專(zhuān)利名稱(chēng)：作為hcv ns3-蛋白酶抑制劑的酰肼-肽的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新型HCV蛋白酶抑制劑。該用途可表現(xiàn)為其抑制HCVNS3/NS4a絲氨酸蛋白酶的能力。用于這些實(shí)證的一般步驟通過(guò)以下體外分析而說(shuō)明。
用于HCV蛋白酶抑制性活性的分析 分光光度分析用于HCV絲氨酸蛋白酶的分光光度分析可針對(duì)本發(fā)明化合物通過(guò)遵循R.Zhang等人，分析生物化學(xué)，270(1999)268-275(其公開(kāi)內(nèi)容在此作為參考并入本發(fā)明)所述的步驟而進(jìn)行。基于發(fā)色酯底物的蛋白水解的分析適用于對(duì)HCV NS3蛋白酶活性的連續(xù)監(jiān)視。底物衍生自NS5A-NS5B接合順序(Ac-DTEDVVX(Nva)，其中X＝A或P)的P側(cè)，其C-端羧基基團(tuán)用4種不同發(fā)色醇(3-或4-硝基苯酚，7-羥基-4-甲基-香豆素，或4-苯基偶氮苯酚)之一進(jìn)行酯化。以下說(shuō)明這些新型分光光度酯底物的合成，表征及其在HCV NS3蛋白酶抑制劑的高容量篩選和詳細(xì)動(dòng)力學(xué)評(píng)估中的應(yīng)用。
材料和方法 材料用于分析相關(guān)的緩沖劑的化學(xué)試劑得自Sigma ChemicalCompany(St.Louis，Missouri)。用于肽合成的試劑來(lái)自Aldrich化學(xué)品，Novabiochem(San Diego，California)，Applied Biosystems(FosterCity，California)和Perseptive Biosystems(Framingham，Massachusetts)。肽手工或在自動(dòng)ABI 431A型合成器(來(lái)自Applied Biosystems)上合成。LAMBDA 12型UV/VIS光譜計(jì)來(lái)自Perkin Elmer(Norwalk，Connecticut)和96-井UV板得自Corning(Corning，New York)。預(yù)加溫模塊可來(lái)自USA Scientific(Ocala，F(xiàn)lorida)和96-井板旋渦器來(lái)自Labline儀器(Melrose Park，Illinois)。具有單色計(jì)的Spectramax Plus微滴定板讀出器得自Molecular Devices(Sunnyvale，California)。
酶制劑重組細(xì)胞雜二聚體HCV NS3/NS4A蛋白酶(菌株1a)通過(guò)使用以前公布的步驟(D.L.Sali等人，Biochemistry，37(1998)3392-3401)而制成。蛋白質(zhì)濃度通過(guò)Biorad染料方法使用一起用氨基酸分析量化的重組細(xì)胞HCV蛋白酶標(biāo)準(zhǔn)確定。在分析引發(fā)之前，酶儲(chǔ)存緩沖劑(50mM磷酸鈉pH 8.0，300mM NaCl，10％甘油，0.05％月桂基麥芽糖苷和10mM DTT)被交換用于分析緩沖劑(25mM MOPS pH6.5，300mM NaCl，10％甘油，0.05％月桂基麥芽糖苷，5μM EDTA和5μM DTT)，采用Biorad Bio-Spin P-6預(yù)填充柱。
底物合成和純化底物的合成按照R.Zhang等人，(ibid.)所述而進(jìn)行和通過(guò)使用標(biāo)準(zhǔn)程序(K.Barlos等人，Int.J.Pept.Protein Res.，37(1991)，513-520)將Fmoc-Nva-OH固定至2-氯三苯甲基氯樹(shù)脂上而引發(fā)。肽隨后，使用Fmoc化學(xué)，手工或在自動(dòng)ABI 431型肽合成器上組裝。N-乙?；屯耆Ｗo(hù)的肽鏈段被在二氯甲烷(DCM)中的10％乙酸(HOAc)和10％三氟乙醇(TFE)從樹(shù)脂上分解30min，或被在DCM中的2％三氟乙酸(TFA)10min。將合并的濾液和DCM洗液共沸蒸發(fā)(或用含水Na2CO3溶液重復(fù)提取)以去除用于分解的酸。DCM相在Na2SO4上干燥和蒸發(fā)。
酯底物使用標(biāo)準(zhǔn)酸-醇偶聯(lián)步驟(K.Holmber等人，Acta Chem.Scand.，B33(1979)410-412)組裝。將肽鏈段溶解在無(wú)水吡啶(30-60mg/ml)中，向其中加入10摩爾當(dāng)量發(fā)色團(tuán)和催化量(0.1eq.)對(duì)-甲苯磺酸(pTSA)。加入二環(huán)己基碳二亞胺(DCC，3eq.)以引發(fā)偶聯(lián)反應(yīng)。產(chǎn)物形成通過(guò)HPLC而監(jiān)控和可被發(fā)現(xiàn)在室溫下在12-72小時(shí)反應(yīng)之后完成。吡啶溶劑在真空下蒸發(fā)和進(jìn)一步通過(guò)與甲苯共沸蒸發(fā)而去除。肽酯用在DCM中的95％TFA去保護(hù)2小時(shí)和用無(wú)水乙基醚提取三次以去除過(guò)量發(fā)色團(tuán)。去保護(hù)的底物通過(guò)在C3或C8柱上的反相HPLC使用30％至60％乙腈梯度(使用六柱體積)而純化。在HPLC純化之后的總產(chǎn)率可以是約20-30％。分子量可通過(guò)電噴霧離子化質(zhì)譜而確定。底物在干燥下被儲(chǔ)存為干粉形式。
底物和產(chǎn)物的光譜底物和相應(yīng)發(fā)色團(tuán)產(chǎn)物的光譜在pH 6.5分析緩沖劑中得到。Extinction系數(shù)在最佳非峰波長(zhǎng)下在1-cm比色池(340nm，對(duì)于3-Np和HMC；370nm，對(duì)于PAP；和400nm，對(duì)于4-Np)中使用多倍稀釋而確定。最佳非峰波長(zhǎng)被定義為產(chǎn)生在底物和產(chǎn)物的吸光率之間產(chǎn)生最大分?jǐn)?shù)差異(產(chǎn)物OD-底物OD)/底物OD)時(shí)的波長(zhǎng)。
蛋白酶分析HCV蛋白酶分析在30℃下使用200μl反應(yīng)混合物在96-井微滴定板中進(jìn)行。分析緩沖劑病況(25mM MOPS pH 6.5，300mMNaCl，10％甘油，0.05％月桂基麥芽糖苷，5μM EDTA和5μM DTT)被優(yōu)化用于NS3/NS4A雜二聚體(D.L.Sali等人，ibid.))。通常，將150μl混合物緩沖劑，底物和抑制劑放在井(DMSO的最終濃度≤4％v/v)中和在30℃下預(yù)培養(yǎng)約3分鐘。在分析緩沖劑中的50μls預(yù)加溫蛋白酶(12nM，30℃)被隨后用于引發(fā)反應(yīng)(最終體積200μl)。板在分析過(guò)程(60分鐘)中使用配有單色計(jì)的Spectromax Plus微滴定板讀出器(可接受結(jié)果可使用利用截?cái)噙^(guò)濾器的板讀出器得到)被監(jiān)控在合適的波長(zhǎng)(340nm，對(duì)于3-Np和HMC；370nm，對(duì)于PAP；和400nm，對(duì)于4-Np)下的吸光率變化。Nva和發(fā)色團(tuán)之間的酯鍵的蛋白水解分解在合適的波長(zhǎng)下針對(duì)作為非酶水解對(duì)照物的無(wú)酶空白進(jìn)行監(jiān)控。對(duì)底物動(dòng)力學(xué)參數(shù)的評(píng)估在30-倍底物濃度范圍(～6-200μM)內(nèi)進(jìn)行。起始速率使用線性回歸而確定和動(dòng)力學(xué)常數(shù)通過(guò)使用非線性回歸分析將數(shù)據(jù)擬合至Michaelis-Menten等式而得到(Mac Curve Fit 1.1，K.Raner)。轉(zhuǎn)換數(shù)(kcat)在假設(shè)酶完全活性的情況下計(jì)算。
抑制劑和鈍化劑的評(píng)估競(jìng)爭(zhēng)抑制劑Ac-D-(D-Gla)-L-I-(Cha)-C-OH(27)，Ac-DTEDVVA(Nva)-OH和Ac-DTEDVVP(Nva)-OH的抑制常數(shù)(Ki)在固定濃度的酶和底物下通過(guò)將vo/vi對(duì)抑制劑濃度([I]o)根據(jù)競(jìng)爭(zhēng)抑制動(dòng)力學(xué)的再排列Michaelis-Menten等式vo/vi＝1+[I]o/(Ki(1+[S]o/Km))作圖而實(shí)驗(yàn)確定，其中vo是未抑制的起始速度，vi是在抑制劑存在下在任何給定抑制劑濃度([I]o)下的起始速度和[S]o是所用的底物濃度。所得數(shù)據(jù)使用線性退化擬合并將所得斜率，1/(Ki(1+[S]o/Km))，用于計(jì)算Ki值。一些本發(fā)明化合物的所得Ki和IC50值(納摩)在下表2中給出。
Ki和IC50值的范圍如下 A＝Ki＜200nM；B＝Ki≥200nM和＜500nM；C＝Ki＞500nM A＝IC50≤500nM；B＝IC50＞500nM和≤3000nM 表2



NT＝?jīng)]有測(cè)試
權(quán)利要求
1.一種化合物，或所述化合物的對(duì)映異構(gòu)體，立體異構(gòu)體，旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，互變異構(gòu)體，和消旋體，或所述化合物的藥物可接受鹽，溶劑合物或酯，所述化合物具有結(jié)構(gòu)式I所示的通式結(jié)構(gòu)
結(jié)構(gòu)式I
其中
R1是氫，烷基，鏈烯基，炔基，芳基，芳基烷基，芳基鏈烯基，雜烷基，環(huán)鏈烯基，環(huán)鏈烯基烷基-，環(huán)鏈烯基鏈烯基-，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基-，環(huán)烷基鏈烯基-，
其中每一所述烷基，鏈烯基，炔基，芳基，芳基烷基，芳基鏈烯基，雜烷基，環(huán)鏈烯基，環(huán)鏈烯基烷基-，環(huán)鏈烯基鏈烯基-，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基-，環(huán)烷基鏈烯基-，
可未被取代或被一個(gè)或多個(gè)可相同或不同的部分所取代，每一部分獨(dú)立地選自鹵素，硝基，烷基，氨基烷基，烷氧基烷基-，氨基烷氧基烷基-，鏈烯基，雜芳基，環(huán)烷基，環(huán)鏈烯基，雜環(huán)烷基，雜環(huán)鏈烯基，芳基，三鹵代烷基，二鹵代烷基，單鹵代烷基，烷基磺酰基，和芳基磺?；?br> 進(jìn)一步其中R2選自氫，烷基，環(huán)烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)鏈烯基，雜烷基，雜環(huán)烷基，雜環(huán)鏈烯基，芳基，雜芳基，環(huán)烷基烷基-，環(huán)鏈烯基烷基-，環(huán)烷基鏈烯基-，環(huán)鏈烯基鏈烯基-，雜環(huán)烷基烷基-，雜環(huán)鏈烯基烷基-，雜環(huán)烷基鏈烯基-，雜環(huán)鏈烯基鏈烯基-，芳基烷基，雜芳基，和雜芳基烷基-；
A和M相互連接，使得以上在結(jié)構(gòu)式I中所示的部分
形成3，4，5，6，7或8-元環(huán)烷基，三種，5，4，6，7或8-元環(huán)鏈烯基，4至8-元雜環(huán)基，4至8-元雜環(huán)鏈烯基，6至10元芳基，或5至10元雜芳基，其中每一所述3，4，5，6，7或8-元環(huán)烷基，3，4，5，6，7或8-元環(huán)鏈烯基，4至8-元雜環(huán)基，4至8-元雜環(huán)鏈烯基，6至10元芳基，或5至10元雜芳基可未被取代或被一個(gè)或多個(gè)可相同或不同的部分所取代，每一部分獨(dú)立地選自烷基，鏈烯基，炔基，鹵素，三鹵代烷基，二鹵代烷基，單鹵代烷基，雜烷基，氨基，氨基烷基，烷氧基烷基-，烷基磺?；?，和芳基磺酰基-；
X選自
其中T1和T2可相同或不同，分別獨(dú)立地選自烷基，芳基，雜烷基，雜芳基，鹵代，氨基，烷基氨基-，烷基硫代-，酰氨基或氨基甲酸酯脲；
W3和R6可以是一個(gè)或兩個(gè)部分；
W選自H，烷基-，鏈烯基-，炔基-，環(huán)烷基-，環(huán)鏈烯基-，雜烷基-，雜環(huán)基-，雜環(huán)鏈烯基-，芳基-，雜芳基-，環(huán)烷基烷基-，環(huán)鏈烯基烷基-，環(huán)烷基鏈烯基-，環(huán)鏈烯基鏈烯基-，雜環(huán)基烷基-，雜環(huán)基鏈烯基-，雜環(huán)鏈烯基烷基-，雜環(huán)鏈烯基鏈烯基-，芳基烷基-，芳基鏈烯基-，雜芳基烷基-，雜芳基鏈烯基-，烷氧基，芳基氧基，烷基硫代，芳基硫代，氨基，羥基，酰氨基，酯，羧酸，氨基甲酸酯，脲，酮，醛，氰基，硝基，鹵素，烷基芳基，烷基雜芳基-，鏈烯基芳基-，和鏈烯基雜芳基-，其中每一所述烷基-，鏈烯基-，炔基，環(huán)烷基-，環(huán)鏈烯基-，雜烷基-，雜環(huán)基-，雜環(huán)鏈烯基，芳基-，雜芳基-，環(huán)烷基烷基-，環(huán)鏈烯基烷基-，環(huán)烷基鏈烯基-，環(huán)鏈烯基鏈烯基-，雜環(huán)基烷基-，雜環(huán)基鏈烯基-，雜環(huán)鏈烯基烷基-，雜環(huán)鏈烯基鏈烯基-，芳基烷基-，芳基鏈烯基-，雜芳基烷基-，和雜芳基鏈烯基-可未被取代或用一個(gè)或多個(gè)部分所取代，所述部分可相同或不同，每一部分獨(dú)立地選自烷基，鏈烯基，炔基，單鹵代烷基，二鹵代烷基，三鹵代烷基，鹵素芳基，芳基烷基，環(huán)烷基，雜環(huán)烷基，羥基，硫代，烷氧基，芳基氧基，烷基硫代，芳基硫代，氨基，酰氨基，酯，羧酸，氨基甲酸酯，脲，酮，醛，氰基，硝基，磺酰氨基，亞砜，砜，磺?；澹ｋ?，和異羥肟酸酯；
W1選自H，烷基-，鏈烯基-，炔基-，環(huán)烷基-，環(huán)鏈烯基-，雜烷基-，雜環(huán)基-，雜環(huán)鏈烯基-，芳基-，雜芳基-，環(huán)烷基烷基-，環(huán)鏈烯基烷基-，環(huán)烷基鏈烯基-，環(huán)鏈烯基鏈烯基-，雜環(huán)基烷基-，雜環(huán)基鏈烯基-，雜環(huán)鏈烯基烷基-，雜環(huán)鏈烯基鏈烯基-，芳基烷基-，芳基鏈烯基-，雜芳基烷基-，雜芳基鏈烯基-，烷氧基，芳基氧基，烷基硫代，芳基硫代，氨基，羥基，酰氨基，酯，羧酸，氨基甲酸酯，脲，酮，醛，氰基，硝基，鹵素，烷基芳基，烷基雜芳基-，鏈烯基芳基-，和鏈烯基雜芳基-，其中每一所述烷基-，鏈烯基-，炔基，環(huán)烷基-，環(huán)鏈烯基-，雜烷基-，雜環(huán)基-，雜環(huán)鏈烯基，芳基-，雜芳基-，環(huán)烷基烷基-，環(huán)鏈烯基烷基-，環(huán)烷基鏈烯基-，環(huán)鏈烯基鏈烯基-，雜環(huán)基烷基-，雜環(huán)基鏈烯基-，雜環(huán)鏈烯基烷基-，雜環(huán)鏈烯基鏈烯基-，芳基烷基-，芳基鏈烯基-，雜芳基烷基-，和雜芳基鏈烯基-可未被取代或用一個(gè)或多個(gè)部分所取代，所述部分可相同或不同，每一部分獨(dú)立地選自烷基，鏈烯基，炔基，單鹵代烷基，二鹵代烷基，三鹵代烷基，鹵素芳基，芳基烷基，環(huán)烷基，雜環(huán)烷基，羥基，硫代，烷氧基，芳基氧基，烷基硫代，芳基硫代，氨基，酰氨基，酯，羧酸，氨基甲酸酯，脲，酮，醛，氰基，硝基，磺酰氨基，亞砜，砜，磺酰基脲，酰肼，和異羥肟酸酯；
W3選自H，烷基-，鏈烯基-，炔基-，環(huán)烷基-，環(huán)鏈烯基-，雜烷基-，雜環(huán)基-，雜環(huán)鏈烯基-，芳基-，雜芳基-，環(huán)烷基烷基-，環(huán)鏈烯基烷基-，環(huán)烷基鏈烯基-，環(huán)鏈烯基鏈烯基-，雜環(huán)基烷基-，雜環(huán)基鏈烯基-，雜環(huán)鏈烯基烷基-，雜環(huán)鏈烯基鏈烯基-，芳基烷基-，芳基鏈烯基-，雜芳基烷基-，雜芳基鏈烯基-，烷氧基，芳基氧基，烷基硫代，芳基硫代，氨基，羥基，酰氨基，酯，羧酸，氨基甲酸酯，脲，酮，醛，氰基，硝基，鹵素，烷基芳基，烷基雜芳基-，鏈烯基芳基-，和鏈烯基雜芳基-，其中每一所述烷基-，鏈烯基-，炔基，環(huán)烷基-，環(huán)鏈烯基-，雜烷基-，雜環(huán)基-，雜環(huán)鏈烯基，芳基-，雜芳基-，環(huán)烷基烷基-，環(huán)鏈烯基烷基-，環(huán)烷基鏈烯基-，環(huán)鏈烯基鏈烯基-，雜環(huán)基烷基-，雜環(huán)基鏈烯基-，雜環(huán)鏈烯基烷基-，雜環(huán)鏈烯基鏈烯基-，芳基烷基-，芳基鏈烯基-，雜芳基烷基-，和雜芳基鏈烯基-可未被取代或用一個(gè)或多個(gè)部分所取代，所述部分可相同或不同，每一部分獨(dú)立地選自烷基，鏈烯基，炔基，單鹵代烷基，二鹵代烷基，三鹵代烷基，鹵素芳基，芳基烷基，環(huán)烷基，雜環(huán)烷基，羥基，硫代，烷氧基，芳基氧基，烷基硫代，芳基硫代，氨基，酰氨基，酯，羧酸，氨基甲酸酯，脲，酮，醛，氰基，硝基，磺酰氨基，亞砜，砜，磺酰基脲，酰肼，和異羥肟酸酯；
R3選自H，烷基-，鏈烯基-，炔基-，環(huán)烷基-，環(huán)鏈烯基-，雜烷基-，雜環(huán)基-，雜環(huán)鏈烯基-，芳基-，雜芳基-，環(huán)烷基烷基-，環(huán)鏈烯基烷基-，環(huán)烷基鏈烯基-，環(huán)鏈烯基鏈烯基-，雜環(huán)基烷基-，雜環(huán)基鏈烯基-，雜環(huán)鏈烯基烷基-，雜環(huán)鏈烯基鏈烯基-，芳基烷基-，芳基鏈烯基-，雜芳基烷基-，雜芳基鏈烯基-，烷氧基，芳基氧基，烷基硫代，芳基硫代，氨基，羥基，酰氨基，酯，羧酸，氨基甲酸酯，脲，酮，醛，氰基，硝基，鹵素，烷基芳基，烷基雜芳基-，鏈烯基芳基-，和鏈烯基雜芳基-，其中每一所述烷基-，鏈烯基-，炔基，環(huán)烷基-，環(huán)鏈烯基-，雜烷基-，雜環(huán)基-，雜環(huán)鏈烯基，芳基-，雜芳基-，環(huán)烷基烷基-，環(huán)鏈烯基烷基-，環(huán)烷基鏈烯基-，環(huán)鏈烯基鏈烯基-，雜環(huán)基烷基-，雜環(huán)基鏈烯基-，雜環(huán)鏈烯基烷基-，雜環(huán)鏈烯基鏈烯基-，芳基烷基-，芳基鏈烯基-，雜芳基烷基-，和雜芳基鏈烯基-可未被取代或用一個(gè)或多個(gè)部分所取代，所述部分可相同或不同，每一部分獨(dú)立地選自烷基，鏈烯基，炔基，單鹵代烷基，二鹵代烷基，三鹵代烷基，鹵素芳基，芳基烷基，環(huán)烷基，雜環(huán)烷基，羥基，硫代，烷氧基，芳基氧基，烷基硫代，芳基硫代，氨基，酰氨基，酯，羧酸，氨基甲酸酯，脲，酮，醛，氰基，硝基，磺酰氨基，亞砜，砜，磺?；澹ｋ?，和異羥肟酸酯；
R4選自H，烷基-，鏈烯基-，炔基-，環(huán)烷基-，環(huán)鏈烯基-，雜烷基-，雜環(huán)基-，雜環(huán)鏈烯基-，芳基-，雜芳基-，環(huán)烷基烷基-，環(huán)鏈烯基烷基-，環(huán)烷基鏈烯基-，環(huán)鏈烯基鏈烯基-，雜環(huán)基烷基-，雜環(huán)基鏈烯基-，雜環(huán)鏈烯基烷基-，雜環(huán)鏈烯基鏈烯基-，芳基烷基-，芳基鏈烯基-，雜芳基烷基-，雜芳基鏈烯基-，烷氧基，芳基氧基，烷基硫代，芳基硫代，氨基，羥基，酰氨基，酯，羧酸，氨基甲酸酯，脲，酮，醛，氰基，硝基，鹵素，烷基芳基，烷基雜芳基-，鏈烯基芳基-，和鏈烯基雜芳基-，其中每一所述烷基-，鏈烯基-，炔基，環(huán)烷基-，環(huán)鏈烯基-，雜烷基-，雜環(huán)基-，雜環(huán)鏈烯基，芳基-，雜芳基-，環(huán)烷基烷基-，環(huán)鏈烯基烷基-，環(huán)烷基鏈烯基-，環(huán)鏈烯基鏈烯基-，雜環(huán)基烷基-，雜環(huán)基鏈烯基-，雜環(huán)鏈烯基烷基-，雜環(huán)鏈烯基鏈烯基-，芳基烷基-，芳基鏈烯基-，雜芳基烷基-，和雜芳基鏈烯基-可未被取代或用一個(gè)或多個(gè)部分所取代，所述部分可相同或不同，每一部分獨(dú)立地選自烷基，鏈烯基，炔基，單鹵代烷基，二鹵代烷基，三鹵代烷基，鹵素芳基，芳基烷基，環(huán)烷基，雜環(huán)烷基，羥基，硫代，烷氧基，芳基氧基，烷基硫代，芳基硫代，氨基，酰氨基，酯，羧酸，氨基甲酸酯，脲，酮，醛，氰基，硝基，磺酰氨基，亞砜，砜，磺?；?，酰肼，和異羥肟酸酯；
R5選自H，烷基-，鏈烯基-，炔基-，環(huán)烷基-，環(huán)鏈烯基-，雜烷基-，雜環(huán)基-，雜環(huán)鏈烯基-，芳基-，雜芳基-，環(huán)烷基烷基-，環(huán)鏈烯基烷基-，環(huán)烷基鏈烯基-，環(huán)鏈烯基鏈烯基-，雜環(huán)基烷基-，雜環(huán)基鏈烯基-，雜環(huán)鏈烯基烷基-，雜環(huán)鏈烯基鏈烯基-，芳基烷基-，芳基鏈烯基-，雜芳基烷基-，雜芳基鏈烯基-，烷氧基，芳基氧基，烷基硫代，芳基硫代，氨基，羥基，酰氨基，酯，羧酸，氨基甲酸酯，脲，酮，醛，氰基，硝基，鹵素，烷基芳基，烷基雜芳基-，鏈烯基芳基-，和鏈烯基雜芳基-，其中每一所述烷基-，鏈烯基-，炔基，環(huán)烷基-，環(huán)鏈烯基-，雜烷基-，雜環(huán)基-，雜環(huán)鏈烯基，芳基-，雜芳基-，環(huán)烷基烷基-，環(huán)鏈烯基烷基-，環(huán)烷基鏈烯基-，環(huán)鏈烯基鏈烯基-，雜環(huán)基烷基-，雜環(huán)基鏈烯基-，雜環(huán)鏈烯基烷基-，雜環(huán)鏈烯基鏈烯基-，芳基烷基-，芳基鏈烯基-，雜芳基烷基-，和雜芳基鏈烯基-可未被取代或用一個(gè)或多個(gè)部分所取代，所述部分可相同或不同，每一部分獨(dú)立地選自烷基，鏈烯基，炔基，單鹵代烷基，二鹵代烷基，三鹵代烷基，鹵素芳基，芳基烷基，環(huán)烷基，雜環(huán)烷基，羥基，硫代，烷氧基，芳基氧基，烷基硫代，芳基硫代，氨基，酰氨基，酯，羧酸，氨基甲酸酯，脲，酮，醛，氰基，硝基，磺酰氨基，亞砜，砜，磺酰基脲，酰肼，和異羥肟酸酯；
R6選自H，烷基-，鏈烯基-，炔基-，環(huán)烷基-，環(huán)鏈烯基-，雜烷基-，雜環(huán)基-，雜環(huán)鏈烯基-，芳基-，雜芳基-，環(huán)烷基烷基-，環(huán)鏈烯基烷基-，環(huán)烷基鏈烯基-，環(huán)鏈烯基鏈烯基-，雜環(huán)基烷基-，雜環(huán)基鏈烯基-，雜環(huán)鏈烯基烷基-，雜環(huán)鏈烯基鏈烯基-，芳基烷基-，芳基鏈烯基-，雜芳基烷基-，雜芳基鏈烯基-，烷氧基，芳基氧基，烷基硫代，芳基硫代，氨基，羥基，酰氨基，酯，羧酸，氨基甲酸酯，脲，酮，醛，氰基，硝基，鹵素，烷基芳基，烷基雜芳基-，鏈烯基芳基-，和鏈烯基雜芳基-，其中每一所述烷基-，鏈烯基-，炔基，環(huán)烷基-，環(huán)鏈烯基-，雜烷基-，雜環(huán)基-，雜環(huán)鏈烯基，芳基-，雜芳基-，環(huán)烷基烷基-，環(huán)鏈烯基烷基-，環(huán)烷基鏈烯基-，環(huán)鏈烯基鏈烯基-，雜環(huán)基烷基-，雜環(huán)基鏈烯基-，雜環(huán)鏈烯基烷基-，雜環(huán)鏈烯基鏈烯基-，芳基烷基-，芳基鏈烯基-，雜芳基烷基-，和雜芳基鏈烯基-可未被取代或用一個(gè)或多個(gè)部分所取代，所述部分可相同或不同，每一部分獨(dú)立地選自烷基，鏈烯基，炔基，單鹵代烷基，二鹵代烷基，三鹵代烷基，鹵素芳基，芳基烷基，環(huán)烷基，雜環(huán)烷基，羥基，硫代，烷氧基，芳基氧基，烷基硫代，芳基硫代，氨基，酰氨基，酯，羧酸，氨基甲酸酯，脲，酮，醛，氰基，硝基，磺酰氨基，亞砜，砜，磺?；?，酰肼，和異羥肟酸酯；
或R4和R5與它們所連接的碳一起形成3至8-元環(huán)烷基，4至8-元雜環(huán)基，3至8-元環(huán)鏈烯基，4至8-元雜環(huán)鏈烯基，6至10元芳基，或5至10元雜芳基，其中每一所述3至8-元環(huán)烷基，4至8-元雜環(huán)基，3至8-元環(huán)鏈烯基，4至8-元雜環(huán)鏈烯基，6至10元芳基，或5至10元雜芳基可未被取代或被一個(gè)或多個(gè)可相同或不同的部分所取代，每一部分獨(dú)立地選自烷基，鏈烯基，炔基，單鹵代烷基，二鹵代烷基，三鹵代烷基和鹵素；或
部分
是
U選自O(shè)，NR3，S，和CR32；和
n是0-5。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中，R1是
和進(jìn)一步其中R2是甲基。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中，R1是
4.權(quán)利要求1的化合物，其中，W1是烷基。
5.權(quán)利要求1的化合物，其中，W1是丙基。
6.權(quán)利要求1的化合物，其中，W1是環(huán)烷基烷基。
7.權(quán)利要求1的化合物，其中，W1是環(huán)丙基甲基。
8.權(quán)利要求1的化合物，其中，W3是烷基。
9.權(quán)利要求1的化合物，其中，W3是叔丁基。
10.權(quán)利要求1的化合物，其中，W3是環(huán)烷基，其中所述環(huán)烷基可未被取代或用烷基取代。
11.權(quán)利要求1的化合物，其中，W3是環(huán)己基。
12.權(quán)利要求1的化合物，其中，W3是
13.權(quán)利要求1的化合物，其中，部分
14.權(quán)利要求1的化合物，其中，部分
是
15.權(quán)利要求1的化合物，其中，部分
16.權(quán)利要求1的化合物，其中，R4和R5可相同或不同，獨(dú)立地是氫或烷基。
17.權(quán)利要求1的化合物，其中，R4和R5可相同或不同，獨(dú)立地是氫或叔丁基。
18權(quán)利要求1的化合物，其中，R4和R5與它們所連接的碳一起形成環(huán)烷基。
19.權(quán)利要求1的化合物，其中，R4和R5與它們所連接的碳一起形成環(huán)己基。
20.權(quán)利要求1的化合物，其中，X選自
其中W和R3，可相同或不同，獨(dú)立地是烷基或雜芳基。
21.權(quán)利要求1的化合物，其中，X是
其中R6是兩個(gè)氫。
22.權(quán)利要求1的化合物，其中，X是
其中R6是兩個(gè)氫。
23.權(quán)利要求1的化合物，其中，X是
其中W和R3分別獨(dú)立地是甲基和R6是兩個(gè)氫。
24.權(quán)利要求1的化合物，其中，X是
其中W是吡啶基和R3是甲基和R6是兩個(gè)氫。
25.權(quán)利要求1的化合物，其中，X是
其中W是
R3是甲基和R6是兩個(gè)氫。
26.權(quán)利要求1的化合物，其中，X是
其中W是叔丁基。
27.權(quán)利要求1的化合物，其中，U是NH。
28.下式化合物
其中可變部分被獨(dú)立地選擇，進(jìn)一步其中R1是
W1是丙基或環(huán)丙基甲基；
部分
W3是叔丁基，環(huán)己基，或1-甲基環(huán)己基；
R4是氫和R5是叔丁基；或R4和R5與它們所連接的碳一起形成環(huán)己基；
X是
其中W是甲基或
R3是甲基，和R6是兩個(gè)氫或
X是
其中W是叔丁基，
其中R6是兩個(gè)氫；
和U是NH。
29.一種藥物組合物，包含作為活性成分的至少一項(xiàng)權(quán)利要求1的化合物。
30.權(quán)利要求29的藥物組合物，它用于治療與HCV有關(guān)的病癥。
31.權(quán)利要求29的藥物組合物，它另外包含至少一種藥物可接受載體。
32.權(quán)利要求31的藥物組合物，它另外包含至少一種抗病毒劑。
33.權(quán)利要求32的藥物組合物，它另外包含至少一種干擾素。
34.權(quán)利要求33的藥物組合物，其中所述至少一種抗病毒劑是利巴韋林和所述至少一種干擾素是α-干擾素或聚乙二醇化干擾素。
35.權(quán)利要求34的藥物組合物，其中所述聚乙二醇化干擾素是PEG-IntronTM牌聚乙二醇化干擾素。
36.一種治療與HCV有關(guān)的病癥的方法，所述方法包括向需要這種治療的病人給藥一種包含治療有效量至少一項(xiàng)權(quán)利要求1的化合物的藥物組合物。
37.權(quán)利要求36的方法，其中所述給藥是口服或皮下。
38.權(quán)利要求1的化合物用于制造藥物的用途，所述藥物用于治療與HCV有關(guān)的病癥。
39.一種制備用于治療與HCV有關(guān)的病癥的藥物組合物的方法，所述方法包括將至少一項(xiàng)權(quán)利要求1的化合物和至少一種藥物可接受載體進(jìn)行緊密物理接觸。
40.一種具有HCV蛋白酶抑制性活性的化合物，或所述化合物的對(duì)映異構(gòu)體，立體異構(gòu)體，旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，互變異構(gòu)體，和消旋體，或所述化合物的藥物可接受鹽，溶劑合物或酯，所述化合物選自具有以下列出的結(jié)構(gòu)的化合物
41.純化形式的權(quán)利要求1的化合物。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了具有HCV蛋白酶抑制性活性的新型化合物以及用于制備這些化合物的方法。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明公開(kāi)了包含這些化合物的藥物組合物以及使用它們治療與HCV蛋白酶有關(guān)的病癥的方法。
文檔編號(hào)C07K5/06GK101679483SQ200880016894
公開(kāi)日2010年3月24日 申請(qǐng)日期2008年3月20日 優(yōu)先權(quán)日2007年3月23日
發(fā)明者S·文卡特拉曼, G·F·約若吉, N·施 申請(qǐng)人:先靈公司