專利名稱：2＇－氟代核苷的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體地講包括2′-氟代核苷及其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
一些年來，合成核苷如5-碘-2′-脫氧尿苷和5-氟-2′-脫氧尿苷已用于治療癌癥和皰疹病毒。從20世紀(jì)80年代開始，合成核苷還已是有利于治療HIV，肝炎和EB病毒。
在1981年，獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)被確認(rèn)為嚴(yán)重危害人免疫系統(tǒng)的一種疾病，且其幾乎毫無例外地導(dǎo)致死亡。在1983年，AIDS的病因確定為人類免疫缺陷病毒(HIV)。在1985年，有報(bào)告稱合成核苷3′-疊氮基-3′-脫氧胸苷(AZT)抑制人類免疫缺陷病毒的復(fù)制。從那時(shí)起，已證明一些其它合成核苷，包括2′，3′-二脫氧肌苷(DDI)，2′，3′-二脫氧胞苷(DDC)及2′，3′-二脫氧-2′，3′-二脫氫胸苷(D4T)，對(duì)HIV有效。由細(xì)胞激酶通過細(xì)胞磷酸化作用產(chǎn)生5′-三磷酸鹽后，這些合成核苷摻入病毒DNA的生長(zhǎng)鏈中，由于不存在3′-羥基而引起鏈終止。它們也可抑制病毒逆轉(zhuǎn)錄酶。
多種合成核苷在體內(nèi)或活體外抑制HIV的成功已使一些研究者設(shè)計(jì)和檢測(cè)核苷，其在核苷的3′-位用碳原子代替雜原子。歐洲專利申請(qǐng)No.0337713和美國專利No.5,041,449(授予BioChem Pharma，Inc.)，公開了外消旋2-取代-4-取代-1，3-二氧雜環(huán)戊烷，其表現(xiàn)出抗病毒活性。美國專利No.5,047,407和歐洲專利申請(qǐng)No.0382526(也是屬于BioChcm Pharma，Inc.)，公開了一些具有抗病毒活性的外消旋的2-取代-5-取代-1，3-氧雜硫雜環(huán)戊烷核苷，并特別指出2-羥甲基-5-(胞嘧啶-1-基)-1，3-氧雜硫雜環(huán)戊烷(下文中稱為BCH-189)與AZT具有近乎相同的抗HIV活性，且毒性很小。外消旋混合物BCH-189的(-)-對(duì)映異構(gòu)體，稱為3TC，其被Liotta等的美國專利No.5,539,116公開，目前在美國銷售，其與AZT聯(lián)合治療HIV。
還已公開了順-2-羥甲基-5-(5-氟胞嘧啶-1-基)-1，3-氧雜硫雜環(huán)戊烷(“FTC”)具有強(qiáng)的抗HIV活性。Schinazi等，“用順-5-氟-1-[2-羥甲基-1，3-氧雜硫雜環(huán)戊烷-5-基]胞嘧啶的外消旋混合物和對(duì)映異構(gòu)體選擇性抑制人免疫缺陷病毒”Antimicrobial Agents andChemotherapy，1992年11月，pp.2423-2431。也可見美國專利No.5,210,085；WO 91/11186及WO 92/14743。
引起人的嚴(yán)重健康問題的其它病毒是乙肝病毒(下文中稱為“HBV”)。HBV是僅次于吸煙的引起人類癌癥的原因。HBV誘發(fā)癌癥的機(jī)理尚不清楚。據(jù)推測(cè)其直接引起腫瘤的惡化，或通過慢性炎癥、肝硬化及與感染有關(guān)的細(xì)胞再生間接引起腫瘤的惡化。
在2至6個(gè)月的潛伏期后，此時(shí)被感染對(duì)象尚未察覺感染，HBV感染可導(dǎo)致肝炎和肝損傷，其引起腹部疼痛、黃疸及血液中某些酶的濃度增高。HBV可引起暴發(fā)性肝炎，這是一種快速惡化常導(dǎo)致死亡的疾病，患此病時(shí)大部分肝臟被破壞。
一般來說，急性肝炎患者是可以康復(fù)的。但是，在一些患者中，高濃度的病毒抗原長(zhǎng)期或無限期保留在血液中，引起慢性感染。慢性感染可以導(dǎo)致慢性遷延性肝炎。慢性遷延性HBV患者在發(fā)展中國家最普遍。到1991年年中，僅在亞洲就有約2.25億慢性HBV攜帶者，而全世界有近3億攜帶者。慢性遷延性肝炎可以引起疲勞，肝硬化和肝細(xì)胞癌，一種主要的肝癌。
在西方工業(yè)化國家，HBV感染危險(xiǎn)性高的人群包括與HBV攜帶者或其血液樣本接觸的那些人。HBV的流行病學(xué)類似于獲得性免疫缺陷綜合征，這就是在HIV感染或AIDS患者中常見HBV感染的原因。但是，HBV較HIV更易接觸感染。
FTC和3TC都表現(xiàn)出抗HBV活性。Furman等，“順-5-氟-1-[2-(羥甲基)-1，3-氧雜硫雜環(huán)戊烷-5-基]-胞嘧啶的(-)和(+)對(duì)映異構(gòu)體的抗乙型肝炎活性、細(xì)胞毒性及代謝特性”Antimicrobial Agents andChemotherapy，1992年12月，pp.2686-2692；及Cheng等，Journal ofbiological Chemistry，Volume 267(20)，pp.13938-13942(1992)。
已開發(fā)了得自人血清的疫苗對(duì)患者進(jìn)行免疫以抗HBV。雖然已發(fā)現(xiàn)其是有效的，但是該疫苗的生產(chǎn)有一些麻煩，這是因?yàn)閺穆詳y帶者中獲得人血清受到限制，而純化步驟長(zhǎng)且成本高。此外，從不同血清中制備的每批疫苗必須在黑猩猩中檢測(cè)以確保安全。也已通過基因工程制備疫苗。每天用一種基因工程蛋白α-干擾素治療也是有希望的。
丙肝病毒(“HCV”)是輸血后感染和偶發(fā)的非甲非乙型肝炎的主要原因(Alter，H.J.(1990)J.Gastro.Hepatol.178-94；Dienstag，J.L.(1983)Gastro 85439-462)。盡管改進(jìn)了篩檢方法，在很多國家HCV仍是至少25％的急性病毒性肝炎的病因(Alter，H.J.(1990)，出處同上；Dienstag，J.L.(1983)，出處同上；Alter M.J.等，(1990a)J.A.M.A.2642231-2235；Alter M.J.等，(1992)N.Engl.J.Med.M1899-1905；Alter，M.J.等，(1990b)N.Engl.J.Med.3211494-1500)。HCV感染在慢性感染(及有傳染性的)攜帶者中以高比例隱伏，他們可能很多年不表現(xiàn)出臨床癥狀。急性感染向慢性感染(70-100％)和肝病(＞50％)轉(zhuǎn)變的高比例，其廣泛的分布及疫苗的缺乏，使HCV是發(fā)病和死亡的顯著原因。
腫瘤是細(xì)胞生長(zhǎng)的不規(guī)則的、破壞組織的增殖。如果其具有侵染性和轉(zhuǎn)移性，則腫瘤是惡性的或癌性的。侵染性指腫瘤進(jìn)入周圍組織，破壞限定組織邊界的基層，于是進(jìn)入常體循環(huán)系統(tǒng)的傾向。轉(zhuǎn)移性指腫瘤遷移至身體的其它區(qū)域并在原出現(xiàn)位點(diǎn)以外建立增殖區(qū)域的傾向。
癌癥是現(xiàn)在美國導(dǎo)致死亡的第二個(gè)原因。在美國已有8,000,000人被確診患有癌癥，預(yù)計(jì)在1994年新診斷出1,208,000。在此國家每年死于此疾病的超過500,000人。
在分子水平，人們并未充分認(rèn)識(shí)癌癥。已知細(xì)胞接觸致癌物質(zhì)如某些病毒、某些化學(xué)物質(zhì)或輻射，導(dǎo)致DNA改變，這滅活“抑制”基因或活化“致癌基因”。抑制基因是生長(zhǎng)調(diào)節(jié)基因，其突變后，再不能控制細(xì)胞生長(zhǎng)。致癌基因開始是正?；?稱為原致癌基因)，其通過突變或表達(dá)序列的改變變?yōu)檗D(zhuǎn)化基因。轉(zhuǎn)化基因的產(chǎn)物引起不適當(dāng)?shù)募?xì)胞生長(zhǎng)。通過基因的改變20多種正常細(xì)胞基因可以變?yōu)橹掳┗?。已轉(zhuǎn)化的細(xì)胞與正常細(xì)胞有很多不同，包括細(xì)胞形態(tài)，細(xì)胞-與-細(xì)胞相互作用，膜組成，細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)，蛋白分泌，基因表達(dá)和死亡(已轉(zhuǎn)化的細(xì)胞可以無限生長(zhǎng))。
機(jī)體的所有不同的細(xì)胞類型可以轉(zhuǎn)變?yōu)榱夹曰驉盒阅[瘤細(xì)胞。最常見的腫瘤位點(diǎn)是肺，然后是結(jié)腸直腸、乳房、前列腺、膀胱、胰腺，再就是卵巢。其它較普遍的癌癥類型包括白血病，中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌癥，包括腦瘤、黑素瘤、淋巴瘤、紅白血病、子宮癌及頭和頸部癌癥。
現(xiàn)在癌癥主要用如下方法之一或其聯(lián)合形式治療三年手術(shù)、放療及化療。手術(shù)包括除去大多數(shù)患病組織。雖然，有時(shí)手術(shù)在除去位于某些位點(diǎn)如乳房、直腸和皮膚的腫瘤是有效的，但是它不能用于治療位于其它區(qū)域如脊椎的腫瘤，也不能用于治療散播的腫瘤病癥如白血病。
化療包括瓦解細(xì)胞的復(fù)制或細(xì)胞代謝。它最常用來治療白血病及乳腺、肺和睪丸癌癥。
目前用于治療癌癥的化療劑有5個(gè)主要的種類天然產(chǎn)物及其衍生物；蒽環(huán)類；烷化劑；抗增殖藥(也稱為抗代謝藥)；及激素?；焺┙?jīng)常稱為抗腫瘤劑。
據(jù)信烷化劑通過將鳥嘌呤及DNA中其它可能的堿基烷基化或交聯(lián)起作用，阻止細(xì)胞分裂。典型的烷化劑包括氮芥，亞乙基亞胺化合物，烷基硫酸酯，順鉑以及多種亞硝基脲。這些化合物的缺點(diǎn)是它們不僅連接惡性細(xì)胞，也連接其它自然分裂的細(xì)胞，如骨髓、皮膚、胃腸粘膜和胎盤組織的細(xì)胞。
抗代謝劑一般是可逆的或不可逆的酶抑制劑，或干擾核酸復(fù)制、翻譯或轉(zhuǎn)錄的化合物。
已確定若干合成核苷表現(xiàn)出抗癌癥活性。具有強(qiáng)抗癌活性的熟知的核苷衍生物是5-氟尿嘧啶。5-氟尿嘧啶已用于臨床治療惡性腫瘤，例如，包括癌、肉瘤、皮膚癌、消化器官的癌癥及乳腺癌。但是5-氟尿嘧啶引起嚴(yán)重的副反應(yīng)如惡心、脫發(fā)、腹瀉、口炎、白細(xì)胞性血小板減少癥、厭食、色素沉著和水腫。具有抗癌活性的5-氟尿嘧啶的衍生物描述于美國專利No4,336,381，及日本專利申請(qǐng)Nos.50-50383，50-50384，50-64281，51-146482和53-84981。
美國專利No.4,000,137描述了肌苷、腺苷或胞苷與甲醇或乙醇經(jīng)過氧化物過氧化的產(chǎn)物具有抗淋巴細(xì)胞白血病的活性。
阿糖胞苷(也稱為Cytarabin，araC及Cytosar)是一種脫氧胞嘧啶的核苷類似物，其首先于1950年合成并于1963年作為臨床藥物。它是目前治療急性骨髓白血病的最重要的藥物。它對(duì)急性淋巴細(xì)胞白血病也有活性，而較少用于治療慢性髓細(xì)胞白血病和非何杰金氏淋巴瘤中。阿糖胞苷的主要作用是抑制核酸DNA的合成。Handschumacher，R.和Cheng，Y.，“嘌呤和嘧啶抗代謝藥”，Cancer Medicine，XV-1章，第3版，編者J.Holland等，Lea和Febigol出版。
5-阿扎胞苷屬于胞苷類，它主要用于治療急性髓細(xì)胞白血病和脊髓發(fā)育不良綜合征。
2-氟腺苷-5′-磷酸鹽(Fludara，也稱為FaraA)是治療慢性淋巴細(xì)胞白血病的最有效的藥物之一。此化合物通過抑制DNA合成起作用。用F-araA處理細(xì)胞與在GI/S期邊緣和在S期的細(xì)胞蓄積有關(guān)；因此，它是細(xì)胞循環(huán)S期的特異性藥物?；钚源x物F-araATP的摻入，阻止了DAN鏈的延伸。F-araA還是核糖核苷酸還原酶的強(qiáng)抑制劑，該酶是負(fù)責(zé)形成dATP的關(guān)鍵酶。
2-氯脫氧腺苷用于治療低級(jí)B細(xì)胞瘤如慢性淋巴細(xì)胞白血病、非何杰金氏淋巴瘤和毛細(xì)胞白血病。
在設(shè)計(jì)新的生物活性核苷時(shí)，人們幾經(jīng)嘗試將氟取代基摻入核苷的碳水化合物環(huán)中。將氟建議為取代基，是因?yàn)樗赡茏鳛榱u基的等極和等體積的模擬物，因?yàn)镃-F鍵長(zhǎng)(1.35埃)與C-O鍵長(zhǎng)(1.43埃)非常接近，且因?yàn)榉菤滏I的受體。氟用最小的空間干擾能使分子產(chǎn)生顯著的電子變化。用氟取代分子中的其它基團(tuán)可以引起底物代謝的變化，這是由于C-F鍵的高強(qiáng)度(116kcal/mol而C-H＝100kcal/mol)。
一些參考文獻(xiàn)報(bào)告了2′-阿糖基氟代核苷(即，2′-氟基團(tuán)是“向上”構(gòu)型的核苷)的合成和用途。已有若干報(bào)告報(bào)道了2-氟-β-D-呋喃阿糖基核苷表現(xiàn)出抗乙型肝炎和皰疹的活性。例如，參見美國專利No.4,666,892(Fox等)；美國專利No.4,211,773(Lopez等)；Su等，Nucleosides.136，“幾種1-(2-脫氧-2-氟-β-D-呋喃阿糖基)-5-烷基尿嘧啶的合成和抗病毒作用”；“一些構(gòu)效關(guān)系”，J.Med Chem.，1986，29，151-154；Borthwick等，“碳環(huán)2′-阿糖-氟-鳥苷一種強(qiáng)的新抗皰疹劑的合成和酶拆分，”J.Chem.Soc.，Chem.Commun，1988；Wantanabe等，“活性抗AIDS核苷3′-疊氮基-3′-脫氧胸苷(AZT)和2′，3′-二脫氧胞苷(DDC)的2′-”上“-氟類似物的合成和抗HIV活性”，J.Med.Chem.1990.33，2145-2150；Martin等，“抗人類免疫缺陷病毒(HIV-1)的嘧啶二脫氧核糖核苷的單氟和二氟代類似物的合成和抗病毒活性，”J Med，Chem.1990，33，2137-2145；Sterzycki等，“一些2′-氟代-含嘧啶核苷的合成和抗HIV活性，”J.Med.Chem.1990，及EPA0316017(由Sterzycki等申請(qǐng))；以及Montgomery等，“9-(2-脫氧-2-氟-β-D-呋喃阿糖基)鳥苷一類代謝穩(wěn)定的2′-脫氧鳥苷細(xì)胞毒類似物”，美國專利No.5,246,924公開了治療肝炎的方法，包括使用1-(2′-脫氧-2′-氟-β-D-呋喃阿糖基)-3-乙基尿嘧啶)，也稱為“FEAU”。美國專利No.5,034,518公開了2-氟-9-(2-脫氧-2-氟-β-D-呋喃阿糖基)腺嘌呤核苷類，其通過降低化合物作為胸苷底物的能力來改變腺嘌呤核苷的代謝而表現(xiàn)出抗癌活性。EPA 0292023公開了某些β-D-2′-氟代阿糖基核苷有抗病毒感染活性。
美國專利No.5,128,458公開了抗病毒劑β-D-2′，3′-二脫氧-4′-硫代核糖核苷。美國專利No.5,446,029公開了具有抗肝炎活性的2′，3′-二脫氧-3′-氟代核苷。
歐洲專利申請(qǐng)No.0409227A2公開了用于治療乙型肝炎的某些3′-取代的β-D-嘧啶和嘌呤核苷。
還公開了L-FMAU(2′-氟-5-甲基-β-L-呋喃阿糖基尿嘧啶)是一種強(qiáng)抗-HBV和抗-EBV劑。見Chu等，“2′-氟-5-甲基-β-L-呋喃阿糖基尿嘧啶作為新的抗病毒劑治療乙型肝炎病毒和EB病毒的用途”Antimicrobial Agents and Chemotherapy，1995年4月，979-981頁；Balakrishna等，“用新的L-核苷，2′-氟-5-甲基-β-L-呋喃阿糖基尿嘧啶抑制乙型肝炎病毒”，Antimicrobial Agents and Chemotherapy，1996年2月，380-356頁；美國專利Nos.5,587,362；5,567,688；及5,565,438。
美國專利Nos.5,426,183和5,424,416公開了制備2′-脫氧-2′，2′-二氟代核苷和2′-脫氧-2′-氟代核苷的方法。還可參見“2′，2′-二氟脫氧胞苷(吉西他濱)與純化的人脫氧胞苷激酶和胞苷脫氨基酶的動(dòng)力學(xué)研究”，BioChemical Pharmacology，Vol.45(No.9)4857-1861頁，1993。
美國專利No.5,446,029(Eriksson等)公開了具有抗乙型肝炎活性的某些2′，3′-二脫氧-3′-氟代核苷。美國專利No.5,128,458公開了某些2′，3′-二脫氧-4′-硫代核苷，其中3′-取代基是H、疊氮化物或氟。WO94/14831公開某些3′-氟-二氫嘧啶核苷。WO92/08727公開了β-L-2′-脫氧-3′-氟-5-取代的尿苷核苷，用于治療單純皰疹1和2。
EPA公開號(hào)No.0352248公開了一大類用于治療HIV、皰疹和肝炎的L-呋喃核糖基嘌呤核苷。雖然某些2′-氟代嘌呤核苷屬于此大類中，但是在其說明書沒有給出制備這些化合物的信息，且它們不在特別公開或說明書中列出的優(yōu)選之列。該說明書沒有公開如何制備3′-呋喃核糖基氟化核苷。類似的說明發(fā)現(xiàn)于WO 88/09001(Aktiebolaget Astra申請(qǐng))。
歐洲專利申請(qǐng)0357571公開了一大組用于治療AIDS的β-D和α-D嘧啶核苷，在此大組中一般性地包括2′或3′位可以被氟基團(tuán)取代的核苷。但是，在此大組中沒有特別公開2′-氟代核苷或其制備方法。
EPA 0 463 470公開制備(5S)-3-氟-四氫-5[(羥基)甲基]-2-(3H)-呋喃酮的制備方法，其是制備2′-氟-2′，3′-二脫氧核苷如2′-氟-2′，3′-二脫氧胞苷的一種已知的中間體。
U.S.S.N.07/556,713公開了β-D-2′-氟呋喃阿糖基核苷，及其制備方法，它們是合成2′，3′-二脫氧-2′-氟阿糖基核苷的中間體。
美國專利No.4,625,020公開了由1，3，5-三-O-?；?呋喃核糖制備帶有保護(hù)基的1-鹵代-2-脫氧-2-氟呋喃阿糖基衍生物的方法。
對(duì)用于醫(yī)療用途包括治療HIV、肝炎(乙型或丙型)或增殖病癥的β-L-2′-氟-呋喃核糖基核苷的公開很缺乏。至少有關(guān)2′-呋喃核糖基核苷，這可能是由于以前感覺將氟基團(tuán)置于2′-呋喃核糖基構(gòu)型中是困難的。對(duì)于L-2′-氟-2′，3′-不飽和嘌呤核苷，可能是由于嘌呤核苷在酸性介質(zhì)中不穩(wěn)定，導(dǎo)致葡糖基鍵的斷裂。
考慮到HIV獲得性免疫缺陷綜合征，AIDS-相關(guān)綜合征和乙型肝炎及丙型肝炎病毒在全世界傳播，并對(duì)感染的患者造成悲慘影響的事實(shí)，還存在為了治療這些疾病提供新的、有效的、對(duì)所治療的對(duì)象低毒的藥劑的要求。此外，還存在提供新的抗增殖劑的需求。
因此，本發(fā)明的目的之一是提供治療感染了乙型肝炎或丙型肝炎的病人的方法和組合物。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供治療感染了HIV的病人的方法和組合物。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供新的抗增殖劑。
本發(fā)明又一個(gè)目的是提供制備2′-氟-呋喃核糖基核苷的新方法。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供制備2′，3′-二脫氧-2′，3′-二脫氫-2′-氟-L-甘油基-戊-2-烯基-呋喃糖基核苷的新方法。
發(fā)明概述在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了結(jié)構(gòu)如下的2′-α-氟-核苷
其中堿基是如本文中進(jìn)一步定義的嘌呤或嘧啶堿基；R1是OH、H、OR3、N3、CN、鹵素包括F、或CF3、低級(jí)烷基、氨基、低級(jí)烷基氨基、二低級(jí)烷基氨基、或烷氧基，而堿基指嘌呤或嘧啶堿基；R2是H、磷酸根包括單磷酸根，二磷酸根，三磷酸根，或穩(wěn)定的磷酸鹽前藥；?；?，或其它藥用離去基團(tuán)，當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)該基團(tuán)能提供R2是H或磷酸根的化合物；磺酸酯包括烷基或芳烷基磺酰基(包括甲基磺?；?、芐基(其中苯基選擇性被一個(gè)或多個(gè)上述芳基定義中所述的取代基取代)、脂類(包括磷脂)、氨基酸、肽或膽固醇；而R3是?；?、烷基、磷酸根或其它藥用離去基團(tuán)，即當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)能裂解為母體化合物的基團(tuán)。
在第二個(gè)實(shí)施方案中，提供了下式的2’-氟代核苷 其中取代基定義如上。
在第三個(gè)實(shí)施方案中，提供了下式的2’-氟代核苷
其中取代基定義如上。
在第四個(gè)實(shí)施方案中，提供了結(jié)構(gòu)如下的2’-氟代核苷 其中取代基定義如上。
這些2’-氟代核苷可以是β-L或β-D構(gòu)型。優(yōu)選β-L構(gòu)型。
此類2’-氟代核苷是生物活性分子，它們用于治療乙型肝炎、丙型肝炎或HIV。這些化合物還用于治療細(xì)胞異常增殖，包括腫瘤和癌癥。通過本文中描述的檢測(cè)方法或用其它確認(rèn)檢測(cè)方法評(píng)價(jià)該化合物，可以容易地確定活性譜。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，為了治療肝炎或HIV，此活性化合物或其衍生物或鹽可以與其它抗病毒劑(例如抗HIV劑或抗肝炎劑，包括如上結(jié)構(gòu)式所述的)聯(lián)合或交替給藥。一般來說，在聯(lián)合治療中，有效量的兩種或多種試劑一起給藥，而在交替治療中，有效量的各種試劑按順序給藥。給藥量取決于藥物的吸收、滅活和排泄速度以及本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它因素。需要提及的是該劑量也將隨被治療的病癥的嚴(yán)重性變化。還應(yīng)進(jìn)一步理解對(duì)于任何特定的對(duì)象，特定的劑量方案和程序按照個(gè)體的需要和給藥者或指導(dǎo)這些組合物給藥的人憑借專業(yè)判斷隨時(shí)間進(jìn)行調(diào)整。
可以與本文中公開的化合物聯(lián)合的抗病毒劑的非限制性實(shí)例包括2-羥甲基-5-(5-氟胞嘧啶-1-基)-1，3-氧雜硫雜環(huán)戊烷(FTC)；2-羥甲基-5-(胞嘧啶-1-基)-1，3-氧雜硫雜環(huán)戊烷(3TC)的(-)-對(duì)映異構(gòu)體；卡波佛，阿昔洛韋，干擾素，泛昔洛韋，噴昔洛韋，AZT，DDI，DDC，D4T，abacavir，L-(-)-FMAU，L-DDA磷酸鹽前藥及β-D-二氧雜環(huán)戊烷核苷如β-D-二氧雜環(huán)戊烷基-鳥嘌呤(DG)，β-D-二氧雜環(huán)戊烷基-2，6-二氨基嘌呤(DAPD)，以及β-D-二氧雜環(huán)戊烷基-6-氯嘌呤(ACP)，非核苷類RT抑制劑如奈韋拉平，MKC-442，DMP-266(sustiva)及蛋白酶抑制劑如indinavir，沙奎那韋，AZT，DMP-450等。
這些化合物還可以用于治療馬傳染性貧血病毒(EIAV)，貓免疫缺陷病毒及類人猿免疫缺陷病毒(Wang，S.，Montelaro，R.，Schinazi，R.F.，Jagerski，B.和Mellors，J.W.“核苷和非核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(NNRTI)抗馬傳染性貧血病毒(EIAV)的活性”，F(xiàn)irst NationalConference on Human Retro viruse and Related lnfections，Washington，DC，1993年12月12-16日；Sellon D.C.，“馬傳染性貧血”，Vet.Clin.North Am.Equine Pract.美國，9321-336，1993；Philpott，M.S.，Ebner，J.P.，Hoover，E.A.，“用定量聚合酶鏈反應(yīng)評(píng)價(jià)9-(2-磷酰基甲氧基乙基)腺嘌呤對(duì)貓免疫缺陷病毒的治療”，Vet.Immunol.Immunopathol.35155166，1992)。
還提供了將氟引入非碳水化合物糖環(huán)前體上的新的和徹底的非對(duì)映體選擇性的方法。該方法包括手性的、非碳水化合物糖環(huán)前體(4S)-5-(保護(hù)的氧基)-戊-4-交酯(其可以由L-谷氨酸制備)與氟的親電子來源包括但不限于N-氟-(雙)苯磺酰亞胺反應(yīng)，得到關(guān)鍵中間體氟代內(nèi)酯6。將此氟代內(nèi)酯還原為內(nèi)半縮醛并乙?；玫蕉嘶悩?gòu)的乙酸酯，然后用于合成-些新的β-L-α-2’-氟代核苷。也可用D-谷氨酸作為起始物合成相應(yīng)的D-對(duì)映異構(gòu)體。
在另一個(gè)可替換的實(shí)施方案中，制備脫氫的氟化的烯糖，然后轉(zhuǎn)變?yōu)?’，3’-二脫氧-2’，3’-二脫氫-2’-氟代核苷或β-L或β-D-阿糖基-2’-氟代核苷，如下文所述。
還給出了制備2’，3’-二脫氧-2’，3’-二脫氫-2’-氟代核苷的簡(jiǎn)單方法，該方法包括將硅烷基化的6-氯代嘌呤與關(guān)鍵中間體直接縮合，該關(guān)鍵中間體由L-2，3-O-亞異丙基甘油醛(glyceraldenhyde)。
發(fā)明詳述此處公開的本發(fā)明涉及一種治療人或其它動(dòng)物宿主的HIV、肝炎(乙型或丙型)或異常細(xì)胞增殖的化合物、方法及組合物，其中包括使用選擇性存在于藥用載體中的有效量的2’-氟-核苷，一種藥用衍生物(包括在5′-位或在嘌呤或嘧啶上已進(jìn)行了烷基化或?；幕衔?，或其藥用鹽。本發(fā)明的化合物具有抗病毒(即抗HIV-1、抗HIV-2或抗肝炎(乙型或丙型))活性，或抗增殖活性，或代謝為具有這些活性的化合物。
概括地說，本發(fā)明包括下列特征(a)β-L和β-D-2’-氟代核苷，如本文所述，及其藥用衍生物和藥用鹽，(b)β-L和β-D-2’-氟代核苷，如本文所述，及其藥用衍生物和藥用鹽，它們用于藥物治療，例如，治療或預(yù)防HIV或肝炎(乙型或丙型)感染或治療異常細(xì)胞增殖；(c)2’，3’-二脫氧-2’，3’-二脫氫-2’-氟-L-甘油基-戊-2-烯基-呋喃糖基核苷，及其藥用衍生物和藥用鹽，它們用于藥物治療，例如，治療或預(yù)防HIV或肝炎(乙型或丙型)感染或治療異常細(xì)胞增殖；(d)這些2’-氟代核苷及其藥用衍生物和其鹽在制備治療HIV或肝炎感染或治療異常細(xì)胞增殖的藥物中的用途；(e)含2’-氟代核苷或其藥用衍生物或其鹽和藥用載體或稀釋劑的藥物制劑；(f)制備β-L和β-D-2’-α-氟代核苷的方法，詳見下文，及(g)制備2’，3’-二脫氧-2’，3’-二脫氫-2’-氟-L-甘油基-戊-2-烯基-呋喃糖基核苷的方法。
I.活性化合物，及其生理可接受的衍生物和鹽提供結(jié)構(gòu)如下的2’-α-氟-核苷 其中R1是OH、H、OR3、N3、CN、鹵素(包括F)、或CF3，低級(jí)烷基、氨基、低級(jí)烷基氨基、二低級(jí)烷基氨基、或烷氧基，而堿基指嘌呤或嘧啶堿基；R2是H，磷酸根包括單磷酸根、二磷酸根、三磷酸根，或穩(wěn)定的磷酸鹽前藥；酰基，或其它藥用離去基團(tuán)，當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)該基團(tuán)能提供R2是H或磷酸根的化合物；磺酸酯包括烷基或芳烷基磺?；?包括甲基磺酰基)、芐基(其中苯基選擇性被一個(gè)或多個(gè)上述芳基定義中所述的取代基取代)、脂類(包括磷脂)、氨基酸、肽或膽固醇；而R3是?；?、烷基、磷酸根或其它藥用離去基團(tuán)，即當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)能裂解為母體化合物的基團(tuán)。
在第二個(gè)實(shí)施方案中，提供了下式的2’-氟代核苷 在第三個(gè)實(shí)施方案中，提供了下式的2’-氟代核苷 在第四個(gè)實(shí)施方案中，提供了結(jié)構(gòu)如下的2’-氟代核苷 在本文中，除非特別說明，術(shù)語烷基指飽和的直鏈、支鏈或環(huán)狀伯、仲或叔C1至C10烴，并特別包括甲基，乙基，丙基，異丙基，環(huán)丙基，丁基，異丁基，叔丁基，戊基，環(huán)戊基，異戊基，新戊基，己基，異己基，環(huán)己基，環(huán)己基甲基，3-甲基戊基-2，2-二甲基丁基，及2，3-二甲基丁基。此烷基可以被一個(gè)或多個(gè)選自如下的部分選擇性取代羥基，氨基，烷基氨基，芳基氨基，烷氧基，芳氧基，硝基，氰基，磺酸，硫酸根，膦酸，磷酸根或膦酸根，它們可以是未保護(hù)的或按照需要保護(hù)，如本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，例如Greene等，Protective Groups inOrganicSynthesis，John Wiley和Sons，第二版，1991所教導(dǎo)的，在此引入作為參考。
在本文中術(shù)語低級(jí)烷基，除非特別說明，指C1至C4的飽和直鏈、支鏈或環(huán)(如果適當(dāng)，例如環(huán)丙基)烷基。
術(shù)語烷基氨基或芳基氨基指分別帶有一個(gè)或兩個(gè)烷基或芳基取代基的氨基。
術(shù)語“保護(hù)”在本文中除非另行限定，指加在氧原子、氮原子或磷原子上以防止進(jìn)一步反應(yīng)或?yàn)榱似渌康亩拥幕鶊F(tuán)。氧原子或氮原子的多種保護(hù)基是有機(jī)合成領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。本文中，術(shù)語芳基除非特別說明，指苯基、聯(lián)苯基或萘基，并優(yōu)選苯基。芳基可以被選自如下的一種或多種部分選擇性取代羥基，氨基，烷基氨基，芳基氨基，烷氧基，芳氧基，硝基，氰基，磺酸，硫酸根，膦酸，磷酸根或膦酸根，它們可以是未保護(hù)的或按照需要保護(hù)，如本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，例如Greene等，Protective Groups in OrganicSynthesis，John Wiley和Sons，第二版，1991所教導(dǎo)的。
術(shù)語烷芳基或烷基芳基指帶有芳基取代基的烷基。術(shù)語芳烷基或芳基烷基指帶有烷基取代基的芳基。
術(shù)語鹵素，在本文中，包括氯、溴、碘和氟。
術(shù)語嘌呤或嘧啶堿基包括但不限于腺嘌呤，N6-烷基嘌呤，N6-酰基嘌呤(其中?；荂(O)(烷基，芳基，烷基芳基，或芳基烷基)，N6-芐基嘌呤，N6-鹵代嘌呤，N6-乙烯基嘌呤，N6-乙基嘌呤，N6-?；堰?，N6-羥基烷基嘌呤，N6-硫代烷基嘌呤，N2-烷基嘌呤，N2-烷基-6-硫代嘌呤，胸腺嘧啶，胞嘧啶，5-氟胞嘧啶，5-甲基胞嘧啶，6-氮雜嘧啶(包括6-氮雜胞嘧啶)，2-和/或4-巰基嘧啶，尿嘧啶，5-鹵代尿嘧啶(包括5-氟尿嘧啶)，C5-烷基嘧啶，C5-芐基嘧啶，C5-鹵代嘧啶，5-乙烯基嘧啶，C5-乙炔基嘧啶，C5-?；奏?，C5-羥基烷基嘌呤，C5-酰氨基嘧啶，C5-氰基嘧啶，C5-硝基嘧啶，C5-氨基嘧啶，N2-烷基嘌呤，N2-烷基-6-硫代嘌呤，5-氮雜胞嘧啶基，5-氮雜尿嘧啶基，三氮雜環(huán)戊并吡啶基，咪唑并吡啶基，吡咯并嘧啶基和吡唑并嘧啶基。嘌呤堿基包括但不限于鳥嘌呤，腺嘌呤，次黃嘌呤，2，6-二氨基嘌呤和6-氯嘌呤。堿基上的官能氧或氮原子基團(tuán)可以按照需要或要求保護(hù)。適宜的保護(hù)基是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的，并包括三甲基甲硅烷基、二甲基己基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基和叔丁基聯(lián)苯基甲硅烷基、三苯甲基、烷基、?；缫阴；捅；⒓谆酋；蛯?duì)甲苯磺?；?br> 對(duì)患者進(jìn)行給藥時(shí)，可以以能直接或間接提供母體化合物或其本身具有活性的任何衍生物的形式使用活性化合物。非限制性實(shí)例為藥用鹽(或者稱為“生理可接受的鹽”)，或在5′-位或嘌呤或嘧啶堿基上已進(jìn)行了烷基化或?；幕衔?或者稱為“藥用衍生物”)。此外，修飾可以影響此化合物的生物活性，在某些情況下增加母體化合物的活性。通過制備衍生物并按照本文中描述的方法或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它方法檢測(cè)其抗病毒活性可以容易地評(píng)價(jià)該化合物。
術(shù)語?；隔人狨?，其中酯基的非羰基部分選自直鏈、支鏈或環(huán)烷基或低級(jí)烷基，烷氧基烷基包括甲氧基甲基，芳烷基包括芐基，芳氧基烷基如苯氧基甲基，芳基包括選擇性地被鹵素，C1至C4烷基或C1至C4烷氧基取代的苯基，磺酸酯如烷基或芳烷基磺酰基包括甲磺?；瑔?、二或三磷酸酯，三苯甲基或單甲氧基三苯甲基，取代的芐基，三烷基甲硅烷基(例如二甲基叔丁基甲硅烷基)或二苯基甲基甲硅烷基。在酯中芳基最好包括苯基。
在本文中，術(shù)語“基本上沒有”或“基本上缺乏”指核苷組合物含有至少95％至98％，或更優(yōu)選99％至100％的此核苷的指定的對(duì)映異構(gòu)體。
核苷前藥制劑本文中描述的任何核苷可以以核苷前藥的形式給藥以增加該核苷的活性、生物利用度、穩(wěn)定性或改變其性質(zhì)。一些核苷酸前藥配體是已知的。總的來說，對(duì)核苷的單、二或三磷酸鹽進(jìn)行烷基化、?；蚱渌H酯性修飾會(huì)增加此核苷酸的穩(wěn)定性?？商鎿Q磷酸根上的一個(gè)或多個(gè)氫原子的取代基的實(shí)例為烷基、芳基、甾類、碳水化合物，包括糖、1，2-二酰基甘油和醇。很多描述于R.Jones和N.Bischofberger，AntiviralResearch，27(1995)1-17。其中任何化合物可以與本文中公開的核苷聯(lián)合使用以達(dá)到所需的效果。
此活性核苷還可以以5’-磷醚脂或5’-醚脂的形式提供，如下列文獻(xiàn)中所公開的，將它們引入本文作為參考Kucera，L.S.，N.lyer，E.Leake，A.Raben，Modest E.K.，D.L.W.，及C.Piantadosi.1990，“抑制傳染性HIV-1產(chǎn)生和誘發(fā)缺陷病毒形成的新的膜相互作用醚脂類”，AIDS Res.Hum.Retro Viruses.6491-501；Piantadosi，C.，J.MarascoC.J.，S.L.Morris-Natschke，K.L.Meyer，F(xiàn).Gumus，J.R.Suries，K.S.Ishaq，L.S.Kucera，N.Iyer，C.A.Wallen，S.Piantadosi，及E.J.Modest.1991，“新的醚脂核苷共軛物的合成并評(píng)價(jià)其抗HIV活性”，J.Med Chem.341408，1414；Hosteller，K.Y.，D.D.Richman，D.A.Carson，L.M.Stuhmiller，G.M.T.van Wijk，及H.van den Bosch.1992，“用3′-脫氧胸腺嘧啶二磷酸鹽二肉豆蔻?；视?，一種3′-脫氧胸腺嘧啶的脂類前藥，極大地提高了對(duì)CEM和HT4-6C細(xì)胞中1型人類免疫缺陷病毒復(fù)制的抑制”，Antimicrob.Agents Chemother.362025.2029；Hosetler，K.Y.，L.M.Stuhmiller，H.B.Lenting，H.vanden Bosch，及D.D.Richman，1990，“疊氮基胸苷和其它抗病毒核苷的磷脂類似物的合成和抗逆轉(zhuǎn)錄病毒活性”，J.BioL Chem.26561127。
公開了可以共價(jià)鍵接在核苷上，優(yōu)選在核苷的5’-OH位的適宜的親脂取代基或親脂制劑的美國專利的非限制性實(shí)例，包括美國專利Nos.5,149,794(1992年9月22日，Yatvin等)；5,194,654(1993年3月16日，Hostetler等)，5,223,263(1993年6月29日，Hostetler等)；5,256,641(1993年10月26日，Yatvin等)；5,411,947(1995年5月2日，Hostetler等)；5,463,092(1995年10月31日，Hostetler等)；5,543,389(1996年8月6日，Yatvin等)；5,543,390(1996年8月6日，Yatvin等)；5,543,391(1996年8月6日，Yatvin等)；及5,554,728(1996年9月10日；Basava等)，將所有內(nèi)容引入本文作為參考。公開了可以連接本發(fā)明的核苷的親脂取代基或親脂制劑的外國專利，包括WO 89/02733，WO 90/00555，WO 91/16920，WO 91/18914，WO 93/00910，WO 94/26273，WO 96/15132，EP 0350287，EP 93917054.4，及WO 91/19721。
核苷酸前藥的非限制性實(shí)例描述于下列文獻(xiàn)Ho，D.H.W.(1973)“1β-D-呋喃阿糖基胞嘧啶的激酶和脫氨基酶在人和小鼠組織中的分布”，Cancer Res.33，2816-2820；Holy，A.(1993)等極磷修飾的核苷酸類似物“，見De Clercq(編輯)，Advancesin Antiviral Drug DesignVol.1，JAI Press，pp.179-231；Hong，C.I.，Nechaev，A.，和West，C.R.(1979a)“氫化可的松和可的松的1-β-D-呋喃阿糖基胞嘧啶軛合物的合成和抗腫瘤活性”，Bicohem.Biophys.Rs.Commun.88，1223-1229；Hong，C.I.，Nechaev，A.，Kirisits，A.J.Buchheit，D.J.和West，C.R.(1980)“作為潛在的抗腫瘤劑的核苷軛合物，3.皮質(zhì)類固醇和所選擇的親脂醇的1-(β-D-呋喃阿糖基)胞嘧啶軛合物的合成及抗腫瘤活性”，J.Med.Chem.28，171-177；Hosteller，K.Y.，Stuhmiller，L.M.，Lenting，H.B.M.van den Bosch，H.和Richman J.Biol.Chem.265，6112-6117；Hosteller，K.Y.，Carson，D.A.和Richman，D.D.(1991)；“磷脂?；B氮基胸苷在CEM細(xì)胞中抗病毒的機(jī)理”，J.Biol.Chem.266，11714-11717；Hosteller，K.Y.，Korba，B.Sridhar，C.，Gardener，M.(1994a)“磷脂?；?二脫氧胞苷在乙型肝炎感染的細(xì)胞中的抗病毒活性和在小鼠中提高的肝攝入”，Antiviral Res.24，59-67；Hosteller，K.Y.，Richman，D.D.，Sridhar.C.N.Felgner，P.L.Felgner，J.，Ricci，J.，Gardener，M.F.Selleseth，D.W.和Ellis，M.N.(1994b)“磷脂?；B氮基胸苷和磷脂?；?ddC在小鼠淋巴組織的吸收和在人免疫缺陷病毒感染的細(xì)胞中及在rauscher白血病感染小鼠中抗病毒活性的評(píng)價(jià)”，Antimicrobial Agents Chemother.38，2792-2797；Hunston，R.N.，Jones，A.A.McGuigan，C.，Walker，R.T.，Balzarini，J.，和DeClercq，E.(1984)“得自2′-脫氧-5-氟尿苷的一些環(huán)磷酸三酯的合成和生物性質(zhì)”，J.Med Chem.27，440-444；Ji，Y.H.，Moog，C.，Schmitt，G.，Bischoff，P.和Luu，B.(1990)；“作為潛在的抗腫瘤劑的7-β-羥基膽固醇和嘧啶核苷的單磷酸酯合成及抗腫瘤活性的初步評(píng)價(jià)”，J.Med Chem.33 2264-2270；Jones，A.S.，McGuigan，C.，Walker，R.T.，Balzarini，J.和DeClercq，E.(1984)“一些核苷環(huán)磷酰胺的合成、性質(zhì)及生物活性”，J.Chem.Soc.Perkin Trans.I，1471-1474；Juodka，B.A.和Smrt，J.(1974)“二核糖核苷磷(P→N)氨基酸衍生物的合成”，Coll.Czech.Chem.Comm.39，363-968；Kataoka，S.，Imai，J.，Yamaji，N.，Kato，M.，Saito，M.，Kawada，T.和Imai，S.(1989)“烷基化的cAMP衍生物；選擇性合成和生物活性”，NucleicAcids Res，Sym.Ser.21，1-2；Kataoka，S.，Uchida，“(cAMP)芐基和甲基三酯”，Heterocycles 32，1351-1356；Kinchington，D.，Harvey，J.J.，O′Comor，T.J.，Jones，B.C.N.M.，Devine，K.G.，Taylor-RobinsonD.，Jeffiies，D.J.和McGuigan，C.(1992)“齊多夫定的氨基磷酸酯和二氨基磷酸酯衍生物體外抗HIV和ULV的抗病毒作用的比較”，Antiviral Chem.Chemother.3，107-112；Kodmna，K.，Morozumi，M.，Saithoh，K.I.，Kuninaka，H.，Yosino，H.和Saneyoshi，M.(1989)“1-β-D-呋喃阿糖基胞嘧啶-5’-硬脂基磷酸酯的抗腫瘤活性和藥物學(xué)；一種1-β-D-呋喃阿糖基胞嘧啶的口服活性衍生物”，Jpn.J.Cancer Res.80，679-685；Korty，M.和Engels，J.(1979)“腺苷-和鳥苷3’，5’磷酸和芐基酯對(duì)豚鼠心室心肌的作用”，Naunyn-Schmiedeberg’s Arch。Pharmacol.310，103-111；Kumar，A.，Goe，P.L.，Jones，A.S.Walker，R.T.Balzarini，J.和DeClereq，E.(1990)“一些環(huán)氨基磷酸酯核苷衍生物的合成及生物評(píng)價(jià)”，J.Med.Chem，33，2368-2375；LeBec，C.和Huynh-Dinh，T.(1991)“5-氟尿苷的磷酸三酯衍生物，一種阿糖基作為抗癌前藥的阿糖胞苷的合成”，Tetrahedron Lett.32，6553-6556；Lichtenstein，J.，Barner.H.D.和Cohen，S.S.(1960)“得自Escherichiacoli.的外源性核苷酸的代謝”，J.Biol.Chem.235，457-465；Lucthy，J.，Von Daeniken，A.，F(xiàn)riederich，J.Manthey，B.，Zweifel，J.，Schlafter，C.和Bem，M.H.(1981)“天然氰基表硫代烷烴的合成和毒性”，Mitt.Geg.Lebensmittelunters.Hyg.72，131-133(Chem.Abstr.95，127093)；McGigan，C.Tollerfield，S.M.和Riley，P.a.(1989)“抗病毒藥物Ara的一些磷酸三酯的合成和生物評(píng)價(jià)”，Nucleic Acids Res.17，6065-6075；McGuigan，C.，Devine，K.G.，O′Connor，T.J.，Galpin，S.A.，Jeffries，D.J.和Kinchington，D.(1990a)“抗HIV化合物3′-疊氮基-3′-脫氧胸苷(AZT)的一些新的氨基磷酸酯衍生物的合成和評(píng)價(jià)”，Antiviral Chem.Chemother.I 107-113；McGuigan，C.，O′Connor，T.J.，Nicholls，S.R.Nickson，C.和Kinchington，D.(1990b)“AZT和ddCyd的一些新的取代的二烷基磷酸酯衍生物的合成和抗HIV活性”，Antiviral Chem.Chemother.1，355-360；McGuigan，C.，Nicholls，S.R.，O′Connor，T.J.，和Kinchington，D.(1990c)“作為潛在的抗AIDS藥物的3′-修飾的核苷的一些新的二烷基磷酸酯衍生物的合成”，Antiviral Chem.Chemother.1，25-33；McGuigan，C.，Devin，K.G.，O′Cornnor，T.J.，和Kinchington，D.(1991)“3’-疊氮基-3’-脫氧胸苷(AZT)的一些鹵代烷基氨基磷酸酯衍生物的合成和抗HIV活性；三氯乙基甲氧基丙氨?；衔锏膹?qiáng)活性”，Antiviral Res.15，255-263；McGuigan，C.，Pathirana，R.N.，B，J.和DeCiercq，E.(1993 b)“通過AZT的芳基磷酸酯衍生物進(jìn)行的生物活性AZT核苷酸的細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)”，J.Med Chem.36，1048-1052。
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II.聯(lián)合和交替治療已認(rèn)識(shí)到在長(zhǎng)時(shí)間用抗病毒劑治療可以出現(xiàn)HIV和HBV的抗藥變體?？顾幮宰畛Ｍㄟ^編碼用于病毒復(fù)制的酶的基因的突變產(chǎn)生，并在HIV的情況下，最普遍的是逆轉(zhuǎn)錄酶，蛋白酶或DNA聚合酶，而對(duì)于HBV，是DNA聚合酶。最近，已表明通過與主藥引起不同突變的第二種，也許第三種抗病毒化合物聯(lián)合或交替使用該化合物，藥物抗HIV感染的效果可以延長(zhǎng)、增加或保持。或者，通過此聯(lián)合或交替治療，該藥物的藥代動(dòng)力學(xué)、生物分布或其它參數(shù)可以改變?？傊?，聯(lián)合治療一般較交替治療更被優(yōu)選，這是因?yàn)槠鋵?duì)病毒引起多重刺激應(yīng)力。
在一個(gè)實(shí)施方案中，治療HIV用的第二種抗病毒劑可以是逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(一種“RTI”)，其可以是合成的核苷(一種“NRTI”)或非核苷化合物(一種“NNRTI”)。在一個(gè)實(shí)施方案中，對(duì)于HIV，第二種(或第三種)抗病毒劑可以是蛋白酶抑制劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，第二種(或第三種)可以是焦磷酸酯類似物或融合結(jié)合抑制劑。一些抗病毒化合物體外和體內(nèi)的抗藥性數(shù)據(jù)見Schinazi等，與抗藥性有關(guān)的逆轉(zhuǎn)錄病毒基因突變，International Antiviral News，1997。
用于聯(lián)合或交替治療HBV的優(yōu)選化合物包括3TC，F(xiàn)TC，L-FMAU，干擾素，β-D-二氧雜環(huán)戊烷基-鳥嘌呤(DXG)，β-D-二氧雜環(huán)戊烷基2，6-二氨基嘌呤(DAPD)和β-D-二氧雜環(huán)戊烷基-6-氯嘌呤(ACP)，泛昔洛韋，噴昔洛韋，BMS-200475，bis pom PMEA(adefovir，dipivoxil)；lobucavir，更昔洛韋及利巴韋林。
可以與本文中公開的化合物聯(lián)合或交替治療的抗病毒劑的優(yōu)選實(shí)例包括順-2-羥甲基-5-(5-氟胞嘧啶-1-基)-1，3-硫雜環(huán)戊烷(FTC)；2-羥甲基-5-(胞嘧啶-1-基)-1，3-氧雜硫雜環(huán)戊烷(3TC)的(-)-對(duì)映異構(gòu)體；卡波佛，阿昔洛韋，磷卡萘替，干擾素，AZT，DDI，DDC，D4T，CS-87(3’-疊氮基-2’，3’-二脫氧-尿苷)和β-D-二氧雜環(huán)戊烷核苷如β-D-二氧雜環(huán)戊烷基-鳥嘌呤(DXG)，β-D-二氧雜環(huán)戊烷基-2，6-二氨基嘌呤(DAPD)和β-D-二氧雜環(huán)戊烷基-6-氯嘌呤(ACP)，MKC-442(6-芐基-1-(乙氧基甲基)-5-異丙基尿嘧啶。
優(yōu)選的蛋白酶抑制劑包括crixivan(Merck)，nelfinavir(Agouron)，ritonavir(Abbott)，沙奎那韋(Roche)，DMP-266(Sustiva)和DMP-450(DuPont Merck)。
可以與任何公開的核苷聯(lián)合或交替給藥的化合物的更綜合的列表包括(1S，4R)-4-[2-氨基-6-環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-環(huán)戊烯-1-甲醇琥珀酸酯(“1592”，一種卡波佛類似物；GlaxoWellcome)；3TC(-)-B-L-2’，3’-二脫氧-3’-硫雜胞苷(GlaxoWellcome)；a-APA R18893a-硝基-苯氨基-苯基乙酰胺；A-77003；C2對(duì)稱的蛋白酶抑制劑(Abbott)；A-75925C2對(duì)稱蛋白酶抑制劑(Abbott)；AAP-BHAP雙雜芳基哌嗪類似物(Upjohn)；ABT-538C2對(duì)稱蛋白酶抑制劑(Abbott)；AzddU3’-疊氮基-2’，3’-二脫氧尿苷；AZT3’-疊氮基-3’-脫氧胸苷(GlaxoWellcome)；AZT-p-ddI3’-疊氮基-3’-脫氧胸苷基-(5’，5’)-2’，3’-二脫氧次黃嘌呤核苷酸(Ivax)；BHAP雙雜芳基哌嗪；BILA 1906N-{1S-[[[3-[2S-{(1，1-二甲基乙基)氨基]羰基}-4R-]3-吡啶基甲基)硫代]-1-哌啶基]-2R-羥基-1S(苯基甲基)丙基]氨基]羰基]-2-甲基丙基}-2-喹啉甲酰胺(Bio Mega/Boehringer-Ingelheim)；BILA 2185N-(1，1-二甲基乙基)-1-[2S-[[2-2，6-二甲基苯氧基)-1-氧代乙基)氨基]-2R-羥基-4-苯基丁基]-4R-吡啶基硫代)-2-哌啶甲酰胺(BioMega/Boehringer-Ingelheim)；BM+51.0836噻唑并-異二氫吲哚酮衍生物；BMS 186，318氨基二醇衍生物HIV-1蛋白酶抑制劑(Bristol-Myers-Squibb)；d4API9-[2，5-二氫-5-(磷?；籽趸?-2-呋喃基]腺嘌呤(Gilead)；d4C2’，3’-二脫氫-2’，3’-二脫氧胞苷；d4T2’，3’-二脫氫-3’-脫氧胸苷(Bristol-Myers-Squibb)；ddC；2’，3’-二脫氧胞苷(Roche)；ddI2’，3’-二脫氧肌苷(Bristol-Myers-Squibb)；DMP-2661，4-二氫-2H-3，1-苯并嗪-2-酮；DMP-450{[4R-(4-a，5-a，6-b，7-b)]-六氫-5，6-雙(羥基)-1，3-雙(3-氨基)苯基]甲基)-4，7-雙(苯基甲基)-2H-1，3-二氮雜環(huán)庚三烯-2-酮}-雙甲磺酸酯(Avid)；DXG(-)-β-D-二氧雜環(huán)戊烷鳥苷(Triangle)；EBU-dM5-乙基-1-乙氧基甲基-6-(3，5-二甲基芐基)尿嘧啶；E-EBU5-乙基-1-乙氧基甲基-6-芐基尿嘧啶；DS硫酸葡聚糖；E-EPSeU1-(乙氧基甲基)-(6-苯基氫硒基)-5-乙基尿嘧啶；E-EPU1-(乙氧基甲基)-(6-苯硫基)-5-乙基尿嘧啶；FTCβ-2’，3’-二脫氧-5-氟-3’-硫雜胞苷(Triangle)；HBY097S-4-異丙氧基羰基-6-甲氧基-3-(甲硫基-甲基)-3，4-二氫喹喔啉-2(1H)-硫酮；HEPT1-[(2-羥基乙氧基)甲基]-6-(苯硫基)胸腺嘧啶；HIV-1人類免疫缺陷病毒1型；JM27631，1’-(1，3-亞丙基)-雙-1，4，8，11-四氮雜環(huán)十四烷(JohnsonMatthey)；JM31001，1’-[1，4-亞苯基雙-(亞甲基)]雙-1，4，8，11-四氮雜環(huán)十四烷(Johnson Matthey)；KNI-272含(2S，3S)-3-氨基-2-羥基-4-苯基丁酸的三肽；L-697，593；5-乙基-6-甲基-3-(2-苯二酰亞氨基-乙基)吡啶-2(1H)-酮；L-735，524羥基-氨基戊烷甲酰胺HIV-1蛋白酶抑制劑(Merck)；L-697，6613-{[(-4，7-二氯-1，3-苯并唑-2-基)甲基]氨基}-5-乙基-6-甲基吡啶-2(1H)-酮；L-FDDC(-)-β-L-5-氟-2’，3’-二脫氧胞苷；L-FDOC(-)-β-L-5-氟-二氧雜環(huán)戊烷胞嘧啶；NMC4426-芐基-1-乙氧基甲基-5-異丙基尿嘧啶(I-EBU；Triangle/Mitsubishi)；奈韋拉平11-環(huán)丙基-5，11-二氫-4-甲基-6H-二吡啶并1[3，2-b2’，3’-e]二氮雜環(huán)庚三烯-6-酮(Boehringer-Ingelheim)；NSC6484001-芐氧基甲基-5-乙基-6-(α-吡啶硫基)尿嘧啶(E-BPTU)；P9941[2-吡啶基乙?；?IlePheAla-y(CHOH)]2(Dupont Merck)；PFA磷?；姿狨?膦甲酸鈉；Astra)；PMEA9-(2-磷?；籽趸一?腺嘌呤(Gilead)；PMPA(R)-9-(2-磷?；籽趸?腺嘌呤(Gilead)；Ro 31-8959羥基乙胺衍生物HIV-1蛋白酶抑制劑(Roche)；RPI-312肽基蛋白酶抑制劑，1-[(3s)-3-(正-α-芐氧羰基)-1-天冬酰胺?；?-氨基-2-羥基-4-苯基丁酰基]-正-叔丁基-1-脯氨酸酰胺；27206-氯-3，3-二甲基4-(異丙烯氧羰基)-3，4-二氫-喹喔啉-2(1H)硫酮；SC-52151羥基乙基-脲電子等排物蛋白酶抑制劑(Searle)；SC-55389A羥基乙基-脲電子等排物蛋白酶抑制劑(Searle)；TIBO R82150(+)-(5S)-4，5，6，7-四氫-5-甲基-6-(3-甲基-2-丁烯基)咪唑并[4，5，1-jk][1，4]-苯并二氮雜環(huán)庚三烯-2(1H)-硫酮(Janssen)；TIBO 82913(+)-(5S)-4，5，6，7-四氫-9-氯-5-甲基-6-(3-甲基-2-丁烯基)咪唑并[4，5，1jk]-[1，4]苯并-二氮雜環(huán)庚三烯-2(1H)-硫酮(Janssen)；TSAO-m3T[2′，5’-雙-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-3’-螺-5’-(4’-氨基-1’，2’-氧雜硫羥基(thiole)-2’，2’-二氧化物)]-b-D-呋喃戊糖基-N3-甲基胸腺嘧啶；U901521-[3-[(1-甲基乙基)-氨基]-2-吡啶基]-4-[[5-[(甲基磺?；?-氨基]-1H-吲哚-2-基]羰基]哌嗪；UC硫代?；桨费苌?Uniroyal)；UC-781＝N-[4-氯-3-(3-甲基-2-丁烯氧基)苯基]-2-甲基-3-呋喃硫代甲酰胺；UC-82＝N-[4-氯-3-(3-甲基-2-丁烯氧基)苯基]-2-甲基-3-噻酚硫代甲酰胺；VB 11，328羥基乙基-磺酰胺蛋白酶抑制劑(Vertex)；VX-478羥基乙基磺酰胺蛋白酶抑制劑(Vertex)；XM 323環(huán)脲蛋白酶抑制劑(Dupont Merck)。
聯(lián)合治療增殖性病癥在另一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)用作抗增殖藥時(shí)，這些化合物可以與增加該治療效果的另一種化合物聯(lián)合使用，所謂的另一種化合物包括但不限于抗葉酸藥，5-氟嘧啶(包括5-氟尿嘧啶)，胞苷類似物如β-L-1，3-二氧雜環(huán)戊烷基胞苷或β-L-1，3-二氧雜環(huán)戊烷基5-氟胞苷，抗代謝藥(包括嘌呤抗代謝藥，阿糖孢苷，fudarabine，氟尿苷，6-巰基嘌呤，甲氨蝶呤和6-硫代鳥嘌呤)，羥基脲，有絲分裂抑制劑(包括CPT-11，依托泊苷(VP-21)，紫杉醇和長(zhǎng)春花屬生物堿如長(zhǎng)春新堿和長(zhǎng)春花堿，烷化劑(包括但不限于白消安，苯丁酸氮芥，環(huán)磷酰胺，異環(huán)磷酰胺，氮芥，美法侖和噻替派)，非經(jīng)典的烷化劑，含鉑的化合物，博萊霉素，抗腫瘤抗生素，蒽環(huán)類抗生素如阿霉素和dannomycin，蒽二酮類，拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑，激素制劑(包括但不限于皮質(zhì)類固醇(地塞米松，潑尼松和甲基潑尼松)，雄激素如氟甲睪酮和甲基睪酮，雌激素如己烯雌酚，抗雌激素如他莫昔芬，LHRH類似物如利普胺，抗雄激素如氟他胺，氨魯米特，醋酸甲地孕酮和甲羥孕酮)，天冬酰胺酶，卡莫司汀，羅氮芥，六甲基-三聚氰胺，達(dá)卡巴嗪，米托坦，鏈佐星，順鉑，卡鉑，左旋咪唑和亞葉酸。本發(fā)明的化合物還可與酶治療劑及免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)劑如干擾素、白細(xì)胞介素、腫瘤壞死因子、巨噬細(xì)胞集落刺激因子和集落刺激因子聯(lián)合使用。
III.制備活性化合物的方法在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了將氟引入新核苷類似物的糖部分上的非對(duì)映異構(gòu)選擇反應(yīng)。此合成可以用來制備嘌呤和嘧啶衍生物。合成路線中的關(guān)鍵步驟是手性的、非碳水化合物糖環(huán)前體(4S)-5-(被保護(hù)的-氧基)-戊-4-交酯，例如，(4S)-5-(叔丁基二苯基甲硅氧烷基)戊-4-甲酯4使用親電性的氟來源，包括但不限于，N-氟-(雙)苯磺酰亞胺5。此類相對(duì)較新的N-氟磺酰亞胺試劑由Barnette在1984年首先開放，從此幾經(jīng)精制并作為便利和高反應(yīng)性的親電性氟(Barnette，W.E.J.Am.Chem.Soc.1984，106，452.；Davis，F(xiàn).A.；Han；W.，Murphy，C.K.J.Org.Chem.1995，60，4730；Snieckus，V.；Beaulieu，F(xiàn).；Mohri，K.；Han，W.；Murphy，C.K.；Davis，F(xiàn).A.TetrahedronLett.1994，35(21)，3465)。這些試劑最常用來將氟轉(zhuǎn)運(yùn)給親核試劑如烯醇和金屬化的芳香族化合物(Davis，F(xiàn).A.；Han；W.，Murphy，C.K.J.Org.Chem.1995，60，4730)。具體地講，N-氟-(雙)苯磺酰亞胺(NFSI)是在空氣中穩(wěn)定的、易于處理的固體，對(duì)將甲硅烷基保護(hù)的內(nèi)酯4的烯醇的立體選擇性氟化有足夠的立體位阻。作為此方法的非限制性實(shí)例，氟化內(nèi)酯6的合成及其作為合成一些新的α-2′-氟代核苷中的普通中間體詳述如下。根據(jù)本說明書，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以按照需要常規(guī)修改此方法以完成要求的目的并制備需要的化合物。
可以用任何來源的親電性氟將前體(4S)-5-(被保護(hù)的-氧基)-戊-4-交酯，例如(4S)-5-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)-戊-4-交酯氟化。親電性氟的其它來源包括N-氟代氨基磺酸類(Differding等，Tet.Lett.Vol.29，No.47 pp.6087-6090(1988)；Chemical Reviews，1992，Vol 92，No.4(517))，N-氟-O-苯二磺酰亞胺(Tet.Lett.Vol.35，3456-3468頁(1994)，Tet Lett.Vol 35.No.20，3263-3266頁(1994))；J.Org.Chem.1995，60，4730-4737)，1-氟乙烯及合成的同等物(Matthews，Tet.Lett.Vol.35，No.7，1027-1030頁(1994)；Allied Signal，Inc.，Buffalo Research Laboratory，Buffalo，New York銷售的Accufluor氟化試劑(NFTh(1-氟-4-羥基-1，4-二偶氮基-雙環(huán)[2.2.2]辛烷雙(四氟硼酸鹽))，NFPy(N-氟吡啶吡啶七氟二硼酸鹽)和NFSi(N-氟苯磺酰亞胺)；Aldrich Chemical Company，Inc.銷售的親電性氟化試劑，包括N-氟吡啶鹽((1-氟-2，4，6-三甲基吡啶三氟甲磺酸鹽，3，5-二氯-1-氟吡啶三氟甲磺酸鹽，1-氟吡啶三氟甲磺酸鹽，1-氟吡啶四氟硼酸鹽和1-氟吡啶七氟二硼酸鹽)，還可參見J.Am.Chem.Soc.，Vol 112，No.23 1990)；N-氟磺酰亞胺和酰胺類(N-氟N-甲基-對(duì)-甲苯磺酰胺，N-氟-N-丙基-對(duì)-甲苯磺酰胺和N-氟苯磺酰亞胺)；N-氟-喹寧丁氟化物(J.Chem.Soc.Perkin Trans I 1988，2805-2811)；全氟-2，3，4，5-四氫吡啶和全氟-(1-甲基吡咯烷)，Banks，Cheng和Haszeldine，雜環(huán)的多氟代-化合物部分II(1964)；1-氟-2-吡啶酮，J.Org.Chem.，1983 48，761-762；帶有氟原子的四元實(shí)體中心(J.Chem.Soc.Perkin.Trans.221-227頁(1992))；N-氟-2，4，6-吡啶三氟甲磺酸鹽，Shimizu，Tetrahedron Vol 50(2)，487-495頁(1994)；N-氟吡啶吡啶七氟二硼酸鹽，J.Org.Chem.1991，56，5962-5964，Umemoto等，Bull.Chem.Soc.Jpn.，64 1081-1092(1991)；N-氟代全氟烷基磺酰亞胺類，J.Am.Chem.Soc.，1987，109，7194-7196；Purrington等，Lewis酸介導(dǎo)的芳香族底物的氟化，J.Org.Chem.1991，56，142-145。
此方法的顯著優(yōu)點(diǎn)是能通過分別適當(dāng)選擇L-或D-谷氨酸起始物分別使用核苷的“天然”(1a)D或“非天然”(1b)L對(duì)映體。

通過方案1所示的路線由L-谷氨酸合成內(nèi)酯4，如Ravid等所述(Tetrahedron 1978，34，1449)和Taniguchi等所述(Tetrahedron 1974，30，3547)。
方案1 已知內(nèi)酯4的烯醇，在-78℃用LiHMDS在THF中制備，是穩(wěn)定的.用此烯醇已進(jìn)行了若干合成，包括以高收率加入親電子試劑如二苯基二硒化物，二苯基二硫化物和烷基鹵化物(Liotta，D.C.；Wilson，L.J.Tetrahedron Lett.1990，31(13)，1815；Chu，C.K.；Babu，J.R.；Beach，J.W.；Ahn.S.K.；Huang，H.；Jeong，L.S.；Lee，.S.J.J.Org.Chem.，1990，55，1418；Kawakami，H.；Ebata，T.；Koseki，K.；Matsushita，H.；Naoi，Y.；ltoh，K.Chem.Lett.1990，1459)。但是，向4的烯醇中加入5的THF溶液得到的所需單氟代產(chǎn)物6的收率極差。形成了一些副產(chǎn)物包括所推測(cè)的二氟代內(nèi)酯，其與其它雜質(zhì)是不可分離的。為此，改變?cè)噭┑募尤腠樞?，將?nèi)酯4和NFSi 5一起溶解于THF中并冷卻至-78℃。緩慢加入LiHMDS，得到除了小量的未反應(yīng)起始物(反應(yīng)式1)以外的唯一產(chǎn)物。
反應(yīng)式1 經(jīng)硅膠柱色譜純化和結(jié)晶后可以獲得收率50-70％的氟內(nèi)酯6。此反應(yīng)得到6的單一非對(duì)映異構(gòu)體，推測(cè)是由于立體位阻TBDPS基團(tuán)和體積較大的氟化試劑5的相互作用。通過比較以前公開的、其對(duì)映異構(gòu)體20的NMR數(shù)據(jù)和X射線晶體結(jié)構(gòu)檢測(cè)，確定氟代內(nèi)酯6為α或“向下”的氟異構(gòu)體。
如方案2所示將內(nèi)酯6轉(zhuǎn)變?yōu)槎嘶悩?gòu)體乙酸酯8。應(yīng)注意鄰位羥基內(nèi)醚7只以β端基異構(gòu)體的形式存在，而乙酸酯8沒有表現(xiàn)出NMR可檢測(cè)的α端基異構(gòu)體，如Niihata等報(bào)告(Bull.Chem.Soc.Jpn.1995，68，1509)。
方案2 通過標(biāo)準(zhǔn)Vorbruggen方法偶聯(lián)8與甲硅烷基化的嘧啶堿基(Tetrahedron Lett.1978，15，1339)，用TMS三氟甲磺酸鹽作為L(zhǎng)ewis酸。或者，可以使用任何其它已知可以用來縮合堿基和碳水化合物以形成核苷的Lewis酸，包括氯化錫、氯化鈦和其它錫或鈦化合物.一些堿基以柱色譜純化后72-100％的高收率成功地偶聯(lián)(反應(yīng)式2，表1)。
反應(yīng)式2
表1.用8將取代的嘧啶類糖基化

質(zhì)子NMR表明在所有情況下β和α核苷端基異構(gòu)體的比率約為2∶1。甲硅烷基保護(hù)的核苷不能通過柱色譜拆分為分離的端基異構(gòu)體.但是，用NH4F在甲醇中將5′-氧原子脫保護(hù)后(反應(yīng)式3)，可以容易地將α和β端基異構(gòu)體分離，并總結(jié)于表2。
反應(yīng)式3

表2.核苷的脫保護(hù)

α或β游離核苷的分類基于端基異構(gòu)質(zhì)子的化學(xué)位移(表3)和如通過薄層色譜觀察到的核苷的極性。觀察所有的游離核苷的α/β對(duì)的趨勢(shì)，其中極性較小的化合物的端基質(zhì)子的化學(xué)位移顯然較極性較大的化合物在較高磁場(chǎng)。
表3.端基異構(gòu)質(zhì)子化學(xué)位移(ppm)

通過比較18a(Niihata，S.；Ebata，T.；Kawakami，H.；Matsushida，H.Bull.Chem.Soc.Jpn.1995，68，1509)和18b(Aerschot，A.V.；Herdewijn，P.；Balzarini，J.；Pauwels，R.；De Clercq，E.J.MedChem.1989，32，1743)，用以前公開的波譜數(shù)據(jù)并通過14b和15b的X射線結(jié)晶結(jié)構(gòu)測(cè)定，來證明端基異構(gòu)質(zhì)子化學(xué)位移與絕對(duì)結(jié)構(gòu)的關(guān)系.此發(fā)現(xiàn)與核苷的通常趨勢(shì)相反，其中在此二者中α端基異構(gòu)體一般極性較小。大概在“向下”2′-氟化核苷中，C-F鍵的強(qiáng)偶極對(duì)抗β異構(gòu)體中的C-N端基異構(gòu)鍵偶極并降低整個(gè)分子的偶極性。相反，α端基異構(gòu)體的幾何構(gòu)型使分子偶極通過加入C-F和C-N鍵偶極而加強(qiáng)。因此，對(duì)于α-2′-氟代核苷的情況，α端基異構(gòu)體比β端基異構(gòu)體更具極性。
α和β端基異構(gòu)體17a和17b不能通過柱色譜分離，因?yàn)橛坞x的氨基使核苷在硅膠上走的太快。因此，需要用N4乙?；奏碇苽?1并再拆分16a和16b。用氨的飽和甲醇溶液定量除去N4-乙酰基以便得到分離的17a和17b。當(dāng)用5-氟胞嘧啶作為堿(化合物10)時(shí)，端基異構(gòu)體15a和15b容易分離，且沒有觀察到在硅膠上形成斑點(diǎn)。
在表2列出的十種核苷中，似乎只有17b(Martin，J.A.；Bushnell，D.I.；Duncan，I.B.；Dunsdon，S.J.；Hall，M.J.；Machin，P.J.；Merrett，J.H.；Parkes，K.E.B.；Roberts，N.A.；Thomas，G.J.；Galpin，S.A.；Kinchington，D.J.Med.Chem.1990，33(8)，2137；Zenchoff，G.B.；Sun，R；Okabe，M.J.Org.Chem.1991，56，4392)，18a(Niihata.S.；Ebata，T.；Kawakami，H.；Matsushida，H.Bull.Chem.Soc.Jpn.1995，68，1509)和18b(Aerschot，A.V.；Herdewijn，P.；Balzarini，J.；Pauwels，R.；De Clercq，E.J.Med Chem.1989，32，1743)以前已合成。它們?nèi)缤恍┮阎?′-β或“向上”氟代核苷類似物14一樣已由天然前體(即它們是β-D構(gòu)型)合成。在本發(fā)明前的文獻(xiàn)中似乎沒有確定過β-L-2′-氟代呋喃核糖基核苷。
一般這些分子通過親核攻擊脫水核苷引入氟(Mengel，R.；Guschlbauer，W.Angew.Chem.，Int.Ed.Engl.1978，17，525)或通過將用三氟化二乙基氨基硫(DAST)立體化學(xué)固定的羥基置換或轉(zhuǎn)化來引入氟(Herdewijn，P.；Aerschot，A.V.；Kerremans，L.NucleosidesNucleotides，1989，8(1)，65)。本發(fā)明方法的優(yōu)點(diǎn)之一是對(duì)于引入氟來說不需要羥基。因此，該方法不僅僅限于天然核苷或糖作為起始物，并使2′-氟代核苷的非天然對(duì)映異構(gòu)體的使用變得簡(jiǎn)單易行。
因此，用此合成路線用D-谷氨酸19作為起始物(方案3)合成了若干非天然核苷。糖環(huán)前體20以上述方法氟化并與不同的甲硅烷基化的堿基偶聯(lián)(表4)。
方案3
表4.非天然核苷類似物的收率

方案4

如方案4所示29的成功合成，利用了兩類核苷。第一類是稱為2’，3’-二脫氧-2’，3’-二脫氫-2-2’-氟-核苷，30，而第二類是核苷的“向上”-氟代或阿糖基類似物，31，如下列方案5所述。
方案5

由普通的中間體32可以合成化合物30和31，其可以通過氟代烯糖29的硒化得到。
方案6 通過用阮內(nèi)鎳還原可以將硒化的化合物32轉(zhuǎn)變?yōu)椤跋蛏稀狈愃莆?1?；蛘?，用NaIO4或過氧化氫將硒化物32氧化，隨后通過此硒化物中間體的熱消除反應(yīng)得到30.對(duì)未氟化系統(tǒng)的這些轉(zhuǎn)化已有詳細(xì)報(bào)道(Wurster，J.A.；Ph.D.Thesis，Emory University，1995；Wilson，L.J.；Ph.D.Thesis，Emory University，1992)。
此外，核苷30和31的對(duì)映異構(gòu)體的合成也是可能的，這是因?yàn)樗鼈兊米?9的對(duì)映異構(gòu)體。
制備30表示的化合物2’，3’-二脫氧-2’，3’-二脫氫-2’-氟-核苷的另一種路線見方案7。此路線提供了用大范圍的甲硅烷基化的堿基來簡(jiǎn)單地、直接獲得此類化合物的方法并已成功地完成。
方案7 由6形成甲硅烷基化的烯酮縮醛可立體選擇性地加入苯基溴化硒以產(chǎn)生單個(gè)異構(gòu)體化合物36。此化合物的還原和?；磻?yīng)進(jìn)行得順利且兩步收率高，得到37。苯基氫硒基的α取向使隨后的糖基化步驟中是立體選擇性的，并以良好的收率完成了核苷38的β異構(gòu)體的合成?；衔?8可以用過氧化氫在二氯甲烷中氧化得到消除反應(yīng)的產(chǎn)物39，但是以我們的經(jīng)驗(yàn)，只需要將38吸附到硅膠上并讓其停留若干小時(shí)，此后可以從活塞柱中以近乎定量的收率洗脫。如前所述除去39的保護(hù)基得到終產(chǎn)物30并得到收率良好(81％)的核苷產(chǎn)物。
方案8 用于合成30和31的一系列化學(xué)轉(zhuǎn)變同樣可用于合成34和35.
實(shí)驗(yàn)部分一般方法
N-氟-(雙)苯磺酰亞胺5得自Allied Signal，并不經(jīng)純化直接使用。所有的其它試劑得自Aldrich Chemical Company并不經(jīng)純化直接使用。用Thomas Hoover毛細(xì)管熔點(diǎn)儀檢測(cè)熔點(diǎn)并且沒有校準(zhǔn)。用Nicolet Impact 400 FT-IR光譜儀獲得IR譜。1H NMR和1C NMR譜在NT-360或Varian 400MHz色譜儀上記錄。TLC板為硅膠60 F254(0.25mm厚)，購自EM Science。閃式色譜在購自EM Science的硅膠60(230-400目，ASTM)上進(jìn)行。所有的反應(yīng)在火焰干燥的玻璃反應(yīng)器中在干燥的氬氣氛下進(jìn)行。通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑。由Atlantic Microlab，Inc，Atlanta，GA.進(jìn)行元素分析。
(2S，4R)-5-(叔丁基二苯基甲硅烷基氧)-2-氟代戊-4-交酯(20)向反應(yīng)瓶中加入存在于250mL無水THF中的(4R)-5-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)-戊-4-交酯(20.0g，0.0564mol，1.0eq.)和N-氟-(雙)苯磺酰亞胺(NFSi)5(17.80g，0.0564mol，1.0eq.)。將此溶液冷卻至-78℃，并在1小時(shí)內(nèi)滴加68.0mL(0.0680mol，1.2eq.)LiHMDS的1.0M THF溶液。再將其在-78℃下攪拌2小時(shí)，然后升溫至室溫并再攪拌1小時(shí)。完成反應(yīng)后，用10mL飽和氯化銨溶液停止該反應(yīng)。用3個(gè)體積的乙醚稀釋此混合物并倒入等體積的飽和碳酸氫鈉中。用飽和碳酸氫鈉再次洗滌有機(jī)層并用飽和氯化鈉洗滌一次。用硫酸鎂干燥此有機(jī)層，過濾并濃縮得到黃色油狀物。將此油狀物通過硅膠柱色譜用30％乙醚/70％己烷溶劑系統(tǒng)純化。再將所得白色固體用熱己烷結(jié)晶，得到13.04g(收率62％)的透明結(jié)晶固體Rf(30％乙醚/70％己烷)＝0.26；mp115-116℃。
1H NMR(360MHz，CDCl3)d 7.63-7.60(m，4H)，7.45-7.35(m，6H)，5.49(dt，J＝52.9和7.9Hz，1H)，4.69(d，J＝9.36Hz，1H)，3.91(d，J＝11.5Hz，1H)，3.60(d，J＝11.5Hz，1H)，2.72-2.40(m，2H)，1.05(s，9H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)d 172.1(d，J＝20.5Hz)，135.5，135.4，132.3，131.7，130.1，128.0，127.9，85.6(d，J＝186.6Hz)，77.3(d，J＝5.3Hz)，65.0，31.8(d，J＝20.5Hz)，26.7，19.1；IR(薄膜)2958，1796，1252，1192，1111，1016cm-1；HRMS[M+Li]C21H25O3FSiLi理論值379.1717。實(shí)測(cè)值379.1713。CHAFFS元素分析理論值C，67.71；H，6.76。實(shí)測(cè)值C，67.72；H，6.78。
5-O-(叔丁基二苯基甲硅烷基)-2，3-二脫氧-2-氟-(L)-赤糖(erythron)-呋喃糖(21)向反應(yīng)瓶中加入內(nèi)酯20(12.12g，0.0325mol，1.0eq.)和240mL無水THF。將此溶液冷卻至-78℃并在30分鐘內(nèi)滴加65mL(0.065mol，2.0eq.)1.0M DIBALH的己烷溶液。并在-78℃下攪拌3小時(shí)，此后緩慢加入2.93mL(0.163mol，5.0eq.)水停止反應(yīng)。將此反應(yīng)升溫至室溫并攪拌1小時(shí)，之后在整個(gè)燒瓶中形成凝膠狀透明固體。將此反應(yīng)混和物用兩個(gè)體積的乙醚稀釋并倒入到Erlenmeyer燒瓶中等體積的飽和酒石酸鈉鉀水溶液中。攪拌20分鐘直到此乳液被破壞。分離有機(jī)層并用250mL乙醚將水層萃取3次。將合并的有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾，并濃縮得到淡黃色油狀物。將此產(chǎn)物通過硅膠柱色譜純化，用6∶1己烷/乙酸乙酯溶劑系統(tǒng)洗脫。將所得清澈油狀物用沸己烷結(jié)晶得到11.98g(收率98％)的白色結(jié)晶固體Rf(30％乙醚/70％己烷)＝0.33；mp 66-67℃。1H NMR(360MHz，CDCl3)d 7.68-7.66(m，4H)，7.55-7.38(m，6H)，5.39(t，J＝7.6Hz，1H)，4.99(dd，J＝52.2和4.3Hz，1H)，4.52(m，1H)，3.88(dd，J＝10.8和2.5Hz，1H)，3.65(d，J＝7.9Hz，1H)，3.49(dd，J＝7.9和1.8Hz，IM，2.44-2.07(m，2H)，1.07(s，9H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)d 135.7，135.5，132.2，132.1，130.2，130.0，129.8，127.9，127.7，99.8(d，J＝31.1Hz)，96.6(d，J＝178.3Hz)，79.4，64.8，29.9(d，J＝21.2Hz)，26.8，19.2；IR(薄膜)3423，2932，1474，1362，1113cm-1；HRMS理論值[M+Li]C21H27O3FSiLi381.1874.實(shí)測(cè)值381.1877.元素分析理論值.C21H27O3FSiC，67.35；H，7.27，實(shí)測(cè)值C，67.42；H，7.31。
1-O-乙酰基-5-O-(叔丁基二苯基甲硅烷基)-2，3-二脫氧-2-氟-(L)-赤糖-呋喃糖(22)向反應(yīng)瓶中加入乳醇21(8.50g，0.0227mol，1.0eq.)和170mL無水二氯甲烷。然后加入DMAP(0.277g，0.00277mol，0.1eq.)和醋酸酐(13.5mL，0.143mol，6.3eq.)并在室溫下攪拌過夜。反應(yīng)完畢后，將此反應(yīng)倒入飽和碳酸氫鈉溶液中。分離有機(jī)層，并用氯仿將水層萃取3次。將合并的有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾，并除去溶劑得到淡黃色油狀物。將此油狀物通過硅膠柱色譜純化，用8∶1己烷/乙酸乙酯溶劑系統(tǒng)洗脫得到9.85g(99％收率)清澈無色油狀物Rf(30％乙醚/70％己烷)＝0.44；1H NMR(360MHz，CDCl3)d 7.69-7.67(m，4H)，7.43-7.38(m，6H)，6.30(d，J＝10.4Hz，1H)，5.06(d，J＝54.9Hz，1H)，4.53(m，1H)，3.81(dd，J＝10.8和4.3Hz，1H)，3.72(dd，J＝10.8和4.3Hz，1H)，2.38-2.12(m，2H)，1.89(s，3H)，1.07(s，9H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)d 169.4，135.6，135.5，133.2，133.1，129.8，129.7，127.8，127.7，99.3(d，J＝34.1Hz)，95.5(d，J＝178.2Hz)，81.4，65.3，31.6(d，J＝20.5Hz)，26.8，21.1，19.3；IR(薄膜)3074，2860，1750，1589，1229，1113cm-1；HRMS理論值[M-OCOCH3]C21H26O2FSi357.1686.實(shí)測(cè)值357.1695.元素分析理論值.C23H29O4FSiC，66.32；H，7.02.實(shí)測(cè)值C，66.30；H，7.04.
甲硅烷基化堿基與22偶聯(lián)的代表性方法(L)-5’-O-(叔丁基二苯基甲硅烷基)-2’，3-二脫氧-2’-氟-5-氟胞苷(25)向裝備有短頸蒸餾頭的燒瓶中，加入5-氟胞嘧啶(2.01g，15.6mmol，5.0eq)，35mL 1，1，1，3，3，3-六甲基乙硅氮烷和催化量的(約1mg)(NH4)2SO4。將此白色混懸液加熱至沸騰，保持1小時(shí)直到該堿被甲硅烷基化而反應(yīng)溶液變清澈。蒸餾掉過量的HMDS，將油狀殘余物抽真空1小時(shí)以除去最后痕跡量的HMDS。將所得白色固體在氬氣氛下溶解于5mL無水1，2-二氯乙烷。向此清澈的溶液中加入乙酸酯22(1.30g，3.12mmol，1.0eq.)在5mL無水1，2-二氯乙烷中的溶液。室溫下向其中加入三氟甲磺酸三甲基甲硅烷基酯(3.32mL，17.2mmol，5.5eq.)。通過TLC(10％甲醇/90％二氯甲烷)監(jiān)控此反應(yīng)，并且反應(yīng)4小時(shí)時(shí)觀察到反應(yīng)徹底。將此反應(yīng)混和物倒入飽和碳酸氫鈉中。然后，分離有機(jī)層，并用氯仿將水層萃取3次。將合并的有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并除去溶劑得到白色泡沫。將此化合物通過硅膠柱色譜純化，用100％二氯甲烷至存在于二氯甲烷中的10％甲醇作為梯度溶劑系統(tǒng)。分離出1.51g該化合物(99％收率)，為白色泡沫端基異構(gòu)體的混合物Rf(100％EtOAc)＝0.36；mp 74-80℃。1H NMR(400MHz，CDCl3)d 8.84(bs，1H)，8.04(d，J＝6.4Hz，0.67H)，7.67-7.63(m，4H)，7.51-7.39(m，6.33H)，6.11(d，J＝20Hz，0.33H)，5.98(d，J＝16.4Hz，0.67H)，5.88(bs，1H)，5.41(d，J＝52.4Hz，0.33H)，5.23(dd，J＝50.4和4Hz，0.67H)，4.56(m，0.33H)，4.45(m，0.67H)，4.23(dd，J＝12.0和1.6Hz.0.67H)，3.89(dd，J＝11.2和3.2Hz，0.33H)，3.74-3.66(m，1H)，2.45-1.96(m，2H)，1.09(s，6H)，1.06(s，3H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)d 158.6(d，J＝14.4Hz)，158.4(d，J＝14.4Hz)，153.9，153.8，136.6(d，J＝240.5Hz)，136.3(d，J＝239.7Hz)，135.6，135.56，135.5，135.4，133.1，132.9，132.5，132.4，130.1，130.0，129.9，127.9，127.8，125.8(d，J＝33.4Hz)，124.6(d，J＝32.6Hz)，96.5(d，J＝182.0Hz)，91.7(d，J＝185.1)，90.7(d，J＝35.6Hz)，87.7(d，J＝15.2Hz)，81.5，79.5，64.9，63.0，33.5(d，J＝20.5Hz)，3 0.6(d，J＝20.4Hz)，26.9，26.8，19.22，19.18；IR(薄膜)3300，2960，1682，1608，1513，1109cm-1；HRMS理論值[M+Li]C25H29N3O3SiF2Li492.2106.實(shí)測(cè)值492.2085.元素分析理論值.C25H29N3O3SiF2·1/2 H2OC，60.71；H，6.11；N，8.50.實(shí)測(cè)值C，60，67；H，6.03；N，8.44。
甲硅烷基-保護(hù)的核苷脫保護(hù)的典型方法α-和β-(L)-2’，3’-二脫氧-2’-氟-5-氟胞苷(28a和28b)將核苷25(1.098g，2.26mmol，1.0eq.)溶解于15mL甲醇中，向其中加入氟化銨(0.838g，22.6mmol，10.0eq.)。將其劇烈攪拌24小時(shí)，之后的TLC(15％乙醇/85％乙酸乙酯)表明該反應(yīng)完成。將此反應(yīng)混和物用3體積的乙酸乙酯稀釋并通過小(1cm)硅膠塞過濾。將此塞用200mL的15％乙醇/85％乙酸乙酯溶液清洗，并除去溶劑得到白色泡沫。將此混合物通過硅膠柱色譜純化，用15％乙醇/85％乙酸乙酯溶劑系統(tǒng)洗脫，其也能將α和β端基異構(gòu)體分離。得到白色泡沫0.190g(0.768mmol，34％收率)，而得到白色泡沫形式的β0.290g(1.17mmol，52％收率)(28a)Rf(15％EtOH，85％EtOAc)＝0.22；mp 199-203℃(分解).1H NMR(400MHz，CD3OD)d 7.78(d，J＝6.8Hz，1H)，6.07(d，J＝19.2Hz，1H)，5.37(d，J＝54.0Hz，1H)，4.60(m，1H)，3.80(dd，J＝12.0和3.2Hz，1H)，3.56(dd，J＝12.4和4.4Hz，1H)，2.40-2.00(m，21i)；13C NMR(100MHZ，DMSO-d6)d 157.7(d，J＝13.6Hz)，153.2，135.9(d，J＝239.0Hz)，126.2(d，J＝31.1Hz)，92.4(d，J＝183.6Hz)，86.7(d，J＝15.2Hz)，79.6，62.7，33.3(d，J＝20.5Hz)；IR(KBr)3343，3100，1683，1517，1104cm-1；HRMS理論值[M+Li]C9H11N3O3F2Li254.0929.實(shí)測(cè)值254.0919.元素分析理論值，C9H11N3O3F2·1/2 H2OC，42.19；H，4.72；N，16.40.實(shí)測(cè)值C，42.44；H，4.56；N，16.56.(28b)Rf(15％EtOH，85％EtOAc)＝0.37；mp 182-186℃(分解).1H NMR(400MHz，DMSO-d6)d 8.32(d，J＝7.6Hz，1H)，7.79(bs，1H)，7.53(bs，1H)，5.81(d，J＝16.8Hz，1H)，5.37(t，J＝4.8Hz)，5.18(dd，J＝51.6和3.2Hz，1H)，4.32(m，1H)，3.88(dd，J＝12.0和2.8Hz，1H)，3.59(dd，J＝12.4和2.4Hz，1H)，2.20-1.99(m，2H)；13C NMR(100MHz，DMSO-d6)d 157.7(d，J＝13.7Hz)，153.2，136.1(d，J＝237.4Hz)，125.3(d，J＝33.4Hz)，97.3(d，J＝176.8Hz)，89.9(d，J＝35.7Hz)，81.6，60.2，30.3(d，J＝19.7Hz)；IR(KBr)3487，2948，1678，1509，1122cm-1，HRMS理論值[M+Li]C9H11N3O3F2Li254.0929.實(shí)測(cè)值254.0935.元素分析理論值.C9H11N3O3F2C，43.73；H，4.49；N，17.00.實(shí)測(cè)值C，43.69；H，4.53；N，16.92。
(D)-5′-O-(叔丁基二苯基甲硅烷基)-2’，3’-二脫氧-2′-氟-5-氟尿苷(9)端基異構(gòu)體的混合物Rf(1∶1己烷/EtOAc)＝0.48；mp65-70℃。1H NMR(400MHz，CDCl3)d 10.0(bm，1H)，7.99(d，J＝5.6Hz，0.63H)，7.65(m，4H)，7.42(m，6.37H)，6.12(dd，J＝18.0和1.6Hz，0.37H)，6.00(d，J＝16Hz，0.63H)，5.37(dd，J＝54.6和2.4Hz，0.37H)，5.22(dd，J＝50.4和4Hz，0.63H)，4.57(m，0.37H)，4.44(m，0.63H)，4.22(dd，J＝12.2和2.0Hz，0.63H)，3.92(dd，J＝11.2和3.2Hz，0.37H)，3.70(m，1H)，2.22(m，2H)，1.09(s，5.67H)，1.074(s，3.33H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)d 157.2(d，J＝31.7Hz)，157.1(d，J＝25.8Hz)，149.1，148.8，140.4(d，J＝236.6Hz)，140.1(d，J＝235.2Hz)，135.6，135.5，135.4，132.9，132.7，132.4，132.3，130.1，130.0，129.9，127.9，127.8，125.1(d，J＝34.9Hz)，123.6(d，J＝34.1Hz)，96.4(d，J＝182.0Hz)，92.0(d，J＝185.9Hz)，90.2(d，J＝37.2Hz)，87.0(d，J＝15.2Hz)，81.7，79.8，64.8，63.0，33.3(d，J＝21.2Hz)，31.0(d，J＝21.2Hz)，26.9，26.8，19.2；IR(薄膜)3185，1722，1117cm-1；HRMS理論值[M+1]C25H29N2O4SiF2487.1866.實(shí)測(cè)值487.1853.元素分析理論值C25H29N2O4SiF2C，61.71；H，5.80；N，5.76.實(shí)測(cè)值C，61.72；H，5.86；N，5.72。
(D)-5′-O-(叔丁基二苯基甲硅烷基)-2’，3′-二脫氧-2’-氟-5-氟胞苷(10)
端基異構(gòu)體的混合物Rf(100％EtOAc)＝0.36；mp 75-81℃。1H NMR(400MHz，CDCl3)d 8.50(bm，1H)，8.05(d，J＝6.0Hz，0.67H)，7.67-7.63(m，4H)，7.51-7.39(m，6.33H)，6.10(d，J＝20Hz，0.33H)，5.98(d，J＝16.4Hz，0.67H)，5.62(bm，1H)，5.41(d，J＝52.4Hz，0.33H)，5.23(dd，J＝51.6和4Hz，0.67H)，4.57(m，0.33H)，4.48(m，0.67H)，4.24(dd，J＝12.4和2.0Hz，0.67H)，3.89(dd，J＝11.2和3.2Hz，0.33H)，3.74-3.66(m，1H)，2.39-1.95(m，2H)，1.09(s，6H)，1.06(s，3H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)d 158.4(d，J＝14.4Hz)，158.3(d，J＝15.2Hz)，153.8，153.7，136.5(d，J＝240.5Hz)，136.2(d，J＝241.8Hz)，135.59，135.56，135.4，133.0，132.9，132.5，132.4，130.1，130.0，129.9，127.9，127.8，124.8(d，J＝31.9Hz)，96.5(d，J＝181.3Hz)，91.8(d，J＝175.2Hz)，90.7(d，J＝24.9Hz)，87.8(d，J＝21.2Hz)，81.6，79.6，64.9，63.0，33.5(d，J＝19.7Hz)，30.6(d，J＝21.3Hz)，26.9，26.8，19.2，14.2；IR(薄膜)3304，2959，1680，1621，1508，1105cm-1；HRMS理論值[M+Li]C25H29N3O3SiF2Li492.2106.實(shí)測(cè)值492.2110.元素分析理論值.C25H29N3O3SiF2C，61.84；H，6.02；N，8.65.實(shí)測(cè)值C，61.86；H，6.09；N，8.55。
(D)-N4-乙酰基-5’-O-(叔丁基二苯基甲硅烷基)-2′，3′-二脫氧-2’-氟-胞苷(11)端基異構(gòu)體的混合物Rf(15％EtOH，85％EtOAc)＝0.75；mp 81-86℃。1H NMR(400MHz，CDCl3)d 10.58(bs，1H)，8.40(d，J＝7.2Hz，0.61H)，7.86(d，J 7.6 Hz，0.38H)，7.67-7.65(m，4H)，7.51-7.41(m，6H)，7.27(d，J＝8.4Hz，1H)，6.12(t，J 15.8Hz，1H)，5.51(d，J＝52.6Hz，0.38H)，5.21(dd，J＝50.8和2.9Hz，0.61H)，4.62(m，0.38H)，4.54(m，0.61H)，4.28(d，J＝11.5Hz，0.61H)，3.95(dd，J＝11.9和3.2Hz，0.38H)，3.79-3.70(m，1H)，2.46-2.04(m，5H)，1.12(s，5.49H)，1.07(s，3.42H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)d 171.5，171.3，163.4，154.9，144.9，144.1，135.5，135.4，133.0，132.8，132.5，132.2，130.2，130.1，129.9，128.0，127.8，96.8(d，J＝91.1Hz)，96.2(d，J＝147.9Hz)，92.3，91.2(d，J 35.7Hz)，90.5，88.5(d，J＝15.9Hz)，81.9，80.1，64.7，62.9，33.5(d，J＝20.5Hz)，30.5(d，J 20.5 I4z)，26.9，26.8，24.9，24.8，19.3，19.2；IR(薄膜)3237，2932，1722，1671，1559，1493，1107cm-1；HRMS理論值[M+Li]C27H32N3O4FSiLi516.2306.實(shí)測(cè)值516.2310.元素分析理論值.C27H32N3O4FSiC，63.63；H，6.33；N，8.24.實(shí)測(cè)值C，63.45；H，6.42；N，8.09。
(D)-5′-O-(叔丁基二苯基甲硅烷基)-2′，3′-二脫氧-2′-氟-胞苷(12)端基異構(gòu)體的混合物Rf(15％EtOH，85％EtOAc)＝0.50；mp98-104℃.1H NMR(360MHz，CDCl3)d 7.97(d，J＝7.2Hz，0.64H，H-6)，7.65(m，4H)，7.47-7.38(m，6.36H)，6.15(d，J＝20.5Hz，0.36H)，6.05(d，J＝16.6Hz，0.64H)，5.83(d，J＝7.9Hz，0.36H)，5.46(d，J＝7.2Hz，0.64H)，5.30-5.10(m，1H)，4.55(m，0.36H)，4.44(m，0.64H)，4.22(d，J＝9.7Hz，0.64H)，3.88-3.63(m，1.36H)，2.38-1.95(m，2H)，1.09(s，5.76H)，1.06(s，3.24H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)d 166.1，155.8，141.5，140.5，135.6，135.4，133.1，132.9，132.8，132.4，130.1，130.0，129.8，128.0，127.9，127.8，96.7(d，J＝181.3Hz)，93.4(d，J＝140.3Hz)，94.5，90.8(d，J＝35.6Hz)，90.8，87.8(d，J＝15.9Hz)，81.2，79.4，65.0，63.2，33.7(d，J＝21.2Hz)，30.8(d，J＝20.4Hz)，26.9，26.8，19.3，19.2IR(薄膜)3470，3339，1644，1487，1113cm-1；HRMS理論值[M+Li]C25H30N3O3FSiLi474.2201.實(shí)測(cè)值474.2198.元素分析理論值.C25H30N3O3FSiC，64.21；H，6.47；N，8.99.實(shí)測(cè)值C，64.04；H，6.58；N，8.76。
α-(D)-2’，3’-二脫氧-2’-氟-5-氟尿苷(14a)Rf(100％EtOAc)＝0.38；mp153-155℃。1H NMR(360MHz，CD3OD)d 7.80(d，J＝6.8Hz，1H)，6.11(d，J＝18.7Hz，1H)，5.35(d，J＝52.9，1H)，4.59(m，1H)，3.81(d，J＝11.9Hz，1H)，3.57(dd，J＝12.6和3.6Hz，1H)，2.36-2.15(m，2H)；13C NMR(100MHz，CD3OD)d 159.6(d，J＝25.8Hz)，150.7，141.5(d，J＝230.6Hz)，127.0(d，J＝34.9Hz)，93.9(d，J＝185.1Hz)，88.5(d，J＝15.1Hz)，81.8，64.3，34.3(d，J＝20.5Hz)；IR(KBr)3421，3081，1685，1478，1111cm-1；HRMS理論值[M+Li]C9H10N2O4F2Li255,0769，實(shí)測(cè)值255.0778.元素分析理論值C9H10N2O4F2C，43.56；H，4.06；N，11.29.實(shí)測(cè)值C，43.59；H，4.11；N，11.17。
β-(D)-2’，3′-二脫氧-2’-氟-5-氟尿苷(14b)Rf(100％EtOAc)0.54；mp 152-154℃。1H NMR(360MHz，CD3OD)d 8.41(d，J＝7.2Hz，1H)，5.89(d，J 16.6Hz，1H)，5.21(dd，J＝51.5和3.6Hz，1H)，4.41(m，1H)，4.00(d，J＝12.6Hz，1H)，3.67(d，J＝12.2Hz，1H)，2.25-2.09(m，2H)；13C NMR(100MHz，CD3OD)d 159.7(d，J＝25.8Hz)，150.7，141.8(d，J＝229.8Hz)，126.3(d，J＝36.4Hz)，98.3(d，J＝179Hz)，91.9(d，J＝37.1Hz)，83.6，61.9，31.9(d，J＝20.5Hz)；IR(KBr)3417，3056，1684，1474，1105cm-1；HRMS理論值[M+Li]C9H10N2O4F2Li255.0769.實(shí)測(cè)值255.0764.元素分析理論值C9H10N2O4F2C，43.56；H，4.06；N，11.29.實(shí)測(cè)值C，43.37；H，3.98；N，11.22。
α-(D)-2′，3′-二脫氧-2’-氟-5-氟胞苷(15a)Rf(15％EtOH，85％EtOAc)＝0.22；mp 198-202℃(分解)。1H NMR(400MHz，CD3OD)d 7.78(d，J＝6.8Hz，1H)，6.07(d，J＝18.8Hz，1H)，5.37(d，J＝54.0Hz，1H)，4.59(m，1H)，3.80(dd，J＝12.0和3.2Hz，1H)，3.57(dd，J＝12.4和4.4Hz，1H)，2.38-2.14(m，2H)；13C NMR(100MHz，CD3OD)d 159.9(d，J＝13.6Hz)，156.5，138.3(d，J＝240.4Hz)，127.5(d，J＝33.4Hz)，93.6(d，J＝184.3Hz)，89.5(d，J＝15.9Hz)，81.8，64.4，34.5(d，J＝20.5Hz)；IR(Y.Br)3486，3098，1681，1519，1108cm-1；HRMS理論值[M+Li]C9H11N3O3F2Li254.0929.實(shí)測(cè)值254.0929.元素分析理論值C9H11N3O3F2·1/2H2OC，42.19；H，4.72；N，16.40.實(shí)測(cè)值C，41.86；H，4.75；N，16.36。
β-(D)-2′，3′-二脫氧-2’-氟-5-氟胞苷(15b)Rf(15％EtOH，85％EtOAc)＝0.37；mp 181-183℃(分解)。1H NMR(400MHz，CD3OD)d 8.45(d，J＝7.2Hz，1H)，5.92(dd，J＝16.2和1.2Hz，1H)，5.18(dd，J＝50.9和4.0Hz，114)，4.46(m，1H)，4.05(dd，J＝12.4和2.4Hz，1H)，3.72(dd.J＝12.8和2.4Hz，1H)，2.27-2.05(m，2H)；13C NMR(100MHz，CD3OD)d 159.9(d，J＝13.6Hz)，156.5，138.5(d，J＝240.5Hz)，126.9(d，J＝33.4Hz)，98.4(d，J＝179.0Hz)，92.5(d，J＝36.4Hz)，83.6，61.9，31.6(d，J＝20.5Hz)；IR(KBR)3494，2944，1689，1522，1106cm-1；HRMS理論值[M+Li]C9H11N3O3F2Li254.0929.實(shí)測(cè)值254.0936.元素分析理論值.C9H11N3O3F2C，43.73；H，4.49；N，17.00.實(shí)測(cè)值C，43.84；H，4.47；N，17.05.
α-(D)-N4-乙酰基-2’，3’-二脫氧-2’-氟-胞苷(16a)Rf(15％EtOH，85％EtOAc)＝0.40；mp 208-212℃。1H NMR(360MHz，DMSO-d6)d(10.91，bs，1H)，8.05(d，J＝7.2Hz，1H)，7.25(d，J＝7.2Hz，1H)，6.08(dd，J＝19.1和2.9Hz，1H)，5.42(d，J＝52.2Hz，1H)，4.97(bs，1H)，4.54(m，1H)，3.63(d，J＝13.0Hz，1H)，3.47(d，J＝13.3Hz，1H)，2.35-2.15(m，2H)，2.11(s，3M；13C NMR(100MHz，DMSO-d6)d 171.0，162.6，154.3，145.7，94.9，92.0(d，J＝183.6Hz)，87.5(d，J＝15.9Hz)，80.2，62.6，33.3(d，J＝19.7Hz)，24.4；IR(KBr)3436，3227，1702，1661，1442，1102cm-1；HRMS理論值[M+Li]C11H14N3O4FLi278.1128.實(shí)測(cè)值278.1136.元素分析理論值C11H14N3O4FC，48.71；H，5.20；N，15.49.實(shí)測(cè)值C，48.73；H，5.23；N，15.52。
β-(D)-N4-乙?；?2’，3’-二脫氧-2’-氟-胞苷(16b)Rf(15％EtOH，85％EtOAc)＝0.50；mp 174-178℃。1HNMR(360MHz，DMSO-d6)d(10.90，bs，1H)，8.46(d，J＝7.2Hz，1H)，7.18(d，J＝7.2Hz，1H)，5.90(d，J＝16.9Hz，1H)，5.27(d，J＝52.9Hz，1H)，5.27(bs，1H)，4.39(m，1H)，3.88(d，J＝13.0Hz，1H)，3.61(d，J＝13.0Hz，1H)，2.09(s，3H)，2.20-1.85(m，2H)；13C NMR(100MHz，DMSO-d6)d 171.0，162.6，154.4，144.7，97.0(d，J＝177.5Hz)，95.0，90.7(d，J＝36.6Hz)，82.2，60.3，30.3(d，J＝19.7Hz)，24.3；IR(KBr)3447，3245，1703，1656，1497，1122cm-1；HRMS理論值[M+Li]C11H14N3O4FLi278.1128.實(shí)測(cè)值278.1133.元素分析理論值C11H14N3O4FC，48.71；H，5.20；N，15.49.實(shí)測(cè)值C，48.65；H，5.22；N，15.46。
α-(D)-2′，3’-二脫氧-2′-氟-胞苷(17a)Rf(15％EtOH，85％EtOAc)＝0.08；mp234-237℃(分解)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)d 7.52(d，J＝7.6Hz，1H)，7.21(bm，2H)，6.05(dd，J＝20.4和3.2Hz，1H)，5.73(d，J＝7.2Hz，1H)，5.28(d，J＝52.4Hz，1H)，4.93(t，J＝5.6Hz，1H)，4.45(m，1H)，3.58(m，1H)，3.43(m，1H)，2.26-2.13(m，2H)；13C NMR(100MHz，DMSO-d6)d 165.8，155.0，141.6，93.3，92.2(d，J＝182.8Hz)，86.6(d，J＝15.1Hz)，79.4，62.8，33.3(d，J＝19.7Hz)；IR(KBr)3366，3199，1659，1399，1122cm-1；HRMS理論值[M+Li]C9H12N3O3FLi236.1023.實(shí)測(cè)值236.1014.元素分析理論值C9H12N3O3FC，47.16；H，5.28；N，18.33.實(shí)測(cè)值C，47.40；H，5.34；N，18.51。
β-(D)-2′，3’-二脫氧-2′-氟-胞苷(17b)將核苷25(0.160g，0.59mmol)溶解于10mL飽和氨的甲醇溶液中。攪拌5分鐘后，反應(yīng)完畢。除去甲醇的氨溶液并將所得白色固體置于真空下，在60℃水浴中溫和加熱2小時(shí)以通過升華除去乙酰胺副產(chǎn)物。將此白色固體從5％甲醇/95％二氯甲烷中結(jié)晶，得到定量收率的白色結(jié)晶固體。Rf(15％EtOH，85％EtOAc)＝0.18；mp 191-195℃(分解)。1H NMR(360MHz，CD3OD)d 8.10(d，J＝7.2Hz，1H)，5.92(d，J＝17.3Hz，1H)，5.82(d，J＝7.6Hz，1H)，5.13(d，J＝50.0Hz，1H)，4.39(m，1H)，3.97(d，J＝12.2Hz，1H)，3.68(dd，J＝13.0和2.5Hz，1H)，2.21-2.00(m，2H)；13C NMR(100MHz，CD3OD)d 165.9，155.0，140.8，97.3(d，J＝176.8Hz)，93.6，90.3(d，J＝35.6Hz)，81.3，60.7，31.0(d，J＝20.5Hz)；IR(KBr)3397，3112，1680，1400，1178，1070cm-1；HRMS理論值[M+Li]C9H12N3O3FLi236.1024.實(shí)測(cè)值236.1028.元素分析理論值.C9H12N3O3FC，47.16；H，5.28；N，18.33.實(shí)測(cè)值C，47.01；H，5.21；N，18.29。
(L)-5′-O-(叔丁基二苯基甲硅烷基)-2′，3′-二脫氧-2′-氟-胸苷(23)端基異構(gòu)體的混合物Rf(10％MeOH/90％二氯甲烷)＝0.56；mp61-65℃.1H NMR(360，MHz，CDCl3)d 9.48(bs，1H)，7.67(m，4H)，7.45-7.37(m，7H)，6.15(dd，J＝20.2和3.2Hz，0.36H)，5.99(d，J＝18.4Hz，0.64H)，5.34(d，J＝51.8Hz，0.36H)，5.24(dd，J＝52.2和4.3Hz，0.64H)，4.59(m，0.36H)，4.45(m，0.64H)，4.17(dd，J＝12.2和2.5Hz，0.64H)，3.91(dd，J＝11.9和2.9Hz，0.36H)，3.81(dd，J＝11.5和2.9Hz，0.64H)，3.68(dd，J＝10.8和3.6Hz，0.36H)，2.40-2.12(m，2H)，1.94(s，1.08H)，1.61(s，1.92H)，1.10(s，5.76H)，1.07(s，3.24H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)d164.1，164.0，150.4，150.2，136.4，135.6，135.5，135.4，135.3，135.2，133.0，132.8，132.6，130.1，130.0，129.9，127.94，127.90，127.8，110.8，109.8，96.4(d，J＝181.3Hz)，92.1(d，J＝185.8Hz)，90.7(d，J＝36.4Hz)，86.6(d，J＝15.2Hz)，80.9，79.4，64.9，63.6，33.4(d，J＝20.5Hz)，32.0(d，J＝21.2Hz)，27.0，26.8，19.4，19.2，12.6，12.2；IR(薄膜)3183，3050，1696，1506，1188cm-1；HRMS理論值[M+Li]C26H31N2O3SiF489.2197.實(shí)測(cè)值489.2175.元素分析理論值C26H31N2O3SiFC，64.71；H，6.47；N，5.80.實(shí)測(cè)值C，64.88；H，6.56；N，5.76。
(L)-5′-O-(叔丁基二苯基甲硅烷基)-2′，3’-二脫氧-2’-氟-5-氟尿苷(24)端基異構(gòu)體的混合物Rf(1∶1己烷/EtOAc)＝0.48；mp 65-71℃。1H NMR(400MHz，CDCl3)d 9.08(bs，0.4H)，9.00(bs，0.6H)8.01(d，J＝5.4Hz，0.6H)，7.65(m，4H)，7.42(m，6.4H)，6.10(dd，J＝20.2和1.4Hz，0.4H)，6.00(d，J＝16.0Hz，0.6H)，5.35(dd，J＝52.4和1.6Hz，0.4H)，(5.22，dd，J＝51.2和4Hz，0.6H)，4.57(m，0.4H)，4.44(m，0.6H)，4.22(dd，J＝12.4和2.0Hz，0.6H)，3.91(dd，J＝11.2和2.9Hz，0.4H)，3.70(m，1H)，2.45-2.00(m，2H)，1.09(s，5.4H)，1.07(s，3.6H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)d 156.9(d，J＝26.5Hz)，148.8，148.6，140.3(d，J＝236.7Hz)，140.1(d，J＝235.1Hz)，135.6，135.5，135.4，132.9，132.7，132.4，132.3，130.2，130.1，129.9，127.9，127.8，125.1(d，J＝34.9Hz)，123.6(d，J＝34.2Hz)，96.4(d，J＝182.9Hz)，92.0(d，J＝186.6Hz)，90.2(d，J＝36.0Hz)，86.9(d，J＝15.1Hz)，81.7，79.8，64.8，63.0，33.2(d，J＝20.5Hz)，30.9(d，J＝20.4Hz)，26.9，26.8，19.2；IR(薄膜)3191，1719，1113cm-1；HRMS理論值[M+Li]C26H31N2O3SiF Li493.1946.實(shí)測(cè)值493.1952.元素分析理論值C26H31N2O3SiFC，61.71；H，5.80；N，5.76.實(shí)測(cè)值C，61.73；H，5.83；N，5.77。
α-(L)-2′，3’-二脫氧-2’-氟-胸苷(26a)Rf(100％EtOAc)＝0.25；mp 147-149℃。1H NMR(360MHz，CD3OD)d 7.45(s，1H)，6.11(dd，J＝19.4和2.9Hz，1H)，5.30(d，J＝53.6Hz，1H)，4.58(m，1H)，3.79(dd，J＝12.2和2.2Hz，1H)，3.55(dd，J＝2.2和3.6Hz，1H)，2.40-2.15(m，2H)，1.87(s，3H)；13C NMR(100MHz，CD3OD)d 166.6，162.3，138.6，110.5，93.9(d，J＝185.1Hz)，88.3(d，J＝15.1Hz)，81.7，64.4，34.5(d，J＝20.5Hz)，12.6；IR(KBr)3436，3166，1727，1667，1362，1186c-1；HRMS理論值[M+Li]C10H13N2O4FLi251.1019.實(shí)測(cè)值251.1014.元素分析理論值C10H13N2O4FC，49.18；H，5.37；N，11.47.實(shí)測(cè)值.C，49.32；H，5.40；N，11.29。
β-(L)-2′，3′-二脫氧-2’-氟-胸苷(26b)Rf(100％EtOAc)＝0.38；mp186-188℃。1H NMR(360MHz，CD3OD)d 7.94(s，1H)，5.93(d，J＝17.6Hz，1H)，5.20(d，J＝51.8Hz，1H)，4.40(m，1H)，3.98(d，J＝11.9Hz，1H)，3.68(d，J＝13.0Hz，1H)，2.37-2.10(m，2H)，1.83(s，3H)；13C NMR(100MHz，CD3OD)d 166.7，152.3，138.2，111.0，98.4(d，J＝178.3Hz)，92.1(d，J＝36.4Hz)，83.1，62.4，32.5(d，J＝20.5Hz)，12.6；IR(KBr)3478，3052，1684，1363，1192，1005cm-1；元素分析理論值C10H13N2O4FC，49.18；H，5.37；N，11.47.實(shí)測(cè)值C，49.29；H，5.44；N，11.36。
α-(L)-2′，3’-二脫氧-2’-氟-5-氟尿苷(27a)Rf(100％EtOAc)＝0.38；mp 155-157℃。1H NMR(400MHz，CD3OD)d 7.80(d，J＝6.8Hz，1H)，6.13(d，J＝20.0Hz，1H)，5.35(d，J＝54.4Hz，1H)，4.63(m.1H)，3.81(dd，J＝11.9和3.2Hz，1H)，3.58(dd，J＝12.4和2.0Hz，1H)，2.41-2.15(m，2H)；13C NMR(100MHz，CD3OD)d 159.6(d，J＝25.8Hz)，150.7，141.5(d，J＝230.6Hz)，127.0(d，J＝34.9Hz)，93.9(d，J＝184.3Hz)，88.5(d，J＝15.1Hz)，81.9，64.3，34.3(d，J＝20.5Hz)；IR(KBr)3401，3098，1661，1458，1018cm-1；HRMS理論值[M+Li]C9H10N2O4F2Li255.0769.實(shí)測(cè)值255.0771.元素分析理論值C9H10N2O4F2C，43.56；H，4.06，N，11.29.實(shí)測(cè)值C，43.70；H，4.17；N，11.15。
β-(L)-2’，3’-二脫氧-2’-氟-5-氟尿苷(27b)
Rf(100％EtOAc)＝0.54；mp 153-156℃。1H NMR(400MHz，CD3OD)d 8.46(d，J＝6.8Hz，1H)，5.94(d，J＝16.4Hz，1H)，5.25(dd，J＝51.6和4.0Hz，1H)，4.41(m，1H)，4.05(dd，J＝12.8和2.4Hz，1H)，3.72(dd，J＝12.4和2.4Hz，1H)，2.34-2.09(m，2H)；13C NMR(100MHz，CD3OD)d 159.7(d，J＝25.8Hz)，150.7，141.8(d，J＝230.6Hz)，126.3(d，J＝35.7Hz)，98.3(d，J＝184.6Hz)，91.9(d，J＝36.4Hz)，83.6，61.9，31.9(d，J＝20.5Hz)；IR(KBr)3482，3037，1702，1654，1402，1103cm-1；HRMS理論值[M+Li]C9H10N2O4F2Li255.0769.實(shí)測(cè)值255.0764.元素分析理論值C9H10N2O4F2C，43.56；H，4.06；N，11.29.實(shí)測(cè)值C，43.59；H，4.06；N，11.17。
制備L-2’-氟-2′，3’-不飽和核苷不飽和2’-氟代核苷的第二種容易的合成方法現(xiàn)已完成并描述如下.此合成包括將被保護(hù)的嘧啶或嘌呤堿與關(guān)鍵中間體309在Lewis酸的存在下反應(yīng)，總的如下列方案9所述。按照此合成方法合成的典型化合物見表5-6。
方案9
方案9
方案9
表2

aCDCl3，bDMSO-d6
表3

aCDCl3，bDMSO-d6
表4

bDMSO-d6
表5

*溶劑；A；EtOAc-己烷，B；CH2Cl2-MeOH，C；CHCl3-MeOH，D；THF-40環(huán)己烷，E；凍干如前所述，通過由容易得到的核苷類似物開始的消除反應(yīng)已完成了2’，3’-不飽和-D-核苷的合成，其中包括單個(gè)核苷酸的冗長(zhǎng)的修飾反應(yīng)。一些人報(bào)告了通過適宜的2′-氟代核苷類似物的消除反應(yīng)制備D-2’-氟-2’，3’-不飽和嘧啶核苷(Martin，J.A.等，J.Med Chem.1990，33，213 7-2145；Stezycki，R.Z.等，J.Med.Chem.1990，33，2150-2157)。但是用此方法合成L-Fd4N時(shí)，在制備起始物L(fēng)-核苷中遇到了另外一些困難。由于2，3-不飽和糖部分在偶聯(lián)條件下在Lewis酸的存在下不穩(wěn)定，通過直接縮合合成2′，3′-不飽和嘌呤核苷的實(shí)例非常少，只有一種嘧啶類似物的情況用噻酚基中間體(Abdel-Medied，A.W.S.等，Synthesis 1991，313-317；Sujino，K.等，Tetrahedron Lett.1996，37，6133-6136)。與2，3-不飽和糖部分相反，2-氟-2，3-不飽和糖在與雜環(huán)縮合時(shí)糖基鍵的穩(wěn)定性提高，預(yù)計(jì)對(duì)直接偶聯(lián)反應(yīng)會(huì)變得更穩(wěn)定。因此，選擇(R)-2-氟代丁烯羥酸內(nèi)酯506，作為關(guān)鍵中間體508的前體，其可以由L-甘油醛丙酮化合物(glyceraldehyde acetonide)501制備。
由L-甘油醛丙酮化合物開始，通過Horner-Emmons反應(yīng)在α-氟代磷酰基乙酸三乙基酯和雙(三甲基甲硅烷基)氨化鈉的存在下在THF中獲得(E)-502/(Z)-2的混合物(1H NMR檢測(cè)9∶1)(Thenappan，A.等，J.Org.Chem.，1990，55，4639-4642；Morikawa，T.等，Chem.Pharm.Bull.1992，40，3189-3193；Patrick，T.B.等，J.Org.Chem.1994，59，1210-1212).由于在分離(E)-502/(Z)-502異構(gòu)體中的困難，將此混合物用于以下的環(huán)合反應(yīng)中，在酸性條件下得到所需的內(nèi)酯503和未環(huán)合的二醇504.將所得混合物轉(zhuǎn)變?yōu)榧坠柰榛膬?nèi)酯506，將其用DIBAL-H在二氯甲烷中在-78℃下還原得到乳醇507。將此乳醇507用醋酸酐處理得到關(guān)鍵中間體508，將其與甲硅烷基化的6-氯代嘌呤在Vorburggen條件下縮合得到端基異構(gòu)體混合物509。用TBAF在THF中處理509得到游離的核苷510和511，用硅膠色譜容易地將其分離。通過用巰基乙醇和NaOMe在不銹鋼瓶中在90℃下處理化合物510和511分別得到腺嘌呤類似物512和513。用巰基乙醇和NaOMe處理化合物510和511分別得到肌苷類似物514和515。這些化合物的立體化學(xué)由NOESP波譜確定(B異構(gòu)體512中在H-1′和H-4′之間存在交叉峰)。
方案10.通過直接縮合合成L-2’-氟-d4腺嘌呤和次黃嘌呤
表7.在PBM中L-2’-氟-d4腺嘌呤和次黃嘌呤抗HIV-1的半數(shù)有效值(EC50)和半數(shù)抑制值(IC50)

實(shí)驗(yàn)部分用Mel-temp II實(shí)驗(yàn)裝置檢測(cè)熔點(diǎn)并未校準(zhǔn)。用四甲基甲硅烷作為內(nèi)標(biāo)物用Bruker 250和AMX400 400MHz色譜儀記錄核磁共振光譜；化學(xué)位移(δ)用百萬分之一報(bào)告(ppm)，而信號(hào)描述為s(單峰)，d(雙重峰)，t(三重峰)，q(四重峰)，br s(寬單峰)，dd(雙重雙峰)及m(多重峰)。UV光譜得自beckman DU 650光譜儀。旋先性在Jasco DIP-370數(shù)碼旋光計(jì)上測(cè)定。質(zhì)譜在Micromass Inc.Autospec高分辨雙聚焦扇形片(EBE)MS光譜儀上檢測(cè)。紅外光譜記錄于Nicolet 510 FT-IR光譜儀。由Atlantic Mcrolab，Inc.，Norcross，GA進(jìn)行元素分析。所有反應(yīng)用薄層色譜Analtech，200mm硅膠GF板監(jiān)控。在使用前用Ca2H蒸餾獲得干燥的1，2-二氯乙烷、二氯甲烷和乙腈。用鈉和二苯酮蒸餾，當(dāng)溶液變紫時(shí)獲得干燥的THF。
L-(S)-甘油醛丙酮化合物(302)將L-古洛糖酸-γ-內(nèi)酯(175g，0.98mol)的DMF(1L)溶液冷卻至0℃并在攪拌下分批加入對(duì)甲苯磺酸(1.1g，5.65mmol)。向所得溶液中，通過滴液漏斗在0℃下滴加2-甲氧基丙烯(87.7g，0.92mol)。將此反應(yīng)混和物升溫至室溫并再攪拌24小時(shí)。反應(yīng)完畢后，加入碳酸鈉(124g)并將所得懸浮液劇烈攪拌3小時(shí)。然后，用玻璃過濾器過濾并將此濾液真空蒸發(fā)得到黃色殘余物，加入甲苯(170mL)，發(fā)生結(jié)晶.抽濾固體，用己烷/乙醇(9∶1；1L)洗滌，并干燥得到淡黃色固體301(99.1g，65％)。
向攪拌的、5，6-O-亞異丙基-L-古洛糖酸-1，4-內(nèi)酯(70.0g，0.32mol)在水(270mL)中的懸浮液中，在0℃下在30分鐘內(nèi)分批加入偏高碘酸鈉(123g，0.58mol)，維持pH5.5(通過加入2N氫氧化鈉調(diào)節(jié))。將此懸浮液室溫下攪拌2小時(shí)，然后用氯化鈉飽和并過濾。將此濾液的pH調(diào)節(jié)至6.5-7.0，并用二氯甲烷(5次，200mL)和乙酸乙酯(5次，300mL)萃取。用無水硫酸鎂將合并的有機(jī)層干燥，過濾并減壓濃縮(＜20℃)。然后將所得殘余物蒸餾得到302(23.2g，69％)，為無色油狀物。b.p.49-51℃/16Torr.[α]D25-66.4(c 6.3，苯)。
(E)/(Z)-乙基-3-[(R)-2，2-二甲基-1，3-二氧雜環(huán)戊烷-4-基]-2-氟丙烯酸酯(E-303和Z-303)將2-氟磷?；宜崛阴?39.2g，162mmol)的THF(70mL)溶液冷卻至-78℃，并滴加雙(三甲基甲硅烷基)氨化鈉(1.0M THF溶液，162mL，162mmol)。將此混合物在-78℃保持30分鐘，然后加入303(19.14g，147mmol)的THF(70mL)溶液。-78℃下攪拌1小時(shí)后，用氯化銨水溶液處理此反應(yīng)混和物并用乙醚萃取。用飽和氯化鈉洗滌醚相，用硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)。將此殘余物在硅膠上進(jìn)行色譜得到E-303和Z-303(91根據(jù)1H NMR)，為淡黃色油狀物(34.6g，97.9％)。1HNMR(CDCl3)81.34，1.36(2t，J＝8Hz，-CH2CH3)，1.40，1.45(2s，-CH3)，3.69(m，Ha-5)，4.28(m，Hb-5，-CH2CH3)，5.02(m，H-4)，5.40(m，H-4)，6.02(dd，J＝8，20Hz，H-3)，6.18(dd，J＝8，32Hz，H-3)。
(R)-(+)-4-[(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)甲基]-2-氟-2-丁烯-4-交酯(307)將E-303和Z-303(19.62g，89.89mmol)的110mL無水乙醇溶液用30mL濃鹽酸處理并在室溫下攪拌2小時(shí)。真空除去溶劑并將此殘余物與甲苯(3×300mL)共蒸發(fā)得到內(nèi)酯304和未環(huán)合的酯305。將所得淡黃色漿不經(jīng)純化直接用于下步反應(yīng)。向304、305和咪唑(12.3g，180mmol)在二氯甲烷(250mL)中的混合物中加入叔丁基二甲基甲硅烷基氯(27.1g，180mmol)，并將此反應(yīng)混和物室溫下攪拌4小時(shí)。將所得混合物用水洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮至干。通過硅膠柱色譜用4％EtOAc-己烷作為洗脫劑分離此殘余物，得到307(28.0g，70.2％，由化合物302)，為白色結(jié)晶固體。mp48-50℃；[α]D+105.3(c1.60，CHCl3)；1H NMR(CDCl3)δ0.07，0.08(2s，2xCH3)，0.88(s，叔丁基)，3.88(m，2H，H-5)，5.01(m，1H，H4)，6.73(pst，1H，J＝4Hz)；元素分析理論值C10H19FO3SiC，53.63；H，7.77.實(shí)測(cè)值C，53.70；H，7.75。
1-乙酰基-4-[(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)甲基]-2-氟-2-丁烯-4-交酯(309)在氮?dú)夥障?，將?nèi)酯307(20.59g，83.54mmol)溶解于200mL的二氯甲烷中，然后冷卻至-78℃，并加入1.0M DIBAL-H的二氯甲烷(125mL)溶液。將所得化合物在-78℃下攪拌2小時(shí)。用稀硝酸處理此冷的混合物，并干燥(硫酸鈉)。將溶劑蒸發(fā)得到端基異構(gòu)體308，為淡黃色油狀物(16.6g，粗收率80％)，將其不經(jīng)純化直接用于下步反應(yīng)。
在0℃將Ac2O(25mL，0.27mol)加入到308和吡啶(22mL，0.27mol)的二氯甲烷(200mL)溶液中，并將所得混合物攪拌16小時(shí)。用稀鹽酸、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌此反應(yīng)混和物。將合并的有機(jī)層干燥，過濾并濃縮至干。將此殘余物進(jìn)行柱色譜純化(6.5％乙酸乙酯/己烷)，得到309(12.6g，65％)，為無色油狀物。
乙酸酯309和嘧啶堿縮合的一般方法在氮?dú)夥障?，將尿嘧?420mg，3.75mmol)，六甲基乙硅氮烷(15mL)和硫酸銨(20mg)的混合物回流3小時(shí)。將所得清澈溶液真空濃縮至干。向糖309(728mg，2.50mmol)和甲硅烷基化堿在干燥的DCE(20ml)的溶液中在0℃下加入TMSOTf(0.7mL，3.14mmol)。將此反應(yīng)混和物在氮?dú)夥障聰嚢?小時(shí)，倒入冷的飽和碳酸氫鈉溶液(30mL)中并攪拌15分鐘。將所得混合物洗滌，干燥(硫酸鈉)，過濾并真空濃縮。將此粗品通過柱色譜(3％甲醇/氯仿)純化得到310(0.960g，2.73mmol，73％)，為不可分的端基異構(gòu)體，將其不經(jīng)分離直接用于下步反應(yīng)。
1-[5-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-2，3-二脫氧-2-氟-L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基]尿嘧啶(310)UV(CHCl3)λmax257.5nm.；元素分析(C15H23N2O4Si)C，H，N.
1-[5-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-2，3-二脫氧-2-氟-L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基]胸腺嘧啶(311)甲硅烷基化的胸腺嘧啶(242mg，1.92mmol)，307(500mg，1.72mmol)和TMSOTf(0.5mL，2.25mmol)反應(yīng)2小時(shí)得到311的混合物，將其通過硅膠柱色譜(3％甲醇/氯仿)純化為不可分的端基異構(gòu)體混合物(0.392g，1.10mmol，64％)。UV(CHCl3)λmax 262.0nm。元素分析(C16H25FN2O4Si)C，H，N。
N6-苯甲?；?1-[5-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-2，3-二脫氧-2-氟-(a，b)-L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基]胞嘧啶(312和313)甲硅烷基化的N6-苯甲酰基胞嘧啶(790mg，3.67mmol)，307(470mg，1.62mmol)和TMSOTf(0.5mL，2.25mmol)反應(yīng)2小時(shí)得到312和313的混合物，將其通過硅膠柱(30％乙酸乙酯/己烷)純化得到β端基異構(gòu)體312(0.34g，0.76mmol，47.1％)，為白色固體，以及α端基異構(gòu)體313(0.23g，0.52mmol，31.8％)，為白色固體。312UV(CHCl3)λmax 260.5nm；元素分析(C22H28FN3O4Si)C，H，N；513UV(CHCl3)λmax260.5nm.；元素分析(C22H28FN3O4Si)C，H，N。
5-氟-1-[5-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-2，3-二脫氧-2-氟-(a，b-L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基]胞嘧啶(314和315)甲硅烷基化的5-氟-胞嘧啶(300mg，2.32mmol)，309(360mg，1.24mmol)和TMSOTf(0.4mL，1.86mmol)反應(yīng)2小時(shí)得到314和315的混合物，將其通過硅膠柱色譜(3％MeOH/二氯甲烷)純化得到β端基異構(gòu)體314白色固體(168mg，37.8％)和α端基異構(gòu)體315(121mg，27.1％)白色固體。314UV(MeOH)λmax281.5nm；315UV(MeOH))λmax281.5mn。
1-(2，3-二脫氧-2-氟-(α，β)-L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基)尿嘧啶(316和317)將氟化四正丁基銨(0.6mL，0.6mmol)加入到310(177mg，0.52mmol)在THF(15mL)中的混合物中并將此反應(yīng)混和物室溫下攪拌15分鐘。除去溶劑并將此殘余物通過硅膠柱色譜(2％MeOH/CHCl3)純化得到β端基異構(gòu)體316(52.8mg，0.23mmol，44.5％)和α端基異構(gòu)體317(35.1mg，0.15mmol，29.6％)。
316UV(H2O)λmax261.0mn(pH7)；元素分析(C9H9FN2O4·0.3H2O)C，H，N。317UV(H2O)λmax261.0nm(pH7)；元素分析(C9H9FN2O4·0.2H2O)C，H，N。
1-(2，3-二脫氧-2-氟-(α，β)-L-甘油基-戊-2-烯呋喃基)胸腺嘧啶(318和319)在0℃，將氟化四正丁基銨(0.8mL，0.8mmol)加入到311(240mg，0.67mmol)在THF(10mL)中的混合物中，并將此反應(yīng)混和物室溫下攪拌15分鐘。除去溶劑并將此殘余物通過硅膠柱色譜(40％THF/環(huán)己烷)純化得到β端基異構(gòu)體318(66.5mg，0.28mmol，41％)和α端基異構(gòu)體319(52.8mg，0.23nunol，26％)。
318UV(H2O)λmax265.5nm(pH7)；元素分析(C9H9FN2O4·0.3H2O)C，H，N。319UV(H2O)λmax266.0nm(pH7)；元素分析(C9H9FN2O4·0.3H2O)C，H，N。
N6-苯甲酰基-1-(2，3-二脫氧-2-氟-β-L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基)胞嘧啶(320)將氟化四正丁基銨(1M在THF中)(1mL，1mmol)加入到β端基異構(gòu)體312(280mg，0.63mmol)的THF(10mL)溶液中并將此反應(yīng)在室溫下攪拌1小時(shí)。將此反應(yīng)混和物減壓濃縮并將此殘余物通過閃式硅膠柱用2.5％MeOH/CHCl3洗脫純化得到320(218mg，0.66mmol，75％)，為白色固體。
UV(MeOH)λmax260.5nm。元素分析(C16H14FN3O4)C，H，N。
N6-苯甲?；?1-(2，3-二脫氧-2-氟-α-L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基)胞嘧啶(321)將氟化四正丁基銨(1M在THF中)(1mL，1mmol)加入到α端基異構(gòu)體313(280mg，0.63mmol)的THF(10mL)溶液中并將此反應(yīng)在室溫下攪拌1小時(shí)。將此反應(yīng)混和物減壓濃縮并將此殘余物通過閃式硅膠柱用2.5％MeOH/CHCl3洗脫純化得到321(145.8mg，0.44mmol，69％)，為白色固體。
UV(MeOH)λmax260.5nm。元素分析(C16H14FN3O4·0.3H2O)C，H，N。
1-(2，3-二脫氧-2-氟-β-L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基)胞嘧啶(322)將β端基異構(gòu)體(67.60mg，0.204mmol)的甲醇(5mL)溶液用NH3/MeOH(10mL飽和溶液)處理并將此反應(yīng)混和物室溫下攪拌直到觀察到起始物消失(10小時(shí))。將此反應(yīng)混和物減壓濃縮并將此殘余物通過制備TLC純化，用12％MeOH/二氯甲烷作洗脫劑。由此板獲得的物質(zhì)322(43mg，93.1％)，為固體，將其用己烷和乙醚研磨.
UV(H2O)λmax266.5nm(pH7)；元素分析(C9H10FN3O3·0.4H2O)C，H，N。
1-(2，3-二脫氧-2-氟-α-L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基)胞嘧啶(323)將α端基異構(gòu)體(65.90mg，0.199mmol)的甲醇(5mL)溶液用NH3/MeOH(10mL飽和溶液)處理并將此反應(yīng)混和物室溫下攪拌直到觀察到起始物消失(16小時(shí))。將此反應(yīng)混和物減壓濃縮并將此殘余物通過制備TLC純化，用12％MeOH/二氯甲烷作洗脫劑。由此板獲得的物質(zhì)323(42.5mg，94.5％)，為固體，將其用己烷和乙醚研磨。
UV(H2O)λmax276.0nm(pH7)；元素分析(C9H10FN3O3)C，H，N。
5-氟-1-(2，3-二脫氧-2-氟-β-L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基)胞嘧啶(324)將氟化四正丁基銨(1M在THF中)加入到β端基異構(gòu)體314的乙腈溶液中并將此反應(yīng)室溫下攪拌1小時(shí)。將此反應(yīng)混和物減壓濃縮并將此殘余物通過閃式硅膠柱用12％MeOH/CHCl3洗脫純化得到324.
5-氟-1-(2，3-二脫氧-2-氟-α-L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基)胞嘧啶(325)將氟化四正丁基銨(1M在THF中)加入到α端基異構(gòu)體315的乙腈溶液中并將此反應(yīng)室溫下攪拌1小時(shí)。將此反應(yīng)混和物減壓濃縮并將此殘余物通過閃式硅膠柱用12％MeOH/CHCl3洗脫純化得到325。
乙酸酯309與嘌呤堿縮合的一般方法在氮?dú)夥障拢瑢?-氯嘌呤(1.20g，7.75mmol)，六甲基乙硅氮烷(25mL)和硫酸銨(催化量)的混合物回流4小時(shí)。將所得清澈溶液真空濃縮至干并將此殘余物溶解于無水DCE(10mL)中并在室溫下與307(1.50g，5.17mmol)的DCE(40mL)溶液和三氟甲磺酸三甲基甲硅烷基酯(1.5mL，7.75mmol)反應(yīng)。在氮?dú)夥障率覝財(cái)嚢?小時(shí)后，將此反應(yīng)溶液倒入到冰冷的飽和碳酸氫鈉溶液(20mL)中并攪拌15分鐘。用水和鹽水洗滌此有機(jī)層，并用硫酸鎂干燥。減壓除去溶劑并通過硅膠柱色譜用12.5％乙酸乙酯/己烷將此殘余物分離，得到端基異構(gòu)體混合物326(1.25g，62.9％)，為漿狀物。
6-氯-9-[5-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-2，3-二脫氧-2-氟-L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基]嘌呤(326)326UV(MeOH)λmax265.0nm；元素分析(C16H22ClFN4O2Si)C，H，N。
6-氨-2-氟-9-[5-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-2，3-二脫氧-2-氟-(α，β)L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基]嘌呤(327和328)將甲硅烷基化的2-氟-6-氯嘌呤[由1.170g(6.78mmol)的2-氟-6-氯嘌呤制備]和無水DCE(40mL)的混合物室溫下攪拌16小時(shí)。類似于326經(jīng)處理后，通過硅膠柱色譜(12％乙酸乙酯/己烷)純化得到β端基異構(gòu)體327(685mg，1.70mmol，30.0％)白色泡沫和α端基異構(gòu)體328(502mg，1.25nunol，22.1％)淡黃色漿狀物。
327UV(MeOH)λmax268.5nm.元素分析(C16H21F2ClN4O2Si)C，H，N.，328UV(MeOH)λmax269.0nm。元素分析(C16H21F2ClN4O2Si)C，H，N.
6-氨-9-(2，3-二脫氧-2-氟-(α，β)-L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基)嘌呤(329和330)將326(1.2g，3.12mmol)的無水CH3CN(20mL)溶液用TBAF(1M的THF溶液)(3.2mL，3.2mmol)處理并攪拌1小時(shí).蒸發(fā)溶劑后，將殘余物通過柱色譜(3％甲醇/氯仿)純化得到β端基異構(gòu)體329(296mg，35％)白色固體和α端基異構(gòu)體330(380mg，45％)泡沫。
329UV(MeOH)λmax265.0nm.；330UV(MeOH)λmax265.0nm。
6-氨基-2-氟-9-[5-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-2，3-二脫氧-2-氟-β-L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基]嘌呤(331)和6-氯-2-氨基-9-[5-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-2，3-二脫氧-2-氟-β-L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基]嘌呤(332)室溫下將干燥的氨氣通入攪拌的、327(420mg，1.04mmol)的無水DME(35mL)溶液中，過夜通入。過濾除去鹽并將此濾液減壓蒸發(fā)。將此殘余物通過硅膠柱色譜(25％EtOAc/己烷)純化得到兩種化合物，331(114mg，0.30mmol)白色固體和332(164mg，0.41mmol)白色固體。
331UV(MeOH)λmax268，5nm。元素分析(C16H23F2N5O2Si·0.2丙酮)C，H，N；332UV(MeOH)λmax307.5nm。元素分析(C16H23FN5O2ClSi)C，H，N，Cl。
6-氨基-2-氟-9-[5-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-2，3-二脫氧-2-氟-α-L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基]嘌呤(333)和6-氯-2-氨基-9-[5-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-2，3-二脫氧-2-氟-α-L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基]嘌呤(334)室溫下將干燥的氨氣通入攪拌的、333(420mg，1.04mmol)的干燥DME(35mL)溶液中，過夜通入。過濾除去鹽并將此濾液減壓蒸發(fā)。將此殘余物通過硅膠柱色譜(25％EtOAc/己烷)純化得到兩種化合物，332(150mg，0.30mmol)白色固體和333(150mg，0.38mmol)白色固體。
333UV(MeOH)λmax269.0nm。元素分析(C16H23F2N5O2Si·0.3丙酮)C，H，N；332UV(MeOH)λmax309.5nm。元素分析(C16H23FClN5O2Si)C，H，N。
9-(2，3-二脫氧-2-氟-β-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基)腺嘌呤(335)將329(100mg，0.369mmol)和飽和NH3/MeOH(50mL)在不銹鋼瓶中在90℃加熱24小時(shí)。冷卻至室溫后，減壓除去溶劑并將殘余漿狀物通過柱色譜用6％MeOH/CHCl3作為洗脫劑純化得到335(70mg，75％)白色固體.335UV(H2O)λmax258nm(ε18，800)(pH2)，258.5nm(ε18，800)(pH7)，258.5nm(ε19，100)(pH11)。元素分析(C10H10FN5O2.0.2H2O)C，H，N。
9-(2，3-二脫氧-2-氟-α-L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基)腺嘌呤(336)將330(100mg，0.369mmol)和飽和NH3/MeOH(50mL)在不銹鋼瓶中在90℃加熱24小時(shí)。冷卻至室溫后，減壓除去溶劑并將殘余漿狀物通過柱色譜用6％MeOH/CHCl3作為洗脫劑純化得到335(72mg，78％)白色固體。336UV(H2O)λmax258nm(ε21，100)(pH2)，259nm(ε21，500)(pH7)，29nm(ε22，600)(pH11).元素分析(C10H10FN5O2.0.3MeOH)C，H，N.
9-(2，3-二脫氧-2-氟-β-L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基)次黃嘌呤(337)將329(100mg，0.369mmol)，NaOMe(0.5M甲醇溶液)(2.94mL，1.46mmol)和HSCH2CH2OH(0.1mL，1.46mmol)在甲醇(20mL)中的混合物在氮?dú)夥障禄亓?小時(shí).將此反應(yīng)混和物冷卻，用冰醋酸中和并真空蒸發(fā)至干。將此殘余物通過硅膠柱色譜(10％甲醇/氯仿)純化得到337(74mg，80％)白色固體.337UV(H2O)λmax247nm(ε12，400)(pH2)，247.5nm(ε13，000)(pH7)，253nm(ε13，100)(pH11)。元素分析(C10H9FN4O3.0.2H2O)C，H，N.
9-(2，3-二脫氧-2-氟-α-L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基)次黃嘌呤(338)將330(100mg，0.369mmol)，NaOMe(0.5M甲醇溶液)(2.94mL，1.46mmol)和HSCH2CH2OH(0.1mL，1.46mmol)在甲醇(20mL)中的混合物在氮?dú)夥障禄亓?小時(shí).將此反應(yīng)混和物冷卻，用冰醋酸中和并真空蒸發(fā)至干.將此殘余物通過硅膠柱色譜(10％甲醇/氯仿)純化得到338(70mg，80％)白色固體。338UV(H2O)λmax247.5nm(ε12，700)(pH2)，247.5nm(ε13，700)(pH7)，252.5nm(ε13，100)(pH11)。元素分析(C10H9FN4O3.0.3H2O)C，H，N。
2-氟-6-氨基-9-(2，3-二脫氧-2-氟-β-L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基)嘌呤(339)將31(101mg，0.26mmol)的無水乙腈(15mL)溶液用TBAF(1MTHF溶液)(0.35mL，0.35mmol)處理并攪拌30分鐘.溶劑蒸發(fā)后，將殘余物通過柱色譜(9％二氯甲烷/甲醇)純化得到339(64.7mg，0.24mmol，92.3％)白色結(jié)晶固體。UV(H2O)λmax269.0nm(pH7)。
2-氟-6-氨基-9-(2，3-二脫氧-2-氟-α-L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基)嘌呤(340)將333(73.4mg，0.19mmol)的無水乙腈(10mL)溶液用TBAF(1M THF溶液)(0.25mL，0.25mmol)處理并攪拌30分鐘。溶劑蒸發(fā)后，將殘余物通過柱色譜(9％二氯甲烷/甲醇)純化得到340(46.2mg，0.17mmol，90.3％)白色結(jié)晶固體。UV(H2O)λmax269.0nm(pH7).
2-氨基-6-氯-9-(2，3-二脫氧-2-氟-β-L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基)嘌呤(341)將332(143.5mg，0.40mmol)的無水乙腈(15mL)溶液用TBAF(1M THF溶液)(0.60mL，0.60mmol)處理并攪拌30分鐘。溶劑蒸發(fā)后，將殘余物通過柱色譜(5％二氯甲烷/甲醇)純化得到341(109mg，0.382mmol，90.3％)白色結(jié)晶固體.UV(H2O)λmax308.5nm(pH7)。
2-氨基-6-氯-9-(2，3-二脫氧-2-氟-α-L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基)嘌呤(342)將334(145mg，0.36mmol)的無水乙腈(10mL)溶液用TBAF(1 MTHF溶液)(0.50mL，0.50mmol)處理并攪拌30分鐘.溶劑蒸發(fā)后，將殘余物通過柱色譜(9％二氯甲烷/甲醇)純化得到342(99.9mg，0.35mmol，96.4％)白色結(jié)晶固體。UV(H2O)λmax309.0nm(pH7)。
9-(2，3-二脫氧-2-氟-β-L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基)鳥嘌呤(343)將341(63.6mg，0.223mmol)，2-巰基乙醇(0.06mL，0.89mmol)和1N NaOMe(0.89mL，0.89mmol)在甲醇(10mL)中在氮?dú)夥障禄亓?小時(shí)。將此混合物冷卻，用冰醋酸中和并減壓濃縮至干。將此殘余物通過柱色譜(12％二氯甲烷/甲醇)純化得到343(30.1mg，0.113mmol，50.7％)白色固體。UV(H2O)λmax253.5nm(pH7)。
9-(2，3-二脫氧-2-氟-α-L-甘油基-戊-2-烯呋喃糖基)鳥嘌呤(344)將342(59.3mg，0.208mmol)，2-巰基乙醇(0.07mL，1.04mmol)和1N NaOMe(1.04mL，1.04mmol)在甲醇(10mL)中在氮?dú)夥障禄亓?小時(shí)。將此混合物冷卻，用冰醋酸中和并減壓濃縮至干.將此殘余物通過柱色譜(12.5％二氨甲烷/甲醇)純化得到344(28.0mg，0.105mmol，50.5％)白色固體。UV(H2O)λmax253.0nm(pH7)。
合成順-(±)-碳環(huán)d4胞嘧啶核苷及其5’-三磷酸鹽參照方案11，由二烯丙基丙二酸二乙酯(701)開始，以78％的收率合成4-乙氧羰基-1，6-庚二烯(702)(W.A.Nugent，J.Am.Chem.Soc.，1995，117，8992-8998)。以71％的收率由化合物702合成化合物703(L.E.Martinez，J.Org.Chem.，1996，61，7963-7966)而以43％的收率由化合物704合成化合物705(D.M.Hodgson，J.Chem.Soc.Perkin Trans.1，1994，3373-3378)。關(guān)鍵中間體順-(±)-3-乙酰氧基-5-(乙酰氧基甲基)環(huán)戊烯(708)或者可以從環(huán)戊二烯和甲醛在乙酸中用Prins反應(yīng)合成(E.A.Saville-Stones，J.Chem.Soc.PerkinTrans.1，1991，2603-2604)，盡管其有收率低及不可分離的問題；或者可以由雙環(huán)內(nèi)酯合成，其經(jīng)多步驟通過4步反應(yīng)合成(F.Burlina，Bioorg.Med.Chem.Lett.，1997，7，247-250)。雖然需要合成手性的雙環(huán)內(nèi)酯，后種方法得到手性708[(-)-對(duì)映異構(gòu)體]。由5-氟胞嘧啶和乙酸對(duì)硝基苯基酯合成N4-乙酰基-5-氟胞嘧啶(A.S.Steinfeld，J.Chem.Research(M)，1979，1437-1450)。
方案11 實(shí)驗(yàn)部分總論除非另外說明所有的試劑都直接使用。無水試劑購自AldrichChemical Co.。用電熱數(shù)碼熔點(diǎn)儀測(cè)定熔點(diǎn)(M.p.)且不經(jīng)校準(zhǔn)。1H和13C NMR光譜用Varian Unity Plus 400光譜儀在室溫下檢測(cè)并以內(nèi)標(biāo)物四甲基硅烷低磁場(chǎng)的ppm報(bào)告。
4-乙氧羰基-1，6-庚二烯(702)將二烯丙基丙二酸二乙酯(701；50g，208mmol)，氰化鈉(20.7g，422mmol)和DMSO(166mL)的混合物在160℃加熱6小時(shí)。冷卻至室溫后，將此混合物加入到400mL水中并用己烷(4×100mL)萃取產(chǎn)物。將溶劑減壓蒸發(fā)后，將此殘余物蒸餾(42-43℃/1 Torr)得到27.34g(78％)的702，為無色液體。1H NMR(400MHz，CDCl3)65.80-5.70(m，2H，2 CH＝CH2)，5.10-5.02(m，4H，2CH＝CH2)，4.14(q，2H，J＝7.2Hz，OCH2)，2.54-2.48(m，1H，CH)，2.41-2.34，2.29-2.23(2m，4H，2 CH2)，1.25(t，J＝7.2Hz，3H，CH3)。
(±)-3-環(huán)戊烯甲酸乙酯(703)向火焰干燥的500mL燒瓶中加入2，6-二溴酚(1.20g，4.76mmol)，氯氧化鎢(0.813g，2.38mmol)和無水甲苯(25mL)。在氮?dú)夥障聦⑺脩腋∫杭訜峄亓?小時(shí)，然后真空蒸發(fā)溶劑。將固體殘余物用刮刀打碎并真空干燥30分鐘。向此殘余物中加入甲苯(160mL)，Et4Pb(1.54g，4.76mL)和702(22g，131.0mmol)。在氮?dú)夥障拢瑢⒋嘶旌衔镌?0℃下加熱1.5小時(shí)。冷卻至室溫后，將此混合物通過硅藻土過濾，并用叔丁基甲醚清洗硅藻土。將合并的濾液用1％氫氧化鈉溶液、水和鹽水洗滌，并減壓蒸發(fā)濃縮。將此殘余物蒸餾(37-38℃/1 Torr)得到13.06g(71％)的703，為無色液體.1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.67(s，2H，CH＝CH)，4.14(q，2H，J＝7.2Hz，OCH2)，3.11(五個(gè)小峰，J＝7.6Hz，1H，CH)，2.65(d，J＝7.6Hz，4H，2 CH2)，1.27(t，J＝7.2Hz，3H，CH3)。
(±)-1-(羥甲基)-3-環(huán)戊烯(704)向703(7g，50mmol)在無水THF(150mL)的冷(-78℃)溶液中，加入LiAlH4(1M THF溶液，25mL，25mmol)，并將此反應(yīng)溶液在-78℃下在氬氣氛下攪拌4小時(shí)。然后讓此反應(yīng)溶液升溫至0℃，并依次加入2.5mL水、2.5mL 15％氫氧化鈉和7.5mL水。升溫至室溫后，通過硅藻土濾出沉淀并用熱乙酸乙酯清洗此硅藻土。將合并的濾液用0.1N氫氧化鈉和鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)，過濾，濃縮并真空干燥得到4.294g(84％)的704，為淡黃色液體。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.68(s，2H，2 CH＝CH)，3.57(d，J＝6.0Hz，2H，CH2OH)，2.54-2.48(m，3H，CH+CH2)，2.15-2.10(m，2 H，CH2)。
順-(+)-4-(羥甲基)-1，2-環(huán)氧環(huán)戊烷(705)向704(930mg，9.1mmol)和氧釩基乙酰基丙酮(10mg)的無水二氯甲烷(20mL)溶液中，滴加叔丁基甲酸[3M二氯甲烷溶液，由叔丁基甲酸(70％(重量)在水中，41mL，0.3mol)和二氯甲烷(59mL)通過干燥(2×MgSO4)并在4埃分子篩上保存制備，10mL，約30mmol]。室溫下攪拌24小時(shí)后，加入亞硫酸鈉水溶液(15％溶液，60mL)，并將此混合物室溫下攪拌6小時(shí)。分離有機(jī)層，用飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，并濃縮。將此殘余物通過閃式色譜在硅膠上用己烷/乙酸乙酯(2∶1)洗脫純化得到460mg(43％)的705，為無色液體。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.54(s，2H，(CH)2O)，3.49(t，J＝4.0Hz，2H，CH2OH)，2.95(bs，1H，OH)，2.44-2.40(m，1H，CH)，2.05-2.02(m，4H，2 CH2)。13C NMR(100MHz，CDCl3)δ66.9(d，(CH)2O)，59.2(t，CH2OH)，36.5(d，CH)，31.4(t，2 CH2)。
順-(±)-3-乙酰氧基-5-(乙酰氧基甲基)環(huán)戊烯(708)向二苯基聯(lián)硒化物(2.70g，8.65mmol)的無水乙醇(100mL)溶液中分批加入硼氫化鈉。攪拌此溶液至黃色變?yōu)闊o色，然后加入705(1.70g，14.4mmol)的無水THF(10mL)溶液。將此反應(yīng)溶液在氮?dú)夥障录訜峄亓?小時(shí)，然后真空蒸發(fā)溶劑。向此殘余物中加入乙酸乙酯(80mL)和水(30mL)。分離有機(jī)層，用鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)，過濾，濃縮并真空干燥。將所得(±)-1-羥基-4-(羥甲基)-2-(苯基硒基)-環(huán)戊烷(706；淡黃色油狀物)不經(jīng)純化直接用于下步反應(yīng)。向粗品706中加入無水二氯甲烷(60mL)、三乙胺(30mL，216mmol)和DMAP(50mg)。將所得溶液冷卻至0℃，并滴加醋酸酐(14.7g，144mmol)。在氬氣氛下室溫?cái)嚢柽^夜后，蒸發(fā)溶劑，得到(±)-1-乙酰氧基-4-(乙酰氧基甲基)-2-(苯基硒基)-環(huán)戊烷(707；淡黃色油狀物)。向含3滴吡啶的707的冷(0℃)二氯甲烷(50mL)溶液中，在5分鐘內(nèi)加入30％過氧化氫溶液(20ml)。在0℃攪拌30分鐘后，再在室溫下攪拌30分鐘，加入二氯甲烷(50mL)稀釋此反應(yīng)混和物。分離有機(jī)相，用水、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)，過濾并真空蒸發(fā)濃縮。將此殘余物通過閃式色譜在硅膠上用存在于己烷中的0-10％乙酸乙酯洗脫純化得到2.254g(79％，3步總收率)的708，為淡棕色液體。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.01-6.00，5.92-5.90(2m，2H，CH＝CH)，5.66-5.64(m，1H，H-3)，4.04(d，J＝6.8Hz，2H，CH2O)，2.98-2.92(m，1H，H-5)，2.53-2.46(m，1H，H-4a)，2.08，2.04(2s，6H，2 CH3)，1.60-1.54(m，2H，H-4b)。13C NMR(100MHz，CDCl3)δ171.1，170.9(2s，2 C＝0)，137.0，131.4(2d，CH＝CH)，79.2(d，C-3)，67.4(t，CH2O)，43.7(d，C-5)，33.4(t，C-4)，21.3，20.9(2q，2 CH3)。
順-(±)-碳環(huán)-5’-O-乙?；?2’，3′-二脫氫-2’，3’-二脫氧-5-氟胞苷(709)將5-氟胞嘧啶(258mg，2mmol)和NaH(58mg，2.4mmol)在無水DMSO(15mL)中的懸浮液在預(yù)熱的油浴中在70℃加熱30分鐘。然后，將所得溶液冷卻至室溫，并分別加入Pd(PPh3)4(73mg，0.063mmol)和708(298mg，1.5mmol)的無水THE(2mL)溶液。將此反應(yīng)混和物在氬氣氛下在70℃攪拌3天。真空蒸發(fā)除去溶劑后，將此殘余物用二氯甲烷(50mL)處理。通過硅藻土濾出沉淀并用二氯甲烷清洗此硅藻土。將合并的濾液濃縮，并將此殘余物通過閃式色譜在硅膠上用存在于二氯甲烷中的0-5％甲醇洗脫純化得到40mg(10％)的709，為淡棕色固體。用甲醇/二氯甲烷/己烷重結(jié)晶得到純的產(chǎn)物，為白色粉末。M.p.182-184℃。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.43(d，J＝6.0Hz，1H，H-6)，6.18-6.16(m，1H，H-3’)，5.83-5.81(m，1H，H-2’)，5.73-5.71(m，1H，H-1’)，4.23-4.21，4.08-4.04(2m，2H，CH2O)，3.14-3.12(m，1H，H-4’)，2.92-2.84(m，1H，.H-6’a)，2.08(s，3H，CH3)，1.41-1.35(m，1H，H-6’b)。
順-(±)-碳環(huán)-N4，5’-O-二乙酰基-2′，3′-二脫氫-2′，3’-二脫氧-5-氟胞苷(710)以類似于709的方法，由708(560mg，2.828mmol)和N4-乙?；?5-氟胞嘧啶(726mg，4.24mmol)制備標(biāo)題化合物710560mg(64％，棕色油狀物)。將此粗品不經(jīng)純化直接用于下步反應(yīng)。
順-(±)-碳環(huán)-N4，5’-O-二乙?；?2′，3′-二脫氫-2′，3’-二脫氧胞苷(711)以類似于709的方法，由708(272mg，1.37mmol)和N4-乙?；奏?316mg，2.06mmol)制備標(biāo)題化合物711108mg(27％)的白色粉末。M.p.169.5-171.5℃。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.80(bs，1H，NH)，7.72(d，J＝6.8Hz，1H，H-6)，7.3 9(d，J＝6.8Hz，1H，H-5)，6.19-6.17(m，1H.H-3’)，5.86-5.81(m，1H，H-2’)，5.77-5.75(m，1H，H-1’)，4.17-4.13，4.07-4.02(2m，2H，CH2O)，3.18-3，10(m，1H，H-4’)，2.96-2.88(m，1H.H-6’a)，2.27，2.06(2s，6H，2 CH3)，1.43-1.37(m，1H，H-6’b)。13C NMR(100MHz，CDCl3)δ170.8(s，2 C＝0)，162.0(s，C-4)，155.6(s，C-2)，145.3(d，C-6)，139.2(d，C-3’)，130.0(d，C-2’)，96.8(d，C-5)，66.3(t，C-5’)，62.8(d，C-1’)，44.2(d，C-4′)，34.7(t，C-6’)，25.0，20.9(2q，2CH3)。
順-(±)-碳環(huán)-2’，3’-二脫氫-2’，3’-二脫氧-5-氟胞苷(712)向裝有709(33mg，0.12mmol)的燒瓶中加入NaOMe(0.5M的甲醇溶液，0.5mL)。將此反應(yīng)溶液室溫?cái)嚢?小時(shí)，并真空蒸發(fā)溶劑。將此殘余物通過閃式色譜在硅膠上用存在于二氯甲烷中的5-10％甲醇洗脫純化得到17mg(61％)的712，為淡棕色固體。用甲醇/二氯甲烷/己烷重結(jié)晶得到純產(chǎn)物，為白色粉末。M.p.205.5-206.0℃.1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.66(d，J＝6.0Hz，1H，H-6)，7.60，7.40(2bs，2H，NH2)，6.06-6.05(m，1H，H-3’)，5.68-5.65(m，1H，H-2’)，5.53-5.50(m，1H，H-1’)，4.77-4.75(m，1H，H4’)，3.50-3.48，3.41-3.37(2m，2H，H-5’)，2.79-2.77(m，1H，H-6’a)，1.34-1.27(m，1H，H-6’b)。13C NMR(100MHz，DMSO-d6)δ157.0(d，JC-F＝11.9Hz，C-4)，154.0(3，C-2)，139.2(d，C-3’)，135.8(d，JC-F＝241.3Hz，C-5)，130.2(d，C-2’)，126.8(d，JC-F＝11.8Hz，C-6)，63.5(t，C-51)，61.3(d，C-1’)，47.2(d，C-4)，33.3(t，C-6’)。MS(FAB)m/e 226(MH+)。元素分析(C10H12FN3O2)理論值C 53.33，H 5.37，N 18.66；實(shí)測(cè)值C53.10，H 5.40，N 18.44。類似于上述方法，由710(750mg，2.42mmol)還制備了化合物712320mg(59％，白色粉末)。
順-(±)-碳環(huán)-2’，3’-二脫氫-2’，3’-二脫氧胞苷(713)以類似于制備712的方法，由化合物711(75mg，0257mmol)制備標(biāo)題化合物71348mg(90％，白色固體)。M.p.200-201℃。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.40(d，J＝7.2Hz，1H，H-6)，7，03，6.95(2bs，2H，NH2)，6.07-6.05(m，1H，H-3’)，5.67(d，J＝7.2Hz，1H，H5)，5.65-5.64(m，1H，H-2’)，5.55-5.52(m，1H，H-1’)，4.71-4.68(m，1H，H4’)，3.43-3.36(m，2H，H-5’)，2.78-2.76(m，1H，H-6’a)，1.24-1.18(m，1H，H-6’b).13C NMR(100MHz，DMSO-d6)δ165.5(s，C-4)，155.8(s，C-2)，142.2(d，C-6)，13 8.6(d，C-3’)，130.5(d，C-2’)，93.7(d，C5)，63.9(t，C-5’)，60.8(d，C-1’)，47.3(d，C-4’)，34.0(t，C-6’)。MS(FAB)m/e 208(MH+)。元素分析(C10H13N3O2)理論值D 57.96，H 6.32，N 20.28；實(shí)測(cè)值C 57.35，H 6.27，N 20.02。HRMS(FAB)理論值(C10H14N3O2)208.1086；實(shí)測(cè)值208.1088。
順-(±)-碳環(huán)-2’，3’-二脫氫-2’，3’-二脫氧-5-氟胞苷5’-三磷酸，三乙基氫銨鹽(714)向712(10mg)的無水DMF(0.3mL)和吡啶(0.1ml)溶液中加入2-氯-4H-1，3，2-苯并二氧雜phosphorin-4-酮的1M無水1，4-二烷(0.05mL)溶液。將此反應(yīng)室溫下攪拌15分鐘。然后，依次加入焦磷酸-Bu3N的1M無水DMF(0.12mL)溶液和Bu3N(0.05mL)。室溫下再攪拌15分鐘后，向上述溶液中滴加I2/H2O/吡啶/THF的溶液直到碘的顏色不褪(約0.5mL)，然后將此混合物真空蒸發(fā)濃縮。將此殘余物溶解于水(2mL)中，用二氯甲烷(3×1mL)洗滌，過濾，并通過FPLC純化(柱HiLoad 26/10 Q Sepharose Fast Flow；緩沖液A0.01M Et3NHCO3；緩沖液B0.7 M Et3NHCO3；流速10mL/分鐘；梯度將B從開始時(shí)的0％至4分鐘時(shí)的10％，在64分鐘時(shí)增加到100％)。收集并將適當(dāng)?shù)酿s份凍干得到714，為無色漿狀物。HPLC[柱100×4.6mm Rainin HydroporeSAX離子交換；緩沖液A10mM NH4H2PO4在10％甲醇/H2O(pH5.5)中；緩沖液B125mM NH4H2PO4在10％MeOH/H2O(pH5.5)中；流速1.0mL/min；梯度將B從開始時(shí)0％增加至25分鐘時(shí)的100％]，滯留時(shí)間11.9分鐘。MS(FAB)m/e 464([M-H]+)。
順-(±)-碳環(huán)-2′，3′-二脫氫-2’，3’-二脫氧胞苷5’-磷酸鹽(715)以類似于制備714的方法，由713制備標(biāo)題化合物715。HPLC(條件同上)滯留時(shí)間12.1分鐘。MS(FAB)m/e 446([M-H]+)。
(±)-羧基-D4FC-三磷酸鹽對(duì)HIV-1逆轉(zhuǎn)錄酶的抑制作用用r(I)n·(dC)12-18均聚物模板引物(Pharmacia，Piscataway，NJ)和HIV-1雜二聚物p66/51逆轉(zhuǎn)錄酶(RT，Biotechnology General，Rehoval，Israel)。標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)混合物(100μl)含100mM Tris-HCl(pH8.0)，50mM KCl，2mM MgCl2，0.05單位/ml r(I)n·(dC)12-18，5mMDTT，100μg/ml牛血清白蛋白和1μM3H-dCTP(2Ci/mmol)。將3TCTP(0.001-50μM)作為陽性對(duì)照。將化合物在37℃下在反應(yīng)混和物中與1單位HIV-1 RT孵育一小時(shí)。加入等體積的冷10％TCA/0.05％焦磷酸鈉停止該反應(yīng)并在4℃下孵育30分鐘。用Packard手動(dòng)收獲儀(Meriden.CT)將沉淀的核酸收集在玻璃纖維過濾紙上。用Packard 9600 Direct Beta計(jì)數(shù)器測(cè)定放射標(biāo)記吸收的每分鐘計(jì)數(shù)(cpm)。
IV.抗HIV活性在一個(gè)實(shí)施方案中，所公開的化合物或其藥用衍生物或鹽或含這些化合物的藥劑用于預(yù)防和治療HIV感染及其相關(guān)疾病，如AIDS相關(guān)綜合征(ARC)、持續(xù)性泛化淋巴節(jié)病(PGL)、AIDS相關(guān)神經(jīng)疾病、抗HIV抗體陽性和HIV陽性的病癥、卡波濟(jì)氏肉瘤、血小板減少性紫癜和機(jī)會(huì)性感染。此外，這些化合物或制劑可以預(yù)防性使用以防止或延遲抗HIV抗體或HIV抗原陽性或已接觸了HIV的個(gè)體的臨床疾病的惡化。
核苷抑制HIV的能力可以通過多種實(shí)驗(yàn)技術(shù)檢測(cè).以下詳述的技術(shù)之一是檢測(cè)對(duì)被HIV-1(株LAV)感染的、用植物凝集素(PHA)刺激的人外周血單核(PBM)細(xì)胞中病毒復(fù)制的抑制。通過檢測(cè)病毒編碼的逆轉(zhuǎn)錄酶來測(cè)定所產(chǎn)生病毒的量.所產(chǎn)生的酶的量與所產(chǎn)生病毒的量成比例。
抗病毒和細(xì)胞毒檢測(cè)如前所述在人外周血單核(PBM)細(xì)胞中測(cè)定這些化合物的抗HIV-1活性(Schinazi，R.F.；McMillan，A.；Cannon，D.；Mathis，R.；Lloyd，R.M.Jr.；Peck，A.；Sonimadossi，J.-P.；St.Clair，M.；Wilson，J.；Furman，P.A.；Painter，G.；Choi，W.-B.；Liotta，D.C.Antimicrob.Agents Chemother.1992，36，2423；Schinazi，R.F.；Sommadossi，J.-P.；Saalmann，V.；Cannon，D.；Xie，M.-Y.；Hart，G.；Smith，G.；Hahn，E.Antimicrob.Agents Chemother.1990，34，1061)。在滅菌的DMSO中制備這些化合物的貯存液(20-40mM)，然后在完全介質(zhì)中稀釋為所需的濃度。在水中制備3’-疊氮基-3’-脫氧胸苷(AZT)貯存液。用原形HIV-1LA1以0.01的多重性感染細(xì)胞。將由細(xì)胞上清液獲得的病毒在感染后第6天通過逆轉(zhuǎn)錄酶實(shí)驗(yàn)用聚(rA)n·寡(dT)12-18作為模板引物定量測(cè)定。在稀溶液(＜0.1％)中DMSO的存在對(duì)病毒的產(chǎn)量應(yīng)沒有影響。可以在人PBM、CEM和Veto細(xì)胞中評(píng)價(jià)這些化合物的毒性。用Chou和Talalay描述的半數(shù)有效方法(Adv.Enzyme Regul.1984，22，27)由濃度-效果曲線獲得抗病毒EC50和細(xì)胞毒性IC50。
將得自乙型肝炎和HIV-1血清陰性的健康供者的、已存活三天的植物凝集素刺激的PBM細(xì)胞(106細(xì)胞/ml)用HIV-1(株LAV)以濃度約百倍于50％組織培養(yǎng)感染劑量(TICD 50)每毫升感染，并在不同濃度的抗病毒化合物存在或不存在下培養(yǎng)。
感染約1小時(shí)后，將含被測(cè)化合物(濃度是在介質(zhì)中最終濃度的2倍)或不含化合物的介質(zhì)加入到燒瓶(5ml；最終體積10ml)。用AZT作為陽性對(duì)照。
讓細(xì)胞接觸病毒(約2×105dpm/ml，通過逆轉(zhuǎn)錄酶實(shí)驗(yàn)檢測(cè))并再置于二氧化碳孵育箱中。HIV-1(株LAV)得自Center for DiseaseControl，Atlanta，Georgia.用于培養(yǎng)PBM細(xì)胞、收獲病毒并測(cè)定逆轉(zhuǎn)錄酶活性的的方法描述于McDougal等(J.Immun.Meth.76，171-183，1985)和Spira等(J.Clin.Moth.25，97-99，1987)，不同的是二性霉素B不包括在介質(zhì)中(見Schinazi等，Antimicrob.AgentsChemother，32，1784-1787(1988)；Id.，341061-1067(1990))。
在第6天，將細(xì)胞和上清液轉(zhuǎn)移至15ml試管并在約900g離心10分鐘。移出5ml上清液并通過在40000rpm離心(Beckman 70.1Ti離心機(jī))30分鐘將病毒濃縮。處理溶解的病毒沉淀物以檢測(cè)逆轉(zhuǎn)錄酶的濃度。結(jié)果以dpm/ml的抽樣上清液表示。由上清液(1ml)獲得的較小量的病毒還可以通過在溶解前離心濃縮并檢測(cè)逆轉(zhuǎn)錄酶的濃度。
半數(shù)有效(EC50)濃度通過半數(shù)有效方法(Antimicrob.AgentsChemother，30，491-498(1986)檢測(cè)。簡(jiǎn)言之，如從檢測(cè)逆轉(zhuǎn)錄酶中測(cè)定的，將病毒的抑制百分率對(duì)化合物的微摩爾濃度作圖。EC50是病毒生長(zhǎng)抑制50％時(shí)化合物的濃度。
在與上述抗病毒實(shí)驗(yàn)類似的條件，在藥物存在或不存在下，可以培養(yǎng)促細(xì)胞分裂劑刺激的未感染人PBM細(xì)胞(3.8×105細(xì)胞/ml)。6天后用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器并用臺(tái)盼藍(lán)排除法計(jì)算細(xì)胞，如Schinazi等，Antimicrobial Agents and Chemotherapy，22(3)，499(1982)所述。IC50是正常細(xì)胞生長(zhǎng)被抑制50％時(shí)化合物的濃度。
表7提供了所選化合物的抗HIV活性數(shù)據(jù)。用此實(shí)驗(yàn)，測(cè)定了(±)-碳環(huán)-D4FC-TP(2’，3’-不飽和-5-氟胞苷的EC50為0.40μM，而(±)-碳環(huán)-D4C-TP(2’，3’-不飽和胞苷)的EC50為0.38μM。
V.抗乙型肝炎活性按照以下詳述的方法可以評(píng)價(jià)活性化合物抑制2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)物(用肝炎病毒顆粒轉(zhuǎn)化的HepG2細(xì)胞)中抑制肝炎病毒生長(zhǎng)的能力。
在此培養(yǎng)系統(tǒng)中檢測(cè)抗病毒作用以及分析HBV DNA的概述和詳述已公開(Korba和Milman，1991，Antiviral Res，15217)?？共《驹u(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)最好對(duì)細(xì)胞獨(dú)立的兩個(gè)階段進(jìn)行。在實(shí)驗(yàn)板中的所有孔以相同密度在相同的時(shí)間接種。
由于細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外HBV DNA的遺傳變異，只有抑制大于未處理細(xì)胞中HBV DNA形式的平均水平的3.5倍(對(duì)于HBV病毒顆粒DNA)或3.0倍(對(duì)于HBV DNA復(fù)制中間體)時(shí)，才認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(P＜0.05)。用在每個(gè)細(xì)胞DNA制劑中整合HBV DNA的濃度(在這些實(shí)驗(yàn)中以每個(gè)細(xì)胞計(jì)其是個(gè)常數(shù))計(jì)算細(xì)胞內(nèi)HBV DNA形式的濃度，以保證在分離的樣本之間細(xì)胞DNA的等量。
在未處理細(xì)胞中細(xì)胞外HBV病毒顆粒DNA的典型值為50至150pg/ml培養(yǎng)基(平均約76pg/ml)。在未處理細(xì)胞中細(xì)胞內(nèi)HBV DNA復(fù)制中間體為50至100μg/pg細(xì)胞DNA(平均約74pg/μg細(xì)胞DNA).總之，將細(xì)胞內(nèi)HBV病毒顆粒DNA濃度的抑制而言，由于用抗病毒化合物治療，因而對(duì)細(xì)胞內(nèi)HBV DNA濃度的抑制不顯著，且發(fā)生得很慢(Korba和Milman，1991，Antiviral Res.，15217)。
這些實(shí)驗(yàn)中可以進(jìn)行雜交分析的方式產(chǎn)生等同于約1.0pg的細(xì)胞內(nèi)HBV DNA至2-3染色體拷貝每個(gè)細(xì)胞和1.0pg/ml的細(xì)胞內(nèi)HBV DNA至3×105病毒顆粒/ml。
進(jìn)行毒性分析以評(píng)價(jià)任何觀察到的抗病毒作用是否由于對(duì)細(xì)胞活力的總作用。本文中所用方法是檢測(cè)中性紅染料(標(biāo)準(zhǔn)的并廣泛用于在多種病毒宿主系統(tǒng)包括HSV和HIV中檢測(cè)細(xì)胞活力物質(zhì))的攝入。毒性分析在96孔平底培養(yǎng)板中進(jìn)行。用于毒性分析的細(xì)胞用與如下所述抗病毒評(píng)價(jià)相同的方案培養(yǎng)并用試驗(yàn)化合物處理。每個(gè)化合物檢測(cè)4個(gè)濃度，每個(gè)濃度在三份培養(yǎng)物(孔A、B和C)中進(jìn)行。用對(duì)中性紅染料的吸收測(cè)定毒性水平。將內(nèi)在的染料在510nm(Asin)的吸收值用來定量分析。該數(shù)值以9個(gè)獨(dú)立培養(yǎng)物中平均Asin值占保持在與被測(cè)化合物相同的96孔板上的未處理細(xì)胞的百分率表示。
VI.抗丙型肝炎活性通過抑制HCV聚合酶，通過抑制復(fù)制循環(huán)中需要的其它酶或通過其它已知方法可以顯示出化合物具有抗丙型肝炎活性。已公開了多種測(cè)定這些活性的方法。
WO97/12033，申請(qǐng)于1996年9月27日，由Emory University申請(qǐng)，Iisting C.Hagedom和A.Reinoldus是發(fā)明人，要求U.S.S.N.60/004,383(1995年9月申請(qǐng))的優(yōu)先權(quán)，描述了可以用于評(píng)價(jià)本發(fā)明化合物活性的HCV聚合酶檢測(cè)。此申請(qǐng)和發(fā)明單獨(dú)屬于TrianglePharmaceuticals，Inc.，Durham，North Carolina。另一種HCV聚合酶檢測(cè)法已由Bartholomeusz等報(bào)告，“用克隆HCV非結(jié)構(gòu)蛋白進(jìn)行的丙肝病毒(HCV)RNA聚合酶檢測(cè)”；Antiviral Therapy 19961(Supp 4)18-24。
VI.治療異常細(xì)胞增殖在可選擇的實(shí)施方案中，這些化合物用來治療異常細(xì)胞增殖。通過常規(guī)篩選實(shí)驗(yàn)(如由National Cancer Institute資助進(jìn)行的)，或用任何其它已知篩選方法(例如WO 96/07413所述的)可以評(píng)價(jià)此化合物的活性.
按照以下CEM細(xì)胞或其它腫瘤細(xì)胞系檢測(cè)法中的方法，可以容易地評(píng)價(jià)化合物的抗癌活性的程度.CEM細(xì)胞為人淋巴瘤細(xì)胞(一種T-成淋巴細(xì)胞系，可得自ATCC，Rockville，MD)?；衔飳?duì)CEM細(xì)胞的毒性為認(rèn)識(shí)該化合物對(duì)腫瘤的活性提供了有用的信息。該毒性以IC50(μM)檢測(cè)。IC50是指抑制培養(yǎng)基中50％腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的被測(cè)化合物濃度。IC50越低，作為抗腫瘤劑該化合物就越具活性。總之，2′-氟代核苷表現(xiàn)出了抗腫瘤活性并可以用于治療細(xì)胞的異常增殖，如果其濃度小于50μM時(shí)在CEM或其它生命力頑強(qiáng)的腫瘤細(xì)胞系中表現(xiàn)毒性，該濃度更優(yōu)選小于10μM，首選小于1μM。藥物溶液，包括作為陽性對(duì)照的放線菌酮，以2倍于最終濃度，分三份置于50μl生長(zhǎng)培養(yǎng)基中，并讓其在37℃下在5％二氧化碳孵育箱中平衡。在50μl生長(zhǎng)培養(yǎng)基中加入對(duì)數(shù)期細(xì)胞至最終濃度2.5×103(CEM和SK-MEL-28)，5×103(MMAN，MDA-MB-435s，SKMES-1，DU-145，LNCap)，1×104(PC-3，MCF-7)細(xì)胞/孔并在37℃下在5％二氧化碳?xì)夥障路跤?(DU-145，PC-3，MMAN)，4(MCF-7，SK-MEL-28，CEM)，或5(SK-MES-1，MDA-MB-435s，LNCap)天。對(duì)照孔包括單獨(dú)的介質(zhì)(空白)和不含藥物的細(xì)胞加介質(zhì)。生長(zhǎng)期后，將15μl的Cell Titer 96試劑盒檢測(cè)染料溶液(Promega，Madison，WI)加入到每個(gè)孔中并將此板在37℃下在5％二氧化碳孵育箱中孵育。將Promega Cell Titer 96試劑盒檢測(cè)停止溶液加入到每個(gè)孔中并在此孵育箱中孵育4-8小時(shí)。用Biotek Biokinetics板讀數(shù)儀(Biotek，Winooski，VT)在570nm讀取吸收值，用只有介質(zhì)的孔作空白對(duì)照。與未處理對(duì)照比較計(jì)算生長(zhǎng)的平均抑制百分率。通過Chou和Talalay的方法計(jì)算IC50、IC90、斜率和r值。Chou T-C，Talalay P.定量分析量效關(guān)系多種藥物或酶抑制劑的協(xié)同作用。Adv Enzyme Regul 1984，2227-55。
可以使用此活性化合物特別治療異常細(xì)胞增殖，并特別是細(xì)胞過度增殖。異常細(xì)胞增殖的實(shí)例包括但不限于良性瘤，其包括但不限于乳頭狀瘤，腺瘤，firoma，軟骨瘤，骨瘤，脂肪瘤，血管瘤，淋巴管瘤，平滑肌瘤，橫紋肌瘤，腦脊膜瘤，神經(jīng)瘤，神經(jīng)節(jié)瘤，痣，嗜鉻細(xì)胞瘤，神經(jīng)鞘瘤，纖維腺瘤，畸胎瘤，囊狀痣，肉芽瘤(granuosatheca)，布倫納氏瘤，男性細(xì)胞瘤，門細(xì)胞瘤，性索間質(zhì)，間質(zhì)細(xì)胞瘤和thyoma以及在血管組織斑發(fā)展過程中的平滑肌細(xì)胞的增殖；惡性腫瘤(癌癥)，包括但不限于癌，包括腎細(xì)胞癌，前列腺癌，膀胱癌和腺癌，纖維肉瘤，軟骨肉瘤，骨肉瘤，脂肉瘤，血管肉瘤，淋巴管肉瘤，平滑肌肉瘤，橫紋肌肉瘤，髓細(xì)胞白血病，紅白血病，多發(fā)性骨髓瘤，神經(jīng)膠質(zhì)瘤，腦膜瘤，thyoma，葉狀囊性肉瘤，腎胚細(xì)胞瘤，畸胎瘤絨毛膜癌，皮膚上的T細(xì)胞淋巴瘤(CTCL)，原發(fā)于皮膚的皮膚腫瘤(例如，基底細(xì)胞瘤，鱗狀細(xì)胞瘤，黑素瘤和博溫氏病)，乳腺癌和其它侵潤(rùn)皮膚的腫瘤，卡波濟(jì)氏瘤及粘膜組織惡化前的和惡性疾病，包括口腔、膀胱和直腸疾?。荒[瘤發(fā)生前的損傷，真菌霉菌病，牛皮癬，皮膚肌炎，類風(fēng)濕病關(guān)節(jié)炎，病毒(例如，疣，單純皰疹和尖銳濕疣)，觸染性軟疣，女性生殖道惡化前的和惡性疾病(子宮頸，陰道和外陰)。這些化合物還可以用于引流。
在此實(shí)施方案中，活性化合物或其藥用鹽以治療有效量給藥，以降低靶細(xì)胞的過度增殖?？梢詫⒋嘶钚曰衔镄揎棾砂ò邢虿糠郑鋵⒋嘶衔餄饧诨钚晕稽c(diǎn)。靶向部分可以包括結(jié)合靶細(xì)胞表面蛋白質(zhì)的抗體或抗體片斷，包括但不限于表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)，受體的c-Esb-2系列受體和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)。
VII.藥物組合物通過給患者使用存在于藥用載體或稀釋劑中的有效量的活性化合物或其藥用衍生物或其鹽，可以治療患有本文中描述的患任何疾病的病人。這些活性物質(zhì)可以以液體或固體形式通過任何適當(dāng)?shù)耐緩浇o藥，例如，口服、非腸道、靜脈內(nèi)、真皮內(nèi)，皮下或局部給藥。對(duì)于所有上述病癥，此化合物優(yōu)選的劑量為約1至50mg/kg、優(yōu)選1至20mg/kg體重每天，更概括地說是0.1至約100mg每千克體重/天。藥用衍生物的有效量可以根據(jù)所要使用的母體核苷的重量來計(jì)算。如果此衍生物本身具有活性，有效量可以如上所述用衍生物的重量估算，或通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它途徑評(píng)估。
此化合物以任何適宜的劑型單元方便地給藥，包括但不限于每單元?jiǎng)┬秃?至3000mg，優(yōu)選70至1400mg活性組份的?？诜┝繛?0-1000mg一般是便利的。
理想中活性組份的使用應(yīng)達(dá)到約0.2至70pM，優(yōu)選約1.0至10μM的活性化合物的峰值血漿濃度。例如，可以通過靜脈注射活性化合物的0.1至5％溶液(選擇性地存在于生理鹽水中)或通過活性化合物的快速濃注達(dá)到此目的。
在藥物組合物中活性化合物的濃度依賴于藥物的吸收、滅活和排泄速度以及其它本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的因素。注意此劑量值還會(huì)隨要減輕的病癥的嚴(yán)重性變化。還應(yīng)理解對(duì)于任何特定的對(duì)象，應(yīng)按照此個(gè)體的需要和使用或建議使用此組合物的人的職業(yè)判斷，來在一定時(shí)間內(nèi)對(duì)特定的給藥方案進(jìn)行調(diào)整，而本文中給出的濃度范圍只是舉例而非旨在限制要求保護(hù)的組合物的范圍或?qū)嵤?。該活性組份可以一次使用，或可以分為一些較小的劑量以可變的時(shí)間間隔給藥。
此活性化合物的優(yōu)選給藥方式是口服?？诜M合物一般含有惰性稀釋劑或可食用的載體。它們可以包封在明膠膠囊或壓制為片劑。為了口服治療給藥目的，此活性化合物可以與賦形劑摻混并以片劑、錠劑或膠囊的形式使用。藥用粘合劑和/或輔料也可作為此組合物的一部分。
片劑、丸劑、膠囊、錠劑等可以含有任何下列組份或性質(zhì)類似的化合物粘合劑如微晶纖維素、黃蓍膠或明膠；賦形劑如淀粉或乳糖，崩解劑如藻酸、Primogel或玉米淀粉；潤(rùn)滑劑如硬脂酸鎂或Sterotes；助流劑如膠態(tài)二氧化硅；甜味劑如蔗糖或糖精；或矯味劑如薄荷腦、水楊酸甲酯或桔味香料。當(dāng)此單元?jiǎng)┬褪悄z囊時(shí)，除上述物質(zhì)外，其可以含有液體載體如脂肪油。此外，單元?jiǎng)┬椭锌梢院卸喾N其它物質(zhì)，其修飾此單元?jiǎng)┬偷奈锢硇问?，例如，糖、紫膠或其它腸溶試劑。
此化合物可以作為酏劑、混懸劑、糖漿、糯米紙囊劑、口膠等的一種成分給藥。除活性化合物外糖漿可以含有蔗糖作為甜味劑和某些防腐劑、染料和著色劑及矯味劑。
此化合物或其藥用衍生物或鹽還可以與不損害所需作用的其它活性物質(zhì)混和，或與增補(bǔ)所需作用的物質(zhì)混和，例如抗生素、抗真菌、抗炎藥或其它抗病毒藥，包括其它核苷化合物。用于非腸道、真皮內(nèi)、皮下或局部給藥的溶液劑或混懸劑可以含有下列組份滅菌稀釋劑如注射用水、鹽水溶液、固定油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其它合成溶劑；抗菌劑如芐醇或?qū)αu基苯甲酸甲酯；抗氧化劑如抗壞血酸或亞硫酸氫鈉；螯合劑如乙二胺四乙酸；緩沖劑如乙酸鹽、枸櫞酸鹽或磷酸鹽以及滲透壓調(diào)節(jié)劑如氯化鈉或右旋糖。非腸道制劑可以包封在安瓿、一次性注射器或玻璃或塑料制的多劑量小瓶中。
如果靜脈內(nèi)給藥，優(yōu)選載體是生理鹽水或磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，活性化合物與保護(hù)此化合物以防止其在體內(nèi)的快速消除的載體配制，如控釋制劑，包括埋植劑和微囊給藥系統(tǒng)。可以使用生物可降解的、生物相容的聚合物，例如，亞乙基乙烯基乙酸酯、聚酸酐、聚乙醇酸、膠原、聚原酸酯和聚乳酸。制備這些制劑的方法對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的。這些物質(zhì)也可從Alza Corporation購買。
脂質(zhì)體混懸劑(包括用抗病毒抗原的單克隆抗體靶向感染細(xì)胞的脂質(zhì)體)也是優(yōu)選的藥用載體。它們可以按照本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法制備，例如，美國專利No.4,522,811(將其整體引入作為參考)所述。例如，通過將適宜的脂(一種或多種)(如硬脂?；柞；掖及?、硬脂酰基磷?；憠A、花生?；字；憠A和膽固醇)溶解于無機(jī)溶劑，然后將此溶劑蒸發(fā)，在該容器的表面上留下干燥脂的薄膜，可以制備脂質(zhì)體制劑。將活性化合物或其單磷酸鹽、二磷酸鹽和/或三磷酸鹽衍生物的水溶液引入該容器中。然后，用手旋轉(zhuǎn)此容器以讓脂類物質(zhì)從容器壁釋出并分散脂類附聚物，于是形成脂質(zhì)體混懸液。
參照優(yōu)選的實(shí)施方案已對(duì)本發(fā)明本發(fā)明進(jìn)行了描述?；诒景l(fā)明的上述描述，本發(fā)明的變化和修飾形式對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的。
權(quán)利要求
1.下式的2′-α-氟-核苷或其藥用鹽 其中堿基是嘌呤或嘧啶堿基；R1是OH，H，OR3，N3，CN，鹵素包括F，或CF3，低級(jí)烷基，氨基，低級(jí)烷基氨基，二低級(jí)烷基氨基，或烷氧基；R2是H，磷酸根，包括單磷酸根，二磷酸根，三磷酸根，或穩(wěn)定的磷酸鹽前藥；?；?，或其它藥用離去基團(tuán)，當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)該基團(tuán)能提供R2是H或磷酸根的化合物；磺酸酯包括烷基或芳烷基磺酰基、包括甲基磺酰基，芐基，其中苯基選擇性被一個(gè)或多個(gè)上述芳基定義中所述的取代基取代，脂類，氨基酸，肽或膽固醇；而R3是酰基、烷基、磷酸根或其它藥用離去基團(tuán)，即當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)能裂解為母體化合物的基團(tuán)。
2.權(quán)利要求1的化合物或其藥用鹽，其中堿基是嘌呤堿基，R2是H、單磷酸根、二磷酸根、三磷酸根或?；?。
3.權(quán)利要求2的化合物或其藥用鹽，其中嘌呤堿基選自鳥嘌呤、腺嘌呤、次黃嘌呤、2，6-二氨基嘌呤和6-氯嘌呤。
4.權(quán)利要求1的化合物或其藥用鹽，其中堿基是嘧啶堿基，R2是H、單磷酸根、二磷酸根、三磷酸根或?；?br> 5.權(quán)利要求5的化合物或其藥用鹽，其中堿基選自胸腺嘧啶、胞嘧啶、5-甲基胞嘧啶、尿嘧啶和5-氟尿嘧啶。
6. 藥物組合物，其中含有與藥用載體結(jié)合的、治療有效量的下式化合物或其藥用鹽 其中堿基是嘌呤或嘧啶堿基；R1是OH，H，OR3，N3，CN，鹵素包括F，或CF3，低級(jí)烷基，氨基，低級(jí)烷基氨基，二低級(jí)烷基氨基，或烷氧基；R2是H，磷酸根，包括單磷酸根，二磷酸根，三磷酸根，或穩(wěn)定的磷酸鹽前藥；?；蚱渌幱秒x去基團(tuán)，當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)該基團(tuán)能提供R2是H或磷酸根的化合物；磺酸酯包括烷基或芳烷基磺酰基、包括甲基磺酰基，芐基，其中苯基選擇性被一個(gè)或多個(gè)上述芳基定義中所述的取代基取代，脂類，氨基酸，肽或膽固醇；而R3是?；⑼榛?、磷酸根或其它藥用離去基團(tuán)，即當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)能裂解為母體化合物的基團(tuán)。
7.權(quán)利要求6組合物，其中堿基是選自鳥嘌呤、腺嘌呤、次黃嘌呤、2，6-二氨基嘌呤和6-氯嘌呤的嘌呤堿基或其藥用鹽。
8.權(quán)利要求6的組合物，其中堿基是選自胸腺嘧啶、胞嘧啶、5-甲基胞嘧啶、尿嘧啶和5-氟尿嘧啶的嘧啶堿基或其藥用鹽。
9.2′-氟代核苷或其藥用鹽在制備治療人的乙型肝炎感染的藥物中的用途，其中2′-氟代核苷具有下式 其中堿基是嘌呤或嘧啶堿基；R1是OH，H，OR3，N3，CN，鹵素包括F，或CF3，低級(jí)烷基，氨基，低級(jí)烷基氨基，二低級(jí)烷基氨基，或烷氧基；R2是H，磷酸根，包括單磷酸根，二磷酸根，三磷酸根，或穩(wěn)定的磷酸鹽前藥；?；蚱渌幱秒x去基團(tuán)，當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)該基團(tuán)能提供R2是H或磷酸根的化合物；磺酸酯包括烷基或芳烷基磺?；谆酋；?，芐基，其中苯基選擇性被一個(gè)或多個(gè)上述芳基定義中所述的取代基取代，脂類，氨基酸，肽或膽固醇；而R3是?；?、烷基、磷酸根或其它藥用離去基團(tuán)，即當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)能裂解為母體化合物的基團(tuán)，其中化合物或其藥用鹽選擇性地與藥用載體混和。
10.2′-氟代核苷或其藥用鹽在制備治療人的丙型肝炎感染的藥物中的用途，其中2′-氟代核苷具有下式 其中堿基是嘌呤或嘧啶堿基；R1是OH，H，OR3，N3，CN，鹵素包括F，或CF3，低級(jí)烷基，氨基，低級(jí)烷基氨基，二低級(jí)烷基氨基，或烷氧基；R2是H，磷酸根，包括單磷酸根，二磷酸根，三磷酸根，或穩(wěn)定的磷酸鹽前藥；?；蚱渌幱秒x去基團(tuán)，當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)該基團(tuán)能提供R2是H或磷酸根的化合物；磺酸酯包括烷基或芳烷基磺?；?、包括甲基磺?；S基，其中苯基選擇性被一個(gè)或多個(gè)上述芳基定義中所述的取代基取代，脂類，氨基酸，肽或膽固醇；而R3是?；?、烷基、磷酸根或其它藥用離去基團(tuán)，即當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)能裂解為母體化合物的基團(tuán)，其中化合物或其藥用鹽選擇性地與藥用載體混和。
11.2′-氟代核苷或其藥用鹽在制備抑制人HIV復(fù)制的藥物中的用途，其中2′-氟代核苷具有下式 其中堿基是嘌呤或嘧啶堿基；R1是OH，H，OR3，N3，CN，鹵素包括F，或CF3，低級(jí)烷基，氨基，低級(jí)烷基氨基，二低級(jí)烷基氨基，或烷氧基；R2是H，磷酸根，包括單磷酸根，二磷酸根，三磷酸根，或穩(wěn)定的磷酸鹽前藥；?；?，或其它藥用離去基團(tuán)，當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)該基團(tuán)能提供R2是H或磷酸根的化合物；磺酸酯包括烷基或芳烷基磺?；?、包括甲基磺?；S基，其中苯基選擇性被一個(gè)或多個(gè)上述芳基定義中所述的取代基取代，脂類，氨基酸，肽或膽固醇；而R3是酰基、烷基、磷酸根或其它藥用離去基團(tuán)，即當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)能裂解為母體化合物的基團(tuán)，其中化合物或其藥用鹽選擇性地與藥用載體混和。
12.2′-氟代核苷或其藥用鹽在制備治療人的異常細(xì)胞增殖的藥物中的用途，其中2′-氟代核苷具有下式 其中堿基是嘌呤或嘧啶堿基；R1是OH，H，OR3，N3，CN，鹵素包括F，或CF3，低級(jí)烷基，氨基，低級(jí)烷基氨基，二低級(jí)烷基氨基，或烷氧基；R2是H，磷酸根，包括單磷酸根，二磷酸根，三磷酸根，或穩(wěn)定的磷酸鹽前藥；?；?，或其它藥用離去基團(tuán)，當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)該基團(tuán)能提供R2是H或磷酸根的化合物；磺酸酯包括烷基或芳烷基磺?；?、包括甲基磺酰基，芐基，其中苯基選擇性被一個(gè)或多個(gè)上述芳基定義中所述的取代基取代，脂類，氨基酸，肽或膽固醇；而R3是酰基、烷基、磷酸根或其它藥用離去基團(tuán)，即當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)能裂解為母體化合物的基團(tuán)，其中化合物或其藥用鹽選擇性地與藥用載體混和。
13.下式的2′-氟代核苷或其藥用鹽 其中堿基是嘌呤或嘧啶堿基；R1是OH，H，OR3，N3，CN，鹵素包括F，或CF3，低級(jí)烷基，氨基，低級(jí)烷基氨基，二低級(jí)烷基氨基，或烷氧基；R2是H，磷酸根，包括單磷酸根，二磷酸根，三磷酸根，或穩(wěn)定的磷酸鹽前藥；?；?，或其它藥用離去基團(tuán)，當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)該基團(tuán)能提供R2是H或磷酸根的化合物；磺酸酯包括烷基或芳烷基磺?；谆酋；?，芐基，其中苯基選擇性被一個(gè)或多個(gè)上述芳基定義中所述的取代基取代，脂類，氨基酸，肽或膽固醇；而R3是?；⑼榛?、磷酸根或其它藥用離去基團(tuán)，即當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)能裂解為母體化合物的基團(tuán)。
14.權(quán)利要求13的化合物或其藥用鹽，其中堿基是嘌呤堿基，R2是H、單磷酸根、二磷酸根、三磷酸根或?；?br> 15.權(quán)利要求13的化合物或其藥用鹽，其中嘌呤堿基選自鳥嘌呤、腺嘌呤、次黃嘌呤、2，6-二氨基嘌呤和6-氯嘌呤。
16.權(quán)利要求13的化合物或其藥用鹽，其中堿基是嘧啶堿基，R2是H、單磷酸根、二磷酸根、三磷酸根或?；?br> 17.權(quán)利要求16的化合物，其中堿基選自胸腺嘧啶、胞嘧啶、5-甲基胞嘧啶、尿嘧啶和5-氟尿嘧啶。
18.藥物組合物，其中含有與藥用載體混和的、治療有效量的下式2′-氟-核苷或其藥用鹽 其中堿基是嘌呤或嘧啶堿基；R1是OH，H，OR3，N3，CN，鹵素包括F，或CF3，低級(jí)烷基，氨基，低級(jí)烷基氨基，二低級(jí)烷基氨基，或烷氧基；R2是H，磷酸根，包括單磷酸根，二磷酸根，三磷酸根，或穩(wěn)定的磷酸鹽前藥；?；蚱渌幱秒x去基團(tuán)，當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)該基團(tuán)能提供R2是H或磷酸根的化合物；磺酸酯包括烷基或芳烷基磺?；谆酋；?，芐基，其中苯基選擇性被一個(gè)或多個(gè)上述芳基定義中所述的取代基取代，脂類，氨基酸，肽或膽固醇；而R3是?；⑼榛?、磷酸根或其它藥用離去基團(tuán)，即當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)能裂解為母體化合物的基團(tuán)。
19.權(quán)利要求18組合物，其中堿基是選自鳥嘌呤、腺嘌呤、次黃嘌呤、2，6-二氨基嘌呤和6-氯嘌呤的嘌呤堿基或其藥用鹽。
20.權(quán)利要求18的組合物，其中堿基是選自胸腺嘧啶、胞嘧啶、5-甲基胞嘧啶、尿嘧啶和5-氟尿嘧啶的嘧啶堿基或其藥用鹽。
21.2′-氟代核苷或其藥用鹽在制備治療人的乙型肝炎感染的藥物中的用途，其中2′-氟代核苷具有下式 其中堿基是嘌呤或嘧啶堿基；R1是OH，H，OR3，N3，CN，鹵素包括F，或CF3，低級(jí)烷基，氨基，低級(jí)烷基氨基，二低級(jí)烷基氨基，或烷氧基；R2是H，磷酸根，包括單磷酸根，二磷酸根，三磷酸根，或穩(wěn)定的磷酸鹽前藥；?；?，或其它藥用離去基團(tuán)，當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)該基團(tuán)能提供R2是H或磷酸根的化合物；磺酸酯包括烷基或芳烷基磺?；?、包括甲基磺?；?，芐基，其中苯基選擇性被一個(gè)或多個(gè)上述芳基定義中所述的取代基取代，脂類，氨基酸，肽或膽固醇；而R3是?；⑼榛?、磷酸根或其它藥用離去基團(tuán)，即當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)能裂解為母體化合物的基團(tuán)，其中化合物或其藥用鹽選擇性地與藥用載體混和。
22.2′-氟代核苷或其藥用鹽在制備治療人的丙型肝炎感染的藥物中的用途，其中2′-氟代核苷具有下式 其中堿基是嘌呤或嘧啶堿基；R1是OH，H，OR3，N3，CN，鹵素包括F，或CF3，低級(jí)烷基，氨基，低級(jí)烷基氨基，二低級(jí)烷基氨基，或烷氧基；R2是H，磷酸根，包括單磷酸根，二磷酸根，三磷酸根，或穩(wěn)定的磷酸鹽前藥；酰基，或其它藥用離去基團(tuán)，當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)該基團(tuán)能提供R2是H或磷酸根的化合物；磺酸酯包括烷基或芳烷基磺?；?、包括甲基磺?；S基，其中苯基選擇性被一個(gè)或多個(gè)上述芳基定義中所述的取代基取代，脂類，氨基酸，肽或膽固醇；而R3是酰基、烷基、磷酸根或其它藥用離去基團(tuán)，即當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)能裂解為母體化合物的基團(tuán)，其中化合物或其藥用鹽選擇性地與藥用載體混和。
23.2′-氟代核苷或其藥用鹽在制備抑制人HIV復(fù)制的藥物中的用途，其中2′-氟代核苷具有下式 其中堿基是嘌呤或嘧啶堿基；R1是OH，H，OR3，N3，CN，鹵素包括F，或CF3，低級(jí)烷基，氨基，低級(jí)烷基氨基，二低級(jí)烷基氨基，或烷氧基；R2是H，磷酸根，包括單磷酸根，二磷酸根，三磷酸根，或穩(wěn)定的磷酸鹽前藥；?；蚱渌幱秒x去基團(tuán)，當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)該基團(tuán)能提供R2是H或磷酸根的化合物；磺酸酯包括烷基或芳烷基磺?；?、包括甲基磺?；?，芐基，其中苯基選擇性被一個(gè)或多個(gè)上述芳基定義中所述的取代基取代，脂類，氨基酸，肽或膽固醇；而R3是?；⑼榛?、磷酸根或其它藥用離去基團(tuán)，即當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)能裂解為母體化合物的基團(tuán)，其中化合物或其藥用鹽選擇性地與藥用載體混和。
24.2′-氟代核苷或其藥用鹽在制備治療人的異常細(xì)胞增殖的藥物中的用途，其中2′-氟代核苷具有下式 其中堿基是嘌呤或嘧啶堿基；R1是OH，H，OR3，N3，CN，鹵素包括F，或CF3，低級(jí)烷基，氨基，低級(jí)烷基氨基，二低級(jí)烷基氨基，或烷氧基；R2是H，磷酸根，包括單磷酸根，二磷酸根，三磷酸根，或穩(wěn)定的磷酸鹽前藥；?；蚱渌幱秒x去基團(tuán)，當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)該基團(tuán)能提供R2是H或磷酸根的化合物；磺酸酯包括烷基或芳烷基磺?；谆酋；?，芐基，其中苯基選擇性被一個(gè)或多個(gè)上述芳基定義中所述的取代基取代，脂類，氨基酸，肽或膽固醇；而R3是?；?、烷基、磷酸根或其它藥用離去基團(tuán)，即當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)能裂解為母體化合物的基團(tuán)，其中化合物或其藥用鹽選擇性地與藥用載體混和。
25.下式的2′-氟代核苷或其藥用鹽 其中堿基是嘌呤或嘧啶堿基；R1是OH，H，OR3，N3，CN，鹵素包括F，或CF3，低級(jí)烷基，氨基，低級(jí)烷基氨基，二低級(jí)烷基氨基，或烷氧基；R2是H，磷酸根，包括單磷酸根，二磷酸根，三磷酸根，或穩(wěn)定的磷酸鹽前藥；?；蚱渌幱秒x去基團(tuán)，當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)該基團(tuán)能提供R2是H或磷酸根的化合物；磺酸酯包括烷基或芳烷基磺酰基、包括甲基磺?；?，芐基，其中苯基選擇性被一個(gè)或多個(gè)上述芳基定義中所述的取代基取代，脂類，氨基酸，肽或膽固醇；而R3是酰基、烷基、磷酸根或其它藥用離去基團(tuán)，即當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)能裂解為母體化合物的基團(tuán)。
26.權(quán)利要求24的化合物或其藥用鹽，其中堿基是嘌呤堿基，R2是H、單磷酸根、二磷酸根、三磷酸根或?；?。
27.權(quán)利要求26的化合物或其藥用鹽，其中嘌呤堿基選自鳥嘌呤、腺嘌呤、次黃嘌呤、2，6-二氨基嘌呤和6-氯嘌呤。
28.權(quán)利要求24的化合物或其藥用鹽，其中堿基是嘧啶堿基，R2是H、單磷酸根、二磷酸根、三磷酸根或酰基。
29.權(quán)利要求28的化合物，其中堿基選自胸腺嘧啶、胞嘧啶、5-甲基胞嘧啶、尿嘧啶和5-氟尿嘧啶。
30.藥物組合物，其中含有與藥用載體混和的、治療有效量的下式2′-氟-核苷或其藥用鹽 其中堿基是嘌呤或嘧啶堿基；R1是OH，H，OR3，N3，CN，鹵素包括F，或CF3，低級(jí)烷基，氨基，低級(jí)烷基氨基，二低級(jí)烷基氨基，或烷氧基；R2是H，磷酸根，包括單磷酸根，二磷酸根，三磷酸根，或穩(wěn)定的磷酸鹽前藥；?；蚱渌幱秒x去基團(tuán)，當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)該基團(tuán)能提供R2是H或磷酸根的化合物；磺酸酯包括烷基或芳烷基磺?；谆酋；S基，其中苯基選擇性被一個(gè)或多個(gè)上述芳基定義中所述的取代基取代，脂類，氨基酸，肽或膽固醇；而R3是?；⑼榛?、磷酸根或其它藥用離去基團(tuán)，即當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)能裂解為母體化合物的基團(tuán)。
31.權(quán)利要求30組合物，其中堿基是選自鳥嘌呤、腺嘌呤、次黃嘌呤、2，6-二氨基嘌呤和6-氯嘌呤的嘌呤堿基或其藥用鹽。
32.權(quán)利要求30的組合物，其中堿基是選自胸腺嘧啶、胞嘧啶、5-甲基胞嘧啶、尿嘧啶和5-氟尿嘧啶的嘧啶堿基或其藥用鹽。
33.2′-氟代核苷或其藥用鹽在制備治療乙型肝炎感染的藥物中的用途，其中2′-氟代核苷具有下式 其中堿基是嘌呤或嘧啶堿基；R1是OH，H，OR3，N3，CN，鹵素包括F，或CF3，低級(jí)烷基，氨基，低級(jí)烷基氨基，二低級(jí)烷基氨基，或烷氧基；R2是H，磷酸根，包括單磷酸根，二磷酸根，三磷酸根，或穩(wěn)定的磷酸鹽前藥；?；?，或其它藥用離去基團(tuán)，當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)該基團(tuán)能提供R2是H或磷酸根的化合物；磺酸酯包括烷基或芳烷基磺?；?、包括甲基磺酰基，芐基，其中苯基選擇性被一個(gè)或多個(gè)上述芳基定義中所述的取代基取代，脂類，氨基酸，肽或膽固醇；而R3是酰基、烷基、磷酸根或其它藥用離去基團(tuán)，即當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)能裂解為母體化合物的基團(tuán)，其中化合物或其藥用鹽選擇性地與藥用載體混和。
34.2′-氟代核苷或其藥用鹽在制備治療丙型肝炎感染的藥物中的用途，其中2′-氟代核苷具有下式 其中堿基是嘌呤或嘧啶堿基；R1是OH，H，OR3，N3，CN，鹵素包括F，或CF3，低級(jí)烷基，氨基，低級(jí)烷基氨基，二低級(jí)烷基氨基，或烷氧基；R2是H，磷酸根，包括單磷酸根，二磷酸根，三磷酸根，或穩(wěn)定的磷酸鹽前藥；?；?，或其它藥用離去基團(tuán)，當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)該基團(tuán)能提供R2是H或磷酸根的化合物；磺酸酯包括烷基或芳烷基磺酰基、包括甲基磺酰基，芐基，其中苯基選擇性被一個(gè)或多個(gè)上述芳基定義中所述的取代基取代，脂類，氨基酸，肽或膽固醇；而R3是?；?、烷基、磷酸根或其它藥用離去基團(tuán)，即當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)能裂解為母體化合物的基團(tuán)，其中化合物或其藥用鹽選擇性地與藥用載體混和。
35.2′-氟代核苷或其藥用鹽在制備抑制HIV復(fù)制的藥物中的用途，其中2′-氟代核苷具有下式 其中堿基是嘌呤或嘧啶堿基；R1是OH，H，OR3，N3，CN，鹵素包括F，或CF3，低級(jí)烷基，氨基，低級(jí)烷基氨基，二低級(jí)烷基氨基，或烷氧基；R2是H，磷酸根，包括單磷酸根，二磷酸根，三磷酸根，或穩(wěn)定的磷酸鹽前藥；?；?，或其它藥用離去基團(tuán)，當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)該基團(tuán)能提供R2是H或磷酸根的化合物；磺酸酯包括烷基或芳烷基磺?；?、包括甲基磺酰基，芐基，其中苯基選擇性被一個(gè)或多個(gè)上述芳基定義中所述的取代基取代，脂類，氨基酸，肽或膽固醇；而R3是?；?、烷基、磷酸根或其它藥用離去基團(tuán)，即當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)能裂解為母體化合物的基團(tuán)，其中化合物或其藥用鹽選擇性地與藥用載體混和。
36.2′-氟代核苷或其藥用鹽在制備治療人的異常細(xì)胞增殖的藥物中的用途，其中2′-氟代核苷具有下式 其中堿基是嘌呤或嘧啶堿基；R1是OH，H，OR3，N3，CN，鹵素包括F，或CF3，低級(jí)烷基，氨基，低級(jí)烷基氨基，二低級(jí)烷基氨基，或烷氧基；R2是H，磷酸根，包括單磷酸根，二磷酸根，三磷酸根，或穩(wěn)定的磷酸鹽前藥；?；?，或其它藥用離去基團(tuán)，當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)該基團(tuán)能提供R2是H或磷酸根的化合物；磺酸酯包括烷基或芳烷基磺?；?、包括甲基磺?；S基，其中苯基選擇性被一個(gè)或多個(gè)上述芳基定義中所述的取代基取代，脂類，氨基酸，肽或膽固醇；而R3是?；?、烷基、磷酸根或其它藥用離去基團(tuán)，即當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)能裂解為母體化合物的基團(tuán)，其中化合物或其藥用鹽選擇性地與藥用載體混和。
37.下式的2′-氟代核苷或其藥用鹽 其中堿基是嘌呤或嘧啶堿基；R1是OH，H，OR3，N3，CN，鹵素包括F，或CF3，低級(jí)烷基，氨基，低級(jí)烷基氨基，二低級(jí)烷基氨基，或烷氧基；R2是H，磷酸根，包括單磷酸根，二磷酸根，三磷酸根，或穩(wěn)定的磷酸鹽前藥；?；蚱渌幱秒x去基團(tuán)，當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)該基團(tuán)能提供R2是H或磷酸根的化合物；磺酸酯包括烷基或芳烷基磺?；谆酋；S基，其中苯基選擇性被一個(gè)或多個(gè)上述芳基定義中所述的取代基取代，脂類，氨基酸，肽或膽固醇；而R3是?；?、烷基、磷酸根或其它藥用離去基團(tuán)，即當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)能裂解為母體化合物的基團(tuán)。
38.權(quán)利要求37的化合物或其藥用鹽，其中堿基是嘌呤堿基，R2是H、單磷酸根、二磷酸根、三磷酸根或?；?br> 39.權(quán)利要求38的化合物或其藥用鹽，其中嘌呤堿基選自鳥嘌呤、腺嘌呤、次黃嘌呤、2，6-二氨基嘌呤和6-氯嘌呤。
40.權(quán)利要求37的化合物或其藥用鹽，其中堿基是嘧啶堿基，R2是H、單磷酸根、二磷酸根、三磷酸根或?；?。
41.權(quán)利要求40的化合物或其藥用鹽，其中堿基選自胸腺嘧啶、胞嘧啶、5-甲基胞嘧啶、尿嘧啶和5-氟尿嘧啶。
42.藥物組合物，其中含有與藥用載體混和的、治療有效量的下式2′-氟-核苷或其藥用鹽 其中堿基是嘌呤或嘧啶堿基；R1是OH，H，OR3，N3，CN，鹵素包括F，或CF3，低級(jí)烷基，氨基，低級(jí)烷基氨基，二低級(jí)烷基氨基，或烷氧基；R2是H，磷酸根，包括單磷酸根，二磷酸根，三磷酸根，或穩(wěn)定的磷酸鹽前藥；?；?，或其它藥用離去基團(tuán)，當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)該基團(tuán)能提供R2是H或磷酸根的化合物；磺酸酯包括烷基或芳烷基磺?；谆酋；S基，其中苯基選擇性被一個(gè)或多個(gè)上述芳基定義中所述的取代基取代，脂類，氨基酸，肽或膽固醇；而R3是?；?、烷基、磷酸根或其它藥用離去基團(tuán)，即當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)能裂解為母體化合物的基團(tuán)。
43.權(quán)利要求42組合物，其中堿基是選自鳥嘌呤、腺嘌呤、次黃嘌呤、2，6-二氨基嘌呤和6-氯嘌呤的嘌呤堿基或其藥用鹽。
44.權(quán)利要求42的組合物，其中堿基是選自胸腺嘧啶、胞嘧啶、5-甲基胞嘧啶、尿嘧啶和5-氟尿嘧啶的嘧啶堿基或其藥用鹽。
45.2′-氟代核苷或其藥用鹽在制備治療乙型肝炎感染的藥物中的用途，其中2′-氟代核苷具有下式 其中堿基是嘌呤或嘧啶堿基；R1是OH，H，OR3，N3，CN，鹵素包括F，或CF3，低級(jí)烷基，氨基，低級(jí)烷基氨基，二低級(jí)烷基氨基，或烷氧基；R2是H，磷酸根，包括單磷酸根，二磷酸根，三磷酸根，或穩(wěn)定的磷酸鹽前藥；?；?，或其它藥用離去基團(tuán)，當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)該基團(tuán)能提供R2是H或磷酸根的化合物；磺酸酯包括烷基或芳烷基磺?；?、包括甲基磺酰基，芐基，其中苯基選擇性被一個(gè)或多個(gè)上述芳基定義中所述的取代基取代，脂類，氨基酸，肽或膽固醇；而R3是?；⑼榛?、磷酸根或其它藥用離去基團(tuán)，即當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)能裂解為母體化合物的基團(tuán)，其中化合物或其藥用鹽選擇性地與藥用載體混和。
46.2′-氟代核苷或其藥用鹽在制備治療丙型肝炎感染的藥物中的用途，其中2′-氟代核苷具有下式 其中堿基是嘌呤或嘧啶堿基；R1是OH，H，OR3，N3，CN，鹵素包括F，或CF3，低級(jí)烷基，氨基，低級(jí)烷基氨基，二低級(jí)烷基氨基，或烷氧基；R2是H，磷酸根，包括單磷酸根，二磷酸根，三磷酸根，或穩(wěn)定的磷酸鹽前藥；酰基，或其它藥用離去基團(tuán)，當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)該基團(tuán)能提供R2是H或磷酸根的化合物；磺酸酯包括烷基或芳烷基磺酰基、包括甲基磺酰基，芐基，其中苯基選擇性被一個(gè)或多個(gè)上述芳基定義中所述的取代基取代，脂類，氨基酸，肽或膽固醇；而R3是酰基、烷基、磷酸根或其它藥用離去基團(tuán)，即當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)能裂解為母體化合物的基團(tuán)，其中化合物或其藥用鹽選擇性地與藥用載體混和。
47.2′-氟代核苷或其藥用鹽在制備抑制HIV復(fù)制的藥物中的用途，其中2′-氟代核苷具有下式 其中堿基是嘌呤或嘧啶堿基；R1是OH，H，OR3，N3，CN，鹵素包括F，或CF3，低級(jí)烷基，氨基，低級(jí)烷基氨基，二低級(jí)烷基氨基，或烷氧基；R2是H，磷酸根，包括單磷酸根，二磷酸根，三磷酸根，或穩(wěn)定的磷酸鹽前藥；酰基，或其它藥用離去基團(tuán)，當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)該基團(tuán)能提供R2是H或磷酸根的化合物；磺酸酯包括烷基或芳烷基磺酰基、包括甲基磺酰基，芐基，其中苯基選擇性被一個(gè)或多個(gè)上述芳基定義中所述的取代基取代，脂類，氨基酸，肽或膽固醇；而R3是?；⑼榛?、磷酸根或其它藥用離去基團(tuán)，即當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)能裂解為母體化合物的基團(tuán)，其中化合物或其藥用鹽選擇性地與藥用載體混和。
48.2′-氟代核苷或其藥用鹽在制備治療人的異常細(xì)胞增殖的藥物中的用途，其中2′-氟代核苷具有下式 其中堿基是嘌呤或嘧啶堿基；R1是OH，H，OR3，N3，CN，鹵素包括F，或CF3，低級(jí)烷基，氨基，低級(jí)烷基氨基，二低級(jí)烷基氨基，或烷氧基；R2是H，磷酸根，包括單磷酸根，二磷酸根，三磷酸根，或穩(wěn)定的磷酸鹽前藥；酰基，或其它藥用離去基團(tuán)，當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)該基團(tuán)能提供R2是H或磷酸根的化合物；磺酸酯包括烷基或芳烷基磺?；?、包括甲基磺?；S基，其中苯基選擇性被一個(gè)或多個(gè)上述芳基定義中所述的取代基取代，脂類，氨基酸，肽或膽固醇；而R3是?；?、烷基、磷酸根或其它藥用離去基團(tuán)，即當(dāng)體內(nèi)使用時(shí)能裂解為母體化合物的基團(tuán)，其中化合物或其藥用鹽選擇性地與藥用載體混和。
全文摘要
公開了用于治療乙型肝炎感染、丙型肝炎感染、HIV和異常細(xì)胞增殖包括腫瘤和癌癥的2′－氟代核苷化合物。這些化合物具有通式(I)、(II)、(III)、(IV)或其藥用鹽，其中堿基是嘌呤或嘧啶堿基；R
文檔編號(hào)C07H19/20GK101089010SQ200610108548
公開日2007年12月19日 申請(qǐng)日期1999年2月25日 優(yōu)先權(quán)日1998年2月25日
發(fā)明者雷蒙德F·辛納茲, 丹尼斯C·利奧塔, C·K·朱, J·杰弗里·麥卡蒂, 施俊生, Y·蔡, K·李, J·H·洪 申請(qǐng)人:埃莫里大學(xué), 佐治亞州大學(xué)研究基金會(huì)有限公司, 雷蒙德F·辛納茲, 丹尼斯C·利奧塔, C·K·朱, J·杰弗里·麥卡蒂, 施俊生, Y·蔡, K·李, J·H·洪