專(zhuān)利名稱(chēng)：：對(duì)α-2-δ蛋白質(zhì)具有親和力的Y-氨基酸的制備的制作方法對(duì)oc-2-5蛋白質(zhì)具有親和力的y-氨基酸的制備本發(fā)明涉及用于制備與4丐離子通道的oc-2-5(oc25)亞單位結(jié)合的光學(xué)活性y-氨基酸的物質(zhì)和方法。這些化合物，包括它們藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物和水合物，可用于治療血管舒縮性癥狀(潮熱和盜汗)、不寧腿綜合征、纖維肌痛、癲癇、疼痛和各種神經(jīng)變性障礙、精神障礙和睡眠障礙。wo+2000/076958和美國(guó)專(zhuān)利6,642,398描述了下式的y-氨基<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>酸或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中W為氫、具有l(wèi)至6+碳原+的直鏈或支鏈烷基或苯基；R2為具有1至8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、具有2至8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烯基，具有3至7個(gè)碳原子的環(huán)烷基、具有1至6個(gè)碳原子的烷氧基、烷基環(huán)烷基、烷基烷氧基、烷基0h、烷基苯基、烷基苯氧基，苯基或被取代的苯基；且若R2為甲基，則W為具有l(wèi)至6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基或苯基。這些化合物和其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物和水合物與鈣離子通道的ot25亞單位結(jié)合且可用于治療眾多障礙、醫(yī)學(xué)病癥和疾病，其中包括癲癇；疼痛(例如急性和慢性疼痛、神經(jīng)病性疼痛和精神性疼痛)；神經(jīng)變性障礙(例如由中風(fēng)、頭部外傷和窒息引起的急性腦損傷)精神病(例如焦慮和抑郁);和睡眠障礙(例如失眠、藥物相關(guān)性失眠、睡眠過(guò)度、發(fā)作性睡病、睡眠呼吸暫停和異態(tài)睡眠)。w0-a-2004/054566描述了這些化合物在治療選自強(qiáng)迫觀念與行為障礙(ocd)、恐懼癥、創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙(ptsd)、不寧腿綜合征，經(jīng)期前煩躁不安癥，潮熱和纖維肌痛的障礙的方法中的用途。在wo-a-2000/076958中描述的許多y-氨基酸均具有光學(xué)活性。所述化合物中的一些化合物(如下所示)具有兩個(gè)或兩個(gè)以上的立體生成(手性)中心，這使它們的制備具有挑戰(zhàn)性。盡管wo-a-2000/076958描述了用于制備光學(xué)活性y-氨奉酸的有用方法，由于效率或成本方面的原因，一些方法用于試'驗(yàn)性或全面規(guī)模生產(chǎn)可能存在問(wèn)題。因此，需要用于制備光學(xué)活性y-氨基酸的改良方法。本發(fā)明提供了用于制備式1的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物或水合物的改良方法，R其中W和^各自獨(dú)立選自氫和c:H烷基，其限制條件為若i^為氫，則W不為氫；R3選自Cw烷基、Cw烯基、Cw環(huán)烷基、C3—6環(huán)烷基-C"烷基、C"烷氧基，芳基和芳基d—3烷基，其中各芳基部分任選被1至3個(gè)獨(dú)立選自Cw烷基、Cw烷氧基、氨基、Cw烷基氨基和鹵素的取代基取代；且其中上述烷基、烯基、環(huán)烷基和烷氧基部分中的每一個(gè)任選被1至3個(gè)氟原子取代。本發(fā)明所提供的方法比已知方法更具有成本效益或效率更高且需要較少體積的溶劑。作為實(shí)施方式A,本發(fā)明的一方面提供了制備式IO的化合物或其鹽和式11的化合物或其鹽的方法，其包含(a)使式7的化合物與酶接觸，其中所述酶使式7的化合物非立體選擇性地水解為式10的化合物或其鹽或水解為式11的化合物或其鹽；(b)分離式10的化合物、其非對(duì)映異構(gòu)體或其鹽；和(c)任選使式10或式11的化合物水解以得到游離羧酸；其中，W和^各自獨(dú)立選自氫和d-3烷基，其限制條件為f與W不同時(shí)為氫；R3選自d-6烷基、Cw烯基、Cw環(huán)烷基、Cw環(huán)烷基-Cw烷基、d-6烷氧基、芳基和芳基Cw烷基，其中各芳基部分任選被1至3個(gè)獨(dú)立選自Cw烷基、d-3烷氧基、氨基、Cw烷基氨基和卣素的取代基取代；且其中上述烷基、烯基、環(huán)烷基和烷氧基部分中的每一個(gè)任選被1至3個(gè)氟原子取代；式7中的R6選自Cw烷基、Cw烯基、C2-6炔基、Cw環(huán)垸基，Cw環(huán)烯基，卣代-(V6烷基、卣代-CH烯基、g代-C2—6炔基、芳基-C2—6烷基、芳基-Cw烯基和芳基-Cw炔基；且式10和式11中的R8和R9各自獨(dú)立選自氫，d—6烷基、C2-6烯基、Ch快基、Cw環(huán)烷基、Cw環(huán)烯基、g代-Cw烷基、g代-C2-6烯基，卣代-C2—6炔基、芳基-Cw烷基、芳基-(V6烯基和芳基-Cw炔基，其限制條件為R8與R'不同時(shí)為氫；且其中上述芳基部分中的每一個(gè)任選被l至3個(gè)獨(dú)立選自Cw烷基、d-3烷氧基，氨基、Cw烷基氨基和囟素的取代基取代。作為實(shí)施方式Al，本發(fā)明提供制備式10的化合物或其鹽的方法:其中W和R2各自扭iL選自lL和Cw烷基，其限制條件為R'為氫，112不為氳；W選自Cw烷基、Cw烯基、C3—6環(huán)烷基、Cw環(huán)烷基-C"烷基，d—6烷氧基，芳基和芳基-Cw烷基，其中各芳基部分任選被1至3個(gè)獨(dú)立選自Cw烷基、Cw烷氧基，氨基、Cw烷基氨基和卣素的取代基取代，且其中上述的烷基、烯基、環(huán)烷基和烷氧基部分中的每一個(gè)任選被1至3個(gè)氟原子取代；并且R8選自d-6烷基、C2—6烯基、C2-6炔基、C3—7環(huán)烷基、C3—7環(huán)烯基，鹵代-Cw烷基、卣代-C2—6烯基、卣代-C2-6炔基、芳基-Cw烷基、芳基-C2-6歸基和芳基-Ch快基；其中上述芳基部分中的每一個(gè)任選被1至3個(gè)獨(dú)立選自C卜3烷基，d-3烷氧基，氨基、d-3烷基氨基和卣素的取代基取代；1且其中所述方法包含(a)使式7的化合物與酶接觸，其中所述酶將所述式7的化合物非立體選擇性地水解為式lla的化合物；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>其中R1、R2和R3如式10的化合物中所定義；并且式7中的1(6選自Cw烷基、C2-6烯基、C2—6炔基、C3-7環(huán)烷基、C3—7環(huán)烯基、卣代-d-6烷基、卣代-(V6烯基、卣代-Cw炔基、芳基-d-6烷基、芳基-C2-6烯基和芳基-Cw炔基，且其中上述芳基部分中的每一個(gè)任選被1至3個(gè)獨(dú)立選自C卜3烷基；Cw烷氧基、氨基、Cw烷基氨基和鹵素的取代基取代，和(b)分離所述式10的化合物。作為實(shí)施方式A2，本發(fā)明提供了如實(shí)施方式A中所限定的方法，其中119為氫。作為實(shí)施方式A3，本發(fā)明提供了如實(shí)施方式A、A1或A2中所限定的方法，其中W和R8獨(dú)立選自Ch坑基；優(yōu)選甲基、乙基、正丙基和異丙基；最優(yōu)選甲基和乙基。作為實(shí)施方式A4，本發(fā)明提供了如實(shí)施方式A、Al、A2或A3中所限定的方法，其中^和112各自獨(dú)立為氫或甲基。其限制條件為R1與W不同時(shí)為氫，且F^為Cw烷基；優(yōu)選Ri為氫，W為甲基且W為甲基、乙基、正丙基或異丙基；最優(yōu)選W為氫，W為曱基且ie為乙基。作為實(shí)施方式A5，本發(fā)明提供了如實(shí)施方式A、Al、A2、A3或A4中所限定的方法，其中在步驟(a)中的酶為脂肪酶；優(yōu)選所述酶為源自微生物洋蔥伯克霍爾德氏菌(^/ri「力oA/ei7ace;"/a)或微生物細(xì)毛嗜熱霉(7^er邊o邊yces/a/7i/^7/zc^i/《)的月旨肪酶。作為實(shí)施方式A6，本發(fā)明提供了如實(shí)施方式Al、A2、A3、A4或A5中所限定的方法，其中所述方法進(jìn)一步包含以下步驟(c)任選將式10的化合物轉(zhuǎn)化為其鹽；優(yōu)選轉(zhuǎn)化為其堿金屬鹽；最優(yōu)選轉(zhuǎn)化為其鈉鹽。作為實(shí)施方式A7，本發(fā)明的另一方面提供了用于制備式10a的化合物或其鹽的方法其中R1、R2和R3如實(shí)施方式A或A3中所定義。所述方法包含以下步驟(a)使式7的化合物與酶接觸以得到式10的化合物或其鹽和式11的化合物或其鹽，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>其中所述酶使式7的化合物非立體選擇性地水解為式10的化合物或其鹽，或水解為式11的化合物或其鹽；(b)分離式10的化合物或其鹽；和(c)任選使式10的化合物水解以得到式10a的化合物，其中式7、式10和式11中的R1、112和R'如以上式1中所定義；式7中的W選自C卜6烷基、Cw烯基、Cw炔基、Cw環(huán)烷基、C3-7環(huán)烯基、鹵代-d-e烷基、閨代-Cw烯基、卣代-Cw炔基、芳基-Cw烷基，芳基，Cw烯基和芳基-Cw炔基且式IO和式11中的R8和R9各自獨(dú)立選自氫、Cw烷基、C^烯基、C2—6炔基、Cw環(huán)烷基、Cw環(huán)烯基、卣代-d-6烷基、面代-Cw烯基、卣代-C2—6炔基、芳基-d-6烷基、芳基-Cw烯基和芳基-C2—6炔基；其中上述芳基部分中的每一個(gè)任選被l至3個(gè)獨(dú)立選自Cw烷基，d—3烷氧基、氨基、Cw烷基氨基和g素的取代基取代。作為實(shí)施例方式B，本發(fā)明進(jìn)一步提供了如以上實(shí)施方式A、Al或A4中所限定的式7的化合物;優(yōu)選W為Ch坑基；更優(yōu)選116為甲基、乙基、正丙基或異丙基。在實(shí)施方式B1中，本發(fā)明提供了式7的化合物，其選自(2'R)-2-氰基-2-(2'-甲基-丁基)-琥珀酸二乙酯；(2'R)-2-氰基-2-(2'-甲基-戊基)-琥珀酸二乙酯；(2'R)-2-氰基-2-(2'-甲基-己基)-琥珀酸二乙酯(2'R)-2-氰基-2-(2'，4'-二甲基-戊基)-琥珀酸二乙酯；(5R)-3-氰基-5-甲基庚酸乙酯；(5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯；(5R)-3-氰基-5-曱基-壬酸乙酯；(5R)-3-氰基-5，7-二甲基-辛酸乙酯；(5R)-3-氰基-5-甲基「庚緣;(5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸；(5R)-3-氰基-5-甲基-壬酸；(5R)-3-氰基-5，7-二曱基-辛酸；(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-庚酸；(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸；(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-壬酸；(3S，5R)-3-氛基-5，7-二甲基-辛酸；(3S，5R)-3-氰基-5--甲基-庚酸乙酯；(3S，5R)-3-氛基-5--甲基-辛酸乙酯；(3S，5R)-3-氛基-5--甲基-辛酸甲酯；(3S，5R)+氰基-5--曱基-壬酸乙酯；(3S，5R)-3-氰基-5，7-二曱基-辛酸乙酯；(3R，5R)-3-氛基-5-甲基-庚酸；(3R，5R)-3-氰基-5--甲基-辛酸；(3R,5R)-3-氰基-5--甲基-壬酸；(3R，5R)-3-氛基-5，7-二甲基-辛酸；(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-庚酸乙酯；(3R，5R)-3-氛基-5""-曱基-辛酸乙酯；(3R，5R)-3-氛^^-5-曱基-壬酸乙酯；(3R，5R)""3-氛基-5，7-二甲基-辛酸乙酯；和上述化合物的非對(duì)映異構(gòu)體和相反的對(duì)映異構(gòu)體，以及上述化合物、其非對(duì)映異構(gòu)體和相反的對(duì)映異構(gòu)體的鹽。作為實(shí)施方式B2，本發(fā)明提供式10的化合物，其選自(3S，5R)-3-_氛基_5--甲基-庚酸；(3S，5R)-3--氰基-5--甲基-辛酸；(3S，5R)-3--氰基-5--甲基-壬酸；(3S，5R)-3-_氛基-5，7-二甲基-辛酸'(3S，5R)-3--氰基-5--甲基-庚酸乙酯(3S，5R)-3-國(guó)氛基-5.-甲基-辛酸乙酯，(3S，5R)-3國(guó)國(guó)氛基-5.-甲基-辛酸曱酯(3S，5R)-3-陽(yáng)氰基-5'-曱;基-壬酸乙酯(3S，5R)-3--氰基-5，7-二甲基-辛酸乙酯;和其鹽和酯。作為實(shí)施方式B3，本發(fā)明提供了化合物(3S，5R)-3-氛基-5-甲基-辛酸或其鹽或酯(式10b的化合物)其中R8b選自氫、d-6烷基、C2—6烯基、C2—6炔基、Cw環(huán)烷基、C3—7環(huán)烯基、卣代-C卜6烷基、卣代-Cw烯基、卣代-Cw炔基、芳基-d-6烷基、芳基-C2-6烯基和芳基-Cw炔基，且其中上迷芳基部分中的每一個(gè)任選被1至3個(gè)獨(dú)立選自Cw烷基、Cw烷氧基、氨基、Cw烷基氨基和卣素的取代基取代；及其鹽。優(yōu)選其酯為式10b的化合物，其中R8b為d"烷基；更優(yōu)選R8b為甲基或乙基。優(yōu)選其鹽為(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸的堿金屬鹽；更優(yōu)選其鈉鹽。作為實(shí)施方式C，本發(fā)明進(jìn)一步提供了用于制備式7的化合物或其鹽的方法，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>其中R1、R2，！^如實(shí)施方式B中所定義；且W為Cw烷基，且其中所述方法包含(a)在堿存在下使式19的化合物與式20的原酸酯化合物反應(yīng)，其中R1、R2、W和W如式7的化合物中所定義且X2為卣素，和(b)使所得原酸酯中間產(chǎn)物水解以得到式7的羧酸酯。作為實(shí)施方式D,本發(fā)明進(jìn)一步提供了用于制備如上所定義的式1的化合物，其非對(duì)映異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受的絡(luò)合物、鹽、溶劑合物或水合物的方法，其包含如實(shí)施方式A，A6或A7中所限定的方法的步驟(a)至(c)且進(jìn)一步包含以下步驟(d)還原式10的化合物或其鹽的氰基部分其中式10中的R1、W和W如式1的化合物中所定義且118如實(shí)施方式A中所定義；和(e)任選進(jìn)一步將式1的化合物或其鹽轉(zhuǎn)化為其藥學(xué)士可接受的鹽，溶劑合物或水合物。作為實(shí)施方式D1，本發(fā)明提供一種用于制備如上所定義的式1的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物或水合物的方法，其包含如實(shí)施方式A6中所限定的方法的步驟(a)至(c)且進(jìn)一步包含以下步驟(d)還原式10的化合物的鹽的氰基部分以得到式l的化合物的鹽；和(e)任選進(jìn)一步將所得式1的化合物的鹽轉(zhuǎn)化成其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物或水合物。作為實(shí)施方式D2，本發(fā)明提供一種如實(shí)施方式Dl中所限定的方法，其中在步驟(c)中將式10的化合物轉(zhuǎn)化為堿金屬鹽；最優(yōu)選轉(zhuǎn)化為鈉鹽。作為實(shí)施方式D3，本發(fā)明提供一種如實(shí)施方式D中所限定的方法，其中在步驟(e)中將所得鹽轉(zhuǎn)化為式l的游離酸。本發(fā)明進(jìn)一步涉及用于制備如上所定義的式1的化合物，包括其非對(duì)映異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物或水合物的方法，其包含如實(shí)施方式A中所限定的方法的步驟(a)至(c)，且進(jìn)一步包含以下步驟(d)還原式8的化合物或其鹽的氰基部分以得到式9的化合物,R3或其鹽，其中在式8和式9中的R1、le和ie如式l中所定義；(b)任選用酸處理式9的化合物的鹽；(c)拆分式9的化合物或其鹽；和(d)任選將式I的化合物或其鹽轉(zhuǎn)化為其藥學(xué)上可接受的絡(luò)合物、鹽、溶劑合物或水合物。本發(fā)明的另外方面提供式19的化合物，包括其鹽，其中R1、W和W如以上式1中所定義；R8是選自氫，Cw烷基，Ch彿基、C2—6炔基，Cw環(huán)烷基、C3—7環(huán)烯基，卣代-C卜6烷基，鹵代-Cw烯基、g代-C2—6炔基、芳基-(V6烷基、芳基-(V6烯基和芳基-Cw炔基Ri2為氫或-C(0)0IT;且f選自d-6烷基、Cw烯基、C2—6炔基、Cw環(huán)烷基、C3—7環(huán)烯基、卣代-Cw烷基、卣代-C2—6烯基、卣代-C2—6炔基、芳基-d-6烷基、芳基-C2—6烯基和芳基-Cw炔基；其中上述芳基部分中的每一個(gè)任選被l至3個(gè)獨(dú)立選自C卜3烷基，Cw烷氧基、氨基、Cw烷基氨基和卣素的取代基取代；且其中上述烷基、烯基，環(huán)烷基和烷氧基部分中的每一個(gè)任選被1至3個(gè)氟原子取代。本發(fā)明的另一方面提供上述式7、式8、式10、式ll和式10a的化合物，其選自(2'R)-2-氰基-2-(2'-曱基-丁基)-琥珀酸二乙酯；(2'R)-2-氰基-2-(2'-甲基-戊基)-琥珀酸二乙酯；(2'R)-2-氰基-2-(2'-甲基-己基)-琥珀酸二乙酯(2'R)-2-氰基-2-(2'，4'-二甲基-戊基)-琥珀酸二乙酯；(5R)-3-氰基-5-甲基庚酸乙酯；(5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯；(5R)-3-氰基-5-甲基r壬酸乙酯；(5R)-3-氰基-5，7-二甲基-辛酸乙酯；(5R)-3-氰基-5-甲基-庚酸；(5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸；(5R)-3-氰基-5-曱基-壬酸；(5R)-3-氰基-5，7-二甲基-辛酸；(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-庚酸；(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸；(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-壬酸；(3S，5R)-3-氰基-5，7-二甲基-辛酸；(3S，5R)-3-氰基-5-甲-基-庚酸乙酯；(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯；(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-壬酸乙酯；(3S，5R)-3-氰基-5，7-二甲基-辛酸乙酯；(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-庚酸；(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸；(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-壬酸；(3R，5R)-3-氰基-5，7-二甲基-辛酸；(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-庚酸乙酯；(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯；(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-壬酸乙酯；(3R，5R)-3-氰基-5，7-二曱基-辛酸乙酯；和其鹽。作為實(shí)施方式E，本發(fā)明進(jìn)一步提供基本上純的結(jié)晶(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A,吝特征為通過(guò)CuKa輻射的照射所獲得的包括26角為7.7、15.8，20.8和23.1度土0.2度處的峰的粉末X射線衍射圖樣(PXRD)。作為實(shí)施方式El,本發(fā)明提供基本上純的結(jié)晶(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A，其特征為在194X:土2X:時(shí)出現(xiàn)一個(gè)單尖銳吸熱峰最高值的差示掃描量熱測(cè)定(DSC)熱分析圖。作為實(shí)施方式E2，本發(fā)明提供基本上純的結(jié)晶(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A，其特征為包括在1006cm^和8"cm^處的吸收光i普帶的傅立葉轉(zhuǎn)換紅外(FT-IR)光譜。作為實(shí)施方式E3，本發(fā)明提供基本上純的結(jié)晶(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A，其特征為包括在1550cm-\595cnf1和386cnf1處的吸收光鐠帶的傅立葉轉(zhuǎn)換-拉曼(FT-Ramon)光鐠。本文所使用的術(shù)語(yǔ)"基本上純"意指至少95重量％的純度。更優(yōu)選為"基本上純"意指至少98重量％的純度，且最優(yōu)選意指至少99重量％的純度。作為實(shí)施法E4，本發(fā)明提供用作藥物的(3S，5R)-3-氨基甲基-5-曱基-辛酸形式A。作為實(shí)施方式E5，本發(fā)明提供用于治療以a-2-5受體配體為適應(yīng)癥的疾病或障礙的(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A，其特別用于治療選自癲癇；疼痛(例如，急性和慢性疼痛、神經(jīng)病性疼痛和精神性疼痛)；神經(jīng)變性病癥(例如，由中風(fēng)、頭部外傷和窒息引起的急性腦損傷)；精神病癥(例如，焦慮和抑郁)；睡眠障礙(例如，失眠、藥物相關(guān)性失眠、睡眠過(guò)度、發(fā)作性睡病、睡眠呼吸暫停和異態(tài)睡眠)；強(qiáng)迫觀念與行為障礙(OCD);恐懼癥；創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙(PTSD);不寧腿綜合征；經(jīng)期前煩躁不安癥；血管舒縮性癥狀(潮熱和盜汗)；和纖維肌痛的疾病或障礙。作為實(shí)施方式E6，本發(fā)明提供(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A用于制備以a-2-5受體配體為適應(yīng)癥的疾病或障礙的藥物的用途，所述藥物特別用于治療選自癲癇；疼痛(例如，急性和慢性疼痛、神經(jīng)病性疼痛和精神性疼痛)；神經(jīng)變性病癥(例如，由中風(fēng)、頭部外傷和窒息引起的急性腦損傷)；精神病癥(例如，焦慮和抑郁)；睡眠障礙(例如，失眠、藥物相關(guān)性失眠、睡眠過(guò)度、發(fā)作性睡病、睡眠呼吸暫停和異態(tài)睡眠)；強(qiáng)迫觀念與行為障礙(OCD);恐懼癥；創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙(PTSD);不寧腿綜合征；經(jīng)期前煩躁不安癥；血管舒縮性癥狀(潮熱和盜汗)；和纖維肌痛的疾病或障礙。作為實(shí)施方式E7，本發(fā)明提供一種在哺乳動(dòng)物中以a-2-5受體配體為適應(yīng)癥的疾病或障礙的方法，特別是選自癲癇；疼痛(例如，急性和慢性疼痛、神經(jīng)病性疼痛和精神性疼痛)；神經(jīng)變性病癥(例如，由中風(fēng)、頭部外傷和窒息引起的急性腦損傷)；精神病癥(例如，焦慮和抑郁)；睡眠障礙(例如，失眠、藥物相關(guān)性失眠、睡眠過(guò)度、發(fā)作性睡病、睡眠呼吸暫停和異態(tài)睡眠)；強(qiáng)迫觀念與行為障礙(OCD);恐懼癥；創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙(PTSD);不寧腿綜合征；經(jīng)期前煩躁不安癥；血管舒縮性癥狀(潮熱和盜汗)；和纖維肌痛的疾病或障礙，所述方法包括將(3S，5R)-3-氨基甲基-5-曱基-辛酸形式A給予需要所述治療的哺乳動(dòng)物。^,治療血管舒縮性癥狀(潮熱和盜汗)為優(yōu)選用途。作為實(shí)施方式E8,本發(fā)明提供包含(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A和一或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物組合物。作為實(shí)施方式E9,本發(fā)明提供通過(guò)從粗制(3S,5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸在乙醇與水或異丙醇(IPA)與水的混合物中的溶液重結(jié)晶而制備(3S，5A)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A的方法；更優(yōu)選為從粗制(3S，5R)-3-氨基曱基-5-甲基-辛酸在1:1的乙醇水的混合物(以體積計(jì))或l:l的IPA:水混合物(以體積計(jì))中的溶液重結(jié)晶；最優(yōu)選從粗制(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸在1:1的乙醇水混合物(以體積計(jì))中的溶液重結(jié)晶。本發(fā)明包括所公開(kāi)化，物的所有絡(luò)合物和鹽(無(wú)論藥學(xué)上是否可接受)、溶劑合物、水合物和多晶型形式。某些化合物可含有烯基或環(huán)基，故順/反(或Z/E)立體異構(gòu)體是可能的，或可含有酮基或肟基，故可發(fā)生互變異構(gòu)現(xiàn)象。在這種情況下，本發(fā)明通常包括所有Z/E異構(gòu)體和互變異構(gòu)體，無(wú)論其是純的、實(shí)質(zhì)上純的或?yàn)榛旌衔?。除非另有說(shuō)明，本發(fā)明使用以下所提供的定義。一些定義和式中可包括短劃線("-")以表示原子的間的鍵或至指定或未指定原子或原子團(tuán)的連接點(diǎn)。其它定義和式中可包括等號(hào)()或恒等號(hào)("=")以分別表示雙鍵或參鍵。某些式可亦包括一或多個(gè)星號(hào)("*")以表示立體(不對(duì)稱(chēng)或手性)中心，盡管沒(méi)有星號(hào)("*")并不表示化合物不存在立體中心。所述式可指外消旋體或是指?jìng)€(gè)別對(duì)映異構(gòu)體或是指?jìng)€(gè)別非對(duì)映異構(gòu)體，其可以是齊可以不是純的或?qū)嵸|(zhì)上純的。其它式可包括一或多個(gè)波狀鍵("J，)1這些波狀鍵當(dāng)連接至立體中心時(shí)是指單個(gè)或作為混合物的兩種立體異構(gòu)體。同樣，這些波狀鍵當(dāng)連接至雙鍵時(shí)表示Z-異構(gòu)體、E-異構(gòu)體或Z和E異構(gòu)體的混合物。一些式可包括虛線鍵"一一"以表示單鍵或雙鍵。"取代的"基團(tuán)為那些其中一或多個(gè)氫原子已被一或多個(gè)非氫原子或基團(tuán)取代的基團(tuán)，其限制奈件為滿(mǎn)足價(jià)鍵要求且所述取代產(chǎn)生化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定的化合物。"約"或"大致"在與可量測(cè)數(shù)值變量一起使用時(shí)是指變量的指定值且是指變數(shù)的所有在指定值的實(shí)驗(yàn)誤差范圍內(nèi)(例如，在平均值95%的置信區(qū)間內(nèi))或在指定值的±10%范圍內(nèi)的值，兩種情況下值的范圍皆更大。"烷基"是指直鏈和支鏈飽和烴基，其通常具有指定碳原子的數(shù)值(亦即，Cw烷基是指具有1、2或3個(gè)碳原子的烷基且d"烷基是指具有l(wèi)、2、3、4、5或6個(gè)碳原子的烷基)。烷基的實(shí)例包括曱基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、異丁基、叔丁基、戊-l-基、戊-2-基、戊-3-基、3-甲基丁-l-基、3-甲基丁-2-基、2-甲基丁-2-基、2，2，2-三甲基乙-l-基、正己基和其類(lèi)似基團(tuán)。"烯基"是指具有一或多個(gè)不飽和碳一碳鍵的直鏈和支鏈烴基，且其通常具有指定碳原子的數(shù)值。烯基的實(shí)例包括乙烯基、l-丙烯-l-基、l-丙烯-2-基、2-丙烯-l-基，1-丁烯-l-基、1-丁烯-2-基-3~丁烯-l-基、3-丁烯-2-基、2-丁烯-l-基、2-丁烯-2-基、2-甲基-1-丙烯-1-基、2-甲基-2-丙烯-l-基、1，3-丁二烯-l-基、1，3-丁二烯-2-基和其類(lèi)似基團(tuán)。"炔基，，是指具有一或多個(gè)碳-碳參鍵的直鏈或支鏈烴基，且其通常具有指定碳原子的數(shù)值。炔基的實(shí)例包括乙炔基、l-丙炔-l-基、2-丙炔-l-基、1-丁炔-l-基、3-丁炔-l-基、3-丁炔-2-基-、2-丁炔-1-基和其類(lèi)似基團(tuán)。"烷氧基"是指烷基-o-、烯基-0和炔基-0，其中烷基、烯基和炔基如上所定義。烷氧基的實(shí)例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基，異丙氧基、正丁氧基，仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基，仲戊氧基和其類(lèi)似基團(tuán)。"鹵代"和"鹵素，，可互換使用，且是指氟，氯，溴和碘。"鹵代烷基"、"離代烯基，，，"卣代炔基"和"fi代烷氧基"分別是指被一或多個(gè)卣素原子取代的烷基、烯基、炔基和烷氧基，其中烷基、烯基、炔基和烷氧基如上所定義。卣代烷基的實(shí)例包括三氟甲基、三氯甲基、五氟乙基，五氟乙基和其類(lèi)似基團(tuán)。"環(huán)烷基"是指飽和單環(huán)和雙環(huán)烴環(huán)，其通常具有指定構(gòu)成環(huán)的碳原子的數(shù)值(亦即，Cw環(huán)烷基是指具有3、4、5、6或7個(gè)作為環(huán)成員的碳原子的環(huán)烷基)。除非連接會(huì)違背價(jià)鍵要求，環(huán)烷基可通過(guò)任何環(huán)原子連接至母體基團(tuán)或連接至底物。同樣地，除非取代會(huì)違背價(jià)鍵要求，環(huán)烷基可包括一或多個(gè)非氫取代基?？捎玫娜〈ㄈ缟纤x的烷基、烯基、炔基、卣代烷基、卣代烯基、卣代炔基、烷氧基、烷氧羰基、烷?；兔嫠兀野u基、巰基、硝基和氨基。單環(huán)環(huán)烷基的實(shí)例包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基和其類(lèi)似基團(tuán)。雙環(huán)環(huán)烷基的實(shí)例包括雙環(huán)[l.1.O]丁基，雙環(huán)[l.1.l]戊基、雙環(huán)[2.1.0]戊基、雙環(huán)[2.1.1]己基、雙環(huán)[3.1.0〗己基、雙環(huán)[2.2.1]庚基、雙環(huán)[3.2.O]庚基、雙環(huán)[3.1.l]庚基、雙環(huán)[4.l.O]庚基、雙環(huán)[2.2.2]辛基、雙環(huán)[3.2.1]辛基、雙環(huán)[4.l.l]辛基,雙環(huán)[3.3.0〗辛基、雙環(huán)[4.2.O]辛基、雙環(huán)[3.3.l]壬基、雙環(huán)[4.2.l]壬基、雙環(huán)[4.3.O]壬基、雙環(huán)[3.3,2]癸基、雙環(huán)[4.2.2]癸基、雙環(huán)[4.3.1]癸基，雙環(huán)[4.4.0]癸基、雙環(huán)[3.3.3]H"—烷基、雙環(huán)[4.3.2]十一烷基、雙環(huán)[4.3.3]十二烷基和其類(lèi)似基團(tuán)。."環(huán)烯基，，是指具有一或多個(gè)不飽和碳-碳鍵的單環(huán)和雙環(huán)烴環(huán)，且通常具有指定構(gòu)成環(huán)的碳原子的數(shù)值(亦即，Cw環(huán)烯基是指具有3，4，5，6或7個(gè)作為環(huán)成員的碳原子的環(huán)烯基)。除非連接會(huì)違背價(jià)鍵要求，環(huán)烯基可通過(guò)任何環(huán)原子連接至母體基團(tuán)或連接至底物。同樣地，除非取代會(huì)違背價(jià)鍵要求，環(huán)烯基可包括一或多個(gè)非氫取代基?？捎玫娜〈ㄈ缟纤x的烷基、烯基、炔基、卣代烷基、鹵代烯基、卣代炔基、烷氧基、烷氧羰基、烷酰基和卣代，且包括羥基、疏基，硝基和氨基。"芳基"和"亞芳基，，分別是指單價(jià)和二價(jià)芳基，包括含有o至4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧和硫的雜原子的5員和6員單環(huán)芳族基團(tuán)。單環(huán)芳基的實(shí)例包括苯基、吡咯基、呋喃基、蓉吩基、噢唑基、異塞唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、吡唑基、惡唑基、異惡唑基、吡啶基，吡嗪基、噠溱基、嘧啶基和其類(lèi)似基團(tuán)。芳基和亞芳基亦包括雙環(huán)基團(tuán)、三環(huán)基團(tuán)等，包括上述5員和6員環(huán)的稠合基團(tuán)。多環(huán)芳基的實(shí)例包括萘基、聯(lián)苯基、葸基、芘基，"t唑基，苯并惡唑基、苯并二惡唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基，苯并噻吩基喹啉基，異喹啉基、吲哚基、苯并呋喃基、嘌呤基、吲嗪基和其類(lèi)似基團(tuán)。除非連接會(huì)違背價(jià)鍵要求，芳基和亞芳基可通過(guò)任何環(huán)原子連接至母體基團(tuán)或連接至底物。同樣地，除非取代會(huì)違背價(jià)鍵要求，芳基和亞芳基可包括一或多個(gè)非氫取代基。有用的取代基包括如上所定義的烷基、烯基、炔基、鹵代烷基、面代烯基、離代炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、烷氧基、環(huán)烷氧基、烷?；?、環(huán)烷酰基、環(huán)烯?；?、烷氧羰基、環(huán)烷氧基羰基和鹵素，且包括羥基、巰基、硝基、氨基和烷基氨基。"芳基烷基，，是指芳泰-烷基，其中芳基和烷基如上所定義。實(shí)例包括節(jié)基、勿基甲基和其類(lèi)似基團(tuán)。"離去基團(tuán)"是指任何在片段化過(guò)程中(包括取代反應(yīng)，消除反應(yīng)和加成-消除反應(yīng))離開(kāi)分子的基團(tuán)。離去基團(tuán)可為離核的，其中基團(tuán)攜帶一對(duì)原先充當(dāng)離去基團(tuán)與所述分子之間的鍵的電子離開(kāi)；或可為離電子的，其中基團(tuán)未攜帶所述電子對(duì)離開(kāi)。離核離去基團(tuán)離開(kāi)的能力視其堿性強(qiáng)度而定，其中最強(qiáng)堿性為最差的離去基團(tuán)。常見(jiàn)的離核離去基團(tuán)包括氮(例如，源自重氨鹽)；磺酸基，包括烷基磺酸根(例如，甲磺酸根)，氟烷基磺酸根(例如，三氟曱磺酸根、六氟丙磺酸根、九氟丁磺酸根和三氟乙磺酸根)和芳基磺酸根(例如，曱苯磺酸根、對(duì)溴苯磺酸根、對(duì)氯苯磺酸根和硝基苯磺酸根)。其它離核離去基團(tuán)包括碳酸根、卣離子、羧酸根陰離;;子、酚鹽離子和烷氧化物。一些較強(qiáng)的堿(諸如，冊(cè)r和0H—)可通過(guò)用酸處理而使其成為較好的離去基團(tuán)。常見(jiàn)的離電子離去基團(tuán)包括質(zhì)子、C02和金屬。"對(duì)映異構(gòu)體過(guò)量"或"ee"為給定樣品的一種對(duì)映異構(gòu)體超過(guò)手性化合物的外消旋樣品的量的測(cè)定且以百分比表示。將對(duì)映異構(gòu)體過(guò)量定義為100x(er-l)/(er+l)，其中"er"為較多量的對(duì)映異構(gòu)體與較少量的對(duì)映異構(gòu)體的比率。"非對(duì)映異構(gòu)體過(guò)量"或"de"為給定樣品的一種非對(duì)映異構(gòu)體超過(guò)具有等量非對(duì)映異構(gòu)體的樣品的量的測(cè)定且以百分比表示。將非對(duì)映異構(gòu)體過(guò)量定義為100x(dr-l)/(dr+l)，其中"dr"為較多量的非對(duì)映異構(gòu)體與較少量的非對(duì)映異構(gòu)體的比率。"立體選擇性"、"對(duì)映選擇性"、"非對(duì)映立體選擇性"和其變體是指可分別產(chǎn)生較另一種立體異構(gòu)體、對(duì)映異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體更多的立體異構(gòu)體、對(duì)映異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體的給定過(guò)程(例如，氫化)。"高度立體選擇性，，、"高度對(duì)映選擇性，，和"高度非對(duì)映立體選擇性"和其變體是指產(chǎn)生一種立體異構(gòu)體、對(duì)映異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體過(guò)量的產(chǎn)物的給定過(guò)程，所述立體異構(gòu)體、對(duì)映異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體占這些產(chǎn)物的至少約90%。對(duì)一對(duì)對(duì)映異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體而言，高度對(duì)映選擇性或非對(duì)映立體選擇性對(duì)應(yīng)于至少約80%的ee或de。"立體異構(gòu)體富集的，，、"對(duì)映異構(gòu)體富集的"、"非對(duì)映異構(gòu)體富集的"和其變體分別是指具有較另一種立體異構(gòu)體、對(duì)映異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體更多的一種立體異構(gòu)體、對(duì)映異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體的化合物樣品。富集程度可通過(guò)總產(chǎn)物的％來(lái)測(cè)定，或?qū)σ粚?duì)對(duì)映異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體面言，可通過(guò)ee或de來(lái)測(cè)定。指定化合物的"立體異構(gòu)體，，是指所述化合物的相反對(duì)映異構(gòu)體且是指所述化合物的任何非對(duì)映異構(gòu)體或幾何異構(gòu)體(Z/E)。例如，若指定化合物具有S，R，Z立體化學(xué)構(gòu)型，則其立體異構(gòu)體將包括其具有S,R，Z構(gòu)型的相反對(duì)映異構(gòu)體、其具有S，S,Z構(gòu)型和R，R,Z構(gòu)型的非對(duì)映異構(gòu)體和其具有S，R，E構(gòu)型、R，S，E構(gòu)型、S，S，E構(gòu)型和R,R，E構(gòu)型的幾何異構(gòu)體。"實(shí)質(zhì)上純的立體異構(gòu)體，，，"實(shí)質(zhì)上純的對(duì)映異構(gòu)體"，"實(shí)質(zhì)上純的非對(duì)映異構(gòu)體，，和其變體分別是指一種包含占所述樣品至少約95%的立體異構(gòu)體、對(duì)映異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體的樣品。對(duì)于成對(duì)對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體而言，實(shí)質(zhì)上純的對(duì)映異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體將對(duì)應(yīng)于ee或de為約90%或更高的樣品。"純立體異構(gòu)體"、"純對(duì)映異構(gòu)體"、"純非對(duì)映異構(gòu)體"和其變體分別是指一種含有占所述樣品至少約99.5%的立體異構(gòu)體，對(duì)映異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體的樣品。對(duì)于成對(duì)對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體而言，純對(duì)映異構(gòu)體或純非對(duì)映異構(gòu)體將對(duì)應(yīng)于ee或de為約99%或更高的樣品。"相反對(duì)映異構(gòu)體"是指作為參考分子的不可重疊的對(duì)映的分子，其可通過(guò)反轉(zhuǎn)所述參考分子的所有立體生成中心而獲得。例如，若參考分子具有S絕對(duì)立體化學(xué)構(gòu)型，則相對(duì)對(duì)映異構(gòu)體具有R絕對(duì)立體化學(xué)構(gòu)型。同樣地，若參考分子具有S，S絕對(duì)立體化學(xué)構(gòu)型，則相對(duì)對(duì)映異構(gòu)體具有R,R立體化學(xué)構(gòu)型等。"對(duì)映選擇性值"或"E"是指經(jīng)歷化學(xué)反應(yīng)或轉(zhuǎn)化后化合物的各對(duì)映異構(gòu)體(或一對(duì)非對(duì)映異構(gòu)體的各立體異構(gòu)體)的特異性常數(shù)的比率且可通過(guò)以下表達(dá)式進(jìn)行計(jì)算(對(duì)于S對(duì)映異構(gòu)體)，C一K，/K:加一+!—-x9-!KVK鵬=l4-dl-eep』_hi〖l-X(l+ees)]'其中L和^分別為S和R對(duì)映異構(gòu)體轉(zhuǎn)化的一級(jí)速率常數(shù)；KSM和K服分別為S和R對(duì)映異構(gòu)體的米氏常數(shù)(Michaelisconstant);x為底物的轉(zhuǎn)化分?jǐn)?shù)；eep和ees分別為產(chǎn)物和底物(反應(yīng)物)的對(duì)映異構(gòu)體過(guò)量。"脂肪酶單位"或"LU"是指當(dāng)與三丁基錫和乳化劑(阿拉伯膠)在30匸和pH7下接觸時(shí)每分鐘可釋出lfimol可滴定的丁酸的酶量(g)。"溶劑合物，，是指包含所公開(kāi)或主張的化合物和化學(xué)計(jì)量或非化學(xué)計(jì)量的量的一或多個(gè)溶劑分子(例如，乙醇)的分子絡(luò)合物。"水合物"是指包含所公開(kāi)或主張的化合物和化學(xué)計(jì)量或非化學(xué)計(jì)量的量的水的溶劑合物。"藥學(xué)上可接受的絡(luò)合物、鹽、溶劑合物或水合物，，是指所主張和公開(kāi)的化合物的絡(luò)合物、酸或堿加成鹽、溶劑合物成水合物處于可靠的醫(yī)學(xué)判斷范圍內(nèi)，適用于接觸患者的組織，無(wú)不適當(dāng)?shù)亩拘浴⒋碳?、過(guò)敏反應(yīng)和其類(lèi)似反應(yīng)，與合理的利益/風(fēng)險(xiǎn)比相稱(chēng)，且有效用于其所期望的用途。"預(yù)催化劑"或"催化劑前體"是指可在使用前轉(zhuǎn)化為催化劑的一種化合物或一組化合物。"治療"是指逆轉(zhuǎn)、減輕、抑制所述術(shù)語(yǔ)所指的障礙或病癥的進(jìn)展，或預(yù)防所述術(shù)語(yǔ)所指的障礙或病癥，或是指預(yù)防所述障礙或病癥的一或多種癥狀。"治療(treatment)"是指如上面剛剛定義的"治療(treating)"的4亍為。表l列出整個(gè)說(shuō)明書(shū)中所使用的縮寫(xiě)?？s寫(xiě)描述Ac乙醜基ACN乙腈Ac20乙酸酐aq含水的(R，R)-BDPP(2R，4R)-(+)-2，4-雙(二苯膦基)戊烷BESN，N-雙(2-羥基乙基)_2-氨基乙磺酸(R)-BICHEP(R)-(-)-2,2，-雙(二環(huán)己基膦基)-6，6'-二曱基-i，r-聯(lián)苯BICINEN，N-雙(2-羥基乙基)甘氨酸(S，S)-BICP(2S,2'S)-雙(二苯膦基)-(IS,1'S)-二聯(lián)環(huán)戊烷BIFUP2，2'-雙(二苯膦基)-4，4',6，6'-四(三氟甲基)-l，l'-聯(lián)苯(R)-Tol-BINAP(R)-(+)-2，2'-雙(二對(duì)甲苯膦基)-l，l'-聯(lián)萘(S)-Tol-BINAP(S)-(+)-2，2'-雙(二對(duì)甲苯膦基)-1，1'-聯(lián)萘(R)-BIMP(R)-2，2'-雙(二苯膦基)-1'1-聯(lián)萘(S)-BINAP(S)-2，2'-雙(二苯膦基)-1'1-聯(lián)萘BIPHEP2，2'-雙(二苯膦基)-1，1'-聯(lián)苯(R)-Me0-BIPHEP(R)-(6，6'-二甲氧基聯(lián)苯-2，2'-二基)-雙(二苯基膦)(R)-C卜MeO-BIPHEP(R)-(+)-5,5'-二氯-6，6'-二甲氧基-2，2'-雙(二苯基膦基)-l，l'-聯(lián)苯(S)-Cl-MeO-BIPHEP(S)-(+)-5，5'-二氯-6，6'-二曱氧基-2，2'-雙(二苯基膦基)-1，1'-聯(lián)苯BisP*(S，S)-1,2-雙(叔丁基甲基膦基)乙烷(+)-tetraMeBITIANP(S)-(+)-2，2'-雙(二苯膦基)-4，4'，6，6'-四曱基-3，3'-二苯并[6]噻吩Bn卡基BnBr、BnCl芐基溴、芐基氯Boc叔丁氧基羰基B0P六氟磷酸苯并三唑-i-基氧基-三-(二甲氨基)-鱗(R)-(S)-BPPFA(-)-(R)-N,N-二曱基-l-((S)-1'，2-雙(二苯膦基)二茂鐵基)乙胺(R,R)-Et-BPE(+)-l，2-雙((2R，5R)-2，5-二乙基phospholano)乙烷(R，R)-Me-BPE(+)-l，2-雙((2R，5R)-2，5-二曱基phospholano)乙烷(S，S)-BPPM(-)-(2S，4S)-2-二苯膦基甲基-4-二苯膦基-1-叔丁氧基羰基吡咯烷BsBrosyl或?qū)︿灞铰吊；鵅un-BuLit-BuBuWBr—t-BuOKt-B感it-B函et-BuONa(+)-CAMP(R)-(+)-環(huán)己基(2-茴香基)曱基膦；-種單膦CARB0PH0S甲基-ot-D-葡萄吡喃糖苷-2，6-二苯曱酸酯-3，4_二(雙(3，5-二甲基苯基)次膦酸酯(phosphinite))Cbz節(jié)氧羰基CDIN，N-羰基二咪唑X轉(zhuǎn)化分?jǐn)?shù)CnTunaPHOS具有連接聯(lián)苯的6，6'碳原子的-0-(CH2)n-0-基團(tuán)的2，2'-雙-二苯基膦基-聯(lián)苯(例如，對(duì)n-4而言的(R)1，14-雙-二苯基膦基-6，7，8，9-四氫-5,10-二氧雜-二苯并[a，c]環(huán)癸烯)。COD1，5-環(huán)辛二烯(R)-CYCPHOS(R)-1，2-雙(二苯膦基)-l-環(huán)己基乙烷DABC01,4-二氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛烷DBAD偶氮二甲酸二叔丁酯DBN1，5-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-5-烯DBU1，8"^二氮雜雙環(huán)[5.4.O]十一-7-烯DCC二《己基碳化二酰亞胺de非對(duì)映異構(gòu)體過(guò)量DEAD偶氮二甲酸二乙酯(R，R)-DEGUPHOSN-爺基-(3R，4R)-3,4-雙(二苯膦基)吡咯烷DIAD偶氮二甲酸二異丙酯(R,R)-DI0P(4R,5R)-(-)-0-亞異丙基-2，3-二羥基-l，4-雙(二苯膦基)丁烷(R，R)-DIPAMP(R,R)-(-)-l，2-雙[(0-甲氧苯基)(苯基)膦基]乙烷DIPEA二異丙基乙胺(休尼格堿(Httnig'sBase))銨醚基基鋰丁卻鋰甲鈉4基四醇醇基醇基丁丁化丁丁K丁丁正叔溴叔叔叔叔DMAP4-(二甲氨基)吡啶DMF二曱基甲跣胺DMS0二甲亞砜DMT-隨氯化4-(4,6-二甲氧基-l，3，5-三嗪-2-基)-4-曱基嗎啉翁鎮(zhèn)(R，R)-Et-DUPHOS(-)-l，2-雙((2R，5R)-2，5-二乙基phospholano)苯(S，S)-Et-DUPHOS(-)-1，2-雙((2S，5S)-2，5-二乙基phospholano)苯(R，R)-i-Pr-DUPHOS(+)-l，2-雙((2R，5R)-2，5-二異丙基phospholano)苯(R，R)-Me-DUPHOS(—)-1,2-雙((2R，5R)-2，5-二曱基phospholano)苯(S，S)-Me-DUPHOS(-)-l，2—雙((2S，5S)-2，5—二曱基phospholano)苯E在經(jīng)歷化學(xué)反應(yīng)或轉(zhuǎn)化后化合物的各對(duì)映異構(gòu)體的對(duì)映選擇性值或特異性常數(shù)的比率EDCI1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺ee(eep或ees)對(duì)映異構(gòu)體過(guò)量(產(chǎn)物或反應(yīng)物)eq當(dāng)量cr對(duì)映異構(gòu)體的此率Et乙基Et3N三乙胺EtOAc乙酸乙酯Et20乙醚EtOH乙醇FDPP二苯基膦酸五氟苯酯(R，R)-Et-FerroTANE1，1'-雙((2R,4R)-2,4-二乙基phosphotano)二茂鐵9-勿基甲氧基羰基GC氣相色譜法H、min、s小時(shí)、分鐘、秒證ES4-(-羥基乙基).哌嗪-1-乙磺酸駆c乙^H0At1-羥基-7-氮雜苯并三唑H0BtN-羥基苯并三唑H0Dhbt3-羥基-3，4-二氫-4-氧基-1，2,3-笨并三嗪HPLC高效液相色譜法IAcOEt碘乙酸乙酯IPA異丙醇i-PrOAc乙酸異丙酯(R)-(R)-J0SIPH0S(R)-(-)-1-[00-2-(二苯膦基)二茂鐵基]乙基二環(huán)己基膦(S)-(S)-J0SIPH0S(S)-(-)-1-[(S)-2-(二苯膦基)二茂鐵基]乙基二環(huán)己基膦(R)-(S)-J0SIPH0S(R)-(-)-1-[(S)-2-(二苯膦基)二茂鐵基]乙基二環(huán)己基膦K畫(huà)S六甲基二硅氮烷鉀KFKarl—FischerKs、KrS或,R對(duì)映異構(gòu)體的一級(jí)速率常數(shù)S或,'R對(duì)^異構(gòu)體"米氏常數(shù)LAH氫化鋰鋁LC/MS液相色譜法/質(zhì)鐠LDA二異丙基氨基鋰LHMDS六曱基二硅氮烷鋰LICA異丙基環(huán)己基氨基鋰LTMP2，2,6，6-四甲基艱咬LU脂肪酶單位Me甲基MeCl2二氯曱烷Mel碘甲烷MEK曱基乙基酮或丁-2-酮MeOH甲醇MeONa甲4鈉MES2-N-嗎啉基乙磺酸(R，R)-t-buty卜(R，R)-l,2-雙(二叔丁基甲基膦基)甲烷miniPHOS(S,S)MandyPhos(S，S)-(-)-2，2'-雙[(R)-(N,N-二曱氨基)(苯基)曱基]-1，1'-雙(二苯膦基)二茂鐵(R)-MonoPhos(R)-(-)-[4,N，N-二甲氨基]二萘并[1，3，2]-dioxaphosphepin(R)-MOP(R)-(+)-2-(二苯膦基)-2'-甲氧基-l,1'-聯(lián)萘MOPS3-(N-嗎啉基)丙磺酸MPamegaPascalmp炫點(diǎn)Ms曱磺?；鵐TBE甲恭叔丁基醚NMPN-甲:基毗咯烷酮Nsnosyl或硝基苯碌?；?R,R)-NORPHOS(2R，3R)-(-)-2，3-雙(二苯膦基)雙環(huán)[2.2.1〗庚-5-烯(HT三氟甲磺酸根(三氟甲磺酸陰離子)PdCl2(dppf)2二氟[1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵]鈀(II)二氯曱烷加合物(R,S，R，S)-Me-PENNP(IR，2S，4R,5S)-2，5-二甲基-7-磷雜雙環(huán)[2.2.1]庚烷HOSPh苯基Ph3P三苯基膦Ph3As三苯基胂(R)-PHANEPHOS(R)-(-)-4，12-雙(二苯膦基)-[2.2]-對(duì)環(huán)芳(paracyclophane)(S)-PHANEPHOS(S)-(-)-4，12-雙(二苯膦基)-[2-2]-對(duì)環(huán)芳(R)-PNNPN，N'-雙[(R)-(+)-ct-曱基苯曱基]-N，N'-雙(二苯膦基)乙二胺PPh2-PhOx-Ph(R)-(-)-2-[2-(二苯膦基)苯基]-4-苯基-2-惡唑啉PIPES哌奉「l'4，雙(2-乙磺酸)Pr丙基i-Pr異丙基(R)-PROPHOS(R)—(+)-1，2-雙(二苯膦基)丙烷PyB0P六氟磷酸苯并三唑-l-基-氧基-三-N-吡咯烷基-憐(R)-QUINAP(R)-(+)-1-(2-二苯膦基-l-萘基)異喹啉RaNiRaney鎳RI折射率RT室溫(大致20r至25t:)s/c底物與催化劑的摩爾比Sp物種(R)-SpirOP(1R，5R,6R)-螺[4.4]壬-1，6-二基-二苯基亞膦酸醋；一種螺環(huán)次膦酸酯配體(R,R,S，S)TangPhos(R，R，S,S)l，l'-二叔丁基-[2,2']biphospholanylTAPSN-[三(羥基甲基)甲基]-3-氨基丙磺酸TATU四氟硼酸0-(7-氮雜苯并三唑-l-基)-l，1，3，3-四甲基跟故(R)-eTCFP脈塌(R)-2-{[(二叔丁基-磷基)-乙基]-甲基-phosphanyl)-2-甲基-丙烷(S)-eTCFP(S)-2-{[(二叔丁基-磷基)-乙基]-甲基-phosphanyl)-2-甲基-丙烷(R)-mTCFP(R)-2-{[(二叔丁基-磷基)-甲基]-甲基-phosphanyl)-2-甲基-丙烷(%)-mTCFP(S)-2-[(二叔丁基-磷基)-甲基]-甲基-phosphanyl)-2-曱基-丙烷T(mén)EA三&醇胺TESN-[5(幾基甲基)甲基]-2-氨基乙磧酸TfTriflyl或三氟甲基磺?；鵗FA三氟乙酸THF四氫吹喃TLC薄層色鐠法TMEDAN，N,N',N'-四甲基-1，2-乙二胺TMS三曱基甲硅烷基Tr三苯甲基TRICLNEN-[三(羥基甲基)甲基]甘氨酸Tris緩沖劑三(羥基曱基)氨基甲烷緩沖劑TRITONB氫氧化千基三曱基銨TRIZMA2-氨基-2-(羥基甲基)-1，3-丙二醇Ts曱苯磺?；?qū)醣交酋；鵳-TSA對(duì)甲苯磺酸v/v體積百分比w/w重量(質(zhì)量)百分比以下一些方案和實(shí)例可能省略了有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的常見(jiàn)反應(yīng)(包括氧化、還原等)、分離技術(shù)和分析程序的細(xì)節(jié)。這些反應(yīng)和技術(shù)的詳細(xì)資料可在許多論文中查到，包括RichardLarock的ComprehensiveOrganicTransformations(1999)，以及MichaelB.Smith等人編輯的多巻叢書(shū)，CompendiumofOrganiCsyntheticMethods(1974-2005)。在許多情況下，起始物質(zhì)和試劑可來(lái)自商業(yè)來(lái)源或可使用文獻(xiàn)方法進(jìn)行制備。一些反應(yīng)方案可能忽略由化學(xué)轉(zhuǎn)換產(chǎn)生的次要產(chǎn)物(例如，酯水解產(chǎn)生的醇，二酸脫羧基產(chǎn)生的C02等)。此外，在一些情況下，反應(yīng)中間體在未被分離或純化下(即就地)即可用于隨后步驟中。在以下一些反應(yīng)方案和實(shí)例中，某些化合物可使用保護(hù)基團(tuán)進(jìn)行制備，此方式可防止在另外的反應(yīng)性位點(diǎn)發(fā)生不必要的化學(xué)反應(yīng)。亦可使用保護(hù)基團(tuán)以提高溶解度或者在其它方面改良化合物的物理性質(zhì)。有關(guān)保護(hù)基團(tuán)策略的討論，用于裝上和除去保護(hù)基團(tuán)的材料和方法的描述和用于常見(jiàn)官能基(包括胺、羧酸、醇、酮、醛等)的可用保護(hù)基團(tuán)的匯編參見(jiàn)T.W.Greene與P.G.Wuts的ProtectingGroupsinOrganicChemistry(1999)和P.Kocienski的ProtectiveGroups(2000)，為所有目的其全文引入本文中作為參考。一般而言，在整個(gè)說(shuō)明書(shū)中所描述的化學(xué)轉(zhuǎn)換是使用大體上化學(xué)計(jì)量的量的反應(yīng)物進(jìn)行的，盡管某些反應(yīng)可受益于使用過(guò)量的一或多種反應(yīng)物。此外，在整個(gè)說(shuō)明書(shū)中所公開(kāi)的許多反應(yīng)是在約室溫和周?chē)鷫毫ο逻M(jìn)行的，但取決于反應(yīng)動(dòng)力學(xué)、產(chǎn)率等，一些反應(yīng)可在高壓下或采用較高(例如，回流條件)或較低(例如，-70匸至ox:)的溫度進(jìn)行。許多化學(xué)轉(zhuǎn)換亦可采用一或多種兼容性溶劑，此可影響反應(yīng)速率和產(chǎn)率。取決于反應(yīng)物的性質(zhì)，所述一或多種溶劑可為極性質(zhì)子性溶劑(包括水)、極性非質(zhì)子性溶劑、非極性溶劑或一些組合。在本公開(kāi)內(nèi)容中對(duì)化學(xué)計(jì)量范圍，溫度范圍、pH范圍等的任何提及，無(wú)論是否明確使用措辭"范圍"，亦包括所示的端點(diǎn)。一般而言且除非另有說(shuō)明，如果首次結(jié)合一式而定義的特定取代基識(shí)別符(R1、R2、R3等)，則所述相同取代基識(shí)別符隨后的式中使用時(shí)具有與先前式中相同的定義。因此，例如，如果第一式1中的R"為氫、鹵素或C卜6烷基，則除非有差別地說(shuō)明或在本文的上下文中清楚地以其它方式說(shuō)明，否則第二式1中的R"亦為氫、卣素或d—6烷基。本
發(fā)明內(nèi)容涉及用于制備以上式1的光學(xué)活性Y-氨基酸和其立體異構(gòu)體(例如，非對(duì)映異構(gòu)體和相對(duì)對(duì)映異構(gòu)體)和其藥學(xué)上可接受的絡(luò)合物、鹽、溶劑合物和水合物的材料和方法。所主張和公開(kāi)的方法可提供立體異構(gòu)體富集的且在許多情況下為純或大體上純的立體異構(gòu)體的式1的化合物(或其立體異構(gòu)體)。為清楚起見(jiàn)，本說(shuō)明書(shū)描述了用于制備具有特定立體化學(xué)構(gòu)型的中間體和最終產(chǎn)物的方法和材料。然而，通過(guò)使用具有不同立體化學(xué)構(gòu)型的起始物質(zhì)、拆分劑、手性催化劑等，這些方法可用于制備所公開(kāi)產(chǎn)物和中間體的相應(yīng)非對(duì)映異構(gòu)體和相反對(duì)映異構(gòu)體。式1的化合物具有至少兩個(gè)立體中心，如由楔形鍵所示，且包括如上所定義的取代基R1、W和R3。式l的化合物包括那些其中^和R2各自獨(dú)立為氫或曱基的化合物，其限制條件為r和R2不同時(shí)為氫；和那些其中W為d—6烷基(包括甲基、乙基、正丙基或異丙基)的化合物。式1的代表性化合物亦包括那些其中^為氫，112為甲基且113為甲基、乙基、正丙基或異丙基的化合物，即(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-庚酸、(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸、(3S，5R)-3-氨基曱基-5-甲基-壬酸或(3S，5R)-3-氨基甲基-5，7-二甲基-辛酸。所述后述化合物的代表性非對(duì)映異構(gòu)體為(3R，5R)-或(3S，5S)-3-氨基甲基-5-甲基-庚酸、(3R，5R)或(3S，5S)-3-氨基甲基-5-曱基-辛酸、(3R，5R)或(3S，5S)-3-氨基甲基-5-甲基-壬酸和(3R，5R)或(3S，5S)-3-氨基甲基-5，7-二曱基-辛酸;代表性相反對(duì)映異構(gòu)體為(3R，5S)-3-氨基曱基-5-甲基-庚酸、(3R，5S)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸，(3R,5S)-3-氨基甲基-5-甲基-壬酸和(3R，5S)-3-氨基甲基-5，7-二甲基-辛酸。方案1顯示兩種用于制備式1的化合物的方法。這些方法包括<吏手性醇(式2)與活化劑(式3)反應(yīng)。使所得的活化醇(式4)與2-氰基琥珀酸二酯(式5)反應(yīng)以得到具有由波狀鍵表示的第二立體中心的2-烷基-2-氰基琥珀酸二酯(式〖6)。隨后使直接連接至所述笫二不對(duì)稱(chēng)碳原子的酯部分(參看式6)裂解以得到3-氰基羧酸酯(式7)，所述3-氰基羧酸酯可通過(guò)與拆分劑抑或酶接觸而轉(zhuǎn)化為需要的最終產(chǎn)物(式1)。在前一方法中，使酯(式7)水解以得到3-氰基羧酸(式8)或鹽。使氰基部分(參看式8)還原經(jīng)酸化(如果需要)得到Y(jié)-氨基酸(式9)，所述Y-氨基酸可通過(guò)與拆分劑(例如，手性酸)接觸而拆分，接著分離需要的非對(duì)映異構(gòu)體鹽或游離氨基酸(式1)?；蛘?，使單酯(式7)的一個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體通過(guò)與酶接觸而非對(duì)映立體選擇性地水解，結(jié)果形成富集在C-3上具有所需的立體化學(xué)構(gòu)型的3-氰基羧酸或酯(式IO)的混合物。將酯或酸(式IO)與木需要的非對(duì)映異構(gòu)體(式ll)分離，且使其水解(如果需要)以得到純的或基本上純的3-氰基羧酸的非對(duì)映異構(gòu)體(式10a)，或者可使其轉(zhuǎn)化為鹽。使氰基部分還原經(jīng)酸處理(如果需要)得到式1的化合物。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage36</formula>方案I在式2、式4和式6至式12中的取代基R1、R'和r如以上式1中所定義；式3中的取代基Fr選自甲苯磺?；?、曱磺酰基、對(duì)溴苯磺?；?、對(duì)氯苯磺?；⑾趸交酋；?nosyl)和三氟甲基磺?；?；式4中的取代基R5為離去基團(tuán)(例如，R40-);且式3中的取代基X'為卣素(例如，C1)或R40-。式5至式7中的取代基W和R'各自獨(dú)立選自Ch烷基、C2—6烯基、Cw炔基、Cw環(huán)烷基、Cw環(huán)烯基、面代-Ch坑基、鹵代-C^烯基、g代-C2—6炔基、芳基-d-6烷基、芳基-Ch蹄基和芳基-Ch快基。式10和式11中的取代基118和R'各自獨(dú)立選自氫、C卜6烷基、Cw烯基、Cw炔基、Cw環(huán)烷基、Cw環(huán)烯基、卣代-CH烷基、由代-Cw烯基、面代-Ch快基，芳基-d-6烷基-、芳基-(V6蜂基和芳基-Ch炔基。其中上述芳基部分中的每一個(gè)任選被1至3個(gè)獨(dú)立選自C卜3烷基、Cw烷氧基、氨基、Cw烷基氨基和面素的取代基取代。X為合適的抗衡離子；優(yōu)選堿金屬；更優(yōu)選鈉。方案I中所示的手性醇(式2)在C-2上具有一個(gè)由楔形鍵所示的立體中心且包括如上所定義的取代基R1、W和R3。式2的化合物包括那些其中W和W各自獨(dú)立為氫或甲基的化合物，其限制條件為W與W不同時(shí)為氫；以及那些其中W為d—6烷基(包括甲基、乙基、正丙基或異丙基)的化合物。式2的代表性化合物亦包括那些其中IC為氫、W為甲基且W為甲基、乙基、正丙基或異丙基的化合物，即(R)-2-甲基-丁-l-醇、(R)-2-甲基-戊-l-醇、(R)-2-甲基-己-l-醇或(R)-2，4-二甲基-戊-l-醇。后述化合物的代表性相反對(duì)映異構(gòu)體為(S)-2-甲基-丁-l-醇、(S)-2-曱基-戊-l-醇、(S)-2-甲基-己-l-醇和(S)-2，4-二甲基-戊-l-醇。如方案I中所示，手性醇(式2)的羥基部分經(jīng)由與式3的化合物反應(yīng)而活化。反應(yīng)通常用過(guò)量(例如，約1.05eq至約1.1eq)活化劑(式3)在約-25匸至約室溫的溫度下進(jìn)行。可用活化劑包括磺?；瘎T如，TsCI、MsCI、BsCI、NsCI、TfCl等，和它們相應(yīng)的酐(例如，對(duì)甲苯磺酸酐)。因此，例如，在吡啶和非質(zhì)子性溶劑(諸如，EtOAc、MeCl2、ACN、THF和其類(lèi)似物)存在下，使式2的化合物與TsCl反應(yīng)得到(R)-甲苯-4-磺酸2-甲基-丁酯、(R)-甲苯-4-磺酸2-甲基-戊酯、(R)一甲苯-4-磺酸2-甲基-己酯和(R)-甲苯-4-磺酸2，4-二甲基-戊酯。同樣地，在非質(zhì)子性溶劑(諸如，MTBE、甲苯或MeCl2)和弱堿(諸如，Et3N)存在下，使式2的化合物與MsCI反應(yīng)得到(R)-甲磺酸2-甲基-丁酯、(R)-甲磺酸2-甲基-戊酯、(R)-甲磺酸2-甲基-己酯和(R)-甲磺酸2，4-二甲基-戊酯。羥基部分活化后，在堿和一或多種溶劑存在下，使所得中間體(式4)與2-氰基琥珀酸二酯(式5)反應(yīng)得到2-烷基-2-氰基琥珀酸二酯(式6)。式5的代表性化合物包括2-氰基-琥珀酸二乙酯。同樣地，式6的代表性化合物包括(2'R)-2-氰基-2-(2'一甲基-丁基)-琥珀酸二乙酯、(21)-2-氰基-2-(2'-甲基-戊基)-琥珀酸二乙酯、(2'R)-2-氰基-2-(2'-甲基-己基)-琥珀酸二乙酯，和(2'R)-2-氰基-2-(2'，4'-二甲基-戊基)-琥珀酸二乙酯。烷基化作用可在范圍為約室溫至回流、約70t:至1101C或約901C至約IOOX:的溫度下使用化學(xué)計(jì)量或過(guò)量的量(例如，約leq至約1.5eq)的堿和二酯(式5)進(jìn)行。代表性的堿包括第l族金屬的碳酸鹽(例如，CS2C。3和K2C03)、磷酸鹽(例如，K3P0J和烷氧化物(例如，21%Na0Et于EtOH中)和位阻非親核性堿(諸如，Et3N，t-BuOK、DBN、DBU等)。反應(yīng)混合物可包含單一有機(jī)相或可包含水相、有機(jī)相和相轉(zhuǎn)移催化劑(例如，四烷基銨鹽，諸如，Bu4N+Br-)。代表性有機(jī)溶劑包括極性質(zhì)子性溶劑，諸如，MeOH、EtQH、i-PrOH和其它醇；極性非質(zhì)子性溶劑，諸如，EtOAc、i-PrOAc、THF、MeCl2和ACN;和非極性芳族和脂族溶劑，諸如，曱苯、庚烷等。在烷基化后，使直接連接至第二不對(duì)稱(chēng)碳原子的酯部分(參看式6)裂解以得到3-氰基羧酸酯(式7)，諸如，(5R)-3-氰基-5-甲基-庚酸乙酯、(5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯、(5R)-3-氰基-5-甲基-壬酸乙酯和(5和)_3-氰基-5，7-二甲基-辛酸乙酯?？赏ㄟ^(guò)使二酯(式6)與氯化物鹽(例如，LiCl、NaCl等)在極性非質(zhì)子性溶劑(諸如，含水DMS0、NMP等)中且于約135X:或更高的溫度下(即Krapcho條件)反應(yīng)而除去酯?？墒褂酶邷囟?例如，150X:，160匸或更高)或使用相轉(zhuǎn)移催化劑(例如，Bii4N+Br-)以將反應(yīng)時(shí)間降低至24小時(shí)或更短。通常反應(yīng)釆用過(guò)量的氯化物鹽(例如^約l.leq至約4eq或約1.5eq至約3.5eq)。如方案I中所示且如上所表明，可通過(guò)與拆分劑接觸使-3-氰基羧酸酯(式7)轉(zhuǎn)化為需要的產(chǎn)物(式1)。在此方法中，經(jīng)由與酸或堿水溶液接觸使酯(式7)水解得到3-氰基羧酸(式8)或鹽。例如，可使用HC1、H2S04等且使用過(guò)量H20處理式7的化合物以得到式8的羧酸?；蛘撸墒褂脽o(wú)機(jī)堿水溶液(諸如，LiOH、K0H、NaOH、CsOH、Na2C03、K2C03、CS2C03等)，在任選的極性溶劑(例如，THF、MeOH、EtOH、丙酮、ACN等)中處理式7的化合物得到堿加成鹽，可使用酸處理所述堿加成鹽生成3-氰基羧酸(式8)。式$的代表性化合物包括(5R)-3-氰基-5-甲基-庚酸、(5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸、(5R)-3-氰基-5-曱基-壬酸和(5R)-3-氰基-5，7-二曱基-辛酸，及其鹽類(lèi)。隨后可使羧酸(式8)或其相應(yīng)鹽的氰基部分還原以在酸處理后(如果需要)得到Y(jié)-氨基酸(式9)。通過(guò)用弱酸(諸如，H0Ac水溶液)處理Y-氨基酸的鹽而獲得倒數(shù)第二步的游離酸。式9的代表性化合物包括(5R)-3-氨基甲基-5-甲基-庚酸、(5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸、(5R)-3-氨基曱基-5-甲基-壬酸和(5R)-3-氨基甲基-5，7-二甲基-辛酸，及其鹽類(lèi)。經(jīng)由在催化劑存在下與&反應(yīng)或經(jīng)由與還原劑(諸如，LiAlH4、BH3-Me2S等)反應(yīng)可使氰基部分還原。除Raney鎳和其它海棉狀金屬催化劑的外，潛在可用的催A劑包括非均勻催化劑，其含有約0.1%至約20%或約1%至約5%(按重量計(jì))的過(guò)渡金屬(諸如，Ni、Pd,Pt,Rh、Re、Ru和Ir，包括其氧化物和組合)，且其通常通過(guò)負(fù)載于各種材料上(包括Al20"C、CaC03、SrC03、BaS04、Mg0、Si02、Ti02、Zr02等)。這些金屬中的許多金屬(包括Pd)可摻雜胺、硫化物或第二金屬(諸如，Pb、Cu或Zn)。例示性催化劑因此包括鈀催化劑，諸如，Pd/C，Pd/SrC03、Pd/Al203、Pd/Mg0、Pd/CaC03、Pd/BaS04、Pd0、Pd黑、PdCl2等，其含有以重量計(jì)約1%至約5%的Pd。其它催化劑包括Rh/C，Ru/C、Re/C、Pt02、Rh/C、跳等。氰基部分的催化還原通常是在一或多種極性溶劑存在下進(jìn)行，這些極性溶劑包括但不限于水、醇、醚、酯和酸、諸如，MeOH、EtOH、IPA、THF、EtOAc和H0Ac。反應(yīng)可在范圍為約5匸至約IOOX:的溫度下進(jìn)行，盡管反應(yīng)通常在室溫下進(jìn)行。一般而言，以重量計(jì)，底物與催化劑的比率可在約1:1至約1000:1的范圍內(nèi)，且&壓力可在氣壓為約0psig至約1500psig的范圍內(nèi)。更通常而言，底物與催化劑的比率可在約4:1至約20:1的范圍內(nèi)，且&壓力可在約25psig至約150psig的范圍內(nèi)。如方案1中所示，拆分倒數(shù)第二步Y(jié)-氨基酸(式9)得到需要的立體異構(gòu)體(式l)?？山?jīng)由與拆分劑(諸如，對(duì)映體純或基本上純的酸或堿(例如，S-扁桃酸、S-酒石酸等))接觸得到一對(duì)可經(jīng)由(例如)重結(jié)晶或色譜法分離的非對(duì)映異構(gòu)體(例如具有不同溶解度的鹽)而拆分所述氨基酸(式9)。隨后可從適當(dāng)非對(duì)映異構(gòu)體經(jīng)由(例如)與堿或酸接觸或經(jīng)由溶劑分離(例如與EtOH、THF等接觸)，使具有需要的立體化學(xué)構(gòu)型的Y-氨基酸(式1)再生?？山?jīng)由在合適溶劑中多次重結(jié)晶進(jìn)一步富集需要的立體異構(gòu)體。除如上所述使用拆分劑之外，可經(jīng)由與酶作用將3-氰基羧酸酯(式7)轉(zhuǎn)化為需要的產(chǎn)物(式1)。如方案I中所示且如上討論，可經(jīng)由與酶接觸使單酯(式7)的一個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體非對(duì)映立體選擇性地水解，結(jié)果形成含有在C-3上具有所需立體化學(xué)構(gòu)型的3-氰基羧酸(或酶)(式IO)和在C-3上具有相反(不需要的)立體化學(xué)構(gòu)型的3-氰基羧酸酯(或酸)(式ll)的混合物。式10的代表性化合物包括(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-庚酸、(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸、(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-壬酸和(38，510-3-氰基-5，7-二曱基-辛酸，及其鹽類(lèi)，以及上述化合物的CH烷基酯，包括(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-庚酸乙酯、(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯、(3S，5R)-3-氰基-5-曱基-壬酸乙酯和(3S，5R)-3-氰基-5，7-二曱基-辛酸乙酯。式11的例示性化合物包括(3R，5R)-3-氯基-5-甲基-庚酸，(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸，(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-壬酸和(3R，5R)-3-氰基-5，7-二甲基-辛酸及其鹽類(lèi)，以及上述化合物的C"烷基酯，包括(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-庚酸乙酯、(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯、(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-壬酸乙酯和(3R，5R)-3-氰基-5，7-二曱基-辛酸乙酯。對(duì)用于拆分需要的非對(duì)映異構(gòu)體(式10)的酶(生物催化劑)的選擇取決于底物(式7)和生物轉(zhuǎn)化產(chǎn)物(式10或式11)的結(jié)構(gòu)。底物(式7)包含兩種在C-3上具有相反立體化學(xué)構(gòu)型的非對(duì)映異構(gòu)體(式13和式14),<formula>formulaseeoriginaldocumentpage41</formula>在式13和式14中，取代基R1、W和W如以上式1和式5中所定義。所述酶使所述兩種非對(duì)映異構(gòu)體(式13或式14)中之一立體選擇性水解。因此，所述酶可為任何在對(duì)式13的化合物僅有很小或沒(méi)有影響的同時(shí)催化式14的化合物水解得到式11的3-氰基羧酸(或鹽)的蛋白質(zhì)。或者，所述酶可為任何在對(duì)式14的化合僅有很小或沒(méi)有影響的同時(shí)催化式13的化合物水解得到式10的3-氰基羧酸(或鹽)的蛋白質(zhì)。用于使式13或式14的化合物分別非對(duì)映立體選擇性水解為式10或式11的化合物的可用的酶因此包括水解酶，包括脂肪酶、某些蛋白酶和其它立體選擇性酯酶。這些酶可得自多種天然來(lái)源，包括動(dòng)物器官和微生物。參看(例如)市售水解酶的非限制性列表-表2。表2.市售可獲得的水解酶酵商品名豬胰腺脂肪酶CAL-A，凍干解脂念珠菌(Candidalipolytica)脂肪酶CAL-B，凍干"念珠地絲菌(Geotrichumcandidum))脂肪酶Pseudomonasaroginosag月旨肪膝假單胞菌屬(PseudomonasSp.)酯酶黑曲霉(Aspergillusniger)脂肪酶洋蔥-4白克霍爾德氏菌(Burkholderiacepacia)月旨肪酶熒光假單孢菌(Pseudomonasfluoresceins)月旨肪酶皺落念^菌(Candidarugosa)脂肪酶德氏根霉(Rhizopusdelemar)月旨脈酶米根霉(Rhizopusoryzae)脂肪酶沙門(mén)柏千酪青霉(Penici11iumcamembertii)脂肪酶Altus03Altus11Altus12Altus13Altus28Altus50AmanoCholesterolEsterase2Amano月旨肪酶ASAmano月旨脈酶AHAmano月旨肪酶AK20Amano脂肪酶AYSAmano月旨肪酶DAmano脂肪酶F-AP15Amano月旨肪酶G50爪哇毛霉(Mucorjavanicus)脂脒酶洋蔥伯克霍爾德氏菌(Burkholderiacepacia)脂肪酶洋蔥伯克霍爾德氏菌(Burkholderiacepacia)脂肪醉洋蔥伯克霍爾德氏菌(Burkholderiacepacia)脂肪酵洋蔥伯克霍爾德氏菌(Burkholderiacepacia)脂肪酶洋蔥伯克霍爾德氏菌(Burkholderiacepacia)脂肪酵婁地青霉(PeniciIliumroqueforti)脂肪酶洋蔥伯i霍爾德氏菌(Burkholderiacepacia)脂肪酵曲霉菌(Aspergillus)屬蛋白酶假單胞菌屬脂肪酶真菌脂肪酶微生物，凍干脂肪酶，CAL-B，凍干'念珠菌(Candida)屬，凍干CAL-A，凍千嗜熱霉(Thermomyces)屬脂肪酶產(chǎn)堿桿菌(Alcaligines)屬，凍干脂肪酶粘稠色桿菌(Chromobacteriumviscosum)月旨肪酶CAL-B，L2Sol柱狀念珠菌(Candidacylindrac6a)月旨肪酶產(chǎn)肌念珠菌(Candidautilis)脂肪酶雪白根霉(Rhizopusniveus)月旨肪酶豬胰脂肪酶假單胞菌(Pseudomonas)屬脂蛋白脂肪酶細(xì)毛嗜熱霉(Thermomuceslanuginosus)月旨肪酶細(xì)毛嗜熱霉(Thermomuceslanuginosus)月旨肪酶曼赫根毛霉(Rhizomucormiehei)脂肪酶假單胞菌屬脂肪酶麥胚脂肪酶■少才^t艮霉(Rhizopusarrhizus)脂肪酶胰脂肪酶250木瓜凝乳蛋白酶黑曲霉(Aspergillusniger)蛋白酶米曲i(Aspergillusoryzae)蛋白酶青霉^(Penicillium)屬蛋白酶曲霉菌(Aspergillus)屬蛋白酶腎素小牛胃蛋白酶A邁ano月旨脈酵M10Amano脂肪酶PSAmano月旨肪酶PS-SDAmano脂肪酶PS-CIAmano脂肪酶PS-CIIAmano脂肪酶PS-DIAmano月旨肪酶RAmano月旨肪酶SBioCatalytBioCatalytBioCatalytiBioCatalytBioCatalytBioCatalytBioCatalytics101ics103cs105ics108ics110ics111ics112BioCatalytics115BioCatalytics117Altus26ChriazymeL2SolFluka62302Fluka6SigmaL8SigmaL12SigmaL13SigmaLipolaseSigmaL10Novo871SigmaL6Palatasesig咖L14XIII型SigmaLllSigmaL7XI型ValleyResearchVIAltus33Altus38Altus40Altus41Altus42Altus43Altus45SigmaP24嘉士伯枯草桿菌蛋白酶(Subti1isinCarlsbergProtease)遲緩芽胞桿菌(Bacilluslentus)蛋白酶真菌蛋白酶真菌蛋白酶細(xì)菌蛋白酶蛋白酶細(xì)菌蛋白酶細(xì)菌蛋白酶細(xì)菌蛋白酶細(xì)菌蛋白酶黑曲霉(Aspergillusniger)蛋白酶雪白根霉(Rhizopusniveus)蛋白酶雪白根霉(Rhizopusniveus)蛋白酶米根霉(Rhizopusoryzae)蛋白酶枯草芽胞桿菌(Bacillussubtilis)蛋白酶米曲霉(Aspergillusoryzae)蛋白酶米曲i(Aspergfflusoryzae)蛋白酶枯草芽胞桿菌(Bacillussubtilis)蛋白酶蜂蜜曲霉(Aspergillusmelleus)蛋白酶嗜熱月旨肪芽孢桿菌(Bacillusstearothemophilus)蛋白酶豬肝酯酶，凍干豬肝酯酶，凍干鏈霉菌(Streptomyces)屬蛋白酶白i軸酶Tritirachiumalbum)蛋白酶灰色鏈霉菌(Str印tomycesgriseus)蛋白酶溶組織梭菌(Clostridiumhistolyticum)'蛋白酶牛腸蛋白酶豬腸蛋白酶芽孢桿菌(Baci1lus)屬蛋白酶米曲霉(Aspergillusoryzae)蛋白酶解淀粉芽孢扦菌(Bacillusamyloliquefaciens)蛋白酶Caricapapaya蛋白酶嗜熱解朊芽孢桿菌蛋白酶(Baci1lusthermoproteolyticusrokko)激烈火球菌(Pyrocoecusfuriosis)蛋白酶芽孢桿菌(Bacillus)屬蛋白酶牛胰蛋白酶多粘芽孢桿菌(Bacilluspolymyxa)蛋白酶地衣余孢桿菌(Baci1lus1icheniformis)蛋白酶齋藤曲霉(Aspergillussaitoi)蛋白酶4油曲i(Aspergillussoyae)蛋白酶Altus10Altus53Genencor真菌蛋白酶500,000GenencorFungal蛋白酶濃縮物GeneneorProtexGenencor蛋白酶899GeneneorMultifectP3000GenencorPrimatanGenencorPurafect(權(quán)OL)GenencorMultifectNeutralAmanoAcid蛋白酶AAnianoAcid蛋白酶IIAmartoNewlaseFAmanoPeptidaseRAmanoProleatherFGFAmano蛋白酶AAmano蛋白酵MAmano蛋白酶NAmano蛋白酶PIOAmano蛋白酶SGBioCatChirazymeElBioCatChirazymeE2BioCatalytics118FlukaP6ProteinaseKSigmaP18a胰凝乳蛋白酶ISigmaP16BacterialSigmaP21P胰凝乳蛋白酶SigmaP13ClostripainSigmaP17EnteropeptidaseSigmaP25EnteropeptidaseSigmaP8EsperaseSigmaPIFlavourzymeSigmaP5NeutraseSigmaP12PapainSigmaP10蛋白酶SigmaP14蛋白酶SSigmaP9SavinaseSigmaPI91型(粗制)SigmaP7IX型SigmaP6VIII型SigmaP3XIII型SigmaP4XIX型米曲霉(Aspergillusoryzae)蛋白酶細(xì)菌蛋白酶根霉(Rhizopus)屬新脂肪酶米曲霉(Aspergi1lusoryzae)蛋白酶鳳梨[Ananascomosus&Anauas'brecteatus曲霉菌(Aspergilus)屬?；D(zhuǎn)移酶豬腎?；D(zhuǎn)移酶青霉素G酰基轉(zhuǎn)移酶得自米黑毛霉(Mucormeihei)的酯酶皺落念珠菌(Candidarugosa)酯酶豬胰彈性蛋白酶乙酰膽堿酯酶膽固醇酯酶PLE-硫酸銨兔肝酯酶假單胞菌(Pseudomonas)屬膽固醇酯酶說(shuō)明書(shū)第37/72頁(yè)SigmaP2XXIII型SigmaPllXXIV型Sigmal5NewlaseValidaseFP濃縮物(L)]Bromelian濃縮物AmanoAmiSigmaA-S2?；D(zhuǎn)移酶IAltus06FlukaE5Altus31Altus35SigmaES8BioCatalytiesE3BioCatalyties123SigmaES2SigmaES4如實(shí)例部分中所示，可用于使被氰基取代的酯(式13或式14)的非對(duì)映立體選擇性轉(zhuǎn)化為式IO或式11的羧酸(或鹽)的酶包括脂肪酶。特別可用于使式14的被氰基取代的酯轉(zhuǎn)化為式11的羧酸(或鹽)的脂肪酶包括源自微生物洋蔥伯克霍爾德氏菌(肋ri:力o/^Wacepflc/a)(以前稱(chēng)為洋蔥假單胞菌C^ew^W70/7fl《ee/ac/a))的酶，諸如那些可自AmanoEnzymeIne.購(gòu)得的商品名為PS、PS-SD、PS-CI、PS-CII、PS-DI和S的酶。這些酶可以自由流動(dòng)粉末(PS)形式或凍干粉末(S)形式獲得，或可固定于陶瓷顆粒(PS-CI和PS-CII)或硅藻土(PS-DI)上。它們具有在約30KLu/g(PS)至約2，200KLu/g(S)范圍內(nèi)的脂解活性。自AmanoEnzymeInc.購(gòu)得的脂肪酶PS-SD為用于本發(fā)明的方法中的優(yōu)選酶。特別可用于使式13的被氰基取代的酯轉(zhuǎn)化為式10的羧酸(或鹽)的脂肪酶包括源自微生物細(xì)毛嗜熱霉(r力ei7Z70/Z77CeS/3力"纟//70《^)的酶，諸如那些自Novo-NoEdis^A/S購(gòu)得的商品名為L(zhǎng)IP0LASE⑧的酶。LIP0LASE⑧酶可通過(guò)浸沒(méi)發(fā)酵米曲霉C^/7ei^/7/"s0r7we)微生物而獲得，所述種米面霉微生物用來(lái)自編碼脂肪酶的氨基酸序列的細(xì)毛嗜熱霉(7^ei7so邊yces/fl;7"gi/20^/i)DSM4109的DM進(jìn)行遺傳修飾。LIP0LASE100L和LIP0LASE⑧100T可分別以液體溶液和粒狀固體形式獲得，其各具有100kLU/g的標(biāo)稱(chēng)活性(norminalactivity)。其它形式的LIPOLASE⑧包括活性為L(zhǎng)IPOLASE100L的一半的LIPOLASE50L和活性與LIPOLASE100L相同但為食品級(jí)的LIPOZYMEIOOL。各種篩選技術(shù)可用于鑒別合適的酶。舉例而言，可使用下面在實(shí)例部分中所述的高通量篩選技術(shù)篩選大量市售的酶?？墒褂酶患蛛x技術(shù)'歸選其它酶(或酶的微生物來(lái)源)。這些技術(shù)通常涉及使用用富集底物補(bǔ)充的碳有限或氮有限的培養(yǎng)基，所述富集底物可為底物(式7)或結(jié)構(gòu)上相似的化合物。可基于微生物在含有富集底物的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的能力來(lái)選擇潛在可用的微生物以用于進(jìn)一步研究。隨后通過(guò)使微生物細(xì)胞的懸浮液與未被拆分的底物接觸且使用分析方法(諸如，手性HPLC、氣相-液相色鐠法、LC/MS等)測(cè)試需要的非對(duì)映異構(gòu)體(式10)的存在來(lái)評(píng)估這些微生物立體選擇性催化酯水解的能力。一旦已經(jīng)分離出具有必需水解活性的微生物，即可采用酶工程以改善其所產(chǎn)生的酶的性質(zhì)。例如但不限于，可使用酶工程以增加產(chǎn)率和酯水解的非對(duì)映立體選擇性，使酶的溫度和pH操作范圍加寬，和改良酶對(duì)有機(jī)溶劑的耐受性?？捎玫拿腹こ碳夹g(shù)包括合理設(shè)計(jì)方法(諸如定點(diǎn)突變)和利用連續(xù)多輪隨機(jī)突變，基因表達(dá)以及高通量篩選以?xún)?yōu)化所需性質(zhì)的體外定向進(jìn)化技術(shù)。參看，例如K.M.Koeller&C.-H.Wong,"Enzymesforchemicalsynthesis,"Nature409:232-240(2001年l月11日)和在此處所引用的參考文獻(xiàn)，其完整的公開(kāi)內(nèi)容以引用的方式并入本文中。酶可呈完整微生物細(xì)胞、透性化微生物細(xì)胞、微生物細(xì)胞的提取物、部分純化的酶、純化的酶等。以體積計(jì)，酶可包含平均粒徑小于約0.lmm(細(xì)分散體)或約0.lmm或更大(粗分散體)的顆粒的分散體。粗酶分散體提供優(yōu)于細(xì)分散體的潛在加工優(yōu)勢(shì)。例如，粗酶顆?？稍诜峙ㄖ谢蛟诎脒B續(xù)或連續(xù)方法中重復(fù)使用，或比酶的細(xì)分散體通常更易于從生物轉(zhuǎn)化的其它組份中分離(例如通過(guò)過(guò)濾)?？捎玫拇置阜稚Ⅲw包括主要包含酶的交聯(lián)酶結(jié)晶(CLEC)和交聯(lián)酶聚集體(CLBA)。其它粗分散體可包括固定于不溶性支撐物之上或之內(nèi)的酶。可用固體支撐物包括包含海藻酸鉤、聚丙烯酰胺、EUPERG1T和其它聚合材料的聚合物基質(zhì)和無(wú)機(jī)基質(zhì)，諸如CELITE⑧。有關(guān)CLEC和其它酶固定技術(shù)的一般描述參看M.A.Navia&N.L.St.Clair的美國(guó)專(zhuān)利5,618,710。有關(guān)CLEA的一般描述，包括它們的制備和用途參看L.Cao&J.Elzinga等人的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)2003/0149172。有關(guān)將CLEC和CLEA技術(shù)應(yīng)用于脂肪酶的論述還可參見(jiàn)A.M.Anderson的BiocatBiotransform,16:181(1998)和P.L6pez-Serrano等人的Bioteehnol,Lett.2,:1379-83(2002)。為所有目的，上述參考文獻(xiàn)的完整公開(kāi)內(nèi)容以引用的方式并入本文中。反應(yīng)混合物可包含單一相或可包含多相(例如，兩相系統(tǒng)或三相系統(tǒng))。因此，例如，方案I中所示的非對(duì)映立體選擇性水解可在單一水相中發(fā)生，所述單一水相含有酶、底物(式7)、需要的非對(duì)映異構(gòu)體(式IO)和不需要的非對(duì)映異構(gòu)體(式11)?；蛘撸磻?yīng)混合物可包含多相系統(tǒng)，所述多相系統(tǒng)包括接觸固相(例如，酶或產(chǎn)物)的水相、接觸有機(jī)相的水相或接觸有機(jī)相和固相的水相。例如，非對(duì)映立體選擇性水解可在包含固相和水相的兩相系統(tǒng)中進(jìn)行，所述固相含有酶，且所述水相含有底物(式7)、需要的非對(duì)映異構(gòu)體(式IO)和不需要的非對(duì)映異構(gòu)體(式ll)?；蛘撸菍?duì)映立體選擇性7JC解可在包含固相、有機(jī)相和水相的三相系統(tǒng)中進(jìn)行，所述固相含有酶，所述有機(jī)相含有底物(式7)，且所述水相一開(kāi)始即含有底物的少量級(jí)分。在某些情況下，需要的非對(duì)映異構(gòu)體(式10)為羧酸，其具有較未反應(yīng)的酯(式14)低的pKa。因羧酸呈現(xiàn)較高的水溶解性，故有機(jī)相發(fā)生未反應(yīng)的酯(式")的富集，同時(shí)水相發(fā)生需要的羧酸(或鹽)的富集。在其它情況下，不需要的非對(duì)映異構(gòu)體(式ll)為羧酸，故有機(jī)相發(fā)生需要的未反應(yīng)的酯(式13)的富集，同時(shí)水相發(fā)生不需要的羧酸(或鹽)的富集。優(yōu)選地，使不需要的非對(duì)映異構(gòu)體(式ll)選擇性水解為羧酸，羧酸在水相中為可溶的，同時(shí)使需要的非對(duì)映異構(gòu)體(式10的酯)未反應(yīng)且仍留在有機(jī)相中。在立體選擇性水解中使用的底物(式7)和生物催化劑的量將特別取決于被氰基取代的酯和酶的性質(zhì)。然而，一般而言，反應(yīng)可采用初始濃度為約0.1M至約5.0M的底物，且在許多情況下，底物的初始濃度為約0.1M至約l.OM。此外，反應(yīng)可通常采用約1%至約20%的酶載量，且在許多情況下，可采用約5%至約15%(重量/重量)的酶栽量。立體選擇性水解可在一定溫度和pH的范圍內(nèi)進(jìn)行。例如，反應(yīng)可在約iox:至約6ot:的溫度下進(jìn)行，但通常在約室溫至約45ic的溫度下進(jìn)行。在合理量的時(shí)間內(nèi)(例如，約1小時(shí)至約48小時(shí)或約1小時(shí)至約24小時(shí))，這樣的溫度通常以約80%或更高(例如98%)的de(3S，5R非對(duì)映異構(gòu)體)使底物(式7)基本上完全轉(zhuǎn)化(例如，約42%至約50%)，同時(shí)酶未失活。此外，立體選擇性水解可在約5的pH至約11的pH下進(jìn)行，更通常在約6的pH至約9的pH下進(jìn)行，且經(jīng)常在約6.5的pH至約7.5的pH下進(jìn)行。在未控制pH的情況下，因隨著底物(式7)水解的進(jìn)行會(huì)生成羧酸(式10或式11)，故反應(yīng)混合物的pH將下降。為補(bǔ)償這種改變，可在控制內(nèi)部pH的情況下(例如在合適緩沖劑存在下)進(jìn)行水解反應(yīng)，或可在通過(guò)添加堿控制內(nèi)部pH的情況下進(jìn)行水解反應(yīng)。合適緩沖劑包括碳酸氫鈉、磷酸鉀、磷酸鈉、乙酸鈉,、乙酸銨、乙酸鈣、BES、BICINE、HEPES、MES、MOPS、PIPES、TAPS、TES、TRICINE、Tris、TRIZMA⑧或其它pKa為約6至約9的緩沖劑。緩沖劑濃度通常在約5mM至約lmM的范圍內(nèi)，且通常在約50mM至約200mM的范圍內(nèi)。合適堿包括包含KOH、NaOH、麗4011等的水溶液，所述水溶液的濃度在約0.SM至約15M的范圍內(nèi)，或更通常在約5M至約IOM的范圍內(nèi)。也可使用其它無(wú)機(jī)添加劑，諸如乙酸鉤。在底物(式7)發(fā)生酶轉(zhuǎn)化之后或期間，使用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)從產(chǎn)物混合物分離出需要非對(duì)映異構(gòu)體(式10)。例如，在單一(水)相分批反應(yīng)的情況下，可使用有機(jī)溶劑(諸如，己烷、庚烷、MeCl2、甲苯、MTBE、THF等)一或多次萃取產(chǎn)物混合物，此舉使分別在水(有機(jī))和有機(jī)(水)相中的在C-3上具有需要立體化學(xué)構(gòu)型的酸(酯)(式10)從不需要的酯(酸)(式ll)中分離。或者，在采用富集酸或酯的水相和有機(jī)相的多相反應(yīng)的情況下，可在反應(yīng)后以分批方式分離兩種非對(duì)映異構(gòu)體(式10和式11)，或可在立體選擇性水解期間半連續(xù)或連續(xù)地分離兩種非對(duì)映異構(gòu)體。如方案1中所示，一弄需要的非對(duì)映異構(gòu)體(式IO)從反應(yīng)混合物分離，即任選使用以上與式7的化合物的酯水解相關(guān)的條件和試劑對(duì)其進(jìn)行水解。隨后可使所得羧酸(式1Qa)或其相應(yīng)鹽的氰基部分還原，經(jīng)酸處理后(如果需要)得到需要的Y-氨基酸(式1)。所述還原可采用與以上所述的用于使式8的化合物的氰基部的分還原相同的條件和試劑且可在不分離式10a的氰基酸的情況下進(jìn)行。式10a的代表性化合物包括(3S，5R)-3-氰基-5-曱基-庚酸、(3S,5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸、(3S,5R)-3-氰基-5-曱基-壬酸和(3S，5R)-3-氰基-5，7-二甲基-辛酸，及其鹽類(lèi)。如方案I中所示，可使需要的非對(duì)映異構(gòu)體(式10)轉(zhuǎn)化為適當(dāng)鹽，優(yōu)選轉(zhuǎn)化為堿金屬鹽。隨后使所得鹽的氰基部分還原以得到需要Y-氨基酸(式l)的鹽。所述承原可采用與以上所述的用于使式8的化合物的氰基部分的還原相同的條件和試劑。接著可進(jìn)一步將所得式1的化合物的鹽轉(zhuǎn)化為游離酸或轉(zhuǎn)化為其藥學(xué)土可接受的鹽、溶劑合物或水合物。式10a的化合物的優(yōu)選鹽為(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸的鈉鹽?？墒褂酶鞣N方法制備方案1中所示的手性醇(式2)。例如，可使用以上所述的與式7的化合物的酶拆分有關(guān)的條件和試劑通過(guò)外消旋酯的立體選擇性的酶介導(dǎo)的水解來(lái)制備手性醇。例如，在水解酶(例如，脂肪酶)和水存在下可使正癸酸2-甲基-戊酯水解以得到純的(或基本上純的)手性醇(R)-2-甲基-戊-l-醇，其可通過(guò)分餾而與非手性酸和未反應(yīng)的手性酯(正癸酸和(S)-戊酸2-曱基-戊酯)分離。酯底物可使用本領(lǐng)域中已知的方法由相應(yīng)外消旋醇(例如2-甲基-戊-l-醇)和酰氯(例如正癸酰氯)或酐制備。或者，可通過(guò)被適當(dāng)取代的2-鏈烯酸的不對(duì)稱(chēng)合成制備手性醇(式2)。例如，可在手性催化劑存在下，使2-曱基-戊-2-烯酸(或其鹽)氫化以得到(R)-2-甲基-戊烯酸或其鹽，其可直接用LAH還原得到(R)-2-曱基-戊-l-醇，或轉(zhuǎn)化為混合酐或酰氯，且接著以NaBH,還原得到手性醇。潛在可用的手性催化劑包括與過(guò)渡金屬(諸如釕、銠、銥或鈀)結(jié)合的環(huán)狀或非環(huán)狀手性膦配體(例如，單膦，雙膦、bisphospholane等)或亞膦酸酯配體。Ru-、Rh-、Ir-或Pd-膦、亞膦酸酯或膦基惡唑啉絡(luò)合物具有光學(xué)活性，因?yàn)樗鼈兙哂惺中粤自踊蜻B接至磷原子的手性基團(tuán)，或因?yàn)樵贐INAP和類(lèi)似轉(zhuǎn)阻異構(gòu)配體的情況下其具有軸向手性。例示性手性配體包括BisP*;(R)-BINAPINE;(S)-Me-二茂鐵-縮酮磷(Ketalphos)，(R，R)-DI0P;(R，R)-DIPAMP;(R)-(S)-BPPFA;(S，S)-BPPM;(+)-CAMP;(S，S)-CHIRAPHOS;(R)-PR0PH0S;(R，R)-N0RPH0S;(R)-BINAP;(R)-CYCPH0S;(R，R)-BDPP;(R，R)-DEGUPHOS;(R，R)-Me-DUPHOS;(R，R)-Et-DUPHOS;(R，R)-i-Pr-DUPHOS;(R，R)-Me-BPE;(R，R)-Et-BPE(R)-PNNP;(R)-BICHEP;(R，S，R，S)-Me-PENNPHOS;(S，S)-BICP;(R，R)-Et-FerroTANE;(R，R)-叔丁基-miniPHOS;(R)-Tol-BINAP;(R)-M0P;(R)-QUINAP;CARB0PH0S;(R)-(S)-J0SIPH0S;(R)-PHANEPHOS;BIPHEP;(R)-Cl-MeO-BIPHEP;(R)-MeO-BIPHEP;(R)-MonoPhos;BIFUP;(R)-SpirOP;(+)-TMBTP;(+)-tetraMeBITIANP;(R，R，S，S)TANGPhos;(R)-PPh廣PhOx-Ph;(S，S)MandyPhos;(R)-eTCFP;(R)-mTCFP和(R)-CnTunaPHOS，其中n為1至6的整數(shù)。其它手性配體包括(R)-(-)-卜[(S)_2-(二(3，5-雙三氟甲基苯基)膦基)二茂鐵基]乙基二環(huán)己基-膦；(R)-(-)-l-[(S)-2-(二(3，5-雙-三氟甲基苯基)膦基)二茂鐵-基]乙基二(3，5-二甲基苯基)膦；(R)-(-)-1-[(S)-2-(二-叔丁基膦基)二茂鐵基]乙基二(3，5-二甲基苯基)膦；(R)-(-)-l-[(S)-2-(二環(huán)己基膦基)二茂鐵基]乙基二叔丁基膦；(R)-(-)-1-[(S)-2-(二環(huán)己基膦基)二茂鐵基]乙基二環(huán)己基膦(R)-(-)-l-[(S)-2-(二環(huán)己基膦基)二茂鐵基]乙基二苯基膦；(R)-(-)-1-[(S)-2-(二(3，5-二甲基-4-甲氧基苯基)膦基)二茂鐵基]乙基二環(huán)己基膦；(R)-W-1-[(S)-2-(二苯基瞵基)二茂鐵基]乙基二叔丁基膦；(R)-N-[2-(N，N-二甲氨基)乙基]-N-曱基-l-[(S)-l'，2-雙(二苯膦基)二茂鐵基]乙胺；(R)-(+)-2-[2-(二苯膦基)苯基]-4-(l-甲基乙基)-4，5-二氫惡唑；{1-[((R，R)-2-爺基-phospholany1)-苯-2-基]-(R'，R')-phospholanyl-2-基)-苯基-甲烷，和(1-[((R，R)-2-節(jié)基-phospholany1)-乙基]-(R',R')-phospholan-2-基卜苯基-曱坑。可用配體可還包括在的前段落中所述的手性配體的立體異構(gòu)體(對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體)，其可通過(guò)反轉(zhuǎn)給定配體的所有或某些立體生成中心或通過(guò)反轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)阻異構(gòu)配體的立體生成軸而獲得。因此，例如，可用的手性配體可亦包括(S)-Cl-MeO-BIPHEP;(S)-PHANEPHOS;(S，S)-Me-DUPH0S:(S，S)rEt-DUPHOS;(S)-BINAP;(S)-Tol-BINAP;(R)-(R)-J0SIPH0S;(S)-(S)-J0SIPH0S:(S)-eTCFP;(S)-mTCFP等。許多手性催化劑、催化劑前體或手性配體可自商業(yè)來(lái)源獲得或可使用已知方法制備。催化劑前體或預(yù)催化劑為可在使用前轉(zhuǎn)化為手性催化劑的一種化合物或一組化合物。催化劑前體通常包含在抗衡離子X(jué)—(諸如，0Tr、PF6—、BF「、SbF6—、C10,等)存在下與膦配體和二烯(例如，降冰片二烯(norboradiene)、C0D、(2-甲基烯丙基)2等)或卣素(Cl或Br)或二烯和卣素絡(luò)合的Ru、Rh、Ir或Pd。因此，例如，包含絡(luò)合物[(雙膦配體)Rh(C0D)]T的催化劑前體可通過(guò)在MeOH中使二烯(COD)氫化以得到[(雙膦配體)Rh(Me0H)2]+X—而轉(zhuǎn)化為手性催化劑。MeOH隨后被烯酰胺(式2)或烯胺(式4)置換，經(jīng)對(duì)映選擇性氫化為需要的手性化合物(式3)。手性催化劑或催化劑前體的實(shí)例包括(+)-TMBTP-釕(II)氯化物丙酮絡(luò)合物(S)-Cl-Me0-BIPHEP-釕(II)氯化物EUN絡(luò)合物；(S)-BINAP-釕(II)Br2絡(luò)合物；(S)-tol-BINAP-釕(II)Br2絡(luò)合物；[((3R4R)-3，4-雙(二苯膦基)-l-甲基吡咯啶)-銠-(1，5-環(huán)辛二烯)]-四氟硼酸絡(luò)合物[((R，R，S,S)-TANGPhos)-銠(I)-雙(1，5-環(huán)辛二烯)]-三氟甲烷磺酸絡(luò)合物；[(R)-BINAPINE-銠-(1，5-環(huán)辛二烯)]-四氟硼酸絡(luò)合物；[(S)-eTCFP-(1，5-環(huán)辛二烯)-銠(I)]-四氟硼酸絡(luò)合物和[(S)-mTCFP-(1，5-環(huán)辛二烯)-銠(I)]-四氟硼酸絡(luò)合物。對(duì)特定手性催化劑和氫化底物而言，底物與催化劑的摩爾比(s/c)取決于H2壓力、反應(yīng)溫度和溶劑(如果存在)。通常，底物與催化劑的比率大于約100:1或200:1,且底物與催化劑的比率為約1000:1或2000:1是常見(jiàn)的。盡管手性催化劑可重復(fù)利用，更高的底物與催化劑的比率更為有效。例如，約1000:1、10，000:1和20，000:1或更高的底物與催化劑的比率將是有效的。不對(duì)稱(chēng)氫化通常在約室溫或室溫以上進(jìn)行，且在H2壓力約1QkPa(0.latm)或更高壓力下進(jìn)行。反應(yīng)混合物的溫度可在約20C至約80X:的范圍內(nèi)且&壓力可在約10kPa至約5000kPa或更高的范圍內(nèi)，但更通常在約10kPa至約100kPa的范圍內(nèi)。通常對(duì)溫度、H2壓力和底物與催化劑的比率的組合進(jìn)行選擇以提供在約24小時(shí)內(nèi)使底物(式2或式4)大體上完全轉(zhuǎn)化(即約95重量％)。對(duì)許多手性催化劑而言，降低H2壓力可增加對(duì)映選擇性。多種溶劑可用于不對(duì)稱(chēng)氫化中，包括質(zhì)子性溶劑，諸如，水、MeOH、EtOH和i-PrOH。其他可用溶劑包括非質(zhì)子性極性溶劑，諸如，THF、乙酸乙酯和丙酮。立體選擇性氫化可采用單一溶劑或可采用溶劑的混合物，諸如，THF與MeOH、THF與水、EtOH與水、MeOH與水等。式1的化合物或其非對(duì)映異構(gòu)體可通過(guò)，例如分步重結(jié)晶或色譜法或通過(guò)在適當(dāng)溶劑中重綍晶進(jìn)一步富集，或者，可按方案2所說(shuō)明的來(lái)制備式IO或式11的化合物。方案2其中R1、R2、R3、118和1(9如上所定義;R4選自甲苯磺?；?、甲磺酰基、對(duì)溴苯磺酰基、對(duì)氯苯磺?；⑾趸交酋；腿谆酋；瑑?yōu)選甲磺?；?；R5為合適離去基團(tuán)，諸如1140-,優(yōu)選甲磺?；?O-W為Cw烷基，優(yōu)選甲基；t為卣素，優(yōu)選氯或溴；R'-f為堿金屬卣化物，優(yōu)選溴化鈉；且X2為卣素，優(yōu)選溴。，，式4的化合物可通過(guò)如以上方案1中所述的方法由式3的化合物制備。式19的化合物可通過(guò)使化學(xué)計(jì)量或過(guò)量的量的式18的化合物與式4的化合物在溫度于45"C至90匸的范圍內(nèi)反應(yīng)2小時(shí)至6小時(shí)而由式4的化合物和式18的化合物制備。反應(yīng)混合物可包含水相、有機(jī)相和相轉(zhuǎn)移催化劑(例如，四烷基銨鹽，諸如，Bu4N+Br-)。代表性有機(jī)溶劑包括極性非質(zhì)子性溶劑(諸如，TMBE、THF、EtOAc、iPrOAc)和非極性芳族溶劑(諸如曱苯)。式7的化合物可通過(guò)式19的化合物和式20的原酸酯化合物制備。可使用化學(xué)計(jì)量或過(guò)量的量(例如，1當(dāng)量至1.5當(dāng)量)的式20的化合物在溫度于-5E至5X:的范圍內(nèi)經(jīng)歷2小時(shí)至12小時(shí)來(lái)進(jìn)行烷基化。代表性堿包括KOtBu，LDA、nBuLi和LiHMDS，可使用過(guò)量的堿(例如，1.2當(dāng)量至3當(dāng)量)。反應(yīng)混合物包含單一有機(jī)溶劑(例如，THF、TBME或曱苯)。在酸性條件(例如，HCI、H2S04等)下的處理過(guò)程中以過(guò)量的水使中間體原酸酶產(chǎn)物水解，從而得到式7的羧酸酯。式IO或11的化合物可如方案1中所述通過(guò)用適當(dāng)酶的非對(duì)映立體選擇性水解而由式7的化合物制備。優(yōu)選地，酶為源自微生物洋蔥伯克霍爾德氏菌(^/rir力0/der/ace/;ac/fl)或微生物細(xì)毛嗜熱霉(r力ei7Z70邁yces/a/mgi'/zosi/s)的月旨肪酶。最優(yōu)選地，酶為由AmanoEnzymeInc購(gòu)得的洋蔥伯克霍爾德氏菌脂肪酶；最優(yōu)選脂肪酶PS-SD。如整個(gè)說(shuō)明書(shū)所述，所公開(kāi)的化合物中的許多化合物具有立體異構(gòu)體。這些化合物中的一些化合物可作為單一對(duì)映異構(gòu)體(對(duì)映純化合物)或?qū)τ钞悩?gòu)體的混合物(富集和外消旋樣品)而存在，其取決于樣品中一種對(duì)映異構(gòu)體多于另一種對(duì)映異構(gòu)體的相對(duì)過(guò)量而定，且其可呈現(xiàn)光學(xué)活性。所述立體異構(gòu)體(其為不能重疊的鏡像)具有立體生成軸或一或多個(gè)立體中心(即手性)。其它所公開(kāi)的化合物可為非對(duì)映的立體異構(gòu)體。所述稱(chēng)為非對(duì)映異構(gòu)體的立體異構(gòu)體可為手性或非手性的(不含有立體中心)。其包括含有烯基或環(huán)狀基團(tuán)的分子，故順/反(或Z/E)立體異構(gòu)體是可能的，或其包括含有兩個(gè)或兩個(gè)以上立體中心的分子，在這些分子中反轉(zhuǎn)單個(gè)立體中心可產(chǎn)生相應(yīng)的非對(duì)映異構(gòu)體。除非清楚地另有說(shuō)明(例如，通過(guò)使用立體鍵、立體中心描述符等)，本發(fā)明的范圍通常包括參考化合物和其立體異構(gòu)體，無(wú)論其各自為純化合物(例如對(duì)映純)或混命物(即對(duì)映異構(gòu)富集的或外消旋的)。一些化合物亦可含有酮基或肟基，故可發(fā)生互變異構(gòu)現(xiàn)象。在這種情況下，本發(fā)明通常包括互變異構(gòu)體，無(wú)論其各自為純化合物或混合物。式1的化合物的藥學(xué)上可接受的鹽包括其酸加成鹽和堿鹽。合適酸加成鹽可自形成無(wú)毒性鹽的酸形成。實(shí)例包括乙酸鹽、己二酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、碳酸氬鹽/碳酸鹽，硫酸氫鹽/硫酸鹽、硼酸鹽、棘腦磺酸鹽、檸檬酸鹽、環(huán)己氨基磺酸鹽、乙二磺酸鹽、乙磺酸鹽、f酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、葡糖醛酸鹽、六氟磷酸鹽、羥節(jié)基苯甲酸鹽、鹽酸鹽/氯化物、氫溴酸鹽/溴化物、氫碘酸鹽/碘化物、羥乙磺酸鹽、乳酸鹽、蘋(píng)果酸鹽、馬來(lái)酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、萘酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、乳清酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、磷酸鹽/磷酸氫鹽/磷酸二氫鹽，焦谷氨酸鹽，葡糖二酸鹽，硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、丹寧酸鹽、酒石酸鹽，甲苯磺酸鹽，三氟乙酸鹽和xinofoate鹽。合適堿鹽可自形成無(wú)毒性鹽的堿形成。實(shí)例包括鋁鹽，精氨酸鹽、爺星鹽、鈣鹽、膽堿鹽、二乙胺鹽、二醇胺鹽、甘氨酸鹽、賴(lài)氨酸鹽、鎂鹽、葡甲胺鹽、醇胺鹽;、鉀鹽、鈉鹽和氨丁三醇鹽和鋅鹽。亦可形成酸和堿的半鹽，例如，半硫酸鹽和半鈣鹽。有關(guān)合適鹽的綜述參看Stahl與Wermuth的HandbookofPharmaeeutiealSalts:Properties,Selection,andUse(Wi1ey-VCH，2002)。式1的化合物的藥學(xué)上可接受的鹽可通過(guò)以下三種方法中的一或多種而制備(i)通過(guò)使式1的化合物與需要的酸或堿反應(yīng)；(ii)通過(guò)使用需要的酸或堿由式1的化合物的合適前體除去酸不穩(wěn)定或堿不穩(wěn)定保護(hù)基或通過(guò)使合適環(huán)狀前體例如，內(nèi)酯或內(nèi)酰胺開(kāi)環(huán)；或(iii)通過(guò)使式1的;化合物的一種鹽與適當(dāng)酸或堿反應(yīng)或通過(guò)合適的離子交換柱而轉(zhuǎn)化為另一種鹽。所有三種反應(yīng)通常均在溶液中進(jìn)行。所得鹽可沉淀出并通過(guò)過(guò)濾收集或可通過(guò)蒸發(fā)溶劑而收回。所得鹽的離子化程度可在完全離子化與幾乎未離子化之間變化。本發(fā)明的化合物可以在完全無(wú)定形至完全結(jié)晶的范圍內(nèi)的固態(tài)連續(xù)體形式存在。術(shù)語(yǔ)"無(wú)定形"是指一種狀態(tài)，其中所述物質(zhì)在分子水平上缺乏長(zhǎng)程有序，且取決于溫度可呈現(xiàn)固體或液體的物理性質(zhì)。通常這些物質(zhì)不能產(chǎn)生獨(dú)特的x射線衍射圖樣，且盡管其呈現(xiàn)固體性質(zhì)，更多地將其正式描述為液體。加熱后，出現(xiàn)固體至液體性質(zhì)的改變，其以狀態(tài)改變?yōu)樘卣?，通常為二?jí)變化("玻璃轉(zhuǎn)移")。術(shù)語(yǔ)"結(jié)晶"是指在分子水平上物質(zhì)具有規(guī)則有序的內(nèi)部結(jié)構(gòu)且能產(chǎn)生獨(dú)特的具有限定峰的x射線衍射圖樣的固相。如果充分加熱這些物質(zhì)亦會(huì)呈現(xiàn)液體的性質(zhì)，但從固體至液體的改變以相變?yōu)樘卣?，通常為一?jí)變化("熔點(diǎn)")。本發(fā)明的化合物亦可以非溶劑合物和溶劑合物的形式存在。本文使用術(shù)語(yǔ)"溶劑合物"來(lái)描述一種包含本發(fā)明的化合物和一或多種藥學(xué)上可接受的溶劑分子(例如，乙醇)的分子絡(luò)合物。當(dāng)所述溶劑為水時(shí)采用術(shù)語(yǔ)"水合物"。一種用于有機(jī)水合物的目前公認(rèn)的分類(lèi)系統(tǒng)為一種限定隔離位點(diǎn)、通道和金屬離子配位水合物的系統(tǒng)-參看K.R.Morris的PolymorphisminPharmaceuticalSolids(H,G.Brittain編，MarcelDekker，1995)。隔離位點(diǎn)水合物為其中水分子通過(guò)介入有機(jī)分子之間而避免彼此直接接觸的水合物。在通道水合物中，水分子位于晶格通道中，在這些晶格通道中水分子與其它水分子鄰接。在金屬離子配位水合物中，所述水分子鍵合至金屬離子。當(dāng)溶劑或水緊密結(jié)合時(shí)，絡(luò)合物將具有良好確定的與濕度無(wú)關(guān)的化學(xué)計(jì)量。然而，當(dāng)與溶劑或水較弱結(jié)合時(shí)，如在通道溶劑合物和吸濕性化合物中，水/溶劑含量將取決于濕度和干燥條件。在這種情況下，非化學(xué)計(jì)量將是正常的。多組份絡(luò)合物(不同于鹽和溶劑合物)亦包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)，其中藥物和至少一種其它組份以化學(xué)計(jì)量或非化學(xué)劑量的量存在。所述類(lèi)型絡(luò)合物包括籠形物(藥物主體包合絡(luò)合物)和共晶體。后者通常定義為通過(guò)非共價(jià)相互作用結(jié)合在一起的中性分子組份的結(jié)晶性絡(luò)合物，但可亦為中性分子與鹽的絡(luò)合物。共晶體可通過(guò)熔融結(jié)晶，通過(guò)從溶劑中重結(jié)晶或通過(guò)用物理方法一起研磨組份而制備-參看0.Almarsson與M.I.Zaworotko的ChemCommun，17，1889-1896(2004)。有關(guān)多組份絡(luò)合物的一般綜述參看Haleblian的JPharmSci，64(8)，1269-1288(1975年8月)。本發(fā)明的化合物當(dāng)在適當(dāng)條件下亦可以介晶態(tài)(中間相或液晶)存在。介晶態(tài)為在真晶狀態(tài)與真液體狀態(tài)(熔融物或溶液)之間的中間狀態(tài)。將由于溫度改變引起的介晶現(xiàn)象描述為"熱致性，，，且將由添加第二組份(諸如，水或另一溶劑)引起的介晶現(xiàn)象描述為"溶致性"。將可能形成溶致性中間相的化合物描述為"兩親媒性，，且其是由具有離子(諸如，C0(TNa+、-COOT或S03—Na+)或非離子(諸如，N—N+(CH3)3)極性頭端的分子組成。更多信息參看N.H.Hartshorne與A.Stuart的CrystalsandthePolarizingMicroscope,第4版(EdwardArnold,1970)。在下文中，所有對(duì)式1的化合物的提及包括提及其鹽、溶劑合物、多組份絡(luò)合物和液晶，以及其鹽的溶劑合物、多組份絡(luò)合物和液晶；且包括其所有多晶型物和晶體慣態(tài)、如下文中所定義的其前藥和異構(gòu)體(包括光學(xué)、幾何和互變異構(gòu)體)以及同位素標(biāo)記的式1的化合物?？煞治鍪?的化合物的生物醫(yī)藥學(xué)性質(zhì)，諸如，溶解度和溶液穩(wěn)定性(在一定pH范圍內(nèi))、滲透性等，以便選擇最適當(dāng)劑型和給藥途徑用于治療所建議的適應(yīng)癥i欲用于醫(yī)藥用途的式1的化合物可以結(jié)晶或無(wú)定形產(chǎn)物給予。其可通過(guò)諸如沉淀、結(jié)晶、凍干、噴霧干燥或蒸發(fā)干燥的方法，例如以固態(tài)塞、散劑或薄膜的形式獲得。為此目的，可使用微波或射頻干燥。式1的化合物可單獨(dú)或與一或多種本發(fā)明的其它化合物組合或與一或多種其它藥物(或藥物的任何組合)組合給予。通常其將與一或多種藥學(xué)上可接受的賦形刑結(jié)合以制劑的形式給予。本文使用術(shù)語(yǔ)"賦形劑"用來(lái)描述除本發(fā)明化合物之外的任何成份。對(duì)賦形劑的選擇在很大程度上取決于諸如特定的給藥方式、賦形劑對(duì)溶解度和穩(wěn)定性的影響以及劑型的性質(zhì)。本領(lǐng)域技術(shù)人員容易了解適于遞送式I的化合物的藥物組合物和用于制備這些藥物組合物的方法。這些組合物和用于制備它們的方法可例如在Remington'sPharmaeeuticalSciellees，第19版(MackPublishingCompany,1995)中查到。口服給藥式1的化合物，特別是(3S，5R)-3-氨基曱基-5-甲基-辛酸形式A可經(jīng)口給予?？诜o藥可涉及吞咽以使化合物進(jìn)入胃腸道，和/或涉及頰、舌或舌下給藥，化合物通過(guò)這些給藥由口腔直接進(jìn)入血流。適于口服給藥的制劑包括固態(tài)、半固態(tài)或液態(tài)系統(tǒng)，諸如，片劑；含有多微?；蚣{米微粒、液體或粉末的軟或硬膠嚢；錠劑(包括液體填充的)；口香糖；凝膠；快速分散劑型；薄膜片；卵狀體；噴霧劑和頰/粘膜粘附貼片。液體制劑包括懸浮液、溶液、糖漿和酏劑。這些制劑可作為填充劑用在軟或硬膠囊(例如由明膠或羥丙基甲基纖維素制成)中且通常包含一種載體(例如，水、乙醇、聚乙二醇、丙二醇、曱基纖維素或合適的油)和一或多種乳化劑和/或懸浮劑。液體制劑亦可通過(guò)使固體重配而制備，例如由藥嚢制備。式1的化合物，特別是(3S，5R)-3-氨基曱基-5-曱基-辛酸形式A亦可用于快速溶解、快速崩解劑型中，諸如那些描述在Liang與Chen的Expert0pini011inTherapeuticPatents,11(6),981-986(2001)中的劑型。對(duì)片劑劑型而言，視劑量而定，藥物可占劑型的1重量。/。至80重量％，更通常占劑型的5重量％至60重量％。除藥物外，片劑通常含有崩解劑。崩解劑的實(shí)例包括羥乙酸淀粉鈉、羧甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素鈣、交聯(lián)羧甲纖維素鈉、交聯(lián)聚維酮，聚乙烯吡咯烷酮、曱基纖維素、微晶纖維素、低級(jí)碳烷基取代的羥丙基纖維素、淀粉、預(yù)膠凝化淀粉和海藻酸鈉。一般而言，崩解劑占劑型的1重量％至25重量％，優(yōu)選占劑型的5重量％至20重量％。粘合劑通常用于將粘合性質(zhì)賦予片劑制劑。合適粘合劑包括微晶纖維素、明膠、糖、聚乙二醇、天然和合成膠、聚乙烯吡咯烷酮、預(yù)膠凝化淀粉、羥丙基纖維素和羥丙基甲基纖維素。片劑亦可含有稀釋劑，諸如乳糖(單水合物、噴霧干燥單水合物、無(wú)水物等)、甘露醇、木糖醇、右旋糖、蔗糖、；山梨醇、微晶纖維素、淀粉和二水合磷酸氫二鈞。錠劑亦任選包含表面活性劑(諸如，月桂基硫酸鈉和聚山梨醇酯80)和助流劑(諸如，二氧化硅和滑石粉)。若存在，則表面活性劑可占錠劑的0.2重量％至5重量％,且助流劑可占錠劑的0.2重量％至1重量％。片劑亦通常含有潤(rùn)滑劑，諸如，硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、硬脂酸鋅，硬脂酰富馬酸鈉以及硬脂酸鎂與月桂基硫酸鈉的混合物。潤(rùn)滑劑通常占片劑的0.25重量％至10重量o/。，優(yōu)選占片劑的0.5重量％至3重°°其它可能的成份包括抗氧化劑、著色劑、調(diào)味劑、防腐劑和味覺(jué)掩蔽劑。例示性片劑含有至多約80%的藥物、約10重量％至約90重量％的粘合劑、約0重量％至約85重量％的稀釋劑、約2重量％至約10重量％的崩解劑和約0.25重量％至約10重量％的潤(rùn)滑劑?？芍苯訅嚎s或通過(guò)滾筒壓縮片劑摻合物以形成片劑。片劑摻合物或摻合物的部分可選地在壓片前被濕式、干式或熔融造粒，被熔融凝固或擠壓。最終制劑可包含一或多層且可被包衣或未被包衣；甚至可將其裝入膠囊中。片劑制劑由H.Lieberman與L.Lachman在PharmaceuticalDosageForms:Tablets,第l巻(MarcelDekker，NewYork,1980)中進(jìn)行了論述。用于人或獸用用途的消費(fèi)性口服薄膜片通常為可彎的水溶性或水可膨脹性的薄膜片劑型，其可迅速溶解或粘附粘膜且通常包含式1的化合物、薄膜形成聚合物、粘合劑、溶劑、保濕劑、增塑劑、穩(wěn)定劑或乳化劑、粘度改良劑和溶劑。制劑的一些組份可執(zhí)行一種以上的功能。式1的化合物可為水溶性或不溶性化合物。水溶性化合物通常占溶質(zhì)的1重量％至80重量％，更通常占溶質(zhì)的20重量％至50重量％。溶解度較低的化合物可能占組合物的更大比例，通常至多為溶質(zhì)的88重量％?；蛘?，式1的化合物可以多微粒珠的形式存在。成膜聚合物可選自天然多糖、蛋白質(zhì)或合成水膠體，且通常以在0.01重量％至99重量％范圍內(nèi)的量存在，更通常以在30重量％至80重量％范圍內(nèi)的量存在。其它可能成份包括抗氧化劑、著色劑、調(diào)味劑和香味增強(qiáng)劑、防腐劑、刺激唾液分泌劑、冷卻劑、共溶劑(包括油)、軟化劑、膨化劑、消泡劑、表面活性劑和味覺(jué)掩蔽劑。本發(fā)明的薄膜片通常承通過(guò)蒸發(fā)千燥包衣于一可剝襯底支撐物或紙上的含水薄膜而制備。此操作可在千燥烘箱或烘道中完成，通常在組合涂布機(jī)干燥器中完成，或通過(guò)冷凍干燥或真空化完成。用于口服給藥的固態(tài)制劑可配制為立即釋放和/或修飾釋放制劑。修飾釋放制劑包括延時(shí)釋放、持續(xù)釋放、脈沖釋放、控制釋放、靶向釋放和程序釋放。用于本發(fā)明的目的的合適修飾釋歡制劑描述在美國(guó)專(zhuān)利6,106,864中。其它合適的釋放技術(shù)的詳細(xì)資料，諸如高能分散液和滲透性且包衣的顆?？稍赩erma等人的PharmaceuticalTechnologyOn-line，25(2)，1-14(2001)中查到。使用口香糖以達(dá)成控制釋放描述在W000/35298中。非腸道給藥式1的化合物，特別是(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A可亦直接給藥進(jìn)入血流中，進(jìn)入肌肉中，或進(jìn)入內(nèi)臟中。用于非腸道給藥的合適方式包括靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、鞘內(nèi)、心室內(nèi)，尿道內(nèi)、胸骨內(nèi)、頭碩內(nèi)、肌肉內(nèi)、滑膜內(nèi)和皮下給藥。用于非腸道給藥的合適裝置包括針(包括，微針)注射器、無(wú)針注射器和輸注技術(shù)裝置。局部給藥式1的化合物，特別是(3S，5R)-3-氨基曱基-5-曱基-辛酸形式A亦可被局部、皮(內(nèi))或透皮給藥至皮膚或粘膜。用于此目的的典型制劑包括凝膠、水凝膠、洗劑、溶液，乳骨、軟骨、粉劑、敷料劑、泡沫劑、薄膜、皮膚貼片、糯米紙、植入物、海綿、纖維、繃帶和微乳液。亦可使用脂質(zhì)體。典型的載體包括醇、水、礦物油、液體礦脂、白礦脂、甘油、聚乙二醇和丙二醇?？苫烊氪┩冈鰪?qiáng)劑-參看，例如Finnin與Morgan的JPharmSci,88(10)，955-958(1999年10月)。局部給藥的其它方式包括通過(guò)電穿孔技術(shù)、離子導(dǎo)入療法、超聲藥物透入療法、超聲電滲法和微針或無(wú)針(例如，Powderject、Bioject等)注射遞送。吸入/鼻內(nèi)給藥式1的化合物，特別是(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A亦可經(jīng)鼻內(nèi)或通過(guò)吸入給予，通常以來(lái)自干粉吸入器的干粉(例如，單獨(dú)；呈混合物形式例如在與乳糖形成的干摻合物中；或呈混合的組份顆粒形式，例如與諸如磷脂酰膽堿的磷脂混合形式)給予；在使用或未使用合適推進(jìn)劑(諸如1，1，1,2-四氟乙烷或1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷)下，以來(lái)自加壓容器、泵,、噴霧裝置，霧化器(優(yōu)選為使用電水動(dòng)力學(xué)以產(chǎn)生細(xì)霧的霧化器)或噴霧器的氣溶膠噴霧形式給予；或以滴鼻劑形式給予。對(duì)鼻內(nèi)使用而言，所述粉末可包含生物粘著劑，例如殼聚糖或環(huán)糊精。直腸/陰道內(nèi)給藥式1的化合物，特別是(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A可例如以栓劑、陰道藥栓或灌腸劑的形式經(jīng)直腸成陰道給予?？煽芍瑸閭鹘y(tǒng)的栓劑基質(zhì)，但如果適當(dāng)可使用各種替代物。經(jīng)眼/耳給藥式1的化合物，特別是(3S，5R)-3-氨基曱基-5-甲基-辛酸形式A亦可直接給藥至眼或耳，通常以在等張、pH經(jīng)調(diào)節(jié)、無(wú)菌的生理鹽水中的微化懸浮液或溶液的滴劑形式給予。適于經(jīng)眼和經(jīng)耳給藥的其它制劑包括軟骨、凝膠、生物可降解(例如，可吸收的凝膠海綿、膠原蛋白)和生物不可降解(例如硅氧烷)植入物、糯米紙、晶狀體和顆?；驀芭菹到y(tǒng)，諸如，類(lèi)脂質(zhì)體(niosome)或脂質(zhì)體。其它技術(shù)式1的化合物，特別是(3S，5R)-3-氨基甲基-5-曱基-辛酸形式A可組合可溶性大分子實(shí)體(諸如，環(huán)糊精和其合適衍生物或含有聚乙二醇的聚合物)以便改良其溶解度，溶解速率，味覺(jué)掩蔽、生物可用性和/或穩(wěn)定性以用于上述給藥方式中的任一種。例如，發(fā)現(xiàn)藥物-環(huán)糊精絡(luò)合物通?？捎糜诙鄶?shù)劑型和給藥途徑中?？墒褂冒辖j(luò)合物和非包合絡(luò)合物兩者。除與藥物直接絡(luò)合外，環(huán)糊精可用作輔助添加劑，即用作載體，稀釋劑或增溶劑。最常用于這些目的的環(huán)糊精為ot-環(huán)糊精、p-環(huán)糊精和Y-環(huán)糊精，其實(shí)例可在國(guó)際專(zhuān)利申請(qǐng)W091/11172、W094/02518和W098/55148中找到。組件試劑盒由于例如為治療特定疾病或病癥可能需要給予活性化合物的組合，故可方便地以適于共同給予組合物的試劑盒形式組合兩種或兩種以上的藥物組合物，其中的至少一種含有式1的化合物，此方式在本發(fā)明的范圍內(nèi)。因此，本發(fā)明的試劑盒包含兩種或兩種以上的分開(kāi)的藥物組合物，其中的至少一種含有式1的化合物，特別是(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A，且包含用于分別保留這些組合物的裝置，諸如，容器、分隔的瓶或分隔的箔袋。所述試劑盒的一個(gè)實(shí)例為熟悉的用于包裝片劑、膠囊等的泡軍包裝。本發(fā)明的試劑盒特別適于例如經(jīng)口和非腸道給予不同劑型，適于以不同給藥間隔給予分開(kāi)的組合物，或適于所述分開(kāi)組合物相互間滴定。為有助于依從性，所述試劑盒通常包含給藥說(shuō)明且可具備所謂的記憶輔助物。劑量對(duì)給藥至患者而言，式1的化合物的總?cè)談┝客ǔＴ?.l邁g至1000mg范圍內(nèi)，此劑量當(dāng)然應(yīng)視給藥方式而定?？?cè)談┝靠梢詥蝿┗蚍秩舾蓜┙o予且可根據(jù)醫(yī)師的判斷落在本文所給定的典型范圍之外。(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A的優(yōu)選日劑量范圍在lmg至250mg范圍內(nèi)；更優(yōu)選日劑量范圍在lmg至125mg范圍內(nèi)。這些劑量基于體重約60kg至70kg的平均人類(lèi)對(duì)象。所述醫(yī)師將易于確定用于體重落在所述范風(fēng)之外的對(duì)象，諸如嬰兒和老年人的劑量。為避免產(chǎn)生疑義，本文中對(duì)"治療，，的提及包括提及治愈性、緩解性和預(yù)防性治療。實(shí)施例以下實(shí)例用于說(shuō)明而非限制本發(fā)明，且其代表本發(fā)明的特定實(shí)施例。使用96孔板進(jìn)行酶篩選，此在D.Yazbeck等人的Synth.Catal.345:524-32(2003)中有描述，為所有目的，其完整公開(kāi)內(nèi)容以引用的方式并入本文中。所有在篩選平板中使用的酶(參看表2)可自商業(yè)酶供貨商獲得，這些供貨商包括AmanoEnzymeInc.(Nagoya，Japan)、Roche(Basel，Switzerland)、NovoNordisk(Bagsvaerd，Denmark)、AltusBiologiesInc.(Cambridge,MA)、Biocatalytics(Pasadena，CA)、Toyobo(Osaka，Japan)、Sigma-Aldrich(St.Louis，M0)、Fluka(Buchs,Switzerland)、GenencotInternational，Inc,(Rochester，NY)和ValleyResearch(SouthBend,IN)。在EppendorfThermomixer-R(糧)中實(shí)施篩選反應(yīng)。隨后較大規(guī)模的酶拆分采用LIPOLASE100LEX,其可自Novo-NordiskA/S購(gòu)得(CAS號(hào):9001-62-1)，以及脂肪酶PS、PS-CI、PS-CII和PS-DII，其可自AmanoEnzymeInc購(gòu)得。實(shí)施例l.(R)-甲烷磺酸2-甲基-戊酯的制備將(R)-2-甲基-戊-l-醇(260kg，2500mol)、甲基叔丁基醚(2000L)裝入4000L的反應(yīng)器中，且使其冷卻至-iox:至ox:。加入甲磺酰氯(310kg，2600mol)，且接著添加Et3N(310kg,3100mol)，同時(shí)維持內(nèi)部溫度在O"C至101C。添加完成后，使反應(yīng)混合物溫至15C至25匸且在所述溫度下攪拌至少1小時(shí)直至通過(guò)氣相色鐠法分析反應(yīng)已完全。接著將HC1水溶液(88kgHC1在700L水中)添加至反應(yīng)混合物中。攪拌所得混合物至少15分鐘，靜置至少15分鐘，且接著除去下層水相。用水(790L)和碳酸氬鈉水緣液(67kg碳酸氫鈉在840L水中)洗滌上層有機(jī)相。然后在真空下濃縮溶液以除去甲基叔丁基醚，得到油狀標(biāo)題化合物(472kg,95%產(chǎn)率)。^NMR(400MHz，CDC13)4.07-3.93ppm(m，2H)，2.97(s，3H)，1.91-1.80(m，1H)，1.42-1.09(m，4H)，0，94(d,J=6.57Hz，3H)，0.87(t，J=6.56Hz，3H);13C賺(CDCh)74.73，37.01，34.81，32.65，19.71，16.29，14.04。實(shí)施例2.(2'R)-2-氰基-2-(2'-甲基-戊基)-琥珀酸二乙酯的制備將(R)-甲烷磺酸2-甲基-戊酯(245kg，1359mol)、2-氰基-琥珀酸二乙酯(298kg，1495mol)和無(wú)水乙醇(1300kg)裝入4000L的反應(yīng)器中。添加乙醇鈉(在乙醇中，5—06kg,21重量％)。將所得溶液加熱至701C至75C且在所述溫度下攪拌混合物至少18小時(shí)直至通過(guò)氣相色鐠法分析反應(yīng)已完全。反應(yīng)完成后，接著將HC1水溶液(32kgHC1在280L水中)添加至反應(yīng)混合物中直至PH小于2。添加另外的水"00L)，然后且在真空下濃縮反應(yīng)混合物以除去乙醇。添加甲基叔丁基醚(1000kg),且攪拌混合物至少15分鐘，靜置至少15分鐘，且接著用甲基叔丁基醚(900kg)反萃取下層水相。在真空下濃縮組合的有機(jī)相，得到深色油狀標(biāo)題化合物,(294kg，79%產(chǎn)率，針對(duì)純度進(jìn)行校正)。^NMR(400MHz，CDC13)4.2》ppm(q，J=7.07Hz，2H)，4.18(q，J=7.07Hz，2H)，3.03(dd，t=6.6,7.1Hz，2H)，1.93-1.61(m，3H)，1.40-1.20(m，IOH)，0.95-0.82(m,6H);13C腿(CDC1》168.91，168.67，168.59，168.57，119.08，118.82，62.95，62.90，44.32，44.19，42.21，42.02，39.77,39.64,30.05，29.91,20.37,19.91,19.66，13.99。實(shí)施例3.(5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯的制備(方法A)將NaCl(175kg，3003mol)、溴化四丁基銨(33.lkg，103mol)，水(87L)和二甲亞砜(1OOOkg)加入4000L的反應(yīng)器中。裝入(2'R)-2-氰基-2-(2'-甲基-戊基)-琥珀酸二乙酯(243kg,858mol),將混合物加熱至1351C至138t:且在所述溫度下攪拌至少48小時(shí)直至通過(guò)氣相色鐠法分析反應(yīng)已完全。在反應(yīng)冷卻至25"C至35TC后，添加庚烷(S90kg)，且攪拌混合物至少15分鐘，靜置至少15分鐘，且接著除去下層水相。用水(800L)洗滌上層有機(jī)相。用炭使含有產(chǎn)物的庚烷溶液脫色，且在真空下濃縮，得到橘黃色油狀標(biāo)題化合物(133.9kg，74%產(chǎn)率，針對(duì)純度進(jìn)行校正)。'HNMR(400MHz，CDC13)4.20ppm(q，J=7.07Hz，2H)，3.13-3.01(m，1H)，2.75-2.49(m,2H)，1.80-1.06(m，10H)，0.98—0.86(m,6H);13CNMR(CDC13)169.69，169,65，121.28，120.99，61.14，39.38，39.15，38.98，37.67，37.23,36.95，30.54，30.47，25.67,25.45，19.78，19.61，19.53，18.56，14.13,14.05。實(shí)施例4.(SR)-3-氰泰-S-甲基-辛酸乙酯的制備(方法B)將LiCl(3.89g,0.0918mol)、水(7mL)和二甲亞砜(72mL)加入250fflL的燒瓶中。加入(2'R)-2-氰基-2-(2'-甲基-戊基)-琥珀酸二乙酯(25.4g，0.0706mol，78.74%，由氣相色鐠法分析而得)，將混合物加熱至35C至138X:且在所述溫度下攪拌至少24小時(shí)直至通過(guò)氣相色譜法分析反應(yīng)完全。在反應(yīng)冷卻至25匸至35X:后，添加庚烷(72mL)，飽和NaCl溶液(72mL)和水(72mL)，且攪拌混合物至少15分鐘，靜置至少15分鐘，且接著用庚烷(100mL)洗滌下層水相。在真空下濃縮組合的有機(jī)相，得到橘黃色油狀標(biāo)題化合物(13.0g，84%產(chǎn)率，針對(duì)純度進(jìn)行校正)。實(shí)施例5.(5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸鈉鹽的制備將(5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯(250kg，1183mol)和四氫呋喃(450kg)加入4000L的反應(yīng)器中。制備N(xiāo)aOH水溶液(350L水中的50%NaOH,190kg)且接著將其添加至四氫呋喃溶液中。在20C至30匸下攪拌所得溶液至少2小時(shí)，直至通過(guò)氣相色鐠分析反應(yīng)已完全。此后，通過(guò)真空蒸餾除去四氫呋喃，得到標(biāo)題化合物的水溶液，其可立即用于下一步驟中。實(shí)施例6.(5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸鈉鹽的制備將海綿鎳催化劑(3.2kg,Johnson&MatheyA7000)加入120L的高壓釜中，接著加入(5沁-3-lC基-5-曱基-辛酸鈉鹽水溶液(15kg在60L水中)，且在50psig氬氣、30C至35匸下使所得混合物氫化至少18小時(shí)，或直至氫氣吸收停止。接著將反應(yīng)冷卻至20X:至30t:，且通過(guò)O.2pm過(guò)濾器過(guò)濾而除去用過(guò)的催化劑。用水(2x22L)洗滌濾餅，且將所得標(biāo)題化合物的水溶液直接用于下一步驟中。實(shí)施例7.(5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸的制備將(5R)-3-氨基-甲基-5-曱基-辛酸的水溶液(約150kg在約1000L水中)裝入4000L的反應(yīng)器中，且使其冷卻至Or至5"C。添加水醋酸直至pH為6.3至6.80。將無(wú)水乙醇(40kg)添加至混合物中。在20分鐘以?xún)?nèi)將所得漿液加熱至65匸至70x:，且經(jīng)3小時(shí)冷卻至ox:至5C通過(guò)過(guò)濾收集產(chǎn)物，得到呈水濕性濾餅的標(biāo)題化合物(76kg，97%產(chǎn)率，針對(duì)純度進(jìn)行校正，10%水，由Karl-Fischer分析而得)，其可用于下一步驟中。力建(40醒z,D3C0D)4,97ppm(BS，3H),3.00-2.74(m，2H)，2.48-2.02(m，3H)，1.61-1.03(m,7H)，0.94-086(m，6H);13CNMR(D3COD)181.10，181.07，46.65,45.86，44.25,43.15，42.16，41.64，41.35，33.45，31.25，31.20，21.45，21.41，20.52，20.12，15.15,15.12。實(shí)施例8.通過(guò)與拆分劑接觸進(jìn)行(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸的制備將水濕(國(guó)(5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸(76kg，365mol)、(S)-扁桃酸(34.8kg,229mol)，無(wú)水乙醇(1780kg)和水(115L)加入4000L的反應(yīng)器中。將所得混合物加熱至651C至70X:且攪拌直至固體溶解。接著經(jīng)2小時(shí)將溶液冷卻'至OiC至5X:且在所述溫度下再攪拌1小時(shí)。通過(guò)過(guò)濾收集產(chǎn)物，且用-20iC乙醇(3x60kg)洗滌濾餅。將粗產(chǎn)物(18kg,48。/。產(chǎn)率)和乙醇(167kg)加入反應(yīng)器中。將混合物冷卻至至51C且在所述溫度下攪拌1.5小時(shí)。接著通過(guò)過(guò)濾收集產(chǎn)物。且用-20"C乙醇(3xl83kg)洗滌濾餅得到標(biāo)題化合物(17kg，94%產(chǎn)率)。在188.1653amu處觀測(cè)到標(biāo)題化合物的準(zhǔn)分子離子(MH+)，且與理論值188.1650相一致；測(cè)量值確定分子式為C1()H21N02，因?yàn)樵跍y(cè)量值的5-ppm(0.9mDa)實(shí)驗(yàn)誤差范圍內(nèi)沒(méi)有其它僅含有C、H、N和0的合理替代化學(xué)實(shí)體可以分子離子形式存在IR(KBr)2955.8cm—、22.12.1，1643.8，1551.7，1389.9;力NMR(400MHz，D3COD)4.91ppm(bs，2H)，3.01-2.73(m，2H)，2.,45-2.22(m,2H)，1.60-1.48(m，1H)，1.45-1.04(m，6H)，0.98二086(m，6H);13C醒(D3C0D)181.04，45.91，44.30，42.13,40,65，33.42，31.24，21.39，20.49，15.11。實(shí)施例9.酶篩選通過(guò)使(5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯(式15)經(jīng)酶水解得到(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸鈉鹽(式16，n)和(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯(式17，R"-Et)或(3S，5R)-3-氰基-5-曱基-辛酸乙酯(式16,R、Et)和(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸鈉鹽(式17,!T-Na+)而進(jìn)行。使用包含沉積于96孔板的獨(dú)立孔中的個(gè)別酶的篩選試劑盒進(jìn)行酶篩選，所述篩選試劑盒預(yù)先根據(jù)D.Yazbeck等人在Synth.Catal.345:524-32(2003)中所描述的方法而制備。各孔具有0.3mL的空體積(淺孔板)。96孔板中有一孔僅含有磷酸鹽緩沖液(10yL，0.1M，pH7.2)。幾乎沒(méi)有例外；各剩余孔含有等分量的酶aOjjL，83mg/mL),這些酶中的多數(shù)系列于以上表2中。使用前，將篩選試劑盒自-8or;儲(chǔ)存室取出且使酶在室溫下解凍約5分鐘。使用多通道移液器將磷酸鉀緩沖液(85yL，O.IM，pH7.2)分配于各孔中。隨后通過(guò)多通道移液器將濃縮底物(式15，5jiL)添加至各孔中且在30匸和750rpm下培養(yǎng)96孔中的反應(yīng)混合物。24小時(shí)后通過(guò)將各反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)移入第二塊96孔板的獨(dú)立孔中而使反應(yīng)'中止并取樣。各孔具有2mL的空體積(深孔板)且含有乙酸乙酯(lmL)和HCI(lN，100^L)。通過(guò)用移液器抽吸孔內(nèi)容物而使各孔組份混合。使第二塊板離心且將IO(VL有機(jī)上清液自各孔轉(zhuǎn)入第三塊96孔板(淺板)的獨(dú)立孔中。隨后使用可滲透的墊蓋密封第三塊板的孔。一旦孔被密封，將第三塊板轉(zhuǎn)移至GC系統(tǒng)中以測(cè)定非對(duì)映立體選擇性(de)。表3列出酶、商品名、E值。x和被篩選的一些酶的選擇性。對(duì)給定酶而言，可將E值理解為一對(duì)非對(duì)映異構(gòu)體(底物)的相對(duì)反應(yīng)性。使用來(lái)自UniversityofGraz的稱(chēng)為Ee2的計(jì)算機(jī)程序且根據(jù)GC/導(dǎo)出數(shù)據(jù)(轉(zhuǎn)化分?jǐn)?shù)、x和de)計(jì)算出表3中列出的E值。在表3中，選擇性對(duì)應(yīng)于非對(duì)映異,體(3R，5R)-3-氰基-5-曱基-辛酸乙酯或(3S，5R)-3-氰基-5-曱基-辛酸乙酯-經(jīng)歷給定酶的最充分水解。表3.實(shí)施例l的篩選反應(yīng)結(jié)果酶商品名EX選擇性豬鵬鰣Altus031.515(3R，5R)^!fe^K菌(Candidacytindracea)脂^SlFluka623021.43(3R，5R)洋蔥伯M爾德氏菌(Burkholderiac印acia)脂肪AnianoLipaseAH20015(3R，5R)縈光假#"&菌(Pseudoinonasfluorescens)月旨^#AmanoLipaseAK2020025(3R，5R)^4^菌(Candidarugosa)脂A^AmanoLipaseAYS1.42(3R，5R)德W疼郵izopusdelemar)脂Mil"AmanoLipaseD644(3S，5R)擬鵬(Rhizopusoryzae)月旨^rSlAmanoLipaseF-AP15201(3S，5R)沙門(mén)柏干酪青審(Penicilliumcamembertii)脂AmanoLipaseG501.16(3S，5R)鵬爪唾4^l(Mucorjavanicus)月旨^S^i^AmanoLipaseM1083(3S，5R)洋蔥伯絲爾德氏菌(Burkholderiac印acia)脂肪AmanoLipasePS20045(3R，5R)假單胞菌(Pseudomonas)屬脂AjilBioCatalytics10347(3S,5R)魁物，凍干脂麟BioCatalytics1081745(3R,5R)CAL-B，凍干BioCatalytics1101.296(3S，5R)4^K菌(Candida)屬，凍干BioCatalytics1111.28(3R，5R)CAL-A，凍干BioCatalytics1121.6(3R,5R)嗜絲(Thermomyces)屬脂鵬BioCatalytics115750(3S，5R)產(chǎn)自菌(Alcaligines)屬，凍干脂,BioCatalytics1171531(3R，5R)CAL-B，L2SolChriazymeSol1.331(3R，5R)細(xì)4j^t熱霉(Thermoniuceslarmginosus)月旨MilSigmaL9Upolase1550(3S，5R)細(xì)4/#^^(Thermomuceslarmginosus)月旨^rS^SigmaL10Novo8711068(3S,5R)曼5^M^,zofflucormiehei)月旨Mi^,SigmaL6Palatase5.390(3S,5R)真菌蛋白酶棘物Gen咖or1010(3R，5R)牛胰蛋白酶SigmaP18ot-胰凝乳1010(3R，5R)蛋白酶I風(fēng)梨[Ananascomosus&AnanasBromclian1010(3R，5R)Bracteatus(L)]ConcentrateSigmaA-S2AcylaseI260(3S,5R)得自高j;錄菌Mucormeihei的酉練FlukaE5579(3S，5R)SigmaES81.154(3S,5R)膽固醇酉辦BioCatalyticsE31.154(3S，5R)BioCatalytics1231.371(3S，5R)實(shí)施例10.通過(guò)酶催化拆分進(jìn)行(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸叔丁基銨鹽的制備將(5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯(8g，37.85mmol)添加至配備pH電極、頂置式攪拌器和堿添加管線的50mL反應(yīng)器中，接著添加乙酸鉤溶液(8mL),去離子水(3.8mL)和LIP0LASE⑧100LEX(0.2mL)。在室溫下攪拌所得懸浮液24小時(shí)。通過(guò)添加4MNaOH而將溶液的pH維持于7.0。通過(guò)氣相色鐠法監(jiān)測(cè)反應(yīng)的進(jìn)程(轉(zhuǎn)化率和產(chǎn)物和起始物質(zhì)的%de)且在已消耗45%的起始物質(zhì)后使反應(yīng)中止(添加約4.3mLNaOH)。反應(yīng)完成后，添加甲苯(2QmL)，且攪拌混合物1分鐘。通過(guò)添加濃HC1水溶液使pH降低至3.0且攪拌溶液5分鐘，接著將溶液轉(zhuǎn)移至分液漏斗/萃取器中。使有機(jī)層分離且用10mL甲苯對(duì)水層進(jìn)行l(wèi)次萃取。合并有機(jī)層且使甲苯蒸發(fā)直至干。將粗產(chǎn)物((3S，5R)-3-氰基-5-曱基-辛酸的鈉鹽，75%非對(duì)映異構(gòu)體過(guò)量，由氣相色鐠法分析而得)再懸浮于曱基叔丁基醚(40mL)中。在攪拌的同時(shí)將叔丁胺(1.52g，1.1當(dāng)量)逐滴添加至混合物中，歷經(jīng)5分鐘的時(shí)間。晶體在添加完成后不久即沉淀出，且將這些晶體收集于布氏漏斗中。用甲基叔丁基醚(2x20mL)洗滌固體。接著在真空下干燥殘余物得到標(biāo)題化合物(2.58g，96%非對(duì)映異構(gòu)體過(guò)量，由氣相色譜法分析而得)。實(shí)施例11.通過(guò)(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯至(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸鈉鹽的酶水解進(jìn)行的(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯的拆分在201C至25"C的溫度下將50%NaOH水溶液(2.Okg)添加至含有砩酸鈉(磷酸二氫鈉)單水合物(4.7kg)和水(1650L)的容器中。攪拌15分鐘后，檢測(cè)混合物的pH以確保其處于6.0至8.O的范圍內(nèi)。添加AmanoPS脂肪酶(17kg)且在20X:至25C下攪拌混合物30分鐘至60分鐘。過(guò)濾混合物以除去固體且濾液與碳酸氫鈉(51kg)、(5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯(154kg)和水(10L)合并。使混合物在約501C下反應(yīng)24小時(shí)至48小時(shí)。通過(guò)氣相色鐠法監(jiān)測(cè)酶水解的進(jìn)程，且當(dāng)基于氣相色鐠法分析發(fā)現(xiàn)(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯與(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸鈉鹽的比率大于99:l時(shí)認(rèn)為酶水解已完全。在反應(yīng)完成后，將混合物添加至裝有NaCl(510kg)的容器中，且在201C至"r下攪拌容器的內(nèi)容物。用甲基叔丁基醚(680L)萃取混合物且使水相與有機(jī)相分離。棄去水相且用NaCl(26kg)、碳酸氫鈉(2kg)和水(85L)洗滌有機(jī)相。在固體溶解后，再次用MTBE(680L)萃取混合物，使水相與有機(jī)相分離，且再次用NaCl(26kg)、碳酸氫鈉(2kg)和水(85L)洗滌有機(jī)相。在水相與有機(jī)相分離后，在70C和大氣壓下蒸餾有機(jī)相得到油狀(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯(48.9kg，88%產(chǎn)率)。^醒R(400MHz，CDC13)4.17ppm(q，J=7.83Hz，2H)，3.13-3.06(m，1H)，2.71-2.58(m，2H),1.75-1.64(m，10H)，0.95(d,J=6.343H)，0.92(t，J=6.83，3H，13CNMR(CDC13)170.4，121.8,61.1，39.6，38.6，37.0，31.0，25.9，20.0，18.5，13.9。實(shí)施例12.由(3S，5R)'-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯制備(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸用次氯酸鈉水溶液(35kg，12%)和水(35L)處理在甲基叔丁基醚中含有(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯(30。/。)的溶液(700kg)。在室溫下攪拌混合物2小時(shí)后，使混合物靜置3小時(shí)，且將水相與有機(jī)相分離。在室溫下用水(15OL)洗滌有機(jī)相且使混合物分離為水相與有機(jī)相。分離出有機(jī)相且隨后與NaOH水溶液(13"g，50%)和水(5601>)與有機(jī)相反應(yīng)。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物2.5小時(shí)至3.5小時(shí)且使混合物靜置2小時(shí)。將所得的含有(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸鈉鹽的水相裝入已裝入海綿鎳A-7063(43kg)的高壓釜中且用氮?dú)獯迪?。將所述高壓蒼加熱至281C至32"且用氬氣加壓至50psig。使壓力維持于50psig，歷經(jīng)18小時(shí)至24小時(shí)。陣后將高壓釜冷卻至20匸至"x:且使壓力降至20psig至30psig進(jìn)行取樣。當(dāng)(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸鈉鹽的轉(zhuǎn)化分率為99%或更大，則反應(yīng)完全。過(guò)濾反應(yīng)混合物且在20X:至30t:的溫度下合并濾液與檸檬酸水溶液(64kg在136kg水中)。添加乙醇(310L)且將混合物加熱至55匸至60X:。使混合物維持在所述狀態(tài)1小時(shí)，然后以約-15X:/小時(shí)的速率冷卻直至混合物的溫度降至約至81C的溫度。在該溫度攪拌混合物約1.5小時(shí)并過(guò)濾。在21C至81C下用水(1S0L)沖洗所得濾餅，接著在室溫下用氮吹掃干燥直至水含量低于1%(由Karl-Fischer分析而得)，因此得到粗產(chǎn)物(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸。將粗產(chǎn)物(129kg)裝入容器中。將水(774kg)和無(wú)水乙醇(774kg)添加至所述容器中且使所得混合物加熱回流(約80r)直至溶液澄清。使溶液通過(guò)拋光過(guò)濾器(lp)且再次加熱回流直至溶液澄清。使溶液以約-20C/小時(shí)的速率冷卻直至其溫度降至約5X:的溫度，在此期間沉淀形成。使所得漿液維持在ox:至5x:約90分鐘以完成結(jié)晶過(guò)程。過(guò)濾漿液以分離標(biāo)題化^^物，用無(wú)水乙醇(305kg)沖洗所述標(biāo)題化合物且借助氮吹掃在40"C至約45t:的溫度下將其干燥直至水含量(由Karl-Fischer分析而得)和乙醇含量(由氣相色譜法分析而得)皆低于0.5重量％。由(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯制備標(biāo)題化合物的代表性產(chǎn)率為約76%。實(shí)施例13.(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸甲酯的制備甲烷磺酸2-曱基-戊酯將甲苯(170ml，8.5ml/g,以2-曱基-戊-l-醇的重量計(jì))，2-曱基-戊-1-醇(20.OOg，0.20摩爾，一次性加入)和三乙胺(21.78g，0.22摩爾，一次性加入)加入反應(yīng)容器中。將反應(yīng)混合物冷卻至-iot;至-5x:的溫度且在維持溫度于-iox:至-5x:的同時(shí)逐滴添加甲磺酰氯(22.42g，0.2摩爾)。在-10C至-5t:的溫度下攪拌所述反應(yīng)1小時(shí)。用1.0MHC1水溶液(60ml，3ml/g,以2-曱基-戊-l-醇的重量計(jì))使反應(yīng)中止，且攪拌30分鐘。將反應(yīng)混合物溫至251C且使相分離。用1MNaHC03水溶液(60ml，3ml/g，以2-甲基-戊-l-醇的重量計(jì))洗滌有機(jī)相且使相分離。將所得的甲烷磺酸2-甲基-戊酯的甲苯溶液直接用于下一步驟。l-溴-2-曱基-戊烷將甲烷磺酸2-曱基-戊酯(35.29g，0.2摩爾，甲苯溶液)、H20(14ml,0.4ml/g，以甲烷磺酸2-甲基-戊酯的重量計(jì))、NaBr(20.14g，0.2摩爾)和溴化四丁基銨(12.61g，0.04摩爾)加入反應(yīng)容器中。將反應(yīng)混合物加熱至90匸且在所述溫度下攪拌3小時(shí)。加入&0(600ml,3ml/g，以曱烷磺酸2-甲基-戊酯的重量計(jì))且使相分離。將所得的1-溴-2-甲基-戊烷的甲苯溶液直接用于以下步驟中。(5R)-3-氰基-5-甲基辛酸曱酯將甲苯(152ml,4.7ml/g，以l-溴-2-甲基-戊烷的重量計(jì))裝入反應(yīng)容器中，接著在攪拌下一次性加入叔丁醇鉀(76.87g，0.69摩爾)。將反應(yīng)混合物冷卻至-10匸至-5C的溫度。將4，4，4-三甲氧基-丁腈(37.39g，0.23摩爾)加入自上一步驟獲得的1-溴-2-曱基-戊烷的曱苯溶液中，且將所得溶液逐滴添加至所述反應(yīng)中，同時(shí)維持溫度于-5r。在-10x:至-5r的溫度下攪拌反應(yīng)混合物18小時(shí)。用H20(323ml，10ml/g，以l-溴-2-甲基-戊烷的重量計(jì))中止反應(yīng)，逐滴添加濃HC1(48.5ml)至pH處于1-2的范圍，且在25X:下攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)。使相分離，且用H20(323ml，10ml/g，以l-溴-2-甲基-戊烷的重量計(jì))洗滌有機(jī)相，且使相分離。自有機(jī)相蒸餾出曱苯至留下的體積為65ml。直接將所得的(5R)-3-氰基-5-甲基辛酸甲酯的甲苯溶液用于以下步驟中。(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸曱酯將NaHC03(47.4g，0.75當(dāng)量)、KH2P04(4.4g，0.042當(dāng)量)和HaOH(0.84g，0.031當(dāng)量)加入水(1500mL)中，且在室溫下攪拌直至形成溶液。將酶LipasePS-SD(30g，可自AmanoEnzymeInc.購(gòu)得)加入所述反應(yīng)中且在室溫下攪拌懸浮液直至形成溶液。將反應(yīng)混合物加熱至45t;，同時(shí)一次性添加(5R)-3-氰基-5-甲基辛酸曱酯(150g,0.76摩爾，1當(dāng)量)的甲苯溶液，歷經(jīng)5分鐘的時(shí)間。在"X:下劇烈攪拌所得的水懸浮液中的油48小時(shí)。反應(yīng)完成后，用叔丁基甲基醚(600mL)萃取產(chǎn)物，合并有機(jī)相，且用鹽水(300mL)洗滌有機(jī)相。以叔丁基甲基醚溶液的形式保留標(biāo)題化合物中以進(jìn)一步用于(3S，510-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸的制備。實(shí)施例14.(3S,5R)-3-氨基曱基-5-甲基-辛酸形式A方法A將乙醇(25mL)與水(25mL)加入容器中且劇烈攪拌以確?；旌稀＜尤氪种?3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸(2.5g)，且將懸浮液加熱至回流溫度(801C)直至形成溶液。在801C下攪拌所述反應(yīng)1小時(shí)以確保完全溶解。通過(guò)在線過(guò)濾器過(guò)濾溶液且將溶液轉(zhuǎn)移至無(wú)污斑的容器中。以o.5t:/分鐘的速率使溶液冷卻，直至溫度降至67x:，且在67x:下用0.5%在漿液中的微?；ХN(2.5-10pm)進(jìn)行接種。以0.5t:/分鐘的速率將懸浮液冷卻至0匸，且在0匸下攪拌12小時(shí)。通過(guò)過(guò)濾收集產(chǎn)物且用無(wú)微物水(2.5mL)洗滌濾餅，接著用無(wú)微物乙醇(2.SmL)洗滌濾餅。在真空、40匸下對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行塔盤(pán)干燥或直至水含量低于0.5重量％。方法B將在乙醇和水(50:50，按體積計(jì))中的粗制(3S，SR)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸(25mg/mL)加入反應(yīng)器中，且在整個(gè)過(guò)程中以適當(dāng)快的速率維持?jǐn)噭?dòng)。以0.5X:/分鐘的加熱速率將反應(yīng)器加熱至55X:的溫度且使溫度維持在551C1小時(shí)以確保完全溶解。以0.5C/分鐘的速率使溶液冷卻至51C且在所述溫度下維持15分鐘。用5%在漿液(75mg/mL，在乙醇中)中的微?；ХN(2-25jim)對(duì)溶液進(jìn)行接種。在接種前攪動(dòng)乙醇晶種漿液以破壞聚集。接種后再使溫度維持于51C下歷經(jīng)20分鐘。以0.5E/分鐘的速率使所得漿液冷卻至O匸且在所述溫度下維持2小時(shí)。在真空下過(guò)濾出固體且用冷乙醇洗滌。在真空烘箱中于50匸下千燥經(jīng)過(guò)濾的固體。方法c將在乙醇和水(50:50，按體積計(jì))中的粗制(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸(5Offlg/niL)加入反應(yīng)器中，且在整個(gè)過(guò)程中以適當(dāng)快的速率維持?jǐn)噭?dòng)。以0.5r/分鐘的加熱速率將反應(yīng)器加熱至80匸(回流溫度)。使溫度維持于80"C下歷經(jīng)1小時(shí)以確保完全溶解。以0.5匸/分鐘的速率使溶液冷卻至ox:且維持于o匸下歷經(jīng)2小時(shí)。在真空下過(guò)濾出固體且用冷乙醇洗滌。在真空烘箱中于50r下干燥經(jīng)過(guò)濾的固體。(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A的表征使用以下技術(shù)對(duì)(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A進(jìn)行表征1.粉末X射線衍射(PXRD)2.差示掃描量熱測(cè)定(DSC)3.傅立葉變換紅外光鐠(FT-IR)4.傅立葉變換拉曼光謙(FT-Raman)使用以下實(shí)驗(yàn)條件。粉末X射線衍射(PXRD)使用配有自動(dòng)試樣更換器、e.8測(cè)角儀、自動(dòng)光束發(fā)散狹縫和PSDVantec-1檢測(cè)器的Bruker-AXSLtd.D4粉末X射線衍射儀確定粉末X射線衍射圖樣。通過(guò)將其置放于低背景硅晶圓樣品底座上面制備用于分析的樣品。在旋轉(zhuǎn)樣品的同對(duì)使用工作于40kV/30mA下的X射線管的銅K-ctiX射線(波長(zhǎng)-1.5406A)照射試樣。用以在28范圍為2。至55。之間設(shè)定為每0.018°步進(jìn)O.2秒計(jì)數(shù)的連續(xù)模式運(yùn)轉(zhuǎn)的測(cè)角儀進(jìn)行分析。正如本領(lǐng)域技術(shù)人員將意識(shí)到的，以下給出的表1和表2內(nèi)的各種峰的相對(duì)強(qiáng)度可因許多因素(諸如，X射線光束下晶體的定向效應(yīng)或所分析材料的純度或樣品的結(jié)晶度)而變化。峰位置亦可因樣品高度的變化而移動(dòng)，但峰位置仍基本上如給定表中所限定。本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)布拉格(Bragg)方程式-n入=2dsin6亦應(yīng)了解使用不同波長(zhǎng)的測(cè)量將導(dǎo)致產(chǎn)生不同位移。這些通過(guò)使用替代波長(zhǎng)所產(chǎn)生的其它PXRD圖樣可視為本發(fā)明的結(jié)晶物質(zhì)的PXRD圖樣的替代性表示，且這些圖樣亦在本發(fā)明的范圍內(nèi)。形式A的晶體結(jié)構(gòu)可通過(guò)單晶X射線衍射分析而確定。此外，可使用AccelrysMaterialsStudi。TM[版本2.2]的"ReflexPowderDiffraction"模組自單晶結(jié)構(gòu)計(jì)算出26角、d間距和相對(duì)強(qiáng)度。在各種情況下有關(guān)的模擬參數(shù)為波長(zhǎng)-l.540562A(CuKct)偏振因子=0.5Pseudo-Voigt特征(U-O.01，V--0.001，W-0.002)差示掃描量熱測(cè)定(DSC)使用PerkinElmerPyris1DSC在50nl的具有鋁蓋的通風(fēng)鋁盤(pán)中進(jìn)行DSc。在ioc至215x:的范圍內(nèi)，大致以每分鐘iox:的速率加熱3mg樣品，同時(shí)用氮?dú)膺M(jìn)行凈化。FT-IR使用配備"GoldenGate"單次反射ATR附件(鉆石頂板和硒化鋅透鏡)和DTGSKBr檢測(cè)器的ThermoNicoletAvatarFT-IR光i普儀獲取IR光鐠。以2cm—1的分辨率釆集光譜且總共掃描256次。使用Happ-Genzel變足跡法。因FT-IR光鐠使用單次反射ATR進(jìn)行記錄，故無(wú)需進(jìn)行制樣。使用ATRFT-IR會(huì)引起紅外波段的相對(duì)強(qiáng)度不同于那些使用KBr碟或石蠟糊制樣而獲得的透射FT-IR光譜中所見(jiàn)的紅外波段的相對(duì)強(qiáng)度。由于ATRFT-IR的性質(zhì)，較低波數(shù)的波段比那些較高波數(shù)的波段更強(qiáng)。除非另有說(shuō)明，實(shí)驗(yàn)誤差為±2cm1。FT-Raman使用配備1064nmNdYAG激光和鍺檢測(cè)器的ThermoNicoler960FT-Raman光鐠儀釆集拉曼光鐠。使用320mW激光功率對(duì)樣品采集光譜且分辨率為2cm_1，共掃描5140次。使用Happ-Genzel變跡法。將各樣品(大致5mg)置放于玻璃小瓶中且暴露于激光輻射。數(shù)據(jù)以作為Raman位移函數(shù)的Raman強(qiáng)度的形式而呈現(xiàn)。除非另有說(shuō)明，實(shí)驗(yàn)誤差為土2ciif1。數(shù)據(jù)圖1中顯示測(cè)量得到的PXRD圖樣。其中相對(duì)強(qiáng)度高于5%的主要特征峰列于表l中。圖2中顯示計(jì)算而得的PXRD圖樣。其中相對(duì)強(qiáng)度高于5%的主要特征峰列于表2中。(3S，5R)-3-氨基甲基-5-曱基-辛酸形式A的主要特征峰在26角為7.7度，15.8度、20，8度和23.1度士O.2度處。圖3中顯示(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A的DSC熱分析圖，且所述圖顯示在1941C土21C時(shí)出現(xiàn)一個(gè)單尖銳吸熱峰最高值。此現(xiàn)象表示(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A的熔化。(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A的FT-IR光傳顯示于圖4和圖5中。其中(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A的主要特征峰列于表3中。(3S,5R)-3-氨基甲基-5-曱基-辛酸形式型的FT-Raman光語(yǔ)顯示于圖6和圖7中。(3S，5R)-3-氨基曱基-5-甲基-辛酸形式A的主要特征峰列于表4中。表1.來(lái)自(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A的測(cè)量圖樣的PXRD特征峰<table>tableseeoriginaldocumentpage76</column></row><table>表2.來(lái)自(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A的計(jì)算圖樣的PXRD特征峰<table>tableseeoriginaldocumentpage76</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage77</column></row><table>表3.(3S，5R)-3-氨基曱基-5-曱基-辛酸形式AFT-IR數(shù)據(jù)的峰列表主要吸收光譜帶頻率列于下表中(W:弱，m:中等，s:強(qiáng))。強(qiáng)度指定是相對(duì)于光譜中的主要光譜帶而言且并非基于來(lái)自基線測(cè)量得到的絕對(duì)值。<table>tableseeoriginaldocumentpage77</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage78</column></row><table>表4.(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式AFT-Raman數(shù)據(jù)的峰列表相對(duì)強(qiáng)度、良好確定的FT-Raman光譜帶的峰表。強(qiáng)度指定是相對(duì)于光譜中的主要光譜帶而言且并非基于來(lái)自基線測(cè)量得到的絕對(duì)值。(W:弱，m:中等，s:強(qiáng)，vs:極強(qiáng))<table>tableseeoriginaldocumentpage78</column></row><table>圖1顯示(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A測(cè)量得到的PXRD圖樣圖2顯示(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A計(jì)算得到的PXRD圖樣圖3顯示(3S,5R)-3-氨基曱基-5-甲基-辛酸形式A的DSC熱分析圖固4顯示(3S，5R)-3-氨基曱基-5-甲基-辛酸形式A的FT-IR光譜圖5顯示(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A的FT-IR光鐠的指紋區(qū)圖6顯示(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A的FT-Raman光譜圖7顯示(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸形式A的FT-Raman光鐠的指紋區(qū)應(yīng)注意除非上下文清楚地另有說(shuō)明，本說(shuō)明書(shū)和隨附權(quán)利要求中所使用的單數(shù)詞(諸如，"一，，或"所述")可以指單個(gè)物件或是指多個(gè)物件。因此，例如，提及含有"一種化合物"的組合物可包括單種化合物或兩種或兩種以上的化合物。應(yīng)了解以上的描述是用來(lái)說(shuō)明而非限制。在閱讀以上的描述后，許多實(shí)施例對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言將顯而易見(jiàn)。因此，本發(fā)明的范圍應(yīng)根據(jù)隨附權(quán)利要求而確定且包括這些權(quán)利要求對(duì)其享有權(quán)利的等同物的全部范圍。所有論文和參照文獻(xiàn)，包括專(zhuān)利、專(zhuān)利申請(qǐng)和出版物的公開(kāi)內(nèi)容的全文以引用方式并入本文并用于所有目的。權(quán)利要求1.用于制備式10的化合物或其鹽的方法其中R1和R2各自獨(dú)立選自氫和C1-3烷基，其限制條件為R1與R2不同時(shí)為氫；R3選自C1-6烷基、C2-6烯基、C3-6環(huán)烷基、C3-6環(huán)烷基-C1-6烷基，C1-6烷氧基，芳基和芳基-C1-3烷基，其中各芳基部分任選被1至3個(gè)獨(dú)立選自C1-3烷基、C1-3烷氧基，氨基、C1-3烷基氨基和鹵素的取代基取代，其中上述的烷基、烯基、環(huán)烷基和烷氧基部分中的每一個(gè)任選被1至3個(gè)氟原子取代；并且R8選自C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-7環(huán)烷基、C3-7環(huán)烯基，鹵代-C1-6烷基、鹵代-C2-6烯基、鹵代-C2-6炔基、芳基-C2-6烷基、芳基-C2-6烯基和芳基-C2-6炔基；其中上述芳基部分中的每一個(gè)可以任選被1至3個(gè)獨(dú)立選自C1-3烷基，C1-3烷氧基，氨基、C1-3烷基氨基和鹵素的取代基取代；且其中所述方法包含(a)使式7的化合物與酶接觸，其中所述酶將所述式7的化合物非立體選擇性地水解為式11a的化合物；其中R1、R2和R3如式10的化合物中所定義；并且式7中的R6選自C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-7環(huán)烷基、C3-7環(huán)烯基、鹵代-C1-6烷基、鹵代-C2-6烯基、鹵代-C2-6炔基、芳基-C1-6烷基、芳基-C2-6烯基和芳基-C2-6炔基，其中上述芳基部分中的每一個(gè)可以任選被1至3個(gè)獨(dú)立選自C1-3烷基；C1-3烷氧基、氨基、C1-3烷基氨基和鹵素的取代基取代，和(b)分離所述式10的化合物。2.權(quán)利要求1的方法，其中W和W為Cw烷基。3.權(quán)利要求1或2的方法，其中R'和W各自獨(dú)立為氫或曱基，其限制條件為^與R2不同時(shí)為氫，且R3為C卜6烷基。4.權(quán)利要求l-3任一項(xiàng)的方法，其中W為氫，W為甲基，且R3為乙基。5.權(quán)利要求l-4任一項(xiàng)的方法，其中在步驟(a)中的所述酶為脂肪酶。6.權(quán)利要求5的方法，其中所述脂肪酶源自微生物洋蔥伯克霍爾德菌(^/rl/o^/er/acepac/a)或微生物疏棉狀嗜熱絲孢菌7.權(quán)利要求l-6任一項(xiàng)的方法，其進(jìn)一步包含以下步驟(c)任選將所述式10的化合物轉(zhuǎn)化為其鹽優(yōu)選轉(zhuǎn)化為其堿金屬鹽；最優(yōu)選轉(zhuǎn)化為其鈉鹽。8.式7的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中R1、R2、R3和^如權(quán)利要求l所定義。9.權(quán)利要求8的化合物，其中R6為Cw烷基。10.權(quán)利要求8或9的化合物，其中R'為甲基、乙基、正丙基或異丙基。11.式10的化侖物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>或其鹽，其中R1,R2、R3和R8如權(quán)利要求1所定義。12.權(quán)利要求10的化合物，其中R8選自氫和Cw烷基。13.權(quán)利要求11或12的化合物，其中R8是選自氫、曱基、乙基、正丙基和異丙基。14.權(quán)利要求8-13任一項(xiàng)的化合物，其中！^和^各自獨(dú)立為氫或曱基，其限制條件為R'與R2不同時(shí)為氫，且R3為d—6烷基。15.權(quán)利要求8-14任一項(xiàng)的化合物，其中W為氫，r為甲基，且W選自曱基、乙基、正丙基和異丙基。16.權(quán)利要求8-15任一項(xiàng)的化合物，其中W為氫，W為甲基，且W為乙基。17.權(quán)利要求8的化合物，其選自(2'R)-2-氰基-2-(2'-甲基-丁基)-琥珀酸二乙酯；(2'R)-2-氰基-2-(2'-甲基-戊基)-琥珀酸二乙酯；(2'R)-2-氰基-2-(2'-甲基-己基)-琥珀酸二乙酯(2'R)-2-氰基-2-(2'，4'-二甲基-戊基)-琥珀酸二乙酯；(5R)-3-氰基-5-甲基庚酸乙酯；(5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯；(5R)-3-氰基-5-曱基-壬酸乙酯；(5R)-3-氰基-5，7-二甲基-辛酸乙酯；(5R)-3-氰基-5-甲基-庚酸；(5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸；(5R)-3-氰基-5-甲基-壬酸；(5R)-3-氰基-5，7-二曱基-辛酸；(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-庚酸；(3S，5R)-3-氰基-5-曱基-辛酸；(3S，5R)-3-氰基-5-曱基-壬酸；(3S，5R)-3-氰基-5，7-二甲基-辛酸；(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-庚酸乙酯；(3S，5R)-3-氰基-5-曱基-辛酸乙酯；(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-壬酸乙酯；(3S，5R)-3-氰基-5，7-二甲基-辛酸乙酯；(3R，5R)-3-氰基-5-曱基-庚酸；(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸；(3R，5R)-3-氰基-5-曱基-壬酸；(3R，5R)-3-氰基-5，7-二甲基-辛酸；(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-庚酸乙酯；(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸乙酯；(3R，5R)-3-氰基-5-甲基-壬酸乙酯；(3R,5R)-3-氰基-5，7-二甲基-辛酸乙酯；及其鹽。18.權(quán)利要求17的化合物，其為(3S，5R)-3-氰基-5-甲基-辛酸或其鹽或酯。19.制備式l的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物或水合物的方法其中R1，112和113如權(quán)利要求1、3或4中任一項(xiàng)所定義；且其中所述方法包含權(quán)利要求1至7任一項(xiàng)中所定義的方法的步驟(a)至(c)，且進(jìn)一步包含以下步驟(d)還原式10的化合物或其鹽的氰基部分以得到式1的化合物或其鹽和(e)任選進(jìn)一步將所得的式1的化合物或其鹽轉(zhuǎn)化為其藥學(xué)上可接受的鹽，溶劑合物或水合物。20.制備式7的化合物或其鹽的方法其中R1、R2和W如權(quán)利要求1、3和4任一項(xiàng)中所定義；且R6為d-6烷基，且其中所述方法包含(a)在堿存在下使式19的化合物與式20的原酸酯化合物反應(yīng)，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>其中R1、R2、W和RS如式7的化合物中所定義；且乂2為鹵素，和(b)使所得的原酸酯中間產(chǎn)物水解以得到所述式7的羧酸酯。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了用于制備光學(xué)活性的式1的γ-氨基酸的物質(zhì)和方法，所述γ-氨基酸可結(jié)合鈣離子通道的α-2-δ(α2δ)亞單位。文檔編號(hào)C07C255/19GK101341117SQ200680048461公開(kāi)日2009年1月7日申請(qǐng)日期2006年12月11日優(yōu)先權(quán)日2005年12月21日發(fā)明者B·A·皮爾曼,J·E·薩恩斯,L·C·弗蘭克林,L·M·莫塔,M·C·埃文斯,N·J·維利斯,T·N·南寧加申請(qǐng)人:輝瑞產(chǎn)品公司