專利名稱：：腦肽及其制備方法及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種肽提取物及其制備方法及其用途，尤其涉及一種從哺乳動物的腦組織中分離提取的腦肽及其制備方法及其用途。
背景技術(shù)：
：肽可以被腸道直接吸收，而且吸收速度快。蛋白質(zhì)經(jīng)消化道酶促反應(yīng)后，并不一定成為完全的游離氨基酸后才被吸收，而是主要以低肽(特別是二肽、三肽)的形式吸收。低肽的吸收率比氨基酸更高，比氨基酸更易、更快被機體利用。臟器療法在我國有著悠久的歷史，經(jīng)過歷代的補充與發(fā)展，至今仍然在臨床發(fā)揮著重要作用，并且成為養(yǎng)生保健的常用方法。臟器療法的治療原理，主要是基于"同氣相求"與"以臟補臟"的學說。中醫(yī)學認為動物臟器氣味醇厚，為血肉有情之品，較草本藥物更易被人體吸收，因而迅速起效，尤其在調(diào)養(yǎng)、補益方面效果更加明顯，此即"同氣相求"之理。現(xiàn)代研究證明，動物臟器在生化特性和成分構(gòu)成上也有許多與人相似之處。因此對人體相應(yīng)的器官組織有藥理作用，此即"以臟補臟"學說。以臟補臟的方法大都是食補，就是日常膳食。這種補益方法有很大弊端，食用量大，進入人體還得經(jīng)過胃、腸等消化才能吸收。利用率低，見效慢。有的臟器因有特殊味道，而被拒之門外，比如動物腦，不僅氣味難聞，而且因其含有大量的腦脂肪，也很少有人食用。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種服用方便、易于吸收的腦肽及其制備方法及其用途。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的本發(fā)明的腦肽，是從哺乳動物的腦組織中提取而成的，包括40%以上的活性小分子肽，所述活性小分子肽的分子量為600—2600道爾頓。本發(fā)明的腦肽的制備方法，所用的主原料為哺育動物腦臟，包括步驟A、將所述腦臟經(jīng)過磨碎處理，然后用乙醇將所述腦臟中的膽固醇分離出；B、向所述腦臟中加入清水攪拌成腦漿液，并升溫至85—95。C，保持15—25分鐘；C、將所述腦漿液進行酶解；D、調(diào)節(jié)所述腦漿液的PH值并使酶滅活，之后過濾得包含所述活性小分子肽的肽液。E、將所述肽液進行濃縮處理，得所述腦肽。本發(fā)明的腦肽在制備補腦、鍵腦及輔助治療腦疾病的藥物方面的用途。由上述本發(fā)明提供的技術(shù)方案可以看出，本發(fā)明所述的腦肽及其制備方法及其用途，由于將哺育動物的腦經(jīng)過生物工程提純并在體外進行酶解成易吸收的小分子肽，每日服用量將會大大減少(只需幾克)，適合各類人群，不存在口味的問題，更大的優(yōu)點就是進入人體不需再消化，可被小腸直接吸收，快捷參與各種生理活動。是制備補腦、健腦、輔助治療腦疾病的藥物的理想生物制劑。圖l為本發(fā)明腦肽的制備方法的具體體實施例的流程圖。具體實施例方式本發(fā)明的腦肽，其較佳的具體實施方式是，從哺乳動物的腦組織中提取而成的，包括40%以上的活性小分子肽，可以是40、45、50、55、60%等比例，這里的百分比為重量百分比。所述活性小分子肽的分子量為600—2600道爾頓，可以是600、1000、1500、2000、2400、2600道爾頓。所述的哺育動物可以為豬、狗、牛、羊、鹿、馬或兔中任意一種或多種，優(yōu)選為羊。本發(fā)明的腦肽的制備方法，所用的主原料為上述的哺育動物腦臟，具體制備方法包括步驟l、將所述腦臟經(jīng)過磨碎處理，然后用乙醇將所述腦臟中的膽固醇分離出，可以向磨碎后的腦臟中加入85_95%的乙醇，攪拌8—12小時后，將酒精倒出，這一步驟進行1一3次。步驟2、向所述腦臟中加入清水攪拌成腦漿液，并升溫至85—95'C，保持15—25分鐘；步驟3、將所述腦漿液進行酶解，這一步驟包括步驟3.1、將所述腦漿液保持溫度5355。C，并調(diào)節(jié)PH值為8.58.8，向所述腦漿液中加入堿性蛋白酶，攪拌均勻后恒溫靜置23小時。步驟3.2、將所述腦漿液保持溫度4648。C，并調(diào)節(jié)PH值為7.88.0，向所述腦漿液中加入激活好的哺育動物的胰臟，攪拌均勻后恒溫靜置45小時。步驟3.1和步驟3.2可以同時使用，也可以單獨使用，也可以分先后依次使用。步驟3.2中，所述胰臟的激活方法為取需要量的胰臟，磨碎后加入所述胰臟重量1.5倍的25%的乙醇溶液，41(TC下放置1214小時，然后再加入3倍蒸餾水，攪勻，再放置1214小時。步驟4、調(diào)節(jié)所述腦漿液的PH值并使酶滅活，之后過濾得包含所述活性小分子肽的肽液?？梢允紫扔蔑柡蜋幟仕嵴{(diào)ra值為6.56.0，再用鹽酸調(diào)節(jié)ra值至5.45.1，之后升溫煮沸1020分鐘，使酶滅活。步驟5、將所述肽液進行濃縮處理，得所述腦肽。可以在65—75'C條件下，對所述肽液進行真空濃縮，控制婆美度Be/30。C二2022。本發(fā)明的腦肽可用于制備補腦、鍵腦及輔助治療腦疾病等方面的藥物?？芍瞥伤巹W上可接受的不同劑型，比如口服液、小容量注射劑、大容量注射劑、片劑、膠囊劑或粉劑。一個具體實施例，以制備100克腦肽為例，選用的主原料和輔料及其用量如表l所示:表l:制備100克腦肽所需的主原料和輔料及其用量<table>complextableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>如圖1所示，詳細的制備工藝如下1、羊腦與顱腔的分離經(jīng)過檢疫的健康羊宰殺后，用真空泵將腦漿吸出，速凍后冷藏待用，也可以用牛、豬或其它的哺育動物。2、腦中膽固醇的分離腦組織中含有2%的膽固醇，是對人體有害的物質(zhì)，根據(jù)相似相溶原理，膽固醇極易溶解于醇類，而乙醇是符合食品級要求的最好溶劑。另外腦脂肪對水解液的過濾有很大影響，而卵磷脂也溶于乙醇，但卵磷脂是對人體有益的物質(zhì)，所以只要除去影響過濾的部分卵磷脂即可。提取方法腦漿經(jīng)過絞肉機粗碎兩遍，再過膠體磨精碎一遍，加入2倍重量95%的乙醇，在3(TC溫度下溫和攪拌812小時，停止攪拌，靜置使其自然分層，傾出上部提取液(一次浸提酒精)，然后加入85%的同樣重量的乙醇，用同樣的方法再浸提一次。兩次浸提的酒精合并后進行蒸餾回收，循環(huán)利用。3、腦蛋白的熱變性腦蛋白具有緊密的立體結(jié)構(gòu)，不利于酶的水解，當它受熱時，蛋白質(zhì)發(fā)生變性，使得保持蛋白質(zhì)構(gòu)象的那些弱鍵斷裂，破壞了肽鏈的特定的排列，原來在分子內(nèi)部的一些非極性基團暴露到分子的表面，這樣使水解部位增加，使水解速度加快，因此有利于酶解。所以在腦蛋白水解前，應(yīng)使蛋白變性。具體方法是向經(jīng)乙醇浸提后的腦糜(主要含有腦蛋白)，加入3倍清水，制成腦漿液，升溫至8595。C，保持1525分鐘。(溫度高時間短)4、酶解4.1、堿性蛋白酶的水解將變性的腦漿液，降溫至5355X:，用40X氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)至PH8.58.8，加入配制好的堿性蛋白酶溶液，溫和攪拌至均勻，停止攪拌，恒溫水解23小時。其中，堿性蛋白酶的配制方法是，提前30分鐘，將稱量準確的堿性蛋白酶粉，用10倍蒸餾水溶解，室溫下靜置使其自然分層，取其清液。4.2、胰臟的水解堿性蛋白酶水解完畢，測定其PH值，用氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH值至7.88.0，物料溫度降至4648°C，加入激活好的胰臟，溫和攪拌均勻，恒溫水解45小時。激活劑用量是胰臟用量的l.5%。其中，胰臟的激活方法是，準確計算所需的胰臟量，將新鮮或冷凍的胰臟粗碎兩遍，精碎一遍，加入1.5倍的25%的乙醇溶液，41(TC下放置1214小時，再加入3倍蒸餾水，攪勻，再放置1214小時，即可使用。5、調(diào)酸水解完畢，用飽和檸檬酸調(diào)PH值6.56.0，再用鹽酸調(diào)節(jié)PH值至5.45.1，升溫煮沸1020分鐘，使未分解的大分子蛋白質(zhì)和酶在酸性條件下變性、沉淀或凝聚上浮，同時使酶滅活，使水解液滅菌。而水解后所得的肽和部分游離的氨基酸呈清亮透明的液體。6、過濾通過固定濾紙式或鈦棒過濾器，將肽和游離的氨基酸清液與雜質(zhì)分離，濾液呈清亮透明的液體。7、濃縮在6575。C條件下，肽液經(jīng)過真空濃縮，控制婆美度Be/3(TC二2022。8、離心噴霧干燥物料經(jīng)高速離心器霧化，形成霧狀，然后在103105'C溫度下瞬間干燥成腦肽粉劑。具體實驗例取本發(fā)明的腦肽粉劑適量進行檢驗，得出如下指標1、產(chǎn)品特點①易溶于水，水溶液清亮透明，有微量白色顆粒狀沉淀。水解過濾液沒有沉淀，白色顆粒是在濃縮時濃度達到一定值出現(xiàn)的，經(jīng)檢測是含氮物質(zhì)，所以推斷該物質(zhì)為肽結(jié)晶物。②水溶液p朋.56.8;(D分子小，經(jīng)質(zhì)譜檢測，其分子量在6002600道爾頓；紫外光譜在195nm和266nm處有雙吸收峰。遇酸、堿、高溫穩(wěn)定，在pH310范圍內(nèi)能經(jīng)受100。C、30分鐘或121。C、20分鐘的耐熱試驗。⑤肽含量高，每100克本品中肽和游離氨基酸總量^60克，其中肽含量40%以上；必需氨基酸占整個氨基酸比例>40%，與世界衛(wèi)生組織冊O(shè)推介的理想模式十分接近。而且八種必需氨基酸的構(gòu)成比例平衡(檢驗報告附后)。2、感官要求感官指標符合表2的規(guī)定表2感官指標<table>complextableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>表2和表3中的各種指標是根據(jù)國家衛(wèi)生部批準的，從牛羊骨髓中提取的肽類保健食品"頤寧多肽沖劑'衛(wèi)食健字[1997]第682號，"企業(yè)標準Q/XMXS01-2003制定的。4、微生物限量微生物指標符合表4的規(guī)定表4微生物限量<table>complextableseeoriginaldocumentpageX</column></row><table>表4中的各項指標是依據(jù)GB16740-1997《保健(功能)食品通用標準》確定的。5、營養(yǎng)成分指標營養(yǎng)成分指標符合表5的規(guī)定表5營養(yǎng)成分指標<table>complextableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>具體應(yīng)用例如表6所示，選不同的人群試服，觀察服用效果。表6:腦肽膠囊試服效果統(tǒng)計<table>complextableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>以上所述，僅為本發(fā)明較佳的具體實施方式，但本發(fā)明的保護范圍并不局限于此，任何熟悉本
技術(shù)領(lǐng)域：
的技術(shù)人員在本發(fā)明揭露的技術(shù)范圍內(nèi)，可輕易想到的變化或替換，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。權(quán)利要求1、一種腦肽，其特征在于，它是從哺乳動物的腦組織中提取而成的，包括40％以上的活性小分子肽，所述活性小分子肽的分子量為600-2600道爾頓。2、根據(jù)權(quán)利要求l所述的腦肽，其特征在于，所述的哺育動物為豬、狗、牛、羊、鹿、馬或兔中任意一種或多種，優(yōu)選為羊。3、一種權(quán)利要求1或2所述的腦肽的制備方法，其特征在于，所用的主原料為哺育動物腦臟，包括步驟A、將所述腦臟經(jīng)過磨碎處理，然后用乙醇將所述腦臟中的膽固醇分離出；B、向所述腦臟中加入清水攪拌成腦漿液，并升溫至85—95。C，保持15—25分鐘；C、將所述腦漿液進行酶解；D、調(diào)節(jié)所述腦漿液的PH值并使酶滅活，之后過濾得包含所述活性小分子肽的肽液；E、將所述肽液進行濃縮處理，得所述腦肽。4、根據(jù)權(quán)利要求3所述的腦肽的制備方法，其特征在于，所述的步驟A包括向磨碎后的腦臟中加入85—95%的乙醇，攪拌8—12小時后，將酒精倒出，這一步驟進行1一3次。5、根據(jù)權(quán)利要求3所述的腦肽的提取方法，其特征在于，所述的步驟C包括步驟Cl、將所述腦漿液保持溫度5355'C，并調(diào)節(jié)ra值為8.58.8，向所述腦漿液中加入堿性蛋白酶，攪拌均勻后恒溫靜置23小時。6、根據(jù)權(quán)利要求5所述的腦肽的制備方法，其特征在于，所述的步驟C1之后還包括步驟C2、將所述腦槳液保持溫度4648。C，并調(diào)節(jié)PH值為7.88.0，向所述腦漿液中加入激活好的哺育動物的胰臟，攪拌均勻后恒溫靜置45小時。7、根據(jù)權(quán)利要求6所述的腦肽的制備方法，其特征在于，所述胰臟的激活方法為取需要量的胰臟，磨碎后加入所述胰臟重量1.5倍的25%的乙醇溶液，410。C下放置1214小時，然后再加入3倍蒸餾水，攪勻，再放置1214小時。8、根據(jù)權(quán)利要求3所述的腦肽的制備方法，其特征在于，所述的步驟D中，首先用飽和檸檬酸調(diào)ra值為6.56.0，再用鹽酸調(diào)節(jié)PH值至5.45.1，之后升溫煮沸1020分鐘，使酶滅活。9、根據(jù)權(quán)利要求3所述的腦肽的制備方法，其特征在于，所述的步驟E包括在65—75。C條件下，對所述肽液進行真空濃縮，控制婆美度Be/3(TC二2022，并制成藥劑學上可接受的不同劑型，包括口服液、小容量注射劑、大容量注射劑、片劑、膠囊劑或粉劑。10、一種權(quán)利要求1或2所述的腦肽在制備補腦、鍵腦及輔助治療腦疾病的藥物方面的用途。全文摘要本發(fā)明公開了一種腦肽及其制備方法及其用途，將哺育動物的腦經(jīng)過生物工程提純并在體外進行酶解成易吸收的小分子肽，每日服用量將會大大減少(只需幾克)，適合各類人群，不存在口味的問題，進入人體不需再消化，可被小腸直接吸收，快捷參與各種生理活動?？捎糜谥苽溲a腦、健腦、輔助治療腦疾病等方面的生物制劑。文檔編號C07K14/435GK101343317SQ200710118548公開日2009年1月14日申請日期2007年7月9日優(yōu)先權(quán)日2007年7月9日發(fā)明者張劍平,郝在林申請人:錫林郭勒盟鑫泰生物制品有限責任公司