專利名稱：具有抗血栓活性的多肽序列、其制備方法及應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及多肽序列，尤其涉及通過活性跟蹤從江浙腹蛇蛇毒中逐級(jí)分離出的具有抗血栓活性的多肽序列，以及該多肽序列作為抗血栓劑的應(yīng)用，屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
蛇毒作為藥物用于疾病治療已有近2千年歷史。在蛇毒治療的一系列重大疾病中，血栓受到格外的重視。腹蛇蛇毒對(duì)血栓的確切作用使得“腹蛇抗栓酶”于二十世紀(jì)七十年代進(jìn)入臨床。“腹蛇抗栓酶”的活性成分是江浙腹蛇蛇毒，與其他蛇毒一樣，江浙腹蛇蛇毒是諸多蛋白質(zhì)的混合物。由于1970年代我國對(duì)申請(qǐng)上市新生化藥和中藥不要求定義實(shí)質(zhì)上的活性成分及結(jié)構(gòu)，所以“腹蛇抗栓酶”的活性成分到底是江浙腹蛇蛇毒中的什么蛋白，以及作為抗血栓活性蛋白的代表具有怎樣的序列，至今都不清楚。1970年代以后，臨床治療和藥物研究的要求逐步提高，尋找江浙腹蛇蛇毒的抗血栓活性成分，以及定義關(guān)鍵成分的序列具有明顯的重要性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一是提供一種從江浙腹蛇蛇毒中分離出的具有良好抗血栓活性的多肽序列(f44)，該多肽序列具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。
江浙腹蛇(Agkistrodon halys Pallas)蛇毒的分子量范圍為2,000-100,000，本發(fā)明在Sephadex G-100凝膠色譜柱上將粗蛇毒干粉(簡稱f0)分離為4種組分(分別簡稱為f1、f2、f3、f4)，通過體外抗血小板聚集實(shí)驗(yàn)、半體內(nèi)抗血小板聚集實(shí)驗(yàn)、小鼠尾動(dòng)脈出血時(shí)間實(shí)驗(yàn)和125I標(biāo)記的單克隆抗體結(jié)合實(shí)驗(yàn)測定f1-4的抗血小板聚集活性。通過這些體外測定，f4被確定為江浙腹蛇蛇毒抗血栓的活性部位。
在上述基礎(chǔ)上，本發(fā)明采用DEAE Saphdax-A-50陰離子交換樹脂色譜柱將f4分離為4種組分(簡稱f41-4)，通過體外抗血小板聚集實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)抗血栓實(shí)驗(yàn)測定了f41-4的活性，確定f44為江浙腹蛇蛇毒中具有良好抗血栓活的組分。用AppliedBiosystems Procise-Procise 491/auto-PE491 Protein sequencer序列儀測定f44N末端的15個(gè)氨基酸序列，再按照常規(guī)方法將f44用胰蛋白酶酶解，進(jìn)一步用反相高效液相質(zhì)譜(RP-HPLC-MS)分析測定了f44的全氨基酸序列(SEQ ID NO.1)。本發(fā)明進(jìn)一步測定了f44的體外抗血小板聚集活性和抗血栓活性，試驗(yàn)結(jié)果表明，f44具有良好的抗血小板聚集活性和抗血栓活性。
本發(fā)明的目的之二是提供一種從江浙腹蛇粗蛇毒中分離出f44的方法，包括，將江浙腹蛇粗蛇毒干粉溶于水后上SephadexG-100凝膠色譜柱，用洗脫劑洗脫，收集餾份，將得到的餾份分別按流出時(shí)間(峰1RT＝0.8h；峰2RT＝1h；峰3RT＝1.3h；峰4RT＝2.3h[RT保留時(shí)間])和對(duì)應(yīng)的紫外峰(紫外峰吸收峰11000mAU；峰2480mAU；峰3250mAU；峰4180mAU)分成f1、f2、f3和f4共4個(gè)組分；將f4組分溶于水后上DEAE Saphdax-A-50陰離子交換樹脂色譜柱，用洗脫劑洗脫，收集餾份，將得到的餾份按流出時(shí)間(峰1RT＝10min；峰2RT＝36min；峰3RT＝54min；峰4RT＝108min[RT保留時(shí)間])和對(duì)應(yīng)的紫外峰(紫外峰吸收峰1200mAU；峰2220mAU；峰3560mAU峰4500mAU)將f44從f4組分中分離出來。
本發(fā)明的目的之三是提供一種藥物組合物，該藥物組合物由治療上有效劑量的具有SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的多肽和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑組成。該藥物組合物可按照生物制劑的常規(guī)方法制成臨床上適宜的制劑，例如可以為口服制劑、注射或輸液制劑等。


圖1 f1-4的SDS-PAGE電泳圖譜。
圖2 f41-4的SDS-PAGE電泳圖譜。
具體實(shí)施例方式
下面通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。應(yīng)當(dāng)指出，這些實(shí)施例僅僅是本發(fā)明的例證，不應(yīng)理解為對(duì)本發(fā)明的限制。
實(shí)施例1.江浙腹蛇粗蛇毒干粉(f0)的分離將0.1g粗蛇毒干粉(f0)(購自廣西醫(yī)學(xué)院蛇毒研究所)溶于2ml去離子水配成0.05g/ml的蛇毒水溶液。將得到的水溶液上到SephadexG-100凝膠色譜柱。色譜柱的直徑為3.0cm、填料高度為100cm。色譜柱用NH4Ac水溶液(0.005mol/l)洗脫，洗脫劑的流速為0.5ml/min，在280nm處監(jiān)測出峰情況并收集餾份。將得到的餾份按流出時(shí)間(峰1RT＝0.8h；峰2RT＝1h；峰3RT＝1.3h；峰4RT＝2.3h[RT保留時(shí)間])和對(duì)應(yīng)的紫外峰(紫外峰吸收峰11000mAU；峰2480mAU；峰3250mAU峰4180mAU)分成組份1-4個(gè)組分(簡稱f1-4)。上樣100mg時(shí)的回收率如表1。f1-4的構(gòu)成由電泳定義(圖1)(SDS-PAGE，12.5％ Polyacrylamide gel；AmershamPharmacia Biotech AB生產(chǎn)的Hoefer mini VE電泳儀；Marker為AmershamPharmacia Biotech AB生產(chǎn)的Low molecular weight calibration kit，從小到大分子質(zhì)量為14400、20100、30000、45000、66000和97000)。從圖1可以看出，f1是大約含有6個(gè)條帶的混合物，主要組分的分子量大約為60000道爾噸，其余分子量的條帶都十分微弱。f2也是大約含有6個(gè)條帶的混合物，主要組分的分子量也大約為60000道爾噸，只是分子量接近30000的2個(gè)條帶的量明顯比f1小。f3是大約含有5個(gè)條帶的混合物，3個(gè)主要組分的分子量大約為16000、25000和31000道爾噸，其余分子量的條帶都比較微弱。f4也是大約含有5個(gè)條帶的混合物，3個(gè)主要組分的分子量大約為17000、20000和3 1000道爾噸，其余分子量的條帶都比較微弱。
表1使用Sephadex G-100色譜分離得到的蛇毒各組份

實(shí)施例2.f1-4的體外抗血小板聚集活性測定每個(gè)注射器中先吸入1ml枸櫞酸鈉(防止凝血)，每次取血30ml。每個(gè)離心管中，倒入5ml全血。平衡后離心，第一次以800r/min離心10min，得到富血小板血漿PRP。第二次3000R/min離心10min得到貧血小板血漿PPP。每個(gè)小管中加250ul PRP和一攪拌子，空白對(duì)照管中加250ul PPP和一攪拌子。30秒鐘時(shí)，用注射器往小管中加f1-4，1分鐘時(shí)用注射器加入誘導(dǎo)劑ADP(終濃度20μmol/L)、花生四烯酸(AA，500μmol/L)或者凝血酶(TH，0.2U/ml)，以二磷酸腺苷(ADP)和血小板活化因子(PAF)為誘導(dǎo)劑的小管4分鐘后測定，以ADP為誘導(dǎo)劑的小管8分鐘后測定，結(jié)果見表2-4。
表2 f1-4在4種濃度下體外抗ADP誘導(dǎo)的家兔血小板聚集活性劑量(μg/ml)/抑制率
f1f2f3f46.25/4.1±2.2 12.50/9.03±6.125.0/15.0±8.85.0/15.6±7.9812.50/16.5±14.4 25.00/18.3±9.350.0/28.6±10.7 10.0/29.2±14.225.00/37.6±15.4 50.00/33.1±15.3 100.0/51.1±15.6 20.0/56.1±16.450.00/76.2±19.8 120.00/70.8±16.6 150.0/66.7±16.5 40.0/94.4±19.6
n＝6表3.f1-4在4種濃度下體外抗AA誘導(dǎo)的家兔血小板聚集活性劑量(μg/ml)/抑制率
f1f2f3f46.25/23.3±7.612.50/41.8±15.6 1.00/25.7±11.3 0.25/25.8±11.412.50/52.2±14.5 25.00/70.9±22.3 1.50/39.7±17.3 0.50/56.8±12.925.00/67.3±15.3 50.00/94.2±16.7 2.00/55.0±11.9 1.00/83.6±20.750.00/94.7±20.2 120.00/100.0±0.0 2.50/65.8±20.8 1.50/99.8±19.6
n＝6表4.f1-4在4種濃度下體外抗TH誘導(dǎo)的家兔血小板聚集活性劑量(μg/ml)/抑制率
f1f2f3f46.25/16.7±15.2 12.50/16.4±13.3 5.00/20.8±8.50.25/15.6±10.312.50/39.2±20.8 25.00/39.1±14.0 10.50/51.3±11.4 0.50/29.2±15.125.00/76.4±15.6 50.00/74.8±15.5 20.00/72.7±15.3 1.00/53.3±21.450.00/92.3±17.9 120.00/100.0±0.0 40.00/94.3±21.4 1.50/75.5±22.6
n＝6根據(jù)表2-4的數(shù)據(jù)得出f1-4體外抗血小板聚集的半數(shù)抑制濃度IC50。結(jié)果見表5。
從IC50值可以看出，f4的體外抗血小板聚集活性最強(qiáng)。
表5 f1-4體外抗血小板聚集的IC50(g/ml)

實(shí)施例3.f1-4的半體內(nèi)抗血小板聚集活性測定36只家兔，每組6只。以f1-4為治療組，以生理鹽水為空白對(duì)照組。通過家兔耳緣靜脈按照相應(yīng)的劑量注射f1-4的生理鹽水溶液或者生理鹽水。然后在規(guī)定時(shí)間內(nèi)取血，按照實(shí)施例2的方法進(jìn)行抗血小板聚集實(shí)驗(yàn)。結(jié)果見表6-8。
表6家兔在靜脈注射f1-4后5-60分鐘內(nèi)抗ADP誘導(dǎo)的血小板聚集活性抑制率

組份劑量5min 15min 30min 60minNS - 4.61±1.20 3.21±1.835.76±0.996.51±2.69f10.106.37±2.46 5.03±3.588.69±4.357.19±3.76f20.105.28±2.23 6.59±2.72a7.19±2.356.21±1.70f30.1036.97±2.2830.89±4.57c24.53±2.87c20.74±4.95bf40.1073.04±8.60c，f63.47±7.35c，e50.23±5.21b，f40.15±6.93c，ff40.0555.30±7.94b49.23±6.51b40.72±7.29b36.69±3.44c
n＝6；劑量＝mg/kg；a)與NS組比較，P＜0.05；b)與NS組比較，P＜0.01；c)與NS組比較，P＜0.001，d)，與相同的濃度和時(shí)間下的f3比較，P＜0.05；e)與相同的濃度和時(shí)間下的f3比較，P＜0.01；f)與相同的濃度和時(shí)間下的f3比較P＜0.001.
表7家兔在靜脈注射f1-4后5-60分鐘內(nèi)抗AA誘導(dǎo)的血小板聚集活性抑制率
組份劑量5min 15min 30min 60minNS - 4.82±3.313.35±2.492.83±2.412.24±2.83f10.105.33±2.884.78±3.205.02±2.443.86±2.68f20.107.13±3.376.28±2.586.14±3.406.31±3.98f30.0548.66±7.37c44.22±9.61c41.94±9.33c36.17±6.48cf40.0566.71±5.84b，f53.67±5.38b，d51.37±6.14a，d47.44±3.72a，ef40.1085.90±10.35c74.11±9.45c60.91±10.54c55.49±4.14c
n＝6；劑量＝mg/kg；a)與NS組比較，P＜0.05；b)與NS組比較，P＜0.01；c)與NS組比較，P＜0.001；d)與相同的濃度和時(shí)間下的f3比較P＜0.05；e)與相同的濃度和時(shí)間下的f3比較P＜0.01；f)與相同的濃度和時(shí)間下的f3比較P＜0.001.
表8家兔在靜脈注射f1-4后5-60分鐘內(nèi)抗ATH誘導(dǎo)的血小板聚集活性抑制率
組份劑量5min 15min30min 60minNS - 3.96±3.235.83±4.81 6.74±4.583.18±3.38f10.105.20±4.157.36±4.18 8.38±4.216.25±3.76f20.105.26±3.757.30±2.93 7.89±3.484.96±3.17f30.0530.13±11.07b29.23±9.27c16.82±6.22a9.20±4.18f40.0539.93±10.98b37.44±7.07b22.43±7.29b21.16±5.77b，df40.1083.18±12.36c64.3±10.32c34.29±8.85 28.58±4.02b
n＝6；劑量＝mg/kg；a)與NS組比較，P＜0.05；b)與NS組比較，P＜0.01；c)與NS組比較，P＜0.001，d)與相同的濃度和時(shí)間下的f3比較P＜0.01.
從表6-8的數(shù)據(jù)值可以看出，f4的半體內(nèi)抗血小板聚集活性最強(qiáng)。
實(shí)施例4.經(jīng)f0-4治療的小鼠尾動(dòng)脈出血時(shí)間測定f0-4治療分為5個(gè)大組，各大組再分為給藥前(尾靜脈注射NS，空白組)和給藥后15，30和60min 4個(gè)小組(尾靜脈注射f0-4的NS溶液，劑量為0.1mg/kg，治療組)，每個(gè)小組6只雄性小鼠(18-22g)。按照相應(yīng)的時(shí)間測量小鼠尾動(dòng)脈出血時(shí)間。方法如下，將小鼠裝入一個(gè)管狀容器中，使它們的尾部露出，然后在距離尾端0.5cm處剪去一段，記錄出血的時(shí)間。結(jié)果見表9。
表9 f0-4治療小鼠的尾動(dòng)脈出血時(shí)間

n＝6；劑量＝0.1mg/kg，i.v.；a)與給藥前比較，P＜0.05；b)與給藥前比較，P＜0.01；c)與給藥前比較，P＜0.001，d)與相同濃度的f3比較，P＜0.05；e)與相同濃度的f3比較，P＜0.001.
從表9的數(shù)據(jù)值可以看出，f4治療能夠最有效地延長小鼠尾動(dòng)脈出血時(shí)間。
實(shí)施例5.f1-4與125I標(biāo)記的單克隆抗體結(jié)合實(shí)驗(yàn)按照實(shí)施例2的方法分離、洗滌和活化血小板。血小板濃度調(diào)節(jié)到109/ml后與f1-4在37℃孵育30分鐘。分別加入50μl125I標(biāo)記的單克隆抗體(Calbiochem，美國)的Tyrode/BSA溶液，再于37℃孵育30分鐘，離心分離血小板。測定上清液的放射活性。f1-4與125I標(biāo)記的單克隆抗體的結(jié)合活性用抑制率表示，結(jié)果見表10。
表10 f1-4與125I標(biāo)記的單克隆抗體結(jié)合活性組份劑量(mg/ml)放射性

抑制率(％)
NS 2269.36±426.30 -f10.4639.85±53.81a73.03f20.4600.64±63.28a73.53f30.4453.03±55.43a84.36f40.4325.32±48.32a，b91.33f40.2362.57±49.15a87.82f40.1470.75±68.77a82.18f40.05 488.06±56.13a81.23f40.025 566.21±53.94a77.55f40.0125 727.57±62.62a69.73
n＝6；抑制率(％)＝(NS組放射性-各組份組的放射性)×100/NS組的放射性；a)與NS組比較，P＜0.001；b)與f3在相同濃度下比較，P＜0.01.
從表10的數(shù)據(jù)值可以看出，f4治療能夠最有效地與125I標(biāo)記的單克隆抗體結(jié)合。
實(shí)施例6.f4的分離將0.1g f4溶于2ml去離子水配成0.05gf4/ml的水溶液。將得到的水溶液上到DEAE Saphdax-A-50陰離子交換樹脂色譜柱。色譜柱的直徑為2.5cm、填料高度為18cm。色譜柱用(NH4)2Ac水溶液(0.005mol/l)按照0.005M/0.01M/0.05M/0.15M/0.25M/0.50M/1.0M梯度洗脫，洗脫劑的流速為2.7ml/min，在280nm處監(jiān)測出峰情況并收集餾份。將得到的餾份按流出時(shí)間(峰1RT＝10min；峰2RT＝36min；峰3RT＝54min；峰4RT＝108min[RT保留時(shí)間])和對(duì)應(yīng)的紫外峰(紫外峰吸收峰1200mAU；峰2220mAU；峰3560mAU；峰4500mAU)分成組份1-4個(gè)組分(簡稱f41-4)。上樣100mg時(shí)的回收率如表11。
f41-4的構(gòu)成由電泳定義(圖2)(SDS-PAGE，12.5％ Polyacrylamide gel；Amersham Pharmacia Biotech AB生產(chǎn)的Hoefer mini VE電泳儀；Marker為Amersham Pharmacia Biotech AB生產(chǎn)的Low molecular weight calibration kit，從小到大分子質(zhì)量為14400、20100、30000、45000、66000和97000)。從圖2可以看出，f41是大約含有2個(gè)條帶的混合物，組分的分子量大約分別為50000和70000道爾噸。f42也是大約含有2個(gè)條帶的混合物，組分的分子量大約分別為45000和80000道爾噸。f43是大約含有3個(gè)條帶的混合物，3個(gè)組分的分子量大約大約分別為75000、80000和90000道爾噸。。f44是含有1個(gè)條帶的單體，分子量大約為17000道爾噸。
表11.使用Sephadex G-100色譜分離得到的蛇毒各組份

用RP-HPLC(C-18 HPLC)驗(yàn)證了f44的純度。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，流動(dòng)相為三氟醋酸/乙腈/水時(shí)，f44的純度大于95％。用ESI液質(zhì)聯(lián)用測得到分子量為13962。
實(shí)施例7.f44的N末端序列測定按照常規(guī)方法，用Applied Biosystems Procise-Procise 491/auto-PE491 Proteinsequencer序列儀測得f44N末端的15個(gè)氨基酸序(SEQ ID NO.2)。
實(shí)施例8.f44的全序列測定將適量f44溶于50mM Tris-HCl(PH＝8.0)，終濃度為10mg/ml。用二硫蘇糖醇(DTT)終濃度5mM于45攝氏度首先還原f441小時(shí)。按照胰蛋白酶∶f44＝1∶100的比例將f44的還原溶液與胰蛋白酶混合均勻。用封口膜密封管口后置37℃溫箱，控制胰蛋白酶消化時(shí)間在4～5h。取10μl消化液自動(dòng)進(jìn)樣，進(jìn)行反相高效液相質(zhì)譜(RP-HPLC-MS)分析。將軟件模擬出的二級(jí)質(zhì)譜碎片峰和實(shí)驗(yàn)所得到的碎片二級(jí)質(zhì)譜峰進(jìn)行對(duì)照理論上進(jìn)行胰蛋白酶消化分析。對(duì)通過液相分離的肽段進(jìn)行質(zhì)量測定，得到f44含124個(gè)氨基酸殘基(SEQ ID NO.1)。
實(shí)施例9.f44的體外抗血小板聚集活性測定按照實(shí)施例2的方法測定f44抗ADP誘導(dǎo)的血小板聚集活性，結(jié)果見表12。由表12得到f44的IC50為0.01mg/ml(7μM)。
表12.f44抗ADP誘導(dǎo)的血小板聚集活性

實(shí)施例10.f44的抗血栓活性測定測定前將f44溶于生理鹽水。Wistra大鼠用戊巴比妥鈉(5.0mg/ml，3ml/kg)麻醉后分離右頸動(dòng)脈和左頸靜脈。把一根6cm長的事先精密稱重的絲線放在聚乙烯管中，將插管充滿肝素鈉的生理鹽水溶液(50IU/ml)后，一端插入左側(cè)靜脈，從一端加入定量肝素鈉抗凝，并加入f44的生理鹽水溶液(濃度為0.67mg/ml，劑量為每1000g體重3ml溶液)，然后插入右側(cè)動(dòng)脈。血流從右側(cè)動(dòng)脈流經(jīng)聚乙烯管流入左側(cè)靜脈，15分鐘后取出附有血栓的絲線并記錄濕重，附有血栓的絲線在干燥器中放置兩周后，稱量干重。結(jié)果見表13。
表13.f44對(duì)血栓形成的影響化合物/劑量(mg/kg體重) 血栓濕重
NS 29.26±2.45阿司匹林/10mg 13.17±1.02f4/2.01mg 3.76±0.83f41/2.01mg 17.68±3.68f42/2.01mg 20.65±4.45f43/2.01mg 20.85±2.82f44/2.01mg 16.60±3.68
試驗(yàn)結(jié)果表明，f44具有較強(qiáng)的抗血栓活性。
序列表<110>北京大學(xué)<120>具有抗血栓活性的多肽序列、其制備方法及應(yīng)用<130>P0897<160>2<170>PatentIn version 3.3<210>1<211>124<212>PRT<213>Agkistrodon halys Pallas<400>1Ser Leu Ile Gln Phe Glu Thr Leu Ile Met Lys Val Ala Lys Lys Ser1 5 10 15Gly Met Phe Trp Tyr Ser Asn Tyr Gly Cys Tyr Cys Gly Trp Gly Gly20 25 30Gln Gly Arg Pro Gln Asp Ala Thr Asp Arg Cys Cys Phe Val His Asp35 40 45Cys Cys Tyr Gly Lys Val Thr Gly Cys Asp Pro Lys Met Asp Val Tyr50 55 60Ser Phe Ser Glu Glu Ash Gly Asp Ile Val Cys Gly Gly Asp Asp Pro65 70 75 80Cys Lys Lys Glu Ile Cys Glu Cys Asp Arg Ala Ala Ala Ile Cys Phe85 90 95Arg Asp Ash Leu Thr Leu Tyr Ash Asp Lys Lys Tyr Trp Ala Phe Gly100 105 110Ala Lys Asn Cys Pro Gln Glu Glu Ser Glu Pro Cys115 120<210>2<211>15<212>PRT<213>Agkistrodon halys Pallas<400>2Ser Leu Ile Gln Phe Glu Thr Leu Ile Met Lys Val Ala Lys Lys1 5 10 1權(quán)利要求
1.一種具有抗血栓活性的多肽序列f44，其具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。
2.一種分離權(quán)利要求1多肽序列的方法，包括將江浙腹蛇粗蛇毒干粉溶于水后上SephadexG-100凝膠色譜柱，用洗脫劑洗脫，分別按照下述條件收集f1、f2、f3和f4餾份f1相對(duì)保留時(shí)間＝0.8h，對(duì)應(yīng)的紫外峰吸收1000mAU；f2相對(duì)保留時(shí)間＝1h，對(duì)應(yīng)的紫外峰吸收480mAU；f3相對(duì)保留時(shí)間＝1.3h，對(duì)應(yīng)的紫外峰吸收250mAU；f4相對(duì)保留時(shí)間＝2.3h，對(duì)應(yīng)的紫外峰吸收180mAU；將所收集的f4組分溶于水后上DEAE Saphdax-A-50陰離子交換樹脂色譜柱，用洗脫劑洗脫，按照相對(duì)保留時(shí)間為108min、對(duì)應(yīng)的紫外峰為500mAU的條件收集餾份，得f44。
3.一種藥物組合物，其特征是由治療上有效劑量的權(quán)利要求1的多肽和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑組成。
4.權(quán)利要求1的多肽在制備抗血栓藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從江浙腹蛇蛇毒中逐級(jí)分離出的具有抗血栓活性的多肽序列，該多肽序列具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。試驗(yàn)證實(shí)，本發(fā)明多肽序列具有良好的抗血栓活性。
文檔編號(hào)C07K1/16GK101089019SQ200610087259
公開日2007年12月19日 申請(qǐng)日期2006年6月15日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月15日
發(fā)明者彭師奇, 趙明, 王超, 王宇偉 申請(qǐng)人:北京大學(xué)