專利名稱：作為神經(jīng)激肽受體拮抗劑用于治療胃腸疾病的新氮雜環(huán)丁烷衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及上述定義的式I的化合物及其鹽。用于藥物組合物的鹽應(yīng)該是藥學(xué)可接受的鹽，但是其它鹽可用于生產(chǎn)式I的化合物。
本發(fā)明的化合物能夠與多種無機(jī)酸和有機(jī)酸形成鹽，并且這種鹽也在本發(fā)明范圍內(nèi)。這種酸加成鹽的實(shí)例包括乙酸鹽、己二酸鹽、抗壞血酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、檸檬酸鹽、環(huán)己基氨基磺酸鹽、乙磺酸鹽、富馬酸鹽、谷氨酸鹽、甘醇酸鹽、半硫酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、羥基馬來酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、雙羥萘酸鹽(Palmoate)、過硫酸鹽、苯乙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、奎尼酸鹽、水楊酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、氨基磺酸鹽、磺胺酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽(對甲苯磺酸鹽)、和十一烷酸鹽。
藥學(xué)可接受的鹽可通過常規(guī)方法從相應(yīng)的酸制備。非藥學(xué)可接受的鹽可用作中間體，并且同樣是本發(fā)明的另一個方面。
酸加成鹽也可為聚合物鹽的形式，例如聚合物型磺酸鹽。
鹽可通過常規(guī)方法形成，例如通過使產(chǎn)物的游離堿形式與一當(dāng)量或多當(dāng)量的適當(dāng)?shù)乃嵩谄渲宣}溶解性較差的溶劑或介質(zhì)中反應(yīng)，或者在溶劑例如水中反應(yīng)然后將水真空除去或者通過冷凍干燥除去，或者通過在適合的離子交換樹脂上將已有鹽的陰離子交換為另一種陰離子。
式I的化合物具有一個或多個手性中心，因此應(yīng)該理解，本發(fā)明包括所有的光學(xué)異構(gòu)體、對映體和非對映體。式(I)的化合物可為單個的立體異構(gòu)體形式，即，單個的對映體(R-對映體或S-對映體)和/或非對映體。式(I)的化合物也可為外消旋混合物的形式，即，對映體的等摩爾混合物。
應(yīng)該理解，本發(fā)明還涉及式I的化合物的任何和所有的互變異構(gòu)形式。
化合物可作為構(gòu)象異構(gòu)體的混合物存在。本發(fā)明的化合物包括單獨(dú)的構(gòu)象異構(gòu)體和構(gòu)象異構(gòu)體的混合物。
除非另有說明，術(shù)語“烷基”包括直鏈以及支鏈的C1-4烷基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基或叔丁基。烷基的一個或多個氫原子可被氟原子代替，例如在二氟甲基或三氟甲基中。
如本文中使用的，C1-C4羥基烷基為包括1-4個碳原子和羥基的羥基烷基。羥基烷基的一個或多個氫原子可被氟原子代替。
藥物制劑 根據(jù)本發(fā)明的一個方面，提供了包括式I的化合物的藥物制劑，用于預(yù)防和/或治療呼吸、心血管、神經(jīng)、疼痛、腫瘤、炎癥性和/或胃腸的病癥，式I的化合物為游離堿或藥學(xué)可接受鹽形式的單個的對映體、其消旋物或混合物。
本發(fā)明的藥物組合物可以通過適于期望其治療的疾病狀況的標(biāo)準(zhǔn)方式給予，例如通過口服、局部、胃腸外、頰、鼻、陰道或直腸方式給予，或者通過吸入或吹入方式給予。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明的化合物可以通過本領(lǐng)域中已知的方式配制為例如片劑、丸劑、膠囊、水或油溶液、懸浮劑、乳劑、霜劑、膏劑、凝膠劑、鼻噴霧劑、栓劑、用于吸入的細(xì)分散粉末劑或氣霧劑或霧化劑、和用于胃腸外使用(包括靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、或輸注)的無菌的水或油溶液或懸浮劑或無菌乳劑。
除了本發(fā)明的化合物之外，本發(fā)明的藥物組合物還可以包含一種或多種在治療本文中所涉及的一種或多種疾病狀況中有價(jià)值的藥理學(xué)試劑，或者，將本發(fā)明的藥物組合物與其共同給予(同時地或順序地)。
本發(fā)明的藥物組合物通?？山o予人類，使得接受例如0.01到25mg/kg體重(并且優(yōu)選0.1到5mg/kg體重)的日劑量。這個日劑量可根據(jù)需要以分開的劑量給予。根據(jù)本領(lǐng)域已知的原則，接受的化合物的確切量和給藥途徑根據(jù)被治療患者的體重、年齡和性別而定，并且根據(jù)所治療的具體疾病狀況而定。
一般地，單位劑型包括約1mg到500mg的本發(fā)明的化合物。例如，口服用片劑或膠囊可方便地包括最多250mg(并且一般地為5到100mg)的式(I)的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽。在另一個實(shí)例中，對于通過吸入給予方式，式(I)的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽可以5到100mg的日劑量范圍以單個劑量或分成二到四份的日劑量給予。在另一個實(shí)例中，對于通過靜脈內(nèi)或肌肉內(nèi)注射或輸注給予方式，可使用包含最多10％w/w(并且一般地為5％w/w)的式(I)的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽的無菌溶液或懸浮液。
醫(yī)療和藥物用途 本發(fā)明提供一種治療或預(yù)防疾病狀況(其中對作用于NK受體的速激肽的拮抗作用是有益的)的方法，包括對受試者給予有效量的式(I)的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽。本發(fā)明還提供式(I)的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽在制備用于疾病狀況(其中對作用于NK受體的速激肽的拮抗作用是有利的)的藥物中的用途。
式(I)的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或溶劑化物可用于生產(chǎn)藥物，用于預(yù)防或治療呼吸、心血管、神經(jīng)、疼痛、腫瘤和/或胃腸的病癥。
這種病癥的實(shí)例是哮喘、過敏性鼻炎、肺疾病、咳嗽、感冒、炎癥、慢性阻塞性肺病、呼吸道反應(yīng)性、風(fēng)疹、高血壓、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、浮腫、血管形成、疼痛、偏頭痛、緊張性頭痛、精神病、抑郁癥、焦慮癥、阿爾茨海默氏病、精神分裂癥、亨廷頓舞蹈病、膀胱運(yùn)動過度、尿失禁、飲食紊亂、躁狂抑郁癥、物質(zhì)依賴性、運(yùn)動障礙、認(rèn)知障礙、肥胖癥、應(yīng)激障礙、排尿紊亂、躁狂癥、輕度躁狂和攻擊行為、雙相性精神障礙、癌癥、癌、纖維肌痛、非心臟性胸痛、胃腸運(yùn)動過強(qiáng)、胃病性氣喘、克羅恩氏病、胃排空紊亂、潰瘍性結(jié)腸炎、易激惹腸綜合征(IBS)、炎癥性腸病(IBD)、嘔吐、胃病性氣喘、胃運(yùn)動性病癥、胃食管反流病(GERD)或功能性消化不良。
藥理學(xué) 用于FLIPR和結(jié)合試驗(yàn)的細(xì)胞的轉(zhuǎn)染和培養(yǎng) 將中國倉鼠卵巢(CHO)K1細(xì)胞(得自ATCC)用人NK2受體(pRc/CMV中的hNK2R cDNA，Invitrogen)或人NK3受體(pcDNA3.1/Hygro(+)/IRES/CD8中的hNK3R，Invitrogen載體修飾，在AstraZenecaEST-Bio UK，Alderley Park)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。將細(xì)胞用陽離子性脂類試劑LIPOFECTAMINETM(Invitrogen)轉(zhuǎn)染并且用1mg/ml的遺傳霉素Geneticin(G418，Invitrogen)選擇hNK2R轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，用500μg/ml的潮霉素Hygromycin(Invitrogen)選擇hNK3R轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。借助于熒光激活細(xì)胞分類器(FACS)收集單細(xì)胞克隆，在FLIPR試驗(yàn)(見下文)中檢驗(yàn)功能性，在培養(yǎng)物中擴(kuò)展并且冷藏備用。用人NK1受體穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的CHO細(xì)胞來源于AstraZeneca R & D，Wilmington USA。將人NK1受體cDNA(得自肺組織的RNA-PCR)亞克隆到pRcCMV(Invitrogen)中。通過磷酸鈣進(jìn)行轉(zhuǎn)染并且用1mg/ml G418進(jìn)行選擇。
將用hNK1R、hNK2R和hNK3R穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的CHO細(xì)胞在濕潤的培養(yǎng)箱中在5％CO2下在具有Glutamax I、10％胎牛血清(FBS)、補(bǔ)充有200μg/ml遺傳霉素(用于表達(dá)hNK1R和hNK2R的細(xì)胞)和500μg/ml潮霉素(用于表達(dá)hNK3R的細(xì)胞)的1％青霉素/鏈霉素(PEST)的NutMix F12(HAM)中培養(yǎng)。使細(xì)胞在T175燒瓶中生長，并且當(dāng)70-80％鋪滿時進(jìn)行常規(guī)傳代，直到20-25代。
評價(jià)所選試驗(yàn)化合物對人NK1/NK2/NK3受體活化的抑制活性(FLIPR試驗(yàn)) 通過以下操作評價(jià)本發(fā)明的化合物抑制NK1/NK2/NK3受體活化的活性，以NK1/NK2/NK3受體介導(dǎo)的胞內(nèi)Ca2+增加進(jìn)行測量 將用人NK1、NK2或NK3受體穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的CHO細(xì)胞在黑色壁/透明底的96孔板(Costar 3904)中以每孔3.5×104細(xì)胞鋪板并且在正常的生長培養(yǎng)基中在37℃的CO2培養(yǎng)箱中生長約24小時。
在FLIPR試驗(yàn)之前，在載荷培養(yǎng)基中對每個96孔板中的細(xì)胞加載4μM的Ca2+敏感性染料Fluo-3(TEFLABS 0116)，所述載荷培養(yǎng)基由具有Glutamax I、22mM HEPES、2.5mM Probenicid(Sigma P-8761)和0.04％Pluronic F-127(Sigma P-2443)的Nut Mix F12(HAM)組成，在37℃的CO2培養(yǎng)箱中在黑暗中保持1小時。然后使用多道移液管將細(xì)胞在試驗(yàn)緩沖液(包含20mM HEPES、2.5mM Probenicid和0.1％BSA的Hanks平衡鹽溶液(HBSS))中洗滌三次，在最后一次洗滌結(jié)束時將它們留在150μl中。將試驗(yàn)化合物在試驗(yàn)緩沖液中的系列稀釋物(最終的DMSO濃度保持低于1％)通過FLIPR(Fluorometric ImagingPlate Reader)自動地移液到每個試驗(yàn)孔中并且通過FLIPR CCD攝像機(jī)記錄熒光強(qiáng)度(激發(fā)488nm和發(fā)射530nm)，持續(xù)2分鐘的預(yù)培養(yǎng)時間。然后通過FLIPR將50μl的P物質(zhì)(NK1特異性)、NKA(NK2特異性)、或Pro-7-NKB(NK3特異性)激動劑溶液(最終濃度等于約EC60濃度)添加到已經(jīng)包含200μl試驗(yàn)緩沖液(包括試驗(yàn)化合物或媒介物)的每個孔中并且連續(xù)地監(jiān)測熒光，檢測持續(xù)另外的2分鐘。以加入激動劑之后的峰相對熒光測量應(yīng)答，并且從每個化合物的10點(diǎn)濃度-反應(yīng)曲線計(jì)算IC50。然后使用下式將IC50換算為pKB值 KB＝IC50/1+(試驗(yàn)中使用的激動劑的EC60濃度/EC50激動劑) pKB＝-log KB 測定化合物對人NK1/NK2/NK3受體的離解常數(shù)(Ki)(結(jié)合試驗(yàn)) 根據(jù)以下方法從用人NK1、NK2或NK3受體穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的CHO細(xì)胞制備膜。
用Accutase溶液使細(xì)胞脫離，通過離心作用收獲在包含5％FBS的PBS中，在PBS中洗滌兩次并且以1×108細(xì)胞/ml的濃度再懸浮在Tris-HCl 50mM、KCl 300mM、EDTA-N210mM pH 7.4(4℃)中。將細(xì)胞懸浮液用UltraTurrax在12.000rpm下勻漿30秒。將勻漿在38.000xg(4℃)離心并將團(tuán)粒再懸浮在Tris-HCl 50mM pH 7.4中。重復(fù)勻漿一次并將勻漿在冰上培養(yǎng)45分鐘。將勻漿再一次如上所述離心并且再懸浮在Tris-HCl 50mM pH 7.4?？偣仓貜?fù)這個離心步驟3次。在最后一次離心步驟之后，將團(tuán)粒再懸浮在Tris-HCl 50mM中并且用DualPotter勻漿10個沖程，成為均質(zhì)溶液，取出一部分用于蛋白質(zhì)測定。將膜等分成小份并且在試驗(yàn)之前在-80℃冷凍。
在室溫下在96孔微量滴定板(No-binding Surface Plates，Corning3600)中，在培養(yǎng)緩沖液(包含0.1％BSA、40mg/L桿菌肽、完全不含EDTA的蛋白酶抑制劑雞尾酒片劑20丸/L(Roche)和3mM MnCl2的50mM Tris緩沖液(pH 7.4RT))中，以200μl/孔的最終試驗(yàn)體積進(jìn)行放射性配體結(jié)合試驗(yàn)。通過加入遞增量的試驗(yàn)化合物得到競爭結(jié)合曲線。將試驗(yàn)化合物溶解并且在DMSO中進(jìn)行一系列稀釋，試驗(yàn)中最終的DMSO濃度為1.5％。加入50μl無標(biāo)記的ZD 6021(非選擇性的NK-拮抗劑，10μM最終濃度)，用于測量非特異性結(jié)合。對于總的結(jié)合，使用50μl的含1.5％DMSO(最終濃度)的培養(yǎng)緩沖液。在對hNK1r的結(jié)合試驗(yàn)中使用[3H-Sar，Met(O2)-P物質(zhì)](4nM最終濃度)。對hNK2r使用[3H-SR48968](3nM最終濃度)和對hNK3r的結(jié)合試驗(yàn)中使用[3H-SR142801](3nM最終濃度)。將50μl的放射性配體、3μl的在DMSO中稀釋的試驗(yàn)化合物和47μl的培養(yǎng)緩沖液與含5-10μg細(xì)胞膜的100μl培養(yǎng)緩沖液混合并且在室溫下在微板振蕩器上培養(yǎng)30分鐘。
然后使用Micro 96Harvester(Skatron Instruments，Norway)通過在0.1％BSA和0.3％聚乙烯亞胺(Sigma P-3143)中預(yù)浸漬的FiltermatB(Wallac)上快速過濾收集膜。通過采集裝置使用冰冷的洗滌緩沖液(50mM Tris-HCl，pH 7.4在4℃，含3mM MnCl2)洗滌過濾器并且在50℃下干燥30-60分鐘。使用Microsealer(Wallac，F(xiàn)inland)將Meltilex閃爍劑片熔化在過濾器上并將過濾器在β-Liquid Scintillation Counter(1450Microbeta，Wallac，F(xiàn)inland)中計(jì)數(shù)。
使用Cheng-Prusoff方程(Biochem.Pharmacol.223099-3108，1973)計(jì)算未標(biāo)記配體的Ki值其中L為使用的放射性配體的濃度，Kd為通過飽和結(jié)合測定的放射性配體對受體的親合力。使用Excel Fit將數(shù)據(jù)擬合到四參數(shù)方程。
KI＝IC50/(1+(L/Kd)) 結(jié)果 通常，經(jīng)過試驗(yàn)的本發(fā)明的化合物表現(xiàn)出統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的對NK1受體的拮抗活性，pKB為7-9。對于NK2受體，pKB為是7-9。通常，對NK3受體的拮抗活性為pKB6-9。
通常，經(jīng)過試驗(yàn)的本發(fā)明的化合物在低水平下表現(xiàn)出統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的CYP3A4抑制。根據(jù)Bapiro等人，Drug Metab.Dispos.29，30-35(2001)測定的IC50值通常大于2μM。
對抗hERG的活性 式I的化合物對抗hERG編碼的鉀通道的活性可以根據(jù)Kiss L等人，Assay Drug Dev Technol.1(2003)，127-35“High throughput ion-channel pharmacologyplanar-array-based voltage clamp”測定。
通常，經(jīng)過試驗(yàn)的本發(fā)明的化合物在低水平下表現(xiàn)出統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的hERG活性。如上所述測定的IC50值通常大于10μM。
代謝穩(wěn)定性 式I的化合物的代謝穩(wěn)定性可以如下所述測定 生物轉(zhuǎn)化比例可以測量為代謝物形成或母體化合物消失比例。試驗(yàn)設(shè)計(jì)包括將低濃度的底物(通常為1.0μM)與肝微粒體(通常為0.5mg/ml)一起培養(yǎng)并且在不同時間點(diǎn)(通常在0、5、10、15、20、30、40分鐘)取出等分試樣。試驗(yàn)化合物通常溶于DMSO。培養(yǎng)混合物中DMSO濃度通常為0.1％或更低，因?yàn)楦嗟娜軇┛梢詣×业亟档鸵恍〤YP450的活性。培養(yǎng)在100mM磷酸鉀緩沖液(pH 7.4)中和在37℃下進(jìn)行。使用乙腈或甲醇終止反應(yīng)。
生物學(xué)評價(jià) 沙鼠爪輕敲試驗(yàn)(Gerbil Foot Tap，NK1特異性試驗(yàn)?zāi)Ｐ? 雄性蒙古沙鼠(60-80g)購自Charles River，Germany。在到達(dá)當(dāng)天，將它們分為每組十只圈養(yǎng)在溫度和濕度受控的圈養(yǎng)空間中，不限量供給食物和水。在實(shí)驗(yàn)之前使動物至少以7天來習(xí)慣圈養(yǎng)條件。每只動物只使用一次并且在實(shí)驗(yàn)后立即通過心臟穿刺(heart punctuation)或給予致命過量的戊巴比妥鈉(penthobarbital sodium)實(shí)施安樂死。
將沙鼠用異氟烷麻醉。腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)或皮下給予強(qiáng)效的可透過CNS的NK1受體拮抗劑。在用激動劑刺激之前在不同時間點(diǎn)(一般地為30-120分鐘)給予化合物。
將沙鼠用異氟烷輕微麻醉并且在前囟點(diǎn)皮膚處開小切口。使用具有4mm長針頭的Hamilton注射器通過icv以5μl的體積給予10pmol的ASMSP(選擇性的NK1受體激動劑)。將傷口夾緊關(guān)閉，將動物置于小的塑料籠子中并且使其醒來。將籠子置于一段充滿水的塑料管上，并且通過壓力傳感器連接于電腦。記錄后爪輕敲的次數(shù)。
糞粒排出量(NK2特異性試驗(yàn)?zāi)Ｐ? 式I化合物的體內(nèi)效果(NK2)可以通過測量NK2受體激動劑誘導(dǎo)的糞粒排出量進(jìn)行測量，使用沙鼠，如例如The Journal of Pharmacologyand Experimental Therapeutics(2001)，pp.559-564中所述。
結(jié)腸直腸膨脹模型 如以前所述在大鼠和小鼠中那樣(Tammpere A，Brusberg M，Axenborg J，Hirsch I，Larsson H，Lindstrm E.Evaluation of pseudo-affective responses to noxious colorectal distension in rats by manometricrecordings.Pain 2005；116220-226；Arvidsson S，Larsson M，LarssonH，Lindstrm E，Martinez V.Assessment of visceral pain-related pseudo-affective responses to colorectal distension in mice by intracolonicmanometric recordings.J Pain 2006；7108-118)(略有改變)，進(jìn)行沙鼠的結(jié)腸直腸膨脹(CRD)。簡而言之，在實(shí)驗(yàn)之前使沙鼠每天習(xí)慣Bollmann籠子30-60分鐘，進(jìn)行三個連續(xù)日，以減少由于限制性應(yīng)激產(chǎn)生的運(yùn)動假象。在異氟烷(Forene，Abbott Scandinavia AB，，Solna，Sweden)淺麻醉過程中，將具有連接導(dǎo)管的2cm的聚乙烯氣球(自制)插入到末端結(jié)腸中，氣球底面距肛門2cm。用帶子將導(dǎo)管固定于尾部。氣球連接于壓力傳感器(P-602，CFM-k33，100mmHg，Bronkhorst HI-TEC，Veenendal，The Netherlands)。使沙鼠在Bollmann籠子中從鎮(zhèn)靜狀態(tài)恢復(fù)知覺至少15分鐘，然后開始實(shí)驗(yàn)。
使用定制的恒壓器(AstraZeneca，Mlndal，Sweden)負(fù)責(zé)充氣和氣球的壓力控制。使用在標(biāo)準(zhǔn)電腦上運(yùn)行的定制計(jì)算機(jī)軟件(PharmLabon-line 4.0)控制恒壓器和進(jìn)行數(shù)據(jù)收集。使用的膨脹范例包括12次重復(fù)的在80mmHg的階段性膨脹，脈沖時間為30秒，間隔5分鐘。在CRD范例之前將化合物或它們各自的媒介物腹膜內(nèi)(i.p.)注射給予。每只沙鼠在不同的時候接受媒介物和化合物，實(shí)驗(yàn)之間至少隔兩天。因此，每只沙鼠充當(dāng)它自己的媒介物對照物。
以單一的取樣速率對模擬輸入通道進(jìn)行取樣，并且對信號進(jìn)行數(shù)字過濾。氣球壓力信號以50個樣本/秒取樣。使用1Hz的高通濾波器分離由恒壓器產(chǎn)生的緩慢變化的壓力產(chǎn)生的收縮誘導(dǎo)壓力變化。壓力發(fā)生器和壓力傳感器之間氣流的阻力進(jìn)一步增強(qiáng)由動物腹部收縮誘導(dǎo)的氣壓變化。使用定制計(jì)算機(jī)軟件(PharmLab off-line 4.0)將高通過濾的氣球壓力信號的大小量化。在脈沖(即基線反應(yīng))之前計(jì)算高通過濾的氣球壓力信號的平均整流值(ARV)30秒，并且在脈沖過程中持續(xù)進(jìn)行計(jì)算。在計(jì)算高通過濾的氣球壓力信號的大小時，將每個脈沖的第一秒和最后一秒排除，因?yàn)檫@些反映了在充氣和放氣過程中由恒壓器產(chǎn)生的而不是來自動物的假象信號。
制備方法 本發(fā)明的另一個方面提供一種制備式(I)化合物或其鹽的方法，該方法包括 a)使式(III)的化合物與式(IV)的化合物反應(yīng)

其中R1-R2、Het、和Ar如前述定義；并且條件是使得式(III)化合物的還原烷基化在式(III)化合物的氮雜環(huán)丁烷基團(tuán)的氮原子與式(IV)化合物的醛基碳原子之間形成N-C鍵；或者 b)使式(III)的化合物與式(V)的化合物反應(yīng)
其中R1-R2、Het、和Ar如前述定義；并且L為這樣的基團(tuán)，其使得式(III)化合物的烷基化在式(III)化合物的氮雜環(huán)丁烷基團(tuán)的氮原子與式(V)化合物的與L基團(tuán)相鄰的碳原子之間形成N-C鍵；或 c)使式(VI)的化合物與式(VII)的化合物反應(yīng)

其中R1-R2、Het、和Ar如前述定義；并且L’為離去基團(tuán)；其中如有必要，將任何其它官能團(tuán)保護(hù)起來，和 i)除去任何的保護(hù)基； ii)任選地將任何可氧化原子氧化； iii)任選地形成藥學(xué)可接受的鹽。
保護(hù)基通常可選自在文獻(xiàn)中描述的或者熟練的化學(xué)工作者已知的適合于保護(hù)所述基團(tuán)的任何基團(tuán)，并且可通過常規(guī)方法引入和除去。參見例如Protecting Groups in Organic Chemistry；Theodora W.Greene。選擇除去方法，使得在對分子中其它位置的基團(tuán)有最小干擾的情況下除去保護(hù)基。
應(yīng)該理解，式(I)化合物中各種任選的取代基中的某些可在本文前述方法之前或之后立即通過標(biāo)準(zhǔn)芳族取代反應(yīng)引入或者通過常規(guī)的官能團(tuán)修飾產(chǎn)生。用于這種方法的試劑和反應(yīng)條件為化學(xué)領(lǐng)域技術(shù)人員公知的。
式(III)和(IV)的化合物在還原烷基化的條件下反應(yīng)。反應(yīng)一般在非極端的溫度下，例如0-40℃下，在基本上惰性的溶劑例如二氯甲烷中進(jìn)行。典型的還原劑包括硼氫化物例如氰基硼氫化鈉。
式(III)和(V)的化合物在烷基化的條件下反應(yīng)。一般地，在式(V)的化合物中，L為離去基團(tuán)，例如鹵素或烷基磺?；趸?。反應(yīng)一般在高溫下，例如30-130℃下，在基本上惰性的溶劑例如DMF中進(jìn)行。
式(III)的化合物是已知的或可以常規(guī)方式制備。式(IV)的化合物可通過例如式(VII)的化合物與式(VIII)的化合物在常規(guī)的?；瘲l件下反應(yīng)制備
其中R1-R2如前述定義。
式(V)的化合物可通過例如式(VII)的化合物與式(IX)的化合物在常規(guī)的酰化條件下反應(yīng)制備
其中R1-R2和L如前述定義。
式(VI)和(VII)的化合物可在常規(guī)的?；瘲l件下反應(yīng)，其中
為酸或活化的酸衍生物。這種活化的酸衍生物為文獻(xiàn)中公知的。它們可從酸原地形成，或者可制備它們、經(jīng)分離、并且隨后用于反應(yīng)。一般地，L’為氯代，從而形成?；取Ｒ话愕?，酰化反應(yīng)在非親核性堿(例如N，N-二異丙基乙基胺)的存在下在基本上惰性的溶劑(例如二氯甲烷)中在非極端溫度下進(jìn)行。
式(VIII)和(IX)的化合物為已知的或可以通過常規(guī)的方式制備。
實(shí)施例 應(yīng)該強(qiáng)調(diào)的是，由于存在有構(gòu)象異構(gòu)體，本發(fā)明的化合物經(jīng)常表現(xiàn)出非常復(fù)雜的NMR光譜。據(jù)信這是由于圍繞酰胺和/或芳基鍵的緩慢旋轉(zhuǎn)所致。以下縮寫用于提供化合物的NMR數(shù)據(jù)s-單峰；d-雙峰；t-三重峰；qt-四重峰；qn-五重峰；m-多重峰；b-寬峰；cm-復(fù)雜的多重峰，其可包括寬峰。
通過以下實(shí)施例描述而不是限制本發(fā)明。
以下縮寫用于實(shí)驗(yàn)部分Boc(叔丁氧羰基)、DCC(1，3-二環(huán)己基碳二亞胺)、DIPEA(N，N-二異丙基乙基胺)、DMF(N，N-二甲基甲酰胺)、TBTU(N，N，N′，N′-四甲基-O-(苯并三唑-1-基)脲四氟硼酸鹽、THF(四氫呋喃)和RT(室溫)。
實(shí)施例1 3-氰基-N-[(2S)-4-[3-(1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基]-2-(4-氟苯基)丁基]-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺
將4-{1-[(3S)-4-[[(3-氰基-5，6，7，8-四氫萘-1-基)羰基]-(甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-甲酸叔丁基酯(參見方法1；63mg，0.10mmol)溶解于二氯甲烷(2mL)并且向得到的溶液加入HCl(4M，在二氧雜環(huán)己烷中，1mL，4mmol)。將溶液在室溫下攪拌，在幾分鐘內(nèi)形成沉淀。加入甲醇(1mL)并且在室溫繼續(xù)攪拌4小時。通過蒸發(fā)除去溶劑，得到70mg的粗物質(zhì)，然后將其溶解于1mL的甲醇/二氯甲烷(1∶9)中。產(chǎn)物通過陽離子交換柱(Isolute SCX-2，2g)(氨氣飽和的甲醇-二氯甲烷，0到50％)上的色譜法純化。得到57mg(100％)的標(biāo)題化合物。1H NMR(500MHz，CDCl3)1.4-2.4(cm，8H)，2.5-2.9(cm，10H)，3.0-4.0(cm，15H)，5.4-6.4(b，1H)，6.7-7.1(cm，3H)，7.2-7.4(cm，3H)；LCMSm/z 518(M+1)+。
實(shí)施例2 3-氰基-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)-4-(3-哌嗪-1-基氮雜環(huán)丁烷-1-基)丁基]-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺
將4-{1-[(3S)-4-[[(3-氰基-5，6，7，8-四氫萘-1-基)羰基]-(甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}哌嗪-1-甲酸叔丁基酯(參見方法3；320mg，0.53mmol)溶解于二氯甲烷(10mL)并且向得到的溶液加入HCl(4M，在二氧雜環(huán)己烷中，10mL，40mmol)。將溶液在室溫下攪拌5小時，然后通過蒸發(fā)除去溶劑。殘余物溶解于二氯甲烷并將溶液用飽和NaHCO3水溶液洗滌，然后用水洗滌。通過相分離柱分離有機(jī)相，然后通過蒸發(fā)除去溶劑。得到240mg(90％)的標(biāo)題化合物。[α]D20＝-15.3°(c 0.4g/ml，甲醇)；1H NMR(500MHz，CDCl3)1.2-2.0(cm，6H)，2.1-4.2(cm，25H)，6.6-7.1(cm，3H)，7.2-7.3(b，3H)；LCMSm/z 504(M+1)+。
實(shí)施例3 N-[(2S)-4-[3-(4-氨基哌啶-1-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基]-2-(4-氟苯基)丁基]-3，5-二溴-N-甲基苯甲酰胺三鹽酸鹽
將(1-{1-[(3S)-4-[(3，5-二溴苯甲?；?(甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)-丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁基酯(參見方法4；573mg，0.82mmol)溶解于HCl的甲醇溶液(1.25M，50mL，62.5mmol)。將溶液在室溫下攪拌5小時，然后通過蒸發(fā)除去溶劑，然后與甲苯共蒸發(fā)。得到610mg(100％)的標(biāo)題化合物。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.8-2.2(cm，5H)，2.5-4.8(cm，24H)，6.8-8.0(cm，6H)，8.4(b，1H)；LCMSm/z 597(M+1)+。
實(shí)施例4-16 以與實(shí)施例1、實(shí)施例2和實(shí)施例3類似的方法，使用適當(dāng)?shù)腂oc保護(hù)的胺中間體合成在下表中所示的以下化合物(參見下文)N-[(2S)-4-{3-[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]氮雜環(huán)丁烷-1-基}-2-(4-氟苯基)丁基]-3，5-二溴-N-甲基苯甲酰胺(實(shí)施例4)；N-[(2S)-4-{3-[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]氮雜環(huán)丁烷-1-基}-2-(4-氟苯基)丁基]-3-氰基-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺(實(shí)施例5)；3，5-二溴-N-[(2S)-4-[3-(1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基]-2-(4-氟苯基)丁基]-N-甲基苯甲酰胺(實(shí)施例6)；3，5-二溴-N-((2S)-2-(4-氟苯基)-4-{3-[4-(甲基氨基)哌啶-1-基]氮雜環(huán)丁烷-1-基}丁基)-N-甲基苯甲酰胺(實(shí)施例7)；3-氰基-N-((2S)-2-(4-氟苯基)-4-{3-[4-(甲基氨基)哌啶-1-基]氮雜環(huán)丁烷-1-基}丁基)-N-甲基-1-萘甲酰胺三鹽酸鹽(實(shí)施例8)；3-氰基-N-((2S)-2-(4-氟苯基)-4-{3-[4-(甲基氨基)-哌啶-1-基]氮雜環(huán)丁烷-1-基}丁基)-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺(實(shí)施例9)；N-[(2S)-4-[3-(4-氨基哌啶-1-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基]-2-(4-氟苯基)丁基]-3-氰基-N-甲基-1-萘甲酰胺三鹽酸鹽(實(shí)施例10)；N-[(2S)-4-[3-(4-氨基哌啶-1-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基]-2-(4-氟苯基)丁基]-3-氰基-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺(實(shí)施例11)；N-[(2S)-4-{3-[(3R)-3-(2-氨基乙基)嗎啉-4-基]氮雜環(huán)丁烷-1-基}-2-(4-氟苯基)丁基]-3-氰基-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺(實(shí)施例12)；N-[(2S)-4-{3-[(3R)-3-(2-氨基乙基)嗎啉-4-基]氮雜環(huán)丁烷-1-基}-2-(4-氟苯基)丁基]-3，5-二溴-N-甲基苯甲酰胺(實(shí)施例13)；3-氰基-N-{(2S)-2-(4-氟苯基)-4-[3-(八氫吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基]丁基}-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺(實(shí)施例14)；3-氰基-N-[(2S)-4-[3-(2，5-二氮雜雙環(huán)[2.2.1]庚烷-2-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基]-2-(4-氟苯基)丁基]-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺(實(shí)施例15)；3-氰基-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)-4-(3-{2-[2-(甲基氨基)乙基]哌啶-1-基}氮雜環(huán)丁烷-1-基)丁基]-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺(實(shí)施例16)。
用作合成實(shí)施例4-16的關(guān)鍵中間體的Boc保護(hù)的氨基衍生物的制備在以下所述方法中描述實(shí)施例4(參見方法5)、實(shí)施例5(參見方法6)、實(shí)施例6(參見方法2)、實(shí)施例7(參見方法7)、實(shí)施例8(參見方法8)、實(shí)施例9(參見方法9)、實(shí)施例10(參見方法10)、實(shí)施例11(參見方法11)、實(shí)施例12(參見方法12)、實(shí)施例13(參見方法13)、實(shí)施例14(參見方法14)、實(shí)施例15(參見方法15)、實(shí)施例16(參見方法16)。




實(shí)施例17 3，5-二溴-N-[(2S)-4-{3-[4-(二甲氨基)哌啶-1-基]氮雜環(huán)丁烷-1-基}-2-(4-氟苯基)丁基]-N-甲基苯甲酰胺
N-[(2S)-4-[3-(4-氨基哌啶-1-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基]-2-(4-氟苯基)丁基]-3，5-二溴-N-甲基苯甲酰胺(參見實(shí)施例3；52mg，0.087mmol)與甲酸(5mL)和甲醛(36％，在水中，0.20mL，2.6mmol)混合。將混合物在室溫?cái)嚢柽^夜，然后回流1小時。通過蒸發(fā)除去溶劑。殘余物通過反相色譜法純化，使用乙腈和0.1M乙酸銨水溶液的混合物。得到21mg(37％)的標(biāo)題化合物。1H NMR(500MHz，CDCl3)14-1.6(cm，3H)，1.7-1.9(cm，6H)，2.2-3.8(cm，21H)，6.9-7.2(cm，5H)，7.3(t，1H)，7.8(d，1H)；LCMSm/z625(M+1)+。
實(shí)施例18 3-氰基-N-[(2S)-4-(3-{(3R)-3-[2-(二甲氨基)乙基]嗎啉-4-基}氮雜環(huán)丁烷-1-基)-2-(4-氟苯基)丁基]-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺
將{2-[(3R)-4-氮雜環(huán)丁烷-3-基嗎啉-3-基]乙基}二甲胺(參見方法17；38mg，0.18mmol)、3-氰基-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺(參見WO 04/110344；50mg，0.13mmol)和三乙胺(40mg，0.40mmol)溶解于甲醇(5mL)。加入氰基硼氫化鈉(58mg，0.92mmol)、氯化鋅(54mg，0.40mmol)和甲醇(2mL)的混合物，然后將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4小時。通過蒸發(fā)除去溶劑并將殘余物溶解于二氯甲烷。有機(jī)溶液用NaHCO3飽和水溶液洗滌三次。有機(jī)相通過相分離柱分離，然后通過蒸發(fā)除去溶劑。產(chǎn)物通過硅膠色譜法純化(氨氣飽和的甲醇-二氯甲烷，1∶6)。得到21mg(28％)的標(biāo)題化合物，為油狀物。1H NMR(500MHz，CDCl3)0.8-4.2(cm，40H)，6.1-7.4(cm，6H)；LCMSm/z 576(M+1)+。
實(shí)施例19 3-氰基-N-{(2S)-2-(4-氟苯基)-4-[3-(八氫吡咯并[1，2-a]吡嗪-2(1H)-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基]丁基}-N-甲基-1-萘甲酰胺
向2-氮雜環(huán)丁烷-3-基八氫吡咯并[1，2-a]吡嗪(參見方法18；37mg，0.20mmol)和3-氰基-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基-1-萘甲酰胺(參見WO 04/110344；78mg，0.20mmol)在甲醇(5mL)中的混合物加入氰基硼氫化鈉(110mg，1.75mmol)和氯化鋅(115mg，0.84mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?0分鐘然后通過蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物在NaHCO3水溶液和乙酸乙酯之間分配。將有機(jī)相分離并將水相用乙酸乙酯提取。合并的有機(jī)溶液通過蒸發(fā)濃縮并將產(chǎn)物通過反相色譜法純化，使用乙腈和0.1M乙酸銨水溶液的混合物。收集的級分在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮，然后用乙酸乙酯提取。將溶液干燥(MgSO4)并且通過蒸發(fā)除去溶劑。得到27mg(23％)的標(biāo)題化合物，為油狀物。1H NMR(500MHz，CD3OD)0.8-4.5(cm，28H)，6.2-7.8(cm，8H)，8.0-8.1(m，1H)，8.4(s，1H)；LCMSm/z 534(M+1)+。
實(shí)施例20 3，5-二溴-N-{(2S)-2-(4-氟苯基)-4-[3-(八氫吡咯并[1，2-a]吡嗪-2(1H)-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基]丁基}-N-甲基苯甲酰胺
向2-氮雜環(huán)丁烷-3-基八氫吡咯并[1，2-a]吡嗪(參見方法18；37mg，0.20mmol)和3，5-二溴-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基苯甲酰胺(參見WO 04/110344；92mg，0.20mmol)在甲醇(5mL)中的混合物中加入氰基硼氫化鈉(122mg，1.94mmol)和氯化鋅(115mg，0.84mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?0分鐘，然后通過蒸發(fā)除去溶劑。殘余物在NaHCO3水溶液和乙酸乙酯之間分配。將有機(jī)相分離并將水相用乙酸乙酯提取。將合并的有機(jī)溶液通過蒸發(fā)除去并將產(chǎn)物通過反相色譜法純化，使用乙腈和乙酸銨水溶液(0.1M)的混合物。收集的級分在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮，然后用乙酸乙酯提取。將溶液干燥(MgSO4)并且通過蒸發(fā)除去溶劑。得到12mg(9％)的標(biāo)題化合物，為油狀物。1H NMR(500MHz，CD3OD)0.9-3.8(cm，28H)，6.9-7.2(m，5H)，7.3(t，1H)，7.8(d，1H)；LCMSm/z 623(M+1)+。
實(shí)施例21 3，5-二溴-N-{(2S)-2-(4-氟苯基)-4-[3-(八氫-2H-吡啶并[1，2-a]吡嗪-2-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基]丁基}-N-甲基苯甲酰胺乙酸鹽
向2-氮雜環(huán)丁烷-3-基八氫-2H-吡啶并[1，2-a]吡嗪(參見方法19；150mg，0.55mmol)和3，5-二溴-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基苯甲酰胺(參見WO 04/110344；200mg，0.44mmol)、幾滴乙酸和二氯甲烷(5mL)的混合物中加入DIPEA(0.23mL，1.31mmol)和三乙酰氧基硼氫化鈉(124mg，0.59mmol)。反應(yīng)混合物在氮?dú)庀率覝財(cái)嚢?小時，然后通過蒸發(fā)除去溶劑。殘余物在NaHCO3水溶液和乙酸乙酯之間分配。將有機(jī)相分離，然后用NaHCO3水溶液、乙酸乙酯洗滌。將溶液干燥并且通過蒸發(fā)除去溶劑。產(chǎn)物通過反相色譜法純化，使用乙腈和乙酸銨水溶液(0.1M)的混合物。色譜法過程中的技術(shù)故障導(dǎo)致物料損失。然而，挽回了一些級分，并將其冷凍干燥。得到5mg(1.5％)的標(biāo)題化合物。1H NMR(500MHz，CD3OD)1.2-3.8(cm，33H)，6.9-7.4(m，6H)，7.8(d，1H)；LCMSm/z637(M+1)+。
實(shí)施例22 3-溴-N-{(2S)-2-(4-氟苯基)-4-[3-(八氫-2H-吡啶并[1，2-a]吡嗪-2-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基]丁基}-N-甲基-5-(三氟甲基)苯甲酰胺二乙酸鹽
向2-氮雜環(huán)丁烷-3-基八氫-2H-吡啶并[1，2-a]吡嗪(參見方法19；134mg，0.50mmol)和3-溴-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基-5-(三氟甲基)苯甲酰胺(參見方法20；215mg，0.48mmol)、幾滴乙酸和二氯甲烷(5mL)的混合物中加入DIPEA(0.24mL，1.35mmol)和三乙酰氧基硼氫化鈉(128mg，0.60mmol)。將反應(yīng)混合物在氮?dú)庀率覝財(cái)嚢?小時，然后通過蒸發(fā)除去溶劑。殘余物在NaHCO3水溶液和乙酸乙酯之間分配。將有機(jī)相分離，然后用NaHCO3水溶液、乙酸乙酯洗滌。將有機(jī)溶液干燥并且通過蒸發(fā)除去溶劑。產(chǎn)物通過反相色譜法純化，使用乙腈和乙酸銨(0.1M)水溶液的混合物。將收集的級分冷凍干燥，得到110mg(30％)的標(biāo)題化合物。1H NMR(500MHz，CD3OD)1.3-4.0(cm，36H)，6.9-7.6(m，6H)，7.9(d，1H)；LCMSm/z 626(M+1)+。
實(shí)施例23 3-氰基-N-{(2S)-2-(4-氟苯基)-4-[3-(八氫-2H-吡啶并[1，2-a]吡嗪-2-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基]丁基}-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺二乙酸鹽
標(biāo)題化合物通過實(shí)施例22中所述的還原胺化流程制備，但是使用3-氰基-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺(參見WO 04/110344)作為醛類起始原料(收率15％)。1H NMR(500MHz，CD3OD)1.4-4.3(cm，44H)，5.8-7.5(cm，6H)；LCMSm/z 558(M+1)+。
起始原料的制備 用于上述實(shí)施例的起始原料或者是市售的，或者是容易地通過標(biāo)準(zhǔn)方法從已知原料制備的。例如，以下反應(yīng)是一些起始原料的例證，但不是限制。
方法1 4-{1-[(3S)-4-[[(3-氰基-5，6，7，8-四氫萘-1-基)羰基]-(甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-甲酸叔丁基酯
(a)4-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-甲酸叔丁基酯 將甲磺酸1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基酯(參見J.Org.Chem.；56；1991；6729；1.0g，3.15mmol)、1-Boc-1，4-二氮雜環(huán)庚烷(0.76g，3.78mmol)、DIPEA(0.49g，3.78mmol)和乙腈(25mL)的溶液加熱到70℃過夜，然后通過蒸發(fā)除去溶劑。殘余物溶解于乙酸乙酯并將溶液用NaHCO3水溶液洗滌，然后用鹽水洗滌。有機(jī)溶液用MgSO4干燥，然后通過蒸發(fā)除去溶劑。產(chǎn)物通過硅膠色譜法純化(乙酸乙酯-庚烷，10％到70％)。得到0.98g(73％)的4-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-甲酸叔丁基酯，為固體。1H NMR(500MHz，CDCl3)1.4(s，9H)，1.7-1.8(m，2H)，2.3-2.4(m，4H)，2.8(dd，2H)，3.1-3.2(t，1H)，3.2-3.3(m，6H)，4.4(s，1H)，7.2(m，2H)，7.3(m，4H)，7.4(m，4H)；LCMSm/z 422(M+1)+。
(b)4-氮雜環(huán)丁烷-3-基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-甲酸叔丁基酯鹽酸鹽 向4-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-甲酸叔丁基酯(1.0g，3.1mmol)在乙醇(15mL)和乙酸(5mL)中的溶液加入炭載氫氧化鈀(0.32g)。將混合物在氫氣(5bar)下室溫?cái)嚢柽^夜，然后通過Celite濾掉催化劑。通過蒸發(fā)除去溶劑并將殘余物在甲苯和稀HCl水溶液之間分配。將兩相分離并將水溶液冷凍干燥過夜。得到700mg(100％)的4-氮雜環(huán)丁烷-3-基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-甲酸叔丁基酯鹽酸鹽，為固體。1H NMR(500MHz，CD3OD)1.5(s，9H)，2.0(b，2H)，2.7-3.0(b，4H)，3.5(d，2H)，3.6(b，2H)，3.9-4.1(b，1H)，4.1-4.4m，4H)；LCMSm/z 292(M+1)+。
(c)4-{1-[(3S)-4-[[(3-氰基-5，6，7，8-四氫萘-1-基)羰基]-(甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-甲酸叔丁基酯 將4-氮雜環(huán)丁烷-3-基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-甲酸叔丁基酯(67mg，0.26mmol)溶解于甲醇(1mL)并將3-氰基-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺(參見WO 04/110344；100mg，0.26mmol)與乙酸(0.2mL)一起溶解于二氯甲烷(1mL)。將兩種溶液合并，然后與已經(jīng)用二氯甲烷預(yù)先洗滌的(聚苯乙烯基甲基)三甲銨氰基硼氫化物(75mg，0.4mmol)混合。反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?小時，然后將溶液與固體支持物分離。將混合物用二氯甲烷(2mL)稀釋，然后用NaHCO3水溶液(2M，2mL)洗滌。有機(jī)相通過相分離柱分離然后通過蒸發(fā)除去溶劑。產(chǎn)物通過硅膠色譜法純化(甲醇-二氯甲烷2％到10％)。得到63mg(39％)的標(biāo)題化合物，為油狀物。1H NMR(500MHz，CDCl3)1.4(s，9H)，1.5-4.1(cm，33H)，6.0-7.3(cm，6H)；LCMSm/z 618(M+1)+。
方法2 4-{1-[(3S)-4-[(3，5-二溴苯甲?；?(甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-甲酸叔丁基酯
標(biāo)題化合物通過方法1c中所述的還原胺化流程制備，但是使用3，5-二溴-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基苯甲酰胺(參見WO 04/110344)作為醛類起始原料(收率33％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)1.4(s，9H)，1.5-3.8(cm，25H)，6.8-7.3(cm，6H)，7.6(s，1H)；LCMSm/z 697(M+1)+。
方法3 4-{1-[(3S)-4-[[(3-氰基-5，6，7，8-四氫萘-1-基)羰基](甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}哌嗪-1-甲酸叔丁基酯
向4-氮雜環(huán)丁烷-3-基哌嗪-1-甲酸叔丁基酯(參見WO96/05193；410mg，1.70mmol)和3-氰基-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺(參見WO 04/110344；500mg，1.33mmol)的甲醇(5mL)溶液加入三乙胺(470mg，4.62mmol)，然后加入氰基硼氫化鈉(580mg，9.24mmol)、氯化鋅(630mg，4.62mmol)和甲醇(5mL)的混合物。將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?0分鐘，然后通過蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物溶解于乙酸乙酯并將溶液用NaHCO3水溶液洗滌，然后用鹽水洗滌。有機(jī)相通過相分離柱分離然后通過蒸發(fā)除去溶劑。產(chǎn)物通過硅膠色譜法純化(甲醇-二氯甲烷2％到20％)。得到590mg(73％)的標(biāo)題化合物，為油狀物。1H NMR(500MHz，CDCl3)1.4(s，9H)，1.5-4.1(cm，31H)，6.0-7.4(cm，6H)；LCMSm/z 604(M+1)+。
方法4 (1-{1-[(3S)-4-[(3，5-二溴苯甲酰基)(甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)-丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁基酯
標(biāo)題化合物通過方法3中所述的還原胺化流程制備，但是使用3，5-二溴-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基苯甲酰胺(參見WO 04/110344)作為醛類起始原料和(1-氮雜環(huán)丁烷-3-基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁基酯(參見WO 96/05193)作為氮雜環(huán)丁烷類起始原料(收率47％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)1.3-3.5(cm，31H)，3.6-3.8(m，1H)，4.4(b，1H)，6.8-7.3(cm，6H)，7.6(s，1H)；LCMSm/z 697(M+1)+。
方法5 [(1-{1-[(3S)-4-[(3，5-二溴苯甲?；?(甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}哌啶-4-基)甲基]氨基甲酸叔丁基酯
(a)({1-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]哌啶-4-基}甲基)氨基甲酸叔丁基酯 將(哌啶-4-基甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.81g，3.8mmol)、甲磺酸1-(二苯甲基)-氮雜環(huán)丁烷-3-基酯(參見J.Org.Chem.；56；1991；6729；1.0g，3.2mmol)、乙腈(25mL)和DIPEA(0.50g，3.8mmol)的混合物加熱至回流過夜，然后通過蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物溶解于乙酸乙酯并將溶液用1M NaHCO3水溶液洗滌。有機(jī)溶液用MgSO4干燥，然后通過蒸發(fā)除去溶劑。得到0.18g(13％)的({1-[1-(二苯甲基)-氮雜環(huán)丁烷-3-基]哌啶-4-基}甲基)氨基甲酸叔丁基酯，為油狀物。1H NMR(500MHz，CDCl3)1.2-1.4(m，3H)，1.5(s，9H)，1.6-1.7(d，2H)，1.7-1.8(t，2H)，2.7(d，2H)，2.9-3.0(m，3H)，3.0(t，2H)，3.4(t，2H)，4.4(s，1H)，4.7(b，1H)，7.2(m，2H)，7.3(m，4H)，7.4(m，4H)；LCMSm/z436(M+1)+。
(b)[(1-氮雜環(huán)丁烷-3-基哌啶-4-基)甲基]氨基甲酸叔丁基酯鹽酸鹽 向({1-[1-(二苯甲基)-氮雜環(huán)丁烷-3-基]哌啶-4-基}甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(0.18g，0.42mmol)的乙酸(5mL)溶液加入炭載氫氧化鈀(0.06g)。將混合物在氫氣(5bar)下室溫?cái)嚢柽^夜，然后通過Celite濾掉催化劑。通過蒸發(fā)除去溶劑并將殘余物在甲苯和稀HCl水溶液之間分配。將兩相分離，然后將水溶液冷凍干燥。得到0.13g(98％)的[(1-氮雜環(huán)丁烷-3-基哌啶-4-基)甲基]氨基甲酸叔丁基酯鹽酸鹽。1H NMR(500MHz，CD3OD)1.2-4.8(cm，16H)；LCMSm/z 270(M+1)+。
(c)[(1-{1-[(3S)-4-[(3，5-二溴苯甲?；?(甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}哌啶-4-基)甲基]氨基甲酸叔丁基酯 標(biāo)題化合物通過方法1c中所述的還原胺化流程制備，但是使用3，5-二溴-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基苯甲酰胺(參見WO 04/110344)作為醛類起始原料和使用[(1-氮雜環(huán)丁烷-3-基哌啶-4-基)甲基]氨基甲酸叔丁基酯作為氮雜環(huán)丁烷類起始原料(收率28％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)1.2(m，2H)，1.4(s，9H)，1.4-3.8(cm，24H)，4.6(b，1H)，6.8-7.3(m，6H)，7.8(s，1H)；LCMSm/z 711(M+1)+。
方法6 [(1-{1-[(3S)-4-[[(3-氰基-5，6，7，8-四氫萘-1-基)羰基](甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}哌啶-4-基)甲基]氨基甲酸叔丁基酯
標(biāo)題化合物通過方法1c中所述的還原胺化流程制備，但是使用[(1-氮雜環(huán)丁烷-3-基哌啶-4-基)甲基]氨基甲酸叔丁基酯(參見方法5c)作為氮雜環(huán)丁烷類起始原料(收率41％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)1.2(q，2H)，1.4(s，9H)，1.5-4.2(cm，32H)，4.7(b，1H)，6.0-7.4(cm，6H)；LCMSm/z 632(M+1)+。
方法7 (1-{1-[(3S)-4-[(3，5-二溴苯甲?；?(甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔丁基酯
(a){1-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]哌啶-4-基}甲基氨基甲酸叔丁基酯 將甲基(哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁基酯(0.71g，3.3mmol)、甲磺酸1-(二苯甲基)-氮雜環(huán)丁烷-3-基酯(參見J.Org.Chem.；56；1991；6729；0.92g，2.9mmol)、乙腈(40mL)和三乙胺(0.36g，3.6mmol)的混合物加熱至回流過夜，然后通過蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物溶解于乙酸乙酯并將溶液用NaHCO3水溶液洗滌。將有機(jī)溶液分離并且通過蒸發(fā)除去溶劑。產(chǎn)物在硅膠上色譜純化(乙酸乙酯)。得到0.79g(63％)的{1-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]哌啶-4-基}甲基氨基甲酸叔丁基酯，為油狀物。1H NMR(500MHz，CDCl3)1.4(s，9H)，1.5-1.9(m，7H)，2.7(s，3H)，2.8(d，2H)，2.9(t，2H)，3.0(m，1H)，3.4(t，2H)，4.4(s，1H)，7.2(m，2H)，7.3(m，4H)，7.4(m，4H)；LCMSm/z 436(M+1)+。
(b)(1-氮雜環(huán)丁烷-3-基哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔丁基酯 向{1-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]哌啶-4-基}-甲基氨基甲酸叔丁基酯(0.79g，1.8mmol)和乙酸(40mL)的溶液加入炭載氫氧化鈀(0.35g)。將混合物在氫氣(5bar)下室溫?cái)嚢柽^夜，然后通過Celite濾掉催化劑。通過蒸發(fā)除去溶劑并將殘余物溶解于乙醇。將溶液過濾通過陽離子交換柱(Isolute SCX-2，10g)。將柱用乙醇洗滌，然后產(chǎn)物用氨氣飽和的甲醇洗脫。得到0.39g(80％)的(1-氮雜環(huán)丁烷-3-基哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔丁基酯。1H NMR(500MHz，CDCl3)1.4(s，9H)，1.6-2.0(m，7H)，2.7(s，3H)，2.8(d，2H)，3.2(qn，1H)，3.5-3.7(m，4H)，4.0(b，1H)；LCMSm/z 270(M+1)+。
(c)(1-{1-[(3S)-4-[(3，5-二溴苯甲?；?(甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔丁基酯 標(biāo)題化合物通過方法3中所述的還原胺化流程制備，但是使用3，5-二溴-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基苯甲酰胺(參見WO 04/110344)作為醛類起始原料和(1-氮雜環(huán)丁烷-3-基哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔丁基酯作為氮雜環(huán)丁烷類起始原料(收率57％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)1.4(s，9H)，1.5-4.1(cm，27H)，6.8-7.2(cm，6H)，7.7(s，1H)；LCMSm/z 711(M+1)+。
方法8 (1-{1-[(3S)-4-[(3-氰基-1-萘甲?；?(甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔丁基酯
標(biāo)題化合物通過方法3中所述的還原胺化流程制備，但是使用3-氰基-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基-1-萘甲酰胺(參見WO 04/110344)作為醛類起始原料和(1-氮雜環(huán)丁烷-3-基哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔丁基酯(參見方法7c)作為氮雜環(huán)丁烷類起始原料(收率78％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)1.4(s，9H)，1.6-4.1(cm，26H)，4.4(b，1H)，6.4-7.9(cm，9H)，8.2(s，1H)；LCMSm/z 628(M+1)+。
方法9 (1-{1-[(3S)-4-[[(3-氰基-5，6，7，8-四氫萘-1-基)羰基](甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔丁基酯
標(biāo)題化合物通過方法3中所述的還原胺化流程制備，但是使用3-氰基-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺(參見WO 04/110344)作為醛類起始原料和(1-氮雜環(huán)丁烷-3-基哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔丁基酯(參見方法7c)作為氮雜環(huán)丁烷類起始原料(收率25％)。1H NMR(500MHz，CD3OD)1.4(s，9H)，1.5-4.2(cm，35H)，5.8-8.4(cm，6H)；LCMSm/z 632(M+1)+。
方法10 (1-{1-[(3S)-4-[(3-氰基-1-萘甲?；?(甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁基酯
標(biāo)題化合物通過方法3中所述的還原胺化流程制備，但是使用3-氰基-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基-1-萘甲酰胺(參見WO 04/110344)作為醛類起始原料和(1-氮雜環(huán)丁烷-3-基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁基酯(參見WO 96/05193)作為氮雜環(huán)丁烷類起始原料(收率60％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)1.0-4.0(cm，32H)，4.4(b，1H)，6.4-8.0(cm，9H)，8.2(s，1H)；LCMSm/z 614(M+1)+。
方法11 (1-{1-[(3S)-4-[[(3-氰基-5，6，7，8-四氫萘-1-基)羰基](甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁基酯
標(biāo)題化合物通過方法3中所述的還原胺化流程制備，但是使用3-氰基-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺(參見WO 04/110344)作為醛類起始原料和(1-氮雜環(huán)丁烷-3-基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁基酯(參見WO96/05193)作為氮雜環(huán)丁烷類起始原料(收率65％)。1H NMR(500MHz，CD3OD)1.4(s，9H)，1.5-4.2(cm，32H)，5.8-7.5(cm，6H)；LCMSm/z 618(M+1)+。
方法12 [2-((3R)-4-{1-[(3S)-4-[[(3-氰基-5，6，7，8-四氫萘-1-基)羰基](甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}嗎啉-3-基)乙基]氨基甲酸叔丁基酯
(a)(3S)-4-芐基-3-(氯甲基)嗎啉 向[(3R)-4-芐基嗎啉-3-基]甲醇(參見J.Med.Chem；29；1986；1288-1290；1.83g，8.8mmol)的無水二氯甲烷(15mL)溶液加入亞硫酰氯(3.15g，26.5mmol)和DMF(2滴)。將混合物加熱至回流2小時30分鐘，然后通過蒸發(fā)除去溶劑。殘余物用NaHCO3水溶液處理并將溶液用乙酸乙酯提取。將有機(jī)溶液分離并且通過蒸發(fā)除去溶劑。得到1.88g(94％)的(3S)-4-芐基-3-(氯甲基)嗎啉，為油狀物。1H NMR(500MHz，CDCl3)2.3-2.4(m，1H)，2.7(m，1H)，2.8(m，1H)，3.5(d，1H)，3.6-3.9(m，5H)，4.0(d，1H)，7.3(m，1H)，7.4(m，4H)；LCMSm/z 226(M+1)+。
(b)(3R)-4-芐基嗎啉-3-甲腈 向(3S)-4-芐基-3-(氯甲基)嗎啉(1.83g，8.1mmol)的二氯甲烷(6mL)溶液加入酸式硫酸四丁基銨(0.14g，0.42mmol)、NaOH(0.033g，0.83mmol)和水(6mL)的混合物，隨后加入KCN(0.54g，8.3mmol)。使混合物回流20小時，然后用二氯甲烷稀釋。有機(jī)相用水洗滌兩次，然后通過相分離柱分離。通過蒸發(fā)除去溶劑并將產(chǎn)物通過硅膠色譜法純化(甲醇-二氯甲烷0到5％)。得到1.66g(95％)的(3R)-4-芐基嗎啉-3-甲腈。1H NMR(500MHz，CDCl3)2.4(m，1H)，2.6(dd，1H)，2.6-2.7(m，1H)，2.8(dd，1H)，2.9(m，1H)，3.4(d，1H)，3.7-3.9(m，5H)，7.3(m，1H)，7.4(m，4H)m/z 217(M+1)+。
(c){2-[(3R)-4-芐基嗎啉-3-基]乙基}胺 將(3R)-4-芐基嗎啉-3-甲腈(0.64g，2.9mmol)溶解于包含KOH(0.08g，1.4mmol)和已經(jīng)用水和2-丙醇預(yù)先洗滌過的阮內(nèi)鎳(0.58g，濕)的2-丙醇(4mL)。在攪拌下將混合物加熱至回流6小時。在冷卻到室溫之后，通過Celite濾掉催化劑并將濾餅用2-丙醇洗滌。通過蒸發(fā)除去溶劑并將殘余物在HCl水溶液(2M，6mL)中攪拌15分鐘。通過加入NaOH(2M)將混合物堿化，然后用二氯甲烷提取。有機(jī)相通過相分離柱分離。通過蒸發(fā)除去溶劑并將產(chǎn)物在硅膠上色譜純化(二氯甲烷-甲醇13∶1)。得到0.36g(60％)的{2-[(3R)-4-芐基嗎啉-3-基]乙基}胺，為油狀物。1H NMR(500MHz，CDCl3)1.6-1.8(m，2H)，2.2(m，1H)，2.5(m，1H)，2.6-2.7(m，1H)，2.7-2.8(m，1H)，2.8-2.9(m，1H)，3.2(d，1H)，3.5(dd，1H)，3.6(m，1H)，3.7(m，1H)，3.8(dd，1H)，4.1(d，1H)，7.3(m，1H)，74(m，4H)；LCMSm/z 221(M+1)+。
(d){2-[(3R)-4-芐基嗎啉-3-基]乙基}氨基甲酸叔丁基酯 在氮?dú)庀聦2-[(3R)-4-芐基嗎啉-3-基]乙基}氨基甲酸叔丁基酯(036g，1.6mmol)溶解于無水THF(5mL)，并且向得到的溶液加入三乙胺(0.34g，3.3mmol)和二碳酸二叔丁基酯(0.36g，1.7mmol)。將混合物在室溫?cái)嚢?小時，然后用二氯甲烷稀釋。溶液用NaHCO3水溶液和鹽水洗滌兩次。有機(jī)相通過相分離柱分離。通過蒸發(fā)除去溶劑并將產(chǎn)物在硅膠上色譜純化(二氯甲烷-氨氣飽和的甲醇13∶1)。得到0.53g(99％)的{2-[(3R)-4-芐基嗎啉-3-基]乙基}氨基甲酸叔丁基酯，為油狀物。m/z 321(M+1)+。
(e){2-[(3R)-嗎啉-3-基]乙基}氨基甲酸叔丁基酯 向{2-[(3R)-4-芐基嗎啉-3-基]乙基}氨基甲酸叔丁基酯(0.51g，1.6mmol)的乙醇溶液(15mL)加入氫氧化鈀(20％，在炭上，0.22g)和催化量的乙酸。將混合物在5bar氫氣下室溫?cái)嚢柽^夜。濾掉催化劑并且通過蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物再溶解于乙醇(1mL)和THF(10mL)。使溶液過濾通過陽離子交換柱(Isolute SCX-2，10g)。將柱用THF洗滌，然后產(chǎn)物用氨氣飽和的甲醇洗脫。通過蒸發(fā)除去溶劑，得到0.32g(86％)的{2-[(3R)-嗎啉-3-基]乙基}氨基甲酸叔丁基酯，為油狀物。1H NMR(500MHz，CD3OD)1.4-1.6(m，11H)，2.8-3.0(m，3H)，3.1-3.3(m，3H)，3.5-3.6(m，1H)，3.8(d，2H)；LCMSm/z 231(M+1)+。
(f)(2-{(3R)-4-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]嗎啉-3-基}乙基)氨基甲酸叔丁基酯 向{2-[(3R)-嗎啉-3-基]乙基}氨基甲酸叔丁基酯(0.32g，1.4mmol)和1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-酮(參見Bioorg.Med.Chem.Lett.；13；2003；2191-2194，0.31g，1.3mmol)的甲醇(5mL)溶液加入乙酸(0.5mL)。將溶液與(聚苯乙烯基甲基)三甲銨氰基硼氫化物(4.2mmol/g，0.34g，1.8mmol)混合。使用微波單節(jié)點(diǎn)加熱將混合物在120℃下加熱8分鐘。將溶液過濾，然后通過蒸發(fā)除去溶劑。殘余物溶解于二氯甲烷并將溶液用NaHCO3水溶液洗滌兩次。有機(jī)溶液通過使用相分離柱分離。通過蒸發(fā)除去溶劑并將產(chǎn)物在硅膠上色譜純化(二氯甲烷-甲醇11∶1)。得到0.49g(79％)的(2-{(3R)-4-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]嗎啉-3-基}乙基)氨基甲酸叔丁基酯。LCMSm/z 452(M+1)+。
(g){2-[(3R)-4-氮雜環(huán)丁烷-3-基嗎啉-3-基]乙基}氨基甲酸叔丁基酯 將(2-{(3R)-4-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]嗎啉-3-基}乙基)氨基甲酸叔丁基酯(0.49g，1.1mmol)的乙醇(10mL)溶液與氫氧化鈀(20％，在炭上，0.15g)和催化量的乙酸混合。將混合物在5bar氫氣和RT下攪拌過夜。濾掉催化劑并且通過蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物再溶解于乙醇(1mL)和THF(10mL)。溶液過濾通過強(qiáng)陽離子交換柱(Isolute SCX-2，10g)。將柱用THF洗滌，然后產(chǎn)物用氨氣飽和的甲醇洗脫。通過蒸發(fā)除去溶劑，得到0.27g(86％)的{2-[(3R)-4-氮雜環(huán)丁烷-3-基嗎啉-3-基]乙基}氨基甲酸叔丁基酯，為油狀物。1H NMR(500MHz，CDCl3)1.4(s，9H)，1.6(m，2H)，2.2(m，1H)，2.4(m，1H)，2.6(m，1H)，3.0-3.2(m，2H)，3.5-3.8(m，8H)，4.6(m，1H)；LCMSm/z 286(M+1)+。
(h)[2-((3R)-4-{1-[(3S)-4-[[(3-氰基-5，6，7，8-四氫萘-1-基)羰基](甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}嗎啉-3-基)乙基]氨基甲酸叔丁基酯 標(biāo)題化合物通過方法1c中所述的還原胺化流程制備，但是使用{2-[(3R)-4-氮雜環(huán)丁烷-3-基嗎啉-3-基]乙基}氨基甲酸叔丁基酯作為氮雜環(huán)丁烷類起始原料(收率35％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)1.4(s，9H)，1.5-4.2(cm，31H)，4.6(b，1H)，6.1-7.4(cm，6H)；LCMSm/z 648(M+1)+。
方法13 [2-((3R)-4-{1-[(3S)-4-[(3，5-二溴苯甲?；?(甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}嗎啉-3-基)乙基]氨基甲酸叔丁基酯
標(biāo)題化合物通過方法1c中所述的還原胺化流程制備，但是使用3，5-二溴-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基苯甲酰胺(參見WO 04/110344)作為醛類起始原料和{2-[(3R)-4-氮雜環(huán)丁烷-3-基嗎啉-3-基]乙基}氨基甲酸叔丁基酯(參見方法12g)作為氮雜環(huán)丁烷類起始原料(收率35％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)1.4(s，9H)，1.5-4.0(cm，26H)，4.6(b，1H)，6.8-7.2(cm，6H)，7.6(s，1H)；LCMSm/z 727(M+1)+。
方法14 5-{1-[(3S)-4-[[(3-氰基-5，6，7，8-四氫萘-1-基)羰基]-(甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}八氫吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁基酯
(a)5-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]八氫吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁基酯 將八氫吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁基酯(0.23g，1.1mmol)溶解于THF(2mL)和將甲磺酸1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基酯(參見J.Org.Chem.；56；1991；6729；0.32g，1.0mmol)溶解于THF(1mL)。將兩種溶液混合并向混合物中加入三乙胺(0.15g，1.5mmol)。使用微波單節(jié)點(diǎn)加熱將反應(yīng)混合物加熱到160℃10分鐘。通過蒸發(fā)除去溶劑并將產(chǎn)物通過反相色譜法純化，使用乙腈和0.1M乙酸銨水溶液的混合物。得到0.21g(47％)的5-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]八氫吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁基酯。LCMSm/z 434(M+1)+。
(b)5-氮雜環(huán)丁烷-3-基八氫吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁基酯 向小瓶中裝載炭載氫氧化鈀(13mg)和5-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]八氫吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁基酯(0.21g，0.47mmol)、乙酸(0.1mL)和甲醇(3mL)的混合物。將混合物在1.6bar氫氣和室溫下攪拌21小時。通過Celite濾掉催化劑并將濾餅用甲醇洗滌。將濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮并將殘余物再溶解于甲醇(3mL)。將5-氮雜環(huán)丁烷-3-基八氫吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁基酯的溶液不經(jīng)分離氮雜環(huán)丁烷中間體直接用于下一步。LCMSm/z 268(M+1)+。
(c)5-{1-[(3S)-4-[[(3-氰基-5，6，7，8-四氫萘-1-基)羰基]-(甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}八氫吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁基酯 向5-氮雜環(huán)丁烷-3-基八氫吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁基酯(參見上述)的甲醇(3mL)溶液加入3-氰基-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺(參見WO 04/110344；143mg，0.38mmol)、(聚苯乙烯基甲基)三甲銨氰基硼氫化物(93mg，0.49mmol)和乙酸(0.3mL)。將反應(yīng)混合物在室溫下振搖2小時。濾掉樹脂并且通過蒸發(fā)除去溶劑。產(chǎn)物通過反相色譜法純化，使用乙腈和0.1M乙酸銨水溶液的混合物，得到19mg(8％兩個步驟)。LCMSm/z 630(M+1)+。
方法15 (1S，4S)-5-{1-[(3S)-4-[[(3-氰基-5，6，7，8-四氫萘-1-基)羰基](甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}-2，5-二氮雜雙環(huán)[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁基酯
標(biāo)題化合物通過方法14中所述的流程制備，但是使用(1S，4S)-2-Boc-2，5-二氮雜雙環(huán)[2.2.1]庚烷作為胺起始原料(收率6％，三個步驟)。LCMSm/z 616(M+1)+。
方法16 [2-(1-{1-[(3S)-4-[[(3-氰基-5，6，7，8-四氫萘-1-基)羰基](甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}哌啶-2-基)乙基]甲基氨基甲酸叔丁基酯
(a)甲基(2-吡啶-2-基乙基)氨基甲酸叔丁基酯 N-甲基-2-吡啶-2-基乙胺(0.98g，7.2mmol)溶解于無水二氯甲烷(15mL)中并且在0℃下在10分鐘時間內(nèi)向得到的溶液加入二碳酸二叔丁基酯(2.0g，9.0mmol)。將混合物在0℃攪拌20分鐘，然后在室溫?cái)嚢?5分鐘。加入聚苯乙烯-三胺(1.02g)加入并將混合物在室溫?cái)嚢?小時。濾掉樹脂并且用二氯甲烷洗滌。通過蒸發(fā)除去溶劑，得到1.72g(97％)的甲基(2-吡啶-2-基乙基)氨基甲酸叔丁基酯。1H NMR(500MHz，CDCl3)14(s，9H)，2.8(s，3H)，3.0(b，2H)，3.6(t，2H)，7.1(b，1H)，7.2(b，1H)，7.6(t，1H)，8.6(b，1H)；LCMSm/z 237(M+1)+。
(b)甲基(2-哌啶-2-基乙基)氨基甲酸叔丁基酯 向反應(yīng)容器裝載氧化鈀(IV)(80％，33mg)、甲基(2-吡啶-2-基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(0.51g，2.2mmol)的乙醇(3mL)溶液和乙酸(0.1mL)。將混合物在氫氣(1.6bar)和室溫下攪拌57小時。通過Celite濾掉催化劑并且通過蒸發(fā)除去溶劑。得到0.58g(94％)的甲基(2-哌啶-2-基乙基)氨基甲酸叔丁基酯。1H NMR(500MHz，CDCl3)1.4(m，1H)，1.5(s，9H)，1.6-2.0(m，7H)，2.6-2.8(m，2H)，2.8(s，3H)，3.1(b，1H)，3.3(b，1H)，3.5(m，1H)，3.8(m，1H)；LCMSm/z 243(M+1)+。
(c)(2-{1-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]哌啶-2-基}乙基)甲基氨基甲酸叔丁基酯 向甲基(2-哌啶-2-基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(0.57g，2.0mmol)和1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-酮(參見Bioorg.Med.Chem.Lett.；13；2003；2191-2194，0.47g，2.0mmol)的甲醇(3mL)溶液加入乙酸(0.3mL)。將溶液與(聚苯乙烯基甲基)三甲銨氰基硼氫化物(4.2mmol/g，0.49g，2.6mmol)混合并使用微波單節(jié)點(diǎn)加熱將混合物在140℃加熱5分鐘。濾掉樹脂然后通過蒸發(fā)除去溶劑。產(chǎn)物通過反相色譜法純化，使用乙腈和0.1M乙酸銨水溶液的混合物。得到0.55g(60％)的(2-{1-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]哌啶-2-基}乙基)甲基氨基甲酸叔丁基酯。1H NMR(500MHz，CDCl3)1.3-1.4(m，2H)，1.4(s，9H)，1.5-1.8(m，6H)，2.1(m，1H)，2.3(b，1H)，2.5-2.6(m，1H)，2.8(s，3H)，2.8-2.9(m，2H)，3.0-3.3(m，3H)，3.4(m，1H)，3.5(m，1H)，4.4(s，1H)，7.2(m，2H)，7.3(m，4H)，7.4(m，4H)；LCMSm/z 464(M+1)+。
(d)[2-(1-氮雜環(huán)丁烷-3-基哌啶-2-基)乙基]甲基氨基甲酸叔丁基酯 向反應(yīng)容器裝載氫氧化鈀(20％，在炭上，165mg)、以及(2-{1-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]哌啶-2-基}乙基)甲基氨基甲酸叔丁基酯(0.55g，1.2mmol)、乙酸(0.3mL)和甲醇(4mL)的混合物。將混合物在1.6bar氫氣和室溫下攪拌20小時。通過Celite濾掉催化劑并將濾餅用甲醇洗滌。通過蒸發(fā)除去溶劑并將殘余物溶解于HCl(2M)?；旌衔镉眉妆较礈觳⑶彝ㄟ^加入NaOH水溶液(5M)調(diào)節(jié)水溶液到pH 11。混合物用二氯甲烷提取兩次并將合并的有機(jī)溶液用MgSO4干燥。通過蒸發(fā)除去溶劑并將殘余物再溶解于二氯甲烷?；旌衔镞^濾通過陽離子交換柱(Isolute SCX-2，2g)。將柱首先用THF洗滌，然后用二氯甲烷洗滌。產(chǎn)物用氨氣飽和的甲醇和二氯甲烷的混合物(1∶9)洗脫。通過蒸發(fā)除去溶劑，得到32mg(9％)的[2-(1-氮雜環(huán)丁烷-3-基哌啶-2-基)乙基]甲基氨基甲酸叔丁基酯。1H NMR(500MHz，CDCl3)1.3-1.7(m，17H)，2.1(m，1H)，2.3-2.6(m，4H)，2.8(s，3H)，3.0-3.3(m，2H)，3.4-3.7(m，4H)；LCMSm/z 298(M+1)+。
(e)[2-(1-{1-[(3S)-4-[[(3-氰基-5，6，7，8-四氫萘-1-基)羰基](甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}哌啶-2-基)乙基]甲基氨基甲酸叔丁基酯 將[2-(1-氮雜環(huán)丁烷-3-基哌啶-2-基)乙基]甲基氨基甲酸叔丁基酯(32mg，0.11mmol)與3-氰基-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺(參見WO 04/110344；41mg，0.11mmol)一起溶解于二氯甲烷(5mL)。向溶液加入乙酸(0.1mL)和三乙酰氧基硼氫化鈉(73mg，0.33mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?小時，然后用NaHCO3水溶液洗滌。將水溶液用二氯甲烷提取兩次并將合并的有機(jī)溶液通過相分離柱分離。通過蒸發(fā)除去溶劑，得到82mg(69％)的標(biāo)題化合物。LCMSm/z 660(M+1)+。
方法17 {2-[(3R)-4-氮雜環(huán)丁烷-3-基嗎啉-3-基]乙基}二甲胺
(a)(2-{(3R)-4-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]嗎啉-3-基}乙基)胺 將(2-{(3R)-4-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]嗎啉-3-基}乙基)氨基甲酸叔丁基酯(參見方法12f；190mg，0.42mmol)溶解于HCl-飽和的乙酸乙酯(2mL)溶液。將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?小時，用乙酸乙酯稀釋，然后將溶液用NaHCO3水溶液洗滌。有機(jī)相通過相分離柱分離然后通過蒸發(fā)除去溶劑。得到78mg(53％)的(2-{(3R)-4-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]嗎啉-3-基}乙基)胺。1H NMR(500MHz，CD3OD)1.5-1.6(m，2H)，2.2(m，1H)，2.4(m，1H)，2.5(m，1H)，2.6(m，2H)，2.9-3.0(m，2H)，3.3-3.5(m，4H)，3.6-3.7(m，3H)，4.4(s，1H)，7.2(m，2H)，7.3(m，4H)，7.4(m，4H)；LCMSm/z 352(M+1)+。
(b)(2-{(3R)-4-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]嗎啉-3-基}乙基)二甲胺 將(2-{(3R)-4-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]嗎啉-3-基}乙基)胺(78mg，0.22mmol)和甲醛(36％，0.14mL，1.7mmol)溶解于乙腈(2mL)并且向得到的溶液加入氰基硼氫化鈉(28mg，0.44mmol)。將混合物在室溫?cái)嚢柽^夜然后用2M HCl水溶液稀釋。溶液用二氯甲烷洗滌，然后通過加入2M NaOH水溶液使為堿性。將混合物用二氯甲烷提取并將有機(jī)層用Na2SO4干燥。通過蒸發(fā)除去溶劑并將產(chǎn)物在硅膠上色譜純化(二氯甲烷-用氨氣處理的甲醇9∶1)。得到80mg(95％)的(2-{(3R)-4-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]嗎啉-3-基}乙基)二甲胺，為油狀物。1H NMR(500MHz，CDCl3)1.5-1.6(m，2H)，2.1-2.3(m，9H)，24(m，1H)，2.6(m，1H)，2.8-3.0(m，2H)，3.3(m，1H)，3.4(m，1H)，3.4-3.5(m，2H)，3.6-3.8(m，3H)，4.4(s，1H)，7.2(m，2H)，7.3(m，4H)，7.4(m，4)；LCMSm/z 380(M+1)+。
(c){2-[(3R)-4-氮雜環(huán)丁烷-3-基嗎啉-3-基]乙基}二甲胺 將(2-{(3R)-4-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]嗎啉-3-基}乙基)二甲胺(80mg，0.21mmol)與催化量的乙酸一起溶解于乙醇(3mL)并且向得到的溶液加入炭載氫氧化鈀(30mg)。將混合物在氫氣(5bar)下室溫?cái)嚢柽^夜然后濾掉催化劑。通過蒸發(fā)除去溶劑并將殘余物溶解于乙醇(1mL)和THF(10mL)的混合物。混合物過濾通過陽離子交換柱(Isolute SCX-2，10g)。將柱首先用THF洗滌，然后將產(chǎn)物用經(jīng)氨氣飽和的甲醇洗脫。通過蒸發(fā)除去溶劑，得到38mg(84％)的標(biāo)題化合物。1H NMR(500MHz，CD3OD)1.4-4.0(cm，22H)；LCMSm/z 214(M+1)+。
方法18 2-氮雜環(huán)丁烷-3-基八氫吡咯并[1，2-a]吡嗪
(a)2-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]六氫吡咯并[1，2-a]吡嗪-6(2H)-酮 六氫吡咯并[1，2-a]吡嗪-6(2H)-酮(參見WO 03/066635；1.7g，12.1mmol)和甲磺酸1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基酯(參見J.Org.Chem.；56；1991；6729；3.0g，9.4mmol)一起溶解于乙腈(100mL)。將反應(yīng)混合物加熱至回流16小時，然后通過蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物溶解于乙酸乙酯并將溶液用NaHCO3水溶液洗滌。有機(jī)溶液用MgSO4干燥，然后通過蒸發(fā)除去溶劑。產(chǎn)物通過硅膠色譜法純化(甲醇-二氯甲烷5∶95)。得到2.1g(61％)的2-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]六氫吡咯并[1，2-a]吡嗪-6(2H)-酮，為油狀物。1H NMR(500MHz，CD3OD)1.5-1.6(qn，2H)，1.7(b，1H)，1.8(m，1H)，2.1-2.2(m，1H)，2.3-2.4(m，2H)，2.6(d，1H)，2.8-2.9(m，3H)，3.0(m，1H)，3.4(t，2H)，3.6(m，1H)，4.0(d，1H)，4.4(s，1H)，7.2(m，2H)，7.3(m，4H)，7.4(m，4H)；LCMSm/z 362(M+1)+。
(b)2-氮雜環(huán)丁烷-3-基六氫吡咯并[1，2-a]吡嗪-6(2H)-酮 將2-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]六氫吡咯并[1，2-a]吡嗪-6(2H)-酮(2.1g，5.7mmol)溶解于乙酸(100mL)并且向得到的溶液加入炭載氫氧化鈀(1g)。將混合物在氫氣(5bar)下室溫?cái)嚢柽^夜然后通過Celite濾掉催化劑。通過蒸發(fā)除去溶劑并將殘余物在二氯甲烷和稀HCl水溶液之間分配。將兩相分離，然后將水溶液用二氯甲烷提取兩次。通過加入K2CO3使水溶液的pH為堿性。通過二氯甲烷將產(chǎn)物提取到有機(jī)溶液的嘗試沒有成功。通過加入HCl使水溶液為酸性，然后將混合物過濾通過陽離子交換柱(Isolute SCX-2，10g)。將柱用水和乙醇洗滌，然后產(chǎn)物用經(jīng)氨氣飽和的甲醇洗脫。通過蒸發(fā)除去溶劑，得到0.15g(13％)的2-氮雜環(huán)丁烷-3-基六氫吡咯并[1，2-a]吡嗪-6(2H)-酮。1H NMR(500MHz，CDCl3)1.6(t，2H)，1.8(m，1H)，2.2(m，1H)，2.4(m，2H)，2.5(b，2H)，2.7(d，1H)，2.8-2.9(m，2H)，3.2(qn，1H)，3.5-3.7(m，4H)，4.0(dd，1H)；LCMSm/z 196(M+1)+。
(c)2-氮雜環(huán)丁烷-3-基八氫吡咯并[1，2-a]吡嗪 在氮?dú)庀聦?-氮雜環(huán)丁烷-3-基六氫吡咯并[1，2-a]吡嗪-6(2H)-酮(100mg，0.51mmol)溶解于無水THF(20mL)，并且向得到的溶液加入硼烷-THF復(fù)合物(516mg，6.0mmol)。將混合物在室溫?cái)嚢?6小時，然后滴加乙醇(5mL)。通過蒸發(fā)除去溶劑并將殘余物溶解于水。將溶液過濾通過陽離子交換柱(Isolute SCX-2，10g)。將柱用水洗滌，然后用乙醇洗滌。產(chǎn)物用經(jīng)氨氣飽和的甲醇洗脫。通過蒸發(fā)除去溶劑，得到74mg(80％)的標(biāo)題化合物，為油狀物。1H NMR(500MHz，CD3OD)1.4(m，1H)，1.6-2.0(m，4H)，2.0-2.5(m，4H)，2.5-3.2(m，4H)，3.2-3.4(m，2H)，3.6-4.0(m，3H)；LCMSm/z 182(M+1)+。
方法19 2-氮雜環(huán)丁烷-3-基八氫-2H-吡啶并[1，2-a]吡嗪二鹽酸鹽
(a)2-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]八氫-2H-吡啶并[1，2-a]吡嗪 將八氫-2H-吡啶并[1，2-a]吡嗪(1.00g，7.1mmol)和1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-酮(參見Bioorg.Med.Chem.Lett.；13；2003；2191-2194，1.5g，6.5mmol)、甲醇(13.5mL)和乙酸(1.5mL)的混合物分裝到五個試管(5mL)中。向每個試管加入(聚苯乙烯基甲基)三甲銨氰基硼氫化物(4.2mmol/g，0.3g，1.6mmol)，然后使用微波單節(jié)點(diǎn)加熱將每份混合物在120℃加熱5分鐘。濾掉樹脂，然后將溶液合并。通過蒸發(fā)除去溶劑。產(chǎn)物通過硅膠色譜法純化，使用甲醇和二氯甲烷(2％-4％)的混合物。得到1.2g(51％)的2-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]八氫-2H-吡啶并[1，2-a]吡嗪。1H NMR(500MHz，CDCl3)1.2-1.3(m，2H)，1.4-1.5(d，1H)，1.6-1.8(m，4H)，2.0-2.2(m，3H)，2.3(t，1H)，2.5(d，1H)，2.6-3.0(m，6H)，3.4(t，2H)，4.4(s，1H)，7.2(t，2H)，7.3(m，4H)，7.4(m，4H)；LCMSm/z 362(M+1)+。
(b)2-氮雜環(huán)丁烷-3-基八氫-2H-吡啶并[1，2-a]吡嗪二鹽酸鹽 將2-[1-(二苯甲基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]八氫-2H-吡啶并[1，2-a]吡嗪(1.2g，3.3mmol)溶解于乙酸，并且向得到的溶液加入炭載氫氧化鈀(1g)。將混合物在氫氣(5bar)下室溫?cái)嚢柽^夜，然后通過Celite濾掉催化劑。將濾餅用乙醇洗滌幾次。通過蒸發(fā)除去溶劑并將殘余物在甲苯和稀HCl水溶液之間分配。將兩相分離，然后將水溶液用甲苯提取。通過冷凍干燥除去溶劑，得到0.80g(90％)的標(biāo)題化合物。1H NMR(500MHz，CD3OD)1.4-2.2(cm，6H)，3.1-3.5(cm，2H)，3.5-4.0(cm，7H)，4.4-4.9(cm，5H)；LCMSm/z 196(M+1)+。
方法20 3-溴-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基-5-(三氟甲基)苯甲酰胺
(a)3-溴-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)戊-4-烯-1-基]-N-甲基-5-(三氟甲基)苯甲酰胺 向[(2S)-2-(4-氟苯基)戊-4-烯-1-基]甲基胺(參見Bioorg.Med.Chem.Lett；2001；265-270；0.54g，2.8mmol)和3-溴-5-三氟甲基苯甲酸(0.81g，3.0mmol)的DMF(7mL)溶液加入TBTU(0.96g，3.0mmol)和DIPEA(1.41g，10.9mmol)。將反應(yīng)混合物在氮?dú)庀率覝財(cái)嚢柽^夜，然后在乙酸乙酯和NaHCO3水溶液之間分配。水相用乙酸乙酯提取兩次(trice)。合并的有機(jī)溶液用水洗滌兩次(trice)，然后通過相分離柱干燥。通過蒸發(fā)除去溶劑，并將產(chǎn)物通過硅膠色譜法純化(乙酸乙酯-庚烷10％到17％)。得到0.86g(68％)的3-溴-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)戊-4-烯-1-基]-N-甲基-5-(三氟甲基)苯甲酰胺。1H NMR(500MHz，CDCl3)2.1-3.8(cm，8H)，4.9-5.1(m，2H)，5.5-5.8(m，1H)，6.8-7.4(cm，6H)，7.8(s，1H)。LCMSm/z 445(M+1)+。
(b)3-溴-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基-5-(三氟甲基)苯甲酰胺 向3-溴-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)戊-4-烯-1-基]-N-甲基-5-(三氟甲基)苯甲酰胺(0.86g，1.9mmol)的丙酮(45mL)溶液加入OsO4(2.5％，在叔丁醇中，0.49mL，0.039mmol)和4-甲基嗎啉-4-氧化物(0.41g，3.5mmol)。將溶液在氮?dú)庀率覝財(cái)嚢柽^夜，然后加入NaHSO3(39％，45mL)的水溶液。將混合物攪拌2小時，用水稀釋，然后用二氯甲烷提取兩次。將合并的有機(jī)溶液通過相分離柱分離并且通過蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物(1.08g)溶解于THF(18mL)和水(4.5mL)中，并且向得到的溶液加入NaIO4(0.73g，3.4mmol)。將混合物在氮?dú)庀率覝財(cái)嚢柽^夜。將混合物在二氯甲烷和水之間分配。水相用二氯甲烷提取，然后將合并的有機(jī)溶液用鹽水洗滌并且通過相分離柱分離。通過蒸發(fā)除去溶劑。得到0.78g(90％)的標(biāo)題化合物。1H NMR(500MHz，CDCl3)2.4-4.4(cm，8H)，6.2-8.2(cm，7H)，9.8(s，1H)；LCMSm/z 447(M+1)+。
權(quán)利要求
1.一種下式(I)所示的化合物
其中
R1為氫；
R2為C1-C4烷基，其中烷基的一個或多個氫原子可被氟原子代替；
Het選自2，5-二氮雜雙環(huán)[2.2.1]庚烷、八氫吡咯并[3，4-c]吡咯、1，4-二氮雜環(huán)庚烷、八氫吡咯并[1，2-a]吡嗪、八氫-2H-吡啶并[1，2-a]吡嗪、八氫吡嗪并[2，1-c][1，4]嗪；其任選地被C1-C4烷基取代，其中烷基的一個或多個氫原子可被氟原子代替；條件是Het以其一個氮原子連接于氮雜環(huán)丁烷環(huán)；
或者Het為
其中
X為CH2、O或NR6；
R3為(CH2)mNR4R5，或如果X為NR6則R3為H；
R4和R5各自獨(dú)立地選自氫、C1-C4烷基或C2-C4羥基烷基，其中烷基或羥基烷基的一個或多個氫原子可被氟原子代替；
或者R4和R5可以一起形成具有4到8個原子的氮雜環(huán)烷，其任選地被一個或多個氟原子取代；
m為0、1、2、3或4，條件是，如果m為0則X為CH2并且R3連接于環(huán)的3-或4-位；
R6為氫、C1-C4烷基、C2-C4羥基烷基、2-(二甲氨基)-2-氧代乙基，其中烷基或羥基烷基的一個或多個氫原子可被氟原子代替；和
Ar選自
其中
R7為CN或F；
及其藥學(xué)和藥理學(xué)可接受的鹽，和式I的化合物的對映體及其鹽。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R2為甲基，其中甲基的一個或多個氫原子可被氟原子代替。
3.權(quán)利要求1或2的化合物，其中Het選自八氫吡咯并[1，2-a]吡嗪或八氫-2H-吡啶并[1，2-a]吡嗪，其任選地被C1-C4烷基取代，其中烷基的一個或多個氫原子可被氟原子代替。
4.權(quán)利要求1或2的化合物，其中Het為八氫吡嗪并[2，1-c][1，4]嗪，其任選地被C1-C4烷基取代，其中烷基的一個或多個氫原子可被氟原子代替。
5.權(quán)利要求1或2的化合物，其中Het為
其中
X為CH2、O或NR6；
R3為(CH2)mNR4R5，或如果X為NR6則R3為H。
6.權(quán)利要求5的化合物，其中R4為氫或甲基，其中甲基的一個或多個氫原子可被氟原子代替。
7.權(quán)利要求5或6的化合物，其中R5為氫或甲基，其中甲基的一個或多個氫原子可被氟原子代替。
8.權(quán)利要求5的化合物，其中R4和R5一起形成具有4到8個原子的氮雜環(huán)烷，其任選地被一個或多個氟原子取代。
9.權(quán)利要求8的化合物，其中R4和R5一起形成5-6元氮雜環(huán)烷，其任選地被一個或多個氟原子取代。
10.權(quán)利要求5-9中任一項(xiàng)的化合物，其中m為0、1或2。
11.權(quán)利要求5-10中任一項(xiàng)的化合物，其中R6為氫或2-(二甲氨基)-2-氧代乙基。
12.權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)的化合物，其中Ar選自
13.權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)的化合物，其中Ar選自
其中R7為CN或F。
14.權(quán)利要求1-13中任一項(xiàng)的化合物，其中化合物為(S)-對映體。
15.權(quán)利要求1的化合物，選自
3-氰基-N-[(2S)-4-[3-(1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基]-2-(4-氟苯基)丁基]-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺；
3-氰基-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)-4-(3-哌嗪-1-基氮雜環(huán)丁烷-1-基)丁基]-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺；
N-[(2S)-4-[3-(4-氨基哌啶-1-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基]-2-(4-氟苯基)丁基]-3，5-二溴-N-甲基苯甲酰胺三鹽酸鹽；
N-[(2S)-4-{3-[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]氮雜環(huán)丁烷-1-基}-2-(4-氟苯基)丁基]-3，5-二溴-N-甲基苯甲酰胺；
N-[(2S)-4-{3-[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]氮雜環(huán)丁烷-1-基}-2-(4-氟苯基)丁基]-3-氰基-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺；
3，5-二溴-N-[(2S)-4-[3-(1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基]-2-(4-氟苯基)丁基]-N-甲基苯甲酰胺；
3，5-二溴-N-((2S)-2-(4-氟苯基)-4-{3-[4-(甲基氨基)哌啶-1-基]氮雜環(huán)丁烷-1-基}丁基)-N-甲基苯甲酰胺；
3-氰基-N-((2S)-2-(4-氟苯基)-4-{3-[4-(甲基氨基)哌啶-1-基]氮雜環(huán)丁烷-1-基}丁基)-N-甲基-1-萘甲酰胺三鹽酸鹽；
3-氰基-N-((2S)-2-(4-氟苯基)-4-{3-[4-(甲基氨基)-哌啶-1-基]氮雜環(huán)丁烷-1-基}丁基)-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺；
N-[(2S)-4-[3-(4-氨基哌啶-1-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基]-2-(4-氟苯基)丁基]-3-氰基-N-甲基-1-萘甲酰胺三鹽酸鹽；
N-[(2S)-4-[3-(4-氨基哌啶-1-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基]-2-(4-氟苯基)丁基]-3-氰基-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺；
N-[(2S)-4-{3-[(3R)-3-(2-氨基乙基)嗎啉-4-基]氮雜環(huán)丁烷-1-基}-2-(4-氟苯基)丁基]-3-氰基-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺；
N-[(2S)-4-{3-[(3R)-3-(2-氨基乙基)嗎啉-4-基]氮雜環(huán)丁烷-1-基}-2-(4-氟苯基)丁基]-3，5-二溴-N-甲基苯甲酰胺；
3-氰基-N-{(2S)-2-(4-氟苯基)-4-[3-(八氫吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基]丁基}-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺；
3-氰基-N-[(2S)-4-[3-(2，5-二氮雜雙環(huán)[2.2.1]庚烷-2-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基]-2-(4-氟苯基)丁基]-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺；
3-氰基-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)-4-(3-{2-[2-(甲基氨基)乙基]哌啶-1-基}氮雜環(huán)丁烷-1-基)丁基]-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺；
3，5-二溴-N-[(2S)-4-{3-[4-(二甲氨基)哌啶-1-基]氮雜環(huán)丁烷-1-基}-2-(4-氟苯基)丁基]-N-甲基苯甲酰胺；
3-氰基-N-[(2S)-4-(3-{(3R)-3-[2-(二甲氨基)乙基]嗎啉-4-基}氮雜環(huán)丁烷-1-基)-2-(4-氟苯基)丁基]-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺；
3-氰基-N-{(2S)-2-(4-氟苯基)-4-[3-(八氫吡咯并[1，2-a]吡嗪-2(1H)-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基]丁基}-N-甲基-1-萘甲酰胺；
3，5-二溴-N-{(2S)-2-(4-氟苯基)-4-[3-(八氫吡咯并[1，2-a]吡嗪-2(1H)-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基]丁基}-N-甲基苯甲酰胺；
3，5-二溴-N-{(2S)-2-(4-氟苯基)-4-[3-(八氫-2H-吡啶并[1，2-a]吡嗪-2-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基]丁基}-N-甲基苯甲酰胺乙酸鹽；
3-溴-N-{(2S)-2-(4-氟苯基)-4-[3-(八氫-2H-吡啶并[1，2-a]吡嗪-2-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基]丁基}-N-甲基-5-(三氟甲基)苯甲酰胺二乙酸鹽；和
3-氰基-N-{(2S)-2-(4-氟苯基)-4-[3-(八氫-2H-吡啶并[1，2-a]吡嗪-2-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基]丁基}-N-甲基-5，6，7，8-四氫萘-1-甲酰胺二乙酸鹽。
16.權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)的化合物，其用于治療用途。
17.權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)的化合物用于制備治療功能性胃腸病癥的藥物的用途。
18.權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)的化合物用于制備治療IBS的藥物的用途。
19.權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)的化合物用于制備治療功能性消化不良的藥物的用途。
20.一種藥物制劑，包括權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)的化合物作為活性成分和藥學(xué)可接受的載體或稀釋劑。
21.制備式(I)的化合物的方法，包括以下步驟
a)使式(III)的化合物與式(IV)的化合物反應(yīng)
其中R1-R2、Het、和Ar如前述定義；并且條件是使得式(III)化合物的還原烷基化在式(III)化合物的氮雜環(huán)丁烷基團(tuán)的氮原子與式(IV)化合物的醛基碳原子之間形成N-C鍵；或者
b)使式(III)的化合物與式(V)的化合物反應(yīng)
其中R1-R2、Het、和Ar如前述定義；并且L為這樣的基團(tuán)，其使得式(III)化合物的烷基化在式(III)化合物的氮雜環(huán)丁烷基團(tuán)的氮原子與式(V)化合物的與L基團(tuán)相鄰的碳原子之間形成N-C鍵；或者
c)使式(VI)的化合物與式(VII)的化合物反應(yīng)
其中R1-R2、Het、和Ar如前述定義；并且L’為離去基團(tuán)；
其中如有必要，將任何其它官能團(tuán)保護(hù)起來，和
i)除去任何保護(hù)基；
ii)任選地將任何可氧化原子氧化；
iii)任選地形成藥學(xué)可接受的鹽。
22.選自以下的化合物
4-{1-[(3S)-4-[[(3-氰基-5，6，7，8-四氫萘-1-基)羰基]-(甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-甲酸叔丁基酯；
4-{1-[(3S)-4-[(3，5-二溴苯甲?；?(甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-甲酸叔丁基酯；
4-{1-[(3S)-4-[[(3-氰基-5，6，7，8-四氫萘-1-基)羰基](甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}哌嗪-1-甲酸叔丁基酯；
(1-{1-[(3S)-4-[(3，5-二溴苯甲?；?(甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)-丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁基酯；
[(1-{1-[(3S)-4-[(3，5-二溴苯甲?；?(甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}哌啶-4-基)甲基]氨基甲酸叔丁基酯；
[(1-{1-[(3S)-4-[[(3-氰基-5，6，7，8-四氫萘-1-基)羰基](甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}哌啶-4-基)甲基]氨基甲酸叔丁基酯；
(1-{1-[(3S)-4-[(3，5-二溴苯甲?；?(甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔丁基酯；
(1-{1-[(3S)-4-[(3-氰基-1-萘甲?；?(甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔丁基酯；
(1-{1-[(3S)-4-[[(3-氰基-5，6，7，8-四氫萘-1-基)羰基](甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔丁基酯；
(1-{1-[(3S)-4-[(3-氰基-1-萘甲?；?(甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁基酯；
(1-{1-[(3S)-4-[[(3-氰基-5，6，7，8-四氫萘-1-基)羰基](甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁基酯；
[2-((3R)-4-{1-[(3S)-4-[[(3-氰基-5，6，7，8-四氫萘-1-基)羰基](甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}嗎啉-3-基)乙基]氨基甲酸叔丁基酯；
[2-((3R)-4-{1-[(3S)-4-[(3，5-二溴苯甲?；?(甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}嗎啉-3-基)乙基]氨基甲酸叔丁基酯；
5-{1-[(3S)-4-[[(3-氰基-5，6，7，8-四氫萘-1-基)羰基]-(甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}八氫吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁基酯；
(1S，4S)-5-{1-[(3S)-4-[[(3-氰基-5，6，7，8-四氫萘-1-基)羰基](甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}-2，5-二氮雜雙環(huán)[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁基酯；
[2-(1-{1-[(3S)-4-[[(3-氰基-5，6，7，8-四氫萘-1-基)羰基](甲基)氨基]-3-(4-氟苯基)丁基]氮雜環(huán)丁烷-3-基}哌啶-2-基)乙基]甲基氨基甲酸叔丁基酯；
{2-[(3R)-4-氮雜環(huán)丁烷-3-基嗎啉-3-基]乙基}二甲胺；
2-氮雜環(huán)丁烷-3-基八氫吡咯并[1，2-a]吡嗪；
2-氮雜環(huán)丁烷-3-基八氫-2H-吡啶并[1，2-a]吡嗪二鹽酸鹽；和
3-溴-N-[(2S)-2-(4-氟苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基-5-(三氟甲基)苯甲酰胺。
全文摘要
本發(fā)明涉及新的式I氮雜環(huán)丁烷衍生物、包含所述化合物的藥物組合物以及所述化合物作為神經(jīng)激肽(NK)受體拮抗劑在治療胃腸疾病中的應(yīng)用。本發(fā)明還涉及制備式I化合物的方法以及在其制備中應(yīng)用的新中間體。
文檔編號C07D401/04GK101208327SQ200680022415
公開日2008年6月25日 申請日期2006年6月21日 優(yōu)先權(quán)日2005年6月23日
發(fā)明者A·約翰遜, J·約翰遜, S·馮昂格 申請人:阿斯利康(瑞典)有限公司