shí)施例21
3-[2-溴-4-(3-氰基-7-乙基-2-曱基-5-氧代-1， 4， 5， 6， 7， 8-六氫喹啉
-4-基)-6-乙氧苯氧曱基]-N- (2-嗎啉-4-基-乙基)-苯甲酰胺
類似于實(shí)施例13c制備標(biāo)題化合物，由實(shí)施例18的產(chǎn)物(20 mg)
和4-(2-氨基乙基)-嗎啉(5. 5 iaU出發(fā)。
收率15mg。 Rr (二氯曱烷/甲醇(95/5， v/v)) =0.22。 MS-ESI:+ = 677/679。
實(shí)施例22
4- [3-碘-5-曱氧基-4- (3-甲氧芳氧基)-苯基]-2-曱基-5-氧代-7-苯基 -l， 4， 5， 6， 7， 8-六氫喹啉-3-曱腈
a) 3-碘-5-曱氧基-4- (3-甲氧芐氧基)-苯曱醛 類似于實(shí)施例15&得到標(biāo)題化合物，由4-羥基-3—典-5-甲氧苯甲
醛(O. 70 g)和l-溴曱基-3-曱氧苯(0. 39 mL)出發(fā)。
收率0.56 g。 Rf (庚烷/乙酸乙酯(4/6, v/v)) = 0.42。 ^ NMR (CDC13): 5 =9.83 (s， 1H)， 7.86 (d， 1H)， 7.43 (d， 1H)， 7.29 (t， 1H)， 7.16 (bs， 1H)， 7.09 (d， 1H)， 6.88 (dd， 1H), 5.14 (s， 2H)， 3.95 (s， 3H)， 3.84 (s， 3H)。
b) 4-[3-碘-5-甲氧基-4-(3-曱氧芐氧基)-苯基]-2-曱基-5-氧代 -7-苯基-l， 4， 5， 6， 7， 8-六氫喹啉-3-曱腈
類似于實(shí)施例la制備標(biāo)題化合物，由步驟a的產(chǎn)物(24mg)出發(fā)。 收率17 mg。 Rf (庚烷/乙酸乙酯(1/4， v/v)) = 0.59。 MS-ESI: [M-H〗-=631。
實(shí)施例23
4- [3-溴-4- (2-氯-3-甲氧芐氧基)-5-乙氧苯基]-2-曱基-5-氧代-7-丙基-1， 4， 5， 6, 7, 8-六氫喹啉-3-甲腈
起始原料根據(jù)McCarthy等人所述的方法(J. Org. Chem. 1986 (29) 1586)獲得
a) 2-氯-3-曱氧苯曱醛
在-40。C下，將正丁基鋰(6. 25 mL， 1. 6M己烷溶液)加入至^ ^ W -三曱基乙二胺(l. 27 mL)的10 mL四氫呋喃溶液中。15min后，反應(yīng) 混合物冷卻至-70。C，加入3-甲氧苯曱醛(1.22 mL)的5 mL四氫咬喃 溶液。反應(yīng)混合物溫?zé)嶂罳。C，然后再次冷卻至-7G'C，加入正丁基鋰 (6.25mL， 1.6M己烷溶液)。反應(yīng)混合物溫?zé)嶂羖(TC ,再次冷卻至-30 。C，然后將其加入至六氯乙烷(7. 10 g)的10 mL四氫呋喃溶液中。反 應(yīng)混合物在室溫下攪拌2 h，傾入20 mL 10% HC1的水溶液中，用乙 酸乙酯萃取數(shù)次。合并的有機(jī)相用飽和鹽水洗滌，MgS(^干燥并濃縮。 快速柱色i脊法處理后得到標(biāo)題化合物(硅膠，庚烷/乙酸乙酯(75/25， v/v)， Rf = 0.38)，接著由庚烷結(jié)晶。
收率1. 06 g。丄H NMR (CDC13): 5 =10.46 (s， 1H)， 7.54 (dd， 1H)， 7.35 (t， 1H)， 7.17 (d， 1H)， 3.96 (s， 3H)。
b) 2-氯-l-氯曱基-3-曱氧苯
在O'C下，將步驟a的產(chǎn)物(1. 00 g)的5 mL四氫呋喃溶液加入至 氫化鋁鋰(O. 34 g)的5 mL四氫^^喃懸浮液中。反應(yīng)混合物在室溫下攪 拌lh，然后在(TC下加入水(O. 35 mL)的5 mL四氫呋喃溶液，接著加 入2 M氫氧化鈉的水(O. 70 mL)溶液和水(O. 70 mL)。所得到的白色懸 浮液攪拌0.5h，過濾。將濾液濃縮后得到的無色油狀物溶解于10mL 1,2-二氯丙烷中，加入亞石危酰二氯(1.5 mL)。反應(yīng)混合物回流過夜后 濃縮。快速柱色譜法處理后得到標(biāo)題化合物(硅膠，庚烷/乙酸乙酯 (75/25， v/v)， Rf = 0.43)，為黃色油狀物，靜置結(jié)晶。
收率0. 80g。 NMR (CDCh): 5 =7.24 (t， 1H) ， 7.09 (dd， 1H)， 6.93 (dd， 1H)， 4.72 (s， 2H), 3.92 (s， 3H)。
c) 3-溴-4-(2-氯-3-曱氧芐氧基)-5-乙氧苯曱醛 類似于實(shí)施例15a得到標(biāo)題化合物，由步驟b的產(chǎn)物(0.42 g)和
5-溴-3-乙氧基-4-羥基苯甲醛(0. 49 g)出發(fā)。
收率0.56 g。 ]H NMR (CDC13): 5 =9.85 (s， 1H)， 7.66 (dd，
1H)， 7.40 (dd， 1H)， 7.39 (d， 1H)， 7.29 (t， 1H)， 6.94 (dd， 1H)， 5.32 (s, 2H)， 4.15 (quar. ， 2H) ， 3.93 (s， 3H) ， 1.44 (t， 3H)。
d) 4- [3-溴-4- (2-氯-3-曱氧芐氧基)-5-乙氧苯基]-2-曱基-5-氣 代-7-丙基-l， 4， 5， 6， 7, 8-六氬壹啉-3-曱腈
類似于實(shí)施例la得到標(biāo)題化合物，由5-丙基環(huán)己烷-1，3-二酮(21 mg)和步驟c的產(chǎn)物(53 mg)出發(fā)。
收率60 mg。 Rf (庚烷/乙酸乙酯(4/6， v/v)) = 0.19。 MS-ESI: [M-Hr = 597/599/601。
實(shí)施例24
甘氨酸，N-3-[2-溴-4-(3-氰基-2-曱基-5-氧代-7-丙基 -l， 4， 5, 6， 7， 8-六氫會(huì)啉-4-基)-6-乙氧苯氧曱基]苯曱?；?，曱酯
a) 3- [2-溴-4-(3-氰基-2-曱基-5-氧代-7-丙基-l， 4， 5， 6， 7， 8-六氫喹 啉-4-基)-6-乙氧苯氧甲基]-苯曱酸甲酯
類似于實(shí)施例la得到標(biāo)題化合物，由5-丙基環(huán)己烷-l， 3-二酮 (0.95 g)和實(shí)施例15a的產(chǎn)物(2. 4 g)出發(fā)。
收率3.0 g。 Rf (庚烷/乙酸乙酯(1/1， v/v)) = 0.20。 MS-ESI: [M-H]- = 591/593。
b) 3-[2-溴-4-(3-氰基-2-曱基-5-氧代-7-丙基-l， 4， 5， 6, 7， 8-六氫喹 啉-4-基)-6-乙氧苯氧曱基]-苯曱酸
類似于實(shí)施例13b得到標(biāo)題化合物，由步驟a的產(chǎn)物(3.0g)出發(fā)。 收率3.0 g。 MS-ESI: [M-H〗—=577/579。
c) 甘氨酸，N-3-[2-溴-4-(3-氰基-2-曱基-5-氧代-7-丙基 -l， 4， 5， 6， 7， 8-六氬奮啉-4-基)-6-乙氧苯氧甲基]苯曱?；?，曱酯
類似于實(shí)施例14得到標(biāo)題化合物，由步驟b的產(chǎn)物(90 mg)和甘 氨酸曱酯鹽酸鹽(64mg)出發(fā)。通過制備性HPLC完成純化(LunaC18 [5
Mm],流速20 ml min—'， 0~>90% CH3CN, 1% TFA)。
收率59 mg。 Rt (CH2Cl2/MeOH (95/5， v/v)) - 0.54。 MS-ESI: [M+H〗+ = 650/652。
實(shí)施例25
4- [ 3-溴-5-乙氧基-4- (3-曱氧芐氧基)-苯基]-7- (4-氯苯基)-2-甲基 -5-氧代-1， 4， 5， 6, 7， 8-六氫喹啉-3-曱腈
a) 3-溴-5-乙氧基-4-(3-曱氧芐氧基)-苯甲醛 類似于實(shí)施例15a得到標(biāo)題化合物，由3-溴-5-乙氧基-4-羥基苯
甲醛(O. 75 g)和1-溴曱基-3-甲氧苯(0. 48 mL)出發(fā)。
收率0.91 g。 Rf (庚烷/乙酸乙酯(2/1， v/v)) - 0.43。 ^ NMR (CDC13): 5 =9.83 (s， 1H)， 7.65 (dd， 1H)， 7.38 (dd， 1H)， 7.29 (t， 1H)， 7.13 (bs， 1H)， 7.07 (d， 1H)， 6.88 (dd， 1H)， 5.16 (s， 2H)， 4.16 (quar.， 2H) ， 3.83 (s， 3H) ， 1.56 (t, 3H)。
b) 4-[3-溴-5-乙氧基-4-(3-曱氧芐氧基)-苯基]-7-(4-氯苯 基)-2-曱基-5-氧代-l， 4， 5， 6, 7， 8-六氫喹啉-3-曱腈
類似于實(shí)施例la得到標(biāo)題化合物，由5- (4-氯苯基)-環(huán)己烷-1， 3-二酮(22 mg)和步驟a的產(chǎn)物(37 mg)出發(fā)。
收率32 mg。 Rf (庚烷/乙酸乙酯(3/7， v/v)) = 0.19。 MS-ESI: [M+H]+ = 633/635/637。
實(shí)施例26
4- [3-溴-5-乙氧基-4- (3-曱氧芐氧基)-苯基]-7-呋喃-2-基-2-曱基 -5-氧代-l， 4， 5, 6, 7, 8-六氫喹啉-3-曱腈
類似于實(shí)施例la得到標(biāo)題化合物，由5-呋喃-2-基環(huán)己烷-l， 3-二酮(18 mg)和實(shí)施例25a的產(chǎn)物(37 mg)出發(fā)。
收率37 mg。 Rf (庚烷/乙酸乙酯(3/7， v/v)) = 0.24。 MS-ESI: [M+H]+ = 589/591。
實(shí)施例27
4-[3, 5-二甲氧基-4-(3-曱氧芐氧基)-苯基]-2-曱基-5-氧代-7-丙基 -1， 4， 5， 6， 7， 8-六氫會(huì)啉-3-甲腈
a) 3， 5-二曱氧基-4-(3-曱氧芐氧基)-苯曱醛 類似于實(shí)施例15a得到標(biāo)題化合物，由4-羥基-3，5-二甲氧苯甲
醛(O. 91 g)和1-溴曱基-3-甲氧苯(0. 75 mL)出發(fā)。
收率1.42 g淺黃色油狀物。Rf (庚烷/乙酸乙酯(1/1， v/v))= 0.40。 ^ NMR (CDCU: 5 =9.86 (s， 1H)， 7,26 (d， 1H)， 7.23 (d， 1H)， 7.09 (bs， 1H)， 7.04 (d， 1H)， 6.85 (dd， 1H)， 5.12 (s， 2H)， 3.91 (s， 6H)， 3.82 (s， 3H)。
b) 4- [3， 5-二甲氧基-4- (3-曱氧節(jié)氧基)-苯基]-2-曱基-5-氧代 -7-丙基-1， 4， 5， 6， 7, 8-六氫喹啉-3-曱腈
類似于實(shí)施例la得到標(biāo)題化合物，由5-丙基環(huán)己烷-1，3-二酮(11 mg)和步驟a的產(chǎn)物(21 mg)出發(fā)。
收率22 mg。 Rf (庚烷/乙酸乙酯(3/7， v/v)) = 0.21。 MS-ESI: [M+H]+ = 503; [M+Na]+ = 525。
實(shí)施例28
4- [3-溴-5-乙氧基-4- (3-吡啶基曱氧基)苯基]-2-曱基-5-氧代-7-丙 基-l, 4， 5, 6， 7， 8-六氫喹啉-3-曱腈三氟乙酸
a) 3-溴-5-乙氧基-4- (3-吡啶基曱氧基)-苯曱醛 類似于實(shí)施例15a得到標(biāo)題化合物，由3-溴-5-乙氧基-4-羥基苯
甲醛(O. 25 g)和3-甲基吡啶氯化物鹽酸鹽(0. 16 g)出發(fā)。
b) 4-[3-溴-5-乙氧基-4-(3-吡啶基甲氧基)苯基]-2-曱基-5-氧 代-7-丙基-l， 4， 5， 6， 7, 8-六氫喹啉-3-曱腈三氟乙酸
類似于實(shí)施例la得到標(biāo)題化合物，由5-丙基環(huán)己烷-l， 3-二酮
(0. 15 g)和步驟a的粗產(chǎn)物出發(fā)?；衔锿ㄟ^半制備性HPLC純化(Luna C18 [5 iam]，流速20 ml miiT1， 10—90% CH3CN， 0. 1% TFA)，由水 和二-惡烷的混合物凍干。 收率0.25 g。 MS-ESI: [M+H]+ = 536/538。
實(shí)施例29
4-[2-溴-4-(3-氰基-2-曱基-5-氧代-7-丙基-l， 4， 5， 6， 7, 8-六氫喹啉 -4-基)-6-乙氧苯氧曱基]-N-蓬吩-2-基曱基苯曱酰胺
a) 4- (2-溴-6-乙氧基-4-曱酰基苯氧曱基)-苯曱酸曱酯 類似于實(shí)施例15a得到標(biāo)題化合物，由4-溴曱基苯甲酸曱酯(3. 7 g)出發(fā)。
收率6. 4g。 ^NMR (CDC1》5 =9.84 (s， 1H)， 8.06 (d， 2H)， 7.65 (d， 1H), 7.61 (d， 2H) ， 7.39 (d， 1H)， 5.03 (s, 2H) ， 4.16 (q， 2H)， 3.93 (s， 3H) ， 1.48 (t， 3H)。
b) 4-[2-溴-4-(3-氰基-2-甲基-5-氧代-7-丙基-l， 4， 5， 6， 7， 8-六氫喹 啉-4-基)-6-乙氧苯氧甲基]-苯曱酸曱酯
類似于實(shí)施例la得到標(biāo)題化合物，由5-丙基環(huán)己烷-l， 3-二酮 (2.5 g)和步驟a的產(chǎn)物(6. 4 g)出發(fā)。
收率6.7 g。 Rf (庚烷/乙酸乙酯(3/2， v/v)) = 0.20。 MS-ESI: [M-H]— = 591/593。
c) 4- [2-溴-4- (3-氰基-2-曱基-5-氧代-7-丙基-l， 4， 5， 6， 7， 8-六氫喹 啉-4-基)-6-乙氧苯氧曱基]-苯曱酸
類似于實(shí)施例13b得到標(biāo)題化合物，由步驟b的產(chǎn)物(6. 7 g)出發(fā)。 反應(yīng)混合物在50。C下攪拌過夜。
收率6.4 g。 MS-ESI: [M-H廠=577/579。
d) 4- [2-溴-4- (3-氰基-2-甲基-5-氧代-7-丙基-1， 4， 5， 6， 7， 8-六氫喹 啉-4-基)-6-乙氧苯氧甲基]-N-瘞吩-2-基甲基苯甲酰胺
類似于實(shí)施例14得到標(biāo)題化合物，由步驟c的產(chǎn)物(O. 10 g)和 2-噢吩曱胺(52 jaL)出發(fā)。通過制備性HPLC完成純化(LunaC18 [5 u m]，流速20 ml min—'， 10—90% CH3CN， 1% TFA)。 收率54 mg。 MS-ESI: [M+H]+ = 674/676。
實(shí)施例30
4- [3-溴-5-乙氧基-4- (4-硝基苯氧基)-苯基]-2-曱基-5-氧代-7-丙基 -l， 4， 5， 6, 7， 8-六氬會(huì)啉-3-甲腈
a) 4-(3-溴-4-羥基-5-乙氧苯基)-2-甲基-5-氧代-7-丙基 -l，4，5，6，7，8-六氫喹啉-3-曱腈
類似于實(shí)施例la得到標(biāo)題化合物，由3-溴-5-乙氧基-4-幾基笨曱醛 (2.0 g)和5-丙基環(huán)己烷-1， 3-二酮(1. 3 g)出發(fā)。 收率3.6 g。 MS-ESI: [M-H]- = 443/445。
b) 4-(3-溴-4-曱磺酰氧基-5-乙氧苯基)-2-曱基-5-氧代-7-丙基 -1， 4， 5， 6， 7， 8-六氫喹啉-3-曱腈
將步驟a的粗產(chǎn)物(0. 99 g)、曱磺酰氯(0. 46 mL)和氬氧化鈉(0. 32 g)在4 mL THF/水(1/1， v/v)中的混合物在室溫下攪拌3天。加入水， 反應(yīng)混合物用二氯甲烷萃取。濃縮有機(jī)相后得到粗標(biāo)題化合物。 收率1.0 g。 MS-ESI: [M-H]_ = 521/523。
c) 4- [3-溴-5-乙氧基-4- (4-硝基苯氧基)-苯基]-2-甲基-5-氧代-7-丙基-1， 4， 5， 6， 7， 8-六氫喹啉-3-甲腈
將步驟b的產(chǎn)物(O. 2Gg)、 1-氟-4-硝基苯(53 uU和碳酸銫(O. 22 g) 的混合物溶解于二甲亞砜(l mL)中，在80'C下攪拌16h。加入二氯曱 烷，反應(yīng)混合物用1%鹽酸的水溶液和飽和鹽水洗滌。有機(jī)相濃縮后， 快速柱色譜法處理后得到標(biāo)題化合物(硅膠，庚烷/乙酸乙酯)。 收率0,19g。 MS-ESI: [M-H]— = 564/566。 NMR (CDCh): 5 =8.17
(d， 2H)， 7.00 (d， 1H)， 6.91 (m， 3H), 5.95 (bs， 1H)， 4.63 (s， 1H)， 4.04 (dq, 2H), 2.52 (dd， 1H), 2.42 (d， 2H)， 2.25 (m， 1H)， 2.20 (s， 3H)， 2.15 (dd， 1H)， 1.38 (m， 4H) ， 1.20 (t， 3H) ， 0.92
(t， 3H)。
實(shí)施例31
4- [3-溴-5-乙氧基-4- (5-氟-2-丙氨基-芐氧基)-苯基]-2-曱基-5-氧 代-7-丙基-1， 4, 5， 6, 7， 8-六氫-喹啉-3-曱腈
a) (5-氟-2-硝基-苯基)-甲醇
向5-氟-2-硝基苯曱酸(4. 58 g)的THF (50ml)溶液中加入1 M BH3 .THF 的THF (62 ml)溶液，同時(shí)用冰浴冷卻。除去冷卻浴，在環(huán)境溫度下 繼續(xù)攪拌l h，然后回流4 h。反應(yīng)混合物冷卻后，加入MeOH石皮壞過 量的硼烷?；旌衔餄饪s后，向殘余物中加入水和乙酸乙酯。有機(jī)層用 鹽水洗滌，干燥并濃縮。 收率4. 3 g。
b) 4- [3-溴-5-乙氧基-4- (5-氟-2-硝基-芐氧基)-苯基]-2-甲基-5-氧 代-7-丙基-1， 4， 5， 6， 7， 8-六氫-喹啉-3-甲腈
將步驟a的粗產(chǎn)物(1.5 g)、亞硫酰二氯(1.94 ml)和數(shù)滴DMF在二氯 曱烷(30ml)中的溶液攪拌72h?；旌衔镎婵諠饪s，殘余物溶解于DMF (20 ml)中。向殘余溶液中加入實(shí)施例30a所述化合物(3. 9 g) 、 K2C03 (6.1 g)和少量溴化四正丁銨(大約50 mg)?；旌衔镌?0。C下攪拌5h， 加入水和乙酸乙酯，水層用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)部分用鹽水洗 滌，干燥并濃縮。殘余物由甲苯重結(jié)晶。 收率3. 8 g。
c) 4-[4-(2-氨基-5-氟-芐氧基)-3-溴-5-乙氧基-苯基]-2-曱基-5-氧 代-7-丙基-l， 4， 5, 6， 7， 8-六氫-喹啉-3-曱腈
向步驟b的產(chǎn)物(3.8 g)的THF (110 ml)溶液中加入乙酸(3. 6 ml)和
鋅屑(8. 2g)。懸浮液在5(TC下加熱1 h。反應(yīng)混合物過濾后濃縮。殘 余物溶解于乙酸乙酯中，用飽和NaHC03和鹽水洗滌。有機(jī)層分離后， 干燥(Na2S04)并濃縮。殘余固體與少量乙酸乙酯攪拌得到標(biāo)題化合物， 過濾后為淺黃色固體。 收率2.8 g。
d) 4-[3-溴-5-乙氧基-4-(5-氟-2-丙氨基-芳氧基)-苯基]-2-曱基-5-氧代-7-丙基-1, 4， 5， 6， 7， 8-六氫-喹啉-3-曱腈
將步驟c所述化合物(200 mg)和丙酪(25 pl)的二氯曱烷(5 ml) 溶液攪拌2 h。然后加入乙酸(81 pi)和三乙酰氧基硼氫化鈉(300 mg)， 混合物繼續(xù)攪拌20h。加入2MNaOH水溶液，繼續(xù)攪拌15 min。有機(jī) 層用水和鹽水洗滌，干燥并真空濃縮。殘余物通過制備性HPLC純化 (L畫C18 [5 Mm],流速20 ml miif1， 10~>90% CH3CN， 0. 1% TFA) 并由水和二喁烷的混合物凍干，得到標(biāo)題化合物。還可能分離得到部 分二-烷基化產(chǎn)物(參見實(shí)施例32)。 收率109 mg。 MS-ESI: [M+H]+ = 610/612。
實(shí)施例32
4-[3-溴-4-(2-二丙氨基-5-氟-芐氧基)-5-乙氧基-苯基]-2-曱基-5-氧代-7-丙基-l， 4, 5， 6， 7， 8-六氫-喹啉-3-曱腈
由實(shí)施例31d的反應(yīng)混合物，經(jīng)制備性HPLC純化(Luna C18 [5 p m〗， 流速20 ml min—\ 10—90% CH3CN， 0.1°/。 TFA)并由水和二嚅烷的混 合物凍干后得到。
收率12 mg。 MS-ESI: [M+H]+ = 652/654。
實(shí)施例33
CHO-FSH體外生物活性
在用人類FSH受體穩(wěn)定轉(zhuǎn)染并用cAMP響應(yīng)元件(CRE)/啟動(dòng)子(導(dǎo) 向螢火蟲熒光素酶報(bào)道基因的表達(dá))共轉(zhuǎn)染的中國倉鼠卵巢(CH0)細(xì)胞 中，測試化合物的FSH活性。配體與Gs-偶聯(lián)的FSH受體結(jié)合導(dǎo)致cAMP 增加，它反過來引起熒光素酶報(bào)道構(gòu)建物的反式激活增大。利用發(fā)光 計(jì)數(shù)器量化熒光素酶信號(hào)。計(jì)算了測試化合物的ECs。值(測試化合物引 起半數(shù)(50W刺激時(shí)的濃度)。為此使用了軟件程序GraphPad PRISM， 3. 0版(GraphPad software Inc. ， San Diego)。
所有實(shí)施例化合物具有小于10—5M的活性(EC5。)。實(shí)施例13、 16、 17、 19-21、 23、 26、 28、 31和32的化合物顯示出介于10—7和10—9 M 之間的EC5。。實(shí)施例24和29的化合物顯示出低于10—9 M的EC5。。
權(quán)利要求
1.根據(jù)式I的二氫吡啶衍生物化合物或其可藥用鹽式I其中R1是(1-6C)烷基、(2-6C)烯基、(2-6C)炔基或者苯基、(1-5C)雜芳基，兩者皆任選被一個(gè)或多個(gè)選自下述的取代基取代羥基、氨基、鹵素、硝基、三氟甲基、氰基、(1-4C)烷基、(2-4C)烯基、(2-4C)炔基、(1-4C)烷氧基、(1-4C)(二)烷氨基；R2、R3獨(dú)立地是(1-4C)烷基、(2-4C)烯基、(2-4C)炔基、(1-4C)烷氧基、(2-4C)烯氧基、(3-4C)炔氧基、鹵素；R4是(1-6C)烷基、(2-6C)烯基、(2-6C)炔基、(3-6C)環(huán)烷基、(3-6C)環(huán)烯基、(3-6C)環(huán)烷基(1-4C)烷基、(2-6C)雜環(huán)烷基、(2-6C)雜環(huán)烷基(1-4C)烷基或者(6-10C)芳基、(6-10C)芳基(1-4C)烷基、(1-9C)雜芳基、(1-9C)雜芳基(1-4C)烷基，所述(雜)芳基任選被一個(gè)或多個(gè)選自下述的取代基取代羥基、氨基、鹵素、硝基、三氟甲基、氰基、(1-4C)烷基、(2-4C)烯基、(2-4C)炔基、(1-4C)烷氧基、(1-4C)(二)烷氨基，以及如果R4是苯基，該苯基還任選被(1-4C)烷硫基、(1-4C)烷磺?；5-氧基羰基、R5-羰基或R5，R6-氨基羰基取代；X是SO2、CH2、C(O)或者X不存在，其中如果X是CH2，則R4可以另外是R5-氧基羰基或R5-羰基；R5、R6獨(dú)立地是H、(1-4C)烷基、(2-4C)烯基、(2-4C)炔基、(3-6C)環(huán)烷基、(3-6C)環(huán)烷基(1-4C)烷基、(2-6C)雜環(huán)烷基、(2-6C)雜環(huán)烷基(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧羰基(1-4C)烷基、(1-4C)(二)烷氨基羰基(1-4C)烷基、或(6-10C)芳基氨基羰基(1-4C)烷基、(1-9C)雜芳基氨基羰基(1-4C)烷基、(6-10C)芳基、(1-9C)雜芳基、(6-10C)芳基(1-4C)烷基、(1-9C)雜芳基(1-4C)烷基，所述(雜)芳基任選被一個(gè)或多個(gè)選自下述的取代基取代羥基、氨基、鹵素、硝基、三氟甲基、氰基、(1-4C)烷基、(2-4C)烯基、(2-4C)炔基、(1-4C)烷氧基、(1-4C)(二)烷氨基，或者R5，R6-氨基羰基中的R5、R6可以聯(lián)合形成(2-6C)雜環(huán)烷基環(huán)；條件是該化合物不是2-甲基-5-氧代-7-苯基-4-(3，4，5-三甲氧苯基)-1，4，5，6，7，8-六氫喹啉-3-甲腈。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R4是苯基，任選被一個(gè)或多 個(gè)選自下述的取代基取代羥基、氨基、面素、硝基、三氟甲基、氰 基、(l-4C)烷基、(2-4C)烯基、(2-4C)炔基、(1-4C)烷氧基、(1-4C) (二) 烷氨基、(l-4C)烷硫基、(1-4C)烷磺?；?、R5-氧基羰基、R5-羰基或 R5， R6-氨基羰基。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中r上苯基的取代基是R5，R6-氨基羰基、(l-4C)烷氧基和/或鹵素。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中R5，R6-氨基羰基中的R5、 W是 (1-4C) (二)烷氨基。
5. 根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中R5，R6-氨基羰基中的R5是(1-4C) 烷氧羰基(1-4C)烷基，以及r是H。
6. 根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中R5， R6-氨基羰基中的W是(l-9C) 雜芳基(l-4C)烷基，所述(雜)芳基任選被一個(gè)或多個(gè)選自下述的取代 基取代羥基、氨基、卣素、硝基、三氟甲基、氰基、(1-4C)烷基、 (2-4C)烯基、(2-4C)炔基、(l-4C)烷氧基、(1-4C) (二)烷氨基或(1-4C) 烷氧羰基(1-4C)烷基，以及r是H。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1-6的化合物，其中X是CH2。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1-7的化合物，其中W是(1-6C)烷基、苯基或 (1-5C)雜芳基。
9. 根據(jù)權(quán)利要求l-8的化合物，其中R2、 R3是卣素和/或(1-4C) 烷氧基。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1-9的化合物，用于治療。
11. 藥物組合物，其中含有包括2-甲基-5-氧代-7-苯基 -4-(3， 4， 5-三甲氧苯基)-l， 4， 5， 6， 7， 8-六氫喹啉-3-曱腈在內(nèi)的權(quán)利 要求1-9中任意一項(xiàng)的化合物、以及藥學(xué)上適宜的輔劑。
12. 包括2-甲基-5-氧代-7-苯基-4-(3，4，5-三曱氧苯 基)-l，4，5，6，7，8-六氫喹啉-3-甲腈在內(nèi)的權(quán)利要求1-9中任意一項(xiàng) 的化合物或其可藥用鹽或溶劑化物在制備用于治療生育障礙的藥物中 的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有通式I的二氫吡啶衍生物或其可藥用鹽，其中R¹是(1-6C)烷基、(2-6C)烯基、(2-6C)炔基、苯基、(1-5C)雜芳基；R²、R³獨(dú)立地是(1-4C)烷基、(2-4C)烯基、(2-4C)炔基、(1-4C)烷氧基、(2-4C)烯氧基、(2-4C)炔氧基、鹵素；X是SO₂、CH₂、C(O)或者X不存在；R⁴是(1-6C)烷基、(2-6C)烯基、(2-6C)炔基、(3-6C)環(huán)烷基、(3-6C)環(huán)烯基、(3-6C)環(huán)烷基(1-4C)烷基、(2-6C)雜環(huán)烷基、(2-6C)雜環(huán)烷基(1-4C)烷基、(6-10C)芳基、(6-10C)芳基(1-4C)烷基、(1-9C)雜芳基或(1-9C)雜芳基(1-4C)烷基。該化合物可用于治療生育障礙。
文檔編號(hào)C07D215/54GK101171234SQ200580049691
公開日2008年4月30日 申請(qǐng)日期2005年5月4日 優(yōu)先權(quán)日2005年5月4日
發(fā)明者G·G·吉里茨馬, L·A·范德溫, N·C·R·范斯特拉藤 申請(qǐng)人:歐加農(nóng)股份有限公司