專利名稱：一種制備高純度馬藺子乙素的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及制藥領(lǐng)域，具體涉及利用提純法制備出高純度馬藺子乙素。
背景技術(shù)：
馬藺子素是由鳶尾科植物馬藺子中提取的主要抗癌活性成分，主要含馬藺子甲素和 馬藺子乙素。
馬藺子乙素(I )的結(jié)構(gòu)為
馬藺子甲素(II)的結(jié)構(gòu)為-
o
H3C(^^^^Ji^^^ (CH2)sCH=CH<CH2)5CH3
i T
馬藺子素是山東新華制藥股份有限公司與天津市醫(yī)藥科學(xué)研究所聯(lián)合開發(fā)的西藥二 類新藥，1996年上市，臨床作為放療增敏劑與放療合用。
馬藺子甲素和馬藺子乙素二者結(jié)構(gòu)相似，不易分離與測定。馬藺子素成分分離測定 方法己報導(dǎo)的HPLC法藥物分析雜志，10 (4)， 19卯，P230-232。提供的方法是以甲 醇-水-乙腈-乙醚(65: 30: 20: 20)為流動相，但該流動相乙醚極易揮發(fā)，組分變動較 大，不適合制備用。中草藥，16 (3), 1985， P5，提供的方法是以無水甲醇加入硝酸銀(5 X1(^M)為流動相，但該流動相對儀器及色譜柱有損害，而且硝酸銀不易從樣品中除去， 同樣也不適合制備用。馬藺子乙素在馬藺子素中含量低，約10%，不適合使用反相制備色譜方法制備。
馬藺子乙素也可以用全合成的方法制備出來中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，22 (2)， 1991， P57-59。全合成路線比較長，試劑比較昂貴，難度較大。
用提純法制備高純度的馬藺子乙素至今未見報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種制備高純度馬藺子乙素的方法，將馬藺子提 取物經(jīng)過提純制得，產(chǎn)品純度高，操作簡易。
本發(fā)明制備高純度馬藺子乙素的方法，將馬藺子提取物經(jīng)過提純制得，其特征在于 提純過程分別是用甲苯和甲醇提純。
馬藺子提取物的制備將采購的馬藺子種皮，經(jīng)粉碎、用乙酸乙酯回流提取、過濾， 濾液控溫60。C以下，壓力-O. 07~-0.09MPa減壓濃縮至干，用乙醇室溫溶解，氧化鋁柱 層析，乙醇洗脫。洗脫液控溫60'C以下，壓力-0.07~-0.091>1 &減壓濃縮至原體積的二 分之一，-20°(:冷凍結(jié)晶，過濾得粗品。粗品通過石油醚、乙醇反復(fù)重結(jié)晶(50'C溶解， -20'C結(jié)晶)，得馬藺子提取物。質(zhì)量指標(biāo)馬藺子甲素83%~86%，馬藺子乙素9%~12%， 均以質(zhì)量百分?jǐn)?shù)計。
本發(fā)明在馬藺子提取物的純化過程中可以將甲苯、甲醇的結(jié)晶順序做調(diào)整，比如可 以先用甲苯純化一遍或幾遍，再用甲醇純化；或先用甲醇純化一遍或幾遍，再用甲苯純 化；或者可以將兩種溶劑交替使用等。
本發(fā)明的關(guān)鍵點在于使用了芳香烴類溶劑，特別是甲苯，有效的去除了馬藺子甲素 和有關(guān)物質(zhì)，提高了馬藺子乙素的純度。
一種優(yōu)選的技術(shù)方案為
純化過程依次包括用甲苯初提純、甲醇提純和甲苯再提純。
甲苯初提純的方法為馬藺子提取物用甲苯于40^0'C溶解，0 5'C結(jié)晶4-8小時， 最優(yōu)6小時，過濾，室溫減壓干燥；該步驟也可以反復(fù)進行幾遍，最后一遍室溫減壓干
極一
甲醇提純的方法為甲苯初提純后得到的濾餅用甲醇回流溶解，40-50。C結(jié)晶12-24 小時，最優(yōu)16-18小時，過濾，室溫減壓干燥；該步驟也可以反復(fù)進行幾遍，最后一遍 室溫減壓干燥。
甲苯再提純的方法為甲醇提純后得到的濾餅用甲苯于40~50'(:溶解，0~5'。結(jié)晶4-8 小時，最優(yōu)6小時，室溫減壓干燥。該步驟也可以反復(fù)進行幾遍，最后一遍室溫減壓干極
本發(fā)明的優(yōu)點
使用本發(fā)明方法制備的馬藺子乙素，產(chǎn)品純度高，操作簡易。純化后的馬藺子乙素 用五氧化二磷為干燥劑，室溫減壓干燥，得馬藺子乙素，HPLC法測定(面積歸一化法) >99%。
具體實施例方式
以下結(jié)合實施例說明本發(fā)明，但不限制本發(fā)明。 實施例l-
依次包括如下步驟
馬藺子提取物(含馬藺子甲素83%，馬藺子乙素12%)用甲苯于4(K50'C溶解，0~5 'C結(jié)晶6小時，過濾，少量甲苯洗滌。
濾餅用甲苯于40 50'C溶解，0~5'(:結(jié)晶6小時，過濾，少量甲苯洗滌。 濾餅用甲苯于40 5(TC溶解，0^5'C結(jié)晶6小時，過濾，少量甲苯洗滌。室溫減壓干
極-
濾餅用甲醇回流溶解，40-50'C結(jié)晶16小時，過濾，少量甲醇洗滌。 濾餅用甲醇回流溶解，40-50'C結(jié)晶16小時，過濾，少量甲醇洗滌。 濾餅用甲醇回流溶解，熱過濾，濾液40-50'C結(jié)晶16小時。過濾，少量甲醇洗滌。 室溫減壓干燥。
濾餅用甲苯于40 50'C溶解，熱過濾，0^5'C結(jié)晶6小時。過濾，少量甲苯洗滌。五 氧化二磷為干燥劑室溫減壓干燥至恒重。得馬藺子乙素，HPLC法測定(面積歸一化法) 含量99%。
實施例2:
依次包括如下步驟
馬藺子提取物(含馬藺子甲素85%，馬藺子乙素9%)用甲苯于40 50'C溶解，0~5 'C結(jié)晶6小時，過濾，少量甲苯洗滌。
濾餅用甲醇回流溶解，40-50 。C結(jié)晶16小時，過濾，少量甲醇洗滌。
濾餅用甲醇回流溶解，40-50°C結(jié)晶16小時,過濾，少量甲醇洗滌。
濾餅用甲醇回流溶解，40-50 °C結(jié)晶16小時，過濾，少量甲醇洗滌。
濾餅用甲醇回流溶解，40-50'C結(jié)晶16小時，過濾，少量甲醇洗滌。
濾餅用甲醇回流溶解，40-50 。C結(jié)晶16小時，過濾，少量甲醇洗滌。
5濾餅用甲醇回流溶解，40-50'C結(jié)晶16小時，過濾，少量甲醇洗滌。 濾餅用甲醇回流溶解，熱過濾，濾液40-50'C結(jié)晶16小時，過濾，少量甲醇洗滌。 室溫減壓干燥。
濾餅用甲苯于40 50'C溶解，熱過濾，，0~5°(:結(jié)晶6小時。過濾，少量甲苯洗漆。 五氧化二磷為干燥劑室溫減壓干燥至恒重。得馬藺子乙素，HPLC法測定(面積歸一化 法)含量99.2%。
權(quán)利要求
1、一種制備高純度馬藺子乙素的方法，將馬藺子提取物經(jīng)過提純制得，其特征在于提純過程分別是用甲苯和甲醇提純。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于馬藺子提取物的純化過程可以是先用甲 苯純化一遍或幾遍，再用甲醇純化，或先用甲醇純化一遍或幾遍，再用甲苯純化，或者 將兩種溶劑交替純化。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于純化過程依次包括用甲苯初提純、 甲醇提純和甲苯再提純。
4、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于所述甲苯初提純的方法為馬藺子提取物用甲苯于40^50'C溶解，0^'C結(jié)晶4-8小 時，過濾，室溫減壓干燥；所述甲醇提純的方法為甲苯初提純后得到的濾餅用甲醇回流溶解，40-50'C結(jié)晶 12-24小時，過濾，室溫減壓干燥；所述甲苯再提純的方法為甲醇提純后得到的濾餅用甲苯于40巧(TC溶解，(K5'C結(jié) 晶4-8小時，室溫減壓干燥。
5、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述馬藺子提取物中含有馬藺子甲素 83%~86%，馬藺子乙素9%~12%，均以質(zhì)量百分?jǐn)?shù)計。
全文摘要
本發(fā)明制備高純度馬藺子乙素的方法，將馬藺子提取物經(jīng)過提純制得，其特征在于提純過程分別是用甲苯和甲醇提純。既可以先用甲苯純化一遍或幾遍，再用甲醇純化；或先用甲醇純化一遍或幾遍，再用甲苯純化；或者可以將兩種溶劑交替使用。純化后的馬藺子乙素用五氧化二磷為干燥劑，室溫減壓干燥，得馬藺子乙素，HPLC法測定(面積歸一化法)＞99％。本發(fā)明具有操作簡易的特點。
文檔編號C07C46/10GK101575278SQ20091001598
公開日2009年11月11日 申請日期2009年6月8日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月8日
發(fā)明者孫太紅, 王劍平 申請人:山東新華制藥股份有限公司