專利名稱：新穎噻吩衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明關(guān)于式(I)的S1P1/EDG1受體拮抗劑及其于醫(yī)藥組合物的制備中作為活性成份的用途。本發(fā)明亦關(guān)于相關(guān)方面，包括制備該等化合物的方法，含有一種或多種式(I)化合物的醫(yī)藥組合物，及其當(dāng)單獨或與其它活性化合物或治療組合使用時作為改進(jìn)血管功能的化合物及作為免疫調(diào)節(jié)劑的用途。

背景技術(shù)：
人類免疫系統(tǒng)用來保護(hù)人體以對抗可引起感染或疾病的外來微生物及物質(zhì)。復(fù)雜的調(diào)節(jié)機(jī)制可確保免疫響應(yīng)朝向?qū)谷肭治镔|(zhì)或有機(jī)體而并非對抗宿主。于某些情形下，這些控制機(jī)制不受控調(diào)而產(chǎn)生自身免疫響應(yīng)。不受控制的發(fā)炎性響應(yīng)會造成嚴(yán)重的器官、細(xì)胞、組織或關(guān)節(jié)損傷。若使用目前的治療，通常會抑制整個免疫系統(tǒng)且亦會嚴(yán)重危害身體對感染的響應(yīng)能力。此類中典型藥劑包括硫唑嘌呤、苯丁酸氮芥、環(huán)磷酰胺、環(huán)孢素或氨甲蝶呤。當(dāng)將可減輕炎癥并抑制該免疫響應(yīng)的腎上腺皮質(zhì)類固醇用于長期治療時，會引起副作用。雖然非類固醇類的抗炎藥(NSAID)可減輕疼痛及炎癥，但卻呈現(xiàn)出相當(dāng)大的副作用。替代治療包括使用可激活或阻斷細(xì)胞因子信號傳導(dǎo)的藥劑。
具有免疫調(diào)節(jié)性能但不會破壞免疫響應(yīng)且具有減輕的副作用的口服活性化合物會顯著改良目前對未受控發(fā)炎性疾病的治療。
在器官移植領(lǐng)域，必須抑制宿主的免疫響應(yīng)以防止器官排斥反應(yīng)。即使在器官移植接受者服用免疫抑制藥時，其亦會經(jīng)歷某一排斥反應(yīng)。排斥反應(yīng)最頻繁地發(fā)生于器官移植后的前幾周，但排斥反應(yīng)發(fā)作亦會于移植后數(shù)月甚至數(shù)年時出現(xiàn)。通常用多達(dá)三或四種藥物的組合來提供最大保護(hù)抑制排斥反應(yīng)，同時使副作用最小。目前用于治療移植器官排斥反應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)藥物在T-型或B-型白血球活化中會干擾各個細(xì)胞內(nèi)通路。此等藥劑的實例為干擾細(xì)胞因子釋放或信號傳導(dǎo)的環(huán)孢菌素、達(dá)克珠單抗(daclizumab)、巴利昔單抗(basiliximab)、依維莫司(everolimus)、或FK506；抑制核苷酸合成的硫唑嘌呤或來氟米特(leflunomide)；或15-脫氧精胍菌素，即一種白血球分化抑制劑。
廣泛免疫抑制治療的有益效果可體現(xiàn)出其效能；然而，該等藥劑產(chǎn)生的全身免疫抑制會減少免疫系統(tǒng)對感染及惡性腫瘤的防御。而且，標(biāo)準(zhǔn)免疫抑制藥通常以高劑量使用從而會引起或加速器官損傷。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供式(I)的新穎化合物，其為G蛋白耦合受體S1P1/EDG1的拮抗劑并具有強力且長效免疫抑制效果，此效果藉由減少循環(huán)及浸潤T-及B-淋巴細(xì)胞的數(shù)目但并不影響其成熟、記憶或擴(kuò)增而達(dá)成。由S1P1/EDG1拮抗病性引起的循環(huán)T-/B-淋巴細(xì)胞的減少(以及可能觀察到的涉及S1P1/EDG1活化的內(nèi)皮細(xì)胞層功能的改良)使此等化合物可用于處理未受控發(fā)炎性疾病且可用于改良血管功能。
本發(fā)明化合物可單獨使用或與可抑制T-細(xì)胞活性的標(biāo)準(zhǔn)藥劑組合使用以提供一當(dāng)與標(biāo)準(zhǔn)免疫抑制性療法相比較時可減少感染傾向的新穎免疫抑制性療法。而且，本發(fā)明化合物亦可與經(jīng)降低劑量的傳統(tǒng)免疫抑制劑療法組合使用，從而一方面提供有效的免疫抑制活性，同時另一方面減少與較高劑量的標(biāo)準(zhǔn)免疫抑制藥有關(guān)的最終器官損傷。與S1P1/EDG1活化有關(guān)的改良的內(nèi)皮細(xì)胞層功能的觀察可提供化合物改善血管功能的額外益處。
人類S1P1/EDG1受體的核苷酸序列及氨基酸序列為業(yè)內(nèi)已知且公開于(例如)Hla、T.及Maciag，T.J.Biol Chem.265(1990)，9308-9313、WO 91/15583(1991年10月17日公開)、WO99/46277(1999年9月16日公開)。式(I)化合物的效力及效能分別使用GTPγS分析確定EC50值及藉由量測經(jīng)口施用后大鼠體內(nèi)循環(huán)淋巴細(xì)胞來評價(參見實例中)。
以下段落提供組成本發(fā)明化合物的各種化學(xué)部分的定義，且除非另有一清晰陳述的定義提供更廣泛的定義，否則擬于整個說明書及申請專利范圍中統(tǒng)一應(yīng)用。
實施方式 任何所提及的式(I)化合物皆應(yīng)理解為亦指的光學(xué)純對映異構(gòu)體、對映異構(gòu)體(例如，外消旋異構(gòu)體)混合物、非對映體、非對映體混合物、非對映外消旋異構(gòu)體、及非對映外消旋異構(gòu)體混合物，以及此等化合物的鹽(尤指醫(yī)藥上可接受的鹽)及溶劑化物(包括水合物)及其它形態(tài)形式(若適合且方便)。
術(shù)語低級烷基，單獨或與其它基團(tuán)結(jié)合使用時，意指具有1至5個碳原子(較佳為1至3個碳原子)的飽和的、具支鏈的或較佳為直鏈的基團(tuán)。低級烷基的實例為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基、第三丁基及正戊基。
術(shù)語低級烷氧基意指R-O基團(tuán)，其中R為低級烷基。低級烷氧基的較佳實例為甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、異丁氧基、第二丁氧基及第三丁氧基。
術(shù)語羥基-低級烷氧基意指具有一羥基的直鏈或支鏈烷氧基鏈，其中該羥基與該低級烷氧基的氧之間至少有兩個碳原子。羥基-低級烷氧基的實例為2-羥基-乙氧基、3-羥基-丙氧基、2-羥基-丙氧基、4-羥基-丁氧基、3-羥基-1-甲基-丙氧基、3-羥基-丁氧基，等等。
術(shù)語低級烷氨基或二-(低級烷基)氨基分別意指R′-NH-或R′-NR″-基團(tuán)，其中R′及R″各獨立為低級烷基。低級烷氨基或二-(低級烷基)氨基的較佳實例為甲氨基、乙氨基、N，N-二甲氨基及N-甲基-N-乙基-氨基。
術(shù)語鹵素意指氟、氯、溴或碘，較佳指氟或氯。
鹽較佳為式(I)化合物的醫(yī)藥上可接受的鹽。
成鹽基團(tuán)為具有堿性或酸性性質(zhì)的基團(tuán)或基。具有至少一個堿性基團(tuán)或至少一個堿性基(例如，未形成肽鍵或吡啶基的氨基、第二氨基)的化合物可與(例如)無機(jī)酸形成酸加成鹽。當(dāng)存在若干堿性基團(tuán)時，可形成單-或多-酸加成鹽。
具有酸性基團(tuán)(例如，羧基或酚系羥基)的化合物可形成金屬或銨鹽(例如，堿金屬或堿土金屬鹽(例如鈉、鉀、鎂或鈣鹽))或具有氨或適宜有機(jī)胺的銨鹽(例如，第三單胺(例如，三乙基胺或三-(2-羥基乙基)-胺)或雜環(huán)堿(例如，N-乙基-吡啶或N，N′-二甲基-哌嗪)。亦可為鹽的混合物。
具有堿性及酸性基團(tuán)兩者的化合物可形成內(nèi)鹽。
出于分離或純化的目的，以及對進(jìn)一步用作中間物的化合物而言，亦可能使用醫(yī)藥上不可接受的鹽，例如苦味酸鹽。然而，只有醫(yī)藥上可接受的、無毒性的鹽方可用于治療目的，且因此該等鹽為較佳。
詞語醫(yī)藥上可接受的鹽涵蓋對活有機(jī)體無毒的無機(jī)酸或有機(jī)酸(如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸、亞磷酸、亞硝酸、檸檬酸、甲酸、乙酸、草酸、馬來酸、乳酸、酒石酸、富馬酸、苯甲酸、苯乙醇酸、肉桂酸、巴莫酸、硬脂酸、，麥胺酸、天冬胺酸、甲磺酸、乙磺酸、乙二磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸、琥珀酸、三氟乙酸及諸如此類)的鹽或在式(I)化合物實質(zhì)上為酸性的情況下為無機(jī)堿(如一堿金屬或堿土金屬堿，例如，氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣及諸如此類)的鹽。對于醫(yī)藥上可接受的鹽的其它實例，可特別參考[Saltselection for basic drugs」，Int.J.Pharm.(1986)，33，201-217。
i)本發(fā)明為關(guān)于式(I)的新穎噻吩衍生物，
式(I) 其中 R1代表氫、低級烷基、低級烷氧基或鹵素； R2代表氫、低級烷基、低級烷氧基或鹵素； R3代表氫、羥基-低級烷基、2，3-二羥基丙基、二-(羥基-低級烷基)-低級烷基、-CH2-(CH2)k-NR31R32、(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸)-1-基-甲基、(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基-甲基、2-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸)-1-基]-乙基、2-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-乙基、3-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸)-1-基]-丙基、3-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-丙基、(吡咯烷-3-羧酸)-1-基-甲基、(吡咯烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基-甲基、(吡咯烷-2-羧酸)-1-基-甲基、(-2-羧酸低級烷基酯)-1-基-甲基、2-[(吡咯烷-3-羧酸)-1-基]-乙基、2-[(吡咯烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-乙基、2-[(吡咯烷-2-羧酸)-1-基]-乙基、2-[(吡咯烷-2-羧酸低級烷基酯)-1-基]-乙基、3-[(吡咯烷-3-羧酸)-1-基]-丙基、3-[(吡咯烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-丙基、3-[(吡咯烷-2-羧酸)-1-基]-丙基、3-[(吡咯烷-2-羧酸低級烷基酯)-1-基]-丙基、-CH2-(CH2)n-CONR31R32、-CO-NHR31、1-(1-(3-羧基-氮雜環(huán)丁基))-2-乙酰基、1-(1-(2-羧基-吡咯烷基))-2-乙酰基、1-(1-(3-羧基-吡咯烷基))-2-乙?；?、1-(1-(3-羧基-氮雜環(huán)丁基))-3-丙?；?-(1-(2-羧基-吡咯烷基))-3-丙?；?、1-(1-(3-羧基-吡咯烷基))-3-丙酰基、-(CH2)nCH(OH)-CH2-NR31R32、羥基、低級烷氧基、氟-低級烷氧基、羥基-低級烷氧基、二-(羥基-低級烷基)-低級烷氧基、1-甘油基、2-甘油基、2-羥基-3-甲氧基-丙氧基、-OCH2-(CH2)m-NR31R32、2-吡咯烷-1-基-乙氧基、3-吡咯烷-1-基-丙氧基、2-哌嗪-1-基-乙氧基、2-[4-(低級烷基)-哌嗪-1-基]-乙氧基、2-[4-(2-羥基-乙基)-哌嗪-1-基]-乙氧基、3-哌嗪-1-基-丙氧基、3-[4-(低級烷基)-哌嗪-1-基]-丙氧基、3-[4-(2-羥基-乙基)-哌嗪-1-基]-丙氧基、2-嗎啉-4-基-乙氧基、3-嗎啉-4-基-丙氧基、2-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸)-1-基]-乙氧基、2-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-乙氧基、2-[(吡咯烷-3-羧酸)-1-基]-乙氧基、2-[(吡咯烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-乙氧基、2-[(吡咯烷-2-羧酸)-1-基]-乙氧基、2-[(吡咯烷-2-羧酸低級烷基酯)-1-基]-乙氧基、2-[(2-羥基-吡咯烷)-1-基]-乙氧基、2-[(3-羥基-吡咯烷)-1-基]-乙氧基、3-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸)-1-基]-丙氧基、3-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-丙氧基、3-[(吡咯烷-3-羧酸)-1-基]-丙氧基、3-[(吡咯烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-丙氧基、3-[(吡咯烷-2-羧酸)-1-基]-丙氧基、3-[(吡咯烷-2-羧酸低級烷基酯)-1-基]-丙氧基、3-[(2-羥基-吡咯烷)-1-基]-丙氧基、3-[(3-羥基-吡咯烷)-1-基]-丙氧基、2-氨基-3-羥基-2-羥甲基-丙氧基、-O-CH2-CONR31R32、1-(1-(3-羧基-氮雜環(huán)丁基))-1-氧代-2-乙氧基、1-(1-(吡咯烷-2-羧酸)-1-基)-1-氧代-2-乙氧基、1-(1-(吡咯烷-3-羧酸)-1-基)-1-氧代-2-乙氧基、3-胺甲?；?丙氧基、3-(低級烷基胺甲?；?丙氧基、3-(2-羥基乙基胺甲?；?丙氧基、-OCH2-CH(OH)-CH2-NR31R32、3-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸)-1-基]-2-羥基丙氧基、3-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-2-羥基丙氧基、2-羥基-3-[(吡咯烷-3-羧酸)-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-[(吡咯烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-[(吡咯烷-2-羧酸)-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-[(吡咯烷-2-羧酸低級烷基酯)-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-[(2-羥基-吡咯烷)-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-[(3-羥基-吡咯烷)-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-吡咯烷-1-基-丙氧基、2-羥基-3-哌嗪-1-基-丙氧基、2-羥基-3-[4-(低級烷基)-哌嗪-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-[4-(2-羥基-乙基)-哌嗪-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-嗎啉-4-基-丙氧基、-NR31R32、-NHCO-R31、-CH2-(CH2)k-NHSO2R33、-(CH2)nCH(OH)-CH2-NHSO2R33、-OCH2-(CH2)m-NHSO2R33、-OCH2-CH(OH)-CH2-NHSO2R33、-CH2-(CH2)k-NHCOR34、-(CH2)nCH(OH)-CH2-NHCOR34、-OCH2-(CH2)m-NHCOR34、或-OCH2-CH(OH)-CH2-NHCOR34； R31代表氫、甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、2-羥乙基、2-羥基-1-羥甲基-乙基、2-低級烷氧基乙基、3-羥丙基、3-低級烷氧基丙基、2-氨基乙基、2-(低級烷氨基)乙基、2-(二-(低級烷基)氨基)乙基、羧甲基、低級烷基羧甲基、2-羧乙基、或2-(低級烷基羧基)乙基； R32代表氫或甲基； R33代表甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、2-羥基乙基、2-甲氧基乙基、甲氨基、乙氨基、丙氨基、異丙氨基、正丁氨基、或二甲氨基； R34代表羥甲基、羥乙基、胺甲基、甲氨基甲基、二甲氨基甲基、胺乙基、2-甲氨基-乙基，或2-二甲氨基-乙基； k代表整數(shù)1、2、或3； m代表整數(shù)1或2； n代表整數(shù)0、1、或2； R4代表氫、低級烷基或鹵素； R5代表三氟甲基、甲基、乙基或丙基； R6代表視情況可經(jīng)單-或雙-取代的苯基，其中該等取代基為獨立選自甲基、乙基、三氟甲基、鹵素及甲氧基；或視情況可經(jīng)甲基或甲氧基取代的2-、3-或4-吡啶基；且 R7代表氫或甲基； 及光學(xué)純對映異構(gòu)體、對映異構(gòu)體的混合物(例如外消旋異構(gòu)體)、非對映體、非對映體混合物、非對映外消旋異構(gòu)體、非對映外消旋異構(gòu)體混合物、以及此等化合物的鹽及溶劑化物及其它形態(tài)形式。
ii)本發(fā)明的一較佳實施例為關(guān)于實施例i)的噻吩衍生物，其中R1及R4代表氫，且R2代表甲基。
iii)本發(fā)明的另一較佳實施例為關(guān)于實施例i)的噻吩衍生物，其中R1代表氫且R2及R4代表甲基，其中R4相對于R3處于鄰位。
iv)本發(fā)明的另一較佳實施例為關(guān)于實施例i)的噻吩衍生物，其中R1代表氫，R2代表甲基且R4代表相對于R3處于鄰位的乙基。
v)本發(fā)明的另一較佳實施例為關(guān)于實施例i)的噻吩衍生物，其中R1代表氫，R2代表甲基且R4代表相對于R3處于鄰位的氯。
vi)本發(fā)明的另一較佳實施例為關(guān)于實施例i)的噻吩衍生物，其中R1及R4代表氫且R2代表氯。
vii)本發(fā)明的另一較佳實施例為關(guān)于實施例i)的噻吩衍生物，其中R1代表氫、R2代表甲氧基且R4代表相對于R3處于鄰位的氯或氟。
viii)本發(fā)明的另一較佳實施例為關(guān)于實施例i)的噻吩衍生物，其中R1代表甲氧基且R2及R4代表氫。
ix)本發(fā)明的一更佳實施例為關(guān)于實施例i)至viii)中任一個的噻吩衍生物，其中R3代表氫、羥基-低級烷基、2，3-二羥基丙基、二-(羥基-低級烷基)-低級烷基、(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸)-1-基-甲基、(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基-甲基、(吡咯烷-3-羧酸)-1-基-甲基、(吡咯烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基-甲基、(吡咯烷-2-羧酸)-1-基-甲基、(吡咯烷-2-羧酸低級烷基酯)-1-基-甲基、-CH2-(CH2)n-CONR31R32、-CO-NHR31、-(CH2)nCH(OH)-CH2-NR31R32、低級烷氧基、羥基-低級烷氧基、二-(羥基-低級烷基)-低級烷氧基、1-甘油基、2-甘油基、2-羥基-3-甲氧基-丙氧基、-OCH2-(CH2)m-NR31R32、2-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸)-1-基]-乙氧基、2-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-乙氧基、2-[(吡咯烷-3-羧酸)-1-基]-乙氧基、2-[(吡咯烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-乙氧基、2-[(吡咯烷-2-羧酸)-1-基]-乙氧基、2-[(吡咯烷-2-羧酸低級烷基酯)-1-基]-乙氧基、2-[(2-羥基-吡咯烷)-1-基]-乙氧基、2-[(3-羥基-吡咯烷)-1-基]-乙氧基、3-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸)-1-基]-丙氧基、3-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-丙氧基、3-[(吡咯烷-3-羧酸)-1-基]-丙氧基、3-[(吡咯烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-丙氧基、3-[(吡咯烷-2-羧酸)-1-基]-丙氧基、3-[(吡咯烷-2-羧酸低級烷基酯)-1-基]-丙氧基、3-[(2-羥基-吡咯烷)-1-基]-丙氧基、3-[(3-羥基-吡咯烷)-1-基]-丙氧基、2-氨基-3-羥基-2-羥甲基-丙氧基、-O-CH2-CONR31R32、-OCH2-CH(OH)-CH2-NR31R32、3-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸)-1-基]-2-羥基丙氧基、3-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-2-羥基丙氧基、2-羥基-3-[(吡咯烷-3-羧酸)-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-[(吡咯烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-[(吡咯烷-2-羧酸)-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-[(吡咯烷-2-羧酸低級烷基酯)-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-[(2-羥基-吡咯烷)-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-[(3-羥基-吡咯烷)-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-吡咯烷-1-基-丙氧基、2-羥基-3-哌嗪-1-基-丙氧基、2-羥基-3-[4-(低級烷基)-哌嗪-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-[4-(2-羥基-乙基)-哌嗪-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-嗎啉-4-基-丙氧基、-NR31R32-NHCO-R31、-CH2-(CH2)k-NHSO2R33、-(CH2)nCH(OH)-CH2-NHSO2R33、-OCH2-(CH2)m-NHSO2R33、-OCH2-CH(OH)-CH2-NHSO2R33、-CH2-(CH2)k-NHCOR34、-(CH2)nCH(OH)-CH2-NHCOR34、-OCH2-(CH2)m-NHCOR34，或-OCH2-CH(OH)-CH2-NHCOR34，其中R31、R32、R33及R34如以上式(I)所定義。
x)本發(fā)明的另一更佳實施例為關(guān)于實施例i)至viii)的任一個的噻吩衍生物，其中R3代表羥基-低級烷基、2，3-二羥基丙基、二-(羥基-低級烷基)-低級烷基、(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸)-1-基-甲基、-CO-NHR31、-(CH2)nCH(OH)-CH2-NR31R32、低級烷氧基、羥基-低級烷氧基、二-(羥基-低級烷基)-低級烷氧基、1-甘油基、2-甘油基、2-羥基-3-甲氧基-丙氧基、-OCH2-(CH2)m-NR31R32、2-氨基-3-羥基-2-羥甲基-丙氧基、-O-CH2-CONR31R32、-OCH2-CH(OH)-CH2-NR31R32、-NR31R32、-NHCO-R31、-CH2-(CH2)k-NHSO2R33、-(CH2)nCH(OH)-CH2-NHSO2R33、-OCH2-(CH2)m-NHSO2R33、-OCH2-CH(OH)-CH2-NHSO2R33、-CH2-(CH2)k-NHCOR34、-(CH2)nCH(OH)-CH2-NHCOR34、-OCH2-(CH2)m-NHCOR34，或-OCH2-CH(OH)-CH2-NHCOR34，其中R31、R32、R33及R34如上式(I)所定義。
xi)本發(fā)明的又一更佳實施例為關(guān)于實施例i)至viii)的任一個的噻吩衍生物，其中R3代表羥基-低級烷基、2，3-二羥基丙基、二-(羥基-低級烷基)-低級烷基、-CO-NHR31、低級烷氧基、羥基-低級烷氧基、二-(羥基-低級烷基)-低級烷氧基、1-甘油基、2-甘油基、2-羥基-3-甲氧基-丙氧基，或-O-CH2-CONR31R32，其中R31及R32如以上式(I)所定義。
xii)本發(fā)明的一尤佳實施例為關(guān)于實施例i)至xi)中任一個的噻吩衍生物，其中R5代表乙基。
xiii)本發(fā)明的另一尤佳實施例為關(guān)于實施例i)至xii)中任一個的噻吩衍生物，其中R6代表一未經(jīng)取代的苯環(huán)。
xiv)本發(fā)明的一更佳實施例為關(guān)于實施例i)至xiii)中任一個的噻吩衍生物，其中R7代表氫。
本發(fā)明的一較佳實施例為關(guān)于式(I)的化合物，其中 R1代表氫； R2代表氫、低級烷基或低級烷氧基； R3代表2，3-二羥基丙基、(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸)-1-基-甲基、羥基、羥基-低級烷氧基、1-甘油基、-OCH2-(CH2)m-NR31R32或-OCH2-CH(OH)-CH2-NR31R32； R31代表氫、甲基或2-羥基乙基； R32代表氫或甲基； m代表整數(shù)1； R4代表氫、低級烷基或鹵素； R5代表三氟甲基、甲基、乙基或丙基； R6代表視情況可經(jīng)單-或雙-取代的苯基(其中該等取代基為獨立選自甲基、乙基、三氟甲基、鹵素及甲氧基)或3-吡啶基；且 R7代表氫。
較佳式(I)化合物為以下給出的實例。
極佳式(I)化合物為 3-[4-((S)-2，3-二羥基-丙氧基)-3，5-二甲基-苯基]-1-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮、 3-[4-((S)-2，3-二羥基-丙氧基)-3，5-二甲基-苯基]-1-(5-乙基-4-(2-甲基-苯基)-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮及 3-[4-((S)-2，3-二羥基-丙氧基)-3，5-二甲基-苯基]-1-(4-苯基-5-丙基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮。
式(I)化合物及/或其醫(yī)藥上可接受的鹽可用作(例如)呈用于經(jīng)腸、非經(jīng)腸或外敷施用的醫(yī)藥組合物形式的醫(yī)藥。舉例而言，它們可以下列方式施用以(例如)錠劑、糖衣錠劑、糖衣藥丸、硬及軟明膠膠囊、溶液、乳液或懸浮液形式經(jīng)口施用，以(例如)栓劑形式經(jīng)直腸施用，以(例如)注射溶液或輸注溶液形式非經(jīng)腸施用，或以(例如)軟膏、乳霜或油劑形式外敷施用。
該等醫(yī)藥組合物的制備可以任何業(yè)內(nèi)熟練技術(shù)者熟悉的方式(參見(例如)Mark Gibson編輯，Pharmaceutical Preformulation andFormulation，IHS Health Group，Englewood，CO，USA，2001；Remington的The Science and Practice of Pharmacy，第20版，Philadelphia College ofPharmacy and Science)藉由將所述式(I)化合物或其醫(yī)藥上可接受的鹽(視情況可與其它具治療價值的物質(zhì)組合)連同具有適宜的、無毒的、惰性的、在治療上可兼容的固體或液體載劑材料及(若需要)常用醫(yī)藥佐劑制成蓋侖制劑施用形式而達(dá)成。
該等包含式(I)化合物的醫(yī)藥組合物可用于預(yù)防及/或治療與激活的免疫系統(tǒng)相關(guān)的疾病或病癥。
這種疾病或病癥選自由下列組成的組移植器官(例如腎、肝、心臟、肺、胰、角膜及皮膚)排斥反應(yīng)；藉由干細(xì)胞移植引發(fā)的移植物抗宿主疾??；自身免疫綜合征，包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、炎性腸疾病(例如克隆氏病(Crohn′s disease)及潰瘍性結(jié)腸炎)、牛皮癬、干癬性關(guān)節(jié)炎、甲狀腺炎(例如橋本氏甲狀腺炎)、葡萄膜視網(wǎng)膜炎；特應(yīng)性疾病(例如鼻炎、結(jié)膜炎、皮炎)；哮喘病；I型糖尿?。桓腥竞笞陨砻庖呒膊。L(fēng)濕熱及感染后腎小球腎炎；實體癌及腫瘤轉(zhuǎn)移。
較佳地，可用式(I)化合物預(yù)防或治療的疾病或病癥選自由移植器官(選自腎、肝、心臟及肺)的排斥、藉由干細(xì)胞移植引起的移植物抗宿主疾病、自身免疫綜合征(選自類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、牛皮癬、干癬性關(guān)節(jié)炎、克隆氏病及橋本氏甲狀腺炎)及特應(yīng)性皮膚炎組成的群。
本發(fā)明亦關(guān)于預(yù)防或治療本文所提及的疾病或病癥的方法，該方法包括向患者投與一具醫(yī)藥活性的數(shù)量的式(I)化合物。
并且，式(I)化合物亦可與一或若干種免疫調(diào)節(jié)劑組合用于預(yù)防及/或治療本文所提及的疾病及病癥。根據(jù)本發(fā)明的一較佳實施例，該等藥劑為選自由免疫抑制劑、腎上腺皮質(zhì)類固醇、細(xì)胞毒性藥、粘附分子抑制劑、細(xì)胞因子、細(xì)胞因子抑制劑、細(xì)胞因子受體拮抗劑及重組細(xì)胞因子受體組成的群。
本發(fā)明亦關(guān)于式(I)化合物用于制備視情況與一或若干種免疫調(diào)節(jié)劑組合使用來預(yù)防或治療本文所提及的該等疾病及病癥的醫(yī)藥組合物的用途。
本發(fā)明亦關(guān)于可在體內(nèi)可轉(zhuǎn)換為式(I)化合物本身的式(I)化合物的前藥。因而，任何對式(I)化合物的參照皆應(yīng)理解為亦指式(I)化合物的相應(yīng)前藥(若適合且方便)。
式(I)化合物可藉由以下所給出的方法、藉由實例中所給出的方法或藉由類似方法制造。最佳反應(yīng)條件可隨所用特定反應(yīng)物或溶劑變化，但此等條件可由業(yè)內(nèi)熟練技術(shù)者藉由例行最優(yōu)化程序來確定。
本發(fā)明式(I)化合物可根據(jù)以下概述的通用反應(yīng)次序制備。僅闡述數(shù)種可產(chǎn)生式(I)化合物的合成方法。

式(I)化合物可藉由于一催化劑(例如Pd/C、Pt/C、PtO2等)存在下、在一溶劑(例如乙醇、甲醇、THF等)中，使結(jié)構(gòu)1的化合物與氫反應(yīng)來制備。結(jié)構(gòu)1的化合物可藉由在溶劑(例如甲醇、乙醇、異丙醇、甲苯等)中、于一堿(例如KOH、NaOH、NaOMe、NaOEt、第三丁醇鉀)或一酸(例如HCl)存在下使結(jié)構(gòu)2的化合物與結(jié)構(gòu)3的化合物反應(yīng)來制備。

另外，式(I)化合物可藉由于格氏(Grignard)條件下、較佳于低于室溫的溫度下使結(jié)構(gòu)4的化合物與結(jié)構(gòu)5的化合物反應(yīng)來制備。結(jié)構(gòu)5的格氏試劑根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)操作法制備。存在于殘基R1至R4中的官能基會需要暫時保護(hù)或甚至可在格氏反應(yīng)后的其它步驟中引入。

結(jié)構(gòu)4的Weinreb酰胺化合物藉由于耦合試劑(例如EDC、DCC、TBTU等)存在下，用鹽酸N，O-二甲基羥胺鹽酸鹽處理結(jié)構(gòu)6的化合物來制備(M.Mentzel，H.M.R.Hoffmann，N-Methoxy N-methylamides(Weinreb amides)in modern organic synthesis，Journal fuer PraktischeChemie/Chemiker-Zeitung 339(1997)，517-524；J.Singh，N.Satyamurthi，I.S.Aidhen，The growing synthetic utility of Weinreb′s amide，Journal fuerPraktische Chemie(Weinheim，Germany)342(2000)340-347；V.K.Khlestkin，D.G.Mazhukin，Recent advances in the application ofN，O-dialkylhydroxylamines in organic chemistry，Current Organic Chemistry 7(2003)，967-993)。

結(jié)構(gòu)6 結(jié)構(gòu)2的化合物可藉由于一溶劑(例如二乙醚、THF或二惡烷(dioxane)中、于介于-20至50℃之間的溫度下用處理結(jié)構(gòu)6的化合物來制備?；蛘?，結(jié)構(gòu)2的化合物可藉由結(jié)構(gòu)4的化合物與甲基溴化鎂反應(yīng)來制備。
結(jié)構(gòu)6的化合物可購得或可根據(jù)已知程序或與其類似的程序(例如，WO 03/014107、I.C.Gonzalez，L.N.Davis，Ch.K.Smith，Bioorg.Med.Chem.Lett.14(2004)4037-4043；M.J.Rudolph等人Bioorg.Med.Chem.Lett.12(2002)491-495；N.L.Subasinghe等人Bioorg.Med.Chem.Lett.11(2001)1379-1382及其中所引用文獻(xiàn)；T.Thiemann，M.Watanabe，Y.Tanaka，S.Mataka，J.Chem.Res.2004，723-727)制備。
實例 以下實例用于闡明本發(fā)明而非限制其范圍。
所有溫度皆以℃表述?；衔锝逵上铝斜碚?H-NMR(300MHz)或13C-NMR(75MHz)(Varian Oxford；化學(xué)位移以相對于所用溶劑的ppm給出；多重性s＝單峰、d＝雙峰、t＝三峰；p＝五重峰、hex＝六重峰、hept＝七重峰、m＝多重峰、br＝寬峰，耦合常數(shù)以Hz給出)；LC-MS(具有HP 1100 Binary幫浦及DAD的菲尼根瀏覽器(Finnigan Navigator)、管柱4.6×50毫米、Zorbax SB-AQ、5微米、120，梯度存于水的5-95％乙腈、1分鐘、用0.04％的三氟乙酸、流速4.5毫升/分鐘)，tR以分鐘給出；TLC(得自Merck的TLC-板，硅膠60F254)或熔點。藉由制備型HPL C(管柱X-terraRP18、50×19毫米、5微米，梯度存于含0.5％的甲酸的水中的10-95％的乙腈)或藉由MPLC(Labomatic MD-80-100幫浦、UVIS-201檢測器、管柱350×18毫米、Labogel-RP-18-5s-100，梯度存于水中的10％甲醇至100％甲醇)來純化化合物。
縮寫(如本文所用) approx. 約 aq. 水性 atm 大氣壓 BSA 牛血清白蛋白 Bu丁基 CC管柱層析法 DCC 二環(huán)己基碳二亞胺 DCM 二氯甲烷 DIPEA 二異丙基-乙胺、Hünig堿、乙基-二異丙基胺 DMF 二甲基甲酰胺 DMSO 二甲基亞砜 EA 乙酸乙酯 EDCN-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基-碳化二亞胺 Et 乙基 h 小時 HPLC 高效液相層析法 LC-MS 液相色譜-質(zhì)譜法 Me 甲基 min分鐘 MPLC 中亞液相層析法 OAc乙酸酯 PdCl2(dppf)二氯[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]鈀(II) Ph 苯基 prep. 制備型 TBTU 四氟硼酸2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，2，3，3-四甲基脲 THF四氫呋喃 rt 室溫 sat. 飽和的 S1P鞘胺醇1-磷酸酯 TLC薄層層析法 tR 保留時間 甲烷磺酸2，2-二甲基-[1，3]二氧雜環(huán)己烷-5-基甲基酯
標(biāo)題化合物按照B.Xu、A.Stephens，G.Kirschenheuter，A.F.Greslin，X.Cheng，J.Sennelo，M.Cattaneo，M.L.Zighetti，A.Chen，S.-A.Kim，H.S.Kim，N.Bischofberger，G.Cook，K.A.Jacobson，J.Med.Chem.45(2002)5694-5709中所給出的程序來制備。
實例1
a)于0℃下，用磷酰氯(2.8毫升)小心地處理DMF(4.3毫升)并于室溫下攪拌混合物20分鐘，然后緩慢加入1，1，1-三氟-3-苯基-丙烷-2-酮(1.55毫升，10毫摩爾)。將該反應(yīng)混合物于45℃下攪拌2小時，然后于室溫下攪拌18小時，用飽和乙酸鈉水溶液(20毫升)及水(40毫升)加以稀釋并用二乙醚實施萃取。將有機(jī)相分離，用飽和NaHCO3水溶液實施洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥再經(jīng)蒸發(fā)，得到淡黃色油劑狀3-氯-4，4，4-三氟-2-苯基-丁-2-烯醛(2.20克)。
b)于-10℃下向2-巰基乙酸乙酯(0.88克，6.75毫摩爾)溶于THF(45毫升)的溶液中加入NaH(271毫克，6.75毫摩爾，60％存于礦物油中)。將混合物于0℃下攪拌30分鐘，然后加入3-氯-4，4，4-三氟-2-苯基-丁-2-烯醛1.32克(4.5毫摩爾)溶于THF(5毫升)中的溶液。將該反應(yīng)混合物于室溫下攪拌45分鐘，然后用2N NaOH水溶液(2毫升)進(jìn)行處理。繼續(xù)攪拌15分鐘并用水(100毫升)及1NNaOH水溶液(15毫升)稀釋該混合物。用二乙醚(70毫升)萃取該混合物。有機(jī)萃取物經(jīng)Na2SO4干燥并蒸發(fā)的。藉由制備型HPLC(Waters Xterra MS18，75×30毫米，10微米，存于含有0.5％甲酸的水中的10至95％的乙腈)純化粗產(chǎn)物，得到褐色油狀4-苯基-5-三氟甲基-噻吩-2-羧酸乙基酯(760毫克)，LC-MStR＝1.12分鐘；1H NMR(CDCl3)δ7.75-7.72(m，1H)、7.42(s，5H)、4.39(q，J＝7.0Hz，2H)、1.40(t，J＝7.0Hz，3H)。
c)將4-苯基-5-三氟甲基-噻吩-2-羧酸乙基酯(750毫克，2.50毫摩爾)溶于乙醇(12毫升)的溶液及2N LiOH水溶液(6毫升)于65℃下攪拌2小時。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用水(60毫升)稀釋并用DCM(50毫升)萃取之。藉由加入2N HCl水溶液(7毫升)來酸化水相并用DCM(2×50毫升)萃取兩遍。將該等有機(jī)萃取物合并后用飽和NaHCO3水溶液洗滌、經(jīng)Na2SO4干燥、蒸發(fā)并在高真空條件下實施干燥，得到棕色固體4-苯基-5-三氟甲基-噻吩-2-羧酸(670毫克)，LC-MStR＝0.97分鐘，1H NMR(D6-DMSO)δ7.57-7.54(m，1H)、7.46-7.42(m，5H)。
d)向4-苯基-5-三氟甲基-噻吩-2-羧酸(272毫克，1.0毫摩爾)溶于THF(10毫升)的溶液中加入溶液(1.30毫升，1.6M存于二乙醚中的溶液)。將該暗紅色反應(yīng)混合物于室溫下攪拌10分鐘。藉由加入飽和NH4Cl水溶液(10毫升)使反應(yīng)停止。將有機(jī)相分離、經(jīng)Na2SO4干燥并實施蒸發(fā)。藉由制備型HPLC(Waters Xterra MS 18，75×30毫米，10微米，存于含有0.5％甲酸的水中的10至95％乙腈)純化所得粗制產(chǎn)物，得到暗黃色油狀1-(4-苯基-5-三氟甲基-噻吩-2-基)-乙酮(31毫克)，LC-MStR＝1.06分鐘，1H NMR(CDCl3)；δ7.62-7.60(m，1H)、7.45-7.40(m，5H)、2.60(s，3H)。
d)將1-(4-苯基-5-三氟甲基-噻吩-2-基)-乙酮(30毫克，0.135毫摩爾)及3，5-二甲基-4-羥基苯甲醛(41毫克，0.27毫摩爾)溶于乙醇(1毫升)的溶液及存于異丙醇(0.5毫升)中的5N HCl于室溫下攪拌18小時。該反應(yīng)混合物用水(10毫升)、飽和NaHCO3水溶液(15毫升)及1N NaOH稀釋并用DCM(25毫升)實施萃取。該有機(jī)萃取物經(jīng)Na2SO4干燥并實施蒸發(fā)，得到棕色固體狀3-(4-羥基-3，5-二甲基-苯基)-1-(4-苯基-5-三氟甲基-噻吩-2-基)-丙烯酮(38毫克)，LC-MStR＝1.17分鐘。
e)用Pd/C(25毫克，10％Pd)處理3-(4-羥基-3，5-二甲基-苯基)-1-(4-苯基-5-三氟甲基-噻吩-2-基)-丙烯酮(30毫克，0.075毫摩爾)溶于乙醇(3毫升)的溶液且于1大氣壓H2條件下在室溫下對所得懸浮液實施1小時攪拌。經(jīng)硅藻土過濾該混合物并于真空下去除溶劑，得到綠色油狀物3-(4-羥基-3，5-二甲基-苯基)-1-(4-苯基-5-三氟甲基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(28毫克)，LC-MS；tR＝1.13分鐘，1H NMR(CDCl3)δ7.56-7.53(m，1H)、7.46-7.38(m，5H)、6.83(s，2H)、4.48(s，1H)、3.18(t，J＝7.6Hz，2H)、2.94(t，J＝7.6Hz，2H)、2.21(s，6H)。
實例2
將3-(4-羥基-3，5-二甲基-苯基)-1-(4-苯基-5-三氟甲基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(8毫克，20微摩爾)溶于2-丙醇(0.7毫升)的溶液及2N NaOH水溶液(0.27毫升)用(S)-3氯-丙烷-1，2-二醇(9毫克，80微摩爾)處理并于65℃下將混合物攪拌24小時。將該混合物冷卻至室溫，用甲酸(0.25毫升)稀釋并藉由制備型HPLC(Waters XterraMS18 19×50毫米5微米，存于含有0.5％甲酸的水中的10至95％乙腈)分離，得到無色冷凍干燥物3-[4-((S)-2，3-二羥基-丙氧基)-3，5-二甲基-苯基]-1-(4-苯基-5-三氟-甲基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(3毫克)；LC-MStR＝1.06分鐘，[M+1]+＝479.21。
實例3
用2-溴乙醇(10毫克，80微摩爾)處理3-(4-羥基-3，5-二甲基-苯基)-1-(4-苯基-5-三氟甲基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(8毫克，20微摩爾)溶于2-丙醇(0.7毫升)的溶液及2N NaOH水溶液(0.27毫升)且于65℃下將混合物攪拌2小時。將該混合物冷卻至室溫，用甲酸(0.25毫升)稀釋并藉由制備型HPLC(Waters Xterra MS18 19×50毫米，5微米，存于含有0.5％甲酸的水中的10至95％的乙腈)分離，得到成無色冷凍干燥物3-[4-(2-羥基-乙氧基)-3，5-二甲基-苯基]-1-(4-苯基-5-三氟-甲基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(4毫克)；LC-MStR＝1.12分鐘，[M+1]+＝449.15。
實例4
a)于5℃下將磷酰氯(17毫升，186毫摩爾)緩慢加至DMF(17毫升)中并于室溫下將混合物攪拌40分鐘，然后于8℃下加入苯基丙酮(9.5毫升，74.5毫摩爾)。于8℃下將該反應(yīng)混合物攪拌1小時，然后于72℃下攪拌3.5小時。將該混合物冷卻至室溫，用水/冰稀釋并藉由加入乙酸鈉(40克)進(jìn)行緩沖。用EA(250毫升)將該溶液萃取兩遍。有機(jī)萃取物用水洗滌并蒸發(fā)之。藉由于硅膠上用庚烷∶EA 4∶1洗脫的CC純化所得粗產(chǎn)物，得到橙色液體3-氯-2-苯基-丁-2-烯醛(8.96克)；1H NMR(CDCl3)δ10.42(s，1H)、7.42-7.30(m，5H)、2.29(s，3H)。
b)將2-巰基乙酸乙酯(5.92克，49.3毫摩爾)加至一新鮮制備型鈉(1.2克，50毫摩爾)的乙醇溶液(50毫升)中。向此溶液中加入3-氯-2-苯基-丁-2-烯醛(8.90克，49.3毫摩爾)并于室溫下將混合物攪拌16小時，然后于70℃下攪拌2小時。加入2N LiOH水溶液(30毫升)并于70℃下繼續(xù)攪拌2小時。于真空下去除乙醇，剩余混合物用水稀釋并用DCM實施萃取。用HCl水溶液酸化水相并用二乙醚實施萃取。蒸發(fā)掉醚相的溶劑，使殘留物懸浮于乙腈中，經(jīng)過濾并用額外乙腈加以洗滌并實施干燥，得到黃色粉末5-甲基-4-苯基-噻吩-2-羧酸(4.45克)，LC-MStR＝0.92分鐘，[M+1+MeCN]+＝260.13；1H NMR(CDCl3)δ7.84(s，1H)、7.46-7.33(m，5H)、2.55(s，3H)。
c)于5℃下向5-甲基-4-苯基-噻吩-2-羧酸(1.50克、6.87毫摩爾)溶于二乙醚(100毫升)的溶液中加入(7毫升，1.5M存于二乙醚中)。于室溫下將混合物攪拌90分鐘，然后加入另一部分甲基鋰(1毫升)。繼續(xù)攪拌1小時。該混合物用水洗滌并用EA萃取。蒸發(fā)有機(jī)萃取物并藉由于硅膠上用庚烷∶EA 4∶1洗脫的CC純化所得粗產(chǎn)物，得到無色油狀物1-(5-甲基-4-苯基-噻吩-2-基)-乙酮(490毫克)，LC-MStR＝1.00分鐘，[M+1]+＝217.10；1H NMR(CDCl3)δ7.62(s，1H)、7.48-7.33(m，5H)、2.54(s，6H)。
d)將1-(5-甲基-4-苯基-噻吩-2-基)-乙酮(419毫克，1.94毫摩爾)及3，5-二甲基-4-羥基苯甲醛(350毫克，2.33毫摩爾)溶于乙醇(4毫升)的溶液及存于異丙醇(2毫升)中的5N HCl于室溫下攪拌1小時。暗綠色溶液用水稀釋并用EA實施萃取。蒸發(fā)該有機(jī)萃取物，并將其溶于乙醇(10毫升)中并用Pd/C(60毫克，10％Pd)進(jìn)行處理。漿液于1.4巴的H2條件下氫化6小時。過濾該混合物，于真空下去除溶劑并藉由于硅膠上用庚烷∶EA 4∶1洗脫的CC純化所得粗產(chǎn)物，得到無色樹脂狀物3-(4-羥基-3，5-二甲基-苯基)-1-(5-甲基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(360毫克)；LC-MStR＝1.09分鐘，[M+1]+＝351.25；1H NMR(CDCl3)δ7.60(s，1H)、7.46-7.30(m，5H)、6.858s，2H)、4.48(s，1H)、3.14(dd，J＝7.0，8.2Hz，2H)、2.92(dd，J＝7.0，8.2Hz，2H)、2.52(s，3H)、2.21(s，6H)。
實例5
將3-(4-羥基-3，5-二甲基-苯基)-1-(5-甲基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(60毫克，0.172毫摩爾)溶于2-丙醇(1毫升)的溶液及3N NaOH水溶液(0.3毫升)用(S)-3-氯-丙烷-1，2-二醇(95毫克，0.86毫摩爾)處理且于70℃下將混合物攪拌24小時。蒸發(fā)掉溶劑并于制備型TLC板上用EA純化殘留物，得到油狀物3-[4-((S)-2，3-二羥基-丙氧基)-3，5-二甲基-苯基]-1-(5-甲基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(44毫克)LC-MStR＝1.00分鐘、[M+1]+＝425.23；1H NMR(CDCl3)δ7.60(s，1H)、7.46-7.32(m，5H)、6.88(s，2H)、4.11-4.06(m，1H)、3.86-3.80(m，4H)、3.19-3.11(m，2H)、2.98-2.91(m，2H)、2.72(d，J＝5.3Hz，1H)、2.53(s，3H)、2.25(s，6H)、2.11-2.05(m，1H)。
實例6
a)將3-(4-羥基-3，5-二甲基-苯基)-1-(5-甲基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(300毫克，0.86毫摩爾)溶于2-丙醇(7.5毫升)的溶液及3N NaOH水溶液(2.5毫升)用環(huán)氧氯丙烷(158毫克，1.72毫摩爾)處理并于室溫下攪拌該混合物24小時，然后用水稀釋并用EA實施萃取。蒸發(fā)掉有機(jī)萃取物的溶劑，且藉由于硅膠上用庚烷∶EA 5∶1洗脫的CC純化所得殘留物，得到油狀物3-(3，5-二甲基-4-環(huán)氧乙烷基甲氧基-苯基)-1-(5-甲基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(92毫克)；LC-MStR＝1.13分鐘，[M+1]+＝407.24。
b)將3-(3，5-二甲基-4-環(huán)氧乙烷基甲氧基-苯基)-1-(5-甲基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(30毫克，74微摩爾)溶于甲醇(1毫升)的溶液及氨(22微升，約7N存于甲醇中的溶液)于65℃下攪拌4小時再于室溫下攪拌18小時。于真空下去除溶劑并藉由制備型HPLC純化殘留物，得到無色樹脂狀物3-[4-(3-氨基-2-羥基-丙氧基)-3，5-二甲基-苯基]-1-(5-甲基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(4毫克)；LC-MStR＝0.87分鐘，[M+1]+＝424.24。
實例7
將3-(3，5-二甲基-4-環(huán)氧乙烷基甲氧基-苯基)-1-(5-甲基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(33毫克，82微摩爾)及甲基胺(0.082毫升，2M存于THF中的溶液)溶于甲醇(1毫升)的溶液于65℃下攪拌4小時并于室溫下攪拌18小時。于真空下去除溶劑并藉由制備型HPLC純化殘留物，得到無色樹脂狀3-[4-(2-羥基-3-甲氨基-丙氧基)-3，5-二甲基-苯基]-1-(5-甲基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(4毫克)；LC-MStR＝0.88分鐘，[M+1]+＝438.25，1H NMR(甲酸鹽形式)(CDCl3)δ8.56(s，1H)、7.60(s，1H)、7.45-7.30(m，5H)、6.85(m，2H)、4.60(s br，2H)、4.37-4.30(m，1H)、3.81-3.70(m，2H)、3.18-3.10(m，4H)、2.96-2.88(m，2H)、2.70(s，3H)、2.51(s，3H)、2.20(s，6H)。
實例8
將3-(3，5-二甲基-4-環(huán)氧乙烷基甲氧基-苯基)-1-(5-甲基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(30毫克，74微摩爾)及氨基乙醇(9毫克，0.148毫摩爾)溶于甲醇(1毫升)的溶液于65℃下攪拌4小時。于真空下去除溶劑并藉由制備型HPLC純化殘留物，得到無色樹脂狀物3-{4-[2-羥基-3-(2-羥基-乙氨基)-丙氧基]-3，5-二甲基-苯基}-1-(5-甲基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(22毫克)；LC-MStR＝0.88分鐘，[M+1]+＝468.28。
實例9
a)于-78℃下用第三-丁基鋰(8毫升，1.6M存于戊烷中)處理4-苯基噻吩-2-羧酸(800毫克，3.92毫摩爾)溶于THF(10毫升)的溶液。于-70℃下攪拌該混合物40分鐘然后加入碘甲烷(1毫升)。于-78℃下繼續(xù)攪拌5小時，然后使該反應(yīng)混合物升溫至室溫過夜。用飽和NH4Cl水溶液使該反應(yīng)停止并用EA實施萃取。經(jīng)MgSO4干燥有機(jī)萃取物，去除溶劑并藉由于硅膠上用含有3％甲醇的DCM洗脫的CC純化所得粗產(chǎn)物，得到紅色固體5-乙基-4-苯基-噻吩-2-羧酸(340毫克)；LC-MStR＝0.95分鐘、[M+1+MeCN]+＝274.15；1H NMR(CDCl3)δ7.79(s，1H)、7.46-7.31(m，5H)、2.92(q，J＝7.6Hz，2H)、1.30(t，J＝7.6Hz，3H)。
b)于5℃下用(0.9毫升，1.6M于二乙醚中)處理5-乙基-4-苯基-噻吩-2-羧酸(180毫克，0.775毫摩爾)溶于THF(4毫升)的溶液。于室溫下將該反應(yīng)混合物攪拌30分鐘，然后加入另一部分(0.5毫升)。繼續(xù)攪拌1小時，藉由加入水(50毫升)使該反應(yīng)停止并用EA實施萃取。經(jīng)MgSO4干燥有機(jī)萃取物，于真空下去除溶劑，并藉由于硅膠上用庚烷∶EA 30∶1洗脫的C C純化所得粗產(chǎn)物，得到無色油狀物1-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-乙酮(64毫克)；LC-MStR＝1.03分鐘，[M+1+MeCN]+＝272.15；1H NMR(CDCl3)δ7.60(s，1H)、7.47-7.32(m，5H)、2.91(q，J＝7.6Hz，2H)、2.54(s，3H)、1.30(t，J＝7.6Hz，3H)。
c)將1-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-乙酮(64毫克，0.278毫摩爾)及3，5-二甲基-4-羥基苯甲醛(53毫克，0.334毫摩爾)溶于乙醇(1.2毫升)的溶液及存于異丙醇(0.6毫升)中的5N HCl在室溫下攪拌1小時。用水稀釋暗綠色溶液并用EA實施萃取。蒸發(fā)該有機(jī)萃取物，將其溶于甲醇(1毫升)及THF(1毫升)中并用Pd/C(60毫克，10％Pd)進(jìn)行處理。在1.4巴的H2條件下對漿液實施1.5小時氫化?；旌衔锝?jīng)硅藻土過濾，于真空下去除溶劑并于制備型TLC板上用庚烷∶EA 2∶1純化粗產(chǎn)物，得到黃色油狀物3-(4-羥基-3，5-二甲基-苯基)-1-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(59毫克)；LC-MStR＝1.11分鐘；1H NMR(CDCl3)δ7.58(s，1H)、7.46-7.30(m，5H)、6.85(s，2H)、4.56(s，1H)、3.18-3.10(m，2H)、2.97-2.86(m，4H)、2.22(s，6H)、1.30(t，J＝7.6Hz，3H)。
實例10
用(S)-3-氯-丙烷-1，2-二醇(79毫克，0.71毫摩爾)處理3-(4-羥基-3，5-二甲基-苯基)-1-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(52毫克，0.143毫摩爾)溶于2-丙醇(1毫升)的溶液及3N NaOH水溶液(0.3毫升)并于70℃下攪拌混合物15小時。用水稀釋該反應(yīng)混合物并用DCM實施萃取。蒸發(fā)掉有機(jī)萃取物的溶劑并于制備型TLC板上用庚烷∶EA 1∶3純化粗產(chǎn)物，得到無色樹脂狀物3-[4-((S)-2，3-二羥基-丙氧基)-3，5-二甲基-苯基]-1-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(14毫克)；LC-MStR＝1.03分鐘，[M+1]+＝439.25；1HNMR(CDCl3)δ7.58(s，1H)、7.45-7.30(m，5H)、6.88(s，2H)、4.11-4.04(m，1H)、3.87-3.80(m，4H)、3.67-3.60(m，2H)、3.60-3.56(m，1H)、3.48-3.40(m，1H)、3.20-3.10(m，2H)、2.98-2.87(m，4H)、2.25(s，6H)、1.30(t，J＝7.6Hz，3H)。
實例11
a)向3，5-二甲基-4-羥基苯甲醛(2.5克，16.6毫摩爾)溶于DCM(25毫升)及吡啶(3.8毫升)的冷溶液(5℃)中緩慢加入三氟甲烷磺酸酐(3毫升)。添加完成后，將該混合物升溫至室溫并攪拌2小時。用EA(150毫升)稀釋混合物并用水(2×100毫升)加以洗滌。蒸發(fā)掉有機(jī)相的溶劑并藉由于硅膠上用庚烷∶EA 3∶1洗脫的CC純化所得粗產(chǎn)物，得到無色液體三氟-甲烷磺酸4-甲?；?2，6-二甲基-苯基酯(3.13克)。
b)向三氟甲烷磺酸4-甲?；?2，6-二甲基-苯基酯(3.13克，11.1毫摩爾)、雙(三苯基膦)二氯化鈀(682毫克，0.972毫摩爾)、三苯基膦(1.76克，6.7毫摩爾)、LiCl(3.98克，93.8毫摩爾)及微量2，6-二-第三-丁基-4-甲基酚溶于DMF(30毫升)的溶液中加入烯丙基三丁基錫烷(2毫升)。將該混合物加熱至120℃并攪拌2小時然后加入另一部分烯丙基三丁基錫烷(2毫升)。于120℃下繼續(xù)攪拌1小時。將該混合物冷卻至室溫，用水(100毫升)稀釋并用EA實施萃取。用1.5M HCl水溶液(2×100毫升)洗滌有機(jī)萃取物，經(jīng)MgSO4干燥并蒸發(fā)掉溶劑。藉由于硅膠上用庚烷∶EA 20∶1洗脫的CC純化粗產(chǎn)物，得到無色液體4-烯丙基-3，5-二甲基-苯甲醛(1.34克)；1H NMR(CDCl3)δ9.92(s，1H)、7.53(s，2H)、5.96-5.80(m，1H)、5.06-5.00(m，1H)、4.87-4.78(m，1H)、3.48-3.40(m，2H)、2.38(s，6H)。
c)向4-烯丙基-3，5-二甲基-苯甲醛(500毫克，2.87毫摩爾)溶于丙酮(10毫升)及水(0.4毫升)的溶液中加入N-甲基嗎啉-N-氧化物(465毫克，3.44毫摩爾)及OsO4(1毫升，2.5％存于第三-丁醇中的溶液)。于室溫下將反應(yīng)混合物攪拌3小時，然后用DCM稀釋并用10％檸檬酸水溶液洗滌的。經(jīng)MgSO4干燥有機(jī)層并于真空下去除溶劑。藉由于硅膠上用EA洗脫的CC純化粗產(chǎn)物，得到無色油狀物4-(2，3-二羥基-丙基)-3，5-二甲基-苯甲醛(190毫克)；LC-MStR＝0.69分鐘，[M+1+CH3CN]+＝250.28。
d)將4-(2，3-二羥基-丙基)-3，5-二甲基-苯甲醛(64毫克，0.308毫摩爾)及1-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-乙酮(50毫克，0.218毫摩爾)溶于乙醇(2毫升)的溶液與存于異丙醇(0.5毫升)中的5N HCl于室溫下攪拌5天。于真空下去除溶劑并藉由制備型HPLC分離殘留物。然后用飽和NaHCO3水溶液及3M NaOH水溶液(5毫升)處理含有流份的產(chǎn)物。于室溫下將混合物攪拌1小時，然后用DCM實施萃取。去除有機(jī)萃取物的溶劑。將所得殘留物溶于THF∶甲醇1∶1(5毫升)中并用Pd/C進(jìn)行處理。于1.5巴的H2條件下于室溫下將漿液攪拌16小時。經(jīng)硅藻土過濾混合物并蒸發(fā)濾液，得到無色油狀物3-[4-(2，3-二羥基-丙基)-3，5-二甲基-苯基]-1-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(20毫克)，L C-MStR＝1.04分鐘，[M+1]+＝423.28。
實例12
a)用環(huán)氧氯丙烷(150毫克，1.63毫摩爾)處理一3-(4-羥基-3，5-二甲基-苯基)-1-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(296毫克，0.81毫摩爾)溶于2-丙醇(2.5毫升)及3N NaOH水溶液(1毫升)中的溶液并于室溫下將混合物攪拌24小時，然后用水稀釋并用EA實施萃取。蒸發(fā)掉有機(jī)萃取物的溶劑，并藉由于硅膠上用庚烷∶EA4∶1洗脫的CC純化殘留物，得到淡黃色油狀物3-(3，5-二甲基-4-環(huán)氧乙烷基甲氧基-苯基)-1-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(160毫克)；LC-MStR＝1.16分鐘，[M+1]+＝421.22、1H NMR(CDCl3)δ7.58(s，1H)、7.45-7.30(m，5H)、6.88(s，2H)、3.99(dd，J＝2.9，11.1Hz，1H)、3.72(dd，J＝5.8，11.1Hz，1H)、3.38-3.31(m，1H)、3.19-3.11(m，2H)、2.98-2.85(m，5H)、2.72-2.67(m，1H)、2.26(s，6H)、1.30(t，J＝7.6Hz，3H)。
b)將3-(3，5-二甲基-4-環(huán)氧乙烷基甲氧基-苯基)-1-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(30毫克，72微摩爾)溶于甲醇(2毫升)及氨(22微升，7N存于甲醇中的溶液)的溶液于室溫下攪拌16小時并于40℃下攪拌16小時，然后蒸發(fā)掉溶劑。藉由制備型HPLC分離殘留物，得到無色樹脂狀物3-[4-(3-氨基-2-羥基-丙氧基)-3，5-二甲基-苯基]-1-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮的甲酸鹽(4毫克)；LC-MS；tR＝0.89分鐘，[M+1]+＝438.24，1H NMR(CDCl3)δ8.54(s，1H)、7.56(s，1H)、7.42-7.26(m，5H)、6.79(s，2H)、5.22(s br，3H)、4.26-4.18(m，1H)、3.75-3.66(m，2H)、3.24-3.06(m，3H)、2.94-2.80(m，4H)、2.28-2.20(m，1H)、2.14(s，6H)、1.28(t，J＝7.0Hz，3H)。
實例13
將3-(3，5-二甲基-4-環(huán)氧乙烷基甲氧基-苯基)-1-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(30毫克，72微摩爾)及甲基胺(80微升，2M存于THF中的溶液)溶于甲醇(2毫升)的溶液于室溫下攪拌16小時再于40℃下攪拌16小時，然后蒸發(fā)掉溶劑。藉由制備型HPLC分離殘留物，得到無色樹脂狀物1-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-3-[4-(2-羥基-3-甲氨基-丙氧基)-3，5-二甲基-苯基]-丙烷-1-酮的甲酸鹽(4毫克)；LC-MStR＝0.91分鐘，[M+1]+＝452.25。
實例14
將3-(3，5-二甲基-4-環(huán)氧乙烷基甲氧基-苯基)-1-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(30毫克，72微摩爾)及氨基乙醇(9毫克，150微摩爾)溶于甲醇(2毫升)的溶液于60℃下攪拌4小時，然后蒸發(fā)掉溶劑。藉由制備型HPLC分離殘留物，得到無色樹脂狀物1-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-3-{4-[2-羥基-3-(2-羥基-乙氨基)-丙氧基]-3，5-二甲基-苯基}-丙烷-1-酮的甲酸鹽(14毫克)；LC-MStR＝0.89分鐘，[M+1]+＝482.32，1H NMR(CDCl3)δ8.54(s，1H)、7.57(s，1H)、7.45-7.30(m，5H)、6.85(s，2H)、4.34-4.26(m，1H)、3.88-3.84(m，2H)、3.80-3.75(m，2H)、3.65(s br，4H)、3.23-3.05(m，6H)、2.98-2.86(m，4H)、2.21(s，6H)、1.29(t，J＝7.6Hz，3H)。
實例15
將1-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-乙酮(200毫克，0.869毫摩爾)及3-氯-4-羥基-5-甲氧基苯甲醛(194毫克，1.04毫摩爾)溶于乙醇(2毫升)中的溶液及存于異丙醇(1毫升)中的5N HCl于室溫下攪拌18小時。暗綠色溶液用水稀釋并用EA實施萃取。蒸發(fā)有機(jī)萃取物，將其溶于甲醇(5毫升)及THF(5毫升)中并用Pd/C(150毫克，10％Pd)進(jìn)行處理。于1.8巴的H2條件下漿液氫化18小時。經(jīng)硅藻土過濾該混合物，于真空下去除溶劑并藉由于硅膠上用庚烷∶EA 7∶3洗脫的CC純化該粗產(chǎn)物，得到無色油劑狀物3-(3-氯-4-羥基-5-甲氧基-苯基)-1-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(208毫克)；LC-MStR＝1.10分鐘，[M+1]+＝401.12；1H NMR(CDCl3)δ7.58(s，1H)、7.46-7.30(m，5H)、6.83(d，J＝1.8Hz，1H)、6.67(d，J＝1.8Hz，1H)、3.88(s，3H)、3.16(t，J＝7.6Hz，2H)、2.98(t，J＝7.6Hz，2H)、2.91(q，J＝7.6Hz，2H)、1.30(t，J＝7.6Hz，3H)。
實例16
a)用環(huán)氧氯丙烷(104毫克，1.12毫摩爾)處理3-(3-氯-4-羥基-5-甲氧基-苯基)-1-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(150毫克，0.375毫摩爾)溶于2-丙醇(3毫升)及3N NaOH水溶液(1毫升)中的溶液并于70℃下將混合物攪拌24小時，然后用水稀釋并用EA實施萃取。蒸發(fā)掉有機(jī)萃取物的溶劑，并藉由于硅膠上用庚烷∶EA 1∶1洗脫的CC純化殘留物，得到無色油狀物3-(3-氯-4-羥基-5-甲氧基-苯基)-1-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(100毫克)；LC-MStR＝1.14分鐘，[M+1]+＝457.13。
b)將3-(3-氯-4-羥基-5-甲氧基-苯基)-1-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(50毫克，110微摩爾)溶于甲醇(2毫升)及氨(53微升，7N存于甲醇中的溶液)于60℃下攪拌16小時，然后蒸發(fā)掉溶劑。藉由制備型HPLC分離殘留物，得到無色樹脂狀物3-[4-(3-氨基-2-羥基-丙氧基)-3，5-二甲基-苯基]-1-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮的甲酸鹽(5毫克)；LC-MStR＝0.90分鐘，[M+1]+＝474.28。
實例17
將3-(3-氯-4-羥基-5-甲氧基-苯基)-1-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(50毫克，110微摩爾)及甲基胺(55微升，2M存于THF中的溶液)溶于甲醇(4毫升)的溶液于室溫下攪拌16小時再于70℃下攪拌16小時，然后蒸發(fā)掉溶劑。藉由制備型HPLC分離殘留物，得到無色油狀物3-[3-氯-4-(2-羥基-3-甲氨基-丙氧基)-5-甲氧基-苯基]-1-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮的甲酸鹽(7毫克)；LC-MStR＝0.90分鐘，[M+1]+＝488.18。
實例18
a)將1-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-乙酮(600毫克，2.61毫摩爾)及對苯二甲醛(874毫克，6.51毫摩爾)溶于乙醇(10毫升)及存于異丙醇(5毫升)中的5N HCl的溶液于室溫下攪拌3天。反應(yīng)混合物用水稀釋并用二乙基醚實施萃取。用水及飽和NaHCO3水溶液洗滌有機(jī)萃取物并蒸發(fā)掉溶劑。藉由于硅膠上用庚烷∶EA 4∶1洗脫的CC純化粗制產(chǎn)物，得到黃色固體4-[3-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-3-氧代-丙烯基]-苯甲醛(280毫克)，LC-MStR＝1.14分鐘，[M+1]+＝347.14，1H NMR(CDCl3)δ10.05(s，1H)、7.95-7.88(m，2H)、7.84-7.77(m，3H)、7.52-7.35(m，5H)、2.96(q，J＝7.6Hz，2H)、1.35(t，J＝7.6Hz，3H)。
b)將4-[3-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-3-氧代-丙烯基]-苯甲醛(140毫克，0.405毫摩爾)及氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸(51毫克，0.506毫摩爾)及NaBH(OAc)3(257毫克，1.21毫摩爾)溶于THF(6毫升)的溶液于室溫下攪拌6小時。用少量甲醇及DCM(150毫升)稀釋反應(yīng)混合物并用水洗滌的。分離有機(jī)相并再次用DCM萃取水相。合倂的有機(jī)萃取物經(jīng)MgSO4干燥并實施蒸發(fā)。將所殘留物懸浮于甲醇中，過濾并干燥之。將所得固體材料懸浮于DMF/甲醇中并用Pd/C(20毫克，10％Pd)進(jìn)行處理。于1.5巴的H2條件下在室溫下將漿液攪拌16小時。過濾該混合物并對濾液實施蒸發(fā)及干燥，得到無色固體1-{4-[3-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-3-氧代-丙基]-芐基}-氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸(15毫克)；LC-MStR＝0.89分鐘，[M+1]+＝434.17。
實例19
a)于5℃下，將鄰甲苯基-乙醛(3.50克，29毫摩爾)加至POCl3(7.5毫升，93毫摩爾)與DMF(8毫升)的混合物中。于70℃下將混合物攪拌3小時，然后藉由加入水/冰及NaOAc(17克)使該反應(yīng)停止并用EA(2×150毫升)實施萃取。蒸發(fā)掉該有機(jī)萃取物的溶劑，并藉由于硅膠上用庚烷∶EA 9∶1洗脫的C C純化產(chǎn)物。將所得油狀物(2.5克)溶解于乙醇(5毫升)中，并隨后將其逐滴加至新制備的Na(318毫克，13.8毫摩爾)及2-巰基乙酸乙酯(1.64克，13.6毫摩爾)溶于乙醇(15毫升)的溶液中。于室溫下將反應(yīng)混合物攪拌16小時，然后于70℃下攪拌2小時。加入3M NaOH水溶液(15毫升)并于70℃下將混合物攪拌2小時。將該混合物冷卻至室溫，用水稀釋并用DCM實施萃取。用HCl水溶液酸化水相并用EA萃取的。經(jīng)MgSO4干燥有機(jī)萃取物并蒸發(fā)掉溶劑，得到棕色固體狀粗制4-鄰-甲苯基-噻吩-2-羧酸(790毫克)；LC-MStR＝0.91分鐘。
b)于-70℃下用第三丁基鋰(6.5毫升，1.7M存于戊烷中的溶液)處理4-鄰-甲苯基-噻吩-2-羧酸(790毫克，3.62毫摩爾)溶于THF(10毫升)的溶液。于-70℃下將混合物攪拌30分鐘然后加入碘乙烷(1.5毫升)。將該混合物升溫至室溫并繼續(xù)攪拌16小時。藉由加入飽和NH4Cl水溶液使反應(yīng)停止并用EA萃取混合物。蒸發(fā)掉有機(jī)萃取物的溶劑并將剩余油狀物(680毫克)溶于干DCM(10毫升)中。加入TBTU(1.24克，3.87毫摩爾)、N，O-二甲基羥基胺(415毫克，4.25毫摩爾)及DIPEA(2毫升)并于室溫下將混合物攪拌20小時，然后用EA實施稀釋并用水洗滌的。分離并蒸發(fā)有機(jī)層，并藉由于硅膠上用庚烷∶EA 9∶1至2∶1洗脫的CC純化剩余殘留物，得到油狀物5-乙基-4-鄰-甲苯基-噻吩-2-羧酸甲氧基-甲基-酰胺(58毫克)。將此油劑溶于THF(4毫升)中并于4℃下用甲基溴化鎂(0.1毫升，3M，存于THF中的溶液)處理。于室溫下將反應(yīng)混合物攪拌16小時，然后加入另一部分格氏試劑(0.2毫升)。繼續(xù)攪拌72小時。用水稀釋混合物并用EA(50毫升)萃取的。蒸發(fā)掉有機(jī)萃取物的溶劑，得到黃色油狀物粗制1-(5-乙基-4-鄰-甲苯基-噻吩-2-基)-乙酮(58毫克)；LC-MS；tR＝1.05分鐘，[M+1]+＝245.16。
c)將1-(5-乙基-4-鄰-甲苯基-噻吩-2-基)-乙酮(51毫克，0.209毫摩爾)及3，5-二甲基-4-羥基苯甲醛(47毫克，0.172毫摩爾)溶于乙醇(1.5毫升)及存于異丙醇(0.7毫升)中的5N HCl的溶液于室溫下攪拌18小時。用水稀釋該溶液并用EA實施萃取。蒸發(fā)有機(jī)萃取物，將其溶解于甲醇(3毫升)及THF(3毫升)中并用Pd/C(10毫克，10％Pd)進(jìn)行處理。于1.5巴的H2條件下將漿液攪拌18小時。過濾混合物，于真空下去除濾液的溶劑并于制備型TLC板上用庚烷∶EA 3∶1純化粗產(chǎn)物，得到無色油狀物1-(5-乙基-4-鄰-甲苯基-噻吩-2-基)-3-(4-羥基-3，5-二甲基-苯基)-丙烷-1-酮(18毫克)；LC-MStR＝1.12分鐘，[M+1]+＝379.24。
實例20
用(S)-3-氯-丙烷-1，2-二醇(30微升)處理1-(5-乙基-4-對-甲苯基-噻吩-2-基)-3-(4-羥基-3，5-二甲基-苯基)-丙烷-1-酮(18毫克，48微摩爾)溶于乙醇(1.5毫升)及3N NaOH水溶液(0.3毫升)的溶液并于60℃下將混合物攪拌14小時。于真空下去除溶劑并藉由于制備型TLC板上用庚烷∶EA 2∶1分離殘留物，得到無色樹脂狀物3-[4-((S)-2，3-二羥基-丙氧基)-3，5-二甲基-苯基]-1-(5-乙基-4-鄰-甲苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(4毫克)；LC-MStR＝1.04分鐘，[M+1]+＝453.28；1H NMR(CDCl3)δ7.45(s，1H)、7.29-7.08(m，4H)、6.87(s，2H)、4.11-4.04(m，1H)、3.87-3.80(m，4H)、3.16-3.10(m，2H)、2.97-2.90(m，2H)、2.64(q，J＝7.6Hz，2H)、2.24(s，3H)、2.17(s，6H)、1.20(t，J＝7.6Hz，3H)。
實例21
a)于10℃下，將對甲苯基-乙醛(11.0克，82毫摩爾)加至POCl3(20毫升，230毫摩爾)與DMF(20毫升)的混合物中。于室溫下將該混合物攪拌2小時，然后藉由加入水/冰及NaOAc使該反應(yīng)停止并用DCM(2×200毫升)實施萃取。蒸發(fā)掉有機(jī)萃取物的溶劑，藉由于硅膠上用庚烷∶EA 9∶1洗脫的CC純化所得產(chǎn)物。將所得油狀物(1.95克)溶解于乙醇(5毫升)中且隨后將其逐滴加至新制備的Na(370毫克，16.2毫摩爾)及2-巰基乙酸乙酯(1.95克，16.2毫摩爾)溶于乙醇(20毫升)的溶液中。于室溫下將反應(yīng)混合物攪拌72小時，用水(100毫升)稀釋并用EA(2×150毫升)實施萃取。該等有機(jī)萃取物經(jīng)MgSO4干燥并蒸發(fā)。藉由于硅膠上用庚烷∶EA 5∶1洗脫的CC，得到4-對-甲苯基-噻吩-2-羧酸乙酯(850毫克)。將此酯溶解于乙醇(10毫升)及3M NaOH水溶液(5毫升)中并將混合物回流2小時。酸化反應(yīng)混合物并用DCM實施萃取。有機(jī)萃取物經(jīng)MgSO4干燥并蒸發(fā)掉溶劑，得到固體4-對-甲苯基-噻吩-2-羧酸(580毫克)；LC-MStR＝0.91分鐘，[M+1+CH3CN]+＝260.16，1HNMR(CDCl3)δ8.14(s，1H)、7.70(s，1H)、7.50(d，J＝7.6Hz，2H)、7.24(d，J＝7.6Hz，2H)、7.05(s br，1H)、2.39(s，3H)。
b)于-70℃下用第三丁基鋰(5毫升，1.7M存于戊烷中的溶液)處理4-對-甲苯基-噻吩-2-羧酸(580毫克，2.66毫摩爾)溶于THF(8毫升)的溶液。于-70℃下攪拌該混合物30分鐘，然后加入碘乙烷(1.2毫升)。將該混合物升溫至室溫并繼續(xù)攪拌72小時。藉由加入飽和NH4Cl水溶液使反應(yīng)停止并用DCM萃取混合物。蒸發(fā)掉有機(jī)萃取物的溶劑并將剩余油狀物(780毫克)溶于干燥的DCM(10毫升)中。加入TBTU(1.42克，4.43毫摩爾)、N，O-二甲基羥基胺(463毫克，4.75毫摩爾)及DIPEA(2毫升)并于室溫下攪拌該混合物18小時，然后將其用EA進(jìn)行稀釋并用水洗滌之。分離、蒸發(fā)有機(jī)層并藉由于硅膠上用庚烷∶EA 4∶1洗脫的CC純化剩余殘留物，得到油狀物5-乙基-4-對-甲苯基-噻吩-2-羧酸甲氧基-甲基-酰胺(210毫克)。將此油狀物溶解于THF中并于3℃下用甲基溴化鎂(0.3毫升，3M存于THF中的溶液)進(jìn)行處理。于室溫下攪拌反應(yīng)混合物16小時，然后加入另一部分格氏試劑(0.5毫升)。繼續(xù)攪拌72小時。用水稀釋該混合物并用EA實施萃取。蒸發(fā)掉有機(jī)萃取物的溶劑，并于制備型TLC板上用庚烷∶EA純化粗產(chǎn)物，得到黃色油狀物1-(5-乙基-4-對-甲苯基-噻吩-2-基)-乙酮(28毫克)；LC-MStR＝1.06分鐘，[M+1]+＝245.19。
c)將1-(5-乙基-4-對-甲苯基-噻吩-2-基)-乙酮(28毫克，0.115毫摩爾)及3，5-二甲基-4-羥基苯甲醛(26毫克，0.172毫摩爾)溶于乙醇(1.5毫升)及存于異丙醇(0.3毫升)中的5N HCl的溶液于室溫下攪拌18小時。用水稀釋該溶液并用EA實施萃取。對有機(jī)萃取物實施蒸發(fā)，溶于甲醇(3毫升)及THF(3毫升)中，并用Pd/C(30毫克，10％Pd)進(jìn)行處理。于1.5巴的H2條件下將漿液攪拌18小時。過濾混合物，于真空下去除濾液的溶劑并藉由制備型HPLC純化粗產(chǎn)物，得到無色油狀物1-(5-乙基-4-對-甲苯基-噻吩-2-基)-3-(4-羥基-3，5-二甲基-苯基)-丙烷-1-酮(46毫克)；LC-MStR＝1.13分鐘，[M+1]+＝379.22。
實例22
用(S)-3-氯-丙烷-1，2-二醇(90微升)處理1-(5-乙基-4-對-甲苯基-噻吩-2-基)-3-(4-羥基-3，5-二甲基-苯基)-丙烷-1-酮(47毫克，0.125毫摩爾)溶于乙醇(2毫升)及3N NaOH水溶液(0.5毫升)的溶液并于60℃下將混合物攪拌20小時。加入另一部分(S)-3-氯-丙烷-1，2-二醇(60微升)并于60℃下繼續(xù)攪拌5天。反應(yīng)混合物用水進(jìn)行稀釋，并用DCM實施萃取。蒸發(fā)掉有機(jī)萃取物的溶劑，并于制備型TLC板上用庚烷∶EA 2∶1純化粗產(chǎn)物，得到無色樹脂狀物3-[4-((S)-2，3-二羥基-丙氧基)-3，5-二甲基-苯基]-1-(5-乙基-4-對-甲苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(6毫克)；LC-MStR＝1.05分鐘，[M+1]+＝453.25；1H NMR(CDCl3)δ7.56(s，1H)、7.30-7.21(m，4H)、6.88(s，2H)、4.11-4.05(m，1H)、3.87-3.80(m，4H)、3.18-3.11(m，2H)、2.98-2.85(m，4H)、2.39(s，3H)、2.25(s，6H)、1.29(t，J＝7.6Hz，3H)。
實例23
a)于-75℃下，用第三丁基鋰(10毫升，1.6M存于戊烷中)處理4-苯基噻吩-2-羧酸(1.20克，5.88毫摩爾)溶于THF(15毫升)的溶液。于-70℃下將混合物攪拌1小時，然后加入1-碘丙烷(1.5毫升)。使反應(yīng)混合物升溫至室溫并攪拌過夜。用飽和NH4Cl水溶液(100毫升)使反應(yīng)停止并用DCM(2×200毫升)實施萃取。蒸發(fā)掉有機(jī)萃取物的溶劑并將所得殘留物溶于DCM(15毫升)中。加入TBTU(2.03克，6.33毫摩爾)、N，O-二甲基羥基胺(760毫克，7.80毫摩爾)及DIPEA(2毫升)并于室溫下將混合物攪拌72小時，然后用水洗滌的。分離并蒸發(fā)有機(jī)層。藉由于硅膠上用庚烷∶EA 5∶1洗脫的CC純化殘留物，得到無色油狀物4-苯基-5-丙基-噻吩-2-羧酸甲氧基-甲基-酰胺(900毫克)；LC-MStR＝1.05分鐘，[M+1]+＝290.15。
b)于2℃下將甲基溴化鎂(1毫升，1.7M存于THF中)添加至4-苯基-5-丙基-噻吩-2-羧酸甲氧基-甲基-酰胺(900毫克，3.11毫摩爾)溶液中。將混合物攪拌1小時，然后加入另一部分(0.2毫升)格氏試劑。繼續(xù)攪拌2小時。用水稀釋該混合物、用EA實施萃取并經(jīng)MgSO4對有機(jī)萃取物實施干燥及濃縮。藉由于硅膠上用庚烷∶EA 5∶4洗脫的CC純化粗產(chǎn)物，得到黃色油狀物1-(4-苯基-5-丙基-噻吩-2-基)-乙酮(456毫克)；LC-MStR＝1.06分鐘，[M+1]+＝245.14、1H NMR(CDCl3)δ7.59(s，1H)、7.47-7.32(m，5H)、2.87-2.81(m，2H)、2.54(s，3H)、1.76-1.63(m，2H)、0.95(t，J＝1.6Hz，3H)。
c)將1-(4-苯基-5-丙基-噻吩-2-基)-乙酮(450毫克，1.84毫摩爾)及3，5-二甲基-4-羥基苯甲醛(331毫克，2.21毫摩爾)溶于乙醇(4毫升)及存于異丙醇(2毫升)的5N HCl中的溶液于室溫下攪拌18小時。用水進(jìn)行稀釋深色溶液并用EA實施萃取。對有機(jī)萃取物實施蒸發(fā)并溶于甲醇(5毫升)及THF(5毫升)中，并用Pd/C(100毫克，10％Pd)進(jìn)行處理。于1.8巴的H2下將漿液攪拌16小時。過濾混合物，于真空下去除濾液的溶劑并用庚烷∶EA 2∶1藉由CC于制備型TLC板上純化所得粗產(chǎn)物，得到無色油狀物3-(4-羥基-3，5-二甲基-苯基)-1-(4-苯基-5-丙基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(550毫克)；LC-MStR＝1.13分鐘；[M+1]+＝379.20，1H NMR(CDCl3)δ7.56(s，1H)、7.45-7.28(m，5H)、6.85(s，2H)、4.48(s，1H)、3.17-3.10(m，2H)、2.96-2.89(m，2H)、2.87-2.80(m，2H)、2.21(s，6H)、1.74-1.64(m，2H)、0.94(t，J＝7.0Hz，3H)。
實例24
用(S)-3-氯-丙烷-1，2-二醇(55毫克，0.50毫摩爾)處理3-(4-羥基-3，5-二甲基-苯基)-1-(4-苯基-5-丙基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(47毫克，125微摩爾)溶于異丙醇(2毫升)及3N NaOH水溶液(0.5毫升)的溶液并于70℃下將混合物攪拌14小時。加入另一部分(S)-3-氯-丙烷-1，2-二醇(55毫克，0.50毫摩爾)，然后于70℃下繼續(xù)攪拌24小時。于真空下去除溶劑并于制備型TLC板上用庚烷∶EA 2∶1分離殘留物，得到無色樹脂狀物3-[4-((S)-2，3-二羥基-丙氧基)-3，5-二甲基-苯基]-1-(4-苯基-5-丙基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(15毫克)；LC-MStR＝1.05分鐘，[M+1]+＝453.18。
實例25
a)用環(huán)氧氯丙烷(122毫克，1.32毫摩爾)處理3-(4-羥基-3，5-二甲基-苯基)-1-(4-苯基-5-丙基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(250毫克，0.661毫摩爾)溶于2-丙醇(2毫升)及3N NaOH水溶液(1毫升)的溶液，并于室溫下將混合物攪拌18小時，然后用水進(jìn)行稀釋并用EA實施萃取。蒸發(fā)掉有機(jī)萃取物的溶劑，得到黃色油狀物粗制3-(3，5-二甲基-4-環(huán)氧乙烷基甲氧基-苯基)-1-(4-苯基-5-丙基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(257毫克)；LC-MStR＝1.18分鐘，[M+1]+＝435.20。
b)將3-(3，5-二甲基-4-環(huán)氧乙烷基甲氧基-苯基)-1-(4-苯基-5-丙基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(80毫克，191微摩爾)及甲胺(0.4微升，2M在于THF中的溶液)溶于甲醇(4毫升)的溶液于75℃下攪拌16小時，然后蒸發(fā)掉溶劑。藉由制備型HPL C分離殘留物，得到無色樹脂狀物3-[4-(2-羥基-3-甲氨基-丙氧基)-3，5-二甲基-苯基]-1-(4-苯基-5-丙基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮的甲酸鹽(23毫克)；LC-MStR＝0.91分鐘，[M+1]+＝466.27；1H NMR(CDCl3)δ8.54(s，1H)、7.588s，1H)、7.45-7.30(m，5H)、6.86(s，2H)、4.40-4.30(m，1H)、3.82-3.74(m，2H)、3.25-3.11(m，2H)、2.96-2.90(m，2H)、2.87-2.80(m，2H)、2.71(s，3H)、2.22(s，6H)、1.75-1.63(m，2H)、0.94(t，J＝7.6Hz，3H)。
實例26
將3-(3，5-二甲基-4-環(huán)氧乙烷基甲氧基-苯基)-1-(4-苯基-5-丙基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮(80毫克，191微摩爾)及氨基乙醇(35毫克，0.571毫摩爾)溶于甲醇(2毫升)的溶液于75℃下攪拌16小時，然后蒸發(fā)掉溶劑。藉由制備型HPLC分離所得殘留物，得到無色樹脂狀物3-{4-[2-羥基-3-(2-羥基-乙氨基)-丙氧基]-3，5-二甲基-苯基}-1-(4-苯基-5-丙基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮的甲酸鹽(27毫克)；LC-MS；tR＝0.91分鐘，[M+1]+＝496.50。
實例27至29
以類似于實例20的方式并使用適宜烷基化試劑自實例19制備以下實例
實例30
a)經(jīng)20分鐘時間將SnCl4(60.9克，234毫摩爾)溶于己烷(20毫升)的溶液添加至2-乙基噻吩(25克，223毫摩爾)及乙酰氯(18.4克，234毫摩爾)溶于己烷(80毫升)的溶液中。將釋放的HCl氣體捕集于NaOH溶液中。當(dāng)加入了約一半SnCl4溶液時，HCl釋放停止。將黑色粘性混合物升溫至100℃保持30分鐘，然后再將其冷卻至室溫。將該混合物倒入冰/水(600毫升)中，用二乙醚(3x)實施萃取并用NaOH(1M)、飽和NaHCO3溶液及鹽水洗滌合并的醚性萃取物、經(jīng)MgSO4干燥、過濾并蒸發(fā)之。將粗制1-(5-乙基-噻吩-2-基)-乙酮(35克)添加至乙酸鈉(16.0克，195毫摩爾)溶于水(160毫升)的溶液中并劇烈攪拌所得乳液。經(jīng)25分鐘時間向此乳液中逐滴加入溴(28.5克，178毫摩爾)。添加溴完成后，加入乙酸鈉(60克，731毫摩爾)并藉由加入10M NaOH水溶液將混合物的pH調(diào)節(jié)至9。加入另一部分溴(12.4克，78毫摩爾)并繼續(xù)攪拌15分鐘。藉由加入1M Na2S2O3水溶液使該反應(yīng)停止并用二乙醚將混合物萃取三次。有機(jī)萃取物用1N NaOH水溶液、2NHCl水溶液及鹽水進(jìn)行洗滌、經(jīng)MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)的，得到棕色油狀物1-(4-溴-5-乙基-噻吩-2-基)-乙酮(38克)；LC-MS；tR＝0.97分鐘，[M+1+CH3CN]+＝274.20。
b)將1-(4-溴-5-乙基-噻吩-2-基)-乙酮(10.6克，46毫摩爾)及3，5-二甲基-4-羥基苯甲醛(7.6克，51毫摩爾)溶于乙醇(40毫升)及存于異丙醇(20毫升)中的5N HCl的溶液于50℃下攪拌1.5小時。將混合物倒入冰/水(400毫升)中并用二乙醚(100毫升)萃取四次。有機(jī)萃取物用飽和NaHCO3水溶液、5％檸檬酸水溶液洗滌，再用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥、過濾并蒸發(fā)的。將粗產(chǎn)物懸浮于氯仿中并于室溫下實施15分鐘攪拌及超音波處理，過濾并干燥的，得到黃色固體1-(4-溴-5-乙基-噻吩-2-基)-3-(4-羥基-3，5-二甲基-苯基)-丙烯酮(2.11克)；LC-MStR＝1.11分鐘，[M+1]+＝365.01；1HNMR(CDCl3)δ7.74(d，J＝15.2Hz，1H)；7.68(s，1H)、7.30(s，2H)、7.18(d，J＝15.2Hz，1H)、4.99(s，1H)、2.84(q，J＝7.6Hz，2H)、2.30(s，6H)、1.34(t，J＝7.6Hz，3H)。
c)將1-(4-溴-5-乙基-噻吩-2-基)-3-(4-羥基-3，5-二甲基-苯基)-丙烯酮(2.10克，5.7毫摩爾)、Pd(PPh3)4(66毫克，57微摩爾)、二苯基硅烷(2.54克，13.8毫摩爾)及ZnCl2(627毫克，4.6毫摩爾)存于CHCl3(100毫升)中的混合物于40℃下攪拌1.5小時。用水稀釋該混合物并分離有機(jī)相。再次用CHCl3萃取水相。有機(jī)萃取物用5％檸檬酸水溶液進(jìn)行洗滌、經(jīng)MgSO4干燥、過濾并蒸發(fā)的。藉由于硅膠上用庚烷∶EA 4∶1洗脫的管柱層析法純化粗產(chǎn)物，得到固體1-(4-溴-5-乙基-噻吩-2-基)-3-(4-羥基-3，5-二甲基-苯基)-丙烷-1-酮(1.03克)；LC-MStR＝1.08分鐘，[M+1]+＝367.18。
d)將1-(4-溴-5-乙基-噻吩-2-基)-3-(4-羥基-3，5-二甲基-苯基)-丙烷-1-酮(45毫克，123微摩爾)及2-乙基苯基硼酸(22毫克，148微摩爾)溶于脫氣的二氧雜環(huán)己烷(0.8毫升)及脫氣的2MNa2CO3水溶液中。于氬氣流下向此溶液中加入PdCl2(dppf)(5毫克，7微摩爾)。于80℃下混合物攪拌8小時。將該混合物冷卻至室溫并藉由制備型HPLC純化一等分試樣，得到無色樹脂狀物1-[5-乙基-4-(2-乙基-苯基)-噻吩-2-基]-3-(4-羥基-3，5-二甲基-苯基)-丙烷-1-酮；LC-MStR＝1.10分鐘，[M+1]+＝383.25。
實例31至34
向?qū)嵗?0的含有1-[5-乙基-4-(2-乙基-苯基)-噻吩-2-基]-3-(4-羥基-3，5-二甲基-苯基)-丙烷-1-酮(9.5毫克，25微摩爾)的粗制混合物中加入一適宜烷基化試劑(125微摩爾)溶于異丙醇(0.15毫升)及2N NaOH水溶液(0.15毫升)的溶液。于75℃下將反應(yīng)混合物攪拌8小時，然后再次將其冷卻至室溫。將該反應(yīng)混合物離心15分鐘并藉由制備型HPLC分離上清液，得到相應(yīng)無色樹脂狀經(jīng)烷基化衍生物。


實例35至64
以類似于實例30及31至34的方式制備以下實例。



實例65確定EC50值的GTPγS分析 GTPγS結(jié)合分析是于96孔微量滴定板(Nunc，442587)中以200微升的終體積使用表現(xiàn)重組人類S1P1受體的CHO細(xì)胞的膜制備物來實施。分析條件為20mM Hepes(Fluka，54461)、100mMNaCl(Fluka，71378)、5mM MgCl2(Fluka，63064)、0.1％BSA(Calbiochem，126609)、1μM GDP(Sigma，G-7127)、2.5％DMSO(Fluka，41644)、50pM35S-GTPγS(Amersham Biosciences，SJ1320)。pH值是7.4。將測試化合物溶解并稀釋于100％DMSO中并在150微升上文分析緩沖劑中于35S-GTPγS存在下在室溫下實施30分鐘預(yù)培養(yǎng)。添加50微升35S-GTPγS后，于室溫下培育分析物1小時。該分析藉由以下操作終止使用得自Packard Biosciences的細(xì)胞收集器將反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)移至一MultiScreen板(Millipore，MAHFC1H60)，并將該等板用冰冷的10mM Na2HPO4/NaH2PO4(70％/30％)進(jìn)行洗滌、實施干燥、于底部密封并添加25微升MicroScint20(Packard Biosciences，序號6013621)，然后于頂端密封。用得自Packard Biosciences的TopCount量測膜結(jié)合35S-GTPγS。
EC50是可誘導(dǎo)50％的最大特異性35S-GTPγS結(jié)合的拮抗病劑濃度。特異性結(jié)合是藉由自最大結(jié)合減去非特異性結(jié)合來確定。最大結(jié)合是于10μM的S1P存在下與MultiScreen板結(jié)合的cpm量。非特異性結(jié)合是在該分析中于一拮抗病劑存在下的結(jié)合量。
表1列示該等實例中一些化合物的EC50值。該等EC50值根據(jù)上述方法確定 表1 實例66活體內(nèi)功效評價 式(I)化合物的功效是藉由向血壓正常的雄性Wistar大鼠經(jīng)口投與3至30毫克/千克式(I)化合物后量測循環(huán)的淋巴細(xì)胞來評價。在具有12小時-明/暗循環(huán)的氣候控制條件下將動物圈養(yǎng)起來并留有通往普通大鼠飼料及飲用水的自由信道。于藥劑投與前及投與后3、6及24小時采集血液。使用Advia血液分析系統(tǒng)(BayerDiagnostics，Zürich，Switzerland)對全血進(jìn)行血液分析。
所有數(shù)據(jù)皆以平均±SEM表示。使用Statistica(StatSoft)及Student-Newman-Keuls程序藉由變量分析(ANOVA)實施統(tǒng)計分析以進(jìn)行多重比較。當(dāng)p＜0.05時，拒絕零假設(shè)。
作為一實例，表2顯示與一組僅用媒劑處理的動物相比向血壓正常的雄性Wistar大鼠經(jīng)口投與10毫克/公斤本發(fā)明化合物3小時后對淋巴細(xì)胞計數(shù)的影響。
表2
權(quán)利要求
1.一種選自由式(I)的噻吩組成的組的化合物，
式(I)
其中
R1代表氫、低級烷基、低級烷氧基或鹵素；
R2代表氫、低級烷基、低級烷氧基或鹵素；
R3代表氫、羥基-低級烷基、2，3-二羥基丙基、二-(羥基-低級烷基)-低級烷基、-CH2-(CH2)k-NR31R32、(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸)-1-基-甲基、(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基-甲基、2-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸)-1-基]-乙基、2-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-乙基、3-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸)-1-基]-丙基、3-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-丙基、(吡咯烷-3-羧酸)-1-基-甲基、(吡咯烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基-甲基、(吡咯烷-2-羧酸)-1-基-甲基、(吡咯烷-2-羧酸低級烷基酯)-1-基-甲基、2-[(吡咯烷-3-羧酸)-1-基]-乙基、2-[(吡咯烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-乙基、2-[(吡咯烷-2-羧酸)-1-基]-乙基、2-[(吡咯烷-2-羧酸低級烷基酯)-1-基]-乙基、3-[(吡咯烷-3-羧酸)-1-基]-丙基、3-[(吡咯烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-丙基、3-[(吡咯烷-2-羧酸)-1-基]-丙基、3-[(吡咯烷-2-羧酸低級烷基酯)-1-基]-丙基、-CH2-(CH2)n-CONR31R32、-CO-NHR31、1-(1-(3-羧基-氮雜環(huán)丁基))-2乙?；?、1-(1-(2-羧基-吡咯烷基))-2-乙酰基、1-(1-(3-羧基-吡咯烷基))-2-乙酰基、1-(1-(3-羧基-氮雜環(huán)丁基))-3-丙?；?、1-(1-(2-羧基-吡咯烷基))-3-丙酰基、1-(1-(3-羧基-吡咯烷基))-3-丙?；?(CH2)nCH(OH)-CH2-NR31R32、羥基、低級烷氧基、氟-低級烷氧基、羥基-低級烷氧基、二-(羥基-低級烷基)-低級烷氧基、1-甘油基、2-甘油基、2-羥基-3-甲氧基-丙氧基、-OCH2-(CH2)m-NR31R32、2-吡咯烷-1-基-乙氧基、3-吡咯烷-1-基-丙氧基、2-哌嗪-1-基-乙氧基、2-[4-(低級烷基)-哌嗪-1-基]-乙氧基、2-[4-(2-羥基-乙基)-哌嗪-1-基]-乙氧基、3-哌嗪-1-基-丙氧基、3-[4-(低級烷基)-哌嗪-1-基]-丙氧基、3-[4-(2-羥基-乙基)-哌嗪-1-基]-丙氧基、2-嗎啉-4-基-乙氧基、3-嗎啉-4-基-丙氧基、2-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸)-1-基]-乙氧基、2-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-乙氧基、2-[(吡咯烷-3-羧酸)-1-基]-乙氧基、2-[(吡咯烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-乙氧基、2-[(吡咯烷-2-羧酸)-1-基]-乙氧基、2-[(吡咯烷-2-羧酸低級烷基酯)-1-基]-乙氧基、2-[(2-羥基-吡咯烷)-1-基]-乙氧基、2-[(3-羥基-吡咯烷)-1-基]-乙氧基、3-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸)-1-基]-丙氧基、3-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-丙氧基、3-[(吡咯烷-3-羧酸)-1-基]-丙氧基、3-[(吡咯烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-丙氧基、3-[(吡咯烷-2-羧酸)-1-基]-丙氧基、3-[(吡咯烷-2-羧酸低級烷基酯)-1-基]-丙氧基、3-[(2-羥基-吡咯烷)-1-基]-丙氧基、3-[(3-羥基-吡咯烷)-1-基]-丙氧基、2-氨基-3-羥基-2-羥甲基-丙氧基、-O-CH2-CONR31R32、1-(1-(3-羧基-氮雜環(huán)丁基))-1-氧代-2-乙氧基、1-(1-(吡咯烷-2-羧酸)-1-基)-1-氧代-2-乙氧基、1-(1-(吡咯烷-3-羧酸)-1-基)-1-氧代-2-乙氧基、3-氨甲?；?丙氧基、3-(低級烷基胺甲?；?丙氧基、3-(2-羥基乙基胺甲?；?丙氧基、-OCH2-CH(OH)-CH2-NR31R32、3-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸)-1-基]-2-羥基丙氧基、3-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-2-羥基丙氧基、2-羥基-3-[(吡咯烷-3-羧酸)-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-[(吡咯烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-[(吡咯烷-2-羧酸)-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-[(吡咯烷-2-羧酸低級烷基酯)-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-[(2-羥基-吡咯烷)-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-[(3-羥基-吡咯烷)-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-吡咯烷-1-基-丙氧基、2-羥基-3-哌嗪-1-基-丙氧基、2-羥基-3-[4-(低級烷基)-哌嗪-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-[4-(2-羥基-乙基)-哌嗪-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-嗎啉-4-基-丙氧基、-NR31R32、-NHCO-R31、-CH2-(CH2)k-NHSO2R33、-(CH2)nCH(OH)-CH2-NHSO2R33、-OCH2-(CH2)m-NHSO2R33、-OCH2-CH(OH)-CH2-NHSO2R33、-CH2-(CH2)k-NHCOR34、-(CH2)nCH(OH)-CH2-NHCOR34、-OCH2-(CH2)m-NHCOR34、或-OCH2-CH(OH)-CH2-NHCOR34；
R31代表氫、甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、2-羥乙基、2-羥基-1-羥甲基-乙基、2-低級烷氧基乙基、3-羥丙基、3-低級烷氧基丙基、2-氨基乙基、2-(低級烷氨基)乙基、2-(二-(低級烷基)氨基)乙基、羧甲基、低級烷基羧甲基、2-羧乙基，或2-(低級烷基羧基)乙基；
R32代表氫或甲基；
R33代表甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、2-羥乙基、2-甲氧基乙基、甲氨基、乙氨基、丙氨基、異丙氨基、n-丁氨基，或二甲氨基；
R34代表羥甲基、羥乙基、氨基甲基、甲氨基甲基、二甲氨基甲基、氨基乙基、2-甲氨基-乙基，或2-二甲氨基-乙基；
k代表整數(shù)1、2、或3；
m代表整數(shù)1或2；
n代表整數(shù)0、1、或2；
R4代表氫、低級烷基或鹵素；
R5代表三氟甲基、甲基、乙基或丙基；
R6代表視情況可經(jīng)單-或雙-取代的苯基，其中該等取代基獨立選自甲基、乙基、三氟甲基、鹵素及甲氧基；或視情況可經(jīng)甲基或甲氧基取代的2-、3-或4-吡啶基；且
R7代表氫或甲基；
及光學(xué)純對映異構(gòu)體、諸如外消旋異構(gòu)體的對映異構(gòu)體混合物、非對映體、非對映體混合物、非對映外消旋異構(gòu)體、及非對映外消旋異構(gòu)體的混合物、以及此等化合物的鹽及溶劑化物及其它形態(tài)形式。
2.如權(quán)利要求1的化合物，其中R1及R4代表氫，且R2代表甲基。
3.如權(quán)利要求1的化合物，其中R1代表氫，且R2及R4代表甲基，其中R4相對于R3處于鄰位。
4.如權(quán)利要求1的化合物，其中R1代表氫，R2代表甲基，且R4代表一相對于R3處于鄰位的乙基。
5.如權(quán)利要求1的化合物，其中R1代表氫，R2代表甲基，且R4代表相對于R3處于鄰位的氯。
6.如權(quán)利要求1的化合物，其中R1及R4代表氫，且R2代表氯。
7.如權(quán)利要求1的化合物，其中R1代表氫、R2代表甲氧基，且R4代表相對于R3處于鄰位的氯或氟。
8.如權(quán)利要求1的化合物，其中R1代表甲氧基，且R2及R4代表氫。
9.如權(quán)利要求1至8中任一項的化合物，其中R3代表氫、羥基-低級烷基、2，3-二羥基丙基、二-(羥基-低級烷基)-低級烷基、(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸)-1-基-甲基、(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基-甲基、(吡咯烷-3-羧酸)-1-基-甲基、(吡咯烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基-甲基、(吡咯烷-2-羧酸)-1-基-甲基、(吡咯烷-2-羧酸低級烷基酯)-1-基-甲基、-CH2-(CH2)n-CONR31R32、-CO-NHR31、-(CH2)nCH(OH)-CH2-NR31R32、低級烷氧基、羥基-低級烷氧基、二-(羥基-低級烷基)-低級烷氧基、1-甘油基、2-甘油基、2-羥基-3-甲氧基-丙氧基、-OCH2-(CH2)m-NR31R32、2-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸)-1-基]-乙氧基、2-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-乙氧基、2-[(吡咯烷-3-羧酸)-1-基]-乙氧基、2-[(吡咯烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-乙氧基、2-[(吡咯烷-2-羧酸)-1-基]-乙氧基、2-[(吡咯烷-2-羧酸低級烷基酯)-1-基]-乙氧基、2-[(2-羥基-吡咯烷)-1-基]-乙氧基、2-[(3-羥基-吡咯烷)-1-基]-乙氧基、3-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸)-1-基]-丙氧基、3-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-丙氧基、3-[(吡咯烷-3-羧酸)-1-基]-丙氧基、3-[(吡咯烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-丙氧基、3-[(吡咯烷-2-羧酸)-1-基]-丙氧基、3-[(吡咯烷-2-羧酸低級烷基酯)-1-基]-丙氧基、3-[(2-羥基-吡咯烷)-1-基]-丙氧基、3-[(3-羥基-吡咯烷)-1-基]-丙氧基、2-氨基-3-羥基-2-羥甲基-丙氧基、-O-CH2-CONR31R32、-OCH2-CH(OH)-CH2-NR31R32、3-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸)-1-基]-2-羥基丙氧基、3-[(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-2-羥基丙氧基、2-羥基-3-[(吡咯烷-3-羧酸)-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-[(吡咯烷-3-羧酸低級烷基酯)-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-[(吡咯烷-2-羧酸)-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-[(吡咯烷-2-羧酸低級烷基酯)-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-[(2-羥基-吡咯烷)-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-[(3-羥基-吡咯烷)-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-吡咯烷-1-基-丙氧基、2-羥基-3-哌嗪-1-基-丙氧基、2-羥基-3-[4-(低級烷基)-哌嗪-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-[4-(2-羥基-乙基)-哌嗪-1-基]-丙氧基、2-羥基-3-嗎啉-4-基-丙氧基、-NR31R32、-NHCO-R31、-CH2-(CH2)k-NHSO2R33、-(CH2)nCH(OH)-CH2-NHSO2R33、-OCH2-(CH2)m-NHSO2R33、-OCH2-CH(OH)-CH2-NHSO2R33、-CH2-(CH2)k-NHCOR34、-(CH2)nCH(OH)-CH2-NHCOR34、-OCH2-(CH2)m-NHCOR34或-OCH2-CH(OH)-CH2-NHCOR34，其中R31、R32、R33及R34如權(quán)利要求1所定義。
10.如權(quán)利要求1至8中任一項的化合物，其中R3代表羥基-低級烷基、2，3-二羥基丙基、二-(羥基-低級烷基)-低級烷基、(氮雜環(huán)丁烷-3-羧酸)-1-基-甲基、-CO-NHR31、-(CH2)nCH(OH)-CH2-NR31R32、低級烷氧基、羥基-低級烷氧基、二-(羥基-低級烷基)-低級烷氧基、1-甘油基、2-甘油基、2-羥基-3-甲氧基-丙氧基、-OCH2-(CH2)m-NR31R32、2-氨基-3-羥基-2-羥甲基-丙氧基、-O-CH2-CONR31R32、-OCH2-CH(OH)-CH2-NR31R32、-NR31R32、-NHCO-R31、-CH2-(CH2)k-NHSO2R33、-(CH2)nCH(OH)-CH2-NHSO2R33、-OCH2-(CH2)m-NHSO2R33、-OCH2-CH(OH)-CH2-NHSO2R33、-CH2-(CH2)k-NHCOR34、-(CH2)nCH(OH)-CH2-NHCOR34、-OCH2-(CH2)m-NHCOR34，或-OCH2-CH(OH)-CH2-NHCOR34，其中R31、R32、R33及R34如權(quán)利要求1所定義。
11.如權(quán)利要求1至8中任一項的化合物，其中R3代表羥基-低級烷基、2，3-二羥丙基、二-(羥基-低級烷基)-低級烷基、-CO-NHR31、低級烷氧基、羥基-低級烷氧基、二-(羥基-低級烷基)-低級烷氧基、1-甘油基、2-甘油基、2-羥基-3-甲氧基-丙氧基，或-O-CH2-CONR31R32，其中R31及R32如權(quán)利要求1所定義。
12.如權(quán)利要求1至11中任一項的化合物，其中R5代表乙基。
13.如權(quán)利要求1至12中任一項的化合物，其中R6代表一未經(jīng)取代苯環(huán)。
14.如權(quán)利要求1至13中任一項的化合物，其中R7代表氫。
15.如權(quán)利要求1的化合物，其選自由下列組成的組
3-[4-((S)-2，3-二羥基-丙氧基)-3，5-二甲基-苯基]-1-(5-乙基-4-苯基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮、
3-[4-((S)-2，3-二羥基-丙氧基)-3，5-二甲基-苯基]-1-(5-乙基-4-(2-甲基-苯基)-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮及
3-[4-((S)-2，3-二羥基-丙氧基)-3，5-二甲基-苯基]-1-(4-苯基-5-丙基-噻吩-2-基)-丙烷-1-酮。
16.一種藥物組合物，其包含如權(quán)利要求1至15中任一項的化合物及一醫(yī)藥上可接受的載劑。
17.如權(quán)利要求1至15中任一項的化合物或如權(quán)利要求16的藥物組合物，其用作藥物。
18.一種如權(quán)利要求1至15中任一項的化合物用于制備可預(yù)防或治療與激活的免疫系統(tǒng)相關(guān)的疾病或病癥的藥物組合物的用途。
19.如權(quán)利要求18的用途，其可用于預(yù)防或治療選自由下列組成的組的疾病或病癥選自腎、肝、心臟及肺的移植器官的排斥反應(yīng)；藉由干細(xì)胞移植引發(fā)的移植物抗宿主疾?。贿x自類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、牛皮癬、干癬性關(guān)節(jié)炎、克隆氏病及橋本氏甲狀腺炎的自身免疫綜合征；及特應(yīng)性皮膚炎。
20.一種如權(quán)利要求1至15中任一項的化合物用于制備與一或若干種選自由免疫抑制劑、腎上腺皮質(zhì)類固醇、細(xì)胞毒性藥、粘附分子抑制劑、細(xì)胞因子、細(xì)胞因子抑制劑、細(xì)胞因子受體拮抗劑及重組細(xì)胞因子受體組成的組的藥劑結(jié)合使用來預(yù)防或治療與激活的免疫系統(tǒng)相關(guān)的疾病或病癥的醫(yī)藥組合物的用途。
全文摘要
本發(fā)明關(guān)于新穎噻吩衍生物、其制備及其作為醫(yī)藥活性化合物的用途。所述化合物尤其可作為免疫抑制劑。
文檔編號C07D333/22GK101203503SQ200680022419
公開日2008年6月18日 申請日期2006年6月20日 優(yōu)先權(quán)日2005年6月24日
發(fā)明者馬丁·博利, 大衛(wèi)·萊曼, 博里斯·馬蒂斯, 克勞斯·米勒, 約爾格·威爾克 申請人:?？铺厝R茵藥品有限公司