專利名稱：：一種用梔子為原料制備梔子苷的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種從中藥材提取有效成分的制備方法，特別地，涉及一種用梔子為原料制備梔子苷的方法。
背景技術(shù)：
：梔子，首載于<神農(nóng)本草經(jīng)>名要丹。列為中品<名醫(yī)別錄>稱作越桃，<藥性論>始稱山梔子，又稱山梔、生山梔子。<唐本草>又稱枝子。在我國(guó)應(yīng)用與臨床治療已有1600多年歷史，現(xiàn)以茜草科常綠灌木植物梔子<GardeniaJasminotdes〉的成熟果實(shí)入藥、其味苦、性寒。歸心、肝、胃經(jīng)、，具有清熱利尿、瀉水除煩，涼血解毒等功效。常用于熱病虛煩不眠，黃疸，淋病，消渴，目赤，咽痛，吐血，血痢疫病，扭傷腫痛等癥。有保肝利膽、促進(jìn)胰腺分泌、降壓、防治動(dòng)脈粥樣硬化及抗血栓形成、解熱鎮(zhèn)痛、抗菌和抗炎及治療軟組織損傷的作用，對(duì)誘變劑變活性和對(duì)細(xì)毛免疫有抑制作用，且無(wú)致癌、致畸、致突變的毒性。神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(NCF)是人體神經(jīng)系統(tǒng)最重要的生物活性分子之一，而梔子中化合物梔子苷對(duì)其有促進(jìn)作用，對(duì)神經(jīng)缺氧起保護(hù)作用。國(guó)內(nèi)外所公認(rèn)的中藥梔子有效成分為環(huán)烯醚萜類物質(zhì)，梔子所含的環(huán)烯醚萜類物質(zhì)包括梔子苷、羥異梔子苷、梔子苷酸等，其中活性成分最高的是梔子苷，中國(guó)藥典中梔子藥材標(biāo)志性成分為梔子苷。梔子苷是從茜草科植物梔子的干燥成熟果實(shí)中運(yùn)用高科技生產(chǎn)工藝提取精制而成的產(chǎn)品。梔子苷為環(huán)烯醚萜苷類化合物，異名京尼平苷，都梅子素葡萄糖苷去羥梔子苷，梔子苷又是生產(chǎn)梔子藍(lán)、梔子紅、梔子紫的中間體和生藥品的有效單體。因此，對(duì)梔子苷的分離、純化、結(jié)晶和含量測(cè)定成為對(duì)梔子深度開發(fā)的關(guān)鍵技術(shù)。梔子苷還有多種藥用用途，有報(bào)道藥理作用表明梔子苷具有緩瀉、鎮(zhèn)痛、利膽、抗炎、治療軟組織損傷以及抑制胃液分泌和降低胰淀粉酶等作用，也是用于治療心腦血管、肝膽等疾病及糖尿病的原料藥物，亦可生成農(nóng)作物增產(chǎn)劑。中國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)朇N200510026143一種用梔子果實(shí)制備高純度梔子苷的方法、[申請(qǐng)?zhí)朇N200510026142]-用梔子果實(shí)制備梔子苷、京尼平-1_0-D-龍膽雙糖苷的方法、[申請(qǐng)?zhí)朇N200510026144]-—種用梔子果實(shí)制備總環(huán)烯醚萜苷的方法等三項(xiàng)專利大致相同，均用大量水和10%乙醇沖洗后再用低濃度乙醇沖洗環(huán)烯醚萜類物質(zhì)，該工藝過(guò)程相對(duì)比較繁瑣，制備成本高。中國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)朇N200310111038.8一種梔子提取物及其制備工藝和它的應(yīng)用本發(fā)明公開了一種梔子提取物，它是以中藥梔子為原料制備的含有環(huán)烯醚萜苷的提取物。所得梔子提取物中梔子苷重量百分含量?jī)H為30%左右，含量相對(duì)較低。中國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)朇N200510017378.3公開了梔子的綜合利用的一種方法，其中涉及梔子苷的分離以及梔子中多種成分的萃取，充分利用了梔子資源，但其未精制梔子苷。從20世紀(jì)60年代開始研究梔子有效成分的利用，至今僅僅具備生產(chǎn)少量梶子苷產(chǎn)品的能力，而梔子苷的供應(yīng)在國(guó)際市場(chǎng)上一直處于非常緊俏狀態(tài)。同時(shí)在國(guó)內(nèi)隨著現(xiàn)代生活水平和生活質(zhì)量的不斷提高，"天然產(chǎn)物"倍受青睞，人們?cè)絹?lái)越重視天然藥品，尤其是中藥治療。因此，應(yīng)該大力開展梔子提取物的綜合利用研究，加大梔子產(chǎn)品在醫(yī)藥、食品等方面的應(yīng)用開發(fā)力度?？傊?，探索開發(fā)梔子系列產(chǎn)品前景廣闊。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種用梔子為原料制備梔子苷的方法。本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的一種用梔子為原料制備梔子苷的方法，包括以下步驟(1)梔子原藥材經(jīng)切片或粉碎成粗粉，加入810倍體積的體積百分比為600%的含水乙醇提取23次，每次1.52小時(shí)；(2)合并提取后液，離心過(guò)濾，濾液減壓濃縮回收乙醇至藥液相對(duì)密度為1.05;(3)將濃縮后的藥液用去離子水稀釋至上樣藥液A440達(dá)到60后，上HPD—IOO型大孔樹脂柱，控制上樣速度在每小時(shí)56倍的上柱大孔樹脂體積，上樣量與上柱大孔樹脂體積比為1:1;收集上柱后藥液，藥液洗脫一倍上柱大孔樹脂體積的去離子水后，用體積百分比為25呢的含水乙醇洗脫至洗脫液A238小于0.8，收集洗脫液，然后用體積百分比為70%的含水乙醇洗脫洗脫液；(4)合并所有洗脫后剩余藥液，減壓濃縮回收乙醇后，經(jīng)噴霧干燥得梔子苷。本發(fā)明得有益效果是整個(gè)工藝過(guò)程僅使用水和乙醇為提取溶劑，生產(chǎn)過(guò)程沒(méi)有廢水、廢氣產(chǎn)生，所用HPD-100型大孔樹脂和乙醇試劑均可回收再利用，適合工業(yè)化生產(chǎn)，是一種環(huán)保型新技術(shù)，得到高純度天然產(chǎn)品梔子苷具體實(shí)施例方式本發(fā)明用梔子為原料制備梔子苷的方法，包括以下步驟一、梔子原藥材經(jīng)切片或粉碎成粗粉，加入810倍體積(體積百分比為60%)的含水乙醇提取23次，每次1.52小時(shí)。二、合并提取后液，經(jīng)離心過(guò)濾，濾液經(jīng)減壓濃縮回收乙醇至藥液相對(duì)密度為1.05。三、將濃縮后的藥液用去離子水稀釋至上樣藥液A440達(dá)到60左右后，上HPD—100型大孔樹脂柱，控制上樣速度在每小時(shí)56倍的上柱大孔樹脂體積，上樣量(以濃縮藥液體積計(jì))與上柱大孔樹脂體積比為1:1以使大孔樹脂充分吸附提取藥液中除梔子苷外的其他成分，上樣藥液中60%左右梔子苷不被樹脂吸附。收集上柱后藥液，上樣完畢后先洗脫一倍上柱大孔樹脂體積的去離子水，以沖洗梔子苷。洗脫速度可調(diào)節(jié)增大。去離子水洗脫收集完畢后，利用HPD—100大孔樹脂吸附梔子苷和其它有效成分能力的相對(duì)大小，用25%的含水乙醇洗脫被大孔樹脂吸附的梔子苷，以洗脫液A238小于0.8時(shí)為洗脫終點(diǎn)(洗脫過(guò)程時(shí)刻觀察洗脫液顏色，以控制速度和判定洗脫終點(diǎn))，洗脫梔子苷較完全后用70%濃度的含水乙醇洗脫剩余有效成分，洗脫速度可調(diào)節(jié)增大。四、最后合并所有洗脫后剩余藥液，經(jīng)減壓濃縮回收乙醇后分別經(jīng)噴霧干燥得梔子苷。實(shí)施例l:溶媒的選擇各取100g梔子藥材站E行試驗(yàn)，提取條件見(jiàn)下表，結(jié)果如下<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>綜合上表，考慮到提取成本及含固量等因素，60%的含水乙醇提取是最佳濃度。實(shí)施例2:提取時(shí)間的選擇取三份100g梔子藥材，用60%的含水乙醇提取，提取兩次，對(duì)提取1小時(shí)、2小時(shí)、3小時(shí)進(jìn)行比較。<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>以上實(shí)驗(yàn)表明用60%的含水乙醇提取，提取兩次，提取2小時(shí)，基本上能將梔子中有效成分提取完全，提取3小時(shí)得率基本上沒(méi)有大的變化。實(shí)施例3:提取次數(shù)的選擇取三份100g梔子藥材，用60%的含水乙醇提取，每次提取時(shí)間為2小時(shí)，對(duì)提取1次、2次、3次進(jìn)行比較，結(jié)果如下<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>從上表可以看出，提取兩次就可以使桅子果實(shí)中的大部分桅子有效成分提取出來(lái)，但綜合得失依據(jù)實(shí)際情況，本發(fā)明采用提取次數(shù)為二次到三次。實(shí)施例4:藥液離心試驗(yàn)試驗(yàn)研究藥液經(jīng)離心后可明顯去除大量肉眼可見(jiàn)絮狀物雜質(zhì)實(shí)施例5:樹脂型號(hào)的選擇試驗(yàn)研究根據(jù)梔子黃色素及梔子苷的性質(zhì)選擇HPD-100、HPD-80、HPD-400、D-101、X-5型號(hào)的大孔樹脂進(jìn)行比較各取10g經(jīng)預(yù)處理的樹脂加入100ml燒杯中，加入藥液中(A238=178.3、A440=50.9、0D=3.5)80ml，靜止吸附。3小時(shí)后檢測(cè)藥液參數(shù)。結(jié)果見(jiàn)下表:<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>分析X-5對(duì)梔子苷及其它有效成分吸附能力都較強(qiáng)，選擇性不高，不利于前期水沖洗梔子苷。因此綜合比較選擇HPD-100做后續(xù)實(shí)驗(yàn)。實(shí)施例6:上樣梔子藥液稀釋溶劑的選擇試驗(yàn)研究采用不同溶劑稀釋藥液，取10g樹脂浸泡于相同量的藥液，進(jìn)行靜置吸附比較，結(jié)果見(jiàn)下表<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>大孔樹脂吸附能力存在飽和，藥液中其它成分被大孔樹脂吸附的量越大，則代表?xiàng)d子苷被吸附的量越小，就越有利與前期水洗脫梔子苷，所以直接用水稀釋上柱既可。實(shí)施例7:上樣液濃度的選擇試驗(yàn)研究樹脂的吸附是一個(gè)選擇吸附的過(guò)程，過(guò)高的濃度必然影響吸附，而濃度過(guò)低必然會(huì)使吸附時(shí)間延長(zhǎng)，從而降低效率。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)流動(dòng)上樣的方法，使用不同濃度的藥液上柱(20ml樹脂裝入30*1.6cm柱)。通過(guò)檢測(cè)，以流出液A440二2為上樣終點(diǎn)?？疾霢440在40-80濃度范圍內(nèi)的吸附變化。<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注；總上樣量以A440Hc上樣體積計(jì)上表分析可得，上樣液濃度A440應(yīng)選擇在50-70之間。結(jié)合各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)綜合得失，選擇藥液稀釋至A440二60時(shí)上柱，藥液中其他有效成分吸附量相對(duì)較大，有利與前期水洗脫梔子苷。實(shí)施例8:洗脫液的選擇試驗(yàn)研究以A440為60的水溶液上柱(20ml樹脂裝入30*1.6cm柱)，計(jì)算總上樣量。分別以500ml不同濃度的乙醇洗脫。計(jì)算各洗脫液的含量。各上樣250ml稀釋后藥液，水及不同濃度乙醇洗脫液大量平行試驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)下表<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>水、10%、20%、25%、30%乙醇對(duì)梔子苷的選擇性大于其他有效成分，35%乙醇對(duì)兩者的選擇性較差，而70%、90%、100%的乙醇對(duì)兩者幾乎無(wú)選擇性。因此選擇先用大量水洗脫梔子苷，接著用25%乙醇洗脫梔子苷之后再用高濃度的70%乙醇洗脫剩余有效成分，從而達(dá)到精制梔子苷的目的。實(shí)施例9:10KG梔子鮮藥材經(jīng)60%乙醇(以體積計(jì))提取濃縮后得藥液3140ml，取1750ml藥液(含梔子苷93537.5mg)用去離子水稀釋至A440二60上1500mlHPD-100大孔樹脂，(走樣藥液體積約60000ml，上柱后藥液中含梔子苷58464mg，占藥液梔子苷總含量的62.5%)，上樣完畢后，先用去離子水洗脫樹脂吸附水溶性雜質(zhì)，(水洗液含梔子苷4209.75mg)再用25%乙醇(以體積計(jì))沖洗樹脂吸附的梔子苷至洗脫液A238小于0.8(洗脫液含梔子苷22478.38mg，占藥液中總含量的24%，至此約91%左右的梔子苷從藥液中分離)，接著用70%的乙醇洗脫剩余有效成分，合并所有洗脫后剩余藥液，經(jīng)噴霧干燥后得44.8g左右得梔子苷和100g左右其他有效成分。權(quán)利要求1.一種用梔子為原料制備梔子苷的方法，其特征在于，包括以下步驟(1)梔子原藥材經(jīng)切片或粉碎成粗粉，加入8～10倍體積的含水乙醇提取2～3次，每次1.5～2小時(shí)；(2)合并提取后液，離心過(guò)濾，濾液減壓濃縮回收乙醇至藥液相對(duì)密度為1.05(3)將濃縮后的藥液用去離子水稀釋至上樣藥液A440達(dá)到60后，上HPD-100型大孔樹脂柱，控制上樣速度在每小時(shí)5～6倍的上柱大孔樹脂體積，上樣量與上柱大孔樹脂體積比為1∶1；收集上柱后藥液，藥液洗脫一倍上柱大孔樹脂體積的去離子水后，用體積百分比為25％的含水乙醇洗脫至洗脫液A238小于0.8，收集洗脫液，然后用體積百分比為70％的含水乙醇洗脫洗脫液(4)合并所有洗脫后剩余藥液，減壓濃縮回收乙醇后，經(jīng)噴霧干燥得梔子苷。全文摘要本發(fā)明公開了一種用梔子為原料制備梔子苷的方法。它利用HPD-100型大孔樹脂吸附梔子提取液中其它成分和梔子苷能力的強(qiáng)弱不同，用特定的速度上樣，以不同濃度的乙醇溶液、以不同洗脫速度進(jìn)行洗沖洗后，合并所有洗脫后剩余藥液，經(jīng)噴霧干燥制得梔子苷成品。提取后梔子藥渣可以用作飼料添加劑或肥料。整個(gè)工藝涉及技術(shù)沒(méi)有產(chǎn)生固體廢渣，沒(méi)有產(chǎn)生工藝廢水，是一種環(huán)保型工藝，適合企業(yè)生產(chǎn)應(yīng)用，產(chǎn)品質(zhì)量好，經(jīng)濟(jì)價(jià)值高。文檔編號(hào)C07H17/00GK101407532SQ20081016240公開日2009年4月15日申請(qǐng)日期2008年11月24日優(yōu)先權(quán)日2008年11月24日發(fā)明者琪余,周丹英,琪朱,楊蘇蓓,錢東偉申請(qǐng)人:浙江省中藥研究所有限公司