專利名稱：：取代桂皮酰哌嗪衍生物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及有機化學(xué)、藥物化學(xué)和藥理學(xué)領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及取代桂皮酰哌嗪衍生物及其制備方法和在制備抗腫瘤藥物中的用途。目前，由于工業(yè)發(fā)展中帶來的環(huán)境污染等問題，人類的生存環(huán)境質(zhì)量不斷下降，腫瘤疾病的發(fā)病率和致死率也不斷上升。然而治療腫瘤疾病的特效藥并不能令人滿意，并且目前抗腫瘤臨床所用細(xì)胞毒性藥物的選擇性不高所導(dǎo)致的對正常細(xì)胞的惡性殺傷，限制了該類藥物的普遍適用性。因此，尋找和發(fā)現(xiàn)新的選擇性高的細(xì)胞毒性抗腫瘤藥物是世界范圍內(nèi)的研究熱點。我們也致力于抗腫瘤藥物的研究。本發(fā)明的目的是提供一種取代桂皮酰哌嗪衍生物，以及它們的可藥用鹽或溶劑化物，具有以下結(jié)構(gòu)通式其中RpR2，R3可以相同或不同，可以為氫，硝基，羥基，鹵素，含18個碳的飽和或不飽和烴基或烷氧基，含18個碳的垸胺基。優(yōu)選的化合物是l-a.(E)-1-[4'-(4〃，5〃-二氯芐基)哌嗪-1'-基]-苯丙-2-烯-1-酮；l-b.(E)-1-[4'-(4"，5"-二氯芐基)哌嗪-l'-基]-6，7-二甲氧基-苯丙-2-烯-l-酮；l畫c.(E)-1-[4'-(4〃，5"-二氯芐基)哌嗪-l'-基]-6，7-甲氧甲氧基-苯丙-2-烯畫l畫酮；l-d.(E)-1-[4'-(4〃，5"-二氯芐基)哌嗪-l'-基]-6，7-二羥基-苯丙-2-烯-l-酮；l隱e.(E)-1-[4'-(4〃，5"-二氯芐基)哌嗪-l'-基]-6，8-二甲氧基-7-對乙氧基芐基-苯丙-2-烯-l-酮；
背景技術(shù)：
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發(fā)明內(nèi)容式(1)結(jié)構(gòu)式分別是:本發(fā)明的另一目的是提供制備該取代桂皮酰哌嗪衍生物即化合物(1)的方法將取代桂皮酸與3，4-二氯芐基哌嗪通過二環(huán)己基羰二亞胺(DCC)偶合的方式制備化合物(1)，反應(yīng)式為(1)其中基團A，R2和R3定義與目的一中相同。本發(fā)明的又一目的是提供取代桂皮酰哌嗪衍生物在制備防治腫瘤疾病藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的再一個目的是提供取代桂皮酰哌嗪衍生物的藥物組合物在制備抗腫瘤疾病藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明提供的取代桂皮酰哌嗪化合物或其可藥用鹽及其溶劑化物可以與藥學(xué)上常用的輔料或載體結(jié)合，制備得到具有腫瘤細(xì)胞生長抑制活性從而可以用于防治腫瘤的藥物組合物。上述各類藥物組合物可以采用注射劑、片劑、膠囊劑、氣霧劑、栓劑、膜劑、滴丸劑、外用搽劑、軟膏劑等劑型藥物。本發(fā)明提供的取代桂皮酰哌嗪化合物或其可藥用鹽及其溶劑化物可以與現(xiàn)已上市的抗腫瘤藥物如鉑類藥物順鉑(DDP)、喜樹堿類藥物伊立替康(Irinatecan，CPT-ll)、長春花堿類藥物失碳長春花堿(Vinorebine，NVB諾維本)、脫氧胞昔類藥物吉西他濱(Gemcitabine，Gemzar，健擇)、足葉乙甙(Etoposide)、紫杉醇(Paclitaxd)等聯(lián)合使用，制備得到具有腫瘤生長抑制活性的細(xì)胞毒性組合物，可用于治療腫瘤疾病。該類藥物組合物可以采用注射劑、片劑、膠囊劑、氣霧劑、栓劑、膜劑、滴丸劑、外用搽劑、軟膏劑等劑型藥物。具有研究抗腫瘤活性的咖啡酸苯乙酯類化合物，目前被認(rèn)為是具有重大開發(fā)價值的一類天然產(chǎn)物(Xuan,HZ,Hu,FL,Gu,ME，AdvancesintheResearchofCaffeicAcidPhenylEsterinPropolis,FoodDeve/o_pwe"/，2006:27,14-15)，因此本發(fā)明中我們著重對開發(fā)新型該類衍生物進行探索，設(shè)計與合成中基本保持了咖啡酸苯乙酯化合物的母環(huán)結(jié)構(gòu)。此外，因為含氮原子之有機胺或堿性雜環(huán)化合物的生理活性物質(zhì)大量存在，因而我們遵照"沒有氮就沒有生物活性"的思路(Ralph,H.ThePracticeofMedicinalChemistry(2ndedition),2003,399-430)，合成了桂皮酰哌嗪類衍生物。本發(fā)明的有益之處是提供的取代桂皮酰哌嗪化合物具有重要的生物活性，體外對人前列腺癌細(xì)胞(PC-3)，人食管癌(Eca-109)和低分化胃腺癌(BGC-823)腫瘤細(xì)胞具有強效的細(xì)胞毒活性，有可能發(fā)展成為新的防治腫瘤藥物。具體實施例方式本發(fā)明通過具體的實施例作進一步說明，其中OMe代表甲氧基(OCH3)，OMOM代表甲氧甲氧基(OCH2OCH3)，OEt代表乙氧基(OCH2CH3)。下述實施例給出了代表性化合物的合成及相關(guān)結(jié)構(gòu)鑒定數(shù)據(jù)。必須說明，下述實施例是用于說明本發(fā)明而不是對本發(fā)明的限制。根據(jù)本發(fā)明的實質(zhì)對本發(fā)明進行的簡單改進都屬于本發(fā)明要求保護的范圍。實施例1:化合物1-a即(E)-l-[4'-(4〃，5〃-二氯芐基)哌嗪-1'-基]-苯丙畫2畫烯-l-酮的制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>本例涉及到一類如式(1)所示的具有細(xì)胞毒活性的取代桂皮酰哌嗪衍生物的一般合成方法。具體涉及化合物(E)-l-[4'-(4〃，5〃-二氯芐基)哌嗪-1'-基]-苯丙-2-烯-l-酮的合成。將化合物桂皮酸(296毫克，2.0毫摩爾)溶于氯仿中，再加入二環(huán)己基羰二亞胺(DCC，448毫克，2.0毫摩爾)，保持45。C攪拌1小時后，再加入3，4-二氯芐基哌嗪(537毫克，2.2毫摩爾)，回流8小時后降至室溫，過濾，濾液濃縮所得粗品，以二氯甲烷/甲醇100:1-50:1為洗脫劑，柱層析純化分離得到500毫克的化合物l-a，收率為66.8%。下面用統(tǒng)一方式表述合成得到的化合物的物理及化學(xué)數(shù)據(jù)。包括熔點(mp)、比移值(及/)及其展開溶劑、核磁共振氫譜。HNMR，數(shù)據(jù)于400MHz核磁共振儀得到)、核磁共振碳譜(13CNMR，數(shù)據(jù)于lOOMHz核磁共振儀得到)、電噴霧質(zhì)譜(ESI-MS);^NMR和"CNMR所使用的試劑一般為氘代氯仿(CDC13)或気代丙酮(CD3)2CO;NMR譜圖峰形表示為單峰(s)、雙峰(d)、寬單峰(brs)、雙雙峰(dd)、三重峰(t)、四重峰(q);耦合常數(shù)C7)的單位用赫茲(Hz)表示；化學(xué)位移值(S)單位用ppm表示。化合物l-a:淡黃色固體；熔點114-116°C;比移值A(chǔ)/(二氯甲烷/甲醇12:1)0.58;核磁共振氫譜iHNMR(400MHz，氖代氯仿CDC13):37.68(1H,d,15.6Hz，H-3),7.53(2H,dd,/=8.0，2.0Hz,H-5,9),7.46(1H，s,H-3〃)，7.40(1H,d:/=8.0Hz,H-6〃)，7.38—7.36(3H,m,H國6，7,8),7.18(1H,d,/=8.4Hz,H-7〃)，6.87(1H,d，/=15.6Hz，H誦2),3.76—3.66(4H,m，H國2'，6'),3.48(2H,s,H畫l〃)，2.47(4H，t，《/=4.4Hz,H-3',5');ESI-MSw/z[M+H]+375。實施例2根據(jù)實施例1的方法制備表一所示化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>表一<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table><table>complextableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>下面列出表一中各化合物的理化數(shù)據(jù)化合物l-b:收率56.4%;A/(二氯甲垸/甲醇12:1)0.58;&NMR(400MHz,CDC13):37.63(1H，d,J=15.2Hz,H-3)，7.46(1H，s,H-3〃)，7.40(IH,d,/=8.0Hz，H-6〃)，7.18(1H，d，8.0Hz,H畫7")，7.11(1H,dd，《/=8.4,1.6Hz，H隱9),7.03(1H,s，H國5),6.86(1H,d，《/=8.4Hz，H-8),6.73(1H，d,/=15.2Hz,H-2),3.92-3.91(6H，s，C//3O-6,7),3.76—3.67(4H，m，H-2',6'),3.48(2H,s，H-l")，2.47(4H,m，H-3',5')。化合物l-c:收率51.1%;A/(二氯甲烷/甲醇12:1)0.57;&NMR(400MHz,CDC13):37.60(IH,d，J=15.6Hz,H-3)，7.46(1H，d,J=1.2Hz，H-3〃)，7.40(IH,d，《/=8.4Hz,H-6〃)，7.34(1H，d,/=1.2Hz,H-5),7.18(IH,dd,/=8.0,2.0Hz,H-7〃)，7.15(IH,dd,/=8.0，2.4Hz,H-9),7.12(IH,d，J=8.4Hz，H-8),6.73(IH，d,/=15.2Hz,H-2),5.27(4H,s，CH3OC//20-6，7),3.75—3.66(4H,m,H國2',6'),3.52(6H,s,C//3OCH20-6,7)，3.49(2H，s,H-l〃)，2.46(4H，m,H-3',5')?；衔?-d:收率53.6%;白色固體；i/(二氯甲烷/甲醇12:1)0.39;&NMR(400MHz,CD3OD):<J7.81(IH,brs,H-3〃)，7.73(IH,d，/=8.4Hz,H-6〃)，7.56(IH,d，《/=15.2Hz,H-3),7.52(IH,d,/=8.4Hz,H-7〃)，7.11(IH,s,H-5),7.04(IH,(!，/=8.0Hz,H陽9),6.94(IH，(!，/=15.2Hz,H-2),6.82(1H，d，《/=8.0Hz,H-8),4.38(4H，m,H-2'，6')，3.48(2H，s,H-l〃)，3.47(4H，m，H-3'，5')?；衔飈-e:收率56.8%;及/(二氯甲烷/甲醇12:1)0.57;'HNMR(400MHz，CDC13):57.58(1H，d，/=15.2Hz，H-3),7.46(1H，s，H國3〃')，7.40(1H,d，/=8.0Hz，H-6〃')，7.37(2H，d，《/=8.4Hz,H-3〃，7〃)，7.18(1H，d,/=8.4Hz，H-7〃'),6.85(2H,d,J=8.4Hz，H-4〃，6〃)，6.74(1H,d，/=15.2Hz,H-2),6.71(2H，s，H-5,9),4.97(2H，s，H-r')，4.03(2H,q,J=7.2Hz,CH3C//20-5〃),3.85(6H，s,C//3O-6，8),3.76—3.67(4H,m，H國2',6'),3.49(2H，s,H-l〃')，2.48(4H,t,/=4.4Hz,H畫3'，5'),1.41(3H,t，《/=7.2Hz,C//3CH20-5〃)。為了更好地理解本發(fā)明的實質(zhì)，下面分別用本發(fā)明提供的化合物對幾種重要的腫瘤細(xì)胞株生長的抑制作用的藥理實驗，實施例給出了代表性化合物的部分藥效學(xué)活性數(shù)據(jù)。必須說明，下述實施例是用于說明本發(fā)明而不是對本發(fā)明的限制。根據(jù)本發(fā)明的實質(zhì)對本發(fā)明進行的簡單改進都屬于本發(fā)明要求保護的范圍。實施例3:化合物l-e對人食管癌(Eca-109)細(xì)胞的細(xì)胞毒活性人食管癌細(xì)胞(Eca-109)細(xì)胞用RPMI1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含10%的胎牛血清，100U/毫升青霉素和100U/毫升的鏈霉素。細(xì)胞以每孔4><103的濃度加入到96孔板中，在37'C含5%(302潮濕空氣的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時。細(xì)胞存活率的測定用改良MTT法。細(xì)胞經(jīng)過24小時的孵育后，分別將新配的化合物I-e的二甲亞砜溶液以濃度梯度加入到各孔中，使孔中化合物最終濃度分別為100微克/毫升，33.3微克/毫升，ll.l微克/毫升和3.7微克/毫升。72小時后，加入10微升MTT(5毫克/毫升)的生理鹽水緩沖液，再繼續(xù)在37"C培養(yǎng)4小時后，離心5分鐘除去未轉(zhuǎn)化的MTT，每孔中加入200微升二甲亞砜，以溶解還原的MTT晶體甲臜(formazan)，所形成的formazan用酶標(biāo)儀在570nm波長下比色，細(xì)胞存活率由樣品相對于對照品的比值計算。其中化合物l-e對Eca-109細(xì)胞半抑制濃度IC50由劑量效應(yīng)曲線得到?；衔飈-e的ICso為6.3^iM，本試驗以抗腫瘤一線用藥順鉑(DDP)作為陽性對照，DDP對Eca-109細(xì)胞的半抑制濃度IC5o為7.7^iM。本實驗表明此類取代桂皮酰哌嗪化合物，對Eca-109細(xì)胞具有較強的細(xì)胞毒性，有可能發(fā)展成為新的具有抗食管癌作用的藥物。實施例4:化合物l-a對低分化胃腺癌腫瘤細(xì)胞(BGC-823)細(xì)胞的細(xì)胞毒活性胃腺癌腫瘤細(xì)胞(BGC-823)細(xì)胞用RPMI1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含10%的胎牛血清，100U/毫升青霉素和100U/毫升的鏈霉素。細(xì)胞以每孔4x103的濃度加入到96孔板中，在37"C含5%(302潮濕空氣的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時。細(xì)胞存活率的測定用改良MTT法。細(xì)胞經(jīng)過24小時的孵育后，分別將新配的化合物I-a的二甲亞砜溶液以濃度梯度加入到各孔中，使孔中化合物最終濃度分別為100微克/毫升，33.3微克/毫升，11.1微克/毫升和3.7微克/毫升。72小時后，加入10微升MTT(5毫克/毫升)的生理鹽水緩沖液，再繼續(xù)在37'C培養(yǎng)4小時后，離心5分鐘除去未轉(zhuǎn)化的MTT，每孔中加入200微升二甲亞砜，以溶解還原的MTT晶體甲臜(formazan)，所形成的formazan用酶標(biāo)儀在570nm波長下比色，細(xì)胞存活率由樣品相對于對照品的比值計算。其中化合物l-a對BGC-823細(xì)胞半抑制濃度ICso由劑量效應(yīng)曲線得到?；衔飈-a的IC5o為31.2pM，本試驗以抗腫瘤一線用藥順鉑(DDP)作為陽性對照，DDP對BGC-823細(xì)胞的半抑制濃度1(35()為5.OpM。本實驗表明此類取代桂皮酰哌嗪化合物對BGC-823細(xì)胞具有較強的細(xì)胞毒性，有可能發(fā)展成為新的具有抗低分化胃腺癌作用的藥物。實施例5:化合物l-c對PC-3細(xì)胞的細(xì)胞毒活性PC-3(前列腺癌)細(xì)胞用F-12培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含10%的胎牛血清，100U/毫升青霉素和100U/毫升的鏈霉素。細(xì)胞以每孔5xl(^的濃度加入到96孔板中，在37。C含5XC02潮濕空氣的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時。細(xì)胞存活率的測定用改良MTT法，具體方法同實施例3。化合物l-c的對PC-3細(xì)胞半抑制濃度IC5o為7.47iiM。本試驗以抗腫瘤一線用藥順鉑(DDP)作為陽性對照，DDP對PC-3細(xì)胞的半抑制濃度IC5o為4.0^iM。實驗結(jié)論本實驗表明此類取代桂皮酰哌嗪化合物對PC-3細(xì)胞具有較強的細(xì)胞毒性，有可能發(fā)展成為新的具有抗前列腺腫瘤作用的藥物。權(quán)利要求1.一種取代桂皮酰哌嗪衍生物及其可藥用鹽或溶劑化物，具有以下結(jié)構(gòu)通式其中R1，R2，R3相同或不同，選用氫、硝基、羥基、鹵素、含1～8個碳的飽和或不飽和烴基或烷氧基或含1～8個碳的烷胺基。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種取代桂皮酰哌嗪衍生物及其可藥用鹽或溶劑化物，其特征是化合物I-a為(E)-1-[4'-(4〃，5〃-二氯芐基)哌嗪-1'-基]-苯丙-2-烯-1-酮；化合物I-b為(E)-1-[4'-(4〃，5〃-二氯芐基)哌嗪-1'-基]-6，7-二甲氧基-苯丙-2-烯-l-酮；化合物I-c為(E)-1-[4'-(4"，5〃-二氯芐基)哌嗪-1'-基]-6，7-甲氧甲氧基-苯丙-2-烯-l-酮；化合物I-d為(E)-1-[4'-(4〃，5〃-二氯芐基)哌嗪-1'-基]-6，7-二羥基-苯丙-2-烯-l-酮；化合物I-e為(E)-1-[4'-(4〃，5〃-二氯芐基)哌嗪-1'-基]-6，8-二甲氧基-7-對乙氧基芐基-苯丙-2-烯-1-酮。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種取代桂皮酰哌嗪衍生物的制備方法，其特征是通過以下步驟實現(xiàn)將取代桂皮酸與3，4-二氯芐基哌嗪通過二環(huán)己基羰二亞胺偶合的方式制備，反應(yīng)式為<formula>seeoriginaldocumentpage2</formula>其中基團RpR2和R3定義與權(quán)利要求1相同。4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種取代桂皮酰哌嗪衍生物及其可藥用鹽或溶劑化物在制備防治腫瘤疾病藥物中的應(yīng)用。5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種取代桂皮酰哌嗪衍生物及其可藥用鹽通式或溶劑化物的藥物組合物在制備抗腫瘤疾病藥物中的應(yīng)用。6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的應(yīng)用，其特征是所述藥物含有可藥用的輔料。7.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的應(yīng)用，其特征是所述藥物含有其它抗腫瘤藥物。8.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的應(yīng)用，其特征是所述藥物的制劑形式為固體制劑或液體制劑。全文摘要本發(fā)明提供一種取代桂皮酰哌嗪衍生物及其可藥用鹽或溶劑化物，具有以下結(jié)構(gòu)通式其中R₁，R₂，R₃相同或不同，選用氫，硝基，羥基，鹵素，含1～8個碳的飽和或不飽和烴基或烷氧基，含1～8個碳的烷胺基。將取代桂皮酸與3，4-二氯芐基哌嗪通過二環(huán)己基羰二亞胺偶合的方式制備獲得本發(fā)明化合物。本發(fā)明對多種腫瘤細(xì)胞具有強效的細(xì)胞毒活性，可在制備防治腫瘤疾病藥物中的應(yīng)用。文檔編號C07D295/185GK101205218SQ200710156909公開日2008年6月25日申請日期2007年11月20日優(yōu)先權(quán)日2007年11月20日發(fā)明者俞永平,張麗娟,張勇民,蘇曾,約阿施·史托克希特,昱趙,鄒宏斌申請人:浙江大學(xué)