專利名稱：2,3,4,5－四取代的苯丙烯類衍生物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及有機(jī)化學(xué)、藥物化學(xué)和藥理學(xué)領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及2，3，4，5-四取代的苯丙烯類衍生物及其關(guān)鍵中間體的制備方法，以及針對(duì)這系列化合物進(jìn)行的六種腫瘤細(xì)胞株，如人前列腺癌細(xì)胞(PC-3)、鼻咽癌細(xì)胞(CNE)、口腔上皮癌細(xì)胞株(KB)、人肺癌細(xì)胞(A549)、人肝癌細(xì)胞(BEL-7404)、人子宮頸癌細(xì)胞(Hela)的腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)抑制活性篩選。該類化合物被發(fā)現(xiàn)具有一定的抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)活性，可預(yù)期作為抗腫瘤藥物用途。
背景技術(shù)：
目前，由于工業(yè)發(fā)展中帶來(lái)的環(huán)境污染等問(wèn)題，人類的生存環(huán)境質(zhì)量不斷下降，腫瘤疾病的發(fā)病率和致死率也不斷上升。然而治療腫瘤疾病的藥物的療效并不能令人滿意，目前臨床所用抗腫瘤藥切一般為細(xì)胞毒性藥物，其選擇性不高導(dǎo)致對(duì)正常細(xì)胞的惡性殺傷，限制了該類藥物的普遍適用性。因此，尋找和發(fā)現(xiàn)新的選擇性高的細(xì)胞毒性抗腫瘤藥物是世界范圍內(nèi)的研究熱點(diǎn)。2002年趙昱等從菊科蓮葉橐吾中分離得到三取代的苯丙烯類化合物，并對(duì)其作了細(xì)胞毒性試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)某些化合物對(duì)KB細(xì)胞有一定的細(xì)胞毒性(Y Zhao，XJ Hao，W Lu，JC Cai，H Yu，T Sevénet，F(xiàn)Guéritte，(2002)J Nat Prod 65，902-908)。本發(fā)明的目的在于對(duì)這類化合物進(jìn)行合成和結(jié)構(gòu)改造，以期尋找對(duì)腫瘤細(xì)胞株生長(zhǎng)產(chǎn)生更強(qiáng)抑制作用的2，3，4，5-四取代的苯丙烯類衍生物。體外細(xì)胞毒活性評(píng)價(jià)指標(biāo)選擇了人前列腺癌細(xì)胞(PC-3)、鼻咽癌細(xì)胞(CNE)、口腔上皮癌細(xì)胞(KB)、人肺癌細(xì)胞(A549)、人肝癌細(xì)胞(BEL-7404)、人子宮頸癌細(xì)胞(Hela)六株腫瘤細(xì)胞，并對(duì)2，3，4，5-四取代的苯丙烯類系列衍生物進(jìn)行細(xì)胞毒活性測(cè)試，據(jù)此完成本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種具有細(xì)胞毒活性的化合物，具體而言，本發(fā)明提供了一種具有式(1)所示的具有細(xì)胞毒活性的2，3，4，5-四取代的苯丙烯類衍生物及其可藥用鹽
式(1)其中R1可以是羥基，鹵素，硝基，氨基，含1～8個(gè)碳的飽和或不飽和烴基或烷氧基，R2，R3或R4可以相同或不同，可以是氫，含1～15個(gè)碳的飽和或不飽和烴基，取代或未取代的芳烷基。其中用于芳烷基中芳基上取代的取代基可以是含1～8個(gè)碳的烷基或烷氧基，鹵素，羥基，氨基，硝基，含1～8個(gè)碳的烷胺基。
R可以是-COOH，-CH2OH，-CHO，-COOR5，-CONHNH2，-CONH2，-CONHR5，-CON(R5)2，其中R5是含1～8個(gè)碳的鏈烷基。
其中，當(dāng)R2，R3，R4同時(shí)為甲基時(shí)，R1不能為溴或硝基或甲氧基取代；當(dāng)R2，R3，R4同時(shí)為氫，R1為羥基時(shí)，R不能為羧基；當(dāng)R2，R4同時(shí)為甲基，R為羧基，取代基R1為羥基時(shí)，R3不能為氫；當(dāng)R2，R4同時(shí)為甲基，R為羧基而取代基R1為硝基時(shí)，R3不能為芐基；當(dāng)R2，R4同時(shí)為甲基，R為醛基而R1為氯時(shí)，R3不能為氫；本發(fā)明進(jìn)一步的實(shí)施方案是當(dāng)取代基R是CO2R5時(shí)，為式(I)所示的2，3，4，5-四取代的苯丙烯酸酯類化合物 式(I)其中，基團(tuán)R1，R2，R3，R4及R5的定義與式(1)中的相同。
本發(fā)明優(yōu)選的式(I)化合物是I-a.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]2-丙烯酸乙酯(2E)；I-b.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸乙酯(2E)；I-c.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸乙酯(2E)；I-d.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]2-丙烯酸乙酯(2Z)；I-e.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]2-丙烯酸乙酯(2E)；I-f.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸乙酯(2Z)；I-g.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯酸乙酯(2E)；I-h.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯酸乙酯(2Z)；I-i.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯酸乙酯(2E)；I-j.3-(2-溴-3，4，5-三甲氧基苯基)-2-丙烯酸乙酯(2E)；I-k.3-(2-溴-3，4，5-三甲氧基苯基)-2-丙烯酸乙酯(2Z)； 本發(fā)明另外一個(gè)實(shí)施方案是當(dāng)式(1)中的取代基R是羧基時(shí)，為式(II)所示的2，3，4，5-四取代的苯丙烯酸類化合物 式(II)
其中，基團(tuán)R1，R2，R3，R4的定義與式(1)中的相同。
本發(fā)明優(yōu)選的式(II)化合物是II-a.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸(2E)；II-b.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸(2E)；II-c.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸(2E)；II-d.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸(2E)；II-e.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯酸(2E)；II-f.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，7，1 1-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯酸(2E)； 本發(fā)明進(jìn)一步的實(shí)施方案是當(dāng)式(1)中的取代基R是羥甲基時(shí)，為式(III)所示的2，3，4，5-四取代的苯丙烯醇類化合物
式(III)其中，基團(tuán)R1，R2，R3，R4的定義與式(1)中的相同。
本發(fā)明優(yōu)選的式(III)化合物是III-a.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯-1-醇(2E)；III-b.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯-1-醇(2E)；III-c.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯1-醇(2E)；III-d.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯-1-醇(2E)；III-e.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯-1-醇(2E)；III-f.3-(2-溴-3，4，5-三甲氧基苯基)-2-丙烯-1-醇(2E)；III-g.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯-1-醇(2E)； 本發(fā)明進(jìn)一步的實(shí)施方案是當(dāng)式(1)中的取代基R是醛基時(shí)，為式(IV)所示的2，3，4，5-四取代的苯丙烯醛類化合物
式(IV)其中，基團(tuán)R1，R2，R3或R4的定義與式(1)中的相同。
本發(fā)明優(yōu)選的式(IV)化合物是IV-a.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯醛(2E)；IV-b.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯醛(2E)；IV-c.3-(2-溴-3，4，5-三甲氧基苯基)-2-丙烯醛(2E)；IV-d.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯醛(2E)；IV-e.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯醛(2E)；IV-f.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯醛(2E)；IV-g.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯醛(2E)； 本發(fā)明的另一目的是提供了具有細(xì)胞毒活性如式(V)所示的式(1)的關(guān)鍵中間體2，3，4，5-四取代的苯甲醛系列化合物及其可藥用鹽 式(V)其中基團(tuán)R1，R2，R3，R4的定義除與式(1)中的相同外，當(dāng)R2，R3，R4同時(shí)為氫時(shí)，R1不能為羥基；當(dāng)R2，R4同時(shí)為甲基時(shí)，R3不能為氫、甲基、未取代芐基；當(dāng)R2，R4中有一個(gè)為甲基，而另一個(gè)為氫或未取代芐基時(shí)，R3不能為氫、甲基、未取代芐基。
本發(fā)明中優(yōu)選的式(V)化合物是V-a.2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)-苯甲醛；V-b.2，3，5-三甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)-苯甲醛；V-c.2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)-苯甲醛；V-d.2-溴-3，5-二甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)-苯甲醛；V-e.2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧-苯甲醛；V-f.2，3，5-三甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧-苯甲醛； 本發(fā)明的另一目的是提供一種由式(V)化合物為起始物的制備式(1)化合物的途徑。該合成工藝路線特征是式(V)化合物通過(guò)與三苯基乙氧羰基次甲基膦烷經(jīng)歷魏悌錫(wittig)反應(yīng)制備得到化合物(I)，得到的產(chǎn)物經(jīng)過(guò)堿水解得到化合物(II)；化合物(I)通過(guò)氫化鋰鋁還原得到化合物(III)與少量2，3位雙鍵還原的產(chǎn)物；化合物(IV)可以由化合物(V)與乙醛的縮合作用制備得到；具體路線見(jiàn)下圖(以稀鍵反式化合物為例) 其中，基團(tuán)R1，R2，R3及R4的定義與式(1)化合物中的相同。
本發(fā)明的又一目的是提供了式(1)及式(V)化合物的用于制備防治腫瘤疾病藥物的用途。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供了一種含有式(1)及式(V)化合物的用于抗腫瘤疾病的藥物組合物。
具體實(shí)施例方式
下面通過(guò)實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，其中OMe代表甲氧基(OCH3)，OEt代表乙氧基(OCH2CH3)。實(shí)施例給出了代表性化合物的合成及相關(guān)結(jié)構(gòu)鑒定數(shù)據(jù)，以及部分活性數(shù)據(jù)。必須說(shuō)明的是下述實(shí)施例是用于說(shuō)明本發(fā)明而不是對(duì)本發(fā)明的限制，根據(jù)本發(fā)明的實(shí)質(zhì)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行的簡(jiǎn)單改進(jìn)都屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。除非另有說(shuō)明，本發(fā)明中的百分?jǐn)?shù)是重量百分?jǐn)?shù)。
實(shí)施例1V-c(2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯甲醛)的制備 本例涉及到一類如式(V)所示的具有細(xì)胞毒活性的2，3，4，5-四取代的苯丙烯類衍生物關(guān)鍵中間體2，3，4，5-四取代的苯甲醛系列化合物的一般合成方法。具體涉及化合物2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯甲醛的合成。將化合物2-溴-4-羥基-3，5-二甲氧基苯甲醛(0.85克，3.28mmol)溶解在20毫升丙酮中，加入無(wú)水碳酸鉀(1.13克，8.22mmol)，攪拌10分鐘，后加入3，4-二氯芐溴(0.6毫升，3.61mmol)的10毫升丙酮溶液，回流4小時(shí)。經(jīng)薄層色譜(TLC)顯示原料點(diǎn)基本反應(yīng)完全，冷卻至室溫，抽濾除去碳酸鉀，蒸去溶劑丙酮。濃縮所得固體經(jīng)柱層析分離得到白色固體0.92克，產(chǎn)率為67.0％。
化合物V-cRf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.55；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ10.30(1H，s，CHO)，7.62(1H，s，H-2′)，7.44(1H，d，J＝8.0Hz，H-6′)，7.31(1H，d，J＝8.0Hz，H-5′)，7.30(1H，s，H-6)，5.10(2H，s，H-7′)，3.91(6H，s，OCH3-3，5)。
實(shí)施例2化合物V-a(2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯甲醛)的制備 本例涉及到一類如式(V)所示的具有細(xì)胞毒活性的2，3，4，5-四取代的苯丙烯類衍生物關(guān)鍵中間體2，3，4，5-四取代的苯甲醛系列化合物的一般合成方法。具體涉及化合物2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯甲醛的合成。在一個(gè)100毫升的三頸瓶中依次加入對(duì)乙氧基溴芐(0.51克，2.37mmol)碘化鈉(59毫克，0.40mmol)和丙酮(15毫升)，再加入碳酸鉀(0.82克，5.94mmol)和4-羥基-2，3，5-三甲氧基苯甲醛(420毫克，1.98mmol)，回流3小時(shí)。冷至室溫，過(guò)濾，濾液濃縮，柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯＝15∶1，粗品/硅膠＝1∶30)得白色固體363毫克，收率為53％。
化合物V-aRf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.51；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ10.28(1H，s，CHO)，7.36(2H，d，J＝8.4Hz，H-2′，6′)，7.09(1H，s，H-6)，6.86(2H，d，J＝8.4Hz，H-3′，5′)，5.10(2H，s，H-7′)，4.02(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-4′)，3.94(3H，s，OCH3-2)，3.87(6H，s，OCH3-3，5)，1.41(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-4′)。
根據(jù)與實(shí)施例1-2之一的方法制備以下表一所示實(shí)施例3-6化合物 表一 下面列出表一中各化合物的理化數(shù)據(jù)化合物V-b白色固體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.57；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ10.29(1H，s，CHO)，7.62(1H，d，J＝2.0Hz，H-2′)，7.43(1H，d，J＝8.0Hz，H-5′)，7.29(1H，m，J＝8.0，2.0Hz，H-6′)，7.11(1H，s，H-6)，5.11(2H，s，H-7′)，3.93(3H，s，OCH3-2)，3.86(6H，s，OCH3-3，5)。
化合物V-d白色固體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.51；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ10.26(1H，s，CHO)，7.34(2H，d，J＝8.8Hz，H-3′，5′)，7.26(1H，s，H-6)，6.84(2H，d，J＝8.8Hz，H-2′，6′)，5.05(2H，s，H-7′)，4.00(2H，q，J＝6.8Hz，OCH2CH3-4′)，3.87(6H，s，OCH3-3，5)，1.38(3H，t，J＝6.8Hz，OCH2CH3-4′)。
化合物V-e無(wú)色液體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.61；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ10.30(1H，s，CHO)，7.28(1H，s，H-6)，5.53(1H，brt，J＝6.8Hz，H-2′)，5.08(2H，m，H-6′，10′)，4.65(2H，s，H-1′)，3.87(6H，s，OCH3-3，5)，2.03(8H，m，H-4′，5′，8′，9′)，1.68(3H，brs，H-15′)，1.66(3H，brs，H-14′)，1.60(3H，brs，H-13′)，1.58(3H，brs，H-12′)。
化合物V-f無(wú)色液體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.61；1H-NMR(400MHz，CD3COCD3)δ10.30(1H，s，CHO)，7.28(1H，s，H-6)，5.53(1H，brt，J＝6.8Hz，H-2′)，5.08(2H，m，H-6′，10′)，4.65(2H， s，H-1′)，3.95(3H，s，OCH3-2)，3.87(6H，s，OCH3-3，5)，2.03(8H，m，H-4′，5′，8′，9′)，1.68(3H，brs，H-15′)，1.66(3H，brs，H-14′)，1.60(3H，brs，H-13′)，1.58(3H，brs，H-12′)。
實(shí)施例7化合物I-a(3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸乙酯(2E))的制備

本例涉及到一類具有細(xì)胞毒活性的如式(I)所示的2，3，4，5-四取代的苯丙烯酸酯的一般合成方法。具體涉及到化合物(3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸乙酯(2E))的制備。在燒瓶中加入化合物VI-a(1.08克，3.12mmol)和25毫升的苯，攪拌溶解，然后加入三苯基乙氧羰基次甲基膦烷(1.30克，3.74mmol)，回流2小時(shí)，冷至室溫，濃縮得粗品，柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯＝20∶1，粗品/硅膠＝1∶10)得無(wú)色油狀液體化合物350毫克，收率為23.5％。
化合物I-a無(wú)色油狀液體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.17；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.92(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，7.37(2H，d，J＝8.4Hz，H-2″，6″)，6.86(2H，d，J＝8.4Hz，H-3″，5″)，6.78(1H，s，H-6′)，6.39(1H，d，J＝16.0Hz，H-2)，5.02(2H，s，H-7″)，4.26(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)，4.03(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-4″)，3.86(3H，s，OCH3-2′)，3.83(6H，s，OCH3-3′，5′)，1.41(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-4″)，1.34(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)。
根據(jù)實(shí)施例7的方法制備以下表二所示實(shí)施例8-17化合物，表中化合物編號(hào)后未加括號(hào)的化合物為2，3-烯鍵反式(E)構(gòu)型化合物

表二

下面列出表二中各化合物的理化數(shù)據(jù)化合物I-b白色固體，Rf(正己烷/乙酸乙酯6/1)0.30；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.91(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，7.63(1H，d，J＝2.0Hz，H-2″)，7.43(1H，d，J＝8.4Hz，H-5″)，7.29(1H，t，J＝8.4Hz，2.0Hz，H-6″)，6.79(1H，s，H-6′)，6.40(1H，d，J＝16.0Hz，H-2)，5.04(2H，s，H-7″)，4.27(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)，3.89(3H，s，OCH3-2′)，3.84(6H，s，OCH3-3′，5′)，1.34(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)。
化合物I-c白色固體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.57；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.04(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，7.62(1H，s，H-2″)，7.44(1H，d，J＝8.4Hz，H-6″)，7.30(1H，d，J＝8.0Hz，H-5″)，6.94(1H，s，H-6′)，6.31(1H，d，J＝16.0Hz，H-2)，5.02(2H，s，H-7″)，4.28(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)，3.88(6H，s，OCH3-3′，5′)，1.35(3H， t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)。
化合物I-d白色固體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.58；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.64(1H，s，H-2″)，7.43(1H，d，J＝8.0Hz，H-6″)，7.31(1H，d，J＝8.0Hz，H-5″)，7.07(1H，s，H-6′)，7.05(1H，d，J＝12.0Hz，H-3)，6.03(1H，d，J＝12.0Hz，H-2)，5.01(2H，s，H-7″)，4.12(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)，3.88(6H，s，OCH3-3′，5′)，1.34(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)。
化合物I-e白色固體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.52；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.05(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，7.38(2H，d，J＝8.4Hz，H-3″，5″)，6.93(1H，s，H-6′)，6.87(2H，d，J＝8.8Hz，H-2″，6″)，6.30(1H，d，J＝16.0Hz，H-2)，4.98(2H，s，H-7″)，4.28(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)，4.03(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-4″)，3.87(6H，s，OCH3-3′，5′)，1.40(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-4″)，1.35(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)。
化合物I-f白色固體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.53；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.50(2H，d，J＝8.4Hz，H-3″，5″)，7.17(1H，d，J＝12.0Hz，H-3)，7.05(1H，s，H-6′)，6.87(2H，d，J＝8.8Hz，H-2″，6″)，6.15(1H，d，J＝12.0Hz，H-2)，5.03(2H，s，H-7″)，4.24(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)，4.03(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-4″)，3.87(6H，s，OCH3-3′，5′)，1.43(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-4″)，1.34(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)。
化合物I-g無(wú)色液體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.63；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.05(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，6.93(1H，s，H-6′)，6.30(1H，d，J＝16.0Hz，H-2)，5.53(1H，brt，J＝6.8Hz，H-2″)，5.08(2H，m，H-6″，10″)，4.65(2H，d，J＝6.8Hz，H-1″)，4.28(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)，3.89(6H，s，OCH3-3′，5′)，2.06(8H，m，H-4″，5″，8″，9″)，1.68(3H，brs，H-15″)，1.66(3H，brs，H-14″)，1.60(3H，brs，H-13″)，1.58(3H，brs，H-12″)，1.38(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)。
化合物I-h無(wú)色液體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.64；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.05(1H，d，J＝12.0Hz，H-3)，6.93(1H，s，H-6′)，6.03(1H，d，J＝12.0Hz，H-2)，5.53(1H，brt，J＝6.8Hz，H-2″)，5.08(2H，m，H-6″，10″)，4.65(2H，d，J＝7.2Hz，H-1″)，4.12(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)，3.87(6H，s，OCH3-3′，5′)，2.04(8H，m，H-4″，5″，8″，9″)，1.69(3H，brs，H-15″)，1.66(3H，brs，H-14″)，1.61(3H，brs，H-13″)，1.58(3H，brs，H-12″)，1.38(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)。
化合物I-i無(wú)色液體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.63；1H-NMR(400MHz，CD3COCD3)δ8.05(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，6.93(1H，s，H-6′)，6.30(1H，d，J＝16.0Hz，H-2)，5.53(1H，brt，J＝6.8Hz，H-2″)，5.08(2H，m，H-6″，10″)，4.65(2H，d，J＝6.8Hz，H-1″)，4.28(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)，3.89(3H，s，OCH3-2′)，3.84(6H，s，OCH3-3′，5′)，2.06(8H，m，H-4″，5″，8″，9″)，1.68(3H，brs，H-15″)，1.66(3H，brs，H-14″)，1.60(3H，brs，H-13″)，1.58(3H，brs，H-12″)，1.38(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)。
化合物I-j無(wú)色液體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.39；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.05(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，6.94(1H，s，H-6′)，6.31(1H，d，J＝16.0Hz，H-2)，4.28(2H，q，OCH2CH3-1)，3.90(9H，s，OCH3-3′，4′，5′)，1.35(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)。
化合物I-k無(wú)色液體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.40；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.05(1H，s，H-6′)，7.05(1H，d，J＝12.0Hz，H-3)，6.02(1H，d，J＝12.0Hz，H-2)，4.12(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)，3.88(9H，s，OCH3-3′，4′，5′)，1.22(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-1)。
實(shí)施例18化合物II-a(3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸(2E))的制備 本例涉及到一類具有細(xì)胞毒活性的如式(II)所示的2，3，4，5-四取代的苯丙烯酸的一般合成方法。具體涉及到化合物II-a(3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸(2E))的制備。將化合物I-a(203毫克，0.57mmol)加到50毫升的燒瓶中，用25毫升乙醇溶解，加入氫氧化鉀水溶液(120毫克，2.00mmol，10毫升水)，回流3小時(shí)，冷至室溫，濃縮至無(wú)醇味，然后加入10毫升水，用稀鹽酸調(diào)至酸性，可見(jiàn)有大量白色的固體析出，用乙醚(15毫升×3)萃取，有機(jī)相用飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜，過(guò)濾，濃縮得白色固體206毫克，收率93.1％。
化合物II-a白色固體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.17；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.57(1H，d，J＝13.6Hz，H-3)，7.23(2H，d，J＝8.4Hz，H-2″，6″)，6.76(2H，d，J＝8.4Hz，H-3″，5″)，6.64(1H，s，H-6′)，6.38(1H，d，J＝13.6Hz，H-2)，4.74(2H，s，H-7″)，3.94(2H，q，J＝6.8Hz，OCH3CH3-4″)，3.66(3H，s，OCH3-2′)，3.52(6H，s，OCH3-3′，5′)，1.36(3H，t，J＝6.8Hz，OCH2CH3-4″)；根據(jù)實(shí)施例18的方法制備以下表三所示實(shí)施例19-23化合物
下面列出表三中各化合物的理化數(shù)據(jù)化合物II-b白色固體，Rf(正己烷/乙酸乙酯/甲酸3/1/0.1)0.22；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.00(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，7.62(1H，d，J＝1.6Hz，H-2″)，7.43(1H，d，J＝8.4Hz，H-5″)，7.28(1H，m，J＝8.4Hz，1.6Hz，H-6″)，6.80(1H，s，H-6′)，6.42(1H，d，J＝16.0Hz，H-2)，5.04(2H，s，H-7″)，3.88(3H，s，OCH3-2′)，3.81(6H，s，OCH3-3′，5′)。
化合物II-c白色固體，Rf(正己烷/乙酸乙酯/甲酸3/1/0.1)0.20；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.09(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，7.48(2H，d，J＝8.4Hz，H-3″，5″)，6.93(1H，s，H-6′)，6.87(2H，d，J＝8.8Hz，H-2″，6″)，6.35(1H，d，J＝16.0Hz，H-2)，5.06(2H，s，H-7″)，4.03(2H，q，J＝6.8Hz，OCH2CH3-4″)，3.89(6H，s，OCH3-3′，5′)，1.35(3H，t，J＝6.8Hz，OCH2CH3-4″)。
化合物II-d白色固體，Rf(正己烷/乙酸乙酯/甲酸3/1/0.1)0.21；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.10(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，7.65(1H，s，H-2″)，7.44(1H，d，J＝8.4Hz，H-6″)，7.39(1H，d，J＝8Hz，H-5″)，6.94(1H，s，H-6′)，6.68(1H，d，J＝16.0Hz，H-2)，5.12(2H，s，H-7″)，3.88(6H，s，OCH3-3′，5′)。
化合物II-e無(wú)色液體，Rf(正己烷/乙酸乙酯/甲酸3/1/0.1)0.23；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.15(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，6.93(1H，s，H-6′)，6.40(1H，d，J＝16.0Hz，H-2)，5.56(1H，brt，J＝6.8Hz，H-2″)，5.08(2H，m，H-6″，10″)，4.65(2H，d，J＝7.2Hz，H-1″)，3.89(6H，s，OCH3-3′，5′)，2.06(8H，m，H-4″，5″，8″，9″)，1.68(3H，brs，H-15″)，1.66(3H，brs，H-14″)，1.61(3H，brs，H-13″)，1.59(3H，brs，H-12″)。
化合物II-f無(wú)色液體，Rf(正己烷/乙酸乙酯/甲酸3/1/0.1)0.23；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.15(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，6.93(1H，s，H-6′)，6.40(1H，d，J＝16.0Hz，H-2)，5.56(1H，brt，J＝6.8Hz，H-2″)，5.08(2H，m，H-6″，10″)，4.65(2H，d，J＝7.2Hz，H-1)，3.92(6H，s，OCH3-3′，5′)，3.88(3H，s，OCH3-2′)，2.06(8H，m，H-4″，5″，8″，9″)，1.68(3H，brs，H-15″)，1.66(3H，brs，H-14″)，1.61(3H，brs，H-13″)，1.59(3H，brs，H-12″)。
實(shí)施例24化合物III-a(3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯-1-醇(2E))的制備 本例涉及到一類具有細(xì)胞毒活性的如式(III)所示的2，3，4，5-四取代的苯丙烯醇的一般合成方法。具體涉及到化合物III-a(3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]2-丙烯-1-醇(2E))的制備。在一個(gè)三口燒瓶中依次加入氫化鋰鋁(28毫克，0.72mmol)和8毫升乙醚，冰鹽浴冷至0℃，加入溶于2毫升乙醚的化合物I-a(122毫克，0.29mmol)，攪拌30分鐘。加水分解過(guò)量的氫化鋰鋁，而后用稀鹽酸調(diào)至酸性，乙醚(10毫升×3)來(lái)萃取，有機(jī)相用飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜，過(guò)濾，濾液濃縮得粗品，柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯＝3∶1，粗品/硅膠＝1∶50)得3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯-1-醇(2E)86毫克，收率為78.1％。
化合物III-a黃色油狀液體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.17；1H-NMR(400MHz，CDCl30δ7.38(2H，d，J＝8.4Hz，H-2″，6″)，6.87(2H，d，J＝8.4Hz，H-3″，5″)，6.83(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，6.73(1H，s，H-6′)，6.31(1H，dt，J＝16.0，6.0Hz，H-2)，4.98(2H，s，H-7″)，4.34(2H，t，J＝6.0Hz，H-1)，4.03(2H，q，J＝6.8Hz，OCH2CH3-4″)，3.87(6H，s，OCH3-3′，5′)，3.79(3H，s，OCH3-2′)，1.41(3H，t，J＝6.8Hz，OCH2CH3-4″)。
根據(jù)與實(shí)施例24相同的方法制備以下表四所示實(shí)施例25-30化合物
表四 下面列出表四中各化合物的理化數(shù)據(jù)化合物III-b)白色固體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.16；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.63(1H，d，J＝2.0Hz，H-2″)，7.42(1H，t，J＝8.4Hz，2.0Hz，H-6″)，7.31(1H， d，J＝8.4Hz，H-5″)，6.84(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，6.74(1H，s，H-6′)，6.32(1H，dt，J＝16.0，6.8Hz，H-2)，5.00(2H，s，H-7″)，4.34(2H，d，J＝6.8Hz，H-1)，3.88(3H，s，OCH3-2′)，3.86(6H，s，OCH3-3′，5′)。
化合物III-c無(wú)色液體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.16；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.62(1H，s，H-2″)，7.40(1H，d，J＝8.4Hz，H-6″)，7.30(1H，d，J＝8.0Hz，H-5″)，6.64(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，6.74(1H，s，H-6′)，6.35(1H，dt，J＝16.0，6.8Hz，H-2)，5.00(2H，s，H-7″)，4.23(2H，brd，J＝6.8Hz，H-1)，3.86(6H，s，OCH3-3′，5′)。
化合物III-d無(wú)色液體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.12；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.38(2H，dd，J＝8.4，2.0Hz，H-3″，5″)，6.59(1H，s，H-6′)，6.55(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，6.84(2H，dd，J＝8.8，2.0Hz，H-2″，6″)，6.28(1H，dt，J＝16.0，4.8Hz，H-2)，4.94(2H，s，H-7″)，4.32(2H，brd，J＝4.8Hz，H-1)，4.01(2H，q，J＝6.8Hz，OCH2CH3-4″)，3.89(6H，s，OCH3-3′，5′)，1.41(3H，t，J＝6.8Hz，OCH2CH3-4″)。
化合物III-e無(wú)色液體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.24；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ6.54(1H，d，J＝15.6Hz，H-3)，6.60(1H，s，H-6′)，6.30(1H，dt，J＝16.0，7.2Hz，H-2)，5.57(1H，brt，J＝6.8Hz，H-2″)，5.10(2H，m，H-6″，10″)，4.63(2H，d，J＝6.8Hz，H-1″)，4.53(2H，d，J＝7.2Hz，H-1)，3.86(6H，s，OCH3-3′，5′)，2.04(8H，m，H-4″，5″，8″，9″)，1.68(3H，brs，H-15″)，1.65(3H，brs，H-14″)，1.60(3H，brs，H-13″)，1.59(3H，brs，H-12″)。
化合物III-f無(wú)色液體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.17；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ6.90(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，6.98(1H，s，H-6′)，6.35(1H，dt，J＝16.0，6.8Hz，H-2)，4.23(2H，brd，J＝6.8Hz，H-1)，3.93(9H，s，OCH3-3′，4′，5′)。
化合物III-g無(wú)色液體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.18；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ6.54(1H，d，J＝15.6Hz，H-3)，6.60(1H，s，H-6′)，6.30(1H，dt，J＝16.0，7.2Hz，H-2)，5.57(1H，brt，J＝6.8Hz，H-2″)，5.10(2H，m，H-6″，10″)，4.64(2H，d，J＝6.8Hz，H-1″)，4.53(2H，d，J＝7.2Hz，H-1)，3.86(6H，s，OCH3-3′，5′)，3.75(3H， s，OCH3-2′)，2.04(8H，m，H-4″，5″，8″，9″)，1.68(3H，brs，H-15″)，1.65(3H，brs，H-14″)，1.60(3H，brs，H-13″)，1.59(3H，brs，H-12″)。
實(shí)施例31化合物IV-a(3-[2-溴-3，5-二甲氫基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯醛(2E))的制備 本例涉及到一類具有細(xì)胞毒活性的如式(IV)所示的2，3，4，5-四取代的苯丙烯醛的一般合成方法。具體涉及到化合物IV-a(3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯醛(2E))的制備。在反應(yīng)瓶中用1.5毫升乙醇將化合物V-a(50毫克，0.12mmol)溶解，加入2.5毫升0.05％氫氧化鈉水溶液，然后緩慢加入40％的乙醛溶液(39微升，0.36mmol)，并在室溫下攪拌24小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后加入氯化鈉使溶液達(dá)飽和并用乙醚萃取(8毫升×3)，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜，過(guò)濾，濾液濃縮得粗品，柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯＝8∶1，粗品/硅膠＝1∶50)得34毫克，收率為65.0％。
化合物IV-a橙黃色固體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.38；1H-NMR(400MHZ，CDCl3)δ9.79(1H，d，J＝7.6Hz，H-1)，7.74(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，7.65(1H，s，H-2″)，7.44(1H，d，J＝8.4Hz，H-6″)，7.39(1H，d，J＝8.4Hz，H-5″)，6.94(1H，s，H-6′)，6.68(1H，dd，J＝16.0，7.6Hz，H-2)，5.12(2H，s，H-7″)，3.88(6H，s，OCH3-3′，5′)。
根據(jù)實(shí)施例31的方法制備以下表五所示實(shí)施例32-37化合物 表五 下面列出表五中各化合物的理化數(shù)據(jù)化合物IV-b橙紅色固體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.37；1H-NMR(400MHZ，CDCl3)δ9.69(1H，d，J＝7.6Hz，H-1)，7.50(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，7.48(2H，d，J＝8.4Hz，H-3″，5″)，6.93(1H，s，H-6′)，6.87(2H，d，J＝8.8Hz，H-2″，6″)，6.35(1H，d，J＝16.0，7.2Hz，H-2)，5.06(2H，s，H-7″)，4.03(2H，q，J＝7.2Hz，OCH2CH3-4″)，3.89(6H，s，OCH3-3′，5′)，1.35(3H，t，J＝7.2Hz，OCH2CH3-4″)。
化合物IV-c橙紅色固體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.34；1H-NMR(400MHZ，CDCl3)δ9.69(1H，d，J＝7.6Hz，H-1)，7.40(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，6.80(1H，s，H-6′)，6.64(1H，dd，J＝16.0，7.6Hz，H-2)，3.93(9H，s，OCH3-3′，4′，5′)。
化合物IV-d微黃色液體，Rf(正己烷/乙酸乙酯6/1)0.30；1H-NMR(400MHZ，CD3COCD3)δ9.72(1H，d，J＝7.6Hz，H-1)，7.86(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，7.76(1H，d，J＝2.0Hz，H-2″)，7.60(1H，d，J＝8.4Hz，H-5″)，7.50(1H，t，J＝8.4，2.0Hz，H-6″)，7.19(1H，s，H-6′)，6.79(1H，dd，J＝16.0，7.6Hz，H-2)，5.15(2H，s，H-7″)，3.88(6H，s，OCH3-3′，5′)，3.81(3H，s，OCH3-2′)。
化合物IV-e白色固體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.17；1H-NMR(400MHZ，CDCl3)δ9.71(1H，d，J＝7.6Hz，H-1)，7.77(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，7.37(2H，d，J＝8.4Hz，H-3″，5″)，6.87(2H，d，J＝8.4Hz，H-2″，6″)，6.80(1H，s，H-6’)，6.66(1H，dd，J＝16.0，7.6Hz，H-2)，5.03(2H，s，H-7″)，4.03(2H，q，J＝6.8Hz，OCH2CH3-4″)，3.87(6H，s，OCH3-3′，5′)，3.85(3H，s，OCH3-2′)，1.41(3H，t，J＝6.8Hz，OCH2CH3-4″)。
化合物IV-f橙紅色固體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.40；1H-NMR(400MHZ，CDCl3)δ9.68(1H，d，J＝7.6Hz，H-1)，7.40(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，6.79(1H，s，H-6′)，6.64(1H，dd，J＝16.0，7.6Hz，H-2)，5.56(1H，brt，J＝6.8Hz，H-2″)，5.09(2H，m，H-6″，10″)，4.58(2H，d，J＝7.2Hz，H-1″)，3.90(6H，s，OCH3-3′，5′)， 2.02(8H，m，H-4″，5″，8″，9″)，1.69(3H，brs，H-15″)，1.67(3H，brs，H-14″)，1.60(3H，brs，H-13″)，1.59(3H，brs，H-12″)。
化合物IV-g無(wú)色液體，Rf(正己烷/乙酸乙酯5/2)0.63；1H-NMR(400MHZ，CDCl3)δ9.70(1H，d，J＝8.0Hz，H-1)，7.80(1H，d，J＝16.0Hz，H-3)，6.80(1H，s，H-6′)，6.66(1H，dd，J＝16.0Hz，8.0Hz，H-2)，5.55(1H，s，H-2″)，5.09(2H，m，H-6″，10″)，4.65(2H，d，J＝6.8Hz，H-1″)，3.94(3H，s，OCH3-2′)，3.88(3H，s，OCH3-3′)，3.86(3H，s，OCH3-5′)，2.06(8H，m，H-4″，5″，8″，9″)，1.68(3H，brs，H-15″)，1.66(3H，brs，H-14″)，1.60(3H，brs，H-13″)，1.58(3H，brs，H-12″)。
式(1)化合物吸其中間體式(V)化合物具有重要的生物活性，對(duì)六株腫瘤細(xì)胞，包括人前列腺癌細(xì)胞(PC-3)、鼻咽癌細(xì)胞(CNE)、口腔上皮癌細(xì)胞株(KB)、人肺癌細(xì)胞(A549)、人肝癌細(xì)胞(BEL-7404)、人子宮頸癌細(xì)胞(Hela)的體外細(xì)胞毒活性試驗(yàn)表明此類具有苯丙烯結(jié)構(gòu)的新化合物及其中間體系列式(V)化合物對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)具有抑制作用，有可能發(fā)展成為新的防治腫瘤藥物。
本發(fā)明的式(1)化合物及式(V)化合物或其可藥用鹽及其溶劑化物可以與藥學(xué)上常用的輻料或載體結(jié)合，制備得到具有腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)抑制活性從而可以用于防治腫瘤的藥物組合物。上述各類藥物組合物可以采用注射劑、片劑、膠囊劑、氣霧劑、栓劑、膜劑、滴丸劑、外用搽劑、軟膏劑等劑型藥物，還可以采用現(xiàn)代制藥界所公知的控釋或緩釋劑型或納米制劑。
本發(fā)明的式(1)化合物及式(V)化合物或其可藥用鹽及其溶劑化物可以與現(xiàn)已上市的抗腫瘤藥物如鉑類藥物順鉑(DDP)、喜樹堿類藥物伊立替康(Irinatecan，CPT-11)、長(zhǎng)春花堿類藥物失碳長(zhǎng)春花堿(Vinorebine，NVB諾維本)、脫氧胞昔類藥物吉西他濱(Gemcitabine，Gemzar，健擇)、足葉乙甙(Etoposide)、紫杉醇(Paclitaxel)等聯(lián)合使用，制備得到具有腫瘤生長(zhǎng)抑制活性的細(xì)胞毒性組合物，可用于治療腫瘤疾病。該類藥物組合物可以采用注射劑、片劑、膠囊劑、氣霧劑、栓劑、膜劑、滴丸劑、外用搽劑、軟膏劑等劑型藥物，還可以采用現(xiàn)代制藥界所公知的控釋或緩釋劑型或納米制劑。
為了更好地哩解本發(fā)明的實(shí)質(zhì)，下面分別用該類對(duì)六種腫瘤細(xì)胞株生長(zhǎng)的抑制作用的藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果，說(shuō)明其在抗腫瘤藥物研究領(lǐng)域中的新用途。藥理實(shí)施例給出了代表性化合物的部分活性數(shù)據(jù)。必須說(shuō)明，本發(fā)明的藥理實(shí)施例是用于說(shuō)明本發(fā)明而不是對(duì)本發(fā)明的限制。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)質(zhì)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行的簡(jiǎn)單改進(jìn)都屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。
藥理實(shí)施例1化合物IV-c對(duì)KB細(xì)胞的細(xì)胞毒活性KB(口腔上皮癌)細(xì)胞用RPMI 1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的鏈霉素。細(xì)胞以每孔5×103的濃度加入到96孔阪中，在37℃含5％CO2潮濕空氣的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。
細(xì)胞存活率的測(cè)定用改良MTT法。細(xì)胞經(jīng)過(guò)24小時(shí)的孵育后，分別將新配的化合物IV-c的二甲亞砜溶液以濃度梯度加入到各孔中，使孔中化合物最終濃度分別為100ug/mL，33.3ug/mL，11.1ug/mL和3.7ug/mL。72小時(shí)后，加入10μL MTT(5mg/mL)的磷酸鹽緩沖液，再繼續(xù)在37℃培養(yǎng)4小時(shí)后，離心5分鐘除去未轉(zhuǎn)化的MTT，每孔中加入200μL二甲亞砜，以溶解還原的MTT晶體甲臜(formazan)，所形成的formazan用酶標(biāo)儀在570nm波長(zhǎng)下比色，細(xì)胞存活率由樣品相對(duì)于對(duì)照品的比值計(jì)算。其中化合物IV-c對(duì)KB細(xì)胞半抑制濃度IC50由劑量效應(yīng)曲線得到。
化合物IV-c的IC50為2.99×10-5M；而陽(yáng)性對(duì)照順鉑對(duì)KB細(xì)胞的IC50為2.78×10-5M。
實(shí)驗(yàn)結(jié)論KB細(xì)胞是測(cè)試化合物對(duì)腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性的有效工具和評(píng)價(jià)指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)表明此類2，3，4，5-四取代的苯丙烯類衍生物及其中間體對(duì)KB細(xì)胞具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，有可能發(fā)展成為新的具有抗腫瘤作用的藥物。
藥理實(shí)施例2化合物II-c對(duì)PC-3細(xì)胞的細(xì)胞毒活性PC-3(前列腺癌)細(xì)胞用F-12培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的鏈霉素。細(xì)胞以每孔5×103的濃度加入到96孔板中，在37℃含5％CO2潮濕空氣的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。
細(xì)胞存活率的測(cè)定用改良MTT法，具體方法如藥理實(shí)施例1。
化合物II-c的IC50為8.88×10-5M；而陽(yáng)性對(duì)照順鉑對(duì)PC-3細(xì)胞的IC50為5.66×10-5M。
實(shí)驗(yàn)結(jié)論本實(shí)驗(yàn)表明此類2，3，4，5-四取代的苯丙烯類衍生物及其中間體對(duì)PC-3細(xì)胞具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，有可能發(fā)展成為新的具有抗腫瘤作用的藥物。
藥理實(shí)施例3化合物I-j對(duì)CNE細(xì)胞的細(xì)胞毒活性CNE(鼻咽癌)細(xì)胞用RPMI 1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的鏈霉素。以每孔5×103細(xì)胞的濃度加入到96孔板中，在37℃含5％ CO2潮濕空氣的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。
細(xì)胞存活率的測(cè)定用改良MTT法，具體方法如藥理實(shí)施例1。
化合物I-j的IC50為8.12×10-5M；而陽(yáng)性對(duì)照順鉑對(duì)CNE細(xì)胞的IC50為5.66×10-5M。
實(shí)驗(yàn)結(jié)論本實(shí)驗(yàn)表明此類2，3，4，5-四取代的苯丙烯類衍生物及其中間體對(duì)CNE細(xì)胞具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，有可能發(fā)展成為新的具有抗腫瘤作用的藥物。
藥理實(shí)施例4化合物II-c對(duì)A549細(xì)胞的細(xì)胞毒活性A549(人肺癌)細(xì)胞用RPMI 1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的鏈霉素。細(xì)胞以每孔5×103的濃度加入到96孔板中，在37℃含5％ CO2潮濕空氣的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。
細(xì)胞存活率的測(cè)定用改良MTT法，具體方法如藥理實(shí)施例1。
化合物II-c的IC50為5.89×10-5M；而陽(yáng)性對(duì)照順鉑對(duì)CNE細(xì)胞的IC50為2.53×10-5M。
實(shí)驗(yàn)結(jié)論本實(shí)驗(yàn)表明此類2，3，4，5-四取代的苯丙烯類衍生物及其中間體對(duì)A549細(xì)胞具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，有可能發(fā)展成為新的具有抗腫瘤作用的藥物。
藥理實(shí)施例5化合物IV-c對(duì)BEL-7404細(xì)胞的細(xì)胞毒活性
BEL-7404(人肝癌)細(xì)胞用RPMI 1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的鏈霉素。細(xì)胞以每孔5×103的深度加入到96孔板中，在37℃含5％ CO2潮濕空氣的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。
細(xì)胞存活率的測(cè)定用改良MTT法，具體方法如藥理實(shí)施例1。
化合物IV-c的IC50為5.01×10-5M；而陽(yáng)性對(duì)照順鉑對(duì)BEL-7404細(xì)胞的IC50為1.07×10-5M。
實(shí)驗(yàn)結(jié)論本實(shí)驗(yàn)表明此類2，3，4，5-四取代的苯丙烯類衍生物及其中間體對(duì)BEL-7404細(xì)胞具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，有可能發(fā)展成為新的具有抗腫瘤作用的藥物。
藥理實(shí)施例6化合物I-j對(duì)Hela細(xì)胞的細(xì)胞毒活性Hela(人子宮頸癌)細(xì)胞用RPMI 1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的鏈霉素。細(xì)胞以每孔5×103的濃度加入到96孔板中，在37℃含5％ CO2潮濕空氣的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。
細(xì)胞存活率的測(cè)定用改良MTT法，具體方法如藥理實(shí)施例1。
化合物I-j的IC50為8.53×10-5M；而陽(yáng)性對(duì)照順鉑對(duì)CNE細(xì)胞的IC50為5.27×10-5M。
實(shí)驗(yàn)結(jié)論本實(shí)驗(yàn)表明此類2，3，4，5-四取代的苯丙烯類衍生物及其中間體對(duì)Hela細(xì)胞具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，有可能發(fā)展成為新的具有抗腫瘤作用的藥物。
權(quán)利要求
1.一種具有式(1)所示結(jié)構(gòu)的2，3，4，5-四取代的苯丙烯類衍生物及其可藥用的鹽 式(1)其中R1可以是羥基，鹵素，硝基，氨基，含1～8個(gè)碳的飽和或不飽和烴基或烷氧基；R2，R3或R4可以相同或不同，可以是氫，含1～15個(gè)碳的飽和或不飽和烴基，取代或未取代的芳烷基；其中用于芳烷基中芳基上取代的取代基可以是含1～8個(gè)碳的烷基或烷氧基，鹵素，羥基，氨基，硝基，含1～8個(gè)碳的烷胺基；R可以是-COOH，-CH2OH，-CHO，-COOR5，-CONHNH2，-CONH2，-CONHR5，-CON(R5)2，其中R5是含1～8個(gè)碳的鏈烷基；當(dāng)R2，R3，R4同時(shí)為甲基時(shí)，R1不能為溴或硝基或甲氧基取代；當(dāng)R2，R3，R4同時(shí)為氫，R1為羥基時(shí)，R不能為羧基；當(dāng)R2，R4同時(shí)為甲基，R為羧基，取代基R1為羥基時(shí)，R3不能為氫；當(dāng)R2，R4同時(shí)為甲基，R為羧基而取代基R1為硝基時(shí)，R3不能為芐基；當(dāng)R2，R4同時(shí)為甲基，R為醛基而R1為氯時(shí)，R3不能為氫。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)所示化合物及其可藥用鹽，其特征是取代基R是CO2R5； 式(I)其中，基團(tuán)R1，R2，R3，R4及R5的定義與權(quán)利要求1中的相同。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的式(II)所示化合物及其可藥用鹽，其特征是取代基R是羧基； 式(II)其中，基團(tuán)R1，R2，R3，R4的定義與權(quán)利要求1中的相同。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的式(III)所示化合物及其可藥用鹽，其特征是取代基R是羥甲基； 式(III)其中，基團(tuán)R1，R2，R3，R4的定義與權(quán)利要求1中的相同。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的式(IV)所示化合物及其可藥用鹽，其特征是取代基R是醛基； 式(IV)其中，基團(tuán)R1，R2，R3或R4的定義與權(quán)利要求1相同。
6.一種具有式(V)所示的2，3，4，5-四取代的苯甲醛化合物及其可藥用鹽 式(V)其中基團(tuán)R1，R2，R3，R4的定義除與權(quán)利要求1的相同外，當(dāng)R2，R3，R4同時(shí)為氫時(shí)，R1不能為羥基；當(dāng)R2，R4同時(shí)為甲基時(shí)，R3不能為氫、甲基、未取代的芐基；當(dāng)R2，R4中有一個(gè)為甲基，而另一個(gè)為氫或未取代的芐基時(shí)，R3不能為氫、甲基、未取代的芐基。
7.一種由式(V)化合物為起始物制備式(1)化合物的方法，其特征是由式(V)化合物通過(guò)與三苯基乙氧羰基次甲基膦烷經(jīng)歷魏悌錫(wittig)反應(yīng)制備得到化合物(I)，得到的產(chǎn)物經(jīng)過(guò)堿水解得到化合物(II)；化合物(I)通過(guò)氫化鋰鋁還原得到化合物(III)與少量2，3位雙鍵還原的產(chǎn)物；化合物(IV)可以由化合物(V)與乙醛的縮合作用制備得到；具體路線見(jiàn)下圖(以烯鍵反式化合物為例) 其中，基團(tuán)R1，R2，R3及R4的定義與權(quán)利要求1～6之一的相同。
8.根據(jù)權(quán)利要求1～7的化合物，它們是I-a.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸乙酯(2E)；I-b.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸乙酯(2E)；I-c.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸乙酯(2E)；I-d.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸乙酯(2Z)；I-e.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸乙酯(2E)；I-f.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸乙酯(2Z)；I-g.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯酸乙酯(2E)；I-h.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯酸乙酯2(Z)；I-i.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯酸乙酯(2E)；I-j.3-(2-溴-3，4，5-三甲氧基苯基)-2-丙烯酸乙酯(2E)；I-k.3-(2-溴-3，4，5-三甲氧基苯基)-2-丙烯酸乙酯(2Z)；II-a.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸(2E)；II-b.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸(2E)；II-c.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸(2E)；II-d.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯酸(2E)；II-e.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2(E)-丙烯酸；II-f.3-[2，3，5-三甲氧基4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2(E)-丙烯酸；III-a.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯-1-醇(2E)；III-b.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯-1-醇(2E)；III-c.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯-1-醇(2E)；III-d.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯-1-醇(2E)；III-e.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯-1-醇(2E)；III-f.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯-1-醇(2E)；III-g.3-(2-溴-3，4，5-三甲氧基苯基)-2-丙烯-1-醇(2E)；IV-a.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯醛(2E)；IV-b.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯醛(2E)；IV-c.3-(2-溴-3，4，5-三甲氧基苯基)-2-丙烯醛(2E)；IV-d.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)苯基]-2-丙烯醛(2E)；IV-e.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)苯基]-2-丙烯醛(2E)；IV-f.3-[2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯醛(2E)；IV-g.3-[2，3，5-三甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧苯基]-2-丙烯醛(2E)；V-a.2，3，5-三甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)-苯甲醛；V-b.2，3，5-三甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)-苯甲醛；V-c.2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，4-二氯苯甲氧基)-苯甲醛；V-d.2-溴-3，5-二甲氧基-4-(4-乙氧基苯甲氧基)-苯甲醛；V-e.2-溴-3，5-二甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧-苯甲醛；V-f.2，3，5-三甲氧基-4-(3，7，11-三甲基-2(E)，6(E)，10-十二烷三烯)氧-苯甲醛。
9.根據(jù)權(quán)利要求1～8之一的化合物或者它們的組合物及其可藥用的鹽用于制備防治口腔上皮癌、前列腺癌、鼻咽癌、肺癌、肝癌、子宮頸癌及其相關(guān)腫瘤疾病的藥物用途及藥物組合物；還可以與其他抗腫瘤藥物以一定比例組成的混合物和可藥用輔料制備腫瘤疾病防治藥物；其含有作為活性成分的治療有效量的權(quán)利要求1～8所述之化合物或其可藥用鹽或者它們的混合物和可藥用輔料。
全文摘要
本發(fā)明涉及藥物化學(xué)、藥物先導(dǎo)化合物的發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域。具體涉及一類具有細(xì)胞毒活性的2，3，4，5－四取代的苯丙烯類衍生物及其可藥用的鹽，本發(fā)明還涉及其制備方法及其藥物組合物和醫(yī)藥用途。本發(fā)明的化合物具有體外抑制六種人體腫瘤細(xì)胞株，如人前列腺癌細(xì)胞(PC－3)、鼻咽癌細(xì)胞(CNE)、口腔上皮癌細(xì)胞(KB)、人肺癌細(xì)胞(A549)、人肝癌細(xì)胞(BEL－7404)、人子宮頸癌細(xì)胞(Hela)的生物活性，可預(yù)期作為抗腫瘤藥物用途。
文檔編號(hào)C07C47/52GK101050179SQ200710068540
公開日2007年10月10日 申請(qǐng)日期2007年5月15日 優(yōu)先權(quán)日2007年5月15日
發(fā)明者趙昱, 張麗娟, 曾蘇, 巫秀美, 白驊 申請(qǐng)人:浙江海正天華新藥研發(fā)有限公司