專利名稱：：一種丹酚酸a的精制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬中藥精制方法，主要涉及一種中藥丹酚酸A的精制方法。
背景技術(shù)：
：丹參是最常用的中藥藥材之一。用于治療心絞痛、高血壓、冠心病及中風(fēng)等心腦血管疾病。以丹參飲片或者丹參粗提取物入藥的中藥制劑有很多，如復(fù)方丹參片、復(fù)方丹參滴丸、丹參注射液、香丹注射液等，另外也有利用從丹參中分離得到純化合物或其鹽類制成的制劑，如丹參素鈉注射液、丹酚酸B針劑等。近年來，隨著藥理研究的深入，丹酚酸A的多種藥理活性被發(fā)現(xiàn)。如甄永蘇等發(fā)現(xiàn)丹酚酸A具有抗腫瘤活性；杜冠華等發(fā)現(xiàn)丹酚酸A對大鼠離體心肌缺血再灌注損傷具有明顯的保護(hù)作用，對小鼠腦缺血再灌注引起的腦損傷有保護(hù)作用，對樟柳堿或冬莨菪堿引起的小鼠記憶獲得障礙有明顯的改善作用等；陶文(TaoWen)等發(fā)現(xiàn)丹酚酸A對四氯化碳引起的大鼠肝損傷具有保護(hù)作用。李志剛等還開發(fā)了治療心血管疾病的丹參丹酚酸A片劑及注射劑。比較已申請的制備丹酚酸A的相關(guān)專利(見表1)，均包含兩種或兩種以上不同原理的分離方法(層析分離和溶劑萃取、蛋白吸附和溶劑萃取)，因而工藝步驟較多，需要多種儀器設(shè)備。表l.已申請專利的比較。<table>tableseeoriginaldocumentpage3</column></row><table>由于丹酚酸A在藥材中含量很低，工藝步驟越多，過程損失越大。另外，柱層析在工業(yè)大生產(chǎn)上運(yùn)用有一定的局限性，不能很好地滿足工業(yè)上生產(chǎn)丹酚酸A制劑的需要。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明針對上述現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，提供了一種丹酚酸A的精制方法，通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)采用有機(jī)溶劑萃取法萃取丹參水提液獲取丹酚酸A粗提物(有機(jī)相)、采用酸水萃取法去除雜質(zhì)、含精制丹酚酸A的有機(jī)相經(jīng)濃縮、干燥后獲得淡黃色粉末，即高純度丹酚酸A。具體涉及以下步驟1、萃取純化采用有機(jī)溶劑萃取富集丹參水提液中的丹酚酸A，再經(jīng)酸水多次反萃取去除雜質(zhì)，得到高純度的丹酚酸A。(1)取待萃取的丹參水提液，加有機(jī)溶劑進(jìn)行萃取，分離含丹酚酸A的有機(jī)溶劑層。(2)取含丹酚酸A的有機(jī)溶劑層直接或濃縮后用酸水多次萃取去除雜質(zhì)，分離含精制丹酚酸A的有機(jī)溶劑層。其中步驟(1)中的丹參水提液是采用常規(guī)回流、溫浸等提取方式從丹參藥材中提取獲取的。所用有機(jī)溶劑為乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯等乙酸酯類溶劑，萃取次數(shù)為210次。用于萃取的有機(jī)溶劑量為丹參水提液量的15倍。步驟(2)中所調(diào)節(jié)酸水pH值用酸為無機(jī)酸，酸水pH值范圍為15，萃取次數(shù)為310次。2、濃縮干燥濃縮采用減壓濃縮或者常壓濃縮，干燥采用真空干燥或冷凍干燥。本發(fā)明的丹酚酸A純化方法，利用丹酚酸A、原兒茶醛的極性比丹參素、丹酚酸B的極性小的性質(zhì)，采用有機(jī)溶劑在pH46條件下萃取富集得到主要含丹酚酸A和原兒茶醛的丹酚酸A粗提物，再利用丹酚酸A和原兒茶醛酸性條件下在水中溶解度的不同，經(jīng)酸水多次反萃取去除原兒茶醛，獲取高純度的丹酚酸A，從而達(dá)到分離純化丹酚酸A的目的。該方法純化回收率達(dá)95%%以上，丹酚酸A的純度達(dá)90%以上(以藥材重量計(jì)，收率為0.3%以上)，最主要的是該工藝中主要純化手段只為液液萃取，從而使工藝和所需設(shè)備更為簡單，適合工業(yè)大生產(chǎn)。該方法精制回收率高、純度好、性能穩(wěn)定、工藝簡單、生產(chǎn)成本低的精制方法圖1丹酚酸A粗提物HPLC色譜圖。圖2丹酚酸A純度檢査色譜圖。具體實(shí)施方案實(shí)施例l:丹酚酸A的提取純化方法，其步驟為1.取丹參飲片100g，加入1L水，回流提取2小時(shí)，過濾，濾渣再加入0.8L水，回流提取1.5小時(shí)，過濾，合并兩次濾液，70。C減壓濃縮至約50mL，用等體積的乙酸乙酯萃取3次，合并有機(jī)相，濃縮至l/3體積；2.鹽酸調(diào)節(jié)水pH值為1，與步驟1中濃縮的有機(jī)相萃取5次，舍去水相，減壓濃縮有機(jī)相至浸膏狀，冷凍干燥得淡黃色粉末，即為丹酚酸A。其純度為92%，回收率為97%。結(jié)果參見圖1和圖2，圖中峰A為丹酚酸A。實(shí)施例2:除萃取溶劑為乙酸丙酯，加入的乙酸丙酯量為丹參水提液3倍量外，其余步驟與實(shí)施例l相同。其純度為93%,回收率為95%。實(shí)施例3:除萃取溶劑為乙酸丁酯，萃取次數(shù)為5次外，其余步驟與實(shí)施例1相同。其純度為93%,回收率為95%。實(shí)施伊j4:除步驟2中所用酸水溶液pH值為2，千燥采用真空干燥(5(TC，真空度-0.09MPa)，其余步驟與實(shí)施例l相同。其純度為95%，回收率為95%。實(shí)施例5:除步驟2中所用酸水溶液pH值為3夕卜，其余步驟與實(shí)施例1相同。其純度為91%，回收率為96%。實(shí)施例6:與除步驟2中酸水萃取次數(shù)為7次外，其余步驟與實(shí)施例l相同。其純度為94%，回收率為95%。實(shí)施例7:除步驟2中酸水萃取次數(shù)為IO次外，其余步驟與實(shí)施例l相同。其純度為96%,回收率為95%。實(shí)施例8:除步驟2中所用無機(jī)酸為硫酸外，其余步驟與實(shí)施例l相同。其純度為92%，回收率為95%。實(shí)施例9:除步驟2中所用無機(jī)酸為磷酸，酸水pH值為4外，其余步驟與實(shí)施例1相同。其純度為90%，回收率為95%。權(quán)利要求1.一種丹酚酸A的精制方法，其特征是通過以下步驟實(shí)現(xiàn)(1)采用常規(guī)回流方式或溫浸的提取方式從丹參藥材中提取丹參水提液，用有機(jī)溶劑萃取法萃取丹參水提液中的丹酚酸A，分離含丹酚酸A的有機(jī)溶劑層作為有機(jī)相，采用酸水萃取法去除雜質(zhì)，獲得含丹酚酸A的有機(jī)溶劑相，所用酸水的pH值為1～5，(2)將含丹酚酸A的有機(jī)相經(jīng)減壓濃縮、真空干燥后獲得淡黃色粉末，即高純度丹酚酸A。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種丹酚酸A的精制方法，其特征是步驟(l)所述的丹參水提液的pH值為4~6。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種丹酚酸A的精制方法，其特征是步驟(l)所述的有機(jī)溶劑萃取次數(shù)為2~10次，用于萃取的有機(jī)溶劑量為丹參水提液量的15倍，所用的有機(jī)溶劑為乙酸酯類溶劑。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種丹酚酸A的精制方法，其特征是萃取所用的有機(jī)溶劑為乙酸乙酯、乙酸丙酯或乙酸丁酯。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種丹酚酸A的精制方法，其特征是步驟(l)中調(diào)節(jié)酸水pH所用的酸為無機(jī)酸，萃取次數(shù)為310次。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種丹酚酸A的精制方法，其特征是步驟(2)所述的濃縮采用常壓濃縮。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種丹酚酸A的精制方法，其特征是步驟(2)所述的干燥采用冷凍干燥。全文摘要本發(fā)明提供一種丹酚酸A的精制方法，采用有機(jī)溶劑萃取法萃取丹參水提液獲取丹酚酸A粗提物、用酸水萃取去雜質(zhì)、有機(jī)相經(jīng)濃縮、干燥后獲得高純度丹酚酸A。本發(fā)明方法純化回收率達(dá)95％％以上，丹酚酸A的純度達(dá)90％以上(以藥材重量計(jì)，收率為0.3％以上)，最主要的是該方法中主要純化手段只為液液萃取，從而使工藝和所需設(shè)備更為簡單，適合工業(yè)大生產(chǎn)。該方法設(shè)計(jì)合理，精制回收率高、純度好、性能穩(wěn)定、制備工藝簡單、生產(chǎn)成本低的。文檔編號C07C67/00GK101353306SQ20081012078公開日2009年1月28日申請日期2008年9月5日優(yōu)先權(quán)日2008年9月5日發(fā)明者徐金鐘,瞿海斌,程翼宇,青邵申請人:浙江大學(xué)