專利名稱：d4T-5′-氫亞磷酸異丙酯的合成方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種核苷氫亞磷酸酯，尤其是涉及一種如式I所示結(jié)構(gòu)的具有潛在抗艾滋 病病毒活性的2', 3，-雙脫氫-2，， 3，-雙脫氧胸苷(2，， 3，-didehydro-2，， 3，-dideoxythymidine，簡稱 為d4T) -5'-氫亞磷酸異丙酯(簡稱為d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯)的合成方法。
自1987年第一個在臨床上使用的治療HIV感染藥物齊多夫定(Zidovudine,AZT,又稱疊氮 胸苷)問世以來，核苷類藥物在治療艾滋病引起的相關(guān)疾病中一直占據(jù)著重要的地位。到2007 年，美國FDA批準在美國上市的29種治療艾滋病感染藥物中有13種屬于核苷類藥物，占總 數(shù)的45%。但在臨床上長期單獨使用核苷類藥物都會有不同程度的耐藥性出現(xiàn)，如使用AZT 半年就會導(dǎo)致病毒變異株的出現(xiàn)(AntonelIi G Turriziani 0, et al. AIDS Res. Hum. Retroviruses 1996，12:223~228.)。另外，有些核苷類藥物在使用中也會產(chǎn)生其它毒副作用。比如，AZT對 造血系統(tǒng)會產(chǎn)生毒性，由它引起的骨髓抑制效應(yīng)，比如白血病和貧血癥等已有報道(1、 Inoue T, Tsushita K, Itoh T, et al. Antimicrob. Agents Chemother. 1989, 33: 576~579 ; 2、 Dornsife R E, Averett D R. Antimicrob. Agents Chemother. 1996， 40: 514~519)。因此通過對這類藥物進行改性 修飾從而降低藥物毒性和病毒耐藥性是目前抗艾滋病藥物設(shè)計的一個研究熱點。
一些核苷氫亞磷酸酯，如AZT-5'-氫亞磷酸環(huán)己酯(結(jié)構(gòu)如下式II所示)，d4T-5'-氫亞磷 酸異丙酯等，由于它們的結(jié)構(gòu)中具有親酯性的基團，使其比相應(yīng)的核苷具有更強的對細胞膜 的穿透能力，從而擁有更高的抗艾滋病病毒的活性，更低的細胞毒性；親酯性基團的引入也 使得它們更不易引起艾滋病病毒的變異。臨床實驗數(shù)據(jù)顯示,在幾種核苷氫亞磷酸酯中，d4T-5'
背景技術(shù)：
-氫亞磷酸異丙酯具有很強的抗艾滋病病毒活性(Prokrovsky A G， Pronayeva T R， KrayevskyA A， et al. 7Vwc/eas7'fife& iVwc/eo//^ M/c/e/c Jc/成2001， 20(4—7), 767.)。
O
d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的合成方法與其它核苷氫亞磷酸酯的合成方法類似；核苷氫亞磷
酸酯的合成方法通常有以下4種
(a)通過核苷氫亞磷酸單酯在耦合試劑的存在下和另外一分子羥基化合物進行耦合(文
獻Stawinski， J.o/Og朋0/7/w印/20rwj CTze/w^^y, Marcel Dekker Inc., New York, 1992:
377-434)。該方法步驟少，操作簡單，但需首先制備出較難分離得到的核苷氫亞磷酸單酯。
(b) 通過二苯基氫亞磷酸酯的在堿的作用下進行連續(xù)酯交換合成((a)KersA， Kers, I， Kraszewski A， Sobkowski M， Szabo T， Thelin M， Zain， R.; Stawinski, J. iVwc/e柳'^ M/c/W/fifes 1996, 75, 361. (b) Xiao， Q.; Sun, J.; Ju， Y.; Zhao， Y. F.; Cui, Y. X. r"ra/2e^0"2002, ￥3(30), 5281.);該方法無須使反應(yīng)體系嚴格無水，給操作帶來一定方便，但產(chǎn)物較難分離純化；
(c) 通過核苷磷酰胺二酯在1//-四氮唑的水溶液中水解制備得到(PadiyaKJ， SalunkheM M.歷oorg. MM. Ozem. 2000, & 337.)。該方法步驟少，操作簡單，但需要首先制備出較難分 離得到的核苷磷酰胺二酯。
(d) 從三氯化磷和核苷出發(fā)，用類Abuzov反應(yīng)合成這類化合物(文獻SunXB， KangJX， ZhaoYF， C/ e肌Co柳w. 2002,20: 2414.)。該方法原料易得，但所需步驟相對較多，反應(yīng)時 間長，反應(yīng)產(chǎn)物較復(fù)雜，往往需要多次用硅膠柱層析才能得到純化的產(chǎn)物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的合成方法。
本發(fā)明的技術(shù)方案是用氯化一2 —氯一1， 3 — 二甲基咪唑啉DMC(2-chloro-l， 3-dimethylimidazolinium Chloride,結(jié)構(gòu)如下式VH所示)為縮合劑，使d4T (結(jié)構(gòu)如式IV 所示)和異丙醇在堿性溶劑里，先后與亞磷酸(結(jié)構(gòu)如下式V所示)的兩個羥基縮合，用一 鍋法合成d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯。
<formula>formula see original document page 6</formula>本發(fā)明所述的d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的結(jié)構(gòu)式為式I :
<formula>formula see original document page 6</formula>本發(fā)明所述的d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的合成方法可以通過下式來表示:
<formula>formula see original document page 6</formula>式中，Base:指有機堿。
由亞磷酸出發(fā)，在堿性條件下用縮合劑氯化一2—氯一1，3 — 二甲基咪唑啉(2-chloro-1, 3-dimethylimidazolinium Chloride, DMC)使其與2，， 3'-雙脫氫-2，， 3，-雙脫氧胸苷(d4T)縮合 生成式VI所示結(jié)構(gòu)的d4T-5'-氫亞磷酸單酯，然后在堿性條件下用縮合劑DMC使d4T-5'-氫亞 磷酸單酯與異丙醇縮合，生成如式I所示的目標產(chǎn)物d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯。
本發(fā)明包括以下步驟
1)在氮氣或氬氣保護下，把1. 0eq的2', 3'-雙脫氫-2', 3，-雙脫氧胸苷(d4T)溶解在液態(tài)有
6
機堿中，再加入1.0 1.2eq的亞磷酸，攪拌使其溶解，得溶液A;
2) 在氮氣或氬氣保護下，把1.0 1.5eq的氯化一2 —氯一l， 3 — 二甲基咪唑啉(DMC)溶 解在第l有機溶劑中，得溶液B，然后在攪拌及氮氣或氬氣保護下將溶液B加到溶液A中反 應(yīng)，得反應(yīng)液，直到點板發(fā)現(xiàn)2'，3'-雙脫氫-2',3'-雙脫氧胸苷(d4T)消失；
3) 在氮氣或氬氣保護下，把0.8 1.0eq的異丙醇溶解在第2有機溶劑中，得溶液C， 然后在攪拌及氮氣或氬氣保護下將溶液C加至反應(yīng)液中，得溶液D;
4) 在氮氣或氬氣保護下，把1.0 1.5eq氯化一2—氯一1， 3 — 二甲基咪唑啉(DMC)溶解 在第3有機溶劑中，得溶液E，然后在攪拌及氮氣或氬氣保護下將溶液E加到溶液D中反應(yīng)， 直到點板發(fā)現(xiàn)式d4T-5'-氫亞磷酸單酯消失；
5) 反應(yīng)結(jié)束后過濾除去固體，濾液經(jīng)減壓除去溶劑后用第4有機溶劑溶解，并用硅膠柱 層析純化，即分離出d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯。
所述的液態(tài)有機堿最好選自吡啶，2-甲基吡啶，3-甲基吡啶，4-甲基吡啶，2，3-二甲基 吡啶，2，4-二甲基吡啶，2，5-二甲基吡啶，2，6-二甲基吡啶，2，3，5-三甲基吡啶，2， 4,6_三 甲基吡啶，六氫吡啶，四氫吡咯，三甲胺，三乙胺，三丁胺等中的至少一種。
在步驟2)中，所述的反應(yīng)的溫度最好為一10 60"C，反應(yīng)的時間最好為2 30min。第 l有機溶劑選自二氯甲垸，三氯甲烷，1,2-二氯乙垸，乙酸乙酯，四氫呋喃，1，4-二氧六環(huán)， 乙腈等中的至少一種。
第2有機溶劑選自二氯甲垸，三氯甲烷，1，2-二氯乙烷，乙酸乙酯，四氫呋喃，1,4-二 氧六環(huán)，乙腈等中的至少一種。
在步驟4)中，所述的反應(yīng)的溫度最好為一10 60。C，反應(yīng)的時間最好為2 30min。第 3有機溶劑選自二氯甲烷，三氯甲垸，1，2-二氯乙垸，乙酸乙酯，四氫呋喃，1，4-二氧六環(huán)， 乙腈等中的至少一種。
第4有機溶劑選自二氯甲烷，三氯甲烷，1,2-二氯乙烷，乙酸乙酯，四氫呋喃，1,4-二 氧六環(huán)，乙腈等中的至少一種。
與現(xiàn)有的合成d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的方法相比，本發(fā)明具有以下突出優(yōu)點 (l)原料易得，反應(yīng)所需的d4T是一種上市多年的抗艾滋病藥物，在國內(nèi)有多家企業(yè)大 量生產(chǎn)，可方便的購得；亞磷酸，二氯甲烷，乙酸乙酯，吡啶等都是常規(guī)試劑，也可方便購 得；DMC需要自己制備，但制備方法成熟，且制備所需時間短，整個制備DMC的過程只需 10h;所合成的d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的純度一般可達到98%以上。 (2) 反應(yīng)時間短，本發(fā)明所述的合成d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的反應(yīng)在15 40min之內(nèi)就 可以完成，比其它合成d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的方法要短許多，提高了效率；且產(chǎn)率可以達 到66%，與其它合成d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的方法的產(chǎn)率相近；
(3) 反應(yīng)條件溫和，本發(fā)明所述的合成d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的反應(yīng)，無需加熱，無需 冷卻，在室溫下就可以進行，節(jié)約能耗；
(4) 反應(yīng)步驟少，本發(fā)明所述的4成d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的反應(yīng)只需兩步就可以合成 出d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯；節(jié)省了溶劑和試劑；
(5) 產(chǎn)物易于分離純化，反應(yīng)結(jié)束后，用硅膠柱層析就可以得到純度98X以上的d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯。
具體實施例方式
以下通過實施例對本發(fā)明作進一步的說明。 實施例1
在氮氣保護下，把224mg (lmmol) d4T溶解在5mL吡啶中，然后加入1. leq亞磷酸，25 t:攪拌使其溶解；在氮氣保護下用2mL.的二氯甲烷把l.leq DMC溶解；25°C，攪拌及氮氣保 護下把DMC的二氯甲烷溶液滴加到上述d4T和亞磷酸的吡啶溶液中，滴加完畢后，25。C攪拌 5minc
在氮氣保護下，把0.9eq的異丙醇溶解lmL在的二氯甲烷中，然后在攪拌及氮氣保護下 把該異丙醇的二氯甲烷溶液滴加到上述反應(yīng)液中。
在氮氣保護下，把l. leq DMC溶解在2mL二氯甲垸中，25'C，攪拌及氮氣保護下把DMC 的二氯甲烷溶液滴加到上述溶液中，滴加完畢后，25。C攪拌10min。
反應(yīng)結(jié)束后過濾除去固體，濾液經(jīng)減壓除去溶劑后得淡黃色液體，加入少量二氯甲烷溶 解后用硅膠柱層析純化，洗脫劑用二氯甲烷甲醇=30: 1 。
得白色固體218mg，產(chǎn)率66%。 .'H NMR (400MHz， CDC13): S = 8. 84(br, 1H， H-3)， 6.86'6.85*(d， JP—H= 700Hz, 1H，P-H), 7. 32 (d, J = 20Hz， 1H， H-6) ， 7. 05-7. 03 (m, 1H, H—1')， 6. 35-6. 33(m, 1H,H-2， ), 5. 93_5. 92(m, 1H, H-3， )' 5. 02 (br， 1H'H-4， ) ， 4. 85-4. 73 (m, 1H, 0-C H(CH3)2)， 4.34-4.20(m, 2H,H-5， )， 1. 93(s, 3H， CHa-5), 1. 37(d'J = 8Hz'6H, O-CH (CH3) 2)卯m; 13CNMR(100MHz， CDC13): S = 163.64， 150.77, 135.79， 133.00， 127.72, 111.25, 89.58， 84.55, 71.92, 65.25， 24.04， 23.77， 12. 38ppm; 31PNMR (160MHz， CDC13): S =8.35, 7.89 卯m; ESI-MS: 353.1 (M+Na)+。
實施例2
在氬氣保護下，把224mg (l醒ol) d4T溶解在5mL 2-甲基吡啶中，然后加入1.0eq亞磷 酸，0'C攪拌使其溶解；在氬氣保護下用2mL三氯甲烷把1.0eq DMC溶解；0°C，攪拌及氬氣 保護下把DMC的三氯甲垸溶液滴加到上述d4T和亞磷酸的2-甲基吡啶溶液中，滴加完畢后， O'C攪拌10min。
在氬氣保護下，把0.9eq的異丙醇溶解在lmL三氯甲垸中，然后在攪拌及氬氣保護下把 該異丙醇的三氯甲垸溶液滴加到上述反應(yīng)液中。
在氬氣保護下，把1.0eqDMC溶解在2mL三氯甲垸中，0'C，攪拌及氬氣保護下把DMC的 三氯甲烷溶液滴加到上述溶液中，滴加完畢后，0'C攪拌15min。
反應(yīng)結(jié)束后過濾除去固體，濾液經(jīng)減壓除去溶劑后得淡黃色液體，加入少量三氯甲烷溶 解后用硅膠柱層析純化，洗脫劑用三氯甲垸乙醇=40: 1 。
得白色固體204mg，產(chǎn)率62%。 !H NMR (400MHz， CDC13): S = 8. 83(br, 1H， H-3)， 6. 86， 6. 85*(d, JP—H = 700Hz， 1H， P-H)， 7. 31 (d， J = 20Hz， 1H' H-6)， 7. 04-7. 02(m， 1H， H_l，)， 6. 35-6.33(m， 1H,H-2' ) ， 5. 93-5. 92 (m, 1H， H-3， )' 5. 02(br, 1H, H-4' ) ， 4, 85—4. 73 (m, 1H, 0-C H(CH3)》，4. 34-4. 20(m，2H,H-5' )， 1. 93(s， 3H， CHj-5) ， 1. 37 (d, J = 8Hz， 6H， O-CH (CH3) 2) ppm; 13CNMR(100MHz， CDC13): S = 163.62， 150.75, 135.79, 133.01， 127.72， 111.25' 89.58' 84.55， 71.92, 65.22, 24.04, 23.77, 12. 38ppm; 31PNMR (160MHz， CDC13): S =8.34' 7.88 ppm; ESI-MS: 353.1 (M+Na)+。
本實施例2所用的2-甲基吡啶可用3-甲基吡啶，4-甲基吡啶，或2-甲基吡啶，3-甲基 吡啶，4-甲基吡啶的任意配比混合液代替。
實施例3
在氮氣保護下，把224mg (lmmol) d4T溶解在5mL 2,3-二甲基吡啶中，然后加入1. 2eq 的亞磷酸，25'C攪拌使其溶解；在氮氣保護下用2mL四氫呋喃把1.2eq的DMC溶解；一10'C， 攪拌及氮氣保護下把DMC的四氫呋喃溶液滴加到上述d4T和亞磷酸的2， 3-二甲基吡啶溶液中， 滴加完畢后，在一l(TC下攪拌15min。
在氮氣保護下，把1.0eq的乙醇溶解lmL在四氫呋喃中，然后在攪拌及氮氣保護下把該 乙醇的四氫呋喃溶液滴加到上述反應(yīng)液中。
在氮氣保護下，把1.2eq DMC溶解在2mL四氫呋喃中，在一10'C下，攪拌及氮氣保護下 把DMC的四氫呋喃溶液滴加到上述溶液中，滴加完畢后，在一10'C下攪拌15min。
反應(yīng)結(jié)束后過濾除去固體，濾液經(jīng)減壓除去溶劑后得淡黃色液體，加入少量乙酸乙酯溶 解后用硅膠柱層析純化，洗脫劑用乙酸乙酯甲醇=30: 1 。
得白色固體177mg,產(chǎn)率56%。 NMR (400MHz， CDC13): S = 9. 03(br， 1H， H-3)， 6.86，6.85*(d， Jp— = 700Hz， 1H, P-H), 7. 30(d, J = 16Hz， 1H， H-6), 7. 06-7. 04(m， 1H， H-1，)， 6. 36-6.32(m, 1H，H-2， ) ， 5. 96-5. 92 (m, 1H， H-3， ), 5. 02(br， 1H, H_4， ), 4. 35-4. 26 (m， 2H, 0-C H2CH3) ， 4. 23-4. 13 (m， 2H, H-5， ) ， 1. 92 (s， 3H' CHa-5) ， 1. 37 (t' J = 7. 2Hz, 3H, 0-CH2CH3)卯m; 13C NMR(100MHz， CDC13): S= 163.71， 150.82, 135.75, 132.90， 127.77, 111.24, 89.59, 84.53， 65.38， 62.36, 16.32, 12. 32ppm; 31PNMR (160MHz， CDC13，) S =9.75， 9. 36ppm; ESI-MS: 339.1 (M+Na)+。
本實施例3所用的2，3-二甲基吡啶可用2,4-二甲基吡啶，2,5-二甲基吡啶，2,6-二甲基 吡啶，2，3，5-三甲基吡啶，2,4,6-三甲基吡啶或2，3-二甲基吡啶，2,4-二甲基吡啶，2， 5-二 甲基吡啶，2，6-二甲基吡啶，2,3,5-三甲基吡啶，2，4,6-三甲基吡啶的任意配比混合液代替。
實施例4
在氮氣保護下，把224mg (lmmol) d4T溶解在5raL六氫吡啶中，然后加入1. leq的亞磷 酸，4(TC攪拌使其溶解；在氮氣保護下用2mL 1， 2-二氯乙烷把1. leq的DMC溶解；40°C，攪 拌及氮氣保護下把DMC的1， 2-二氯乙烷溶液滴加到上述d4T和亞磷酸的六氫吡啶溶液中，滴 加完畢后，4(TC攪拌10min。
在氮氣保護下，把1.0eq的正丁醇溶解lmL在l，2-二氯乙垸中，然后在攪拌及氮氣保護 下把該正丁醇的1,2-二氯乙垸溶液滴加到上述反應(yīng)液中。
在氮氣保護下，把l.leq DMC溶解在2mL 1,2-二氯乙烷中，4CTC，攪拌及氮氣保護下把 DMC的1，2-二氯乙烷溶液滴加到上述礙液中，滴加完畢后，4(TC攪拌10min。
反應(yīng)結(jié)束后過濾除去固體，濾液經(jīng)減壓除去溶劑后得淡黃色液體，加入少量二氯甲烷溶 解后用硅膠柱層析純化，洗脫劑用二氯甲烷乙醇=20: 1 。
得白色固體200mg，產(chǎn)率58%。 ^ NMR (400MHz， CDC13): S= 8. 96(br， 1H， H-3)， 6. 87,6. 84*(d, JP—H=704Hz， 1H, P-H), 7. 30(d， J = 16Hz， 1H, H-6)， 7. 05(s， 1H'H-l， )， 6.34(d, J =8Hz'lH，H-2' )，5.95-5.91(m, lH，H-3， )， 5. 02(br, 1H'H_4， ), 4. 37-4. 23(m， 2H， 0-CH2(CH2)2 CH3), 4. 18—4. 04 (m， 2H' H—5' )' 1. 92 (s， 3H, CHs—5), 1. 68-1. 64 (m, 2H， 0—CH2CH2CH2CH3) ， 1. 45_1. 3 5 (m, 2H, 0-CH2CH2CH2CH3) ， 0. 94 (t, J=7. 4Hz, 3H, 0-CH2CH2CH2CH3) ppm; 13C NMR (lOOMHz， CDC13): S = 163.67, 150.78, 135.73， 132.90, 127.77， 111.27, 89.60, 84.52, 66.04， 65.39, 32.31， 18.63, 13.46， 12. 33ppm; 31PNMR (160MHz, CDC13): S =9.92， 9. 57 ppm; ESI-MS:
367.1 (M+Na)十。 實施例5
在氮氣保護下，把224mg (lmmol) d4T溶解在5mL四氫吡咯中，然后加入1. leq的亞磷 酸，60。C攪拌使其溶解；在氮氣保護下用2tnL 1，4-二氧六環(huán)把1.5eq的DMC溶解；6CTC，攪 拌及氮氣保護下把DMC的1， 4-二氧六環(huán)溶液滴加到上述d4T和亞磷酸的四氫吡咯溶液中，滴 加完畢后，6(TC攪拌2min。
在氮氣保護下，把1.0eq的異丁li溶解lmL在1,4-二氧六環(huán)中，然后在攪拌及氮氣保護 下把該異丁醇的1， 4-二氧六環(huán)溶液滴加到上述反應(yīng)液中。
在氮氣保護下，把1.5eq DMC溶解在2mL 1,4-二氧六環(huán)中，60°C，攪拌及氮氣保護下把 DMC的1，4-二氧六環(huán)溶液滴加到上述溶液中，滴加完畢后，6(TC攪拌5min。
反應(yīng)結(jié)束后過濾除去固體，濾液經(jīng)減壓除去溶劑后得淡黃色液體，加入少量三氯甲烷溶 解后用硅膠柱層析純化，洗脫劑用三氯甲垸甲醇=50: 1 。
得白色固體210mg，產(chǎn)率61%。 & NMR (400MHz， CDC13): S = 8. 94(br， 1H， H_3)， 6.86，6.85*(d, JP—H= 700Hz, 1H， P—H), 7.30(d，J= 16Hz, 1H， H—6)， 7. 06—7. 03(m, 1H， H-l，)， 6. 34(d， J=8Hz， 1H，H-2， )， 5. 95—5. 92(m, 1H， H_3， )， 5. 02(br， 1H， H_4， )， 4. 37—4. 22(m， 2H， 0_ CH2CH(CH3)2), 3.94-3.87(m，2H，H-5, )'， 1. 99-1. 93(m， 1H， 0-CH2CH(CH3)2)， 1. 92(s， 3H， CH3_5), 0.96-0.94(m'6H，0-CH2CH(CH3)2)ppm; 13C NMR (lOOMHz， CDC13): S = 163.65， 150.79, 135.71, 132.90, 127.77, 111.26, 89.62, 84.52, 72.07, 65.40， 29.10， 18. 59—18. 55 (2C), 12. 35ppm; 31PNMR (160MHz, CDC13): S = 9.93, 9. 65 ppm; ESI-MS: 367.1 (M+Na)+。
實施例6
在氬氣保護下，把224mg (lmmol) d4T溶解在5mL三乙胺中，然后加入1. leq的亞磷酸， 25。C攪拌使其溶解；在氬氣保護下用2mL乙酸乙酯把l.leq的DMC溶解；一5。C，攪拌及氮氣 保護下把DMC的乙酸乙酯溶液滴加到上述d4T和亞磷酸的三乙胺溶液中，滴加完畢后，一5 "C攪袢12min。
在氬氣保護下，把0.9eq的叔丁醇溶解lmL在乙酸乙酯中，然后在攪拌及氬氣保護下把 該叔丁醇的乙酸乙酯溶液滴加到上述反應(yīng)液中。
在氬氣保護下，把l. leq DMC溶解在2mL乙酸乙酯中，—5°C，攪拌及氬氣保護下把DMC 的乙酸乙酯溶液滴加到上述溶液中，滴加完畢后，一5'C攪拌20min。
反應(yīng)結(jié)束后過濾除去固體，濾液經(jīng)減壓除去溶劑后得淡黃色液體，加入少量乙酸乙酯溶 解后用硅膠柱層析純化，洗脫劑用乙酸乙酯乙醇=40: 1 。
得白色固體193mg，產(chǎn)率56%。 NMR (400MHz， CDC13): S = 8. 82 (br, 1H, H-3)， 6. 89， 6. 86*(d, JP—H=700Hz, 1H, P_H)， 7. 34(d， J=20Hz, 1H， H-6)， 7. 04(s, 1H, H-l， )， 6. 35-6. 32( m'lH,H-2， )' 5.93-5.91(m, 1H,H-3， )' 5. 01 (br, 1H， H_4， )' 4. 33-4. 18(m, 2H'm， 2H, H-5') 1.92(s， 3H,CHa-5)， 1. 54(s, 9H， -C(CH3):,)ppm; 13C NMR (lOOMHz， CDC13): S = 163.68， 150.79， 135.90, 133.13, 127.61， 111,24, 89.56' 84.82， 84.62， 65,16, 30. 45-30. 33 (3C)， 12. 41ppm; 31PNMR (160MHz, CDC13): S = 4.70, 3.97 ppm; ESI陽MS: 367. 1 (M+Na)+。
本實施例6所用的三乙胺可用三甲胺代替。
實施例7
在氬氣保護下，把224mg (lmraol).d4T溶解在5mL三丁胺中，然后加入1. leq的亞磷酸， 25。C攪拌使其溶解；在氬氣保護下用2mL乙腈把l.leq的DMC溶解；一5'C，攪拌及氮氣保護 下把DMC的乙腈溶液滴加到上述d4T和亞磷酸的三丁胺溶液中，滴加完畢后，一5。C攪拌12min。
在氬氣保護下，把0.9eq的叔丁醇溶解lmL在乙腈中，然后在攪拌及氬氣保護下把該叔 丁醇的乙腈溶液滴加到上述反應(yīng)液中。
在氬氣保護下，把l. leqDMC溶解在2mL乙腈中，一5。C，攪拌及氬氣保護下把DMC的乙 腈溶液滴加到上述溶液中，滴加完畢后，一5。C攪拌20min。
反應(yīng)結(jié)束后過濾除去固體，濾液經(jīng)減壓除去溶劑后得淡黃色液體，加入少量乙酸乙酯溶 解后用硅膠柱層析純化，洗脫劑用乙酸乙酯乙醇=40: 1 。
得白色固體182mg，產(chǎn)率53%?！紿 NMR (400MHz， CDC13): S = 8. 82(br， 1H， H-3)， 6. 89, 6. 86* (d， JP—H=700Hz， 1H, P-H) ， 7. 33 (d' J=20Hz， 1H, H_6), 7. 04 (s, 1H， H-1， ) ， 6. 34-6. 31 ( m，lH,H-2， )，5. 93-5. 91(m, 1H,H—3, ), 5. 01 (br， 1H, H-4， )， 4. 32_4. 17(m， 2H， m， 2H, H—5，)， 1. 92 (s, 3H， CH3-5), 1. 54 (s， 9H, -C (Cft)》ppm; 13C NMR (100MHz ， CDC13): S = 163. 64， 150.78, 135.90, 133.13， 127.61， 111.24， 89.56, 84.81， 84.62， 65.16， 30. 46-30. 33 (3C)， 12. 40ppm; 31PNMR(160MHz， CDC13): S = 4. 70， 3. 97 ppm; ESI-MS: 367. 1 (M+Na)+。
*上述所有磷譜均用85%的磷酸作外標。
權(quán)利要求
1、d4T-5′-氫亞磷酸異丙酯的合成方法，其特征在于其合成路線為式中，Base指有機堿。
2、 如權(quán)利要求l所述的d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的合成方法，其特征在于包括如下步驟:1) 在氮氣或氬氣保護下，把1.0eq的2'，3'-雙脫氫-2'，3'-雙脫氧胸苷溶解在液態(tài)有機堿 中，再加入1.0 1.2eq的亞磷酸，攪拌使其溶解，得溶液A;2) 在氮氣或氬氣保護下，把1.0 1.5eq的氯化一2—氯一l， 3 — 二甲基咪唑啉溶解在第 l有機溶劑中，得溶液B，然后在攪拌及氮氣或氬氣保護下將溶液B加到溶液A中反應(yīng)，得反 應(yīng)液，直到點板發(fā)現(xiàn)2'， 3'-雙脫氫-2'， 3，-雙脫氧胸苷消失；3) 在氮氣或氬氣保護下，把0.8 1.0eq的異丙醇溶解在第2有機溶劑中，得溶液C， 然后在攪拌及氮氣或氬氣保護下將溶液C加至反應(yīng)液中，得溶液D;4) 在氮氣或氬氣保護下，把1.0 1.5eq氯化一2—氯一l， 3 — 二甲基咪唑啉溶解在第3 有機溶劑中，得溶液E，然后在攪拌及氮氣或氬氣保護下將溶液E加到溶液D中反應(yīng)，直到 點板發(fā)現(xiàn)式d4T-5'-氫亞磷酸單酯消失；5) 反應(yīng)結(jié)束后過濾除去固體，濾液經(jīng)減壓除去溶劑后用第4有機溶劑溶解，并用硅膠柱 層析純化，即分離出d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯。
3. 如權(quán)利要求2所述的d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的合成方法，其特征在于所述的液態(tài)有 機堿選自吡啶，2-甲基吡啶，3-甲基吡啶，4-甲基吡啶，2,3-二甲基吡啶,2,4-二甲基吡啶， 2,5-二甲基吡啶，2,6-二甲基吡啶，2,3,5-三甲基吡啶，2，4，6-三甲基吡啶，六氫吡啶，四 氫吡咯，三甲胺，三乙胺，三丁胺中的至少一種。
4. 如權(quán)利要求2所述的d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的合成方法，其特征在于在步驟2)中， 所述的反應(yīng)的溫度為一10 60'C，反應(yīng)的時間為2 30min。
5. 如權(quán)利要求2所述的d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的合成方法，其特征在于第l有機溶劑 選自二氯甲垸，三氯甲烷，1,2-二氯乙垸，乙酸乙酯，四氫呋喃，1,4-二氧六環(huán)，乙腈中的 至少一種。 '
6. 如權(quán)利要求2所述的d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的合成方法，其特征在于第2有機溶劑 選自二氯甲垸，三氯甲烷，1，2-二氯乙垸，乙酸乙酯，四氫呋喃，1，4-二氧六環(huán)，乙腈中的 至少一種。
7. 如權(quán)利要求2所述的d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的合成方法，其特征在于在步驟4)中， 所述的反應(yīng)的溫度為一10 6(TC,反應(yīng)的時間為2 30min。
8. 如權(quán)利要求2所述的d4T-5'-氫亞磷酸異丙酯的合成方法，其特征在于第3有機溶劑 選自二氯甲垸，三氯甲垸，1,2-二氯乙垸，乙酸乙酯，四氫呋喃，1,4-二氧六環(huán)，乙腈中的 至少一種。
9. 如權(quán)利要求2所述的d4T-5'-i亞磷酸異丙酯的合成方法，其特征在于第4有機溶劑 選自二氯甲烷，三氯甲烷，1,2-二氯乙烷，乙酸乙酯，四氫呋喃，1,4-二氧六環(huán)，乙腈中的 至少一種。
全文摘要
d4T-5′-氫亞磷酸異丙酯的合成方法，涉及一種核苷氫亞磷酸酯。提供一種d4T-5′-氫亞磷酸異丙酯的合成方法。將2’，3’-雙脫氫-2’，3’-雙脫氧胸苷溶解在有機堿中，加入亞磷酸溶解得溶液A；將氯化-2-氯-1，3-二甲基咪唑啉溶解在第1有機溶劑中得溶液B，將溶液B加到溶液A中反應(yīng)得反應(yīng)液，將異丙醇溶解在第2有機溶劑中得溶液C，將溶液C加至反應(yīng)液中得溶液D；將氯化-2-氯-1，3-二甲基咪唑啉溶解在第3有機溶劑中得溶液E，將溶液E加到溶液D中反應(yīng)，直到點板發(fā)現(xiàn)式d4T-5′-氫亞磷酸單酯消失；過濾除去固體，濾液除去溶劑后用第4有機溶劑溶解，用硅膠柱層析純化即得。
文檔編號C07H19/00GK101100478SQ20071000926
公開日2008年1月9日 申請日期2007年7月24日 優(yōu)先權(quán)日2007年7月24日
發(fā)明者吳劍彬, 果 唐, 趙玉芬, 祥 高 申請人:廈門大學(xué)