專(zhuān)利名稱(chēng)：：新的抗病毒化合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，涉及新的抗病毒化合物、其異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受的鹽，以及含有該化合物的藥物組合物和制備方法。2
背景技術(shù)：
：病毒感染可引起多種疾病，嚴(yán)重危害人類(lèi)的健康和生命。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，約60%的流行性傳染病由病毒引起。隨著醫(yī)藥及相關(guān)科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，曾在20世紀(jì)肆虐全球的病毒性傳染病如天花、麻疹、風(fēng)疹等疾病的發(fā)病率已日趨減少，但是新的病毒特別是致病性強(qiáng)的病毒不斷被發(fā)現(xiàn)，有的甚至爆發(fā)流行，而老的病毒又時(shí)有起伏，潛在威脅嚴(yán)重。2002年11月在我國(guó)廣東省發(fā)現(xiàn)首例嚴(yán)重急性呼吸道綜合征(SARS)，波及全球32個(gè)國(guó)家和地區(qū)，2004年初發(fā)生的禽流感也給人們帶來(lái)了威脅，干擾了人們正常的生活。目前對(duì)種類(lèi)繁多的病毒性傳染病尚缺乏有效的治療藥物，現(xiàn)有的抗病毒藥物只是病毒抑制劑，不能直接殺滅病毒，因此對(duì)此類(lèi)治療藥物的需求急劇增加。3
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種新的具有良好抗流感病毒活性的化合物，可用于制備治療和/或預(yù)防感染性疾病的藥物，包括流感病毒、皰疹病毒、呼吸道病毒、HIV病毒等引起的感染等。本發(fā)明的具體技術(shù)方案如下本發(fā)明提供了一種新的化合物、其異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受的鹽，如式(I)所示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中-R1、W可以相同或不同，分別獨(dú)立的表示為氫原子，Cl6焼基，芳基，C"垸基?；蛘?lt;:2.6烯基?；?；W表示氨基，芳基，cl6垸基酰胺基，cl6烷氧基羰基，取代或未被取代的3-8員環(huán)烷基、3-8員環(huán)烯基、3-8員環(huán)烯基氨基、雜環(huán)基、雜環(huán)硫基；所述的取代基選自羥基，氨基，羧基，鹵素，巰基，脒基，硝基，被羧基取代或者未被取代的Cl6焼基，CL6垸基酰胺基，d.6烷氧基羰基或者d.6烷基硫基。優(yōu)選的化合物為-R1、W可以相同或不同，分別獨(dú)立的表示為氫原子，Cl6院基，芳基，Cw垸基酰基或者C2-6烯基?；籖S表示氨基，芳基，CM烷基酰胺基，Cw垸氧基羰基，取代或未被取代的3-7員環(huán)烯基、3-7員環(huán)烯基氨基、雜環(huán)基、雜環(huán)硫基；所述的取代基選自羥基，氨基，羧基，鹵素，巰基，脒基，硝基，被羧基取代或者未被取代的CL4烷基，Cu4垸基酰胺基，Cw垸氧基羰基或者Cw烷基硫基。進(jìn)一步優(yōu)選的化合物為-R1、W可以相同或不同，分別獨(dú)立的表示為氫原子，d.6烷基?；蛘逤2.6烯基酰基；113表示氨基，芳基，CM烷基酰胺基，取代或未被取代的3-6員環(huán)烯基、3-6員環(huán)烯基氨基、雜環(huán)基、雜環(huán)硫基；所述的取代基選自羥基，氨基，羧基，鹵素，巰基，脒基，羧基甲基，硝基，Cw烷基，Cw垸基酰胺基或者CM垸氧基羰基。更進(jìn)一步優(yōu)選的化合物化學(xué)名稱(chēng)如下3，19-二乙?；?12-(N-3-甲酰氨基-lH-l,2，4-三氮唑)-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯；3，19-二丙?；?12-(N-3-甲脒基-lH-l,2，4-三氮唑)-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯；3，19-二乙?；?12-氨基-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯；3,19-二乙?；?12-乙酰氨基-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯；3，19-二丙?；?12-[(3R，4R，5S)-4-乙酰氨基-5-氨基-3_羥基-1-環(huán)己烯-1-羧酸]-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯；3,19-二乙?；?12-[4-氨基-2(lH)-嘧啶酮-l-基]-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯；3，19-二乙酰基-12-[4-氨基-嘌呤-1-基]-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯；3,19-二乙?；?14-脫氧-12-巰基噻唑基-穿心蓮內(nèi)酯；3，19-二乙?；?14-脫氧-12-(2-巰基-3-甲基-噻唑乙酸)-穿心蓮內(nèi)酯，及其異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明所述"Cw烷基"選自甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、戊基、己基等。本發(fā)明所述"CL6烷基?；?選自甲酰基，乙酰基，丙?；□；?。本發(fā)明所述"<:2.6烯基"選自乙烯基，丙烯基，丁烯基，戊烯基，己烯基等。本發(fā)明所述"C2-8烯基酰基"選自乙烯?；?，丙烯?；∠；取１景l(fā)明所述"芳基"選自苯基、萘基。本發(fā)明所述"芳烷基"選自苯甲基、苯乙基，苯丙基等。本發(fā)明所述"3-8員環(huán)垸基"選自環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基等。本發(fā)明所述"3-8員環(huán)烯基"選自環(huán)丙烯基、環(huán)丁烯基、環(huán)戊烯基、環(huán)己烯基等。本發(fā)明所述"CL6垸基酰胺基"選自甲酰胺基、乙酰胺基、丙酰胺基、異丙酰胺基、丁酰胺基等。本發(fā)明所述"垸氧基羰基"選自甲氧基羰基、乙氧基羰基、丙氧基羰基、異丙氧基羰基、丁氧基羰基等。本發(fā)明所述"烷基硫基"選自甲硫基，乙硫基，丙硫基等。本發(fā)明所述"3-8員的雜環(huán)基團(tuán)"選自吡啶基，喹啉基，氫化喹啉基，異喹啉基，氫化異喹啉基，吲哚基，三氮唑基，四氮唑基，噻吩基，噻唑基，呋喃基，吡咯基，吡啶基，吡喃基，吡唑基，咪唑基，嘧啶基，惡唑基，吡嗪基，噠嗪基，苯并噻唑基，苯并咪唑基，嘌呤基等。為了便于制成制劑，本發(fā)明還要求進(jìn)一步保護(hù)上述化合物可藥用的鹽，可接受的鹽為有機(jī)酸鹽、無(wú)機(jī)酸鹽、有機(jī)堿鹽或無(wú)機(jī)堿鹽，其中有機(jī)酸包括乙酸、甲磺酸、檸檬酸、富馬酸、馬來(lái)酸、乙醇酸、乳酸、水楊酸、琥珀酸、對(duì)甲苯磺酸、酒石酸、甲磺酸、甲酸、苯甲酸、丙二酸、苯磺酸、萘磺酸；無(wú)機(jī)酸包括鹽酸、氫溴酸、硝酸、硫酸、磷酸；有機(jī)堿包括葡甲胺、氨基葡萄糖；無(wú)機(jī)堿包括堿金屬鈉、鉀、鋇、鈣、鎂、鋅的堿性化合物。特別優(yōu)選的化合物的結(jié)構(gòu)式和化學(xué)名稱(chēng)為3,19-二乙?；?12-(N-3-甲酰氨基-lH-l，2,4-三氮唑)-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯(簡(jiǎn)稱(chēng)化合物1)3，19-二丙酰基-12-(N-3-甲脒基-lH-I,2，4-三氮唑)-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯(簡(jiǎn)稱(chēng)化合物2)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>3,19-二丙酰基-12-[(3R，4R,5S)-4-乙酰氨基-5-氨基-3-羥基-l-環(huán)己烯-l-羧酸]-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯的制備(簡(jiǎn)稱(chēng)化合物3)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>3,19-二乙酰基-12-[4-氨基-2(lH)-嘧啶酮-l-基]-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯(簡(jiǎn)稱(chēng)化合物4)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>3,19-二乙?；?12-[4-氨基-嘌呤-1-基]-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯(簡(jiǎn)稱(chēng)化合物5)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>3,19-二乙?；?14-脫氧-12-巰基噻唑基-穿心蓮內(nèi)酯(簡(jiǎn)稱(chēng)化合物6)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>3,19-二乙酰基-14-脫氧-12-(2-巰基-3-甲基-噻唑乙酌-穿心蓮內(nèi)酯(簡(jiǎn)稱(chēng)化合物7)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>本發(fā)明進(jìn)一步提供了上述部分化合物的制備方法，但不僅限于下述制備方法1、3,19-二乙?；?12-(N-3-甲酰氨基-lH-l,2,4-三氮唑)-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯(簡(jiǎn)稱(chēng)化合物1)的制備將穿心蓮內(nèi)酯投入反應(yīng)瓶中，然后加入乙酸酐，回流反應(yīng)后回收乙酸酐，剩余物倒入冰水中，用氯仿萃取，合并有機(jī)層，水洗，干燥，減壓回收溶劑，得3，14，19-三乙?；?穿心蓮內(nèi)酯粗品，用無(wú)水乙醇重結(jié)晶，得精制品。將3-甲酰氨基-lH-l，2，4-三氮唑溶于氯仿中，滴加入含三甲基氯硅烷的氯仿，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)。將反應(yīng)液移入分液漏斗中，水洗，飽和碳酸氫鈉洗，飽和氯化鈉洗，減壓蒸除溶劑。然后再用干燥的氯仿溶解，冷卻到-lCTC以下，加入上述3,14，19-三乙?；?穿心蓮內(nèi)酯的氯仿溶液后升溫至10'C反應(yīng)，然后再升溫至2(TC反應(yīng)。反應(yīng)完畢后用飽和碳酸氫鈉洗滌，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉千燥，減壓濃縮，殘余物用硅膠拄層析純化，得固體3，19-二乙?；?12-(N-3-甲酰氨基-lH-l,2,4-三氮唑)-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯。2、3，19-二丙?；?12-(N-3-甲脒基-lH-l,2,4-三氮唑)-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯(簡(jiǎn)稱(chēng)化合物2)的制備將穿心蓮內(nèi)酯投入反應(yīng)瓶中，然后加入丙酸酐，回流(TLC檢測(cè)反應(yīng)進(jìn)程)，反應(yīng)完成后倒入冰水中，用氯仿萃取，有機(jī)層水洗后干燥，減壓回收溶劑，得3,14,19-三丙?；?穿心蓮內(nèi)酯粗品，用無(wú)水乙醇重結(jié)晶，得精制品。將N-3-甲脒基-lH-l，2,4-三氮唑在氯仿中溶解，滴加入三甲基氯硅烷，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)，將反應(yīng)液移入分液漏斗中，水洗，飽和碳酸氫鈉洗，飽和氯化鈉洗，有機(jī)層減壓濃縮至干。然后再用干燥的氯仿溶解，冷卻到0X:以下，加入3,14，19-三丙?；?穿心蓮內(nèi)酯的氯仿溶液后升溫至2(TC反應(yīng)。反應(yīng)完畢后用飽和碳酸氫鈉洗滌，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，殘余物用硅膠拄層析純化，得固體3,19-二丙?；?12-(1^-3-甲脒基-111-1,2,4-三氮唑)-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯。3、3,19-二丙酰基-12-[(3R,4R,5S)-4-乙酰氨基-5-氨基-3-羥基-l-環(huán)己烯小羧酸]-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯的制備(簡(jiǎn)稱(chēng)化合物3)的制備將穿心蓮內(nèi)酯投入反應(yīng)瓶中，然后加入丙酸酐，回流(TLC檢測(cè)反應(yīng)進(jìn)程)，反應(yīng)完成后倒入冰水中，用氯仿萃取，有機(jī)層水洗后干燥，減壓回收溶劑，得3，14，19-三丙酰基-穿心蓮內(nèi)酯粗品，用無(wú)水乙醇重結(jié)晶，得精制品。將(3R，4R，5S)-4-乙酰氨基-5-氨基-3-羥基-1-環(huán)己烯-l-羧酸在乙醚中溶解，冷卻到10'C以下，加入3,14,19-三丙?；?穿心蓮內(nèi)酯的乙醚溶液后升溫至2(TC反應(yīng)。反應(yīng)完畢后將反應(yīng)液用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，殘余物用硅膠拄層析純化(氯仿甲醇=95:5)，得固體3,19-二丙?；?12-[(3R,4R，5S)-4-乙酰氨基-5-氨基-3-羥基-1-環(huán)己烯-l-羧酸]-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯。4、3,19-二乙?；?12-[4-氨基-2(lH)-嘧啶酮-l-基]-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯(簡(jiǎn)稱(chēng)化合物4)的制備具體操作及配比參考化合物1的制備。5、3,19-二乙酰基-12-[4-氨基-嘌呤-1-萄-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯(簡(jiǎn)稱(chēng)化合物5)的制備具體操作及配比參考化合物1的制備。6、3，19-二乙?；?14-脫氧-12-巰基噻唑基-穿心蓮內(nèi)酯(簡(jiǎn)稱(chēng)化合物6)的制備在攪拌下加入2-巰基噻唑，三乙胺，二氯甲烷，然后加入3,14，19-三乙?；┬纳弮?nèi)酯，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)4小時(shí)，TLC檢測(cè)反應(yīng)進(jìn)程。反應(yīng)完成后反應(yīng)液用乙醚稀釋?zhuān)?，無(wú)水硫酸鈉干燥，回收溶劑，殘余物過(guò)硅膠柱純化，得3，19-二乙?；?14-脫氧-12-巰基噻唑基-穿心蓮內(nèi)酯。7、3,19-二乙?；?14-脫氧-12-(2-巰基-3-甲基-噻唑乙酸)-穿心蓮內(nèi)酯(簡(jiǎn)稱(chēng)化合物7)的制備具體操作及配比參考化合物6的制備。本發(fā)明進(jìn)一步要求保護(hù)包括藥學(xué)上有效量的上述任一化合物或其立體異構(gòu)體或其多晶形物及其藥學(xué)上可接受的鹽的藥物組合物，其有效劑量為lmg10g。上述藥物組合物可以以口服、腸胃外給藥或外用等方式施用于需要治療的患者。上述藥物組合物的制劑可采用現(xiàn)有制藥領(lǐng)域中的常規(guī)方法生產(chǎn)，需要的時(shí)候可以添加各種藥學(xué)上可接受的載體。所述的載體包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤(rùn)劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體、潤(rùn)滑劑等。用于腸胃外給藥時(shí)，可將其制成注射劑，注射劑系指藥物制成的供注入體內(nèi)的溶液、乳液或混懸液及供臨用前配制或稀釋成溶液或混懸液的粉末或濃溶液的無(wú)菌制劑，包括注射液、注射用無(wú)菌粉末和注射用濃溶液。注射液系指藥物制成的供注射入體內(nèi)用的無(wú)菌溶液型注射液、乳液型注射液或混懸型注射液，其標(biāo)示裝量可以為0.5ml、lml、2ml、5ml、10ml、20ml、50ml、100ml、200ml、250ml、500ml等，一般不小于100ml的供靜脈滴注用的大體積注射液也稱(chēng)靜脈輸液。注射用無(wú)菌粉末系指藥物制成的供臨用前用適宜的無(wú)菌溶液配制成澄清溶液或均勻混懸液的無(wú)菌粉末或無(wú)菌塊狀物，無(wú)菌粉末可以用溶媒結(jié)晶法、噴霧干燥法或冷凍干燥法等制得。注射用濃溶液系指藥物制成的供臨用前稀釋供靜脈滴注用的無(wú)菌濃溶液。用于口服給藥時(shí)，可將其制成常規(guī)的固體制劑，包括片劑、膠囊劑、顆粒劑、丸劑和口服溶液劑等。片劑系指藥物與適宜的輔料混勻壓制而成的圓片狀或異形片狀的固體制劑；片劑以口服普通片為主，另有含片、舌下片、口腔貼片、咀嚼片、分散片、可溶片、泡騰片、緩釋片、控釋片與腸溶片等。膠囊劑系指藥物或加有輔料充填于空心膠囊或密封于軟質(zhì)囊材中的固體制劑；膠囊劑依據(jù)其溶解與釋放特性，可分為硬膠囊(通稱(chēng)為膠囊)、軟膠囊(膠丸)、緩釋膠囊、控釋膠囊和腸溶膠囊。顆粒劑系指藥物與適宜的輔料制成具有一定粒度的干燥顆粒狀制劑；顆粒劑可分為可溶顆粒(通稱(chēng)為顆粒)、混懸顆粒、泡騰顆粒、腸溶顆粒、緩釋顆粒和控釋顆粒等。丸劑系指藥物與適宜的輔料均勻混合，以適當(dāng)方法制成的球狀或類(lèi)球狀固體制劑；丸劑包括滴丸、糖丸、小丸等。口服溶液劑系指藥物溶解于適宜溶劑中制成供口服的澄清液體制劑。上述藥物組合物還可以制成栓劑、軟膏劑、乳膏劑、洗劑、搽劑、涂膜劑、凝膠劑、散劑、貼劑等。栓劑系指藥物與適宜基質(zhì)制成供腔道給藥的固體制劑，可分為直腸栓、陰道栓和尿道栓，栓劑常用基質(zhì)為半合成脂肪酸甘油酯、可可豆脂等，而陰道栓常用水溶性或水能混溶的基質(zhì)。軟膏劑系指藥物與油脂性或水溶性基質(zhì)混合制成均勻的半固體外用制劑。乳膏劑系指藥物溶解或分散于乳液型基質(zhì)中形成均勻的半固體外用制劑。洗劑系指含藥物的溶液、乳液、混懸液，供清洗或涂抹無(wú)破損皮膚用的制劑。搽劑系指藥物用乙醇、油或適宜的溶劑制成的溶液、乳液或混懸液，供無(wú)破損皮膚揉擦用的液體制劑。涂劑系指含藥物的水性或油性溶液、乳液、混懸液，供臨用前用紗布或棉花蘸取或涂于皮膚或口腔與喉部黏膜的液體制劑。涂膜劑系指藥物溶解于含成膜材料有機(jī)溶劑中，涂搽患處后形成薄膜的外用液體制劑。凝膠劑系指藥物與能形成凝膠的輔料制成均一、混懸或乳液型的稠厚液體或半固體制劑。散劑系指藥物或與適宜的輔料經(jīng)粉碎、均勻混合制成的干燥粉末狀制劑，分為口服散劑和局部用散劑。貼劑系指可粘貼在皮膚上，藥物可產(chǎn)生全身性或局部作用的一種薄片狀制劑；該制劑有背襯層、有(或無(wú))控釋膜的藥物貯庫(kù)、黏合劑層及臨用前需除去的保護(hù)層；可用于完整皮膚表面，也可用于有疾患或完整的皮膚表面。本發(fā)明進(jìn)一步要求保護(hù)本發(fā)明抗病毒化合物、其異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受的鹽，在制備用于治療和/或預(yù)防感染性疾病的藥物中的用途，包括流感病毒、皰疹病毒、呼吸道病毒、HIV病毒等引起的感染。本發(fā)明進(jìn)一步要求保護(hù)本發(fā)明抗病毒化合物、其異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受的鹽，在制備用于治療和/或預(yù)防由感染引起的免疫力低下疾病的藥物中的用途。本發(fā)明進(jìn)一步要求保護(hù)本發(fā)明抗病毒化合物、其異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受的鹽，在制備治療感染性疾病中的藥物中的用途。本發(fā)明的化合物與最接近的現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)(1)首次提供了一種新的抗病毒化合物、其異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受的鹽，其抗病毒活性更強(qiáng)、耐藥性更好，值得在臨床推廣使用。(2)本發(fā)明進(jìn)一步對(duì)部分化合物進(jìn)行了抗病毒實(shí)驗(yàn)包括細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)和體外抗病毒實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明化合物對(duì)供試的腺病毒3型(Adv3)、流感病毒FMh柯薩奇B病毒(COXBY)均有良好的抑制作用，且對(duì)細(xì)胞的無(wú)毒性界線(xiàn)均從10mg/ml開(kāi)始。(3)本發(fā)明化合物對(duì)病毒有抑制作用外，還對(duì)感染小鼠有保護(hù)作用。(4)本發(fā)明上述化合物的制備工藝簡(jiǎn)單，藥品純度高、收率高、質(zhì)量穩(wěn)定，易于進(jìn)行大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)。以下通過(guò)實(shí)驗(yàn)例來(lái)進(jìn)一步闡述本發(fā)明所述的具有抗病毒活性的化合物的有益效果，這些實(shí)驗(yàn)例包括本發(fā)明的化合物抗病毒實(shí)驗(yàn)。本發(fā)明化合物具有下列有益效果，但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明化合物僅具有下列有益效果。實(shí)驗(yàn)例l本發(fā)明化合物抗病毒實(shí)驗(yàn)供試品本發(fā)化合物注射劑，制備方法參加實(shí)施例；毒株腺病毒3型(Adv3);流感病毒FM，；柯薩奇B病毒(COXBY);細(xì)胞株Hep-2細(xì)胞；Z-HL!6C細(xì)胞實(shí)驗(yàn)方法1、細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)將本發(fā)明化合物分別均配制成20、10、5、2.5、1.25mg/ml的5種不同濃度藥液，分別接種2支Hep-2和Z-HI^C細(xì)胞管，力Q2%小牛血清Eagles維持液，于37。C衡溫，觀(guān)察對(duì)正常細(xì)胞的毒性影響并設(shè)空白對(duì)照，逐日觀(guān)察細(xì)胞毒性反應(yīng)界線(xiàn)。表l細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>注"++""+"表示細(xì)胞圓縮，有不同程度毒性；"一"表示無(wú)任何毒性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果與結(jié)論實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明化合物(10、5、2.5、1.25mg/ml各組)藥液對(duì)H印-2和Z-HL16C細(xì)胞無(wú)任何毒性反應(yīng)；本發(fā)明藥物的無(wú)毒性界線(xiàn)均從10mg/ml開(kāi)始?？瞻讓?duì)照對(duì)Hep-2和Z-HL16C細(xì)胞無(wú)任何毒性反應(yīng)。2、體外抗病毒實(shí)驗(yàn)取100TCID50/0.1ml(半數(shù)細(xì)胞病變量)的Adv3和COXBY病毒分別接種Hep-2細(xì)胞，取lOOTCIDWO.lml(半數(shù)細(xì)胞病變量)的FMi病毒分接種Z-HL16C細(xì)胞，腮腺吸附30分鐘后洗去病毒，分別加入無(wú)毒界線(xiàn)的IO、5、2.5、1.25mg/ml4個(gè)濃度組的實(shí)驗(yàn)藥液，同時(shí)設(shè)病毒唑、細(xì)胞對(duì)照組(觀(guān)察對(duì)正常細(xì)胞的影響)。置37'C衡溫，逐R觀(guān)察細(xì)胞病變。實(shí)驗(yàn)結(jié)果與結(jié)論實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明藥物的105mg/ml濃度對(duì)Adv3、COXBY、FM,病毒均有抑制作用，2.5mg/ml濃度時(shí)與空白對(duì)照組相比對(duì)Adv3、COXBY、FMi病毒略有抑制作用。表2體外抗病毒實(shí)驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>注"+++""++"表示細(xì)胞圓縮，有不同程度毒性；"一"表示無(wú)任何毒性。實(shí)驗(yàn)例2本發(fā)明化合物對(duì)流感病毒感染小鼠的保護(hù)作用受試動(dòng)物昆明種小鼠，體重1822g，雌雄各半。供試品本發(fā)化合物注射劑，制備方法參見(jiàn)實(shí)施例5本發(fā)明化合物水針劑的制備；生理鹽水，市購(gòu)。病毒甲3型流感病毒強(qiáng)毒株實(shí)驗(yàn)方法取小白鼠80只，隨機(jī)分組，每組10只，腹腔內(nèi)注射本發(fā)明化合物，每天一次，連續(xù)7d。同時(shí)以生理鹽水做平行對(duì)照。于第7天給藥后2h，用甲3型流感病毒鼻內(nèi)接種0.2ml/只，以小白鼠死亡為指標(biāo)，觀(guān)察48h，記錄各組動(dòng)物死亡率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果與結(jié)論與生理鹽水組比較，本發(fā)明化合物能顯著降低小鼠的死亡率。流感病毒所致的上呼吸道感染，易繼發(fā)肺炎，腦炎等疾病。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)用強(qiáng)毒株甲3型流感病毒對(duì)小鼠鼻內(nèi)接種，觀(guān)察本發(fā)明化合物對(duì)病毒感染小鼠的保護(hù)作用，結(jié)果表明，腹腔內(nèi)注射連續(xù)7天可顯著防止由于病毒感染引起的小鼠死亡。表3本發(fā)明化合物對(duì)甲3型流感病毒鼻內(nèi)接種小鼠死亡率的影響組別_劑量(mg/kg)死亡數(shù)總數(shù)死亡率％生理鹽水—1010100化合物1組10021020化合物2組10011010化合物3組10021020化合物4組歸11010化合物5組10021020化合物6組1000100化合物7組1000100具體實(shí)施例方式以下通過(guò)實(shí)施例形式的具體實(shí)施方式，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下實(shí)施例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。以下實(shí)施例中各劑型的輔料可以用藥學(xué)上可接受的輔料替換，或者減少、增加。實(shí)施例25中化合物源于實(shí)施例1的制備。實(shí)施例l本發(fā)明化合物的制備1、3，19-二乙酰基-12-(N-3-甲酰氨基-lH-l，2，4-三氮唑)-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯(簡(jiǎn)稱(chēng)化合物1)的制備將3.5g(lOmmol)穿心蓮內(nèi)酯投入反應(yīng)瓶中，然后加入50ml乙酸酐，回流反應(yīng)10min,反應(yīng)完成后回收乙酸酐，剩余物倒入200ml冰水中，用氯仿50mlX2萃取，合并有機(jī)層，水洗，干燥，減壓回收溶劑，得3,14,19-三乙?；?穿心蓮內(nèi)酯粗品，用無(wú)水乙醇重結(jié)晶，得精制品3.4g，收率71%。將l.lg(lOmmol)3-甲酰氨基-lH-l,2,4-三氮唑溶于20ml氯仿中，滴加入含三甲基氯硅烷2.7g(25mmo1)/20ml氯仿，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)3小時(shí)。將反應(yīng)液移入分液漏斗中，水洗，飽和碳酸氫鈉洗，飽和氯化鈉洗，減壓蒸除溶劑。然后再用干燥的氯仿50ml溶解，冷卻到-10。C以下，加入上述3，14，19-三乙?；?穿心蓮內(nèi)酯的氯仿溶液后升溫至1(TC反應(yīng)2小時(shí)，然后再升溫至2(TC反應(yīng)2小時(shí)。反應(yīng)完畢后用飽和碳酸氫鈉洗滌，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，殘余物用硅膠拄層析純化(氯仿乙酸乙酯=8:2)，得固體3，19-二乙?；?12-(>-甲酰氨基-lH-l，2,4-三氮唑)-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯2.8g，收率74.3%。元素分析(C27H36N407):C:61.21%;H:6.90%;N:10.55%(理論:C:61.35%;H:6.86%;N:10.60%)2、3，19-二丙?；?12-(N-3-甲脒基-lH-l，2，4-三氮唑)-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯(簡(jiǎn)稱(chēng)化合物2)的制備將7g(20mmo1)穿心蓮內(nèi)酯投入反應(yīng)瓶中，然后加入80ml丙酸酐，回流10min(TLC檢測(cè)反應(yīng)進(jìn)程)，反應(yīng)完成后倒入冰水中，用氯仿50mlX2萃取，有機(jī)層水洗后干燥，減壓回收溶劑，得3,14,19-三丙?；?穿心蓮內(nèi)酯粗品，用無(wú)水乙醇重結(jié)晶，得精制品6.5g，收率62.5%。將1.4g(15mmo1)N-3-甲脒基-lH-l,2,4-三氮唑在25ml氯仿中溶解，滴加入三甲基氯硅烷，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)3小時(shí)，將反應(yīng)液移入分液漏斗中，水洗，飽和碳酸氫鈉洗，飽和氯化鈉洗，有機(jī)層減壓濃縮至干。然后再用干燥的氯仿溶解，冷卻到0。C以下，加入3,14，19-三丙?；?穿心蓮內(nèi)酯的氯仿溶液后升溫至2(TC反應(yīng)5小時(shí)。反應(yīng)完畢后用飽和碳酸氫鈉洗滌，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，殘余物用硅膠拄層析純化(氯仿甲醇=90:10)，得固體3,19-二丙?；?12-(N-3-甲脒基-lH-l,2，4-三氮唑)-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯5.0g，收率72.5%。元素分析(C29H4lN506):C:62.59%;H:7.54%;N:12.51%(理論C:62.68%;H:7.44%;N:12.60%)3、3，19-二丙酰基-12-(3R,4R,5S)-4-乙酰氨基-5-氨基-3-羥基-1-環(huán)己烯-1-羧酸]-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯(簡(jiǎn)稱(chēng)化合物3)的制備將14g(40mmo1)穿心蓮內(nèi)酯投入反應(yīng)瓶中，然后加入160ml丙酸酐，回流10min(TLC檢測(cè)反應(yīng)進(jìn)程)，反應(yīng)完成后倒入冰水中，用氯仿100mlX2萃取，有機(jī)層水洗后干燥，減壓回收溶劑，得3,14,19-三丙?；?穿心蓮內(nèi)酯粗品，用無(wú)水乙醇重結(jié)晶，得精制品13g，收率62.5%。將5.4g(25mmo1)(3R，4R,5S)-4-乙酰氨基-5-氨基-3-羥基-1_環(huán)己烯-1-羧酸在100ml乙醚中溶解，冷卻到l(TC以下，加入3，14，19-三丙?；?穿心蓮內(nèi)酯的乙醚溶液后升溫至20'C反應(yīng)10小時(shí)。反應(yīng)完畢后將反應(yīng)液用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，殘余物用硅膠拄層析純化(氯仿甲醇=95:5)，得固體3，19-二丙?；?12-[(3R，4R，5S)-4-乙酰氨基-5-氨基-3-羥基-l-環(huán)己烯-1-羧酸]-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯的制備10.1g，收率61.4%。元素分析(C3sH5oN20k)):C:62.59%;H:7.54%;N:12.51%(理論C:62.68%;H:7.44%;N:12.60%)4、3，19-二乙?；?12-4-氨基-2(lH)-嘧啶酮-l-萄-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯(簡(jiǎn)稱(chēng)化合物4)的制備具體操作及配比參考化合物1的制備。得3,19-二乙?；?12-[4-氨基-2(lH)-嘧啶酮-l-基]-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯2.7g。元素分析(C28H37N307)C:63.65°/。；H:7.12%;N:7.89%(理論C:63.74%;H:7.07%;N:7.96%)5、3，19-二乙?；?12-[4-氨基-嘌呤-1-基]-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯(簡(jiǎn)稱(chēng)化合物5)的制備具體操作及配比參考化合物1的制備。得3,19-二乙?；?12-[4-氨基-嘌呤-1-基]-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯2.1g。元素分析(C29H37N507):C:63.24%;H:6.66%;N:12.30%(理論:C:61.36%;H:6.57%;N:12.34%)6、3，19-二乙酰基-14-脫氧-12-巰基噻唑基-穿心蓮內(nèi)酯(簡(jiǎn)稱(chēng)化合物6)的制備在攪拌下加入2-巰基噻唑5.3g(45mmo1)，10ml三乙胺，500ml二氯甲烷，然后加入3，14，19-三乙?；┬纳弮?nèi)酯(11.9g，25mmo1)，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)4小時(shí)，TLC檢測(cè)反應(yīng)進(jìn)程。反應(yīng)完成后反應(yīng)液用500ml乙醚稀釋?zhuān)?，無(wú)水硫酸鈉干燥，回收溶劑，殘余物過(guò)硅膠柱(230-400目)純化(洗脫劑石油醚乙酸乙酯=4:1)，得3,19-二乙?；?14-脫氧-12-巰基噻唑基-穿心蓮內(nèi)酯8.1g，收率60.5%.元素分析(C27H35N06S2):C:60.71%;H:6.68%;N:2.57%;S:11.95%(理論:C:60.76%;H:6.61%;N:2.62%;S:12.02%)7、3，19-二乙酰基-14-脫氧-12-(2-巰基-3-甲基-噻唑乙酌-穿心蓮內(nèi)酯(簡(jiǎn)稱(chēng)化合物7)的制備具體操作及配比參考化合物6的制備。得3,19-二乙酰基-14-脫氧-12-(2-巰基-3-甲基-噻唑乙酸)-穿心蓮內(nèi)酯7.5g元素分析(C30H39NO8S2):C:59.39%;H:6.56%;N:2.24%;S:10.48%(理論:C:59.48%;H:6.49%;N:2.31%;S:10.59%)實(shí)施例2本發(fā)明化合物片劑的制備處方1:化合物1-7或其衍生物中的任意一種100g(以化合物計(jì))微晶纖維素50g預(yù)膠化淀粉60g硬脂酸鎂1.5g羧甲淀粉鈉_5g共制備1000片處方2:化合物1-7或其衍生物中的任意一種200g(以化合物計(jì))微晶纖維素100g預(yù)膠化淀粉120g硬脂酸鎂3g2、制備工藝將原料、輔料分別過(guò)100目篩，備用；按照處方量稱(chēng)取原料和輔料；將化合物1-7或其衍生物中的任意一種、微晶纖維素、預(yù)膠化淀粉，混合均勻，加入水適量，攪拌均勻，制成適宜軟材；過(guò)20目篩制顆粒；顆粒在6(TC的條件下烘干；干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂和羧甲淀粉鈉，過(guò)18目篩整粒，混合均勻；取樣，半成品化驗(yàn)；按照化驗(yàn)確定的片重壓片；成品全檢，包裝入庫(kù)。實(shí)施例3本發(fā)明化合物膠囊劑的制備1、處方處方l:化合物1-7或其衍生物中的任意一種50g預(yù)膠化淀粉20g微晶纖維素10g10%PVPK30乙醇液適量硬脂酸鎂_0.5g共制備1000粒處方2:化合物1-7或其衍生物中的任意一種75g30g15g適量1.5g0.75g預(yù)膠化淀粉微晶纖維素2%HPMC水溶液微粉硅膠硬脂酸鎂共制備1000粒處方3:化合物1-7或其衍生物中的任意一種訓(xùn)g40g20g適量2glg預(yù)膠化淀粉微晶纖維素2%HPMC水溶液微粉硅膠硬脂酸鎂共制備畫(huà)粒處方4:化合物1-7或其衍生物中的任意一種250g預(yù)膠化淀粉120g微晶纖維素50g2%HPMC水溶液適量微粉硅膠5g硬脂酸鎂__共制備1000粒2、制備工藝將原料、輔料分別粉碎過(guò)100目篩，備用；按照處方量稱(chēng)取原料和輔料；將羥丙甲纖維素溶于水中制成2%的水溶液備用；將化合物l-7或其衍生物中的任意一種、預(yù)膠化淀粉、微晶纖維素混合均勻，加入2MHPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材；過(guò)20目篩制顆粒，顆粒在6(TC的條件下烘干，干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂、微粉硅膠，過(guò)18目篩整粒，混合均勻；取樣，半成品化驗(yàn)；按照化驗(yàn)確定的裝量裝入膠囊；成品全檢，包裝入庫(kù)。實(shí)施例4本發(fā)明化合物粉針的制備1、處方處方l:化合物1-7或其衍生物中的任意一種50g(以化合物計(jì))共制備1000支處方2:處方3:處方4:化合物1-7或其衍生物中的任意一種100g(以化合物計(jì))共制備1000支化合物1-7或其衍生物中的任意一種200g(以化合物計(jì))共制備塵支化合物1-7或其衍生物中的任意一種500g(以化合物計(jì))共制備畫(huà)支2、制備工藝將制備所用的抗生素玻璃瓶、膠塞等進(jìn)行無(wú)菌處理；按處方稱(chēng)取原料(折算后投料)，將無(wú)菌粉末置于分裝機(jī)中分裝，隨時(shí)檢測(cè)裝量；加塞，壓蓋，成品全檢，包裝入庫(kù)。實(shí)施例5本發(fā)明化合物水針的制備1、處方處方l.-化合物1-7或其衍生物中的任意一種100g(以化合物計(jì))注射用水_加至2000ml_共制備薩支處方2:化合物1-7或其衍生物中的任意一種200g(以化合物計(jì))注射用水_加至5000ml_共制備薩支2、制備工藝將化合物l-7或其衍生物中的任意一種和輔料用注射用水溶解配液，經(jīng)活性炭吸附處理后過(guò)濾、定容、精慮、半成品檢驗(yàn)、灌封、滅菌、檢漏、燈檢、包裝制成成品。權(quán)利要求1、通式(I)所示的化合物、其異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受的鹽其中R1、R2可以相同或不同，分別獨(dú)立的表示為氫原子，C1-6烷基，芳基，C1-6烷基酰基或者C2-6烯基?；?；R3表示氨基，芳基，C1-6烷基酰胺基，C1-6烷氧基羰基，取代或未被取代的3-8員環(huán)烷基、3-8員環(huán)烯基、3-8員環(huán)烯基氨基、雜環(huán)基、雜環(huán)硫基；所述的取代基選自羥基，氨基，羧基，鹵素，巰基，脒基，硝基，被羧基取代或者未被取代的C1-6烷基，C1-6烷基酰胺基，C1-6烷氧基羰基或者C1-6烷基硫基。2、如權(quán)利要求1所示的化合物、其異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受的鹽其中R1、W可以相同或不同，分別獨(dú)立的表示為氫原子，CL6烷基，芳基，d-6烷基?；蛘?lt;:2.6烯基?；?；RS表示氨基，芳基，CM烷基酰胺基，CM烷氧基羰基，取代或未被取代的3-7員環(huán)烯基、3-7員環(huán)烯基氨基、雜環(huán)基、雜環(huán)硫基；所述的取代基選自羥基，氨基，羧基，鹵素，巰基，脒基，硝基，被羧基取代或者未被取代的Cl4院基，CM垸基酰胺基，cl4烷氧基羰基或者CM烷基硫基。3、如權(quán)利要求2所示的化合物、異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受的鹽其中R1、W可以相同或不同，分別獨(dú)立的表示為氫原子，cl6烷基?；蛘逤2.6烯基?；?；W表示氨基，芳基，Cw垸基酰胺基，取代或未被取代的3-6員環(huán)烯基、3-6員環(huán)烯基氨基、雜環(huán)基、雜環(huán)硫基；所述的取代基選自羥基，氨基，羧基，卣素，巰基，脒基，羧基甲基，硝基，Cw垸基，CM烷基酰胺基或者Cw烷氧基羰基。4、如權(quán)利要求3所示的化合物選自3，19-二乙?；?12-(N-3-甲酰氨基-lH-l，2，4-三氮唑)-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯；3，19-二丙?；?12-(N-3-甲脒基-lH-l，2,4-三氮唑)-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯；3，19-二乙酰基-12-氨基-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯；3，19-二乙?；?12-乙酰氨基-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯；3,19-二丙酰基-12-[(3R,4R,5S)-4-乙酰氨基-5_氨基_3-羥基_1-環(huán)己烯_1-羧酸]-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯；3,19-二乙?；?12-[4-氨基-2(lH)-嘧啶酮-l-基]-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯；3，19-二乙?；?12-[4-氨基-嘌呤-1-基]-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯；3,19-二乙?；?14-脫氧-12-巰基噻唑基-穿心蓮內(nèi)酯；3,19-二乙?；?14-脫氧-12-(2-巰基-3-甲基-噻唑乙酸)-穿心蓮內(nèi)酯，及其異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽。5、如權(quán)利要求4所示的化合物選自3,19-二乙?；?12-(N-3-甲酰氨基-lH-l,2,4-三氮唑)-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯；3，19-二丙?；?12-(N-3-甲脒基-lH-l，2,4-三氮唑)-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯；3,19-二丙?；?12-[(3R,4R,5S)-4-乙酰氨基-5-氨基-3-羥基-l-環(huán)己烯-l-羧酸]-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯；3，19-二乙酰基-12-[4-氨基-2(lH)-嘧啶酮-l-基]-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯；3,19-二乙酰基-12-[4-氨基-嘌呤-1-基]-14-脫氧-穿心蓮內(nèi)酯；3,19-二乙酰基-14-脫氧-12-巰基噻唑基-穿心蓮內(nèi)酯；3,19-二乙?；?14-脫氧-12-(2-巰基-3-甲基-噻唑乙酸)-穿心蓮內(nèi)酯，及其異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽。6、權(quán)利要求15所述的任一化合物，其藥學(xué)上可接受的鹽包括有機(jī)酸鹽、無(wú)機(jī)酸鹽、有機(jī)堿鹽或無(wú)機(jī)堿鹽。7、包括權(quán)利要求15所述的任一化合物、其異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受的鹽與一種或多種藥用載體和/或稀釋劑的藥物組合物，為藥學(xué)上可接受的任一劑型。8、如權(quán)利要求7所述的藥物組合物，含有權(quán)利要求14任一權(quán)利要求所述的化合物、其異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受的鹽的有效量作為必要的活性成分。9、包括權(quán)利要求15所述的所示的任一化合物、其異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受的鹽，在制備治療和/或預(yù)防感染性疾病的藥物中的應(yīng)用。10、如權(quán)利要求9所述的藥物組合物，在制備治療和/或預(yù)防病毒引起的感染的藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，涉及通式(I)所示的新的具有抗病毒活性的化合物、其異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R¹、R²、R³如說(shuō)明書(shū)中所定義；本發(fā)明還涉及這些化合物的制備方法，含有這些化合物的藥物組合物，以及這些化合物在制備治療和/或預(yù)防感染性疾病的藥物中的應(yīng)用。文檔編號(hào)C07D405/06GK101190912SQ20071019703公開(kāi)日2008年6月4日申請(qǐng)日期2007年12月1日優(yōu)先權(quán)日2006年12月1日發(fā)明者黃振華申請(qǐng)人:黃振華