專利名稱：木香烴內(nèi)酯的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物有效成分提取分離制備領(lǐng)域，具體涉及一種從廣玉蘭葉中提 提取分離木香烴內(nèi)酯的方法。
技術(shù)背景木香烴內(nèi)酯(costunolide)為一類倍半萜烯內(nèi)酯化合物，分子中含有一ct-亞甲 基卞內(nèi)酯基團(tuán)，具有抗菌抗病毒樣作用。文獻(xiàn)(Song XK, Tu PF， et al. A new sesquiterpene lactone from Tsoongiodendron odorum Chun. J" i'朋Ato Pracf 2001:3(4):285-291)報(bào)道，木香烴內(nèi)酯顯示對(duì)白血病癌細(xì)胞系(HL-60)具有細(xì)胞 毒性作用，能抑制白血病癌細(xì)胞的生長(zhǎng)。文獻(xiàn)(Koo TH， Lee JH， et al. A sesquiterpene lactone, costunolide, from Magnolia grandiflora inhibits NP-kappa B by targeting I kappa B phosphorylation. Met/, 2001 Mar,67(2):103-107)記載，木香烴內(nèi)酯具有抑制核轉(zhuǎn)錄因子NF-kB作用，實(shí)驗(yàn)證明，其能抑制NF-kB與DNA結(jié)合，并呈劑 量依賴關(guān)系，作用強(qiáng)于小白菊內(nèi)酯，還可抑制由脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的iN0S的mRNA 的表達(dá)，在濃度為lug/ml時(shí)3即可達(dá)到完全抑制作用。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種從廣玉蘭葉中提取分離木香烴內(nèi)酯的方法，本發(fā) 明方法適合工業(yè)化生產(chǎn)，得率高，產(chǎn)物純度可達(dá)90%以上。本發(fā)明以廣玉蘭葉為原料，以水浸泡提取除去其中的水溶性成分后，再用濃 度較高的能與水混溶的有機(jī)溶劑系統(tǒng)提取，經(jīng)柱層析分離精制后可得到木香烴內(nèi)酯。實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的具體工藝如下a) 水提取棄雜廣玉蘭葉粗粉，以去離子水浸泡提取兩次，每次12小時(shí)，過(guò)濾，棄水提取液，殘?jiān)鼈溆?；b) :木香烴內(nèi)酯粗提物的制備經(jīng)水提取后的廣玉蘭葉，用能與水混溶的有機(jī)溶劑提取，減壓濃縮提取液，濃縮液中再加入蒸餾水分散，用石油醚或己烷萃 取至萃取液顏色變淡，再改用氯仿或乙酸乙酯萃取，合并氯仿或乙酸乙酯萃 取液，減壓濃縮得木香烴內(nèi)酯粗提物； C)木香烴內(nèi)酯的精制將上述得到的木香烴內(nèi)酯粗提物，采用硅膠柱進(jìn)行進(jìn)一 步的分離，以石油醚-乙酸乙酯20:1-4:1或石油醚-丙酮20:1-4:1為流動(dòng)相梯度 洗脫，收集含木香烴內(nèi)酯的流份段，濃縮。d)將第一次收集得到的木香烴內(nèi)酯再次采用硅膠柱層析分離，以石油醚-乙酸乙 酯5:1等度洗脫，收集木香烴內(nèi)酯流份，濃縮、干燥即得。其中所用的能與水混溶的有機(jī)溶劑系統(tǒng)可以是甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、 丙酮以及這些溶劑的任意組舍，優(yōu)選乙醇，更優(yōu)選75%~95%的乙醇。本發(fā)明中的提取方法可以是浸泡提取、滲漉提取或回流提取，優(yōu)選回流提取。本發(fā)明在第一次收集木香烴內(nèi)酯時(shí)，當(dāng)所得木香烴內(nèi)酯大于或等于90%時(shí)， 可以不需第二步硅膠柱層析精制，對(duì)木香烴內(nèi)酯純度小于90%的流份，采用第二 步硅膠柱層析進(jìn)一步精制。本發(fā)明在采用硅膠柱層析分離時(shí)，所用的流動(dòng)相除為石油醚-乙酸乙酯或石油 醚-丙酮外，還可用己垸-丙酮、己烷-乙酸乙酯、氯仿-乙酸乙酯、氯仿-丙酮、氯仿 -甲醇系統(tǒng)，只要在分離過(guò)程中，能將木香烴內(nèi)酯與其它成分分開即可，可認(rèn)為與 本發(fā)明技術(shù)方案等同。本發(fā)明所得到的木香烴內(nèi)酯，加入藥學(xué)上可接受的輔料，可制成各種所需的 劑型，優(yōu)選為口服劑型，如片劑、膠囊劑、滴丸等。具體實(shí)施例木香烴粗內(nèi)酯的制備實(shí)施例1廣玉蘭葉500g，粉碎成粗粉，8倍量水浸泡提取兩次，每次12小時(shí)，過(guò)濾， 棄水提液，殘?jiān)?倍量75%的乙醇回流提取兩次，每次1.5小時(shí)，過(guò)濾，合并濾 液，減壓濃縮至浸膏狀，再加入小于20%的乙醇分散浸膏，石油醚萃取分散液， 至萃取液顏色變淡，減壓除去殘留石油醚，改用乙酸乙酯萃取至乙酸乙酯萃取液 顏色變淡，合并乙酸乙酯萃取液，減壓濃縮、干燥即得。實(shí)施例2廣玉蘭葉500g，粉碎成粗粉，8倍量水浸泡提取兩次，每次12小時(shí)，過(guò)濾， 棄水提液，殘?jiān)?倍量95%的乙醇回流提取兩次，每次1.5小時(shí)，過(guò)濾，合并濾 液，減壓濃縮至浸膏狀，再加入小于20%的乙醇分散浸膏，己烷萃取分散液，至 萃取液顏色變淡，減壓除去殘留己垸，改用氯仿萃取至氯仿萃取液顏色變淡，合 并氯仿萃取液，減壓濃縮、干燥即得。將提取溶劑乙醇改成甲醇、丙醇、異丙醇、丙酮或這些溶劑的任意組合，即 為其它溶劑提取的實(shí)施例。 廣木香內(nèi)酯的分離實(shí)施例3將上述所得到的廣木香內(nèi)酯粗提物拌入60-90目的硅膠中，采用硅膠柱層析分 離精制，層析用硅膠粒度200-300目，浸膏用量與硅膠用量的重量比為1: 50，以 石油醚-乙酸乙酯20:1-4:1梯度洗脫，分段收集廣木香內(nèi)酯流份，將廣木香內(nèi)酯純 度大于90%的流份合并；廣木香內(nèi)酯含量小于90%的流份另外合并，濃縮，繼續(xù) 采用硅膠層析柱分離，以石油醚-乙酸乙酯4:1的等度洗脫，分段收集廣木香內(nèi)酯 流份，將廣木香內(nèi)酯大于90%的流份并入到第一次收集到的大于90%的流份中， 濃縮，真空干燥，即得廣木香內(nèi)酯L2g，純度為95.27%。實(shí)施例4將實(shí)施例1或2中所得到的廣木香內(nèi)酯粗提物拌入60-90目的硅膠中，采用硅 膠柱層析分離精制，層析用硅膠粒度200-300目，浸膏用量與硅膠用量的重量比為 1: 50，以石油醚-丙酮20:1-4:1梯度洗脫，分段收集廣木香內(nèi)酯流份，將廣木香內(nèi) 酯純度大于90%的流份合并；廣木香內(nèi)酯含量小于90%的流份另外合并，濃縮， 繼續(xù)采用硅膠層析柱分離，以石油醚-丙酮5:1的等度洗脫，分段收集廣木香內(nèi)酯 流份，將廣木香內(nèi)酯大于90%的流份并入到第一次收集到的大于90%的流份中， 濃縮，真空干燥，即得廣木香內(nèi)酯1.0g，純度為97.27%。實(shí)施例5工藝中試穩(wěn)定性考察依據(jù)實(shí)施例1和實(shí)施例3的提取分離程序，做三批產(chǎn)品，每批藥材用量為10kg， 其結(jié)果見表1表l木香烴內(nèi)酯提取工藝三批藥材中試穩(wěn)定性考察第一批 第二批 第三批得率(g) 25.724.2 26.1 純度(％)_96.35_98.27_94.36從上表結(jié)果可知，此工藝穩(wěn)定，重現(xiàn)性好，適合工業(yè)化生產(chǎn)。 實(shí)施例6廣木香內(nèi)酯10g，淀粉20g，混勻，裝入硬膠囊中，共狀100粒，沒單位膠囊 中含廣木香內(nèi)酯100mg。實(shí)施例7廣木香內(nèi)酯10g，微晶纖維素42g，羧甲基淀粉鈉3.2g，交聯(lián)羧甲基纖維素鈉
權(quán)利要求
1、從廣玉蘭葉中提取分離木香烴內(nèi)酯的方法，其特征在于包括如下步驟a)水提取棄雜廣玉蘭葉粗粉，以去離子水浸泡提取兩次，每次12小時(shí)，過(guò)濾，棄水提取液，殘?jiān)鼈溆?；b)木香烴內(nèi)酯粗提物的制備經(jīng)水提取后的廣玉蘭葉，用能與水混溶的有機(jī)溶劑提取，減壓濃縮提取液，濃縮液中再加入蒸餾水分散，用石油醚或己烷萃取至萃取液顏色變淡，再改用氯仿或乙酸乙酯萃取，合并氯仿或乙酸乙酯萃取液，減壓濃縮得木香烴內(nèi)酯粗提物；c)木香烴內(nèi)酯的精制將上述得到的木香烴內(nèi)酯粗提物，采用硅膠柱進(jìn)行進(jìn)一步的分離，以石油醚-乙酸乙酯20∶1-4∶1或石油醚-丙酮20∶1-4∶1為流動(dòng)相梯度洗脫，收集含木香烴內(nèi)酯的流份段，濃縮。d)將第一次收集得到的木香烴內(nèi)酯再次采用硅膠柱層析分離，以石油醚-乙酸乙酯4∶1等度洗脫，收集木香烴內(nèi)酯流份，濃縮、干燥即得。
2、 如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于所述的能與水混溶的有機(jī)溶劑系指 甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丙酮以及這些溶劑的任意混合。
3、 如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述的能與水混溶的有機(jī)溶劑優(yōu)選 乙醇。
4、 如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于所述的乙醇優(yōu)選為75%-95%的乙 醇。
5、 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所得到的木香烴內(nèi)酯的純度為大于 等于90%而小于100%。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種木香烴烴內(nèi)酯的提取分離方法，以廣玉蘭葉為原料，粉碎成粗粉，經(jīng)水提除去水溶性雜質(zhì)，殘留物用85％的乙醇回流提取，石油醚萃取除去一些色素雜質(zhì)后，以氯仿或乙酸乙酯富集廣木香內(nèi)酯粗提物，經(jīng)硅膠柱層析分離后可得廣木香內(nèi)酯。本發(fā)明提取工藝簡(jiǎn)便易操作，得率高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07D307/93GK101157676SQ200710119450
公開日2008年4月9日 申請(qǐng)日期2007年7月25日 優(yōu)先權(quán)日2007年7月25日
發(fā)明者熊國(guó)裕 申請(qǐng)人:北京星昊醫(yī)藥股份有限公司