專利名稱：：吡啶酮化合物的制作方法吡啶酮化合物發(fā)明背景0001肝細胞生長因子(HGF)也稱為分散因子(SF)，由于其干擾體外集落形成的能力，它是己知在正常細胞和瘤細胞中誘導(dǎo)多種多效反應(yīng)的間充質(zhì)來源細胞因子(Sonnenberg等人，JCW/所o/.123:223-235,1993;Matsumato等人，CV".iev.3:27-54，1992;和Stoker等人，Atowe327:239-242，1987)。已知這些反應(yīng)包括上皮和內(nèi)皮細胞的增殖、上皮集落分離為單個細胞、上皮細胞運動性(促運動發(fā)生)的刺激、細胞存活、細胞形態(tài)發(fā)生的誘導(dǎo)(Montesano等，CW/67:901-卯8,1991)以及侵襲的促進(Stella等人，/"/.JCe〃所o/.12:1357-62,1999和Stuart等人，M.￡平尸a仇81:17-30，2000)，所有這些都是引起轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵過程。也已報道HGF促進血管發(fā)生(Bussolino等，JCW/嵐119:629-641,1992)。此外，HGF在組織再生、傷口愈合和正常的胚胎過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用，所有這些依賴于細胞運動性和細胞增殖。0002HGF通過高親和性結(jié)合到其相關(guān)受體——Met蛋白酪氨酸激酶受體，一種已鑒定的原癌基因——而起始這些生理過程(Park等人A^/.^cad84:6379-83,1987禾BBottaro等人，Sc/e"ce251:802-4,1991)。Met的成熟形式由高度糖基化的外部(x-亞基以及具有大的細胞外結(jié)構(gòu)域、跨膜片段和細胞質(zhì)酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域的P-亞基組成。配體接觸Oigandengagement)誘導(dǎo)Met二聚化，所述二聚化產(chǎn)生自磷酸化活化受體。Met的活化促進信號轉(zhuǎn)導(dǎo)級聯(lián)，如由負責(zé)募集多種效應(yīng)蛋白的關(guān)鍵細胞質(zhì)酪氨酸殘基的轉(zhuǎn)磷酸作用所定義的(Furge等人，O腳g匿19:5582-9，2000)。這些效應(yīng)蛋白包括PI3-激酶的p85亞基、磷脂酶Oy(Gaul等人，(9"coge"e19:1509-18，2000)、Grb2和She銜接蛋白、蛋白磷酸酶SHP2和Gabl。后面的銜接物作為主要的下游?？糠肿?dockingmolecule)出現(xiàn)，所述?？糠肿禹憫?yīng)于配體占據(jù)(ligandoccupancy)而變?yōu)槔野彼崃姿峄?Schaeper等，《/Ce〃歷o/.149:1419-32,2000;Bardelli等人，O"coge"e18:1139-46,1999和Sachs等人，JCW/Ao/.150:1375-84,2000)。已經(jīng)報道在HGF刺激細胞中其它信號分子的活化，最顯著的是Ras、MAP激酶、STATs、ERK-l、ERK-2和FAK(Tanimura等，O"coge"e17:57-65,1998;Lai等，CT;em.275:7474-802000禾卩Furge等，19:5582-9，2000)。許多這些信號分子的作用在細胞增殖中己經(jīng)被很好地確立。0003Met也稱為肝細胞生長因子受體(HGFR)，其主要在上皮細胞中表達，但是也已在內(nèi)皮細胞、成肌細胞、造血細胞和運動神經(jīng)元中得到鑒定。HGF的過量表達和Met的活化與多種不同腫瘤類型的發(fā)病和進展以及轉(zhuǎn)移性疾病的促進有關(guān)。將Met與癌癥聯(lián)系的最初證據(jù)已得到激酶結(jié)構(gòu)域錯義突變的鑒定的支持，其使個體易患乳頭狀腎癌(PRC)和肝細胞癌(HCC)(Lubensky等人，尸a/Zzo/ogv,155:517-26,1999)。也已經(jīng)在卵巢癌、兒童HCC、胃癌、頭頸部鱗狀細胞癌、非小細胞肺癌、結(jié)腸直腸轉(zhuǎn)移中鑒定出突變形式的Met(Christensen等人，Qwcer63:7345-55,2003;Lee等人，Owcoge"e,19:4947-53,2000和Direnzo等人，dCa"cer版，1:147-54,1995)。此外，支持Met在癌癥中的作用的進一步證據(jù)是基于HGF和Met受體在各種腫瘤中的過量表達，所述腫瘤包括甲狀腺癌、卵巢癌和胰腺癌。也已經(jīng)顯示其在結(jié)腸直腸癌的肝轉(zhuǎn)移中擴增((Rong等人，C朋cerA仏55:1963-1970,1995;Rong等，Owe"i^s.53:5355-5360,1993;Kenworthy等人，/Owcer66:243-247,1992禾卩Scarpino等人，■/尸aAo/ogy189:570-575,1999)。已經(jīng)在人胃癌中描述和鑒定了TPR-Met(與CML中的BCR/Abl相似的活性形式)(PNAS88:4892-6，1991)。在患有侵襲性乳腺癌的患者中和在非小細胞肺癌患者的近期研究中，受體或者配體的表達是存活降低的預(yù)測物，這進一步將Met與腫瘤進展聯(lián)系起來(Camp等人，O紐86:2259-651999和Masuya等人，/C朋cw,90:1555-62,2004)。一般而言，大多數(shù)間充質(zhì)來源的人腫瘤和腫瘤細胞系不適當?shù)乇磉_HGFR禾B/或HGF。0004大量的實驗數(shù)據(jù)支持HGF和Met在最終導(dǎo)致轉(zhuǎn)移的腫瘤侵襲、生長、存活和進展中的作用。在臨床前，HGF的轉(zhuǎn)基因表達導(dǎo)致轉(zhuǎn)移表型(Takayama等人，iWAS，94:701-6,1997)并且擴增的/過量表達的Met自發(fā)地轉(zhuǎn)化NIH-3T3細胞(Co叩er等人，￡M50/，5:2623-8,1986)。0005已經(jīng)示出，靶向HGF或Met的生物劑，如核糖核酸酶、抗體和反義RNA抑制腫瘤發(fā)生(Stabile等人，Gwe77zerap_y,11:325-35，2004，Jiang等人，C"".Ca"cwWes，9:4274-81，2003禾BGenentechUS6,214,344，2001)。因此，期望靶向Met的選擇性的小分子激酶調(diào)節(jié)劑對于癌癥——其中Met受體活化在原發(fā)腫瘤和繼發(fā)轉(zhuǎn)移的發(fā)展和進程中發(fā)揮關(guān)鍵作用——的治療具有治療潛力。也已知HGF調(diào)節(jié)血管發(fā)生，血管發(fā)生是腫瘤生長和播散中的關(guān)鍵過程。因此，這類調(diào)節(jié)劑也具有影響血管發(fā)生依賴性疾病的潛能，所述血管發(fā)生依賴性疾病可以包括糖尿病視網(wǎng)膜病變、黃斑變性、肥胖和炎性疾病如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。0006有幾個專利申請涉及用于治療Met活化癌癥的化合物。例如，見2005年11月3日公布的美國公開專利US2005/0245530，其公開內(nèi)容通過引用并入本文。然而，申請人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的化合物令人驚訝地具有優(yōu)勢。發(fā)明概述0007本發(fā)明涉及下列化合物包括其鹽。申請人已發(fā)現(xiàn)，AK4-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基氧基)-3-氟苯基)-4-乙氧基-l-(4-氟苯基)-2-氧代-l，2-二氫吡啶-3-甲酰胺(化合物1)和其鹽對于治療Met相關(guān)性癌癥特別有用，原因在于與一些已知的Met激酶抑制劑相比，其將增強的效力和對某些CYP450同工酶的降低的抑制組合起來。0008本發(fā)明還涉及藥物組合物，其包括在藥學(xué)上可接受的載體中的治療有效量的如上述的化合物1或其鹽。0009本發(fā)明進一步涉及在需要這種治療的患者中治療癌癥的方法，其中所述癌癥依賴于Met活化，其中所述Met活化由基因擴增、活化的Met突變和/或HGF刺激調(diào)節(jié)，所述方法包括給患者施用治療有效量的化合物1并且可選地施用至少一種另外的抗癌劑。0010在本發(fā)明的一些實施方式中，待治療的癌癥選自膀胱癌、乳腺癌、結(jié)腸直腸癌、胃癌、頭頸癌、腎癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、胰腺癌/膽囊癌、前列腺癌、甲狀腺癌、骨肉瘤、橫紋肌肉瘤、MFH/纖維肉瘤、惡性膠質(zhì)瘤/星形細胞瘤、黑色素瘤和間皮瘤。發(fā)明詳述.0011下面列出的是用于描述本發(fā)明的各種術(shù)語的定義。當所述術(shù)語在整個說明書中單獨地或作為較大集合的一部分使用時，這些定義適用于該術(shù)語(除非它們在特定情況下被另外限制)。0012短語"治療有效的"意圖限定每一藥劑的量，其在每一藥劑本身的治療過程中會實現(xiàn)改善病癥嚴重性和發(fā)生頻率的目標，同時避免與可替代療法通常相關(guān)的不利副作用。例如，有效的抗癌劑延長患者的生存能力、抑制與瘤有關(guān)的快速增殖的細胞生長或?qū)е铝龅耐嘶?013除非另外指明，如此處使用的，短語"藥學(xué)上可接受的鹽(一種或多種)"或"鹽(一種或多種)"包括含有藥學(xué)上可接受的陰離子的鹽，如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硝酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、酸式磷酸鹽、異煙酸鹽、醋酸鹽、乳酸鹽、水楊酸鹽、檸檬酸鹽、酸式檸檬酸鹽、酒石酸鹽、泛酸鹽、酒石酸氫鹽、抗壞血酸鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽、龍膽酸鹽、延胡索酸鹽、葡糖酸鹽、葡糖醛酸鹽(glucaronate)、甲磺酸鹽(mesylate)、糖二酸鹽、甲酸鹽、苯甲酸鹽、谷氨酸鹽、甲磺酸鹽(methanesulfonate)、乙磺酸鹽、硫酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽和雙羥萘酸鹽(pamoate)[即，l，l，-亞甲基-二-(2-羥基-3-萘甲酸鹽)]。0014如本文使用的，短語"基因擴增"是指DNA片斷的選擇性合成，其可產(chǎn)生Met基因或其中編碼Met的染色體片斷的多個拷貝。0015如本文使用的，短語"活化的Met突變"是指在Met的DNA序列中的選擇性改變，其產(chǎn)生組成性(即，永久地)磷酸化的Met蛋白。0016如本文使用的，短語"HGF刺激"是指HGF以活化受體導(dǎo)致表型反應(yīng)的方式結(jié)合其相關(guān)受體(Met)的能力。在Met的情況下，這可以是細胞增殖、運動性、分化和/或存活。0017如本文使用的，術(shù)語"患者"包括所有的哺乳動物種類，包括人、牛、馬、犬和貓。0018短語"另外的抗癌劑"是指選自下列任一種或更多種的藥物垸化劑(包括氮芥、烷基磺酸鹽、亞硝基脲、氮丙啶衍生物和三氮烯)；抗-血管發(fā)生劑(包括基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑)；抗代謝物(包括腺苷脫氨酶抑制劑、葉酸拮抗劑、嘌呤類似物和嘧啶類似物)；抗生素或抗體(包括單克隆抗體、CTLA-4抗體、蒽環(huán)類抗生素)；芳香酶抑制劑；細胞周期反應(yīng)調(diào)節(jié)劑(cell-cycleresponsemodifiers);酶；法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑(famesyl-proteintransferaseinhibitors);激素和抗激素劑以及類固醇(包括合成類似物、糖皮質(zhì)激素、雌激素/抗雌激素[例如，SERMs]、雄激素/抗雄激素、黃體酮、孕酮受體激動劑以及促黃體激素釋放激素[LHRH]激動劑和拮抗劑)；胰島素樣生長因子(IGF)/胰島素樣生長因子受體(IGFR)系統(tǒng)調(diào)節(jié)劑(包括IGFR1抑制劑)；整聯(lián)蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑；激酶抑制劑(包括多激酶抑制劑和/或Src激酶或Src/abl抑制劑、細胞周期蛋白依賴性激酶[CDK]抑制劑、panHer、Her-l和Her-2抗體、包括抗VEGF抗體在內(nèi)的VEGF抑制劑、EGFR抑制劑、促分裂原活化蛋白[MAP]抑制劑、MEK抑制劑、極光激酶(Aurorakinase)抑制劑、PDGF抑制劑、以及其它的酪氨酸激酶抑制劑或絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑；微管破壞劑，如海鞘素(ecteinascidin)或它們的類似物和衍生物；微管穩(wěn)定劑如紫杉烷(taxane)以及天然存在的埃博霉素(epothilones)和它們的合成與半合成的類似物；微管結(jié)合去穩(wěn)定劑(包括長春花生物堿)；拓撲異構(gòu)酶抑制劑；異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑；鉑配合物；信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑；以及其它用作抗癌劑和細胞毒劑的藥劑，如生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑、生長因子和免疫調(diào)節(jié)劑。0019本發(fā)明涉及下列化合物1:或其鹽，其用于治療癌。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的化合物對于治療癌癥特別有用，這是由于與已知的Met激酶抑制劑相比其效力增加以及對某些CYP450同工酶的抑制降低。0020因此，本發(fā)明涉及在其中癌癥依賴于Met活化的患者中治療癌癥的方法，其中所述Met活化由基因擴增、活化的Met突變和/或HGF剌激調(diào)節(jié)，所述方法包括給患者施用治療有效量的化合物1或其鹽。0021根據(jù)本發(fā)明的一個實施方式，提供治療下述癌癥的方法膀胱癌、乳腺癌、結(jié)腸直腸癌、胃癌、頭頸癌、腎癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、胰腺癌/膽囊癌、前列腺癌、甲狀腺癌、骨肉瘤、橫紋肌肉瘤、MFH/纖維肉瘤、惡性膠質(zhì)瘤/星形細胞瘤、黑色素瘤和間皮瘤，已知所有這些癌癥與Met活化有關(guān)。0022在癌癥治療中，化療劑和/或其它治療(如放射治療)的聯(lián)合通常是有利的。第二(或第三)藥劑可以具有與第一治療劑相同或不同的作用機理?？赡芴貏e有用的是使用細胞毒性藥物聯(lián)合，其中被施用的兩種或更多種藥物以不同的方式起作用或在細胞周期的不同階段起作用，和/或其中兩種或更多種藥物具有重疊的毒性或副作用，禾口/或其中被聯(lián)合的藥物在治療患者表現(xiàn)出的特定疾病狀態(tài)中各自具有所表明的效力。0023因此，本發(fā)明的化合物可以與其它用于治療癌癥或其它增殖性疾病的抗癌治療聯(lián)合施用。本文的發(fā)明進一步包括化合物1或其鹽化合物1；和/或其包括本文的化合物1連同說明書的包裝，所述說明書說明所述化合物與其它抗癌劑或細胞毒劑以及用于治療癌癥的療法聯(lián)合應(yīng)用。本發(fā)明進一步包括試劑盒形式的化合物1與一種或更多種另外藥劑的組合，例如，其中，它們被包裝在一起或放在單獨的包裝中作為試劑盒一起出售，或其中，它們被包裝為配制在一起。0024本發(fā)明的化合物可以與其它治療劑配制或共同施用，所述其它治療劑由于它們在解決與上述狀況有關(guān)的副作用中的特定有效性而被選擇。例如，本發(fā)明的化合物可以與防止惡心、超敏性和胃刺激的藥劑一起配制，所述藥劑如止吐劑，以及Hi和H2抗組胺劑。0025本發(fā)明的化合物可以含有一個或更多個額外的不對稱碳原子，并且因此以兩種或更多種立體異構(gòu)形式存在。本發(fā)明包括所有可能的單獨的立體異構(gòu)體、其單獨的互變異構(gòu)形式、連同其混合物。0026非對映異構(gòu)體的分離可以通過傳統(tǒng)的技術(shù)來實現(xiàn)，例如，通過本發(fā)明的化合物、或其合適的鹽或衍生物的立體異構(gòu)混合物的分步結(jié)晶、層析或H.P丄.C.。合適的話，化合物的單獨對映體還可以從相應(yīng)的光學(xué)純的中間體制備，或通過使用合適的手性載體對相應(yīng)的外消旋鹽進行拆分——例如通過H.P丄.C——而制備，或通過對由相應(yīng)的外消旋鹽與合適的光學(xué)活性酸或堿的反應(yīng)形成的非對映異構(gòu)鹽進行分步結(jié)晶而制備。0027也包含在本發(fā)明內(nèi)的是一類藥物組合物，其包括與一種或更多種非毒性的、藥學(xué)上可接受的載體和/或稀釋劑和/或佐劑(本文總體稱為"載體"材料)和其它活性成分——如果期望的話——結(jié)合的化合物1或其鹽。本發(fā)明的活性化合物可以通過任何合適的途徑施用，優(yōu)選地以適合這樣的途徑的藥物組合物的形式，并且以對意圖的治療有效的劑量施用。本發(fā)明的化合物和組合物可以這樣施用，例如，口服、經(jīng)粘膜、外部(topically)、經(jīng)直腸、經(jīng)肺部如通過吸入噴霧、或腸胃外，包括血管內(nèi)、靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下、肌肉內(nèi)、胸骨內(nèi)和輸注技術(shù)，以含有常規(guī)的藥學(xué)上可接受的載體、佐劑和賦形物(vehicle)的劑量單位制劑施用。例如，藥物載體可以包含甘露醇或乳糖和微晶纖維素的混合物。所述混合物可以含有另外的成分如潤滑劑，例如硬脂10酸鎂，和崩解劑如交聯(lián)聚維酮(crosspovidone)。載體混合物可以填充到明膠膠囊中或被壓制為片劑。0028本發(fā)明的藥學(xué)活性化合物可以按照藥劑學(xué)的常規(guī)方法來加工，以生產(chǎn)藥劑，用于施用給患者，包括人和其它哺乳動物。0029對于口服施用，藥物組合物可以是例如片劑、膠囊、懸浮劑或液體的形式。藥物組合物優(yōu)選地以含有特定量的活性成分的劑量單位的形式制造。這種劑量單位的例子是片劑或膠囊。例如，它們可以包含大約1至2000mg，優(yōu)選地大約1至500mg，更優(yōu)選地大約5至150mg的活性成分量。取決于患者的狀況和其它因素，對人或其它哺乳動物的適合的日劑量可以相差很大，但再一次地，其可以使用常規(guī)方法來確定。0030被施用化合物的量和使用本發(fā)明的化合物和/或組合物治療疾病狀況的給藥方案取決于多種因素，包括對象的年齡、體重、性別和醫(yī)學(xué)狀況，疾病的類型，疾病的嚴重程度，給藥途徑和頻率，以及所使用的具體化合物。因而，給藥方案可以相差很大，但是可以使用標準方法常規(guī)確定。大約0.01至500mg/kg體重，優(yōu)選地大約0.5和大約50mg/kg體重之間，最優(yōu)選地在約O.l至20mg/kg體重之間的日劑量可以是適當?shù)?。日劑量可以以每日l至4個劑量施用。0031為了治療目的，本發(fā)明的活性化合物通常與適合于所指出的施用途徑的一種或更多種佐劑聯(lián)合。如果經(jīng)口施用，化合物可以與乳糖、蔗糖、淀粉粉末、鏈垸酸纖維素酯、纖維素烷基酯、滑石、硬脂酸、硬脂酸鎂、氧化鎂、磷酸和硫酸的鈉鹽和鈣鹽、明膠、阿拉伯膠、藻酸鈉、聚乙烯吡咯垸酮和/或聚乙烯醇混合，然后制成片劑或裝入膠囊以方便施用。這種膠囊或片劑可以包括控釋制劑，如可以以活性化合物在羥丙基甲基纖維素中的分散體提供。0032在牛皮癬和其它皮膚病的情況下，可以優(yōu)選的是，將本發(fā)明化合物的外用制劑應(yīng)用到受侵襲區(qū)域，每日兩至四次。0033適合外用的制劑包括適合滲透通過皮膚的液體或半液體制劑(例如，搽劑、洗劑、軟膏、乳膏或糊劑)和適合施用到眼、耳或鼻的滴劑。本發(fā)明化合物的活性成分的合適的外用劑量是O.lmg到150mg，每日施用1至4次，優(yōu)選地每日1次或2次。對于外用，活性成分可以占制劑重量的0.001。/。至10。/。w/w，例如1%至2%，盡管其可以占制劑的多達10%w/w，但是優(yōu)選地不多于5。/。w/w，并且更優(yōu)選地為制劑的0.1%至1%。0034當被配制為軟膏時，所述活性成分可以與石蠟或水混溶性軟膏基一起使用?？蛇x地，活性成分可以配制在具有水包油乳膏基的乳膏中。如果需要，乳膏基的水相可以包含，例如，至少30。/。w/w的多元醇，如丙二醇、1,3-丁二醇、甘露醇、山梨醇、丙三醇、聚乙二醇和它們的混合物。外用制劑可以期望地包含增強活性成分吸收或滲透穿過皮膚或其它受侵襲區(qū)域的化合物。這種皮膚滲透增強劑的實例包括二甲亞砜和相關(guān)類似物。0035本發(fā)明的化合物也可以通過透皮裝置施用。優(yōu)選地，透皮施用將采用儲庫和多孔膜型貼劑或固體基質(zhì)類型貼劑來完成。在任一情況下，活性成分持續(xù)地從儲庫或微膠囊輸送穿過膜，進入可透過活性劑的粘合劑中，所述粘合劑與接受者的皮膚或粘膜接觸。如果活性劑通過皮膚吸收，則受控和預(yù)定的活性劑流被施用給接受者。在微膠囊的情況下，成膠囊劑也可以起膜的作用。0036本發(fā)明的乳劑的油相可以以已知方式由已知成分組成。雖然所述相可僅僅包含乳化劑，但是其可包含至少一種乳化劑與脂肪或油或者與脂肪和油兩者的混合物。優(yōu)選地，親水性乳化劑和充當穩(wěn)定劑的親脂性乳化劑一起被包含在內(nèi)。也優(yōu)選的是包含油和脂肪二者?？傊?，帶有或不帶有穩(wěn)定劑(一種或多種)的乳化劑(一種或多種)構(gòu)成所謂的乳化蠟，并且所述蠟與油和脂肪一起構(gòu)成所謂的乳化軟膏基，其形成乳膏制劑的油性分散相。適合用于本發(fā)明制劑的乳化劑和乳化穩(wěn)定劑包括吐溫(Tween)60、司盤(Span)80、十六醇十八醇混合物、肉豆蔻醇、單硬脂酸甘油酯、十二垸基硫酸鈉、單獨的二硬脂酸甘油酯或帶有蠟的二硬脂酸甘油酯、或本領(lǐng)域熟知的其它材料。0037用于制劑的合適的油或脂肪的選擇基于達到期望的美容特性，因為活性化合物在可能用于藥物乳劑制劑的大多數(shù)油中的溶解度非常低。因此，乳膏應(yīng)該優(yōu)選為非油脂的、非著色的并且可洗滌的產(chǎn)品，其具有適合的稠度以避免從管或其它容器中滲漏?？梢允褂弥辨溁蛑ф湹囊辉蚨?，如二-異己二酸酯、硬脂酸異十六酯(isocetylstearate)、椰子脂肪酸的丙二醇二酯、十四酸異丙酯、油酸癸酯、棕櫚酸異丙酯、硬脂酸丁酯、棕櫚酸2-乙基己酯、或支鏈酯的摻和物。取決于所需要的性質(zhì)，這些物質(zhì)可以單獨使用或聯(lián)合使用?？蛇x地，可以使用高熔點脂質(zhì)，如白軟石蠟和/或液體石蠟或其它礦物油。0038適合外部施用到眼睛的制劑也包括眼滴劑，其中活性成分溶解或懸浮在合適的載體中，特別是用于活性成分的水溶劑。活性成分優(yōu)選地以0.5至20%w/w，有利地0.5至10%w/w并且特別是大約1.5%w/w的濃度存在于這種制劑中。0039用于腸胃外施用的制劑可以是水性或非水性等張無菌注射溶液或懸浮液的形式。可以使用所提到的用于口服施用制劑的載體或稀釋劑中的一種或更多種，或通過使用其它合適的分散劑或潤濕劑和懸浮劑，從無菌粉末或顆粒制備這些溶液和懸浮液?；衔锟梢匀苡谒⒕垡叶?、丙二醇、乙醇、玉米油、棉籽油、花生油、芝麻油、苯甲醇、氯化鈉、黃蓍膠、和/或各種緩沖液中。其它的佐劑和施用模式在藥物領(lǐng)域內(nèi)是公知和廣泛知曉的?；钚猿煞忠部梢宰鳛榕c包括鹽水、葡萄糖或水的合適載體，或與環(huán)糊精(即Captisol)、助溶劑增溶(即丙二醇)或膠束增溶(即吐溫80)的組合物通過注射施用。0040無菌可注射制劑也可以是在無毒腸胃外可接受稀釋劑或溶劑中的無菌可注射的溶液或懸浮液，例如，作為在l,3-丁二醇中的溶液。在可接受的賦形物和可以使用的溶劑中，有水、林格氏液(Ringer'ssolution)和等張氯化鈉溶液。此外，無菌固定油常規(guī)用作溶劑或懸浮介質(zhì)。為此目的，可以使用任何溫和的固定油，包括合成的甘油一酯或甘油二酯。此外，脂肪酸如油酸在制備注射劑中是有用的。0041對于肺部施用，藥物組合物可以氣溶膠的形式施用或使用包含干粉氣溶膠的吸入器施用。0042用于直腸給藥的栓劑可以通過將藥物與合適的非刺激性賦形劑如可可脂和聚乙二醇混合來制備，所述賦形劑在通常的溫度下是固態(tài)但在直腸溫度下是液態(tài)并且因此將在直腸中融化并釋放藥物。0043藥物組合物可以經(jīng)受常規(guī)的制藥操作如滅菌和/或可以包含常規(guī)的佐劑，如防腐劑、穩(wěn)定劑、潤濕劑、乳化劑、緩沖劑等等。片劑13和丸劑可以用腸衣另外制備。這種組合物也可以包含佐劑，如潤濕劑、甜味劑、矯味劑以及芳香劑。0044本發(fā)明的藥物組合物包含化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽；和任選地額外藥劑，選自激酶抑制劑(小分子、多肽、抗體等)、免疫抑制劑、抗癌劑、抗病毒劑、抗炎劑、抗真菌劑、抗生素或抗血管高增殖化合物；以及任何藥學(xué)上可接受的載體、佐劑或賦形物。本發(fā)明的可選組合物包括本文所述式子的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽；和藥學(xué)上可接受的載體、佐劑或賦形物。這樣的組合物可以任選地包含一種或更多種額外的治療劑，其包括，例如，激酶抑制劑(小分子、多肽、抗體等)、免疫抑制劑、抗癌劑、抗病毒劑、抗炎劑、抗真菌劑、抗生素或抗血管高增殖化合物。0045可以用于本發(fā)明的藥物組合物的藥學(xué)上可接受的載體、佐劑和賦形物包括但不限于離子交換劑，氧化鋁，硬脂酸鋁，磷脂酰膽堿，自乳化藥物遞送系統(tǒng)(SEDDS)如D-a-維生素E聚乙二醇1000琥珀酸酯，用于藥物劑型的表面活性劑如吐溫或其它類似的聚合物遞送基質(zhì)，血清蛋白如人血清白蛋白，緩沖物質(zhì)如磷酸鹽，甘氨酸，山梨酸，山梨酸鉀，飽和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物，水，鹽或電解質(zhì)，如硫酸魚精蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、膠態(tài)二氧化硅、三硅酸鎂，聚乙烯吡咯烷酮，纖維素基物質(zhì)，聚乙二醇，羧甲基纖維素鈉，聚丙烯酸酯，蠟，聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段聚合物，聚乙二醇和羊毛脂。環(huán)糊精如ot-環(huán)糊精、卩-環(huán)糊精和Y-環(huán)糊精，或化學(xué)改性的衍生物如羥垸基環(huán)糊精，包括2-羥丙基-環(huán)糊精和3-羥丙基-環(huán)糊精，或其它溶化的衍生物，也可以有利地用于增加本文所述式子的化合物的輸送。實施例0046下列實施例和制劑描述制造和使用本發(fā)明的方式和方法。0047所有的反應(yīng)均在干燥的氮或氬氣氛下、在持續(xù)磁力攪拌下進行。所有的蒸發(fā)和濃縮均在減壓下在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上進行。商業(yè)試劑以收到的狀態(tài)使用而無需額外純化。溶劑是商業(yè)無水級的并且不需要進一步干燥或純化而使用。采用硅膠(EMerckKieselgel60,0.040-0.060mm)進行急驟層析(flashchromatography)。0048采用PhenomenexLunaC18S54.6mmx50mm柱或YMCS5ODS4.6x50mm柱進行分析型反相(RP)HPLC。在每一種情況下，使用4min的線性梯度(從100%A:%0B至0%A:100%B)，流動相體系如下A=90%H20/MeOH+0.2%H3P04;B=90%MeOH/H20+0.2%H3PO4，流速是4mL/min，并在220nm處檢測。0049在下列柱之一上，采用10%甲醇、90%水、0.1%TFA(溶劑A)和卯。/。甲醇、10%水、0.1%TFA(溶劑B)，用線性梯度洗脫，并在220nm處檢測，進行制備型反相(RP)HPLC:A-ShimadzuS5ODS-VP20x100mm柱，流速為20mL/min;B國YMCS5ODS30x100mm柱，流速為20mL/min;C-Phenomonex30x250mm柱，流速為10mL/min;D-YMCS5ODS20x250mm柱，流速為10mL/min;E-YMCS10ODS50x500mm柱，流速為50mL/min;或F-YMCS10ODS30x500mm柱，流速為20mL/mino0050通過iHNMR、RPHPLC、電噴射離子化(ESIMS)或大氣壓離子化質(zhì)譜(APIMS)來表征終產(chǎn)物。在400MHzBmker儀上獲得〗HNMR譜。在100MHz記錄"CNMR譜。場強以相對于溶劑峰的S單位(百萬分率，ppm)表示，并且如下命名峰的多樣性s，單峰；d，二重峰；dd，雙二重峰；dm，雙多重峰；t，三重峰；q，四重峰；brs，寬的單峰；m，多重峰。0051下列縮寫詞用于通常使用的試劑Boc或BOC:氨基甲酸叔丁酯；Fmoc:氨基甲酸9//-芴甲酉旨(9//-fluorenylmethylcarbamate);TEA:三乙胺；NMM:N-甲基嗎啉；Ms,甲磺酰基；DIEA或DIPEA:二異丙基乙胺或Hunig堿；NMP:7V—甲基吡咯垸酮；BOP試劑苯并三唑-l-基氧基三(三甲氨基)轔六氟磷酸酯；DCC:1,3-二環(huán)己基碳二亞胺；EDCI:1-(二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽；RT或rt:室溫；tR:保留時間；h，小時(一個或多個)；min:分鐘(一個或多個)；PyBroP:溴三吡咯烷基轔六氟磷酸酯；TBTU:0-(l/f-苯并三唑-l-基)-^^^，'-四甲基脲錯四氟硼酸酯；DMAP:4-7V,l二甲基氨基吡啶；HOBt或HOBT:羥基苯并三唑；Na(OAc)3BH:三乙酰氧基硼氫化鈉；HOAc:乙酸；TFA:三氟乙酸；LiHMDS:二(三甲代甲硅烷基)酰胺鋰；DMSO:二甲亞砜；MeCN:乙腈；MeOH:甲醇；EtOAc:乙酸乙酯；DMF:二甲基甲酰胺；THF:四氫呋喃；DCE:1,2-二氯乙垸；Et20:二乙醚；DCM:二氯甲烷或二氯甲烷(dichloromethaneormethylenechloride);w-CPBA:4-氯過氧苯甲酸。7\44-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基氧基)-3-氟苯基)-4-乙氧基-1-(4-氟苯基)-2-氧代-l，2-二氫吡錠-3-甲酰胺A)3，4-二氯吡啶甲酸如由Marzi,E.等以前所述(五,JOg.C7^附.2001,137~11376)，在0°C，將"-BuLi(正丁基鋰，33mL，52mmol，Aldrich，1.6M己烷)加到50mL乙醚(ether)中的2,2，6,6-四甲基哌啶(8.84mL,52mmol,Aldrich)中。在0。C攪拌30分鐘后，溶液被冷卻至-78。C并且加入3,4-二氯吡啶(7.0g，47mmol,Matrix)的5mL乙醚溶液。在-78。C攪拌2小時后，通過套管將二氧化碳(干冰)吹入反應(yīng)混合物中，此時溶液變得不均勻。在-78r將二氧化碳吹入反應(yīng)中10分鐘后，移開冷卻浴并且在C02吹入下使反應(yīng)混合物升至室溫。用飽和氯化銨水溶液(50mL)猝滅反應(yīng)并且在空氣氣氛下在室溫攪拌5分鐘。用水(150mL)稀釋反應(yīng)混合物并且用乙酸乙酯(2x75mL)萃取，以除去任何殘留的原料。用INHC1水溶液將水層酸化至pHl-2，并且用乙酸乙酯(2xl00mL)萃取。經(jīng)無水硫酸鎂干燥有機相并且在真空中濃縮，獲得3,4-二氯吡啶甲酸(3.5實施例lg,39%)，為黃色固體。'HNMR(DMSO-《)58.53(d,lH,J:5.2Hz):7.90(d，1H，/=5.2Hz);MS(ESI+)m/z192.08(M+H)+。B)3，4-二氯吡啶甲酰胺在8(TC，將3,4-二氯吡啶甲酸(3.5g,18mmol)在過量亞硫酰氯(10mL,AldrichReagentPlus99.5%)中的混合物攪拌1小時。冷卻至室溫后，在真空中濃縮反應(yīng)以除去過多的亞硫酰氯，并且隨后懸浮在乙醚(50mL)中。在0。C，將乙醚的?；热芤杭尤氲綒溲趸@(50mL)中。通過真空過濾收集產(chǎn)物，用水洗滌，然后用乙醚研制，獲得3,4-二氯吡啶甲酰胺(2.6g，76%)，為米黃色固體JHNMR(DMSO-^)S8.50(d,1H,J=5.2Hz)，8.12(brs,1H)，7.83(d,1H，5.2Hz)，7.82(brs，1H);MS(ESI+)m/z191.10(M+H)+?？蛇x地，可以根據(jù)下述步驟，從3，4-二氯吡啶直接制備3，4-二氯吡啶甲酰胺。在0°C，在15分鐘內(nèi)，通過注射器向2,2,6,6-四甲基哌啶(3Ug,0.22mol)的二乙醚(400mL)溶液加入己烷中的"-BuLi(1,6M，138.0mL，0.22mol)。在0。C，將得到的溶液攪拌0.5小時，并且在-78。C攪拌0.5小時。然后，在15分鐘內(nèi)，通過注射器向此混合物緩慢加入3，4-二氯吡啶(29.6g,0.20mol)的二乙醚(20mL)溶液。在-78。C將得到的混合物攪拌2小時，然后加入異氰酸根合三甲基硅烷(純度85%，40.0mL，0.30mol)。異氰酸根合三甲基硅垸的來源是TCI。加入后，除去冷卻浴，并且在1小時內(nèi)使反應(yīng)混合物升至室溫。用乙酸(40g，0.67mol)和200mL水猝滅反應(yīng)混合物。使混合物攪拌過夜并且通過過濾收集形成的白色固體并用水洗滌。用乙酸乙酯(3x300mL)萃取濾液。將先前收集的固體溶解在合并的有機層中，并且用鹽水(2x200mL)洗滌得到的溶液，經(jīng)MgS04干燥并在真空中濃縮。殘留物懸浮在200mL二乙醚中并超聲處理。通過過濾收集殘余固體并用最小量的二乙醚洗滌，提供3,4-二氯吡啶甲酰胺(14.8g，39%)。C)4-(4-氨基-2-氟苯氧基)-3-氯吡啶甲酰胺向4-氨基-2-氟苯酚(9.3g,73mmol，3BMedicalSystems,3B3290)的DMF(100mL)溶液加入叔丁醇鉀(8.8g，79mmol)。室溫下攪拌30分鐘后，加入3，4-二氯吡啶甲酰胺(10g，52mmol)。在50。C，將反應(yīng)混合物攪拌2.5小時。將反應(yīng)冷卻至室溫后，用400mL乙酸乙酯稀釋混合物，并且用飽和碳酸氫鈉水溶液(400mL)洗滌。用300mL乙酸乙酯反萃取水層。用10%氯化鋰水溶液洗滌合并的有機相，經(jīng)無水硫酸鈉干燥，并且在真空中濃縮。得到的褐色固體懸浮在乙酸乙酯中，過濾并且用乙醚洗滌，得到產(chǎn)物，為棕褐色固體(7.4g)。在真空中濃縮濾液，然后通過急驟層析在硅膠上純化(2%甲醇/乙酸乙酯)。將得到的褐色固體用乙醚研制，得到額外4.3g的4-(4-氨基-2-氟苯氧基)-3-氯吡啶甲酰胺(聯(lián)合收率79%)，為淺棕褐色固體。&NMR(CD3OD)S8.29(d,1H，5.6Hz),7,00(t，1H，/=8.8Hz)，6.79(d，1H，5.6Hz)，6.63-6.55(m,2H);MS(ESI+)m/z282.21(M+H)+。D)4-碘-2-甲氧基吡啶甲醛(nicotinaldehyde)在-3(TC至-40。C，在N2覆蓋下，通過套管向二異丙胺(260g，2.57mol)的無水THF(6.5L)溶液滴加"-BuLi(156g,2.45mol)。使得到的溶液升至0。C并在此溫度下攪拌35分鐘。然后將該溶液冷卻至-78'C并且滴加2-氟吡啶(250g,2.57mol，Alfa)。在-78。C，將反應(yīng)混合物攪拌2小時。然后在-2(TC，在N2下，通過套管將該混合物加入到碘(654g,2.57mol)的無水THF(1.96L)溶液中。反應(yīng)完成后，用冰水猝滅混合物，并用EtOAc萃取。用硫代硫酸鈉洗滌有機層，之后用水和鹽水洗滌。然后干燥有機層(Na2S04)并且在真空中濃縮，獲得2-氟-3-碘吡啶(450g，78%)，為固體，其純度足以用在隨后的步驟中。在-8至-10。C，在N2覆蓋下，通過套管向二異丙胺(345mL，249g,2.46mol)的無水THF(5L)溶液滴加"-BuLi(880mL,158g,2.46mol)。在-l(TC將混合物攪拌30分鐘，冷卻至-78。C并用2-氟-3-碘吡啶(500g,2.24mol)的無水THF(2L)溶液滴加處理。在添加之后，反應(yīng)混合物升至-60。C并且在該溫度維持2小時。然后，將混合物冷卻至-78。C，滴加甲酸乙酯(183g，2.47mol)處理，之后用MeOH(1.5L)中的甲醇鈉(149g,2.75mol)處理，并升至環(huán)境溫度。用冰水猝滅反應(yīng)混合物，并用EtOAc萃取。分離層并且用水和鹽水洗滌有機相，干燥(Na2S04)并在真空中濃縮。通過急驟層析在硅膠上純化殘余物，得到4-碘-2-甲氧基吡啶甲醛(380g，64%)，為固體。可選地，可以根據(jù)在US5,491,237(WO95/29917)中描述的步驟制備4-碘-2-甲氧基吡徒甲醛。E)4-碘-2-氧代-l，2-二氫吡啶-3-甲醛在500mL乙腈中，將4-碘-2-甲氧基吡啶甲醛(25g,95mmol)和碘化鈉(31.0g，285mmol,Aldrich)—起攪拌。在15分鐘內(nèi)向該溶液滴加三甲基氯硅烷(36.0mL,285mmol,Aldrich^99%)。在室溫將反應(yīng)混合物攪拌2小時，然后在真空下濃縮。產(chǎn)物懸浮在乙酸乙酯、水和飽和碳酸氫鈉水溶液中，然后過濾，獲得暗褐色固體。將此固體用乙腈研制，產(chǎn)生4-碘-2-氧代-l，2-二氫吡啶-3-甲醛(21.3g，90%)，為黃色固體(互變異構(gòu)體的混合物)。MS(ESI+)m/z250.04(M+H)+。19F)l-(4-氟苯萄-4-碘-2-氧代-l，2-二氫吡啶-3-甲醛在800mL甲苯中，將4-碘-2-氧代-l，2-二氫吡啶-3-甲醛(16.0g，64.3mmol)、4-氟苯基硼酸(26.8g，193mmol,Aldrich)、醋酸銅(II)(23.4g,129mmol,Aldrich)和肉豆蔻酸(58.7g,257mmol,Aldrich)—起攪拌。向該溶液加入2,6-二甲基吡啶(60mL,514mmol,Aldrich)，并將反應(yīng)劇烈攪拌1天。加入額外5g4-氟苯基硼酸并且劇烈攪拌反應(yīng)另外3天。濃縮反應(yīng)混合物，然后懸浮在10%甲醇/乙酸乙酯中。加入Cdit^并攪拌混合物5分鐘。接著，通過Cdite⑧塞子過濾混合物，濃縮并懸浮在乙酸乙酯和水中。再次通過Cdit^過濾混合物，以除去已沉淀出的額外的銅，用乙酸乙酯充分洗滌。用1NHC1水溶液洗滌濾液，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并在真空下濃縮。將得到的固體用乙酸乙酯研制，產(chǎn)生9.25g(42%)的l-(4-氟苯基)-4-碘-2-氧代-l,2-二氫吡啶-3-甲醛，為黃色固體。在真空中濃縮濾液，再次將殘留的固體用乙酸乙酯研制，產(chǎn)生額外5.75g(總收率68%)的期望產(chǎn)物，為黃色固體。iHNMR(DMSO-^)S9.57(s，1H)，7.68(d,1H,■/=7.2Hz)，7.58-7.54(m，2H),7.40(t，2H，《/=8.8Hz),7.02(d，1H，J=7.2Hz);MS(ESI十)m/z344.13(M+H)十。G)l-(4-氟苯基)-4-碘-2-氧代-l，2-二氫吡啶-3-甲酸在0。C，在各35mL的THF、叔丁醇和水中劇烈攪拌1-(4-氟苯基)-4-碘-2-氧代-l，2-二氫吡啶-3-甲醛(10.0g，29.2mmol)和磷酸二氫鈉(10.1g,73mmol,Aldrich)。將2-甲基-2-丁烯(45.2mL,2.0M，在THF中,Aldrich)加入反應(yīng)混合物中，隨后加入亞氯酸鈉(6.06g，67.1mmol,Aldrich)。除去冰浴并將反應(yīng)混合物升至室溫，非?？焖俚財嚢?。幾分鐘后，期望產(chǎn)物開始沉淀出溶液。持續(xù)攪拌l小時，然后加入20mL1NHC1水溶液，并且繼續(xù)攪拌另外5分鐘。期望產(chǎn)物被濾出，然后用水、乙酸乙酯和乙醚洗滌。獲得濾液并且分離層。用乙酸乙酯萃取水層。合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥、過濾并在真空中濃縮。得到的固體懸浮在乙酸乙酯中，過濾并用乙酸乙酯和乙醚洗滌，以產(chǎn)生額外的期望產(chǎn)物。合并淺黃色固體，產(chǎn)生8.22g(78%)的1-(4-氟苯基)-4-碘-2-氧代-1,2-二氫吡啶-3-甲酸(純度92%，殘留8%原料)。將這種材料溶解在最小量的1NNaOH水溶液中。加入乙酸乙酯并且將混合物劇烈攪拌5分鐘。分離層，用乙酸乙酯萃取水層。使用濃HCl酸化水層至pHl，同時攪拌。收集沉淀出溶液的淺黃色固體，用水、乙酸乙酯、二乙醚洗滌，然后在真空下干燥，獲得7.33g(70%)的1-(4-氟苯基)-4-碘-2-氧代-l,2-二氫吡啶-3-甲酸(純度95.4%，HPLC)。NMR(DMSO-4)513.53(s，1H)，7.52—7.49(m,3H)，7.38(t,2H,/=8.8Hz)，6.81(d,1H，/=7.2Hz);MS(ESI十)m/z360.14(M+H)+。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>H)3-氯-4-(2-氟-4-(l-(4-氟苯基)-4-碘-2-氧代-l，2-二氫吡啶-3-甲酰胺基)苯氧基)吡啶甲酰胺向6mL甲苯中的l-(4-氟苯基)-4-碘-2-氧代-l，2-二氫吡啶-3-甲酸(3.7g，10mmol)加入亞硫酰氯(10mL，AldrichReagentPlus99.5%)。室溫下攪拌2.5小時后，混合物變?yōu)椴痪鶆?，然后在真空中濃縮。將甲苯(3mL)加入到殘余物中，并且將混合物在真空中濃縮以除去過多的亞硫酰氯(進行兩次)。然后在高真空下將粗制的?；雀稍?5分鐘。在?；雀稍锿瑫r，將4-(4-氨基-2-氟苯氧基)-3-氯吡啶甲酰胺(2.5g,8.9mmol)溶解在THF(50mL)和DMF(3mL)中。溶液冷卻至0。C，然后加入TV,iV-二異丙基乙胺(3.1mL,18mmo1，Aldrich，99.5%，再蒸餾的)。然后在30分鐘內(nèi)加入?；?，其為固體。添加完成后，除去冷浴并在室溫下攪拌反應(yīng)混合物15分鐘，然后用飽和碳酸氫鈉水溶液(30mL)猝滅。加入水(30mL)以溶解鹽，并用乙酸乙酯(lx100mL)萃取混合物。經(jīng)無水硫酸鈉干燥有機相并在真空中濃縮。通過急驟層析在硅膠(2%甲醇/乙酸乙酯)上純化粗制的產(chǎn)物，獲得4.9g期望產(chǎn)物連同少量3-氯_4-(4-(4-氯-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氫吡啶-3-甲酰胺基)-2-氟苯氧基)吡啶甲酰胺，為灰白色固體(基于碘化物，89%)。'HNMR(CD30D)S8.34(d,1H,/=5.6Hz)，7.92(dd，1H，/=12.4，2.4Hz)，7.51-7.47(m,4H),7.37-7.29(m,3H),6.99(d,1H,/=7.2Hz)，6.86(d,1H，J=5.6Hz);MS(ESI+)m/z623.08(M+H)+。I)3-氯-4-(4-(4-乙氧基-l-(4-氟苯基)-2-氧代-l，2-二氫吡啶-3-甲酰胺基)-2-氟苯氧基)吡啶甲酰胺在N2下，將氫化鈉(1.89g,47.2mmol,60%分散體，在礦物油中，Aldrich)緩慢加入到乙醇(77mL，Aldrich>99.5%200標準強度)和THF(77mL)的溶液中，在室溫下將得到的混合物攪拌5分鐘。然后將乙醇鈉溶液加入到3-氯-4-(2-氟-4-(l-(4-氟苯基)-4-碘-2-氧代-l,2-二氫吡啶-3-甲酰胺基)苯氧基)-吡啶甲酰胺和3-氯-4-(4-(4-氯-l-(4-氟苯基)-2-氧代-l，2-二氫吡啶_3-甲酰胺基)-2-氟苯氧基)吡啶甲酰胺(22.6g,~36.3mmol)的混合物中并在室溫攪拌1小時。在真空下濃縮反應(yīng)混合物。得到的粗制固體懸浮在乙酸乙酯、飽和碳酸氫鈉水溶液和水中(以溶解任何沉淀的鹽)。超聲處理并攪拌該混合物，直到殘余的固體變成可濾過的粉末。該粉末被過濾出，產(chǎn)生17.2g(88M)的期望產(chǎn)物，為淺黃色固體。分離殘余濾液層。用乙酸乙酯萃取水層。在無水硫酸鈉上干燥合并的有機層并在真空下濃縮。將得到的固體用乙酸乙酯研制，超聲處理并過濾，得到額外3.02g期望產(chǎn)物，為淺褐色固體。&NMR(CD3OD)S8.34(d,1H,/=5.6Hz),7.94(dd,1H,/=12.4,2.4Hz),7.80(d,1H,/=8Hz),7.48—7.46(m，3H),7.31—7.28(m，3H)，6.86(d,1H，5.6Hz)，6.61(d,1H，/=7.2Hz),4.34(q,2H,/=7.2Hz),1,45(t，3H，《/=7.2Hz);MS(ESI+)m/z541.11(M+H)+。J)7V-(4-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基氧基)-3-氟苯基)-4-乙氧基-l-(4-氟苯基)-2-氧代-l，2-二氫吡啶-3-甲酰胺在0。C，向乙酸乙酯(16mL)、乙腈(1611^)和水(811^)中的3-氯-4-(4-(4-乙氧基-l-(4-氟苯基)-2-氧代-l,2-二氫吡啶-3-甲酰胺基)-2-氟苯氧基)吡啶甲酰胺(1.2g,2.1mmol)加入二乙酸碘代苯(820mg,2.6mmol，Aldrich)。室溫下攪拌2小時后，過濾反應(yīng)以收集粗制產(chǎn)物。用另外的乙酸乙酯洗滌固體。用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌濾液并且經(jīng)無水硫酸鈉干燥有機相并在真空下濃縮。合并沉淀和濾液并通過急驟層析在硅膠(2%甲醇/氯仿)上純化，得到標題化合物(810mg,74%)，為白色固體。'HNMR(DMSO-^)S10.57(s,1H),7.83—7.79(m,2H)，7.67(d,1H，《/=5.6Hz),7.41-7.38(m,3H)，7.36-7.22(m，3H),6.44(d，1H，J=7.6Hz)，6.36(brs,2H)，5.86(d,1H，J=6.0Hz)，4.18(q,2H，J=7.2Hz),1.23(t，3H,7.2Hz);MS(ESI+)m/z513.09(M+H)+。試驗0052本發(fā)明的化合物的藥理學(xué)特性可以通過許多藥理學(xué)試驗來確定。已經(jīng)應(yīng)用根據(jù)本發(fā)明的化合物和/或其鹽進行了下列示范性藥理學(xué)試驗。Met激酶分析0053用于Met激酶分析的溫育混合物含有桿狀病毒表達的GST-Met激酶、合成底物polyGlu:Tyr(4:l)、ATP、ATP個33p和緩沖液，所述緩沖液含有]^11++、DTT、BSA和Tris。在3(TC將反應(yīng)溫育60分鐘并通過添加冷的三氯乙酸(TCA)至終濃度8%而終止反應(yīng)。使用濾器伴侶(Filtermate)通用收集器(PackardInstrumentCo.，Meriden，CT)將TCA沉淀物收集到GF/Cunifilter板(PackardInstrumentCo.，Meriden,CT)上，并且使用TopCount96/3S4-孔液體閃爍計數(shù)器(PackardInstrumentCo.，Meriden,CT)定量濾器。產(chǎn)生劑量反應(yīng)曲線以確定抑制50%的激酶活性所需要的濃度(IC—50)?；衔镆?0mM溶于二甲亞砜(DMSO)中并且在10個濃度下進行評價，每一濃度進行兩次。試驗中DMSO的終濃度是1.7%。從非線性回歸推出IC—50值。試劑底物混合物終濃度儲存溶液Tris-HCl,(1M,pH7.4)MnCl2(1M)/mMDTT(1M)BSA(羅mg/ml)polyGlu4/tyr(10mg/ml)ATP(lmM)緩沖液酶混合物20ul1MDTT"/斷.2—m/」=200ul1MTris-HCL,pH適量"附/緩#掩7.420ullOOmg/mlBSA適量贏/砂00547V-(4-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基氧基)-3-氟苯基)-4-乙氧基-l-(4-氟苯基)-2-氧代-l,2-二氫吡啶-3-甲酰胺(化合物l)抑制Met激酶，其ICso值是3.5nM。體力效力測定0055評價AK4-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基氧基)-3-氟苯基M-乙氧基-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1，2-二氫吡啶-3-甲酰胺(化合物l)對于GTL-16胃腫瘤異種移植物和U87惡性膠質(zhì)瘤腫瘤異種移植物的體內(nèi)效力。如圖1中說明的，化合物1是有活性的，如在6.25mg/kg至50mg/kg范圍的多個劑量水平下對GTL-16人胃癌模型的50%以上的腫瘤生長抑制(TGI)所定義的，所述TGI持續(xù)至少一個腫瘤倍增時間。當每日給藥1次持續(xù)14天時，在所有這些劑量水平下沒有觀察到明顯毒性。在該研究中，25mg/kg和50mg/kg導(dǎo)致完全的腫瘤停滯。在以前描述的研24究中——其中使用100mg/kg對抗該模型，沒有觀察到活性增加。因此，25mg/kg是觀察到的化合物1對GTL-16腫瘤異種移植物的最大有效劑量水平。在此研究中，在6.25mg/kg檢測的最低劑量水平也導(dǎo)致大于50%的TGI，因此，限定了該研究中的最低有效劑量(MED)水平。也針對U87人惡性膠質(zhì)瘤模型檢測化合物1，所述模型是基于Met活化的HGF自分泌機制的Met驅(qū)動腫瘤。如圖2所示，在50和25mg/kg都觀察到完全的腫瘤停滯，這與對GTL-16腫瘤異種移植物觀察到的活性相似。圖l.對于GTL-16胃癌異種移植物的抗腫瘤活性。圖2.對于U87惡性膠質(zhì)瘤異種移植物的抗腫瘤活性。已經(jīng)將本發(fā)明的化合物(化合物1)與其它化合物——其已發(fā)現(xiàn)為有用的Met激酶抑制劑，如在US2005/0245530中公開的那些——相比較，并且發(fā)現(xiàn)本發(fā)明化合物特別有利。例如，已發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物與1(4-(2-氨基吡啶-4-基氧基)-3-氟苯基)-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氫吡啶-3-甲酰胺鹽酸鹽(化合物2)相比特別有利，原因在于藥動學(xué)特征改善和對于某些CYP450同工酶的抑制降低。細胞色素P450分析應(yīng)用重組人CYP同工型，在體外評價化合物抑制負責(zé)藥物代謝的主要人細胞色素P450s(CYPs)的能力。使用3-氰基-7-乙氧基香豆素(CYP1A2，CYP2C19)、7-甲氧基-4-三氟甲基香豆素(CYP2C9)或3-[2-(iV,iV-二乙基-7V-甲氨基)乙基]-7-甲氧基-4-甲基香豆素(CYP2D6)作為底物，測量從桿狀病毒感染的昆蟲細胞制備的cDNA-來源CYP酶的抑制。用兩種底物7-芐氧基-4-三氟甲基香豆素(BFC)和試鹵靈芐基醚(resorufinbenzylether)(BzRes)評價CYP3A4抑制。檢測每一種模型底物的單一濃度(近似表觀《m，除了BFC，其在表觀i^之下被檢測)和間隔大約1/2個對數(shù)單位的測試化合物的多種濃度，進行兩次。通過7-羥基-3-氰基香豆素、3-[2-(A^V-二乙氨基)乙基]-7-羥基-4-甲基香豆素、7_羥基_4-三氟甲基香豆素或試鹵靈的產(chǎn)生分析模型底物的代謝，并且通過熒光檢測進行測定。測試在NADPH產(chǎn)生系統(tǒng)的存在下、在96孔微量滴定板中進行。陽性對照樣品包括在這些研究中。陽性對照值在所有測試的歷史范圍之內(nèi)。利用XLfit曲線擬合軟件計算IC5。值。在小鼠中獲得的藥代動力學(xué)參數(shù)。在8小時口腔暴露研究中，單一劑量的50mg/kg化合物作為70%PEG400/30y。水中的溶液通過口服強飼被遞送至禁食成年雄性Balb/C小鼠(每種化合物"=2或3)。在口服給藥后的0.5、1、4、8小時的時間點，從每只小鼠收集三個血清樣品。最初的兩個樣品通過眼球后放血獲得(~100^L/20-25g小鼠)，而第三個樣品通過心臟穿刺獲得。使血液樣品在冰上凝固，離心，然后收集血清。在分析之前，血漿樣品被儲存在-2(TC。通過HPLC連接串聯(lián)質(zhì)譜(LC/MS/MS)分析血漿樣品的母體化合物。<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>權(quán)利要求1.具有下列式I的化合物或其鹽。2.藥物組合物，其包含在藥學(xué)上可接受的載體中的、治療有效量的具有下列式I的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其中所述藥學(xué)上可接受的載體由微晶纖維素和甘露醇或乳糖組成。4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的藥物組合物，進一步包含潤滑劑。5.根據(jù)權(quán)利要求2、3或4之一所述的藥物組合物，進一步包含崩解劑。6.具有下列式I的化合物或其鹽?；蚱潲}在制造用于治療癌癥的藥物中的應(yīng)用。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其中所述癌癥依賴于Met活化，其中所述Met活化由基因擴增、活化的Met突變和/或HGF刺激來調(diào)節(jié)。8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的應(yīng)用，其中所述癌癥是膀胱癌、乳腺癌、結(jié)腸直腸癌、胃癌、頭頸癌、腎癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、胰腺癌/膽囊癌、前列腺癌、甲狀腺癌、骨肉瘤、橫紋肌肉瘤、MFH/纖維肉瘤、惡性膠質(zhì)瘤/星形細胞瘤、黑色素瘤或間皮瘤。9.具有下列式I的化合物或其鹽，用于治療癌癥的療法中。10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的化合物，用于治療膀胱癌、乳腺癌、結(jié)腸直腸癌、胃癌、頭頸癌、腎癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、胰腺癌/膽囊癌、前列腺癌、甲狀腺癌、骨肉瘤、橫紋肌肉瘤、MFH/纖維肉瘤、惡性膠質(zhì)瘤/星形細胞瘤、黑色素瘤或間皮瘤的療法中。全文摘要本發(fā)明涉及用于調(diào)節(jié)Met激酶的吡啶酮化合物，其具有下列結(jié)構(gòu)(I)，并且進一步涉及包含所述化合物的藥物組合物以及通過施用這種化合物治療增殖性疾病如癌癥的方法。文檔編號C07D213/82GK101535264SQ200780041420公開日2009年9月16日申請日期2007年11月8日優(yōu)先權(quán)日2006年11月8日發(fā)明者G·M·施羅德,R·M·波茲萊里,Z-W·蔡申請人:百時美施貴寶公司