專利名稱：：新型二苯乙烯類化合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一類新型的二苯乙烯類化合物，及其制備方法和它們在制備治療腫瘤的藥物中的用途。
背景技術(shù)：
：已知結(jié)構(gòu)中含有二苯乙烯母核的化合物具有預(yù)防心臟病、抑制血小板凝聚、調(diào)控脂質(zhì)和脂蛋白代謝、抗氧化及治療腫瘤等方面的作用，這些作用被PhilippedeMedina等人在#ed6Te瓜2005，4《287-291;MarinellaRoberti等人在/.Oe瓜2003,46,3546-3554;AGosslau等人在5r"is//oi/77WCa/7car.2005，513—521中公開報(bào)道。近年來，化學(xué)家們以二苯乙烯為母核設(shè)計(jì)合成了一系列具有重要生理活性的二苯乙烯類化合物，這類化合物對良性、惡性腫瘤表現(xiàn)出較好的預(yù)防和治療作用。M.Cushman等人曾在,#edC/e瓜1991，■《2579-2588中報(bào)道過，具有二苯乙烯母核的(f)-3，4，5-三甲氧基-4'-氨基二苯乙烯具有抗腫瘤活性。本發(fā)明人經(jīng)過長期試驗(yàn)研究，發(fā)現(xiàn)一類抗腫瘤活性良好的新型二苯乙烯類化合物，并基于該發(fā)現(xiàn)完成本發(fā)明。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明一方面提供一種新型的二苯乙烯類化合物，所述化合物具有式I的結(jié)構(gòu)5R3式I其中R'、W或R3可以相同或不同，分別為H原子、烷基或烷氧基；R4為HOo人o原子或一WW基。R1、R2或R3優(yōu)選為H原子或烷氧基；更優(yōu)選R1、R2或R3同時為烷氧基或R'、R2或R3其中二者為烷氧基，另一個為氫。在這里列舉式I中的一些化合物如下化合物AH3CO、化合物BH3cd化合物c化合物D本發(fā)明另一方面提供所述新型二苯乙烯類化合物的制備方法，所述方法包括下列反應(yīng)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>該反應(yīng)將反應(yīng)底物氨基二苯乙烯類化合物與DMDO-Br進(jìn)行親核取代反應(yīng)。在目標(biāo)化合物制備過程中，當(dāng)氨基二苯乙烯類化合物與DMDO-Br物質(zhì)的量比約為1:1時，主要生成一取代產(chǎn)物；當(dāng)二者物質(zhì)的量比約為1:2時，主要生成二取代產(chǎn)物。其中所用的4-溴甲基-5-甲基-1,3-二氧環(huán)戊烯-2-酮(DMDO-Br)由4-氯甲基-5-甲基-1，3-二氧環(huán)戊烯-2-酮(DMD0-C1)與NaBr反應(yīng)而得到，反應(yīng)如下所示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>所述方法具體包括如下步驟(1)4-氯甲基-5-甲基-1，3-二氧環(huán)戊烯-2-酮與溴化鈉在有機(jī)溶劑中反應(yīng)，生成4-溴甲基-5-甲基-1，3-二氧環(huán)戊烯-2-酮和氯化鈉；(2)向步驟(1)的反應(yīng)混合物中加入丙酮使生成的氯化鈉析出，過濾后得4-溴甲基-5-甲基-l,3-二氧環(huán)戊烯-2-酮的溶液，待用；(3)將步驟(2)中的4-溴甲基-5-甲基-1，3-二氧環(huán)戊烯-2-酮的溶液加入到含有4'-氨基二苯乙烯衍生物和KHC03的有機(jī)溶劑中進(jìn)行反應(yīng)，薄層色譜跟蹤反應(yīng)，至反應(yīng)混合物組成不再有明顯變化，加水終止反應(yīng)，分離純化得式I的化合物；其中R1、R2、^與上述定義相同。上述步驟中所用的有機(jī)溶劑為N，N-二甲基甲酰胺。本發(fā)明再一方面提供所述新型二苯乙烯類化合物治療腫瘤的用途，所述腫瘤選自宮頸癌、肝癌、肺癌、胃癌、乳腺癌、膀胱癌、頭頸癌、卵巢癌、前列腺癌、結(jié)直腸癌、生殖泌尿道癌、黑素瘤、鱗狀細(xì)胞癌、星形細(xì)胞癌、Kaposi肉瘤、成膠質(zhì)細(xì)胞癌，本發(fā)明的化合物或組合物尤其對宮頸癌、肝癌、肺癌、胃癌等具有良好的治療作用。本發(fā)明再一方面提供一種治療腫瘤的藥物組合物，所述組合物含有所述式I的新型二苯乙烯類化合物和藥學(xué)上可接受的輔料。本發(fā)明提供的組合物可以制成口服制劑、注射劑和外用制劑等多種制劑形式。合適的口服制劑有片劑、膠囊、混懸液等形式；合適的注射劑有注射液、凍干粉劑等形式；適宜的外用制劑有乳膏、軟膏、洗劑等形式。各種制劑中可以包含藥物制劑領(lǐng)域普遍使用的藥學(xué)上可接受的載體、輔劑，例如，固態(tài)制劑中可包含填充劑、崩解劑、粘合劑、助流劑等；液態(tài)制劑中可包含殺菌劑、表面活性劑等。前提條件是所有輔料都必須無毒、無藥理活性并且與相應(yīng)的劑型相適宜。本發(fā)明中的術(shù)語"院基"是指含有l(wèi)一6個碳原子的飽和脂肪烴基，包括直鏈和支鏈烷基的非限制性實(shí)例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基或叔丁基等。所述的垸氧基為含有1一6個碳原子的垸氧基，包括直鏈和支鏈烷氧基，代表性的實(shí)例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基等。本發(fā)明提供的式I新型二苯乙烯類化合物制備工藝簡單，重現(xiàn)性好，抗癌活性試驗(yàn)研究結(jié)果表明此類化合物具有良好的抗腫瘤活性，特別是對Hda腫瘤細(xì)胞的增殖抑制活性較好，具有開發(fā)成治療人宮頸癌藥物的前景。本發(fā)明化合物在代謝中有突出的優(yōu)點(diǎn)，毒性較小，生物利用度高，更易于開發(fā)成藥品。具體實(shí)施例方式下面以具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明，但本
發(fā)明內(nèi)容不限于這些實(shí)施例。本發(fā)明實(shí)施例中所用的0)-3，4,5-三甲氧基-4'-氨基-1，2-二苯乙烯、(f)-3,4-二甲氧基-4'-氨基-1，2-二苯乙烯為本發(fā)明人分別以3，4,5-三甲氧基苯甲醛、3，4-二甲氧基苯甲醛及對硝基甲苯為原料合成，具體合成方法參照[賴宜天，張喜全，郭鍵，李寶林.化學(xué)試劑，2007,29(5):257-259,262]*,其它所用試劑均為分析純?；衔锝Y(jié)構(gòu)確定所用的核磁共振儀為BrukerAvance300超導(dǎo)核磁共振儀，TMS作為內(nèi)標(biāo)；紅外光譜采用Nicolet170SXFT-IR紅外光譜儀測定；熔點(diǎn)采用WRS-113數(shù)字熔點(diǎn)測定儀測定(熔點(diǎn)未進(jìn)行校正)；元素分析在VarioELIII元素分析儀(德國元素分析系統(tǒng)公司)上進(jìn)行測定。實(shí)施例l:化合物A的制備取0.82g(5.50mmol)4-氯甲基-5-甲基-1,3-二氧環(huán)戊烯-2-酮，1.15g(11.00mmol)溴化鈉，2.0mLDMF于25mL的燒瓶中，25。C下，攪拌1.5小時后加入1.0mL丙酮，繼續(xù)攪拌1小時；濾掉固體后得4-溴甲基-5-甲基-l,3-二氧環(huán)戊烯-2-酮溶液，待用。取1.28g(5.00,1)(f)-3,4-二甲氧基-4'-氨基-1,2-二苯乙烯，0.96g(9.50咖o1)KHC03，40.0mLDMF于50mL的燒瓶中，25。C，在劇烈攪拌下，緩慢滴加上述制備的4-溴甲基-5-甲基-1,3-二氧環(huán)戊烯-2-酮溶液，加入的4-溴甲基-5-甲基-1，3-二氧環(huán)戊烯-2-酮與(f)-3，4_二甲氧基-4'-氨基-1,2-二苯乙烯的摩爾比約為l:1。加畢25-C下繼續(xù)攪拌，TLC跟蹤反應(yīng)，直至反應(yīng)物組成不再有明顯變化，加水40.0mL后，用乙酸乙酯萃取。有機(jī)層用5%鹽酸洗滌三次，再用飽和食鹽水洗滌至中性。有機(jī)層用無水硫酸鎂干燥后濃縮至干；濃縮物經(jīng)硅膠柱色譜層析純化后得到淺黃色固體0.35g，目標(biāo)化合物產(chǎn)率19.1%，熔點(diǎn)157.9158.7。C;'H麗R(300MHz,DMSO-cUS:2.15(s，3H，-CH3)，3.75(s,3H,-0CH3),3.80(s，3H，-OCH3),4.14(s,2H，—CH2—),6.22(s，1H，—NH-)，6.63(d，2H，/:7.4Hz，2，，6，-Ar-H)，6.84—6.99(m,4H，-CH:CH-，5,6-Ar-H)，7.14(s，1H,2-Ar-H),7.32(d，2H，/=7.4Hz,3，，5，-Ar-H);1:iCNMR(75MHz，DMS0-d6)S:9.2，36.3,56.0，56.1，109.5，112.5，113.1，119.5，124.3,126.7，127.2，127.7，131.4，136.5,137.2，147.7,148.6，149.5，153.7;IRvKBrmaxcnf':3431,3356,3011，，2844,1615,1514,1459，1382，1264，1140，1025,962,818,757;元素分析(%):C21H21N05，實(shí)測值(計(jì)算值)C,68.22(68.65)，H，5.50(5.76)，N,3.37(3.81)。實(shí)施例2:化合物B的合成H3CO、H3CO-H3CO'4-溴甲基-5-甲基-1，3-二氧環(huán)戊烯-2-酮的制備同實(shí)施例1。取1.43g(5.00mraol)(￡)-3，4，5-三甲氧基-4'-氮基-1,2-二苯乙烯，0.96g(9.50mmol)KHC03，40.0mL的DMF于50mL的燒瓶中，25。C，在劇烈攪拌下，緩慢滴加上述制備的4-溴甲基-5-甲基-1，3-二氧環(huán)戊烯-2-酮溶液，加入的4-溴甲基-5-甲基-1，3-二氧環(huán)戊烯-2-酮與(f)_3，4-二甲氧基-4'-氨基-1，2-二苯乙烯的摩爾比約為l:1。加畢25T:下繼續(xù)攪拌，TLC跟蹤反應(yīng)，直到反應(yīng)物組成不再有明顯變化，加水40.0mL后，用乙酸乙酯萃取。有機(jī)層用5%鹽酸洗滌三次，再用飽和食鹽水洗滌至中性。有機(jī)層用無水硫酸鎂干燥后濃縮至干；濃縮物經(jīng)硅膠柱色譜層析純化后得到淺黃色固體0.63g,目標(biāo)化合物產(chǎn)率33.2%，熔點(diǎn)139.0141.1。C;'H畫R(300MHz，DMS0-d6)S:2.14(s,3H，-CH3),3.66(s,3H，-0CH3)，3.82(s，6H，-0CH3),4.18(s，2H，-CH'廠)，6.72(d,2H，/=8.2Hz,2，，6，-Ar-H)，6.84(s,2H，2,6-Ar-H)，6.93(d，1H，力16.5Hz，-CH《H-)，7.05(d，1H，/=16.5Hz，-CH=CH-),7.37(d,2H，,8.2,3，，5，-Ar-H);IR/Br謹(jǐn)cm匿'3431，3353，2981,2937,2834，1592，1508，1456,1302,1232,1177,1122，995,832,671;元素分析(％):(:2孔3,6，實(shí)測值(計(jì)算值)C，66.31(66.49)，H，5.68(5.83):N，3.47(3.52)。實(shí)施例3:化合物C的合成<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>4-溴甲基-5-甲基-1,3-二氧環(huán)戊烯-2-酮的制備同實(shí)施例1。取0.64g(2.50隨ol)(f)-3,4-二甲氧基-4'-氨基-1，2-二苯乙烯，0.48g(4.80mmol)KHC0"20.0mL的面F于50mL的燒瓶中，加入上述制備的4-溴甲基-5-甲基-1，3-二氧環(huán)戊烯-2-酮溶液，加入的4-溴甲基-5-甲基-1，3-二氧環(huán)戊烯-2-酮與GF)-3，4-二甲氧基-4'-氨基-1，2-二苯乙烯的摩爾比約為2:1。在25'C下，劇烈攪拌，TLC跟蹤反應(yīng)，直到反應(yīng)物組成不再有明顯變化，加水20.0mL后，用乙酸乙酯萃取。有機(jī)層用5。/。鹽酸洗滌三次，再用飽和食鹽水洗滌至中性。有機(jī)層用無水硫酸鎂干燥后濃縮至干；濃縮物經(jīng)硅膠柱色譜層析純化后得到淺黃色固體1.14g,目標(biāo)化合物產(chǎn)率95.1%，熔點(diǎn)147.9148.5°C;'H醒R(300MHz,DMS0-d》5:2.12(s,6H,-CH3),3.76(s>3H,-0CH3),3.81(s，3H,_0CH3)，4.41(s，4H,—CH2-)，6.92-7.07(m，6H)，7.18(s,1H，2-Ar-H),7.44(d，2H，/=8.2Hz,3，，5，-Ar-H);13CNMR(75MHz，DMSO—d6)S:9.2,43.1，56.0，56.1,109,5，112.4，115.0，119.8，125.7，126.6，127.6,128.4，131.1，135.1，138.2，147.1，148.8，149.4,152.7;IRvKBrmaxCm-':2931，2668,1819，1731，1580，1512，1419，1326,1230,1183，1130，959，822;元素分析(%):C26H25N08，實(shí)測值(計(jì)算值):C，65.15(65.13);H，4.95(5.26);N，2.70(2.92)。實(shí)施例4:化合物D的合成4-溴甲基-5-甲基-1,3-二氧環(huán)戊烯-2-酮的制備同實(shí)施例1。取0.72g(2.50畫1)(￡")-3，4，5-三甲氧基-4，-氨基-1，2-二苯乙烯，0.48g(4.80mraol)KHC03，20.0mL的DMF于50mL的燒瓶中，加入上述制備的4-溴甲基-5-甲基-1，3-二氧環(huán)戊烯-2-酮溶液，加入的4-溴甲基-5-甲基-1，3-二氧環(huán)戊烯-2-酮與(f)_3，4-二甲氧基-4'-氨基-1,2-二苯乙烯的摩爾比約為2:1。在25"C下，劇烈攪拌，TLC跟蹤反應(yīng)，直到反應(yīng)物組成不再有明顯變化，加水20.0mL后，用乙酸乙酯萃取。有機(jī)層用5%鹽酸洗滌三次，再用飽和食鹽水洗滌至中性。有機(jī)層用無水硫酸鎂干燥后濃縮至干；濃縮物經(jīng)硅膠柱色譜層析純化后得到淺黃色固體1.09g，目標(biāo)化合物產(chǎn)率85.6%，熔點(diǎn)153.3154.7°C;'HNMR(300MHz,DMS0—d6)S:2.12(s,6H，—CHO,3.66(s,犯，一0CH》'3.83(s，6H，-0CH3)，4.43(s，4H,-CH2-)，6.86(s，2H，2,6-Ar-H)，6.96(d，2H，/=8.0Hz，2',6，-Ar-H),7.02(d，1H，,16.5Hz，-CH二CH-),7.10(d,1H,戶16.5Hz，-CH=CH-)，7.45(d，2H，/=8.0Hz，3',5'-Ar—H);13CNMR(75MHz,DMSO-ds)3:9.2,43.0,56.3,60.5，104.0，115.0，125.8'127.8，128.0，128.1'133.8，135.1,137.4，138.2，147.3，152.7，153.5;IRvKBrmaxCm-':2920，2816，1821,1742,1584,1512，l識1221，1131,1024，964,767;元素分析(％):C27H27N09，實(shí)測值(計(jì)算值)C，63.21(63.65);H,5.32(5.34)13N，2.67(2.75)。實(shí)施例5:抗癌活性試驗(yàn)1.受試化合物A、B、C、D分別按照實(shí)施例l一的方法制備2.受試細(xì)胞株人宮頸癌細(xì)胞Hela人肝癌細(xì)胞SMMC-7721人肺癌細(xì)胞A549人低分化胃腺癌細(xì)胞BGC-8233.方法3.1取處于指數(shù)生長期狀態(tài)良好的細(xì)胞一瓶，加入0.25%胰蛋白酶消化液，消化使貼壁細(xì)胞脫落，計(jì)數(shù)24xl(^個/mL，制成細(xì)胞懸液。3.2取細(xì)胞懸液接種于96孔板上，180^iL/孔，置恒溫C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時。3.3換液，加入受試藥物，20pL/孔，培養(yǎng)48小時。3.4將MTT加入96孔板中，20pL/孔，培養(yǎng)箱中反應(yīng)4小時。3.5吸去上清液，加入DMSO，150)aL/孔，平板搖床上振搖5分鐘。3.6用酶聯(lián)免疫檢測儀在波長為570nm處測定每孔的吸光值(OD值)，并計(jì)算細(xì)胞抑制率。以相應(yīng)溶媒作陰性對照，以長春瑞賓(Vinordbine，VBI)為陽性對照。xl00%3.7抗腫瘤活性判斷標(biāo)準(zhǔn)(NCI)，具體見表1表1.抗腫瘤活性判斷標(biāo)準(zhǔn)(NCI)化合物lag/mL10100細(xì)胞抑制率％>50>50<50^50<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)(見表2)表明受試化合物AD對所用腫瘤細(xì)胞的增殖具有明顯的抑制作用；從試驗(yàn)結(jié)果可知此類化合物對Hda腫瘤細(xì)胞的增殖抑制活性較好。這種結(jié)果表明對此類化合物的深入研究將會得到對人宮頸癌細(xì)胞Hela具有選擇性抑制作用的抗腫瘤藥物。表2.受試物對腫瘤細(xì)胞增殖的影響(11=3，重復(fù)l次)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>權(quán)利要求1.一種二苯乙烯類化合物，其具有式I的結(jié)構(gòu)id="icf0001"file="A2008101560920002C1.tif"wi="59"he="29"top="36"left="70"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>式I其中R1、R2或R3可以相同或不同，分別為H原子、烷基或烷氧基；R4為H原子或id="icf0002"file="A2008101560920002C2.tif"wi="23"he="16"top="80"left="38"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>2.權(quán)利要求1所述的二苯乙烯類化合物，其中，R'、R2或R3選自H原子或烷氧基；3.權(quán)利要求1或2所述的二苯乙烯類化合物，其中，R1、R2或R3同時為烷氧基或R1、R2或R3其中二者為烷氧基，另一個為氫。4.權(quán)利要求1或2所述的二苯乙烯類化合物，其選自下列化合物化合物A<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>化合物B<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>化合物C<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>化合物D<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>5.權(quán)利要求1所述的二苯乙烯類化合物的制備方法，包括下列反應(yīng):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>其中，R'、R2或R3與權(quán)利要求1中定義相同，在反應(yīng)中，當(dāng)氨基二苯乙烯類化合物與DMD0-Br物質(zhì)的量比約為1:1時，主要生成一取代產(chǎn)物；當(dāng)二者物質(zhì)的量比約為h2時，生成二取代產(chǎn)物。6.權(quán)利要求5所述的新型二苯乙烯類化合物的制備方法，包括下列反應(yīng)步驟(1)4-氯甲基-5-甲基-1,3-二氧環(huán)戊烯-2-酮與溴化鈉在有機(jī)溶劑中反應(yīng)，生成4-溴甲基-5-甲基-1，3-二氧環(huán)戊烯-2-酮和氯化鈉；(2)向步驟(1)的反應(yīng)混合物中加入丙酮使生成的氯化鈉析出，過濾后得4-溴甲基-5-甲基-1，3-二氧環(huán)戊烯-2-酮的溶液，待用；(3)將步驟(2)中的4-溴甲基-5-甲基-1,3-二氧環(huán)戊烯-2-酮的溶液加入到含有4'-氨基二苯乙烯衍生物和KHC03的有機(jī)溶劑中進(jìn)行反應(yīng)，薄層色譜跟蹤反應(yīng)，至反應(yīng)混合物組成不再有明顯變化，加水終止反應(yīng)，分離純化得式I的化合物。7.權(quán)利要求1所述的二苯乙烯類化合物在制備治療腫瘤的藥物中的用途，所述腫瘤選自宮頸癌、肝癌、肺癌、胃癌、乳腺癌、膀胱癌、頭頸癌、卵巢癌、前列腺癌、結(jié)直腸癌、生殖泌尿道癌、黑素瘤、鱗狀細(xì)胞癌、星形細(xì)胞癌、Kaposi肉瘤、成膠質(zhì)細(xì)胞癌。8.權(quán)利要求7的用途，其中腫瘤選自宮頸癌、肝癌、肺癌、胃癌。9.一種治療腫瘤的藥物組合物，其包含權(quán)利要求1所述的二苯乙烯類化合物和藥學(xué)上可接受的輔料。全文摘要本發(fā)明涉及一種結(jié)構(gòu)式如式I所示的新型二苯乙烯類化合物，其中R¹、R²或R³可以相同或不同，分別為H原子、烷基或烷氧基；R⁴為H原子或式a基。本發(fā)明還涉及該類化合物的制備方法以及其在制備治療腫瘤的藥物中的用途。所述化合物制備工藝簡單，重現(xiàn)性好，抗癌活性試驗(yàn)研究結(jié)果表明此類化合物具有良好的抗腫瘤活性。文檔編號C07D317/40GK101684114SQ20081015609公開日2010年3月31日申請日期2008年9月27日優(yōu)先權(quán)日2008年9月27日發(fā)明者張喜全,徐宏江,李寶林,麗王,王喆之,顧紅梅申請人:江蘇正大天晴藥業(yè)股份有限公司;陜西師范大學(xué)