專利名稱：紅花黃色素b的制備方法及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然藥物有效成分提取制備領(lǐng)域，具體涉及從紅花中分離羥基紅 花黃色素B的工藝，本發(fā)明還涉及羥基紅花黃色素B在制藥及心腦血管領(lǐng)域方面 的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
紅花為菊科植物紅花Carthamus tinctorius L.的干燥花，夏季花由黃變紅時(shí)采 摘，陰干或曬干，具有活血祛瘀、通經(jīng)止痛的功效。紅花中主要有三種水溶性黃 色素，分別為羥基紅花黃色素A、紅花黃色素B、紅花黃色素C。目前眾多研究一 —包括提取方法、藥理及臨床——都是針對(duì)羥基紅花黃色素A的，對(duì)其余兩種成 分的研究較少。中國(guó)專利CN1785988A公開了一種富含紅花黃色素B的紅花黃色 素的制備方法和用途，發(fā)明采用水浸泡提取，聚酰胺分離精制。由于聚酰胺存在 一些小分子可溶性酰胺雜質(zhì)，目前也沒有對(duì)其殘留的統(tǒng)一檢測(cè)項(xiàng)，且聚酰胺對(duì)多 酚羥基類化合物吸附牢固，死吸附量大，較難洗脫下來，聚酰胺的可重復(fù)利用次 數(shù)也較少。而紅花黃色素B含多個(gè)酚羥基，且還有臨酚羥基，被聚酰胺吸附牢固， 用聚酰胺分離時(shí)相對(duì)損失較大。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種制備紅花黃色素B的方法。本發(fā)明首先采用含水 極性溶劑滲漉提取紅花中的紅花黃色素B，與水浸泡提取相比，提取率更高，黃色 素B溶出更完全。
在醇沉與過大孔樹脂的順序上，本發(fā)明采用先過大孔樹脂柱，因紅花黃色素B 能較好的被大孔樹脂吸附，用水或含醇量低于15%的乙醇洗脫時(shí)，黃色素B不被
洗脫下，這樣可以除去一些水溶性多糖及不被大孔樹脂吸附的成分，如羥基紅花
黃'色素A，在后續(xù)醇沉?xí)r，由于水溶性雜質(zhì)干擾的減少，醇沉?xí)r黃色沉淀中黃色 素B含量更高也更純。
本發(fā)明在對(duì)紅色素B的精制時(shí)采用反相填料柱，如Sephadex-LH20、GEL-MCI、 ODS填料，這類填料不會(huì)產(chǎn)生對(duì)多酚羥基類化合物的死吸附，可重復(fù)利用性高， 且極少醇溶性低分子雜質(zhì)，處理填料時(shí)更簡(jiǎn)單。采用這類填料對(duì)黃色素B進(jìn)行精 制，最終的產(chǎn)物紅花黃色素B的產(chǎn)量明顯得到提高。
本發(fā)明中所用的反相填料，可以是葡聚糖凝膠、反相硅膠、反相GEL-MCI填 料，優(yōu)選葡聚糖凝膠S印hadex-LH20。
本發(fā)明在滲漉提取中所用的溶劑，為極性有機(jī)溶劑質(zhì)量分?jǐn)?shù)低于60%的含水 極性溶劑。其中的含水有機(jī)溶劑可以是含水甲醇、含水乙醇或含水丙酮，還可以 單用水，優(yōu)選乙醇。更優(yōu)先50%的乙醇。
本發(fā)明的另一目的在于提供含有本發(fā)明方法所得到的紅花黃色素B在制藥中 的應(yīng)用。
本發(fā)明的再一目的在與提供由本發(fā)明方法所得到的紅花黃色素B在制備具有 預(yù)防和治療心腦血管疾病藥物中的應(yīng)用。
實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，可以通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)紅花極性有機(jī)溶劑質(zhì)量分?jǐn)?shù)低于 60%的含水極性溶劑浸泡24小時(shí)后，然后用水或含水乙醇滲漉提取，至滲漉液中 基本無(wú)紅花黃色素B，合并滲漉提取液，6(TC下減壓濃縮，至相對(duì)密度為1.05~1.15， 上大孔吸附樹脂柱，藥材與大孔吸附樹脂用量的比例為lg生藥材/0.5 2mL樹脂， 先用低于15%的乙醇洗脫至洗脫液顏色變淡，再用30%~50%的乙醇洗脫至無(wú)紅花 黃色素B流下，合并乙醇洗脫液，60。C減壓濃縮至相對(duì)密度約為1.05~1.30，在不 斷攪拌下加入乙醇使含醇量為75%~85%，冷處放置24小時(shí)，析出黃色沉淀，過
濾，取黃色沉淀，用至少3倍量沉淀的去離子水溶解，靜置，過濾，取濾液，濾 液60。C減壓濃縮至無(wú)醇味，相對(duì)密度為1.05 1.15，上反相填料柱分離，低于15% 的乙醇洗脫至洗脫液顏色變淡，改用35%~55%的乙醇洗脫，收集紅花黃色素B含 量大于90%的流份，合并；紅花黃色素B含量小于90%的流份合并再上反相柱， 低于15%的乙醇洗脫至洗脫液顏色變淡，35% 55%的乙醇洗脫，收集紅花黃色素 B含量大于90。/。的流份，并入到上述紅花黃色素B含量大于90。/。的流份中，如此 反復(fù)精制，至紅花黃色素B大部分被分離出，6(TC減壓濃縮紅花黃色素B含量大 于卯％的合并液得濃縮液，濃縮液冷凍干燥，得紅花黃色素B。
本發(fā)明滲漉提取所用的溶劑優(yōu)選50%的乙醇，精制紅花黃色素B的填料優(yōu)選 Sephadex-LH20。
通過對(duì)比本發(fā)明方法和水浸泡提取聚酰胺精制方法，對(duì)提取時(shí)紅花黃色素B 的提取率和最終的紅花黃色素B得率進(jìn)行比較，本發(fā)明均有提高。 下面通過對(duì)比實(shí)驗(yàn)給予說明，比較結(jié)果見表l。 提取方案一已有對(duì)比技術(shù)方案
云南紅花lkg，以水浸泡三次，溶劑用量分別為IOL、 8L、 8L，浸泡時(shí)間分別 為24小時(shí)、12小時(shí)、12小時(shí)。過濾，合并濾液，6(TC減壓濃縮至相對(duì)密度為1.20， 攪拌下加入乙醇使含純量為80%,精制24小時(shí)，析出黃色沉淀，取黃色沉淀，用 4倍量的水溶解，過濾，取濾液，上HP-20大孔吸附樹脂柱，先用10°/。的乙醇洗 脫，再用50%的乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，合并，減壓濃縮后上處理好的聚酰 胺柱，先用50%的乙醇洗脫5個(gè)柱體積，再用95%的乙醇洗脫，收集紅花黃色素 B含量大于90。/。的流份，得紅花黃色素B (A2)。
提取方案二本發(fā)明技術(shù)方案
云南紅花lkg， 10L50。/。的乙醇浸泡24小時(shí)后，滲漉提取，至紅花黃色素B基本提盡，總?cè)軇┯昧繛?6L,合并滲漉液，60'C減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10，上 HP-20大孔吸附樹脂柱，先用10%的乙醇洗脫，棄此部分，改用50%的乙醇洗脫， 收集50%的乙醇洗脫液，合并，6(TC減壓濃縮至相對(duì)密度為1.20，攪拌下加入乙 醇使含醇量為80%，冷處放置24小時(shí)，析出黃色沉淀，過濾，取沉淀，用沉淀量 5倍的去離子水溶解，過濾，取濾液，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10，上Sephadex-LH20 柱，15%的乙醇洗脫，棄去，再用50%的乙醇洗脫，收集紅花黃色素B含量大于 90%的流份，合并，減壓濃縮，干燥，既得。
表1兩種方法分離紅花黃色素B的比較
實(shí)驗(yàn)方案總浸膏量g浸膏中黃色素 B的總量g浸膏中黃色素 B含量最終所得黃色 素B的量g
對(duì)比技術(shù)方案2805.21.86%3.0
本發(fā)明技術(shù)方2517.02.79%4.9
案從上表結(jié)果可知，利用本發(fā)明技術(shù)方案提取分離紅花黃色素B，提取物中紅 花黃色素的提取率和最終紅花黃色素B的得率均優(yōu)于對(duì)比技術(shù)方案。
本發(fā)明技術(shù)方案所得到的紅花黃色素B，具有預(yù)防和治療心腦血管疾病的作 用，如對(duì)缺血性腦中風(fēng)、心肌缺血等疾病。用含有有效量的本發(fā)明技術(shù)方案所得 到的紅花黃色素B，可用于制備各種具有預(yù)防和治療心腦血管疾病的藥物劑型，可 以是口服固體制劑，如片劑、膠囊劑、滴丸劑等，也可以是注射型制劑，如注射 液、凍干粉針、大輸液等。
本發(fā)明的口服固體制劑(膠囊劑)可以通過如下方案實(shí)現(xiàn)
紅花黃色素B 28g
干淀粉 172g
制備工藝為稱取紅花黃色素B和干淀粉，采用等量遞增法將紅花黃色素B 和干淀粉混合均勻，裝入空心膠囊中，既得膠囊劑。
本發(fā)明藥物組合物片劑的制備 紅花黃色素B 28g 85%的乙醇 適量 淀粉 適量
稱取紅花黃色素、淀粉，混勻，用85%的乙醇制粒，加入適量的崩解劑和潤(rùn) 滑劑，壓片制成1000片。
本發(fā)明凍干粉針劑的制備 紅花黃色素B 14g 甘露醇 適量 注射用水 適量
稱取紅花黃色素B，用注射用水溶解，0.1M的NaOH調(diào)pH至6.5左右，加入 甘露醇，超聲溶解，過0.22um的微孔濾膜，凍干，既得。 具體實(shí)施例
以下從具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說明，需要指出的是，所列舉的實(shí)施例 并不是為了限制本發(fā)明技術(shù)方案，而是為了更清楚的說明本發(fā)明。以下紅花所選 用的原料均來自云南。
實(shí)施例1 ' 稱取干燥紅花20kg，以去離子水200L浸泡24小時(shí)后，轉(zhuǎn)入滲漉桶中，進(jìn)行 滲漉提取，流速為0.06BV/min，藥材上不斷補(bǔ)充新鮮的去離子水，至滲漉液中基 本無(wú)紅花紅色素B，共計(jì)用水量520L，合并滲漉液，6(TC減壓濃縮至相對(duì)密度約 為1.10，上已處理好的HP-20大孔吸附樹脂柱，樹脂用量為20L，先用10%的乙 醇洗脫5個(gè)柱體積，棄此部分洗脫液，改用50%的乙醇洗脫，至留出液基本無(wú)紅 花黃色素B，合并50%的乙醇洗脫液，60'C減壓濃縮至相對(duì)密度為1.20，攪拌下
加入95%的乙醇使含醇量為81%,冷處放置24小時(shí)，析出黃色沉淀，過濾，取黃 色沉淀，加入5倍沉淀量的去離子水，攪拌使溶解，過濾，取濾液，6(TC減壓濃. 縮至相對(duì)密度為1.10，上Sephadex-LH20葡聚糖凝膠柱，濃縮液體積比與填料體 積比為l: 10，以15%的乙醇洗脫，至流出液顏色變淡，改用55%的乙醇洗脫，收 集紅花黃色素B含量大于90W的流份，合并；紅花黃色素B含量小于90%的流份 合并濃縮后，按上述凝膠純化步驟操作，收集紅花黃色素B含量大于90o/。的流份， 將所收集到的紅花黃色素B含量大于90。/。的流份合并，6(TC減壓濃縮，冷凍干燥 得紅花黃色素B100g，含量為94.37%。 實(shí)施例2
稱取干燥紅花20kg，以60%的乙醇浸泡24小時(shí)后，轉(zhuǎn)入滲漉桶中，進(jìn)行滲漉 提取，流速為0.06BV/min，藥材上不斷補(bǔ)充新鮮的60%的乙醇，至滲漉液中基本 無(wú)紅花紅色素B，共計(jì)用60%的醇為520L，合并滲漉液，6(TC減壓濃縮至相對(duì)密 度約為1.10，上己處理好的AB-8型大孔吸附樹脂柱，樹脂用量為20L，先用5% 的乙醇洗脫5個(gè)柱體積，棄此部分洗脫液，改用30%的乙醇洗脫，至流出液基本 無(wú)紅花黃色素B，合并30%的乙醇洗脫液，60"C減壓濃縮至相對(duì)密度為1.20，攪 拌下加入95%的乙醇使含醇量為75%，冷處放置24小時(shí)，析出黃色沉淀，過濾， 取黃色沉淀，加入4倍沉淀量的去離子水，攪拌使溶解，過濾，取濾液，6(TC減 壓濃縮至相對(duì)密度為1.10，上GEL-MCI反相柱，濃縮液體積比與填料體積比為1: 8，以10%的乙醇洗脫，至流出液顏色變淡，改用45%的乙醇洗脫，收集紅花黃色 素B含量大于90。/。的流份，合并，濃縮，冷凍干燥，得含量為96.82%的紅花黃色 素B 110g。
實(shí)施例3
稱取干燥紅花20kg，以50。/。的乙醇200L浸泡24小時(shí)后，轉(zhuǎn)入滲漉桶中，進(jìn)
行滲漉提取，流速為0.06BV/min，藥材上不斷補(bǔ)充新鮮的50%的乙醇，至滲漉液 中基本無(wú)紅花紅色素B，共計(jì)用50°/。的乙醇量為520L，合并滲漉液，60'C減壓濃 縮至相對(duì)密度約為UO，上已處理好的D-lOl型大孔吸附樹脂柱，樹脂用量為20L， 先用15%的乙醇洗脫5個(gè)柱體積，棄此部分洗脫液，改用40%的乙醇洗脫，至留 出液基本無(wú)紅花黃色素B，合并40%的乙醇洗脫液，6(TC減壓濃縮至相對(duì)密度為 1.20，攪拌下加入95%的乙醇使含醇量為85%，冷處放置24小時(shí)，析出黃色沉淀， 過濾，取黃色沉淀，加入5倍沉淀量的去離子水，攪拌使溶解，過濾，取濾液， 60'C減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10，上反相ODS硅膠柱，濃縮液體積比與填料體積 比為l: 12,以10%的乙醇洗脫，至流出液顏色變淡，改用35°/。的乙醇洗脫，收集 紅花黃色素B含量大于90%的流份，合并；紅花黃色素B含量小于90。/。的流份合 并濃縮后，按上述凝膠純化步驟操作，收集紅花黃色素B含量大于90。/。的流份， 將所收集到的紅花黃色素B含量大于90。/。的流份合并，6(TC減壓濃縮，冷凍干燥， 得含量為92.79。/。的紅花黃色素B 115g。 實(shí)施例4
稱取干燥紅花20kg，以30Q/。的乙醇200L浸泡24小時(shí)后，轉(zhuǎn)入滲漉桶中，進(jìn) 行滲漉提取，流速為0.06BV/min，藥材上不斷補(bǔ)充新鮮的30°/。的乙醇，至滲漉液 中基本無(wú)紅花紅色素B，共計(jì)用30W的乙醇量為520L，合并滲漉液，6(TC減壓濃 縮至相對(duì)密度約為1.10，上已處理好的HP-20大孔吸附樹脂柱，樹脂用量為20L， 先用10%的乙醇洗脫5個(gè)柱體積，棄此部分洗脫液，改用50%的乙醇洗脫，至留 出液基本無(wú)紅花黃色素B，合并50%的乙醇洗脫液，6(TC減壓濃縮至相對(duì)密度為 1.20，攪拌下加入95%的乙醇使含醇量為80%，冷處放置24小時(shí)，析出黃色沉淀， 過濾，取黃色沉淀，加入5倍沉淀量的去離子水，攪拌使溶解，過濾，取濾液， 60。C減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10，上Sephadex-LH20葡聚糖凝膠柱，濃縮液體積
比與填料體積比為l: 10，以15%的乙醇洗脫，至流出液顏色變淡，改用55%的乙 醇洗脫，收集紅花黃色素B含量大于96。/。的流份，合并；紅花黃色素B含量小于 96%的流份合并濃縮后，反復(fù)上述凝膠精制操作，約3次，合并各次所得的紅花黃 色素B, 60'C減壓濃縮，冷凍干燥，得含量為98.97%的紅花黃色素B 95g。 實(shí)施例5
稱取干燥紅花20kg，以10。/。的乙醇200L浸泡24小時(shí)后，轉(zhuǎn)入滲漉桶中，進(jìn) 行滲漉提取，流速為0.06BV/min，藥材上不斷補(bǔ)充新鮮的10%的乙醇，至滲漉液 中基本無(wú)紅花紅色素B，共計(jì)用10%的乙醇量為520L，合并滲漉液，6(TC減壓濃 縮至相對(duì)密度約為1.10，上已處理好的HP-20大孔吸附樹脂柱，樹脂用量為20L， 先用10%的乙醇洗脫5個(gè)柱體積，棄此部分洗脫液，改用50%的乙醇洗脫，至留 出液基本無(wú)紅花黃色素B，合并50%的乙醇洗脫液，6(TC減壓濃縮至相對(duì)密度為 1.20，攪拌下加入95%的乙醇使含醇量為80%，冷處放置24小時(shí)，析出黃色沉淀， 過濾，取黃色沉淀，加入5倍沉淀量的去離子水，攪拌使溶解，過濾，取濾液， 60'C減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10，上Sephadex-LH20葡聚糖凝膠柱，濃縮液體積 比與填料體積比為l: 10，以15%的乙醇洗脫，至流出液顏色變淡，改用55%的乙 醇洗脫，收集紅花黃色素B含量大于96。/。的流份，合并；紅花黃色素B含量小于 96%的流份合并濃縮后，反復(fù)上述凝膠精制操作，約3次，合并各次所得的紅花黃 色素B， 60'C減壓濃縮，冷凍干燥，得含量為98.97W的紅花黃色素B90g。
實(shí)施例5
紅花黃色素B對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用實(shí)驗(yàn)。
動(dòng)物Wistar大鼠，雄性，體重25(K300g。
藥品紅花黃色素B (星昊醫(yī)藥股份有限公司制備)
超氧化物歧化酶(SOD)測(cè)定試劑盒、丙二醛(MDA)測(cè)定試劑盒、 乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒、紅四氮唑(TTC)
大鼠急性不完全性腦缺血再灌注模型取Wistar大鼠40只，隨機(jī)分成5組， 給藥組分別給予紅花黃色素B3、 6、 9mg/kg， iv， 1次/日，連續(xù)3天。對(duì)照組iv 等容量生理鹽水，假手術(shù)組除不結(jié)扎總動(dòng)脈，其余處理同對(duì)照組。末次給藥后 10min,大鼠以烏拉坦1.0g/kgip麻醉，參照文獻(xiàn)(潘鑫鑫，劉天培.人參總皂苷對(duì) 急性腦缺血的保護(hù)作用[J].南京醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1992，12(3):237 239.)方法結(jié)扎雙側(cè) 頸總動(dòng)脈，30min后再恢復(fù)腦供血，24h后取腦備用。
腦組織LDH、 SOD活性及MDA含量的測(cè)定大鼠斷頭取腦，去除小腦和腦 干，制成10%勻漿，經(jīng)分級(jí)離心后取上清液，按硫代巴比妥酸法測(cè)定MDA含量， 按試劑盒說明書方法測(cè)定LDH活性及SOD活力，蛋白質(zhì)定量用Folin酚法。結(jié)果 見表2
表2紅花黃色素B對(duì)大鼠急性不完全性缺血再灌注損傷的影響(^土s)
^力J mg/kg,d(U/mg蛋白)(nmol/mg蛋白)(U/mg蛋白) 假手術(shù)組 一 179±28 13.65±1,82 5.28±0.79 對(duì)照組一103±25#25.67±2.65# 1,79±0.47** 3.0 128±29 24.31±2.15 2.17±0.51 黃色素B組 6.0 141±30*21.98±2.46.* 2.86±0.67* __^__168±32**__16.46±2.37** 4.21±0.87**
與假手術(shù)組相比，"PO.01;與對(duì)照組相比，*P<0.05, *P<0.01
結(jié)果表明，大鼠全腦缺血30min再灌注24小時(shí)，腦組織LDH、 SOD活性明 顯降低，MDA含量明顯升高，而紅花黃色素6.0、 9.0mg/kg iv能顯著提高缺血腦 組織的LDH、 SOD活力，降低MDA含量，但不能達(dá)到假手術(shù)組水平。
實(shí)施例6
紅花黃色素B對(duì)大鼠心肌耗氧量的影響
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用戊巴比妥鈉(30mgAcg )靜脈麻醉，氣管插管，鏈接人工呼吸機(jī)，
開胸，分離頸總動(dòng)脈抽取動(dòng)脈血，經(jīng)頸外靜脈插管至冠狀靜脈竇取冠狀靜脈血， 以血計(jì)氧測(cè)血氧含量。
實(shí)驗(yàn)共分兩組，劑量分別為8、 4mg/kgiv,每組10只，給藥前測(cè)定各組血氧 含量。
結(jié)果表明，紅花黃色素B8mg/kg劑量能明顯降低心肌耗氧量及耗氧指數(shù)。給 藥后lmin，心肌耗氧量由給藥前53.2± 1.28降為34.3± 1.20，降低了 35.5± 1.3%; 耗氧指數(shù)由184.28±53.23降為116.36±75.50，下降了 36.85±22.27% (P<0.05， PO.Ol)。
權(quán)利要求
1、一種紅花黃色素B的制備方法，以紅花為原料，其特征是紅花以極性有機(jī)溶劑質(zhì)量分?jǐn)?shù)低于60％的含水極性溶劑浸泡后，滲漉提取，合并滲漉提取液，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.05～1.15，上大孔吸附樹脂柱，先以含醇量低于15％的乙醇洗脫至洗脫液顏色變淡，棄此部分洗脫液，再用含醇量為30％～50％的乙醇洗脫至無(wú)紅花黃色素B流下，合并此部分醇洗液，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.05～1.30，在不斷攪拌下加入乙醇使含醇量為75％～85％，冷處放置，析出黃色沉淀，過濾取黃色沉淀，用至少為沉淀量3倍的水溶解，靜置，過濾，取濾液，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.05～1.15，上反相填料柱，濃縮液與填料的比例為1∶8-12，先用低于15％的乙醇洗脫至流出液顏色變淡，再用35％～55％的乙醇洗脫，收集紅花黃色素B含量大于等于90％的流份，合并，減壓濃縮，干燥，得紅花黃色素B。
2、 如權(quán)利要求1所述的紅花黃色素B的制備方法，其特征是紅花以極性有機(jī) 溶劑質(zhì)量分?jǐn)?shù)低于60%的含水極性溶劑浸泡24小時(shí)后，滲漉提取，至滲 漉液中基本無(wú)紅花黃色素B，合并滲漉提取液，6(TC下減壓濃縮，至相對(duì) 密度為1.10，上HP20大孔吸附樹脂柱，藥材與大孔吸附樹脂用量的比例 為lg生藥材/0.8-1.2mL樹脂，先用10%的乙醇洗脫至洗脫液顏色變淡，再 用45。/。的乙醇洗脫至無(wú)紅花黃色素B流下，合并45%的乙醇洗脫液，60°C 減壓濃縮至相對(duì)密度約為1.20，在不斷攪拌下加入乙醇使含醇量為81%， 冷處放置24小時(shí)，析出黃色沉淀，過濾，取黃色沉淀，用5倍量沉淀的 去離子水溶解，靜置，過濾，取濾液，濾液6(TC減壓濃縮至無(wú)醇味，相對(duì) 密度為1.10，上葡聚糖凝膠柱，濃縮液與凝膠的比例為1: 8-12， 10%的 乙醇洗脫至洗脫液顏色變淡，改用50%的乙醇洗脫，收集紅花黃色素B含 量大于90%的流份，合并；紅花黃色素B含量小于90%的流份合并再上葡聚糖凝膠柱，15%的乙醇洗脫至洗脫液顏色變淡，45。/。的乙醇洗脫，收集 紅花黃色素B含量大于卯％的流份，并入到上述紅花黃色素B含量大于 90%的流份中，如此反復(fù)精制，至紅花黃色素B大部分被分離出，60C減 壓濃縮紅花黃色素B含量大于90%的合并液得濃縮液，濃縮液冷凍干燥， 得紅花黃色素B。
3、 如權(quán)利要求1所述的紅花黃色素B的制備方法，其中所述的反相填料還可 以是GEL-MCI、 ODS填料。
4、 .如權(quán)利要求1或二所述的紅花黃色素B的制備方法，其特征是所述的含水極性溶劑是指含水乙醇、含水甲醇或含水丙酮。
5、 如權(quán)利要求1或2所述的紅花黃色素B的制備方法，其特征是所述的紅花 黃色素B的含量大于90%而小于100%。
6、 一種含有如權(quán)利要求1或2所述的制備方法得到的紅花黃色素B的制劑。
7、 如權(quán)利要求5所述的制劑，其特征是主要為口服制劑。
8、 由權(quán)利要求1或2所述的制備方法得到的紅花黃色素B在制備具有預(yù)防和 治療心腦血管疾病藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種紅花黃色素B的制備方法及其應(yīng)用。紅花經(jīng)極性溶劑浸泡滲漉提取后，采用層析柱和醇沉結(jié)合的方式進(jìn)行精制分離，即可得本發(fā)明紅花黃色素B。本發(fā)明制備紅花黃色素B的方法能提高產(chǎn)物紅花黃色素B的得率，適合工業(yè)化生產(chǎn)。分離得到的紅花黃色素B可用于預(yù)防和治療心腦血管疾病。
文檔編號(hào)C07D309/00GK101190906SQ20071011774
公開日2008年6月4日 申請(qǐng)日期2007年6月22日 優(yōu)先權(quán)日2007年6月22日
發(fā)明者張樹祥, 熊國(guó)裕 申請(qǐng)人:北京星昊醫(yī)藥股份有限公司