專利名稱：紅景天提取物、含有該提取物的藥物組合物及制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種紅景天提取物，屬藥物領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
紅景天性味甘，澀，寒，用于活血止血，清肺止咳。治療肺炎咳嗽，咯血咳血， 婦女白帶，外用治跌打損傷、燙火燒傷。近年來研究表明紅景天具有抗缺氧、抗寒冷、 抗疲勞、抗微波輻射及興奮大腦和脊髓的作用。可以提高體力和腦力勞動的工作效率，
延緩機體衰老，防治老年疾病等功能。景天科紅景天屬植物(Rhodiola L.)為多年生 草本或亞灌木植物，全世界的紅景天屬共有90多種，我國約有80多種。
目前，關(guān)于紅景天制劑，報道較多，如JP2001240552提供一種安全性高，純天 然的a-淀粉酶抑制劑，其中包括紅景天和其它植物的提取物。不同點 一是本專利產(chǎn) 品含有除紅景天提取物之外的其它提取物，活性成分不明確；二是此專利產(chǎn)品中涉及 的紅景天原料品種不同。JP2柳0128795醛糖還原酶抑制劑，用于糖尿病外周神經(jīng)損傷 比如肌萎縮，產(chǎn)品含有紅景天屬植物的粉末或提取物作為有效成分。優(yōu)選Rhodiola sacra,該專利提供了服用劑量，但是該產(chǎn)品使用的是包括紅景天的全株的粉末或者醇、 水提取物，且用途為糖尿病外周神經(jīng)損傷。JP2000128793a-葡萄糖苷酶抑制劑，產(chǎn)品 含有紅景天屬植物的粉末或提取物作為有效成分，優(yōu)選Rhodiola sacra，專利文本提供 了服用劑量，但是本專利產(chǎn)品使用的是包括紅景天的全株的粉末或者醇、水提取物。
目前針對降血糖的報道有趙文，王庭欣，蔣東升，薔薇紅景天提取液對糖尿病模型 小鼠胰腺功能的修復作用，中國比較醫(yī)學雜志，2003， 13 (5): 309;報道蕃薇紅景天 提取液(醇、水粗提)能明顯升高四氧嘧啶型糖尿病小鼠的血清胰島素水平，且能明 顯改善四氧嘧啶對小鼠胰島組織所造成的損傷，提示薔薇紅景天提取液對糖尿病模型 小鼠胰腺功能有一定的修復作用。趙文，王庭欣，蔣東升等，薔薇紅景天對四氧嘧啶 糖尿病小鼠血糖的調(diào)節(jié)作用，衛(wèi)生研究，28: 362-263薔薇紅景天提取液的作用，醇、 水粗提物。所述的試驗結(jié)果表明，紅景天提取物在劑量為2500mg/kg.BW時能較明顯 地降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的空腹血糖值，并增強其糖耐量能力，而在劑量為5000mg /kg.BW時，其降空腹血糖的效果不明顯，但卻可使模型動物的糖耐量能力明顯增強。 同時，紅景天提取液在1250 — 5000mg/kg.BW劑量范圍內(nèi)，可以使四氧嘧啶糖尿病小 鼠的肝糖原和血清鈣含量明顯增加，且血清尿素氟含量有一定程度的降低。作者認為 紅景天提取液的降糖作用可能與其富含鉻相關(guān)。程秀娟、邸琳、吳巖等，高山紅景天 多糖降血糖作用——-不同給藥途徑的比較，中國中藥雜志1996年第21巻第11期 686491， Rhodiola sachalinensis多糖提取物具有降血糖作用，該報道使用的紅景天 為Rhodiola sachalinensis。
但是由于紅景天種屬來源復雜，而且所含成分復雜，藥效物質(zhì)不能明確，臨床使
用難于有效控制藥物針對不同適應癥的用法和用量，穩(wěn)定性、可控性均較差，目前也
沒有相關(guān)針對其不同適應癥的相應指標成分的報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供了一種穩(wěn)定、可控的紅景天提取物，本發(fā)明的 另一解決的技術(shù)問題是提供了該提取物的制備方法和用途。
本發(fā)明提供了一種紅景天提取物，它是由紅景天為原料經(jīng)提取制備而成的提取物， 該提取物含有苯丙素苷類rosavins的重量百分含量為3.0-10.0%，其中苯丙素苷類 rosavins是由肉桂醇苷rosavin、 rosarin、 rosin組成。其中rhodiola rosea在中國 稱為玫瑰紅景天或薔薇紅景天，其成分苯丙素苷類rosavins(包括rosavin，rosarin，rosin) 是rhodiola rosea區(qū)別于其它種紅景天的主要特點，在紅景天植物中，rosavins只存在 于rhodiola rosea的根莖中。
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所述的紅景天來源于景天科紅景天屬rhodiola rosea的根莖。
進一歩地，本發(fā)明紅景天提取物中含有rosavins的重量百分含量為3.0_5.0%。
其中，該提取物中還含有紅景天苷salidroside，其中紅景天苷salidroside的重量
百分含量為0.5-1.0%。
進一歩地，提取物中含有rosavins的重量百分含量為3.0-5.0%,紅景天苷
salidroside的重量百分含量為0.8-1.0%。
本發(fā)明還提供了該紅景天提取物的制備方法，它包括如下歩驟
a、 取紅景天rhodiola rosea為原料，用水或乙醇，或含水醇類提取、濃縮；
b、 取a歩驟所述的濃縮液，上大孔吸附樹脂柱，用水洗凈不吸附的雜質(zhì)，再用 50-70%乙醇洗，得洗脫液，將洗脫液干燥。
本發(fā)明提供了該紅景天提取物在制備具有抑制a -葡萄糖苷酶活性的藥物中的用途。
本發(fā)明還提供了該紅景天提取物在制備具有降血糖的藥物中的用途。 其中，所述的藥物是具有降低餐后血糖作用的藥物。
以上述所說的本發(fā)明紅景天提取物，與藥學上可接受的輔助添加成分混合后，按 相應的常規(guī)藥物制劑方法，可以制備a—葡萄糖苷酶抑制劑類的藥物。例如，與在口 服制劑中可以被接受的如崩解劑、賦形劑、潤滑劑、粘合劑、填充劑等常用的輔助添 加成分混合后，按常規(guī)的操作方法和過程，可以制成片劑、丸劑、膠囊劑或多種相應 的緩釋劑、控釋劑等固體口服制劑形式的藥物。
本發(fā)明紅景天提取物藥效明顯，可控性強，為臨床提供了一種新的選擇。
顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)和慣用手段，在不脫離本 發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以作出其它多種形式的修改、替換或變更。
以下通過實施例形式的具體實施方式
，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進一步的詳細說 明。但不應將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例，凡基于本發(fā)明上述 內(nèi)容所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。


圖l本發(fā)明紅景天提取物對a—淀粉酶抑制作用 圖2本發(fā)明紅景天提取物對麥芽糖酶抑制作用 圖3本發(fā)明紅景天提取物對蔗糖酶的抑制作用
具體實施例方式
實施例l本發(fā)明紅景天提取物的制備
200g紅景天rhodiola rosea根莖，2000ml70。/。的乙醇回流提取1小時，過濾，再 用1000ml70。/。的乙醇提取1小時，過濾，濾渣用1000加170%的乙醇再回流提取1小時， 合并提取液，濃縮，濃縮液上D101樹脂，先用水洗脫，再用50%的乙醇洗脫，濃縮 干燥乙醇洗脫液，得13.5g提取物，HPLC檢測含rosavins的百分含量為3.51%, salidroside的百分含量為0.93%。
實施例2本發(fā)明紅景天提取物的制備-
200g紅景天rhodiola rosea根莖，2000ml70。/。的乙醇回流提取1小時，過濾，再 用1000ml70n/。的乙醇提取1小時，過濾，濾渣用1000加170%的乙醇再回流提取1小時， 合并提取液，濃縮，濃縮液上D101樹脂，先用水洗脫，再用70%的乙醇洗脫，濃縮 干燥乙醇洗脫液，得13.6g提取物，HPLC檢測含rosavins的百分含量為4.18%， salidroside的百分含量為0.76%。
實施例3本發(fā)明紅景天提取物的制備
200g紅景天rhodiola rosea根莖，2000ml70V。的乙醇回流提取1小時，過濾，再 用1000ml70V。的乙醇提取1小時，過濾，濾渣用1000扱170%的乙醇再回流提取1小時， 合并提取液，濃縮，濃縮液上D101樹脂，先用水洗脫，再用30%的乙醇洗脫，再用 70%乙醇洗脫，濃縮干燥70V。乙醇洗脫液，得10.9g提取物，HPLC檢測含rosavhis的 百分含量為8.04%,salidroside的百分含量為0.57%。
在上述基本工藝不變的情況下，進行條件參數(shù)的合理選擇，就能得到不同規(guī)格的 本發(fā)明紅景天提取物。
實施例4紅景天粗提物的制備-
200g紅景天根莖，2000加170%的乙醇回流提取1小時，過濾，再用1000ml7(T/o的 乙醇提取l小時，過濾，濾渣用l(M)0ml7O。/。的乙醇再回流提取l小時，合并提取液， 濃縮干燥，得4Sg, HPLC檢測，含rosavins的百分含量為1.25%， salidroside的百分 含量為1.35%。
實施例5本發(fā)明藥物的制備
將以上提取物(實施例1-3制備的提取物)粉末，用一步制粒機制粒，以水為潤 濕劑，進風溫度60—80'C，出風溫度40—60"C，得顆粒，分裝得顆粒劑產(chǎn)品。
將以上提取物(實施例1-3制備的提取物)粉末或者顆粒，裝入膠囊得膠囊劑產(chǎn)品。
按以上方法加工成顆粒后，再加入適量的潤濕劑及崩解劑,壓片，每片0.45—(K55g， 高效包衣機包衣，分裝得片劑產(chǎn)品。 實施例6本發(fā)明紅景天提取物檢測方法 rosavins的檢測方法
一、 色譜條件
Inertsil ODS 150 X 4.6mm 3.5um
流動相流動相在0-22分鐘時0.1%磷酸乙腈溶液的水由90%變?yōu)?0%。
柱溫室溫
流速l.Oml/min 檢測波長254nm 進樣量lOul 靈敏度0.01 AUFS
二、 溶液制備
1、 標準溶液的制備
精密稱取經(jīng)五氧化二磷干燥至恒重的rosavin、 rosarin、 rosin對照品，各加甲醇 制成每lml分別含0JL5mg的溶液，作為對照品溶液。
再分別吸取對照液2、 4、 6、 8、 10ral于50ml容量瓶中用甲醇配制成五種不同濃 度的對照品溶液。
2、 供試品溶液的制備
分別精密稱定兩份樣品0.6g于兩個100ml容量瓶中。加約70ml的分析甲醇，于 超聲波中超聲溶解，放冷至室溫，定容至刻度，然后用0.45um微孔濾膜過濾即得待測 樣品。
三、 樣品測定
在上述色譜條件下，待儀器穩(wěn)定，基線平穩(wěn)后，進樣溯定；含量按外標法計算。 紅景天苷檢測方法
一、 色譜條件
Inertsil ODS 150 X 4.6mm 3.5um
流動相水:甲醇:磷酸(體積比80:20:0.2)
柱溫室溫
流速l.Oml/min 檢測波長225nm 進樣量lOul 靈敏度0.01 AUFS
二、 溶液的制備
1、 標準溶液的制備
精密稱取經(jīng)五氧化二磷干燥至恒重的紅景天苷對照品，各加甲醇制成每1ml分別 含0.15mg的溶液，作為對照品溶液。
再分別吸取對照液2、 4、 6、 8、 10ml于50ml容量瓶中用甲醇配制成五種不同濃 度的對照品溶液。
2、 供試品溶液的制備
分別精密稱定兩份樣品0.6g于兩個100ml容量瓶中。加約70mi的分析甲醇，于 超聲波中超聲溶解，放冷至室溫，定容至刻度，然后用0.45um微孔濾膜過濾即得待測樣品。
3、樣品測定-
在上述色譜條件下，待儀器穩(wěn)定，基線平穩(wěn)后，進樣測定；含量按外標法計算。 以下通過藥效學試驗證明本發(fā)明的有益效果。
試驗例1本發(fā)明紅景天提取物對a—葡萄糖苷酶的抑制活性測定-樣品分別為1、實施例l所制得的產(chǎn)品； 2、實施例2所制得的產(chǎn)品；
3、實施例3所制得的產(chǎn)品； 4、實施例4所制得的產(chǎn)品。
實驗方案-
1) 以淀粉為底物時，紅景天提取物對a—葡萄糖苷酶的抑制活性測定 將實施例1-4制備的紅景天提取物分別溶于生理鹽水，配制成濃度為lmg/ml、
0.5mg/ml、 025mg/ml、 0.125mg/mi、 0.0625mg/ml紅景天提取物溶液，再分別將此三 種溶液20微升與2微升a—淀粉酶(0.1U/ul，購自SIGMA公司)混合，在37flC溫 育10分鐘，加入1%淀粉溶液，室溫孵育3 5分鐘，用碘滴定顯色法，在630nm波 長下測定OD值，通過淀粉消耗量計算a—葡萄糖苷酶活性抑制率；設(shè)定空白對照， 陰性對照，陽性對照(拜唐蘋(生產(chǎn)廠家北京拜耳醫(yī)藥保健有限公司))，抑制率=(樣 品一陰性/空白一陰性)*100%
2) 以麥芽糖為底物時，紅景天提取物對a—葡萄糖苷酶的抑制活性測定 將實施例1-4制備的紅景天提取物分別溶于生理鹽水，配制成lmg/ml、 0.1mg/ml、
lug/ml、 (Uug/ml溶液，再分別將此三種溶液20微升與2微升a —葡萄糖苷酶 (0.02U/ul，購置SIGMA公司)混合，在37"C溫育10分鐘，然后加入麥芽糖，370C 繼續(xù)溫育10分鐘；采用葡萄糖氧化酶法，在4卯mn波長下測定OD值，以葡萄糖的 生成量，計算a—葡萄糖苷酶活性抑制率；設(shè)定空白對照，陰性對照，陽性對照(拜 唐蘋)。酶活性抑制率=(陰性一樣品)/陰性一空白)*100%。
3) 以蔗糖為底物時，紅景天提取物對a—葡萄糖苷酶的抑制活性測定 將實施例l"4制備的紅景天提取物分別溶于生理鹽水，配制成lmg/ml、 0.1mg/ml、
0.01mg/ml、0.001mg/ml溶液，再分別將此三種溶液20微升與2微升轉(zhuǎn)化酶(0.106U/ul， 購置SIGMA公司)混合，在37QC溫育10分鐘，然后加入蔗糖，37flC繼續(xù)溫育10 分鐘；采用葡萄糖氧化酶法，在490波長下測定OD值，以葡萄糖的生成量，計算a 一葡萄糖苷酶活性抑制率；同時設(shè)定空白對照，陰性對照，陽性對照(拜唐蘋)。酶活 性抑制率=(陰性一樣品)/ (陰性一空白)*100%.
圖1、 2、 3是紅景天提取物對a—葡萄糖苷酶活性的抑制效應的測定結(jié)果?？v座 標代表酶活性抑制率，橫座標代表紅景天提取物濃度。圖中比較了以麥芽糖、庶糖、 淀粉為底物時，紅景天提取物對a—葡萄糖苷酶的抑制活性。
圖1結(jié)果表明，紅景天提取物體外對a—淀粉酶有顯著的抑制作用，其中以2號對淀 粉酶抑制作用最強，其次是1號、3號、4號。
圖2結(jié)果表明，紅景天提取物體外對麥芽糖酶有顯著的抑制作用。不同含量的提
取物抑制作用相當，沒有明顯的差異。
圖3結(jié)果表明，紅景天提取物體外對蔗糖酶有顯著的抑制作用。不同含量的提取
物抑制作用相當，沒有明顯的差異。
結(jié)論以上實驗結(jié)果表明，本發(fā)明紅景天提取物體外對a—葡萄糖苷酶有顯著抑 制作用。并且不同含量的提取物針對于不同的作用機理產(chǎn)生了不同的抑制作用。特別 是紅景天提取物體外對a—淀粉酶有顯著的抑制作用，其中以2號對淀粉酶抑制作用 最強，其次是1號、3號、4號，即所用的本發(fā)明紅景天提取物對a—淀粉酶的抑制作 用強于紅景天粗提物。
試驗例2本發(fā)明藥物體內(nèi)實驗(四氧嘧啶誘導糖尿病小鼠淀粉負荷糖耐量試驗)
取體重22-26克昆明種小鼠，腹腔注射200毫克/公斤四氧嘧啶，72小時后測定血 糖，選取血糖值在13mmo 1/L以上的小鼠，按每組10只、雌雄各半分為6組，即糖 尿病模型組、紅景天粗提物組(實施例4提供粗提物的制備方法)，紅景天提取物(實 施例l制備)高劑量組、中劑量組、低劑量組，給藥10分鐘(模型組灌胃生理鹽水)， 各組均灌胃淀粉5克/公斤，于Omin30min，60min， 120min后取眶后靜脈叢血，以葡 萄糖氧化酶法在96孔板中測定血糖含量，結(jié)果見表l:
_表1對四氧嘧啶致糖尿病小鼠糖耐量的影響(x ± s )
組別劑量(g/kg) 血糖值(mmol/L) ~
0 min 30m i n 60m i n 120m i n
與模型組比較，*P<0.05， **P<0.01。
結(jié)果分析從表可以看出，糖尿病小鼠給予淀粉后，血糖值明顯升高。紅景天提 取物能抑制糖尿病小鼠的血糖值升高。粗提物組的血糖值有下降趨勢，但與對照組比 較，沒有顯著性意義。
通過上述實施例，經(jīng)過體外實驗證明本發(fā)明紅景天提取物體外對a—葡萄糖苷酶 有顯著抑制作用。動物實驗表明通過淀粉負荷糖耐量試驗，給予劑量為IOO — 400mg/kg.bW本發(fā)明紅景天提取物后，顯著降低糖尿病小鼠淀粉負荷后的血糖升高， 對控制餐后血糖的升高非常有效，可以用于I型特別是II型糖尿病以及糖尿病并發(fā)癥 的治療。
上述藥效學試驗證明，本發(fā)明紅景天植物rhodiola rosea,以rosavins進行質(zhì)量控 制。試驗證明在rosavins的重量百分含量為3.0-10.0%,質(zhì)量穩(wěn)定，尤其在ro幼vins 的重量百分含量為3.0-5.0%時效果最佳。同時對提取物中紅景天苷salidroside進行質(zhì) 量控制，通過實驗證明，本發(fā)明藥物中rosavins與紅景天苷salidroside均非單 -的量 效關(guān)系，且兩類成分達到配比范圍時(rosavins的重量百分含量為3.0-5.0%,salidroside 的重量百分含量為0.8-1.0%),藥效最佳、且可控性好，為臨床提供了一種穩(wěn)定、有效、 可控的藥物選擇。
28.0 ±5.56
29.0 ±5.41
29.1 ±5.42 28.1 ±5.20 28.1 ±5.33
34.41 ±6.20 28.40 ±4.16 27,72 ±5.09* 26.70 ±4.34** 24.81 ±4.30*
35.36 ±5.57 34.40 ±4.53
35.47 ±4.48 34.98 ±3.59 30.30 ±4.47*
33.0 土 4 87 30.7 ±4.07 33.9±3.71 32.8±3.62 31.5±3.76
2 1 2 4
Loot.
組物天物
荊提景取
模粗紅提
權(quán)利要求
1、一種紅景天提取物，其特征在于它是由紅景天rhodiola rosea為原料經(jīng)提取制備而成的提取物，該提取物含有苯丙素苷類rosavins的重量百分含量為3.0-10.0％，其中苯丙素苷類rosavins是由肉桂醇苷rosavin、rosarin、rosin組成。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的紅景天提取物，其特征在于它含有rosavins的重量百 分含量為3.0-5.0%。
3、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的紅景天提取物，其特征在于提取物中還含有紅景天苷 salidroside，其中紅景天苷salidroside的重量百分含量為0.5-1.0%。
4、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的紅景天提取物，其特征在于提取物中含有rosavins的 重量百分含量為3.0-5.0%; salidroside的重量百分含量為0.8-1.0%。
5、 一種制備權(quán)利要求1-4任一項所述的紅景天提取物的方法，它包括如下步驟a、 取紅景天rhodiola rosea原料，用水或乙醇，或含水醇類提取、濃縮。b、 取a歩驟所述的濃縮液，上大孔吸附樹脂柱，用水洗凈不吸附的雜質(zhì)，再用 50-70%乙醇洗，得洗脫液，將洗脫液干燥。
6、 權(quán)利要求1-4任一項所述的紅景天提取物在制備具有抑制a -葡萄糖苷酶活性的 藥物中的用途。
7、 權(quán)利要求1-4任一項所述的紅景天提取物在制備具有降血糖的藥物中的用途。
8、 根據(jù)權(quán)利要求7所述的用途，其特征在于所述的藥物是具有降低餐后血糖作 用的藥物。
9、 一種藥物組合物，它是由權(quán)利要求14任一項所述的紅景天提取物為活性成分， 加上藥學上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的藥劑。
10、 根據(jù)權(quán)利要求9所述的藥物組合物，其特征在于所述的藥劑是口服制劑。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種紅景天提取物，它是由紅景天為原料經(jīng)提取制備而成的提取物，該提取物含有苯丙素苷類rosavins的重量百分含量為3.0-10.0％，其中苯丙素苷類rosavins是由肉桂醇苷rosavin、rosarin、rosin組成。本發(fā)明還提供了該提取物的制備方法和用途。本發(fā)明紅景天提取物藥效明顯，可控性強，為臨床提供了一種新的選擇。
文檔編號C07H15/00GK101095690SQ20061002130
公開日2008年1月2日 申請日期2006年6月30日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月30日
發(fā)明者燕 張, 杰 房 申請人:成都華高藥業(yè)有限公司