專利名稱：一種甾體皂甙元化合物作殺菌劑的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇的用途，特別涉及作為殺菌劑在荔枝霜疫霉病防治中的用途。
背景技術(shù)：
荔枝霜疫霉病是由低等真菌(Peronophythora litchii Chen)引起的病害，可造成荔枝嫩梢干枯、落花、落果和爛果等癥狀，是嚴(yán)重影響荔枝產(chǎn)量和品質(zhì)的主要病害。目前，在生產(chǎn)上防治荔枝霜疫霉病仍然是以化學(xué)合成藥劑——雷多米爾(Ridomil)為主，藥劑種類比較單一，長(zhǎng)期使用必然會(huì)導(dǎo)致病原菌產(chǎn)生抗性，尚未見(jiàn)有植物源殺菌劑應(yīng)用于此病防治的報(bào)道。
甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇(spirost-25(27)-ene-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-heptol)是以百合科植物開口箭(Tupistra chinensis Bak.)的根莖為原料，采用生物活性追蹤法，通過(guò)甲醇或乙醇提取、有機(jī)溶劑分部和硅膠柱層析等方法分離得到的。該化合物是一種多羥基取代的螺甾烷型甾體衍生物，白色粉末，溶點(diǎn)為273～275℃，比旋光度為-98.5°，其結(jié)構(gòu)式如式I。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇的新用途，即作為殺菌劑在荔枝霜疫霉病防治中的用途。
所述甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇作為殺菌劑使用時(shí)，濃度≥100mg/L，采用噴霧、浸泡或涂布的方法使用。
所述甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇可作為有效成分單獨(dú)用于荔枝霜疫霉病的防治。
所述甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇可作為有效成分或添加物與其它一種或一種以上化合物以任意比例混合用于荔枝霜疫霉病的防治。
所述甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇可與甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮混合用于荔枝霜疫霉病的防治。
所述甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇可與防治荔枝霜疫霉病的殺菌劑復(fù)配，用于荔枝霜疫霉病的防治，所述防治荔枝霜疫霉病的殺菌劑可選雷多米爾。
還可將含有所述甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇的植物提取物、分部提取物或分離部位作為殺菌劑用于荔枝霜疫霉病的防治。
用孢子萌發(fā)法對(duì)荔枝霜疫霉菌進(jìn)行離體生物活性跟蹤測(cè)試證明所述甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇對(duì)荔枝霜疫霉菌孢子囊萌發(fā)的有效抑制中濃度(EC50)為124.37μg/mL。用接種法對(duì)所述甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇進(jìn)行荔枝霜疫霉菌的活體抗菌試驗(yàn)證明濃度為500μg/mL的所述甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇藥液處理對(duì)荔枝(品種為‘淮枝’)霜疫霉病具有明顯的防治效果，結(jié)果如圖1。


圖1為甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇對(duì)荔枝霜疫霉菌孢子囊萌發(fā)的抑制作用。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。
實(shí)施例1甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇對(duì)荔枝霜疫霉菌孢子囊萌發(fā)抑制作用的離體活性測(cè)定先將甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇配成濃度為1000μg/mL的貯液。再取在25℃和98％RH條件下培養(yǎng)，菌齡為5天的荔枝霜疫霉菌菌種，用無(wú)菌水沖洗，制成不同濃度的孢子囊懸浮液。用不同濃度的孢子囊懸浮液分別與所述甾體皂甙元化合物貯液配成濃度50μg/mL、100μg/mL、150μg/mL、200μg/mL和250μg/mL的系列含藥菌液，含藥菌液的菌數(shù)為每視野下20個(gè)孢子囊，將含藥菌液搖勻，置于25℃和98％RH條件下培養(yǎng)6小時(shí)，同時(shí)設(shè)空白對(duì)照，然后取培養(yǎng)后的含藥菌液在10×40倍顯微鏡下統(tǒng)計(jì)萌發(fā)率或抑制率，結(jié)果如圖1。
由圖1可見(jiàn)，本發(fā)明的甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇對(duì)荔枝霜疫霉菌孢子囊萌發(fā)的抑制效果隨濃度升高而增強(qiáng)，由統(tǒng)計(jì)分析得出，所述甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇對(duì)荔枝霜疫霉菌孢子囊萌發(fā)的有效抑制中濃度EC50為124.37μg/mL。
實(shí)施例2甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇對(duì)荔枝霜疫霉菌的活體抑菌測(cè)定將經(jīng)挑選的荔枝(品種為‘淮枝’)先用表面消毒劑洗果，接著用自來(lái)水沖凈藥液、晾干，然后取濃度為500μg/mL的所述甾體皂甙元化合物藥液(配制方法同實(shí)施例1)，均勻涂布于荔枝果尖處、晾干，再取霜疫霉菌孢子囊懸浮液(2×105個(gè)/mL)，均勻涂布于施藥處，單果包裝，并于25℃和98％RH條件下培養(yǎng)3天后，統(tǒng)計(jì)病、健果，計(jì)算感染率，試驗(yàn)結(jié)果如表1所示
表1螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇對(duì)荔枝霜疫霉菌的活體抑菌結(jié)果*

*后隨字母相同者，表示在5％水平上差異不顯著(DMRT法)。
由表1可見(jiàn)，荔枝果實(shí)使用本發(fā)明的甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇處理后，接種霜疫霉菌，其感病率僅為18.9％，與對(duì)照感病率87.8％相比，具有顯著差異，因此，螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇對(duì)荔枝霜疫霉菌具有明顯的活體抗菌作用，亦即對(duì)荔枝霜疫霉病具有明顯的防控作用。
權(quán)利要求
1.一種甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇作為殺菌劑用于荔枝霜疫霉病的防治。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇的用途，其特征在于所述甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇作為殺菌劑使用時(shí)，濃度≥100mg/L，采用噴霧、浸泡或涂布的方法使用。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇的用途，其特征在于所述甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇作為有效成分單獨(dú)用于荔枝霜疫霉病的防治。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的甾體皂甙元化合物1螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇的用途，其特征在于所述甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇作為有效成分或添加物與其它一種或一種以上化合物以任意比例混合用于荔枝霜疫霉病的防治。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇的用途，其特征在于所述甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇與甾體皂甙元化合物1β，2β，3β，4β，5β，7α-六羥基螺甾-25(27)-烯-6-酮混合用于荔枝霜疫霉病的防治。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇的用途，其特征在于所述甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇與雷多米爾復(fù)配后用于荔枝霜疫霉病的防治。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇的用途，其特征在于使用含有所述甾體皂甙元化合物螺甾-25(27)-烯-1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α-七醇的植物提取物、分部提取物或分離部位作為殺菌劑用于荔枝霜疫霉病的防治。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種甾體皂甙元化合物螺甾－25(27)－烯－1β，2β，3β，4β，5β，6β，7α－七醇作為殺菌劑用于荔枝霜疫霉病防治的用途，該甾體皂甙元化合物可單獨(dú)、或與其他化合物混合、或與雷多米爾復(fù)配用于荔枝霜疫霉病的防治。
文檔編號(hào)C07J21/00GK1922998SQ200610084990
公開日2007年3月7日 申請(qǐng)日期2004年2月27日 優(yōu)先權(quán)日2004年2月27日
發(fā)明者吳光旭, 陳維信, 魏孝義, 劉愛(ài)媛, 吳振先, 李雪萍 申請(qǐng)人:華南農(nóng)業(yè)大學(xué), 長(zhǎng)江大學(xué), 中國(guó)科學(xué)院華南植物園