專(zhuān)利名稱(chēng)：新化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一類(lèi)新的2，4，8-三取代-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮化合物、其制備方法、它們?cè)谥委烠SBP/p38激酶介導(dǎo)的疾病方面的應(yīng)用以及用于這種治療的藥物組合物。
背景技術(shù)：
細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)是細(xì)胞應(yīng)答細(xì)胞外刺激的手段。與細(xì)胞表面受體(例如蛋白酪氨酸激酶或7次垮膜G蛋白偶聯(lián)性受體)的性質(zhì)無(wú)關(guān)，蛋白激酶和磷酸酶與磷脂酶一起是信號(hào)在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)一步傳遞的基本成員(machinery)(Marshall，J.C.Cell，80，179-278(1995)]。蛋白激酶可分為五類(lèi)，其中兩種主要類(lèi)型為酪氨酸和絲氨酸/蘇氨酸激酶，這取決于該酶是在特異性酪氨酸殘基上還是在絲氨酸/蘇氨酸殘基上磷酸化其底物[Hunter，T.，Methods inEnzymology(Protein Kinase Classification)p.3，Hunter，T.；Sefton，B.M.；eds.Vo.200，Academic Press；San Diego，1991].
大多數(shù)生物反應(yīng)都涉及多種細(xì)胞內(nèi)激酶，而且個(gè)別激酶還可能參與一種以上的信號(hào)活動(dòng)。這些激酶通常是細(xì)胞溶質(zhì)酶，并且可以轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞核和核糖體上，從而分別影響轉(zhuǎn)錄和翻譯活動(dòng)。正如通過(guò)對(duì)與MAP/ERK激酶有關(guān)的生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)的研究所闡明，目前對(duì)激酶參與轉(zhuǎn)錄調(diào)控的了解要多于對(duì)其影響翻譯的了解[Marshall，C.J.Cell，80，179(1995)；Herskowitz，I.Cell，80，187(1995)；Hunter，T.Cell，80，225(1995)；Seger，R.，和Krebs，E.G.FASEB J.，726-735(1995)]。
雖然許多信號(hào)傳導(dǎo)途徑是細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的一部分，但大量細(xì)胞因子(例如IL-1和TNF)和一些其它炎癥介質(zhì)(例如COX-2，和iNOS)只是在對(duì)應(yīng)激信號(hào)例如細(xì)菌脂多糖(LPS)應(yīng)答時(shí)才產(chǎn)生。Weinstein的研究首次揭示，導(dǎo)致LPS誘導(dǎo)細(xì)胞因子生物合成的信號(hào)傳導(dǎo)途徑與蛋白激酶有關(guān)[Weinstein等，J.Immunol.151，3829(1993)]，但沒(méi)有鑒定出所涉及的特異性蛋白激酶。Han[Han等，Science265，808(1994)]采用類(lèi)似的方法進(jìn)行研究，鑒定出鼠p38為應(yīng)答LPS過(guò)程中酪氨酸磷酸化的激酶。Lee[Lee等，Nature，372，739(1994)]有關(guān)激酶p38是一類(lèi)新抗炎劑的分子靶的獨(dú)立發(fā)現(xiàn)，提供了p38激酶參與促炎性細(xì)胞因子生物合成啟動(dòng)的LPS刺激信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的確定證據(jù)。p38(Lee稱(chēng)之為CSBP1和2)的發(fā)現(xiàn)提供了一類(lèi)抗炎化合物(其原型實(shí)例為SK&F86002)的作用機(jī)制。這些化合物在低μM濃度范圍下能夠抑制人單核細(xì)胞中IL-1和TNF的合成[Lee等，Int.J.Immunopharmac.10(7)，835(1988)]，在耐環(huán)氧合酶抑制劑的動(dòng)物模型中顯示出活性[Lee等，Annals N.Y.Acad.Sci.，696，149(1993)]。
現(xiàn)在已充分確立了CSBP/p38是參與應(yīng)激信號(hào)傳導(dǎo)途徑的數(shù)種激酶之一，其中所述應(yīng)激信號(hào)傳導(dǎo)途徑與類(lèi)似的促分裂原活化蛋白激酶(MAP)激酶級(jí)聯(lián)反應(yīng)平行，并且二者間有很強(qiáng)的獨(dú)立性。包括LPS、促炎性細(xì)胞因子、氧化劑、紫外線(xiàn)和滲透性應(yīng)激在內(nèi)的應(yīng)激信號(hào)激活CSBP/p38上游的激酶，后者進(jìn)而在蘇氨酸180和酪氨酸182上磷酸化CSBP/p38，從而導(dǎo)致CSBP/p38激活。MAPKAP激酶-2和MAPKAP激酶-3已經(jīng)鑒定為CSBP/p38的下游底物，而且它們能磷酸化熱休克蛋白Hsp27(

圖1)。已知能被p38磷酸化的其它下游底物包括激酶(Mnk1/2，MSK1/2和PRAK)和轉(zhuǎn)錄因子(CHOP，MEF2，ATF2和CREB)。盡管細(xì)胞因子生物合成需要的多種信號(hào)傳導(dǎo)途徑現(xiàn)在仍不確切，但上面所列的p38的多種底物顯然是參與的.[Cohen，P.Trends CellBiol.，353-361(1997)和Lee，J.C.等，Pharmacol.Ther.vol.82，nos.2-3，pp389-397，1999].
然而，CSBP/p38激酶抑制劑(SK&F 86002和SB 203580)除了已知能抑制IL-1和TNF之外，還會(huì)減少包括IL-6，IL-8，GM-CSF和COX-2在內(nèi)的多種促炎蛋白的合成。CSBP/p38激酶的抑制劑也顯示出抑制TNF誘導(dǎo)的VCAM-1在內(nèi)皮細(xì)胞上的表達(dá)，TNF誘導(dǎo)的磷酸化和胞質(zhì)PLA2的激活以及IL-1刺激的膠原酶和溶基質(zhì)素的合成。這些及另外的資料證明CSBP/p38不僅參與細(xì)胞因子的合成，而且還參與細(xì)胞因子信號(hào)傳遞[CSBP/p38激酶綜述，Cohen，P.在Trends Cell Biol.，353-361(1997)]。
白介素-1(IL-1)和腫瘤壞死因子(TNF)系由多種細(xì)胞如單核細(xì)胞或巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的生物物質(zhì)。已經(jīng)證實(shí)IL-1能介導(dǎo)在免疫調(diào)節(jié)和其它生理反應(yīng)如炎癥的過(guò)程中起重要作用的各種生物活性[參見(jiàn)例如Dinarello等，Rev.Infect.Disease，6，51(1984)]。IL-1的種種已知生物活性包括激活T輔助細(xì)胞、誘導(dǎo)發(fā)熱、刺激前列腺素或膠原酶產(chǎn)生、嗜中性白細(xì)胞的趨化性，誘導(dǎo)急性期蛋白和抑制血漿鐵水平。
IL-1的過(guò)度或失控性產(chǎn)生會(huì)加重和/或引發(fā)多種疾患。這些疾病包括類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、內(nèi)毒素血癥和/或中毒性休克綜合癥、其它急性或慢性炎癥性疾病如內(nèi)毒素引發(fā)的炎性反應(yīng)或炎癥性腸病；肺結(jié)核，動(dòng)脈粥樣硬化，肌肉退化，惡病質(zhì)，牛皮癬性關(guān)節(jié)炎，萊特爾氏綜合癥，類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，痛風(fēng)，創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎，風(fēng)疹性關(guān)節(jié)炎，和急性滑膜炎。有關(guān)證據(jù)還將IL-1活性與糖尿病和胰腺β細(xì)胞聯(lián)系在一起[IL-1的生物活性綜述，Dinarello，J.Clinical Immunology，5(5)，287-297(1985)]。
TNF的過(guò)度或失控產(chǎn)生會(huì)介導(dǎo)或加劇多種疾病，包括類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，類(lèi)風(fēng)濕性脊椎炎、骨關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎和其它關(guān)節(jié)炎性病癥；濃毒癥，濃毒性休克，內(nèi)毒素休克，革蘭氏陰性濃毒癥，中毒性休克綜合癥，成人呼吸窘迫綜合癥，腦瘧，慢性肺炎性疾病，矽肺，肺肉樣瘤病，骨吸收病，再灌注損傷，移植物抗宿主反應(yīng)，同種移植物排斥，感染如流感引起的發(fā)熱和肌痛，繼發(fā)于感染或惡性腫瘤的惡病質(zhì)，繼發(fā)于獲得性免疫缺陷綜合癥(AIDS)的惡病質(zhì)，AIDS，ARC(艾滋病相關(guān)復(fù)合征)，瘢痕瘤形成，瘢痕組織形成，Crohn病，潰瘍性結(jié)膜炎，或發(fā)熱(pyresis)。
白介素-8(IL-8)是一種趨化因子，由包括單核細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞在內(nèi)的多種類(lèi)型細(xì)胞所產(chǎn)生。內(nèi)皮細(xì)胞受IL-1、TNF、或脂多糖(LPS)所誘導(dǎo)產(chǎn)生這種趨化因子。IL-8在體外能刺激多種功能。已經(jīng)證明對(duì)嗜中性粒細(xì)胞、T-淋巴細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞具有化學(xué)引誘劑性質(zhì)。另外它誘導(dǎo)正常和特應(yīng)性個(gè)體的嗜堿細(xì)胞釋放組胺以及嗜中性粒細(xì)胞釋放溶菌酶和呼吸爆發(fā)。據(jù)表明IL-8還能增加Mac-1(CD11b/CD18)在嗜中性粒細(xì)胞上的表面表達(dá)量，而不會(huì)從頭進(jìn)行蛋白合成，這可導(dǎo)致嗜中性粒細(xì)胞對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的粘著性增加。有許多疾病的特征是大量嗜中性白細(xì)胞滲入。與IL-8產(chǎn)生增多(是導(dǎo)致嗜中性白細(xì)胞趨化進(jìn)入炎性部位的主要原因)有關(guān)的病癥可用能抑制IL-8產(chǎn)生的化合物加以治療。
IL-1和TNF能夠影響多種細(xì)胞與組織，這些細(xì)胞因子以及其它白細(xì)胞衍生細(xì)胞因子是多種疾患和病癥的重要且關(guān)鍵的炎癥介質(zhì)。對(duì)這些細(xì)胞因子的抑制有助于控制、降低和減緩多種這些疾患。
CSBP/38信號(hào)傳導(dǎo)除了參與IL-1、TNF、IL-8、IL-6、GM-CSF、COX-2、膠原酶和溶質(zhì)基素的產(chǎn)生之外，通過(guò)CSBP/p38的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)對(duì)于這些前炎性蛋白中的一些和許多其它蛋白(VEGF，PDGF，NGF)的作用也是必需的[Ono，K.和Han，J.Cellular Signalling，12，1-13(2000)]。CSBP/p38參與多種應(yīng)激誘導(dǎo)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑對(duì)CSBP/p38在治療免疫系統(tǒng)過(guò)度和破壞性激活所致疾病方面的潛在效用提供了另外的基本理論。這種假設(shè)受到CSBP/p38激酶抑制劑的強(qiáng)效及多樣性活性所支持[Badger等，J.Pharm.Exp.Thera.279(3)1453-1461(1996)；Griswold等，Pharmacol.Comm.7，323-229(1996)；Jackson等，J.Pharmacol.Exp.Ther.284，687-692(1998)；Underwood等，J.Pharmacol.Exp.Ther.293，281-288(2000)；Badger等，Arthritis Rheum.43，175-183(2000)]。
在此領(lǐng)域中，人們?nèi)匀恍枰捎米饕种萍?xì)胞因子的抗炎藥物的化合物，亦即能抑制CSBP/p38/RK激酶的化合物。
現(xiàn)有技術(shù)中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了其它一些含有藥效基團(tuán)且具不同的藥學(xué)、殺蟲(chóng)和除草活性的吡啶并[2，3-d]嘧啶化合物，例如參見(jiàn)WO 98/33798；WO 98/23613；WO 95/19774，即現(xiàn)在的美國(guó)專(zhuān)利6,265,410；WO 00/23444；WO 01/19828(公開(kāi)在本申請(qǐng)遞交日之后)；US 5,532,370；US 5,597,776；JP 2000-38350；WO00/43374；WO 98/08846；和WO 01/55147(同樣也公開(kāi)在本申請(qǐng)的遞交日之后)。
附圖簡(jiǎn)述圖1說(shuō)明p38激酶的級(jí)聯(lián)反應(yīng)。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及式(I)和(Ia)以及式(II)和(IIa)的新化合物、包括式(I)和(Ia)，和式(II)和(IIa)的化合物以及可藥用稀釋劑或載體的藥物組合物。
本發(fā)明涉及治療有此需要的哺乳動(dòng)物中CSBP/p38激酶介導(dǎo)的疾病的方法，該方法包括給所述哺乳動(dòng)物服用有效量的式(I)和(Ia)，和式(II)和(IIa)的化合物。
本發(fā)明還涉及在需要的哺乳動(dòng)物中抑制細(xì)胞因子和治療細(xì)胞因子介導(dǎo)的疾病的方法，該方法包括給所述哺乳動(dòng)物服用有效量的式(I)和(Ia)，和式(II)和(IIa)的化合物。
本發(fā)明更具體地涉及在需要的哺乳動(dòng)物中抑制IL-1產(chǎn)生的方法，該方法包括給所述哺乳動(dòng)物服用有效量的式(I)和(Ia)，和式(II)和(IIa)的化合物。
本發(fā)明更具體地涉及在需要的哺乳動(dòng)物中抑制IL-6產(chǎn)生的方法，該方法包括給所述哺乳動(dòng)物服用有效量的式(I)和(Ia)，和式(II)和(IIa)的化合物。
本發(fā)明更具體地涉及在需要的哺乳動(dòng)物中抑制IL-8產(chǎn)生的方法，該方法包括給所述哺乳動(dòng)物服用有效量的式(I)和(Ia)，和式(II)和(IIa)的化合物。
本發(fā)明更具體地涉及在需要的哺乳動(dòng)物中抑制TNF產(chǎn)生的方法，該方法包括給所述哺乳動(dòng)物服用有效量的式(I)和(Ia)，和式(II)和(IIa)的化合物。
因此，本發(fā)明提供了式(I)和(Ia)的化合物或其可藥用鹽 或 其中R1為任選取代的芳基或任選取代的雜芳基環(huán)；R2為氫，C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基烷基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基，雜芳基C1-10烷基，雜環(huán)基，或雜環(huán)基C1-10烷基基團(tuán)，這些基團(tuán)都可任選被取代，或者R2為基團(tuán)X1(CR10R20)qC(A1)(A2)(A3)，或C(A1)(A2)(A3)；A1為任選取代的C1-10烷基；A2為任選取代的C1-10烷基；A3為氫或?yàn)槿芜x取代的C1-10烷基；R3為C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基C1-4烷基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基，雜芳基C1-10烷基，雜環(huán)基，或雜環(huán)基C1-10烷基基團(tuán)，這些基團(tuán)均可任選被取代；R4和R14各自獨(dú)立選自氫，任選取代的C1-4烷基，任選取代的C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基C1-4烷基，任選取代的芳基，或任選取代的芳基-C1-4烷基，或者R4和R14與它們所連接的氮一起形成任選取代的4-7元雜環(huán)，該環(huán)任選含有選自氧、硫或NR9的其它雜原子；R6為氫，C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-10烷基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基或雜芳基C1-10烷基，其中這些基團(tuán)可任選被取代；R9為氫，C(Z)R6或任選取代的C1-10烷基，任選取代的芳基或任選取代的芳基-C1-4烷基；R10和R20獨(dú)立地選自氫或C1-4烷基；X為R2，OR2，S(O)mR2，(CH2)nN(R10)S(O)mR2，(CH2)nN(R10)C(O)R2，(CH2)nNR4R14，或(CH2)nN(R2)2；X1為N(R10)，O，S(O)m，或CR10R20；n為0或整數(shù)1-10；m為0或整數(shù)1或2；q為0或整數(shù)1-10；Z為氧或硫。
發(fā)明詳述本發(fā)明的另一方面提供了式(II)和(IIa)的化合物或其可藥用鹽 或 其中R1為基團(tuán)YRa；R2為氫，C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基烷基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基，雜芳基C1-10烷基，雜環(huán)基，或雜環(huán)基C1-10烷基基團(tuán)，這些基團(tuán)都可任選被取代，或者R2為基團(tuán)X1(CR10R20)qC(A1)(A2)(A3)，或C(A1)(A2)(A3)；A1為任選取代的C1-10烷基；A2為任選取代的C1-10烷基；A3為氫或?yàn)槿芜x取代的C1-10烷基；R3為C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基C1-4烷基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基，雜芳基C1-10烷基，雜環(huán)基，或雜環(huán)基C1-10烷基基團(tuán)，這些基團(tuán)都可任選被取代；R4和R14各自獨(dú)立選自氫，任選取代的C1-4烷基，任選取代的C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基C1-4烷基，任選取代的芳基，或任選取代的芳基-C1-4烷基，或者R4和R14與它們所連接的氮一起形成任選取代的4-7元雜環(huán)，該環(huán)任選含有選自氧、硫或NR9的其它雜原子；R6為氫，C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-10烷基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基或雜芳基C1-10烷基，其中這些基團(tuán)各自可任選被取代；R9為氫，C(Z)R6或任選取代的C1-10烷基，任選取代的芳基或任選取代的芳基-C1-4烷基；R10和R20獨(dú)立地選自氫或C1-4烷基；Y為C(Rb)(Rd)，C(O)，N(Rd)，N(Rd)C(Rc)(Rd)，氧，OC(Rc)(Rd)，S(O)m，或S(O)mC(Rc)(Rd)；Ra為芳基或雜芳基環(huán)，該環(huán)任選被取代；Rb為氫，C1-2烷基，NRc，羥基，巰基，C1-2烷氧基，S(O)mC1-2烷基；Rc為氫或C1-2烷基；Rd為氫或C1-2烷基；X為R2，OR2，S(O)mR2，(CH2)nN(R10)S(O)mR2，(CH2)nN(R10)C(O)R2，(CH2)nNR4R14，或(CH2)nN(R2)2；X1為N(R10)，O，S(O)m，或CR10R20；n為0或整數(shù)1-10；m為0或整數(shù)1或2；q為0或整數(shù)1-10；Z為氧或硫。
本發(fā)明涉及式(I)和(Ia)，和式(II)和(IIa)的新化合物或它們的可藥用鹽。不難看出，式(I)與(Ia)化合物以及式(II)與(IIa)化合物之間的不同之處在于吡啶-7-酮環(huán)的不飽和性。相應(yīng)的R1，R2，X和R3術(shù)語(yǔ)在其結(jié)構(gòu)式例如I和Ia中表示二者是相同的基團(tuán)。因此，在本文中，除另有說(shuō)明之外，適用于式(I)的一切說(shuō)明也都適用于式(Ia)，適用于式(II)的一切說(shuō)明也同樣都適用于式(IIa)。
對(duì)于式(I)和(Ia)化合物而言，R1宜為芳基或雜芳基環(huán)，該環(huán)是任選被取代的。R1芳基或雜芳基環(huán)可以被選自以下的取代基獨(dú)立地取代一次或多次(優(yōu)選1-4次)鹵素、C1-4烷基、鹵代-C1-4烷基、氰基、硝基、(CR10R20)vNR4R14、(CR10R20)vC(Z)NR4R14、(CR10R20)vC(Z)OR8、(CR10R20)vCORa′、(CR10R20)vC(O)H、SR5、S(O)R5、S(O)2R5、(CR10R20)vOR8、ZC(Z)R11、NR10C(Z)R11、或NR10S(O)2R7。
優(yōu)選的是，R1為芳基部分(更優(yōu)選苯環(huán))，其任選被鹵素、C1-4烷基、或鹵代-C1-4烷基取代一次或多次。更優(yōu)選的是，苯環(huán)是在2，4，或6-位被單取代，或在2，4-位被二取代，例如2-氟、4-氟、2，4-二氟或2-甲基-4-氟；或在2，4，6位被三取代，例如2，4，6-三氟。
優(yōu)選的是，當(dāng)R1為雜芳基部分時(shí)，所述環(huán)不能通過(guò)一個(gè)雜原子例如氮與藥效團(tuán)連接形成帶電荷環(huán)。例如，吡啶基環(huán)將通過(guò)碳原子連接形成2-、3-或4-吡啶基基團(tuán)，它們是任選取代的。
v宜為0或整數(shù)1或2。
Z宜為氧或硫。
Ra′宜為C1-4烷基，鹵代C1-4烷基，C2-4鏈烯基，C2-4炔基，C3-7環(huán)烷基，C5-7環(huán)烯基，芳基，芳基C1-4烷基，雜芳基，雜芳基C1-4烷基，雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-4烷基，(CR10R20)vOR7，(CR10R20)vS(O)mR7，(CR10R20)vNHS(O)2R7，或(CR10R20)vNR4R14；而且其中的芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基可任選被取代。
對(duì)于式(II)和(IIa)的化合物，R1宜為Y-Ra。
Y適宜為C(Rb)(Rd)，C(O)，N(Rd)，N(Rd)C(Rc)(Rd)，氧，OC(Rc)(Rd)，S(O)m，或S(O)mC(Rc)(Rd)。
Rb適宜為氫，C1-2烷基，NRc，羥基，巰基，C1-2烷氧基，S(O)mC1-2烷基。
Rc適宜為氫或C1-2烷基。
Rd適宜為氫或C1-2烷基。
m適宜為0或整數(shù)1或2。
Ra適宜為任選取代的芳基環(huán)或任選取代的雜環(huán)基環(huán)。這些環(huán)的任選取代基與上面式(I)和(Ia)中R1芳基和雜芳基環(huán)所述的相同。
應(yīng)當(dāng)理解，式(I)和(II)化合物之間的差異在于R1的取代。剩余的取代基是相同的，而且適用于本文中的所有四個(gè)結(jié)構(gòu)式，但另有說(shuō)明除外。
適宜的是，R4和R14各自獨(dú)立地選自氫，任選取代的C1-4烷基，任選取代的C3-7環(huán)烷基，任選取代的C3-7環(huán)烷基C1-4烷基，任選取代的芳基或任選取代的芳基-C1-4烷基，或者R4和R14與它們所連接的氮一起形成任選取代的4-7元雜環(huán)，該環(huán)任選含有另外選自氧、硫或NR9的雜原子。
所述C1-4烷基、C3-7環(huán)烷基、C3-7環(huán)烷基C1-4烷基、芳基和芳基-C1-4烷基基團(tuán)任選被以下的基團(tuán)獨(dú)立取代一次或多次(優(yōu)選1-4次)鹵素，如氟、氯、溴或碘；羥基；羥基取代的C1-10烷基；C1-10烷氧基，例如甲氧基或乙氧基；鹵代C1-10烷氧基；S(O)m烷基，例如甲硫基、甲亞磺?；蚣谆酋；蝗?-C(O))，或酮，例如-C(O)R6，例如C(O)C1-10烷基或C(O)芳基；酰胺，例如C(O)NR4′R14′，或NR4′C(O)C1-10烷基，或NR4′C(O)芳基；NR4′R14′，其中R4′和R14′各自獨(dú)立地為氫或C1-4烷基，或者其中的R4′R14′可以與它們所連接的氮一起環(huán)合形成任選含有另外選自O(shè)/N/S的雜原子的5-7元環(huán)；氰基，硝基，C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，或C3-7環(huán)烷基C1-10烷基基團(tuán)，如甲基、乙基、丙基、異丙基、叔丁基等，或環(huán)丙基甲基；鹵代C1-10烷基，例如CF2CF2H，CH2CF3，或CF3；任選取代的芳基，例如苯基，或任選取代的芳烷基，如芐基或苯乙基，其中這些包含芳基的基團(tuán)也可以被下列基團(tuán)取代1-2次鹵素；羥基；羥基取代烷基；C1-10烷氧基；S(O)m烷基；氨基，單和二-取代的C1-4烷基氨基，如在NR4′R14′基團(tuán)中的基團(tuán)；C1-4烷基，或CF3。
當(dāng)R4和R14與氮一起環(huán)合成環(huán)時(shí)，適宜的是，這些環(huán)包括但不限于吡咯烷、哌啶、哌嗪、嗎啉和硫嗎啉(包括硫被氧化的情形)。所述環(huán)可任選被以下的基團(tuán)獨(dú)立取代一次或多次(優(yōu)選1-4次)鹵素，如氟、氯、溴或碘；羥基；羥基取代的C1-10烷基；C1-10烷氧基，例如甲氧基或乙氧基；鹵代C1-10烷氧基；S(O)m烷基，例如甲硫基、甲亞磺酰基或甲磺?；?；環(huán)合環(huán)上的酮(-C(O))，或環(huán)外的酮或醛(-C(O)R6)，例如C(O)C1-10烷基或C(O)芳基；NR4′R14′，其中R4′和R14′各自獨(dú)立地為氫或C1-4烷基；C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，或C3-7環(huán)烷基C1-10烷基基團(tuán)，如甲基、乙基、丙基、異丙基、叔丁基等，或環(huán)丙基甲基；鹵代C1-10烷基，例如CF2CF2H，CH2CF3，或CF3；任選取代的芳基，例如苯基，或任選取代的芳烷基，如芐基或苯乙基，其中這些包含芳基的基團(tuán)也可以被下列基團(tuán)取代1-2次鹵素；羥基；羥基取代烷基；C1-10烷氧基；S(O)m烷基；氨基，單和二-取代的C1-4烷基氨基，如在NR4′R14′基團(tuán)中的基團(tuán)；C1-4烷基，或CF3。
R5適宜為氫，C1-4烷基，C2-4鏈烯基，C2-4炔基或NR4R14，但基團(tuán)SR5為SNR4R14，S(O)2R5為SO2H和S(O)R5為SOH的情形除外。
R6適宜為氫，C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-10烷基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基或雜芳基C1-10烷基，其中這些基團(tuán)可任選被取代。
R7適宜為C1-6烷基，芳基，芳基C1-6烷基，雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-6烷基，雜芳基，或雜芳基C1-6烷基；這些基團(tuán)各自可任選被取代。
R8適宜為氫，C1-4烷基，鹵代C1-4烷基，C2-4鏈烯基，C2-4炔基，C3-7環(huán)烷基，C5-7環(huán)烯基，芳基，芳基C1-4烷基，雜芳基，雜芳基C1-4烷基，雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-4烷基，(CR10R20)tOR7，(CR10R20)tS(O)mR7，(CR10R20)tNHS(O)2R7，或(CR10R20)tNR4R14；并且其中的環(huán)烷基、環(huán)烯基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基基團(tuán)可任選被取代。
t宜為整數(shù)1-3。
R9適宜為氫，C(Z)R6，任選取代的C1-10烷基，任選取代的芳基或任選取代的芳基-C1-4烷基。
適宜的是，R10和R20獨(dú)立地選自氫或C1-4烷基。
R11適宜為C1-4烷基，鹵代C1-4烷基，C2-4鏈烯基，C2-4炔基，C3-7環(huán)烷基，C5-7環(huán)烯基，芳基，芳基C1-4烷基，雜芳基，雜芳基C1-4烷基，雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-4烷基，(CR10R20)tOR7，(CR10R20)tS(O)mR7，(CR10R20)tNHS(O)2R7，或(CR10R20)vNR4R14；并且其中的芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基基團(tuán)可任選被取代。
m宜為0或整數(shù)1或2。
R3適宜為任選取代的C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基C1-10烷基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基C1-10烷基，或雜環(huán)基C1-10烷基基團(tuán)，這些基團(tuán)任選被下列基團(tuán)獨(dú)立地取代一次或多次(優(yōu)選1-4次)C1-10烷基，鹵代C1-10烷基，C2-10鏈烯基，C2-10炔基，C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基C1-10烷基，C5-7環(huán)烯基，C5-7環(huán)烯基C1-10烷基，鹵素，氰基，硝基，(CR10R20)nOR6，(CR10R20)nSH，(CR10R20)nS(O)mR7，(CR10R20)nNHS(O)2R7，(CR10R20)nNR4R14，(CR10R20)nCN，(CR10R20)nS(O)2NR4R14，(CR10R20)nC(Z)R6，(CR10R20)nOC(Z)R6，(CR10R20)nC(Z)OR6，(CR10R20)nC(Z)NR4R14，(CR10R20)nNR10C(Z)R6，(CR10R20)nNR10C(＝NR10)NR4R14，(CR10R20)nOC(Z)NR4R14，(CR10R20)nNR10C(Z)NR4R14，或(CR10R20)nNR10C(Z)OR7.
優(yōu)選任選取代基獨(dú)立選自鹵素，烷基，羥基，烷氧基，氰基，硝基，氨基或鹵代烷基。更優(yōu)選為鹵素或烷基。
優(yōu)選R3為任選取代的C1-10烷基、C3-7環(huán)烷基、C3-7環(huán)烷基烷基、或芳基。更優(yōu)選R3為任選取代的C1-10烷基，或芳基。
優(yōu)選的是，當(dāng)R3為芳基基團(tuán)時(shí)，它為苯基環(huán)，該苯環(huán)任選被鹵素、C1-4烷基、或鹵代C1-4烷基取代一次或多次。更優(yōu)選的是，該苯環(huán)是在2，4，或6-位被單取代，或在2，4-位被二取代，例如2-氟、4-氟、2，4-二氟或2-甲基-4-氟；或在2，4，6位被三取代，例如2，4，6-三氟。
n宜為0或整數(shù)1-10。
X適宜為R2，OR2，S(O)mR2，(CH2)nN(R10)S(O)mR2，(CH2)nN(R10)C(O)R2，(CH2)nNR4R14，或(CH2)nN(R2)2。優(yōu)選X為R2，OR2，(CH2)nNR4R14，或(CH2)nN(R2)2。優(yōu)選的是，當(dāng)X為R2時(shí)，則R2為基團(tuán)X1(CR10R20)qC(A1)(A2)(A3)，或C(A1)(A2)(A3)。
適宜的是，R2獨(dú)立選自氫，任選取代的C1-10烷基，任選取代的C3-7環(huán)烷基，任選取代的C3-7環(huán)烷基烷基，任選取代的芳基，任選取代的芳基C1-10烷基，任選取代的雜芳基，任選取代的雜芳基C1-10烷基，任選取代的雜環(huán)基，任選取代的雜環(huán)基C1-10烷基基團(tuán)，或者R2為基團(tuán)X1(CR10R20)qC(A1)(A2)(A3)，或C(A1)(A2)(A3)。
R2的基團(tuán)除氫之外都可任選地被下列基團(tuán)獨(dú)立地取代一次或多次(優(yōu)選1-4次)C1-10烷基，鹵代C1-10烷基，C2-10鏈烯基，C2-10炔基，C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基C1-10烷基，C5-7環(huán)烯基，C5-7環(huán)烯基C1-10烷基，鹵素，-C(O)，氰基，硝基，(CR10R20)nOR6，(CR10R20)nSH，(CR10R20)nS(O)mR7，(CR10R20)nNR10S(O)2R7，(CR10R20)nNR4R14，(CR10R20)nCN，(CR10R20)nS(O)2NR4R14，(CR10R20)nC(Z)R6，(CR10R20)nOC(Z)R6，(CR10R20)nC(Z)OR6，(CR10R20)nC(Z)NR4R14，(CR10R20)nNR10C(Z)R6，(CR10R20)nNR10C(＝NR10)NR4R14，(CR10R20)nNR10C(＝NOR6)NR4R14，(CR10R20)nOC(Z)NR4R14，(CR10R20)nNR10C(Z)NR4R14，或(CR10R20)nNR10C(Z)OR7.
X1適宜為N(R10)，O，S(O)m，或CR10R20。更優(yōu)選X1為N(R10)，或O。
q宜為0或整數(shù)1-10。
A1適宜為任選取代的C1-10烷基。
A2適宜為任選取代的C1-10烷基。
A3適宜為氫或?yàn)槿芜x取代的C1-10烷基。
A1、A2和A3中的C1-10烷基部分可任選被下列基團(tuán)獨(dú)立地取代一次或多次(優(yōu)選1-4次)鹵素，例如氯、氟、溴或碘；鹵代C1-10烷基如CF3或CHF2CF3，C2-10鏈烯基，C2-10炔基，C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基C1-10烷基，C5-7環(huán)烯基，C5-7環(huán)烯基C1-10烷基，(CR10R20)nOR6，(CR10R20)nSH，(CR10R20)nS(O)mR7，(CR10R20)nNHS(O)2R7，(CR10R20)nNR4R14，(CR10R20)nCN，(CR10R20)nS(O)2NR4R14，(CR10R20)nC(Z)R6，(CR10R20)nOC(Z)R6，(CR10R20)nC(Z)OR6，(CR10R20)nC(Z)NR4R14，(CR10R20)nNR10C(Z)R6，(CR10R20)nNR10C(＝NR10)NR4R14，(CR10R20)nOC(Z)NR4R14，(CR10R20)nNR10C(Z)NR4R14，或(CR10R20)nNR10C(Z)OR7.
優(yōu)選的是，A1-A3中的一個(gè)或多個(gè)被(CR10R20)nOR6取代。更優(yōu)選R6為氫。
優(yōu)選的C(A1)(A2)(A3)基團(tuán)為CH(CH2OH)2，或C(CH3)(CH2OH)2，X1(CR10R20)qCH(CH2OH)2或X1(CR10R20)qC(CH3)(CH2OH)2。X1優(yōu)選為氧或氮。
除非具體定義，否則本文中使用的“任選取代的”均應(yīng)當(dāng)表示這樣一些基團(tuán)，例如鹵素，如氟、氯、溴或碘；羥基；羥基取代的C1-10烷基；C1-10烷氧基，如甲氧基或乙氧基；鹵代C1-10烷氧基；S(O)m烷基，如甲硫基，甲亞磺?；蚣谆酋；?C(O)；NR4′R14′，其中R4′和R14′各自獨(dú)立地為氫或C1-4烷基，如氨基或單或-二取代的C1-4烷基，或者R4′R14′與它們所連接的氮一起環(huán)合形成可任選含有另外選自O(shè)/N/S的雜原子的5-7元環(huán)；C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基或C3-7環(huán)烷基C1-10烷基基團(tuán)，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、叔丁基等或環(huán)丙基甲基；鹵代C1-10烷基，如CF2CF2H或CF3；任選取代的芳基，如苯基，或任選取代的芳烷基，如芐基或苯乙基，其中這些含芳基的基團(tuán)可還可以被以下基團(tuán)取代一次或兩次鹵素；羥基；羥基取代烷基；C1-10烷氧基；S(O)m烷基；氨基，單和二-取代C1-4烷基氨基，如在NR4R14基團(tuán)中的一樣；C1-4烷基，或CF3。
合適的可藥用鹽是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的，并且包括無(wú)機(jī)或有機(jī)酸的堿式鹽，這些酸例如有鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、乙酸、蘋(píng)果酸、酒石酸、檸檬酸、乳酸、草酸、琥珀酸、富馬酸、馬來(lái)酸、苯甲酸、水楊酸、苯乙酸和扁桃酸。
此外，例如當(dāng)取代基包含羧基基團(tuán)時(shí)，式(I)化合物的可藥用鹽還可以是與可藥用陽(yáng)離子形成的鹽。合適的可藥用陽(yáng)離子是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的，并且包括堿金屬、堿土金屬、銨和季銨陽(yáng)離子。
本文所用術(shù)語(yǔ)“鹵代”或“鹵素”是指氟、氯、溴和碘的鹵素。
本文所用術(shù)語(yǔ)“C1-10烷基”或“烷基”或“烷基1-10”，是指具有1-10個(gè)碳原子的直鏈和支鏈基團(tuán)(除非另外限定了鏈長(zhǎng)度)，并且包括(但不限于)甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、異丁基、叔丁基、正戊基等。
本文所用術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”是指環(huán)狀基團(tuán)，優(yōu)選含3至8個(gè)碳，且包括但不限于環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基等。
本文所用術(shù)語(yǔ)“環(huán)烯基”是指含至少一個(gè)雙鍵的環(huán)狀基團(tuán)，優(yōu)選具5-8個(gè)碳。此類(lèi)基團(tuán)包括但不限于環(huán)戊烯基、環(huán)己烯基等。
在本文所有情形下使用的術(shù)語(yǔ)“鏈烯基”是指含2-10個(gè)碳原子的直鏈或支鏈基團(tuán)(其鏈長(zhǎng)度另有限定除外)，且包括但不限于乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、2-甲基-1-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基等。
本文所用術(shù)語(yǔ)“芳基”是指苯基和萘基。
本文所用術(shù)語(yǔ)“雜芳基”(其本身或在任何組合基團(tuán)中，例如“雜芳氧基”或“雜芳基烷基”)是指在其一個(gè)或多個(gè)環(huán)中含有一個(gè)或多個(gè)選自N、O或S的雜原子的5-10元芳環(huán)體系，例如(但不限于)吡咯、吡唑、呋喃、吡喃、噻吩、喹啉、異喹啉、喹唑啉基、吡啶、嘧啶、噠嗪、吡嗪、尿嘧啶、二唑、唑、異唑、噻二唑、噻唑、異噻唑、噻二唑、四唑、三唑、吲唑、咪唑、或苯并咪唑。
本文所用術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)”(其本身或在任何組合基團(tuán)中，例如“雜環(huán)基烷基”)是指其中一個(gè)或多個(gè)環(huán)含有一個(gè)或多個(gè)選自N、O、S或S(O)m(m為0或整數(shù)1或2)的雜原子的4-10元飽和或部分飽和環(huán)體系；例如(但不限于)上述雜芳基基團(tuán)的飽和或部分飽和形式，如四氫吡咯、四氫吡喃、四氫呋喃、四氫噻吩(包括硫原子的氧化形式)、吡咯烷、哌啶、哌嗪、嗎啉、硫嗎啉(包括硫原子的氧化形式)或咪唑烷。
本文所用術(shù)語(yǔ)“芳烷基”或“雜芳基烷基”或“雜環(huán)基烷基”是指連接在本文所定義(另有說(shuō)明除外)的芳基、雜芳基或雜環(huán)基基團(tuán)上的上述C1-4烷基。
本文所用術(shù)語(yǔ)“亞磺?；笔侵赶鄳?yīng)硫化物的氧化物S(O)，術(shù)語(yǔ)“硫代”是指硫化物，且術(shù)語(yǔ)“磺酰基”是指完全氧化的S(O)2基團(tuán)。
本文所用術(shù)語(yǔ)“芳?；笔侵窩(O)Ar，其中Ar為如上所定義的苯基、萘基、或芳基烷基衍生物，例如包括但不限于芐基和苯乙基。
本文所用術(shù)語(yǔ)“鏈烷?；笔侵窩(O)C1-10烷基，其中烷基如上定義。
應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明化合物可以以立體異構(gòu)體、區(qū)域異構(gòu)體、或非對(duì)映異構(gòu)體形式存在。這些化合物可含有一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱(chēng)碳原子，并且可以以外消旋或旋光活性形式存在。所有這些單一化合物、異構(gòu)體、及其混合物都包括在本發(fā)明范圍之內(nèi)。
本發(fā)明化合物的示例性化合物包括本文實(shí)施例化合物的外消旋體或旋光活性形式，及其可藥用鹽。
制備方法式(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的化合物可以用本文所述的合成方法制得。所述合成對(duì)于產(chǎn)生具有多種不同的R1、R2、Y、X和R3基團(tuán)的式(I)，(Ia)，(II)和(IIa)的化合物來(lái)說(shuō)都是適用的，將這些基團(tuán)利用適當(dāng)保護(hù)的任選取代基進(jìn)行反應(yīng)以實(shí)現(xiàn)和本文所述反應(yīng)的相容性。隨后脫保護(hù)，在那些情況下則能得到具有通常所述性質(zhì)的化合物。盡管本文給出的是具有特定取代基的特定結(jié)構(gòu)式，但其合成適用于本文中的所有結(jié)構(gòu)式與所有取代基。
一旦母核已經(jīng)確立，即可用本領(lǐng)域公知的官能團(tuán)相互轉(zhuǎn)化的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)制備其它式(I)，(Ia)，(II)和(IIa)的化合物。例如，在有或無(wú)催化量或化學(xué)計(jì)算量的金屬氰化物或三甲基鋁(例如NaCN)存在下，在CH3OH中與HNR4R14一起加熱，可以將-CO2CH3轉(zhuǎn)化成C(O)NR4R14；在堿如三乙胺和吡啶中與例如ClC(O)R6一起加熱，可以將OH轉(zhuǎn)化成OC(O)R3；利用異硫氰酸烷基酯或硫氰酸和ClC(S)NR4R14，可以將NHR10轉(zhuǎn)化為NR10-C(S)NR4R14；利用氯甲酸烷基酯或芳基酯可以將NHR10轉(zhuǎn)化成NR10C(O)OR6；通過(guò)用異氰酸酯例如R4N＝C＝O處理，可以由NHR10轉(zhuǎn)化成NR10C(O)NR4H；通過(guò)在吡啶中用Cl-C(O)R6處理，可以由NHR10制得NR10-C(O)R6；通過(guò)在醇中和H3NR10+OAc-一起加熱，可以由C(NR4R14S)制得C(＝NR10)NR4R14；在惰性溶劑如丙酮中與R6-I反應(yīng)可以將C(S)NR4R14轉(zhuǎn)化為C(NR4R14)SR6；加熱下，在堿如吡啶中用C1SO2R7處理，可以將NHR10轉(zhuǎn)化為NR10SO2R7；通過(guò)用Lawesson試劑[2，4-雙(4-甲氧基苯基)-1，3，2，4-二硫雜二磷雜丁環(huán)-2，4-二-硫化物]處理，將NR10C(O)R6轉(zhuǎn)化為NR10C(S)R6；用三氟甲磺酸酐和堿處理，將NHR10轉(zhuǎn)化為NR10SO2CF3，其中的R3，R6，R10，R4和R14如本文式(I)所定義。
基團(tuán)R1、R2和R3的前體可以為其它的R1、R2和R3等基團(tuán)，它們可以用官能團(tuán)相互轉(zhuǎn)化的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)互相轉(zhuǎn)化。例如，其中鹵代C1-10烷基基團(tuán)通過(guò)與適當(dāng)?shù)寞B氮化物鹽反應(yīng)而轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的C1-10烷基N3衍生物，隨后視需要可以還原成相應(yīng)的C1-10烷基NH2化合物，后者又可以與其中X為鹵素(例如氯)的R7SO2X反應(yīng)，生成相應(yīng)的C1-10烷基NHS(O)2R7化合物。
另一方面，其中基團(tuán)為鹵代C1-10烷基的化合物可以與胺R4R14NH反應(yīng)，生成相應(yīng)的C1-10-烷基NR4R14化合物，或者能夠與R7SH的堿金屬鹽反應(yīng)得到相應(yīng)的C1-10烷基SR7化合物。
如上所述，在本發(fā)明化合物的合成過(guò)程中，最好將分子中參與反應(yīng)的活性官能團(tuán)加以衍生，以避免發(fā)生不需要的副反應(yīng)。諸如羥基、氨基、酸基之類(lèi)的官能團(tuán)通常用適當(dāng)基團(tuán)加以保護(hù)，需要時(shí)這些基團(tuán)能夠很容易地除去。用于羥基和氮基的適當(dāng)常規(guī)保護(hù)基是本領(lǐng)域公知的，并且在多篇文獻(xiàn)中有記載，例如《有機(jī)合成中的保護(hù)基)》(Protecting Groups in Organic Synthesis)，Greene等，John Wiley和Sons，New York，New York，(第2版，1991或早期的1981版本)。羥基保護(hù)基的適當(dāng)實(shí)例包括成醚基團(tuán)，例如芐基，和芳基基團(tuán)如叔丁氧基羰基(Boc)，甲硅烷基醚，如叔丁基二甲基或叔丁基二苯基，以及烷基醚，如通過(guò)可變連接子(CR10R20)n的烷基鏈連接的甲基。氨基保護(hù)基的實(shí)例可包括芐基，芳基如乙酰基和三烷基甲硅烷基基團(tuán)。羧酸基團(tuán)通常通過(guò)轉(zhuǎn)化為易于水解的酯而加以保護(hù)，例如使用三氯乙基、叔丁基、芐基等基團(tuán)進(jìn)行保護(hù)。
式(I)，(Ia)，(II)和(IIa)化合物的可藥用酸加成鹽可以用已知方法制得，例如在適當(dāng)溶劑存在下用適當(dāng)量的酸處理。
本發(fā)明化合物的制備用下面所示的流程說(shuō)明。在本文中，流程I和II中所示化合物帶有S-甲基，或S(O)2-甲基基團(tuán)，它們被認(rèn)為是S(O)m-Rg基團(tuán)的代表基團(tuán)，見(jiàn)下面的結(jié)構(gòu)式所述。
原料1-流程I可按照文獻(xiàn)已知方法(例如Santilli等在J.heterocycl.Chem.(1971)，445-53中所述的方法)由市售物4，6-二羥基-2-甲基巰基嘧啶制得，其中使用POCl3和DMF。
中間體2-流程I用兩種不同路線(xiàn)制備。在第一條路線(xiàn)中，使二氯醛1-流程I在NaH存在下在DMSO中與芳胺偶聯(lián)(Santilli等，J.Heterocycl.Chem.(1971)，445-53)，得到需要的化合物2-流程I以及亞胺13-流程I。在THF中用鹽酸處理，亞胺轉(zhuǎn)化為醛2-流程I。1-流程I向2-流程I的轉(zhuǎn)化也可以使用三乙胺和所需胺在氯仿中室溫反應(yīng)10分鐘完成。對(duì)于各種不同的烷基胺該反應(yīng)都非常有效(78-95％收率)。對(duì)于芳胺，需要高溫(回流)和更長(zhǎng)的反應(yīng)時(shí)間(24小時(shí))才能完成反應(yīng)。當(dāng)使用3當(dāng)量或更多當(dāng)量的胺時(shí)可以不使用堿。其它適宜的堿包括但不限于吡啶、二異丙基乙胺或吡咯烷，它們也可以在適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑中使用，這些溶劑包括但不限于THF、乙醚或二烷。
在第二條路線(xiàn)中，腈9-流程I是以醛1-流程I為原料經(jīng)三步制備的(Santilli等，J.Heterocycl.Chem.(1971)，445-53)。在NaH存在下，在DMSO中偶聯(lián)二氯腈9-流程I和芳基胺，得到需要的化合物10-流程I。也可以在適當(dāng)有機(jī)溶劑如THF、DMF或二烷中使用其它適宜的堿，如吡啶、二異丙基乙胺或鈉。腈9-流程I的制備與應(yīng)用還可見(jiàn)于2001年3月2日遞交的PCT/US01/06688，其內(nèi)容在此全文引入用作參考。
腈10-流程I在室溫下在二氯甲烷中很容易被DIBAL還原(Boschelliat等，J.Med.Chem.(1998)，4365-4377)，而得到需要物2-流程I以及未取代的亞胺13-流程I(R＝H)。后者就地用HCl水解成2-流程I。也可以在適當(dāng)有機(jī)溶劑如THF、乙醚或二烷中使用其它還原劑如氫化鋁鋰、阮內(nèi)鎳或SnCl2來(lái)完成10-流程I向2-流程I的轉(zhuǎn)化。
在Suzuki偶聯(lián)條件下，利用鈀催化劑如四(三苯膦)鈀(0)偶聯(lián)醛2-流程I與芳基硼酸，得到良好至優(yōu)異收率的3-流程I?；蛘?，2-流程I的聯(lián)芳基偶聯(lián)反應(yīng)可以使用芳基或雜芳基有機(jī)鋅、有機(jī)銅、有機(jī)錫、或形成聯(lián)-芳基交叉偶聯(lián)產(chǎn)物如3-流程I已知的其它有機(jī)金屬試劑來(lái)進(jìn)行。[例如參見(jiàn)Solberg，J.；Undheim，K.Acta Chemica Scandinavia 1989，62-68]。2-流程I中氯的置換也可以由氮親核試劑[相關(guān)的氨基化反應(yīng)參見(jiàn)USP 3,631,045和3,910,913]、硫親核試劑[參見(jiàn)Tumkevicius，S.Liebigs Ann.1995，1703-1705]，氧親核試劑、或烷基親核試劑完成。
3-流程I然后用三種方法之一轉(zhuǎn)化為吡啶并嘧啶酮5-流程I。第一種方法使用維悌希反應(yīng)(例如由Horner-Emmons改進(jìn)的這種反應(yīng))將3-流程I轉(zhuǎn)化為4-流程I。在此反應(yīng)中，醛3-流程I用適當(dāng)?shù)牧兹~立德如膦?；缍一Ⅴ；宜嵋阴セ蚨一Ⅴ；宜峒柞ヌ幚恚上N中間體4-流程I。此反應(yīng)是在適當(dāng)溶劑如乙醚、二烷或乙醇中，在適當(dāng)堿如氫化鈉、甲醇鈉、或氫氧化鈉存在下回流進(jìn)行。3-流程I向4-流程I的轉(zhuǎn)化也可以使用Peterson烯化反應(yīng)，或應(yīng)用乙酸酐、丙二酸及其單烷基酯、或乙酸乙酯的羥醛基烯化反應(yīng)來(lái)進(jìn)行。
在密封管中于220℃下在甲苯中加熱4-流程I(Matyus等，Heterocycles(1985)，2057-64)，接著除去溶劑，得到需要產(chǎn)物5-流程I。這一反應(yīng)可以在適當(dāng)堿如DBU或二異丙基乙胺、吡啶、雙(三甲基甲硅烷基)氨化鋰、或LDA存在下，在適當(dāng)有機(jī)溶劑如有機(jī)烴、甲酚、二烷、DMF、吡啶或二甲苯中進(jìn)行。
第二種方法使用Still改良的Horner-Emmons反應(yīng)(Still等，TetrahedronLett.(1983)，4405-8；Jacobsen等，Tetrahedron(1994)，4323-34)，生成需要產(chǎn)物5-流程I和反式異構(gòu)體4-流程I的混合物。分離反式異構(gòu)體4-流程I，并按上所述在密封管中于220℃下在甲苯中加熱而轉(zhuǎn)化為需要產(chǎn)物5-流程I。
第三種方法包括乙?；?-流程I，接著進(jìn)行分子內(nèi)羥醛縮合，并使用乙?；瘎?如乙酸酐、乙酰氯或乙烯酮)和適當(dāng)堿(如吡啶、二異丙基乙胺或吡咯烷)進(jìn)行促進(jìn)，從而能夠以極其優(yōu)良的產(chǎn)率生成5-流程I。當(dāng)R3是任選取代的芳基或雜芳基時(shí)，優(yōu)選第三種方法。當(dāng)R3為芳基烷基，或雜芳基烷基取代基時(shí)，非顯而易見(jiàn)的是反應(yīng)會(huì)形成式(VII)的關(guān)鍵中間體[如下文所示(3a-流程II)]，并且如下面流程II所示該中間體可任選地被分離。優(yōu)選不分離式(VII)化合物，而是進(jìn)一步與堿反應(yīng)或通過(guò)加熱環(huán)合成5-流程-I。對(duì)于其它的R3基團(tuán)，應(yīng)當(dāng)使用第一種和第二種方法。
硫化物5-流程I氧化形成砜6-流程I的反應(yīng)使用間氯過(guò)苯甲酸(mCPBA)進(jìn)行，無(wú)論是產(chǎn)率還是純度都很高。本發(fā)明使用的適宜氧化方法包括使用一或兩當(dāng)量的間氯過(guò)苯甲酸(mCPBA)或Oxone，不是得到亞砜就是得到砜。硫化物氧化形成亞砜或砜的反應(yīng)也可以使用OsO4和催化劑叔胺N-氧化物，過(guò)氧化物，其它過(guò)酸，氧，臭氧、有機(jī)過(guò)氧化物、高錳酸鉀和高錳酸鋅，過(guò)硫酸鉀和次氯酸鈉來(lái)進(jìn)行。
置換砜6-流程I形成終產(chǎn)物7-流程-I的反應(yīng)通常使用處在N-甲基吡咯烷中的過(guò)量胺進(jìn)行(Barvian等，J.Med.Chem.(2000)，4606-4616)。多種伯胺都能以?xún)?yōu)良的收率進(jìn)行此反應(yīng)。在某些情況下(在O-置換反應(yīng)或磺酰胺形成反應(yīng)中)，在二甲基甲酰胺中用堿(通常為氫化鈉)處理制備親核試劑的陰離子，然后加成到砜上。這些反應(yīng)的收率通常都較低。文獻(xiàn)中已經(jīng)報(bào)道了與其中X為SO-烷基或SO2-烷基的本發(fā)明化合物類(lèi)似的相關(guān)砜和亞砜被各種不同的親核試劑置換。因此，其中X為烷基砜或亞砜的本發(fā)明化合物的類(lèi)似物在不加入堿催化劑的情形下在極性非質(zhì)子傳遞溶劑例如但不限于N-甲基吡咯烷-2-酮(NMP)中，可以用伯和仲烷基胺置換，其中反應(yīng)溫度隨胺的親核性而變化。例如，在NMP中用乙醇胺置換式(I)化合物的類(lèi)似物中的砜需在65℃反應(yīng)30分鐘，而對(duì)于位阻更大的胺如三(羥甲基)-氨基甲烷，可能需要高溫和更長(zhǎng)的反應(yīng)時(shí)間(80℃，反應(yīng)時(shí)間24小時(shí))。砜也可以在高溫下在DMSO中被取代的芳胺，或雜芳胺置換，這些胺有時(shí)需用氫化鈉或其它適宜的堿形成芳基或雜芳基胺陰離子。另外，如專(zhuān)利文獻(xiàn)(WO 99/32121)中早已描述的那樣，式(I)化合物的亞砜類(lèi)似物易被芳基或雜芳基胺的鋁鹽置換。類(lèi)似地，式(I)和(Ia)的砜和亞砜類(lèi)似物也可以被芳基或雜芳基或烷基硫醇或烷基或芳基或雜芳基醇置換。例如，含有砜作為X取代基的(I)的類(lèi)似物可以與醇鈉/醇進(jìn)行置換反應(yīng)，或者可由醇或酚與適當(dāng)堿如鈉、NaH或雙(三甲基甲硅烷基)氨化鈉在極性非質(zhì)子傳遞溶劑如DMSO中生成的反應(yīng)性醇鹽或酚鹽親核試劑進(jìn)行置換反應(yīng)，或者以?xún)粝喾磻?yīng)方式進(jìn)行。類(lèi)似地，與式(I)和(Ia)有關(guān)的砜例如可以被碳親核試劑如芳基或烷基格利雅試劑或相關(guān)的有機(jī)金屬物如有機(jī)鋰、鋅、錫或硼置換。在某些情形下，這些反應(yīng)需要過(guò)渡金屬催化劑如Pd或Ni催化劑。氰化物、丙二酸陰離子、未活化烯醇物或雜環(huán)C親核試劑如1-甲基咪唑陰離子(在THF中使用NaH或其它適宜的堿生成陰離子)與相關(guān)的2-嘧啶砜的置換反應(yīng)也是有先例的(參見(jiàn)例如Chem Pharm Bull.1987，4972-4976)。例如，其中X為烷基砜的式(I)和(Ia)化合物的類(lèi)似物可以被1-甲基咪唑陰離子置換，生成取代在咪唑C-2上的C-烷基化產(chǎn)物，其中1-甲基咪唑的陰離子系在溶劑如THF中于約-70℃下用正丁基鋰處理1-甲基咪唑生成。
對(duì)于本發(fā)明來(lái)講，其中X為R2或NHS(O)mR2的式(I)，(Ia)，(II)和(IIa)的化合物可通過(guò)用如式(I)和(Ia)中定義的適當(dāng)?shù)摹癤”官能物置換砜而由化合物6-流程I制得。為獲得其中X為S(O)mR2而R2不為甲基的式(I)，(Ia)，(II)和(IIa)的化合物，用硫醇(R2SH)置換相應(yīng)化合物6-流程I上的砜，繼而如果需要的話(huà)用適當(dāng)氧化劑如MCPBA或KMnO4氧化。本發(fā)明使用的適當(dāng)氧化方法包括使用氧化劑如一或兩當(dāng)量的間氯過(guò)苯甲酸或Oxone，得到亞砜或者砜。硫化物氧化生成砜的反應(yīng)也可以使用OsO4和催化劑叔胺N-氧化物來(lái)進(jìn)行。用于硫化物氧化的其它方法包括使用過(guò)氧化氫，其它過(guò)酸，氧氣，臭氧，有機(jī)過(guò)氧化物，高錳酸鉀和高錳酸鋅，過(guò)硫酸鉀和次氯酸鈉來(lái)進(jìn)行。
8-流程I也可以通過(guò)在醇中在相應(yīng)的醇鹽存在下加熱反式酯4-流程I來(lái)制備。該反應(yīng)的產(chǎn)率對(duì)伯醇而言很高，但對(duì)于仲醇則需要較長(zhǎng)的反應(yīng)時(shí)間。醇鈉易從相應(yīng)的醇和堿如鈉或氫化鈉制備。
用SmI2還原反式酯4-流程I生成還原類(lèi)似物11-流程I。此還原反應(yīng)也可以在其它還原劑如氫氣，鋰/液氨、鎂或硼氫化鈉存在下，在適當(dāng)有機(jī)溶劑如THF、乙醇或乙醚中進(jìn)行。
酯11的環(huán)化-流程I可以使用甲醇鈉在甲醇中進(jìn)行，生成還原類(lèi)似物12-流程I。在適當(dāng)有機(jī)溶劑如甲醇、乙醇或二烷中也可以使用其它有機(jī)堿如鈉、乙醇鈉或TEA。在適當(dāng)有機(jī)溶劑如甲苯、二甲苯或異丙醇中加熱酯11-流程I到150℃，也可以獲得產(chǎn)物12-流程I。
流程I本領(lǐng)域技術(shù)人員可使用的制備與本發(fā)明化合物類(lèi)似的中間體的其它方法，可見(jiàn)于WO 99/41253(現(xiàn)在的美國(guó)專(zhuān)利6,200,977)；US 6,153,619；US6,268,310；US 5,468,751；US 5,474,996；和EP 1040831。
下面流程II示出制備本發(fā)明式(VII)化合物的另一實(shí)例，并且在上文中進(jìn)行了描述。
流程II本發(fā)明的另一方面涉及式(III)的新中間體 其中R1為芳基或雜芳基環(huán)，所述環(huán)任選被取代；R3為C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基烷基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基，雜芳基C1-10烷基，雜環(huán)基，或雜環(huán)基C1-10烷基基團(tuán)，所述這些基團(tuán)任選被取代；R12為C1-10烷基，芳基，雜芳基，或芳基烷基；m為0或整數(shù)1或2；和Rg為C1-4烷基。
優(yōu)選Rg為C1-4烷基，更優(yōu)選甲基。
優(yōu)選m為0或整數(shù)1或2。更優(yōu)選m為0或2。
優(yōu)選的是，R1為芳基部分，更優(yōu)選苯基環(huán)，其任選被鹵素、C1-4烷基、或鹵代-C1-4烷基取代一次或多次。更優(yōu)選的是，苯環(huán)是在2，4，或6-位被取代，或在2，4-位被二取代，例如2-氟、4-氟、2，4-二氟，2，4，6-三氟，或2-甲基-4-氟。
本發(fā)明的另一方面涉及式(IIIa)的新中間體 其中R1為基團(tuán)YRa；Y為C(Rb)(Rd)，C(O)，N(Rd)，N(Rd)C(Rc)(Rd)，氧，OC(Rc)(Rd)，S(O)m，或S(O)mC(Rc)(Rd)；Ra為芳基或雜芳基環(huán)，所述環(huán)任選被取代；Rb為氫，C1-2烷基，NRc，羥基，硫代，C1-2烷氧基，S(O)mC1-2烷基；Rc為氫或C1-2烷基；Rd為氫或C1-2烷基；m為0或整數(shù)1或2；和R3為C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基烷基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基，雜芳基C1-10烷基，雜環(huán)基，或雜環(huán)基C1-10烷基基團(tuán)，所述這些基團(tuán)任選被取代；R12為C1-10烷基，芳基，雜芳基，或芳基烷基；m為0或整數(shù)1或2；和Rg為C1-4烷基。
式(III)和(IIIa)、以及下面的(IV)和(IVa)的化合物中的取代基分別遵循本發(fā)明式(I)或(II)最終化合物的那些優(yōu)選內(nèi)容。
本發(fā)明的另一方面涉及式(IV)的新中間體
其中R1，R3，R12，m和Rg如上面式(III)所定義。
本發(fā)明的另一方面涉及式(IVa)的新中間體 其中R1，R3，R12，m和Rg如上面式(IIIa)所定義。
本發(fā)明的另一方面涉及式(IV)的新中間體 其中R1，R3，R12，m和Rg如上面式(III)所定義。
本發(fā)明的另一方面涉及式(IVa)的新中間體 其中R1，R3，R12，Rg和m如上面式(III)所定義。
本發(fā)明的再一方面涉及下式新中間體 其中
R1為鹵素，任選取代的芳基或任選取代的雜芳基環(huán)；R3為氫，C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基烷基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基，雜芳基C1-10烷基，雜環(huán)基，或雜環(huán)基C1-10烷基基團(tuán)，所述這些基團(tuán)任選被取代；條件是當(dāng)R3為氫，則R1不能為氯；m為0或整數(shù)1或2；和Rg為C1-4烷基。
優(yōu)選的是，R1為鹵素，更優(yōu)選氯，或芳基部分，更優(yōu)選苯基環(huán)，其任選被鹵素、C1-4烷基、或鹵代-C1-4烷基取代一次或多次。更優(yōu)選的是，苯環(huán)是在2，4，或6-位被取代，或在2，4-位被二取代，例如2-氟、4-氟、2，4-二氟，2，4，6-三氟，或2-甲基-4-氟。
優(yōu)選R3為任選取代的C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基烷基，或芳基。
優(yōu)選R3的任選取代基獨(dú)立選自C1-10烷基，鹵代C1-10烷基，C2-10鏈烯基，C2-10炔基，C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基C1-10烷基，C5-7環(huán)烯基，C5-7環(huán)烯基C1-10烷基，鹵素，(CR10R20)nOR6，(CR10R20)nSH，(CR10R20)nS(O)mR7，(CR10R20)nNHS(O)2R7，(CR10R20)nNR4R14，(CR10R20)nCN，(CR10R20)nS(O)2NR4R14，(CR10R20)nC(Z)R6，(CR10R20)nOC(Z)R6，(CR10R20)nC(Z)OR6，(CR10R20)nC(Z)NR4R14，(CR10R20)nNR10C(Z)R6，(CR10R20)nNR10C(＝NR10)NR4R14，(CR10R20)nOC(Z)NR4R14，(CR10R20)nNR10C(Z)NR4R14，或(CR10R20)nNR10C(Z)OR7.
更優(yōu)選所述任選取代基獨(dú)立選自鹵素，烷基，羥基，烷氧基，氨基，或鹵代烷基。
式(VI)化合物的實(shí)例包括但不限于4-氯-2-甲硫基(methylsulfanyl)-6-苯基氨基-嘧啶-5-甲醛；4-氯-6-(2，6-二氟-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-氯-6-(2-氯-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-氯-6-(2-氟-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-氯-6-(1-乙基-丙基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-氯-6-異丙基氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-氯-6-環(huán)丙基氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；
4-氯-6-(環(huán)丙基甲基-氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；2-甲硫基-4-苯基-6-苯基氨基-嘧啶-5-甲醛；4-(2-氯苯基)-6-(1-乙基-丙基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-(2-氯苯基)-6-(2-氯-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-(2-氟苯基)-6-(2-氯-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-(2-氟-苯基)-6-異丙基氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-氯-2-甲硫基-6-環(huán)己基氨基嘧啶-5-甲醛；2-甲硫基-4-(2-甲基-4-氟苯基)-6-環(huán)己基氨基嘧啶-5-甲醛；4-氨基-6-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-環(huán)丙基氨基-6-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-(環(huán)丙基甲基-氨基)-6-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-(2，6-二氟-苯基氨基)-6-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-(2-氟苯基)-6-(2-氟-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-仲丁基氨基-6-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-(4-氟-2-甲基-苯基)-6-異丙基氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-環(huán)丙基氨基-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-(環(huán)丙基甲基-氨基)-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-(4-氟-2-甲基-苯基)-6-(2-氟-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-仲丁基氨基-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-氨基-6-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-氨基-6-氯-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-仲丁基氨基-6-氯-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-(2，6-二氟-苯基氨基)-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-(1-乙基丙基氨基)-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；2-甲硫基-4-(2-甲基-4-氟苯基)-6-環(huán)己基氨基嘧啶-5-甲醛；和4-氯-2-甲硫基-6-環(huán)己基氨基嘧啶-5-甲醛。
本發(fā)明的再一方面涉及式(VIa)的新中間體
其中R1為基團(tuán)YRa；Y為C(Rb)(Rd)，C(O)，N(Rd)，N(Rd)C(Rc)(Rd)，氧，OC(Rc)(Rd)，S(O)m，或S(O)mC(Rc)(Rd)；Ra為芳基或雜芳基環(huán)，所述環(huán)任選被取代；Rb為氫，C1-2烷基，NRc，羥基，硫代，C1-2烷氧基，S(O)mC1-2烷基；Rc為氫或C1-2烷基；Rd為氫或C1-2烷基；m為0或整數(shù)1或2；和R3為氫，C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基烷基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基，雜芳基C1-10烷基，雜環(huán)基，或雜環(huán)基C1-10烷基基團(tuán)，所述這些基團(tuán)任選被取代；m為0或整數(shù)1或2；和Rg為C1-4烷基。
如上所述，優(yōu)選式(VI)和(VIa)化合物中的取代基遵循本發(fā)明式(I)和(II)最終化合物中的那些取代基。
可例舉的式(VI)化合物包括但不限于4-(2-氯-苯基氨基)-2-甲硫基-6-苯氧基-嘧啶-5-甲醛。
本發(fā)明的再一方面涉及式(VII)的新中間體 其中R1如上面式(I)化合物所定義，且R3，Rg，和m為任選取代的芳基或雜芳基部分，如式(III)化合物所定義。
本發(fā)明的再一方面涉及式(VIIa)的新中間體 其中R1如上面式(II)化合物所定義，且R3，Rg，和m為任選取代的芳基或雜芳基部分，如式(IIIa)化合物所定義。
本發(fā)明的再一方面涉及下式新中間體 其中R1為鹵素；R3為氫，C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基烷基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基，雜芳基C1-10烷基，雜環(huán)基，或雜環(huán)基C1-10烷基基團(tuán)，所述這些基團(tuán)任選被取代；條件是當(dāng)R3為氫時(shí)，則R1不能為氯；m為0或整數(shù)1或2；和Rg為C1-4烷基。
優(yōu)選R1為鹵素，更優(yōu)選氯。
適宜的是，R3取代基與本發(fā)明式(I)和(II)化合物中的相同。
治療方法式(I)和(Ia)的化合物或其可藥用鹽可用于制備用于預(yù)防或治療人或其它哺乳動(dòng)物的疾病的藥物，所述疾病由于這些哺乳動(dòng)物細(xì)胞例如(但不局限于)單核細(xì)胞和/或巨噬細(xì)胞過(guò)量或失控產(chǎn)生細(xì)胞因子而加重或引起。
在本發(fā)明中，除另有說(shuō)明外，式(I)和(Ia)的化合物均簡(jiǎn)稱(chēng)為式(I)化合物。
式(I)化合物能抑制促炎性細(xì)胞因子如IL-1，IL-6，IL-8和TNF，因此具有治療用途。IL-1，IL-6，IL-8和TNF影響多種細(xì)胞與組織，這些細(xì)胞因子及其它白細(xì)胞衍生細(xì)胞因子是多種疾患和病癥的重要且關(guān)鍵的炎性介質(zhì)。抑制這些促炎性細(xì)胞因子對(duì)于控制、減輕和緩解許多這些疾患是有益的。
因此，本發(fā)明提供了治療細(xì)胞因子介導(dǎo)的疾病的方法，該方法包括服用有效量的干擾細(xì)胞因子的式(I)化合物或其可藥用鹽。
式(I)化合物能夠抑制誘導(dǎo)型促炎蛋白如COX2[其還有多種其它名稱(chēng)，例如前列腺素內(nèi)過(guò)氧化物合成酶-2(PGHS-2)]，并因此具有治療用途。這些環(huán)加氧酶(CO)途徑的促炎性脂質(zhì)介質(zhì)由誘導(dǎo)COX2酶產(chǎn)生。因此，對(duì)能使花生四烯酸衍生生成這些產(chǎn)物如前列腺素的COX-2的調(diào)節(jié)可影響多種細(xì)胞和組織，它們是多種疾患和病癥的重要且關(guān)鍵的炎性介質(zhì)。式(I)化合物不影響COX-1的表達(dá)。這種對(duì)COX-2的選擇性抑制可減輕或排除與抑制COX-1有關(guān)的潰瘍性?xún)A向，從而抑制細(xì)胞保護(hù)作用所必需的前列腺素。因此，抑制這些促炎性介質(zhì)有利于控制、減輕和緩和多種這些疾患。最值得注意的是，這些炎性介質(zhì)尤其是前列腺素與疼痛如對(duì)于疼痛受體的致敏作用、或水腫有關(guān)。因此這方面疼痛的治療包括治療神經(jīng)肌肉疼痛、頭疼、癌癥疼痛和關(guān)節(jié)炎疼痛。式(I)化合物或其可藥用鹽通過(guò)抑制COX-2酶的合成而能夠用于預(yù)防或治療人或其它哺乳動(dòng)物。
因此，本發(fā)明提供了抑制COX-2合成的方法，該方法包括服用有效量的式(I)化合物或其可藥用鹽。本發(fā)明也提供了通過(guò)抑制COX-2酶的合成治療人或其它哺乳動(dòng)物的方法。
具體說(shuō)，式(I)化合物或其可藥用鹽是用在預(yù)防或治療人或其它哺乳動(dòng)物的疾病方面的，所述疾病由這些哺乳動(dòng)物細(xì)跑例如(但不局限于)單核細(xì)胞和/或巨噬細(xì)胞過(guò)量或失控產(chǎn)生IL-1、IL-6、IL-8和TNF而加劇或引起。
因此，在另一方面，本發(fā)明涉及在需要的哺乳動(dòng)物中抑制IL-1產(chǎn)生的方法，該方法包括給所述哺乳動(dòng)物服用有效量的式(I)化合物或其可藥用鹽。
許多疾病都是由IL-1的過(guò)量或失控產(chǎn)生而加重或引起的。這些疾病包括類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、腦膜炎、局部缺血性和出血性中風(fēng)、神經(jīng)外傷/閉合式頭損傷、中風(fēng)、內(nèi)毒素血癥和/或中毒性休克綜合癥、其它急性或慢性炎癥疾病如內(nèi)毒素引起的炎癥反應(yīng)或炎性腸病、結(jié)核病、動(dòng)脈粥樣硬化、肌肉退化、多發(fā)性硬化癥、病質(zhì)、骨吸收、牛皮癬關(guān)節(jié)灸、萊特爾氏綜合征、痛風(fēng)、創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)疹關(guān)節(jié)炎和急性滑膜炎。最近的證據(jù)也將IL-1活性與糖尿病、胰腺β細(xì)胞疾病和阿爾茨海默氏病聯(lián)系到一起。
使用CSAID抑制劑化合物治療CSBP介導(dǎo)的疾病可以包括(但不限于)神經(jīng)變性疾病，如阿爾茨海默氏病(如上所述)、帕金森病和多發(fā)性硬化等。
另一方面，本發(fā)明涉及在需要的哺乳動(dòng)物中抑制TNF產(chǎn)生的方法，該方法包括給所述哺乳動(dòng)物服用有效量的式(I)化合物或其可藥用鹽。
產(chǎn)生TNF的過(guò)量或失控能介導(dǎo)或加劇多種疾病，這些疾病包括類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、類(lèi)風(fēng)濕性脊椎炎、骨關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)關(guān)節(jié)炎和其它關(guān)節(jié)炎疾病，膿毒病，膿毒性休克，內(nèi)毒素性休克，革蘭氏陰性膿毒病，中毒性休克綜合征，成人呼吸窘迫綜合征，慢性肺炎性疾病和肺慢性阻塞性疾病，矽肺，肺肉樣瘤病，骨吸收疾病如骨質(zhì)疏松癥，心、腦和腎再灌注損傷、移植物抗宿主反應(yīng)、同種異體移植排斥、發(fā)熱和感染如流感所致的肌痛、腦感染包括腦炎(包括HIV誘導(dǎo)的形式)，腦型瘧，腦膜炎，局部缺血性和出血性中風(fēng)，感染或惡性腫瘤繼發(fā)的惡病質(zhì)，獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)繼發(fā)的惡病質(zhì)，AIDS，ARC(AIDS相關(guān)復(fù)合征)，瘢痕瘤形成，傷疤組織形成，炎癥性腸病，Crohn病，潰瘍性結(jié)腸炎和pyresis。
式(I)化合物也用于治療病毒感染，其中這些病毒對(duì)于TNF的正調(diào)節(jié)敏感或在體內(nèi)引起TNF產(chǎn)生。本發(fā)明設(shè)想用于治療的病毒是由于感染產(chǎn)生TNF的那些病毒或者對(duì)式(I)的抑制TNF化合物直接或間接的抑制作用敏感(如通過(guò)減少?gòu)?fù)制而起抑制作用)的那些病毒。這些病毒包括(但不局限于)HIV-1、HIV-2和HIV-3、巨細(xì)胞病毒(CMV)、流感病毒、腺病毒和皰疹類(lèi)病毒，例如(但不限于)帶狀皰疹病毒(Herpes Zoster)和單純皰疹病毒(Herpes Simplex)。因此，另一方面，本發(fā)明涉及治療感染人免疫缺陷病毒(HIV)的哺乳動(dòng)物的方法，該方法包括給這樣的哺乳動(dòng)物服用TNF有效抑制量的式(I)化合物或其可藥用鹽。
同樣可以認(rèn)識(shí)到，IL-6和IL-8都是鼻病毒(HRV)感染期間產(chǎn)生的，能夠引起感冒發(fā)病和與HRV感染有關(guān)哮喘的加劇(Turner等.(1998)，Clin.Infec.Dis.，Vol 26，p 840；Teren等(1997)，Am J Respir Crit Care Med vol 155，p 1362；Grunberg等(1997)，Am J Respir Crit Care Med 156609和Zhu等，J ClinInvest(1996)，97421)。人們還已經(jīng)在體外證實(shí)，HRV對(duì)肺上皮細(xì)胞的感染引發(fā)產(chǎn)生IL-6和IL-8(Subauste等，J.Clin.Invest.1995，96549)。上皮細(xì)胞為HRV感染的初始部位。因此，本發(fā)明的另一方面涉及治療或減輕鼻病毒感染所致炎癥的方法，該方法不一定直接作用于病毒本身。
式(I)化合物也可用于人以外的需要抑制TNF生成的哺乳動(dòng)物的獸醫(yī)治療。治療性或預(yù)防性治療動(dòng)物的TNF介導(dǎo)疾病包括上述那些疾病，但特別是病毒感染。這些病毒的實(shí)例包括(但不限于)慢病毒屬感染如傳染性馬貧血病毒、山羊關(guān)節(jié)炎病毒、visna病毒或maedi病毒或逆轉(zhuǎn)錄病毒感染，例如但不限于貓免疫缺陷病毒(FIV)、牛免疫缺陷病毒或犬免疫缺陷病毒或其它的逆轉(zhuǎn)錄病毒感染。
式(I)化合物也可局部用于治療或預(yù)防由細(xì)胞因子如分別由IL-1或TNF過(guò)量產(chǎn)生而介導(dǎo)或加劇的局部病癥，如炎性關(guān)節(jié)、濕疹、牛皮癬和其它炎性皮膚病如曬斑；炎性眼疾包括結(jié)膜炎；pyresis、疼痛和其它炎癥相關(guān)疾病。牙周病也是由局部或全身性細(xì)胞因子產(chǎn)生所致。因此，本發(fā)明的另一方面提供了使用式(I)化合物控制這些口腔病如齒齦炎和牙周炎中與細(xì)胞因子產(chǎn)生有關(guān)炎癥的用途。
式(I)化合物也已經(jīng)被證明能抑制IL-8(白細(xì)胞介素-8，NAP)的產(chǎn)生。因此，另一方面，本發(fā)明涉及在需要的哺乳動(dòng)物中抑制IL-8產(chǎn)生的方法，該方法包括給所述哺乳動(dòng)物服用有效量的式(I)化合物或它的藥學(xué)上可接受的鹽。
許多疾病都是由于產(chǎn)生IL-8的過(guò)量或失控而加重或引起的。這些疾病的特征是有大量嗜中性白細(xì)胞滲入，例如牛皮癬，炎癥性腸病，哮喘，心、腦、和腎的再灌注損傷、成人呼吸窘迫綜合征、血栓形成和腎小球性腎炎。所有這些疾病都與導(dǎo)致嗜中性白細(xì)胞趨化到炎癥位點(diǎn)的IL-8產(chǎn)生增多有關(guān)。與其它炎性細(xì)胞因子(IL-1，TNF，和IL-6)相反，IL-8具有促進(jìn)嗜中性白細(xì)胞趨化和活化的獨(dú)特性質(zhì)。因此，抑制IL-8的產(chǎn)生可直接減少嗜中性白細(xì)胞滲入。
為了緩解或預(yù)防這些疾病，以足以抑制細(xì)胞因子尤其是IL-1、IL-6、IL-8或TNF產(chǎn)生的量服用式(I)化合物，調(diào)節(jié)它們到正常水平或在某些情況下到正常水平以下。例如在本發(fā)明說(shuō)明書(shū)中，IL-1、IL-6、IL-8或TNF的異常水平包括(i)游離(無(wú)結(jié)合細(xì)跑的)IL-1、IL-6、IL-8或TNF的水平大于或等于每毫升1皮克；(ii)與IL-1、IL-6、IL-8或TNF相關(guān)的任何細(xì)胞；或者(iii)在分別產(chǎn)生IL-1、IL-6、IL-8或TNF的細(xì)胞或組織中存在高于基本水平的IL-1、IL-6、IL-8或TNF mRNA。
式(I)化合物是細(xì)胞因子的抑制劑特別是IL-1、IL-6、IL-8或TNF的抑制劑的發(fā)現(xiàn)，是基于式(I)化合物在本文描述的體外試驗(yàn)中對(duì)IL-1、IL-6、IL-8或TNF產(chǎn)生的作用。
本文所用術(shù)語(yǔ)“抑制IL-1(IL-6、IL-8或TNF)的產(chǎn)生”是指a)通過(guò)抑制包括(但不限于)單核細(xì)胞或巨噬細(xì)胞在內(nèi)的所有細(xì)胞在體內(nèi)釋放細(xì)胞因子，使人體內(nèi)過(guò)高的細(xì)胞因子(IL-1、IL-6、IL-8或TNF)水平降低到正常水平或正常水平以下；b)在基因組水平上下調(diào)人體內(nèi)過(guò)高的細(xì)胞因子(IL-1、IL-6、IL-8或TNF)水平到正常水平或正常水平以下；c)通過(guò)抑制直接合成作為翻譯后活動(dòng)的細(xì)胞因子(IL-1、IL-6、IL-8或TNF)進(jìn)行下調(diào)；或者d)在翻譯水平下調(diào)人體內(nèi)過(guò)高的細(xì)胞因子(IL-1、IL-6、IL-8或TNF)水平到正常水平或正常水平以下。
本文所用術(shù)語(yǔ)“TNF介導(dǎo)的疾病或疾病狀態(tài)”是指其中TNF通過(guò)其自身生成或通過(guò)引起其它單核因子如(但不限于)IL-1、IL-6、IL-8釋放而起作用的所有疾患。例如其中IL-1是主要成分、并且其產(chǎn)生或作用由于TNF而被加重或分泌的疾病狀態(tài)可認(rèn)為是TNF介導(dǎo)的疾病。
本文所用術(shù)語(yǔ)“細(xì)胞因子”是指影響細(xì)胞功能的任何分泌多肽，并且是在免疫、炎性或造血反應(yīng)中調(diào)節(jié)細(xì)胞間相互作用的分子。細(xì)胞因子包括(但不限于)單核因子和淋巴因子，與產(chǎn)生它們的細(xì)胞無(wú)關(guān)。例如，單核因子一般指的是由單核細(xì)胞如巨噬細(xì)胞和/或單核細(xì)胞產(chǎn)生和分泌的細(xì)胞因子。然而許多其它的細(xì)胞也產(chǎn)生單核因子，如天然殺傷細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、嗜中性白細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、腦星形膠質(zhì)細(xì)胞、骨髓基質(zhì)細(xì)胞、表皮角質(zhì)形成細(xì)跑和B-淋巴細(xì)胞。淋巴因子一般指的是由淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子。細(xì)胞因子的實(shí)例包括(但不限于)白細(xì)胞介素-1(IL-1)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、白細(xì)胞介素-8(IL-8)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和腫瘤壞死因子-β(TNF-β)。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“細(xì)胞因子干擾量”或“細(xì)胞因子抑制量”是指有效量的式(I)化合物，當(dāng)給予患者用于預(yù)防或治療細(xì)胞因子的過(guò)度或失控產(chǎn)生而加劇或引起的疾病時(shí)，其能使體內(nèi)細(xì)胞因子水平降至正常水平或正常水平以下。
在本說(shuō)明書(shū)中，短語(yǔ)“抑制細(xì)胞因子，用于治療HIV感染患者”中的細(xì)胞因子是指與(a)參與引發(fā)和/或維持T細(xì)胞活化和/或活化的T細(xì)胞介導(dǎo)的HIV基因表達(dá)和/或復(fù)制和/或(b)任何細(xì)胞因子介導(dǎo)的疾病所致的問(wèn)題，例如惡病質(zhì)或肌肉退化問(wèn)題有關(guān)的細(xì)胞因子。
因?yàn)門(mén)NF-β(也稱(chēng)為淋巴毒素)與TNF-α“(也稱(chēng)為惡液質(zhì)素)具有接近的結(jié)構(gòu)同源性，并且它們每一種都誘導(dǎo)類(lèi)似的生物反應(yīng)和結(jié)合相同的細(xì)胞受體，所以TNF-α和TNF-β兩者都能被本發(fā)明化合物所抑制，為此在文中統(tǒng)稱(chēng)為“TNF”，但另有具體說(shuō)明除外。
一些實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)獨(dú)立地鑒定了MAP激酶家族的一個(gè)成員，或稱(chēng)為CSBP，p38或RK。通過(guò)采用廣譜刺激，例如物理化學(xué)應(yīng)激和用脂多糖或促炎性細(xì)胞因子如白細(xì)胞介素-1和腫瘤壞死因子處理，在不同的細(xì)胞體系中已經(jīng)觀察到這種新的蛋白激酶經(jīng)由雙重磷酸化的活化。已經(jīng)測(cè)得本發(fā)明的細(xì)胞因子生物合成抑制劑式(I)化合物為CSBP/p3/RK激酶活性的強(qiáng)效選擇性抑制劑。這些抑制劑有助于測(cè)定涉及炎癥反應(yīng)的信號(hào)傳導(dǎo)途徑。特別是，這是第一次確定的信號(hào)傳導(dǎo)途徑能被指定為脂多糖在巨噬細(xì)胞中產(chǎn)生細(xì)胞因子方面起的作用。除了已經(jīng)提到的那些疾病外，還包括中風(fēng)、神經(jīng)創(chuàng)傷、心臟和腎臟再灌注損傷、再狹窄、充血性心力衰竭、冠狀動(dòng)脈旁路移植(CABG)手術(shù)、慢性腎衰竭、血管生成及相關(guān)疾病如癌癥、血栓形成、腎小球性腎炎、糖尿病和胰β細(xì)胞、多發(fā)性硬化癥、肌肉退化、濕疹、接觸性皮炎、牛皮癬、曬斑和結(jié)膜炎的治療。
這類(lèi)CSBP抑制劑隨后在多種動(dòng)物模型中測(cè)試了其抗炎活性。為了揭示細(xì)胞因子抑制劑的獨(dú)特活性，選擇相對(duì)于環(huán)加氧酶抑制劑不敏感的模型系統(tǒng)。這些抑制劑在許多這種體內(nèi)研究中呈現(xiàn)出顯著活性。最值得注意的是它們?cè)谀z原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎模型中的效力和在內(nèi)毒素休克模型中對(duì)TNF產(chǎn)生的抑制作用。在后一研究中，血漿TNF水平的降低與存活有關(guān)并且與內(nèi)毒素休克相關(guān)死亡率的保護(hù)有關(guān)。同樣也十分重要的是這些化合物在大鼠胎兒長(zhǎng)骨器官培養(yǎng)體系中抑制骨吸收的效力.Griswold等，(1988)Arthritis Rheum.311406-1412；Badger等，(1989)，Circ.Shock27，51-61；Votta等，(1994)in vitro.Bone 15，533-538；Lee等，(1993).B Ann.N.Y.Acad.Sci.696，149-170.
具有不適當(dāng)血管生成組分的慢性疾病是各種不同的眼部新血管生成，如糖尿病性視網(wǎng)膜病和斑退化。涉及脈管系統(tǒng)過(guò)度或增大性增殖的其它慢性疾病是腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移、動(dòng)脈粥樣硬化和某些關(guān)節(jié)炎病。因此CSBP激酶抑制劑在阻斷這些疾病狀態(tài)的血管生成組分方面是有用的。
本文所用術(shù)語(yǔ)“脈管系統(tǒng)不適當(dāng)?shù)难苌傻倪^(guò)度或增大性增殖”包括但不限于以血管瘤和眼病為特征的疾病。
本文所用術(shù)語(yǔ)“不適當(dāng)?shù)难苌伞卑?但不局限于)以伴隨如發(fā)生在癌癥、轉(zhuǎn)移瘤、關(guān)節(jié)炎和動(dòng)脈粥祥硬化中的組織增生的小泡增殖為特征的疾病。
因此，本發(fā)明提供了在需要的哺乳動(dòng)物(優(yōu)選為人)中治療CSBP激酶介導(dǎo)的疾病的方法，該方法包括給所述哺乳動(dòng)物服用有效量的式(I)化合物或其可藥用鹽。
為了在治療中使用式(I)化合物或其可藥用鹽，通常依照標(biāo)準(zhǔn)制藥方法將其配制成藥物組合物。因此，本發(fā)明也涉及包含有效、無(wú)毒量的式(I)化合物和可藥用的載體或稀釋劑的藥物組合物。
式(I)化合物、其可藥用鹽和含有這些組分的藥物組合物可以很方便地通過(guò)任何常規(guī)給藥途徑，例如口服、局部、非腸道或吸入途徑給藥。式(I)化合物通過(guò)使式(I)化合物與標(biāo)準(zhǔn)藥物載體按常規(guī)方法混合制備的普通劑型給藥。式(I)化合物也可以與已知的第二種治療活性化合物聯(lián)用的常規(guī)劑型給藥。這些方法可包括混合、制粒和壓制或溶解所需制劑的適當(dāng)組分?？梢岳斫饪伤幱玫妮d體或稀釋劑的形式與性質(zhì)是由與一起混合的活性組分的量、給藥途徑和其它公知的可變因素決定的。載體必須是“可接受的”是指它與制劑中的其它成分是相容的，并且對(duì)接受者是無(wú)害的。
所用藥物載體可以是例如固體或液體。固體載體的實(shí)例為乳糖、石膏粉、蔗糖、滑石粉、明膠、瓊脂、果膠、阿拉伯膠、硬脂酸鎂、硬脂酸等。液體載體的實(shí)例為糖漿、花生油、橄欖油、水等。同樣，載體或稀釋劑可包括本領(lǐng)域公知的緩釋材料，例如甘油一硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯或它們與蠟的混合物。
可以使用多種不同的藥物形式。例如如果使用固體載體，可將制劑壓片、以粉劑或丸劑形式填充在硬明膠膠囊內(nèi)，或者制成錠劑或糖錠劑。固體載體的量可以在寬范圍內(nèi)變化，但優(yōu)選約25mg-約1g。當(dāng)使用液體載體時(shí)，制劑為糖漿劑、乳劑、軟明膠膠囊、無(wú)菌注射液如安瓿或非水性液體懸浮劑的形式。
式(I)化合物可局部給藥，即非全身性給藥。這包括將式(I)化合物外部施用到表皮或頰腔上，將這種化合物滴注到耳朵、眼睛和鼻內(nèi)，使化合物不能有效進(jìn)入血流。相反，系統(tǒng)給藥指的是口服、靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)和肌內(nèi)給藥。
適宜于局部給藥的制劑包括適于穿透皮膚滲透到炎癥部位的液體或半液體制劑，如搽劑、洗劑、霜?jiǎng)④浉鄤┗蚝齽?，以及適用于給藥到眼、耳或鼻內(nèi)的滴劑。對(duì)于局部給藥而言，活性成分的含量可以為制劑重量的0.001％至10％w/w，例如1％至2％。然而其含量可以高達(dá)制劑重量的10％w/w，但優(yōu)選低于5％w/w，更優(yōu)選為0.1％至1％w/w。
本發(fā)明洗劑包括適合施用于皮膚或眼的制劑。眼用洗劑可包括任選含有殺菌劑的無(wú)菌水溶液，并且可通過(guò)制備滴劑的類(lèi)似方法制得。施用在皮膚上的洗劑或搽劑也可包括促進(jìn)干燥和清涼皮膚的物質(zhì)如乙醇或丙酮和/或濕潤(rùn)劑如甘油或者油如蓖麻油或花生油。
本發(fā)明的霜?jiǎng)④浉鄤┗蚝齽┦腔钚越M分的外用半固體制劑。它們的制備可通過(guò)在適當(dāng)機(jī)械輔助下，將細(xì)分散或粉末形式的活性組分單獨(dú)或以在水或非水液體的溶液或懸浮液中與含脂肪或不含脂肪基質(zhì)混合來(lái)進(jìn)行。所述基質(zhì)可包括烴類(lèi)如硬、軟或液體石蠟、甘油、蜂蠟、金屬皂；膠漿；天然源油如杏仁油、王米油、花生油、蓖麻油或橄欖油；羊毛脂或它的衍生物或脂肪酸例如硬脂酸或油酸以及醇例如丙二醇或大粒凝膠。這些制劑可包含任何合適的表面活性劑如陰離子、陽(yáng)離子或非離子表面活性劑如脫水山梨醇酯或它的聚氧乙烯衍生物。其中還可包含懸浮劑如天然樹(shù)膠、纖維素衍生物或無(wú)機(jī)材料如含硅的硅石、以及其它組分如羊毛脂。
本發(fā)明的滴劑可包括無(wú)菌的水或油性溶液或懸浮液，并且可通過(guò)將活性組分溶解于適宜的殺菌劑和/或殺真菌劑的和/或任何其它適當(dāng)防腐劑的水溶液中來(lái)制備所述水溶液優(yōu)選含有表面活性劑。所形成的溶液可通過(guò)過(guò)濾加以澄清、然后轉(zhuǎn)移到適宜的容器中，進(jìn)而密封并通過(guò)高壓滅菌或在98-100℃維持半小時(shí)進(jìn)行滅菌。另一方面，這些溶液可通過(guò)過(guò)濾滅菌，然后通過(guò)無(wú)菌技術(shù)轉(zhuǎn)移到容器中。適于包含在滴劑中的殺菌劑和殺真菌劑的實(shí)例為硝酸苯汞或乙酸苯汞(0.002％)、苯扎氯銨(0.01％)和乙酸洗必泰(0.01％)。適于油性溶液制劑的合適溶劑包括甘油、稀醇和丙二醇。
式(I)化合物可經(jīng)非腸道給藥，即通過(guò)靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、鼻內(nèi)、直腸內(nèi)、陰道內(nèi)或腹膜內(nèi)給藥。皮下和肌內(nèi)形式的非腸道給藥方式通常是優(yōu)選的。用于這種給藥方式的適當(dāng)劑型可用常規(guī)技術(shù)制備。式(I)化合物也可通過(guò)吸入給藥，即通過(guò)鼻內(nèi)和口腔吸入給藥。用于這種給藥的適當(dāng)劑型如氣霧劑或計(jì)量劑量吸入器可通過(guò)常規(guī)技術(shù)制備。
對(duì)于本文所公開(kāi)的式(I)化合物的所有使用方法，日口服劑量方案優(yōu)選為每千克總體重大約0.1至大約80mg，優(yōu)選大約0.2至30mg，更優(yōu)選大約0.5mg至15mg。對(duì)于非腸道給藥，日劑量方案優(yōu)選為每千克總體重大約0.1至大約80mg，優(yōu)選大約0.2至大約30mg且更優(yōu)選大約0.5mg至大約15mg。局部給藥的日劑量?jī)?yōu)選為0.1mg至150mg，每天給藥一至四次，優(yōu)選二或三次。吸入給藥的日劑量方案優(yōu)選為每天大約0.01mg至大約1mg/kg。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，式(I)化合物或其可藥用鹽單次劑量的最佳量和給藥間隔根據(jù)所要治療疾病的性質(zhì)和程度、劑型、給藥途徑和給藥部位以及所要治療的具體患者來(lái)確定，并且這樣的最適當(dāng)量可以用常規(guī)技術(shù)來(lái)確定。本領(lǐng)域技術(shù)人員還應(yīng)當(dāng)理解，最佳療程，即對(duì)于確定天數(shù)每天給藥式(I)化合物或其可藥用鹽的劑量，可由本領(lǐng)域技術(shù)人員使用治療測(cè)定試驗(yàn)的常規(guī)過(guò)程來(lái)確定。
式(I)新化合物也可用于涉及需要抑制CSBP/p38或抑制或產(chǎn)生細(xì)胞因子的哺乳動(dòng)物(除人之外)的獸醫(yī)治療。特別是，在動(dòng)物的治療或預(yù)防方面CSBP/p38介導(dǎo)的疾病包括例如在治療方法一節(jié)中提到的那些疾病，但特別是病毒感染。這類(lèi)病毒的實(shí)例包括(但不局限于)慢病毒感染如傳染性馬貧血病毒、山羊關(guān)節(jié)炎病毒、visna病毒或maedi病毒或逆轉(zhuǎn)錄病毒感染，例如但不限于貓免疫缺陷病毒(FIV)、牛免疫缺陷病毒或犬免疫缺陷病毒或其它的逆轉(zhuǎn)錄病毒感染。
本發(fā)明的另一方面涉及在需要的人體中治療人鼻病毒(HRV)、其它腸道病毒、冠狀病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、或腺病毒引起的感染或呼吸道病毒感染的方法，該方法包括給所述患者服用有效量的CBSP/p38抑制劑。
本發(fā)明的另一方面涉及在需要的人體中治療(包括預(yù)防在內(nèi))流感引發(fā)的肺炎的方法，該方法包括給所述患者服用有效量的CBSP/p38抑制劑。
本發(fā)明還涉及CSBP/p38激酶抑制劑在治療(包括預(yù)防在內(nèi))人鼻病毒(HRV)、其它腸道病毒、冠狀病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、或腺病毒的病毒感染并發(fā)的炎癥方面的應(yīng)用。
特別是，本發(fā)明涉及治療人的病毒感染，這些感染由人鼻病毒(HRV)、其它腸道病毒、冠狀病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、或腺病毒引起。本發(fā)明特別涉及能加重下列疾病的呼吸道病毒感染哮喘(由這種感染引起)、慢性支氣管炎、肺慢性阻塞性疾病、中耳炎和竇炎。雖然對(duì)IL-8或其它細(xì)胞因子的抑制可能有助于治療鼻病毒的作用是已知的，但據(jù)信使用p38激酶抑制劑來(lái)治療引起感冒的HRV或其它呼吸道病毒感染以前未報(bào)道過(guò)的。
應(yīng)當(dāng)指出，本文中所治療的呼吸道病毒感染也能用于繼發(fā)性細(xì)菌感染，如中耳炎、竇炎或肺炎。
本文中所述的治療可包括預(yù)防性用于治療易受這些感染影響人群。同樣還包括減輕、緩解患者病情，減輕患者病癥的嚴(yán)重程度、降低患者病癥的發(fā)生率、或能改善治療結(jié)果的任何其它變化。
還應(yīng)當(dāng)指出，本文所述治療不涉及殺滅或治療病毒微生物本身，但涉及能加重其它疾病或病勢(shì)的呼吸道病毒感染的治療，這些疾病例如哮喘(由這種感染引起)、慢性支氣管炎、肺慢性阻塞性疾病、中耳炎和竇炎。
適合本發(fā)明治療的優(yōu)選病毒為人鼻病毒感染(HRV)或呼吸道合胞病毒(RSV)。
本發(fā)明在此參照下列生物實(shí)施例加以描述，這些實(shí)施例只是說(shuō)明性的，不得認(rèn)作是對(duì)本發(fā)明范圍的限制。
生物實(shí)施例本發(fā)明化合物對(duì)細(xì)胞因子的抑制作用可通過(guò)下列體外試驗(yàn)測(cè)定用于白細(xì)胞介素-1(1L-1)、白細(xì)胞介素-8(IL-8)和腫瘤壞死因子(TNF)的試驗(yàn)是本領(lǐng)域所熟知的，并且可見(jiàn)于多種出版物和專(zhuān)利。本文使用的具有代表性的適宜試驗(yàn)記載在Adams等的US 5,593,992之內(nèi)，其公開(kāi)內(nèi)容在此全面引入用作參考。
白細(xì)胞介素-1(IL-1)按照Colotta等的方法(J.Immunol，132，936(1984))，從自愿供血者的新鮮血制品或血庫(kù)血呈棕黃色層中分離人外周血單核細(xì)胞并加以純化。以每孔每毫升1-2百萬(wàn)個(gè)細(xì)胞數(shù)的濃度將這些單核細(xì)胞(1×106)平鋪在24孔板內(nèi)。使這些細(xì)胞貼壁2小時(shí)，之后通過(guò)緩緩洗滌移去非貼壁細(xì)胞。然后向細(xì)胞中加入試驗(yàn)化合物，1小時(shí)后再加入脂多糖(50ng/ml)，并在37℃溫育培養(yǎng)物24小時(shí)。培養(yǎng)結(jié)束后移去培養(yǎng)上清液，澄清細(xì)胞和所有碎片。培養(yǎng)上清液然后隨即按照下述方法測(cè)定其IL-1生物活性Simomn等，J.Immunol.Methods，84，85，(1985)(基于IL-1刺激白細(xì)胞介素-2產(chǎn)生細(xì)胞系(EL-4)分泌IL-2的能力，同A23187離子載體一致)或Lee等，J.Immuno Therapy，6(1)，1-12(1990)(ELISA試驗(yàn))。
體內(nèi)TNF試驗(yàn)(1)Griswold等，Drugs Under Exp.and Clinical Res.，XIX(6)，243-248(1993)；或(2)Boehm等，Journal of Medicinal Chemistry 39，3929-3937(1996)，它們的內(nèi)容在此全面引入用作參考。
在小鼠和大鼠體中LPS誘導(dǎo)產(chǎn)生TNFα為了評(píng)價(jià)對(duì)LPS誘導(dǎo)嚙齒動(dòng)物產(chǎn)生TNF的體內(nèi)抑制作用，對(duì)小鼠和大鼠都注射LPS。
小鼠方法用化合物或賦形劑預(yù)處理購(gòu)自Charles River實(shí)驗(yàn)室的雄性Balb/c小鼠(30分鐘).30分鐘預(yù)處理期后，給小鼠腹膜內(nèi)用25ug/小鼠劑量的在25ul磷酸鹽緩沖鹽水(pH7.0)中的LPS(得自大腸桿菌血清型055-85的脂多糖，Sigma Chemical Co.，St Louis，MO)。兩小時(shí)后通過(guò)吸入CO2處死小鼠，通過(guò)驅(qū)血法將血樣采集到肝素化采血試管中，置于冰上貯存。離心血樣，收集血漿，-20℃下貯存，供ELISA方法測(cè)定TNFα備用。
大鼠方法在不同的時(shí)間用化合物或溶媒預(yù)處理購(gòu)自Charles River Laboratories的雄性L(fǎng)ewis大鼠。在規(guī)定的預(yù)處理時(shí)間之后，給大鼠腹膜內(nèi)用3.0mg/kg劑量的LPS(得自大腸桿菌血清型055-85的脂多糖，Sigma Chemical Co.，StLouis，MO)。在注射LPS 90分鐘之后通過(guò)吸入CO2處死大鼠，并且通過(guò)心臟穿刺術(shù)從每只大鼠體內(nèi)采集肝素化全血。離心血樣，收集血漿利用ELISA分析TNFα水平。
ELISA方法采用如Olivera等(Circ.Shock，37，301-30，(1992)(其內(nèi)容在此全面引入用作參考)描述的夾心式ELISA測(cè)定TNFα水平，使用倉(cāng)鼠單克隆抗鼠TNFα(Genzyme，Boston，MA)作為捕捉抗體并使用多克隆兔抗鼠TNFα(Genzyme)作為第二抗體。為了進(jìn)行測(cè)定，加入過(guò)氧化酶軛合山羊抗兔抗體(Pierce，Rockford，IL)，隨后加入過(guò)氧化酶底物(含有1％過(guò)氧化脲的1mg/ml鄰苯二胺)。根據(jù)重組鼠TNFα(Genzyme)產(chǎn)生的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算從每只動(dòng)物血漿樣品中的TNFα水平。
LFS刺激的人全血細(xì)胞因子的產(chǎn)生試驗(yàn)以10X濃度制備受試化合物濃縮液，并且制備1ug/ml濃度LPS(終濃度50ng/ml LPS)，并以50uL體積加入到1.5mL微量離心管內(nèi)。從健康志愿者采得肝素化人全血并分配到含有化合物和LPS的微量離心管中，每管0.4ml體積，并在37℃下孵育這些離心管。孵育4小時(shí)后，各管利用TOMY微量離心機(jī)以5000rpm離心5分鐘，取出血漿，-80℃冷凍。
細(xì)胞因子測(cè)定使用標(biāo)準(zhǔn)ELISA技術(shù)對(duì)IL-I和/或TNF進(jìn)行定量。用自制的ELISA試劑盒測(cè)定人IL-1和TNF。根據(jù)適當(dāng)細(xì)胞因子的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)測(cè)定IL-I或TNF的濃度，并且通過(guò)線(xiàn)性回歸分析計(jì)算受試化合物的IC50值(抑制50％的LPS刺激的細(xì)胞因子產(chǎn)生的濃度)。
CSBP/p38激酶試驗(yàn)本試驗(yàn)測(cè)定CSBP/p38催化32P從[a-32P]ATP轉(zhuǎn)移到具有以下序列的表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)衍生肽的蘇氨酸殘基上的能力KRELVEPLTPSGEAPNQZLLR(殘基661-681).(參見(jiàn)Gallagher等，“利用吡啶基咪唑調(diào)控應(yīng)激誘導(dǎo)的細(xì)胞因子產(chǎn)生對(duì)CSBP激酶的抑制作用”，BioOrganic & Medicinal Chemistry，1997，5，49-64)。
反應(yīng)在96孔圓底板(得自Coming)中以30ml體積進(jìn)行。反應(yīng)液含有(最終濃度)25mM Hepes，pH7.5；8mM MgCl2，0.17mM ATP(p38的Km[ATP](參見(jiàn)Lee等，Nature 300，n72pg.639-746(1994年12月))；2.5uCi[g-32P]ATP；0.2mM原釩酸鈉；1mM DTT；0.1％BSA；10％甘油；0.67mM T699肽；和2-4nM酵母表達(dá)、活化并純化的p38。加入[γ-32P]Mg/ATP啟動(dòng)反應(yīng)，37℃孵育25分鐘。在加入32P-ATP之前，將抑制劑(溶解在DMSO中)與該反應(yīng)混合物一起在冰上孵育30分鐘。最終DMSO濃度為0.16％。加入10ul O.3M磷酸終止反應(yīng)，通過(guò)在p81磷酸纖維素濾器上捕獲從反應(yīng)混合物中分離出磷酸化肽。濾器用75mM磷酸洗滌，用β-閃爍計(jì)數(shù)器定量測(cè)定32P的摻入量。在這些條件下，p38的比活性為400-450pmol/pmol酶，并在高達(dá)2小時(shí)孵育期之間該活性與時(shí)間呈線(xiàn)性關(guān)系。減去無(wú)底物存在時(shí)產(chǎn)生的值(為總值的10-15％)之后獲得激酶活性值。
在本結(jié)合試驗(yàn)中，已經(jīng)測(cè)試過(guò)的下列實(shí)施例的代表性式(I)和(Ia)最終化合物均表現(xiàn)出IC50＜10μM的正抑制活性實(shí)施例29，31-35，37-41，43，45-47，60-65，67-105，107-109，112-186，188-193，195-231，233-239，241-243。
在本結(jié)合試驗(yàn)中，已經(jīng)測(cè)試過(guò)的實(shí)施例11的代表性式(II)和(IIa)最終化合物均表現(xiàn)出IC50＜10μM的正抑制活性。
創(chuàng)傷性腦損傷試驗(yàn)中的TNF-α本試驗(yàn)提供了對(duì)發(fā)生在實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)的大鼠旁側(cè)流體叩診創(chuàng)傷性腦損傷(TBI)之后特定腦區(qū)域中腫瘤壞死因子mRNA表達(dá)的檢查。因?yàn)門(mén)NFα能夠誘導(dǎo)神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)并刺激活化星形細(xì)胞釋放其它細(xì)胞因子，所以TNF-α基因表達(dá)的這種創(chuàng)傷后改變?cè)贑NS創(chuàng)傷的急性和再生性反應(yīng)中起著重要作用。適宜的測(cè)定方法可見(jiàn)本發(fā)明引用的參考文獻(xiàn)WO 97/35856。
用于IL-b mRNA的CNS損傷模型本試驗(yàn)表征實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)的大鼠旁側(cè)流體叩診創(chuàng)傷性腦損傷(TBI)后特定腦區(qū)域中白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)的區(qū)域表達(dá)情況。由這些試驗(yàn)得到的結(jié)果表明在TBI之后IL-1β mRNA的短暫表達(dá)在特定的腦區(qū)域受到局部刺激。細(xì)胞因子如IL-1β的這些區(qū)域性變化在腦創(chuàng)傷的創(chuàng)傷后病理性或再生性后遺癥中起作用。適宜的測(cè)定方法可見(jiàn)本發(fā)明引用的參考文獻(xiàn)WO 97/35856。
血管生成試驗(yàn)本發(fā)明引用的參考文獻(xiàn)WO 97/32583描述試驗(yàn)測(cè)定炎性血管生成，該試驗(yàn)用于說(shuō)明對(duì)細(xì)胞因子的抑制將阻止過(guò)度或不適當(dāng)血管增殖的組織破壞。
鼻病毒/流感病毒測(cè)定細(xì)胞系，鼻病毒血清型39，和流感病毒A/PR/8/34購(gòu)自美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC)。BEAS-2B細(xì)胞按照ATCC提供的說(shuō)明使用購(gòu)自CloneticsCorp的BEGM(支氣管上皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基)培養(yǎng)。用于檢測(cè)和滴定病毒的HELA細(xì)胞培養(yǎng)物保存在Eagle極限必需培養(yǎng)基(含10％胎牛血清，2mM 1-谷氨酰胺和10mM HEPES緩沖液(MEM))內(nèi)。
在這些研究中使用改進(jìn)的Subauste等(出處同上)報(bào)道的用鼻病毒體外感染人支氣管上皮細(xì)胞的方法。在膠原包被孔中培養(yǎng)BEAS-2B細(xì)胞(2×105/孔)24小時(shí)，之后用鼻病毒感染。向細(xì)胞培養(yǎng)物中加入鼻病毒血清型39，34℃溫育1小時(shí)，然后用新鮮培養(yǎng)基更換接種物，34℃再溫育培養(yǎng)物72小時(shí)。感染后72小時(shí)收集上清液，利用市售試劑盒(R&D Systems)通過(guò)ELISA法測(cè)定細(xì)胞因子蛋白濃度。利用細(xì)胞微量滴定試驗(yàn)同樣還能由HELA細(xì)胞培養(yǎng)物的培養(yǎng)上清液測(cè)定病毒產(chǎn)率(Subauste等，出處同上 1995)。在用[38激酶抑制劑處理過(guò)的培養(yǎng)物中，藥物是在感染前30分鐘加入?；衔锏馁A存液在DMSO中制備(10mM藥物)，并貯存-20℃下。
為測(cè)定p38激酶，在未加生長(zhǎng)因子和能降低活化p38激酶內(nèi)源水平的添加劑的基本培養(yǎng)基中溫育培養(yǎng)物。在加入鼻病毒后的不同時(shí)刻收集細(xì)胞。通過(guò)免疫印跡對(duì)酪氨酸磷酸化p38激酶的檢測(cè)使用市售試劑盒分析，按照生產(chǎn)廠(chǎng)家說(shuō)明書(shū)進(jìn)行(PhosphoPlus p38 MAPK Antibody KitNew England BioLabsInc.)。
在一些試驗(yàn)中，使用流感病毒(病毒株A/PR/8/34)替代鼻病毒來(lái)感染BEAS-2B細(xì)胞。感染后48及72小時(shí)收集細(xì)胞上清液，如上所述用ELISA測(cè)試細(xì)胞因子。
細(xì)胞與病毒流感病毒A/pR/8/34亞型H1N1(VR-95美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，Rockville，MD)在10日齡雞卵的尿囊腔中培養(yǎng)。37℃溫育后，4℃冷凍2.5小時(shí)，收集尿囊液，匯集，離心(1,000rcf；15min；4℃)除去細(xì)胞。等分上清液，-70℃貯存。病毒貯存培養(yǎng)物的效價(jià)為1.0×1010組織培養(yǎng)感染劑量/ml(TCID50).
接種方法4-6周齡雌性Balb/cAnNcrlBr小鼠購(gòu)自Charles River，Raleigh，NC。動(dòng)物經(jīng)鼻內(nèi)途徑感染。小鼠通過(guò)腹膜注射氯胺酮(40mg/kg；FortDodge Labs，F(xiàn)ort Dodge，Ia)和甲苯噻嗪(5mg/kg；Miles，Shawnee Mission，Ks)進(jìn)行麻醉，然后用100 TCID50 PR8在PBS中的稀釋液(20μl)接種。每天觀察動(dòng)物的感染跡象。所有動(dòng)物研究都得到SmithKlin Beecham PharmaceuticalsInstitutional Animal Care和Use Committee的批準(zhǔn)。
病毒滴定在感染后的不同時(shí)間，處死動(dòng)物，無(wú)菌收集肺臟。在含1微米玻璃珠(Biospec Products，Bartlesville，OK)和1ml Eagles極限必需培養(yǎng)基的小瓶中均化組織。4℃下以1,000rcf離心15分鐘清除細(xì)胞碎片，上清液用Madin-Darby犬腎(MDCK)細(xì)胞連續(xù)稀釋。37℃(5％CO2)溫育5天后，每孔加入50μl 0.5％雞紅血細(xì)胞，室溫下保持1小時(shí)后研究凝集作用。病毒效價(jià)用按照邏輯回歸法計(jì)算的50％組織培養(yǎng)感染量(TCID50)表示。
ELISA利用市售試劑盒通過(guò)定量ELISA測(cè)量細(xì)胞因子水平。耳朵樣品在PBS中用組織minser均化。以14,000rpm離心5分鐘去除細(xì)胞碎片。細(xì)胞因子的濃度和閾值如廠(chǎng)商所述測(cè)定；IL-6，IFN-γ，和KC(R&D Systems，Minneapolis，MN)。
髓過(guò)氧化物酶測(cè)定髓過(guò)氧化物酶(MPO)的活性如Bradley等(1982)所述用動(dòng)力學(xué)方法測(cè)定。簡(jiǎn)言之，就是將兔角膜在溶解于0.5m磷酸鉀緩沖液(J.T.Baker Scientific，hillipsburg，NJ)的十六烷基三甲基溴化銨(HTAB)(SigmaChemical Co.St.Louis，Mo)中均化。均化后將樣品進(jìn)行凍融超聲處理(Cole-Parmer 8853，Cole-Parmer，Vernon Hills，I1)三遍。懸浮液然后在4℃下以12,500×g離心15分鐘加以澄清。根據(jù)鄰聯(lián)茴香胺二鹽酸鹽(ODI)0.175mg/ml(Sigma Chemical Co.St.Louis，Mo)同0.002％過(guò)氧化氫(Sigma Chemical Co.St.Louis，Mo)反應(yīng)過(guò)程中吸光度的比色變化測(cè)定MPO酶活性。測(cè)定使用配置有控溫裝置的Beckman Du640分光光度計(jì)(Fullerton，Ca)進(jìn)行。將50μl要測(cè)定的物質(zhì)加到950μl ODI中，25℃、460nm波長(zhǎng)下測(cè)量吸光度變化，共計(jì)2分鐘。
整體體積描記法將流感病毒感染的小鼠置于內(nèi)部體積約250-ml的整體體積描記箱內(nèi)。向箱內(nèi)通以1l/min的偏氣流，用Buxco XA數(shù)據(jù)獲取和呼吸分析系統(tǒng)(Buxco，Electronics，Sharon，CT)測(cè)量并記錄流量變化。在記錄氣流數(shù)據(jù)之前使動(dòng)物適應(yīng)體積描記箱2分鐘。氣流測(cè)量值按Penh(增強(qiáng)間歇)計(jì)算。Penh早已表示為氣道阻塞指數(shù)，并且與胸膜內(nèi)壓增高有關(guān)。用于Penh計(jì)算的算法如下Penh＝[(呼氣時(shí)間/松馳時(shí)間)-1]×(最大呼氣流量/最大吸氣流量)，其中松馳時(shí)間是指呼出70％潮流氣量需要的時(shí)間。
動(dòng)脈氧飽和度的測(cè)定按文獻(xiàn)所述(Sidwell等，1992，Antimicrobial Agentsand Chemotherapy 36473-476)，使用帶有舌傳感器的Nonin獸用手持式脈沖血氧計(jì)8500V(Nonin Medical，Inc.，Plymouth MN)測(cè)定每天的動(dòng)脈氧飽和度％SpO2。
其它數(shù)據(jù)及測(cè)定改進(jìn)方法可見(jiàn)本發(fā)明引用的參考文獻(xiàn)-2000年9月15日遞交的PCT/US00/25386，(WO 01/19322)。
合成實(shí)施例本發(fā)明在此參照下列實(shí)施例加以描述，它們僅僅作為舉例說(shuō)明，不得認(rèn)作是對(duì)本發(fā)明范圍的限制。所有溫度均以攝氏度給出，所有溶劑的純度都是可獲得的最高級(jí)別，并且所有反應(yīng)都是在無(wú)水條件下于氬氣氛圍中(需要時(shí))進(jìn)行。
質(zhì)譜使用電噴霧電離作用在開(kāi)發(fā)式存取(open access)LC-MS系統(tǒng)上進(jìn)行。LC條件4.5％-90％CH3CN(0.02％TFA)，3.2分鐘，其中停留0.4分鐘，再平衡1.4分鐘；用MS，UV(214nm)和光散射檢測(cè)器(ELS)檢測(cè)。柱1×40mm Aquasil(C18).1H-NMR(以下稱(chēng)為“NMR”)光譜使用Bruker AM400光譜儀或Bruker AVANCE 400在400Mhz下記錄。所示峰形為s＝單峰，d＝雙重峰，t＝三重峰，q＝四重峰，m＝多重峰且br表示寬峰信號(hào)。對(duì)于制備(prep)hplc；取約50mg終產(chǎn)物在500μL DMSO中的溶液注射到50×20mm I.D.YMCCombiPrep ODS-A柱內(nèi)，每分鐘20mL，用10％CH3CN(0.1％TFA)-90％CH3CN(0.1％TFA)的水(0.1％TFA)梯度洗脫10分鐘，停留時(shí)間為2分鐘(另有說(shuō)明除外)?？焖偕V在Merck硅膠60(230-400目)上進(jìn)行，使用含可變相對(duì)濃度的二氯甲烷和甲醇、或EtOAc，與己烷的溶劑混合液洗脫(另有說(shuō)明除外)。早先已經(jīng)描述過(guò)的比色(chromatotron)色譜(Desai，HK；Joshi，BS；Panu，AM；Pelletier，SW J.Chromatogr.1985 223-227)在比色板(購(gòu)自Analtech，Wilmington DE，USA)上進(jìn)行。
satd＝飽和；aq＝含水；NMP＝1-甲基-2-吡咯烷酮；其它縮寫(xiě)見(jiàn)ACS StyleGuide(American Chemical Society，Washington，DC，1986)中所述。
實(shí)施例1
4-氯-2-甲硫基-6-苯基氨基-嘧啶-5-甲醛向苯胺(550微升(以下簡(jiǎn)寫(xiě)為“μL”或“uL”)，6毫摩爾(以下簡(jiǎn)寫(xiě)為“mmol”)，1.2當(dāng)量(以下簡(jiǎn)寫(xiě)為“eq”))在干燥DMSO(100mL)中的溶液內(nèi)加入NaH(60％礦物油懸浮物)(240毫克(以下簡(jiǎn)寫(xiě)為“mg”)，6mmol，1.2eq)，攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)(以下簡(jiǎn)寫(xiě)為“h”)。然后向紅色溶液中加入4，6-二氯-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛(1.11克(以下簡(jiǎn)寫(xiě)為“g”)，5mmol)[Santilli等，J.Heterocycl.Chem.1971，8，445-45]的無(wú)水DMSO(20毫升(以下簡(jiǎn)寫(xiě)為“mL”))溶液。反應(yīng)混合物的顏色變?yōu)辄S色，23℃攪拌2小時(shí)，順序加入水(250mL)和EtOAc(500mL)。分離各層；有機(jī)層用飽和(以下簡(jiǎn)寫(xiě)為sat’d)氯化鈉水溶液洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾。蒸發(fā)有機(jī)層，將殘留物粗品溶于異丙醇(5mL)，加熱到60℃，加入水(50mL)，緩慢冷卻所得溶液到23℃。過(guò)濾分離產(chǎn)物，真空干燥得到1.06g(76％收率)4-氯-2-甲硫基-6-苯基氨基-嘧啶-5-甲醛純品。1H-NMRδ2.59(s，3H)，7.21(m，1H)，7.44(m，2H)，7.68(m，2H)，10.37(s，1H)，11.38(brs，1H).LC MS(m/e)＝280(MH+).
實(shí)施例2 4-氯-6-(2，6-二氟-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛向4，6-二氯-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛(11.1g，50mmol)的CHCl3(100mL)溶液中加入2，6-二氟苯胺(8.07mL，75mmol，1.5eq)，接著加入Et3N(10.43mL，75mmol，1.5eq.)。反應(yīng)混合物變?yōu)辄S色，加熱回流24小時(shí)，加入水(50mL)，分離各層。蒸發(fā)有機(jī)層，粗產(chǎn)物用200mL的甲醇∶水混合液(2∶1)重結(jié)晶，得到12.03g(76％)純品4-氯-6-(2，6-二氟苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMR δ2.21(s，3H)，6.91(m，2H)，7.24(m，1H)，10.29(s，1H)，10.35(br s，1H).LC MS(m/e)＝316(MH+).
實(shí)施例3 4-氯-6-(2-氯-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛以4，6-二氯-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛和2-氯苯胺為原料按上文實(shí)施例1所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-氯-6-(2-氯-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMR δ2.55(s，3H)，7.17(m，1H)，7.29(m，2H)，7.44(m，1H)，10.37(s，1H)，11.49(br s，1H).LS MS(m/e)＝315(MH+).
實(shí)施例4 4-氯-6-(2-氟-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛以4，6-二氯-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛和2-氟苯胺為原料按上文實(shí)施例2所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-氯-6-(2-氟-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMR δ2.53(s，3H)，7.15(m，3H)，8.25(m，1H)，7.44(m，1H)，10.31(s，1H)，11.35(br s，1H).LC MS(m/e)＝298(MH+).
實(shí)施例5 4-氯-6-(1-乙基-丙基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛以4，6-二氯-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛和3-戊胺為原料按上文實(shí)施例2所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-氯-6-(1-乙基-丙基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMR δ0.92(6，6H，J＝7.3Hz)，1.50-1.74(m，4H)，2.52(s，3H)，4.22(m，1H)，9.21(br s，1H)，10.33(s，1H).LC MS(m/e)＝274(MH+).
實(shí)施例6 4-氯-6-異丙基氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛以4，6-二氯-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛和異丙胺為原料按上文實(shí)施例2所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-氯-6-異丙基氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMRδ1.31(d，6H，J＝5.7Hz)，2.60(s，3H)，4.47(m，1H)，9.16(br s，1H)，10.25(s，1H).LC MS(m/e)＝246(MH+).
實(shí)施例7 4-氯-6-環(huán)丙基氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛以4，6-二氯-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛和環(huán)丙胺為原料按上文實(shí)施例2所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-氯-6-環(huán)丙基氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMRδ0.68(m，2H)，0.90(m，2H)，2.58(s，3H)，3.07(m，1H)，9.20(br s，1H)，10.28(s，1H).LC MS(m/e)＝244(MH+).
實(shí)施例8 4-仲丁基氨基-6-氯-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛以4，6-二氯-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛和2-丁胺為原料按上文實(shí)施例2所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-仲丁基氨基-6-氯-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMRδ0.87(m，3H)，1.18(m，3H)，1.20(m，2H)，2.51(s，3H)，4.24(m，1H)，9.12(br s，1H)，10.18(s，1H).LC MS(m/e)＝260(MH+).
實(shí)施例9 4-氯-6-(環(huán)丙基甲基-氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛以4，6-二氯-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛和(氨甲基)環(huán)丙烷為原料按上文實(shí)施例2所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-氯-6-(環(huán)丙基甲基-氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMR δ0.32(m，2H)，0.59(m，2H)，1.12(m，1H)，2.55(s，3H)，3.46(m，2H)，9.35(br s，1H)，10.28(s，1H).LC MS(m/e)＝258(MH+).
實(shí)施例10 4-氨基-6-氯-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛向4，6-二氯-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛(2g，7.36mmol)的苯(20mL)溶液中通NH3氣體30分鐘(以下簡(jiǎn)寫(xiě)為“min”)。然后過(guò)濾所產(chǎn)生的固體，用EtOAc(15mL)重結(jié)晶，得到1.18g(80％)純品4-氨基-6-氯-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMR δ2.50(s，3H)，7.28(t，3H，J＝45Hz，D2O可交換)，8.65(d，3H，J＝41Hz，D2O可交換)，10.11(s，1H).
實(shí)施例11 2-甲硫基-4-苯基-6-苯基氨基-嘧啶-5-甲醛向4-氯-2-甲硫基-6-苯基氨基-嘧啶-5-甲醛(300mg，1.07mmol)在二烷(21mL)和水(7mL)中的溶液內(nèi)加入無(wú)水碳酸鉀(443mg，3.21mmol，3eq)，接著再加入苯硼酸(196mg，1.6mmol，1.5eq)。脫氣反應(yīng)混合物，加入四(三苯膦)鈀(61mg，0.053mmol，0.05eq)。加熱回流反應(yīng)混合物24小時(shí)，之后冷卻到23℃，分層，順序加入EtOAc(50mL)和水(10mL)，分離有機(jī)層，用飽和NaCl水溶液洗滌，干燥(MgSO4)并過(guò)濾。然后蒸發(fā)黃色溶液，產(chǎn)物用柱色譜或用10mL異丙醇∶水(2∶1)結(jié)晶進(jìn)行純化，得到240mg(70％收率)純品2-甲硫基-4-苯基-6-苯基氨基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMR δ2.60(s，3H)，7.22(m，1H)，7.35-7.81(m，9H)，9.89(s，1H)，11.31(br s，1H)，LC MS(m/e)＝322(MH+).
實(shí)施例12 4-(2，6-二氟-苯基氨基)-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛以4-氯-6-(2，6-二氟-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛和4-氟-2-甲基-苯基硼酸為原料按上面實(shí)施例11所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-(2，6-二氟-苯基氨基)-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMR δ2.21(s，3H)，2.25(s，3H)，6.95(m，4H)，7.18(m，4H)，9.54(s，1H)，10.29(br s，1H).LC MS(m/e)＝390(MH+).
實(shí)施例13 4-(1-乙基-丙基氨基)-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛以4-氯-6-(1-乙基-丙基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛和4-氟-2-甲基-苯基硼酸為原料按上面實(shí)施例11所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-(1-乙基-丙基氨基)-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMR δ0.92(m，6H)，1.54-1.71(m，4H)，2.21(s，3H)，2.53(s，3H)，4.28(m，1H)，6.63-7.05(m，2H)，7.21(m，1H)，9.05(br s，1H)，10.50(s，1H).LC MS(m/e)＝348(MH+).
實(shí)施例14 4-(2-氯-苯基)-6-(1-乙基-丙基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛以4-氯-6-(1-乙基-丙基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛和2-氯苯基硼酸為原料按上面實(shí)施例11所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-(2-氯-苯基)-6-(1-乙基-丙基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMR δ0.91(m，6H)，1.42-1.60(m，4H)，2.45(s，3H)，4.21(m，1H)，7.32(m，4H)，8.96(br s，1H)，9.44(s，1H).LC MS(m/e)＝350(MH+).
實(shí)施例15 4-(2-氯-苯基)-6-(2-氯-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛以4-氯-6-(2-氯-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛和2-氯苯基硼酸為原料按上面實(shí)施例11所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-(2-氯-苯基)-6-(2-氯-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMR δ2.58(s，3H)，7.01-7.59(m，7H)，8.61(d，1H，J＝4.7H)，9.65(s，1H)，11.48(br s，1H).LC MS(m/e)＝390(MH+).
實(shí)施例16
4-(2-氟-苯基)-6-(2-氯-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛以4-氯-6-(2-氯-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛和2-氟苯基硼酸為原料按上面實(shí)施例11所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-(2-氟-苯基)-6-(2-氯-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMR δ2.60(s，3H)，6.99-7.68(m，7H)，8.47(d，1H，J＝4.7Hz)，9.78(s，1H)，11.59(br s，1H).LC MS(m/e)＝374(MH+).
實(shí)施例17 4-氨基-6-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛以4-氨基-6-氯-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛和2-氟-苯基硼酸為原料按上面實(shí)施例11所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-氨基-6-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMR δ2.59(s，3H)，5.78(br s，1H)，7.11-7.32(m，2H)，7.42-7.58(m，2H)，8.65(br s，1H)，9.71(s，1H).LC MS(m/e)＝264(MH+).
實(shí)施例18 4-(2-氟-苯基)-6-異丙基氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛以4-氯-6-異丙基氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛和2-氟苯基硼酸為原料按上面實(shí)施例11所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-(2-氟-苯基)-6-異丙基氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMR δ1.31(d，6H，J＝5.7Hz)，2.56(s，3H)，4.51(m，1H)，7.05-7.31(m，2H)，7.41-7.55(m，2H)，9.02(br s，1H)，9.64(s，1H).LC MS(m/e)＝306(MH+).
實(shí)施例19 4-環(huán)丙基氨基-6-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛以4-氯-6-環(huán)丙基氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛和2-氟苯基硼酸為原料按上面實(shí)施例11所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-環(huán)丙基氨基-6-(2-氟苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMR δ0.66(m，2H)，0.92(m，2H)，2.60(s，3H)，3.11(m，1H)，7.10-7.30(m，2H)，7.41-7.57(m，2H)，9.10(br s，1H)，9.66(s，1H).LCMS(m/e)＝304(MH+).
實(shí)施例20 4-(環(huán)丙基甲基-氨基)-6-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛以4-氯-6-環(huán)丙基甲基-氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛和2-氟苯基硼酸為原料按上面實(shí)施例11所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-(環(huán)丙基甲基-氨基)-6-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMR δ0.34(m，2H)，0.61(m，2H)，1.19(m，1H)，2.56(s，3H)，3.51(m，2H)，7.11-7.27(m，2H)，7.31-7.52(m，2H)，9.22(br s，1H)，9.69(s，1H).LC MS(m/e)＝318(MH+).
實(shí)施例21
4-(2，6-二氟-苯基氨基)-6-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛以4-氯-6-(2，6-二氟-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛和2-氟苯基硼酸為原料按上面實(shí)施例11所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-(2，6-二氟-苯基氨基)-6-(2-氟苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMR δ.31(s，3H)，6.98-7.20(m，3H)，7.26(m，2H)，7.38-7.42(m，2H)，9.79(s，1H)，10.39(br s，1H).LC MS(m/e)＝376(MH+).
實(shí)施例22 4-(2-氟-苯基)-6-(2-氟-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛以4-氯-6-(2-氟苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛和2-氟苯基硼酸為原料按上面實(shí)施例11所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-(2-氟-苯基)-6-(2-氟苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMR δ.61(s，3H)，7.11-7.23(m，4H)，7.26(m，1H)，7.45-7.62(m，2H)，8.38(m，1H)，9.80(s，1H)，11.33(br s，1H).LC MS(m/e)＝358(MH+).
實(shí)施例23
4-仲丁基氨基-6-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛以4-仲丁基氨基-6-氯-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛和2-氟苯基硼酸為原料按上面實(shí)施例11所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-仲丁基氨基-6-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMR δ0.96(m，3H)，1.30(m，3H)，1.67(m，2H)，2.58(s，3H)，4.38(m，1H)，7.11-7.31(m，2H)，7.42-7.58(m，2H)，9.07(br s，1H)，9.63(s，1H).LC MS(m/e)＝306(MH+).
實(shí)施例24 4-(4-氟-2-甲基-苯基)-6-異丙基苯基-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛以4-氯-6-異丙基氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛和4-氟-2-甲基苯基硼酸為原料按上面實(shí)施例11所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-(4-氟-2-甲基-苯基)-6-異丙基氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMR δ1.31(d，6H，J＝5.7Hz)，2.21(s，3H)，2.59(s，3H)，4.52(m，1H)，7.90-7.15(m，2H)，7.18-7.25(m，1H)，9.06(br s，1H)，9.50(s，1H).LC MS(m/e)＝320(MH+).
實(shí)施例25 4-環(huán)丙基氨基-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛以4-氯-6-環(huán)丙基氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛和4-氟-2-甲基苯基硼酸為原料按上面實(shí)施例11所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-環(huán)丙基氨基-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMR δ0.69(m，2H)，0.94(m，2H)，2.23(s，3H)，2.62(s，3H)，3.14(m，1H)，6.98(m，2H)，7.20(m，1H)，9.09(br s，1H)，9.49(s，1H).LC MS(m/e)＝318(MH+).
實(shí)施例26 4-(環(huán)丙基甲基-氨基)-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛以4-氯-6-環(huán)丙基甲基-氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛和4-氟-2-甲基-苯基硼酸為原料按上面實(shí)施例11所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-(環(huán)丙基甲基-氨基)-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMR δ0.30(m，2H)，0.60(m，2H)，1.18(m，1H)，2.24(s，3H)，2.55(s，3H)，3.50(m，2H)，6.98(m，2H)，7.18(m，1H)，9.21(br s，1H)，9.50(s，1H).LC MS(m/e)＝332(MH+).
實(shí)施例27 4-(4-氟-2-甲基-苯基)-6-(2-氟-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛以4-氯-6-(2-氟-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛和4-氟-2-甲基苯基硼酸為原料按上面實(shí)施例11所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-(4-氟-2-甲基-苯基)-6-(2-氟-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMR δ2.28(s，3H)，.59(s，3H)，7.01(m，2H)，7.18(m，3H)，7.24(m，1H)，8.42(m，1H)，9.63(s，1H)，11.30(br s，1H).LC MS(m/e)＝372(MH+).
實(shí)施例28 4-仲丁基氨基-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛以4-仲丁基氨基-6-氯-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛和4-氟-2-甲基-苯基硼酸為原料按上面實(shí)施例11所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-仲丁基氨基-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMR δ1.02(m，3H)，1.30(m，3H)，1.70(m，2H)，2.28(m，3H)，2.59(s，3H)，4.37(m，1H)，6.98(m，2H)，7.20(m，1H)，9.04(br s，1H)，9.50(s，1H).LC MS(m/e)＝334(MH+).
實(shí)施例29 2-甲硫基-4，8-二苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮冷卻由18-冠-6(442mg，1.6mmol，5eq)和(甲氧基羰基甲基)膦酸二(2，2，2-三氟乙基)酯(81μL，0.38mmol，1.2eq)在無(wú)水THF(20mL)形成的溶液到-78℃。向此溶液中加入雙(三甲基甲硅烷基)氨化鉀(0.96mL，0.48mmol，1.5eq)的甲苯溶液(0.5mol)。-78℃另攪拌此溶液30分鐘，然后逐滴加入2-甲硫基-4-苯基-6-苯基氨基-嘧啶-5-甲醛(102mg，0.32mmol)的無(wú)水THF(1mL)溶液。反應(yīng)混合物然后于-78℃攪拌8h，之后溫?zé)岬?3℃，攪拌16小時(shí)。順序加入氯化銨飽和水溶液(5mL)和乙醚(20mL)。分離各層。有機(jī)層用氯化鈉飽和水溶液洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。黃色殘留物然后通過(guò)快速色譜純化，得100mg(91％收率)純品2-甲硫基-4，8-二苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR δ2.19(s，3H)，6.70(d，1H，J＝9.9Hz)，7.26(m，2H)，7.42-7.83(m，8H)，7.88(d，1H，J＝9.9Hz).LC MS(m/e)＝346(MH+).
實(shí)施例30 (E)-3-[4-(2，6-二氟-苯基氨基)-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-基]-丙烯酸乙酯向膦酸乙酸三乙酯(8.18mL，41.3mmol，2eq)在120mL無(wú)水THF中的溶液內(nèi)加入NaH(2.05g，60％礦物油分散物，51.4mmol，2.5eq)，23℃攪拌反應(yīng)混合物30分鐘。向此溶液中加入4-(2，6-二氟-苯基氨基)-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛(8g，20.65mmol)的10mL無(wú)水THF溶液，在HPLC檢測(cè)下加熱回流反應(yīng)混合物30分鐘。反應(yīng)完全后，加入20mL氯化銨飽和水溶液，分離各層。水層用乙醚(100mL)洗滌，合并有機(jī)層。有機(jī)層用水、和氯化鈉飽和水溶液洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾，蒸發(fā)溶劑。粗產(chǎn)物用100mL甲醇∶H2O(1∶1)重結(jié)晶，得8.1g(88％)純品(E)-3-[4-(2，6-二氟-苯基氨基)-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-基]-丙烯酸乙酯.LC MS(m/e)＝460(MH+).Rt＝2.49min.
實(shí)施例31 8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將(E)-3-[4-(2，6-二氟-苯基氨基)-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-基]-丙烯酸乙酯(8.1g，17.6mmol)溶于50mL無(wú)水甲苯。在密封管中220℃加熱反應(yīng)混合物48小時(shí)，蒸發(fā)甲苯，黃色殘留物通過(guò)快速色譜純化，得7.1g(96％)8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ2.24(s，3H)，2.29(s，3H)，6.63(d，1H，J＝9.6 Hz)，7.03-7.20(m，4H)，7.25(m，1H)，7.51(m，2H)；LC MS(m/e)＝414(MH+).
實(shí)施例32 4，8-雙-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮向如實(shí)施例22所述制備的4-(2-氟-苯基)-6-(2-氟-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛(400mg，1.1mmol)在吡啶(2mL)中的溶液內(nèi)加入Ac2O(2mL)，加熱回流反應(yīng)混合物48h，蒸發(fā)溶劑，將殘留物溶于EtOAc(40mL)，用1M碳酸鈉水溶液、水及氯化鈉飽和水溶液洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。黃色殘留物通過(guò)快速色譜法純化，得純品4，8-雙-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(320mg，76％收率).1H-NMR(CDCl3)δ2.21(s，3H)，6.76(d，1H，J＝9.6Hz)，7.22-7.42(m，4H)，7.45-7.67(m，5H).LC MS(m/e)＝382(MH+).
實(shí)施例33 8-(2-氯-苯基)-4-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以4-(2-氟-苯基)-6-(2-氯-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛為原料按上面實(shí)施例29所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物8-(2-氯-苯基)-4-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。1H-NMRδ2.08(s，3H)，6.61(d，1H，J＝9.7Hz)，7.11-7.51(m，9H).LC MS(m/e)＝399(MH+).
實(shí)施例34 4，8-雙-(2-氯-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以4-(2-氯-苯基)-6-(2-氯-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛為原料按上面實(shí)施例29所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4，8-雙-(2-氯-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。1H-NMRδ1.99(s，3H)，6.50(d，1H，J＝9.7Hz)，7.11-7.48(m，9H).LC MS(m/e)＝4 14(MH+).
實(shí)施例35 8-環(huán)丙基甲基-4-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以4-(環(huán)丙基甲基氨基)-6-(2-氟-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛為原料按上面實(shí)施例29所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物8-環(huán)丙基甲基-4-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。1H-NMRδ0.56(m，4H)，1.48(m，1H)，2.65(s，3H)，3.79(s，2H)，6.62(d，1H，J＝9.7Hz)，7.19-7.39(m，3H)，7.42-7.60(m，2H).LC MS(m/e)＝342(MH+).
實(shí)施例36
8-環(huán)丙基-4-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以4-環(huán)丙基氨基-6-(2-氯-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛為原料按上面實(shí)施例29所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物8-環(huán)丙基-4-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。1H-NMRδ0.98(m，2H)，1.35(m，2H)，2.69(s，3H)，3.02(m，1H)，6.55(d，1H，J＝9.6Hz)，7.12-7.36(m，2H)，7.42-7.60(m，3H).LC MS(m/e)＝328(MH+).
實(shí)施例37 8-仲丁基-4-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以4-仲丁基氨基-6-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛為原料按上面實(shí)施例29所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物8-仲丁基-4-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。1H-NMRδ0.91(m，3H)，1.67(m，3H)，2.00-2.42(m，2H)，2.69(s，3H)，5.85(m，1H)，6.79(d，1H，J＝9.7Hz)，7.24-7.44(m，1H)，7.50-7.75(m，4H).LC MS(m/e)＝328(MH+).
實(shí)施例38 4-(2-氟-苯基)-8-異丙基-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以4-(2-氟-苯基)-6-異丙基氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛為原料按上面實(shí)施例29所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-(2-氟-苯基)-8-異丙基-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。1H-NMRδ1.69(m，6H)，2.60(s，3H)，5.91(m，1H)，6.52(d，1H，J＝9.6Hz)，7.16-7.49(m，5H).LC MS(m/e)＝330(MH+).
實(shí)施例39 8-環(huán)丙基甲基-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以4-(環(huán)丙基甲基氨基)-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛為原料按上面實(shí)施例29所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物8-環(huán)丙基甲基-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。1H-NMRδ0.55(m，4H)，1.56(m，1H)，2.23(s，3H)，2.67(s，3H)，4.40(m，2H)，6.60(d，1H，J＝9.6Hz)，7.05(m，2H)，7.22(m，1H)，7.39(d，1H，J＝9.6Hz).LC MS(m/e)＝356(MH+).
實(shí)施例40 8-環(huán)丙基-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以4-環(huán)丙基氨基-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛為原料按上面實(shí)施例29所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物8-環(huán)丙基-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。1H-NMRδ0.99(m，2H)，1.40(m，2H)，2.21(s，3H)，2.71(s，3H)，3.06(m，1H)，6.61(d，1H，J＝9.6Hz)，7.02(m，2H)，7.24(m，1H)，7.34(d，1H，J＝9.6Hz).LC MS(m/e)＝342(MH+).
實(shí)施例41 8-仲丁基-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以4-仲丁基氨基-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛為原料按上面實(shí)施例29所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物8-仲丁基-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。1H-NMRδ0.89(m，3H)，1.70(m，3H)，2.06-2.42(m，2H)，2.21(s，3H)，2.65(s，3H)，5.80(m，1H)，6.61(d，1H，J＝9.7Hz)，7.03(m，2H)，7.24(m，1H)，7.39(d，1H，J＝9.7Hz).LC MS(m/e)＝328(MH+).
實(shí)施例42 4-(4-氟-2-甲基-苯基)-8-異丙基-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以4-(4-氟-2-甲基苯基)-6-異丙基氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛為原料按上面實(shí)施例29所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-(4-氟-2-甲基-苯基)-8-異丙基-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。1H-NMRδ1.68(m，6H)，2.21(s，3H)，2.70(s，3H)，5.95(m，1H)，6.60(d，1H，J＝9.6Hz)，6.95-7.11(m，2H)，7.18-7.32(m，2H).LC MS(m/e)＝344(MH+).
實(shí)施例43
8-(2，6-二氟-苯基)-4-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以4-(2，6-二氟苯基氨基)-6-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛為原料按上面實(shí)施例29所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物8-(2，6-二氟-苯基)-4-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.LC MS(m/e)＝400(MH+).Rt＝2.42min.
實(shí)施例44 4-(2-氯-苯基)-8-(1-乙基-丙基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以4-(2-氯-苯基)-6-(1-乙基-丙基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛為原料按上面實(shí)施例29所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-(2-氯-苯基)-8-(1-乙基-丙基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。1H-NMRδ0.85(m，6H)，2.01(m，4H)，2.26-2.44(m，2H)，2.63(s，3H)，5.39(m，0.5H)，5.75(m，0.5H)，6.62(br d，1H，J＝9.6)，7.31-7.60(m，5H).LC MS(m/e)＝482(MH+).
實(shí)施例45 4-(4-氟-2-甲基-苯基)-8-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以4-(4-氟-2-甲基-苯基)-6-(2-氟-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛為原料按上面實(shí)施例29所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-(4-氟-2-甲基-苯基)-8-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。1H-NMR(CDCl3)δ2.19(s，3H)，2.28(s，3H)，6.76(d，1H，J＝9.6Hz)，7.05(m，2H)，7.24-7.40(m，4H)，7.51(m，2H)；LC MS(m/e)＝396(MH+).
實(shí)施例46 2-甲磺酰基-4，8-二苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮向2-甲硫基-4，8-二苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(70mg，0.2mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入3-氯過(guò)苯甲酸(109mg，0.6mmol，3eq)，23℃攪拌反應(yīng)混合物2小時(shí)，蒸發(fā)溶劑，黃色殘留物通過(guò)快速色譜法純化，得2-甲磺酰基-4，8-二苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(55mg，71％收率)。1H-NMR(CDCl3)δ2.96(s，3H)，6.89(d，1H，J＝9.8Hz)，7.26(m，2H)，7.40-7.81(m，8H)，8.01(d，1H，J＝9.8Hz).LC MS(m/e)＝378(MH+).
實(shí)施例47 4，8-雙-(2-氯-苯基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮向4，8-雙-(2-氯-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(414mg，1mmol)的CHCl3(15mL)溶液中加入3-氯過(guò)苯甲酸(549mg，3mmol，3eq)，23℃攪拌反應(yīng)混合物5h，然后加入1M碳酸鈉水溶液(10mL)，分離各層，水洗有機(jī)層，干燥(MgSO4)，蒸發(fā)溶劑得4，8-雙-(2-氯-苯基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(550mg，89％收率).1H-NMR(CDCl3)δ3.15(s，3H)，6.96(d，1H，J＝9.8Hz)，7.26(m，2H)，7.51-7.80(m，9H).LC MS(m/e)＝446(MH+).
實(shí)施例48 8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮為原料按上面實(shí)施例47所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.LC MS(m/e)＝446(MH+).Rt＝2.13min.
實(shí)施例49 4，8-雙-(2-氟-苯基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以4，8-雙-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮為原料按上面實(shí)施例47所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4，8-雙-(2-氟-苯基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.LC MS(m/e)＝414(MH+).Rt＝1.96min.
實(shí)施例50
8-環(huán)丙基甲基-4-(2-氟-苯基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以8-環(huán)丙基甲基-4-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮為原料按上面實(shí)施例47所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物8-環(huán)丙基甲基-4-(2-氟-苯基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.LC MS(m/e)＝374(MH+).Rt＝1.90min.
實(shí)施例51 8-仲丁基-4-(2-氟-苯基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以8-仲丁基-4-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮為原料按上面實(shí)施例47所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物8-仲丁基-4-(2-氟-苯基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.LC MS(m/e)＝376(MH+).Rt＝1.95min.
實(shí)施例52 4-(2-氟-苯基)-8-異丙基-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以4-(2-氟-苯基)-8-異丙基-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮為原料按上面實(shí)施例47所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-(2-氟-苯基)-8-異丙基-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.LC MS(m/e)＝362(MH+).Rt＝1.85min.
實(shí)施例53 8-環(huán)丙基甲基-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以8-環(huán)丙基甲基-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮為原料按上面實(shí)施例47所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物8-環(huán)丙基甲基-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲磺酰基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.LC MS(m/e)＝388(MH+).Rt＝2.13min.
實(shí)施例54 8-環(huán)丙基-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以8-環(huán)丙基-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮為原料按上面實(shí)施例47所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物8-環(huán)丙基-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.LC MS(m/e)＝374(MH+).Rt＝1.79min.
實(shí)施例55
8-仲丁基-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以8-仲丁基-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮為原料按上面實(shí)施例47所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物8-仲丁基-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.LC MS(m/e)＝390(MH+).Rt＝2.05min.
實(shí)施例56 4-(4-氟-2-甲基-苯基)-8-異丙基-2-甲磺酰基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以4-(4-氟-2-甲基-苯基)-8-異丙基-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮為原料按上面實(shí)施例47所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-(4-氟-2-甲基-苯基)-8-異丙基-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.LC MS(m/e)＝376(MH+).Rt＝2.00min.
實(shí)施例57 8-(2，6-二氟-苯基)-4-(2-氟-苯基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以8-(2，6-二氟-苯基)-4-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮為原料按上面實(shí)施例47所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物8-(2，6-二氟-苯基)-4-(2-氟-苯基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.LC MS(m/e)＝432(MH+).Rt＝2.04min.
實(shí)施例58
4-(2-氯-苯基)-8-(1-乙基-丙基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以4-(2-氯-苯基)-8-(1-乙基-丙基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮為原料按上面實(shí)施例47所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-(2-氯-苯基)-8-(1-乙基-丙基)-2-甲磺酰基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.LC MS(m/e)＝406(MH+).Rt＝2.15min.
實(shí)施例59 4-(4-氟-2-甲基-苯基)-8-(2-氟-苯基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以4-(4-氟-2-甲基-苯基)-8-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮為原料按上面實(shí)施例47所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-(4-氟-2-甲基-苯基)-8-(2-氟-苯基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.LC MS(m/e)＝428(MH+).Rt＝2.04min.
實(shí)施例60 2-(2-二乙基氨基-乙基氨基)-4，8-二苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮加熱由實(shí)施例46的產(chǎn)物(18.8mg，0.05mmol)、NMP(5mL)和N，N-二乙基乙二胺(28m，0.25mmol，5eq)形成的溶液到50℃。1小時(shí)后，按順序加入水(20mL)和EtOAc(20mL)。分離各層。有機(jī)層用氯化鈉飽和水溶液洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾，真空蒸發(fā)溶劑。黃色殘留物通過(guò)快速色譜法純化，得2-(2-二乙基氨基-乙基氨基)-4，8-二苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(21mg，89％收率).1H-NMR(CDCl3)δ0.74-0.98(m，6H)，2.28-2.56(m，8H)，2.98(br s，1H)，6.32(d，1H，J＝9.8Hz)，7.26(m，2H)，7.09-7.88(m，11H).LC MS(m/e)＝414(MH+).
實(shí)施例61 2-(2-二乙基氨基-乙基氨基)-8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例48的產(chǎn)物與N，N-二乙基乙二胺反應(yīng)，得標(biāo)題化合物2-(2-二乙基氨基-乙基氨基)-8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ0.96(m，6H)，2.24(s，3H)，2.50(m，6H)，3.14(m，2H)，6.02(br s，1H)，6.36(d，1H，J＝9.6Hz)，7.06(m，4H)，7.24(m，2H)，7.49(m，1H).LC MS(m/e)＝482(MH+).
實(shí)施例62 4，8-雙-(2-氯-苯基)-2-(2-二乙基氨基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例47的產(chǎn)物與N，N-二乙基乙二胺反應(yīng)，得標(biāo)題化合物4，8-雙-(2-氯-苯基)-2-(2-二乙基氨基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ0.97(m，6H)，2.49(s，6H)，3.12(m，2H)，6.00(br s，1H)，7.19-7.63(m，9H).LC MS(m/e)＝482(MH+).
實(shí)施例63 8-(2-氯-苯基)-2-(2-二乙基氨基-乙基氨基)-4-(2-氟-苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮a)8-(2-氯苯基)-4-(2-氟苯基)-2-甲磺酰基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以實(shí)施例33的產(chǎn)物為原料按上面實(shí)施例47所述制備，得到標(biāo)題化合物。
b)8-(2-氯-苯基)-2-(2-二乙基氨基-乙基氨基)-4-(2-氟-苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以實(shí)施例63(a)的產(chǎn)物為原料按照上面實(shí)施例60所述進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物8-(2-氯-苯基)-2-(2-二乙基氨基-乙基氨基)-4-(2-氟-苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ0.99(m，6H)，2.49(s，6H)，3.16(m，2H)，6.03(br s，1H)，7.13-7.63(m，9H).LC MS(m/e)＝466(MH+).
實(shí)施例64 8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮向8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(800mg，1.8mmol)的1-甲基-2-吡咯烷酮(8mL)溶液中加入絲氨醇(819mg，9mmol，5eq)，加熱反應(yīng)混合物到50℃。1小時(shí)后，加入水(20mL)，接著加入Et2O(20mL)和EtOAc(20mL)。分離各層。有機(jī)層用飽和氯化鈉水溶液洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾，蒸發(fā)溶劑。黃色殘留物然后通過(guò)快速色譜法提純，得8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(750mg，92％收率).1H-NMR(CDCl3)δ2.30(s，3H)，3.67(m，1H)，3.88(m，4H)，6.30(br s，1H)，6.41(d，1H，J＝9.6Hz)，7.08(m，4H)，7.24(m，1H)，7.31(d，1H，J＝9.6Hz)，7.49(m，1H).LC MS(m/e)＝457(MH+).
實(shí)施例65 4，8-雙-(2-氯-苯基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例47的產(chǎn)物與絲氨醇反應(yīng)，得標(biāo)題化合物4，8-雙-(2-氯-苯基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ3.44(m，1H)，3.68(m，4H)，6.30(br s，1H)，6.48(d，1H，J＝9.7Hz)，7.24-7.65(m，9H).LC MS(m/e)＝457(MH+).
實(shí)施例66
4-(2-氟-苯基)-8-(1-乙基-丙基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使4-(2-氟苯基)-8-(1-乙基丙基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮與絲氨醇反應(yīng)，得標(biāo)題化合物4-(2-氟-苯基)-8-(1-乙基-丙基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMRδ0.82(m，6H)，1.32(m，4H)，1.90(m，2H)，2.32(m，2H)，3.71(m，2H)，4.24(m，1H)，5.38(m，0.5H)，5.69(m，0.5H)，5.71(br s，1H)，6.30(br d，1H，J＝9.6)，7.13(d，1H，J＝9.6Hz)，7.30-7.55(m，4H).LC MS(m/e)＝401(MH+).
實(shí)施例67 4-(2-氯-苯基)-8-(1-乙基-丙基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例58的產(chǎn)物與絲氨醇反應(yīng)，得標(biāo)題化合物4-(2-氯-苯基)-8-(1-乙基-丙基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMRδ0.84(m，6H)，1.91(m，2H)，2.32(m，2H)，3.02(m，2H)，3.95(m，4H)，4.14(m，1H)，5.30(m，0.5H)，5.52(m，0.5H)，6.28(br d，1H，J＝9.6)，6.40(br s，1H)，7.12(d，1H，J＝9.6Hz)，7.30-7.58(m，4H).LC MS(m/e)＝417(MH+).
實(shí)施例68 4-(2-氟-苯基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8-異丙基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例52的產(chǎn)物與絲氨醇反應(yīng)，得標(biāo)題化合物4-(2-氟-苯基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8-異丙基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMRδ1.54(m，6H)，3.80(m，4H)，4.11(m，1H)，5.75(m，1H)，6.19(d，1H，J＝9.8)，6.38(br s，1H)，7.01-7.21(m，2H)，7.30-7.49(m，3H).LC MS(m/e)＝373(MH+).
實(shí)施例69 8-環(huán)丙基-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例54的產(chǎn)物與絲氨醇反應(yīng)，得標(biāo)題化合物8-環(huán)丙基-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMRδ0.85(m，2H)，1.28(m，2H)，2.11(m，6H)，2.79(m，1H)，3.89(m，4H)，4.16(m，1H)，6.18(d，1H，J＝9.8)，6.31(br s，1H)，6.85-7.14(m，4H)，LC MS(m/e)＝385(MH+).
實(shí)施例70 8-環(huán)丙基甲基-4-(2-氟-苯基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例50的產(chǎn)物與絲氨醇反應(yīng)，得標(biāo)題化合物8-環(huán)丙基甲基-4-(2-氟-苯基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMRδ0.40(m，4H)，1.25(m，1H)，3.89(m，4H)，4.13(m，3H)，5.75(m，1H)，6.30(d，1H，J＝9.8Hz)，6.59(br s，1H)，7.08-7.48(m，5H).LC MS(m/e)＝385(MH+).
實(shí)施例71 8-仲丁基-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例55的產(chǎn)物與絲氨醇反應(yīng)，得標(biāo)題化合物8-仲丁基-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMRδ0.80(m，3H)，1.37(m，3H)，2.21(m，3H)，2.73(m，2H)，3.96(m，4H)，4.20(m，1H)，5.52(m，1H)，6.29(m，1H)，6.59(br s，1H)，6.91-7.40(m，4H).LC MS(m/e)＝401(MH+).
實(shí)施例72 4-(4-氟-2-甲基-苯基)-8-(2-氟-苯基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例59的產(chǎn)物與絲氨醇反應(yīng)，得標(biāo)題化合物4-(4-氟-2-甲基-苯基)-8-(2-氟-苯基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMRδ2.24(s，3H)，2.68(br s，2H)，3.42(m，1H)，3.61(m，4H)，6.30(br s，1H)，6.38(d，1H，J＝9.7Hz)，7.02(m，2H)，7.27(m，5H)，7.46(m，1H).LC MS(m/e)＝439(MH+).
實(shí)施例73 4，8-雙-(2-氟-苯基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例49的產(chǎn)物與絲氨醇反應(yīng)，得標(biāo)題化合物4，8-雙-(2-氟-苯基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMRδ2.91(br s，2H)，3.39(m，1H)，3.55(m，4H)，6.05(br s，1H)，6.33(d，1H，J＝9.7Hz)，6.21(m，5H)，7.39(m，4H).LC MS(m/e)＝425(MH+).
實(shí)施例74 8-(2，6-二氟-苯基)-4-(2-氟-苯基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例57的產(chǎn)物與絲氨醇反應(yīng)，得標(biāo)題化合物8-(2，6-二氟-苯基)-4-(2-氟-苯基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMRδ2.52(br s，2H)，3.45(m，1H)，3.60(m，4H)，6.28(br s，1H)，6.34(d，1H，J＝9.7Hz)，6.98(m，2H)，7.19(m，3H)，7.42(m，3H).LCMS(m/e)＝443(MH+).
實(shí)施例75
8-環(huán)丙基甲基-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例53的產(chǎn)物與絲氨醇反應(yīng)，得標(biāo)題化合物8-環(huán)丙基甲基-4-(2-氟-苯基-4-(2-氟-苯基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMRδ0.46(m，4H)，1.32(m，1H)，2.18(s，3H)，3.31(br s，2H)，3.89(m，4H)，4.15(m，3H)，6.30(d，1H，J＝9.8Hz)，6.59(br s，1H)，6.97(m，2H)，7.19(m，2H).LC MS(m/e)＝399(MH+).
實(shí)施例76 4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8-異丙基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例56的產(chǎn)物與絲氨醇反應(yīng)，得標(biāo)題化合物4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8-異丙基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMRδ1.61(m，6H)，2.15(m，3H)，3.45(br s，2H)，3.85(m，5H)，5.74(m，1H)，6.21(d，1H，J＝9.8Hz)，6.36(br s，1H)，6.91-7.20(m，4H).LCMS(m/e)＝387(MH+)。
實(shí)施例77
4，8-雙-(2-氯-苯基)-2-(2-二甲基氨基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例47的產(chǎn)物與N，N-二甲基乙二胺反應(yīng)，得標(biāo)題化合物4，8-雙-(2-氯-苯基)-2-(2-二甲基氨基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(396mg，84％收率).uH-NMR(CDCl3)δ2.02-2.34(m，8H)，3.05(m，2H)，6.02(br s，1H)，6.39(d，1H，J＝9.8Hz)，7.24-7.62(m，9H).LC MS(m/e)＝455(MH+)。
實(shí)施例78 4，8-雙-(2-氯-苯基)-2-(哌啶-4-基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例47的產(chǎn)物與哌啶-4-基胺反應(yīng)，得標(biāo)題化合物4，8-雙-(2-氯-苯基)-2-(哌啶-4-基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ1.21(m，2H)，1.84(m，2H)，2.38(m，2H)，3.01(m，2H)，3.30(m，1H)，5.36(s，1H)，6.40(d，1H，J＝9.8Hz)，7.20-7.62(m，9H).LC MS(m/e)＝466(MH+)。
實(shí)施例79
4，8-雙-(2-氯-苯基)-2-(1-甲基-哌啶-4-基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例47的產(chǎn)物與1-甲基哌啶-4-基胺反應(yīng)，得標(biāo)題化合物4，8-雙-(2-氯-苯基)-2-(1-甲基-哌啶-4-基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ1.42(m，2H)，1.79(m，4H)，2.25(s，3H)，2.75(m，2H)，3.15(m，1H)，5.33(s，1H)，6.39(d，1H，J＝9.8Hz)，7.24-7.59(m，9H).LCMS(m/e)＝480(MH+)。
實(shí)施例80 4，8-雙-(2-氯-苯基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-1-甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例47的產(chǎn)物與2-氨基-2-甲基丙烷-1，3-二醇反應(yīng)，得標(biāo)題化合物4，8-雙-(2-氯-苯基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-1-甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ1.01(s，3H)，3.43(m，2H)，3.62(m，2H)，6.03(br s，1H)，6.41(d，1H，J＝9.6Hz)，7.27-7.65(m，9H).LC MS(m/e)＝471(MH+)。
實(shí)施例81
4，8-雙-(2-氯-苯基)-2-(2-羥基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例47的產(chǎn)物與2-氨基乙醇反應(yīng)，得標(biāo)題化合物4，8-雙-(2-氯-苯基)-2-(2-羥基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)3.17(m，2H)，3.48(m，2H)，6.08(br s，1H)，6.45(d，1H，J＝9.6Hz)，7.26-7.67(m，9H).LC MS(m/e)＝427(MH+)。
實(shí)施例82 2-(2-氨基-乙基氨基)-4，8-雙-(2-氯-苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例47的產(chǎn)物與1，2-二氨基乙烷反應(yīng)，得標(biāo)題化合物2-(2-氨基-乙基氨基)-4，8-雙-(2-氯-苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ2.59(m，2H)，3.11(m，2H)，5.91(br s，1H)，6.40(d，1H，J＝9.6Hz)，7.25-7.61(m，9H).LC MS(m/e)＝426(MH+)。
實(shí)施例83 [4，8-雙-(2-氯-苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基]-乙酸乙酯按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例47的產(chǎn)物與甘氨酸乙酯反應(yīng)，得標(biāo)題化合物[4，8-雙-(2-氯-苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基]-乙酸乙酯.1H-NMR(CDCl3)δ1.21(m，3H)，3.59(m，2H)，4.12(m，2H)，5.91(br s，1H)，6.41(m，2H)，7.25-7.62(m，9H).LC MS(m/e)＝469(MH+).Rt＝2.12min。
實(shí)施例84 [4，8-雙-(2-氯-苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基]乙酸向?qū)嵤├?3產(chǎn)物(20mg，0.43mmol)的THF(2mL)溶液中加入LiOH(40mg，1.67mmol)的水(1mL)溶液。23℃攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)，然后用1MHCl中和，以EtOAc(5mL)萃取，分離各層。有機(jī)層用水、氯化鈉飽和水溶液洗滌，干燥(MgSO4)。過(guò)濾溶液，蒸發(fā)得到標(biāo)題化合物[4，8-雙-(2-氯-苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基]-乙酸.LC MS(m/e)＝441(MH+).Rt＝1.85min。
實(shí)施例85 4-(2-氯-苯基)-2-(2-二乙基氨基-乙基氨基)-8-(1-乙基-丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例44的產(chǎn)物與N，N-二乙基乙二胺反應(yīng)，得標(biāo)題化合物4-(2-氯-苯基)-2-(2-二乙基氨基-乙基氨基)-8-(1-乙基-丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(371mg，80％收率).LC MS(m/e)＝442(MH+).Rt＝1.77min。
實(shí)施例86 2-(2-氨基-乙基氨基)4-(2-氯-苯基)-8-(1-乙基-丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例44的產(chǎn)物與1，2-二氨基乙烷反應(yīng)，得到2-(2-氨基-乙基氨基)-4-(2-氯-苯基)-8-(1-乙基-丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.LC MS(m/e)＝386(MH+).Rt＝1.54min。
實(shí)施例87 4-(2-氯-苯基)-8-(1-乙基-丙基)-2-(2-羥基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例44的產(chǎn)物與2-氨基乙醇反應(yīng)，得標(biāo)題化合物4-(2-氯-苯基)-8-(1-乙基-丙基)-2-(2-羥基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.LC MS(m/e)＝387(MH+).Rt＝1.94min。
實(shí)施例88 4-(2-氯-苯基)-8-(1-乙基-丙基)-2-((R)-2-羥基-1-甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例44的產(chǎn)物與(R)-2-氨基丙烷-1-醇反應(yīng)，得標(biāo)題化合物4-(2-氯-苯基)-8-(1-乙基-丙基)-2-((R)-2-羥基-1-甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMRδ0.81(m，6H)，1.30(m，2H)，1.96(m，2H)，2.36(m，2H)，3.71(m，2H)，4.25(m，1H)，5.31(m，0.5H)，5.56(m，0.5H)，5.71(br s，1H)，6.26(br d，1H，J＝9.6)，7.12(d，1H，J＝9.6Hz)，7.30-7.54(m，4H).LCMS(m/e)＝401(MH+).Rt＝2.07min。
實(shí)施例89 4-(2-氯-苯基)-8-(1-乙基-丙基)-2-(1-甲基-哌啶-4-基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例44的產(chǎn)物與1-甲基哌啶-4-基胺反應(yīng)，得標(biāo)題化合物4-(2-氯-苯基)-8-(1-乙基-丙基)-2-(1-甲基-哌啶-4-基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.LC MS(m/e)＝440(MH+).Rt＝1.67min。
實(shí)施例90 [4-(2-氯-苯基)-8-(1-乙基-丙基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基]-乙酸乙酯按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例44的產(chǎn)物與甘氨酸乙酯反應(yīng)，得標(biāo)題化合物[4-(2-氯-苯基)-8-(1-乙基-丙基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基]-乙酸乙酯.LC MS(m/e)＝429(MH+).Rt＝2.49min。
實(shí)施例91
8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-羥基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例48的產(chǎn)物與2-氨基乙醇反應(yīng)，得標(biāo)題化合物8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-羥基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ2.26(s，3H)，3.18(m，2H)，3.53(m，2H)，3.70(br s，1H)，6.21(br s，1H)，6.40(d，1H，J＝9.7Hz)，7.09(m，4H)，7.21-7.65(m，3H).LC MS(m/e)＝427(MH+).Rt＝1.96min。
實(shí)施例92 8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(1-甲基-哌啶-4-基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例48的產(chǎn)物與1-甲基哌啶-4-基胺反應(yīng)，得標(biāo)題化合物8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(1-甲基-哌啶-4-基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ1.45(m，2H)，1.85(m，4H)，2.40(s，3H)，2.72(m，2H)，3.30(m，1H)，5.41(m，1H)，6.38(d，1H，J＝9.7Hz)，7.05(m，4H)，7.29(m，3H).LC MS(m/e)＝480(MH+).Rt＝1.67min。
實(shí)施例93
N-(7-氧代-4，8-二苯基-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基)-甲磺酰胺向甲磺酰胺(200mg，4eq)的DMF(2mL)溶液中加入NaH(80mg，2mmol，60％礦物油分散物，4eq)，23℃攪拌反應(yīng)混合物30分鐘。向此溶液中加入2-甲磺酰基-4，8-二苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(190mg，0.5mmol)的DMF(1mL)溶液，加熱混合物到50℃。1小時(shí)后，順序加入水(10mL)和乙醚(10mL)，分離各層，并將有機(jī)層用氯化鈉飽和水溶液洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾，蒸發(fā)溶劑。黃色殘留物然后用快速色譜法提純，得N-(7-氧代-4，8-二苯基-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基)-甲磺酰胺(101mg，51％收率).1H-NMR(CDCl3)δ2.82(s，3H)，6.69(d，1H，J＝9.8Hz)，7.31(m，2H)，7.59(m，8H)，7.91(d，1H，J＝9.8Hz).LC MS(m/e)＝393(MH+)。
實(shí)施例94 N-[4，8-雙-(2-氟-苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基]-甲磺酰胺按照實(shí)施例93的方法使實(shí)施例49的產(chǎn)物進(jìn)行反應(yīng)，得標(biāo)題化合物N-[4，8-雙-(2-氟-苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基]-甲磺酰胺.1H-NMR(CDCl3)δ2.81(s，3H)，6.66(d，1H，J＝9.6Hz)，7.24(m，4H)，7.48(m，4H)，7.87(d，1H，J＝9.8Hz).LC MS(m/e)＝429(MH+).Rt＝1.84min。
實(shí)施例95
N-[4-(2-氟-苯基)-8-異丙基-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基]-甲磺酰胺按照實(shí)施例93的方法使實(shí)施例49的產(chǎn)物進(jìn)行反應(yīng)，得標(biāo)題化合物N-[4-(2-氟-苯基)-8-異丙基-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基]-甲磺酰胺.1H-NMR(CDCl3)δ1.68(m，6H)，3.52(s，3H)，5.82(m，1H)，6.68(d，1H，J＝9.6Hz)，7.21-7.61(m，5H).LC MS(m/e)＝377(MH+).Rt＝1.83min。
實(shí)施例96 N-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(2-氟-苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基]-甲磺酰胺按照實(shí)施例93的方法使實(shí)施例56的產(chǎn)物進(jìn)行反應(yīng)，得標(biāo)題化合物N-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(2-氟-苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基]-甲磺酰胺.1H-NMR(CDCl3)δ3.08(s，3H)，6.72(d，1H，J＝9.6Hz)，7.20(m，2H)，7.39(m，3H)，7.74(m，3H).LC MS(m/e)＝447(MH+).Rt＝1.84min。
實(shí)施例97
N-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基]-甲磺酰胺按照實(shí)施例93的方法使實(shí)施例48的產(chǎn)物進(jìn)行反應(yīng)，得標(biāo)題化合物N-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基]-甲磺酰胺.1H-NMR(CDCl3)δ2.29(s，3H)，3.04(s，3H)，6.69(d，1H，J＝9.6Hz)，7.16(m，4H)，7.59(m，3H).LC MS(m/e)＝461(MH+).Rt＝1.90min。
實(shí)施例98 8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲氧基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮向?qū)嵤├?0的產(chǎn)物(90mg，0.2mmol)的甲醇(5mL)溶液中加入甲醇鈉(1mL，25％w/w甲醇溶液，過(guò)量)。反應(yīng)混合物變?yōu)辄S色，加熱回流2小時(shí)，蒸發(fā)，然后順序加入水(5mL)、EtOAc(20mL)。分離各層。有機(jī)層用氯化鈉飽和水溶液洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾并蒸發(fā)。黃色殘留物然后通過(guò)快速色譜法提純，得到71mg(83％收率)8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲氧基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ2.30(s，3H)，3.82(s，3H)，6.61(d，1H，J＝9.7Hz)，7.01-7.18(m，4H)，7.25(m，1H)，7.52(m，2H).LC MS(m/e)＝398(MH+)。
實(shí)施例99
8-(2，6-二氟-苯基)-2-乙氧基-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例98的方法使用乙醇鈉進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物8-(2，6-二氟-苯基)-2-乙氧基-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ1.26(m，3H)，2.30(s，3H)，4.22(m，2H)，6.60(d，1H，J＝9.6Hz)，6.98-7.20(m，4H)，7.25(m，1H)，7.51(m，2H).LC MS(m/e)＝412(MH+)。
實(shí)施例100 2-丁氧基-8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例98的方法使用丁醇鈉進(jìn)行制備，得到標(biāo)題化合物2-丁氧基-8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ0.87(m，3H)，1.31(m，2H)，1.65(m，2H)，2.27(s，3H)，4.16(m，2H)，6.58(d，1H，J＝9.6Hz)，6.95-7.21(m，4H)，7.25(m，1H)，7.52(m，2H).LC MS(m/e)＝440(MH+)。
實(shí)施例101
8-(2-氯-苯基)-4-(2-氟-苯基)-2-甲氧基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例98的方法，以(E)-3-[4-(2-氯苯基氨基)-6-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-基]-丙烯酸甲酯和甲醇鈉為原料進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物8-(2-氯-苯基)-4-(2-氟-苯基)-2-甲氧基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ3.70(s，3H)，6.59(d，1H，J＝9.7Hz)，7.01-7.20(m，3H)，7.40(m，2H)，7.56(m，4H).LC MS(m/e)＝382(MH+).Rt＝2.24min。
實(shí)施例102 4，8-雙-(2-氯-苯基)-2-甲氧基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照上面實(shí)施例98所述，以(E)-3-[4-(2-氯-苯基氨基)-6-(2-氯-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-基]-丙烯酸甲酯和甲醇鈉進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4，8-雙-(2-氯-苯基)-2-甲氧基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ3.71(s，3H)，6.55(d，1H，J＝9.6Hz)，7.24-7.60(m，9H).LC MS(m/e)＝398(MH+).Rt＝2.27min。
實(shí)施例103
8-(2，6-二氟-苯基)-4-(2-氟-苯基)-2-甲氧基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照上面實(shí)施例98所述，以(E)-3-[4-(2，6-二氟-苯基氨基)-6-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-基]-丙烯酸甲酯和甲醇鈉進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物8-(2，6-二氟-苯基)-4-(2-氟-苯基)-2-甲氧基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ3.82(s，3H)，6.56(d，1H，J＝9.6Hz)，7.08(m，2H)，7.26-7.59(m，6H).LC MS(m/e)＝384(MH+).Rt＝2.22min.
實(shí)施例104 8-(1-乙基-丙基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲氧基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照上面實(shí)施例98所述，以(E)-3-[4-(1-乙基-丙基氨基)-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-基]-丙烯酸甲酯和甲醇鈉進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物8-(1-乙基-丙基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲氧基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ0.89(m，6H)，2.02(m，2H)，2.22(s，3H)，2.33(m，2H)，3.39(m，2H)，4.09(s，3H)，5.35(m，0.5H)，5.62(m，0.5H)，6.41(br d，1H，J＝9.6Hz)，7.03(m，2H)，7.28(m，2H).LC MS(m/e)＝356(MH+).Rt＝2.50min。
實(shí)施例105
4，8-雙-(2-氯-苯基)-2-(2-羥基-乙氧基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照上面實(shí)施例98所述，以(E)-3-[4-(2-氯-苯基氨基)-6-(2-氯-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-基]-丙烯酸甲酯和乙二醇鈉鹽進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4，8-雙-(2-氯-苯基)-2-(2-羥基-乙氧基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ3.81(m，2H)，4.23(m，2H)，5.62(m，0.5H)，6.65(d，1H，J＝9.6Hz)，7.29-7.58(9H).LC MS(m/e)＝428(MH+).Rt＝1.85min。
實(shí)施例106 4-氨基-6-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛向?qū)嵤├?7(217mg，1.07mmol)在二烷(21mL)和水(7mL)中的溶液內(nèi)加入無(wú)水碳酸鉀(443mg，3.21mmol，3eq)，接著加入2-氟苯基硼酸(218mg，1.6mmol，1.5eq.)。脫氣反應(yīng)混合物，加入四(三苯膦)鈀(61mg，0.053mmol，0.05eq)，加熱回流24小時(shí)，冷卻到23℃。分離各層，順序加入EtOAc(50mL)、水(10mL)，分離各層，用氯化鈉飽和水溶液洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾，并蒸發(fā)溶劑。殘留物通過(guò)快速色譜純化(1∶2 EtOAc∶己烷)，得到180mg(72％收率)4-氨基-6-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛純品。1H-NMR δ2.58(s，3H)，5.80(br s，1H)，7.16(m，1H)，7.28(m，1H)，7.59(m，2H)，8.68(br s，1H)，9.71(s，1H)，LC MS(m/e)＝264(MH+)。Rt＝1.89min。
實(shí)施例107
4-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮冷卻由18-冠-6(422mg，1.6mmol，5eq)和磷酸雙(2，2，2-三氟乙基)·(甲氧基羰基甲基)酯(81μL，0.38mmol，1.2eq.)在無(wú)水THF(20mL)中形成的溶液到-78℃，加入雙(三甲基甲硅烷基)氨化鉀(0.96mL，0.48mmol，1.5eq)的甲苯溶液(0.5mol)。-78℃再攪拌此溶液30分鐘，逐滴加入4-氨基-6-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛(85mg，0.32mmol)的無(wú)水THF(1mL)溶液。然后-78℃攪拌反應(yīng)混合物8小時(shí)，繼而溫?zé)岬?3℃，攪拌16小時(shí)。順序加入飽和氯化銨水溶液(5mL)、Et2O(20mL)。分離各層。有機(jī)層用飽和NaCl水溶液洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾，蒸發(fā)溶劑。黃色殘留物通過(guò)快速色譜純化，得100mg(91％收率)4-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。1H-NMR δ2.62(s，3H)，6.50(d，1H，J＝9.9Hz)，7.26(m，3H)，7.52(m，2H)，8.99(br s，1H).LC MS(m/e)＝288(MH+)。Rt＝1.75min。
實(shí)施例108 4-(2-氟-苯基)-8-甲基-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮向4-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(120mg，0.42mmol)在20mL無(wú)水THF中的溶液內(nèi)順序加入NaH(50mg，1.2mmol，60％礦物油分散物，3eq)、碘甲烷(74μL，1.2mmol，3eq)。23℃攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)，加飽和NH4Cl(20mL)終止反應(yīng)，然后加入Et2O(100ml)，分離各層。有機(jī)層用飽和NaCl水溶液洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾并蒸發(fā)。黃色殘留物然后用快速色譜法純化，得100mg(92％收率)4-(2-氟-苯基)-8-甲基-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。1H-NMR δ2.68(s，3H)，3.81(s，3H)，6.61(d，1H，J＝9.8Hz)，7.22(m，3H)，7.50(m，3H).LC MS(m/e)＝302(MH+)。Rt＝2.17min。
實(shí)施例109 8-乙基-4-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照上面實(shí)施例108所述，以4-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮和碘甲烷為原料進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物8-乙基-4-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.LC MS(m/e)＝316(MH+)。Rt＝2.29min。
實(shí)施例110 4-(2-氯-苯基氨基)-2-甲硫基-6-苯氧基-嘧啶-5-甲醛向4-氯-6-(2-氯-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛(315mg，1mmol)在10mL無(wú)水DMSO中的溶液內(nèi)順序加入NaH(50mg，1.2mmol，60％礦物油分散物，1.2eq)、苯酚(112mg，1.2mmol，1.2eq)。23℃攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)，加水(20mL)終止反應(yīng)，加入乙醚(100mL)，分離各層。有機(jī)層用飽和NaCl水溶液洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾并真空除去溶劑。黃色殘留物然后用快速色譜法純化，得120mg(45％收率)4-(2-氯-苯基氨基)-2-甲硫基-6-苯氧基-嘧啶-5-甲醛。1H-NMR δ2.32(s，3H)，7.01-7.49(m，8H)，8.51(d，1H，J＝7.2Hz)，10.49(s，1H)，11.58(br s，1H).LC MS(m/e)＝372(MH+)。Rt＝2.94min。
實(shí)施例111
8-(2-氯-苯基)-2-甲硫基-4-苯氧基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮冷卻由18-冠-6(422mg，1.6mmol，5eq)和磷酸雙(2，2，2-三氟乙基)·(甲氧基羰基甲基)酯(81μL，0.38mmol，1.2eq.)在無(wú)水THF(20mL)中形成的溶液到-78℃。向此溶液內(nèi)加入雙(三甲基甲硅烷基)氨化鉀(0.96mL，0.48mmol，1.5eq)的甲苯溶液(0.5mol)。-78℃再攪拌此溶液30分鐘，逐滴加入4-(2-氯-苯基氨基)-2-甲硫基-6-苯氧基-嘧啶-5-甲醛(119mg，0.32mmol)的無(wú)水THF(1mL)溶液。然后-78℃攪拌反應(yīng)混合物8小時(shí)，繼而溫?zé)岬?3℃，攪拌16小時(shí)。順序加入飽和NH4Cl水溶液(5mL)、Et2O(20mL)。分離各層。有機(jī)層用飽和NaCl水溶液洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾，真空蒸發(fā)溶劑。黃色殘留物然后通過(guò)快速色譜純化，得100mg(91％收率)8-(2-氯-苯基)-2-甲硫基-4-苯氧基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮純品。1H-NMR δ1.89(s，3H)，6.55(d，1H，J＝9.9Hz)，7.18(m，4H)，7.28(m，4H)，7.44(m，1H)，7.98(d，1H，J＝9.9Hz).LCMS(m/e)＝396(MH+).Rt＝2.68min。
實(shí)施例112 2-氨基-8-(2，6-二氟-苯基)-4-(2-氟-苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮向8-(2，6-二氟-苯基)-4-(2-氟-苯基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(432mg，1mmol)的1-甲基-2-吡咯烷酮(5mL)溶液中加入NaNH2(195mg，5mmol，5eq)，加熱混合物到50℃。1小時(shí)后，順序加入H2O(20mL)、Et2O(20mL)。分離各層。有機(jī)層用飽和NaCl水溶液洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾，真空蒸發(fā)溶劑。黃色殘留物然后用快速色譜法純化，得2-氨基-8-(2，6-二氟-苯基)-4-(2-氟-苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(100mg，53％收率).1H-NMR(CDCl3)δ5.51(br s，2H)，6.42(d，1H，J＝9.8Hz)，7.08(m，2H)，7.30(m，2H)，7.50(m，4H).LC MS(m/e)＝369(MH+)。Rt＝1.77min。
實(shí)施例113 8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-5，8-二氫-6H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮a)3-[4-(2，6-二氟-苯基氨基)-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-基]-丙酸甲酯向SmI2在THF(0.1M)(Aldrich)(15mL，1.5mmol)和MeOH(3mL)中的溶液內(nèi)加入實(shí)施例30的產(chǎn)物(100mg，0.22mmol)，反應(yīng)混合物的顏色仍保持為藍(lán)色。hplc顯示存在有新產(chǎn)物并且原料消失。30分鐘后，順序加水(10mL)、1MHCl(3mL)、EtOAc(20mL)稀釋反應(yīng)物，一起搖動(dòng)各層，之后分離。水相用EtOAc(20mL)洗滌，并且干燥(MgSO4)合并的EtOAc，真空蒸發(fā)溶劑，殘留物用i-PrOH/H2O(1∶1)結(jié)晶，得到3-[4-(2，6-二氟-苯基氨基)-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-基]-丙酸甲酯。LC MS(m/e)＝448.2(MH+)，Rt＝2.17min。
b)8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-5，8-二氫-6H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮向3-[4-(2，6-二氟-苯基氨基)-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-基]-丙酸甲酯(45mg，0.1mmol)的甲醇(5mL)溶液中加入甲醇鈉溶液(0.5mL)，加熱回流反應(yīng)混合物1h。然后蒸發(fā)反應(yīng)混合物，順序加入EtOAc(20mL)、水(10mL)。分離各層，有機(jī)物用飽和NaCl水溶液洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾，蒸發(fā)溶劑。加入二氯甲烷(5mL)，接著加入0.5mL草酰氯和0.1mL Et3N。反應(yīng)混合物然后于23℃攪拌2h，順序加入水(5mL)和二氯甲烷(15mL)。分離各層，有機(jī)層用飽和NaCl水溶液洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾，蒸發(fā)溶劑。黃色殘留物用快速色譜純化，得11.2mg(21％收率)8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-5，8-二氫-6H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。1H-NMR(CDCl3)δ2.20(s，3H)，2.29(s，3H)，3.85(m，4H)，7.02(m，4H)，7.21(m，1H)，7.42(m，1H).LC MS(m/e)＝416.2(MH+)。Rt＝2.44min。
實(shí)施例114 2-(2-二乙基氨基-乙基氨基)-8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-5，8-二氫-6H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例113(b)的產(chǎn)物與N，N-二乙基乙二胺反應(yīng)，得到標(biāo)題化合物2-(2-二乙基氨基-乙基氨基)-8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-5，8-二氫-6H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ1.01(m，6H)，2.01-2.80(m，11H)，6.89-7.40(m，6H).LC MS(m/e)＝484.2(MH+)。Rt＝1.80min。
實(shí)施例115 4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-羥基-乙基氨基)-8-異丙基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例56的產(chǎn)物與2-氨基乙醇反應(yīng)，得到標(biāo)題化合物4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-羥基-乙基氨基)-8-異丙基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ1.78(m，6H)，2.29(s，3H)，3.70(br s，2H)，3.89(br s，3H)，5.81(m，1H)，6.02(br s，1H)，6.23(d，1H，J＝9.7Hz)，7.00(m，2H)，7.11(d，1H，J＝9.7Hz)，7.19(m，1H)，LC MS(m/e)＝357.2(MH+)。Rt＝1.80min。
實(shí)施例116 N-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基]-N-甲基-甲磺酰胺向N-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基]-甲磺酰胺(92mg，0.2mmol)的無(wú)水DMF(2mL)溶液內(nèi)加入NaH(80mg，60％礦物油分散物，2mmol，10eq)，反應(yīng)混合物于23℃攪拌30分鐘。加入碘甲烷(280mg，2mmol，10eq)，于23℃再攪拌反應(yīng)混合物1h。加入飽和NH4Cl水溶液(5mL)，反應(yīng)混合物用EtOAc(2×20mL)萃取。合并有機(jī)層，以飽和NaCl水溶液洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾，蒸發(fā)溶劑。黃色殘留物然后通過(guò)快速色譜法純化，得80mg純凈的N-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基]-N-甲基-甲磺酰胺.1H-NMR(CDCl3)δ2.22(s，3H)，2.96(s，3H)，3.30(s，3H)，6.68(d，1H，J＝9.8Hz)，7.02(m，4H)，7.213(m，1H)，7.42(m，2H)，LC MS(m/e)＝475.4(MH+)。Rt＝2.25min。
實(shí)施例117
N-[4-(4-氟-2-甲基-苯基)-8-異丙基-7-氧代-7，8-二氫吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基]-N-甲基-甲磺酰胺如上實(shí)施例115所述，以N-[4-(4-氟-2-甲基-)-8-異丙基-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基]-甲磺酰胺為原料進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物N-[4-(4-氟-2-甲基-苯基)-8-異丙基-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基]-N-甲基-甲磺酰胺。1H-NMR(CDCl3)δ1.75(d，6H，J＝6.9Hz)，2.18(s，3H)，3.39(s，3H)，3.53(s，3H)，5.81(m，1H)，6.40(d，1H，J＝9.7Hz)，6.96(m，2H)，7.11(m，1H)，7.21(d，1H，J＝9.7Hz)，LC MS(m/e)＝405.4(MH+)。Rt＝2.20min。
實(shí)施例118 8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-羥基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮向8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(223mg，0.5mmol)的N-甲基吡咯烷(5mL)溶液內(nèi)順序加入Et3N(0.1mL)、2-氨基乙磺酸(200mg，1.5mmol，3eq)，加熱反應(yīng)混合物到50℃持續(xù)12小時(shí)。然后滴加1M鹽酸水溶液至pH3。反應(yīng)混合物然后以EtOAc(2×20mL)萃取。合并有機(jī)層，用飽和NaCl水溶液洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。黃色殘留物隨后用快速色譜法純化，得到一油狀產(chǎn)物，進(jìn)而以甲醇∶H2O(3∶1)重結(jié)晶，得51mg 8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-羥基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ2.24(s，3H)，6.31(d，1H，J＝9.8Hz)，7.02(m，5H)，7.23(m，1H)，7.352(m，1H)，LC MS(m/e)＝384.2(MH+)。Rt＝1.65min。
實(shí)施例119 4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-8-鄰-甲苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮如上實(shí)施例32所述，以4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-6-鄰甲苯基氨基-嘧啶-5-甲醛為原料進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-8-鄰甲苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ2.02(s，3H)，2.20(s，3H)，2.28(s，3H)，6.79(d，1H，J＝9.7Hz)，7.02(m，2H)，7.17(m，1H)，7.22(m，2H)，7.40(m，2H)，7.53(d，1H，J＝9.7Hz).LC MS(m/e)＝392.2(MH+)。Rt＝2.40min。
實(shí)施例120 8-(2，6-二甲基-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮如上實(shí)施例32所述，以4-(2，6-二甲基苯基氨基)-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛為原料進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物8-(2，6-二甲基-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ2.05(s，6H)，2.26(s，3H)，2.31(s，3H)，6.81(d，1H，J＝9.7Hz)，7.02(m，2H)，7.17(m，5H)，7.51(d，1H，J＝9.7Hz).LC MS(m/e)＝406.4(MH+)。Rt＝2.55min。
實(shí)施例121 4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲磺?；?8-鄰-甲苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮如上面實(shí)施例47所述，以4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-6-鄰甲苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮為原料進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲磺?；?8-鄰甲苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.LC MS(m/e)＝424.2(MH+)。Rt＝2.02min。
實(shí)施例122 8-(2，6-二甲基-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲磺酰基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮如上面實(shí)施例47所述，以8-(2，6-二甲基-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮為原料進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物8-(2，6-二甲基-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.LCMS(m/e)＝438.0(MH+)。Rt＝2.07min。
實(shí)施例123 8-(2，6-二甲基-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-羥基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮如上面實(shí)施例60所述，以8-(2，6-二甲基苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲磺酰基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮和2-氨基乙醇為原料進(jìn)行制備，得標(biāo)題化合物8-(2，6-二甲基-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-羥基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ1.92(s，6H)，2.12(s，3H)，2.95(br s，2H)，3.30(br s，2H)，3.45(br s，1H)，6.31(d，1H，J＝9.7Hz)，6.92(m，2H)，7.17(m，5H).LC MS(m/e)＝419.4(MH+)。Rt＝1.84min實(shí)施例124 8-(2，6-二甲基-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-羥基-1-羥基甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例122的產(chǎn)物與絲氨醇反應(yīng)，得標(biāo)題化合物8-(2，6-二甲基-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-羥基-1-羥基甲基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ1.91(s，6H)，2.14(s，3H)，3.45(br s，3H)，3.93(br s，1H)，6.20(br s，1H)，6.31(d，1H，J＝9.7Hz)，6.93(m，2H)，7.11(m，5H).LC MS(m/e)＝449.0(MH+)。Rt＝1.62min。
實(shí)施例125 4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-羥基-1-羥甲基-乙基氨基)-8-鄰-甲苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60的方法使實(shí)施例121的產(chǎn)物與絲氨醇反應(yīng)，得標(biāo)題化合物4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-羥基-1-羥基甲基-乙基氨基)-8-鄰甲苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮.1H-NMR(CDCl3)δ2.09(s，3H)，2.26(s，3H)，3.73(br s，4H)，4.02(br s，1H)，6.30(br s，1H)，6.41(d，1H，J＝9.7Hz)，7.05(m，2H)，7.24(m，6H).LC MS(m/e)＝435.2(MH+)。Rt＝1.60min。
實(shí)施例126 4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-羥基-乙基氨基)-8-鄰-甲苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮23℃在NMP(2mL)中攪拌實(shí)施例121的產(chǎn)物(400mg，0.95mmol)與乙醇胺(0.29mL，4.73mmol)共計(jì)1小時(shí)。加EtOAc稀釋上述混合物，水洗，分出有機(jī)相，真空除去EtOAc，并將殘留物通過(guò)硅膠快速色譜法純化，以EtOAc/己烷/三乙胺(50/50/2，v/v/v)洗脫，繼之蒸發(fā)溶劑得到一樹(shù)膠狀殘留物。進(jìn)而用水研制，得標(biāo)題化合物4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-羥基-1-羥基甲基-乙基氨基)-8-鄰甲苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮白色固體(340mg，88％).LC MS(m/e)＝405.4(MH+，m/z)。Rt＝1.85min。
實(shí)施例127 8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(3-甲硫基丙氧基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮?dú)鍤夥障?，?3℃向3-(甲硫基)-1-丙醇(0.5mL)中加入NaH(12mg，0.5mmol)并攪拌此混合物。5分鐘后，不再有氣體逸出，一次性加入實(shí)施例48的產(chǎn)物(223mg，0.5mmol)。攪拌混合物30分鐘。真空除去大部分過(guò)量的3-(甲硫基)-1-丙醇，將殘留物分配到EtOAc與水之間。有機(jī)層用水、飽和NaCl水溶液洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，蒸發(fā)得到粗產(chǎn)物。以10-30％EtOAc/己烷為洗脫劑進(jìn)行快速柱層析，進(jìn)而用二氯甲烷/己烷重結(jié)晶，得白色結(jié)晶固體標(biāo)題化合物。mp127-128℃，LC MS m/z＝472(MH+)，保留時(shí)間＝2.47min.
實(shí)施例128 8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(3-甲磺酰基丙氧基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮向?qū)嵤├?27的產(chǎn)物(100mg，0.21mmol)/氯仿(10mL)中加入80％3-氯過(guò)苯甲酸(135mg，0.63mmol)?；旌衔镌跉鍤夥障掠?3℃攪拌2h，之后真空除去溶劑，將殘留物分配到EtOAc與1M Na2CO3之間。有機(jī)相用水、飽和NaCl水溶液洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，蒸發(fā)得到粗產(chǎn)物。以0-20％EtOAc/CH2Cl2為洗脫劑進(jìn)行快速柱層析，繼而以CH2Cl2/己烷重結(jié)晶，得白色結(jié)晶固體標(biāo)題化合物。mp160-162℃，LC MS m/z＝504(MH+)，保留時(shí)間＝2.02min。
實(shí)施例129 8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(2-羥基-1-羥甲基乙氧基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將1，3-O-亞芐基甘油(100mg，0.55mmol)溶于無(wú)水THF(5mL)，并在氬氣氛下于23℃進(jìn)行攪拌。加入NaH(14mg，0.55mmol)，23℃攪拌混合物15分鐘，然后冷卻到-78℃。加入實(shí)施例48的產(chǎn)物(222mg，0.5mmol)，使混合物緩慢溫?zé)岬?3℃。真空除去溶劑，將殘留物溶于乙酸(2mL)，加入水(0.5mL)?；旌衔镌谟驮≈屑訜岬?0℃保持3小時(shí)，然后真空除去溶劑，得到粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)物通過(guò)硅膠快速色譜層析兩次，以20-50％EtOAc/CH2Cl2洗脫，得到白色無(wú)定形固體產(chǎn)物。mp104-107℃，LC MS m/z＝458(MH+)，保留時(shí)間＝1.88min。
實(shí)施例130 8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-[2-(叔丁氧羰基氨基)乙氧基]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例48的產(chǎn)物(445mg，1mmol)和BOC-氨基乙醇(177mg，1.1mmol)溶于THF(10mL)，在氬氣氛圍中于攪拌下冷卻到-78℃。一次性加入NaH(28mg，1.1mmol)?；旌衔锞徛厣?3℃，但反應(yīng)未完全進(jìn)行。再加入NaH(10mg，0.4mmol)，使反應(yīng)完全進(jìn)行。真空除去溶劑，將殘留物分配到EtOAc與水之間。有機(jī)層用水、飽和NaCl水溶液洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，蒸發(fā)得到粗產(chǎn)物。以0-10％EtOAc/己烷為洗脫劑進(jìn)行快速層析，得白色無(wú)定形固體標(biāo)題化合物.mp103-105℃，LC MS m/z＝527(MH+)，保留時(shí)間＝2.44min。
實(shí)施例131 8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(2-氨基乙氧基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例130的產(chǎn)物(1g，1.9mmol)溶于CH2Cl2(8mL)，氬氣氛下，在油浴中進(jìn)行攪拌。加入25％TFA的二氯甲烷冰冷溶液(40mL)，混合物于0℃攪拌45分鐘。真空除去溶劑，將殘留物分配到EtOAc與飽和NaHCO3溶液之間。有機(jī)相用水、飽和NaCl洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，蒸發(fā)得到粗產(chǎn)物。經(jīng)快速層析(以0-10％MeOH/CH2Cl2洗脫)得到白色無(wú)定形固體標(biāo)題化合物。mp96-99℃，LC MS m/z＝427(MH+)，保留時(shí)間＝1.52min。
實(shí)施例132
8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(2-乙酰氨基乙氧基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例131的產(chǎn)物(61mg，0.14mmol)溶于CH2Cl2(2mL)，于0℃在氬氣氛圍中進(jìn)行攪拌。加入三乙胺(0.1mL)，接著再加入乙酸酐(0.2g，2mmol)。緩慢溫?zé)岱磻?yīng)物到23℃，攪拌18h。真空除去溶劑，殘留物通過(guò)快速色譜層析，以10-30％EtOAc/CH2Cl2洗脫，得白色無(wú)定形固體標(biāo)題化合物.mp75-79℃，LC MS m/z＝469(MH+)，保留時(shí)間＝1.95min.
實(shí)施例133 8-(2，6-氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(3-羥基-2-羥甲基丙氧基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮向2-(羥甲基)-1，3-丙二醇/THF(5mL)中加入NaH(15mg，0.6mmol)。在氬氣氛圍中23℃攪拌混合物10分鐘，然后冷卻到-78℃。于-78℃加入在THF(5mL)中的實(shí)施例48的產(chǎn)物(224mg，0.5mmol)，溫?zé)峄旌衔锏?3℃，攪拌2小時(shí)。真空除去溶劑，將殘留物分配到EtOAc和水之間。有機(jī)層用水、飽和NaCl水溶液洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，蒸發(fā)得到粗產(chǎn)物。以70％EtOAc/CH2Cl2為洗脫劑進(jìn)行快速層析，得白色無(wú)定形固體標(biāo)題化合物.mp77-81℃，LC MS m/z＝472(MH+)，保留時(shí)間＝1.79min.
實(shí)施例134
8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(2-甲磺酰基氨基乙氧基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮23℃、氬氣氛下攪拌實(shí)施例131的產(chǎn)物(100mg，0.23mmol)的CH2Cl2(4mL)溶液。加入三乙胺(0.1mL)，然后加入甲磺酰氯(29mg，0.25mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液。真空除去溶劑，將殘留物分配到EtOAc與水之間。有機(jī)層用水、飽和NaCl水溶液洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，蒸發(fā)得到粗產(chǎn)物。以0-10％EtOAc/CH2Cl2為洗脫劑進(jìn)行快速層析，得到白色無(wú)定形固體標(biāo)題化合物.mp95-99℃，LC MS m/z＝505(MH+)，保留時(shí)間＝2.02min.
實(shí)施例135 8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(2-N-甲磺?；?N-甲基氨基乙氧基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例134的產(chǎn)物(20mg，0.04mmol)溶于丙酮(2mL)，在氬氣氛圍中于23℃進(jìn)行攪拌。加入碳酸鉀(7mg，0.05mmol)，接著加入碘甲烷(6.4mg，0.045mmol)的丙酮(1mL)溶液。攪拌混合物18h，真空除去溶劑，將殘留物分配到EtOAc/水之間。有機(jī)相用水、飽和NaCl水溶液洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，蒸發(fā)得到粗產(chǎn)物。以0-5％EtOAc/CH2Cl2為洗脫劑進(jìn)行快速層析，得到白色無(wú)定形固體標(biāo)題化合物.mp89-92℃，LC MS m/z＝519(MH+)，保留時(shí)間＝2.2min.
實(shí)施例136 4-(4-氟-2-甲基苯基)-8-(2-氟苯基)-2-(2-羥基乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例59的產(chǎn)物(200mg，0.47mmol)溶于THF(4mL)，加入乙醇胺(115mg，1.87mmol)的THF(1mL)溶液?；旌衔镌跉鍤夥諊杏?3℃攪拌18h。真空除去溶劑，將殘留物分配到EtOAc和水之間。有機(jī)相用水、飽和NaCl水溶液洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，蒸發(fā)得到粗產(chǎn)物。以0-15％EtOAc/CH2Cl2為洗脫劑進(jìn)行快速層析，得到亮黃色無(wú)定形固體標(biāo)題化合物.mp120-124℃，LC MS m/z＝409(MH+)，保留時(shí)間＝1.84min.
實(shí)施例137 (S)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-8-(2，6-二氟苯基)-2-[(1-羥基丙-2-基)氨基]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例48的產(chǎn)物(200mg，0.45mmol)和(S)-2-氨基-1-丙醇(75mg，1mmol)溶于THF(10ml)，在氬氣氛圍中23℃攪拌10天。真空除去溶劑，將殘留物分配到EtOAc和H2O之間。有機(jī)相用水、飽和NaCl水溶液洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，蒸發(fā)得到粗產(chǎn)物。以0-15％EtOAc/CH2Cl2為洗脫劑進(jìn)行快速層析，得到灰白色無(wú)定形固體標(biāo)題化合物.mp96-101℃，LC MS m/z＝441(MH+)，保留時(shí)間＝2.04min.
實(shí)施例138 (R)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-8-(2，6-二氟苯基)-2-[(1-羥基丙-2-基)氨基]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例48的產(chǎn)物(200mg，0.45mmol)和(R)-2-氨基-1-丙醇(75mg，1mmol)溶于THF(10ml)，在氬氣氛圍中23℃攪拌18h。真空除去溶劑，將殘留物分配到EtOAc和水之間。有機(jī)相用水、飽和NaCl水溶液洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，蒸發(fā)得到粗產(chǎn)物。以0-15％EtOAc/CH2Cl2為洗脫劑進(jìn)行快速層析，得到灰白色無(wú)定形固體標(biāo)題化合物.mp90-95℃，LC MS m/z＝441(MH+)，保留時(shí)間＝2.09min.
實(shí)施例139 4-(4-氟-2-甲基苯基)-8-(2，6-二氟苯基)-2-(1，1-二甲基-2-羥基乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例48的產(chǎn)物(200mg，0.45mmol)和95％2-氨基-2-甲基-1-丙醇(94mg，1mmol)溶于THF(10ml)，在氬氣氛圍中50℃攪拌3天。真空除去溶劑，將殘留物分配到EtOAc和水之間。有機(jī)相用水、飽和NaCl水溶液洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，蒸發(fā)得到粗產(chǎn)物。以0-15％EtOAc/CH2Cl2為洗脫劑進(jìn)行快速層析，得到灰白色無(wú)定形固體標(biāo)題化合物.mp99-105℃，LC MSm/z＝455(MH+)，保留時(shí)間＝2.19min.
實(shí)施例140 2-乙基氨基-4-(4-氟-2-甲基苯基)-8-(2-氟苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例59的產(chǎn)物(200mg，0.47mmol)與5mL 2M乙胺的THF溶液混合并進(jìn)行攪拌。5分鐘后真空除去溶劑，將殘留物分配到EtOAc和水之間。有機(jī)相用水、飽和NaCl水溶液洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，蒸發(fā)得到粗產(chǎn)物。以0-2％EtOAc/CH2Cl2為洗脫劑進(jìn)行快速層析，繼而再用CH2Cl2/己烷重結(jié)晶，得到亮黃色結(jié)晶固體標(biāo)題化合物.mp176-177℃，LC MS m/z＝393(MH+)，保留時(shí)間＝2.38min.
實(shí)施例141 (S)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-8-(2-氟苯基)-2-[(1-羥基丙-2-基)氨基]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例59的產(chǎn)物(200mg，0.47mmol)和(S)-2-氨基-1-丙醇(75mg，1mmol)溶于THF(10ml)，在氬氣氛圍中23℃攪拌18h。真空除去溶劑，將殘留物分配到EtOAc和水之間。有機(jī)相用水、飽和NaCl水溶液洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，蒸發(fā)得到粗產(chǎn)物。以0-20％EtOAc/CH2Cl2為洗脫劑進(jìn)行快速層析，得到灰白色無(wú)定形固體標(biāo)題化合物.mp114-120℃，LC MS m/z＝423(MH+)，保留時(shí)間＝2.0min.
實(shí)施例142 (R)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-8-(2-氟苯基)-2-[(1-羥基丙-2-基)氨基]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例59的產(chǎn)物(200mg，0.47mmol)和(R)-2-氨基-1-丙醇(75mg，1mmol)溶于THF(10ml)，在氬氣氛圍中23℃攪拌18h.真空除去溶劑，將殘留物分配到EtOAc和水之間。有機(jī)相用水、飽和NaCl水溶液洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，蒸發(fā)得到粗產(chǎn)物。以0-20％EtOAc/CH2Cl2為洗脫劑進(jìn)行快速層析，得到灰白色無(wú)定形固體標(biāo)題化合物.mp116-122℃，LC MS m/z＝423(MH+)，保留時(shí)間＝2.04min.
實(shí)施例143 2-(1，1-二甲基-2-羥基乙基氨基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-8-(2-氟苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例59的產(chǎn)物(200mg，0.47mmol)和2-氨基-2-甲基-1-丙醇(94mg，1mmol)溶于THF(10ml)，在氬氣氛圍中50℃攪拌3天。真空除去溶劑，將殘留物分配到EtOAc和水之間。有機(jī)相用水、飽和NaCl水溶液洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，蒸發(fā)得到粗產(chǎn)物。以0-15％EtOAc/CH2Cl2為洗脫劑進(jìn)行快速層析，得到亮黃色無(wú)定形固體標(biāo)題化合物.mp106-112℃，LC MS m/z＝437(MH+)，保留時(shí)間＝1.94min.
實(shí)施例144 2-羥基-4-(4-氟-2-甲基苯基)-8-(2-氟苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以5％MeOH/CH2Cl2為洗脫劑從硅膠快速柱中洗脫出實(shí)施例143中形成的高極性產(chǎn)物。進(jìn)而用EtOAc重結(jié)晶，得到白色結(jié)晶固體標(biāo)題化合物。據(jù)推測(cè)此化合物可能是通過(guò)原料砜與摻雜在胺原料中的水反應(yīng)生成.mp＞280℃，LC MS m/e＝366(MH+)，保留時(shí)間＝1.7min.
實(shí)施例145 2-環(huán)己基氨基-4-(4-氟-2-甲基苯基)-8-(2-氟苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮在THF(10mL)中混合實(shí)施例59的產(chǎn)物(200mg，0.47mmol)和環(huán)己胺(100mg，1mmol)，在氬氣氛圍中23℃攪拌18小時(shí)。真空除去溶劑，殘留物以50-100％CH2Cl2/己烷為洗脫劑進(jìn)行硅膠快速層析。經(jīng)CH2Cl2/己烷重結(jié)晶得到白色結(jié)晶固體標(biāo)題化合物.mp181-182℃，LC MS m/z＝447(MH+)，保留時(shí)間＝2.71min.
實(shí)施例146
2-(四氫吡喃-4-基氨基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-8-(2-氟苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮在THF(10mL)中混合實(shí)施例59的產(chǎn)物(200mg，0.47mmol)與4-氨基四氫吡喃(102mg，1mmol)，然后在氬氣氛圍中23℃攪拌18小時(shí)。真空除去溶劑，殘留物以0-15％EtOAc/CH2Cl2為洗脫劑進(jìn)行快速層析。進(jìn)而用CH2Cl2/己烷重結(jié)晶，得到亮黃色結(jié)晶固體標(biāo)題化合物.mp211-212℃，LC MS m/z＝449(MH+)，保留時(shí)間＝2.21min.
實(shí)施例147 2-乙基氨基-4-(4-氟-2-甲基苯基)-8-(2，6-二氟苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮混合并攪拌實(shí)施例48的產(chǎn)物(200mg，0.45mmol)與2M乙胺的THF溶液(5mL)。5分鐘后，真空除去溶劑，將殘留物分配到EtOAc和水之間。有機(jī)相用水、飽和NaCl水溶液洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，蒸發(fā)得到粗產(chǎn)物。以0-2％EtOAc/CH2Cl2為洗脫劑進(jìn)行快速層析，進(jìn)而用CH2Cl2/己烷重結(jié)晶，得到白色結(jié)晶固體產(chǎn)物.mp195-196℃，LC MS m/z＝411(MH+)，保留時(shí)間＝2.4min.
實(shí)施例148
2-環(huán)己基氨基-4-(4-氟-2-甲基苯基)-8-(2，6-二氟苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮在THF(10mL)中混合實(shí)施例48的產(chǎn)物(200mg，0.45mmol)和環(huán)己胺(100mg，1mmol)，并在氬氣氛圍中23℃攪拌18h.真空除去溶劑，殘留物以50-100％CH2Cl2/己烷為洗脫劑進(jìn)行快速層析，經(jīng)CH2Cl2/己烷重結(jié)晶后得到白色結(jié)晶固體標(biāo)題化合物.mp218-219℃，LC MS m/z＝465(MH+)，保留時(shí)間＝2.8min.
實(shí)施例149 2-(四氫吡喃-4-基氨基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-8-(2，6-二氟苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮在THF(10mL)中混合實(shí)施例48的產(chǎn)物(200mg，0.45mmol)和4-氨基四氫吡喃(102mg，1mmol)，并在氬氣氛圍中于23℃攪拌18h。真空除去溶劑，殘留物以0-15％EtOAc/CH2Cl2為洗脫劑進(jìn)行快速層析。經(jīng)CH2Cl2/己烷重結(jié)晶后得到亮黃色結(jié)晶固體標(biāo)題化合物.mp231-232℃，LC MS m/z＝467(MH+)，保留時(shí)間＝2.27min.
實(shí)施例150
2-(2，2，2-三氟乙基氨基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-8-(2-氟苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例59的產(chǎn)物(200mg，0.47mmol)和三氟乙胺(200mg，2mmol)溶于THF(7ml)，并在氬氣氛圍中密封于小瓶?jī)?nèi)。混合物在油浴中加熱到60℃保持4天。真空除去溶劑，殘留物以60-90％CH2Cl2/己烷為洗脫劑進(jìn)行快速層析。經(jīng)CH2Cl2/己烷重結(jié)晶后得到白色結(jié)晶固體標(biāo)題化合物。mp187-188℃，LC MS m/z＝447(MH+)，保留時(shí)間＝2.27min.
實(shí)施例151 反式-2-(4-羥基環(huán)己基氨基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-8-(2-氟苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮在THF(10mL)中混合實(shí)施例59的產(chǎn)物(200mg，0.47mmol)、反式-4-氨基環(huán)己醇鹽酸鹽(151mg，1mmol)與三乙胺(0.28mL，2mmol)，并在氬氣氛圍中于50℃攪拌2天。真空除去溶劑，將殘留物分配到EtOAc與H2O之間。有機(jī)相用水、飽和NaCl水溶液洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物。以0-20％EtOAc/CH2Cl2為洗脫劑進(jìn)行快速層析，接著用CH2Cl2/己烷重結(jié)晶，得到淺黃色結(jié)晶固體產(chǎn)物.mp148-151℃，LC MS m/z＝463(MH+)，保留時(shí)間＝2.0min.
實(shí)施例152
2-(1-羥甲基-1-甲基-2-羥基乙基氨基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-8-(2-氟苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮在THF(10mL)中混合實(shí)施例59的產(chǎn)物(200mg，0.47mmol)與2-氨基-2-甲基-1，3-丙二醇(105mg，1mmol)，并在氬氣氛圍中于50℃攪拌3天。真空除去溶劑，殘留物以0-25％EtOAc/CH2Cl2為洗脫劑進(jìn)行快速層析。經(jīng)CH2Cl2/己烷重結(jié)晶，得到白色結(jié)晶固體標(biāo)題化合物.mp160-162℃，LC MS m/z＝453(MH+)，保留時(shí)間＝1.75min.
實(shí)施例153 2-(2，2，2-三氟乙基氨基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-8-(2，6-二氟苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例48的產(chǎn)物(300mg，0.67mmol)和三氟乙胺(300mg，3mmol)溶于THF(10ml)，并在氬氣氛圍中密封于小管內(nèi)?；旌衔镌谟驮≈屑訜岬?0℃保持4天。真空除去溶劑，殘留物以60-90％CH2Cl2/己烷洗脫劑進(jìn)行快速層析。經(jīng)CH2Cl2/己烷重結(jié)晶后得到白色結(jié)晶固體標(biāo)題化合物.mp195-196℃，LC MS m/z＝465(MH+)，保留時(shí)間＝2.38min.
實(shí)施例154
2-(1-羥甲基-1-甲基-2-羥基乙基氨基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-8-(2，6-二氟苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮在THF(10mL)中混合實(shí)施例48的產(chǎn)物(300mg，0.67mmol)與2-氨基-2-甲基-1，3-丙二醇(158mg，1.5mmol)，并在氬氣氛圍中于50℃攪拌3天。真空除去溶劑，殘留物以0-25％EtOAc/CH2Cl2為洗脫劑進(jìn)行快速層析。經(jīng)CH2Cl2/己烷重結(jié)晶后得到白色結(jié)晶固體標(biāo)題化合物.mp158-160℃，LC MS m/z＝471(MH+)，保留時(shí)間＝1.75min.
實(shí)施例155 反式-2-(4-羥基環(huán)己基氨基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-8-(2，6-二氟苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮在THF(15mL)中混合實(shí)施例48的產(chǎn)物(300mg，0.67mmol)、反式-4-氨基環(huán)己醇鹽酸鹽(226mg，1.5mmol)與三乙胺(0.42mL，3mmol)，并在氬氣氛圍中于50℃攪拌2天。真空除去溶劑，將殘留物分配到EtOAc與H2O之內(nèi)。有機(jī)相用水、飽和NaCl水溶液洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，蒸發(fā)得到粗產(chǎn)物。以0-20％EtOAc/CH2Cl2為洗脫劑進(jìn)行快速層析，進(jìn)而用CH2Cl2/己烷重結(jié)晶，制得白色結(jié)晶固體標(biāo)題化合物.mp158-160℃，LC MS m/z＝481(MH+)，保留時(shí)間＝2.08min.
實(shí)施例156
2-乙氧基-4-(4-氟-2-甲基苯基)-8-(2-氟苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例59的產(chǎn)物(200mg，0.47mmol)加入到EtOH(10mL)內(nèi)，混合物在氬氣氛圍中攪拌。餾去約2mL乙醇以蒸發(fā)干混合物。當(dāng)混合物冷卻至23℃時(shí)，一些起始物質(zhì)砜析出。加入NaH(11.5mg，0.46mmol)。反應(yīng)未完全進(jìn)行，故再加入NaH(4mg，0.16mmol)。真空除去溶劑，殘留物以60-100％CH2Cl2/己烷為洗脫劑進(jìn)行硅膠快速層析。經(jīng)CH2Cl2/己烷重結(jié)晶后得到白色結(jié)晶固體標(biāo)題化合物.mp137-139℃，LC MS m/z＝394(MH+)，保留時(shí)間＝2.32min.
實(shí)施例157 8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-[(2-氨基乙基)氨基]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮?dú)鍤夥障?，將?shí)施例48的產(chǎn)物[8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮](0.89g，0.002mol)在無(wú)水THF中于23℃、攪拌下用乙二胺(668μL，0.01mol)處理。顏色變成橙色。LC MS顯示5分鐘后已經(jīng)無(wú)起始物質(zhì)存在。蒸發(fā)反應(yīng)物至干；將殘留物溶于EtOAc-H2O。分離各層，水相用10％NaOH調(diào)節(jié)至pH10.5。水相用EtOAc萃取兩次；干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層，然后蒸發(fā)得到0.762g(89％)玻璃狀標(biāo)題化合物。LC MS m/z＝426(MH+)，保留時(shí)間＝1.52min.
實(shí)施例158 1-[2-[8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基]乙基]-3-乙基脲攪拌下，在氬氣氛圍中將實(shí)施例157的產(chǎn)物(42.5mg，0.0001mol)于23℃在無(wú)水THF(5mL)中用異氰酸乙酯(9.6mg，0.0001mol)單批處理。過(guò)30分鐘后，蒸發(fā)所產(chǎn)生的紅色溶液至干；再溶于二氯甲烷(5mL)，加到ChromatotronTMRotor Plate(1000μ厚度)上；板用二氯甲烷-甲醇梯度液(0％-2％MeOH)洗脫，得30mg(60.4％)純凈標(biāo)題化合物.(m.p.130-133℃).LC MS(m/e)＝497(MH+).Rt＝2.04min.
實(shí)施例159 1-[2-[8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基]乙基]-3-苯基脲以實(shí)施例158所述的相同方式用異氰酸苯酯(11.9mg，0.00011mol)處理實(shí)施例157的標(biāo)題化合物(42.3mg，0.0001mol)。純化得到43mg(79％)紅色固體標(biāo)題化合物(mp142-148℃)，LC MS(m/e)＝545(MH+)，Rt＝2.34min.
實(shí)施例160 1-[2-[8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基]乙基]-3-環(huán)己基脲以實(shí)施例158所述的相同方式用異氰酸環(huán)己基酯(12.5mg，0.00011mol)處理實(shí)施例157的標(biāo)題化合物(42.3mg，0.0001mol)。純化得到43mg(78％)紅色固體標(biāo)題化合物(mp178-183℃)，LC MS(m/e)＝551(MH+)，Rt＝2.38min.
實(shí)施例161 1-[2-[8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基]乙基]-3-[3-氟苯基]脲以實(shí)施例158所述的相同方式用異氰酸3-氟苯酯(12mg，0.0001mol)處理實(shí)施例157的標(biāo)題化合物(42.3mg，0.0001mol)。純化得到38mg(67.6％)亮黃色固體標(biāo)題化合物(mp131-144℃)，LC MS(m/e)＝563(MH+)，Rt＝2.22min.
實(shí)施例162
8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-[1-(2-氨基乙基)-3-甲基脲基]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以實(shí)施例158所述的相同方式用異氰酸甲酯(22μL，21.6mg，0.00035mol)處理實(shí)施例157的標(biāo)題化合物(150mg，0.00035mol)。純化得到100.5mg(59％)亮紅色固體標(biāo)題化合物(mp124-133℃)，LC MS(m/e)＝452(MH+)，Rt＝1.85min.
實(shí)施例163 8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-[N-(2-氨基乙基)-3-苯甲酰基氨基]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮攪拌下，在氬氣氛圍中將實(shí)施例157的標(biāo)題化合物(300mg，0.00071mol)在無(wú)水THF(10mL)中用三乙胺(78.8mg，109μL，0.00078mol)處理，接著再用苯甲酰氯(119mg，99μL，0.00085mol)處理?；旌衔镉?3℃攪拌18小時(shí)；蒸發(fā)至干，然后溶于二氯甲烷(5mL)，施加到ChromatotronTMRotor Plate(2000μ厚度)上；板用二氯甲烷-甲醇梯度液(0％-2％MeOH)洗脫。由此制得141mg(37.5％)灰白色固體標(biāo)題化合物。(m.p.246-248℃)，LC MS(m/e)＝530(MH+).Rt＝2.25min.
實(shí)施例164 8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-[N-(2-氨基乙基)-氨基甲酸乙酯)]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以實(shí)施例163所述的相同方式使用氯甲酸乙酯(91.8mg，81.2μL，0.00085mol)作為氯羰基試劑處理實(shí)施例157的標(biāo)題化合物(300mg，0.00071mol)。純化粗產(chǎn)物得64mg(18％)亮棕色固體標(biāo)題化合物(mp91-109℃)，LC MS(m/e)＝4.98(MH+)，Rt＝2.09min.
實(shí)施例165 8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-[N-(2-氨基乙基)-丙酰氨基)]8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以實(shí)施例163所述的相同方式使用丙酸酐(110mg，110μL，0.00085mol)作為?；瘎┨幚韺?shí)施例157的標(biāo)題化合物(300mg，0.00071mol)。純化粗產(chǎn)物得180mg(53％)灰白色固體標(biāo)題化合物(mp214-16℃)，LC MS(m/e)＝482(MH+)，Rt＝1.95min.
實(shí)施例166
8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-[N-(2-氨基乙基)-2，2-二甲基丙酰氨基)]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以實(shí)施例163所述的相同方式使用2，2-二甲基丙酰氯(102mg，104μL，0.00085mol)作為?；瘎┨幚韺?shí)施例157的標(biāo)題化合物(300mg，0.00071mol)。純化粗產(chǎn)物得149mg(41％)灰白色固體標(biāo)題化合物(mp111-133℃)，LC MS(m/e)＝510(MH+)，Rt＝2.14min.
實(shí)施例167 8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-[N-(2-氨基乙基)-氨基甲酸叔丁基酯)]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮以實(shí)施例163所述的相同方式使用二碳酸二叔丁酯(185mg，0.00085mol)作為氨基甲酸酯形成試劑處理實(shí)施例157的標(biāo)題化合物(300mg，0.00071mol)；該反應(yīng)省略三乙胺。純化粗產(chǎn)物得210mg(56％)灰白色固體標(biāo)題化合物(mp106-119℃)，LC MS(m/e)＝526(MH+)，Rt＝2.30min.
實(shí)施例168
8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(N-氨基尿嘧啶-5-基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例48的標(biāo)題化合物[8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮](100mg，0.000225mol)和5-氨基尿嘧啶(70mg，0.00055mol)溶于無(wú)水DMSO(1.5mL)，在攪拌下于氬氣氛圍中溫?zé)岬?5℃保持6.5h。冷卻反應(yīng)物到23℃，然后用EtOAc稀釋?zhuān)蝗芤河盟礈?；水相以EtOAc萃??；干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層，然后蒸發(fā)得到一琥珀色玻璃體。將這一玻璃體用少量MeOH結(jié)晶，干燥所產(chǎn)生的結(jié)晶，得到15mg(14％)亮黃色結(jié)晶固體標(biāo)題化合物.(m.p.＞300℃)，LC MS(m/e)＝493(MH+)，Rt＝1.82min.
實(shí)施例169 8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-N-(2-氨基乙基)-N’-(叔丁氧羰基甘氨?；?-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例157的標(biāo)題化合物(168mg，0.0004mol)在含有叔丁氧羰基甘氨酸(70mg，0.0004mol)的無(wú)水THF(2mL)中用二環(huán)己基碳二亞胺(82.4mg，0.0004mol)/無(wú)水THF(2mL)處理。于23℃攪拌所得溶液16小時(shí)；過(guò)濾，蒸發(fā)至干。將殘留物溶于二氯甲烷(5mL)，施加到ChromatotronTMRotor Plate(厚1000μ)上；以二氯甲烷-甲醇梯度液(0％-3％MeOH)洗脫。從而得到122mg(52％)亮紅色固體標(biāo)題化合物。LC MS(m/e)＝583(MH+)，Rt＝2.12min.
實(shí)施例170 8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-[N-(2-氨基乙基)-N’-甘氨?；鵠-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例169的標(biāo)題化合物(80mg，0.000137mol)溶于二氯甲烷(2mL)；加入TFA(2mL)，所得溶液于23℃攪拌0.5h，形成琥珀色溶液。蒸發(fā)得到一琥珀色殘留物，以乙醚研制得到一固體物。收集固體物，真空干燥得標(biāo)題化合物的雙三氟乙酸鹽，灰白色固體，60mg(62％).LC MS(m/e)＝483(MH+)，Rt＝1.55min.
實(shí)施例171 8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-[N-([2，2-二甲基-2-羥基]乙基氨基)]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例48的標(biāo)題化合物(150mg，0.000337mol)在無(wú)水THF(5mL)中用2，2-二甲基乙醇胺(50mg，50μL，0.00067mol)處理[后一化合物按照BijayaL.Rai等在J.Med.Chem.1998，41，3347中描述的方法制備]，于23℃攪拌；反應(yīng)進(jìn)程用LC MS監(jiān)測(cè)。蒸發(fā)反應(yīng)物至干；將殘留物溶于二氯甲烷(5mL)，施加到ChromatotronTMRotor Plate(厚度2000μ)上；板用二氯甲烷-甲醇梯度液(0％-1.5％MeOH)洗脫。從而得到116mg(69％)純品標(biāo)題化合物，為灰白色固體。LC MS(m/e)＝455(MH+)，Rt＝1.99min.
實(shí)施例172 S-(+)-8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-[N-(1-氨基-2-丙醇)]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例48的標(biāo)題化合物(150mg，0.000337mol)在無(wú)水THF(5mL)中用S-(+)-1-氨基-2-丙醇(76mg，79μL，0.00098mol)處理，于23℃進(jìn)行攪拌；反應(yīng)進(jìn)程根據(jù)LC MS監(jiān)測(cè)。蒸發(fā)反應(yīng)物至干；將殘留物溶于二氯甲烷(5mL)，施加到ChromatotronTMRotor Plate(厚度2000μ)上；板用二氯甲烷-甲醇梯度液(0％-1.5％MeOH)洗脫。從而得到76mg(51％)純品標(biāo)題化合物，為灰白色固體。LC MS(m/e)＝441(MH+)，Rt＝1.94min.
實(shí)施例173 R-(-)-8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-[N-(1-氨基-2-丙醇)]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例48的標(biāo)題化合物(150mg，0.000337mol)在無(wú)水THF(5mL)中用R-(-)-1-氨基-2-丙醇(50.5mg，54μL，0.00067mol)處理，于23℃進(jìn)行攪拌；反應(yīng)進(jìn)程根據(jù)LC MS監(jiān)測(cè)。蒸發(fā)反應(yīng)物至干；將殘留物溶于二氯甲烷(5mL)，施加到ChromatotronTMRotor Plate(厚度2000μ)上；板用二氯甲烷-甲醇梯度液(0％-1.5％MeOH)洗脫。從而得到89mg(60％)純品標(biāo)題化合物，為灰白色固體。LC MS(m/e)＝441(MH+)，Rt＝1.94min.
實(shí)施例174 (R)-8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-[N-(1-氨基-2-羥基-2-苯基乙基)]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例48的標(biāo)題化合物(150mg，0.000337mol)在無(wú)水THF(5mL)中用R-2-氨基-1-苯基乙醇(93mg，0.00067mol)處理，于23℃進(jìn)行攪拌；反應(yīng)進(jìn)程根據(jù)LC MS監(jiān)測(cè)。蒸發(fā)反應(yīng)物至干；將殘留物溶于二氯甲烷(5mL)，施加到ChromatotronTMRotor Plate(厚度2000μ)上；板用二氯甲烷-甲醇梯度液(0％-1.5％MeOH)洗脫。從而得到108mg(64％)純品標(biāo)題化合物，為亮橙色樹(shù)膠物。LC MS(m/e)＝503(MH+)，Rt＝2.20min.
實(shí)施例175 8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-[N-三羥基甲基氨基甲基]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例48的標(biāo)題化合物(150mg，0.000337mol)和TRIS(三羥甲基氨基甲烷)(121mg，0.0001mol)在N-甲基吡咯烷酮(1.5mL)中用MARS5TMMicrowave(CEM公司)以300瓦于180℃微波處理2分鐘(需3分鐘直線(xiàn)上升期)。LC MS監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)無(wú)起始物質(zhì)存在。在泵真空下除去溶劑，將殘留物溶于二氯甲烷(5mL)，施加到ChromatotronTMRotor Plate(厚度2000μ)上；板用二氯甲烷-甲醇梯度液(0％-1.5％MeOH)洗脫。從而得到42mg(26％)純品標(biāo)題化合物，為淺棕色固體。LC MS(m/e)＝487(MH+)，Rt＝1.55min.
實(shí)施例176 8-(2-氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-[N-([2，2-二甲基-2-羥基]乙基氨基)]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例59的標(biāo)題化合物(144mg，0.000337mol)在無(wú)水THF(5mL)中用2，2-二甲基乙醇胺(50mg，50μL，0.00067mol)處理[后者用Bijaya L.Rai等人的方法制備J.Med.Chem.1998，41，3347]，于23℃進(jìn)行攪拌；反應(yīng)進(jìn)程用LC MS監(jiān)測(cè)。蒸發(fā)反應(yīng)物至干；將殘留物溶于二氯甲烷(5mL)，施加到ChromatotronTMRotor Plate(厚度2000μ)上；板用二氯甲烷-甲醇梯度液(0％-1.5％MeOH)洗脫。從而得到106mg(72％)純品標(biāo)題化合物，為灰白色固體。LC MS(m/e)＝437(MH+)，Rt＝1.92min.
實(shí)施例177
(S)-(+)-8-(2-氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-[N-([2-甲基-2-羥基]乙基氨基)]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例59的標(biāo)題化合物(144mg，0.000337mol)在無(wú)水THF(5mL)中用S-(+)-1-氨基-2-丙醇(76mg，79μL，0.00098mol)處理，于23℃進(jìn)行攪拌；反應(yīng)進(jìn)程用LC MS監(jiān)測(cè)。蒸發(fā)反應(yīng)物至干；將殘留物溶于二氯甲烷(5mL)，施加到ChromatotronTMRotor Plate(厚度2000μ)上；板用二氯甲烷-甲醇梯度液(0％-1.5％MeOH)洗脫。從而得到132mg(93％)純品標(biāo)題化合物，為淺黃色固體。LC MS(m/e)＝423(MH+)，Rt＝1.82min.
實(shí)施例178 (R)-(-)-8-(2-氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-[N-([2-甲基-2-羥基]乙基氨基)]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例59的標(biāo)題化合物(150mg，0.000337mol)在無(wú)水THF(5mL)中用R-(-)-1-氨基-2-丙醇(50.5mg，54μL，0.00067mol)處理，于23℃進(jìn)行攪拌；反應(yīng)進(jìn)程用LC MS監(jiān)測(cè)。蒸發(fā)反應(yīng)物至干；將殘留物溶于二氯甲烷(5mL)，施加到ChromatotronTMRotor Plate(厚度2000μ)上；板用二氯甲烷-甲醇梯度液(0％-1.5％MeOH)洗脫。從而得到151mg(定量)純品標(biāo)題化合物，為淺黃色樹(shù)膠物。LC MS(m/e)＝423(MH+)，Rt＝1.84min.
實(shí)施例179 4-氯-2-甲硫基-6-環(huán)己基氨基嘧啶-5-甲醛快速攪拌下，1分鐘內(nèi)用環(huán)己胺(3.76g，4.3mL，0.038mol)處理在乙腈(65mL)中的4，6-二氯-2-甲硫基嘧啶-5-甲醛(4.0g，0.018mol)。攪拌反應(yīng)16小時(shí)，然后用3體積的水稀釋。收集析出的固體物，水洗，真空干燥，得到5.1g(99％)標(biāo)題化合物，為白色固體。LC MS(m/e)＝286(MH+)，Rt＝2.85min.
實(shí)施例180 2-甲硫基-4-(2-甲基-4-氟苯基)-6-環(huán)己基氨基嘧啶-5-甲醛攪拌下，在氬氣氛圍中溫?zé)嵊蓪?shí)施例180的標(biāo)題化合物(5.1g，0.018mol)、2-甲基-4-氟硼酸(5.54g，0.036mol)、Na2CO3(3.82g，0.036 mol)、四(三苯膦)鈀(0)、二烷(100mL)和水(50mL)組成的混合物至65℃，攪拌16h。冷卻反應(yīng)物到23℃，用EtOAc稀釋?zhuān)旌衔锵嗬^用水、碳酸氫鈉水溶液、和飽和NaCl水溶液洗滌。干燥(Na2SO4)有機(jī)層，然后蒸發(fā)得到粘性糖漿物。在溫和攪拌和超聲波處理下，將此糖漿物用少量MeOH結(jié)晶。從而得到5.5g(86％)白色固體標(biāo)題化合物。LC MS(m/e)＝360(MH+)，Rt＝3.00min.
實(shí)施例181
8-環(huán)己基-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將膦酸乙酸三乙酯(3.87mL，0.01953mol)在無(wú)水THF(56mL)中用NaH(60％，礦物油)(967.5mg，0.0243mol)處理。攪拌混合物30分鐘形成透明溶液。一次性加入在無(wú)水THF(75mL)中的實(shí)施例180的標(biāo)題化合物(4.5g，0.0125mol)，微微回流溶液72小時(shí)。冷卻到23℃后，反應(yīng)混合物用乙醚稀釋?zhuān)缓箜樞蛴蔑柡蚇H4Cl水溶液和水洗滌。干燥(Na2SO4)有機(jī)層，然后蒸發(fā)得到一粘性糖漿物，進(jìn)而快速層析，以二氯甲烷-己烷梯度液(20％-0％己烷)洗脫，首先獲得920mg(19％)白色固體標(biāo)題化合物.LC MS(m/e)＝384(MH+)，Rt＝2.79min.
實(shí)施例182 8-環(huán)己基-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-乙氧基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮再用二氯甲烷/己烷洗脫實(shí)施例181的柱，獲得580mg(12.2％)本實(shí)施例標(biāo)題化合物，為白色固體.LC MS(m/e)＝382(MH+)，Rt＝2.67min.
實(shí)施例183
8-環(huán)己基-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮在二氯甲烷(100mL)中攪拌實(shí)施例181的標(biāo)題化合物(850mg，0.0022mol)，用間氯過(guò)苯甲酸(77％)(992mg，0.0044mol)處理。溶液于23℃攪拌過(guò)夜。LC MS顯示大約90％轉(zhuǎn)化為標(biāo)題化合物，因此再向反應(yīng)物中加入120mg間氯過(guò)苯甲酸。1小時(shí)后，反應(yīng)物依次用5％Na2CO3、飽和NaCl水溶液洗滌，干燥(Na2SO4)。加入二甲硫醚(0.5mL)分解過(guò)量的過(guò)氧化物。蒸發(fā)溶液，得到0.96g(定量)白色固體標(biāo)題化合物.LC MS(m/e)＝416(MH+)，Rt＝2.24min.
實(shí)施例184 8-環(huán)己基-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-[N-2，2-二甲基乙醇氨基]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例183的標(biāo)題化合物(150mg，0.00036mol)在無(wú)水THF(2.5mL)中用2，2-二甲基乙醇胺(64mg，64μL，0.00072mol)處理[后者用Bijaya L.Rai等人的方法制備J.Med.Chem.1998，41，3347]，于23℃進(jìn)行攪拌16h；反應(yīng)進(jìn)程用LC MS監(jiān)測(cè)。蒸發(fā)反應(yīng)物至干；將殘留物溶于二氯甲烷(5mL)，施加到ChromatotronTMRotor Plate(厚度2000μ)上；板用二氯甲烷-甲醇梯度液(0％-2％MeOH)洗脫。從而得到107mg(70％)純品標(biāo)題化合物，為無(wú)色玻璃體.LC MS(m/e)＝425(MH+)，Rt＝2.22min.
實(shí)施例185 (S)-(+)-8-環(huán)己基-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-[N-1-氨基-2-羥基丙基]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例183的標(biāo)題化合物(150mg，0.00036mol)在無(wú)水THF(2.5mL)中用S-(+)-1-氨基-2-丙醇(76mg，79μL，0.00098mol)處理，于室溫下攪拌；反應(yīng)進(jìn)程用LC MS監(jiān)測(cè)。90℃溫?zé)岱磻?yīng)物15h。蒸發(fā)反應(yīng)物至干；將殘留物溶于二氯甲烷(5mL)，施加到ChromatotronTMRotor Plate(厚度2000μ)上；板用二氯甲烷-甲醇梯度液(0％-2％MeOH)洗脫。從而得到118mg(80％)純品標(biāo)題化合物，為無(wú)色樹(shù)膠物。LC MS(m/e)＝411(MH+)，Rt＝2.10min.
實(shí)施例186 (R)-(-)-8-環(huán)己基-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-[N-1-氨基-2-羥基丙基]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例183的標(biāo)題化合物(150mg，0.00036mol)在無(wú)水THF(2.5mL)中用R-(-)-1-氨基-2-丙醇(54mg，58μL，0.00072mol)處理，于23℃攪拌16h；反應(yīng)進(jìn)程用LC MS監(jiān)測(cè)。蒸發(fā)反應(yīng)物至干；將殘留物溶于二氯甲烷(5mL)，施加到ChromatotronTMRotor Plate(厚度2000μ)上；板用二氯甲烷-甲醇梯度液(0％-2％MeOH)洗脫。從而得到158mg(定量)純品標(biāo)題化合物，為淺黃色樹(shù)膠物。LC MS(m/e)＝411(MH+)，Rt＝2.12min.
實(shí)施例187 8-環(huán)己基-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-[N-二羥甲基甲基氨基]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例183的標(biāo)題化合物(150mg，0.00036mol)在無(wú)水THF(2.5mL)中用絲氨醇(62mg，0.000674mol)處理，于90℃溫?zé)?6h；反應(yīng)進(jìn)程用LC MS監(jiān)測(cè)。蒸發(fā)反應(yīng)物至干；將殘留物溶于二氯甲烷(5mL)，施加到ChromatotronTMRotor Plate(厚度2000μ)上；板用二氯甲烷-甲醇梯度液(0％-2％MeOH)洗脫。從而得到163mg(定量)純品標(biāo)題化合物，為無(wú)色樹(shù)膠物。LC MS(m/e)＝427(MH+)，Rt＝1.75min.
實(shí)施例188 8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-[N-(2-氯乙基氨基)]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮攪拌下，將實(shí)施例48的標(biāo)題化合物(890mg，0.002mol)在無(wú)水DMF(18mL)中用2-氯乙胺(345mg，0.003mol)和K2CO3(207mg，0.0015mol)處理?；旌衔镉?3℃攪拌16h。汽提反應(yīng)物得一殘留物；溶于EtOAc；用水(2X)洗滌；干燥(Na2SO4)有機(jī)萃取物，然后蒸發(fā)得到棕色樹(shù)膠物。將這一殘留物溶于二氯甲烷(5mL)，施加到ChromatotronTMRotor Plate(厚度2000μ)上；板用二氯甲烷洗脫。從而得到510mg具有良好純度的標(biāo)題化合物。然后將這一化合物再溶于乙腈(2mL)，超聲波處理得到白色結(jié)晶固體。收集固體，干燥后得到280mg(31.5％)標(biāo)題化合物純品.LC MS(m/e)＝445(MH+)，Rt＝2.44min.
實(shí)施例189 N-[2-[[8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-7，8-二氫-7-氧代吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基]氨基]乙基]甲磺酰胺冷卻由實(shí)施例157的產(chǎn)物(250mg，0.58mmol)、二異丙基乙胺(111μL，0.64mmol)和CH2Cl2(10mL)形成的溶液至-5℃，加入甲磺酰氯(50μL，0.64mmol)，溫?zé)崴萌芤褐?3℃，攪拌15分鐘，用CH2Cl2(75mL)稀釋?zhuān)⒂?0％NaOH水溶液(2×20mL)洗滌和飽和NaCl水溶液洗滌，干燥(Na2SO4)，濃縮，得到棕色固體。mp＝105-115℃(分解)；LC MS(m/e)＝504.2(MH+)，Rt＝1.94min.
實(shí)施例190 N-[8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-7，8-二氫-7-氧代吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基]甘氨酸甲酯將實(shí)施例48的產(chǎn)物(2.25gmg，5.0mmol)、甘氨酸甲酯鹽酸鹽(3.13g，25.0mmol)、無(wú)水K2CO3(3.45g，25.0mmol)和NMP(25mL)一起于60℃攪拌1h。反應(yīng)物用EtOAc(200mL)稀釋?zhuān)?0％檸檬酸水溶液(2×25mL)、H2O(25mL)和飽和NaCl水溶液(40mL)洗滌，干燥(Na2SO4)，濃縮。所得棕色殘留物通過(guò)二氧化硅塞(350mL)過(guò)濾(二氯甲烷/甲醇)，得到棕色泡沫物。用Et2O研制，得標(biāo)題化合物N-[8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-7，8-二氫-7-氧代吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基]甘氨酸甲酯，為白色固體.mp＝212-213℃.
實(shí)施例191 N-[8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-7，8-二氫-7-氧代吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基]甘氨酸按照實(shí)施例84的方法使實(shí)施例190的產(chǎn)物進(jìn)行反應(yīng)，制得標(biāo)題化合物N-[8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-7，8-二氫-7-氧代吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基]甘氨酸，為白色固體.mp＝260-261.
實(shí)施例192 2-[[8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-7，8-二氫-7-氧代吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基]氨基]-N-乙基乙酰胺一同溶解實(shí)施例191的產(chǎn)物(50mg，0.11mmol)、N-羥基苯并三唑(21mg，0.34mmol)、1-甲基嗎啉(19μL，0.172mmol)以及N-甲基吡咯烷酮(2.5mmol)，然后加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(66mg，0.34mmol)，攪拌1h，然后再加入乙胺(2M THF溶液)(1.0mL，2.0mmol)，反應(yīng)物于23℃攪拌16h，加EtOAc(50mL)稀釋?zhuān)⒂?0％檸檬酸水溶液(2×20mL)、H2O(20mL)、和飽和NaCl水溶液(20mL)洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮，通過(guò)比色(chromatotron)色譜純化(CH2Cl2/CH3OH)，得到35mg標(biāo)題化合物2-[[8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-7，8-二氫-7-氧代吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基]氨基]-N-乙基乙酰胺，為白色粉末.mp＝250-253(分解).LC MS(m/e)＝468.2(MH+).Rt＝1.87min.
實(shí)施例193 8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(2-嗎啉-4-基-2-氧代-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮?dú)鍤夥障拢瑪嚢鑶徇?58mg，0.66mmol)和三乙基鋁(2M甲苯溶液)(0.33mL，0.66mmol)在二氯甲烷中的溶液10分鐘。加入實(shí)施例190的產(chǎn)物(100mg，0.22mmol)于二氯甲烷(2mL)中的溶液。攪拌所得混合物16h，加EtOAc稀釋?zhuān)吹玫酱之a(chǎn)物。經(jīng)硅膠快速色譜純化，以EtOAc/己烷/三乙胺(70/30/2，v/v/v)洗脫，接著再用二氯甲烷和己烷重結(jié)晶，得到所需產(chǎn)物(35mg，31％).LC-MS510.10(MH+，m/z)，1.96(Rt，min).
實(shí)施例194
4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-((R)-2-羥基-1-甲基-乙基氨基)-鄰甲苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例126所述的一般方法，由實(shí)施例121的產(chǎn)物(200mg，0.47mmol)和(R)-(-)-2-氨基-1-丙醇(0.18mL，2.36mmol)制得白色固體標(biāo)題化合物.170mg(86％).LC-MS419.2(MH+，m/z)，2.00(Rt，min).
實(shí)施例195 4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(4-羥基-環(huán)己基氨基)-8-鄰甲苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮于23℃攪拌反式-4-氨基環(huán)己醇鹽酸鹽(270mg，2.35mmol)、NMP(1mL)與三乙胺(0.33mL，2.35mmol)共計(jì)10分鐘。加入實(shí)施例121的產(chǎn)物(200mg，0.47mmol)，攪拌混合物2h，加EtOAc稀釋?zhuān)?。分離有機(jī)相，蒸發(fā)溶劑得到粗產(chǎn)物，進(jìn)而如實(shí)施例126所述進(jìn)行純化，得到所需產(chǎn)物98mg(46％).LC-MS459.4(MH+，m/z)，2.12(Rt，min).
實(shí)施例196 4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-((S)-2-羥基-1-甲基-乙基氨基)-8-鄰甲苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例126所述的一般方法，由實(shí)施例121的產(chǎn)物(200mg，0.47mmol)和(S)-(+)-2-氨基-1-丙醇(0.18mL，2.36mmol)制得185mg(94％)所需產(chǎn)物.LC-MS419.2(MH+，m/z)，1.96(Rt，min).
實(shí)施例197
4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(2-羥基-1，1-二甲基-乙基氨基)-8-鄰甲苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例126所述的一般方法，使實(shí)施例121的產(chǎn)物(222mg，0.52mmol)與2-氨基-2-甲基-1-丙醇(0.25mL，2.62mmol)反應(yīng)，制得粗產(chǎn)物。以/二氯甲烷/乙醇/三乙胺(100/1/2，v/v/v)為洗脫劑進(jìn)行快速層析純化，接著以乙腈/H2O(10/90，v/v-90/10，v/v，歷時(shí)10min)通過(guò)制備HPLC純化，獲得所需產(chǎn)物25mg(11％).LC-MS433.4(MH+，m/z)，2.10(Rt，min).
實(shí)施例198 2-乙基氨基-4-(4-氟-2-甲基苯基)-8-鄰甲苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例126所述的一般方法，由實(shí)施例121的產(chǎn)物(200mg，0.47mmol)與乙胺(1.18mL，2.36mmol)反應(yīng)制得粗產(chǎn)物。以EtOAc/己烷/三乙胺(30/70/2，v/v/v)為洗脫劑進(jìn)行快速層析純化，進(jìn)而用二氯甲烷和己烷重結(jié)晶，得到所需產(chǎn)物150mg(82％).LC-MS389.2(MH+，m/z)，2.39(Rt，min).
實(shí)施例199
2-環(huán)己基氨基-4-(4-氟-2-甲基苯基)-8-鄰甲苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例126所述的一般方法，由實(shí)施例121的產(chǎn)物(200mg，0.47mmol)和環(huán)己胺(0.27mL，2.36mmol)反應(yīng)制得粗產(chǎn)物，進(jìn)而如實(shí)施例198所述加以純化，得100mg(48％)所需產(chǎn)物.LC-MS443.4(MH+，m/z)，2.79(Rt，min)。
實(shí)施例200 4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(四氫-吡喃-4-基氨基)-8-鄰甲苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例126所述的一般方法，由實(shí)施例121的產(chǎn)物(150mg，0.35mmol)和4-氨基四氫吡喃(179mg，1.77mmol)反應(yīng)制得粗產(chǎn)物，進(jìn)而如實(shí)施例198所述加以純化，得140mg(90％)所需產(chǎn)物.LC-MS445.4(MH+，m/z)，2.27(Rt，min).
實(shí)施例201 4-(4-氟-2-甲基-苯基)-8-鄰甲苯基-2-(2，2，2-三氟-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例126所述的一般方法，由實(shí)施例121的產(chǎn)物(150mg，0.35mmol)和2，2，2-三氟-乙胺(176mg，1.77mmol)反應(yīng)制得粗產(chǎn)物，進(jìn)而如實(shí)施例198所述加以純化，得130mg(84％)所需產(chǎn)物.LC-MS443.0(MH+，m/z)，2.27(Rt，min).
實(shí)施例202 4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(2-羥基-1-羥基甲基-1-甲基乙基氨基)-8-鄰甲苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例60所述的一般方法，由實(shí)施例121的產(chǎn)物(200mg，0.47mmol)和2-氨基-2-甲基-1，3-丙二醇(494mg，4.7mmol)反應(yīng)制得粗產(chǎn)物，進(jìn)而如實(shí)施例126所述加以純化，得130mg(62％)所需產(chǎn)物.LC-MS449.0(MH+，m/z)，1.67(Rt，min).
實(shí)施例203 2-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基]-N，N-二甲基-乙酰胺按照實(shí)施例193所述的一般方法，由二甲胺(1.1mL，2.2mmol)、三甲基鋁(1.1mL，2.2mmol)與實(shí)施例190的產(chǎn)物(100mg，0.22mmol)反應(yīng)制得56mg(54％)所需產(chǎn)物.LC-MS468.2(MH+，m/z)，2.00(Rt，min).
實(shí)施例204
2-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(2-氧代-2-吡咯烷-1-基乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例193所述的一般方法，由吡咯烷(0.18mL，2.2mmol)、三甲基鋁(1.1mL，2.2mmol)和實(shí)施例190的產(chǎn)物(100mg，0.22mmol)反應(yīng)制得52mg(48％)所需產(chǎn)物.LC-MS494.4(MH+，m/z)，2.10(Rt，min).
實(shí)施例205 2-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基]-N-(2-甲氧基-乙基)-乙酰胺按照實(shí)施例193所述的一般方法，由2-甲氧基-乙胺(0.17mL，2.2mmol)、三甲基鋁(1.1mL，2.2mmol)和實(shí)施例190的產(chǎn)物(200mg，0.44mmol)反應(yīng)制得145mg(66％)所需產(chǎn)物.LC-MS498.2(MH+，m/z)，1.90(Rt，min).
實(shí)施例206 2-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基]-丙腈按照實(shí)施例126所述的一般方法，由實(shí)施例48的產(chǎn)物(500mg，1.12mmol)和3-氨基丙腈(0.41mL，5.6mmol)反應(yīng)制得270mg(55％)所需產(chǎn)物.LC-MS436.0(MH+，m/z)，2.17(Rt，min).
實(shí)施例207
4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-嗎啉-4-基-8-鄰甲苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例193所述的一般方法，由實(shí)施例121的產(chǎn)物(100mg，0.22mmol)、嗎啉(58mg，0.66mmol)和三甲基鋁(0.33mL，0.66mmol)反應(yīng)制得61mg(64％)所需產(chǎn)物.LC-MS431.2(MH+，m/z)，2.46(Rt，min).
實(shí)施例208 8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(1SR，2SR)-2-羥基環(huán)己基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例195所述的一般方法，由實(shí)施例48的產(chǎn)物(200mg，0.45mmol)、反式-2-羥基-1-環(huán)己胺鹽酸鹽(341mg，2.25mmol)和三乙胺(0.31mL，2.25mmol)反應(yīng)制得粗產(chǎn)物，進(jìn)而如實(shí)施例193所述進(jìn)行純化，得100mg(46％)所需產(chǎn)物.LC-MS481.2(MH+，m/z)，2.25(Rt，min).
實(shí)施例209
2-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基]-N-(2-羥基-乙基)-乙酰胺向?qū)嵤├?05的產(chǎn)物(50mg，0.1mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入1M三溴化硼的二氯甲烷溶液(0.5mL，0.5mmol)。混合物于23℃攪拌2h，加入水，用EtOAc萃取。干燥(Na2SO4)，濃縮，得到粗產(chǎn)物。以二氯甲烷和己烷重結(jié)晶，得到標(biāo)題產(chǎn)物(30mg，62％).LC-MS484.2(MH+，m/z)，1.59(Rt，min).
實(shí)施例210 8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-[2-(1H-四唑-5-基)乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮加熱包含實(shí)施例206的產(chǎn)物(200mg，0.46mmol)、三乙胺鹽酸鹽(630mg，4.6mmol)和NaN3(299mg，4.6mmol)在甲苯(20mL)中的懸浮液至甲苯回流溫度持續(xù)60h。制備HPLC得到標(biāo)題化合物100mg(45％).LC-MS479.0(MH+，m/z)，1.82(Rt，min).
實(shí)施例211 N-環(huán)丙基-2-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基]-乙酰胺按照實(shí)施例193所述的一般方法，由環(huán)丙胺(0.23mL，3.3mmol)、三甲基鋁(1.7mL，3.3mmol)和實(shí)施例190的產(chǎn)物(150mg，0.33mmol)反應(yīng)制得20mg(13％)所需產(chǎn)物.LC-MS480.0(MH+，m/z)，1.89(Rt，min).
實(shí)施例212 2-[8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-((1H-四唑-5-基甲基)氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮a)[[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基]-乙腈按照實(shí)施例195所述的一般方法，使實(shí)施例48的產(chǎn)物(500mg，1.12mmol)、氨基乙腈硫酸氫鹽(1.16g，5.6mmol)和三乙胺(0.78mL，5.6mmol)在65℃反應(yīng)2小時(shí)生成460mg粗產(chǎn)物。LC-MS421.8(MH+，m/z)，2.08(Rt，min).
b)2-[8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-((1H-四唑-5-基甲基)氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例210所述的方法，使實(shí)施例212(a)的粗產(chǎn)物，[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基]-乙腈(460mg)，三乙胺鹽酸鹽(1.54g，11.2mmol)和NaN3(728mg，11.2mmol)反應(yīng)生成50mg(9.6％)所需產(chǎn)物。LC-MS465.2(MH+，m/z)，1.79(Rt，min).
實(shí)施例213
2-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(1SR，2SR)-2-羥基-環(huán)戊基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮a)反式-2-疊氮基-環(huán)戊醇向氧化環(huán)戊烯(2.0g，23.8mmol)于CH3OH和水(40mL)(4/1，v/v)中的溶液內(nèi)加入NaN3(7.73g，119mmol)和NH4Cl(3.17g，59.2mmol)。加熱所得混合物至溶劑沸騰持續(xù)18h，然后冷卻到23℃。濃縮混合物，殘留物用EtOAc稀釋?zhuān)矗袡C(jī)層用Na2SO4干燥，濃縮得到所需產(chǎn)物(2.8g，93％).1H NMR(CDCl3)δ4.10(m，1H)，3.72(m，1H)，2.10(m，2H)，1.72-1.60(m，4H).
b)反式-2-氨基-環(huán)戊醇鹽酸鹽向反式-2-疊氮基-環(huán)戊醇(1.0g，7.87mmol)的EtOAc溶液內(nèi)加入10％Pd/C(0.5g)。混合物用Ar沖洗，然后在Parr裝置中于23℃以40psi攪拌2h?；旌衔锿ㄟ^(guò)硅藻土過(guò)濾，并將硅藻土用EtOAc洗滌。濾液用3mL 4N HCl/1，4-二烷酸化，析出白色固體。過(guò)濾混合物，收集固體得到所需產(chǎn)物(0.76g，99％).1H NMR(MeOD-d4)δ4.09-4.04(m，1H)，3.29-3.25(m，1H)，2.18(m，1H)，2.03(m，1H)，1.83-1.80(m，2H)，1.65-1.58(m，2H).
c)2-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(1SR，2SR)-2-羥基-環(huán)戊基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例195所述的一般方法，使實(shí)施例48的產(chǎn)物(200mg，0.45mmol)、反式-2-氨基-環(huán)戊醇鹽酸鹽(227mg，2.25mmol)和三乙胺(0.31mL，2.25mmol)反應(yīng)2h，生成63mg(30％)所需產(chǎn)物.LC-MS467.0(MH+，m/z)，2.09(Rt，min).
實(shí)施例214
2-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(3-甲硫基-丙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例126所述的一般方法，由實(shí)施例48的產(chǎn)物(200mg，0.45mmol)和3-(甲硫基)丙胺(231mg，2.2mmol)反應(yīng)制得標(biāo)題化合物108mg(52％).LC-MS471.2(MH+，m/z)，2.37(Rt，min).
實(shí)施例215 2-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(3-甲磺?；?丙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮向?qū)嵤├?14產(chǎn)物(120mg，0.26mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入間氯過(guò)苯甲酸(130mg，0.52mmol)?；旌衔镉?3℃攪拌1.5h。加EtOAc稀釋混合物，水洗得到粗產(chǎn)物。以EtOAc/三乙胺(100/2，v/v)為洗脫劑進(jìn)行柱層析純化，接著用二氯甲烷和己烷重結(jié)晶，得到所需產(chǎn)物(80mg，61％).LC-MS503.2(MH+，m/z)，1.94(Rt，min).
實(shí)施例216
2-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-氧代-2-(3-氧代-哌嗪-1-基)-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例193所述的一般方法，由哌嗪-2-酮(165mg，1.65mmol)、三甲基鋁(0.83mL，1.65mmol)和實(shí)施例190的產(chǎn)物(150mg，0.33mmol)反應(yīng)制得粗產(chǎn)物。以乙腈/H2O(10/90，v/v-90/10 v/v，歷時(shí)10min)為洗脫劑通過(guò)制備HPLC，接著用二氯甲烷和己烷重結(jié)晶，得到所需產(chǎn)物50mg(29％).LC-MS523.2(MH+，m/z)，1.68(Rt，min).
實(shí)施例217 2-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-[(5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基甲基)-氨基]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮將實(shí)施例48的產(chǎn)物(150mg，0.34mmol)和(5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基)-甲胺(190mg，1.7mmol)在NMP(2mL)中的溶液于100℃攪拌16h，得到粗產(chǎn)物。以乙腈/H2O(10/90，v/v-90/10v/v，歷時(shí)10min)為洗脫劑通過(guò)制備HPLC，得到所需產(chǎn)物23mg(14％).LC-MS478.2(MH+，m/z)，1.70(Rt，min).
另一方面，所需產(chǎn)物也可以通過(guò)快速色譜純化，以EtOAc/三乙胺(100/2，v/v)洗脫，接著用EtOAc和甲醇結(jié)晶其鹽酸鹽。
實(shí)施例218 2-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-((1，1-二氧代-四氫-1-噻吩-3-基甲基)-氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例217所述的一般方法，由實(shí)施例48的產(chǎn)物(100mg，0.22mmol)與3-氨基甲基環(huán)丁砜(328mg，2.2mmol)反應(yīng)制得粗產(chǎn)物。以EtOAc/己烷/三乙胺(65/35/2，v/v/v)為洗脫劑進(jìn)行快速色譜純化，得到所需產(chǎn)物25mg(22％).LC-MS515.4(MH+，m/z)，1.97(Rt，min).
實(shí)施例219 2-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-((3-甲基-異唑-5-基甲基)氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例217所述的一般方法，由實(shí)施例48的產(chǎn)物(100mg，0.22mmol)與(3-甲基-異唑-5-基)-甲胺(125mg，1.12mmol)反應(yīng)制得所需產(chǎn)物50mg(44％).LC-MS478.2(MH+，m/z)，2.20(Rt，min).
實(shí)施例220 2-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-((3S，4S)-4-羥基-1，1-二氧代-四氫-1-氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例217所述的一般方法，由實(shí)施例48的產(chǎn)物(100mg，0.22mmol)與3(S)-氨基-4(S)-羥基環(huán)丁砜(169mg，1.12mmol)反應(yīng)制得所需產(chǎn)物50mg(44％).LC-MS517.0(MH+，m/z)，1.87(Rt，min).
實(shí)施例221
2-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-氧代-2，3-二氫嘧啶-4-基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例217所述的一般方法，由實(shí)施例48的產(chǎn)物(100mg，0.22mmol)與胞嘧啶(124mg，1.12mmol)反應(yīng)制得粗產(chǎn)物。制備HPLC得到所需產(chǎn)物，27mg(20％).LC-MS477.2(MH+，m/z)，1.77(Rt，min).
實(shí)施例222 2-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-((1H-咪唑-2-基甲基)氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮23℃攪拌(1H-咪唑-2-基)-甲胺二鹽酸鹽(184mg，1.1mmol)、NMP(1mL)與三乙胺(0.31mL，2.2mmol)共計(jì)10min。加入實(shí)施例48的產(chǎn)物(100mg，0.22mmol)，混合物于100℃反應(yīng)16小時(shí)獲得粗產(chǎn)物。經(jīng)制備hplc得到標(biāo)題化合物，36mg(29％).LC-MS463.2(MH+，m/z)，1.42(Rt，min).
實(shí)施例223 2-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(1H-[1，2，4]三唑-3-基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例217所述的一般方法，由實(shí)施例48的產(chǎn)物(150mg，0.33mmol)與3-氨基-1，2，4-三唑(141mg，1.68mmol)反應(yīng)制得粗產(chǎn)物。經(jīng)制備hplc得到標(biāo)題化合物，28mg(15％).LC-MS450.2(MH+，m/z)，1.79(Rt，min).
實(shí)施例224 2-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(1H-四唑-5-基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例217所述的一般方法，由實(shí)施例48的產(chǎn)物(150mg，0.33mmol)與5-氨基-1H-四唑(143mg，1.68mmol)反應(yīng)得到粗產(chǎn)物，進(jìn)而通過(guò)制備hplc純化，得到標(biāo)題化合物，17mg(9％).LC-MS451.0(MH+，m/z)，2.04(Rt，min).
實(shí)施例225 2-[8-(2，6-氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-甲氧基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮23℃實(shí)施例48的產(chǎn)物(150mg，0.34mmol)與2-甲氧基-乙胺(0.09mL，1.01mmol)在DMF(2mL)中的溶液16小時(shí)。所得混合物用EtOAc稀釋?zhuān)吹玫酱之a(chǎn)物，進(jìn)而如實(shí)施例198所述加以純化，得70mg(47％)所需產(chǎn)物.LC-MS441.2(MH+，m/z)，2.10(Rt，min).
實(shí)施例226
8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(四氫-呋喃-3-基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮a)(四氫-呋喃-3-基)-氨基甲酸叔丁酯氬氣氛下，向(+/-)-四氫-3-呋喃甲酸(500mg，4.30mmol)的DMF(2mL)溶液中順序加入三乙胺(0.66mL，4.74mmol)、二苯基磷酰疊氮(1.02mL，4.74mmol)。加熱混合物到80保持3小時(shí)，之后冷卻至23℃，加入叔丁醇(3mL)，并于23℃攪拌所得混合物16小時(shí)?；旌衔锛覧tOAc稀釋?zhuān)⒓右运?。有機(jī)層用硫酸鈉干燥，濃縮得到粗制中間體670mg。
b)四氫-呋喃-3-基胺鹽酸鹽向(四氫-呋喃-3-基)-氨基甲酸叔丁酯粗品(460mg)的EtOAc(10mL)溶液中加入2mL 4N Hcl/1，4-二烷。混合物于23℃攪拌16小時(shí)，然后濃縮，得到粗產(chǎn)物240mg。
c)8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(四氫-呋喃-3-基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例195所述的一般方法，由實(shí)施例48的產(chǎn)物(125mg，0.28mmol)、四氫-呋喃-3-基胺鹽酸鹽粗品(240mg)與三乙胺(0.27mL，1.9mmol)反應(yīng)制得粗產(chǎn)物。以EtOAc/己烷/三乙胺(50/50/2，v/v/v)為洗脫劑進(jìn)行快速層析純化，得到所需產(chǎn)物(38mg，30％).LC-MS453.2(MH+，m/z)，2.20(Rt，min).
實(shí)施例227 8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-[(2-羥基-乙基)-甲基氨基]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例126所述的一般方法，由實(shí)施例48的產(chǎn)物(100mg，0.22mmol)、N-甲基乙醇胺(0.05mL，0.66mmol)反應(yīng)2小時(shí)，制得粗產(chǎn)物，進(jìn)而經(jīng)制備hplc純化，得到標(biāo)題化合物，26mg(27％).LC-MS441.2(MH+，m/z)，2.19(Rt，min).
實(shí)施例228 8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-[2-(1H-咪唑-4-基)-乙基氨基]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例217所述的一般方法，由實(shí)施例48的產(chǎn)物(150mg，0.34mmol)與組胺(187mg，1.68mmol)反應(yīng)制得所需產(chǎn)物50mg(31％).LC-MS477.0(MH+，m/z)，1.59(Rt，min).
實(shí)施例229 [8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基]-乙酰胺向三甲基鋁(3.3mL，6.6mmol)的二氯甲烷溶液中通氨氣30分鐘，然后加入實(shí)施例190的產(chǎn)物(500mg，1.1mmol)。攪拌所得混合物16h。混合物加EtOAc稀釋?zhuān)吹玫酱之a(chǎn)物。以EtOAc/三乙胺(100/2，v/v)為洗脫劑進(jìn)行快速色譜純化，得到所需產(chǎn)物(263mg，54％).LC-MS440.0(MH+，m/z)，1.75(Rt，min).
實(shí)施例230
環(huán)丙烷羧酸[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基]-酰胺a)2-氨基-8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮23℃向?qū)嵤├?8的產(chǎn)物(1.0g，2.2mmol)和三乙胺(1mL)在2mL NMP中的溶液內(nèi)通氨氣30分鐘?；旌衔锛覧tOAc稀釋?zhuān)吹玫酱之a(chǎn)物。以EtOAc/己烷/三乙胺(50/50/2，v/v/v)為洗脫劑進(jìn)行快速色譜純化，進(jìn)而用二氯甲烷/己烷重結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物(360mg，43％).LC-MS383.0(MH+，m/z)，1.95(Rt，min).
b)環(huán)丙烷羧酸[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基]-酰胺向?qū)嵤├?30(a)的產(chǎn)物，2-氨基-8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(100mg，0.26mL)于3mL四氫呋喃中的溶液內(nèi)加入NaH(19mg，0.78mmol)?；旌衔镉?3℃攪拌20分鐘，加入環(huán)丙烷碳酰氯(27mg，0.26mmol)的四氫呋喃(1mL)溶液。加熱所得混合物至溶劑回流持續(xù)16小時(shí)，生成粗產(chǎn)物，進(jìn)而經(jīng)制備hplc純化，得到25mg(21％)。LC-MS451.2(MH+，m/z)，2.14(Rt，min).
實(shí)施例231 環(huán)丙烷羧酸(1-環(huán)丙基-甲?；?-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-7-氧代-7，8-氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基]-酰胺經(jīng)hplc純化后自實(shí)施例230的反應(yīng)物中得到的第二個(gè)化合物就是純標(biāo)題化合物，33mg(24％).LC-MS519.0(MH+，m/z)，2.37(Rt，min)。
實(shí)施例232 8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-氧代-2-硫嗎啉-4-基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例193所述的一般方法，由硫嗎啉(0.2mL，2.2mmol)、三甲基鋁(1.1mL，2.2mmol)和實(shí)施例190的產(chǎn)物(200mg，0.44mmol)反應(yīng)，制得200mg(86％)所需產(chǎn)物.LC-MS526.0(MH+，m/z)，2.07(Rt，min).
實(shí)施例233 8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-[(四氫-呋喃-2-基甲基)-氨基]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例225所述的一般方法，由實(shí)施例48的產(chǎn)物(100mg，0.22mmol)和四氫糠胺(0.07mL，0.66mmol)制得標(biāo)題化合物，50mg(49％).LC-MS467.0(MH+，m/z)，2.22(Rt，min).
實(shí)施例234
8-(2，6-氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-[2-(3-羥基-氮雜環(huán)丁烷-1-基)-2-氧代-乙基氨基]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮a)氮雜環(huán)丁烷-3-醇鹽酸鹽向1-二苯甲基氮雜環(huán)丁烷-3-醇(1.0g，4.16mmol)的甲醇(20mL)溶液中加入10％Pd/C(1.0g)和4N HC1/1，4-二烷(2mL)?；旌衔镉脷鍤鉀_洗，然后在Parr裝置中于40psi H2下60℃攪拌6小時(shí)。冷卻混合物至室溫，通過(guò)硅藻土過(guò)濾。濃縮濾液，用乙醚洗滌所得固體，從而得到0.31g(68％)所需產(chǎn)物.1H NMR(MeOD-d4)δ4.17(m，1H)，4.22(m，2H)，3.91(m，2H).
b)8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-[2-(3-羥基-氮雜環(huán)丁烷-1-基)-2-氧代-乙基氨基]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮23℃攪拌由[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基]-乙酸(100mg，0.23mmol)、氮雜環(huán)丁烷-3-醇鹽酸鹽(37mg，0.34)、O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基脲翁六氟磷酸鹽(129mg，0.34mmol)和N-甲基嗎啉(0.12mL，1.13mmol)在DMF(2mL)中形成的混合物共計(jì)16小時(shí)，生成粗產(chǎn)物，進(jìn)而通過(guò)制備hplc純化，獲得標(biāo)題化合物56mg(49％).LC-MS496.2(MH+，m/z)，1.69(Rt，min).
實(shí)施例235 4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-((R)-2-羥基-丙基氨基)-8-鄰甲苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例225所述的一般方法，由實(shí)施例121的產(chǎn)物(120mg，0.28mmol)和(R)-1-氨基-2-丙醇(0.064mL，0.85mmol)反應(yīng)制得粗產(chǎn)物。以EtOAc/己烷/三乙胺(50/50/2，v/v/v)為洗脫劑進(jìn)行快速色譜純化，進(jìn)而用二氯甲烷和己烷重結(jié)晶，得到所需產(chǎn)物110mg(94％).LC-MS419.0(MH+，m/z)，1.83(Rt，min).
實(shí)施例236 4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-羥基-2-甲基-丙基氨基)-8-鄰甲苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例225所述的一般方法，由實(shí)施例121的產(chǎn)物(120mg，0.28mmol)和1-氨基-2-甲基-2-丙醇(76mg，0.85mmol)反應(yīng)制得粗產(chǎn)物。以EtOAc/己烷/三乙胺(50/50/2，v/v/v)為洗脫劑進(jìn)行快速色譜純化，進(jìn)而用二氯甲烷和己烷重結(jié)晶，得到所需產(chǎn)物96mg(79％).LC-MS433.4(MH+，m/z)，1.87(Rt，min).
實(shí)施例237 (1SR，2RS)-2-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基]-環(huán)戊烷羧酸酰胺按照實(shí)施例225所述的一般方法，由實(shí)施例48的產(chǎn)物(150mg，0.34mmol)和順式-2-氨基-1-環(huán)戊烷甲酰胺(139mg，1.02mmol)反應(yīng)制得粗產(chǎn)物。以EtOAc/己烷/三乙胺(50/50/2，v/v/v)為洗脫劑進(jìn)行快速色譜純化，接著用二氯甲烷和己烷重結(jié)晶，得到所需產(chǎn)物，87mg(52％).LC-MS494.0(MH+，m/z)，2.00(Rt，min).
實(shí)施例238 4-(4-氟-2-甲基-笨基)-2-((S)-2-羥基-丙基氨基)-8-鄰甲苯基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例225所述的一般方法，由實(shí)施例121的產(chǎn)物(220mg，0.52mmol)和(S)-(+)-1-氨基-2-丙醇(0.12mL，1.56mmol)反應(yīng)制得粗產(chǎn)物。以EtOAc/己烷/三乙胺(50/50/2，v/v/v)為洗脫劑進(jìn)行快速色譜純化，進(jìn)而用二氯甲烷和己烷重結(jié)晶，得到所需產(chǎn)物135mg(62％).LC-MS419.2(MH+，m/z)，1.79(Rt，min).
實(shí)施例239 2-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲基氨基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例225所述的一般方法，由實(shí)施例48的產(chǎn)物(1.0g，2.24mmol)和甲胺(5.6mL，11.2mmol)反應(yīng)制得粗產(chǎn)物。以EtOAc/己烷/三乙胺(30/70/2，v/v/v)為洗脫劑進(jìn)行快速色譜純化，進(jìn)而用二氯甲烷和己烷重結(jié)晶，得到所需產(chǎn)物430mg(48％).LC-MS397.2(MH+，m/z)，2.14(Rt，min).
實(shí)施例240
8-(2，6-二氟-苯基)-2-[2-(1，1-二氧代-1l6-硫嗎啉-4-基)-2-氧代-乙基氨基]-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例215所述的一般方法，由實(shí)施例232的產(chǎn)物，8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(2-氧代-2-硫嗎啉-4-基-乙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(164mg，0.31mmol)和間氯過(guò)苯甲酸(156mg，0.62mmol)反應(yīng)制得所需產(chǎn)物165mg(95％).LC-MS558.2(MH+，m/z)，1.77(Rt，min).
實(shí)施例241 2-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-(3-(2-氧代-吡咯烷-1-基)丙基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮按照實(shí)施例225所述的一般方法，由實(shí)施例48的產(chǎn)物(100mg，0.22mmol)和N-(3’-氨基丙基)-2-吡咯烷酮(96mg，0.67mmol)反應(yīng)制得粗產(chǎn)物。以EtOAc/己烷/三乙胺(70/30/2，v/v/v)為洗脫劑進(jìn)行快速色譜純化，進(jìn)而用乙醇和己烷重結(jié)晶，得到所需產(chǎn)物95mg(85％).LC-MS508.2(MH+，m/z)，2.02(Rt，min).
實(shí)施例242 3-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基]-N-羥基-丙脒氬氣氛下，室溫?cái)嚢枇u胺鹽酸鹽(119mg，1.72mmol)和三乙胺(0.26mL，1.89mmol)在5mL DMSO中的溶液5分鐘，加入實(shí)施例206的產(chǎn)物，3-[8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-7-氧代-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基]-丙腈(150mg，0.34mmol)。加熱所得混合物至80℃保持16小時(shí)。經(jīng)制備hplc，接著以乙醇和己烷重結(jié)晶，獲得80mg(45％)所需產(chǎn)物.LC-MS469.2(MH+，m/z)，1.52(Rt，min).
實(shí)施例243 8-(2，6-二氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-[-2-(5-氧代-4，5-二氫-[1，2，4]-二唑-3-基)-乙基氨基]-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮?dú)鍤夥障?，向?qū)嵤├?42的產(chǎn)物，3-[8-(2，6-氟-苯基)-4-(4-氟-2-甲基-苯基)-7-氧代-7，8-二氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基]-N-羥基-丙脒(100mg，0.20mmol)與吡啶(0.048mL，0.6mmol)形成的溶液中加入氯甲酸2-乙基己基酯(0.039mL，0.2mmol)。室溫?cái)嚢杌旌衔?小時(shí)，然后加水稀釋?zhuān)肊tOAc萃取。有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過(guò)濾并濃縮。所得殘留物加二甲苯(10mL)稀釋?zhuān)訜峄亓?8小時(shí)得到粗產(chǎn)物，進(jìn)而經(jīng)制備hplc純化，得到所需產(chǎn)物28mg(28％).LC-MS495.0(MH+，m/z)，1.96(Rt，min).
本說(shuō)明書(shū)中引用作為參考的所有公開(kāi)文獻(xiàn)(包括但不限于專(zhuān)利和專(zhuān)利申請(qǐng)?jiān)趦?nèi))，如同專(zhuān)門(mén)和逐一地將每一篇全部列入?yún)⒖嘉墨I(xiàn)中一樣。
以上描述充分公開(kāi)了包括其優(yōu)選實(shí)施方案在內(nèi)的本發(fā)明。對(duì)本文具體公開(kāi)的實(shí)施方案的修飾和改進(jìn)都落在所附權(quán)利要求范圍內(nèi)。無(wú)需進(jìn)一步闡述就可以認(rèn)為本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)前面的描述能夠最大程度地應(yīng)用本發(fā)明。因此，本文中的實(shí)施例僅是舉例說(shuō)明，而不是以任何方式限制本發(fā)明的范圍。本發(fā)明的具體實(shí)施方案作為要求保護(hù)的一種獨(dú)占權(quán)或特權(quán)在權(quán)利要求書(shū)中作了定義。
權(quán)利要求
1.下式化合物 其中R1為任選取代的芳基或任選取代的雜芳基環(huán)；R3為氫、C1-10烷基、C3-7環(huán)烷基、C3-7環(huán)烷基烷基、芳基、芳基C1-10烷基、雜芳基、雜芳基C1-10烷基、雜環(huán)基，或雜環(huán)基C1-10烷基基團(tuán)，所述這些基團(tuán)除了氫以外，任選被取代；m為0或整數(shù)1或2；和Rg為C1-4烷基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R1為任選取代的雜芳基環(huán)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R1為任選取代的芳環(huán)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中芳基為獨(dú)立地被鹵素、C1-4烷基或鹵代C1-4烷基取代一次或多次的苯基。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的化合物，其中所述苯基在2，4，或6位被單取代，在2，4-位被二取代，或在2，4，6位被三取代。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或3的化合物，其中R1為苯基、2-氟苯基、4-氟苯基、2-甲基苯基、2，4-二氟苯基、4-氟-2-甲基苯基或2-氯苯基。
7.根據(jù)權(quán)利要求5的化合物，其中苯基獨(dú)立地被氟或甲基取代一次或多次。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R1為2，4-二氟苯基、2-氟苯基、4-氟苯基、2-甲基-4-氟苯基或2，4，6-三氟苯基。
9.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R1為2-甲基-4-氟苯基。
10.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R1為芳環(huán)，所述芳環(huán)任選被鹵素、C1-4烷基、鹵代-C1-4烷基、氰基、硝基、(CR10R20)vNR4R14、(CR10R20)vC(Z)NR4R14、(CR10R20)vC(Z)OR8、(CR10R20)vCORa′、(CR10R20)vC(O)H、SR5、S(O)R5、S(O)2R5、(CR10R20)vOR8、ZC(Z)R11、NR10C(Z)R11，或NR10S(O)2R7獨(dú)立地取代一次或多次；并且其中R4和R14各自獨(dú)立地選自氫、任選取代的C1-4烷基、任選取代的C3-7環(huán)烷基、C3-7環(huán)烷基C1-4烷基、任選取代的芳基或任選取代的芳基C1-4烷基，或者R4和R14與它們所連接的氮一起形成任選取代的4-7元雜環(huán)，該環(huán)任選含有選自氧、硫或NR9的其它雜原子；R5為氫、C1-4烷基、C2-4鏈烯基、C2-4炔基或NR4R14，但基團(tuán)SR5為SNR4R14，S(O)2R5為SO2H和S(O)R5為SOH的情形除外；R6為氫、C1-10烷基、C3-7環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基C1-10烷基、芳基、芳基C1-10烷基，雜芳基或雜芳基C1-10烷基，其中這些基團(tuán)各自可任選被取代；R7為C1-6烷基、芳基、芳基C1-6烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基C1-6烷基、雜芳基，或雜芳基C1-6烷基；這些基團(tuán)各自可任選被取代；R8為氫、C1-4烷基、鹵代C1-4烷基、C2-4鏈烯基、C2-4炔基、C3-7環(huán)烷基、C5-7環(huán)烯基、芳基、芳基C1-4烷基、雜芳基、雜芳基C1-4烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基C1-4烷基、(CR10R20)tOR7、(CR10R20)tS(O)mR7、(CR10R20)tNR10S(O)2R7或(CR10R20)tNR4R14；并且其中的環(huán)烷基、環(huán)烯基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基基團(tuán)可任選被取代；R9為氫、C(Z)R6或任選取代的C1-10烷基、任選取代的芳基或任選取代的芳基-C1-4烷基；R10和R20在每種情形下獨(dú)立地選自氫或C1-4烷基；R11為C1-4烷基、鹵代C1-4烷基、C2-4鏈烯基、C2-4炔基、C3-7環(huán)烷基、C5-7環(huán)烯基、芳基、芳基C1-4烷基、雜芳基、雜芳基C1-4烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基C1-4烷基、(CR10R20)tOR7，(CR10R20)tS(O)mR7，(CR10R20)tNR10S(O)2R7或(CR10R20)vNR4R14；并且其中的芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基和雜環(huán)基烷基基團(tuán)可任選被取代；v為0或整數(shù)1或2；t為整數(shù)1-3；其中Ra′為C1-4烷基、鹵代C1-4烷基、C2-4鏈烯基、C2-4炔基、C3-7環(huán)烷基、C5-7環(huán)烯基、芳基、芳基C1-4烷基、雜芳基、雜芳基C1-4烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基C1-4烷基、(CR10R20)vOR7、(CR10R20)vS(O)mR7，(CR10R20)vNHS(O)2R7，或(CR10R20)vNR4R14；而且其中的芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基可任選被取代；并且Z為氧或硫。
11.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R3為任選取代的C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基烷基或芳基。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的化合物，其中R3任選被下列基團(tuán)獨(dú)立地取代一次或多次C1-10烷基、鹵代C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C2-10炔基、C3-7環(huán)烷基、C3-7環(huán)烷基C1-10烷基、C5-7環(huán)烯基、C5-7環(huán)烯基C1-10烷基、鹵素、(CR10R20)nOR6、(CR10R20)nSH、(CR10R20)nS(O)mR7、(CR10R20)nNR10S(O)2R7、(CR10R20)nNR4R14、(CR10R20)nCN、(CR10R20)nS(O)2NR4R14、(CR10R20)nC(Z)R6、(CR10R20)nOC(Z)R6、(CR10R20)nC(Z)OR6、(CR10R20)nC(Z)NR4R14、(CR10R20)nNR10C(Z)R6、(CR10R20)nNR10C(＝NR10)NR4R14、(CR10R20)nOC(Z)NR4R14、(CR10R20)nNR10C(Z)NR4R14，或(CR10R20)nNR10C(Z)OR7；并且其中R4和R14各自獨(dú)立地選自氫、任選取代的C1-4烷基、任選取代的C3-7環(huán)烷基、C3-7環(huán)烷基C1-4烷基、任選取代的芳基或任選取代的芳基C1-4烷基，或者R4和R14與它們所連接的氮一起形成任選取代的4-7元雜環(huán)，該環(huán)任選含有選自氧、硫或NR9的其它雜原子；R5為氫、C1-4烷基、C2-4鏈烯基、C2-4炔基或NR4R14，但基團(tuán)SR5為SNR4R14、S(O)2R5為SO2H和S(O)R5為SOH的情形除外；R6為氫、C1-10烷基、C3-7環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基C1-10烷基、芳基、芳基C1-10烷基、雜芳基或雜芳基C1-10烷基，其中這些基團(tuán)各自可任選被取代；R7為C1-6烷基、芳基、芳基C1-6烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基C1-6烷基、雜芳基、或雜芳基C1-6烷基；其中這些基團(tuán)各自可任選被取代；R9為氫、C(Z)R6或任選取代的C1-10烷基、任選取代的芳基或任選取代的芳基-C1-4烷基；R10和R20獨(dú)立地選自氫或C1-4烷基；m為0或整數(shù)1或2；n為0或整數(shù)1-10；和Z為氧或硫。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的化合物，其中任選的取代基獨(dú)立地選自鹵素、C1-10烷基、羥基、C1-10烷氧基、氨基或鹵代C1-10烷基。
14.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R3為苯環(huán)，所述苯環(huán)任選被鹵素、C1-4烷基或鹵代C1-4烷基獨(dú)立地取代一次或多次。
15.根據(jù)權(quán)利要求1，11，12，13或14的化合物，其中所述苯基環(huán)在2，4，或6位被單取代，或在2，4-位被二取代，或在2，4，6位被三取代。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的化合物，其中苯基獨(dú)立地被氟或甲基取代。
17.根據(jù)權(quán)利要求16的化合物，其中R3為2-甲基苯基、2-氟苯基、2-氯苯基、2，6-二甲基苯基或2，6-二氟苯基。
18.根據(jù)權(quán)利要求17的化合物，其中R3為2，6-二氟苯基。
19.根據(jù)權(quán)利要求1或11的化合物，其中R3為甲基、乙基、1-乙基-丙基、異丙基、仲丁基、環(huán)己基、環(huán)丙基甲基、環(huán)丙基甲基、2-甲基苯基、2-氟苯基、2-氯苯基、2，6-二甲基苯基或2，6-二氟苯基。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的化合物，其中R3為2，6-二氟苯基。
21.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其為2-甲硫基-4-苯基-6-苯基氨基-嘧啶-5-甲醛；4-(2-氯苯基)-6-(1-乙基-丙基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-(2-氯苯基)-6-(2-氯-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-(2-氟苯基)-6-(2-氯-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；或4-(2-氟-苯基)-6-異丙基氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。
22.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其為4-氨基-6-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-環(huán)丙基氨基-6-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-(環(huán)丙基甲基-氨基)-6-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-(2，6-二氟-苯基氨基)-6-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-(2-氟苯基)-6-(2-氟-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-仲丁基氨基-6-(2-氟-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-(4-氟-2-甲基-苯基)-6-異丙基氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-環(huán)丙基氨基-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-(環(huán)丙基甲基-氨基)-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-(4-氟-2-甲基-苯基)-6-(2-氟-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-仲丁基氨基-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-(2，6-二氟-苯基氨基)-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-(1-乙基丙基氨基)-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；或2-甲硫基-4-(2-甲基-4-氟苯基)-6-環(huán)己基氨基嘧啶-5-甲醛。
23.化合物4-(2，6-二氟-苯基氨基)-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。
24.化合物，選自4-氯-2-甲硫基-6-苯基氨基-嘧啶-5-甲醛；4-氯-6-(2，6-二氟-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-氯-6-(2-氯-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-氯-6-(2-氟-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-氯-6-(1-乙基-丙基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-氯-6-異丙基氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-氯-6-環(huán)丙基氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-氯-6-(環(huán)丙基甲基-氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；2-甲硫基-4-苯基-6-苯基氨基-嘧啶-5-甲醛；4-(2-氯苯基)-6-(1-乙基-丙基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-(2-氯苯基)-6-(2-氯-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-(2-氟苯基)-6-(2-氯-苯基氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛；4-(2-氟-苯基)-6-異丙基氨基-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛。
25.下式化合物 其中R1為芳基或雜芳基環(huán)，所述環(huán)任選被取代；R3為C1-10烷基、C3-7環(huán)烷基、C3-7環(huán)烷基烷基、芳基、芳基C1-10烷基、雜芳基、雜芳基C1-10烷基、雜環(huán)基、或雜環(huán)基C1-10烷基基團(tuán)，所述這些基團(tuán)任選被取代；R12為C1-10烷基，芳基，雜芳基，或芳基烷基；m為0或整數(shù)1或2；和Rg為C1-4烷基。
26.根據(jù)權(quán)利要求25的化合物，其中R3任選被下列基團(tuán)獨(dú)立地取代一次或多次C1-10烷基、鹵代C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C2-10炔基、C3-7環(huán)烷基、C3-7環(huán)烷基C1-10烷基、C5-7環(huán)烯基、C5-7環(huán)烯基C1-10烷基、鹵素、(CR10R20)nOR6、(CR10R20)nSH、(CR10R20)nS(O)mR7、(CR10R20)nNR10S(O)2R7、(CR10R20)nNR4R14、(CR10R20)nCN、(CR10R20)nS(O)2NR4R14、(CR10R20)nC(Z)R6、(CR10R20)nOC(Z)R6、(CR10R20)nC(Z)OR6、(CR10R20)nC(Z)NR4R14、(CR10R20)nNR10C(Z)R6、(CR10R20)nNR10C(＝NR10)NR4R14、(CR10R20)nOC(Z)NR4R14、(CR10R20)nNR10C(Z)NR4R14，或(CR10R20)nNR10C(Z)OR7；并且其中R4和R14各自獨(dú)立地選自氫、任選取代的C1-4烷基、任選取代的C3-7環(huán)烷基、C3-7環(huán)烷基C1-4烷基、任選取代的芳基或任選取代的芳基C1-4烷基，或者R4和R14與它們所連接的氮一起形成任選取代的4-7元雜環(huán)，該環(huán)任選含有選自氧、硫或NR9的其它雜原子；R6為氫、C1-10烷基、C3-7環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基C1-10烷基、芳基、芳基C1-10烷基、雜芳基或雜芳基C1-10烷基，其中這些基團(tuán)各自可任選被取代；R7為C1-6烷基、芳基、芳基C1-6烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基C1-6烷基、雜芳基，或雜芳基C1-6烷基；其中這些基團(tuán)各自可任選被取代；R9為氫，C(Z)R6或任選取代的C1-10烷基，任選取代的芳基或任選取代的芳基-C1-4烷基；R10和R20獨(dú)立地選自氫或C1-4烷基；m為0或整數(shù)1或2；n為0或整數(shù)1-10；和Z為氧或硫。
27.根據(jù)權(quán)利要求26的化合物，其中任選的取代基獨(dú)立地選自鹵素、C1-10烷基，羥基，C1-10烷氧基，氨基或鹵代C1-10烷基。
28.根據(jù)權(quán)利要求27的化合物，其中R3為苯環(huán)，所述苯環(huán)任選被鹵素、C1-4烷基或鹵代C1-4烷基獨(dú)立地取代一次或多次。
29.根據(jù)權(quán)利要求25～28的化合物，其中所述苯基環(huán)在2，4或6位被單取代，在2，4-位被二取代，或在2，4，6位被三取代。
30.根據(jù)權(quán)利要求29的化合物，其中苯基獨(dú)立地被氟或甲基取代。
31.根據(jù)權(quán)利要求29的化合物，其中R3為2-甲基苯基、2-氟苯基、2-氯苯基、2，6-二甲基苯基或2，6-二氟苯基。
32.根據(jù)權(quán)利要求31的化合物，其中R3為2，6-二氟苯基。
33.根據(jù)權(quán)利要求25的化合物，其中R3為甲基、乙基、1-乙基-丙基、異丙基、仲丁基、環(huán)己基、環(huán)丙基甲基、環(huán)丙基甲基、2-甲基苯基、2-氟苯基、2-氯苯基、2，6-二甲基苯基或2，6-二氟苯基。
34.根據(jù)權(quán)利要求25的化合物，其中R1為任選取代的雜芳基環(huán)。
35.根據(jù)權(quán)利要求25的化合物，其中R1為任選取代的芳環(huán)。
36.根據(jù)權(quán)利要求35的化合物，其中R1為被鹵素、C1-4烷基或鹵代C1-4烷基獨(dú)立地取代一次或多次的苯環(huán)。
37.根據(jù)權(quán)利要求36的化合物，其中所述苯基在2，4或6位被單取代，在2，4-位被二取代，或在2，4，6位被三取代。
38.根據(jù)權(quán)利要求25或37的化合物，其中R1為苯基、2-甲基苯基、4-氟-2-二甲基苯基或2-氯苯基。
39.根據(jù)權(quán)利要求25的化合物，其中R12為C1-10烷基。
40.根據(jù)權(quán)利要求25的化合物，其為(E)-3-[4-(2，6-二氟-苯基氨基)-6-(4-氟-2-甲基-苯基)-2-甲硫基-嘧啶-5-基]-丙烯酸乙酯。
41.下式化合物 其中R1為任選取代的芳基或雜芳基環(huán)；和R3為任選取代的芳基或雜芳基基團(tuán)；m為0或整數(shù)1或2；和Rg為C1-4烷基。
42.根據(jù)權(quán)利要求41的化合物，其中R3任選被下列基團(tuán)獨(dú)立地取代一次或多次C1-10烷基、鹵代C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C2-10炔基、C3-7環(huán)烷基、C3-7環(huán)烷基C1-10烷基、C5-7環(huán)烯基、C5-7環(huán)烯基C1-10烷基、鹵素、(CR10R20)nOR6、(CR10R20)nSH、(CR10R20)nS(O)mR7、(CR10R20)nNR10S(O)2R7、(CR10R20)nNR4R14、(CR10R20)nCN、(CR10R20)nS(O)2NR4R14、(CR10R20)nC(Z)R6、(CR10R20)nOC(Z)R6、(CR10R20)nC(Z)OR6、(CR10R20)nC(Z)NR4R14、(CR10R20)nNR10C(Z)R6、(CR10R20)nNR10C(＝NR10)NR4R14、(CR10R20)nOC(Z)NR4R14、(CR10R20)nNR10C(Z)NR4R14、或(CR10R20)nNR10C(Z)OR7；并且其中R4和R14各自獨(dú)立地選自氫，任選取代的C1-4烷基，任選取代的C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基C1-4烷基，任選取代的芳基或任選取代的芳基C1-4烷基，或者R4和R14與它們所連接的氮一起形成任選取代的4-7元雜環(huán)，該環(huán)任選含有選自氧、硫或NR9的其它雜原子；R6為氫，C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-10烷基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基或雜芳基C1-10烷基，其中這些基團(tuán)各自可任選被取代；R7為C1-6烷基，芳基，芳基C1-6烷基，雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-6烷基，雜芳基，或雜芳基C1-6烷基；其中這些基團(tuán)各自可任選被取代；R9為氫，C(Z)R6或任選取代的C1-10烷基，任選取代的芳基或任選取代的芳基-C1-4烷基；R10和R20獨(dú)立地選自氫或C1-4烷基；m為0或整數(shù)1或2；n為0或整數(shù)1-10；和Z為氧或硫。
43.根據(jù)權(quán)利要求42的化合物，其中任選的取代基獨(dú)立地選自鹵素、C1-10烷基、羥基、C1-10烷氧基、氨基或鹵代C1-10烷基。
44.根據(jù)權(quán)利要求43的化合物，其中R3為苯環(huán)，所述苯環(huán)任選被鹵素、C1-4烷基或鹵代C1-4烷基獨(dú)立地取代一次或多次。
45.根據(jù)權(quán)利要求41～44的化合物，其中所述苯基環(huán)在2，4，或6位被單取代，在2，4-位被二取代，或在2，4，6位被三取代。
46.根據(jù)權(quán)利要求45的化合物，其中苯環(huán)獨(dú)立地被氟或甲基取代。
47.根據(jù)權(quán)利要求45的化合物，其中R3為2-甲基苯基、2-氟苯基、2-氯苯基、2，6-二甲基苯基或2，6-二氟苯基。
48.根據(jù)權(quán)利要求47的化合物，其中R3為2，6-二氟苯基。
49.根據(jù)權(quán)利要求41的化合物，其中R3為甲基、乙基、1-乙基-丙基、異丙基、仲丁基、環(huán)己基、環(huán)丙基甲基、環(huán)丙基甲基、2-甲基苯基、2-氟苯基、2-氯苯基、2，6-二甲基苯基或2，6-二氟苯基。
50.根據(jù)權(quán)利要求41的化合物，其中R1為任選取代的雜芳基環(huán)。
51.根據(jù)權(quán)利要求41的化合物，其中R1為任選取代的芳環(huán)。
52.根據(jù)權(quán)利要求51的化合物，其中R1為被鹵素、C1-4烷基或鹵代C1-4烷基獨(dú)立地取代一次或多次的苯基。
53.根據(jù)權(quán)利要求52的化合物，其中所述苯基在2，4，或6位被單取代，在2，4-位被二取代，或在2，4，6位被三取代。
54.根據(jù)權(quán)利要求41或53的化合物，其中R1為苯基、2-甲基苯基、4-氟-2-二甲基苯基或2-氯苯基。
55.下式化合物 其中R1為芳基或雜芳環(huán)，所述環(huán)被任選取代；R3為C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基烷基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基，雜芳基C1-10烷基，雜環(huán)或雜環(huán)C1-10烷基，所述基團(tuán)被任選取代；R12為C1-10烷基，芳基，雜芳基或芳基烷基；m為0或整數(shù)1或2；和Rg為C1-4烷基。
56.根據(jù)權(quán)利要求55的化合物，其中R1為任選取代的雜芳環(huán)。
57.根據(jù)權(quán)利要求55的化合物，其中R1為任選取代的芳環(huán)。
58.根據(jù)權(quán)利要求57的化合物，其中芳基為獨(dú)立地被鹵素、C1-4烷基或鹵素取代的C1-4烷基取代一次或多次的苯基。
59.根據(jù)權(quán)利要求58的化合物，其中所述苯基在2，4，或6位被單取代，在2，4-位被二取代，或在2，4，6位被三取代。
60.根據(jù)權(quán)利要求55或57的化合物，其中R1為苯基、2-甲基苯基、4-氟-2-甲基苯基或2-氯苯基。
61.根據(jù)權(quán)利要求55的化合物，其中R3為任選取代的C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基烷基或芳基。
62.根據(jù)權(quán)利要求61的化合物，其中所述的取代基獨(dú)立地選自下列基團(tuán)C1-10烷基、鹵代C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C2-10炔基、C3-7環(huán)烷基、C3-7環(huán)烷基C1-10烷基、C5-7環(huán)烯基、C5-7環(huán)烯基C1-10烷基、鹵素、(CR10R20)nOR6、(CR10R20)nSH、(CR10R20)nS(O)mR7、(CR10R20)nNR10S(O)2R7、(CR10R20)nNR4R14、(CR10R20)nCN、(CR10R20)nS(O)2NR4R14、(CR10R20)nC(Z)R6、(CR10R20)nOC(Z)R6、(CR10R20)nC(Z)OR6、(CR10R20)nC(Z)NR4R14、(CR10R20)nNR10C(Z)R6、(CR10R20)nNR10C(＝NR10)NR4R14、(CR10R20)nOC(Z)NR4R14、(CR10R20)nNR10C(Z)NR4R14，或(CR10R20)nNR10C(Z)OR7；并且其中R4和R14各自獨(dú)立地選自氫，任選取代的C1-4烷基，任選取代的C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基C1-4烷基，任選取代的芳基或任選取代的芳基C1-4烷基，或者R4和R14與它們所連接的氮一起形成任選取代的4-7元雜環(huán)，該環(huán)任選含有選自氧、硫或NR9的其它雜原子；R6為氫，C1-10烷基，C3-7環(huán)烷基，雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-10烷基，芳基，芳基C1-10烷基，雜芳基或雜芳基C1-10烷基，其中這些基團(tuán)各自可任選被取代；R7為C1-6烷基，芳基，芳基C1-6烷基，雜環(huán)基，雜環(huán)基C1-6烷基，雜芳基，或雜芳基C1-6烷基；其中這些基團(tuán)各自可任選被取代；R9為氫，C(Z)R6或任選取代的C1-10烷基，任選取代的芳基或任選取代的芳基-C1-4烷基；R10和R20獨(dú)立地選自氫或C1-4烷基；m為0或整數(shù)1或2；n為0或整數(shù)1-10；和Z為氧或硫。
63.根據(jù)權(quán)利要求62的化合物，其中任選的取代基獨(dú)立地選自氫、C1-10烷基、羥基、C1-10烷氧基、氨基或鹵代C1-10烷基。
64.根據(jù)權(quán)利要求63的化合物，其中R3為苯環(huán)，所述苯環(huán)任選被鹵素、C1-4烷基或鹵代C1-4烷基獨(dú)立地取代一次或多次。
65.根據(jù)權(quán)利要求62至64的化合物，其中所述苯環(huán)在2，4或6位被單取代，或在2，4-位被二取代，或在2，4，6位被三取代。
66.根據(jù)權(quán)利要求65的化合物，其中苯基獨(dú)立地被氟或甲基取代。
67.根據(jù)權(quán)利要求66的化合物，其中R3為2-甲基苯基、2-氟苯基、2-氯苯基、2，6-二甲基苯基或2，6-二氟苯基。
68.根據(jù)權(quán)利要求67的化合物，其中R3為2，6-二氟苯基。
69.根據(jù)權(quán)利要求55的化合物，其中R3為甲基、乙基、1-乙基-丙基、異丙基、仲丁基、環(huán)己基、環(huán)丙基甲基、環(huán)丙基甲基、2-甲基苯基、2-氟苯基、2-氯苯基、2，6-二甲基苯基或2，6-二氟苯基。
70.根據(jù)權(quán)利要求55至59中任一項(xiàng)的化合物，其中R12為C1-10烷基。
全文摘要
本發(fā)明涉及取代的2，4，8－三取代－8H－吡啶并[2，3－d]嘧啶－7－酮新化合物和組合物，其在治療中用作CSBP/p38激酶抑制劑。
文檔編號(hào)C07D239/02GK1847229SQ200610075468
公開(kāi)日2006年10月18日 申請(qǐng)日期2001年10月23日 優(yōu)先權(quán)日2000年10月23日
發(fā)明者杰里·L·亞當(dāng)斯, 杰弗里·C·貝姆, 拉爾夫·霍爾, 金琦, 吉里·卡斯帕里克, 多明戈斯·J·席爾瓦, 約翰·J·塔格特 申請(qǐng)人:史密絲克萊恩比徹姆公司