專利名稱：一種從茶多酚中提取表沒食子兒茶素沒食子酸酯的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從茶多酚中分離提取表沒食子兒茶素沒食子酸酯的方法。
背景技術(shù)：
茶多酚是從茶葉中提取的多酚類活性物質(zhì)，其中單體化合物有兒茶素(c)、
表兒茶素(EC)、沒食子兒茶素(GC)、兒茶素沒食子酸酯(CG)、表沒食子兒茶素 (EGC)、表兒茶素沒食子酸酯(ECG)、沒食子兒茶素沒食子酸酯(GCG)，表沒食子 兒茶素沒食子酸酯(EGCG)，此外還有少量咖啡因和兒茶素聚合物。其中主要 成分為表沒食子兒茶素沒食子酸酯，市售茶多酚中一般含表沒食子兒茶素沒食 子酸酯30-70%。
近年研究表明，茶多酚具有抗腫瘤、抗氧化、抗炎、抗病毒、降血脂、防 輻射等多種重要的生物活性，而其中的表沒食子兒茶素沒食子酸酯的活性最強。 基于茶多酚的良好生物活性，其在醫(yī)藥、食品和化妝品中的應(yīng)用越來越受到人 們的重視。尤其是開發(fā)其藥用價值成為了熱點。如臨床上已有治療心血管的茶 多酚復(fù)方藥物"心腦康"，國外開發(fā)了將其用于口腔消炎的牙膏和漱口水。2006 年10月31日FDA批準(zhǔn)加拿大的Epitome制藥公司的產(chǎn)品Veregen(成份為95% 茶多酚)上市，該產(chǎn)品己作為植物藥在皮膚科方面應(yīng)用于治療生殖器疣。盡管 如此，茶多酚的藥用價值還沒有被充分開發(fā)利用，關(guān)鍵因素是由傳統(tǒng)提取工藝 獲得的茶多酚為混合物并混有少量咖啡因(如CN1562995A， CN1351012， CN1421426A)，因而限制了對其進行藥理研究和藥物開發(fā)。2007年Chan Tak Hang (W02007041891 )發(fā)明通過乙酰化從茶葉中提取單體兒茶素的方法，但從茶葉 中直接提取存在原材料消耗大，收率低和工藝復(fù)雜的缺點。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種從茶多酚中分離提取表沒食子兒茶素沒食子酸酯 的方法，它能克服現(xiàn)有技術(shù)的上述缺點。
一種從茶多酚中提取表沒食子兒茶素沒食子酸酯的方法，其特征在于用乙 ?；噭┦共瓒喾又械亩喾游镔|(zhì)羥基乙?；?，然后用硅膠柱色譜分離得到全乙 ?；谋頉]食子兒茶素沒食子酸酯，再使全乙?；谋頉]食子兒茶素沒食子酸 酯在酸性條件下和質(zhì)子性溶劑中水解得到表沒食子兒茶素沒食子酸酯，經(jīng)干燥 得到不含溶劑的表沒食子兒茶素沒食子酸酯。
本發(fā)明優(yōu)點是原材料消耗小，收率高，并可以大規(guī)模生產(chǎn)表沒食子兒茶素 沒食子酸酯單體。
具體實施例方式
本方法以市售的茶多酚為原料，總酚含量為80-98% (重量百分?jǐn)?shù)，下同)， 其中表沒食子兒茶素沒食子酸酯的含量為20-50%。本方法用吡啶、三乙胺或二 異丙基乙基胺作溶劑和縛酸劑，用乙?；噭┤缫阴Ｂ然蛞宜狒共瓒喾又卸?酚物質(zhì)的羥基全部被乙?；甚?，反應(yīng)溫度為0°C-30°C。乙酰化產(chǎn)物用硅膠柱 色譜分離得到全乙?；頉]食子兒茶素沒食子酸酯，其化學(xué)名為5，7-二乙酰氧 基-2-(3,4， 5-三乙?；交?-3， 4-二氫-苯并吡喃-3-醇，3， 4, 5-三乙酰基苯甲 酸酯。所述的硅膠為100-300目粒徑，所用洗脫劑為乙酸乙酯和石油醚，兩者 的體積比為1:0.5-3，最合適體積比為1: 2。使全乙?；谋頉]食子兒茶素沒 食子酸酯在酸性條件下和質(zhì)子性溶劑中水解得到表沒食子兒茶素沒食子酸酯， 所用的酸為HC1、 H2S04或乙酸，以及能生成這些酸的氯化亞砜、草酰氯、乙酸 酐、乙酰氯、乙酰溴。水解所用質(zhì)子性溶劑為乙酸、水、乙酸、乙醇、甲醇、 異丙醇、正丁醇、異丁醇等含一個到六個碳原子的醇。最后采用真空干燥或冷 凍干燥得到不含溶劑的表沒食子兒茶素沒食子酸酯。
以下結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步說明。
(1) 5, 7-二乙酰氧基-2-(3， 4, 5-三乙?；交?-3， 4-二氫-苯并吡喃-3_醇， 3， 4, 5-三乙?；郊姿狨サ闹苽?br> 稱取乙酸酐380 ml、吡啶350ml，在1000 ml的茄形瓶中將乙酸酑和吡啶 在冰浴條件下混合攪拌，向冰浴中加入食鹽使其溫度降至0°C，然后緩緩倒入市 售茶多酚樣品200 g,茶多酚總酚含量為95%，其中表沒食子兒茶素沒食子酸酯 含量為40%。冰浴溫度下反應(yīng)30min后，移至室溫，室溫下反應(yīng)72h。經(jīng)薄層色 譜檢測反應(yīng)完全后，攪拌下將反應(yīng)液倒入約1000 ml冰水中，抽濾，水洗。用 250ml乙酸乙酯溶解，然后每次用1 M 300 ml稀鹽酸洗，共洗3次，再用300ml 蒸餾水洗，共洗3次。分離出的有機相用無水Na2S04干燥，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑， 得到咖啡色粘狀固體。用硅膠柱層析，洗脫劑為石油醚和乙酸乙酯，兩者的體 積比為1:2。干燥得淺黃色5,7-二乙酰氧基-2-(3,4, 5-三乙?；交?-3，4-二 氫-苯并吡喃-3-醇，3,4,5-三乙?；郊姿狨?17克，以表沒食子兒茶素沒食 子酸酯計產(chǎn)率為88. 7%。熔點110-lirC;比旋光度
D--180.7 (c=1.0, CD3OD);產(chǎn)品分子式為CuH^O!i,高分辨質(zhì)譜計 算分子離子加氫值為459.0927,實測值為459.0901;核磁共振氫譜巾NMR (CDC13， 600 MHz)化學(xué)位移值為6.94 (s, 2 H)， 6.49 (s, 2 H), 5,94 (m, 2 H), 5.51 (m, 1 H), 4.96 (s, 1 H), 2.97 (dd， J=17.58, 4.74 Hz, 1 H), 2.83 (dd, J=17.58, 2.58 Hz, 1 H);核磁共振碳譜13C NMR (CDC13, 600 MHz)化學(xué)位移值為167.6, 157.9, 157.8, 157.2, 146.7 (2), 146.3 (2), 139.8, 133.8， 130.8, 121.5, 110.3 (2), 107,9 (2), 99.4， 96.5, 95.9, 78.6, 69.9, 26.8。
權(quán)利要求
1、一種從茶多酚中提取表沒食子兒茶素沒食子酸酯的方法，其特征在于用乙酰化試劑使茶多酚中的多酚物質(zhì)羥基乙?；缓笥霉枘z柱色譜分離得到全乙?；頉]食子兒茶素沒食子酸酯，使全乙酰化表沒食子兒茶素沒食子酸酯在酸性條件下和質(zhì)子性溶劑中水解得到表沒食子兒茶素沒食子酸酯，經(jīng)干燥得到不含溶劑的表沒食子兒茶素沒食子酸酯。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從茶多酚中提取表沒食子兒茶素沒食子酸酯的方法，其特 征在于所述的乙?；噭橐宜狒蛞阴Ｂ?。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從茶多酚中提取表沒食子兒茶素沒食子酸酯的方法，其特 征在于所述的全乙?；頉]食子兒茶素沒食子酸酯的化學(xué)名稱為5， 7-二乙酰氧基 -2-(3， 4, 5-三乙?；交?-3， 4-二氫-苯并吡喃-3-醇，3, 4, 5-三乙?；郊姿狨?。
4、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從茶多酚中提取表沒食子兒茶素沒食子酸酯的方法，其特 征在于所述的硅膠柱色譜分離所用的洗脫劑為乙酸乙酯和石油醚，乙酸乙酯和石油醚 體積比為1:0. 5-3。
5、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從茶多酚中提取表沒食子兒茶素沒食子酸酯的方法，其特 征在于所述的酸性條件下水解所用的酸為硫酸、鹽酸、乙酸以及可以產(chǎn)生乙酸的乙酸 酐、乙酰氯、乙酰溴中的一種。
6，根據(jù)權(quán)利要求1所述的從茶多酚中提取表沒食子兒茶素沒食子酸酯的方法，其特 征在于所述的質(zhì)子性溶劑為乙酸、水、乙酸、甲醇、乙醇、異丙醇、正丁醇、異丁醇、 乙二醇或環(huán)己醇。
7、根據(jù)權(quán)利要求1所述的從茶多酚中提取表沒食子兒茶素沒食子酸酯的方法，其特 征在于所述的干燥為真空干燥或冷凍干燥。
全文摘要
一種從茶多酚中提取表沒食子兒茶素沒食子酸酯的方法，其特征在于用乙?；噭┦共瓒喾又械亩喾游镔|(zhì)羥基乙?；缓笥霉枘z柱色譜分離得到全乙?；谋頉]食子兒茶素沒食子酸酯，再使全乙?；谋頉]食子兒茶素沒食子酸酯在酸性條件下和質(zhì)子性溶劑中水解得到表沒食子兒茶素沒食子酸酯，經(jīng)干燥得到不含溶劑的表沒食子兒茶素沒食子酸酯。本發(fā)明優(yōu)點是原材料消耗小，收率高，并可以大規(guī)模生產(chǎn)表沒食子兒茶素沒食子酸酯單體。
文檔編號C07D311/62GK101182319SQ20071011525
公開日2008年5月21日 申請日期2007年12月5日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月5日
發(fā)明者萬升標(biāo), 孫東魁, 張曉瑜, 濤 江, 秦旭龍 申請人:中國海洋大學(xué)