欧美在线观看视频网站,亚洲熟妇色自偷自拍另类,啪啪伊人网,中文字幕第13亚洲另类,中文成人久久久久影院免费观看 ,精品人妻人人做人人爽,亚洲a视频

植物甾體配糖體的制備方法

文檔序號(hào):3476275閱讀:305來(lái)源:國(guó)知局
專利名稱:植物甾體配糖體的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及化學(xué)領(lǐng)域化合物的分離提取方法,具體地,涉及具有抗致病性真菌活性的植物甾體配糖體的制備方法。
背景技術(shù)
甾體配糖體為植物的一類次生代謝產(chǎn)物,廣泛存在于植物界。甾體配糖體是甾體藥物的重要天然原料。近年,甾體配糖體的抗腫瘤活性、心血管活性、鎮(zhèn)痛抗炎活性等已引起廣泛的重視。甾體配糖體對(duì)致病性真菌的抗菌活性至今未有系統(tǒng)的報(bào)道。替告皂甙元的配糖體存在于龍舌蘭科、百合科、茄科、玄參科、菝葜科、以及蒺藜科等多種植物中,對(duì)cAMP磷酸二酯酶,以及人宮頸癌Hela和JTC-26細(xì)胞系具有抑制作用,尚未見(jiàn)有關(guān)抗菌作用的報(bào)道。這類植物甾體配糖體提取分離純化的難度較大,也未有批量生產(chǎn)制備的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明在大量篩選的基礎(chǔ)上,發(fā)現(xiàn)以替告皂甙元為母核的C-27甾體配糖體對(duì)致病性真菌具有顯著的抗菌作用。所涉及的化合物是植物中天然存在的,具有抗致病性真菌活性的甾體配糖體,其結(jié)構(gòu)通式如I所示。其中,甾體母核為(25R)-3β-羥基-5α-螺甾烷[(25R)-spirostan-5α-3β-hydroxyl],又稱替告皂甙元(tigogenin)。取代基R為由3個(gè)或3個(gè)以上的單糖基組成的糖鏈。單糖基可以是半乳糖基、葡萄糖基、鼠李糖基或木糖基等。其糖鏈的內(nèi)側(cè)糖基為半乳糖基,并有一個(gè)葡萄糖基連接在內(nèi)側(cè)半乳糖基的C-4位上。通過(guò)構(gòu)效關(guān)系的研究分析,進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)替告皂甙元配糖體抗菌作用的強(qiáng)度與糖鏈上單糖基的種類、數(shù)量、以及連接方式均有一定的關(guān)系。
結(jié)構(gòu)通式I
本發(fā)明的目的在于提供一種具有抗致病性真菌活性的植物甾體配糖體的制備方法。該方法簡(jiǎn)單易行,適于批量制備和工業(yè)化生產(chǎn),所得到的植物配糖體具有顯著的抗真菌活性,可作為新藥開(kāi)發(fā)的原料,也可作為食品保鮮劑和功能化妝品的原料,可廣泛用于制藥、食品和化妝品等行業(yè)。
為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的上述目的,本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案植物原料經(jīng)干燥粉碎后,用醇提取。提取液過(guò)濾、濃縮、回收溶劑,用水飽和的正丁醇萃取。正丁醇萃取液減壓濃縮,回收溶劑,得到正丁醇提取物。經(jīng)硅膠柱層析分離純化,進(jìn)一步干燥或結(jié)晶,即得到替告皂甙元配糖體的富集部位或單體化合物。經(jīng)過(guò)活性測(cè)定,評(píng)價(jià)其抗真菌的作用。
上述技術(shù)方案中用于提取替告皂甙元配糖體的植物原料為龍舌蘭科龍舌蘭屬(Agave)植物,如番麻(Agave sisalana Perr)、劍麻(A.amaniensis)、金邊龍舌蘭(A.americana var.marginata)、短葉龍舌蘭(A.angustifolia Haw.)、銀邊短葉龍舌蘭(A.angustifolia var.marginata),狹葉龍舌蘭(A.cantala Roxb),灰葉劍麻(A.fourcroydes)等;晚香玉屬(Polianthes)晚香玉(Polianthes tuberosa);絲蘭屬(Yucca)植物,如鳳尾蘭(Yucca gloriosa)、絲蘭(Y.filamentosa)、王蘭(Y.aloifolia)等。蔥科蔥屬(Allium)植物,如薤白(Allium macrostemon)、大蒜(A.sativum)等;Triteleia屬Triteleia lacteal。玉簪科玉簪屬(Hosta)紫玉簪(Hosta longipes)等。知母科知母屬(Anemarrhenae)知母(Anemarrhenaeasphodeloides Burge.)。茄科茄屬(Solanum)植物,如茄(Solanum melongena),龍葵(S.nigrum)等;辣椒屬(Capsicum)植物辣椒(Capsicum annuum)等;夜香樹(shù)屬(Cestrum)植物夜香樹(shù)(Cestrum diurnum)。玄參科毛地黃屬(Digitalis)植物,如毛地黃(Digitalis purpurea),黃花毛地黃(D.lanata)等。菝葜科菝葜屬(Smilax)植物華東菝葜(Smilax sieboldii)等。蒺藜科蒺藜屬(Tribulus)蒺藜(Tribulus terrestris)等。
上述技術(shù)方案中用于提取的醇類溶劑,包括但不限于乙醇、甲醇等低級(jí)醇,以及低級(jí)醇與水的混和溶劑。提取的過(guò)程包括但不限于加熱回流提取、超聲波提取、微波提取、室溫或低溫提取、滲濾等多種技術(shù)和方法。醇提取液經(jīng)減壓回收溶劑后,即得到醇提取物。
上述技術(shù)方案中用于柱層析分離的填充劑為硅膠、鍵合硅膠等。柱層析分離純化用的硅膠填充劑包括但不限于八烷基鍵合硅膠(Rp-8)和十八烷基鍵合硅膠(Rp-18)等。提取物與上述分離材料的重量比為1∶8-15,柱徑高比為1∶10-15。
上述技術(shù)方案中抗真菌活性的評(píng)價(jià)方法如下抗真菌活性測(cè)定參照修訂后的NCCLS(National Committee of the Clinical Laboratory Standards)方法進(jìn)行。以兩性霉素B(Amphotericin B)作為陽(yáng)性對(duì)照藥品。致病性真菌菌株包括白色念珠菌(Candida albicans),光滑念珠菌(Candida,abrata),克柔念珠菌(Candida krusei),新型隱球菌(Cryptococcus neoformans)和煙曲菌(Aspergillus fumigatus)等。待測(cè)樣品溶于二甲基亞砜(DMSO),用0.9%鹽水和20%DMSO逐步稀釋成不同濃度,移至96微孔板中。將預(yù)先準(zhǔn)備好的真菌菌絲體加入到樣品中,使體積達(dá)到200μl。加好菌種后的樣品在培養(yǎng)前和培養(yǎng)后分別在630nm或544ex/590em(Alamer Blue)波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行光密度檢測(cè)。計(jì)算50%抑制濃度(IC50),最小抑制濃度(MIC)和最小殺菌濃度(MFC)。與陽(yáng)性對(duì)照進(jìn)行比較,評(píng)價(jià)樣品的抗真菌活性。若IC50,MIC和MIC值小于20μg/ml,即可認(rèn)為有抗菌活性。
本發(fā)明制備抗真菌活性的甾體配糖體的具體步驟如下1.植物原料去雜、洗凈、烘干、粉碎成粗粉(過(guò)20-40目篩)。
2.將該植物粗粉用低級(jí)醇(可以是甲醇或乙醇)加熱回流提取2-3次,每次提取時(shí)間為2-3小時(shí),過(guò)濾、合并濾液,濃縮、回收溶劑,干燥,得醇提取物。
3.用少量水將醇提取物溶解,過(guò)濾,以水飽和的正丁醇進(jìn)行萃取。萃取3次后,合并正丁醇萃取液,減壓濃縮,回收正丁醇。將殘留的濃縮液緩緩傾入大孔吸附樹(shù)脂(如DiaionHP20SS,D-101,KB-8等)層析柱的上端。層析柱的柱徑高比為1∶10-15,正丁醇提取物與大孔吸附樹(shù)脂的重量比為1∶8-15。以不同濃度的低級(jí)醇(可以是甲醇或乙醇)梯度洗脫,同時(shí)用薄層層析法檢測(cè)指導(dǎo)洗脫。薄層層析的條件為氯仿-甲醇-水(70∶30∶5)為展開(kāi)劑,10%的硫酸-乙醇液為顯色劑。收集含有甾體配糖體的洗脫液,合并,濃縮,回收溶劑,得醇洗脫物。
4.將醇洗脫物用少量甲醇溶解,傾入硅膠層析柱的上端。柱徑高比為1∶10-15,醇洗脫物與硅膠的重量比為1∶30-50。以不同濃度的氯仿-甲醇-水梯度洗脫,用薄層層析法檢測(cè)指導(dǎo)洗脫。薄層層析的條件為氯仿-甲醇-水(70∶30∶5)為展開(kāi)劑,10%的硫酸-乙醇液為顯色劑。收集含有甾體配糖體的洗脫液,合并,濃縮,回收溶劑,得到淡黃色粉術(shù)狀的甾體配糖體富集部位。
5.將淡黃色粉末狀的甾體配糖體富集部位用少量甲醇溶解,緩緩傾入鍵合硅膠(如Rp-8,Rp-18等)層析柱上端。層析柱的柱徑高比為1∶10-15,提取物與鍵合硅膠的重量比為1∶8-15。以不同濃度的低級(jí)醇(可以是甲醇或乙醇)梯度洗脫。同時(shí)用反相硅膠薄層層析法(Rp-8或Rp-18薄層層析板)檢測(cè)指導(dǎo)洗脫。薄層層析的條件為甲醇-水(6∶4至9∶1)為展開(kāi)劑,10%的硫酸-乙醇液為顯色劑。收集含有甾體配糖體的洗脫液,合并,濃縮,回收溶劑,得到甾體配糖體結(jié)晶形或粉術(shù)狀單體。
6.甾體配糖體的富集部位和純品的干燥,可用電熱恒溫真空干燥法,也可采用冷凍干燥、噴霧干燥和微波干燥法等。
7.應(yīng)用核磁共振圖譜(NMR)和質(zhì)譜(MS)等技術(shù),測(cè)定甾體配糖體單體的化學(xué)結(jié)構(gòu),并用高壓液相色譜(HPLC)對(duì)富集部位和單體進(jìn)行定量分析。
8.高壓液相色譜(HPLC)的分析條件如下;儀器與試劑HPLC儀器為Alliance高效液相色譜儀,自動(dòng)進(jìn)樣器,蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)。甲醇為色譜純,水為超純水,其余溶劑均為分析純。
色譜條件及檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇用十八烷基硅膠為填充劑(如大連依利特C18ODS色譜柱,4.6×150mm,5μm);甲醇-水(90∶10,V/V)為流動(dòng)相。柱溫25℃,流速1ml/min。ELSD檢測(cè)器漂移管溫度40℃;氣體(N2)壓力2×105Pa。
實(shí)驗(yàn)材料精密稱取甾體配糖體單體1mg,加1ml甲醇充分溶解后,即得對(duì)照品溶液。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)(1)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲醇-水溶液(90%,60min)為流動(dòng)相;流速1ml/min;柱溫25℃。理論板數(shù)按甾體配糖體峰計(jì)算應(yīng)不低于10000。
(2)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲醇-水溶液(70%,30min)為流動(dòng)相;流速1ml/min;柱溫25℃。理論板數(shù)按甾體配糖體峰計(jì)算應(yīng)不低于10000。
(3)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;流動(dòng)相為甲醇-水溶液(30-90%,30min),線性梯度洗脫;流速1ml/min;柱溫25℃。理論板數(shù)按甾體配糖體計(jì)算應(yīng)不低于10000。
系統(tǒng)精密度考察以甾體配糖體含量為指標(biāo),RSD為0.1%,系統(tǒng)精密度良好。
重現(xiàn)性考察以甾體配糖體含量為指標(biāo),RSD為0.95%,重現(xiàn)性良好。
穩(wěn)定性考察以甾體配糖體含量為指標(biāo),考察24小時(shí),RSD為0.59%,甾體配糖體穩(wěn)定性良好。
含量測(cè)定由上述工藝制備的甾體配糖體的含量根據(jù)產(chǎn)品的制備工藝與質(zhì)量要求可以有不同含量的產(chǎn)品。其含量范圍可在50-98%之間。
經(jīng)過(guò)上述制備工藝提取分離得到的甾體配糖體,無(wú)有機(jī)溶劑的殘留,可直接作為制藥的天然原料,也可作為食品和化妝品的天然添加劑和天然保鮮劑使用。
具體實(shí)施例方式下面以本發(fā)明的實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容,但本發(fā)明的內(nèi)容并不局限于此。
實(shí)施例1龍舌蘭葉中具有抗致病性真菌活性的甾體配糖體的制備龍舌蘭(Agave americana L.)為龍舌蘭科龍舌蘭屬多年生大型草本植物。原產(chǎn)美洲熱帶,我國(guó)華南和西南各省區(qū)引種栽培,在其它大部分省區(qū)為常見(jiàn)的溫室植物,供觀賞。龍舌蘭葉為制船纜、繩索、麻袋、造紙等的原料,同時(shí),葉中富含甾體皂甙,水解后得到的甾體皂甙元是生產(chǎn)甾體激素藥物的重要天然原料。龍舌蘭性溫,平,味酸,澀,具有止血消炎,抑制霉菌生長(zhǎng)的作用??芍委熥訉m出血,盆腔炎,皮膚疥癬等病癥。
龍舌蘭鮮葉汁經(jīng)自然發(fā)酵,得到的沉淀物6.5kg,用甲醇加熱回流提取3次,每次3小時(shí)。提取液合并后減壓濃縮,回收甲醇,用等體積飽和的正丁醇萃取4次。合并正丁醇萃取液,減壓濃縮,得到正丁醇提取物1.37kg。取1/4正丁醇提取物經(jīng)硅膠柱層析分離,氯仿∶甲醇∶水(7∶2.5∶0.4)洗脫,得到3個(gè)洗脫部分。其中,第2部分(360g)經(jīng)硅膠(氯仿∶甲醇∶水洗脫)和鍵合硅膠(RP-8)(甲醇-水洗脫)反復(fù)柱層析分離純化,得到化合物A-1(200mg)。第3部分(430g)經(jīng)同樣的分離純化,得到化合物A-2(378mg)。
實(shí)施例2晚香玉根莖中具有抗致病性真菌活性的甾體配糖體的制備晚香玉(Polianthes tuberosa L.)是龍舌蘭科晚香玉屬的多年生草本植物,原產(chǎn)南美墨西哥。我國(guó)四川,廣東和云南等地大面積引種栽培,主要供香料或觀賞用。
晚香玉新鮮球莖24kg,粉碎后用甲醇回流提取3次,每次4小時(shí)。提取液合并,減壓濃縮,回收甲醇,用等體積飽和的正丁醇萃取4次。合并正丁醇萃取液,減壓濃縮,得到正丁醇提取物890g。取450g正丁醇提取物,用硅膠柱層析分離,氯仿-甲醇-水(7∶3∶0.5)洗脫,得到4個(gè)洗脫部位。其中,第3部分經(jīng)硅膠(氯仿∶甲醇∶水洗脫)和鍵合硅膠(RP-8)(甲醇-水洗脫)反復(fù)柱層析分離純化得到化合物P-1(210mg)。第4部分按同樣的方式反復(fù)柱層析分離純化得到化合物P-2(2g)。
以上4個(gè)甾體配糖體的結(jié)構(gòu)如

圖1所示,結(jié)構(gòu)鑒定如下化合物A-1白色粉末,[α]D26-48.0°(c=0.01,MeOH)。IR(KBr)vmax3428,2933,1377,1157,1072,980,921,898(強(qiáng)度898>921),865cm-1。負(fù)離子FAB-MS m/z 1179[M(C56H92O26)-H]-,1047[M-H-132]-,901[M-H-132-146]-,871[M-H-146-162]-,739[M-H-132-146-162]-,577[M-H-132-146-162-162]。1H NMR(pyridine-d5)δ0.65(s,CH3-19),0.68(d,J=5.1Hz,CH3-27),0.81(s,CH3-18),1.02(d,J=7.4Hz,CH3-21),1.61(d,J=7.0Hz,Rha H-6),348(t,J=11.0Hz,H-26a),3.59(dd,J=3.5,11.0Hz,H-26b),3.93(m,H-3),4.46(m,H-16),4.86(d,J=7.4Hz,H-gal-1),5.15(d,J=7.8Hz,H-glc-1),5.11(d,J=7.4Hz,H-xyl-1),5.47(d,J=7.9Hz,H-glc’-1),6.09(br s,RhaH-1)。13C NMR(pyridine-d5)C1-C2737.3,30.0,77.6,35.0,44.9,29.0,32.5,35.4,54.6,35.9,21.4,40.3,40.9,56.6,32.2,81.2,63.0,16.7,12.4,42.0,15.0,109.3,31.9,29.4,30.7,67.0,17.4;Gal1-6102.5,73.2,75.3,79.6,75.4,60.8;Glc 1-6104.7,81.0,87.4,70.4,77.6,63.0;Glc’1-6104.4,76.3,83.8,69.6,78.5,62.4;Xyl1-5104.9,75.6,78.5,70.7,67.2;Rha 1-6102.8,72.3,72.6,74.2,69.8,18.6?;衔顰-1鑒定為(25R)-5α-螺甾烷-3β-醇-3-O-α-L-鼠李吡喃糖基-(1-3)-β-D-葡萄吡喃糖基-(1-2)-[β-D-木吡喃糖基-(1-3)]-β-D-葡萄吡喃糖基-(1-4)-β-D-半乳吡喃糖苷。
化合物A-2白色粉末,[α]D14-70.0°(c=0.03,MeOH)。IR(KBr)vmax3426,2932,2866,1705,1456,1374,1158,1072,982,920,899,867cm-1(強(qiáng)度899>920)。負(fù)離子FAB-MS m/z 1209[M(C57H94O27)-H]-,1047[M-H-162]-,901[M-H-146-162]-,739[M-H-146-162-162]-。HR FAB-MS m/z 1209.5941[M-H]-(calcd.for C57H94O271209.5904)。1H NMR(pyridine-d5)δ0.72(s,CH3-19),0.76(d,J=5.1Hz,CH3-27),0.89(s,CH3-18),1.20(d,J=7.0Hz,CH3-21),1.70(d,J=6.3Hz,Rha H-6),3.43(t,J=10.5Hz,H-26a),3.56(br d,J=10.5Hz,H-26b),3.68(m,H-3),4.41(m,H-16),4.95(d,J=7.6Hz,H-gal-1),5.21(d,J=7.9Hz,H-glc-1),5.27(d,J=7.6Hz,H-glc’’-1),5.57(d,J=7.9Hz,H-glc’-1),6.22(br s,Rha H-1)。13C NMR(pyridine-d5)C1-C2737.3,30.0,77.6,34.9,44.7,29.0,32.5,35.3,54.5,35.9,21.4,40.2,40.9,56.5,32.2,81.2,63.1,16.7,12.4,42.1,15.0,109.4,31.9,29.3,30.7,67.0,17.4;Gal 1-6102.5,73.2,75.6,80.1,75.6,60.8;Glc 1-6104.7,81.2,88.8,70.8,77.6,63.1;Glc’1-6104.5,76.5,83.3,69.2,78.5,62.2;Glc”1-6104.5,75.4,78.6,71.6,78.4,62.5;Rha 1-6102.8,72.4,72.6,74.2,69.8,18.7?;衔顰-2鑒定為龍舌蘭苷G(agamenoside G)。
化合物P-1白色粉術(shù),[α]D25-45.2°(c=0.08,pyridine)。IR(KBr)vmax3412,2931,1455,1374,1158,1070,981,921,898,865cm-1(強(qiáng)度898>921)。負(fù)離子FAB-MS m/z 1033[M(C50H82O22)-H]-,901[M-H-132]-,871[M-H-162]-,739[M-H-132-162]-,577[M-H-132-162-162]-。1H NMR(pyridine-d5)60.62(s,CH3-19),0.69(d,J=5.4Hz,CH3-27),0.81(s,CH3-18),1.13(d,J=6.9Hz,CH3-21),3.50,3.58(2H,H-26),3.67(m,H-3),4.38(m,H-16),4.81(d,J=7.8Hz,H-gal-1),5.16(d,J=7.9Hz,H-glc-1),5.20(d,J=7.8Hz,H-xyl-1),5.53d,J=7.4Hz,H-glc’-1)。11C NMR(pyridine-d5)C1-C2737.3,30.0,77.8,34.9,44.7,29.0,32.5,35.3,54.5,35.9,21.4,40.2,40.9,56.5,32.2,80.0,63.1,16.7,12.4,42.1,15.1,109.3,31.9,29.3,30.7,67.0,17.4;Gal 1-6102.5,73.2,75.4,80.0,75.6,60.7;Glc 1-6105.2,81.2,86.9,70.5,77.6,63.1;Glc’1-6104.9,76.2,77.8,71.1,78.7,62.5;Xyl 1-5105.0,75.1,78.7,70.8,67.3。因此,化合物P-1鑒定為(25R)-5α-螺甾烷-3β-醇-3-O-β-D-葡萄吡喃糖基-(1-2)-[β-D-木吡喃糖基-(1-3)]-β-D-葡萄吡喃糖基-(1-4)-β-D-半乳吡喃糖苷。
化合物P-2白色粉末,[α]D25-43.7°(c=0.05,pyridine)。IR(KBr)vmax3418,2932,1448,1375,1158,1072,981,922,898,864cm-1(強(qiáng)度898>922)。負(fù)離子FAB-MS m/z 1165[M(C55H90O26)-H]-,1033[M-H-132]-,871[M-H-132-162]-,739[M-H-132-162-132]-,577[M-H-132-162-132-162]-。1HNMR(pyridine-d5)δ0.62(s,CH3-19),0.69(d,J=4.1Hz,CH3-27),0.81(s,CH3-18),1.13(d,J=6.6Hz,CH3-21),3.48,3.55(2H,m,H-26),3.65(m,H-3),4.34(m,H-16),4.81(d,J=7.8Hz,H-gal-1),5.10(d,J=7.6Hz,H-glc-1),5.07(d,J=7.4Hz,H-xyl-1),5.14(d,J=7.8Hz,H-xyl’-1),5.53d,J=6.9Hz,H-glc’-1)。13C NMR(pyridine-d5)C1-C2737.3,30.0,77.8,34.9,44.8,29.0,32.5,35.4,54.5,35.9,21.4,40.3,40.9,56.6,32.3,81.3,63.1,16.8,12.4,42.1,15.2,109.4,31.9,29.4,30.7,67.0,17.5;Gal 1-6102.6,73.2,75.1,79.7,75.4,60.8;Glc 1-6104.9,80.8,86.9,70.5,77.6,63.0;Glc’1-6104.0,75.1,86.9,69.2,78.3,62.2;Xyl 1-5104.9,75.5,78.4,70.8,67.2;Xyl 1-5106.2,75.4,77.6,70.8,67.3?;衔颬-2鑒定為(25R)-5α-螺甾烷-3β-醇-3-O-β-D-木吡喃糖基-(1-3)-β-D-葡萄吡喃糖基-(1-2)-[β-D-木吡喃糖基-(1-3)]-β-D-葡萄吡喃糖基-(1-4)-β-D-半乳吡喃糖苷。
以上化合物的抗真菌活性測(cè)定結(jié)果如下 Candida albicans白色念珠菌Candida glabrata光滑念珠菌Candida krusei克柔念珠菌
Cryptococcus neoformans新型隱球菌Aspergillus fumigatus煙曲菌IC5050%抑制濃度(50%Inhibitory Concentration)(μg/mL)MIC最小抑制濃度(Minimum Inhibitory Concentration)(μg/mL)MFC最小殺菌濃度(Minimum Fungicidal Concentration.)(μg/mL)“-”20μg/mL濃度范圍內(nèi)無(wú)活性。
權(quán)利要求
1.植物甾體配糖體的制備方法,其特征是植物原料經(jīng)干燥粉碎后,用醇提取,提取液過(guò)濾、濃縮、回收溶劑,得醇提取物,醇提取物用水飽和的正丁醇萃取,正丁醇萃取液減壓濃縮,回收溶劑,得到正丁醇提取物,經(jīng)硅膠柱層析分離純化,進(jìn)一步干燥或結(jié)晶,得到替告皂甙元配糖體的富集部位或單體化合物即植物甾體配糖體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法,其特征在于植物原料包括但不限于龍舌蘭科龍舌蘭屬(Agave)、絲蘭屬(Yucca)、晚香玉屬(Polianthes);蔥科蔥屬(Allium)、Triteleia屬;玉簪科玉簪屬(Hosta);知母科知母屬(Anemarrhenae);風(fēng)信子科Chlorogalum屬;菝葜科菝葜屬(Smilax);茄科茄屬(Solanum)、辣椒屬(Capsicum)、夜香樹(shù)屬(Cestrum);玄參科毛地黃屬(Digitalis);蒺藜科蒺藜屬(Tribulus)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法,其特征在于醇提取包括但不限于使用乙醇、甲醇等低級(jí)醇為溶劑進(jìn)行提取,也包括使用低級(jí)醇與水的混和溶劑進(jìn)行提取;提取過(guò)程包括但不限于加熱回流提取、超聲波提取、微波提取、室溫或低溫提取、滲濾方法。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于硅膠柱層析分離純化用的硅膠填充劑包括但不限于八烷基鍵合硅膠和十八烷基鍵合硅膠,提取物與鍵合硅膠的重量比為1∶8-15,柱徑高比為1∶10-15。
全文摘要
植物甾體配糖體的制備方法,植物原料經(jīng)干燥粉碎后,用醇提取,提取液過(guò)濾、濃縮、回收溶劑,得醇提取物,醇提取物用水飽和的正丁醇萃取,正丁醇萃取液減壓濃縮,回收溶劑,得正丁醇提取物,經(jīng)硅膠柱層析分離純化,進(jìn)一步干燥或結(jié)晶,得到替告皂甙元配糖體的富集部位或單體化合物即植物甾體配糖體。
文檔編號(hào)C07J75/00GK1803827SQ20061001065
公開(kāi)日2006年7月19日 申請(qǐng)日期2006年1月25日 優(yōu)先權(quán)日2006年1月25日
發(fā)明者楊崇仁, 張穎君, 李興從, 張影 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所
網(wǎng)友詢問(wèn)留言 已有0條留言
  • 還沒(méi)有人留言評(píng)論。精彩留言會(huì)獲得點(diǎn)贊!
1
延庆县| 汾西县| 南充市| 宜昌市| 绥江县| 浙江省| 鹤山市| 冀州市| 阳信县| 疏附县| 彭山县| 西乌| 新源县| 阿拉尔市| 浦东新区| 望城县| 威海市| 新泰市| 游戏| 油尖旺区| 上犹县| 抚远县| 湄潭县| 霍邱县| 襄城县| 来凤县| 洛宁县| 个旧市| 江永县| 宝丰县| 忻州市| SHOW| 秦安县| 民勤县| 南雄市| 丰原市| 嘉荫县| 南靖县| 深圳市| 九江县| 宝山区|