專(zhuān)利名稱(chēng)：：Mdm2的小分子抑制劑以及其應(yīng)用的制作方法MDM2的小分子抑制劑以及其應(yīng)用
背景技術(shù)：

技術(shù)領(lǐng)域：
[OOOl]本發(fā)明屬于醫(yī)藥化學(xué)領(lǐng)域。本發(fā)明特別是涉及可以對(duì)p53和MDM2之間的相互作用發(fā)生拮抗劑功能的小分子以及其用作一類(lèi)用于治療癌癥和其它疾病的新治療劑的應(yīng)用。相關(guān)現(xiàn)有技術(shù)進(jìn)攻性癌細(xì)胞表型是許多導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)信號(hào)途徑失控的遣傳和遺傳后(epigenetie)改變的結(jié)果(Ponder,Nature411:336(2001))。但是，對(duì)于所有的癌細(xì)胞而言，其共同特性是其不能完成細(xì)胞凋亡程序，并且由于正常細(xì)胞凋亡機(jī)構(gòu)中的缺陷而缺乏適宜的細(xì)胞凋亡是癌癥的標(biāo)志(Lowe等人，Carcinogenesis21:485(2000))。因此，癌細(xì)胞由于在正常細(xì)胞凋亡機(jī)構(gòu)中的缺陷而不能完成適宜的細(xì)胞凋亡程序的情況使其常常對(duì)化療、輻射或免疫療法誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡具有耐受性。由于細(xì)胞凋亡缺陷而產(chǎn)生的不同起源的人類(lèi)癌癥對(duì)目前治療方案的原發(fā)性或獲得性耐受性是目前癌癥治療中的主要問(wèn)題(Lowe等人，Carcinogenesis21:485(2000);Nicholson,Nature407:810(2000))。因此，目前和以后進(jìn)行的設(shè)計(jì)和研制用于改善癌癥患者的存活和生活質(zhì)量的具有特異靶向性的新分子抗癌療法的各種努力都必需包括特異地使癌細(xì)胞耐受性靶向細(xì)胞凋亡的策略。就此而言，在直接抑制癌細(xì)胞中的細(xì)胞凋亡方面起著中心作用的重要的靶向負(fù)調(diào)節(jié)劑代表了新抗癌藥物設(shè)計(jì)的一種很有前景的治療策略。p53腫瘤抑制基因在控制細(xì)胞周期進(jìn)行和細(xì)胞凋亡中起著重要作用(Vogelstein等人，Nature408:307(2000))。因?yàn)榭梢源碳て淠[瘤抑制基因活性以消滅腫瘤細(xì)胞，所以其是一種引人注意的抗癌藥物設(shè)計(jì)的治療目標(biāo)(Vogelstein等人，Nature徵307(2000);Chene，Nat.Rev.Cancer3:102(2003))。一種刺激p53活性的新方法是用非肽類(lèi)小分子抑制劑來(lái)抑制其與蛋白MDM2之間的相互作用(Chene，Nat.Rev.Cancer3:102(2003);Vassilev等人，Science303:844(2004))。MDM2和p53都是自動(dòng)調(diào)節(jié)反饋回路的一部分(Wu等人，GenesDev.7:1126(1993))。M匿2是被p53和MDM2轉(zhuǎn)錄活化的，其反過(guò)來(lái)又通過(guò)至少三種機(jī)理抑制了p53活性(Wu等人，GenesDev.7:1126(1993)。首先，M匿2蛋白直接與p53轉(zhuǎn)活區(qū)域結(jié)合，從而抑制了p53-介導(dǎo)的轉(zhuǎn)活，其次，MDM2蛋白包含一種核輸出信號(hào)序列，并且在與p53結(jié)合時(shí)，其謙導(dǎo)了p53的核輸出，從而阻止了p53與其目標(biāo)DNAs結(jié)合。第三，MDM2蛋白是一種E3泛素連接酶并且在與p53結(jié)合時(shí)能促進(jìn)p53降解。因此，通過(guò)發(fā)揮有效的p53活性?xún)?nèi)源性細(xì)胞抑制劑的功能，MDM2有效抑制了p53-介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期停滯和DM修復(fù)。因此，與MDM2結(jié)合并能阻斷MDM2和p53之間的相互作用的小分子抑制劑可以促進(jìn)具有功滯、細(xì)胞凋亡、或DNAj務(wù)復(fù)(Chene，Nat.Rev.Cancer3:102(2003);VassUev等人，Science303:844(2004))雖然過(guò)去已經(jīng)成功設(shè)計(jì)出以肽為基礎(chǔ)的高親合力抑制刑(Garcia-Echeverria等人，Med.Chem43:3205(2000))，但是，這些抑制劑不是藥物樣分子，這是因?yàn)槠浼?xì)胞滲透性差和在體內(nèi)的生物利用度差。盡管制藥企業(yè)不斷努力，但是，在鑒定有效的非肽小分子抑制劑時(shí)，高產(chǎn)量的篩選策略?xún)H取得了十分有限的成功。因此，需要可以抑制P53-MDM2相互作用的藥物樣非肽類(lèi)小分子。以p53-MDM2相互作用為目標(biāo)的非肽小分子抑制劑的設(shè)計(jì)是目前人們正在尋求的抗癌藥物設(shè)計(jì)的有吸引力的策略(Chene，Nat.Rev.Cancer3:102(2003);Vassilev等人，Science303:844(2004))。已經(jīng)通過(guò)x-射線晶體學(xué)確定了這種相互作用的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)(Kussie等人，Science274:948(1996))。其晶體結(jié)構(gòu)表明p53和MDM2之間的相互作用主要是由p53的三種疏水殘基(Phel9，Trp23和Leu26)和MDM2中的微小的深疏水性裂縫介導(dǎo)的。對(duì)于可以破壞p53-MDM2相互作用的小分子抑制劑的設(shè)計(jì)方案而言，這種疏水性裂縫是一種理想的位置(Chene，Nat.Rev.Cancer3:102(2003))。本發(fā)明的概述通常認(rèn)為在對(duì)遺傳損害或與細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)刑(如抗痛劑和轎射)的接觸進(jìn)行響應(yīng)時(shí)，癌細(xì)胞或其支持細(xì)胞不能進(jìn)行細(xì)胞凋亡是癌癥發(fā)生和進(jìn)行的主要因素。認(rèn)為在癌細(xì)胞或其支持細(xì)胞(例如，腫瘤血管系統(tǒng)中的新血管細(xì)胞)中誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡實(shí)際上是市場(chǎng)上或目前實(shí)踐中所有有效的癌癥治療劑或放療的普遍作用機(jī)理。細(xì)胞不能進(jìn)行細(xì)胞凋亡的一種原因是p53的腫瘤抑制基因活性降低，在許多情況中，其可能是由于MDM2對(duì)包含功能性p53的細(xì)胞中的p53的抑制作用造成的，p53活性的抑制導(dǎo)致了細(xì)胞凋亡途徑以及細(xì)胞周期調(diào)節(jié)的變化。本發(fā)明認(rèn)為使患有癌癥的動(dòng)物與治療有效量的通過(guò)抑制p53或與p53有關(guān)的蛋白(例如，p63，p73)和MDM2或與MDM2有關(guān)的蛋白(例如，MDMX)之間的相互作用來(lái)增加p53和與p53有關(guān)的蛋白的功能的藥物(例如，小分子)進(jìn)行接觸將立即抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)和/或使該類(lèi)細(xì)胞成為更易受癌癥治療藥或放療的誘導(dǎo)細(xì)胞死亡活性的影響的群體。本發(fā)明的抑制劑特別是可以通過(guò)干擾通常促進(jìn)p53降解的p53-MDM2相互作用來(lái)延長(zhǎng)p53的半衰期。本發(fā)明認(rèn)為，當(dāng)以誘導(dǎo)癌細(xì)胞中細(xì)胞生長(zhǎng)抑制、細(xì)胞凋亡和/或細(xì)胞周期停滯的單一療法的形式進(jìn)行應(yīng)用時(shí)，或者當(dāng)與其它治療劑，如其它誘導(dǎo)細(xì)胞死亡或破壞細(xì)胞周期的癌癥治療藥或放療暫時(shí)相關(guān)進(jìn)行應(yīng)用(聯(lián)合療法)(只要與僅用所述癌癥治療藥或放療單獨(dú)進(jìn)行治療的動(dòng)物體內(nèi)的細(xì)胞比例相比，易于實(shí)施細(xì)胞凋亡程序的癌細(xì)胞或支持細(xì)胞的比例更髙即可)時(shí)，p53或與p53有關(guān)的蛋白和MDM2以及與MDM2有關(guān)的蛋白之間的相互作用的抑制劑都滿足了許多類(lèi)癌癥治療未被滿足的需要。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，與僅用本發(fā)明的化合物或抗癌劑/輻射進(jìn)行治療的動(dòng)物相比，用治療有效量本發(fā)明的化合物和抗癌劑或輻射過(guò)程對(duì)動(dòng)物進(jìn)行聯(lián)合治療在該類(lèi)動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生了更好的腫瘸響應(yīng)和臨床益處。另一方面，因?yàn)樗龌衔飳⒔档退屑?xì)胞的細(xì)胞凋亡閾值，所以作為對(duì)抗癌藥/輻射誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡活性的響應(yīng)，將增加成功實(shí)施細(xì)胞凋亡程序的細(xì)胞的比例。或者，在產(chǎn)生與單獨(dú)使用抗癌糸J/輻射的常規(guī)刑量時(shí)產(chǎn)生的腫瘸響應(yīng)/臨床益處相同的腫瘤響應(yīng)/臨床益處時(shí)，本發(fā)明的化合物降低了抗癌劑和/或輻射的藥劑量，因此降低了毒性并且更耐受。因?yàn)樗幸呀?jīng)獲得批準(zhǔn)的抗癌藥和輻射治療的刑量都是已知的，因此本發(fā)明考慮其與本發(fā)明化合物的各種組合。因?yàn)楸景l(fā)明(pro-apoptotic)和/或細(xì)胞周期抑制活性來(lái)起作用，所以使癌細(xì)胞和支持細(xì)胞與治療有效量所述化合物進(jìn)行接觸暫時(shí)也認(rèn)為與作為對(duì)抗癌劑或放療的響應(yīng)，這些細(xì)胞試圖實(shí)施細(xì)胞凋亡程序的努力相一致，因此，在一些實(shí)施方案中，以某些暫時(shí)性關(guān)系給予本發(fā)明的組合物提供了尤其有效的治療操作。在本發(fā)明其它一些實(shí)施方案中，p53或與p53有關(guān)的蛋白和MDM2和與M畫(huà)2有關(guān)的蛋白的相互作用之間的抑制劑可以保護(hù)正常(例如，未過(guò)度增生)細(xì)胞不受某些化療劑和輻射的毒性影響(其可能是由于該抑制劑誘導(dǎo)細(xì)胞周期停滯的能力造成的)。本發(fā)明的抑制劑特別是可以在包含野生型p53的細(xì)胞中引起細(xì)胞周期停滯，而對(duì)于包含突變型p53或刪除了p53的癌細(xì)胞沒(méi)有影響。這種差別保護(hù)作用使得可以通過(guò)在不增加該類(lèi)治療毒副作用的情況下使用更高劑量化療劑進(jìn)行治療或者進(jìn)行更長(zhǎng)時(shí)間的治療來(lái)更有效地治療癌癥。[OOIO]本發(fā)明涉及用于抑制p53或與p53有關(guān)的蛋白和MDM2或與滯誘導(dǎo)劑的敏感性的化合物。在一個(gè)特定的實(shí)施方案中，;斤述化合物為式I的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage25</formula>或其可藥用的鹽或前體藥物，其中X是CH、0、N、或S，其中如果X是O或S則Rs不存在；Y是0、S、或NR';R!、R2、R3、R4、R5、R6、和R7獨(dú)立地是H或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、C02R'、0C0R'、C0腦"、NR"COR'、NR'S02R"、S02NR'R"、(ONR')NR〃R〃'、或或者l與Rs或R6中的一個(gè)形成一種芳基、環(huán)烷基、或雜環(huán)基團(tuán)；&是H或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、C02R'、0C0R'、C0NR'R〃、S02NR'R〃、或(C豕NR')NR〃R'";IU是一至四個(gè)獨(dú)立地選自H、F、Cl、Br、I、0H、N02、烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、0R'、C02R'、0C0R'、C0NR'R〃、NR〃C0R'、N跳R〃、S。2固〃、或(ONR')NR〃R'〃、或NR'R〃的基團(tuán)；并且各R'、R〃和R'〃獨(dú)立地是H或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、或雜環(huán)；或者R'和R〃、或者R〃和R'〃形成一個(gè)環(huán)；或者當(dāng)l和R4中的一個(gè)是C0NRR'時(shí)，R和R'還可以是(CH丄-R'、(CH2)n-NR'R〃、(CH2)n-NR'C0R〃、(CH2)n-NR'S02R〃、(CH2)n-NR'(ONR〃)NR〃'、(CH丄-COOH、(CH2)n-C00R'、(CH2)n-C0NR'R〃、(CH2)n-0R'、(CH2)n-SR'、(CH2)n-COR'、(CH2)n—S03H、(CH2)n-S0NR'R〃、(CH2)n—S02NR'R〃、(CH2CH20)n-(CH2)m—0H、(CH2CH20)n-(CH2)—0R'、(CH2CH20)n-(CH2)B-C00R'、(CH2CH20)n—(CH2)m—C0NR'R〃、(CH2CH20)n-(CH2)n-NR'R〃、((CH2CH20)n-(CH2)m-NR'C0R〃、(CH2CH20)n-(CH2)邁-NR'(ONR")NR'〃、(CH2CH20)n—(CH2)m—NR'S02R〃、(CH2)p-(CH2CH20)n—(CH2)n—0H、(CH2)p-(CH2CH20)n—(CH2)m-0R'、(CH2)p—(CH2CH20)n-(CH2)ra—C00R'、(CH2)p-(CH2CH20)n—(CH2)C0NR'R〃、(CH2)p—(CH2CH20)n—(CH2)m—NR'R"、(CH2)p—(CH2CH20)n—(CH2)—NR'C0R〃、(CH2)p-(CH2CH20)n—(CH2)—NR'(C=NR〃)NR〃'、(CH2)P—(CH2CH20)n—(CH2)m—NR'S02R〃、-CO-R'、一S0R'、或-S02R';和ii、m、和p各自獨(dú)立地是l-6。本發(fā)明涉及式I所示的化合物，其是p53或與p53有關(guān)的蛋白和MDM2或與MDM2有關(guān)的蛋白間的相互作用的抑制劑。本發(fā)明涉及本發(fā)明停滯和/或細(xì)胞凋亡的應(yīng)用。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的化合物用于使細(xì)胞對(duì)另外的物質(zhì)，如細(xì)胞凋亡和/或細(xì)胞周期停滯的誘導(dǎo)刑敏感和通過(guò)在用化療劑進(jìn)行治療前誘導(dǎo)細(xì)胞周期停滯來(lái)對(duì)正常細(xì)胞進(jìn)行化學(xué)保護(hù)的應(yīng)用。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及使正常細(xì)胞耐受化療劑或一些處理的方法，其包括使所述細(xì)胞與本發(fā)明的化合物進(jìn)行接觸。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一些保護(hù)患有過(guò)度增生性疾病的動(dòng)物的正常細(xì)胞不受化療劑或一些治療影響的方法，其包括給所述動(dòng)物使用本發(fā)明的化合物。在一個(gè)特定的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及通過(guò)給進(jìn)行化療的動(dòng)物使用本發(fā)明的化合物來(lái)治療、改善或預(yù)防由于給正常非癌細(xì)胞使用化療刑而造成的病癥、副作用或情況。由化療造成的該類(lèi)病癥和情況的實(shí)例非限制性地包括粘膜炎、口腔炎、口腔干燥、胃腸病癥、和脫發(fā)。本發(fā)明的化合物可用于治療、改善或預(yù)防一些病癥，如這些對(duì)誘導(dǎo)的編程性細(xì)胞死亡有反應(yīng)的病癥，如特征為細(xì)胞凋亡失調(diào)的病癥，包括過(guò)度增生性疾病如癌癥。在某些實(shí)施方案中，所述化合物被用于治療、改善或預(yù)防特征為對(duì)癌癥治療耐受的癌癥(例如，這些瘺細(xì)胞耐受化療、耐受輻射、耐受激素等)。在其它一些實(shí)施方案中，所述化合物可用于治療特征為表達(dá)功能性p53或與p53有關(guān)的蛋白的過(guò)度増生性疾病。在其它一些實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及本發(fā)明的化合物通過(guò)在正常細(xì)胞中誘導(dǎo)細(xì)胞周期停滯來(lái)保護(hù)正常(例如，未過(guò)度增生的)細(xì)胞不受化療劑和一些治療的毒副作用影響的應(yīng)用。本發(fā)明提供了包含對(duì)于在細(xì)胞中誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡或使細(xì)胞對(duì)細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑敏感而言治療有效量的式I化合物的藥物組合物。本發(fā)明還提供了包含式I化合物和用于將所述化合物給藥于動(dòng)物的說(shuō)明的藥盒。所述藥盒可任選地包含其它治療劑，例如，抗癌刑或細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)劑。本發(fā)明還提供了一些制備式I化合物的方法。附圖簡(jiǎn)要說(shuō)明圖l表示了以spirotryprostatinA為基礎(chǔ)的一類(lèi)新M謝2抑制劑的設(shè)計(jì)方案。圖2A和2B表示了預(yù)測(cè)的化合物la和ld與隨2的結(jié)合棋型。圖3表示了(1〃R，2〃S，2'R，3'R,3S，4'R)6-氯-4'-(3-氯-苯基)-1'-(2-羥基-l，2-二苯基-乙基)-2'-(3-甲基-丁基)-2-氣代-1，2-二氬-螺環(huán)[p引哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基酰胺的X-射線結(jié)構(gòu)，圖4A表示了與MDM2蛋白結(jié)合的PMDM6-F的飽和曲線，圖4B表示了未標(biāo)記的熒光探針PMDM6和天然p53肽與MDM2蛋白的竟?fàn)幗Y(jié)合曲線。圖5表示用以FP為基礎(chǔ)的結(jié)合試驗(yàn)測(cè)定的MDM2抑制刑的竟?fàn)幗Y(jié)合曲線和Ki值。圖6表示用WST細(xì)胞生長(zhǎng)試4^測(cè)定的對(duì)具有野生型p53的LNCaP前列腺癌細(xì)胞中細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用。圖7表示用WST細(xì)胞生長(zhǎng)試驗(yàn)測(cè)定的對(duì)具有突變型p53的PC3前列腺癌細(xì)胞中細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用。圖8表示用WST細(xì)胞生長(zhǎng)試驗(yàn)測(cè)定的對(duì)具有野生型p53的PrEC正常人前列腺上皮細(xì)胞中細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用。圖9表示一些p53-MDM2相互作用的抑制劑的竟?fàn)幗Y(jié)合曲線，圖10表示Ke-43對(duì)p53-MDM2相互作用的分裂。圖12表示對(duì)作為對(duì)Ke-43的響應(yīng)的p53以及其目標(biāo)基因產(chǎn)物MDM2和p21在癌細(xì)胞中的表達(dá)進(jìn)行的蛋白質(zhì)印跡分析?！?029]圖13A和13B表示Ke-43和Ke-61在癌細(xì)胞和正常細(xì)胞中誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡和細(xì)胞凋亡。圖14表示在用Ke-43和nutlin-3進(jìn)行處理后，表達(dá)野生型圖15表示用Ke-63進(jìn)行處理保護(hù)正常細(xì)胞不受TAX0L處理的影響的保護(hù)作用。本發(fā)明的詳細(xì)描迷[本發(fā)明涉及發(fā)揮p53或與p53有關(guān)的蛋白和MDM2或與MDM2有關(guān)的蛋白間的相互作用的抑制劑功能的式I所示的化合物。通過(guò)抑制MDM2或與MDM2有關(guān)的蛋白對(duì)p53或與p53有關(guān)的蛋白的消極作用，這i一些情況中，其本)誘;了細(xì)j^消亡和/或細(xì)胞周期停滯，'^此，'本發(fā)明涉及使細(xì)胞對(duì)細(xì)胞凋亡和/或細(xì)胞周期停滯的誘導(dǎo)刑敏感的方法和在細(xì)胞中誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和/或細(xì)胞周期停滯的方法，其包括使所述細(xì)胞僅與式I的化合物進(jìn)行接觸或者與式I的化合物和其它物質(zhì)，如細(xì)胞擁亡誘導(dǎo)劑或細(xì)胞周期破壞劑進(jìn)行接觸。本發(fā)明還涉及治療、改善或預(yù)防動(dòng)物的一些病癥，如對(duì)誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡有響應(yīng)的病癥的方法，其包括給所述動(dòng)物使用式I的化合物和一些另外的物質(zhì)，例如細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑，該類(lèi)病癥包括這些特征為細(xì)胞凋亡失調(diào)的病癥和特征為表達(dá)功能性p53或與p53有關(guān)的蛋白的細(xì)胞增生的病癥.在其它一些實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及保護(hù)動(dòng)物的正常(例如，非過(guò)度增生性)細(xì)胞不受化療劑和一些治療的毒副作用影響的方法，其包括給所述動(dòng)物^f吏用式I的化合物。這里所用的術(shù)語(yǔ)"抗癌刑"和"抗癌藥"指的是用于治療過(guò)度增生性疾病，如癌癥(例如哺乳動(dòng)物的癌癥)的任何治療劑(例如，化療化合物和/或分子治療化合物)、反義療法、放療、或手術(shù)干預(yù).這里所用的術(shù)語(yǔ)"前體藥物"指的是需要在目標(biāo)生理學(xué)系統(tǒng)中進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化(例如自發(fā)轉(zhuǎn)化或酶轉(zhuǎn)化)從而釋放出活性藥物或者將所述前體藥物轉(zhuǎn)化(例如酶學(xué)、生理學(xué)、機(jī)械、電磁轉(zhuǎn)化(electromagnetically))成活性藥物的母體"藥物"分子無(wú)藥理學(xué)活性的衍生物。用前體藥物來(lái)克服與穩(wěn)定性、毒性、缺乏特異性、或生物利用度有限有關(guān)的問(wèn)題。一些實(shí)例性前體藥物包含活性藥物分子本身和一種化學(xué)掩蓋基團(tuán)(例如，一種可逆性抑制藥物活性的基團(tuán))。一些優(yōu)選的前體藥物是具有可在代謝條件下裂解的基團(tuán)的化合物的變型或衍生物。當(dāng)在生理學(xué)條件下進(jìn)行溶刑分解或者進(jìn)行醉降解或其它生物化學(xué)轉(zhuǎn)化(例如磷酸化、氫化、脫氫、糖基化)時(shí)，一些實(shí)例性前體藥物在體內(nèi)或體外變得有藥學(xué)活性。前體藥物常?？梢蕴峁┤芙舛取⒔M織相容性或在哺乳動(dòng)物體內(nèi)的延遲釋放方面的優(yōu)點(diǎn)。(見(jiàn)例如，Bundgard，前體藥物設(shè):計(jì)(DesignofProdrugs,第7—9、21-24頁(yè)，Elsevier,Amsterdam(1985);和Silverman,藥物設(shè)計(jì)和藥物作用有機(jī)化合物(TheOrganicChemistryofDrugDesignandDrugAction)，第352-401頁(yè),AcademicPress,SanDiego，CA(1992))。常見(jiàn)的前體藥物包括酸衍生物如通過(guò)將母體酸與適宜的醇(低級(jí)鏈烷醇)進(jìn)行反應(yīng)制得的酯、通過(guò)將母體酸化合物與胺或可以反應(yīng)形成?；瘔A衍生物(例如，低級(jí)烷基酰胺)的堿性基團(tuán)進(jìn)行反應(yīng)制得的酰胺。這里所用的術(shù)語(yǔ)"可藥用的鹽"指的是目標(biāo)動(dòng)物(例如哺乳物與酸或堿進(jìn)行反應(yīng)而獲得的鹽)。本發(fā)明化合物的鹽可以得自無(wú)機(jī)或有機(jī)酸和堿。酸的實(shí)例非限制性地包括鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、高氯酸、富馬酸、馬來(lái)酸、磷酸、羥乙酸、乳酸、水楊酸、琥珀酸、對(duì)甲苯磺酸、酒石酸、醋酸、檸檬酸、甲磺酸、乙磧酸、甲酸、苯甲酸、丙二酸、磺酸、萘-2-磺酸、苯磺酸等。雖然其它一些酸如草酸本身是不可藥用的，但是在制備用作獲得本發(fā)明化合物以及其可藥用酸加成鹽的中間體時(shí)可以使用這些酸。堿的實(shí)例非限制性地包括堿金屬(例如，鈉)氬氧化物、堿土金屬(例如，鎂)氫氧化物、氨、和其中W是Ch坑基的鼎/化合物等。鹽的實(shí)例非限制性地包括醋酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、天門(mén)冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氬鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、重葡萄糖酸鹽(digluconate)、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、富馬酸鹽、flucoheptanoate、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、氯化物、澳化物、捵化物、2-羥基乙磺酸鹽、乳酸鹽、馬來(lái)酸鹽、甲磺酸鹽(mesylate)、甲烷橫酸鹽(methanesulfonate)、2-恭橫酸鹽、煙酸鹽、草酸鹽、樸酸鹽(palmoate)、果膠酯酸鹽、過(guò)硫酸鹽、苯丙酸鹽、苦P木酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲笨橫酸鹽、十一烷酸鹽等。鹽的其它一些實(shí)例包括本發(fā)明化合物的陰離子與適宜的陽(yáng)離子如Na+、NH4+、和NW/(其中W是CH烷基)等形成的鹽。對(duì)于治療應(yīng)用而言，本發(fā)明化合物的鹽是可藥用的。但是，在可藥用化合物的制備或純化中也可以使用不可藥用的酸和堿的鹽。這里所用的術(shù)語(yǔ)"治療有效量"指的是足以改善病癥的一種或多種癥狀或預(yù)防病癥發(fā)展或引起病癥消退的治療劑的數(shù)量。例如，在涉及癌癥的治療時(shí)，治療有效量?jī)?yōu)選地指的是降低腫瘤生長(zhǎng)速度、降低腫瘤質(zhì)量、降低轉(zhuǎn)移瘤數(shù)目、增加腫瘤進(jìn)行的時(shí)間、或者將存活時(shí)間增加至少5%，優(yōu)選至少10%，至少15%,至少20%，至少25%，至少30%,至少35%,至少40%，至少45%，至少50%，至少55%，至少60%，至少65%，至少70%，至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少95%，或至少100%的治療劑的數(shù)量。這里所用的術(shù)語(yǔ)"敏感"和"敏化"指的是通過(guò)使用第一種物質(zhì)(例如式I的化合物)，使得動(dòng)物或動(dòng)物體內(nèi)的細(xì)胞對(duì)第二種物質(zhì)的生物學(xué)作用(例如促進(jìn)或阻止某方面的細(xì)胞功能，非限制性地包括細(xì)胞分裂、細(xì)胞生長(zhǎng)、增生、侵襲、血管生成、壞死、或細(xì)胞凋亡)更敏感或者反應(yīng)性更高?？梢砸栽诮o予或不給予第一種物質(zhì)的情況下給予笫二種物質(zhì)時(shí)觀察到的所需生物學(xué)作用(例如，促進(jìn)或阻止某方面的細(xì)胞功能，非限制性地包括細(xì)胞生長(zhǎng)、增生、侵襲、血管生成、或細(xì)胞凋亡)的差異的形式來(lái)測(cè)量第一種物質(zhì)對(duì)靶細(xì)胞的敏化作用，與不存在第一種物質(zhì)時(shí)的響應(yīng)相比，纟皮敏化的細(xì)胞的響應(yīng)可以增加至少10%,至少20%,至少30%，至少40%，至少50%，至少60%，至少70%，至少80Q/。，至少90%，至少100%，至少150%,至少200%，至少350%，至少300%，至少350%，至少400%，至少450%，或至少500%。這里所用的術(shù)語(yǔ)"細(xì)胞凋亡失調(diào)"指的是細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞凋亡經(jīng)歷細(xì)胞死亡的能力(例如，傾向)方面的任何失常。細(xì)胞凋亡失調(diào)與許多情況有關(guān)或者是由許多情況誘導(dǎo)的，所述情況的實(shí)例非限制性地包括自身免疫性病癥(例如，全身性紅斑狼瘡、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、移植物抗宿主病、重癥肌無(wú)力、或斯耶格倫氏綜合征)、慢性炎性情況(例如，牛皮癬、哞喘或克羅恩氏病)、過(guò)度增生性病癥(例如，肺瘤、B細(xì)胞淋巴瘤、或T細(xì)胞淋巴瘤)、病毒感染(例如，皰滲、乳頭狀瘤、或HIV)，其它情況如骨關(guān)節(jié)炎和動(dòng)脈粥樣硬化。應(yīng)當(dāng)注意的是，當(dāng)所述失調(diào)與病毒感染有關(guān)或者是由病毒感染誘導(dǎo)時(shí)，在失調(diào)發(fā)生時(shí)所述病毒感染可探測(cè)或不可探測(cè)，或者可以被觀察到。即，病毒誘導(dǎo)的失調(diào)甚至可以發(fā)生于病毒感染癥狀消失之后。這里所用的術(shù)語(yǔ)"功能性p53"指的是以正常水平、高水平或低水平表達(dá)的野生型p53和保留了野生型p53至少5%活性，例如至少10%、20%、30%、40%、50%或更高活性的突變型p53。這里所用的術(shù)語(yǔ)"與p53有關(guān)的蛋白"指的是與p53具有至少25%序列同源性、具有腫瘤抑制基因活性并且被與MDM2或與MDM2有關(guān)的蛋白的相互作用抑制的這些蛋白。與p53有關(guān)的蛋白的實(shí)例非限制性地包括p63和p73。這里所用的術(shù)語(yǔ)"與MDM2有關(guān)的蛋白"指的是與MDM2具有至少25%的序列同源性并且與p53或p53有關(guān)的蛋白相互作用并抑制p53或與p53有關(guān)的蛋白的這些蛋白。與MDM2有關(guān)的蛋白的實(shí)例非限制性地包括MDMX和HDM2。這里所用的術(shù)語(yǔ)"過(guò)度增生性疾病"指的是其中動(dòng)物體內(nèi)正在進(jìn)行增生的細(xì)胞的局部群體不受正常生長(zhǎng)的通常限制因素控制的任何情況。過(guò)度增生性病癥的實(shí)例包括腫瘤、贅生物、淋巴瘤等。如果贅生物不進(jìn)行侵襲或者轉(zhuǎn)移，則其被稱(chēng)為是良性的，如果進(jìn)行使襲或轉(zhuǎn)移，則該贅生物被稱(chēng)為是惡性的。"轉(zhuǎn)移性的"細(xì)胞指的是可以侵襲和破壞鄰近身體結(jié)構(gòu)的細(xì)胞。增生是一種涉及組織或器官中細(xì)胞數(shù)目增加但組織或器官結(jié)構(gòu)或功能沒(méi)有顯著改變的細(xì)胞增生形式。組織轉(zhuǎn)化是一種其中一類(lèi)充分分化的細(xì)胞替代了另一類(lèi)分化細(xì)胞的受控的細(xì)胞生長(zhǎng)形式，被活化的淋巴樣細(xì)胞的病理學(xué)生長(zhǎng)常常導(dǎo)致自身免疫性病癥或慢性炎性情況。這里所用的術(shù)語(yǔ)"自身免疫性病癥"指的是其沖有機(jī)體產(chǎn)生識(shí)別該有機(jī)體自身分子、細(xì)胞或組織的抗體或免疫細(xì)胞的任何情況。自身免疫性病癥的非限制性實(shí)例包括自身免疫性溶血性貧血、自身免疫性肝炎、貝格爾氏病或IgA腎病、口炎性腹竭、慢性疲乏綜合征、克羅恩氏病、皮膚肌炎、纖維肌痛、移植物抗宿主病、格雷夫斯氏病、橋本氏甲狀腺炎、特發(fā)性血小板減少性紫癜、扁平苔蘚、多發(fā)性硬化、重癥肌無(wú)力、牛皮痺、風(fēng)濕熱、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、硬皮病、斯耶格倫氏綜合征、全身性紅斑狼瘡、l型糖尿病、潰瘍性結(jié)腸炎、白癲風(fēng)等。這里所用的術(shù)語(yǔ)"瘤形成疾病"指的是良性(非癌性)或惡性(癌性)細(xì)胞的任何異常生長(zhǎng)。這里所用的術(shù)語(yǔ)"正常細(xì)胞"指的是不經(jīng)歷異常生長(zhǎng)或分裂的細(xì)胞。正常細(xì)胞是非癌性的并且不是任何過(guò)度增生性疾病或病癥的部分。這里所用的術(shù)語(yǔ)"抗胂瘤劑"指的是阻礙目標(biāo)(例如惡性)脊生物的增生、生長(zhǎng)或擴(kuò)散的任何化合物。這里所用的術(shù)語(yǔ)"阻止"、"防止"和"預(yù)防"("prevent"、"preventing"和"prevention")指的是降低動(dòng)物體內(nèi)病理學(xué)細(xì)胞(例如過(guò)度增生或贅生細(xì)胞)的出現(xiàn)。本發(fā)明可以是完全的，例如使得個(gè)體體內(nèi)完全沒(méi)有病理性細(xì)胞。本發(fā)明也可以是不完全的，從而使得個(gè)體體內(nèi)出現(xiàn)的病理性細(xì)胞低于不使用本發(fā)明時(shí)出現(xiàn)的病理性細(xì)胞。這里所用的術(shù)語(yǔ)"細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)劑"指的是參與調(diào)節(jié)(例如抑制、降低、增加、促進(jìn))細(xì)胞凋亡的物質(zhì)。細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)劑的實(shí)例包括包含死亡區(qū)域的蛋白，非限制性地如Fas/CD95、TRAMP、TNFRI、DR1、DR2、DR3、DR4、DR5、DR6、FADD、和RIP。細(xì)胞洞亡調(diào)節(jié)劑的其它一些實(shí)例非限制性地包括TNFa、Fas配體、Fas/CD95和其它TNF族受體的抗體、TRAIL(也被稱(chēng)為Apo2配體或Apo2L/TRAIL)、TMIL-R1或TRAIL-R2的抗體、Bcl-2、p53、BAX、BAD、Akt、CAD、PI3激酶、PP1、和半胱天冬酶蛋白。廣義的調(diào)節(jié)刑包括TNF族受體和TNF族配體的激動(dòng)劑和拮抗刑。細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)劑可以是可溶的或膜結(jié)合的(例如配體或受體)，優(yōu)選的細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)劑是細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)刑，如TNF或TNF相關(guān)配體，特別是TRAMP配體、Fas/CD95配體、TNFR-1配體、或TRAIL。本發(fā)明p53和MDM2之間相互作用的抑制劑是式I的化合物:或其可藥用的鹽或前體藥物，其中X是CH、0、N、或S，其中如果X是O或S，則Rs不存在；Y是0、S、或NR';Ri、R2、R3、R4、R5、R6和R7獨(dú)立地是H或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、C02R'、0C0R'、C0NR'R"、NR"C0R'、NR'S02R"、S0識(shí)'R"、(C-NR')NR"R〃'、或NR'R";或者R7與Rs或R6中的一個(gè)形成一種芳基、環(huán)烷基、或雜環(huán)基團(tuán)；Rs是H或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、C02R'、0C0R'、C0NR'R"、S02NR'R"、或(C-NR')NR"R〃'；IU是一至四個(gè)獨(dú)立地選自H、F、Cl、Br、I、0H、N02、烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、0R'、C02R'、0C0R'、C0NR'R"、NR"C0R'、N跳R"、S02NR'R"、(C-NR')NR"R〃'、或NR'R";和R'、R"和R〃'獨(dú)立地是H或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、或雜環(huán)；或者R'和R"、或者R"和R〃'形成一種環(huán)；或者當(dāng)Rs和R4中的一個(gè)是C0NRR'時(shí)，R和R'中的一個(gè)還可以是(CH丄-R'、(CH2)n—NR'R"、(CH2)n-NRT0R"、(CH2)n-NR'S02R"、(CH2)n-NR'(ONR")NR〃'、(CH丄-C00H、(CH2)n-C00R'、(CH2)n-C0NR'R"、(CH2)n-0R'、(CH丄-SR'、(CH2)n—C0R'、(CH2)n—S03H、(CH2)n—S0NR'R"、(CH2)n-S02NR'R"、(CH2CH20)n-(CH2)f0H、(CH2CH20)n-(CH2)ra-0R'、(CH2CH20)n-(CH2)「C00R'、(CH2CH20)n-(CH2)-CONR'R"、(CH2CH20)n-(CH2)n-NR'R"、(CH2CH20)n-(CH2)—NR'C0R"、(CH2CH20)n—(CH2)m-NR'(ONR")NR'〃、XiR8(CH2CH20)「(CH2)ra—NR'S02R"、(CH2)「(CH2CH20)n—(CH2)ra—0H、(CH2)P—(CH2CH20)n—(CH2)m—0R'、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)-C00R'、(CH2)P—(CH2CH20)n—(CH2)m-CONR'R"、(CH2)p-(CH2Ciy))n-(CH2K-NR'R"、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH》-NR'C0R"、(CH2)p-(CH2CH20)n-線)JR'(C-NR")NR'〃、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2h-NR'S02R"、-CO-R'、-SOR'、或,11';和n、m、和p各自獨(dú)立地是l-6。在一個(gè)更特定的實(shí)施方案中，R,和R2中的一個(gè)是被取代或未被取代的芳基(例如，苯基)、被取代或未被取代的雜芳基、環(huán)烷基、直鏈或支鏈烷基、酰胺或酯。在另一個(gè)實(shí)施方案中,Rs和R6中的一個(gè)是Cw8烷基，例如，丙基、異丙基、仲-丁基、叔-丁基、異戊基、環(huán)戊基、降冰片基、或金剛烷基、或5-或6-員芳基或雜芳基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述的式I化合物具有式II或式III中所示的立體化學(xué)結(jié)構(gòu)IIIU或其可藥用的鹽或前體藥物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述的式I化合物具有式IV:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage35</formula>其中RHU和Y的定義如上所述。1V在另一個(gè)實(shí)施方案中，式IV的化合物具有式V或式VI中所示的立體化學(xué)結(jié)構(gòu)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage36</formula>或其可藥用的鹽或前體藥物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所迷的式I化合物具有式VII:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage36</formula>其中M9的定義如上所述。在另一個(gè)實(shí)施方案中，中所示的立體化學(xué)結(jié)構(gòu)式VII的化合物具有式VIII和式IX<formula>formulaseeoriginaldocumentpage36</formula>或其可藥用的鹽或前體藥物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述的式I化合物具有式X:其中Id、R5、R7、和R,的定義如上所述；R!。和Ru獨(dú)立地是H、OH或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、(CH丄-R'、(d匿'、(CH丄-腦OR"、(CH2)n-NR'S02R"、(CH2)n-NR'(C=NR")NR〃'、(CH2)n-COOH、(CH2)n-C00R'、(CH丄-C0NR'R"、(CH丄-OR'、(CH丄-SR'、(CH2)n-COR'、(CH2)n-S03H、(CH2)n-S0NR'R"、(CH2)n-S02NR'R"、(CH2CH20)n-(CH2)m-0H、(CH2CH20)n-(CH丄-OR'、(CH2CH20)n-(CH2)ra-C00R'、(CH2CH20)n-(CH2)ra-CO服'R"、(CH2CH20)n-(CH2)m-NR'R",,(CH2CH20)n-(CH2)-NR'COR"、(CH2CH20)n-(CH2)ra-NR'(ONR")NR〃'、(CH2CH20)n-(CH2)邁-NR'S02R"、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)ra—0H、(CH2)p—(CH2CH20)n-(CH2)m—0R'、(CH2)p-(CH2CH20)n—(CH2)加一COOR'、(CH2)p-(CH2CH20)n—(CH2)m—CONR'R"、(CH2)p-(CH2CH20)n—(CH2)-NR'R"、(CH2)p-(CH2CH20)n—(CH2)m-NR'COR"、(CH2)p—(CM20)n-(CH2)-NR'(C-NR")NR〃'、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)m-NR'S02R"、-CO-R'、-SOR'、或-S02R';和n、m、和p各自獨(dú)立地是l-6。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述的式I化合物具有式XI-XXVI中的一種<formula>formulaseeoriginaldocumentpage38</formula>其中R:、R5、R7、R9、R1C、和Ru的定義如上所述。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述的式I化合物具有式XXVII和XXVIII中的一種:0<formula>formulaseeoriginaldocumentpage38</formula>XXVI權(quán)l(xiāng)其中R,、R5、R7、R9、IU、和Rn的定義如上所述。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述的式I化合物具有式XXIX:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage38</formula>其中Z是O、NH、NR'、CH2、CHR'、或CR'R";和R,、R5、R7、R9、和R!。的定義如上所述。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述的式I化合物具有式XXX-XLV中的一種其中Z、R,、R5、R7、R9、和R,。的定義如上所述。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所迷的式I化合物具有式XLVI:其中Ri、R5、R7、和R,的定義如上所述。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述的式I化合物具有式XLVII:XXXVI<formula>formulaseeoriginaldocumentpage40</formula>XLVII其中Id、R3、R,、和IU的定義如上所述；Ru是一至四個(gè)獨(dú)立地選自H、F、Cl、Br、I、0H、N02、烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、0R'、C02R'、0C0R'、C0NR'R〃、NR〃C0R'、N跳R〃、S0,R〃、(C-NR')NR〃R〃'、或NR'R〃的基團(tuán)；和n是0、1、或2。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述的式I化合物具有式XLVIII:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage40</formula>XLVIII其中I、R3、R4、R5和R,的定義如上所述；在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述的式I化合物具有式XLI3HLXIV中的一種:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage40</formula>其中R,、R3、R4、Rs和R,的定義如上所述。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述的式I化合物具有一種式LXV:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage41</formula>其中Ri、R4、R5、R9、Rie、和Ru的定義如上所述。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述的式I化合物具有式LXVI和LXVII中的一種其中R,、R4、R5、R,、R!。、和Ru的定義如上所述，〖0070]在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述的式I化合物具有式LXVIII和LXVIX中的一種LX謂LXIX其中R!、R4、R5、R9、R、和Z的定義如上所述。有用的烷基包括直鏈或支鏈d—18烷基，尤其是甲基、乙基、丙基、異丙基、叔-丁基、仲-丁基、3-戊基、金剛烷基、降冰片基、和3-己基。有用的鏈烯基包括直鏈或支鏈C2—18烯基，尤其是乙烯基、丙烯基、異丙烯基、丁烯基、異丁烯基、和己烯基，有用的炔基有C2—18炔基，尤其是乙炔基、丙炔基、丁炔基、和2-丁炔基。有用的環(huán)烷基有Cw環(huán)烷基。典型的環(huán)烷基包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基和環(huán)庚基。有用的芳基包括C^芳基，尤其是苯基、萘基、菲基、蒽基、茚基、環(huán)戊并環(huán)庚五烯基、聯(lián)苯基、亞聯(lián)苯基、和芴基。有用的雜芳基包括漆吩基、苯并[b]嚷吩基、萘并[2，3-b]噱吩基、噻蒽基、呋喃基、吡喃基、異苯并呋喃基、色烯基、*噸基、phenoxanthenyl、2H-吡咯基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、吡咬基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、巧l嗪基、異丐l咮基、3H-巧I哚基、-引哚基、吲唑基、嘌呤基、4H-喹嗪基、異喹啉基、喹啉基、酞嗪基、萘啶基、quinozalinyl、肉啉基、蝶咬基、吵唑基、0-呻啉基、菲啶基、吖啶基、萘嵌二氮苯基(perimidinyl)、菲咯啉基、吩嚷基、異漆峻基、喻噻嗪基、異惡唑基、呋咱基、吩惡嗪基、1，4-二氫喹喔啉-2，3-二酮、7-氨基異香豆素、吡啶并[l，2-a]嘧啶-4-酮、1，2-苯并異惡唑-3-基、苯并咪唑基、2-羥吲哚基、和2-氧代苯并咪唑基。在所述雜芳基在環(huán)中包含氮原子的情況中，該類(lèi)氮原子可以為N-氧化物，例如吡叱基N-氣化物、吡噪基N-氧化物、嘧充基N-氣化物等形式。有用的雜環(huán)基團(tuán)包括四氫呋喃基、吡喃基、哌咬基、哌喚基(piperizinyl)、吡咯烷基、咪唑烷基、咪唑啉基、二氫吲哚基、異二氫吲哚基、奎寧環(huán)基、嗎啉基、異色滿基、色滿基、吡唑烷基、吡唑啉基、tetronoyl、tetramoyl、或四氬異查啉基、以及與雜芳基環(huán)稠合的雜環(huán)，例如，任選地被取代的5，6-二氫-8H-[1，2，4]三唑并[4，3-A]吡嚷基。任選的取代基包括一種或多種烷基；卣素；卣代烷基；環(huán)烷基；任選地被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、亞甲二氧基、鹵代、卣代烷基、氨基磺?；?、芳基、或雜芳基取代的芳基；任選地被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、亞甲二氧基、囟代、卣代烷基、氨基橫?；?、芳基、或雜芳基取代的芳氧基；芳烷基；任選地被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、亞甲二氧基、卣代、卣代烷基、氨基磺?；⒎蓟?、或雜芳基取代的雜芳基；任選地被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、低級(jí)烷氣基、亞曱二氧基、囟代、商代烷基、氨基磺酰基、芳基、或雜芳基取代的雜芳氧基；烷氧基;烷硫基；芳硫基；酰氨基；氨基；氨基烷基、烷基氨基、酰氧基；任選地被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、亞甲二氧基、卣代、卣代烷基、氨基磺?；?、芳基、或雜芳基取代的芳基酰氣基；任選地被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、亞甲二氧基、鹵代、囟代烷基、氨基磧?；⒎蓟?、或雜芳基取代的二苯基氣膦基氧基；任選地被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、亞甲二li^、鹵代、鹵代烷基、氨基磺?；?、芳基、雜芳基、氨基酸取代的磺酰基、或氨基酸衍生物取代的磺?；〈碾s環(huán)；任選地被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、亞甲二氧基、卣代、卣代烷基、氨基磺酰基、芳基、或雜芳基取代的雜環(huán)?；?；任選地被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、低級(jí)烷氣基、亞甲二氣基、卣代、卣代烷基、氨基磺?；⒎蓟?、或雜芳基取代的雜環(huán)烷氣基；任選地被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、亞甲二氧基、卣代、卣代烷基、氡基磺?；?，芳基、或雜芳基取代的部分不飽和雜環(huán)烷基；或者任選地被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、亞甲二氧基、卣代、卣代烷基、氨基崤酰基、芳基、或雜芳基取代的部分不飽和雜環(huán)烷氣基。本發(fā)明的某些化合物可以以包括光學(xué)異構(gòu)體在內(nèi)的立體異構(gòu)體的形式存在。本發(fā)明包括所有立體異構(gòu)體，其可以為各純立體異構(gòu)體制劑和富含各異構(gòu)體的制劑形式，并且可以為該類(lèi)立體異構(gòu)體的外消映異構(gòu)體形式。可以結(jié)合下面的合成流程圖來(lái)更好地理解本發(fā)明的化合物和方法，這些合成流程圖對(duì)可以用來(lái)制備本發(fā)明化合物的方法進(jìn)行了說(shuō)明。起始材料可以得自商業(yè)來(lái)源或者可以用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的已經(jīng)充分得到確認(rèn)的文獻(xiàn)方法來(lái)進(jìn)行制備。對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員而言顯而易見(jiàn)的是，上面所定義的化合物也可以通過(guò)對(duì)下面所示合成中的適宜試劑和物質(zhì)進(jìn)行替代來(lái)進(jìn)行合成。具有通式X的結(jié)構(gòu)的化合物可以用不對(duì)稱(chēng)的1，3-偶極環(huán)加成作為關(guān)鍵步驟來(lái)進(jìn)行合成(流程圖1)。流程圖1.<formula>formulaseeoriginaldocumentpage44</formula>試劑和條件a)CH2C12-CH3CN,KF-A1203,微波，或甲醇，哌啶回流；b)4A分子篩，甲苯，70匸;c)胺，室溫;d)Pb(OAc)4，CH2Cl2-MeOH(1:1)，OX:，或硝酸鈰(IV)銨(CAN)，CH3CN，K2C03，室溫具有式XXIX的化合物可以用流程圖2所示的操作來(lái)進(jìn)行合1213XXIX試劑和條件a)4A分子篩，曱苯，70TC;b)乙醇/HCl，回流;c)NaBH4，乙醇回流；d)TBDMSCl，咪唑，DMF;e)i)三甲基乙酰氯，二異丙基乙基胺，CH2C12，ii)HC1/乙酸乙酯，室溫；f)CBR4，Ph3P，CH2C12;g)R,。ONa(對(duì)于Z-0而言)，或者R1QNH2(對(duì)于Z=NH而言)或其它標(biāo)準(zhǔn)操作；h)Pb(OAc)4，CH2Cl2-MeOH(l:l)，0匸或CAN,CH3CN，K2C03，室溫；i)HCHO，NaBH3CN，CH3CN(對(duì)于R7-Me而言)或其它標(biāo)準(zhǔn)操作。具有式XLVI的化合物可以用如流程圖3中所示的公開(kāi)了的1，3-偶極環(huán)加成反應(yīng)來(lái)進(jìn)行制備(Fejes等人，Tetrahedron57:1129(2000))。流程圖3.具有式XLVI1的化合物可以用如流程蹈4所示的公開(kāi)了的另一種1，3-偶極環(huán)加成反應(yīng)來(lái)進(jìn)行制備(Fejes等人，Tetrahedron57:1129(2000))。流程圖4.<formula>formulaseeoriginaldocumentpage46</formula>具有式LXV的化合物是用與式X的制備方法相似的方法來(lái)進(jìn)行制備的(流程圖5)。18LXV試劑和條件a)CH2C12-CH3CN，KF-A1203，微波，或曱醉，咪咬回流；b)4A分子篩，甲笨，70n;c)胺，室溫；d)Pb(OAc)4，CH2Cl2-MeOH(1:1)，OX:，或硝酸鈰(IV)銨(CAN)，CM,K2C03，室溫。本發(fā)明一方面涉及一些制備MDM2抑制刑化合物的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種制備具有式X的化合物的方法，其包括a)將式1的化合物與式2的化合物進(jìn)行縮合，例如，在溶刑或溶劑混合物(例如，CH2Cl2和CH3CN)中在微波下在存在催化刑(例如，KF-A1203)或在存在堿的情況下在適宜溶劑中進(jìn)行縮合，從而形成式3的化合物；123b)將式3的化合物與式4的化合物和式5的化合物進(jìn)行縮合，例如，在非極性溶劑(例如，甲苯)中在存在脫水劑(例如，4A分子篩)的情況下在升高的溫度(例如，約70TC)下進(jìn)行縮合，從而形成式6的化合物；和45c)用氧化劑(例如，Pb(OAc)4，硝酸鈰銨)在溶刑或溶刑混合物(例如,CH2Cl2和MeOH，CH3CN)中在適宜的溫度(例如，約0t:或室溫)下對(duì)式6的化合物進(jìn)行處理，從而形成式X的化合物；其中R,、和Rs獨(dú)立地是H或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、歸'、OCOR'、C0NR'R〃、NR"COR'、NR'S02R〃、S02NR'R〃、(C-NR')NR〃R〃'、或NR'R";IU是一至四個(gè)獨(dú)立地選自H、F、Ci、Br、I、0H、N02、烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、0R'、歐、0C0R'、C0鵬〃、NR〃C0R'、N跳R〃、S0累〃、(ONR')NR〃R〃'、或NR'R〃的基團(tuán)；!^。和Ru獨(dú)立地是H、0H或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、(CH丄-R'、(CH丄-NR'R"、(CH丄-NR'C0R"、(CH2)n-NR'S02R〃、(CH2)n-NR'(ONR〃)NR〃'、(CH2)n-C00H、(CH丄-C00R'、(CH2)n-C0冊(cè)'R〃、(CH2);1-0R'、(CH2)n-SR'、(CH2)n-C0R'、(CH2)n-S03H、(CH2)n-S0NR'R〃、(CH2)n-S02NR'R"、(CH2CH20)n-(CH2)m-0H、(CH2CH20)n-(CH丄-0R'、(CH2CH20)n-(CH2)B-COOR'、(CH2CH20)n-(CH2)rC0NR'R〃、(CH2CH20)n-(CH2)-NR'R〃、(CH2CH20)n—(CH2)NR'C0R"、(CH2CH20)n-(CH2)m-NR'(C=NR〃)NR〃'、(CH2CH20)n-(CH2)m-NR'S02R"、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)m-0H、(CH2)p-(CH線O)n—(CH2)-0R'、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)m-C00R'、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)rC0NR'R〃、(CH2)p—(CH2CH20)n-(CH2)加-NR'R"、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)「NR'C0R〃、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)ra-NR'(ONR")NR〃'、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)m-NR'S02R〃、-C0-R'、-SOR'、或-S(U';n、m、和p各自獨(dú)立地是l-6;和R'、R"和R'〃各自獨(dú)立地是H或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、或雜環(huán)；或者R'和R"，或者R"和R〃'形成一種環(huán)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種制備具有式LXV的化合物的方法，其包括a)將式16的化合物與式2的化合物縮合，例如，在溶刑或溶劑混合物(例如，C仏Cl2和CH3CN)中在微波中在存在催化劑(例如，KF-A1力3)的情況下或者在存在堿的情況下在適宜的溶劑中進(jìn)行縮合，從而形成式17的化合物；b)將式17的化合物與式4的化合物和式5的化合物進(jìn)行縮合，例如，在非極性溶劑(例如，甲苯)中在存在脫水劑(例如，4A分子篩)的情況下在升高的溫度(例如，約70。下進(jìn)行縮合，從而形成式18的化合物；和<formula>formulaseeoriginaldocumentpage49</formula>c)在溶劑或溶劑混合物(例如，CH2Cl2和MeOH，CH3CN)中在適宜的濕度(例如，約Ot:或室溫)用氧化劑(例如，Pb(OAc),，硝酸鋅銨)對(duì)式18的化合物進(jìn)行處理，從而形成式LXV的化合物；LXV其中R,、R5、R9、R!。和Rn的定義如上所述。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種制備具有式XXIX的化合物的方法，其包括a)將式3的化合物與式4的化合物和式5的化合物進(jìn)行縮合，例如，在非極性溶劑(例如，甲苯)中在存在脫水劑(例如，4人分子篩)的情況下進(jìn)行縮合或者通過(guò)在升高的溫度(例如約70t:下)進(jìn)行共沸蒸鎦來(lái)進(jìn)行縮合，從而形成式7的化合物；b)將式7的化合物在存在酸(例如，HC1)的情況下進(jìn)行加熱，然后向其中加入一種還原劑(例如，NaBH4)，從而形成式8的化合物；8c)將式8的化合物與阻滯劑(例如，三烷基甲硅烷基卣化物如TBDMSC1)在極性溶劑(例如，DMF)中進(jìn)行縮合，然后將其與三甲基乙酰氯或其它保護(hù)劑在溶劑或溶劑混合物(例如，二異丙基乙基胺，CH2Cl2)中進(jìn)行縮合和然后將其和酸(例如，HC1)縮合，從而形成式10的化合物；810d)用面化劑(例如，CBr4和PlhP)在溶劑(例如，CH2C1》中對(duì)式10的化合物進(jìn)行處理，從而形成一種式11的卣代化合物；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage51</formula>10<formula>formulaseeoriginaldocumentpage51</formula>11e)用R!。ONa或1^。卵2置換式11化合物的離素基團(tuán)，從而形成式12的化合物；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage51</formula>11<formula>formulaseeoriginaldocumentpage51</formula>12f)在溶劑或溶劑混合物(例如，CH2Ch和MeOH或CH3CN)中在適宜的溫度(例如，約OX:至室溫)下用氧化劑(例如，Pb(0Ac)4，或硝酸镩銨)對(duì)式12的化合物進(jìn)行處理，從而形成式13的化合物；和<formula>formulaseeoriginaldocumentpage51</formula>12<formula>formulaseeoriginaldocumentpage51</formula>13g)用烷化劑(例如，HCH0，NaBH3CN，和CH3CN)對(duì)式13的化合物進(jìn)行烷化，從而形成式XXIX的化合物；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage51</formula>13<formula>formulaseeoriginaldocumentpage51</formula>XXIX其中R!、R5、R7、R9、Rw和Z的定義如上所述。本發(fā)明的一個(gè)重要方面是式I的化合物誘導(dǎo)細(xì)胞周期停滯和/或細(xì)胞凋亡并且也可以是羊獨(dú)或者作為對(duì)另一種細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)信號(hào)的響應(yīng)加強(qiáng)誘導(dǎo)的細(xì)胞周期停滯和/或細(xì)胞凋亡。因此，認(rèn)為這些化合物可以使細(xì)胞對(duì)細(xì)胞周期停滯和/或細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)敏感，所迷細(xì)胞包括對(duì)該類(lèi)誘導(dǎo)刺激有耐受性的細(xì)胞?？梢栽诳梢酝ㄟ^(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡來(lái)進(jìn)行治療、改善或預(yù)防的任何病癥中用本發(fā)明抑制p53或與p53有關(guān)的蛋白和M畫(huà)2或與MDM2有關(guān)的蛋白之間相互作用的抑制刑來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞調(diào)亡.在一個(gè)實(shí)施方案中，可以用所述抑制刑在包含功能性p53或與p53有關(guān)的蛋白的細(xì)胞中誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及與一種或多種細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)劑有關(guān)的對(duì)細(xì)胞凋亡有關(guān)的狀態(tài)進(jìn)行的調(diào)節(jié)。細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)劑的實(shí)例非限制性地包括Fas/CD95、TRAMP、TNFRI、DR1、DR2、DR3、DR4、DR5、DR6、FADD、RIP、TNFct、Fas配體、TRAIL、TRAIL-Rl或TRAIL-R2的抗體、Bc卜2、p53、BAX、BAD、Akt、CAD、PI3激酶、PP1、和半胱天冬酶蛋白。還可以包括參與細(xì)胞凋亡的初始相、決定相和降解相的其它物質(zhì)。細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)劑的實(shí)例包括其活性、存在或濃度變化可以調(diào)節(jié)個(gè)體體內(nèi)的細(xì)胞凋亡的物質(zhì)。優(yōu)選的細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)劑是細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)劑，如TNF或與TNF-有關(guān)的配體，特別是TRAMP配體、Fas/CD95配體、TNFR-1配體、或TRAIL。在一些實(shí)施方案中，可以用本發(fā)明的組合物和方法來(lái)治療動(dòng)物(例如哺乳動(dòng)物個(gè)體，非限制性地包括人和善醫(yī)動(dòng)物)體內(nèi)的患病細(xì)胞、組織、器官或病理學(xué)情況和/或疾病狀態(tài)。就此而言，可以用本發(fā)明的方法和組合物治療或預(yù)防各種疾病和病變。這些疾病和情況的非限制性實(shí)例列表非限制性地包括乳癌、前列腺癌、淋巴瘤、皮膚癌、胰腺癌、結(jié)腸癌、黑素瘤、惡性黑素瘤、卵巢癌、腦癌、原發(fā)性腦癌、頭頸癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、肝癌、膀胱癌、非小細(xì)胞肺癌、頭或頸癌、乳腺癌、卵巢癌、肺癌、小細(xì)胞肺癌、維爾姆斯瘤、宮頸癌、華丸癌、膀胱癌、胰腺癌、胃癌、結(jié)腸癌、前列腺癌、泌尿生殖器癌、甲狀腺癌、食管癌、骨髄瘤、多發(fā)性骨髄瘤、腎上腺癌、腎細(xì)胞癌、子常內(nèi)膜癌、腎上腺癌、惡性胰腺胰島素瘤、惡性類(lèi)癌瘤、絨毛膜癌、簞樣真菌病、惡性高鈣血、宮頸增生、白血病、急性淋巴細(xì)胞性白血病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病、急性髄細(xì)胞性白血病、慢性髄細(xì)胞性白血病、慢性粒細(xì)胞性白血病、急性粒細(xì)胞性白血病、毛細(xì)胞性白血病、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、橫紋肌肉瘤、卡波濟(jì)氏肉瘤、真性紅細(xì)胞增多癥、特發(fā)性血小板增多癥(essentialthrombocytosis)、何杰金氏病、非何杰金氏淋巴瘤、軟組織肉瘤、骨肉瘤、原發(fā)性巨球蛋白血癥、和成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤等、T和B細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫性疾病；炎性疾?。桓腥?；過(guò)度增生性疾?。籄IDS;變性情況、血管疾病等。在一些實(shí)施方案中，被治療的癌細(xì)胞是轉(zhuǎn)移性的。在其它一些實(shí)施方案中，被治療的癌細(xì)胞對(duì)抗癌劑有耐受性。在一些實(shí)施方案中，適于用本發(fā)明的組合物和方法進(jìn)行治療的感染非限制性地包括由病毒、細(xì)菌、真菌、支原體、朊病毒(prions)等造成的感染。本發(fā)明的一些實(shí)施方案提供了一些將有效量式I的化合物和至少一種其它的治療刑(非限制性地包括化療的抗胂瘸劑、細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)劑、抗微生物劑、抗病毒劑、抗真菌劑、和抗炎刑)和/或治療技術(shù)(例如，手術(shù)干預(yù)，和/或放療)進(jìn)行給藥的方法。認(rèn)為本發(fā)明的方法可以使用許多適宜的抗癌刑。實(shí)際上，本發(fā)明非限制性地考慮給予許多抗癌劑如:誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的物質(zhì)；多核苷酸(例如，反義，核酶，siRM);多肽(例如，酶和抗體)；生物學(xué)擬似物(例如，棉子酚或BH3擬似物)；與Bcl-2族蛋白如Bax結(jié)合(例如，寡聚或*$^)的物質(zhì)；生物堿類(lèi)；烷化劑；抗腫瘤抗生素；抗代謝物；激素；鉑化合物；單克隆或多克隆抗體(例如，與抗癌藥、毒素、防衛(wèi)素軛合的抗體)、毒素類(lèi)；放射性核素；生物學(xué)響應(yīng)改性劑(例如，干擾素(例如，IFN-ot)和白介素(例如，IL-2));過(guò)繼免疫治療劑；造血生長(zhǎng)因子；誘導(dǎo)肺瘤細(xì)胞分化的物質(zhì)(例如，全反式視黃酸)；基因治療試劑(例如，反義治療試刑和核苷酸)；腫瘤疫苗;血管生成抑制劑；蛋白體抑制劑；NF-kB調(diào)節(jié)刑；抗-CDK化合物；HDAC抑制劑等。許多適于與所公開(kāi)的化合物一起進(jìn)行給藥的其它化療化合物和抗癌治療的實(shí)例對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是已知的。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，抗癌劑包括誘導(dǎo)或刺激細(xì)胞凋亡的物質(zhì)。誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的物質(zhì)非限制性地包括輻射(例如，X-射線、Y射線、UV);與胂瘤壞死因子(TNF)有關(guān)的因子(例如，TNF族受體蛋白、TNF族配體、TRAIL、TRAIL-Rl或TRAIL-R2的抗體)；激酶抑制刑(例如，表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)激酶抑制劑、血管生長(zhǎng)因子受體(VGFR)激酶抑制劑、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(FGFR)激酶抑制刑、血小板衍生生長(zhǎng)因子受體(PDGFR)激酶抑制刑、和Bcr-Abl激酶抑制劑(如GLBEVEC));反義分子；抗體(例如，赫賽汀(HERCEPTIN)、B細(xì)胞單克隆抗體(RITUXAN)、ZEVALIN、和AVASTIN);抗雌激素藥(例如，雷洛昔芬和他莫昔芬)；抗雄激素藥(例如，氟他胺、比卡魯胺、非那雄胺、aminoglutethamide、酮康唑、和皮質(zhì)類(lèi)固醇)；環(huán)氧合酶2(C0X-2)抑制刑(例如，塞來(lái)考西、美洛昔康、NS-398、和非齒體抗炎藥(NSAIDs));抗炎藥(例如，保泰松、地卡特隆(DECADRON)、去氫可的松(DELTASONE)、地塞米松、地塞米爭(zhēng)》intensol、地塞米松磷酸鈉(DEX0NE)、HEXADR0L、羥氯溱、METICORTEN、0RADEX0N、0RAS0NE、羥布宗、潑尼松磷酸鈉制劑(PEDIAPRBW、苯丁唑酮、羥氯喚(PLAQUENIL)、潑尼松龍、潑尼松、PREL0NE、和坦特利爾(TANDEARIL));和癌癥化療藥(例如，依立替康(CAMPTOSAR)、CPT-ll、氟達(dá)拉濱(FLUDARA)、達(dá)咕巴喚(DTIC)、地塞米松、醚托蒽載、MYL0TARG、VP-16、順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、5-FU、多柔比星、吉西他濱、bortezomib、gefitinib、貝伐單抗、泰索帝(TAX0TERE)或泰素(TAX0L));細(xì)胞發(fā)信號(hào)分子；神經(jīng)酰胺和細(xì)胞因子；十字孢堿等。在其它一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物和方法提供了式I的化合物和至少一種選自烷化劑、抗代謝物、和天然產(chǎn)物(例如，草藥和得自其它植物和/或動(dòng)物的化合物)的抗過(guò)度增生或抗腫瘤劑。[OIOO]適用于本發(fā)明組合物和方法的烷化劑非限制性地包括l)氮芥類(lèi)(例如，雙氯乙基甲胺、環(huán)砩酰胺、異環(huán)砩酰胺、美法侖(L-溶肉瘤素)；和苯丁酸氮芥)；2)氮丙啶和甲基蜜胺類(lèi)(methylmelamines)(例如，六甲密胺和噻替哌)；3)烷基磺酸酯類(lèi)(例如，白消安)；4)亞硝基脲類(lèi)(例如，卡莫司汀(BCNU);羅氮芥(CCNU);司莫司汀(甲基-CCNU);和鏈佐星(鏈唑霉素))；和5)三氮烯類(lèi)(例如，氮烯咪胺(DTIC;二甲基三氮烯并咪峻甲酰胺(triazenoimid-azolecarboxamide))。在一些實(shí)施方案中，適用于本發(fā)明組合物和方法的抗代謝物非限制性地包括:l)葉酸類(lèi)似物(例如，甲絲呤(氨甲葉船)；2)嘧咬類(lèi)似物(例如，氟尿嘧咬(5-氟尿嘧咬;5-FU)，llll苷(1Ul嗜g氣核苷;FudR)、和阿糖胞苷)；和3)噪呤類(lèi)似物(例如，巰基嘌呤(6-巰基嘌呤;6-MP)、疏鳥(niǎo)嚷呤(6-硫鳥(niǎo)嘌呤；TG)、和噴司他丁(2'-脫氣助間型霉素))。在另一些實(shí)施方案中，適用于本發(fā)明組合物和方法的化療劑非限制性地包括l)長(zhǎng)春花屬生物堿(例如，長(zhǎng)春花堿(VLB)、長(zhǎng)春新堿)；2)鬼臼乙叉甙類(lèi)(epipodophyllotoxins)(例如，依托泊苷和替尼泊苷)；3)抗生素類(lèi)(例如，更生霉素(放線菌素D)、柔紅霉素(道諾霉素；柔毛霉素)、多柔比星、博來(lái)霉素、普卡霉素(光輝美塞)、和絲裂霉素(絲裂霉素C));4)酶類(lèi)(例如，L-天門(mén)冬酰胺酶)；5)生物學(xué)響應(yīng)改性劑(例如，干擾素-ot);6)鉑配位#物(例如，順鉑(順式-DDP)和卡鉑)；7)蒽二酮類(lèi)(例如，米托蒽醌)；8)被取代的脲類(lèi)(例如，羥勤象)；9)甲基腓衍生物(例如，丙卡巴肼(N-甲基肼;MIH));10)腎上腺皮質(zhì)抑制劑(例如，米托坦(o，p'-DDD)和氨基格魯米特)；11)腎上腺皮質(zhì)類(lèi)固醇(例如，潑尼松)；12)黃體酮類(lèi)(例如，己酸羥孕酮、醋酸甲羥孕酮酯、和醋酸甲地孕酮)；13)雌激素類(lèi)(例如，己烯雌酚和乙炔基雌二醇)；14)抗雌激素藥(例如，他莫昔芬)；15)雄激素藥(例如，丙酸睪丸酮和氟甲奪酮)；16)抗雄激素藥(例如，氟他胺)；和17)促性腺激素釋放激素類(lèi)似物(例如，醋酸亮丙瑞林)。發(fā)現(xiàn)在本發(fā)明的組合物和方法中可以使用抗癌治療背景中常用的任何溶瘤細(xì)胞劑。例如，美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局(U.S.FoodandDrugAdministration)維持了一種在美國(guó)獲得批準(zhǔn)應(yīng)用的溶瘤細(xì)胞劑的處方。U.S.F.D.A.的國(guó)際對(duì)應(yīng)機(jī)構(gòu)維持了類(lèi)似的配方。表l提供了批準(zhǔn)可在美國(guó)進(jìn)行應(yīng)用的抗腫瘤劑的實(shí)例列表。本領(lǐng)域技術(shù)人員將意識(shí)到美國(guó)批準(zhǔn)的所有化療劑上要求的"產(chǎn)品標(biāo)簽"描述的是所述實(shí)例性物質(zhì)被批準(zhǔn)的適應(yīng)征、給藥信息、毒性數(shù)據(jù)等。表l.阿地白介素(脫-丙氨?；?l,絲氨酸-125人白介素-2)ProleukinChironCorp.，E邁eryvi1le，CA阿侖單抗(IgGlK抗CD52抗體)CampathMillenniumandILEXPartners,LP,Cambridge,MA阿利維A酸(9-順式視黃紀(jì)PanretinLigandPharmaceuticals,Inc.，SanDiegoCA別嘌醇(1，5-二氫-4H-吡唑并[3,4-d]嘧咬-4酮單鈉鹽)ZyloprimGlaxoSmithKline，ResearchTrianglePark,NC六甲密胺(N，N，N'，N'，N"，N〃-六甲基-l,3,5-三喚-2，4，6-三胺)HexalenUSBioscience,WestConshohocken,PA阿米斯丁(乙硫醇，2-[(3-絲丙基)絲]-，二氫罅酸鹽(酯))EthyolUSBioscience阿那曲唑(1，3-苯二乙腈，a,a，a',a'-四甲基-5-(1H-1，2,4-三唑-1-基甲基))ArimidexAstraZenecaPharmaceuticals,LP,Wilmington,DE三氧化二砷T(mén)risenoxCellTherapeutic,Inc.，Seattle,WA天門(mén)冬酰胺酶(L-天門(mén)冬酖胺氨基水解酶，EC-2型)ElsparMerck&Co.，Inc.,WhitehouseStation，NJBCGLive(牛分支桿菌(卡介苗(勘"7/iwCa/邁e"e-C"h'/2)[BCG]，次代品系蒙特利爾(Montreal))減毒菌林的冷凍干燥制刑)TICEBCGOrganonTeknika，Corp.,Durham,NC貝沙羅汀膠囊(4-[l-(5，6，7，8-四氫-3，5,5，8，8-五甲基-2-萘基)乙烯基苯甲ftt)TargretinLigandPharmaceuticals貝沙羅汀皿TargretinUgandPharmaceuticals200680012907.3轉(zhuǎn)溢*被35/1415t<table>tableseeoriginaldocumentpage57</column></row><table>(5-(3，3-二曱基-l-三唑)-咪唑-4-曱酰胺(DTIC))德國(guó)更生霉素，放線菌素D(streptomycesparvullus產(chǎn)生的放線菌素，CH016)CosmegenMerckDarbepoetinalfa(重組肽)AranespAmgen，Inc，Thousand0aks，CA柔紅審素脂質(zhì)體((8S-順式)-8-乙酰基-10-[(3-氨基-2,3，6-三脫氧-在-L-lyxo-己糖吡喃糖基)氧基]-7，8，9,10-四氫-6，8，11-三雍基-l-甲g-5，12-并四苯二酮鹽酸鹽)DanuoXo邁eNexstarPharmaceuticals,Inc.,Boulder,CO柔紅霉素HC1，道諾霉素((IS，3S)-3-乙酰基-1，2，3，4，6，11-六氫-3)5>12-三羥基-10-甲氧基-6,ll-二氧代-l-并四苯基3-氨基-2，3，6-三脫氣-(a)-L-lyxo-己糖吡喃糖苷鹽酸鹽)CerubidineWyethAyerst，Madison,NJ地尼白介素(重組肽)0ntakSeragen,Inc.,Hopkinton,MA右雷佐生((S)—4，4'一(l-曱基-l，2-乙二基)二-2，6-旅溱二酮)ZinecardPharmacia&UpjohnCompany多西紫杉醇((2R，3S)-N-羧基-3-苯基異絲氨酸，N省-丁基酯，13-酯具有5b-20-環(huán)氣-12a，4，7b，10b，13a-六雍基tax-ll-en-9-酮4-乙酸酯2-苯甲酸酯，三水合物)TaxotereAventisPharmaceuticals,Inc.，Bridgewater,NJ多柔比星HC1((8S，IOS)-IO-[(3-氨基-2,3，6-三脫氣-a-L-lyxo-己糖吡喃糖基)IL^]-8-羥乙跣基-7，8,9，10-四氫-6,8，11-三羥基-l-甲J^-5，12-并四苯二稱(chēng)鹽酸鹽)Adria邊ycin，RubexPharmacia&UpjohnCompany多柔比星AdriamycinPFS靜脈內(nèi)注射Pharmacia&UpjohnCompany多柔比星脂質(zhì)體DoxilSequusPharmaceuticals,Inc.，Menlopark,CA200680012907.3勢(shì)s*被37/1413丙酸屈他雄酮(17b-羥基-2a-甲基-5a-雄甾烷-3-酮丙酸鹽)DromostanolEliLilly&Company,Indianapolis,IN丙酸屈他雄酮Masterone注射液Syntex,Corp.，PaloAlto,CAElliott'sB溶液Elliott'sB溶液OrphanMedical,Inc表柔比星((8S-順式)-10-[(3-氨基-2，3,6-三脫氧-a-L-阿拉伯糖-己糖吡喃糖基)氧基]-7,8,9,10-四氫-6，8，11-三羥基-8-(雍基乙酖基)-l-甲絲-5，12-并四苯酮鹽酸鹽)EllencePharmacia&UpjohnCompany重組人腎紅細(xì)胞生成素a(重組肽)EpogenA邁gen,Inc雌莫司汀(雌-l，3，5(10)-三烯-3,17-二醇(17(p))-，3-[二(2-氯乙基)氨基甲酸酯]17-(二氫磷酸酯)，二鈉鹽，單水合物，或雌二醇3-[二(2-氯乙基)氨基甲酸醋]17-(二氫鱗酸酯)，二鈉鹽，單水合物)EmcytPharmacia&UpjohnCompany褲酸依托泊苷(4'-脫曱基鬼臼乙叉堿9-[4，6-0-(R)-亞乙基-(P)-D-吡喃葡菊糖苷]，4'-(二氬褲酸鹽))EtopophosBristol-MyersSquibb依托泊苷，VP-16(4'-脫甲基鬼臼乙叉堿9-[4，6-0-(R)-亞乙基-(p)-D-吡噙葡萄糖苷])VepesidBristol~MyersSquibb依西美坦(6-亞甲^甾—1，4-二烯-3，17-二稱(chēng))AromasinPharmacia&UpjohnCompany非格司亭(netHuG-CSF)NeupogenAmgen,Inc氣尿嘧"^t氧核苷(動(dòng)脈內(nèi))(2'-脫氣-5-lt^苷)FUDRRoche200680012907.3勢(shì)滯齒誡38/141:K氟達(dá)拉濱(抗病毒劑阿糖腺普，9-b-D-阿糖呋喃糖腺噤呤(ara-A)的氟化核苷酸類(lèi)似物)FludaraBerlexLaboratories,Inc.,CedarKnolls，NJ氟尿嘧咬，5-FU(5-氟-2，4(1H，3H)-嘧咬二酮)Adruci1ICNPharmaceuticals,Inc.,Humacao，PuertoRico氟維司群(7-a-[9-(4,4,5，5，5-五氟戊基亞硫酰基)壬基]雌-1,3，5-(10)-三烯-3,17-二醇)FaslodexIPRPharmaceuticals,Guayama，PuertoRico吉西他濱(2'-脫氧-2'，2'-二氣胞苷單鹽酸鹽(b-異構(gòu)休))G6mzarEliLilly吉姆單抗奧佐米星(抗-CD33hP67.6)MylotargWyethAyerst醋酸戈舍瑞林([D-Ser(But)6,Azgly!。]LHRH;pyro-Glu—His—Trp-Ser-Tyr-D-Ser(But)—Leu-Arg-Pro-Azgly-NH2基團(tuán)醋酸鹽[C59H"N18014(CZoladex植入物AstraZenecaPharmaceuticals羥基脲HydreaBristol—MyersSquibb替伊莫單抗(由單克隆抗體Ibritumomab和聯(lián)結(jié)子-螯合劑tiuxetan[N-[2-二(羧基甲基)氨基]-3-(對(duì)-異氛硫基苯基)-丙基]-[N-[2-二(羧基甲基)氨基]-2-(甲基)-乙基]甘氨酸之間的硫脲共價(jià)鍵產(chǎn)生的免疫輒合物)ZevalinBiogenIDEC，Inc.,CambridgeMA伊達(dá)比星(5，12-并四苯二酮，9-乙酰基-7-[(3-氨基-2，3,6-三脫氧-(ct)-L-lyxo-己糖吡喃糖基)氣基]-7，8，9，10-四氫-6,9,ll-三羥基鹽酸鹽，(7S-順式))IdamycinPharmacia&UpjohnCompany異環(huán)褲跣胺(3-(2-氯乙基)-2-[(2-氯乙基)氨基]四氛-2H-l，3,2-氧雜氮雜phosphorine2-氣化物)IFEXBristol-MyersSquibb200680012907.3轉(zhuǎn)s齒被39/141:3<table>tableseeoriginaldocumentpage61</column></row><table><image>imageseeoriginaldocumentpage62</image><table>tableseeoriginaldocumentpage63</column></row><table>沙格司亭(重組肽)ProkineI咖unexCorp鏈佐星(鏈佐星2-脫氧-2-[[(曱基亞硝基^JJ羰基]氨基]-a(和b)-D-吡喃葡萄糖和220mg無(wú)水檸檬酸ZanosarPharmacia&UpjohnCompany滑石粉(Mg3Si4010(OH)2)SclerosolBryan,Corp.,Woburn,MA他莫昔芬((Z)2-[4-(1,2-二苯基-l-丁雄基)苯氧基]-N，N-二曱基乙胺2-羥基-l，2，3-丙烷三羧酸鹽(1:l))NolvadexAstraZenecaPharmaceuticals替莫唑胺(3，4-二氫-3-甲基-4-氧代咪唑并[5，1-d]-as-四嗪-8-甲耽胺)TemodarSchering替尼泊苷，VM-26(4'-脫甲基鬼臼乙叉堿9-[4,6-0-(R)-2-逸吩亞曱基D-吡喃葡萄糖苷])VumonBristol-MyersSquibb睪內(nèi)酯(13-羥基-3-氧代-13，17-開(kāi)環(huán)雄甾-1,4-二烯-17-酸[dgr]-內(nèi)酯)TeslacBristol-MyersSquibb碟鳥(niǎo)噪呤，6-TG(2-#J-1，7-二氫-6H-嘌呤-6-疏酮)ThioguanineGlaxoSmithKline塞替派(環(huán)乙亞胺，1，l'，l"-聘基thioylidynetris-，或三(l-環(huán)乙亞胺基)膦碟化物)ThioplexI咖unexCorporation托泊替康HC1((S)-10-[(二曱基氨基)曱基]-4-乙基-4，9-二輕基-lH-歡喃并[3'，4':6，7]吲嗪并[1，2-b]喹啉-3，14-(4H,12H)-二鵬單鹽酸鹽)HycamtinGlaxoSmitMline托瑞米芬FarestonRobertsPhar腿ceuticalCorp,,Eatontown,NJ200680012907.3溢齒被43/141:a;<table>tableseeoriginaldocumentpage65</column></row><table>抗癌劑還包括已經(jīng)被確定具有抗癌活性但是目前仍然未被美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局(U.S.FoodandDrugAdministration)或其它相應(yīng)機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)或者正在進(jìn)行新應(yīng)用評(píng)估的化合物。其實(shí)例非限制性地包括3-AP、12-0-四癸?；鸩ù?13-乙酸酯、17AAG、852A、ABI-007、ABR-217620、ABT-751、ADI-PEG20、AE-941、AG-013736、AGROIOO、阿拉諾新、AMG706、抗體G250、抗瘤酮類(lèi)(antineoplastons)、AP23573、apaziquone、APC8015、阿替莫德、ATN-161、atrasenten、阿扎胞苷、BB-10901、BCX-1777、貝伐單抗、BG00001、比卡軎胺、BMS247550、bortezomib、苔蘚抑素-1、布舍瑞林、骨化三醇、CCI-779、CDB-2914、頭孢克肟、西妥昔單抗、CG0070、西侖吉肽、clofarabine、布考他丁A4磷酸鹽、CP-675,206、CP-724，714、CpG7909、姜黃(curc咖in)、地西他濱、DENSPM、度骨化醇、E7070、E7389、ecteinascidin743、efaproxiral、依洛尼塞、EO-569、enzastaurin、erlotinib、依昔舒林、芬維A胺、flavopir固、氟達(dá)拉濱、氟他胺、福莫司汀、F腿228、G17DT、galiximab、gefitinib、染料木素、葡磷酰胺、GTI-2040、組氨瑞林、HKI-272、高三尖杉酯堿、HSPPC-96、hul4.18-白介素-2融合蛋白、HuMax-CD4、伊洛前列素、咪喹莫特、英夫利昔單抗、白介素-12、IPI-504、伊羅夫文、ixabepilone、lapatinib、lenalidomide、lestaurtinib、醋酸亮丙瑞林(leuprolide)、LMB-9免疫毒素、lonafarnib、limi1iximab、馬磷酰胺、MB07133、MDX-OIO、MLN2704、單克隆抗體3F8、單克隆抗體J591、莫特沙芬、MS-275、MVA-MUC1-IL2、尼魯米特、硝基喜樹(shù)堿、鹽酸諾拉曲塞、他莫昔芬、NS-9，06-爺基鳥(niǎo)嚷呤、oblimersensodium、0NYX-015、oregovomab、0SI-774、panit咖咖ab、伯爾定、PD-0325901、培美曲塞、PHY906、吡格列酮、吡非尼酮、pixantrone、PS-341、PSC833、PXDIOI、吡唑啉吖咬、R115777、MDOOl、豹蟲(chóng)i:酶、rebeccaraycin類(lèi)似物、rhuAngiostatin蛋白、rhuMab2C4、羅格列酮、盧比替康、S-l，S-8184、沙鉑、SB-，15992、SGN-OOIO、SGN-40、sorafenib、SR31747A、ST1571、SU011248、suberoylanilide異羥將酸、蘇拉明、talabostat、他侖帕奈、tariquidar、temsiroli邁us、TGFa-PE38免疫毒素、沙利度胺、胸腺法新、tipifarnib、替拉扎明、TLK286、trabectedin、葡萄糖醛酸三曱曲沙、TroVax、UCN-1、丙戊酸、長(zhǎng)春氟寧、VNP40101M、volociximab、vorinostat、VX-680，ZD1839、ZD6474、齊留通(zileuton)、和zosuquidar三鹽酸鹽。對(duì)于抗癌劑和其它治療劑的更詳細(xì)的描述而言，本領(lǐng)域技術(shù)人員可參考任何數(shù)目的指導(dǎo)手冊(cè)，所述指導(dǎo)手冊(cè)非限制性地包括thePhysician'sDeskReference和Goodman和Gilman的"治療的藥學(xué)基礎(chǔ)(PharmaceuticalBasisofTherapeutics)"，第10版，Hardman等人編輯，2002。本發(fā)明提供了將式I的化合物與放療一起給藥的方法，本發(fā)明不受用于將治療劑量的輻射傳遞給動(dòng)物所用的類(lèi)型、數(shù)量、或傳遞和給藥系統(tǒng)的限制。例如，所述動(dòng)物可以接受光子放療、粒子束輻射治療、其它類(lèi)型的放療、以及其組合。在一些實(shí)施方案中，用線性加速器將輥射傳遞給動(dòng)物。在另一些實(shí)施方案中，用咖瑪?shù)秾⑤椛鋫鬟f給動(dòng)物。所述動(dòng)物可以任選地接受放射致敏劑(例如，甲硝唑、米索硝唑、動(dòng)脈內(nèi)Budr、靜脈內(nèi)碘脫氧嘧咬核苷(IudR)、硝基咪唑、5-取代的-4-硝基咪唑類(lèi)、2H-異吲咮二酮、[[(2-溴乙基)-氨基]甲基]-硝基-1H-咪唑-卜乙醇、硝基苯胺衍生物、DM-affinic低氧選擇性細(xì)胞毒素、鹵化DM配體、1，2，4苯并三噪氧化物、2-硝基咪唑衍生物、包含氟的硝基吡咯衍生物、苯甲酰胺、煙酰胺、吖啶-插入劑、5-硫代四唑(thiotretrazole)f汴生物、3-硝基-l，2，4-三唑、4，5-二硝基咪唑衍生物、羥基化texaphrins、順拍、絲裂霉素、tiripazamine、亞確基脲、巰基嚯呤、甲氨蝶呤、氟尿嘧啶、博來(lái)霉素、長(zhǎng)春新堿、卡賴(lài)、表柔比星、多柔比星、環(huán)磷酰胺、長(zhǎng)春地辛、依托泊苷、紫杉醇、熱(過(guò)熱)等)、輻射防護(hù)劑(例如，巰乙胺、氨基烷基二氫疏代磷酸酯、阿米斯丁(WR2721)、IL-1、IL-6等)。放射致敏劑增強(qiáng)了肺瘤細(xì)胞的殺滅。輻射防護(hù)劑保護(hù)健康組織不受輻射有害作用的影響?？梢越o動(dòng)物使用任何類(lèi)型的輻射，只要輻射劑量可以被動(dòng)物耐受并且不產(chǎn)生不可接受的消極副作用即可。適宜的放療類(lèi)項(xiàng)目包括例如電離(電磁)放療(例如，X-射線或Y射線)或粒子束輻射治療(例如，高能量線性輻射。電離輻射被定義為包含具有足以產(chǎn)生電離(即獲得或損失電子)的能量的微?；蚬庾拥妮椛?如例如US5，770，581中所述，其在這里被全部引入作為參考)。臨床醫(yī)師可以至少部分控制插射的作用。為了獲得最大靶細(xì)胞接觸和降低毒性，優(yōu)選地對(duì)輻射的劑量進(jìn)行分級(jí)給藥。[OllO]被給藥于動(dòng)物的輻射的總劑量?jī)?yōu)選地為約0.01戈瑞(Gy)至約100Gy。在治療過(guò)程中，更優(yōu)選地使用約10Gy至約65Gy(例如，約15Gy、20Gy、25Gy、30Gy、35Gy、40Gy、45Gy、50Gy、55Gy、或60Gy)。雖然在一些實(shí)施方案中，可以在一天過(guò)程中給予輻射的全部劑量，但是理想地將該總刑量分成幾部分并將其在幾天內(nèi)進(jìn)行給藥。令人希望地是在至少約3天，例如，至少5、7、10、14、17、21、25、28、32、35、38、42、46、52、或56天(約1-8周)的過(guò)程中進(jìn)行放療。因此，輻射的日劑量將包含約1-5Gy(例如，約lGy、1.5Gy、1.8Gy、2Gy、2.5Gy、2.8Gy、3Gy、3.2Gy、3.5Gy、3.8Gy、4Gy、4.2Gy、或4.5Gy)，優(yōu)選l-2Gy(例如，1.5-2Gy)。所述輻射的日劑量應(yīng)足以誘導(dǎo)所靶向細(xì)胞的破壞。如果在一定時(shí)期內(nèi)擴(kuò)張(stretched)，則優(yōu)選地不每天進(jìn)行輻射，從而使得動(dòng)物可以進(jìn)行休息和實(shí)現(xiàn)該治療的作用。例如，對(duì)于各治療周而言，理想地連續(xù)5天進(jìn)行輻射，然后兩天不進(jìn)行治療，從而使得每周休息2天。但是，根據(jù)動(dòng)物的響應(yīng)和任何可能的副作用，輻射可以被1天/周、2天/周、3天/周、4天/周、5天/周、6天/周地進(jìn)行或者一周7天都進(jìn)行?？梢栽谥委熤芷诘娜魏螘r(shí)間開(kāi)始輻射治療。優(yōu)選地在笫l或2周開(kāi)始輻射，并且在該治療周期的其余持續(xù)時(shí)間內(nèi)進(jìn)行輻射。例如，在包含對(duì)例如實(shí)體瘤治療6周的治療時(shí)期內(nèi)，在該時(shí)期的1-6周或2-6周內(nèi)進(jìn)行輻射。或者，在包含5周的治療時(shí)期的1-5周或2-5周內(nèi)進(jìn)行輻射。但是，并不是要用這些實(shí)例性放療給藥時(shí)間表對(duì)本發(fā)明進(jìn)行限制。[Olll]還可以用抗微生物的治療刑作為本發(fā)明的治療刑。可以^t用可以殺死、抑制或者減弱微生物功能的任何物質(zhì)以及認(rèn)為具有該類(lèi)活性的任何物質(zhì)?？刮⑸镄谭窍拗菩缘匕▎为?dú)或聯(lián)合使用的天然和合成抗生素、抗體、抑制性蛋白(例如，防御素)、反義核酸、破裂劑等。實(shí)際上，可以使用任何類(lèi)型的抗生素，非限制性地包括抗菌劑、抗細(xì)菌刑、抗病毒劑、抗真菌劑等。在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，式I的化合物和一種或多種治療劑或抗癌劑在一種或多種下面的情況下被給藥于動(dòng)物以不同的周期、不同的持續(xù)時(shí)間、不同的濃度、通過(guò)不同的給藥途徑等。在一些實(shí)施方案中，可以在使用所述治療劑或抗癌劑之前給予所述化合物，例如可以在給予所述治療劑或抗癌劑前0.5、1、2、3、4、5、10、12、或18小時(shí)，1、2、3、4、5、或6天，或l、2、3、或4周給予所述化合物。在一些實(shí)施方案中，所述化合物在給予所述治療劑或抗癌刑之后進(jìn)行給藥，例如可以在給予所述抗癌劑后0.5、1、2、3、4、5、10、12、或18小時(shí)，1、2、3、4、5、或6天，或1、2、3、或4周給予所述化合物。在一些實(shí)施方案中，所述化合物和治療劑或抗癌劑可以以不同的時(shí)間表并行給藥，例如所述化合物可以被每天給藥，而所述治療劑或抗癌劑可以被每周給藥一次、每隔周給藥一次、每三周給藥一次、或每四周給藥一次。在其它一些實(shí)施方案中，所迷化合物被每周給藥一次，而所述治療劑或抗癌劑被每天給藥一次、每周給藥一次、每?jī)芍芙o藥一次、每三周給藥一次、或每四周給藥一次。本發(fā)明范圍中的組合物包括其中所含本發(fā)明化合物的數(shù)量為可以有效實(shí)現(xiàn)其所需目的數(shù)量的所有組合物.雖然個(gè)體的需要可能不同，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員可以確定各組分有效量的最佳范圍。被給藥于哺乳動(dòng)物，例如人的化合物的口服刑量典型地為0.0025至50mg/kg就對(duì)細(xì)胞凋亡有響應(yīng)的病癥進(jìn)行治療的哺乳動(dòng)物體重/天，或等量其可藥用的鹽。為了治療、改善或預(yù)防該類(lèi)病癥，口服給藥量?jī)?yōu)選地為約0.01至約25mg/kg。對(duì)于肌內(nèi)注射而言，所述劑量通常為口服刑量的大約一半。例如，適宜的肌內(nèi)劑量為約0.0025至約25mg/kg，并且最優(yōu)選地為約0.01至約5mg/kg,,所述單位口服劑量可以為約0.01至約1000mg,優(yōu)選地為約0.1至約100mg所述化合物。所述單位劑量可以以各自包含約0.1至約10mg(方便地為約0.25至50mg)所述化合物或其溶刑化物的一片或多片或一枚或多枚膠囊的形式被給藥一次或多次。在典型的制劑中，所述化合物可以以約0.01至100mg/克栽體的濃度存在。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述化合物的存在濃度為約0.07-1.0mg/ml，更優(yōu)選地為約0.1-0.5mg/ml，最優(yōu)選地為約0.4mg/ml。除以新化學(xué)品的形式將所述化合物進(jìn)行給藥外，本發(fā)明的化合物還可以以包含適宜可藥用載體的藥物制劑的形式進(jìn)行給藥，所述適宜的可藥用載體包括可以幫助將所述化^^物加工成可以藥用的制劑的賦形劑和助劑。所述制劑，特別是可以被口服或局部給藥并且可用于優(yōu)選給藥類(lèi)型的這些制刑，如片劑、糖錠劑、緩釋錠劑和膠囊、口腔清洗劑和漱口劑、凝膠、液體混懸液、洗發(fā)劑、發(fā)用凝膠、香波并且還有可以被直腸給藥的制劑，如栓劑、以及用于通過(guò)靜脈內(nèi)輸入、注射、局部或口服給藥的適宜溶液優(yōu)選地包含約0.01至99%,優(yōu)選約0.25至75%活性化合物和賦形劑。本發(fā)明的藥物組合物可以被給藥于可以經(jīng)歷本發(fā)明化合物的有益作用的任何動(dòng)物。其中最重要的該類(lèi)動(dòng)物是哺乳動(dòng)物，例如，人，但是本發(fā)明并不因此受限。其它動(dòng)物包括獸醫(yī)動(dòng)物(牛、羊、豬、馬、狗、貓等)。所述化合物以及其組合物可以用可以實(shí)現(xiàn)其所需目的的任何方法來(lái)進(jìn)行給藥。例如，可以通過(guò)胃腸外、皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、經(jīng)皮、頰、鞘內(nèi)、顱內(nèi)、鼻內(nèi)或局部途徑來(lái)進(jìn)行給藥。可以通過(guò)口服途徑來(lái)進(jìn)行交替或并行給藥。給藥劑量將取決于領(lǐng)受者的年齡、健康、和體重、以及如果有的話的并行治療的種類(lèi)、治療頻率、和所需作用的性質(zhì)。本發(fā)明的藥物制劑是以本身已知的方式來(lái)進(jìn)行制備的，例如可以通過(guò)常規(guī)混合、制粒、糖衣掩味、溶解、或冷凍干燥方法來(lái)進(jìn)行制備。因此，用于口服應(yīng)用的藥物制劑可以通過(guò)將所述活性化合物與圃體賦形劑混合物到一起，任選地將所得的混合物進(jìn)行研磨和如果希望或需要的話，在加入適宜的助劑后對(duì)這些粒子的混合物進(jìn)行加工從而得到片劑或糖錠劑核來(lái)獲得。適宜的賦形刑特別是填充劑如糖類(lèi)，例如乳糖或蔗糖、甘露醇或山梨醇、纖維素制劑和/或磷酸鉤，例如磷酸三鈣或礴酸氬鏑、以及粘合劑如使用例如玉米淀粉、小麥淀粉、水稻淀粉、馬鈴吝淀粉的淀粉糊、明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、和/或聚乙烯吡咯烷酮。如果需要的話，可以加入崩解劑如上述淀粉類(lèi)物質(zhì)并且還可以是羧甲基淀粉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂、或藻酸或其鹽，如藻酸鈉。助劑尤其是流動(dòng)調(diào)節(jié)劑和潤(rùn)滑劑，例如，二氣化硅、滑石粉、硬脂酸或其鹽，如硬脂酸鎂或硬脂酸鉀、和/或聚乙烯醇。如果需要的話，可以給糖錠劑核提供耐胃液的適宜包衣。為此，可以使用濃的糖溶液，該糖溶液可任選地包含阿拉伯膠、滑石粉、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和/或二氧化鈥、透明保護(hù)膜溶液(lacquersolutions)和適宜的有機(jī)溶劑或溶劑混合物。為了制備耐受胃液的包衣，使用適宜纖維素制劑如鄰苯二甲酸乙?；w維素或鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素的溶液。例如為了進(jìn)行鑒別或?qū)钚曰衔飫┝康慕M合進(jìn)行描述，可以向片劑或糖錠劑包衣中加入染料材料或顏料?？梢钥诜褂玫钠渌幬镏苿┌ㄓ擅髂z制成的推壓-配合(push-fit)膠囊以及由明膠和增塑劑如甘油或山梨醇制成的密封的軟膠嚢。所述推壓-配合的膠囊可以包含可混有填充劑如乳糖、粘合刑如淀粉類(lèi)物質(zhì)、和/或潤(rùn)滑劑如滑石粉或硬脂酸鎂、并任選地包舍穗定刑的顆粒形式的活性化合物。對(duì)軟膠囊而言，活性成分優(yōu)逸地被溶刑或混懸于適宜的液體，如脂肪油或液體石蠟中。此外，還可以加入穗定刑，可以直腸使用的可能的藥物制刑包括例如栓劑，其是由一種或多種活性化合物與栓劑基質(zhì)的組合所組成的。適宜的栓刑基質(zhì)有例如天然或合成的甘油三酯類(lèi)、或石蠟烴類(lèi)。此外，還可以使用由活性化合物和基質(zhì)聯(lián)合組成的直腸用明膠膠囊。可能的基質(zhì)材料包括例如液體甘油三酯類(lèi)、聚乙二醇類(lèi)、或石蠟烴類(lèi)。用于胃腸外給藥的適宜制劑包括水溶性形式的活性化合物，例如水溶性鹽形式的化合物的水溶液和堿性溶液。此外，還可以使用適宜的油性注射混懸液的形式的活性化合物的混懸液。適宜的親脂性溶刑或基質(zhì)包括脂肪油，例如芝麻油、或合成的脂肪酸酯類(lèi)，例如油酸乙酶或甘油三酯類(lèi)或聚乙二醇-400。含水注射混懸液可以包含增加該混懸液粘度的物質(zhì)，所述物質(zhì)包括例如羧甲基纖維素鈉、山梨醇、和/或葡聚糖。所述混懸液還可任選地包含穩(wěn)定劑。通過(guò)選擇適宜的栽體，本發(fā)明的局部組合物優(yōu)選地被制備為油狀物、霜?jiǎng)?、洗劑、軟骨等形式。適宜的載體包括植物油或礦物油、白凡士林(白軟石蠟)、支鏈脂類(lèi)或油類(lèi)、動(dòng)物脂類(lèi)和高分子量醇(高于C12)。優(yōu)選的栽體是這些活性成分在其中可溶的栽體。如果需要的話，其還可以包含乳化劑、穩(wěn)定劑、潤(rùn)濕劑和抗氧劑以及賦予其顏色或香味的物質(zhì)。此外，在這些局部制劑中還可以使用經(jīng)皮滲透增強(qiáng)劑.在US專(zhuān)利3，989，816和4，444，762中可以找到該類(lèi)增強(qiáng)劑的實(shí)例。霜?jiǎng)﹥?yōu)選地是由礦物油、自乳化的蜂蠟和水制成的，將溶解于少量油如杏仁油中的活性成分混合于該混合物中。該類(lèi)霜?jiǎng)┑囊环N典型實(shí)例是一種包含約40份水、約20份蜂蠟、約40份礦物油和約1份杏仁油的霜?jiǎng)?。軟骨可以通過(guò)將活性成分在植物油如杏仁油中的溶液與溫?zé)岬能浭灮旌希缓笫乖摶旌衔锢鋮s來(lái)進(jìn)行制備。該類(lèi)軟骨的一種典型實(shí)例是一種包含約30%重量杏仁油和約70%重量白軟石蠟的軟骨，洗劑可以方便地通過(guò)將活性成分溶解于高分子量酵如丙二醇或聚乙二醇中來(lái)進(jìn)行制備。用下面的實(shí)施例來(lái)對(duì)本發(fā)明的方法和組合物進(jìn)行非限制性說(shuō)明。在臨床治療中通常會(huì)遇到對(duì)許多情況和參數(shù)進(jìn)行其它適宜改變和調(diào)整的情況，其對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言都是顯而易見(jiàn)的并且也被包括在本發(fā)明的主旨和范圍中。實(shí)施例1MDM2抑制劑的設(shè)計(jì)方案因?yàn)樵S多抗癌藥是天然產(chǎn)物或者包含一種得自天然產(chǎn)物的核心藥效團(tuán)，所以對(duì)可以為能抑制p53和MDM2之間的相互作用的化合物的設(shè)計(jì)提供一種新框架的天然產(chǎn)物進(jìn)行一項(xiàng)研究。用具有ChemScore擬和功能的GOLD程序(2.1版)進(jìn)行了一些計(jì)算對(duì)接研究(Computationaldockingstudies)。在SYBYL6.9和用Tripos力場(chǎng)(forcefield)最小化了的能量下構(gòu)架一些配體結(jié)構(gòu)。所述MDM2結(jié)構(gòu)提取自與p53結(jié)合的MDM2的晶體結(jié)構(gòu)(PDB代碼1YCR)。用SYBYL6.9向該蛋白中加入氫氣。將活性部位定義為在12A半徑球中包含所有的原子，其起端位于p53肽的Trp23的中心。選棒標(biāo)準(zhǔn)的遣傳算法方案來(lái)進(jìn)行對(duì)接(docking)。對(duì)于各化合物而言，進(jìn)行20次單獨(dú)的對(duì)接運(yùn)行。根據(jù)ChemScore的評(píng)分來(lái)對(duì)所產(chǎn)生的各配體的20種方案進(jìn)行排序。用X-Score記錄各配體最好序列的方案并用其來(lái)進(jìn)一步進(jìn)行結(jié)合模式分析。SpirotryprostatinA代表一類(lèi)由煙曲霉的發(fā)酵液分離出來(lái)的天然生物堿(Usui等人，Biochem.J.33:543(1998))(困1),計(jì)算對(duì)接研究表明spirotryprostatinA不能在MDM2的疏水性裂縫種進(jìn)行結(jié)合，但是對(duì)于一類(lèi)新的p53-MDM2相互作用的抑制刑的設(shè)計(jì)而言，該螺環(huán)(羥巧|咪-3，3'-吡咯烷)核結(jié)構(gòu)可以被用作一種剛性框架。其幾咽咮單元精密模擬了形成氬鍵和與MDM2的疏水性相互作用中的Trp23殘基。其吡咯烷基環(huán)提供了一種剛性框架，兩個(gè)疏水性基團(tuán)可以連接到其上來(lái)模擬Phel9和Leu26(圖2A)?？梢杂镁哂胁煌瑯?gòu)型的取代碁來(lái)模仿許多模板化合物。其中，表明化合物la在其氬鍵和與MDM2關(guān)鍵的疏水性相互作用方面很好地模擬了p53(圖2A)。在所迷羥吲哚環(huán)上的6-氣取^占據(jù)了MDM2中的疏水小袋，已經(jīng)表明其是一種可以有效增強(qiáng)MDM2的以p53為基礎(chǔ)的肽抑制刑的親合力的相互作用(Garcia-Echeverria等人，Med.Chem43:3205(2000))。實(shí)施例2熒光偏振結(jié)合試驗(yàn)化合物la是如流程圖1中所示的那樣用不對(duì)稱(chēng)的1,3-偶極反應(yīng)(Sebehar等人，J.Am.Chem.Soc.122:5666(2000))作為關(guān)鍵步驟來(lái)進(jìn)行合成的。通過(guò)對(duì)關(guān)鍵的中間體之一，(1"R，2"S，2'R，3'R，3S，4'R)6-氯-4'-(3-氯-苯基)-l'-(2-羥基-l，2-二苯基-乙基)-2'-(3-甲基-丁基)-2-氧代-1，2-二氬-螺環(huán)HI咮-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基跣胺(圖3)進(jìn)行X-射線結(jié)晶分析來(lái)測(cè)定la和所設(shè)計(jì)的其它類(lèi)似物的絕對(duì)立體化學(xué)。為了測(cè)定la破壞MDM2和p53之間相互作用的能力，用重組人MDM2蛋白和用熒光標(biāo)記物進(jìn)行了標(biāo)記的以p53為基礎(chǔ)的肽來(lái)建立一種以熒光偏振(FP)為基礎(chǔ)的結(jié)合試驗(yàn)(Garcia-Echeverria等人，JMedChem43:3205(2000))。該被稱(chēng)為PMDM6-F的熒光探針具有序列(5-Fam-pAla-pAla-Phe-Met-Aib-pTyr-(6-Cl-卜Trp)-Glu-Ac3cHLeu-Asn-NH2)(SEQIDNO:1),其中Fam是羧基熒光素(carboxyfluoroscein)，Aib是P-氨基異丁酸，和Ac3c是l-氨基環(huán)丙烷-l-甲酸。測(cè)得所設(shè)計(jì)的這種探針與MDM2蛋白的結(jié)合的Kd值是0.001nM(lnM土O.09)，束明這種探針以十分高的親合力與MDM2蛋白的表面小袋進(jìn)行結(jié)合(閨4A)'通過(guò)用具有相同序列的未進(jìn)行標(biāo)記的肽與和M顧2蛋白進(jìn)行結(jié)合的PMDM6-F的進(jìn)行竟?fàn)幮灾脫Q來(lái)證實(shí)試驗(yàn)特異性。證實(shí)相應(yīng)的未進(jìn)行標(biāo)記的PMDM6肽(Ki=0.7nM±0.1)的結(jié)合力顯著高于野生型p53肽(PLSQETFSDLWKLLPEN-冊(cè)2)(SEQIDNO:2)(L-6.7yM±1.2)(困4B).在N末端與His-標(biāo)記稠合的重組MDM2人蛋白(殘基1-118)是穗定和可溶的，并且用其來(lái)進(jìn)行以FP為基礎(chǔ)的結(jié)合試驗(yàn)。用一系列試驗(yàn)化合物在DMSO中的系列稀釋物來(lái)進(jìn)行所述刑量依賴(lài)性結(jié)合實(shí)驗(yàn)。將5y1位于試驗(yàn)緩沖液(IOO慮砩酸鉀，pH7.5;100/ig/ml牛y球蛋白；0.02%疊氮化鈉，購(gòu)自InvitrogenLifeTechnology)中的試驗(yàn)樣品和預(yù)培養(yǎng)的MDM2蛋白(0.010jaM)和PMDM6-F肽(0.001yM)的樣品在Dynex96孔黑色圃底板(FisherScientific)中進(jìn)4亍混合，從而得到125pl的終體積。對(duì)于各試驗(yàn)而言，都包括包含MDM2蛋白和PMDM6-F的結(jié)合肽對(duì)照(相當(dāng)于0%抑制)和僅包含游離PMDM6-F的游離肽對(duì)照(相當(dāng)于100%抑制)。在培養(yǎng)3小時(shí)后，當(dāng)該結(jié)合達(dá)到平衡時(shí)，用ULTRAREADER(TecanU.S.Inc.，ResearchTrianglePark,NC)來(lái)測(cè)量其偏振值。用非線性最小二乘法分析來(lái)由一種圖測(cè)定其IC5。值(其下50%的結(jié)合肽被置換的抑制刑濃度)。用GRAPHPADPRISM軟件(GraphPadSoftware,Inc.，SanDiego，CA)來(lái)進(jìn)行曲線擬和。為了計(jì)算抑制劑的親合力常數(shù)(Ki),使用所建立的用于在以FP為基礎(chǔ)的結(jié)合試驗(yàn)中計(jì)算Ki值的下面的方程其中U]5。表示在50%抑制下游離抑制刑的濃度，[L]5。表示在50%抑制下進(jìn)行了標(biāo)記的游離配體的濃度，[P]。表示在0%抑制下游離蛋白的濃度，和Ka表示蛋白-配體復(fù)合體的解離常數(shù)。為了用所示方程精確計(jì)算抑制劑的Ki值，建立了一種計(jì)算過(guò)程來(lái)計(jì)算該方程中所需所有參數(shù)的準(zhǔn)確值(Nikolovska-Coleskaetal，Anal.Biochem.332:261(2004))。還建立了一種以網(wǎng)絡(luò)為基礎(chǔ)的(web-based)計(jì)算機(jī)程序來(lái)根據(jù)相同的方程計(jì)算以FP為基礎(chǔ)的結(jié)合試驗(yàn)中的抑制刑的Ki值，以熒光標(biāo)記的p53為基礎(chǔ)的肽與MDM2具有l(wèi)nM的K。值，其與之前所報(bào)道的其對(duì)MDM2具有高親合力的報(bào)道相一致(Garcia-Echeverria等人，Med.Chem43:3205(2000))。在這種結(jié)合試驗(yàn)中，測(cè)得被用作陽(yáng)性對(duì)照的天然p53肽(殘基13-29)和la的K;值分別為6.7jiM和8.5nM(圖5)。因此，la是一種十分有效的p53-MDM2相互作用的抑制劑。對(duì)與MDM2結(jié)合的la模式進(jìn)行的分析(圖2)表明為了與MDM2更好地進(jìn)行相互作用，可以進(jìn)一步對(duì)la進(jìn)行優(yōu)化。例如，la的苯基環(huán)與被Phel9的側(cè)鏈占據(jù)的疏水性結(jié)合袋進(jìn)行結(jié)合，但是在這種袋中仍然還有一些空間。類(lèi)似地，la的異丁基填充了被Leu26占據(jù)的疏水性結(jié)合袋，但是其可以容納更大的疏水基團(tuán)。設(shè)計(jì)了一些新的la類(lèi)似物來(lái)對(duì)在這兩個(gè)疏水結(jié)合部位進(jìn)行的相互作用進(jìn)行進(jìn)一步優(yōu)化。如上所示，la中的異丁基不是最理想的并且用lb作為模板對(duì)在這種部位進(jìn)行的疏水性相互作用進(jìn)一步進(jìn)行優(yōu)化。模型研究表明2，2-二甲基丙基可以增強(qiáng)所述的疏水性相互作用(圖2)并且合成了所得的化合物ld。發(fā)現(xiàn)其具有86nM的Ki值并且因此是一種十分有效的p53-MDM2相互作用的抑制刑，其效力比天然p53肽高78倍。為了證實(shí)在這種部位的疏水性相互作用的重要性，設(shè)計(jì)和合成了化合物le和lf，其分別具有比ld小和比ld大的疏水基團(tuán)。模型研究表明le和lf的效力都應(yīng)低于ld，并且實(shí)際上，以FP為基礎(chǔ)的結(jié)合試驗(yàn)證實(shí)L值分別為650和390nM的le和lf的效力遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于ld(困5)。實(shí)施例3細(xì)胞生長(zhǎng)抑制非肽類(lèi)小分子抑制劑優(yōu)于以肽為基礎(chǔ)的抑制刑的一個(gè)主要的優(yōu)點(diǎn)是其優(yōu)良的細(xì)胞滲透性。預(yù)測(cè)p53-MDM2相互作用的有效的非肽類(lèi)抑制劑如ld將通過(guò)刺激p53的活性來(lái)有效抑制具有野生型p53的癌細(xì)胞的細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂。此外，預(yù)測(cè)其在喪失p53或者具有突變的非功能性p53的癌癥細(xì)胞中具有選擇性。為了對(duì)這種預(yù)測(cè)進(jìn)行檢驗(yàn)，用人前列腺癌LNCaP(p53野生型)和PC-3(p53無(wú)效力)細(xì)胞系來(lái)建立一種細(xì)胞生長(zhǎng)試驗(yàn)。還在正常前列腺上皮細(xì)胞系上檢查了這些化合物對(duì)正常細(xì)胞的毒性作用。將細(xì)胞以3-4x103個(gè)細(xì)胞/孔的密度接種到96孔平底細(xì)胞培養(yǎng)板中并將其在存在一些化合物的情況下培養(yǎng)4天。在用濃度增加的所述化合物進(jìn)行處理后，用WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-確基苯基)-5-(2，4二橫基苯基)-2H-四唑翁單鈉鹽(DojindoMolecularTechnologiesInc.，Gaithersburg，馬里蘭)來(lái)測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)抑制速率,將WST-8以10%的終濃度加入到各孔中并將這些板在371C下培養(yǎng)2-3小時(shí)。在板式讀數(shù)器中在450nm下測(cè)量這些樣品的吸光度(MolecularDevice-TECANULTRA)。通過(guò)對(duì)未進(jìn)行處理的細(xì)胞和用所述化合物進(jìn)行了處理的細(xì)胞的吸光度進(jìn)行比較來(lái)計(jì)算將細(xì)胞生長(zhǎng)抑制50%的化合物濃度(ICs。)。所述化合物以劑量依賴(lài)性方式誘導(dǎo)了細(xì)胞生長(zhǎng)抑制。如所預(yù)測(cè)的那樣，化合物ld以0.83jjM的ICs。值十分有效地抑制了包含野生型p53的LNCaP細(xì)胞的細(xì)胞生長(zhǎng)(圖6)?；衔飈b、le和lf也分別以2.1、2.7、和1.9nM的ICs。值有效抑制了細(xì)胞生長(zhǎng)(圖6)。其在LNCaP細(xì)胞的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制方面的活性完全與其與MDM2的親合力相關(guān)。用喪失p53的PC-3細(xì)胞來(lái)計(jì)算細(xì)胞選擇性，如所預(yù)期的那樣，這些MDM2抑制劑在PC-3細(xì)胞中的效力比在LNCaP細(xì)胞中的效力低得多(圖7)。例如，ld在PC-3細(xì)胞中的活性(ICs。值為22.5yM)比其在LNCaP細(xì)胞中的活性低27倍。因?yàn)檎＜?xì)胞也具有野生型p53，所以在研制作為新抗癌藥的p53-MDM2相互作用的抑制劑時(shí)一種可能的憂慮是其可能無(wú)選擇性和以與殺死癌細(xì)胞的活性相等的活性殺死正常細(xì)胞。用具有野生型p53的正常人前列腺上皮細(xì)胞(PrEC)對(duì)化合物ld進(jìn)行評(píng)估并且測(cè)得ld在PrEC細(xì)胞中具有6.0uM的IC5。值(圖8)。因此，ld在PrEC細(xì)胞中的效力比在LNCaP中的效力低13倍并且其對(duì)正常細(xì)胞表現(xiàn)出良好的選擇性。實(shí)施例43-E-亞節(jié)基-6-氯-1，3-二氫-吲哚-2-酮—般技術(shù)元素分析是由DepartmentofChemistryoftheUniversityofMichigan,AnnArbor，MI進(jìn)行的.在給出分子式的情況中，除非特別說(shuō)明，否則發(fā)現(xiàn)元素組成在理論值的0.3%之內(nèi).旋光度是在589nm下，在25C下在Perkin-Elmer241旋光計(jì)上(在CHC13中)進(jìn)行測(cè)定的。單晶X-射線分析是在NavalResearchLaboratory,Washington,DC中進(jìn)行的。^NMR光謙是在300MHz下進(jìn)行記錄的和"CNMR光傳是在75MHz下在BrukerAVANCE300分光計(jì)上進(jìn)行記錄的。所有的畫(huà)R光謙都是在CDCh中獲得的，并且其結(jié)果被記錄為得自四甲基硅烷(TMS)的每百萬(wàn)份低磁場(chǎng)的份數(shù)(卯m)的形式。對(duì)于畫(huà)R信號(hào)的多重性而言，使用下面的縮寫(xiě)s=單峰，d-雙峰，t三重峰，q-四重峰，m-多重峰，dd=雙重雙峰，dt-雙三重峰，dq=雙四重峰，br=寬。方法A:向6-氯-羥吲咮(1.67g，10.0咖ol)在60mLCH2C12:CH3CN(1:1)中的溶液中加入苯曱醛(10.0mmol)和KF-A1203(10g)。在室溫下10分鐘后，真空除去溶劑，將殘余物與該燒瓶一^故置在一個(gè)微波烘箱中并將其加熱5分鐘(60~80W)。用150mLCH3CN進(jìn)行萃取，將固體濾出，真空除去溶劑，得到粗品，將其在不進(jìn)行進(jìn)一步純化的情況下進(jìn)行應(yīng)用。'HNMR(300MHz，CDCl3)57.90(br，1H)，7.63(d，J=5.67Hz，2H)，7.55(d，J-8.27Hz，1H)，7.49(d，J-5.87Hz，2H)，7.39(d，J-7.85Hz，2H),6.90(s，lH)，6.85(d，J=8.22Hz，1H)，4.66(s，1H)。實(shí)施例5用類(lèi)似的操作制備下面的化合物。a)3-E-6-氯-3-(3-氯-亞節(jié)基)-1，3-二氫-叼l咮-2-酮NMR(300MHz，CDCl3)58.32(br，1H)，7.87(s，1H),7.77~7.66(m，3H)，7.75~7.43(m，3H)，7.24(td，J=1.10,7.69Hz，lH)，6.93~6.87(m，2H)。c)3-E-6-氯-3-(4-氯-亞爺基)-1，3-二氫-吲哚-2-酮d)3-E-亞節(jié)基-6-澳-1,3-二氫-叼l咮-2-酮e)3-E-亞千基-6-氟-1，3-二氫-丐|哚-2-酮f)3-E-亞芐基-6-三氟甲基-l，3-二氫-吲味-2-酮g)3-E-6-氯-3-(4-溴-亞千基)-l，3-二氫-巧|味-2-酮h)3-E-6-氯-3-(4-甲基-亞千基)-l，3-二氫-吲咪-2-酮i)3-E-6-氯-3-(4-甲氧基-亞節(jié)基)-l，3-二氫-吲哚-2-酮j)3-E-6-氯-3-(4-三氟甲基-亞爺基)-l，3-二氫-吲咮-2-酮k)3-E-6-氯-3-(3，4-二氯-亞千基-1，3-二氫-巧l咮-2-酮1)3-E-6-氯-3-(3，5-二氯-亞爺基)-1，3-二氫-吲咮-2-酮m)3-E-6-溴-3-(3-澳-亞千基)-l，3-二氬-丐|咮-2-酮n)3-E-6-氯-3-(3，3-二甲基-亞丁基)-1，3-二氫-吲哚-2-嗣o)3-E-6-氯-3-(3-甲基-亞丁基)-1，3-二氫-丐l咮-2-酮p)3-E-6-氯-3-(2-環(huán)己基-亞乙基)-1,3-二氫-吲咮-2-酮q)3-E-6-氯-3-環(huán)己基亞甲基-l，3-二氫-吲咮-2-酮r)3-E-6-氯-3-環(huán)戊基亞甲基-1，3-二氫-吲哚-2-酮s)3-E-6-氯-3-噻吩-2-基亞甲基-l，3-二氫-丐l哚-2-酮t)3-E-6-氯-3-吡咬-2-基亞甲基-l，3-二氫-,咮-2-酮u)3-8-3-(6-氯-吡啶-2-基亞甲基)-6-氯-1，3-二氫-丐l咮-2-酮v)3-E-3-(3-氯-2-氟-亞千基)-6-氯-l，3-二氫-吲哚-2-酮w)3-E-3-(3-氯-4-氟-亞千基)-6-氯-1，3-二氫-吲咮-2-酮x)3-E-6-氯-3-(3-氯-5-氟-亞節(jié)基)-l，3-二氫-吲哚-2-酮y)3-E-3-(3-溴-亞千基)-l，3-二氫-吲哚-2-酮z)3-E-3-(3-溴-亞千基)-6-三氟甲基-l，3-二氫-吲哚-2-酮實(shí)施例6(2'R，3S，4'R，5'R)6-澳-4'-(3-溴-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[吲咮-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基酰胺(KE-29)將所得的1，3-偶極產(chǎn)物(2.0咖ol)溶解于THF-二甲基胺(4M，5mL)中并將所得的溶液在室溫下攪拌一夜。在真空下除去溶刑并將殘余物用色謙法進(jìn)行純化，得到(r'R，2"S，2'R，3'R，3S，4'R)6-澳-4'-(3-溴-苯基)-2'-(2,2-二甲基-丙基)-1'-(2-羥基-1，2-二苯基-乙基)-2-氣代-l，2-二氫-螺環(huán)[嗎l哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基酰胺。在0。C下，向(1"R，2"S，2'R，3'R,3S，4'R)6-澳-4'-(3—澳-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-1'-(2-羥基-1，2-二苯基-乙基)-2-氣代-l,2-二氫-螺環(huán)HI咮-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基跣胺(2.0咖ol)在CH2Cl2-MeOH(10mL，1:1)中的溶液中加入Pb(0Ac)4(1.34g，3.0鵬ol)。將該反應(yīng)在(TC下攪拌約5-10分鐘，然后將該溶液用一根短硅膠柱進(jìn)行過(guò)濾。在真空下除去溶劑并將殘余物用色謙法進(jìn)行純化，得到所述產(chǎn)物。"D82.7(c，0.3CHC13);!H畫(huà)R(300MHz，CDCl3)，59.15(br，lH),7.20~7.28(m，2H);]7.18~7.03(m，2H)，6.97(s，1H),6.86(d，J-8.00Hz，1H)，6.34(d，J-8.08Hz，1H),4.54(d，J=7.50Hz，1H)，3.99(d，J=7.49Hz，1H)，3.63(br，1H)，3.51(d，J=9.13Hz，lH)，3.03(s，3H)，2,91(s，3H)，1.48(dd,J-9.85,14.01Hz，lH)，0.90(d，J=13.50Hz，lH)，O.83(s，9H);13C應(yīng)R(75MHz，CDCh)，5181.16，170.08，142.73，141.20，131.55，130.49，進(jìn)06，127.52，127.09，126.08，124.60，122.58，121.46，113.17，68.03，65.15，64.49,58.08，43.12，37,21，36.19，30.10,29.79。實(shí)施例7<formula>formulaseeoriginaldocumentpage82</formula>(1"R，2"S，2'R，3S，4'R，5'R)6-氯-4'-苯基-1'-(2—幾基—1，2-二苯基一乙基)-2'-異丁基-2-氧代-1，2-二氬-螺環(huán)[丐l哚-3，3'-吡咯坑]-5'-甲酸二甲基酰胺[a]"d-81.9(c，0.3，CHC13);NMR(300MHz，CDCh)58.25(br，lH)，7.73(d，J=7.88Hz，1H)，7.42~6.93(血，16H)，6.78(s，1H)，5.20(s，1H)，4.64(d，J=10.07Hz，1H)，4.59(s，1H)，4.52(d，J-3.13Hz,lH)，4.17~4.10(m，lH)，3.50(d，J-10.83Hz，lH)，2.86(s，3H)，2.64(dd，J=12.45，13.20Hz，1H)，1.95(s，3H)，1.73~1.65(m，lH)，1.13~1.07(m，lH)，0.85(d，J-6.38Hz，3H)，0.54(d，J=6.08Hz，3H);13CNMR(75MHz,CDCU5176.43，174.25，140.95，140.55:135.38，133.91，133.77，131.39，130.81，129.78，127.96,127.81，127.58，126.58，125.90，125.36,122.19，110.52，75.52，75.10，73.58，64.71，60.59，58.45，57.52，37.34，36.54，36.30，29.56，28.129實(shí)施例8(1"R，2"S，2'R，3S，4%5'R)6-氯一4'一(3—氯-苯基)-l'—(2-羥基—1，2-二苯基-乙基)-2'-異丁基-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)KI咪-3，3'-吡咯烷〗-5'-甲酸二甲基酰胺[a]25D-76.O(c，O.2CHCU;NMR(300MHz，CDCl3)58.15(br，lH)，7.75(d，J=7.91Hz，lH)，7.21~6.86(m，14H)，6.82(d，J=7.82Hz，lH)，6.73(s，lH)，5.18(s，lH)，4.69(d，J豕10.28Hz，lH)，4.51(d，J-3.45Hz，1H)，4.32(br，1H)，4.22~4.ll(m，lH)，3.48(d，J=10.99Hz，lH)，2.90(s，3H)，2,57(dd，J-12.53,13.24Hz，lH)，2.06(s，3H)，1.85~1.56(m，1H),1.10~0.95(m，1H)，0.84(d，J=6.41Hz，3H)，0.47(d，J=6.90Hz，3H);13CNMR(75MHz，CDC13)5176.06，173.83，l復(fù)80，140.61，136.27，135.04，134.06，133.86,130.81,130.71，129.54，129.23，128.09，127.87，127.62，127.38，126.70，125.80，125.54，122.39，110.60，73.92，72.51，72.23，62.55，60.41，56.75，39.23，36.59，26.43，23.39，21.03。(1"R，2"S,2'R，3S，4'R，5'R)6-氯-4'-(4-氯-苯基)-1'-(2-羥基—1,2-二苯基-乙基)-2'-異丁基-2-氣代-1，2-二氫-螺環(huán)[丐l哚-3，3'-吡咯[ot]25?！?3.3(c,0.2CHC13);力NMR(300MHz，CDCl3)57.80(br,1H)，7.74(d，J=8.09Hz,1H)，7.34~6.90(m，14H)，6.91(d，J-8.41Hz,1H)，6.78(s，lH)，5.18(s，lH)，4.65(d，J9.89實(shí)施例9烷]-5'-甲酸二甲基酰胺Hz，lH)，4.51(d，J=3.54Hz，1H)，4.36(br，1H),4.18~4.10(m，lH),3.48(d，J-10.96Hz，1H)，2.89(s，3H),2.59(dd，J=12.39，12.77Hz，lH)，2.05(s，3H)，1.70~1.60(m，1H)，1.10~l.OO(m，lH)，0.85(d，J=6.28Hz，3H)，0.49(d，J-6.10Hz，3H);13C麗R(75MHz，CDCU5175.72，173.98，140.71，140.59，135.08，134.02，133.80,132.58，130.86，130.70，128.25，127.87，127.62，126.70，125.80，125.56,122.42，110.50，74.54，72.64，72.19，62.52,60.59，60.41，56.67，39.31，36.58，26.44，23.38,21.06。(1"R，2"S，2'R，3S，4'R，5'R)6-氯-4'-(3-氯-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-l'-(2-羥基-l，2-二苯基-乙基)-2-氧代-1，2-二氬-螺環(huán)丐l哚[a]25。-92.7(c，0.6CHC13);'H麗R(300細(xì)z，CDCh)57.85(br，lH)，7.45(d，J=8.10Hz，2H)，7.41-6.72(m，14H)，6.68(d，J7.72Hz，1H)，5.43(d，J=3.24Hz，1H)，4.84(br，1H)，4.50(d，J3.55Hz，1H)，4.38(d，J=10.46Hz，1H)，3.98(d，J=10.46Hz,1H)，3.65(d，J=9.00Hz，lH)，2.97(dd，J=9.00Hz，12.00Hz，1H)，2.86(s，3H)，1.94~1.85(m，lH)，1.93(s，3H)，0.79(s，9H);13CNMR(75MHz,CDC13)5174.32，140.84，135.61，135.32，134.20，133.71，130.97，129.51，129.08，128.16，128.02，127.60，127.41，126.48，125.89，125.17，122.41，110.48，74.85，73.82，72.00，62.31，60.94,60.41，57.92，42.19，36.69,30.31,29.68。(1"R，2"S，2'R，3S，4'R，5'R)6-氯-4'-(3-氯-苯基)-1'-(2-羥基-1，2-實(shí)施例103，3'-吡咯烷]-5'-曱酸二甲基酰胺實(shí)施例11二苯基-乙基)-2'-丙基-2-氧代-1,2-二氫-螺環(huán)[吲哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基酰胺nIH02"^NMR(300MHz，CDCU5'.63(d，J=6.97Hz，lH)，:7.26Hz,1H)，7.28~10.06Hz，lH)，4.58~[ct]25D-73.9(c，0.3CHC13);8.27(br，lH)，7.66(d，J8.01Hz，1H)7.42(d，J=6.99Hz，1H)，7.32(d，J6.57(m，14H)，5.14(s，lH)，4.60(d，J=4.48(m，lH)，4.48(d，J-3.32Hz，lH)，4.17~4.10(m，1H)，3.37(d，J=10.11Hz，lH)，2.87(s，3H)，2.56~2.40(m，1H)，1.99(s，3H)，2.00~1.88(m，1H)，L10~0.87(m，2H)，0.27~0.72(m，3H)。實(shí)施例12(1"R，2"S，2'R,3S，4'R，5'R)6-氯-4'-(3-氯—苯基)(2-羥基-1，2-二苯基-乙基)-2'-(3-甲基-丁基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)HI哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基酰胺[ot]"d-85.6(c，0.4CHC13);'HNMR(300MHz，CDCh)58.68(br，lH)，7.63(d，J=7.77Hz，lH)，7.28~6.81(m，16H)，5.13(s，lH)，4.59(d,J=10.12Hz，1H)，4.54(s，1H),4.46(d，J=2.94Hz，lH)，4.12(d，J=10.10Hz，lH)，3.31(d，J=10.26Hz，lH)，2.85(s，3H)，2.60~2.45(m，lH)，1.99(s，3H)，1.95~1.84(m，lH)，1.48~1.42(m，lH)，0.95~0.82(m，1H)，0.77(t，J=5.50Hz，6H),0.70~0.60(m，lH);13CNMR(75MHz，CDCl3)5176.58,173.82，140.98，140.53，136.12，135.21，134.03，133.76，130.75,129.43，129.16，128.04，127.81，127.59，127.32，126.64，125.86，125.30，122.29，110.75，75.18，74.99，73.10，62.68，60.39，56.99，37.22，36.57，36.42,29.19,28.08,22.61。(2'R，3S，4'R，5'R)6-氯-4'-(3，4-二氯-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-l，2-二氫-螺環(huán)[巧l哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基酖麼這種化合物是用與實(shí)施例6的方法相似的方法來(lái)進(jìn)行合成的。"d128.0(c，0.2CHC13);畫(huà)R(300MHz,CDCU，&8.64(s，lH)，7.35(s，lH)，7.22(d，J=1.79Hz，1H)，6.97(dd，J1.80,8.30Hz，lH);6.88(d，J-1.65Hz，1H)，6.78(dd，J=1.75,8.10Hz，1H)，6.35(d,J=8.06Hz，1H)，4.47(d，J-7.92Hz，1H)，4.07(d，J豕7.91Hz,1H)，3.48(d，J-9.47Hz，1H)，3.03(s，3H)，2.91(s，3H)，1.49(dd，J=9.88,14.3Hz，1H);0.90~0.88(m，1H)，0.84(s，9H);"CNMR(75MHz,CDC13)，5180.88，169.71，142.30，139.07，133.72，132.55:131.32，130.41，127.14，126.60，125.69，121.99，110.41，68.64，65.41，64.20，57.67,43.15，37,28，36.16，30.14,29.81。(2'R，3S，4'R，5'R)6-氯-2'-(2,2-二甲基-丙基)-2-氧代-4'-(3-三氣甲基-苯基)-l，2-二氬-螺環(huán)KI哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基耽胺實(shí)施例13(KE-32)實(shí)施例14<formula>formulaseeoriginaldocumentpage87</formula>(KE-21)這種化合物是用與實(shí)施例6的方法相似的方法來(lái)進(jìn)行合成的。[oc]25D61.0(c，0.2CHC13);]HNMR(300MHz，CDCl3)，58.19(br，lH)，7.45~7.21(m，4H)，6.82(d，J-1.82Hz,1H)，6.70(dd，J=1.90，8.12Hz，1H)，6.39(d，J-8.11Hz，1H)，4.57(d，J=8.28Hz，lH)，4.18(d，J=8.10Hz，1H)，3.50(d，J=9.80Hz，lH)，2.99(s，3H)，2.93(s，3H)，1.52(dd，J=9.84,14.22Hz，1H)，0.96(d，J頃14.23Hz，lH)，O.90(s，9H);13CNMR(75MHz,CDC13)，5180.70,169.84,142.03，139.71，133.64，132.33，129.09，126.72，125.73，125.06，124.09，121.89，110.14，68.44，65.05，64.38，58.55，43.26,37.02，36.15，30.17,29.82;EI/MS，508(M4+1);HRMSC26H3。C1F3N302([M+H]+)需要值:508.1979，實(shí)測(cè)值508.1965。實(shí)施例15(2'R，3S，4'R，5'R)6-氯-4'-(4-氯-苯基)-2'-異丁基-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[叼l哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基酖胺(KE-10)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage87</formula>這種化合物是用與實(shí)施例6的方法相似的方法來(lái)進(jìn)行合成的。[a]25D68.0(c,0.3CHCU;H腿(300MHz,CDCl3)，58.98(br，lH)，7.21(d，J-8.18Hz，2H)，7.09(d，J=8.17Hz，2H)，6.86(s，lH)，6.74(d,J-7.75Hz，1H)，6.46(d，J-7.78Hz，1H)，4.59(d，J-7.63Hz，1H)，3.99(d，J=7.64Hz，lH),3.56(m，1H)，2.96(s，3H)，2.85(s，3H)，1.68~1.53(m，2H)，0.98-0.88(m，lH)，0.79(d，J-12.1Hz，3H)，0.77(d，J=12.0Hz，3H);13CNMR(75MHz,CDC13)，8180.86，170.40,142.35，136.85,133.62，133.28，130.04,128.76，127.16，125.73，121.87，110.29，68.90，64.35，63.60，59.40，38.66，37.24，36.24，25.83，23.42，21.76;EI/MS，4600T+1);匪SC24H2sCl2N3()2([M+Hr)需要值460.1559，實(shí)測(cè)值460.1552。(2'S，3R，4'S，5'S)6-氯-4'-(4-氯-苯基)-2'-異丁基-2-氣代-l，2-二氫-螺環(huán)[丐l哚-3，3'-吡咯烷]-5',-甲酸二甲基酰胺(KE-38)25D-65.8(c,0.3CHCh);]HNMR(300MHz，CDCl》，58.98(br，lH)，7.21(d，J=8.18Hz，2H)，7.09(d，J=8.17Hz，2H)，6.86(s，lH)，6.74(d，J=7.75Hz，1H)，6.46(d，J=7.78Hz,1H)，4.59(d，J=7,63Hz，lH)，3.99(d，J-7.64Hz，1H)，3.56(m,1H)，2.96(s，3H)，2.85(s，3H)，1.68~1.53(m，2H)，0.98~0.88(m，lH)，0.79(d，J=12.1Hz，3H)，0.77(d，J-12.0Hz，3H);13CNMR(75MHz,CDCh)，5180.86，170.40，142.35，136.85，133.62，133.28，130.04，128.76,127.16，125.73，121.87，110.29，68.90，64.35，63.60，59.40,38.66，37.24，36.24，25.83,23.42,21.76;EI/MS，460(M++1);HRMS實(shí)施例16C24H28ChN302([M+H]+)需要值:460.1559，實(shí)測(cè)值460.1552。實(shí)施例17(2'S，3R，4'S，5'S)6-氯-4'-(3-氯-苯基)-2'-異丁基-2-氣代4，2-二氫-螺環(huán)HI哚-3，3'-吡咯烷-5'-甲酸二甲基酰胺[otrV-50.0(c，0.3CHC13);^NMR(300MHz，CDCh),59.30(br，lH)，7.27~6.95(邁，4H)，6.88(s，1H)，6.73(d,J=8.00Hz，1H)，6.47(d,8.01Hz，1H)，4.61(d，J=7.66Hz,1H)，4.00(d，J7.64Hz,1H),3.58~3.54(m，1H)，2.97(s，3H)，2.88(s，3H)，1.65~1.45(m，2H)，0.98~0.91(m，1H)，0.78(d，J=6.63Hz，3H)，0.76(d，J一6.53Hz，3H);13CNMR(75MHz，CDCh)，5180.98，170.23，142.44，140.40，134.35，133.58，129.77，128.68，127.64,126.94，125.64，121.75，110.36，68.84，64.08，63.59，59.50，38.54,37.22，36.21，25.78,23.38,21.72;EI/MS，460(r+1);HRMSC24H28C12N302([M+H]+)需要值460.1559，實(shí)測(cè)值460.1551。實(shí)施例18(2'R，3S，4'R，5'R)6-氯-4'-(3-氯-苯基)-2'-異丁基-2-氣代-1，2-二氫-螺環(huán)[丐l哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基酰胺(KE-9)[oc]25。50.Q(c，0.3CHC1》；力畫(huà)R(300MHz，CDCl3),59.30(br，lH)，7.27~6.95(m，4H)，6.88(s，1H)，6.73(d，J=8.00Hz，1H)，6.47(d，8.01Hz，1H)，4.61(d，J-7.66Hz，1H)，4.00(d，J-7.64Hz，1H)，3.58~3.54(m，1H)，2.97(s，3H)，2.88(s，3H)，1.65~1.45(m，2H)，0.98~0.91(m，1H)，0.78(d，J-6.63Hz，3H)，0,76W,J-6.53Hz，3H);13CNMR(75MHz，CDCl3)，5180.98，170.23，142.44，140.40，134.35，133.58，129.77，128.68，127.64，126.94，125.64，121.75，110.36，68.84，64.08，63.59，59.50,38.54，37.22，36.21，25.78，23.38,21.72;EI/MS，460(r+1);HRMSC24H28C12N302([M+H]+)需要值460.1559,實(shí)測(cè)值460.1551。(2'R，3S，4'R，5'R)6-氯-2'-異丁基-2-氧代-4'-苯基-l，2-二氳-螺環(huán)[吲味-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基酰胺(KE-5)[ct]"d24.7(c，0.8CHC13);!HNMR(300MHz，CDCh),58.20(br，lH)，7.38~7.01(m，5H)，6.80(d，J=1.86Hz，lH)，6.66(dd，J-1.91,8.10Hz，1H),6.32(d，J-8.13Hz,1H)，4.63(d，J-7.12Hz，lH)，3.94(d，J=7.18Hz，lH),3.65~3.55(m，1H)，2.97(s，3H)，2.75(s，3H)，1.76~1.51(m，2H)，0.99~0.88(m，1H)，0.82(d，J=6.63Hz，3H)，0.78(d，J=6.52Hz，3H);13CNMR(75MHz，CDCU,5180.54，170.75，142.16，138.68，133.34，128.78，128.63，128.43，128.30，127.56，127.11，125.85，121,67，109.86，68.75，64.59，63.72，59.87,38.58，37.14，36.23，25.85,23.49,21.74;EI/MS，426(NT+1);HRMSC24H29ClN302([M+H]+)需要值426.1948，實(shí)測(cè)值426.1937。(2'S,3R，4'S，5'S)6-氯-2'-異丁基-2-氧代-4'-苯基-1，2-二氬-螺環(huán)實(shí)施例19實(shí)施例20〖巧|哚-3，3'-吡咯烷]5'-曱酸二甲基酰胺(KE-4)-24.7(c，0.8CHC13);^麗R(300MHz，CDCh),&8.20(br，lH)，7.38~7.01(m，5H)，6.,，J=1.86Hz，lH)，6.66(dd，J=1.91,8.10Hz，lH)，6.32(d，J-8.13Hz，1H)，4.63(d，J7.12Hz，lH)，3.94(d，J-7.18Hz，lH)，3.65~3.55(m，1H)，2.97(s，3H)，2.75(s，3H)，1.76-1.51(m，2H)，0.99~0.88(m，1H)，0.82(d,J=6.63Hz，3H)，0.78(d，J=6.52Hz，3H);13C醒R(75MHz，CDCl3)，5180.54，170.75，142.16，138.68，133.34，128.78，128.63，128.43，128.30，127.56，127.11，125.85，121.67，109.86，68.75，64.59，63.72,59.87,38.58,37.14,36.23,25.85,23.49,21.74;EI/MS，426(M++1);HRMSC2晶9C1N302([M+HD需要值:426.1948，實(shí)測(cè)值426.1937。(2'S，3S，4'R，5'R)6-氯-4'-(3-氯-苯基)-2'-(3-甲基-丁基)-2-氧代1，2-二氫-螺環(huán)[巧|哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基酖胺(KB-16)[a]25D25.l(c,0.5CHC13);^NMR(300MHz，CDCl3)，58.15(br，1H)，7.21~7.07(m，4H)，6.81(s，1H)，6.76(d(i,J=1.85,8.06Hz，lH)，6.49(d，J-8.08Hz，1H)，4.69(d,J7.90實(shí)施例21Hz，lH)，3.96(d，J=7.89Hz，1H)，3.53(dd，J=8.64,9.19Hz，1H)，2.97(s，3H)，2.85(s，3H)，1.68~1.56(m，1H)，1.46~1.36(m，lH)，1.30~1.20(m，2H)，1.11~0.99(m，1H)，0.78(d，J6.46Hz，3H)，0.75(d，J=6.48Hz，3H);13CNMR(75MHz，CDCl3)，5180.00，17008,141.83,140.20，134.45，133.70，129.82，128.73，127.78，127.13，126.93，125.94，121.98，110.03，70.69，63.56,63.33，59.70，40.43,37.21,36.51，27.86，27.33，22.54,22.15.EI/MS，474(r+1);HRMS。^"跳(胸〗+)需要值:474.1715，實(shí)測(cè)值474.1714。(2'R，3S，4'R，5'R)6-氯-2'-(2，2-二甲基-丙基)-4'-(3-碘-苯基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[,咪-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基酰胺(KE-22)[cx]25。84.2(c,0.4CHC13);^醒R(300MHz，CDCl3)，58.79(br，lH)，7.50(邁，2H),7.15(d，J=7.68Hz，1H)，6.96(dd，J-7.80，8.10Hz，lH)，6.81(s，lH)，6.73(dd，J-1.59,8.10Hz，lH)，6.40(d，J-9.10Hz，lH)，4.52(d，J-7.50Hz，1H)，3.96(d，J=7.50Hz，1H)，3.50(d,J-9.96Hz，1H)，2.98(s，3H)，2.91(s，3H)，1.48(dd，J9.90，14.11Hz，1H)，0.89—0.85(m，1H)，0.84(s，9H)，13CNMR(75MHz，CDCU，5181,03，170.10，142.37，141.28，137.15，136.45，133.54，129.98，128.12，126.60，125.82，121.75，110.28，94.45，68.18，65.17，64.43，60.40，43.17，37.23，36.19，30.13，29.82;EI/MS，566(Nf+1);HRMSC2晶。C1IN302([M+Hr)需要值566.1071，實(shí)測(cè)值566.1063。(2'R，3S，4'R，5'R)6-氯-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氣代-4'-苯基實(shí)施例22實(shí)施例232-二氫-螺環(huán)Hl咮-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基酰胺(KB-7)25D53.3(c，0.9CHC1》；力麗R(300MHz，CDCl3)，57.68(br，lH)，7.28~7.12(m，5H)，6.78(d，J=1.84Hz，lH)，6.43(dd，J=1.88,8.14Hz，lH)，6.23(d，J=8.13Hz，1H)，4.60(d，J=6.81Hz,1H)，3.92(d，J=6.84Hz，1H)，3.53(d，J=8.99Hz，lH)，3.39(br，lH)，2.98(s，3H)，2.76(s，3H),1.48(dd，J=9.64,14.35Hz，lH)，0.97~0.90(m，lH)，0.86(s，9H)，EI/MS，440(M++1);HRMSC25H3。C1N302([M+H]+)需要值440.2105，實(shí)測(cè)值440.2102。實(shí)施例24(2'S，3R，4'S，5'S)6-氯-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-4'-苯基-l，2-二氫-螺環(huán)[丐l哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基跣胺(KE-14)[a]25D-50.6(c，0.6CHC13);腿(300MHz，CDCl3)，57.68(br，1H)，7.28~7.12(m，5H)，6.78(d，J-1.84Hz，lH)，6.43(dd，J=1.88,8.14Hz，1H)，6.23(d，J=8.13Hz，1H)，4.60(d，J=6.81Hz，1H)，3.92(d，J=6.84Hz,1H)，3.53(d，J-8.99Hz，1H),3.39(br，1H)，2.98(s，3H)，2.76(s，3H)，1.48(dd，J9.64,14.35Hz，lH)，0.97~0.90(m，1H)，0.86(s，9H),EI/MS，440(NT+1);H詣SC25H3oCl線([M+H]+)需要值:440.2105，實(shí)測(cè)值440.2102。實(shí)施例25(2'R，3S，4'R，5'R)6-氯-4'-(3，5-二氯-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[,咪-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基酰胺(KE-20)[a]25D69.1(c，0.6CHCU;^NMR(300MHz,CDCi3)，58.03(br，lH)，7.33(d，J=8.00Hz，1H),7.13(s，1H)，7.12(dd，J1.84,7.95Hz，lH)，7.04(d，J-1.85Hz，2H)，6,師，1.84Hz，1H)，4.73(d，J=8.52Hz，1H)，4.48(d,J-8.51Hz，1H)，3.68(4，J-9.12Hz，lH)，3.08(s，3H)，2.96(s，3H)，1.44~1.22(m，1H)，0.99~0.89(m，lH)，0.84(s，9H)，"CNMR(75MHz，CDCl3)，5181.07,172.13,141.75，139.98,134.69，134.00，127.69，127.04，126.36，123.48，123.11，110.55，66.57，66.08,61.65，56.48，43.34，37.49，36.32，30.15，29.78。(2'R，3S，4'R，5'R)6-氯-4'-(3-氯—苯基)-2'—(2，2—二甲基-丙基)-5'-(4-甲基-哌喚-1-羰基)-1H-螺環(huán)HI哚-3，3'-吡咯烷]-2-酮實(shí)施例2625D88.5(c，0.2CHC13);!HNMR(300MHz，CDCU，58.91(br，lH)，7.18~7.14(m，3H)，7.05~7.02(m，1H)，6.85(d，J，1.58Hz，lH)，6.72(dd，J-1.61,8.11Hz，1H)，6.41(d,J=8.12Hz，lH)，4.50(d，J=7.42Hz，1H)，3.99(d，J=7.49Hz，lH)，3.68~3.35(m，7H)，2.41~2.33(m，2H),2.25(s，3H),1.47(dd，J-9.90,14.15Hz，1H)，1.03~0.88(m,1H)，0.72(s，9H);13CNMR(75MHzCDCU,5181.12，168.55，142.42，140.76，134.47，133.62，129.89,128.73,127.69，127.06，126.42，125.79，121.85，110.30，67.99，65.24，64.27，58.01，54.57，54.29，45.49，45.09，43.08，42.03，30.13,29.79。(2'S，3S，4'R，5'R)6-氯-2'-(4-氯-苯基)-4'-(2'，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[,咮-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二乙基酰胺(KE-39)[ot]25D124.O(c，O.2CHCW;〗HNMR(300MHz，CDCl3)，58.46(br，lH)，7.25~7.09(m，3H)，7.02(dd，J=7.85,7.93Hz，1H)，6.92(s，1H)，6.75(s，1H)，6.43(d,J=7.45Hz,1H)，4.31(s，1H)4.02(d，J=6.82Hz,1H)，3.28(s，lH)，3.12~3.06(m，lH),3.06(s，3H)，2.96(s，3H)，1.59(dd，J=7.69,7.80Hz，lH)，l.23~1.18(m，lH)，0.55(s，9H);13CNMR(75MHz，CDC13)，5180.58,170.44，142.54，137.79，133.99，133.84,129.18，129.00，128.19，126.32，126.19，124.28，122.13，110.61，74.67，66.15，60.40，50.42，42.21，38.88，37.68,30.30,28.90。(2'R，3S，4'R，5'R)4'-(3-溴-苯基)-6-氯-2'-(2，2-二甲基-丙基)-5'-(嗎啉-4-羰基)-1H-螺環(huán)[丐|咪-3，3'-吡咯烷]-2-酮(KE-28)實(shí)施例27實(shí)施例28-2-酮(KE-26)[oc]25D56.5(c，0.2CHC13);!HNMR(300MHz，CDCl3),58.76(br，lH)，7.18~7.15(m，3H)，7.04~7.01(邁，1H)，6.86(d，J-H6Hz，lH)，6.72(dd，J-1.76,8.10Hz，1H)，6.42(d，J=8.13Hz，lH)，4.46(d，J-7.57Hz，1H)，4.04(d，J=7.55Hz，1H)，3.66~3.30(m，9H),1.46(dd,J-9.94，14.09Hz，1H)，1.04-0.89(m，1H)，0.84(s，9H);13CNMR(75MHz，CDC13)，5181.05，168.71，142.40，140.74:134.48，133.62，129.90,128.66，127.71，127.08，126.37，125.75，121.84，110.32.68.29，66.78，66.58，65.41，64.26，57.97，46.17，43.02,30.13，29.80。實(shí)施例29實(shí)施例30(2'R，3S，4'R，5'R)4'-(3-溴-苯基)-6-氯-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[巧j哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基酖胺(KE-23)NMR(300MHz，CDCU，58.73(br，1H)，7.33~7.28(m，2H)，7.14~7.07(m，2H)，6.86(d，J=1.79Hz，1H)，6.72(dd，J-1.86,8,10Hz，lH)，6.40(d，J-8.13Hz，1H)，4.54(d，J-7.54Hz，1H)，4.00(d，J-7.53Hz，1H)，3.50(d，J-8.63Hz，1H)，2.92(s，3H),2.87(s，3H)，1.52~1.44(m，1H)，0.97~0.92(m，1H)，0.89(s，9H);13CNMR(75MHz，CDCU，5181.49，170.49，142.76，141.68，134.00,132.02，130.95，130.51,127.96，127.02，126.23，123.05，122.24，110.70，62.59，65.62，64.85，60.84，58.59,43.61，37.66，36.62，30.57，30.25。EI/MS，518(NT+1);H腿C25H39BrClN302([M+H〗+)需要值518.1210,實(shí)測(cè)值518.1177。(2'R，3S，4'R，5'R)6-氯-4'-(3-氯-苯基)-2-氧代-2'-丙基-l，2-二氫-螺環(huán)[-引味-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基酰胺(KE-30)[ct]"d42.2(c，1.0CHC13);^NMR(300MHz，CDCl3)，5實(shí)施例319.39(br，1H)，7.16~7.05(m,4H)，6.87(s，1H)，6.74(d，J=7.98Hz，1H)，5.49(d，J-8.07Hz，1H)，4.62(d，J=7.82Hz，1H)，4.00(d,J=7.81Hz，1H)，3.51(dd，J-9.15，9.27Hz，1H)，2.97(s，3H)，2.74(s,3H)，1.65~1.44(m，2H)，1.29~1.18(m，2H)，0.77(t，J-7.15Hz，3H);13CNMR(75MHz，CDCU，5180.89，170.27，142.47，140.30，134.34,133.59，129.75，128.67，127.65，127.21,126.94，125.73，121.73，110.34，70.65，63.85，63.49，59.66，37.21，36.21，31.92，20.77，14.00;EI/MS，446(r+1);腳SC23H26C12N302([M+H]+)需要值:446.1402，實(shí)測(cè)值446.1408。實(shí)施例32(2'R，3S，4'R，5'R)6-氯-2'-(2,2-二甲基-丙基)-4'-(3-甲IU^-苯基)-2-氧代-l，2-二氫-螺環(huán)[-引哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基酰胺(KE-25)[a〗25D46.9(c，0.4CHCU;^NMR(300MHz，CDCl3)，57.87(br，lH),7.34(d，J-8.02Hz，lH)，7.12~6.93(m，2H)，6.74~6.64(m，4H)，4.87(d，J==8.60Hz，1H)，4.34(d，J=8.55Hz,1H),3.79(d,J-9.09Hz，lH)，3.63(s，3H)，2.97(s，3H)，2.96(s，犯)，1.68(br，lH)，1.37~1.27(ra,IH)，O.92~0.88(m，1H)，0.84(s,9H);13CNMR(75MHz，CDCl3)，5178.33，173.23，159.20，141.99，137.60，133.54129.22，127.24，123.59，122.63，120.63，114.03，112.75，110.15;EI/MS，470(NT+1);國(guó)SC26H33C1N303([M+H]+)需要值:470.2210,實(shí)測(cè)值470.2222。實(shí)施例33(2'R，3S,4'R，5'R)6-氯-4'-(3-氯-苯基)-2-氧代-2'-戊基-1,2-二氣-螺環(huán)HI咪-3，3'-吡咯烷]-5'-曱酸二甲基酰胺(KE-19)[a]25D33.0(c，0.3CHC13);力NMR(300MHz,CDCl3)，58.23(br，1H)，7.23~6.99(m，4H)，6.82(d，J=1.59Hz，lH)，6.76(dd，J-1.92，7.86Hz，1H)，6,48(d，J=8.10Hz，1H)，4.61(d，J-7.81Hz，1H)，3.99(d，J-7.80Hz，1H)，3.51(dd,J-9.35，9.49Hz，1H)，2.98(s，3H)，2.83(s,3H)，1.66~1.54(m，1H)，1.48~1.42(m，lH)，1.26~1.15(m，6H)，0.80(t，J=6.81Hz，3H);"CNMR(75匪z，CDCl3),S180.13，170.17，140.31，134.43，133.65,129.81，128.71，127.73，127.19，126.95，125.88，121.91，110.06，70.93，63.88,63.42，59.71，37.22，36.22，31.67，29.82，27.25，22.39，13.89;EI/MS，474(M++1)。實(shí)施例34(2'R，3S，4'R，5'R)-丁基_6-氯-4'-(3-氯-苯基)-2-氧代-1，2-二氬-螺環(huán)[丐l哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基酰胺(KE-18)[a]"D20.0(c，0.3CHC13);H賺(300MHz，CDCl3)，58.03(br，lH)，7.24~6.88(m，4H),6.78(s，1H)，6.76(dd，J=1.90Hz，8.08Hz，lH)，6.48(d，J=8.10Hz,1H)，4.62(d，J=7.83Hz，lH)，3.99(d，J-7.83Hz，1H)，3.81(dd,J=9.19,9.51Hz，1H)，2.94(s，3H)，2.84(s，3H)，1.68~1.52(m，1H),1.45~1.33(m，lH)，1.31~1.18(m，4H)，0.75(t，J-6.891Hz,3H);13C纖(75MHz，CDCh)，5180.30，170.12，141.93，140.29，134.43,133.66,129.81，128.72，127.74，127.17，126.94，125.90，121.93，110.04,70.58，63.80，63.37，59.68，37.36，36.22，31.57，29.68，22.58，13.82;EI/MS，460(M++1)。實(shí)施例35(2'R,3S，4'R，5'R)6，7-二氯-2'-異丁基-2-氣代-4'-苯基-1,2-二氬-螺環(huán)[丐l哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基酰胺(KE-11)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage100</formula>[a〗25D55.7(c，0.6CHC13);!H麗R(300MHz，CDC13),57.83(br，lH)，7.28~7.15(m，5H)，6.75(d，J-8.15Hz，1H)，6.19(d，J-8.15Hz，lH)，4.61(d，J-6.97Hz，1H)，3.93(d,J-6.97Hz,1H)，3.60~3.50(m，1H)，2.94(s，3H)，2.74(s，3H)，1.80~1.55(m，2H)，0.90~0.85(m，1H)，0.85(d，J=6.80Hz，3H)，0.78(d,J-6.53Hz，3H);13CNMR(75MHz，CDCU，5179.16，170.50，140.27，138.57，131.44，128.77，128.47，127.98，127.74，123.62,122.90，113.17，68.92，66.92，65.21，60,33，38.51，36.22，35.30，25.89,23.53，21.09實(shí)施例36(2'R，3S，4'R，5'R)6-氯-4'-(3-氯-苯基)-2-氧代-2'-(2，2-二甲基丙基)-1,2-二氫-螺環(huán)[吲哚-3，3'-吡咯烷-5'-甲酸二甲基酰胺OLE-17)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage101</formula>[a]"D60.9(c,0.4CHC13);^NMR(300MHz，CDCl3)，59.36(br，lH)，7.35~6.97(m，4H)，6.90(s，1H)，6.69(d，J8.10Hz，lH)，6.38(d，J-8.11Hz,1H)，4.54(d，J-47.41Hz，1H)，4.00(d，J-7.39Hz,1H)，3.50(d，J-9.41Hz,1H)，3,17(br，1H)，2.97(s，3H)，2.91(s，3H)，1.51~1.42(m,1H)，0.91~0.83(m，1H)，0.82(s，9H);13CNMR(75MHz，CDCl3)，5181.37，170.16，142.63，141.05，134.33，133.50，129.78，128.64，128.08，127.52，127.04，126.54，125.65，121.65，110.41，68.13，65.22，64.41，58.08，43.10，37.21，36.19，30.01,29.79;EI/MS，474(NT+1);HRMSC25H3。C12N302([M+H]+)需要值474.1715，實(shí)測(cè)值474.1713。實(shí)施例37(2'R，3S，4'R，5'R)6-氯-4'-(4-氯-苯基)-2-氣代-2'-(2，2-二甲基丙基)-l，2-二氫-螺環(huán)[丐l哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二乙基酰胺(KE-31)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage101</formula>EI/MS，474(M++1);HRMSC25H3。C12N302([M+H]+)需要值474.1715,實(shí)測(cè)值474.1703。實(shí)施例38(2'R，3S，4'R，5'R)2'-異丁基-2-氣代-4'-苯基-l，2-二氬-螺環(huán)[吲哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基酰胺(KE-8)-5'-甲酸(3-嗎啉-4-基-丙-5'-甲酸二甲基酰胺(KE-41)-5'-甲酸(2-嗎啉-4-基-乙實(shí)施例40實(shí)施例41基)-酰胺(KE-43)-5'-甲酸二甲基酰胺(KE-47)〖0195][ct]25D101.5(C1,1CHC13);H職(300MHz，CDCl3)，58.56(br，lH)，6.95~6.85(m，3H)，6.83~6.74(m,2H)，6.50(d，J8.10Hz，lH)，4.47(d，J=7.97Hz，1H)，4.12(d，J-7.81Hz，1H)，3.48(d，J=9.83Hz，1H)，3.10(s，3H)，2.97(s，3H)，1.46(dd，J豕6.98,14.11Hz，lH)，l.05~0.98(m，1H)，0.84(s，9H);13C腿(75MHz，CDC13)，5180.87，169.59，142.72，142.62，142.29，135.23，133.82，126.57,125.61，124.69，122.01，115.39，114.37，110.43，68.66，65.25，64.22，57.94，43,19，37.28，36.18，30.17，29.84;C25H2SC12FN302需JHi:C，60.98;H，5.73;N，8.53;實(shí)測(cè)值C，61.12;H，6.14;N，8.00,實(shí)施例43(2'R，3S，4'R，5'R)6-氯一4'-(4—氯-3-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[丐|哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基酰胺(KE-46)[oc]58.O(c0.75，C腦3);〗HNMR(300MHz，CDCh)，59.25(br，lH),7.28~7.20(m，2H)，7.04(d，J=7.67Hz，lH)，7.90(s，1H),6.69(d，J-7.94Hz，1H)，6.41(d，j=2.82Hz，1H)，4.65(d，J7.60Hz，lH)，4攀32(d，J-7.54Hz，1H)，3.48(d，J=9.44Hz，lH)，3.02(s，3H)，2.99(s，3H)，1.50~1.42(m，1H)，1.03~0.95(m，lH)，0,82(s，9H);13C醒R(75MHz，CDCl》，5181.46,169.84,157.92，142.78，133.61，129.63，128.26,128.07,127.46,126.70，124.79，124.54，121.67,110.47，68.26，63.73，52.27，42.85，37.02，36.13，30.08，29.76;C25H2SC12FN302+H20需要值C，58.83;H，5.92;N，8.23;實(shí)測(cè)值C，59.09;H，5058;N,8.16。實(shí)施例44(2'R，3S，4%5'R)6-氯-4'-(3-氯-4-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氬-螺環(huán)[巧j哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基跣胺(KE-45)[ot]"d97.4(cl，CHCU;!HNMR(300MHz，CDCl3)，59.10(br，lH)，7.18(d，J-6.16Hz，lH)，7.01~6.90(m，2H)，6.89(d,J=1.75Hz，lH)，6.75(dd，J-1.80,8.10Hz,1H)，6.45(d，J=8.11Hz，1H),4.47(d，J-7.73Hz，1H)，4.06(d，J=7.84Hz，1H)，3.49(d，J-9.62Hz，lH)，2.98(s，6H)，1.48(dd，J-9.96,14.18Hz，lH)，l.03~0.89(m，lH)，0.83(s，9H);13CNMR(75MHz，CDC13)，5181.25,169.85，158.69，142.49，135.97，155.65，130.51，128.50，126.62，125.62，121.85，121.08，116.75，110.50,68.37，65.47，64.27，57.54，43.13，37.26，36.17,30.12,29.80;C25H28C12FN302需要值C，60.98;H，5.73;N，8.53;實(shí)測(cè)值C，61.05;H，6.26;N，7.97。實(shí)施例45(2'R，3S，4'R，5'R)6-氯-4'-(3-氯-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丁基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)Hi咮-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基跣胺(KE-48)!H腦R(300MHz，CDCl3)，58.37(br，1H)，7.25~7.23(m，2H)，6.81~6.77(m，4H)，5.04(d，J=8.34Hz，1H)，4.17(d，J-107-5'-甲酸二甲基酰胺(KE-50)8.41Hz，1H)，3.67(d，J-9.17Hz，1H)，3.09(s，3H)，2.96(s，3H),1.73(br，lH)，1.50(dd，J=9.99,14.10Hz，lH)，O.99~0.90(邊，1H)，0.87(s，9H);13CNMR(75MHz，CDCl3)，5181.25,170.60，159.68,141.96，141.14，138.80，133.38，127.06，126.98，126.36，123.62，121.98，109.88，69.70，64.79，64.11，60.08，42.97，37.32，35.92，30.19，29.84。實(shí)施例47l'-甲基-2'-(2-甲基-丙烯基)-4'-苯基-1H-螺環(huán)[吲哚-3，3'—比咯烷]-2-酮(KE-13)將3-E-3-亞千基-1,3-二氫-丐|咮-2-酮(10.O鵬ol)、N-甲基-甘氨酸(14mmol)和3-甲基-丁-2-烯眵(14咖ol)在100mL甲苯中的混合物回流6小時(shí)。除去溶劑并將殘余物在硅膠柱上進(jìn)行純化，得到所述產(chǎn)物。'HNMR(300MHz,CDCh)，58.06(br,1H)，7.28(d，J-8.01Hz，lH)，7.10~6.95(m，4H)，6.74~6.67(m，4H)，5.72(s,1H),4.15(m，lH)，3.48(dd，J=5.51,12.01Hz，lH)，2.71~2.61(m，lH)，2.32(dd，J=5.31,18.54Hz,1H)，2.05(s，3H)，1.84(s，6H);13CNMR(75匪z，CDCU，5180.61，143.07，138.56，135.89，133.75，128.14，127.78，127.55,127.32，127.10，121.45，120.85，110.33，67.38，57.30，47.31,43.06,34.77，23.09,14.19。實(shí)施例486-氯-1'-甲基-2'-(2-甲基-丙烯基)-4'-苯基-111-螺環(huán)Hl咮-3，3'-吡咯烷]-2-酮(KE-2)這種化合物是用與實(shí)施例47的方法相似的方法來(lái)進(jìn)行合成的。!HNMR(300MHz，CDCU，57.56(br，1H)，7.28(d，J8.04Hz，2H)，7.13~7.02(m，4H),6.72~6.67(m，3H)，5.73(s，1H)，3.49(dd，J=5.46，12.21Hz，1H)，2.65(dd，J=12.64，17.30Hz,1H)，2.32(ddJ=3.21,18.31Hz，lH)，2.08(s，6H),1.91(s，MO;13C腿(75MHz,CDC13)，5180.21，142.86，138.57，135.89，133.75,128.17,127.81，127.64，127.33，127.11，121.52，120.75，110.20，67.40，57.33，47.33,43.15,34.74,23.12。1'-甲基-2'-(2-甲基-丙烯基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[兮|哚-3，3'-吡咯烷]-4'-甲酸叔-丁基酯(KE-3)這種化合物是用與實(shí)施例47的方法相似的方法來(lái)進(jìn)行合成的。'HNMR(300MHz,CDCl3)，58.53(br，1H)，7.42(d,40Hz1H)，7.20(td，J-1.27，7,69Hz，1H)，6.99(td，J=0.97，7.53Hz，1H),6.86(d，J-7.66Hz,1H)，4.42(dt，J=1.33，9.32Hz，1H)，3.85(dd,J實(shí)施例495.51，9.72Hz，1H)，3.66(dd，J-5.49，10.80Hz，1H)，3.58(d,J-9.32Hz，lH)，2.70(t，J=9,87Hz，1H)，2.28(s，3H)，1.63(d，J=1.23Hz，3H)，1.49(d，J-1.20Hz,3H)，0.95(s，9H);13CNMR(75MHz,CDC13)，5179.44，169.54，141.21,138.48，129.20，127.89，126.16,122.15,120.52，108.86，80.80，71.64，60.95，54.48，49.94，39.97，27.17,26.05，18.48。實(shí)施例50<formula>formulaseeoriginaldocumentpage110</formula>向(2-氧代-1，2-二氫-吲哚-3-亞基)-乙酸乙基酯和由2-澳-l-苯基-乙酮和3，4-二氫-異查啉所形成的復(fù)合體(一種鹽)在CH2Cl2中的溶液中加入Et3N。將所得的溶液在室溫下攪拌一夜。除去溶刑并將殘余物在珪膠柱上進(jìn)行純化，從而得到所述產(chǎn)物。^NMR(300MHz，CDCl》，58.13(br，1H)，8.10(d，J=1.47Hz，lH)，8.07(d，J=7.58Hz，lH)，7.63~7.59(m，1H)，7.55~7.49(m，2H)，7.44(s，lH)，7.32(d，J==7.62Hz，lH)，7.21~7.16(m，lH)，7.08-7.05(m，lH)，6.86~6.80(m，2H)，6.16(d，J=7.65Hz，lH)，5.42(d，J=7.38Hz，1H)，5.19(s，1H)，4.27(d，J==7.35Hz，lH)，3.89~3.76(nUH)，3.22~3.15(m，1H)，2.96(d，J5.14Hz，1H)，2.95(d，J-5,83Hz，1H)，0.76(d，J-7.15Hz，3H);13C麗R(75MHz，CDC13)，5197.64，180.02，169.25，140.69，137.00，134.62,133.07，132.50，130.99，128.57，128.50，128.33，126.91，126.31，125.65，124.68,123.19，109.10，71.09，70.71，63.02，60.55，55.12，46.76，28.97,26.95,13.49。實(shí)施例51這種化合物是用與實(shí)施例50的方法相似的方法來(lái)進(jìn)行合成的這種化合物是通過(guò)對(duì)實(shí)施例50的化合物進(jìn)行氬化來(lái)進(jìn)行制備的?！紅)21irHNMR(300MHz，CDCl3)，57.42(m，3H)，7.35~7.23(m，4H)，7.116.67(m，2H)，6.08(d，Hz，lH)，4.60(t，J=7.14Hz，2H)，3.24~3.20(m,1H)，3.12~3.03(m，1H),2.98(d，J=5.88Hz，lH)，2.89~2.81(m，1H)，2.55~2.50(m，1H)，0.93(t，J-6.40Hz，3H);13CNMR(75MHz，CDCl3)，5178.51,170.99,141.75，7.93(br，lH)，7.57~-6,93(m，3H),6.76~-7.70Hz，lH)，5.41(s，lH)，5.24(d，J-5.83.89Hz，lH)，4.10~4.03(m，1H)，4.04(q，J=137.37，134.08，128.96，128.29,128.15，127.54，127.17，126.34，125.80，125,65，124.98，124.43，122.60，109.65，70.84，69.22，67.95,61.06，60.60,44.58,26.92,22.64,13.74。實(shí)施例53KE-6這種化合物是通過(guò)對(duì)實(shí)施例51的化合物進(jìn)行氬化來(lái)進(jìn)行制備的。NMR(300MHz，MeOH-d6)，57.65~7.42(in，6H)，7.23-7.18(m，3H)，6.96~6.93(m，2H)，6.23(d,J-7.85Hz，lH)，6.00(s，lH)，5.42(d，J=6.62Hz,1H)，5.28(t，J-6.16Hz，lH)，3.59~2.83(m，6H)，1.46(s，9H)。實(shí)施例54(2'R，3S，4'R，5'R)6-氯-4'-環(huán)己基-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氣代-1，2-二氫-螺環(huán)[-引哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基酜胺(G-51)!HNMR(300MHz，CDCU，59.05(s,1H)，7.26-6.79(m，4H)，3.72(d，J-8.0Hz，1H),3.26(d，J=8.3，1H)，3.11—2.95(m，2H),2.89(d，J-4.5Hz，犯)，2,50(t，J=3.3Hz，1H)，2.29(br，1H),1.93(s，1H)，1.70(s,1H)，1.43-1.21(m，5H)，1.19-0.85(m，3H)，0.74(s，9H);"C剛R(75MHz，CDCU,5182.36，176.77，142.27，133.62，128.30，125.29，122.09，110.62，67.30，67.14，61.70，57.76，43.20，38.51，34.61，32.77，31.54，30.64，30.02，29.71，26.29，26.02，25.69。(2'R，3S，4'R，5'R)6-氯-4'-環(huán)戊基-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-l，2-二氫-螺環(huán)KI哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基酰胺(G-52)-5'-甲酸二甲基酰胺(G-53)實(shí)施例55<formula>formulaseeoriginaldocumentpage113</formula>實(shí)施例56<formula>formulaseeoriginaldocumentpage113</formula>-5'-甲酸二甲基酰胺(G-56)111NMR(300MHz，CDCl3)，59.13(s，1H)，8.61(t，J-2.2Hz，1H)，7.38(t,J=2.2Hz，1H)，7.07-7.03(m，1H)，6.86(d，J-2.lHz，1H)，6.78(d，J=8.0Hz，1H)，6.63—6.60(m，1H)，6.50(d,J豕8.0Hz，1H)，5.23(d，J-7.8Hz，1H)，4.12(d，J=8.0Hz，1H)，3.51(d，J-9.3Hz,1H)，3.0-2.92(m,6H)，1.50—1.32(m，1H)，0.88(m,1H)，0.82(s，9H);13CNMR(75MHz，CDCU)，5181.80，171.13，158.49，148.66，142.33，136.51，133.12，127.04，126.30，125.74，124.29，122.19，121.56，109.97，68.86，64.88，63.77，59.85，53.41，42.76，37.08，35.91，31.55，30.43實(shí)施例58(2'R，3S，4'R，5'R)6-氯-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-4'-噻吩-2-基-l，2-二氫-螺環(huán)[-引哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基酰胺(G-57)-5'-甲酸二甲基酰胺(G-58)NMR(300MHz，CDCl3)，58.75(br，1H)，7.30~7.27(m，2H)，7.08~7.03(m，3H)，6.83(d，J=7.63Hz，1H)，6.7秦，J=7.45,7.49Hz，lH)，6.53(d，J-7.45Hz，1H)，4.55(d，J=7.68Hz，1H)，4.02(d，J=7.67Hz，1H)，3.54(d，J-9,14Hz，1H)，3.21(br，1H)2.98(s，3H)，2.93(s，3H)，1.54~1.46(m，1H)，1.03~0.92(m，lH)，0.82(s，9H);13CNMR(75MHz,CDCh),5161.22，170.23，141.42，141.19131.61，130.22，129.85，128.25，127.75，127.56，124.93，122.40，121.75，109.60，68.09，65.06,64.65，58.32，43.25,37.22，36.14,30.12，29.80。實(shí)施例59實(shí)施例60(2'R，3S，4%5'R)6-氯-2'-(2,2-二甲基-丙基)-4'-(1-甲基-lH-吡咯-2-基)-2-氧代-l，2-二氫-螺環(huán)Hl哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二乙基酰胺(G-84)-5'-甲酸二甲基酰胺(G-83)-5'-甲酸二甲基酰胺(G-82)-5'-甲酸甲基酰胺(G-81)實(shí)施例62實(shí)施例63-5'-甲酸甲基酰胺(G-80)NMR(300MHz，CDCl3):58.98(s，1H)，7.43(J=4.8Hz，lH)，7.13~6.740n，3H)，6.10~6.05(m，2H)，4.47(d,J=9.30Hz，1H)，4.17(d，J-9.35Hz，lH)，3.67(d，J-8.00Hz，1H),2.89(d，J一4.90Hz，3H)，1.39-1.24(m,lH)，0.93~0.85(m，1H)，0.88(s，9H);13CNMR(75MHz，CDC1》5178.45，173.65，151.36，142.40，142.15，134.26，126.04，125.88，122.33，111.11，110.49，107.83,65.77，65.20，64.01，52.45，45.11，32.00，30.57，30.36，26.48。(2'R，3S，4'R，5'R)4'-(3-溴-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-6-甲氧基-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[巧|哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸二甲基酰胺實(shí)施例64實(shí)施例65(KE-61)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage118</formula>-5'-甲酸(2-嗎啉-4-基-乙[ot]"d45.29(c0.17，CH2C12);NMR(300MHz，CDCl3)58.33(s,lH)，7.17-7.10(m，4H)，6.95(d，J=4.4Hz，1H)，6.81(dd，J！=8Hz，J產(chǎn)1.6Hz,1H),6.70(d，J=1.8Hz，1H)，6.31(d，J-8Hz，lH),4.33(d，J-7.1Hz，lH)，3.88(d，J=7.12Hz，lH)，3.67-3.60(m，4H)，3.57(d，J=8.1Hz，1H)，3.43-3.40(m，2H)，2.71-2.28(m，7H)，1.53-1.43(m，1H)，1.29-1.21(m，1H)，0.85(s，9H);13CNMR(75MHz,CDC13)5180.82，172.17，142.67，141.28,134.76，134.18，130.15，128.98，127.98，127.46，126.92，126.25，122.29，110.66，67.51,67.33，66.65，64.03，57.47，57.20，53.61，44.28,36.04，31.99，30.63，30.50，30.31;C29H3。C12N403+0.5H20需要值C，61.26;H，6.56;N，9.85;實(shí)測(cè)值C，61.38;H，7.08;N，9.50。實(shí)施例66基)-酰胺(KE-79)實(shí)施例67(2'R，3S,4'R，5'R)6-氯-4'-(3-氯-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)Hl咪-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸(3-嗎啉-4-基-丙基)-酰胺(KE-78)HNMR(300MHz，CDCl3)，58.57(s，1H)，7.29(s，1H)，7.28-7.10(m，3H)，6.96-6.93(m，1H)，6.80(d，J=1.6Hz，1H)，6.68(dd，L=7.3Hz，J2=1.6Hz，1H)，6.27(d，J-8.1Hz，1H)，4.28(d，J-6.9Hz，1H)，3.87(d，J-7.3Hz，1H)，3.86-3.67(m，4H)，3.35(d，J=7.6Hz，1H),3.89-3.34(m,2H)，2.43-2.37(m，6H)，1.72-1.68(m，2H)，1.53-1.48(m，lH)，1.29-1.26(m，2H)，0.84(s，9H);13C服R(75MHz，CDCl3)5180.91，172.08，142.67，]41.34，134.76，134.19，130.13，129.08，127.99，127.49，126.76，126.31,122.29，110.63，67.79，67.35，66.62，63.80，57.47，57.41，54.10，44.15，38.83，31.99，30.59，30.40，30.26。實(shí)施例68(2'R，3S，4'R，5'R)6-氯-2'-(2，2-二甲基-丙基)-4-(3-氟-苯基)-2-氧代-l，2-二氫-螺環(huán)[巧|咮-3，3-吡咯烷]-5-甲酸二甲基酰胺(KB-75)!HNMR(300MHz，CDCh)58,59(s，1H)，7.29—7.20(m，1H)6.98-6.87(m，4H),6.68(dd，J產(chǎn)7.8Hz,J2=1.7Hz，1H)，6.35(d，J7.5Hz，1H)，4.56(s，1H)，4.01(d，J=6.1Hz，1H)，3.50(m，1H)，3.03(s，犯)，2.91(s，3H)，1.51-1.45(m，1H)，1.29-1.26(m，2H)，0.84(s，9H);13CNMR(75MHz,CDC13)5180.91，170.20，164.33，161.06，142.33，141.71，133.51，130.20，126.54，125.66,121.75，115.74，114.49，110.19,68.14，65.34，61.36，43.12，37.16，36.19，31.89，30.13,29.82。實(shí)施例69(2'R，3S，4'S，5'R)6-氯-2'-(2,2-二甲基-丙基)-4-(2，3-二氣-苯基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)Hl哚-3，3-吡咯烷]-5-甲酸二乙基酰胺(KE-74)NMR(300MHz，CDCh)58.21(s,1H)，7.40(d,J-8.0Hz，1H)，7.23(s，1H)，7.10(d，J-8.0Hz，1H)，6.94-6.77(m，3H)，4.98(d，J-8.45Hz，1H)，4.80(d，J=8.6Hz，咖，3.78(d，J-8.7Hz，1H)，3.01(s，3H)，2.97(s，3H)，1.31-1.27(m，犯)，0.84(s，9H);"C腿(75MHz，CDCU5178.77，172.84，148.09，142.12，134.23，126.61，126.54，124.72，124.07，116.51，116.28，110.47，67.08，66.23,61.98，48.40，43.87，37.77,36.70，35.06，31.99，30.58，30.21。實(shí)施例70(2'R，3S，4'S，5'R)6-氯-2'-(2，2-二甲基-丙基)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[巧|咪-3，3-吡咯烷]-5-甲酸(2-DI乙基氨基-乙基)-酰胺(KE-73)腿(300MHz，CDCl》，58.55(s，1H)，7.50(m，1H)，7.18(t，J=2.4Hz，1H)，7.08(t，J=3.2Hz，1H)，6.86(s，1H)，6.64(d,J1.6Hz，1H)，6.26(d，J-3.4Hz，1H)，4.43(d，J=3.2Hz，1H)，4.25(d，J2.5Hz，lH)，4.43(d，J-8.1Hz，1H)，4.16(d，J=7.8Hz，1H)，3.60-3.51(in,2H)，3.41(d，J=8.3Hz，1H)，3.40-2.91(m，6H)，1.48-1.43(m，2H)，1.19-1.14(t，J-6.8Hz，6H)，0.79(s，9H);13C麵75MHz,CDC13)，5181.59，177.47，172.58，143.39，134.01，129.76，127.48，126.92，125.51，124.85，121.99，110.70，67.90，66.56，63.64，53.01，51.62，43.60，35.88，31.99，30.54，23.26，23.05。實(shí)施例71(2'R，3S，4'R，5'R)6-氯-2'-(2，2-二甲基-丙基)-4-(3-氯-苯基)-2-氧代-l，2_二氫-螺環(huán),哚-3，3-吡咯烷]-5-甲酸甲基酰胺(KE-71)13CNMR(75MHz，CDCh)5181.25，170.16，142.89，134.06,133.01，128.70，128.49，126.82，125.59,125.37，125.21，122.21,110.62，68.94，64.30，64.09,52.99，43.32，37.48，36.55，30.58，30.25,實(shí)施例72(2'R，3S，4'S，5'R)6-(氯-4'-(3-溴-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)|>引哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸(2-嗎啉-4-基-乙基)-酰胺(KE-90)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage123</formula>-5-甲酸二甲基酰胺(KE-91)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage123</formula>!HNMR(300MHz，CDCl3)57.65(s，1H),7.39-7.24(m，1H)，6.98-6.90(m，1H)，6.82(s，1H)，6.69(d，J=6.5Hz，1H)，6.41(d，J=6.7Hz，lH)，4.60-4.53(m，lH)，4.35(d，J-7.4Hz，1H)，3.43-3.34(m,1H),3.05(s，3H)，3.00(s，3H)，1.51-1.45(m，1H)，1.30-1.25(m，2H)，0.86(s,9H)。實(shí)施例74(2'R,3S，4'S，5'R)6-甲基-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[咽哚-3，3'-吡咯坑]-5'-甲酸(3-嗎啉-4-基-丙基)-酰胺(KE-92)NMR(300MHz，CDCl3)57.70-7.00(m，5H)，6.62(s，1H)，6.49(d，J=7.8Hz，lH)，6.20(d，J=7.8Hz，1H)，4.40(d，J=7.7Hz，1H)，4.07(d，J=7.8Hz，1H)，3.82(m,4H)，3.52-3.34(m，3H)，2.62(m，6H)，2.24(s，3H)，1.85(m，2H)，1.54-1.46(m，1H)，0.98-0.91(m，2H)，0.87(s，9H);13CNMR(75MHz,CDC13)5181.12，172.46，141.51，138.67，129.71，129.01，128.81，127.87，124.71，124.65，124.50，123.04，121.81，110.73，66.64，66.17，63.08，57.03，53.74，51.37，43.76,38.18，30.56,30.22,30.10。(2'R，3'S，4'R，5'R)6-氯-4'-2，2-二甲基-丙基-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)HI哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸(3-嗎啉-4-基-5'-甲酸甲基耽胺(KE-94)'HNMR(300MHz，CDCU58.90(s，1H)，7.10-6.90(m，3H)，3.52(d，J=7.6Hz，lH)，3.25(d，J=7.5Hz，1H)，2.88(d，J-4.5Hz，3H)，2.54(m，1H)，2.30(m，1H)，1.64-1.45(m，3H)，1.27(m，2H)，0.76(s，9H)，0.56(s，9H);13CNMR(75MHz，CDCh)5182.51，173.37，142.95,134.13，129.05，127.14，122.47，110.96，71.11，68.01，62.60，48.92，44.09，42.88，39.81，31.99，30.60，30.51，30.20，29.35，26.43。實(shí)施例77(2'R，3S，4'S，5'R)6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丁基)-2-氧代-1，2-二氬-螺環(huán)[-引哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸(3-嗎啉-4-基-丙基)-酰胺(GM-29)-5'-甲酸(3-嗎啉-4-基-5'-甲酸(3-嗎啉-4-基-丙基)-酰胺(KE-102)-5'-甲酸(3-嗎啉-4-基-丙基)-酰胺(KE-103)丄HNMR(300MHz，CDCl》58.31(m，1H)，7.42(m，1H)，6.94-6.67(m，5H)，6.38(d，J=7.5Hz，1H)，4.25(d，J-7.8Hz，1H)，3.88(d，風(fēng)2Hz，lH)，3.78(m，4H)，3,53(d，J=8.1Hz，lH)，3.39(m，2H)，2.54-2.49(m,6H)，1.80-1.74(m，2H)，1.51-1.46(m，1H)，0.90~0.85(m,IH)，O.84(s，9H);13CNMR(75MHz，CDCl》5180.31，171.79，143.02，142.37，135.42，126.51,126.18，125.16，122.58，115.82,115.50，114.83，114.54，110.70，67.63，67.01，66.79，63.58，57.26，54.08，46.38，38.60，33.32，30.59，30.35，30.23。實(shí)施例81(2'R，3S，4S，5'R)6-氯，7-氟-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-l,2-二氫-螺環(huán)KI咮-3，3'-吡咯烷]-5'-曱酸(3-嗎淋-4-基-丙基)-酰胺(ICE-104)!H腿(300MHz，CDCl3)58.23(s，1H)，7.43-7.01(m，4H)，6.87(d，J-6.0Hz，1H)，6.22(d，J-8.6Hz，1H)，4.40(d，J豕8.0Hz，1H)，4.12(d，J=7.8Hz，1H)，3.70(ra，4H)，3.56-3.48(m，4H)，2.67-2,60(m，7H)，1.76-1.70(m，2H)，0.90~0.88(m，1H)，0.86(s,9H);13CNMR(75MHz，CDCl3)5180.62，171.58，138.22，128.20，127.92，127.57，125.07，125.02，122.17，121.93，120.98，120.72，113.63，111.58，67.43，67.18，66.22，63.61，57.42，54.05，51.79，43.68，38.79，32.00，30.86,30.55,30.38。實(shí)施例82(2'R，3S，4S，5'R)6-氯，7-氟—4'一(3-氯—2-氣-苯基)-2'-(2,2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[-引咮-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸(2-嗎啉-4-基-丙基)-酰胺(KE-109)-5'-甲酸(2-^b咯烷-l-基-乙基)-酰胺(KE-110)'HNMR(300MHz，CDCl3)59.79(s，1H)，8.60(s，1H)，7.57(s，1H)，7.27-6.87(m，3H)，5.90(d，J=8.1Hz，1H)，4.51(m，1H)，4.23(m，1H)，3.7-3.1(m，9H)，2.12(m3H)，1.49-1.41(m，4H)，0.82(s，9H);13CNMR(75MHz，CDCl3)5181.11,174.19，155.66，138.77，130.35，127.98，127.39，125.43，121.79，121.52，121.12，113.38，113.06，112.33，66.17，64.44，63.28，55.27，55.11，49.44，46.58，43.89，36.26，30.50，30.14,23.66。實(shí)施例84(2'R，3S，4S，5'R)6-氯，7-氟-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[-引哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸(2-哌啶-l一基-乙基)-酰胺(KE-111)NMR(300MHz，CDCl》57.34-7.23(m，4H)，7.13(m，1H)，6.88(m1H)，6.22(d，J=8.2Hz，1H)，4.42(d，J=8.3Hz，1H)，4.15(d，J-7.8Hz，1H)，3.41(m，3H)，2.47(邁，7H)，1.58-0.92(m，8H)，0.85(s,9H);13C腿(75MHz，CDCl》5180.89，171.50，158.38，155.69，152.47，130.19，128.49，127.88，125.06，122.09，121.85，120.60，113.51，111.63，67.93，66.13，54.04，57.80，54.81，51.76，43.61，36.14，32.00，30.85，30.67，26.25，25.90，24.39。實(shí)施例85(2'R，3S，4S，5'R)6-氯，7-氟-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[丐l哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸[2-(四氬-吡喃-4-基)-乙基]-酰胺(KE-112)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage130</formula>NMR(300MHz，CDCl》58.51(s,1H)，7.32—6.78(m，3H)，6.26(d，J=8.5Hz，lH)，4.38(d，J=7.8Hz，lH)，4.05(d,J-7.7Hz，1H)，3.90-3.78(m，2H)，3.54-3.22(m，6H)，1.65-1.25(m，11H)，0.86(s，9H);13CNMR(75MHz，CDCU5180.66,171.92,158.32,152.47，138.28，130.36，128.09，127.99，127.77，127.49，122.19，120.80，111.30，111.65，68.34，66.96，65.93，63.42，51.39,43.76，37.13，37.01，33.25,33.16,30.56,30.36,30.23,27.12。實(shí)施例86(2'R，3S，4R，5'R)6-氯-4'-(3-氯-5-氟-苯基)-2'-(2,2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[丐|咮-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸(2-嗎啉-4-基-乙基)-酰胺(KE-115)NMR(300MHz，CDCl3)58.01(s，1H)，7.13(m,1H)，6，94-6.70(m，5H)，6.42(d，J=8.0Hz，1H),4.30(d，J-7.6Hz，1H)，3.88(d，J-7.6Hz，lH)，3.68(m，4H)，3.56(d，J-9.1Hz，1H)，3.43-3.37(m，2H)，2.56—2.40(m，4H)，1.80(m，2H)，1.51-1.46(m，1H)，0.90~0.85(m，1H)，0.86(s，9H);13CNMR(75MHz，CDCl3)5180.17,171.69，142.97，142.28，135.35，134.46，126.76，126.13,125.07，122.60，115.81，115.48，114.47,110.69，67.45，67.36，66.93，63.86，57.32，57.22,53.66，44.27，35.99，30.65,30.30。實(shí)施例87(2'R，3S，4S，5'R)6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2,2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[巧|哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸[2-(四氬-吡喃-4-基)-乙基]-酰胺(KE-MDM2-108)，CDCl3)58.65(s，1H)，7.33-7.20(m,2H)，7.08-7.03(m,2H)，6.83(d，J=1.8Hz，1H)，6.67(dd，J！-8.1Hz，J產(chǎn)1.8Hz，lH)，6.26(d，J-6Hz，1H)，4.13(d，J7.8Hz，lH),4.06(d，J-7.5Hz，1H)，3.96-3.91(m，2H)，3.50(d，J-9Hz，1H)，3.38—3.29(m，4H)，1.61-1.48(m，6H)，1.31—1.27(m，2H)，0.86(d，J=9Hz，lH)，O.82(s，9H);"CNMR(75MHz，CDCl》5181.10,172.29，142.98，134.36,130.06，128.40，128.21，127.68，126.36，125.60，124.83，122.25，121.77，110.73，68.34，66.54，65.88，62.95，43.82，37.11，36.88，33.26，33.15，30.56，30.21。(2'R，3S，4S，5'R)6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)一2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1,2-二氫-螺環(huán)[-引咪-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸(2-嗎啉-4-基"d+5.8(c0.9CHCh);力NMR(300MHz，CDCl3)，57.83(br，lH)，7.34~7.20(m，3H)，7.07(t，dd，J=7.91,7.94Hz，1H)，6.83(d，J-1.83Hz，1H)，6.69(dd，J=1.86,8.11Hz，1H)，6.30(d，J-8.17Hz，1H)，4.44(d，J=8.05Hz，1H)，4.12(d，J=實(shí)施例88乙基)一酰胺(KE-63)8.04Hz,1H)，3.68(t，J-4.56Hz，4H)，3.49~3.35(m，3H)，2.59~2.20(m，7H)，1.52(dd，J9.80,14.10Hz，lH),0.95~0.89(m，lH)，0.84(s，9H);13CNMR(75MHz，CDCh)，5180.34，171.30，142.16，133.89，129.57，128.12，127.93，127.09，126.15，124.42，124.36，121.93，121.61，110.13，66.91，65.63，62.93，56.79，53.40，51.28，43.31，35.55，30.18，30.04，29.83;C29H35C12FN403+H20需要值C，58.49;H，6.26;N，9.41;實(shí)測(cè)值C，58.70;H，6.44;N，9.23。實(shí)施例89(2'R，3S，4S，5'R)6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-l，2-二氬-螺環(huán)[丐l哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸(3-嗎啉-4-基-丙基)-酰胺(KE-64)-5'-甲酸叔-丁基酯!H醒R(300MHz，CDCl》58.16(s，1H)，7.53(m，1H)，7.30(ra，lH),7.08(ra，lH)，6.93(d，J-1.8Hz，1H)，6.72(dd，L=8.1Hz，J2-1.8Hz，lH)，6.ll(d，J=7.9Hz，1H),4.59(d，J-7.5Hz，1H)，4.31(d，J=7.3Hz，1H)，3.81-3.78(m，1H)，2.69(s，3H),1.96-1.88(m，1H)，1.12(s，9H)，0.80-0.89(m，1H)，0.63(s，9H)。實(shí)施例91(2'S，3R，4'R，5'S)6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[丐l哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸(2-嗎啉-4-基-乙基)-酰胺(KE-98(63B，KE-63的鏡像))[a]25。一6.5(c1CHC13);C29H35C12FN403+H20需JHi:C,58.49;H，6.26;N，9.41;實(shí)測(cè)值C，58.73;H，6.54;N，9.18^NMR(300MHz，CDCl3)，57.83(br，lH)，7.34~7.20(m，3H)，7.07(t，dd，J=>7.91,7.94Hz，lH)，6.83(d，J=1.83Hz，1H)，6.69(dd，J=1.86,8.11Hz，lH)，6.30(d，J=8.17Hz，1H)，4.44(d，J=8.05Hz，1H)，4.12(d，J8.04Hz，lH)，3.68(m，4H)，3.49~3.35(m，3H)，2.59~2.20(m，7H)，1.52(dd，J-9.80,14.10Hz，lH)，O.95~0.89(m，lH)，0.84(s，9H);13CNMR(75MHz，CDCl3)，5180.34，171.30，142.16，133.89，129.57，128.12，127.93,127.09，126.15，124.42，124.36，121.93，121.61，110.13，66.91，65.63，62.93，56.79，53.40，51.28，43.31，35.55,30.18,30.04,29.83。實(shí)施例92(2'R，3S，4R，5'R)6-氯-4'-(3-氯-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-5'-甲基氨基曱酰基-2-氧代-l，2-二氫-螺環(huán)[-引哚-3，3'-吡咯烷]-l'-甲酸甲基酯(KE-66)NMR(300MHz，CDCl3)，57.86(s，1H)，7.70(s，1H)，7.27~6.95(m，5H)，4.56(d，J=8.70Hz，1H)，3.93(s，3H)，3.87(d，J埋9Hz，lH)，3.50~3.47(m，lH)，3.05(m，lH)，2.88(d,J=5.1Hz，3H)，1.55~0.89(m，2H),0.89(s，9H)。實(shí)施例93(2'R，3S，4S，5'R)6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[丐l哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-曱基-酰胺(KE-62)-5'-甲酸[2-(4-甲基-哌喚-l-^NMR(300MHz，CDCU，58.46(br，1H)，7.90(br，1H)，7.31~7.23(m，2H),7,14~7.07(m，2H)，6.94(d，J=1.79Hz，1H)，6.75(dd，J=1.86，8.10Hz，1H)，4.45(d，J=11Hz，1H)，4.22~實(shí)施例95基)-2-氧代-乙基]-酰胺(KE-67)4.15(m，lH)，4.03~3.95(m，1H)，3.87~3.83(m，1H)，3.73~3.65(m，3H)，3.43(m，2H)，2.44(m，4H)，2.32(s，3H)，1.85(m，1H)，0.97~0.92(m，lH)，0.89(s,9H)。實(shí)施例96(2'R，3S，4S，5'R)6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[丐|哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸(2-吡咯烷-l-基-乙基)-酰胺(MDM2-DQ-120)!HNMR(300MHz,CDCU，57.50(br，1H)，7.41(m，1H)，7.28(m，lH),7.10(m，lH)，6.85(d，J-1.54Hz，1H)，6.67(dd，J-1.54,7.61Hz，1H)，6.33(d，J=8.17Hz，1H)，4.45(d，J-8.40Hz，1H)，4.13(dd，J=8.40,1.54Hz，lH)，3.49~3.35(m，3H)，2.78(m，1H)，2.67(依，5H)，1.80(in,4H)，1.53(dd，J=9.60，14.40Hz，1H)，0.93(m，1H)，0.81(s，9H),實(shí)施例97(2'R，3S，4S，5'R)6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[-引咮-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸(2-旅咬-l-基-乙基)-酰胺(MDM2-DQ-121)-5'-甲酸[2-(卜甲基-哌啶-4-基)-乙基]-酰胺(MDM2-DQ-122))HNMR(300MHz，CDCU,57.41—7.22(m，3H)，7.07(m，2H)，6.81(d，J-1.82Hz，lH)，6.67(dd，J=8.10,1.83Hz，1H)，6.24(d,J8.10Hz,1H)，4.41(d，J-7.83Hz，1H)，4.05(d，J-7.83Hz，1H)，3.51(m，1H)，3.33(m，2H)，2.93(m，2H)，2.32(s，3H)，2.02(m,3H)，1.72(m，2H)，1.53(m，3H)，1.35(m，3H)，0.93(m，1H)，0.82(s，9H)。實(shí)施例99(2'R，3S，4S，5'R)6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-l，2-二氫-螺環(huán)[丐l咮-3，3'-吡咯烷〗-5'-甲酸(2-哌淀-4曙基-乙基)-酰胺(MDM2-DQ-123)!HNMR(300MHz，CDCU，57.34(m，1H)，7.20(m，1H)，7.07(m，2H)，6.80(d，J-1.23Hz，1H)，6.64(dd，J-8.11,1.83Hz，lH)，6.24(d,J-8.11Hz,1H)，4.41(d，J-7.81Hz，1H)，4.05(d，J=7.81(m,3H)，1.28(m，3H)，0.93(m，2H)，0.80(s，9H)。實(shí)施例100(2'R，3S，4S，5'R)6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[p引哚-3,3'-吡咯烷]-5'-甲酸(4-嗎啉-4-基-丁基)-酰胺(MDM2-119)[ct]25。2.6(c，0.5CHC13);^NMR(300MHz，CDCl3)，57.82(br，lH),7.34(m，lH)，7.24(dt，J=1.43,6.90Hz，lH),7.10~7.05(m，2H)，6.83(d，J=1.80Hz，1H)，6.68(dd，J=1.86,8.11Hz，1H)，6.26(d，J-8.14Hz，1H)，4.42(d，J-7.80Hz，1H)，4.07(d，J"7.74Hz，lH)，3.73(t，J-7.62Hz，4H)，3.48(d，J=9.16Hz，lH)，3.34~3.20(m，2H)，2.45~2.31(m，6H)，1.58~1.47(m，5H)，0.92~0.88(m，1H)，0.82(s，9H);13CMMR(75MHz，CDCh)，5180.57，172.06，142.60，134.37,130.01，126.36，125.66，122.35，110.52，67.33，66.67，65.90，62.83，58.89，54.04，43.76，39.53，30.56，30.21,27.86,24.16。(2'R，3S，4S，5'R)6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-l，2-二氫-螺環(huán)[丐|咮-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸(2-環(huán)己基-乙Hz，lH)，3.45(m，lH)3.32(m，2H)，2.86(m，2H)1.92(m，3H)，1.48實(shí)施例101基)-酰胺(MDM2-DQ-125)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage140</formula>NMR(300MHz，CDCl》，58.37(m，1H)，7.35(m，1H)，7.23(m，1H)，7.06(m，2H),6.86(s，1H),6.68(d,J=8.11Hz,1H)，6.30(d，J-8.12Hz，1H)，4.46(m，1H)，4.12(m，1H)，3.48(m，1H)，3.31(m，2H)，2.38(m，1H)，1.67(m，5H),1.29(m，3H)，1.17(m，4H)，0.91(m，2H)，0.81(s,9H)實(shí)施例102<formula>formulaseeoriginaldocumentpage140</formula>(2'R，3S，4S,5'R)6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-l，2-二氫-螺環(huán)[-引哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸[2-(4-甲基-哌溱-l-基)-乙基]-酰胺(MDM2-DQ-126)^NMR(300MHz，D20)，57.36(m，1H)，7.19(m，1H)，7.05(m，2H)，6.77(s，1H),6.50(d，J=7.80Hz，1H)，6.26(d，J-7.80Hz，lH),4.46(d，J=7.51Hz，1H)，4.37(d，J=7.50Hz，lH)，4.05(m，1H)，3.60~3.21(ra,12H)，2.90(s，3H)，1.83(邁，1H)，0.98(m，1H)，0.89(s，9H)。(2'R，3S，4S，5'R)6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[-引哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸[2-(4-乙基-實(shí)施例103哌喚-l-基)-乙基]-酰胺(MDM2-DQ-129)4NMR(300MHz，CDCl3)，59.46(br，1H)，7.70(br，1H),7.50(m，1H)，7.26(m,1H),7.12(m，1H),6.94(d，J=1.56Hz，1H),6.61(dd，J=8.10，1.80Hz，1H)，6.諫，J8.10Hz，1H)，4.51(d，J-6.30Hz，lH)，4.12(d，J=6.30Hz，1H)，4.05(m,1H)，3.53-2.66(m，16H)，1.35(t，J-7.2Hz，3H)，0.92(m，1H)，0.80(s，9H)。(2'R，3S,4S,5'R)6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[p引哚-3，3'-吡咯烷]-5'-曱酸[2-(4-異丙基^NMR(300MHz，CDCh),59.80(br，1H)，7.88(br，1H)，7.52(m，1H)，7.24(m，1H)，7.13(m，1H)，6.97(s，1H)，6.61(d，J=8.10Hz，1H)，6.08(d，J=8.10Hz，1H)，4.63(m，1H),4.17(邁，1H)，3.61(m，1H)3.59-2.60(m，14H)，1.55(m，lH)，1.35(d，J=6.3Hz，6H)，0.92(m，1H)，0.80(s，9H)。(外消旋的)6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)甲基-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[,哚-3，3'-吡咯垸]-5'-甲酸(2-嗎啉-4-實(shí)施例104-哌溱-l-基)-乙基]-酰胺(MDM2-DQ-130)實(shí)施例105基-乙基)-酰胺(KE-100)111腿(300MHz，CDCl3)，57.93~7.85(m，2H)，7.38~7.30(m，2H)，7.02(t，J工7.92Hz，1H)，6.83(d，J-1.86Hz，lH)，6.20(dd，J-1.91,8.31Hz，lH)，5.61(d，J-8.16Hz，1H)，4.70(d,J7.86Hz，lH)，4.39(d，J=7.83Hz,1H)，3.90(d，J-7.31Hz，lH)，3.78~3.75(m，4H)，3.34~3.24(m，2H)，2.74(s，3H)，2.52~2.48(m，6H)，2.01~1.94(m，lH)，0.79(s，9H)，0.71~0.67(m，lH);"C腿(75MHz，CDC13)，5179.72，171.31，142.57，134.78，130.29，127.80，127.34，125.74，124.83，123.95，122.07，110.53，74.22，67.50，65.09，63.32，57.11，53.69，45.13，39.55，37.30，35.28，30.67，30.00。(外消旋的)6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)甲基-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[,咮-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸(3-嗎啉-4-^NMR(300MHz，CDCU，58.37(s，1H)，8.22(t，J=5.55Hz，lH)，7.42~7.28(m，2H)，7.03(t,J=7.45Hz，lH)，6.81(d，J=1.85Hz，lH)，6.63(dd，J=1.89,8.96Hz，1H)，5.87(d,J-8.14Hz，lH)，4.65(d，J-7.50Hz，1H)，4.37(d，J=7.45Hz，lH)，4.05~4.01(m，lH)，3.77~3.74(m，4H)，3.30~3.24(m，2H)，實(shí)施例106基-丙基)-酰胺2.69(s，3H)，2.46~2.39(沮，6H)，1.89~1.66(m,2H)，1.42~1.38(m，1H)，0.99-0.87(m，2H)，0.76(d，J=6.53Hz，3H)，0.69(d，J6.42Hz，3H)。(2'R，3S，4'S，5'R)6-氯-4'-(3-氯-2-氟—苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-l，2-二氫-螺環(huán)[巧|哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸[3-(2-羥基-NMR(300MHz,CDCl3),58.59(s，1H)，7.36-7.06(m，4H),6.84(d，J=1.8Hz,1H)，6.66(dd，Jl=7.5Hz，J2=1.5Hz,1H)，6.25(d，J=8.1Hz，1H)，4.43(d，J=4.8Hz，lH)，4.10(d，J-4.2Hz，1H)，3.79-3.41(m，11H)，1.84-1.81(m,2H)，1.51-1.46(m，1H)，0.93-0.89(m，lH)，0.81(s，9H);13CNMR(75MHz，CDCl》，5181.12，171.97，142.93，134.29，129.95，128.47，127.66，126.46，125.57，124.83，124.78，122.22，110.71，72.89，70.62，70.50，69.73，66.84，66.01，6309，62.11，43.74，37.57，30.74，30.34，29.43。(2'R，3S，4'S，5'R)6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2,2-二甲基-丙基)-5-氟-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)HI哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸{2-[3-(2，2，2-三氟-乙基)-5，6-二氫-8H-[1，2，4〗三唑并[4，3-A]吡喚實(shí)施例107乙氧基)-丙基]-酰胺<formula>formulaseeoriginaldocumentpage143</formula>實(shí)施例1087-基]-乙基}-酰胺<formula>formulaseeoriginaldocumentpage143</formula>腿(300MHz，CDCl3),58.98(s，1H)，7.58(m，1H)，7.29—7.03(m，3H),6.89(d，J=3.2Hz，1H)，6.02(d，J-8.1Hz,1H),4.42(d，J=6.1Hz，lH),4.08-4.03(m，4H)，3.96((U="5.6Hz，1H)，3.93-3.78(m，1H)，3.71-3.42(m，2H)，3.19-3.12(m，1H)，3.02-2.74(m，3H)，2.10(m，2H)，1.54-1.48(m，1H)，1.24(m，1H)，0.96-0.92(m，1H)，O.86(s，9H);13CNMR(75MHz，CDCl3)，5180.35，173.22，152.60，138.67，130.37,128.25，127.65，127.32，125.07，125.01，113.37，113.04，111.81，66.16,65.77，63.14，56.24，49.80，48.22，44.27，43.99，36.89,34.92，31.99，30.17，23.06,14.54。實(shí)施例109(2'R，3S，3"S，4'S，5'R)6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基一丙基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[-引哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸(3，4-二羥基-丁基)-酰胺<formula>formulaseeoriginaldocumentpage144</formula>-5'-甲酸[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙基]-酰胺NMR(300MHz,CDC13)，58.64(s，1H)，7.32-7.19(m，3H),7.08(t，J=7.9Hz，1H)，6.85(d，J-1.8Hz，1H)，6.68(dd，Jl=8.1Hz，J=1.8Hz，lH)，6.32(d，J-8.1Hz,1H)，4.46(d，J=8.0Hz，1H)，4.12-4.03(m，1H)，3.62—3.41(m，9H)，3.38(s，3H)，2.85(br，1H)MHz,CDC13)，5181.41，171.90，143.07，129.94,128.50，127.70,126.97，125.49，124.85，124.81，123.18，122.17，121.94，121.68，110.81，72.19，70.56，70.16，67.34，66.71，63.46，56.39，51.89，43.66,39.18，30.32，29.29(2'R，3S，4'S，5'R)4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二曱基-丙基)-2-氧代-1，2-二氬-螺環(huán)H哚-3，3'-吡咯烷-5'-甲酸(3-嗎啉-4-基-丙^NMR(300MHz，CDCU，57.45-7.04(m，7H)，6.83(t，J==7.5Hz，1H)，6.34(d,J=7.5Hz，1)，4.45(d，J=5.8Hz，1H)，4.11(d，J=5.9Hz，lH)，3.75-3.69(m，4H)，3.54(d，J-4.8Hz，1H)，3.42-3.40(m，2H),2.55-2.50(m，7H)，1.58-1.53(m，1H)，0.83(s，9H);13C腿(75MHz，CDC13)，5178.44，171.32，153.92，153.58,130.24，129.61，127.56，125.13，124.92，124.40，124.14，122.12，111.13，110.92，67.611.52-1.47(m，1H)，0.98—0.89(m，1H)，0.82(s,9H);腿(75實(shí)施例111基)-酰胺，67.33，66.48，62.19，57.18，53.83，52.55，44.72，35.91，30.63，30.40，30.19。實(shí)施例112(2'R，3S，4'S，5'R)6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-l'-甲基-2-氧代-l，2-二氫-螺環(huán)[-引咮-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙基]-酰胺在氬氣下，向?qū)嵤├?10的化合物(l咖ol)、20mLCH3CN、0.5mL37%的福爾馬林和1.1咖olNaBH3CN的溶液中加入2滴H0Ac。將所得的溶液在室溫下攪拌2小時(shí)，然后向其中加入50mL乙酸乙酯，將所得的混合物用NaHCCh溶液和鹽水進(jìn)行洗滌并用Na2S04對(duì)其進(jìn)行干燥。除去溶劑并將殘余物用柱進(jìn)行純化(收率~90%)。卞NMR(300MHz，CDCU58.01(br，1H)，7.52(m，1H),7.28-7.02(m，2H)，6.85-6.52(m，3H)，4.15(m，1H)，3.87(m，1H)，3.72-3.51(m，8H)，3.44(s，3H)，2.96(m，1H)，2.52(s，3H)，2.16(m，1H)，1.61-1.48(m，2H)，0.58(s，9H)。實(shí)施例113(2'R，3S，4'S，5'R)6-氯-4'-(3-氯-2-氣-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-1'-甲基-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[吲咪-3，3'-吡咯烷]-5'-曱酸(3-嗎啉-4-基-丙基)-酰胺實(shí)施例113的化合物是通過(guò)與實(shí)施例112的搮作相同的搮作來(lái)進(jìn)行制備的。-5'-甲酸(2-嗎啉-4-基-乙基)-酰胺實(shí)施例114的化合物是通過(guò)與實(shí)施例112的操作相同的操作來(lái)進(jìn)行制備的。^NMR(300MHz，CDC13)，S7.62~7.30(m，2H)，7.21-6.92(m，3H)，6.92-6.50(m，3H)，4.17(m，1H)，3.79-3.36(m，5H)，3.46~3.31(m，2H)，2.92(m，lH)，2.65~2.30(m，8H)，1.95(m，1H)，1.80~1.45(m，2H)，0.58(s，9H)。實(shí)施例115(2'R，3S，4'S，5'R)6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-5'-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙基氨基甲酖基]-2-氧代-1，2-二氬-螺環(huán)[吲哚-3，3'-吡咯烷]-l'-甲酸甲基酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage147</formula>實(shí)施例115的化合物是通過(guò)與實(shí)施例112的搮作相同的搮作來(lái)進(jìn)行制備的。^NMR(300MHz，CDCl3)，57.89(s，1H)，7.26-7.20(m，2H)，7.05-7.03(m，1H),6.84-6.82(m，2H)，4.85-4.82(m，1H)，4.11—4.05(m，1H)，3.97(s，3H)，3.81(s,3H)，3.58-3.47(m，8H)，2.59-2.44(m，3H)，1.81一1.75(m，lH)，1.34-1.30(m，lH)，0.85(s，9H);13CNMR(75MHz，CDCl3),5171.62，169.46，151.15，139.49，138.03，135.56，131.03，129.02，127.68，125.62，124.88，124.82，124.62，116.82，72.19，70.69，70.16,66.16,63.24，61.27，59.43，54.71，53.62，43.21，39.92，29.79，23.06。實(shí)施例116(1"R，2"S，2'R，3S，4'S，5'R)6-氯-4'-(3-氯—2-氟-基)一2'-(2,2-二甲基-丙基)-1'-(2-羥基-1，2-二苯基-乙基)-5'-羥基曱基-lH-螺環(huán)KI哚-3，3吡咯烷]-2-酮在氬氣下，向一個(gè)具有攪拌棒的100mL燒瓶中加入(2S，3R)-2，3，5，6-四氫-2，3-二苯基-1，4-惡?jiǎn)?6-酮(1.0g，3.96mmol)，3-E-(2-氟-3-氯)-亞節(jié)基-6-氯-l，3-二氫-吲咮-2-酮(4.75mmol)、2g新活化的4A分子篩、3，3-二甲基-丁醛(4.75咖ol)和甲苯(50mL)。將該混合物加熱至70t:并將其在該溫度下保持5小時(shí)。將該混合物冷卻至室溫并將分子篩濾出。在真空下除去溶劑并用色謙法對(duì)殘余物進(jìn)行純化，得到所述l，3-偶極產(chǎn)物。將所得的1，3-偶極產(chǎn)物(2.0mmol)溶解于乙醇/HC1(10mL)中并將所得的溶液回流一夜。在真空下除去溶劑并將殘余物用NaHC03/H20進(jìn)行中和并用乙酸乙酯對(duì)其進(jìn)行萃取。將有機(jī)相用化2304干燥。在真空下除去溶劑，將殘余物溶解于20mL乙醇中并十分小心地向其中加入10mmolNaBH"將所得的混合物回流一夜。在真空下除去溶劑，將殘余物用Na0H/H20進(jìn)行處理并用乙酸乙酯對(duì)其進(jìn)行萃取。將有機(jī)相用Na2S0,進(jìn)行干燥。在真空下除去溶劑并將殘余物用色謙法進(jìn)行純化，得到所述產(chǎn)物。111畫(huà)R(300MHz，CDCU，57.60~7.34(邁，11H)，7.14~7.09(m，1H)，7.04~6.93(m，2H)，6.82(t，J-7.98Hz，1H)，6.57(d，J1.82Hz，lH)，5.38(d，J-8.61Hz，1H)，4.47(d，J-8.40Hz，lH)，3.93(dd，J-2.6,12.0Hz,1H),3.74(d，J=9.21Hz，lH)，3.63(d，J-11.30Hz，1H)，3.11(t，J-9.60Hz,1H)，2.64(s，lH)，2.37(d，J=9.18Hz，lH)，1，84~1.75(m，1H)，1.15(d，J-14.44Hz，1H)，0.54(s，9H)。(1"R，2"S，2'R，3S，4'S，5'R)5'-(叔-丁基-二甲基-珪烷氣基甲基)-6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-1'-(2-羥基-1，2-二苯基-乙基)-lH-螺環(huán)[-引咮-3，3'-吡咯烷]-2-酮〖0283]向化合物116(1.0mmol)在10mLDMF中的溶液中加入TBDMSCl(l.lmmol)和咪唑(l.1咖ol)。將所得的溶液在室溫下攪拌2小時(shí)。在真空下除去溶劑，將殘余物用乙酸乙酯進(jìn)行溶解并用鹽水對(duì)其溶液進(jìn)行洗滌。將有機(jī)相用Na2S04進(jìn)行干燥。在真空下除去溶刑并將殘余物用色鐠法進(jìn)行純化，得到所述產(chǎn)物。!HNMR(300MHz，CDCl3)，57.62(d，J=6.98Hz，2H)，7.48(d，J=7.33Hz，2H),7.38~7.06(m，11H)，6.82(t，J8.16Hz，lH)，6.65(d，J=1.78Hz，1H)，5.54(d，J=5.84Hz,1H)，4.54(d，J=5.85Hz，1H)，4.23(d，J=7.34實(shí)施例117Hz，lH)，4.10(s，lH)，3.82(d，J=8.57Hz，1H)，3.73(dd，J=3.36,11.10Hz，lH)，3.49(d，J-10.23Hz，1H)，3.22(d，J=9.12Hz，lH)，1.89~1.81(m，lH)，1.34(d，J=15.60Hz，1H)，0.91(s，9H)，0.52(s,9H)、-0.05(s，3H)、-0.12(s，3H)。(1"R,2"S，2'R，3S，4'S，5'R)2，2-二甲基-丙酸2-[6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-5'-羥基甲基-2-氧代-1，2-二氬-螺環(huán)[吲哚-3，3'-吡咯烷]-1'-基]-l，2-二苯基-乙基酯向化合物116(1.0咖ol)在10mLCH2C12中的溶液中加入三甲基乙酰氯(l.5畫(huà)ol)和二異丙基乙基胺(2.0咖ol)并將所得的溶液在室溫下攪拌一夜。在真空下除去溶劑并將殘余物用乙酸乙酯溶解。向有機(jī)相中加入HCl(lmL)并將所得的混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。然后，向其中加入5mLNaHC03/H20并對(duì)這兩相進(jìn)行分離.將有機(jī)相用瓧2304進(jìn)行干燥。在真空下除去溶劑并將殘余物用色謙法進(jìn)行純化，得到所述產(chǎn)物。-l'-基]-l，2-二苯基-乙基酯實(shí)施例118實(shí)施例119<formula>formulaseeoriginaldocumentpage151</formula>向化合物118(1.0mmol)在10mLCH2C12中的溶液中加入CBr4(l.5咖ol)和Ph3P(l.5咖ol)并將所得的溶液在室溫下攪拌6小時(shí)，在真空下除去溶劑并將殘余物用色傳法進(jìn)行純化，得到所述產(chǎn)物。向2-嗎啉-4-基-乙醇(10腸1)在10mL無(wú)水THF中的溶液中加入NaH(lO鵬ol)并將所得的混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。然后，向其中加入化合物119(lmmol)并將所得的混合物在室溫下攪拌一夜。在真空下除去溶劑，將殘余物用乙酸乙酯溶解并用鹽水對(duì)該溶液進(jìn)行洗滌。將有機(jī)相用Na2S04進(jìn)行干燥。在真空下除去溶劑并將殘余物用色謙法進(jìn)行純化，得到所述產(chǎn)物。實(shí)施例120甲基)-1H-螺環(huán)[丐l咮-3，3'-吡咯烷]-2-酮<formula>formulaseeoriginaldocumentpage151</formula>-2-酮0在0'C下，向化合物120(2.0咖ol)在CH2Cl2-MeOH(10mL，l:1)中的溶液中加入Pb(OAc)4(1.34g，3.0咖ol)。將該反應(yīng)在下攪拌約5-10分鐘，將該溶液用一根短硅膠柱進(jìn)行過(guò)濾。在真空下除去溶刑并將殘余物用色謙法進(jìn)行純化，得到所述產(chǎn)物。!H醒R(300MHz，CDCU，58.12(s，1H)，7.39~6.71(m，6H)，4.18~3,40(m，11H)，2.63~2.47(m，7H)，1.29~1.13(m，2H)，0.85(s，9H)。實(shí)施例122(2'R，3S，4'S，5'R)6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-1'-甲基-5'-(2-嗎啉-4-基-乙氧基甲基)-lH-螺環(huán)[吲哚-3，3'-吡咯烷]-2-酮<formula>formulaseeoriginaldocumentpage152</formula>化合物122是用與實(shí)施例112的操作相同的操作來(lái)獲得的，!HNMR(300MHz，CDCl3)，57.50(d，J-8.66Hz，lH)，7.28~7.17(m，3H)，7.02~6.88(m，1H)，6.88(d，J1.80Hz，lH)，5.02~4.80(m，lH)，3.96(d，J"-11.15Hz，1H)，3.68(t，J4.50Hz，4H)，3.57~3.53(m，2H)，3.40~3.32(m，2H)，3.03(d，J=6.83Hz，lH)，2.55(s，3H)，2.48~2.40(m，6H)，1.76~1.68(m，1H)，1.47(d,J=15.10Hz，1H)，0.61(s，9H)。實(shí)施例123(2'R，3S，3"S，4'R，5'R)6-氯-4'一(3-氯-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)Hl咮-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸(3，4-二羥基-Hn丁基)-酰胺鹽酸鹽'HNMR(300{4Hz，CD3OD)，58.46(br，1H)，7.50~7.38(m，2H)，7.30~7.14(m，4H)，6.92(dd，J=1.93,8.13Hz，lH)，6.80(d，J=1.83Hz，1H)，5.08(d，J-10.84Hz，lH)，4.30~4.26(m，lH)，4.20(d，J=10.85Hz，lH)，3.51~3.31(m，8H)，2.05~2.00(m，1H)，1.64~1.46(m，3H)，0.85(s，9H);13CNMR(75MHz,CD30D),5178.78，165.54，143.64，135.89，135.44，131.84，131.77，130.54，127.53，127.18，125.57，122.68，122.27，110.67，69.67，66.09，63.31，63.23，61.13，60.58，56.20，41.53，36.90,32.66，29.85，28.49;EIMS:580.i(r+i)。實(shí)施例124(2'R，3S，3"S，4'R,5'R)6-氯-4'一(3—氯—苯基)-2'-(2,2-二甲基一丙基)-5-氟-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[丐l哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸(3，4-二羥基-丁基)-酰胺HQ-5'-甲酸(3-羥基3-TRITYLOXY-丁基)-酰胺o、々畫(huà)R(300MHz，CDCU，58.46(br,1H),7.46~7.23(m，15H)，7.18~7.09(m，3H)，6.90(d，J-7.00Hz，lH)，6.80(s，1H)，6.69(d，J-7.90Hz,1H)，6.19(d，J-7.59Hz，1H)，4.33(5.82Hz，lH),3.88(br，lH)，3.83(d，J-6.56Hz，lH)，3.65~3.55(m,2H)，3.34~3.10(m，4H)，2.71(br，lH)，1.73~1.48(m，3H)，0.96~0.91(m，lH)，0.84(s，9H)。(2'R，3S，4'S，5'R)6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二甲基一丙基)-5'-(嗎啉-4-羰基)-1H-螺環(huán)[丐l哚-3，3'-吡咯烷]-2-酮^NMR(300MHz，CDCl》，58.39(br，1H)，7.27~7.13(m,2H)，7.05~6.99(m，1H)，6.87(d，J-1.57Hz，1H)，6.72(dd，J=1.43,8.08Hz,1H),6.49(d，J-8.05Hz，1H)，4.61-4.54(m,1H)，4.39(d，J=8.04Hz，lH)，3.80~3.45(m，8H),2.97(m,1H)，1.80(br，lH)，1.51~1.42(m，1H)，0.90~0.87(m，1H)，0.84(s，9H);13CNMR(75MHz，CDCh)，5181.47，168.74,142.90，134.17，130.24，128.44，128.25，126.69，125.37，125.11，122.38，122.31，110.75，68.96，67.26，67.17，64.38,63.97，52.84，46.62，43.21，31.99，30.58，30.24。(2'R，3S，3"S，4'R，5'R)6-氯-4'-(3-氯-苯基)-2'-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氬-螺環(huán)O引哚-3，3'-吡咯烷-5'-甲酸(3，4-二幾實(shí)施例126<formula>formulaseeoriginaldocumentpage155</formula>實(shí)施例127<formula>formulaseeoriginaldocumentpage155</formula>基)-酰胺鹽酸鹽<formula>formulaseeoriginaldocumentpage156</formula>-5'-甲酸(3，4-二羥基-丁基)-酰胺卞NMR(300MHz，DMSO-d6)，7.73(t，J=6.69Hz，lH)，7.44~7.4.29~4.28(m，3H)，3.醇，J510.44(br，lH)，8.ll(br,1H),15(m，2H)，6.88~6.82(m，2H)，=9.60Hz，lH)，3.32~3.00(m，4H)，2.60~2.50(m，1H)，1.52~1.17(m,3H)，0.82(s，9H)。EIMS:570.2(M++1)。實(shí)施例129(2'R,3S，3"S，4'R，5'R)4'-(3-渙-苯基)-6-氯-2'-(2，2-二甲基-丙基)-5-氟-2-氧代-1，2-二氫-螺環(huán)[-引哚-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸(3，4-二^麗R(300MHz，CDCh)，59.47(br，1H)，7.72(t，J=5.59Hz，lH)，7.37(d，J=7.84Hz，1H)，7.18(s，1H)，7.11(t，J=7.77Hz，1H)，6.95(d，J=7.74Hz，1H)，6.78(d，J=9.04Hz，1H)，5.85(d,J=8.96Hz，lH)，4.60(br，lH)，4.35(d，J=4.94Hz，lH)，3.85~3.40(m，8H)，1.75~1.65(m，2H)，1.51~1.43(m，1H)，0.90~0.88(m，1H)，0.83(s，9H);"C畫(huà)R(75MHz,CDC13)，180.62,174.19，155.61，141.86，138.55,132.04，131.33，130.66，127.12，123.26，121.14，114.20，111.91，70.47，67.14，66.98，65.20，63.49，55.96，44.34，36.97，33.23，30.55，30.27。(2'R，3S，3"S，4'R，5'R)6-氯-4'-(3-氯-2-氟-苯基)-2'-(2，2-二曱基-丙基)-2-氧代-l，2-二氬-螺環(huán)[丐|咮-3，3'-吡咯烷]-5'-甲酸(4-羥基-丁羥基-丁基)酰胺HO實(shí)施例130基)一酰胺<formula>formulaseeoriginaldocumentpage157</formula>-5'-甲酸(3，4-二羥[a〗25D71.l(c，l.OMeOH);]H證(300MHz，CD潔D》,59.74(s，lH)，7.74(t，J=5.8Hz，1H)，7.43(dd，J=2.0，7.1Hz，1H),7.33-6.84(m,5H)，4.42(d，J-8.4Hz,1H)，4.05-3.98(m，1H)，3.91(d，J-8.lHz，1H)，3.70-3.33(m,6H)，3.04(br，2H)，1.53-1.45(m，3H),0.98-.091(m，lH),0.84(s，9H);13C腿(75MHz,CD3COCD3)，5180.40，172.20，158.73，155.46，144.00，136.86，133.30，131.19，129.97，128.64，126.92，121.36，109.91，69.97，67.33，67.22，66.73，64.40，58.92,44.49,36.39,33.63,29.40.ESIMS[M+Na]-574.1。用實(shí)施例2所述的FP結(jié)合試驗(yàn)來(lái)檢驗(yàn)所合成的一些化合物抑制MDM2和p53之間相互作用的能力。對(duì)化合物Ke-43(實(shí)施例41)、Ke-61(實(shí)施例65)、PMDM6(實(shí)施例2)、和Ke-63(實(shí)施例88)對(duì)天然p53肽的作用進(jìn)行了試驗(yàn)(實(shí)施餌2)。表明化合物Ke-43、PMDM6、和Ke-63對(duì)天然p53肽的效力更強(qiáng)，其具有范圍為低nM至低于nM范圍的Ki值(圖實(shí)施例131基-丁基)-酰胺實(shí)施例132P53-MDM2相互作用的竟?fàn)幮砸种?589)。實(shí)施例133MDM2抑制刑對(duì)P53-MDM2相互作用的瓦解進(jìn)行免疫共沉淀(Co-IP)/免疫印跡分析試驗(yàn)來(lái)對(duì)Ke-43對(duì)p53-M畫(huà)2相互作用的影響進(jìn)行評(píng)估。在收獲和用冷PBS洗滌一次后，通過(guò)在包含lmM苯基甲磺酰氯和蛋白酶抑制劑雞尾酒的冷Co-IP緩沖液(50mMTris(pH7.5)，150mMNaCl，lmMBDTA(pH8.0)，0.5%NP-40)中進(jìn)行聲處理來(lái)使HCT116結(jié)腸癌細(xì)胞溶解。然后，將進(jìn)行了聲處理的溶胞產(chǎn)物在12，000xg下在4€下離心15分鐘。將包含2mg蛋白的上清液在不存在或存在Ke-43的情況下在4t:下培養(yǎng)1小時(shí)，然后向其中加入與抗-p53抗體(FL-393，SantaCruz)或者非特異性抗體軛合的瓊脂糖小珠。在將其在4匸下混合2小時(shí)后，將該瓊脂糖小珠用冷Co-IP緩沖液洗滌3次，將其在樣品緩沖液中煮沸，然后進(jìn)行SDS-PAGE,用使用對(duì)抗p53和MDM-2蛋白的小鼠單克隆抗體的蛋白印跡分析來(lái)探測(cè)存在的p53和MDM2。濃度漸增的Ke-43通過(guò)抗-p53抗體使得MDM2的免疫沉淀降低，表明Ke-43破壞了p53和MDM2之間的相互作用(圖10)。實(shí)施例134MDM2抑制劑的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制作用將RK0(野生型p53)、HCT116(野生型p53)、和HT-29(突變型p53)結(jié)腸癌細(xì)胞系以3-4xl()3個(gè)細(xì)胞/孔的密度接種到96-孔平底細(xì)胞培養(yǎng)板中并將其在存在化合物的情況下培養(yǎng)4天。在用濃度漸增的化合物進(jìn)行處理后，用WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2，4二磺基苯基)-2H-四唑翁單鈉鹽(DojindoMolecularTechnologiesInc.，Gaithersburg，馬里蘭)測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)抑制速率。以10%的終濃度向各孔中加入WST-8并將這些板在37n下培養(yǎng)2-3小時(shí)。在板式讀數(shù)器中在450nm下測(cè)量這些樣品的吸光度(MolecularDevice-TECANULTRA)。通過(guò)對(duì)用所述化合物進(jìn)行處理的細(xì)胞的吸光度和未進(jìn)行處理的細(xì)胞的吸光度進(jìn)行比較來(lái)計(jì)算將細(xì)胞生長(zhǎng)抑制50%的化合物濃度(ICs。)。表明對(duì)于表達(dá)野生型p53的癌細(xì)胞而言，化合物Ke-43(實(shí)施例41)是一種有效的生長(zhǎng)抑制劑(圖11)。對(duì)表達(dá)野生型p53的癌細(xì)胞的特異性顯著高于表達(dá)突變型p53(HT-29)的癌細(xì)胞，其分別比其高18-倍(HCT116)和13-倍(M0)(圖11)。實(shí)施例135MDM2抑制劑對(duì)P53以及其目標(biāo)基因產(chǎn)物MDM2和P21表達(dá)的作用將癌細(xì)胞用試驗(yàn)化合物或0.1%DMS0處理24小時(shí)。通過(guò)胰蛋白酶消化來(lái)收集這些細(xì)胞并用冷磷酸鹽緩沖的鹽水，pH7.5(Invitrogen，Carlsbad，CA)對(duì)其進(jìn)行洗滌。將這些細(xì)胞在包含2mM原釩酸鈉、1mM苯基甲磺酰氟和蛋白酶抑制劑雞尾酒(RocheAppliedScience,Indianapolis,IN)的冰冷的溶解緩沖液(50mMTris(pH7.5),150mMNaCl，lmMEDTA(pH8.0)，25mM氟化鈉，1%NP-40和0.1%SDS)中溶解30分鐘。接下來(lái)，將這些細(xì)胞提取物在12，OOOxg下在4'C下離心10分鐘從而獲得一種澄清的溶胞產(chǎn)物。用Bio-Rad染料來(lái)對(duì)蛋白進(jìn)行估算。將包含35jig蛋白的細(xì)胞溶胞產(chǎn)物在4-20%tris-甘氨酸凝膠(Invitrogen，Carlsbad,CA)上進(jìn)行拆解并將其轉(zhuǎn)移到聚(偏二氟乙埽)膜上。用抗-p53(Ab-6，OncogeneResearchProducts,Boston,MA)、抗-MDM2(SMP14，SantaCruzBiotechnology,SantaCruz，CA)和抗-p21(BDBiosciences,SanDiego，CA)小鼠單克隆抗體在所述轉(zhuǎn)移膜上進(jìn)行蛋白的免疫檢測(cè)。用P-肌動(dòng)蛋白抗體(Sigma,StLouis,M0)來(lái)對(duì)蛋白負(fù)載進(jìn)行評(píng)估。當(dāng)將RK0(野生型p53)和HT-29(突變型p53)結(jié)腸癌細(xì)胞系用Ke-43(實(shí)施例41)處理24小時(shí)時(shí)，Ke-43僅在表達(dá)野生型p53的RK0細(xì)胞中誘導(dǎo)了p53以及其目標(biāo)基因-產(chǎn)物的蓄積(圖12)。實(shí)施例136MDM2抑制刑誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡和細(xì)胞凋亡將RKO(野生型p53)和HT-29(突變型p53)結(jié)腸癌細(xì)胞系和CCD-18Co正常結(jié)腸成纖維細(xì)胞在6-孔陪替氏培養(yǎng)皿中用劑量漸增的Ke-43或Ke-61處理4天。進(jìn)行臺(tái)盼藍(lán)染料排除試驗(yàn)以測(cè)定所述抑制刑誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的能力。在處理4天后，收獲漂浮和粘連的細(xì)胞并用0.2%臺(tái)盼藍(lán)染料溶液(Sigma,StLouis,M0)對(duì)其進(jìn)行染色。各處理都是一式三份地進(jìn)行的并且對(duì)至少I(mǎi)OO個(gè)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。將被染藍(lán)的細(xì)胞或者形態(tài)上不健康的細(xì)胞記為死亡細(xì)胞。為了對(duì)細(xì)胞凋亡進(jìn)行評(píng)估，通過(guò)propidiumiodide(PI)染色來(lái)對(duì)用或不用試驗(yàn)抑制刑進(jìn)行了處理的細(xì)胞中的亞二倍體DNA含量進(jìn)行分析。在用冷PBS洗滌一次后，將這些細(xì)胞在70%乙醇中在-20t:下固定1天。然后，將該進(jìn)行了乙酵固定的細(xì)胞用PBS洗滌兩次并用在PBS中包含50ug/ml的propidiumiodide(PI)和100|jg/ml的RNAse的染色溶液在室溫下在黑暗中對(duì)其染色20分鐘。用CellQuest軟件，通過(guò)流式細(xì)胞計(jì)來(lái)進(jìn)行細(xì)胞收獲和亞二倍體DNA含量的分析。在使用Ke-43時(shí)，僅表達(dá)野生型p53的癌細(xì)胞對(duì)其發(fā)生響應(yīng)進(jìn)行細(xì)胞凋亡(圖13)。實(shí)施例137MDM2抑制劑對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞的細(xì)胞周期進(jìn)行的影響通過(guò)混入溴脫氣尿苷(BrdU)，然后用FITC-標(biāo)記的抗-BrdU抗體進(jìn)行染色測(cè)定S-相細(xì)胞和根據(jù)制造商的指導(dǎo)(BDBiosciences,SanJose，CA)用7-氨基放線菌素D(7-AAD)進(jìn)行染色測(cè)定總DNA-含量來(lái)對(duì)RKO(野生型p53)和HT-29(突變型p53)結(jié)腸癌細(xì)胞系和CCD-18Co正常結(jié)腸成纖維細(xì)胞中的細(xì)胞周期進(jìn)程進(jìn)行評(píng)估。簡(jiǎn)單地說(shuō)，在培養(yǎng)一夜后，將癌細(xì)胞和正常細(xì)胞用試驗(yàn)化合物或者在不使用試驗(yàn)化合物的情況下處理22小時(shí)，然后再將其與10jiMBrdU—起培養(yǎng)2小時(shí)。對(duì)細(xì)胞進(jìn)行收集，固定并用FITC-標(biāo)記的抗-BrdU和7-AAD對(duì)其進(jìn)行染色。用流式細(xì)胞計(jì)對(duì)細(xì)胞周期分布進(jìn)行分析。收集細(xì)胞并用CellQuest軟件(BDBiosciences)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。Ke-43在表達(dá)野生型p53的RKO痼細(xì)胞和CCD-18Co正常人結(jié)腸成纖維細(xì)胞中都劑量依賴(lài)性地誘導(dǎo)了S-相的缺失(圖14)。但是，Ke-43對(duì)表達(dá)突變型p53的HT-29細(xì)胞的細(xì)胞周期進(jìn)程沒(méi)有可察覺(jué)的影響(圖14)。無(wú)活性的對(duì)照抑制刑Ke-61對(duì)所有這些試驗(yàn)細(xì)胞都沒(méi)有顯著影響。實(shí)施例138保護(hù)正常細(xì)胞不受用MDM2抑制劑進(jìn)行的化療影響的保護(hù)作用將PrEC正常前列腺上皮細(xì)胞接種到6孔板中并將其與Ke-63(ljiM和2.5yM)—起培養(yǎng)24小時(shí)，然后向其中加入1mMTAXOL(紫杉醇)再培養(yǎng)2天。用臺(tái)盼藍(lán)來(lái)測(cè)定細(xì)胞活力。數(shù)據(jù)表明當(dāng)將正常前列腺上皮細(xì)胞用Ke-63預(yù)處理時(shí)，這些細(xì)胞受到了保護(hù)不受紫杉醇的影響(圖15)現(xiàn)在已經(jīng)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了充分描述，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)清楚的是其同樣可以在不影響本發(fā)明范圍以及其任何實(shí)施方案的情況下，在一些情況、制劑和參數(shù)的很寬的等同范圍內(nèi)來(lái)進(jìn)行。這里所列舉的所有專(zhuān)利、專(zhuān)利申請(qǐng)和公開(kāi)物在這里都被全部引入作為參考。權(quán)利要求1.式I的化合物或其可藥用的鹽或前體藥物，其中X是CH、O、N、或S，其中當(dāng)X是O或S時(shí)R8不存在；Y是O、S、或NR′；R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7獨(dú)立地是H或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、CO2R′、OCOR′、CONR′R″、NR″COR′、NR′SO2R″、SO2NR′R″、(O＝NR′)NR″R、或NR′R″；或者R7與R5或R6中的一個(gè)形成一種芳基、環(huán)烷基、或雜環(huán)基團(tuán)；R8是H或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、CO2R′、OCOR′、CONR′R″、SO2NR′R″、或(C＝NR′)NR″R；R9是一至四個(gè)獨(dú)立地選自H、F、Cl、Br、I、OH、NO2、烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、OR′、CO2R′、OCOR′、CONR′R″、NR″COR′、NR′SO2R″、SO2NR′R″、(C＝NR′)NR″R、或NR′R″的基團(tuán)；和R′、R″和R各自獨(dú)立地是H或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、或雜環(huán)；或者R′和R″、或者R″和R形成一種環(huán)；或者當(dāng)R3和R4中的一個(gè)是CONRR′時(shí)，則R和R′中的另一個(gè)還可以是(CH2)n-R′、(CH2)n-NR′R″、(CH2)n-NR′COR″、(CH2)n-NR′SO2R″、(CH2)n-NR′(C＝NR″)NR、(CH2)n-COOH、(CH2)n-COOR′、(CH2)n-CONR′R″、(CH2)n-OR′、(CH2)n-SR′、(CH2)n-COR′、(CH2)n-SO3H、(CH2)n-SONR′R″、(CH2)n-SO2NR′R″、(CH2CH2O)n-(CH2)m-OH、(CH2CH2O)n-(CH2)m-OR′、(CH2CH2O)n-(CH2)m-COOR′、(CH2CH2O)n-(CH2)m-CONR′R″、(CH2CH2O)n-(CH2)m-NR′R″、(CH2CH2O)n-(CH2)m-NR′COR″、(CH2CH2O)n-(CH2)m-NR′(C＝NR″)NR、(CH2CH2O)n-(CH2)m-NR′SO2R″、(CH2)p-(CH2CH2O)n-(CH2)m-OH、(CH2)p-(CH2CH2O)n-(CH2)m-OR′、(CH2)p-(CH2CH2O)n-(CH2)m-COOR′、(CH2)p-(CH2CH2O)n-(CH2)m-CONR′R″、(CH2)p-(CH2CH2O)n-(CH2)m-NR′R″、(CH2)p-(CH2CH2O)n-(CH2)m-NR′COR″、(CH2)p-(CH2CH2O)n-(CH2)m-NR′(C＝NR″)NR、(CH2)p-(CH2CH2O)n-(CH2)m-NR′SO2R″、-CO-R′、-SOR′、或-SO2R′；和n、m、和p各自獨(dú)立地是1-6。2.具有式II或式III的如權(quán)利要求1所述的化合物:或其可藥用的鹽或前體藥物。3.具有式IV的如權(quán)利要求1所述的化合物:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>4.具有式V或式VI的如權(quán)利要求3所述的化合物:或其可藥用的鹽或前體藥物。5.具有式VII的如權(quán)利要求1所述的化合物:或其可藥用的鹽或前體藥物。6.具有式VIII或式IX的如權(quán)利要求5所述的化合物:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>或其可藥用的鹽或前體藥物。7.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中R:和R2中的一個(gè)是任選地被取代的芳基或雜芳基。8.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中R!和R2中的一個(gè)是環(huán)烷基、直鏈或支鏈烷基、酰胺或酯。9.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中Rs和FU中的一個(gè)是Cm烷基、芳基、或雜芳基。10.具有式X的如權(quán)利要求1所迷的化合物:,R5HX或其可藥用的鹽或前體藥物，其中R,。和Ru獨(dú)立地是H、0H或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基，環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、(CH上-R'、(CH2)n-NR'R"、(CH丄-NR'COR"、(CH2)n-NR'S02R"、(CH2)n-NR'(C-NR")NR"'、(CH丄-C00H、(CH2)n-C00R'、(CH2)n-C0NR'R"、(CH2)n-0R'、(CH2)n-SR'、(CH2)n—C0R'、(CH2)n-S03H、(CH丄-SONR'R"、(CH2)n-S02NR'R"、(CH2CH20)n-(CH2)n-OH、(CH2CH20)n—(CH2)ra-0R'、(CH2CH20)n—(CH2)—COOR'、(CH2CH20)n—(CH2)n-CONR'R"、(CH2CH20)n-(CH2)B-NR'R"、(CH2CH20)n-(CH丄-NR'COR"、(CH2CH20)n-(CH2)m-NR'(C-NR")NR'〃、(CH2CH20)n-(CH2)ra-NR'S02R"、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)-0H、(CH2)p—(CH2CH20)n-(CH2)-0R'、(CH2)p-(CH馬)n-(CH2)m-C00R'、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)n-CONR'R"、(CH2)P-(CH2CH20)n-(CH丄-NR'R"、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH丄-NR'COR"、(CH2)p—(CH2CH20)n-(CH2)m-NR'(C=NR")NR'〃、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH丄-N跳R"、-CO-R'、一S0R'、或-S。2R';和n、m、和p各自獨(dú)立地是l-6。11.具有式XI-XXVI中的一種的如權(quán)利要求10所述的化合物卩IO10lji10<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>或其可藥用的鹽或前體藥物.12.具有式XXIX的如權(quán)利要求1所述的化合物:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>或其可藥用的鹽或前體藥物，其中Z是O、NH、NR'、CH2,CHR'、或CR'R";Rw是H、OH或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、(CH丄-R'、(CH丄-NR'R"、(CH上-NR'COR"、(CH2)n-NR'S02R"、(CH丄-NR'(C-NR")NR'〃、(CH2)n-COOH、(CH2)n-COOR'、(CH2)n-CONR'R"、(CH2)n-0R'、(CH2)n—SR'、(CH2)n—COR'、(CH2)n-S03H、(CH丄-SONR'R"、(CH2)n-S02NR'R"、(CH2CH20)n-(CH2)m-0H、(CH2CH20)n-(CH2)m-0R'、(CH2CH20)n-(CH2)-COOR'、(CH2CH20)n-(CH2)m-CONR'R",(CH2CH20)n-(CH2)m-NR'COR"、(CH2CH20)n-(CH2)ra-NR'S02R"、(CH2)P—(CH2CH20)n—(CH2)m—OR'、(CH2)p-(CH2CH20)n—(CH2)CONR'R'(CH2CH20)n—(CH2)n-!m'ir(CH2CH20)n-(CH2)(ONR")NR'〃(CH2)p—(CH2CH20)n-(CH2)m—0H(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)m-COOR'、(CH2)p-(CH2CH20)n—(CFUm-NR'R"f,〃(CH2)p—(CH2CH20)n—(CH2)NR'COR"(CH2)p—(CH2CH20)n—(CH2)n—NR'(C-NR")冊(cè)'(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)B-NR'S02R";-CO-R'、-SOR'、-S02R';和n、m、和p各自獨(dú)立地是l一6。13.具有式XXX-XLV中的一種的如權(quán)利要求12所述的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>或其可藥用的鹽或前體藥物,14.具有式xxvn或式xxvin的如權(quán)利要求i所述的化合物:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>或其可藥用的鹽或前體藥物，其中Ri。和Rn獨(dú)立地是H、OH或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、(CH丄-R'、(CH丄-NR'R，'、(CH丄-NR'COR"(CH2)n-NR'S02R"、(CH2)n-NR'(ONR")NR'〃、(CH》廣C00H、(CH丄-COOR'(CH2)n-C0NR'R"、(CH2)n-0R'、(CH2)n-SR'、(CH2)n-C0R'、(CH2)n-S03H(CH2)n-S0NR'R"、(CH2)n-S02NR'R"、(CH2CH20)n-(CH2)n-0H(CH2CH20)n_(CH2)m-0R'、(CH2CH20)n-(CH2)-O)NR'R"、(CH2CH20)n-(CH2)ra-NR'COR"、(CH2CH20)n-(CH2)m-NR'S02R!l、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)-0R'、(CH2)p-(CH線O)n-(CH2)-CONR'R"(CH2CH20)n-(CH2)n-C00R'(CH2CH20)n-(CH2)-NR'R"(CH2CH20)n-(CH2)(ONR")冊(cè)"'(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)ra-0H(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)邁-C00R'、(CH2)p—(CH2CH20)n—(CH2)n-NR'R"(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)rNR'COR"(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)0-膨(ONR")NR〃'(CH2)P—(CH2CH20)n-(CH2;L—NR'S02R"、-C0-R'、-SOR'、或一S(U';和n、m、和p各自獨(dú)立地是l-6.15.具有式XLVI的如權(quán)利要求1所述的化合物:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>或其可藥用的鹽或前體藥物。16.具有式XLVII的如權(quán)利要求1所述的化合物:XLVH或其可藥用的鹽或前體藥物，其中Rn是一至四個(gè)獨(dú)立地選自H、F、Cl、Br、I、0H、N02、烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、OR'、C02R'、0C0R'、CONR'R"、NR"COR'、NR'S02R"、S02NR'R"、(ONR')NR"R〃'、或NR'R"的基團(tuán);和n是0、1、或2。17.具有式XLVIII的如權(quán)利要求1所述的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>或其可藥用的鹽或前體藥物。18.具有式XLIX-LXIV中的一種的如權(quán)利要求17所述的化合物:或其可藥用的鹽或前體藥物。19.具有式LXV的如權(quán)利要求1所述的化合物:或其可藥用的鹽或前體藥物，其中R,。和Ru獨(dú)立地是H、OH或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、(CH2)n-R'、(CH2)n-NR'R"、(CH2)n-NR'C0R"、(CH2)n—NR'S02R"、(CH2)n—NR'(C=NR")NR'〃、(CH2)n—C00H、(CH2)n-C00R'、(CH2)n-CONR'R"、(CH2)廣OR'、(CH2)n-SR'、(CH2)n-C0R'、(CH2)n-S03H、(CH丄-SONR'R"、(CH2)n-S02NR'R"、(CH2CH20)n-(CH2)ra-0H、(CH2CH20)n-(CH2)ffi-OR'、(CH2CH20)n—(CH2)^-C00R'、(CH2CH20)n-(CH2)ra-C0NR'R"、(CH2CH20)n-(CH2)ffi-NR'R"、(CH2CH20)n-(CH2)m-NR'COR"、(CH2CH20)n-(CH2)m-NR'(ONR")NR〃'、(CH2CH20)n-(CH2)ra-NR'S02R"、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH》a-0H、(CH2)p—(CH2CH20)n-(CH2)OR'、(CH2)p—(CH2CH20)n-(CHJn-C00R'、(CH2)P-(CH2CH20)n-(CH2)m-CONR'R"、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)n-NR'R"、(CH2)p-(CH2CH20)n—(CH2)m—NR'COR"、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)m—NR'(C-NR")NR〃'、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)m-NR'S02R"、-CO-R'、-SOR'、或-S02R';和n、m、和p各自獨(dú)立地是l-6。20.具有式LXVI和LXVII中的一種的如權(quán)利要求19所述的化合物:LXVI或其可藥用的鹽或前體藥物,IJ(VH21.具有式LXVIII和LXIX中的一種的如權(quán)利要求1所述的化合物:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>或其可藥用的鹽或前體藥物，其中Z是O、NH、NR'、CH2、CHR'、或CR'R";Rn是H、OH或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯4i、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、(CH2)n-R'、(CH2)n-NR'R"、(CH2)n-NR'C0R"、(CH2)n-NR'S02R"、(CH2)n-NR'(C-NR")NR"'、(CH2)n-COOH、(CH2)n_COOR'、(CH2)n-CONR'R"、(CH2)n-OR'、(CH2)n-SR'、(CH丄-COR'、(CH2)n-S03H、(CH2)「SONR'R"、(CH2)n-S02NR'R"、(CH2CH20)n-(CH2)n-0H、(CH2CH20)n-(CH2)NR'COR"、(CH2CH20)n-(CH2)m-NR'(C=NR")NR〃'、(CH2CH20)n_(CH2)-NR'S02R"、(CH2)p—(CH2CH20)n—(CH2)m-0H、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)m-OR'、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)ffl-COOR'、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)m-CONR'R"、(CH2)p—(CH2CH20)n-(CH2)m—NR'R"、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)m-NR'COR"、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)ra-NR'(ONR")NR〃'、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)-NR'S02R";-CO-R'、-SOR'、-S02R';和n、m、和p各自獨(dú)立地是l-6。22.—種制備式x化合物的方法，其包括a)將式1的化合物與式2的化合物縮合，從而形成式3的化合物;b)將式3的化合物與式4的化合物和式5的化合物縮合，從而形成式6的化合物；和<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>c)將式6的化合物用氧化刑進(jìn)行處理，從而形成一種式X的化合物;(CH2CH20)n—(CH2)ra-0R'(CH2CH20)n-(CHKONR'R"(CM20)n-(CH2)ra-COOR'(CH2CH20)n—線h-NR'R"<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>X其中R!和Rs獨(dú)立地是H或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、C02R'、0C0R'、C0NR'R"、NR"C0R'、NR'S02RB、S02NR'R"、(C-NR')NR"R〃'或NR'R";Rs是一至四個(gè)獨(dú)立地選自H、F、Cl、Br、I、0H、N02、烷基、環(huán)就基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、0R'、C02R'、0C0R'、C0NR'R"、NR"C0R'、M'S02R"、S02NR'R"、(C-NR')NR"R'〃、或NR'R"的基團(tuán)；IU和Ru獨(dú)立地是H、0H或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、(CH2)n-R'、(CH2)n-NR'R"、(CH丄-NR'C0R"、(CH2)n-NR'S02R"、(CH2)n-NR'(C-NR")NR'〃、(CH2)n-C00H、(CH2)n-C00R'、(CH2)n-C0NR'R"、(CH2)n-OR'、(CH2)n-SR'、(CH2)n-COR'、(CH2)n-S03H、(CH2)n-S0NR'R"、(CH2)n-S02NR'R"、(CH2CH20)n-(CH2)邁-0H、(CH2CH20)n-(CH2)ra-0R'、(CH2CH20)n-(CH2)加-C00R'、(CH2CH20)n-(CIOra-CONR'R"、(CH2CH20)n-(CH2)頃-NR'R"、(CH2CH20)n-(CH2)m-NR'C0R"、(CH2CH20)n—(CH2)ra-NR'(ONR")NR'〃、(CH2CH20)n—(CH2)-NR'S02R"、(CH2)p—(CH2CH20)n-(CH2)—0H、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)OR'、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)邊-C00R'、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)m-CONR'R"、(CH2)p—(CH2CH20)n—(CH2)m—NR'R"、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)m-NR'COR"、(CH2)p-(CH2CH20)n—(CH2)m—NR'(C=NR")NR'〃、(CH2)p-(CH2CH20)n—(CH2)m—NR'S02R"、-CO-R'、一S0R'、或-S。2R';<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>n、m、和p各自獨(dú)立地是l-6;和R'、R"和R〃'各自獨(dú)立地是H或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、或雜環(huán)；或者R'和R"、或者R"和R〃'形成一種環(huán)。23.—種制備式LXV化合物的方法，其包括a)將式16的化合物與式2的化合物縮合，從而形成式17的化合物;b)將式17的化合物與式4的化合物和式5的化合物進(jìn)行縮合，從而形成式18的化合物；和<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>c)將式18的化合物用氧化劑進(jìn)行處理，從而形成一種式LXV的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>其中R,和R5獨(dú)立地是H或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、C02R'、0C0R'、C0訓(xùn)"、M',C0R'、N跳R"、S02NR'R"、(C-NR')NR"R〃'、或NR'R";R4是H;R,是一至四個(gè)獨(dú)立地選自H、F、Cl、Br、I、0H、N02、烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、0R'、C02R'、0C0R'、C0歸"、NR"COR'、NR'S02R"、S02NR'R"、(CR')NR"R"'、或腦";R,。和Rn獨(dú)立地是H、0H或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、(CH丄-R'、(CH丄-NR'R"、(CH丄-NR'COR"、(CH上-N跳R"、(CH2),-NR'(ONR")NR'〃、(CH丄-C00H、(CH丄-C00R'、(CH2)n-C0NR'R"、(CH2)r-0R'、(CH2)n-SR'、(CH2)n-C0R'、(CH2)n-S03H、(CH丄-S0NR'R"、(CH2)n-S02NR'R"、(CH2CH20)n-(CH2)ffl-0H、(CH2CH20)n-(CH2)m-0R'、(CH2CH20)n-(CH2)邁-C00R'、(CH2CH20)n-(CH2)m—CONR'R"、(CH2CH20)n-(CH2)^-NR'R"、(CH2CH20)n-(CH2)ffl-NR'C0R"、(CH2CH20)n-(CH2)ffl—NR'(ONR")NR〃'、(CH2CH20)n-(CIOm-NR'S0R"、(CH2)p-(CH2CH20)n—(CH2)ra—0H、(CH2)p-(CH2CH20)n—(CH2),，-OR'、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)rCOOR'、(CH2)p—(CH2CH20)n-(CH2)n—CONR'R"、(CH2)p—(CH2CH20)n-(CH2)ra-NR'R"、(CH2)p—(CH2CH20)n-(CH2),,,-NR'COR"、(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2),廠NR'(C-NR")NR"'、(CH2)P—(CH2CH20)n-(CH2)-NR'S02R"、-CO-R'、一S0R'、或-S。2R';n、m、和p各自獨(dú)立地是l-6;和R'、R"和R〃'各自獨(dú)立地是H或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、或雜環(huán)；或者R'和R"、或者R"和R'〃形成一種環(huán)。24.—種制備式XXIX化合物的方法，其包括a)將式3的化合物與式4的化合物和式5的化合物縮合，從而形成式7的化合物；b)將式7的化合物在存在酸的情況下進(jìn)行加熱，然后向其中加入還原劑，從而形成式8的化合物；c)將式8的化合物與阻滯劑，然后與三甲基乙酕氯，然后與酸縮合，從而形成式10的化合物；。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>d)將式10的化合物用鹵化劑進(jìn)行處理，從而形成式11的離代化合物;e)將式11化合物的卣代基團(tuán)用R!。0Na或1^。冊(cè)2置換，從而形成式12的化合物；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>f)將式12的化合物用氧化劑進(jìn)行處理，從而形成式13的化合物;g)將式13的化合物用烷化劑烷基化，從而形成式XXIX的化合物;R:和R5獨(dú)立地是H或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、歐、0COR'、C0NR'R"、NR"C0R'、N跳"、S02NR'R"、(ONR')NR"R'〃、或NR'R";R7是任選地被取代的烷基、鏈烯基、炔基、C02R'、0C0R'、C0NR'R"、S02NR'R"、或(C')NR"R'〃;IU是一至四個(gè)獨(dú)立地選自H、F、Cl、Br、I、0H、N02、烷基、環(huán)鍵基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、0R'、歐、0C0R'、C0醒"、NR"C0R'、NR'S02R"、S0廁'R"、(C-冊(cè)')NR"R〃'、或NR'R"的基團(tuán)；R'、R"和R〃'各自獨(dú)立地是H或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、或雜環(huán)；或者R'和R"、或者R"和R〃'形成一種環(huán)；R^是H、OH或任選地被取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、環(huán)鏈烯基、炔基、芳基、雜環(huán)、(CH丄-R'、(CH丄-冊(cè)'R"、(CH丄-服'COR"、(CH2)n-NR'S02R"、(CH2)n-NR'(C-皿")NR〃'、(CH2)n-C00H、(CH2)n-C00R'、其中:(CH2)n-CONR'R"、(CH2)'「0R'、(CH2)n-SR'、(CH2)n-COR'、(CH2)n-S03H、(CH2)n-SONR'R"、(CH2)n-S02NR'R"、(CH2CH20)n-(CH2)—0H、(CH2CH20)n—(CH2)ffl-0R'、(CH2CH20)n-(CH2)raCONR'R"、(CH2CH20)n-(CH2)ra-NR'COR"、(CH2CH20)n—(CH2)m—NR'S02R"、(CH2)p—(CH2CH20)n-(CH2)OR'、(CH2)p—(CH2CH20)n-(CH2)「CONR'R(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)「NR'COR(CH2)p-(CH2CH20)n-(CH2)NR'(C=NR")NR〃'、(CH2)P-(CH2CH20)n-(CH2),,-NR'S02R";-CO-R'、-SOR'、-S02R';Z是O、NH、皿'、CH2、CHR'、或CR'R";和n、m、和p各自獨(dú)立地是l-6。25.—種包含如權(quán)利要求1所述的化合物和可藥用栽體的藥物組合物。26.—種抑制細(xì)胞生長(zhǎng)和/或分裂、在細(xì)胞中誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和/或誘導(dǎo)細(xì)胞周期停滯的方法，其包括將所述細(xì)胞與如權(quán)利要求1所述的化合物進(jìn)行接觸。27.—種使細(xì)胞對(duì)另外的物質(zhì)敏感的方法，其包括將所述細(xì)胞與如權(quán)利要求1所述的化合物進(jìn)行接觸。28.如權(quán)利要求27所述的方法，其還包括將所述細(xì)胞與另外的物質(zhì)進(jìn)行接觸。29.如權(quán)利要求28所迷的方法，其中所迷的另外的物質(zhì)是一種化療劑。30.如權(quán)利要求28所述的方法，其中所述的另外的物質(zhì)是輻射.31.—種治療、改善或預(yù)防動(dòng)物的病癥的方法，其包括給所述動(dòng)物使用治療有效量如權(quán)利要求1所述的化合物。32.如權(quán)利要求31所述的方法，其還包括使用另外的物質(zhì)。33.如權(quán)利要求32所述的方法，其中所述的另外的物質(zhì)是一種化療劑。34.如權(quán)利要求32所述的方法，其中所述的另外的物質(zhì)是輻射，35.如權(quán)利要求31所述的方法，其中所述的病癥是過(guò)度增生性疾病。36.如權(quán)利要求35所述的方法，其中所述的過(guò)度增生性疾病是癌癥，37.如權(quán)利要求32所述的方法，其中在給予所述另外的物質(zhì)之前給予所述的如權(quán)利要求1所述的化合物。38.如權(quán)利要求32所述的方法，其中在給予所述另外的物質(zhì)之后給予所述的如權(quán)利要求1所述的化合物。39.如權(quán)利要求32所述的方法，其中將所述的如權(quán)利要求1所述的化合物與所述的另外的物質(zhì)同時(shí)給藥。40.—種抑制細(xì)胞中p53或與p53有關(guān)的蛋白和MDM2或與MDM2有關(guān)的蛋白之間的相互作用的方法，其包括使所迷細(xì)胞與如權(quán)利要求1所述的化合物進(jìn)行接觸。41.一種抑制包含功能性p53或與p53有關(guān)的蛋白的過(guò)度增生細(xì)胞生長(zhǎng)的方法，其包括使所述細(xì)胞與如權(quán)利要求1所述的化合物進(jìn)行接觸。42.—種治療、改善或預(yù)防特征在于在動(dòng)物體內(nèi)表達(dá)功能性p53或與p53有關(guān)的蛋白的過(guò)度增生性疾病的方法，其包括給所述動(dòng)物使用治療有效量如權(quán)利要求1所述的化合物。43.—種使正常細(xì)胞耐受化療劑或一些治療的方法，其包括使所迷細(xì)胞與如權(quán)利要求1所述的化合物進(jìn)行接觸。44.如權(quán)利要求43所述的方法，其中所述的正常細(xì)胞包含野生型p53。45.—種保護(hù)患有過(guò)度增生性疾病的動(dòng)物體內(nèi)的正常細(xì)胞不受化療劑或一些治療的毒副作用影響的方法，其包括給所述動(dòng)物使用如權(quán)利要求1所述的化合物。46.如權(quán)利要求45所述的方法，其中所述的正常細(xì)胞包含野生型p53。47.如權(quán)利要求45所述的方法，其中所述的過(guò)度增生性疾病是癌癥。48.如權(quán)利要求47所述的方法，其中所述的癌癥包含p53的突變或缺失。49.一種治療、改善、或預(yù)防由于使用化療刑或進(jìn)行治療所造成的疾病或情況的方法，其包括將如權(quán)利要求1所迷的化合物和化療刑共同給藥于進(jìn)行治療的動(dòng)物或者在進(jìn)行治療的同時(shí)共同給予如權(quán)利要求1所述的化合物。50.如權(quán)利要求49所述的方法，其中所迷的病癥或情況是粘膜炎、口腔炎、口腔干燥、胃腸病癥、或脫發(fā)。51.如權(quán)利要求49所述的方法，其中在給予所述化療刑或進(jìn)行治療前給予所述的如權(quán)利要求1所述的化合物。52.—種包含如權(quán)利要求1所述化合物的藥盒。53.如權(quán)利要求52所述的藥盒，其還包含用于將所述化合物給藥于動(dòng)物的i兌明。54.如權(quán)利要求52所述的藥盒，其還包括另外的物質(zhì)。55.如權(quán)利要求54所述的藥盒，其中所述的另外的物質(zhì)是一種化療劑。56.如權(quán)利要求53所述的藥盒，其中所述的說(shuō)明是用于說(shuō)明將所迷化合物給藥于患有過(guò)度增生性疾病的動(dòng)物。57.如權(quán)利要求56所述的藥盒，其中所述的過(guò)度增生性疾病是癌癥.全文摘要本發(fā)明涉及可以發(fā)揮p53和MDM2之間相互作用的抑制劑功能的小分子。本發(fā)明還涉及這些化合物用于抑制細(xì)胞生長(zhǎng)、誘導(dǎo)細(xì)胞死亡、誘導(dǎo)細(xì)胞周期停滯和/或增加細(xì)胞對(duì)另外的物質(zhì)的敏感性的應(yīng)用。文檔編號(hào)C07D487/10GK101160314SQ200680012907公開(kāi)日2008年4月9日申請(qǐng)日期2006年2月22日優(yōu)先權(quán)日2005年2月22日發(fā)明者D·秦,G·王,K·丁,S·庫(kù)馬,S·王,S·邱,Y·魯,Z·尼科羅夫斯塔-科勒斯塔申請(qǐng)人:密執(zhí)安州立大學(xué)董事會(huì)