專利名稱：一種橙皮苷的高生物利用率衍生物的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是一種橙皮苷的高生物利用率衍生物的制備方法，屬柑桔功能性成分的二次深加 工領(lǐng)域。
二背景技術(shù)：
橙皮苷是柑桔中含量最為豐富的黃酮類物質(zhì)之一，但是橙皮苷在柑桔果實中是以活性較 低的糖苷形式存在，提取得到的橙皮苷其糖苷鍵并沒有斷開，這種糖苷鍵的存在特別是鼠李 糖糖苷鍵的存在，阻礙了其被生物體消化吸收，降低了其生物利用率。而且橙皮苷的溶解性 很差，它的水溶性和脂溶性都相當?shù)停沟盟灰妆簧锩割惱?，也不易透過生物細胞膜， 因而也限制了它在食品等領(lǐng)域中的應(yīng)用。
從柑桔中提取橙皮苷在上世紀70年代就已經(jīng)工業(yè)化生產(chǎn)了 ，這些橙皮苷大部分應(yīng)用于醫(yī) 藥和化妝品領(lǐng)域中，在食品和保健品領(lǐng)域幾乎沒有應(yīng)用。因為橙皮苷中糖基的存在，經(jīng)人體 口服后需要經(jīng)人體大腸中微生物分解后才能被吸收，未被分解的部分則隨大便排出體外，而 對于腸胃功能不好的人則橙皮苷的藥效也會降低。至于人體皮膚吸收，也由于糖基的存在， 降低了橙皮苷的親脂性，不易通過皮膚細胞，因此也會降低它對皮膚作用的效果。而去除糖 基或部分糖基后，橙皮苷的衍生物在水溶性、脂溶性和生物利用率上面都會改善。本發(fā)明就 是針對橙皮苷所連的糖基對橙皮苷理化性質(zhì)和活性的影響，利用酸對糖基的水解作用，得到 生物利用率較高的橙皮素-7-葡萄糖苷以及副產(chǎn)品橙皮素。另外，橙皮素-7-葡萄糖苷也是合成 高倍甜味劑的原料，合成藥物的原材料。
目前除了用酸來水解橙皮苷外，也有用酶法水解的。相對于酸法水解，酶法水解溫度較 低，水解反應(yīng)較好控制，但是經(jīng)發(fā)酵產(chǎn)酶的產(chǎn)率并不高，價格昂貴，而且水解率較低，若酶 系中含有多種酶，得到的反應(yīng)產(chǎn)物仍然復(fù)雜，使得分離純化困難。而用酸法來水解，水解率 高，成本低廉，水解產(chǎn)物橙皮素-7-葡萄糖苷和橙皮素易于分開，未經(jīng)水解的橙皮苷也可以循 環(huán)利用用于下一次水解。
三
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明公開了一種橙皮苷的高生物利用率衍生物的制備方法，其特征在于通過對橙皮苷 適度的水解，并通過一定的分離純化方法，得到純度較高的橙皮素-7-葡萄糖苷和橙皮素。本 發(fā)明的內(nèi)容分為兩部分， 一部分為通過橙皮苷的酸水解得到水解混合產(chǎn)物， 一部分為水解混
合產(chǎn)物的分離提純。為了達到這一目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下橙皮苷的酸水解時，采用的方法如下稱取橙皮苷適量，先加堿溶液，使橙皮苷溶解， 再加入一定量的有機溶劑，預(yù)熱使其中的橙皮苷完全溶解，最后加入預(yù)熱過的鹽酸溶液，加 熱回流一段時間，終止反應(yīng)，調(diào)節(jié)pH值，靜置，過濾，濾液濃縮，濃縮到一定倍數(shù)后，過 濾析出的物質(zhì)，兩次濾渣合并，烘干用于下一步提純用。
對水解混合產(chǎn)物的分離提純時，所用的方法特征在于混合物中的三種組分在純丙酮和丙 酮的水溶液中的溶解度不同，通過這一性質(zhì)對混合產(chǎn)物進行提純。將混合產(chǎn)物按固液比為1 : 10溶解在純的丙酮中，在40 50'C下攪拌1-2h ,過濾，得到濾液I和濾渣I ，濾渣I溶解 在40 50匸60%~80%的丙酮中，zK浴20-60min，再過濾，濾液II和濾渣II，濾液II經(jīng)真空蒸
干，得到橙皮素-7-葡萄糖苷，濾渣n可循環(huán)利用再用來酸水解。濾液I蒸干得到橙皮素。反
復(fù)上述步驟，即可得到純度較高的橙皮素-7-葡萄糖苷和橙皮素。 本發(fā)明的優(yōu)點
(1) 本發(fā)明獨特的酸水解工藝，先用堿對橙皮苷進行溶解，加入有機溶劑促進其溶解， 使得橙皮苷在整個溶液中呈分散狀態(tài)，再加入酸后，橙皮苷能夠較快地被水解。
(2) 本發(fā)明通過橙皮苷的酸水解，改善了其理化性質(zhì)和生物利用率。
(3) 本發(fā)明獨特的分離提純工藝，與以前樹脂層析方法相比，具有快速、溶劑消耗低、 工藝簡單、成本低廉等優(yōu)點。
(4) 本發(fā)明把分離提純得到的未分解的橙皮苷進行循環(huán)利用，再用于下一步的酸水解， 從而提到了橙皮苷總的水解率。
具體實施例方式
下面通過具體的實施方式對本發(fā)明作進一步描述，但絕不是要對本發(fā)明作任何限制。 實施例h橙皮苷購自浙江衢州天圣植物提取有限公司，含量為96。/。(HPLC)。橙皮苷稱取 3g，溶解于15ml 1M的氫氧化鈉溶液中，加入20ml的異丙醇，預(yù)熱，充分溶解后加入預(yù)熱 過的5M的鹽酸溶液18ml，補水至50-60ml，加熱沸騰回流15min，終止反應(yīng)，調(diào)節(jié)pH值至4， 靜置，過濾，得到水解產(chǎn)物2.2g，經(jīng)HPLC分析，可知橙皮苷水解率為17.31%，橙皮素-7-葡萄糖苷、橙皮素含量分別為16.26%、 4.36%。把得到的水解產(chǎn)物進行分離提純，得到橙皮素 -7-葡萄糖苷制品0.6g，純度為64%，得到橙皮素制品0.2g,純度達84。/。。
實施例2:稱取橙皮苷3g，溶解于15ml 1M的氫氧化鈉溶液中，加入20ml的異丙醇， 預(yù)熱，加入預(yù)熱過的5M的鹽酸溶液18ml，加熱沸騰回流45min，得到水解產(chǎn)物2. 3g，經(jīng)HPLC 分析，可知橙皮苷水解率為35. 53%，橙皮素-7-葡萄糖苷、橙皮素含量分別為28. 05%、 10. 06%。 水解產(chǎn)物經(jīng)過分離提純，得到橙皮素-7-葡萄糖苷制品lg，純度為70%，得到橙皮素制品0. 4g，純度達86%。
實施例3:稱取橙皮苷3g，溶解于15ml 1M氫氧化鈉溶液中，加入20ml的乙醇，預(yù)熱， 加入預(yù)熱過的5M的鹽酸溶液18ml，加熱沸騰回流45min，得到水解產(chǎn)物2. 5g，經(jīng)HPLC分析， 可知橙皮苷水解率為9. 18%,橙皮素-7-葡萄糖苷、橙皮素含量分別為8.68%、 4.50%。水解產(chǎn) 物經(jīng)過分離提純，得到橙皮素-7-葡萄糖苷制品0.22g，純度為63%,得到橙皮素制品0.1g， 純度達82%。
實施例4:稱取橙皮苷3g，溶解于15ml 1M氫氧化鈉溶液中，加入20ml的DMF(N，N—二 甲基甲酰胺)，預(yù)熱，加入預(yù)熱過的5M的鹽酸溶液18ml，加熱沸騰回流45min，得到水解產(chǎn) 物2. 3g，經(jīng)HPLC分析，可知橙皮苷水解率為16. 3%，橙皮素-7-葡萄糖苷、橙皮素含量分別 為20.06%、 0.24%。水解產(chǎn)物經(jīng)過分離提純，得到橙皮素-7-葡萄糖苷制品0. 3g，純度為63%， 得到橙皮素制品0. lg,純度達82%。
實施例5:稱取橙皮苷3g，溶解于15ml 1M氫氧化鈉溶液中，加入20ral異丙醇，預(yù)熱， 充分溶解后加入預(yù)熱過的5M鹽酸，使反應(yīng)體系中鹽酸濃度為l.ON ，加熱沸騰回流45min， 得到水解產(chǎn)物2.3g，經(jīng)HPLC分析，可知橙皮苷水解率為15. 51%，橙皮素-7-葡萄糖苷、橙皮 素含量分別為12.39%、 6.50%。水解產(chǎn)物經(jīng)過分離提純，得到橙皮素-7-葡萄糖苷制品0.4g， 純度為68%,得到橙皮素制品0. 2g,純度達84%。
實施例6:稱取橙皮苷3g,溶解于15ml 1M氫氧化鈉溶液中，加入20ml異丙醇，預(yù)熱， 加入預(yù)熱過的鹽酸，使反應(yīng)體系中使鹽酸濃度2.0N ，加熱沸騰回流45min，終止反應(yīng)，得到 水解產(chǎn)物2.3g，經(jīng)HPLC分析，可知橙皮苷水解率為48. 0%，橙皮素-7-葡萄糖苷、橙皮素含 量分別為含量為22. 05%、 28.06%。水解產(chǎn)物經(jīng)過分離提純，得到橙皮素-7-葡萄糖苷制品0. 8g， 純度為70%，得到橙皮素制品0. 6g,純度達85%。
權(quán)利要求
1. 一種橙皮苷的高生物利用率衍生物的制備方法，其特征在于以從柑桔中提取的橙皮苷為原料，溶于10～30ml1M的堿性溶液中，添加20～40ml的有機溶劑，充分溶解后，預(yù)熱，最后加入預(yù)熱過的5M鹽酸10～30ml，沸水浴回流15～60min，冷卻，調(diào)節(jié)pH值至3～6，靜置，過濾得到水解混合物?；旌衔锝?jīng)分離提純得到橙皮素-7-葡萄糖苷和橙皮素。其中的堿性溶液為氫氧化鈉或氫氧化鈣溶液。
2. 根據(jù)權(quán)利要求書1所述， 一種橙皮苷的高生物利用率衍生物的制備方法，所述的有機溶劑 為下列之一異丙醇、乙醇、甲醇、正丁醇、DMF、丙酮。
3. 根據(jù)權(quán)利要求書1所述，其中的分離提純方法是采用60% 80%丙酮水溶液和純丙酮兩種 有機溶劑來進行的。所述的方法為(1)水解混合產(chǎn)物先用純丙酮來溶解，攪拌1 2h， 過濾，得到濾渣，濾渣用純的丙酮再洗滌兩次；(2)用60% 80%丙酮溶液溶解濾渣，過 濾，濾液真空蒸發(fā)至干；(3)蒸干物在4(TC真空干燥，即可得含量較高的橙皮素-7-葡萄糖 苷。重復(fù)步驟(2)，可得到步驟(l)濾渣中殘留的橙皮素-7-葡萄糖苷。把步驟(l)中得到的濾 液真空蒸干，可得到含量較高的橙皮素。
4. 根據(jù)權(quán)利要求書3所述，水解產(chǎn)物經(jīng)過分離提純后，可以把產(chǎn)物中的三種組分分開，其中 的橙皮苷部分可以進行循環(huán)利用，再用于下一次的酸水解。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種橙皮苷的高生物利用率衍生物的制備方法，其特征在于通過對橙皮苷適度的水解，并通過一定的分離純化方法，得到純度較高的橙皮素-7-葡萄糖苷和橙皮素。其制備方法為以從柑桔中提取的橙皮苷為原料，溶于一定量的堿性溶液中，添加一定量的有機溶劑，充分溶解后，預(yù)熱，最后加入也預(yù)熱過的一定量的鹽酸，沸水浴回流一定時間，冷卻，調(diào)節(jié)pH后，靜置，過濾得到水解混合產(chǎn)物?；旌衔锝?jīng)分離提純得到橙皮素-7-葡萄糖苷、橙皮素。產(chǎn)物經(jīng)分離提純后未分解的橙皮苷可以循環(huán)利用于下一次的酸水解。本發(fā)明通過簡單的酸水解方法，即可得到高生物利用率的橙皮苷衍生物橙皮素-7-葡萄糖苷和橙皮素，因此具有成本低廉、工藝簡單的優(yōu)點，可循環(huán)生產(chǎn)，易于實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C07H17/07GK101445530SQ20081016383
公開日2009年6月3日 申請日期2008年12月25日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月25日
發(fā)明者夏其樂, 穎 楊, 邢建榮, 鄭美瑜, 陸勝民, 陳劍兵 申請人:浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院