專利名稱：一種合成rna單體的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種RNA單體的制備方法。
背景技術(shù)：
RNA單體目前由Glen Research, Transgenomic， ChemGene等少數(shù)幾個大公 司壟斷生產(chǎn)，國內(nèi)無任何RNA單體生產(chǎn)廠家；我們依靠自有技術(shù)生產(chǎn)的RNA單體 質(zhì)量指標高于現(xiàn)有廠家生產(chǎn)產(chǎn)品；

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于采用獨特的2'-保護基為出發(fā)點，合成RNA單體。 本發(fā)明的上述目的是通過下述技術(shù)方案實現(xiàn)的 A.制備2，-保護基1_(3-氯苯)-4-哌啶烯(CPPB. 尿苷單體合成；
C. 胞苷單體合成；
D. 腺苷單體合成；
E. 鳥苷單體合成； 所述的RNA單體合成方法，其特征在于
采用獨特的2，-保護基1-(3-氯苯)-4-哌啶烯(CPP)為出發(fā)點，合成RNA 單體。


圖1為CPP制備方法結(jié)構(gòu)圖 圖2為尿苷單體合成流程圖 圖3為胞苷單體合成流程圖 圖4為腺苷單體合成流程圖 圖5為鳥苷單體合成流程圖
具體實施例方式
2'-保護基CPP的制備方法
3-氯丙酰氯與乙烯在劉易斯酸的作用下生產(chǎn)1, 5-二氯戊酮，再與3-氯 苯胺縮合形成N- (3-氯苯)-哌啶酮，后者再與甲醇縮合生成二甲基-N- (3-氯苯)-哌啶縮酮，最后再在減壓加熱條件下脫掉一分子甲醇生成所要的 1-(3-氯苯)-4-哌啶烯(CPP);
RNA合成單體的制備尿苷單體3 ， ，5 '-氫氧基用Marcwicz保護基進行保護，然后在酸 性條件下引入2 ， -CPP保護基，隨后脫去Marcwicz保護基，5 ，-氫氧 基用1，4-二甲氧基三苯甲烷氯(DMTrCl)進行保護，最后在3'-位用磷酸化 試劑進行亞磷酰胺化，制得尿苷單體。
胞苷單體、腺苷單體、鳥苷單體制備將胞苷/腺苷/鳥苷的堿基先用苯 甲?；Ｗo，后繼步驟與鳥苷相同。
權(quán)利要求
1、一種RNA單體的合成方法，其特征在于獨特的2’-保護基為出發(fā)點，RNA合成單體結(jié)構(gòu)不同于以往的RNA合成單體。合成方法包括如下步驟A.制備2’-保護基1-(3-氯苯)-4-哌啶烯(CPP)；B.尿苷單體合成；C.胞苷單體合成；D.腺苷單體合成；E.鳥苷單體合成。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的RNA單體合成方法獲得的RNA單體，其特征在于， 合成及純化獲得的RNA寡核苷酸純度可達97%以上，純化回收率可達55% 以上。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種合成RNA單體的方法。該方法中所采用的RNA合成單體以其獨特的2’-保護基為出發(fā)點，RNA合成單體結(jié)構(gòu)不同于以往的RNA合成單體。其特點在于該保護基在酸性脫保護條件下穩(wěn)定，在堿性脫保護條件下也很穩(wěn)定。在固相合成完成后，在把5’-DMT保護基脫掉而2’-保護基仍在鏈上的情況下可以進行高壓液相純化，一級純化后的產(chǎn)品可以在適當?shù)臈l件下將2’-保護基完全脫下來，進一步純化后即可與另一條互補鏈退火成雙鏈。由此合成及純化獲得的RNA寡核苷酸純度可達97％以上，純化回收率可達55％以上。
文檔編號C07H21/00GK101289486SQ200710039568
公開日2008年10月22日 申請日期2007年4月18日 優(yōu)先權(quán)日2007年4月18日
發(fā)明者曹躍瓊 申請人:上海吉凱基因化學(xué)技術(shù)有限公司