專利名稱：：通過二氫吡咯環(huán)氧化制備二氮雜并環(huán)戊二烯衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及制備可用于制備半胱氨酰蛋白酶抑制劑特別是CAC1抑制劑的5，5-雙環(huán)結(jié)構(gòu)單元的方法。
背景技術(shù)：
：蛋白酶參與大范圍的生物進(jìn)程，并且構(gòu)成在分析幾種完成的基因組測序程序之后識別的全部基因產(chǎn)物的約2%。蛋白酶通過在實(shí)質(zhì)上發(fā)現(xiàn)的無數(shù)蛋白質(zhì)內(nèi)的肽酰胺鍵的分裂介導(dǎo)其作用。這種水解作用包括識別、然后結(jié)合于蛋白質(zhì)的特異性三維電子表面，這使得用于分裂的鍵精確對準(zhǔn)蛋白酶催化部位內(nèi)部。然后，經(jīng)由蛋白酶自身的氨基酸側(cè)鏈，或者經(jīng)由與蛋白酶結(jié)合并通過其激活的水分子的作用，通過親核進(jìn)攻待分裂的酰胺鍵開始催化水解。其中進(jìn)攻性親核試劑是Cys殘基的硫醇側(cè)鏈的蛋白酶已知為半胱氨酸蛋白酶。"半胱氨酸蛋白酶"的總類別包含許多在各種各樣的有機(jī)體中發(fā)現(xiàn)的成員，所述有機(jī)體來自病毒、細(xì)菌、原生動物、植物、真菌乃至哺乳動物。半胱氨酸蛋白酶基于其立體結(jié)構(gòu)的類似性或蛋白酶一級序列中催化殘基的保守排列被分為"氏族(clans)"。另外，"氏族"可進(jìn)一步分為"家族(families)"，在該家族中，當(dāng)比較那些構(gòu)成用于負(fù)責(zé)蛋白酶活性的部分的氨基酸序列部分時，每種蛋白酶與其它成員之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著關(guān)系(參見Barrett,A.J等人，在'HandbookofProteolyticEnzymes',Eds.Barrett,A.J.，Rawlings，N.D.,和Woessner，J.F.Publ.AcademicPress,1998中的徹底討論)。迄今為止，半胱氨酸蛋白酶已^皮分為五類CA、CB、CC、CD和CE(Barrett，A.J.等人，1998)。源自熱帶木瓜果實(shí)'木瓜蛋白酶，的蛋白酶構(gòu)成CA氏族的基礎(chǔ)，其目前在多種序列數(shù)據(jù)庫中包含八十多種不同的序列條目，并且從目前的基因組測序努力中希望獲得更多序列條目。近年來，半胱氨酰蛋白酶已經(jīng)顯示出廣泛的與疾病有關(guān)的生物學(xué)功能。特別是氏族CA/家族C1(CAC1)的蛋白酶已經(jīng)與眾多疾病過程有關(guān)[a)Lecaille，F(xiàn).等人，Chem.Rev.2002,102，4459;(b)Chapman，H.A.等人，Annu.Rev.Physiol.1997，59，63;Barrett,A.J.等人,HandbookofProteolyticEnzymes;Academic:NewYork,1998]。例子包括人蛋白酶，例如組織蛋白酶K(骨質(zhì)疏松癥)，組織蛋白酶S和F(自身免疫疾病)，組織蛋白酶B(瘤侵入/轉(zhuǎn)移)和組織蛋白酶L(轉(zhuǎn)移/自身免疫疾病)，以及寄生蛋白酶例如惡性瘧原蟲半胱氨酸蛋白酶(falcipain)(癡疾寄生蟲惡性瘧原蟲)，并胱氨酸蛋白酶克魯茲蛋白酶(cruzipain)(克氏錐蟲感染)和與利什曼病有關(guān)的CPB蛋白酶。[Lecaille，F(xiàn).等人，出處同上，Kaleta，J.，出處同上]。半胱氨酰蛋白酶活性的抑制已經(jīng)逐步發(fā)展成目前非常令人感興趣的領(lǐng)域[(a)0Uo，H.-H.等人，Chem.Rev.1997，97,133;(b)Hera證dez，A.A.等人，Curr.Opin.Chem。Biol。2002，6，459;(c)Veber，D.F.等人，Cur.Opin.DrugDisc.Dev.2000,3，362-369;(d)Leung—Toung，R.等人,Curr.Med.Chem.2002，9，979]。選擇性抑制這些CAC1蛋白酶中的任一種提供巨大的治療學(xué)潛力，并因此成為制藥工業(yè)對開發(fā)適于人體給藥的化合物的共同的驅(qū)動力[例如，參見(a)Bromme，D.等人，Curr.Pharm.Des.2002,8，1639-1658;(b)Kim，W.等人，ExpertOpin.Ther.Patents2002，12(3)，419]。迄今為止，這些努力主要集中于基于低分子量底物的擬肽抑制劑，它們中較領(lǐng)先的正處在初期臨床評價中。迄今為止研究的半胱氨酰蛋白酶抑制劑包括肽和擬肽腈類(例如參見WO03/041649)，直鏈和環(huán)狀的肽和擬肽酮類，酮雜環(huán)類(例如參見Veber，D.F.等人，Curr.Opin.DrugDiscoveryDev.，3(4)，362-369，2000),單環(huán)內(nèi)酰胺類(例如，參見WO00/59881、W099/48911、WO01/09169)，a-酮酰胺類(例如，參見WO03/013518)，氰酰胺類(WO01/077073、WO01/068645)，二氫嘧啶類(例如，參見WO02/032879)和氰基氨基嘧啶類(例如，參見WO03/020278、WO03/020721)。[la]X=0，n=1[lb]X=NR'，n=1[lc]X=O，n=2[ld]X=NR',n=2[le]X=NIT,n=3現(xiàn)有技術(shù)中的組織蛋白酶K的環(huán)狀抑制劑GSK的最初的環(huán)狀抑制劑基于強(qiáng)力、選擇性和可逆的3-酰胺基-四氫呋喃-4-酮[la]，3-酰胺基吡咯烷-4-酮[lb]，4-酰胺基-四氫吡喃-3-酮[lc]，4-酰胺基p底咬-3-酮[ld]和4-酰胺基氮雜環(huán)庚烷-3-酮[le](如上所述)[參見(a)Marquis，R.W.等人，J.Med.Chem.2001，44，725，和其中引用的參考文獻(xiàn)；(b)Marquis，R.W.等人,J.Med.Chem.2001，44，1380，和其中引用的參考文獻(xiàn)]。進(jìn)一步的研究顯示環(huán)酮[l]特別是五元環(huán)類似物[la]和[lb]，由于酮a位中心容易發(fā)生差向異構(gòu)化而具有結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定性[Marquis,R.W.等人，J.Med.Chem.2001，44，1380;Fenwick，A.E.等人，J.Bioorg.Med.Chem.Lett.2001，11，199;WO00/69855]。這排除了式[la-d]抑制劑的臨床前優(yōu)化，并導(dǎo)致開發(fā)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的氮雜環(huán)庚酮(azepanone)系列[le]。作為環(huán)擴(kuò)大方法的替代方法，ot-碳的烷基化消除了環(huán)酮[l]經(jīng)歷a-烯醇化的能力，并因此導(dǎo)致結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性。然而，研究已表明在3-酰胺基吡咯烷-4-酮[lb]體系內(nèi)的a-甲基化引起相對于組織蛋白酶K的效力從Ki,app0.18-50nM的實(shí)質(zhì)喪失。目前更多的研究考察了作為CAC1蛋白酶抑制劑的5，5-雙環(huán)體系，例如，N-(3-氧代-六氫環(huán)戊烷并[b]呋喃-3a-基)酰胺雙環(huán)酮類[2][(a)Quibell,M.;Ramjee，M.K.，WO02/57246;(b)Watts，J.等人，Bioorg.Med.Chem.12(2004)，2903-2925],四氫吹喃并[3，2-b]吡咯-3-酮基骨架[3][Quibell，M.等人，Bioorg.Med.Chem.12(2004)，5689-5710〗，順式-6-氧代六氫-2-氧雜-1，4-二氮雜并環(huán)戊二烯和順式-6-氧代-六氫吡咯并[3，2-c]吡唑基骨架[4][Wang，Y.等人，Bioorg.Med.Chem.Lett.15(2005)，1327-1331]，和順式-六氫吡咯并[3，2-b]吡咯-3-酮基骨架[5][Quibell，M.等人，Bioorg.Med.Chem.13(2005)，609—625]。2問W問CAC1半胱氨酰蛋白酶的5，5-雙環(huán)抑制劑研究已表明上述5，5-雙環(huán)體系表現(xiàn)出作為各種具有治療魅力的哺乳動物和寄生蟲CAC1半胱氨酰蛋白酶靶的抑制劑的有前途的效力。另外，5，5-雙環(huán)系列具有手性穩(wěn)定性，因?yàn)槠鋵樖匠砗蠋缀谓Y(jié)構(gòu)比反式稠合幾何結(jié)構(gòu)具有顯著的優(yōu)先能量選擇性。當(dāng)與由于手性不穩(wěn)定性而通常表現(xiàn)出有限的臨床前開發(fā)潛力的單環(huán)體系相比，這種手性穩(wěn)定性提供了很大的優(yōu)勢。5，5-雙環(huán)結(jié)構(gòu)單元的改進(jìn)方法。更特別地，本發(fā)明致力于提供合成順式-六氫吡咯并[3，2-b]吡咯-3-酮核心的改進(jìn)方法。本發(fā)明的各方面在下面的說明書和權(quán)利要求中闡述。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的第一方面涉及制備式I的化合物或其可藥用鹽的方法:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>其中R'為Pg'或P/;P/為C0-烴基；P2為CH2、0或N-Pg2;且Pg'和Pg2各自獨(dú)立地為N-保護(hù)基；所述方法包括以下步驟(i)使式II的化合物與雙環(huán)氧乙烷反應(yīng)形成式III的環(huán)氧化物，其中X選自CN、CH2N3、CH2NH-Pg2、ONH-Pg2、NHNH-Pg2、N(Pg2)NH-Pg2;(ii)將式III的化合物轉(zhuǎn)化為式I的化合物，本發(fā)明的另一方面涉及制備半胱氨酰蛋白酶抑制劑的方法，其包括上述步驟。本發(fā)明的另一方面涉及制備式vn、VIII和IX的化合物的方法，其中Rx、Ry、IT、Rz、U、V、W、X'、Y、n、m、o、P2、P〗,和R'在以下的詳細(xì)說明中定義，m反式大量順式少量其中所述方法包括上述本發(fā)明第一方面所述的方法。!具體實(shí)施方法本文中使用的術(shù)語"烴基"是指至少包括C和H的基團(tuán)。如果烴基包括一個以上的C，則這些碳不必彼此連接。例如，至少兩個碳可通過適當(dāng)?shù)脑鼗蚧鶊F(tuán)連接。因此，烴基可包含雜原子。適當(dāng)?shù)碾s原子對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的，并包括例如硫、氣、氧、磷和硅。其中烴基包含一個或多個雜原子，所述基團(tuán)可通過碳原子或者通過雜原子與另一基團(tuán)連接，也就是說，連接原子可以是碳或者雜原子。烴基還可包括一個或多個取代基，例如鹵基、烷基、?；?、環(huán)烷基、脂環(huán)基、CF3、0H、CN、N02、S03H、S02NH2、S02Me、NH2、C00H和C0冊2。優(yōu)選地，烴基為芳基、雜芳基、烷基、環(huán)烷基、芳烷基、脂環(huán)基或烯基。更優(yōu)選地，烴基為芳基、雜芳基、烷基、環(huán)烷基、芳烷基或烯基。本文中使用的術(shù)語"烷基，，包括飽和的直鏈和支鏈烷基，其可被取代(單取代或多取代)或未被取代。優(yōu)選地，烷基為Cw。烷基，更優(yōu)選為CH5烷基，進(jìn)一步優(yōu)選為CH2烷基，更進(jìn)一步優(yōu)選為Cw烷基，再進(jìn)一步優(yōu)選為Cw烷基。特別優(yōu)選的烷基包括例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基和己基。適當(dāng)?shù)娜〈睦影ㄘ栈?、CF3、0H、CN、N02、S03H、S02NH2、S02Me、NH2、C00H和C0NH2。本文中使用的術(shù)語"芳基"或者"Ar"是指Ch2芳基，其可被取代(單取代或多取代)或未被取代。典型實(shí)例包括苯基和萘基等等。適當(dāng)?shù)娜〈睦影ㄍ榛⒇栈?、CF3、0H、CN、N02、S03H、S02NH2、S02Me、NH2、C00H和C0NH2。本文中使用的術(shù)語"雜芳基"是指Cw芳基，其可被取代(單取代或多取代)或未被取代，其包含一個或多個雜原子。優(yōu)選的雜芳基包括吡咯、吲味、苯并吹喃、吡唑、苯并咪喳、苯并瘞唑、嘧啶、咪唑、吡。秦、吡咬、查啉、三唑、四唑、瘞汾和吹喃。另夕卜，適當(dāng)?shù)娜〈ɡ琨u基、烷基、CF3、0H、CN、N02、S03H、SO萬、S02Me、NH2、C00H和C0NH2。本文中使用的術(shù)語"環(huán)烷基"是指環(huán)狀烷基，其可被取代(單取代或多取代)或未被取代。適當(dāng)?shù)娜〈ɡ缲栈⑼榛?、CF3、0H、CN、N02、S03H、S02NH2、S02Me、NH2、C00H、C0NH2和烷氧基j/術(shù)語"環(huán)烷基(烷基)"用作上述術(shù)語炕基和環(huán)烷基的連接基。術(shù)語"芳烷基"用作上述術(shù)語烷基和芳基的連接基。優(yōu)選的芳烷基包括CH2Ph和CH2CH2Ph等等。本文中使用的術(shù)語"烯基"是指含有一個或多個碳-碳雙鍵的基團(tuán)，其可為支鏈或非支鏈基團(tuán)，可被取代(單取代或多取代)或未被取代。優(yōu)選地，烯基為Cw。烯基，更優(yōu)選為Cm烯基，進(jìn)一步優(yōu)選為Cm烯基，或優(yōu)選為C2—6烯基，更進(jìn)一步優(yōu)選為C2—3烯基。適當(dāng)?shù)娜〈ɡ缤榛?、卣基、CF3、0H、CN、N02、S03H、S0萬、S02Me、NH2、C00H、C0NH2和烷氧基。本文中使用的術(shù)語"脂環(huán)基"是指環(huán)狀脂族基，其任選地含有一個或多個雜原子并且其任選地被取代。優(yōu)選的脂環(huán)基包括哌啶基、吡咯烷基、哌溱基和嗎啉基。更優(yōu)選地，脂環(huán)基選自N-哌啶基、N-吡咯烷基、N-哌溱基和N-嗎啉基。適當(dāng)?shù)娜〈ɡ缤榛?、卣基、CF3、0H、CN、N02、S03H、S02NH2、S02Me、NH2、C00H、C0冊2和烷氧基。術(shù)語"脂族基"取其本領(lǐng)域的標(biāo)準(zhǔn)含義并且包括非芳香基團(tuán)，如烷、烯和炔，及其取代的衍生物。基團(tuán)Pj皮定義為CH2、0或N-Pg2。在本發(fā)明的一個非常優(yōu)選的實(shí)施方案中，P2為CH2?；鶊F(tuán)X選自CN、CH2N3、CH2NH-Pg2、ONH-Pg2、NHNH-Pg2和N(Pg2)NH-Pg2。在本發(fā)明的一個非常優(yōu)選的實(shí)施方案中，X為CN。'本發(fā)明涉及本文所述化合物的所有的鹽、水合物、溶劑化物、復(fù)合物和前藥的制備和用途。除非上下文要求，否則術(shù)語"化合物"意指包括所有這些鹽、水合物、溶劑化物、復(fù)合物和前藥。通式(I)化合物的適當(dāng)?shù)乃帉W(xué)和獸醫(yī)學(xué)可接受的鹽包括有機(jī)酸特別是羧酸類的鹽，包括但不限于乙酸鹽、三氟醋酸鹽、乳酸鹽、葡糖酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、馬來酸鹽、蘋果酸、泛酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、丁酸鹽、二葡糖酸鹽、環(huán)戊酸鹽、葡庚酸鹽、甘油磷酸鹽、草酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、富馬酸鹽、煙酸鹽、棕櫚酸鹽、果膠酸鹽、3-苯基丙酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸酯、丙酸鹽、酒石酸鹽、乳糖酸鹽、新戊酸鹽、樟腦酸鹽、十一烷酸鹽和琥珀酸鹽，有機(jī)磺酸鹽如曱磺酸鹽、乙磺酸鹽、2-羥基乙磧酸鹽、樟腦磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、苯磺酸鹽、對氯苯磺酸鹽和對甲苯磺酸鹽；以及無機(jī)酸鹽，如鹽酸鹽、氬溴酸鹽、氫碘酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、半硫酸鹽、硫氰酸鹽、過硫酸鹽、磷酸鹽和磺酸鹽。不是藥學(xué)或獸醫(yī)學(xué)可接受的鹽作為中間體仍是有價值的。本發(fā)明進(jìn)一步涉及以各種晶形、多晶型和含水形式存在的化合物的制備。制藥工業(yè)內(nèi)公知，本發(fā)明化合物可以任何這些形式被分離，如上所述，本發(fā)明致力于提供用于制備可制備半胱氨酰蛋白酶抑制劑的5，5-雙環(huán)結(jié)構(gòu)單元的改進(jìn)方法。本發(fā)明的關(guān)鍵步驟包括使用雙環(huán)氧乙烷環(huán)氧化N-保護(hù)的2,5-二氬吡咯化合物(步驟(i)),然后(根據(jù)需要)還原和進(jìn)行分子內(nèi)環(huán)化以形成順式-5，5-雙環(huán)體系。雙環(huán)氧乙烷作為氧化劑的用途在文獻(xiàn)中充分記栽[參見(a)Hodgson,D.M.等人，Synlett，310(2002);(b)Adam，W.等人，Ace.Chem.Res.22，205，(1989);(c)Yang，D.等人，J.Org.Chem.，60，3887,(1995);(d)Mello，R.等人，J.Org.Chem.，53，3890,(1988);(e)Curci，R.等人，Pure&Appl.Chem.，67(5)，811(1995);(f)Em醒s，W.D.等人,J.Amer.Chem.Soc.89，(1955)]。優(yōu)選地，雙環(huán)氧乙烷通過KHS05與酮反應(yīng)原地產(chǎn)生。然而，步驟(i)還可使用分離的雙環(huán)氧乙烷進(jìn)行，例如使用從丙酮形成的雙環(huán)氧乙烷的儲備溶液。更優(yōu)選地，雙環(huán)氧乙烷使用0xone⑧原地產(chǎn)生，0xone⑧是市售的含有KHS05作為活性成分的氧化劑。因此，在一個優(yōu)選方案中，本發(fā)明要求保護(hù)的方法的步驟(i)包括使用Oxone(2KHS05'KHS04.K2S04)和酮共反應(yīng)劑原地進(jìn)行式II的N-保護(hù)的2，5-二氫吡咯化合物的環(huán)氧化。如上所述，(^0116@的活性成分是過一硫酸鉀，KHS05[CAS-RN10058-23-8]，通常已知為過硫酸氫鉀，其作為式2KHS05.KHS04.K2S04的三聚鹽的成分存在。[過一硫酸氫鉀硫酸鹽(5:3:2:2)，CAS-RN70693-62-8;購自DuPont]。(^0116@的氧化電位來自其過酸化學(xué)性質(zhì)；其是過一硫酸H2S05(亦稱卡羅酸)的第一個中性鹽。K—0-S(=0)2(-00H)過石克酸氫鉀在弱堿性條件下(7.5-8.0)，過硫酸鹽與酮共反應(yīng)劑反應(yīng)形成三元環(huán)狀過氧化物(雙環(huán)氧乙烷)，其中兩個氧都與酮的羰基碳連接。然后，的化合物進(jìn)行環(huán)氧化。優(yōu)選地，酮為式V:其中r和Rb各自獨(dú)立地為烷基、芳基、卣代烷基或閨代芳基。其中iT和/或Rb為烷基，烷基可為直鏈或支鏈烷基。優(yōu)選地，烷基為Cw。烷基，更優(yōu)選為d—15烷基，進(jìn)一步優(yōu)選為Cw2烷基，更進(jìn)一步優(yōu)選為d-6烷基，再進(jìn)一步優(yōu)選為Cw烷基。特別優(yōu)選的烷基包括例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基和己基。本文中使用的術(shù)語"卣代烷基"是指其中一個或多個氫被卣基替代的上述烷基。其中r和/或Rb為芳基，芳基通常為c6—12芳基。優(yōu)選例子包括苯基和萘基等等。本文中使用的術(shù)語"卣代芳基"是指其中一個或多個氫被卣基替代的上述芳基。例如，KHS0s(0xone勺與式V的酮的反應(yīng)將形成式VI的雙環(huán)氧乙坑其中r和Rb的定義如上所述。更優(yōu)選地，r和Rb各自獨(dú)立地為烷基或囟代烷基。在非常優(yōu)選的方案中，r和Rb的至少一個為鹵代烷基。更優(yōu)選地，為CF3或CF2CF3。在一個優(yōu)選方案中，IT和Rb各自獨(dú)立地為甲基或三氟甲基。在本發(fā)明的一個優(yōu)選方案中，酮選自丙酮和1，1，1-三氟烷基酮。在本發(fā)明的更優(yōu)選方案中，三氟烷基酮為l，l，l-三氟丙酮或1，1，1-三氟-2-丁酮，更優(yōu)選為1，1，1-三氟-2-丁酮。有利地是，使用雙環(huán)氧乙烷的環(huán)氧化反應(yīng)導(dǎo)致反式-環(huán)氧化物順式-環(huán)氧化物之比增加。例如，在其中的X是CN的式III的化合物中，使用Oxone/1，1，1-三氟-2-丁酮試劑混合物生成大于9:1的反式-環(huán)氧化物順式-環(huán)氧化物的混合物。同樣地，使用Oxone/1，1，1-三氟丙酮的混合物生成7:1的反式-環(huán)氧化物順式-環(huán)氧化物。相比之下，現(xiàn)有技術(shù)的使用mCPBA進(jìn)行環(huán)氧化步驟的方法只提供低得多的反式-環(huán)氧化物順式-環(huán)氧化物之比，例如，為2:1。使用本發(fā)明的條件荻得的反式-環(huán)氧化物順式-環(huán)氧化物的比例的增加最終提供更有利的所需的式I的順式-5,5-雙環(huán)化合物的收率，該化合物通過隨后的反式-環(huán)氧化物的分子內(nèi)環(huán)化形成。、使用本發(fā)明的方法獲得的選擇比的改進(jìn)進(jìn)一步被以下事實(shí)所證明，在^從反應(yīng)介質(zhì)中提取之后，得到的反式-和順式-環(huán)氧化物的混合物優(yōu)選地可通過研磨和/或從有機(jī)溶劑中結(jié)晶而被富集，從而獲得旋光的純的反式-環(huán)氧化物。在本發(fā)明的一個非常優(yōu)選的方案中，X為CN且所述的式III化合物通過結(jié)晶純化，從而獲得基本上純的反式-環(huán)氧化物。在一個非常優(yōu)選的方案中，反式-環(huán)氧化物從乙醚/庚烷的混合物中結(jié)晶。環(huán)氧化烯的速率、以及反應(yīng)的選擇性、易提取性和通過研磨和/或重結(jié)晶獲得純反式-環(huán)氧化物的能力，都確定了KHS0s/酮的混合物的作為式II化合物立體選擇性環(huán)氧化的非常有利的試劑的用途。在本發(fā)明的一個優(yōu)選方案中，步驟(i)在約7.5~約8的pH條件下進(jìn)行。當(dāng)原地生成雙環(huán)氧乙烷時，重要的是控制pH。優(yōu)選地，pH可通過使用磷酸鹽或者碳酸氫鹽緩沖液控制。在本發(fā)明的一個優(yōu)選方案中，步驟(i)在NaHC03存在條件下進(jìn)行。在本發(fā)明的一個優(yōu)選方案中，步驟(U在使用包括乙腈的溶劑條件下進(jìn)行。在本發(fā)明的一個更優(yōu)選方案中，步驟(i)在使用包括乙腈和水的溶劑條件下進(jìn)行。在本發(fā)明的一個優(yōu)選方案中，步驟(i)在使用還包括相轉(zhuǎn)移試劑的溶劑混合物條件下進(jìn)行。適當(dāng)?shù)南噢D(zhuǎn)移試劑包括例如18-冠-6和Bu4N+HS(V。在本發(fā)明的另一個優(yōu)選方案中，步驟(i)在包括Na2'EDTA水溶液的溶劑混合物中進(jìn)行。更優(yōu)選地，步驟(i)使用包括乙腈、水和Na2EDTA的溶劑進(jìn)行。在本發(fā)明的一個特別優(yōu)選方案中，其中在所述的式II化合物中，!^為叔丁氧羰基，P2為亞甲基和X為CN，步驟(i)使用過量試劑在乙腈和水的混合溶劑中以以下比率進(jìn)行；1.0當(dāng)量的化合物II,2.0當(dāng)量的Oxone,2.0當(dāng)量的1，1，l-三氟丙酮，ll.O當(dāng)量的丙酮，8.6當(dāng)量的NaHC03，0.014當(dāng)量的Na2EDTA。優(yōu)選地，反應(yīng)在050。C進(jìn)行約60~約90分鐘的反應(yīng)時間。這些被認(rèn)為是在本發(fā)明上下文中的步驟(i)的最佳條件。本發(fā)明要求保護(hù)的方法的步驟(ii)包括式III化合物的分子內(nèi)環(huán)化形成式I的5，5-雙環(huán)化合物。在一個優(yōu)選方案中，反應(yīng)經(jīng)由式IV的胺中間體進(jìn)行。在一個優(yōu)選方案中，步驟(ii)包括將式III的化合物原地轉(zhuǎn)化為式IV化合物；并將式IV的化合物轉(zhuǎn)化為式I的化合物。in在一個特別優(yōu)選方案中，X為CN,也就是說，所述方法包括如下所示的式IIIa化合物的環(huán)化。因此，在更優(yōu)選方案中，步驟(ii)包括將式IIIa的化合物原地轉(zhuǎn)化為式IVa的化合物；和將所述的式IVa的化合物轉(zhuǎn)化為式Ia的化合物(即，其中P2為CH2的式I的化合物)。在優(yōu)選方案中，步驟(ii)包括用硼氫化鈉和六水合氯化鈷(II)處理式IIIa的化合物。優(yōu)選地，該步驟所用溶劑為甲醇。優(yōu)選地，反應(yīng)在環(huán)境溫度進(jìn)行。在可供選擇的優(yōu)選方案中，步驟(ii)包括用阮內(nèi)鎳和氬處理式Ilia(其中W為叔丁氧羰基Boc)的化合物。優(yōu)選地，該步驟所用溶劑為包含氨的甲醇。優(yōu)選地，反應(yīng)在3(TC下反應(yīng)2小時。就收率、雜質(zhì)分布和按比例放大的可操作性方面而言，這些條件被認(rèn)為是在本發(fā)明上下文中的步驟(ii)的最佳條件。在可供選擇的優(yōu)選方案中，步驟(ii)包括在醚中用氫化鋁鋰處理式IIIa的化合物。在又一個的優(yōu)選方案中，步驟(n)包括用硼氫化鈉和氯化鎳處理式IIIa的化合物。在優(yōu)選方案中，所述式II的化合物是下述式IIa的化合物，R1的定義如本文以上所述，即，步驟(i)包括使其中的X為氰基的式II化合物環(huán)氧化形成式IIIa的化合物。在特別優(yōu)選方案中，所述式IIa的化合物由式lib的化合物制備:libHa其中LG為離去基團(tuán)，f的定義如上所述。優(yōu)選地，離去基團(tuán)為甲磺酸酯(Ms)、曱苯磺酸酯(Ts)、0H或者卣基。更優(yōu)選地，所述式IIa的化合物通過使式lib的化合物與氰化鈉反應(yīng)制備。優(yōu)選地，溶劑為DMSO或DMF。優(yōu)選地，對于這一具體實(shí)施方案，反應(yīng)在至少約IO(TC下進(jìn)行，更優(yōu)選在約ll(TC進(jìn)行。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述式IIa的化合物(其中R'是叔丁氧羰基Boc)通過使式lib的化合物(其中r是叔丁氧羰基Boc)與1.5當(dāng)量的氰化鈉在DMSO中在90-95。C反應(yīng)2小時制備。這些反應(yīng)條件被認(rèn)為是在本發(fā)明上下文中的最佳條件。在可供選擇的優(yōu)選方案中，所述式IIa的化合物通過使式lib的化合物與Et4N+CN—反應(yīng)制備。優(yōu)選地，對于這一實(shí)施方案，反應(yīng)在至少約50。C，更優(yōu)選在約60'C的溫度下進(jìn)行。在另一個可供選擇的優(yōu)選方案中，所述式IIa的化合物通過使式lib的化合物與KCN，任選地在18-冠-6存在的條件下反應(yīng)制備。對于使用Et,N+CN—或者KCN的實(shí)施方案，優(yōu)選溶劑是DMF、CHC13或THF。有利地，這些實(shí)施方案允許反應(yīng)在比在DMSO或者DMF中使用氰化鈉的實(shí)施方案的溫度更低的條件下進(jìn)行。在一個優(yōu)選方案中，離去基團(tuán)LG是甲磺酸酯(Ms)，且所述式lib的化合物是通過將式lie的化合物甲磺?；苽銲k其中f定義如上所述。優(yōu)選地，離去基團(tuán)LG是甲磺酸酯(Ms)且所述式lib的化合物(其中R1是叔丁氧羰基Boc)通過使用1.5當(dāng)量的甲磺酰氯(MsCl)和2.0當(dāng)量的三乙胺在二氯甲烷中制備。優(yōu)選地，反應(yīng)在環(huán)境溫度下進(jìn)行90到100分鐘。這些條件被認(rèn)為是本發(fā)明上下文中該步驟的最佳條件。在可供選擇的優(yōu)選方案中，離去基團(tuán)LG是甲苯磺酸酯(Ts)且所述式lib的化合物通過將其中f定義如上所述的式IIc的化合物進(jìn)行曱苯磺?；瘉碇苽?。在另一個優(yōu)選方案中，離去基團(tuán)LG是OH且所述式IIa的化合物通過使式IIc的化合物與三苯基膦、DEAD和丙酮氰醇反應(yīng)制備。在一個優(yōu)選方案中，所述式lie的化合物從式IId的化合物制備:其中112為烷基或芳基。對于式IId的化合物，優(yōu)選R2為烷基，更優(yōu)選為曱基。在非常優(yōu)選的方案中，所述式IIc的化合物通過使式IId的化合物與硼氫化鋰在曱醇/THF中反應(yīng)制備。優(yōu)選地，反應(yīng)在環(huán)境溫度進(jìn)行。使用這些具體的還原條件獲得良好結(jié)果。在更非常優(yōu)選的方案中，式Hc的化合物(其中R'是叔丁氧羰基Boc)通過使式IId的化合物(其中f是叔丁氧羰基Boc且R2是曱基)與1.0當(dāng)量的氯化鋰、1.Q當(dāng)量的硼氫化鈉在二甘醇二甲醚(二乙二醇二甲醚)中制備。優(yōu)選地，反應(yīng)在90-95。C反應(yīng)90到100分鐘，使用這些具體的還原條件也可獲得良好結(jié)果。在可供選擇的實(shí)施方案中，所述式IIc的化合物通過使式IId的化合物與氫化鋁鋰和THF(或者乙醚)反應(yīng)制備。在一個優(yōu)選方案中，所述式IId的化合物從式lie的化合物制備He加其中112為烷基或芳基。更優(yōu)選地，所述式lid的化合物通過使式lie的化合物與(三甲基甲硅烷)重氮甲烷在曱苯/MeOH中反應(yīng)制備。對于這一轉(zhuǎn)化的可供選擇的酯化條件對于掌握合成有機(jī)化學(xué)基礎(chǔ)知識的人而言是熟知的。更優(yōu)選地，所述式IId的化合物(其中R'是叔丁氧羰基Boc且R2是曱基)通過使式IIe的化合物(其中W是叔丁氧羰基Boc)與3.0當(dāng)量的甲基碘和1.5當(dāng)量的碳酸氫鉀反應(yīng)制備。優(yōu)選地，反應(yīng)在丙酮中在43-45'C進(jìn)行5到6小時。使用這些具體的烷基化條件獲得很好的結(jié)果。式lie的化合物(其中R'是+又丁氧羰基Boc，CAS51154-06-4)根據(jù)文獻(xiàn)記載方法以數(shù)千克比例規(guī)模放大時可以獲得手性(Sturmer，R.等人，Synthesis,1，46-48，2001)。在可供選擇的優(yōu)選方案中，所述式lid的化合物通過將式IIf的化合物或其鹽進(jìn)行N-保護(hù)來制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage29</formula>在一個優(yōu)選方案中，氮通過標(biāo)準(zhǔn)的N-叔丁氧羰基保護(hù)法被保護(hù)。這種方法對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是熟知的?；衔颕If(其中W是甲基)可以HC1鹽的形式購自市場(Bachem，商品目錄號F-1500;2，5-二氫-lH-吡咯-2-羧酸曱酯)。在一個實(shí)施方案中，R1為保護(hù)基Pg1并且是任何能在環(huán)氧化步驟時保護(hù)環(huán)氮的氮保護(hù)基。適當(dāng)?shù)牡Ｗo(hù)基對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是熟知的(例如參見，"ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis"，PeterG.M.Wuts和TheodoraW.Greene,第2版)。優(yōu)選的氮4呆護(hù)基包括例如叔丁氧羰基(Boc)、節(jié)基(CBz)和2-(聯(lián)苯基)異丙基。Pg2具有類似的定義。其中X是N(Pg"NH-Pg2，每個Pg'可相同或不同。在本發(fā)明的一個非常優(yōu)選的方案中，R1是叔丁氧羰基(Boc)。在本發(fā)明的一個特別優(yōu)選的方案中，P2是CH2，X是CN且^是叔丁氧羰基(Boc)。或者，W基團(tuán)可以是與本發(fā)明要求保護(hù)的方法中的其它步驟相適合的P/基團(tuán)，例如，為C0-烴基。優(yōu)選的P/基團(tuán)包括C0-芳基、C0-芳烷基、C0-環(huán)烷基、C0-烷基和C0-脂環(huán)基，所述芳基、烷基、芳烷基、環(huán)烷基和脂環(huán)基各自任選被一個或多個選自以下的取代基取代烷基、烷氧基、卣素、NH2、CF3、S0廣烷基、S02-芳基、0H、NH-烷基、NHC0-烷基和N(烷基)2。特別優(yōu)選的P/基團(tuán)包括0)-苯基、0)-(^2-苯基和0)-(N-吡咯烷)。另外的特別優(yōu)選的P/基團(tuán)包括C0-(3-吡啶基)、CO-(3-氟-苯基)。在另一個優(yōu)選方案中，氮保護(hù)基f為Boc或者Fmoc基團(tuán)，更優(yōu)選為Boc基團(tuán)。本發(fā)明的另一個優(yōu)選方案涉及如上定義的方法，其還包括將所述式I化合物的游離NH基保護(hù)起來的步驟。因此，本發(fā)明的更優(yōu)選方案涉及如上定義的方法，其還包括在1，4-二喁烷/水混合物中用Fmoc-Cl和碳酸鈉處理所述的式I化合物。本發(fā)明的這一實(shí)施方案對于固相合成本發(fā)明的5，5-雙環(huán)體系特別有用。本發(fā)明的第二方面涉及制備半胱氨酰蛋白酶抑制劑的方法，其包括上述方法。優(yōu)選地，半胱氨酰蛋白酶抑制劑為CAC1抑制劑，更優(yōu)選為選自以下的CAC1抑制劑組織蛋白酶K、組織蛋白酶S、組織蛋白酶F、組織蛋白酶B、組織蛋白酶L、組織蛋白酶V、組織蛋白酶C、惡性癡原蟲半胱氨酸蛋白酶和克魯茲蛋白酶。在又一個優(yōu)選方案中，所述方法還包括將所述式I化合物轉(zhuǎn)化為式VII化合物的步驟其中r和r各自獨(dú)立地為烴基。因此，本發(fā)明的一個實(shí)施方案涉及制備式VII的半胱氨酰蛋白酶抑制劑的方法，所述方法包括制備如上所述的式I的化合物，并將所述的式I化合物轉(zhuǎn)化為式VII的化合物。本發(fā)明的另一個優(yōu)選方案涉及制備式VIII的半胱氨酰蛋白酶抑制劑的方法<formula>formulaseeoriginaldocumentpage31</formula>其中，P2的定義如上所述；R'為芳基或烷基；r為烷基、芳烷基、環(huán)烷基(烷基)或環(huán)烷基；和r為芳基、雜芳基或脂環(huán)基；其中，所述芳基、烷基、芳烷基、環(huán)烷基(烷基)、環(huán)烷基、雜芳基和脂環(huán)基可任選被取代。因此，本發(fā)明的一個實(shí)施方案涉及制備式VIII的半胱氨酰蛋白酶抑制劑的方法，所述方法包括制備如上所述的式I的化合物，并將所述的式I化合物轉(zhuǎn)化為式VIII的化合物。本發(fā)明的另一個優(yōu)選方案涉及制備如上所述的式VIII的半胱氨酰蛋白酶抑制劑的方法，其中P2的定義如上所述；IT為芳基；IT為烷基、芳烷基、環(huán)烷基(烷基)；和r為芳基或雜芳基；其中，所述芳基、烷基、芳烷基、環(huán)烷基(烷基)和雜芳基可任選被取代。用于所述芳基、烷基、芳烷基、環(huán)烷基(烷基)和雜芳基的優(yōu)選取代基包括例如0H、烷基、卣基、酰基、烷基-冊2、NH2、NH(烷基)、N(烷基)2、和脂環(huán)基，其中所述脂環(huán)基本身任選被一個或多個烷基或?；〈?；例如，取代基優(yōu)選為任選被一個或多個烷基或者?；〈倪咪诨蛘哌哙せＴ谝粋€特別優(yōu)選的方案中，Rz為任選被哌嚷基或者哌啶基取代的芳基或者雜芳基，哌嗪基或者哌啶基各自又可任選被一個或多個烷基或者?；〈?。因此，在一個非常優(yōu)選的方案中，C0-IT選自以下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage32</formula>其中r為烷基或?；?。在另一個特別優(yōu)選的方案中，r為任選被一個或多個烷基取代的5元雜芳基或6元脂環(huán)基。因此，在另一個非常優(yōu)選的方案中，C0-Rz選自以下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage32</formula>其中E和烷基的定義如上所述。優(yōu)選地，對于式vni的化合物，r為苯基、3-吡啶基或3-氟-苯基。r'為CH2CH(Me)2、環(huán)己基-CH廣、對羥基節(jié)基、CH2C(Me)3、C(Me)3、環(huán)戊基或者環(huán)己基；r為苯基或者噻吩基，其各自可任選被一個或多個選自以下的取代基取代0H、卣基、烷基、烷基-NH2、N-哌嗪基和N-哌啶基，其中所述N-哌溱基和N-哌啶基各自任選被一個或多個烷基或者?；〈?。另外，r可為2-呋喃基、3-呋喃基或N-嗎啉基，其各自可任選被一個或多個烷基取代。優(yōu)選地，對于式VIII的化合物，IT為苯基；IT為CH2CH(Me)2、環(huán)己基-CH2-、對羥基節(jié)基、CH2C(Me)3或C(Me)3;r為苯基或者噻吩基，其各自可任選被一個或多個選自以下的取代基取代0H、面基、烷基、烷基-冊2、N-哌嗪基和N-哌啶基，其中所述N-哌喚基和N-哌咬基各自任選被一個或多個烷基或者?；〈?。如何對式I的化合物進(jìn)行修飾以形成式VII和VIII的化合物的更多細(xì)節(jié)可參見Quibell,M.等人的Bioorg.Med.Chem.13(2005)，609-625。在一個特別優(yōu)選的方案中，所述的式I的化合物通過以下圖解1中所述步驟被轉(zhuǎn)化為式VIII的化合物。首先，所述式I的化合物與式RzC0NHCHRwC00H的化合物偶合(例如使用酸活化技術(shù))，形成式X的化合物。然后，所述式X的化合物用能除去R]基團(tuán)的試劑(例如通過酸解)處理，隨后與式RX00H的羧酸偶合形成式XI的化合物，然后所述式XI的化合物被氧化形成式VIII的化合物。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage33</formula>用于仲醇氧化步驟的適當(dāng)試劑對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是熟知的。例如，氧^b可通過戴斯一馬丁試劑(Dess—Martinperiodinane)反應(yīng)進(jìn)行[Dess，D.B.等人，J.Org.Chem.1983，48，4155;Dess，D.B.etal,J.Am.Chem.Soc.1991，113，7277]，或通過斯文氧化(Swern偶合RZCONHCHRWCOOH-酸活化技術(shù)(1)Boc或R1=CORxR1-Boc(i)酸解除去Boc(ii)偶合RxCOOHOoxidation)進(jìn)行[Mancuso，A.J.等人，J.Org.Chem.1978，43，2480]。或者，氧化可通過使用S03/吡啶/Et3N/DMSO進(jìn)行[Parith，J.R.等人，J.Am.Chem.Soc.1967，5505;US3，444，216，Parith，J.R.等人，]、使用P205/DMSO或P205/Ac20進(jìn)行[Christensen，S.M.等人,OrganicProcessResearchandDevelopment,2004，8，777]。其它的可供選擇的氧化試劑包括活化的二甲基亞砜[Mancuso，A.J.，Swern，D.J.，Synthesis,1981，165]、氯鉻酸吡咬[Pianeatel1i，G.等人，Sythesis,1982，245]和瓊斯試劑(Jones'reagent)[Vogel，A，I.，TextbookofOrganicChemistry,第6版]。在另一個優(yōu)選的方案中，本發(fā)明涉及制備式IX的半胱氨酰蛋白酶抑制劑的方法P2,=0、CH2或NR9，其中1(9選自H、d—廣烷基、Cw-環(huán)烷基、Ar或Ar-d—「烷基5Y=CRl11-C(O)或CITRH-C(S)或ClTR"-S(0)或ClTR"-S02，其中R"和RU獨(dú)立地選自H、C卜廣烷基、Cw-環(huán)烷基、Ar和Ar-C卜廣烷基，或者Y表示其中L為1-4的數(shù)字，R"和R"獨(dú)立地選自CR"R15，其中R"和R15獨(dú)立地選自H、Cw-烷基、C3-6-環(huán)烷基、Ar、Ar-C卜7-烷基或卣素；R12和R"中的每一個或者R"或R"(但不是R"和R"二者都)可另外選自0H、0-Ch-烷基、0-Ch-環(huán)烷基、0Ar、0-Ar-d—廣烷基、SH、S-C卜7-烷基、S-C3—6-環(huán)烷基、SAr、S-Ar-Cw-烷基、NH2、NH-Cw-烷基、NH-C3—6-環(huán)烷基、NH—Ar、NH-Ar-Ch-烷基、N-(d-廣烷基)2、N-(C36-環(huán)烷基)2、其中:Mr2和N-(Ar-d—廣烷基)2;在基團(tuán)(XO。中，X'=CR"R17，其中R"和R"獨(dú)立地選自H、C卜7-烷基、C3-6-環(huán)烷基、Ar和Ar-C-廣烷基且o為0-3的數(shù)字；在基團(tuán)(W)n中，W=0、S、C(O)、S(0)或S(0)2或NR18，其中R18選自H、Ch-烷基、C3-6-環(huán)烷基、Ar和Ar-Cw-烷基且n為0或1;在基團(tuán)(V)m中，V-C(O)、C(S)、S(O)、S(0)2、S(0)肌OC(O)、NHC(O)、NHS(O)、NHS(0)2、0C(0)NH、C(0)NH或CR19R2°、ON-C(0)-OR19或C=N-C(O)-NHR19，其中r和R"獨(dú)立地選自H、Cw-烷基、C3—6-環(huán)烷基、Ar、Ar-Cw-烷基且m為0-3的數(shù)字，條件是當(dāng)m大于l時，(V)最多含有一個羰基或者磺?；?；U-穩(wěn)定的5-7元單環(huán)或穩(wěn)定的8-11元雙環(huán)，它們是飽和或不飽和的并且包含0-4個雜原子，它們選自以下其中R"為H、C卜廠烷基、C3-6-環(huán)烷基、Ar、Ar-d—廣烷基、0H、0-Cw-烷基、0-Cw-環(huán)烷基、0-Ar、0-Ar-Ch-烷基、SH、S-C卜廣烷基、S-C36-環(huán)烷基、S-Ar、S-Ar-Ch-烷基、S02H、S02-C卜廣烷基、S02-C3-6-環(huán)烷基、S02-Ar、S02-Ar-Ch-烷基、NH2、NH-C卜廣烷基、NH-Cw-環(huán)烷基、NH-Ar、N-Ar2、NH-Ar-Cw-烷基、N(C，廣烷基)2、N(C^-環(huán)烷基)2或N(Ar-C,-廣烷基)2;或者，當(dāng)是CHR"或者CR"基團(tuán)部分時，R"可以是鹵素；A選自CH2、CHR21、0、S、S02、NR"或N-氧化物(N—0)，其中R"的定義如上所述；且R"選自H、Ch-烷基、C3—6-環(huán)烷基、Ar和Ar-d-廣烷基;B、D和G獨(dú)立地選自CR21(其中R"的定義如上所述)、N或N-氧化物(N—0);E選自CH2、CHR21、0、S、S02、NR"或N-氧化物(N—0),其中1121和1122的定義如上所述；K選自CH2、CHR22，其中R"的定義如上所述;j、l、m、r、t、t2、l和l獨(dú)立地選自CR21(其中R"的定義如上所述)、或N或N-氧化物(N~>0);Ts選自CH或N;Te選自NR22、S02、OC(O)、C(0)、NR22C(0);q為0-3的數(shù)字，從而形成5-、6-或7-元環(huán)；r=r2'c(o)、r2'oc(o)、r2'nqc(o)、r2'so2,其中R2'選自c卜-烷基、Cw-環(huán)烷基、Ar和Ar-Cw-烷基，且Q為H或d-廣烷基。如何對式I的化合物進(jìn)行修飾以形成式IX的化合物的更多細(xì)節(jié)可參見W004/007501(AmuraTherapeuticsLimited)。本發(fā)明的另一方面涉及制備如上定義的式VII、VIII或者IX的化合物的方法，所述方法包括使用如上定義的用于所述第一方面的方法。本發(fā)明通過以下的非限制性實(shí)施例進(jìn)一步進(jìn)行描述。實(shí)施例本發(fā)明的非常優(yōu)選的實(shí)施方式通過以下圖解2闡述。(僅通過反式-(6a))[ot],EA,HRMS圖解2(a)TMSCHN2，PhMe，MeOH.(b)LiB出，MeOH，THF.(c)MsCl，Et3N，DCM.(d)NaCN，DMSO，110。C.(e)0X0NE,Na跳，l，l，l-三氟丙酮，CH3CN，H20，Na2.EDTA.(f)NaBH4，六水合氯化鈷(II)，MeOH,(g)Fmoc-Cl，Na2C03，1,4-二喁烷，H20.(h)PPh3，THF，DEAD，(CH》2C(OH)CN。(S)-2，5-二氫吡咯-1，2-二羧酸l-叔丁基酯2-甲基酯(2)的制備在氬氣氛下，在用冰-水冷卻的同時，將(三曱硅烷基)重氮曱烷(2.0M在己烷中的溶液，200mL，400mmol)在15分鐘內(nèi)滴加到攪拌的曱苯(600mL)、曱醇(IOOinL)和(S)-Boc-3，4-脫氫脯氨酸(l)(ex.Bachem，50g，234.4mmol)的混合物中。將黃色溶液攪拌30分鐘，然后添加醋酸15mL，得到無色溶液。真空除去溶劑，得到酯(2)(56.58g，>100%收率)，為淺黃色油狀物，其無需進(jìn)一步純化即可使用。TLC(單一UV斑點(diǎn)，Rf=0.10，庚烷乙酸乙酯1:1);分析HPLC單一主峰Rt=14.26分鐘，HPLC-MS128.2[M+2H-Boc]+,172.1[M+2H-Bu]+，477.3[2M+Na〗+。(S)-2-羥基甲基-2，5-二氫吡咯-l-羧酸叔丁基酯(3)的制備將硼氫化鋰(IO.21g，469.0mmol)混懸在THF(IOOOmL)中，然后添加甲醇(19.3mL)，然后滴加酯(2)(53.3g，234.5mmol)在無水THF(1428mL)中的溶液。滴加后，在環(huán)境溫度攪拌混合物1小時，然后向混合物中謹(jǐn)慎地添加水(608mL)，然后用二氯甲烷提取(3x2026mL)。合并的有機(jī)層經(jīng)干燥(MgS04)。減壓蒸發(fā)濾液，得到醇(3)(46.4g，99%),為淺黃色油狀物，其無需進(jìn)一步純化即可使用。TLC(Rf=0.20，庚烷乙酸乙酯1:1)，分析HPLC單一主峰，1=11.32分鐘，HPLC-MS100.2[M+2H-Boc]+，144.1[M+2H-Bu]+,222.0[M+Na]+，421.3[2M+Na]+。(S)-2-甲磺酰氧基曱基-2，5-二氫吡咯-1-羧酸叔丁基酯(4)的制備在(TC，將三乙胺(52.3mL，372.4mmol)滴加到攪拌的醇(3)(46.4g，232.8mmol)和曱磺酰氯(27.0inL,349.2mmol)在二氯甲烷(200mL)中的溶液中。將混合物在環(huán)境溫度攪拌30分鐘，然后用水(400mL)和鹽水(400mL)洗涂。有機(jī)層經(jīng)干燥(Na2S0J，真空濃縮，得到淺黃色油狀物(65.2g)，其通過硅膠快速色語法純化，用乙酸乙酯庚烷混合物洗脫，得到甲磺酸酯(4)(57.9g，90%)，為淺黃色油狀物。TLC(Rf=0.l5，庚烷乙酸乙酯1:1)，分析HPLC單一主峰，Rt=10.21分鐘，HPLC-MS178.1[M+2H-Boc〗+，222.1[M+2H-Bu]+，300.1[M+Na]+，577.2[2M+Na]+。(S)-2-氰基甲基-2，5-二氫吡咯-1-羧酸叔丁基酯(5)的制備在環(huán)境溫度，將氰化鈉(30.7g，626.5mmol)添加到攪拌的甲磺酸酯(4)(57.9g，208.8畫l)在DMSO(400mL)中的溶液中,混合物在ll(TC加熱1小時，然后使其冷卻到環(huán)境溫度，然后將其傾入到二氯曱烷(400mL)和水(400mL)中，分離有機(jī)層，然后水相用二氯甲烷提取(3x100mL)。合并的二氟甲烷層用鹽水(200mL)洗滌，干燥(MgSOj，真空蒸發(fā)得到殘余物，該殘余物通過硅膠快速色謙法純化，用乙酸乙酯庚烷混合物洗脫，得到腈(5)，為油狀物，其在冷凍下固化得到白色的臘狀固體(37.6g，87%)。TLC(Rf=0.40,庚烷乙酸乙酯1:1).,分析HPLC單一主峰，Rt=14.77分鐘，HPLC-MS153.2[M+2H-Bur，209.2[M+l〗+，231.1[M+Na〗+，439.3[2M+Na]+.5H(CDC13，^E298K);旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物1.39-1.55(9H，兩個s,C卿3)，2.70-2.78和3.00-3.10(2H，m，CHC^CN)，4.08—4.20(2H，m，qpC02),4.62-4.78(1H,m，C旦跳)，5.70—5.80和5.93-6.07(2H:CH=CH).5C(CDC13，在298K);22.51，23.58(p2CN),29.66(C,3):53.83，54.00《H2NC02)，60.43，60.53(pNC02)，80.35，80.74(g(CH3)3)，116.86，117.17(SN)，126.86，126.92(口-CH)，128.77，128.85(CH-P)，153.'44，153.98(^=0);[a]22D-290.7°(c0.269，CHCU;元素分析計(jì)算值CulN^:C，63,44;H，7.74;N，13.45;實(shí)測值C，63.23;H，7.63;N,13.31;精確質(zhì)量計(jì)算值CH16N202(MNa+):231.1104，實(shí)測值231.1096(-3.22ppm)。(S)-2-氰基曱基-2，5-二氫吡咯-l-羧酸叔丁基酯(5)的可供選擇的制備方法在(TC，向醇(3)(0.204g，1.024mmol)在THF(10mL)中的溶液中添加三苯基膦(O.537g，2.048mmol)，反應(yīng)混合物在0°C(冰-水浴)攪拌10分鐘，然后滴加DEAD(O.357g，2.(M8mmol)，混合物攪拌20分鐘。滴加丙酮-氰醇(0.174g，2.048mmol)，添加后，在攪拌下在26小時使混合物回溫到室溫，減壓除去溶劑得到粗產(chǎn)物，粗產(chǎn)物使用JonesISOLUTEFlash-XLSiII和I(20g)柱色"i昝法進(jìn)行兩次純化，使用正庚烷乙酸乙酯=8:1~6:1，得到產(chǎn)物，為灰白色油狀物(0.134g，63%)。TLC(Rf=0.4，正庚烷乙酸乙酯=1:1)，HPLC-MS(UV峰的Rt=4.080，153.2[M+卜56]+,209.2[M+l〗+，231.1[M+Na]+，5H(CDC13，在298K);1.39-1.55(9H,C卿)3，bd)，2.70-2.78，3.00-3.10(2H，NCC旦2，m)，4.08-4.20(2H，CHC]p，m),4.62-4.78(1HCHC]iCH2N，m)，5.70-5.80，5.93-6.07(2H,CH-CH，m).5C(CDCl3，在298K);22.51，23.58(d，NC^H2)，29.66(u，EH3)，53.83，54.OO(d，C,N)，60.43，60.53(u，NpCH2CN)，80.35，80.74(q，g(CH3)3)，116.86，117.17(q，gN)，126.86，126.92(u，p-CH)，128.77，128.85(u，CH,)，153.44，153.98(q，，。(2R，3R，4S)-2-氰基曱基-6-氧雜-3-氮雜雙環(huán)[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁基酯(6a)的制備間<^_^兩在0。C，通過預(yù)冷注射器向在乙腈a50mL)和Na2'EDTA水溶液(150mL，0.4mmol溶液)的腈溶液(5)(6g，28.85mmol)中添加1，1，l-三氟丙酮(31.0mL，346mmo1)，在1小時內(nèi)，向該均勻溶液中逐次添加》灰酸氫鈉(20.4g，248mmol)和OXONE(55.0g，89.4mmol)的混合物，然后混合物用水(750mL)稀釋，將產(chǎn)物提取到二氯甲烷(4x150mL)中。合并的有才幾層用5%的亞石充酸氫鈉水溶液(300mL)、水(300mL)和鹽水(300mL)洗滌，然后用Na2S04干燥，真空蒸發(fā)，得到殘余物，該殘余物從乙醚庚烷(l:6)重結(jié)晶，得到(3R，4S)-2R-氰基甲基-6-氧雜-3-氮雜雙環(huán)[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁基酯(6a)，為白色固體(4.3g，67%)。TLC(Rf=0.20，正庚烷乙酸乙S旨1:1)，HPLC-MS169.1[M+2H-Bu]+，247.1[M+Na]+，471.3[2M+Na]+.5H(CDC1"在298K);1.43—1.47(9H，兩個s，(qy3C)，2.60—3.02(2H，CHC&CN，m)，3.46-3.65(2H，C!OC旦，m)，3.75-3.92(2H，C旦2跳，m)，4.17—4.24(1H，q|NC02，m).5C(CDCh,在298K);19.07，19.94(C,2CN)，28.31，28.37(C,3)，46.82，47.56,2跳)，54.14，54.38(pNC02)，54.70，55.54(^H0CH)，57.32，57.78(CHOp)，80.91，81.18("CH3)3)，116.46，116.95,，153.74，154.27,;[oc〗"d-159.2。(c0.628，CHC13)。使用快速色譜法然后從母液中重結(jié)晶，獲得另一批產(chǎn)物，為(3R，4S)-2R-氰基曱基-6-氧雜-3-氮雜雙環(huán)[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁基酯(6a):(3S，4R)-2R-氰基曱基-6-氧雜-3-氮雜雙環(huán)[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁基酯(6b)的6:1混合物(444mg，7%)。(3aS，6aR)-3S-羥基六氫吡咯并[3，2-b]吡咯-1-羧酸叔丁基酯(7)的制備在0。C，在30分鐘內(nèi)，將硼氫化鈉(0.42g，11.20mmol)逐次添加到六水合氯化鈷(II)(0.53g，2.23mmol)和環(huán)氧化物(6a)(0.5g，2.23mmol)在甲醇(20mL)中的溶液中，將混合物在環(huán)境溫度攪拌1小時，然后在10分鐘內(nèi)滴加檸檬酸(25mL，10%水溶液)(pH4)。然后，在用冰-水冷卻的同時添加氫氧化鈉(5M)，直到pH^13，然后將混合物用二氯甲烷提取(10x20mL)，干燥(Na2S04)，真空蒸發(fā)，得到(3aS，6aR)-3S-羥基六氫吡咯并[3，2-b]吡咯-l-羧酸叔丁基酯(7)(0.41g，80%),為無色油狀物，其無需進(jìn)一步純化即可使用。HPLC-MSUV峰173.1[M+2H-Bu]+，229.1[M+ir，251.1[M+Na]+.5H(400MHz，CDCU，旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的約1:1的混合物，l.55(9H，s，C(CH3)3)，1.92和2.G3(總共2H，每個為br.s，NHCH2CH2),2.71和2.79(總共2H，m，NHCH2CH2)，3.46(1H，dd，J-12.15和3.80Hz，Boc跳)，3.74-3.62(1H，m,BocNCH2)，3.60—3,69(1H，m,CHNHCH》，4,10(1H，s，CHOH)，4.33和4.40(總共1H，每個為s,BocNCHCH2)。(3aS，6aR)-3S-羥基六氫吡咯并[3，2-b]吡咯一1，4一二羧酸1一叔丁基酯4一(9H-芴-9-基甲基)酯(8)的制備Boe|在0℃，在40分鐘內(nèi)，在攪拌的同時，將氯甲酸9一芴基甲基酯(0．130g，0．504mmo1)在1，4一二嗯烷(3mL)中的溶液滴加到(3aS，6aR)-3S-羥基六氫吡咯并[3，2-b]吡咯-1-羧酸叔丁基酯(7)(0．1g，0．438mmo1)和碳酸鈉(O．104g，0．986mmo1)在水(2mL)和1，4一二嗯烷(3mL)中的溶液中。添加后，將混合物在環(huán)境溫度攪拌1小時，然后添加水(5OmL)，混合物用二氯甲烷提取(4X50mL)，干燥(NaSO。)，真空蒸發(fā)得到殘余物，該殘余物通過硅膠快速色譜法純化，用乙酸乙酯庚烷的混合物洗脫，得到(3aS，6aR)-3S．羥基六氫吡咯并[3，2-b]吡咯一1，4一二羧酸1一叔丁基酯4一(9H一芴一9一基甲基)酯(8)(0．152g，77％)，為灰白色固體。HPLC峰的R。=18．582分鐘，HPLC-MS351．2[M+2H-Boc]’，395．2[M+2H-Bu]’，451．3[M+H]’，473．2[M+Na]’，923．5[2M+Na]’．。H(COCl，，在298K)；旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物，1．33—1．52(9H，兩個S，C(OH，)，)，1．58-1．75和1．90-2．21(4H，m，CHCH)，2．85—3．66(5H，m，NCHCHOH和NCHCH)，4．02-4．83(3H，m，F(xiàn)mocCH和CH)，7．25-7．83(8H，F(xiàn)moc芳香氫)．6C(CDC1，，在298K)N，5.84;精確質(zhì)量計(jì)算值C26H3。N205(MNa+):473.2052，實(shí)測值473.2053(+0.06ppm)。環(huán)化路線的改變已經(jīng)研究了雙環(huán)(7)的選擇性反應(yīng)順序并且在圖解3中進(jìn)行詳述。圖解3(a)0X0NE，Na跳，l，l，l-三氟丙酮,CH3CN，H20，Na2.EDTA.(b)NaBH4，CoCl26H20,MeOH.(c)CbzCl，Na2C03，THF，H20.(d)LiAlH4，Et20.(e)OXONE,NaHC03，1，1，l-三氟-2-丁酮，CH3CN，H20，Na2.EDTA.(f)NaH，THF.(g)Pd-C，H2，乙醇。通過各種路線(參見圖解3)可從腈(5)制備有用的雙環(huán)衍生物如Boc-Cbz醇(8b)。然而，各所示路線的比較顯示，優(yōu)選選擇圖解2中所示的路線，該圖解2采用(6a)結(jié)晶作為主要優(yōu)點(diǎn)。因此，使用環(huán)氧化、然后用鈷催化作用進(jìn)行腈還原的反應(yīng)順序(a—b—c)，可以68%的總收率合成(8b)，其可被定量氫化而得到雙環(huán)(7)。相比之下，包括環(huán)氧化、然后用氫化鋁鋰進(jìn)行腈還原(a—d—c)或者腈還原、胺保護(hù)、環(huán)氧化、氫化/分子內(nèi)環(huán)化(d—c—e—f)的兩種可選擇的反應(yīng)順序分別得到39%和22%的總收率的(8b)。盡管后一種路線的條件不是優(yōu)化的(例如通過0X0NE⑧、NaHC03、1，1，1-三氟-2-丁酮、CH3CN、H20、Na2.EDTA對環(huán)氧化的立體化學(xué)控制的改進(jìn)和可能的重結(jié)晶(lla))，與圖解2相比的額外步驟看似未提供優(yōu)勢。本發(fā)明更優(yōu)選的方案在以下的圖解4中闡述，其詳述了圖解2中的反應(yīng)的最佳條件。OH(7)(僅通過反式-(6a))圖解4(a)3.0eq.Mel，1.5eq.K跳，8vo1丙酮，43-45。C，5-6h.;(b)l.Oeq.LiCl，1.0eq.NaBH4，2vol二甘醇二甲醚，90-95°C，90-100分鐘；(c)1.5eq.MsCl，2.0eq.Et3N，4volDCM，環(huán)境溫度，90-100分鐘;(d)1.5eq.NaCN，5volDMSO，90-95。C，2h.;(e)2.0eq.OXONE,8.6eq.NaHC03，2.0eq.l，l，l-三氟丙酮，11.0eq.丙酮，20volCH3CN，H20，0.014eq.Na2.EDTA，0-5。C;(f)阮內(nèi)鎳，MeOH，在MeOH中的10°/。氨，H2,30°C。(S)-2，5-二氫吡咯-1，2-二羧酸1-叔丁基酯2-曱基酯(2)的可供選擇的大規(guī)模制備Mel/KHC03、N^^COOH丙酮Boc材料重量(g)摩爾重量摩爾數(shù)摩爾當(dāng)量酸(l)25.0213.230.1171碘甲烷50.0141.940.3523丙酮200ml//8volK線17.6100.120.1761.5MDC100ml//4vol.籌備裝有高架攪拌器、熱套和冷卻水冷凝器的250毫升的4頸RBF。.加入酸(l)(25.0g)和丙酮(175ml)并攪拌直到溶解。.在30-35。C加入KHC03(17.6g)并用25ral的丙酮沖洗漏斗。.在15-20分鐘內(nèi)，通過滴液漏斗緩慢加入碘曱烷(50.0g)并維持溫度在30-35。C。.設(shè)定反應(yīng)保持回流(43-45。C)并通過TLC體系(甲苯曱醇為9:1)監(jiān)控反應(yīng)直到完成(約5-6小時)。.反應(yīng)完成后，將反應(yīng)混合物冷卻到15-20'C,并通過硅藻土墊過濾。.在40-45。C真空蒸餾，直到反應(yīng)混合物變成濃稠混懸液。.向混懸液中加入MDC(75ml),確保產(chǎn)物保留在溶液中。通過硅藻土墊過濾漿液并用25毫升的MDC洗滌濾餅。.在45-5(TC真空濃縮濾液，得到產(chǎn)物，為淺黃色液體。COOMe產(chǎn)物重量26.4g(99.2%)通過GC測定的純度為99.8%[通過'H，"CNMR鑒定產(chǎn)物](S)-2-羥基曱基-2，5-二氫吡咯-1-羧酸叔丁基酯(3)的可供選擇的大規(guī)模制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage47</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage47</column></row><table>-籌備裝有高架攪拌器和冷凝器的500毫升的4頸RBF。.加入酯(2)(25.0g)和二甘醇二甲醚(25ml),并在30-35。C攪拌直到溶解。'一次性加入LiCl(4.7g)和NaBH4(4.2g)并用25毫升的溫?zé)岫蚀级趺褯_洗漏斗。.在30-35。C攪拌反應(yīng)混合物15分鐘，然后將溫度增加到90-95'C。保持該溫度直到反應(yīng)完成(90-100分鐘)。通過TLC(乙酸乙酯己烷；4:6)監(jiān)控反應(yīng)。-反應(yīng)完成后，將反應(yīng)物質(zhì)冷卻到室溫。在30分鐘內(nèi)向上述物質(zhì)中慢慢添加500毫升的DI水(放熱并冒泡)。.使用INHC1調(diào)節(jié)反應(yīng)混合物的pH至4.向反應(yīng)混合物中添加甲苯(250ml)并在30-35。C攪拌10-15分鐘并分離各層。.重復(fù)甲苯提取兩次(2x250ml)。.合并有機(jī)層并用水(lx250ml)洗滌。注意在各層沉降之前攪拌15分鐘。.有機(jī)層用MgS04千燥并在50-55。C真空濃縮，得到產(chǎn)物，為油狀物。液體重量22.4g(>100%，含一些溶劑)通過GC測定的純度為98%[通過'H，13CNMR確認(rèn)產(chǎn)物結(jié)構(gòu)](S)-2-曱磺酰氧基甲基-2，5-二氫吡咯-l-羧酸叔丁基酯(4)的可供選擇的大規(guī)模制備BocBoc材料重量(g)分子量摩爾數(shù)摩爾當(dāng)量醇(3)20.0199.250.1001.0CH肌C117.3114.550.15061.5TEA20.2101.100.2002.0MDC80ml一—-4volDI水160ml—一2volw.r.tmdc20%NaCl溶液160ml——2volw.r.tmdcDI水80ml——.籌備裝有高架攪拌器和水浴的500毫升的4頸RBF。.加入醇(3)(20.0g)和MDC(80ral)并攪拌直到溶解。.在10-15分鐘內(nèi)向反應(yīng)混合物慢慢地加入曱磺酰氯(17.3g)并保持反應(yīng)溫度在30-35°C。.在3(TC攪拌該物質(zhì)10分鐘并冷卻到0-2°C。!.慢慢添加TEA(20.2g)(放熱反應(yīng)急劇)，同時保持溫度在0-8°C。.使反應(yīng)回溫到室溫并攪拌直到反應(yīng)完成(90-100分鐘)，通過TLC(曱苯甲醇；9:l)監(jiān)控。.向反應(yīng)混合物中加入DI水(160ml)并在28-30X:攪拌10-15分鐘。-分離各層并用MDC提取水層(3x50ml)，在各次提取之間攪拌15分鐘。.用0.INHC1(1x50ml)、所述NaHC(V溶液(50ml)和鹽水(160ml)洗滌有機(jī)層。.用MgS04干燥有機(jī)層，并真空(40-50'C)蒸發(fā)溶劑得到產(chǎn)物，為粘稠油狀物。產(chǎn)物重量22.3g(80%)通過'HNMR確認(rèn)鑒別產(chǎn)物(S)-2-氰基甲基-2，5-二氫吡咯-1-羧酸叔丁基酯(5)的可供選擇的大規(guī)模制備^^^OMsNaCN^^y^^CNNDMSONBocBoc材料重量(g)分子量摩爾數(shù)摩爾當(dāng)量曱磺酸酯(4)20.0277.340.07221NaCN5.349.00.1081.5DMSO100ml——5體積甲苯600mlDI水1000ml+100—一10volw.r.tdmso.籌備裝有高架攪拌器和水冷凝器的500毫升的4頸RBF。.加入20.0g的甲磺酸酯(4)和80ml的DMSO并在3(TC攪拌5分鐘使得溶解。.在3(TC—次性加入5.3g的NaCN并用DMSO(20ml)沖洗漏斗(將反應(yīng)物排到循環(huán)漂白洗滌器)。.加熱反應(yīng)混合物到90-95。C并保持?jǐn)嚢柚钡椒磻?yīng)完成(~2小時)。通過TLC(甲苯曱醇；9:1)監(jiān)控反應(yīng)。.使反應(yīng)混合物冷卻到室溫并慢慢加入1000毫升的DI水以形成均勻溶液。.加入曱苯(200ml)并攪拌10分鐘。-分離各層。.重復(fù)用曱苯提取(2x200ml)。.用水洗滌合并的甲苯層(2x100ml)。.處理合并的水溶液以在處置前除去痕量的氰化物。-有機(jī)層用MgSO,千燥。.真空(50-55'C)濃縮有機(jī)層得到產(chǎn)物，為濃稠的暗褐色液體。液體重量9.9g(66%)通過GC測定的純度為95%[通過'H，13CNMR確認(rèn)產(chǎn)物]從合并的水層提取另外的產(chǎn)物。(2R，3R，4S)-2-氰基曱基-6-氧雜-3-氮雜雙環(huán)[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁基酯(6a)的可供選擇的大規(guī)模制備<table>tableseeoriginaldocumentpage50</column></row><table>.籌備裝有高架攪拌器的500毫升的4頸RBF。.加入氰化物(5)(10.0g)、ACN(200ml)并在室溫?cái)嚢杌旌衔?分鐘。.加入EDTA鈉溶液(O.25克，在25Qml水中)。-將反應(yīng)混合物冷卻到0-5'C。.將l，l，l-三氟丙酮(10.7g)直接加入到35ml的預(yù)冷的丙酮(0-5。C)中，并且立即一次性被添加到反應(yīng)物質(zhì)中(1，1，1-TFA為高揮發(fā)性試劑)。.在0-5。C，在60-90分鐘內(nèi)，緩慢添加Oxone(59.1g)和碳酸氫鈉(34.7g)的緊密混合物到反應(yīng)混合物中。-添加完成后，通過TLC(己烷EtOAc為6:4)監(jiān)控。.添加水(lL)到反應(yīng)混合物中并攪拌，得到透明溶液。.加入MDC(200ml)并在20-25。C攪拌10-15分鐘。.分離各層J吏用MDC重復(fù)提取(2x200ml)。.合并有機(jī)層，并用5%亞硫酸鈉水溶液(400ml)洗滌，攪拌溶液10分鐘。.分離各層。.加入水(400ml)到有機(jī)層中并攪拌10-15分鐘。.分離各層。.在分離各層之前，用20%NaCl溶液(400ml)洗滌有機(jī)層，并攪拌10-15分鐘。、.用MgS04干燥有機(jī)層。.真空濃縮(45-50。C)得到粗環(huán)氧化物(10.2克)，為淺黃色液體。液體重量10.2克(95%)通過GC測定的純度為73%(2R，3R，4S)-2-氰基曱基-6-氧雜-3-氮雜雙環(huán)[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁基酯(6a)的純化將粗的環(huán)氧化物(IO.0g)溶于MDC(25ml)中，并加入中性氧化鋁(50g)以吸附產(chǎn)物。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上干燥溶劑，得到細(xì)粉末。第一次提取(環(huán)己烷)添加環(huán)己烷(50ml)到氧化鋁/產(chǎn)物混合物中，并在30-35。C攪拌15分鐘并過濾。充分用環(huán)己烷洗滌(3x50ml)。合并提取液。8:2提取向氧化鋁餅添加50ml的環(huán)己烷EtOAc/(8:2)的混合物，攪拌15分鐘并過濾。重復(fù)這一提取過程5次(6x50ml)并合并提取液。6:4提取用50毫升的環(huán)己烷EtOAc(6:4)的混合物提取氧化鋁六次(6x50ml)。分別濃縮級分。液體重量7.4克(F-1=1.4克；F-2-5.2克；F-3=0.8克)通過GC測定的純度為NLT80%(2R，3R，4S)-2-氰基甲基-6-氧雜-3-氮雜雙環(huán)[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁基酯(6a)的重結(jié)晶(純化).向裝有高架攪拌器的燒瓶中添加6.O克的經(jīng)純化的環(huán)氧化物。.加入60ml的9:1曱苯/環(huán)己烷。-在3(TC攪拌30分鐘。.開始形成白色結(jié)晶。.冷卻到IO'C并攪拌1小時。-過濾產(chǎn)物并在35。C真空千燥過夜。固體重量4.5克(44%理論收率)通過GC測定的純度為NLT98%[通過％13CNMR確認(rèn)結(jié)構(gòu)](3aS，6aR)-3S-羥基六氫吡咯并[3，2-b]吡咯-l-羧酸叔丁基酯(7)的可供選擇的大規(guī)模制備編號名稱重量(g)分子量摩爾數(shù)摩爾當(dāng)量1反式-環(huán)氧化物(6a)3.0克224.260.01331.02MeOH48ml16.0pts3阮內(nèi)鎳5.0克410%氨的MeOH溶液50ml.在30°C，向1升高壓滅菌器(攪拌型)中添加3.0克的反式-環(huán)氧化物(6a)和5.O克阮內(nèi)鎳和48ml的曱醇，然后添加10%氨的甲醇溶液(50ml)。-保持4.0-4.5kg氬壓2.0小時。.通過TLC(5y。甲苯，在曱醇中)監(jiān)控反應(yīng)。.反應(yīng)完成后，通過折疊式過濾器(hyflow)過濾物質(zhì)，蒸出濾液得到最終的二胺，為粘稠液體。收率3.0克(98.2%)[通過％13CNMR鑒別產(chǎn)物]綜上，在圖解2中描述的總反應(yīng)順序(將羧酸酯轉(zhuǎn)化為雙環(huán)醇，通過還原、曱磺?；?、氰化物置換、環(huán)氧化和還原環(huán)化步驟(圖解2))，明顯優(yōu)于使用圖解3中所述的反應(yīng)路線(路線(d->c—e~>f)或(a4d~>c))。特別地，高收率反應(yīng)的較低數(shù)目，無需使用色語純化技術(shù)(通常)和極高非對映異構(gòu)選擇性的環(huán)氧化物重結(jié)晶都證明了圖解2是優(yōu)異的方法。圖解2中所述的轉(zhuǎn)化的最佳條件在圖解4中詳述。本發(fā)明所述各方面的各種修改和變更對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的，并不脫離本發(fā)明的范圍和精神。盡管已經(jīng)參考具體優(yōu)選方案描述了本發(fā)明，可以理解的是本發(fā)明不受這些具體實(shí)施方案的限制。實(shí)際上，對于所述的實(shí)施本發(fā)明的方式的各種變更對于本發(fā)明技術(shù)人員而言是顯而易見的，并且包含在權(quán)利要求的保護(hù)范圍內(nèi)。權(quán)利要求1.制備式I的化合物或其可藥用鹽的方法，id="icf0001"file="S2006800357262C00011.gif"wi="25"he="33"top="54"left="40"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="no"/>其中R1為Pg1或P1′；P1′為CO-烴基；P2為CH2、O或N-Pg2；且Pg1和Pg2各自獨(dú)立地為N-保護(hù)基；所述方法包括以下步驟(i)使式II的化合物與雙環(huán)氧乙烷反應(yīng)形成式III的環(huán)氧化物；id="icf0002"file="S2006800357262C00012.gif"wi="82"he="32"top="150"left="40"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="no"/>反式大量順式少量其中X選自CN、CH2N3、CH2NH-Pg2、ONH-Pg2、NHNH-Pg2、N(Pg2)NH-Pg2；(ii)將式III的化合物轉(zhuǎn)化為式I的化合物，id="icf0003"file="S2006800357262C00013.gif"wi="88"he="35"top="210"left="44"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="no"/>2.權(quán)利要求1所述的方法，其中雙環(huán)氧乙烷通過KHS0s與酮的反應(yīng)原地生成。3.權(quán)利要求1或2所述的方法，其中酮由下式V表示:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>其中r和Rb各自獨(dú)立地為烷基、芳基、卣代烷基或閨代芳基。4.權(quán)利要求3所述的方法，其中IT和Rb各自獨(dú)立地為烷基或鹵代烷基。5.權(quán)利要求3或4所述的方法，其中IT和Rb各自獨(dú)立地為曱基或三氟曱基。6，權(quán)利要求2-5中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述酮選自丙酮和1，1，1-三氟烷基酮。7.權(quán)利要求6所述的方法，其中三氟烷基酮是1，1，1-三氟丙酮或1，1，1-三氟-2-丁酮。8.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中步驟(i)在pH約7.5~約8的條件下進(jìn)行。9.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中步驟(i)在NaHC03存在的條件下進(jìn)行。10.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中步驟(i)在包括乙腈的溶劑中進(jìn)行。11.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中步驟(i)在還包括相轉(zhuǎn)移試劑的溶劑混合物中進(jìn)行。12.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中步驟(i)在包括Na2.EDTA水溶液的溶劑混合物中進(jìn)行。13.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中步驟(ii)包括將式III的化合物原地轉(zhuǎn)化為式IV的化合物；并將所述式IV的化合物轉(zhuǎn)化為式I的化合物，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>14.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中X為CN,15.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中P2為CH216.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中步驟(ii)包括將式Ilia的化合物轉(zhuǎn)化為式IVa的化合物；并將所述式IVa的化合物轉(zhuǎn)化為式la的化合物，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>17.權(quán)利要求16所述的方法，其中步驟(ii)包括用硼氫化鈉和六^C合氯化鈷(II)處理式nia的化合物。18.權(quán)利要求n所述的方法，其中步驟(n)所用的溶劑是甲醇,19.權(quán)利要求16所述的方法，其中R'是叔丁氧羰基，且步驟(H)包括用阮內(nèi)鎳和氫處理式IIIa的化合物。20.權(quán)利要求19所述的方法，其中步驟(ii)所用的溶劑是包含氨的曱醇。21.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述式II的化合物由下式IIa表示，其中R'的定義同權(quán)利要求1。22.權(quán)利要求21所述的方法，其中所述式IIa的化合物由式lib的化合物制備，其中，LG為離去基團(tuán)，R'的定義同權(quán)利要求l。23.權(quán)利要求22所述的方法，其中離去基團(tuán)LG是Ms、Ts、鹵基或者0H。24.權(quán)利要求22或23所述的方法，其中所述式IIa的化合物通過使式lib的化合物與氰化鈉反應(yīng)制備。25.權(quán)利要求22所述的方法，其中離去基團(tuán)LG是Ms，且所述式IIb的化合物通過將式IIc化合物進(jìn)行甲磺酰化制備，I.<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>其中R'的定義同權(quán)利要求1。26.權(quán)利要求22所述的方法，其中離去基團(tuán)LG是Ts，且所述式lib的化合物通過將式IIc化合物進(jìn)行甲苯磺?；苽?，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>其中R'的定義同權(quán)利要求1。27.權(quán)利要求22所述的方法，其中離去基團(tuán)LG是OH。28.權(quán)利要求27所述的方法，其中所述式IIa的化合物通過使式IIc的化合物與三苯基膦、DEAD和丙酮氰醇反應(yīng)制備，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>其中R'的定義同權(quán)利要求1。29.權(quán)利要求25-28中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述式IIc的化合物由式IId的化合物制備，其中R2為烷基或芳基，且R'的定義同權(quán)利要求1。30.權(quán)利要求29所述的方法，其中所述式IIc的化合物通過使式IId的化合物與LiB比在曱醇/THF中反應(yīng)制備。31.權(quán)利要求29所述的方法，其中！^是叔丁氧羰基(Boc)，且所述式IIc的化合物通過使其中的112是甲基的式IId的化合物與氯化鋰和硼氫化鈉反應(yīng)制備。32.權(quán)利要求31所述的方法，其使用二甘醇二甲醚作為溶劑進(jìn)行。33.權(quán)利要求29所述的方法，其中所述式IId的化合物由式lie的化合物制備，lielid其中R2為烷基或芳基，且Ri的定義同權(quán)利要求1。34.權(quán)利要求33所述的方法，其中所述式IId的化合物通過使式lie的化合物與(三曱硅烷基)重氮甲烷在甲苯/MeOH中反應(yīng)制備。35.權(quán)利要求33所述的方法，其中f是叔丁氧羰基(Boc)，且其中的112是甲基的所述式IId的化合物通過使式IIe的化合物與甲基碘和碳酸氫鉀反應(yīng)制備。36.權(quán)利要求29所述的方法，其中所述式lid的化合物由式IIf的化合物或其鹽制備，其中R2為烷基或芳基，且R'的定義同權(quán)利要求1。37.權(quán)利要求29-35中任一項(xiàng)所述的方法，其中R2為甲基。38.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中R'為Boc基團(tuán)。39.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其還包括將所述式I化合物的游離NH基保護(hù)起來的步驟。40.權(quán)利要求39所述的方法，其包括用Fmoc-Cl和碳酸鈉在1，4-二喁烷/水中處理所述式I化合物的步驟。41.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述式III或IIIa的化合物在步驟(ii)之前通過結(jié)晶被純化。42.權(quán)利要求41所述的方法，其中所述式IIIa的化合物從乙醚庚烷的混合物中結(jié)晶。43.權(quán)利要求l-37、或41或42中任一項(xiàng)所述的方法，其中R'為P/基團(tuán)，P/選自C0-芳基、C0-芳烷基、C0-環(huán)烷基、C0-烷基和C0-脂環(huán)基，其中所述芳基、烷基、芳烷基、環(huán)烷基和脂環(huán)基各自任選地被一個或多個選自以下的取代基取代烷基、烷氧基、鹵素、NH2、CF3、SO廣烷基、S02-芳基、0H、NH-烷基、NHC0-烷基和N(烷基)2。44.權(quán)利要求43所述的方法，其中所述P/基團(tuán)選自C0-苯基、C0-CH廣苯基和CO-(N-吡咯烷)、CO-(3-吡啶基)和CO-(3-氟苯基)。45.制備半胱氨酰蛋白酶抑制劑的方法，其包括權(quán)利要求1-44中任一項(xiàng)所述的方法。46.權(quán)利要求45所述的方法，其中半胱氨酰蛋白酶抑制劑為CAC1抑制劑。47.權(quán)利要求46所述的方法，其中CAC1抑制劑選自以下的抑制劑組織蛋白酶K、組織蛋白酶S、組織蛋白酶F、組織蛋白酶B、組織蛋白酶L、組織蛋白酶V、組織蛋白酶C、惡性痗原蟲半胱氨酸蛋白酶和克魯茲蛋白酶。48.權(quán)利要求47所述的方法，其中CAC1抑制劑是組織蛋白酶S的抑制劑。49.權(quán)利要求45-48中任一項(xiàng)所述的方法，其中半胱氨酰蛋白酶抑制劑由下式VII表示，其中r和r各自獨(dú)立地為烴基。50.權(quán)利要求45-49中任一項(xiàng)所述的方法，其中半胱氨酰蛋白酶抑制劑由下式VIII表示，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>其中P2的定義同權(quán)利要求l;R'為芳基或烷基；r為烷基、芳烷基、環(huán)烷基(烷基)或環(huán)烷基；和r為芳基、雜芳基或脂環(huán)基；其中所述芳基、烷基、芳烷基、環(huán)烷基(烷基)、環(huán)烷基、雜芳基和脂環(huán)基可任選地被取代。51.權(quán)利要求50所述的方法，其中r為各自任選被哌嗪基或哌啶基取代的芳基或雜芳基，哌嚷基或哌啶基各自又任選被一個或多個烷基或?；〈?。52.權(quán)利要求50所述的方法，其中r為5元雜芳基或6元脂環(huán)基，其各自任選被一個或多個烷基取代。53.權(quán)利要求50所述的方法，其中r為苯基、3-吡啶基或3-氟苯基；IT為CH2CH(Me)2、環(huán)己基-CH廣、對幾基千基、CH2C(Me)3、C(Me)3、環(huán)戊基或者環(huán)己基；Rz為苯基或者噻吩基，其各自可任選被一個或多個選自以下的取代基取代0H、卣基、烷基、烷基-NH,、N-哌嚷基和N-哌啶基，其中所述N-哌溱基和N-哌啶基各自任選被一個或多個烷基或者?；〈换蛘?，r為2-呋喃基、3-呋喃基或N-嗎啉基，其各自可任選被一個或多個烷基取代。54.權(quán)利要求50-53中任一項(xiàng)所述的方法，其中半胱氨酰蛋白酶抑制劑由下式IX表示，P2,=0、CH2或NR9，其中R9選自H、(V廣烷基、C3-6-環(huán)烷基、Ar或Ar-d-廣烷基；Y=CR'。R"-C(0)或CR'。R"-C(S)或CR'。R"-S(0)或CR'。R"-S02，其中R"和R"獨(dú)立地選自H、Cw-烷基、C^-環(huán)烷基、Ar和Ar-Cw-烷基，或者Y表示其中L為l-4的數(shù)字，1112和R"獨(dú)立地選自CR"R15，其中R"和R15獨(dú)立地選自H、Cw-烷基、Cw-環(huán)烷基、Ar、Ar-d-廣烷基或卣素；R"和R"中的每一個或者R"或R"(但不是R"和R"二者都)可另外選自0H、0-d廣烷基、0-C3—6-環(huán)烷基、0Ar、0-Ar-Cw-烷基、SH、S-Ch-烷基、S_C3—6-環(huán)烷基、SAr、S-Ar-d—廣烷基、NH2、NH-C卜廣烷基、NH-C3—6-環(huán)烷基、NH-Ar、NH-Ar-Cw-烷基、N-(Ch-烷基)2、N-(Cw-環(huán)烷基)2、NAr2和N-(Ar-d—廣烷基)2;在基團(tuán)(XO。中，X'-CR"R"，其中R"和R"獨(dú)立地選自H、C卜廣烷基、C3—6-環(huán)烷基、Ar和Ar-Cw-烷基，且o為G-3的數(shù)字；在基團(tuán)(W)n中，W=0、S、C(O)、S(0)或S(0)2或NR18,其中R18選自H、C卜廣烷基、C3—6-環(huán)烷基、Ar和Ar-C卜廣烷基，且n為0或1;在基團(tuán)(V),中，V=C(0)、C(S)、S(O)、S(0)2、S(0)肌OC(O)、NHC(O)、NHS(O)、NHS(0)2、0C(0)NH、C(0)NH或CR19R2°、C=N-C(0)-OR19或C-N-C(O)-NHR19，其中IT和R2。獨(dú)立地選自H、d-廣烷基、C3—6-環(huán)烷基、Ar、Ar-CH-烷基，且m為Q-3的數(shù)字，條件是當(dāng)m大于l時，(Vh最多其中:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>其中R"為H、Cw-烷基、C3—6-環(huán)烷基、Ar、Ar-d—廠烷基、0H、0-d—廣烷基、0-C3—6-環(huán)烷基、O-Ar、0-Ar-d-廣烷基、SH、S-Cw-烷基、S-C3-6-環(huán)烷基.S-Ar、S-Ar-C卜廣烷基、S02H、S0廣C卜廣烷基、S0fC3—6-環(huán)烷基、SO廣Ar、SO廣Ar-C卜廣烷基、NH2、NH-d—廣烷基、NH-C3—6-環(huán)烷基、NH-Ar、N-Ar2、含有一個羰基或者磺?；籙=穩(wěn)定的5-7元單環(huán)或穩(wěn)定的8-11元雙環(huán)，它們是飽和或不飽和的并且包含0-4個雜原子，它們選自以下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>NH-Ar-d-廣烷基、N(C卜7-烷基)2、N(C3—6-環(huán)烷基)2或N(Ar-C,-廣烷基)2;或者，當(dāng)是CHR"或者CR"基團(tuán)部分時，R"可以是鹵素；A選自ch2、chr21、0、s、S02、nr"或n-氧化物(n—0)，其中r"的定義如上所述；且R"選自H、d-廠烷基、C3—6-環(huán)烷基、Ar和Ar-C卜7-烷基；B、D和G獨(dú)立地選自CR21、N或N-氧化物(N—0)，其中R"的定義如上所述；E選自CH2、CHR21、0、S、S02、NR"或N-氧化物(N—0)，其中R"和R"的定義如上所述；K選自CH2、CHR22,其中R"的定義如上所述；J、L、M、R、T、T2、L和L獨(dú)立地選自CR21、N或N-氧化物(N~>0)，其中R"的定義如上所述；丁5選自CH或N;l選自NR22、S02、OC(O)、C(O)、NR"C(0);q為0-3的數(shù)字，從而形成5-、6-或7-元環(huán)；nc(0)、r2'oc(o)、r2'nqc(o)、r2'S02,其中r選自d—7-烷基、C3-6-環(huán)烷基、Ar和Ar-C卜廣烷基，且Q為H或Ch-烷基。55.制備權(quán)利要求49、50或54中任一項(xiàng)所述的式VII、VIII或IX的化合物的方法，所述方法包括權(quán)利要求1-44中任一項(xiàng)所述的方法。56.基本上如本文隨附參考的實(shí)施例所述的方法。全文摘要本發(fā)明涉及制備式I的化合物的方法，其中R¹為Pg¹或P₁′；P₁′為CO-烴基；P₂為CH₂、O或N-Pg²；且Pg¹和Pg²各自獨(dú)立地為N-保護(hù)基；(i)使式(II)的化合物與雙環(huán)氧乙烷反應(yīng)形成式(III)的環(huán)氧化物；其中X選自CN、CH₂N₃、CH₂NH-Pg²、ONH-Pg²、NHNH-Pg²、N(Pg²)NH-Pg²；(ii)將式(III)的化合物轉(zhuǎn)化為式(I)的化合物。文檔編號C07D487/04GK101273044SQ200680035726公開日2008年9月24日申請日期2006年8月10日優(yōu)先權(quán)日2005年8月10日發(fā)明者J·P·瓦特斯,J·奈莉,M·奎貝爾,M·斯坦登,V·K·阿加沃爾,王義康申請人:阿姆拉醫(yī)療有限公司