專利名稱：：一種n-(甲硫基硫羰基)-17-甾腙化合物及其制備與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種具有抗癌活性的n-(曱硫基硫羰基)-n-甾腙化合物及其制備與應(yīng)用。(二)
背景技術(shù)：
：以甾類骨架為母體，經(jīng)適當(dāng)修飾是制備新型抗癌藥物的一個(gè)重要分支。例如，將抗癌藥氮芥的基本藥效基團(tuán)引入甾環(huán)骨架，可制得新型的抗癌藥+>龍苯芥(Prednimustine，I陽1)和石粦站,醇芥(Estramustinephosphate,1-2)。前者用于治療惡性淋巴瘤和慢性淋巴細(xì)胞型白血病，后者用于前列腺癌和胰腺病。這兩種藥均已用于臨床。在甾類化合物的骨架上的適當(dāng)位置引入適當(dāng)?shù)幕鶊F(tuán)，可得到新的抗癌藥物。例如1992年和1999年，Novavtis^>司和Phrmacia&Upjohn7>司研制的福美斯坦(Formestane,I-3)和依西美坦(Exemestane，I-4),在C-4和C-6位分別為羥基和亞甲基，具有很強(qiáng)的抑制芳香酶活性，能夠不可逆的與芳香酶結(jié)合，阻止芳香酶將雄性激素轉(zhuǎn)化為雌激素，從而避免虧1起體內(nèi)雌激素濃度水平過高而S1發(fā)乳腺癌疾病。這兩類藥物目前被廣泛用于治療乳腺癌疾病。松龍苯芥Prednimustine,I—1福美斯坦(Formestane，I—3)依西美坦(Exemestane，I—4)類似的抗癌新藥還有很多，有的已處于臨床I-III期的研究階段，例如表1所示。表l部分具有抗癌作用的甾類藥物<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>近半個(gè)世紀(jì)以來，國內(nèi)外的藥物化學(xué)家對帶有不同取代基的縮胺硫脲類化合物的研究非?；钴S，其化學(xué)結(jié)構(gòu)如下從上面的結(jié)構(gòu)可以看出，縮胺硫脲類化合物結(jié)構(gòu)中含有N，S等雜原子。通過改變RpR2、R3、R4基團(tuán)，得到一系列縮胺硫脲類化合物。藥理研究發(fā)現(xiàn)它們具有抗結(jié)核菌、抗麻瘋病、抗病毒、抗牛皮癬、抗瘧疾及抗腫瘤等多種生物活性。由于縮胺硫脲類化合物優(yōu)異的生物活性，引起藥物化學(xué)家們的廣泛的注意。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，從20世紀(jì)70年代以來，已經(jīng)發(fā)表論文二千三百多篇，其中對抗癌活性的研究有127篇。若將甾體與縮胺硫脲化合物相結(jié)合，可望篩選出一些新型結(jié)構(gòu)的高效、低毒的甾體縮胺硫脲類抗癌化合物。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明將具有蛋白同化功能的甾酮類化合物如表雄斜、去ib^表雄酮等與肼基二硫代甲酸曱酯結(jié)合，制備了一類結(jié)構(gòu)全新的N-(甲硫基硫羰基)-n-甾酮腙化合物，并提供了此類化合物的制備方法，并發(fā)現(xiàn)它們具有較明顯的抗癌活性。本發(fā)明采用的技術(shù)方案是一種N-(甲硫基硫羰基)-17-甾腙化合物，結(jié)構(gòu)如式(III)所示其中，Ri為乙?；驓?，R2為羥基或氫，R3為羥基或氫，5，6位為雙鍵或單鍵，或者5位為氯取代，C19一C6呈環(huán)氧結(jié)構(gòu)。7優(yōu)選的，所述化合物為下式之一:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>本發(fā)明還涉及所述N-(曱硫基硫羰基)-n-甾腙化合物的制備方法，所述方法包括用式(V)所示的甾酮與式(IV)所示的肼基硫代曱酸曱酯在可與甾酮混溶的溶劑中、于0100。c下進(jìn)行縮合反應(yīng)，制得式(m)所示的N-(曱硫基硫羰基)-H-甾腙化合物；式(V)中，R!為乙?；驓?，R2為羥基或氪，R3為羥基或氯，5,6位為雙鍵或單鍵，或者5位為氯取代，C19—C6呈環(huán)氧結(jié)構(gòu)。所述可與甾酮混溶的溶劑為本領(lǐng)域常規(guī)與所述甾酮混溶的溶劑，如C1C6的醇，四氫呋喃等，優(yōu)選為下列之一曱醇、乙醇、異丙醇、四氫呋喃，更優(yōu)選為乙醇。優(yōu)選的，縮合反應(yīng)在7080°C下進(jìn)行。從成本考慮，所述反應(yīng)以肼基硫代曱酸曱酯過量為宜。優(yōu)選的，所述甾酮與肼基硫代曱酸曱酯物質(zhì)的量之比為1:1.01.5。所用的甾酮類化合物為具有蛋白同化功能的甾酮類化合物，其結(jié)構(gòu)如表2,其中4個(gè)化合物的羰基在3位，5個(gè)化合物的羰i在17位，其結(jié)構(gòu)表2:原料甾體酮類化合物的結(jié)構(gòu)圖化合物結(jié)構(gòu)化合物結(jié)構(gòu)表雄酮0三羥基物0去氳表雄酮0水解物0Cl9重排物0所述化合物的制備方法，是采用原料甾酮與肼基二硫代甲酸曱酯縮合反應(yīng)。肼基二硫代曱酸甲酯是按文獻(xiàn)(Audrieth，J.Org.Chem.,1954,19，733)經(jīng)改進(jìn)的方法制備。反應(yīng)式如下H2NNH2+CS2+KOH，(CH3)2S04^H2NNHCSK-H2NNHCSCH3(jy)具體為在裝有溫度計(jì)、攪拌器和恒壓滴液漏斗的50ml三口燒瓶內(nèi)加入4ml水和3ml異丙醇。水浴冷卻下分批加入氫氧化鉀(2.8g,0.05mol),攪拌使全溶。低于20。C下緩慢滴加85。/。水合肼(2.5g,0.05mol)。滴畢，招i去水浴換冰浴，于46。C下40分鐘內(nèi)滴加冰冷的二硫化碳(3.8g,0.05mol)。加畢，保溫?cái)嚢?0分鐘。-然后于9~11°C,60分鐘內(nèi)滴加冰冷的碌u酸二曱酯(6.3g,0.05mol)，繼續(xù)攪拌60分鐘。將生成的白色沉淀過濾，用少量冰水淋洗，真空干燥，得到4.3g(71%)白色晶體(IV)。用二氯曱烷重結(jié)晶，得到無色片狀晶體3.8g(62%),8081°C(文獻(xiàn)值8182°C)。IR(KBr，cm-l):3262,3155，2978,1599,1509,1428,1376,1291,1154，1007,970,715,667,469。然后合成甾酮肼基二硫代曱酸曱酯，口下:sH2N-NH"^"SCH3F^OR，OS1N-NH"^SCH3具體方法為將肼基二硫代曱酸甲酯(1.22g，10mmol)和相應(yīng)的甾酮(lOmmol)溶于1520mL的無水乙醇中，攪拌加熱回流35h,自然冷卻至室溫，將生成的沉淀過濾，用少量乙醇淋洗，再用適量的乙醇重結(jié)晶得到產(chǎn)物。所述的N-(曱硫基硫羰基)-17-甾腙化合物經(jīng)檢測具有較強(qiáng)抗癌活性，可用于制備抗癌藥物。具體的，所述化合物可用于制備抑制癌細(xì)胞增殖的藥物。本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在本發(fā)明用具有蛋白同化作用的甾酮與肼基二硫代曱酸曱酯縮合制得新型的N-(曱硫基硫羰基)-17-甾腙化合物，它們具有一定的抗癌活性，具有進(jìn)一步開發(fā)的潛力，為新藥篩選提供了基石出。具體實(shí)施例方式-下面結(jié)合-具體實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步描述,但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不僅限于此實(shí)施例1:表雄酮縮肼基二硫代曱酸曱酯的合成(zlm-5)。在裝有溫度計(jì)，回流冷凝管和攪拌器的50ml三口燒瓶中，加入表雄酮(2.9g,lOmmol)，肼基二硫代曱酸曱酯(1.3g，10.7mmo1)和無水乙醇(15ml),油浴加熱攪拌。固體溶解，溶液呈淡黃色透明。78。C回流。反應(yīng)用TLC點(diǎn)板跟蹤，展開劑為石油醚乙酸乙酯(1:2，v/v)?；亓?小時(shí)后，停止加熱，冷卻至室溫，將生成的白色沉淀過濾，用少量冷乙醇淋洗，干燥后得3.0g粗品，收率76.1%。然后用無水乙醇重結(jié)晶，得白色顆粒狀晶體。m.p.234-237。C。IR(KBr,cm-1):3409,2931，1641,1518,1470,1268,1104,1039，760，677,549.HRMSm/zcald.(fnd.):395.2179(395.2185).1HNMR(CDC13)5:0.839(s,3H),0.913(s,3H)，0.9452.473(m，22H),2.607(s,3H),3.5693.632(m,1H),9.526(br,1H).實(shí)施例2:去氫表雄酮縮肼基二硫代曱酸曱酯的合成(zlm-6)。sH2NNHC—SCH3+(I)HO在裝有溫度計(jì)，-苗流冷凝管和攪拌器的50ml-三口燒瓶中，加入去氫表雄酮(2.9g,lOmmol),肼基二硫代甲酸曱酯(1.3g，略大于lOmmol)和無水乙醇(15ml)，油浴加熱攪拌。固體溶解，溶液呈淡黃色透明。78°C回流。反應(yīng)用TLC點(diǎn)板跟蹤，展開劑為石油醚乙酸乙酯(1:2，v/v)。回流4小時(shí)后，停止加熱，冷卻至室溫，將生成的淡黃色沉淀過濾，用少量冷乙醇淋洗，干燥后得2.9g粗品，收率74%。然后用無水乙醇重結(jié)晶，得類白色顆粒狀晶體。m.p.238-241°C。IR(KBr，cm—1):3348,3185,2960，1646,1527,1472，1263，1055，1036,954,764，675.HRMSm/zcald.(fnd.):393.2013(393.2028).iH麗R(CDCl3)5:0'945(s,3H),L046(s,3H)，U012.501(m,19H)，2.612(s,3H)，3.505~3.569(m,1H),3.505~3.569(d,1H),9.510(br,1H).實(shí)施例3:三羥基物縮肼基二硫代曱酸甲酯的合成(zlm-7)。sH2NNHC——SCH3+(I)HO在裝有溫度計(jì)，回流冷凝管和攪拌器的50ml三口燒瓶中，加入三羥基物(3.2g,lOmmol),肼基二硫代甲酸曱酯(1.3g,10.7mmol)和無水乙醇(20ml),油浴加熱攪拌。固體溶解，溶液呈淡黃色透明。78。C回流。反應(yīng)用TLC點(diǎn)板跟蹤，展開劑為石油醚乙酸乙酯(1:2，v/v)。回流5小時(shí)后，停止加熱，冷卻至室溫，將生成的淡黃色沉淀過濾，用少量冷乙醇淋洗，干燥后得1.7g粗品，收率41%。然后用無水乙醇重結(jié)晶，得白色顆粒狀晶體。m.p.272-275°C。IR(KBiycm"4):3440，2931,1645H516,1460，1340,-1264,鵬1030,952,782，695.HRMSm/zcald.(fnd.):425.1914(425.1927)。實(shí)施例4:水解物縮肼基二硫代曱酸曱酯的合成(zlm-8)。在裝有溫度計(jì)，回流冷凝管和攪拌器的50ml三口燒瓶中，加入水解物(3.4g,lOmmol),肼基二硫代曱酸曱酯(1.3g,10.7mmo1)和無水乙醇(15ml)，油浴加熱攪拌。固體溶解，溶液呈^^黃色透明。78。C回流。反應(yīng)用TLC點(diǎn)板跟蹤，展開劑為石油醚乙酸乙酯(1:2，v/v)?；亓?小時(shí)后，停止加熱，冷卻至室溫，將生成的淡黃色沉淀過濾，用少量冷乙醇淋洗，干燥后得3.8g粗品，收率85.9%。然后用無水乙醇重結(jié)晶，得類白色顆粒狀晶體。m.p.261-264°C。IR(KBr,cm-l):3438,2941,1654,1491,1412，1327，1044，1021,998，751，676.HRMSn^cald.(fnd.):443.1578(443.1588).畫R(CDC13)&0.968(s,3H),U782.477(m,19H),2.609(s,3H)，3.814~3.831(d,1H),3.9393.957(d,1H),4.034~4.096(m,2H),9.489(br,1H).實(shí)施例5:重排物縮肼基二硫代曱酸曱酯的合成(zlm-9)。s'^nhSsch3H2NNhH_sch3+jf^^j"^-*^i^T^i^^(1)AcO^^Ac0^^(zlm-9)在裝有溫度計(jì)，回流冷凝管和攪拌器的50ml三口燒瓶中，加入重排物(3.3g，lOmmol),肼基二硫代曱酸曱酯(1.3g,10.7mmo1)和無水乙醇(15ml)，油浴加熱攪拌。固體溶解，溶液呈淡黃色。78。C回流。反應(yīng)用TLC點(diǎn)板跟蹤，展開劑為石油醚乙酸乙酯(1:2，v/v)?；亓?小時(shí)后，停止加熱，冷卻至室溫，將生成的白色沉淀過濾，用少量冷乙醇淋洗，干燥后得3.9g粗品，收率89.9%。然后用無水乙醇重結(jié)晶，得白色顆粒狀晶體。m.p.205-208。C。IR(KBr,cm-l):3447,2941,1733,1642,1479，1245,1056，1030,952，761，672.HRMSm/zcald.(fnd.):435.2125(435.2134).^麗R(CDCl3)S:0.942(s,3H),1.057(s,3H).1.128~2.504(m,19H),2.034(s,3H),2.612(s,3H),4'5664.647(m,IH),5.3855.399(d,1H),9.475(br,1H).實(shí)施例5:抗癌活性體外篩選結(jié)果以人胃癌細(xì)胞林(BCG-823),人口腔上皮癌細(xì)胞株(KB),人肝癌細(xì)胞抹(BEL),人肺癌細(xì)胞抹(NCI)為模型。順鉑(DDP)為陽性對照品，測定了Zlm-5-Zlm-9在四種濃度下體外對腫瘤細(xì)胞生長的抑制率。結(jié)果詳見表3。<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>權(quán)利要求1.一種N-(甲硫基硫羰基)-17-甾腙化合物，結(jié)構(gòu)如式(III)所示其中，R1為乙?；驓洌琑2為羥基或氫，R3為羥基或氫，5，6位為雙鍵或單鍵，或者5位為氯取代，C19—C6呈環(huán)氧結(jié)構(gòu)。2.如權(quán)利要求1所述的N-(曱硫基硫羰基)-17-甾腙化合物，其特征在于所述化合物為下式之一<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>3.權(quán)利要求l所述N-(甲硫基硫羰基)-17-甾腙化合物的制備方法，所述方法包括用式(V)所示的甾酮與式(IV)所示的肼基^5克代曱酸曱酯在可與甾酮混溶的溶劑中、于0100°C下進(jìn)行縮合反應(yīng)，制得式(III)所示的N-(曱硫基硫羰基)-17-甾腙化合物；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>式(V)中，R4為乙酰基或氫，R2為羥基或氫，R3為羥基或氳，5,6位為雙鍵或單鍵，或者5位為氯取代，C19一C6呈環(huán)氧結(jié)構(gòu)。4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于所述可與甾酮混溶的溶劑為下列之一曱醇、乙醇、異丙醇、四氫呋喃。5.如權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于所述與甾酮混溶的溶劑為乙醇。6.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于縮合反應(yīng)在7080。C下進(jìn)行。7.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于甾酮與肼基硫代曱酸曱酯物質(zhì)的量之比為1:1.01.5。8.如權(quán)利要求1或2所述的N-(曱硫基硫羰基)-n-甾腙化合物在制備抗癌藥物中的應(yīng)用。9.如權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于所述化合物用于制備抑制癌細(xì)胞增殖的藥物。全文摘要本發(fā)明提供了一類結(jié)構(gòu)全新的N-(甲硫基硫羰基)-17-甾腙化合物(III)，并提供了此類化合物的制備方法，并發(fā)現(xiàn)它們具有較明顯的抗癌活性。本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在本發(fā)明用具有蛋白同化作用的甾酮與肼基二硫代甲酸甲酯縮合制得新型的N-(甲硫基硫羰基)甾腙化合物，它們具有一定的抗癌活性，具有進(jìn)一步開發(fā)的潛力，為新藥篩選提供了基礎(chǔ)。文檔編號(hào)C07J1/00GK101445541SQ20081016377公開日2009年6月3日申請日期2008年12月31日優(yōu)先權(quán)日2008年12月31日發(fā)明者衛(wèi)周,張李銘,楊忠愚,胡惟孝申請人:浙江工業(yè)大學(xué)