專利名稱：制備3α(β)-7α(β)-二羥基-6α(β)-烷基-5β-膽烷酸的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及制備3a-7a ((β) -二羥基-601 (β)-烷基-5β-膽烷酸的方法。
現(xiàn)有技術
類法尼醇X受體(FXR )最初是孑瓜兒核受體(orphan nuclear receptors )， 其首次從鼠肝cDNA文庫被鑒定(B.M Forman等，Ce〃. 81:687-693
(1995 ))，它們是配體激活的轉錄因子核受體的家族成員，包括類固醇、 類視黃醇和曱狀腺激素的受體(D. J. Mangelsdorf等，Ce〃. 83:841-850
(1995 ))。
如WO 00/37077所描述的，幾種天然型的膽汁酸(特別是鵝膽酸、脫 氧膽酸、石膽酸(litocholic acids )以及與牛石黃酸和甘氨酸的相關軛合物) 結合在一起并以生理濃度激活FXR。還認為FXR參與調(diào)節(jié)膽汁酸和膽固 醇的內(nèi)穩(wěn)態(tài)。
WO 02/072598描述了也是類法尼醇X受體激動劑的、具有通式(A ) 的3-01,7-01-二羥基-601-烷基-(烯丙基)-5(3-膽烷酸
<formula>complex formula see original document page 11</formula>
其中R'是乙基、丙基或烯丙基。
特別的是，具有式(I)(其中Rb乙基)的化合物的效力比最有效的
天然FXR激動劑大兩個數(shù)量級。
特別的是，將具有通式(A)的化合物用于增加HDL膽固醇、減少 甘油三酯以預防和治療起因于膽汁郁積的肝疾病，所述化合物使用包括以 下步驟的方法制備
i)使式(II)的3-a-羥基-7-酮基-5p-膽烷酸與二氫吡喃反應<formula>complex formula see original document page 12</formula>
以獲得相應的式(B)的3-a-四氫吡喃氧基-7-酮基-5p-膽烷酸<formula>complex formula see original document page 12</formula>
ii)使化合物(B)與式R'Br (其中R'具有上述含義)的烷基溴反應，以 獲得化合物(C )<formula>complex formula see original document page 13</formula>
iii)使用硼氫化鈉還原化合物(C)得到(D)
<formula>complex formula see original document page 13</formula>(D)
iv)水解(D)得到化合物(A)。
盡管這種方法只包括較少的步驟，但其存在一系列的不足之處。
首先，所有步驟的反應產(chǎn)物均要在色譜柱上進行純化，這是非常昂貴 的分離方法，不能以工業(yè)規(guī)^莫實現(xiàn)。
而且，步驟(ii)的反應收率極低(12-13%)，其使得總收率下降很 多，低于3.5%。
此外，仍然是該步驟，其將已知為致癌劑的六亞甲基膦酸酰胺 (hexamethyienphosphonamide )作為還原齊'H吏用。
發(fā)明概述
目前，申請人發(fā)現(xiàn)了能夠獲得通式(I)的兩種化合物的方法，<formula>complex formula see original document page 14</formula>其中6位和7位的虛線鍵(--)表示取代基可位于a位或(3位，選自以 下組成的類別
i)具有通式(IA)的3-a，7-a-二羥基-6-a-烷基-5(3-膽烷酸
<formula>complex formula see original document page 14</formula>(ii)具有通式(IB)的3-a，7-a-二羥基-6-a-烷基-5(3-膽烷酸
iii)具有通式(IC)的3-α, 7- β - 二羥基-6-α-烷基-5 β -膽烷酸
<formula>complex formula see original document page 15</formula> (IC)
其中R是直鏈或支鏈的C1-C5烷基，所述方法包括下述步驟
a)在酸性環(huán)境中的甲醇中酯化3a-羥基-7-酮基-5p-膽烷酸(II)
<formula>complex formula see original document page 15</formula>
以獲得3α-羥基-7- 酮基 -5 β -膽烷酸甲酯(III),
<formula>complex formula see original document page 15</formula> (III)
b )使用三曱基氯硅烷將3 a -羥基-7-酮基-5 β -膽烷酸曱酯(III)曱硅烷基化，以獲得相應的3-a-三曱基甲硅烷氧基-7-酮基-5β-膽烷酸酯(IV),<formula>complex formula see original document page 16</formula>
c)在強堿存在下，使用三甲基氯硅烷將步驟(b)中獲得的3-a-三甲基甲 硅烷氧基-7-酮基-5β-膽烷酸甲酯(IV)曱硅烷基化，以獲得3a-,7a-二-三 甲基甲硅烷氧基-6-烯-5β-膽烷酸曱酯(V),<formula>complex formula see original document page 16</formula>
d)使3a-,7a-二-三甲基甲硅烷氧基-6-烯-5β-膽烷酸曱酯(V)與其中R具 有上述含義的醛R-CHO和路易斯酸反應，以獲得3a-羥基-6-亞烷基-7-酮 基-5β-膽烷酸曱酯(VI)，
<formula>complex formula see original document page 16</formula>e)水解3a-羥基-6-亞烷基-7-酮基-5(3-膽烷酸曱酯得到3a-羥基-6-亞烷基-7-酮基-5(3-膽烷酸(VII)，
<formula>complex formula see original document page 17</formula>(VII)
f)在含水的堿性環(huán)境下，使用Pd/C氬化3a-羥基-6-亞烷基-7-酮基-5(3-膽 烷酸得到3a-羥基-6卩-烷基-7-酮基-5卩-膽烷酸
<formula>complex formula see original document page 17</formula> (VIII)
g)在含水的堿性環(huán)境下，任選地熱處理中間產(chǎn)物(Vin)以獲得相應的3a-羥基-6a-烷基-7-酮基-5p-膽烷酸(IX )
<formula>complex formula see original document page 17</formula>(IX)
h)根據(jù)以下備選操作條件中的一種來將中間產(chǎn)物(VIII)或(IX)的(7) 位酮基還原為7-羥基
h')使用金屬氫化物將3α-羥基-6α-烷基-7-酮基-5β-膽烷酸化合物(IX) 還原為3α-，7α-二-羥基-6α-烷基-5β-膽烷酸(IA ),
h")在鈉和醇存在下，還原3α-羥基-6α-烷基-7-酮基-5β-膽烷酸化合物(IX)并獲得3α-,7β-二-羥基-6a-烷基-5β-膽烷酸(IC );
h"')在金屬氳化物存在下，將3α-羥基-6β-烷基-7-酮基-5β-膽烷酸 (VIII)還原為3α-,7a-二-羥基-6β-烷基-5β-膽烷酸(IB )。
根據(jù)本發(fā)明的方法，特別是獲得3α-,7α-二-羥基-6a-烷基-5(3-膽烷酸 (IA)的方法，存在相對于上述的已知方法而言大量的優(yōu)勢。事實上，雖然該方法預期包括較多步驟，但是其允許以確定令人滿意的總收率 (24.6%)來獲得式(I)的產(chǎn)物，該收率在任何情況下確定高于已知方法的收率。此外，不需要通過色譜法對中間產(chǎn)物進行純化并且避免了試劑如高毒性的六亞甲基膦酸酰胺的使用。
最后，如上所示地使用本發(fā)明的方法，可能獲得式(IB)和(IC)的 新化合物，所述化合物可以特別作為肝保護劑使用，用于預防和治療起因 于膽汁郁積的肝疾病。
因此，本發(fā)明涉及藥物組合物，所述藥物組合物包括作為主要活性成 分的酸(I-B)和酸(I-C)的至少一種及其藥學上可接受的鹽和合適的賦 形劑和/或稀釋劑。
發(fā)明詳述
在本發(fā)明方法的步驟(a)中，3a-羥基-7-酮基-5p-膽烷酸(II)的酯 化反應優(yōu)選在30和60℃之間溫度下的酸環(huán)境中進行，其中所述酸優(yōu)選為 甲磺酸。
在本發(fā)明方法的步驟(b)中，所預期的3a-羥基-7-酮基-5P-膽烷酸 曱酯的3a-位羥基的曱硅烷基化反應在氳離子受體存在下，優(yōu)選于非極性 溶劑、更優(yōu)選于芳香族溶劑、甚至更優(yōu)選于甲苯中進行，所述氬離子受體優(yōu)選由脂族、脂環(huán)族或雜芳族類型的叔胺組成，甚至更優(yōu)選地，所述叔胺
為三乙胺。根據(jù)特定的優(yōu)選實施方案，3-a-三甲基曱硅烷氧基-7-酮基-5(3-
膽烷酸曱酯在用于步驟(c)之前不進行分離和純化，正相反，該步驟使
用了蒸發(fā)反應溶劑后獲得的、含油的殘留物，其中所述反應溶劑事先通過 水萃取除去鹽。
在本發(fā)明方法的步驟(c)中所預期的隨后的7位酮基的曱硅烷基化 優(yōu)選使用由氨獲得的堿性酰胺或脂族仲胺的堿性酰胺作為強堿進行。根據(jù) 特別優(yōu)選的溶液，將二異丙氨基鋰作為強堿使用。該反應優(yōu)選在極性的非 質(zhì)子溶劑中進行，并且甚至更優(yōu)選地，所述溶劑為四氬呋喃。
根據(jù)優(yōu)選的實施方案，步驟(c)中獲得的產(chǎn)物在用于隨后的步驟(d) 之前不進行分離和純化，正相反，該步驟使用了通過蒸發(fā)反應溶劑獲得的、 含油的殘留物，其中所述反應溶劑事先使用水萃取鹽。步驟(d)優(yōu)選在 非極性溶劑中進行，這種溶劑優(yōu)選選自烷基卣，并且甚至更優(yōu)選為二氯甲 烷。步驟(d)優(yōu)選在其中R具有期望含義的醛R-CHO存在下，使用三 氟化硼合乙醚作為路易斯酸，于-90和-6(TC之間的溫度下進行2至4小時 的時段。隨后，反應混合物在0和35。C之間的溫度下反應1至6小時。
在該情況下依然，步驟(d)中獲得的產(chǎn)物在用于隨后的步驟(e)之 前不進行分離和純化，而是使用了蒸發(fā)反應溶劑后獲得的、含油的殘留物， 其中所述反應溶劑已經(jīng)使用水萃取除去鹽和水溶性組分。
步驟(e)優(yōu)選在堿性氬氧化物存在下，于醇溶劑(優(yōu)選曱醇)中進 行，甚至更優(yōu)選地，所述堿性氫氧化物為30%的氫氧化鈉水溶液。
溫度優(yōu)選在20和60。C之間。
步驟(e)的反應產(chǎn)物優(yōu)選在酸化后，可能于水存在下，通過有機溶 劑的結晶作用進行分離，所述有機溶劑優(yōu)選選自乙酸乙酯和丙酮。
步驟(f)中預期的氬化反應優(yōu)選在1和3個大氣壓之間的壓力下， 于氫氧化鈉水溶液存在的含水環(huán)境中進行。當本發(fā)明的方法預期包括步驟 (g)時，特別是必須制備通式(IA)或(IC)的化合物時，該步驟優(yōu)選 在來自氫化反應的反應混合物上直接進行并且優(yōu)選通過以95和105。C之間的溫度加熱所述反應數(shù)小時使得6-β-乙基差向異構化為6-α-乙基而進行。
優(yōu)選使用以下的操作條件來從所述反應混合物中分離來自步驟(f) 或可能的步驟(g)的反應產(chǎn)物。
l)加入水溶液，該水溶液已通過過濾除去催化劑并優(yōu)選使用85%的 磷酸進行酸化，
2 )向步驟(1 )獲得的混合物中加入乙酸乙酯，并以40和70。C之間的溫度加熱整個混合物。
3)然后將其冷卻至0和30。C之間的溫度，所獲得的沉淀經(jīng)過濾并隨 后干燥。
當根據(jù)步驟(h，)中預期的操作條件來進行步驟(h)的還原以獲得 式(IA)的化合物時，或者根據(jù)步驟(h"，)中預期的操作條件來進行步 驟(h)的還原以獲得本發(fā)明方法的式(IB)的化合物時，金屬氫化物優(yōu) 選為硼氫化鈉并且所述還原反應在堿性的水溶液中進行。該反應優(yōu)選在 70和105"C之間的溫度下進行1小時。
可選地，當根據(jù)步驟(h")中預期的操作條件來進行步驟(h)的還 原時，其優(yōu)選在溶劑回流的溫度下，于直鏈或支鏈的d-Cs醇、甚至更優(yōu) 選于仲丁醇中進行。優(yōu)選根據(jù)以下的操作條件來分離由步驟(h，)或(h"，) 獲得的產(chǎn)物
1，)向反應混合物中加入水不混溶的溶劑，所述水不混溶的溶劑優(yōu)選 為非極性溶劑，如二氯曱烷，并優(yōu)選使用磷酸來酸化該混合物，
2，)攪拌并允許靜置所獲得的混合物，其后除去水相，
3 ，)使用水和氨從有機相中萃取產(chǎn)物，
4，)向由此獲得的水相中加入磷酸并在20和50。C之間的溫度下攪拌 整個混合物數(shù)小時，
5，)通過過濾回收并干燥沉淀產(chǎn)物。
本發(fā)明的方法特別適用于制備其中R優(yōu)選為曱基的式(I)的化合物。
根據(jù)本發(fā)明方法制備具有式(I)且特別是其中R-曱基的(IA)、 (IB) 和(IC)的化合物的一些實例的給出是用于說明而不是限制的目的。
實施例1 -用于制備其中R-曱基的、式(IA)的3a-,7a-二羥基-6a-乙基 -5(3-膽烷酸的方法
a) 3-a-羥基-7-酮基-5B-膽烷酸甲酯(III)的制備
將17.0 kg的3-a-羥基-7-酮基-5卩-膽烷酸、68 kg的曱醇和0.17 kg的 曱磺酸裝入反應器中。然后將反應混合物加熱1小時至30-60℃并加入25.5 kg的軟化水(demineralised water)。隨后攪拌獲得的混合物，冷卻至 20-25℃，直至獲得良好沉淀，然后進一步冷卻至0-15℃。過濾沉淀物并 使用水與曱醇的混合物洗滌，在約40℃的烘箱中進一步干燥。從而獲得 15kg的3cx-羥基-7-酮基-5l3-膽烷酸甲酯(III)。化學計量收率85.2%。
b) 3a-三甲基曱硅烷氣基-7-酮基-5B-膽烷酸甲酯(IV)的制備
將15.0 kg的3 a-羥基-7-酮基-5 P -膽烷酸曱酯、45 kg的甲苯、7.5 kg 的三乙胺、7.5kg的三甲基氯硅烷裝入反應器中。
將混合物加熱至70-80℃并于攪拌下保持在該溫度約1小時，然后加 入37.5kg水并在15-20℃攪拌該混合物。隨后分離并除去下層的水相。濃縮有機相直到獲得含油的殘留物為止，向其中加入15 kg的四氫吹喃。
由此獲得的含有3a-三曱基曱硅烷氧基-7-酮基-5(3-膽烷酸曱酯(IV) 的溶液于以下的步驟(c)中使用。
c) 3a-,7a-二-三曱基曱硅烷氣基-5B-膽烷酸甲酯(V)的制備
將30 kg的四氫呋喃裝載入反應，然后將混合物的溫度升至-90℃和 -60℃之間，向其中加入9.8 kg 100%的二異丙氨基鋰和9.3 kg的三甲基氯 硅烷，并且向其中傾倒入(b)制備的、含有3-a-三甲基曱硅烷氧基-7-酮 基-5p-膽烷酸曱酯的全部四氫呋喃溶液。然后將混合物在-60和-90℃之間的溫度下攪拌約1小時。隨后將4.50 kg的碳酸氬鈉溶液和60 kg水傾入 其中并在0-10℃攪拌混合物，分離并除去下層的水相。然后濃縮下層的相 直到獲得含油的殘留物為止，向其中加入45.0Kg的二氯曱烷。
將由此獲得的3a-,7a-二-三曱基曱硅烷氧基-5p-膽烷酸甲酯溶液送至 下一步驟(d)。
d) 其中R-甲基的3a-羥基-6-亞乙基-7-酮基-5B-膽烷酸甲酯(VI)的制備
將來自前述實施例的3a,7-a-二-三曱基曱硅烷氧基-5β-膽烷酸曱酯的 全部二氯曱烷溶液裝入反應器中并冷卻至-90至-60℃,然后加入1.97 kg 乙醛和5.5 kg三氟化硼合乙醚。在攪拌下使反應混合物在上述溫度保持2 至4小時。之后，將反應混合物加熱至30-35℃并在該溫度保持約2至4 小時。然后加入60kg水。攪拌得到的混合物并分離水相。將由此獲得的 含有3a-羥基-6-亞乙基-7-酮基-5l3-膽烷酸曱酯的溶液送至下一步驟。
e) 其中R=CH3的3a-羥基-6-亞乙基-7-酮基-5B-膽烷酸(VII)的制備
將先前步驟中獲得的3-a-羥基-6-亞乙基-7-酮基-5p-膽烷酸酯的二氯 曱烷溶液裝入反應器中。然后通過蒸餾除去溶劑直到獲得含油的殘留物為 止，向其中加入15 kg的曱醇。
隨后將反應混合物加熱至45-50℃并將7.5kg 30%的氮氧化鈉傾入，同 時將反應混合物在上述溫度保持約1小時。然后加入30kg水。接著加入 45.0 kg的二氯曱烷和7.5 kg的85%磷酸。分離下層的有機相并且隨后除 去水相。通過蒸餾來從有機相中除去溶劑直到獲得糊狀的殘留物為止。向 殘留物中加入約37.5 kg的乙酸乙酯并將混合物加熱至65-75℃,然后冷卻 至10-35℃。將所獲得的沉淀經(jīng)過濾并用乙酸乙酯洗滌后進行干燥。
獲得了 8.0kg的3-a-羥基-6-亞乙基-7-酮基-5P-膽烷酸，其中基于3-a-羥基-7-酮基-5p-膽烷酸甲酯計算的化學計量收率為51.8%。
f) 其中R-CHi的3-a-羥基-6-(3-乙基-7-酮基-5!3-膽烷酸(IX)的制備
將8.0 kg的3-a-羥基-6-a-亞乙基-7-酮基-5p-膽烷酸、48.0 kg水、5.1 kg 30%的氫氧化鈉、0.80 kg 5%的釔/碳裝入反應器中。反應混合物在1和3 個大氣壓之間的壓力下氫化，直到指示氫不再吸收為止。
g) 3a-羥基-6-a-乙基-7-酮基-5B-膽烷酸(IX)的制備 在反應結束時，將混合物加熱至95-105℃并在該溫度保持數(shù)小時，以使301-羥基-6-(3-乙基-7-酮基-5P-膽烷酸(VIII )轉化為所期望的3a-羥基-6-a-乙基-7-酮基-5(3-膽烷酸(IX)的相應差向異構體。
過濾懸浮液并回收催化劑。向過濾的溶液中加入5.1 kg的85%-疇酸、 9.6kg的乙酸乙酯，并將反應混合物加熱至40和7(TC之間的溫度。反應 混合物冷卻至0和30。C之間的溫度并通過過濾回收沉淀物。沉淀物在用 乙酸乙酯洗滌后，于65。C的烘箱中干燥。獲得了 5.0 kg的3a-羥基-6a-乙 基-7-酮基-{3-膽烷酸?；瘜W計量收率62.2%。<formula>complex formula see original document page 23</formula>3-a-羥基-6-a-乙基-7-西同基-56-膽烷酸(IX) C26H4204 m.p.(熔點)185國188。C
使用儀器Bruker DRX-ADVANCE-400Mhz對溶解于CD3OD中的樣品 進行'H-NMR分析，得出以下結果
0.62 ppm (s, C18甲基的3H); 0.76ppm， J=7.4Hz (t, C26曱基的3歐 0.89ppm J= 6.5Hz, (d, C21甲基的3g); U8ppm (s， C19甲基的3出，2.21 ppm (m, 2g, C23的國CHr); 2.50ppm, J=11.17Hz (甲t, C8上的2.85ppm J =13Hz和J- 5.4Hz (dd C6中的lg), 3.50ppm (m, C3上的Cg).
使用儀器Bruker DRX-ADVANCE-200Mhz對溶解于CD3OD和CDC13 混合物中有待分析的樣品進行BCNMR分析，得出以下結果
212.82ppm (C7); 179.44ppm (C24), 71.26ppm (C3), 54.77ppm (C17), 51.98ppm(C14),18.84ppm(C21)， 18.34ppm (C26), 12.09ppm (C18).
h，)其中11=曱基的、式(I)的3a,7a-二羥基-6a-乙基-5(3-膽烷酸的制
釜
將5.0 kg的3a-羥基-6a-乙基-7-酮基-卩-膽烷酸、5.0 kg水、2.50 kg氫 氧化鈉裝載入反應器中。然后將混合物加熱至70-105。C并將溶解于2.50 kg 水中的硼氫化鈉混合物傾入，隨后使混合物保溫l小時，冷卻至室溫，向 其中加入10.0 kg的軟化水、15.0 kg的二氯曱烷和3.00 kg的85%石舞酸。 攪拌混合物，分離下層的有機相并丟棄水相。
通過冷卻有機溶液獲得粗品的結晶。將該產(chǎn)物溶解于50 kg的軟化水 和1.10 kg的30%氨水中。然后攪拌混合物直到獲得完全溶解的溶液為止， 并將該混合物保持在20-50°C ，將1.50 kg的磷酸傾入。始終在20和50°C 之間的溫度下攪拌沉淀混合物，然后通過過濾回收沉淀物，用水洗滌并干 燥。獲得了 4.50kg式(I)的3a-,7a-二-羥基-6a-乙基-5P-膽烷酸，其中R= 曱基。化學計量收率89.6%。
實施例2 其中R=曱基的、式(IB)的3-a,7a-二-羥基-6(3-乙基-5P-膽烷酸
的制備
使用與實施例1步驟(h，)中描述的相同操作條件來還原根據(jù)實施例 1步驟(a) - (f)中的描述進行制備并根據(jù)步驟(g)中的描述進行分離 的式(VIII)的3-a-羥基-6p-乙基-7酮基-5P-膽烷酸。然后獲得了式(IB) 的3-a，7a-二-羥基-6p-乙基-5p-膽烷酸，其中R二曱基。
分析
<formula>complex formula see original document page 24</formula>
3-a,7-a-二-羥基-6-B-乙基-5B-膽烷酸(IB)
C26H4404m.p. 115-118 ℃
使用儀器Bruker DRX-ADVANCE-400Mhz對溶解于CD3OD3中的樣品進行1H-NMR分析，得出以下結果
0.70ppm (s, C18曱基的3H); 0.95ppm (s, C19曱基的3H，l.OOppm, J=7,65Hz (t， C26甲基的3H；1.45ppm J= 3.5Hz, (d, C21曱基的3出；2.25 ppm (m, 2旦，C23的-CH2－); 3.40ppm (m， C3上的CH), 3.62ppm (m， C7上的CH).
使用儀器Bruker DRX-ADVANCE-200Mhz對溶解于CD3OD和CDC13 混合物中有待分析的樣品進行"CNMR分析，得出以下結果
177.91 ppm (C24), 72.18ppm (C3)， 71.68ppm (C7); 55.79ppm (C17)， 50.83ppm (C14),18.17ppm (C21), 14ppm (C26), U.60ppm (C18).
實施例3 其中R=曱基的、式(IC)的3-a，7β-二-羥基-6a-乙基-5β-膽烷酸
的制備
根據(jù)實施例1步驟(a)-(g)中描述的操作條件來制備中間產(chǎn)物(IX), 以相對化合物(IX) 3:1和3:2之間的摩爾量向其中加入事先溶解有鈉的 仲丁醇，直到完全溶解。獲得了其中11=曱基的、式(IC)的3-a,7β-二-鞋基-6a-乙基-5β-膽烷酸。
分析
3-a,7-β-二-羥基-6-a-乙基-5β-膽烷酸(IC )
C26H4404 m.p. 217-219℃
<formula>complex formula see original document page 25</formula>
使用儀器Bruker DRX-ADVANCE-400Mhz對溶解于CD3OD中的樣品 進行'H-NMR分析，得出以下結果
0.56ppm (s, C18曱基的3出;0.73ppm, J=7.4Hz (t, C26甲基的3H);0.81 ppm (s， C19曱基的3H)， 0.82ppm J= 4.60Hz, (d， C21曱基的3H); 2.21 ppm (m， 2H, C23的-CH2-)， 3.80ppm (br, C3, C7上羥基以及(:24羧基的O-H,); 3.10ppm (m, C7上的CH；3.44ppm (m， C3上的CH).
使用儀器Bruker DRX-ADVANCE-200Mhz對溶解于CD3OD和CDC13 混合物中有待分析的樣品進行13C NMR分析，得出以下結果
179ppm (C24), 75.65ppm (C7), 71.87ppm (C3), 56ppm (C17), 55ppm (C14), 18.4ppm(C21)， 12.24ppm(C26)， 11.20ppm (C18).
權利要求
1.一種制備具有通式(I)的3α-7α(β)-二羥基-6α(β)-烷基-5β-膽烷酸的方法，其中6位和7位的虛線鍵(----)表示取代基可位于α位或β位，選自以下組成的種類i)具有通式(IA)的3-α，7-α-二羥基-6-α-烷基-5β-膽烷酸ii)具有通式(IB)的3-α，7-α-二羥基-6-β-烷基-5β-膽烷酸iii)具有通式(IC)的3-α，7-β-二羥基-6-α-烷基-5β-膽烷酸其中R是直鏈或支鏈的C1-C5烷基，所述方法包括下述步驟a)在酸性環(huán)境下于甲醇中酯化3α-羥基-7-酮基-5β-膽烷酸(II)，以獲得3α-羥基-7-酮基-5β-膽烷酸甲酯(III)，b)使用三甲基氯硅烷將3-α-羥基-7-酮基-5β-膽烷酸甲酯(III)甲硅烷基化，以獲得相應的3-α-三甲基甲硅烷氧基-7-酮基-5β-膽烷酸甲酯(IV)，c)在強堿存在下，使用三甲基氯硅烷將步驟(b)中獲得的3α-三甲基甲硅烷氧基-7-酮基-5β-膽烷酸甲酯(IV)甲硅烷基化，以獲得3α-，7α-二-三甲基甲硅烷氧基-6-烯-5β-膽烷酸甲酯(V)，d)使3-α-，7α-二-三甲基甲硅烷氧基-6-烯-5β-膽烷酸甲酯(V)與其中R具有上述含義的醛R-CHO和路易斯酸反應，以獲得3-α-羥基-6-亞烷基-7-酮基-5β-膽烷酸甲酯(VI)，e)水解3-α-羥基-6-亞乙基-7-酮基-5β-膽烷酸甲酯(VI)，得到3-α-羥基-6-亞烷基-7-酮基-5β-膽烷酸(VII)，f)在含水的堿性環(huán)境中，使用Pd/C氫化3-α-羥基-6-亞烷基-7-酮基-5β-膽烷酸，得到3-α-羥基-6β-烷基-7-酮基-5β-膽烷酸(VIII)，g)任選地，在含水的堿性環(huán)境中熱處理中間產(chǎn)物(VIII)，以獲得相應的3 α-羥基-6α-烷基-7-酮基-5β-膽烷酸(IX)，h)根據(jù)以下備選操作條件中的一種來將中間產(chǎn)物(VIII)或(IX)的(7)位酮基還原為7-羥基h’)使用金屬氫化物將3α-羥基-6α-烷基-7-酮基-5β-膽烷酸(IX)還原為3α-，7α-二-羥基-6α-烷基-5β-膽烷酸(IA)；h”)在金屬鈉和醇存在下，還原3α-羥基-6α-烷基-7-酮基-5β-膽烷酸(IX)并獲得3α-，7β-二-羥基-6α-烷基-5β-膽烷酸(IC)；h″′)在金屬氫化物存在下，將3α-羥基-6β-烷基-7-酮基-5β-膽烷酸(VIII)還原為3α-，7α-二-羥基-6β-烷基-5β-膽烷酸(IB)。
2. 根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(a)的酯化在30 和60℃之間的溫度下于酸環(huán)境中進行。
3. 根據(jù)權利要求2所述的方法，其特征在于，所述酸為曱磺酸。
4. 根據(jù)權利要求l-3任一項所述的方法，其特征在于，步驟(b)的 所述曱硅烷基化在氫離子受體存在下于非極性溶劑中進行。
5. 根據(jù)權利要求4所述的方法，其特征在于，所述非極性溶劑是芳 香族溶劑。
6. 根據(jù)權利要求5所述的方法，其特征在于，所述芳香族溶劑是曱苯。
7. 根據(jù)權利要求4-6所述的方法，其特征在于，所述氫離子受體是脂 族、脂環(huán)族或雜芳族類型的叔胺。
8. 根據(jù)權利要求7所述的方法，其特征在于，所述叔胺為三乙胺。
9. 根據(jù)權利要求l-8任一項所述的方法，其特征在于，由步驟(b) 獲得的3-a-三曱基曱硅烷氧基-7-酮基-5P-膽烷酸甲酯(IV )在用于步驟(c ) 之前不進行分離和純化。
10. 根據(jù)權利要求9所述的方法，其特征在于，在步驟(c)中，使 用蒸發(fā)反應溶劑后獲得的含油殘留物作為反應物(IV),其中所述反應溶 劑事先通過用水萃取除去鹽。
11. 根據(jù)權利要求l-10任一項所述的方法，其特征在于，步驟(c) 中隨后的酮基曱硅烷基化使用由氨獲得的堿性酰胺或由仲胺獲得的堿性 酰胺作為強堿而進行。
12. 根據(jù)權利要求11所述的方法，其特征在于，所述堿性酰胺是二 異丙氨基鋰。
13. 根據(jù)權利要求1-12任一項所述的方法，其特征在于，所述步驟(c ) 在極性的非質(zhì)子溶劑中進行。
14. 根據(jù)權利要求13所述的方法，其特征在于，所述極性的非質(zhì)子 溶劑是四氫呋喃。
15. 根據(jù)權利要求l-14任一項所述的方法，其特征在于，步驟(c) 中獲得的3-a,7-a-二-三曱基曱硅烷氧基-6-烯-5P-膽烷酸曱酯(V)在用于 步驟(d)之前不進行分離和純化。
16. 根據(jù)權利要求15所述的方法，其特征在于，使用蒸發(fā)反應溶劑后獲得的含油殘留物作為反應物(V)，其中所述反應溶劑事先通過水萃 取除去鹽。
17. 根據(jù)權利要求l-16任一項所述的方法，其特征在于，步驟(d)在非極性溶劑中進行。
18. 根據(jù)權利要求17所述的方法，其特征在于，所述非極性溶劑是 烷基卣。
19. 根據(jù)權利要求17和18任一項所述的方法，其中所述溶劑是二氯 曱烷。
20. 根據(jù)權利要求l-19任一項所述的方法，其特征在于，所述路易斯 酸是三氟化硼合乙醚。
21. 根據(jù)權利要求20所述的方法，其特征在于，步驟(d)根據(jù)以下 的操作條件進行將反應混合物冷卻至-9(TC和-60。C之間的溫度并維持2 小時至4小時，然后使所述反應混合物在0。C和35。C之間的溫度下保持1 小時至6小時。
22. 根據(jù)權利要求1-21任一項所述的方法，其特征在于，步驟(d) 中獲得的3-a-羥基-6-亞烷基-7-酮基-5(3-膽烷酸曱酯(VI)在用于隨后步驟(e)之前不進行分離和純化。
23. 根據(jù)權利要求22所述的方法，其特征在于，步驟(e)中的水解 使用蒸發(fā)反應溶劑后獲得的含油殘留物作為反應物(VI)而進行，其中所 述反應溶劑已經(jīng)使用水萃取除去鹽和水溶性組分。
24. 根據(jù)權利要求1-23任一項所述的方法，其特征在于，步驟(e) 中的水解反應在堿性氫氧化物的水溶液存在下，于醇溶劑中進行。
25. 根據(jù)權利要求24所述的方法，其特征在于，所述反應在20。C和 60 °C之間的溫度下進行。
26. 根據(jù)權利要求1-25任一項所述的方法，其特征在于，步驟(f) 中的氫化在1個大氣壓和3個大氣壓之間的壓力下，于存在有氫氧化鈉水 溶液的含水環(huán)境中進行。
27. 根據(jù)權利要求l-26任一項所述的方法，其特征在于，當所述方法包括步驟(g)時，該步驟直接在由步驟(f)獲得的反應混合物上進行。
28. 根據(jù)權利要求27所述的方法，其特征在于，所述步驟(g)于95 。C和105X:之間的溫度下進行數(shù)小時。
29. 根據(jù)權利要求l-28任一項所述的方法，其特征在于，當所述方法 不預期包括步驟(g)時由步驟(f)獲得的反應產(chǎn)物或者由步驟(g)獲 得的反應產(chǎn)物根據(jù)以下的操作條件從所述反應混合物中分離出來1) 酸化所述水溶液，其中所述水溶液已通過過濾除去催化劑，2) 向步驟(1 )獲得的混合物中加入乙酸乙酯，并將整個混合物加熱 至40°C和70°C之間的溫度，3) 冷卻至0。C和30。C之間的溫度，過濾并干燥得到的沉淀物。
30. 根據(jù)權利要求l-29任一項所述的方法，其特征在于，當根據(jù)步驟 (h，)中預期的操作條件或者根據(jù)步驟(h，")的操作條件來進行步驟(h )的還原時，所述金屬氫化物為于水溶液中的硼氫化鈉，所述水溶液中已經(jīng) 溶解了堿性氫氧化物。
31. 根據(jù)權利要求30所述的方法，其特征在于，所述堿性氫氧化物 由30%的氫氧化鈉::容液組成。
32. 根據(jù)權利要求30-31所述的方法，其特征在于，所述反應在7(TC 和105。C之間的溫度下進行1小時。
33. 根據(jù)權利要求30-32所述的方法，其特征在于，根據(jù)以下的操作 條件來分離得到的產(chǎn)物1，)向所述反應混合物中加入水不混溶的溶劑，并使用磷酸來酸化所 述混合物，2，)攪拌并靜置獲得的混合物，并且除去水相， 3，)使用水和氨從有機相中萃取所述產(chǎn)物，4，)向由此獲得的水相中加入磷酸，并在20。C和50。C之間的溫度下 攪拌整個混合物，5，)通過過濾回收并干燥沉淀的產(chǎn)物。
34. 根據(jù)權利要求l-29任一項所述的方法，其特征在于，當根據(jù)(h") 的操作條件來進行步驟(h)時，所述還原反應在溶劑回流的溫度下，于 直鏈或支鏈的C1-C5醇中進行。
35. 根據(jù)權利要求34所述的方法，其特征在于，所述醇為仲丁醇。
36. 根據(jù)權利要求l-35任一項所述的方法，其中R優(yōu)選為曱基。
37. 根據(jù)權利要求l-30任一項所述的方法，其用于制備3-a，7-a-二羥 基-6a-乙基-5P-膽烷酸。
38. 3-a-羥基-6-P-烷基-7-酮基-5P-膽烷酸<formula>see original document page 9</formula>(VIII)(IX)
39. 3-a-羥基-6-a-烷基-7-酮基-5P-膽烷酸(IX)<formula>see original document page 9</formula>其中R是直鏈或支鏈的d-Cs烷基。
40. —種通式(IB)的3-a，7-a-二羥基-6-p-烷基-5p-膽烷酸其中R是直鏈或支鏈的CrCs烷基。
41. 一種通式(IC)的3-a,7-j3-二羥基-6-a-烷基-5p-膽烷酸其中R是直鏈或支鏈的C,-Q烷基。
42. —種藥物組合物，其包括作為活性成分的、至少一種根據(jù)權利要 求40所述的3-a,7-a-二羥基-6-(3-烷基-5(3-膽烷酸或相應的藥學上可接受的鹽和合適的賦形劑和/或稀釋劑。
43. —種藥物組合物，其包括作為活性成分的、至少一種根據(jù)權利要 求41所述的3-a,7-(3-二羥基-6-a-烷基-5(3-膽烷酸及相應的藥學上可接受的 鹽和合適的賦形劑和/或稀釋劑。
全文摘要
用于制備3α(β)-7α(β)-二-羥基-6α(β)-烷基-5β-膽烷酸(I)以及相關的中間產(chǎn)物3α-羥基-6β-烷基-7-酮基-5β-膽烷酸(VIII)和3α-羥基-6α-烷基-7-酮基-5β-膽烷酸(IX)的方法，其中R是直鏈或支鏈的C₁-C₅烷基。
文檔編號C07J9/00GK101203526SQ200680017025
公開日2008年6月18日 申請日期2006年5月19日 優(yōu)先權日2005年5月19日
發(fā)明者羅伯托·佩里恰里, 馬西莫·法拉利 申請人:伊萊吉爾瑞公司