專利名稱：具有誘導(dǎo)金絲桃屬植物次生代謝活性的新化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明的技術(shù)方案涉及含1，2-二唑的雜環(huán)化合物及其誘導(dǎo)植物次生代謝的作用，具體涉及[1，2，3]噻二唑衍生物以及這些衍生物誘導(dǎo)金絲桃屬植物貫葉連翹和元寶草產(chǎn)生金絲桃素類物質(zhì)如金絲桃素(Hyperisin，簡稱HP)、偽(假)金絲桃素(Pseudohypericin，簡稱PHP)、原假金絲桃素(Protopseudohypericin，簡稱PPHP)、貫葉金絲桃素(Hyperforin，簡稱HF)的活性。
背景技術(shù)：
噻二唑類衍生物具有廣泛的生物活性，是重要的醫(yī)藥和農(nóng)藥中間體，噻二唑有[1，2，3]噻二唑、[1，2，4]噻二唑、[1，2，5]噻二唑、[1，3，4]噻二唑4種異構(gòu)體，目前應(yīng)用最多的是[1，3，4]噻二唑的衍生物，由于[1，2，3]噻二唑是幾個異構(gòu)體中唯一能夠通過熱解和光解很容易產(chǎn)生N2的異構(gòu)體，因此，該類化合物正在成為研究的熱點。文獻報道的部分高活性[1，2，3]噻二唑衍生物的化學(xué)結(jié)構(gòu)見表1，其中比較值得關(guān)注的是該類化合物中的BTH和TDL以及SV-03均具有很好的誘導(dǎo)植物產(chǎn)生對病原菌的抗性。BTH英文通用名acibenzolar-S-methyl；IUPAC名S-甲基苯并[1，2，3]噻二唑-7-硫代羧酸酯；在植物體內(nèi)迅速降解為無活性的苯并[1，2，3]噻二唑-7-甲酸，但BTH能激活植物的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生對真菌、細菌、線蟲和病毒的保護作用(Sonnemannet al.，Does induced resistance in plant affect the belowground community？Applied Soil Ecology，2002，21179-185)；噻酰菌胺即3’-氯-4，4’-二甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰胺(TDL)具有很好殺菌活性(Tsubata et al.Thiadiazole carboxamide derivative，plant disease controlling agent，and methodof using the same.WO 9923084，1999-05-14)，它和中間體[1，2，3]-噻二唑-5-甲酸(SV-03)都能誘導(dǎo)煙草抗性基因的表達并產(chǎn)生對煙草抗煙草花葉病毒(TMV)的抗性(Yasuda et al.Thiadiazolecarboxylic acid moiety of tiadinil，SV-03，induces systemic acquired resistance in tobacco withoutsalicylic acid accumulation.J.Pestic.Sci.，2006，31(3)329-334)。有關(guān)[1，2，3]噻二唑的合成、反應(yīng)、性質(zhì)和應(yīng)用見Bakulev和Dehaen教授出版的“The Chemistry of 1，2，3-thiadiazole”一書。
植物誘導(dǎo)抗病激活劑的創(chuàng)制研究在國內(nèi)報道不多，本發(fā)明的發(fā)明人在前期建立植物抗病激活劑誘導(dǎo)活性篩選體系的基礎(chǔ)上對BTH和TDL兩個先導(dǎo)化合物進行了較系統(tǒng)結(jié)構(gòu)改造，合成了100多個新的衍生物，發(fā)現(xiàn)部分化合物具有很好的誘導(dǎo)煙草抗TMV的活性，部分新化合物有很好的殺菌活性(范志金等，苯并噻二唑衍生物及其合成方法和誘導(dǎo)抗病活性的篩選，中國國家發(fā)明專利，公開號CN1680342A，2005-10-12；范志金等，新型[1，2，3]噻二唑表1 高活性1，2，3-噻二唑類化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)

衍生物及其合成方法和用途，中國國家發(fā)明專利，公開號CN1810808A，2006-8-2)。由于茉莉酸甲酯(表2)和上述3個化合物都具有誘導(dǎo)植物對農(nóng)業(yè)病害產(chǎn)生抗病性的活性，文獻也報道了貫葉連翹提取物的主要成分就是金絲桃素類物質(zhì)(Tatsis，et al.，Identification of the majorconstituents of hypericum perforatum by LC/SPE/NMR and/or LC/MS.Phytochemistry，2007，68383-393)，同時，茉莉酸甲酯具有誘導(dǎo)貫葉連翹產(chǎn)生金絲桃素類物質(zhì)(結(jié)構(gòu)見表2)的活性(Sirvent，et al.，Induction of hypericins and hyperforin in Hypericum perforatum L.in response tobiotic and chemical elicitors.Physiol.Mol.Plant Pathol.，2002，60311-320；Walker，et al.，Jasmonic acid-induced hypericin production in cell suspension cultures of Hypericum perforatum L.(St.John′s wort).Phytochemistry，2002，60(3)289-293)，考慮到金絲桃素類物質(zhì)具有很好的抗憂郁活性、抗微生物、抗腫瘤和抗病毒及防治禽流感的作用(婁海容等，在防治禽流感中引人注目的中草藥-金絲桃屬和金絲桃素，現(xiàn)代醫(yī)院，2006，6(4)3-5.)，我們預(yù)期自己合成的[1，2，3]噻二唑衍生物及其中間體可能與茉莉酸甲酯一樣具有共同的誘導(dǎo)貫葉連翹的活性，因此，發(fā)明人在國家自然科學(xué)基金(批準號20672062和30270883)和國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展計劃“973”項目(批準號2003CB114402)及天津市自然科學(xué)基金(批準號07JCYBJC01200)和元素有機化學(xué)國家重點實驗室開放基金(0602和0702)的資助下對已合成的具有誘導(dǎo)煙草抗TMV活性的化合物進行了誘導(dǎo)貫葉連翹和元寶草產(chǎn)生金絲桃素類物質(zhì)活性的測定，結(jié)果在國際上首次發(fā)現(xiàn)，[1，2，3]噻二唑的衍生物具有誘導(dǎo)金絲桃屬植物產(chǎn)生金絲桃素類物質(zhì)的特性。
表2 茉莉酸甲酯及金絲桃素類化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)

本發(fā)明的目的本發(fā)明的目的是提供新型誘導(dǎo)貫葉連翹和元寶草產(chǎn)生金絲桃素類物質(zhì)的1，2，3-噻二唑衍生物以及這些化合物用于誘導(dǎo)貫葉連翹和元寶草產(chǎn)生金絲桃素類物質(zhì)的方法。
本發(fā)明的內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供新型1，2，3-噻二唑的衍生物，利用組織培養(yǎng)的方法測定這些化合物誘導(dǎo)貫葉連翹和元寶草產(chǎn)生金絲桃素類物質(zhì)的活性，同時以茉莉酸甲酯為對照。
本發(fā)明解決該技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是分別利用固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基進行新型1，2，3-噻二唑衍生物分別誘導(dǎo)，分別進行貫葉連翹和元寶草產(chǎn)生金絲桃素類物質(zhì)的活性測定，并系統(tǒng)評價各化合物的誘導(dǎo)活性，本發(fā)明具體涉及的化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)式(I)描述的具體化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)式見表3

表3 本發(fā)明涉及的具有誘導(dǎo)植物產(chǎn)生金絲桃素類物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)特征

I.MS固體培養(yǎng)基的制備和繼代誘導(dǎo)培養(yǎng)MS固體培養(yǎng)基含有6-卞基腺嘌呤(BA)0.1毫克/升，4-吲哚-3-丁酸(IBA)0.05毫克/升，瓊脂0.6％，蔗糖3％，121度(0.105MPa)高溫滅菌15分鐘，待培養(yǎng)基溫度降至約50度，將化合物以50微摩爾/升終濃度加入培養(yǎng)基中，充分搖勻后靜置待用，以培養(yǎng)基中添加1微升/毫升的DMF為對照；取繼代培養(yǎng)(MS+BA0.1毫克/升+IBA0.05毫克/升)約一年的貫葉連翹或元寶草組培苗，剪切成3～4個節(jié)點，接入含有不同化合物的培養(yǎng)基中，光照(16小時/8小時)培養(yǎng)，光強3700Lux，培養(yǎng)溫度25±2度，以100毫升錐形瓶為培養(yǎng)容器，每瓶12個外植體，每個處理8瓶，培養(yǎng)28天后，取出植物材料液氮冷凍后，待測提取和檢測?；衔锱渲芐ZG系列和LD系列化合物配制成50微摩爾/毫升DMF溶液，MJA和TDL配制成50微摩爾/毫升乙醇溶液，經(jīng)0.45微摩爾/升Nylon膜過濾后配制成50微摩爾/毫升DMF溶液，各種化合物在培養(yǎng)基中的母液的添加量為1微升/毫升培養(yǎng)基，藥劑在培養(yǎng)基中的最終濃度為50微摩爾/升，對照為不添加溶劑的固體培養(yǎng)的組培苗。
II.MS液體培養(yǎng)基的制備和繼代誘導(dǎo)培養(yǎng)MS液體培養(yǎng)基含有6-卞基腺嘌呤(BA)0.1毫克/升，4-吲哚-3-丁酸(IBA)0.05毫克/升，蔗糖3％，不加瓊脂，121度(0.105MPa)高溫滅菌15分鐘，待培養(yǎng)基溫度降至約50度，將化合物以50微摩爾/升終濃度加入培養(yǎng)基中，充分搖勻后靜置待用，以培養(yǎng)基中添加1微升/毫升的DMF為對照；取繼代培養(yǎng)(MS+BA0.1毫克/升+IBA0.05毫克/升)約一年的貫葉連翹或元寶草組培苗，剪切成3～4個節(jié)點，接入含有不同化合物的培養(yǎng)基中，光照(16小時/8小時)培養(yǎng)，光強3700Lux，培養(yǎng)溫度25±2度，以100毫升錐形瓶為培養(yǎng)容器，每瓶12個外植體，每個處理8瓶，培養(yǎng)28天后，取出植物材料液氮冷凍后，待測提取和檢測。化合物配制BTH配制成50微摩爾/毫升水溶液，SZG-7配制成50微摩爾/毫升DMF溶液，MJA和TDL配制成50微摩爾/毫升乙醇溶液，分別將50微摩爾其他化合物于溶1毫升N，N-二甲基甲酰胺(DMF)，經(jīng)0.45微摩爾/升Nylon膜過濾后配制成50微摩爾/毫升DMF溶液，各種化合物在培養(yǎng)基中的添加量為1微升/毫升培養(yǎng)基，藥劑在培養(yǎng)基中的最終濃度為50微摩爾/升，對照為不添加溶劑的液體培養(yǎng)的組培苗。
III.生物反應(yīng)器和活體植株的誘導(dǎo)培養(yǎng)生物反應(yīng)器的誘導(dǎo)培養(yǎng)和上述液體培養(yǎng)基的誘導(dǎo)培養(yǎng)類似，將整個體系移植到生物反應(yīng)器中進行?；铙w植株的誘導(dǎo)可以采用50微摩爾/升整體植株噴霧，植物材料的提取和測定采用下述方法進行。
IV.組培苗中金絲桃素類化合物的提取和HPLC含量測定金絲桃素類化合物的提取樣品冷凍干燥18小時，研磨后稱取0.200g，用10毫升甲醇(含2％吡啶)超聲波冰浴提取15分鐘，4000g冷凍離心15分鐘，上清液經(jīng)0.45微米尼龍膜過濾后用于HPLC分析。操作過程在低溫下盡量避光進行，防止提取物的光分解和熱分解。
金絲桃素類化合物含量的HPLC測定采用日本島津高效液相色譜分析系統(tǒng)SCL-10A控制器和SPD-M10A檢測器，Diamonsil C18(5微摩爾/升，4.6mm×150mm)色譜柱；20微升進樣量，流動相為乙腈和0.05摩爾/升三乙銨乙酸緩沖液(80∶20)，流速1.0毫升/分鐘。HF在290nm檢測，HP和PHP在588nm檢測，各化合物的保留時間分別為6分鐘(PHP)、18分鐘(HP)和9分鐘(HF)左右；HF的甲醇標準溶液濃度分別為2.5，5.0，10.0，25.0，50微克/毫升；PHP的甲醇標準溶液濃度分別為5.0，7.5，10.0，25.0，50.0，75.0微克/毫升；HP的甲醇標準溶液濃度分別為1.0，2.0，4.0，6.0，10.0微克/毫升，采用峰面積外標法定量。
本發(fā)明的有益效果是TDL和茉莉酸甲酯(MJA)具有誘導(dǎo)植物產(chǎn)生對農(nóng)業(yè)病原真菌抗病性的特點，而MJA具有誘導(dǎo)金絲桃屬植物貫葉連翹和元寶草產(chǎn)生金絲桃素類物質(zhì)的性能，金絲桃素類物質(zhì)具有很好的抗憂郁活性、抗微生物、抗腫瘤和抗病毒及防治禽流感的作用，廣泛應(yīng)用于藥物和食品中，本發(fā)明首次成功進行了MJA以外的其他化合物誘導(dǎo)金絲桃屬植物貫葉連翹和元寶草產(chǎn)生金絲桃素類物質(zhì)的試驗。
本發(fā)明將通過特定實施例更加具體地說明TDL及其衍生物誘導(dǎo)貫葉連翹和元寶草產(chǎn)生金絲桃素(Hyperisin)、偽(假)金絲桃素(Pseudohypericin)、原假金絲桃素(Protopseudohyericin)、貫葉金絲桃素(Hyperforin)的活性，但所述實施例僅用于具體的說明本發(fā)明而非限制本發(fā)明，具體的實施方式如下實施例1組培苗中金絲桃素類化合物的提取和HPLC含量測定的方法按照前述方法進行誘導(dǎo)貫葉連翹和元寶草中金絲桃素類化合物的提取和金絲桃素類化合物含量的HPLC測定，HPLC測定方法能有效的檢測本發(fā)明涉及的金絲桃素類化合物，三個化合物測定方法的相關(guān)性好，R2均大于0.99，三個化合物的線性相關(guān)性分別為y＝8.846×10-5x+3.755×10-2(HF)；y＝2.922×10-5x+1.082(HP)；y＝8.375×10-6x+0.436(PHP)(x為峰面積，y為濃度，微克/毫升)。
實施例2SZG系列化合物和LD系列化合物對貫葉連翹組培苗生長及代謝產(chǎn)物合成的影響按照前述方法進行測定，SZG系列化合物，即SZG-7、SZG-II和SZG-4誘導(dǎo)貫葉連翹組培苗后，能促進假金絲桃素(PHP)和金絲桃素(HP)的合成；SZG-7和SZG-4能同時促進包括貫葉金絲桃素(HF)的三種代謝產(chǎn)物合成；SZG-II與其他兩種同類化合物相比，不能促進HF的合成(可能與其某個結(jié)構(gòu)基團有關(guān))，但它能促進植物生物量的增加。LD系列兩種化合物L(fēng)D43和LD44中，LD43與對照相比能促進PHP和HP合成，但HF含量會隨之降低；LD44顯著抑制貫葉連翹組培苗生長和三種有效成分的代謝合成；TDL-7處理與對照之間沒有顯著差異；TDLA也具有一定的誘導(dǎo)活性，以上分析見表1及圖1-圖4。這些化合物用于誘導(dǎo)元寶草產(chǎn)生金絲桃素類物質(zhì)的測定結(jié)果也有相同的結(jié)果。誘導(dǎo)作用除了組織培養(yǎng)誘導(dǎo)以外，還可以用活體植株和室內(nèi)生物反應(yīng)器誘導(dǎo)培養(yǎng)，這些化合物也能產(chǎn)生同樣的誘導(dǎo)效果。
表1 SZG系列和LD系列化合物對貫葉連翹組培苗生長及代謝產(chǎn)物合成的影響

實施例3SZG-7和MJA誘導(dǎo)貫葉連翹次生代謝產(chǎn)物的測定結(jié)果按照前述方法進行測定，實驗結(jié)果見表3，MJA50微摩爾/升能顯著促進PHP、HP和HF的合成，與表2結(jié)果相似，但生物量增加為7.92毫克，少于表2的18.33毫克，與溶解MJA的溶劑有關(guān)；SZG-7能促進PHP和HP的合成，與表1結(jié)果相似，但SZG-7對HF代謝合成的影響與表1中的結(jié)果有差異。這些化合物用于誘導(dǎo)元寶草產(chǎn)生金絲桃素類物質(zhì)的測定結(jié)果也有相同的結(jié)果。誘導(dǎo)作用除了組織培養(yǎng)誘導(dǎo)以外，還可以用活體植株和室內(nèi)生物反應(yīng)器誘導(dǎo)培養(yǎng)，這些化合物也能產(chǎn)生同樣的誘導(dǎo)效果。
表3 SZG-7和MJA誘導(dǎo)貫葉連翹次級代謝產(chǎn)物試驗

實施例4SZG-7、TDL和MJA誘導(dǎo)貫葉連翹水培苗及次級代謝產(chǎn)物合成按照前述方法進行測定，對照液體培養(yǎng)基中添加1微升/毫升DMF，貫葉連翹組培苗中PHP、HP、HF含量都比對照低，尤其HF的含量顯著低于不添加DMF的對照，此試驗結(jié)果見表4，表4的結(jié)果能解釋表3中SZG-7處理后HF含量比不加DMF的對照降低的原因。培養(yǎng)初期添加SZG-7能促進PHP，HP，HF的代謝合成，隨著添加SZG-7誘導(dǎo)物的時間延遲，誘導(dǎo)代謝產(chǎn)物合成的能力逐漸降低；但添加培養(yǎng)初始添加SZG-7后，植物組織生物量增加會受到抑制，并且隨著SZG-7添加的逐漸延遲，這種抑制作用會逐漸消失，組織培養(yǎng)至第12天加入SZG-7誘導(dǎo)物后生物量增加與對照沒有顯著差異，就兩種物質(zhì)添加時間的結(jié)果看，隨著誘導(dǎo)物添加時間的延遲，誘導(dǎo)代謝產(chǎn)物合成的效果會降低。TDLA也具有一定的誘導(dǎo)效果和誘導(dǎo)趨勢；這些化合物用于誘導(dǎo)元寶草產(chǎn)生金絲桃素類物質(zhì)的測定結(jié)果也有相同的結(jié)果。誘導(dǎo)作用除了組織培養(yǎng)誘導(dǎo)以外，還可以用活體植株和室內(nèi)生物反應(yīng)器誘導(dǎo)培養(yǎng)，這些化合物也能產(chǎn)生同樣的誘導(dǎo)效果。
表4 SZG-7、TDL和MJA誘導(dǎo)貫葉連翹水培苗及次級代謝產(chǎn)物合成

實施例5不同濃度SZG-7、TDL和MJA誘導(dǎo)貫葉連翹組培苗代謝產(chǎn)物研究測定結(jié)果見表5，表5表明，SZG-7能誘導(dǎo)貫葉連翹組培苗中PHP和HP的合成，對于HF誘導(dǎo)效果不顯著可能是對照的沒有添加DMF的原因；同時SZG-7的添加會在一定程度上抑制生物量增長(與表1結(jié)果相似)；25微摩爾/升與50微摩爾/升的SZG-7相比，對代謝產(chǎn)物的合成影響差異不顯著。這些化合物用于誘導(dǎo)元寶草產(chǎn)生金絲桃素類物質(zhì)的測定結(jié)果也有相同的結(jié)果。誘導(dǎo)作用除了組織培養(yǎng)誘導(dǎo)以外，還可以用活體植株和室內(nèi)生物反應(yīng)器誘導(dǎo)培養(yǎng)，這些化合物也能產(chǎn)生同樣的誘導(dǎo)效果。
表5 不同濃度SZG-7、TDL和MJA誘導(dǎo)貫葉連翹組培苗代謝產(chǎn)物研究

實施例6測定結(jié)果的總結(jié)以上試驗設(shè)計較為合理和完善，研究結(jié)果表明SZG系列的化合物和LD系列化合物其及中間體具有誘導(dǎo)貫葉連翹和元寶草組培苗代謝產(chǎn)物PHP，HP或HF合成的能力；在水培條件下驗證了SZG-7的誘導(dǎo)活性，并且誘導(dǎo)時間的規(guī)律得到基本確定；在固體培養(yǎng)條件下，添加25微摩爾/升與50微摩爾/升的SZG-7相比，對代謝產(chǎn)物的合成影響的差異不顯著?；铙w植株以及生物反應(yīng)器誘導(dǎo)培養(yǎng)也能產(chǎn)生同樣的誘導(dǎo)效果。


圖1SZG系列和LD系列化合物對貫葉連翹組培苗生物量的影響圖2SZG系列和LD系列化合物對貫葉連翹組培苗PHP含量的影響圖3SZG系列和LD系列化合物對貫葉連翹組培苗HP含量的影響圖4SZG系列和LD系列化合物對貫葉連翹組培苗HF含量的影響
權(quán)利要求
1.新型1，2，3-噻二唑的衍生物，其特征在于它是結(jié)構(gòu)式(I)描述的化合物和該化合物是4-(2’，4’-二氯苯基-5-正丙基-1，3-噻唑-2-胺 其中R分別是對甲氧基苯胺基、2，6-二氯苯胺基、羥基、5-甲基-1，3-噻唑-2-胺基、3-氯-4-甲基苯胺基、1，3-噻唑-2-胺基以及整個是4-(2’，4’-二氯苯基-5-正丙基-1，3-噻唑-2-胺。
2.4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰對甲氧基苯胺、4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰-2’，6’-二氯苯胺、4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酸、4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰-5’-甲基-1’，3’-噻唑-2’-胺、4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰-3’-氯-4’-甲基苯胺、4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰-1’，3’-噻唑-2’-胺和4-(2’，4’-二氯苯基-5-正丙基-1，3-噻唑-2-胺用于組織培養(yǎng)誘導(dǎo)貫葉連翹和元寶草產(chǎn)生金絲桃素類物質(zhì)金絲桃素(Hyperisin，簡稱HP)、偽(假)金絲桃素(Pseudohypericin，簡稱PHP)、原假金絲桃素(Protopseudohypericin，簡稱PPHP)、貫葉金絲桃素(Hyperforin，簡稱HF)以及生物量的增加。
3.4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰對甲氧基苯胺、4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰-2’，6’-二氯苯胺、4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酸、4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰-5’-甲基-1’，3’-噻唑-2’-胺、4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰-3’-氯-4’-甲基苯胺、4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰-1’，3’-噻唑-2’-胺和4-(2’，4’-二氯苯基-5-正丙基-1，3-噻唑-2-胺用于活體植株誘導(dǎo)貫葉連翹和元寶草產(chǎn)生金絲桃素類物質(zhì)金絲桃素(Hyperisin，簡稱HP)、偽(假)金絲桃素(Pseudohypericin，簡稱PHP)、原假金絲桃素(Protopseudohypericin，簡稱PPHP)、貫葉金絲桃素(Hyperforin，簡稱HF)以及生物量的增加。
4.4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰對甲氧基苯胺、4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰-2’，6’-二氯苯胺、4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酸、4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰-5’-甲基-1’，3’-噻唑-2’-胺、4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰-3’-氯-4’-甲基苯胺、4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰-1’，3’-噻唑-2’-胺和4-(2’，4’-二氯苯基-5-正丙基-1，3-噻唑-2-胺用于在田間誘導(dǎo)和室內(nèi)生物反應(yīng)器內(nèi)誘導(dǎo)誘導(dǎo)貫葉連翹和元寶草產(chǎn)生金絲桃素類物質(zhì)金絲桃素(Hyperisin，簡稱HP)、偽(假)金絲桃素(Pseudohypericin，簡稱PHP)、原假金絲桃素(Protopseudohypericin，簡稱PPHP)、貫葉金絲桃素(Hyperforin，簡稱HF)以及生物量的增加。
全文摘要
本發(fā)明系統(tǒng)的評價了噻酰菌胺(TDL)及其雜環(huán)酰胺和芳環(huán)酰胺及其中間體4－甲基－1，2，3－噻二唑－5－甲酸、4－甲基－1，2，3－噻二唑－5－甲酰對甲氧基苯胺、4－甲基－1，2，3－噻二唑－5－甲酰－2’，6’－二氯苯胺、4－甲基－1，2，3－噻二唑－5－甲酰－5’－甲基－1’，3’－噻唑－2’－胺、4－甲基－1，2，3－噻二唑－5－甲酰－3’－氯－4’－甲基苯胺、4－甲基－1，2，3－噻二唑－5－甲酰－1’，3’－噻唑－2’－胺和4－(2’，4’－二氯苯基－5－正丙基－1，3－噻唑－2－胺通過組織培養(yǎng)和活體植株以及室內(nèi)生物反應(yīng)器誘導(dǎo)貫葉連翹和元寶草產(chǎn)生金絲桃素類物質(zhì)金絲桃素(Hyperisin，簡稱HP)、偽(假)金絲桃素(Pseudohypericin，簡稱PHP)、原假金絲桃素(Protopseudohypericin，簡稱PPHP)、貫葉金絲桃素(Hyperforin，簡稱HF)的活性。研究發(fā)現(xiàn)，SZG系列的化合物和LD系列化合物其及中間體具有誘導(dǎo)貫葉連翹和元寶草組培苗代謝產(chǎn)物PHP，HP或HF合成的能力并能誘導(dǎo)生物量的增加；在水培條件下驗證了SZG－7的誘導(dǎo)活性，并且誘導(dǎo)時間的規(guī)律得到基本確定；在固體培養(yǎng)條件下，添加25微摩爾/升與50微摩爾/升的SZG－7相比，對代謝產(chǎn)物的合成影響的差異不顯著。活體植株以及生物反應(yīng)器誘導(dǎo)培養(yǎng)也能產(chǎn)生同樣的誘導(dǎo)效果。本發(fā)明公開了上述化合物的誘導(dǎo)活性及其測定方法。
文檔編號C07D417/12GK101020667SQ200710056909
公開日2007年8月22日 申請日期2007年3月12日 優(yōu)先權(quán)日2007年3月12日
發(fā)明者范志金, 劉曉娜, 孫君社, 石祖貴, 吳瓊, 劉秀峰, 巴庫勒夫·瓦西里耶·阿勒克什維奇 申請人:南開大學(xué)