專利名稱：一種海藻倍半萜類化合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及海洋天然產(chǎn)物領(lǐng)域，具體地說是一種海藻倍半萜類化合物及其制備方 法。隨著陸地生物天然產(chǎn)物資源的廣泛開發(fā)，人們把尋找新藥的目光越來越多的聚焦 在海洋天然產(chǎn)物資源上，海洋中生存著地球上80%以上的生物資源，豐富多樣的物種能夠 在高壓、高鹽、低氧、競爭激烈的海洋環(huán)境中生存下來，說明它們擁有天然自衛(wèi)與對抗疾病 的能力，其中許多海洋生物體內(nèi)含有化學(xué)結(jié)構(gòu)新穎、生物活性顯著的化學(xué)防御物質(zhì)，為海洋 天然產(chǎn)物研究提供了巨大的資源寶庫，而且有數(shù)個海洋天然產(chǎn)物已開發(fā)為臨床藥物或正在 進(jìn)行臨床研究。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種天然的海藻倍半萜類化合物及其制備方法。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為海藻倍半萜類化合物結(jié)構(gòu)式如(I)所示 (I)海藻倍半萜類化合物的制備方法1)將海洋褐藻叉開網(wǎng)翼藻(Dictyopteris divaricate)沖洗、陰干、粉碎，然后用 有機溶液提取2-5次，合并提取液進(jìn)行濃縮，得到粗提物；2)取步驟1)中所得粗提物的10-15倍體積的水加入步驟1)的粗提物中，并用所 述加入水體積1-1. 5倍的乙酸乙酯萃取2-5次，萃取物濃縮得相應(yīng)的提取物，備用；3)取步驟2)中的提取物進(jìn)行硅膠柱層析，用有機溶劑進(jìn)行梯度洗脫，收集洗脫 液，洗脫液經(jīng)薄層層析檢測；所述有機溶劑可為100 0-0 100梯度的石油醚-乙酸乙酯或石油醚-丙酮；4)將步驟3)中以洗脫液體積比2-3 1梯度洗脫下的組分進(jìn)行凝膠柱、反相硅膠 柱并用薄層層析分離純化得目標(biāo)化合物I。步驟1)中的有機溶液可為氯仿、丙酮、乙酸乙酯、乙醇或甲醇中一種或幾種。步驟4)中的凝膠柱洗脫液可為體積比1-2 1的氯仿-甲醇或氯仿-乙醇；步驟 4)中的反相硅膠柱洗脫液可為體積比3-4 1的甲醇-水或乙醇-水。5.按權(quán)利要求2所述的海藻倍半萜類化合物的制備方法，其特征在于步驟4)所
背景技術(shù)：
述薄層層析分離純化時展開劑為體積比3 1石油醚-乙酸乙酯，Rf值為0.6-0. 7的化合 物即為目標(biāo)化合物I。本發(fā)明具有以下優(yōu)點本發(fā)明涉及的海洋褐藻叉開網(wǎng)翼藻(Dictyopteris divaricate)屬于褐藻門、網(wǎng) 地藻科、網(wǎng)翼藻屬海藻，廣泛分布于中國的遼寧、山東和浙江等沿海地區(qū)。本發(fā)明通過海洋 褐藻叉開網(wǎng)翼藻經(jīng)提取、分離獲得的倍半萜類天然化合物，屬于新的小分子天然有機化合 物，容易制備獲得。
具體實施例方式下面結(jié)合實施實例對本發(fā)明做進(jìn)一步闡述。實施例1采集新鮮的叉開網(wǎng)翼藻(Dictyopteris divaricate)經(jīng)海水清洗，除去表面附著 的沙礫及雜藻，陰涼處涼干備用。取涼干后的樣品2千克，粉碎到60-80目后用5升氯仿和 甲醇體積比1 1混合溶劑常溫提取三次，每次48小時，合并提取液，在溫度40°C左右減 壓濃縮、回收氯仿和甲醇，獲得粗提物。將粗提物加入蒸餾水中使其混懸于水中，再用乙酸 乙酯萃取3次，所得萃取物濃縮得提取物，備用；將濃縮后的乙酸乙酯提取物(90克)進(jìn)行 硅膠柱(200-300目)層析，用石油醚-乙酸乙酯以100 0、50 1、20 1、5 1,2 1 到0 100的梯度進(jìn)行洗脫，分別收集洗脫液，再用薄層層析(TLC)檢測(薄層層析(TLC) 檢測時用茴香醛_硫酸作為顯色劑)，根據(jù)Rf值來判斷、合并相同或類似部分，獲得十個組 分(I-X)。將組分VII Rf = 0.5-0. 8 (石油醚-乙酸乙酯3 1展開)，即以石油醚-乙 酸乙酯2 1梯度洗脫下的組分再進(jìn)行凝膠柱、反相硅膠柱并用薄層層析分離。凝膠柱層 析時用1 1的氯仿_甲醇進(jìn)行洗脫，TLC檢測，收集Rf = 0. 5-0. 7的組分；反相硅膠柱 層析時用3 1的甲醇_水進(jìn)行洗脫，TLC檢測，收集Rf = O. 6-0.7的組分；而后用薄層 層析用體積比3 1的石油醚-乙酸乙酯為展開劑，Rf = 0.6-0. 7，即得化合物I (9.1毫 克)，經(jīng)TLC檢測，呈單個、均勻藍(lán)色斑點，確定為純化合物。經(jīng)波譜分析，其結(jié)構(gòu)鑒定為1， 4-epoxymuurolan_5 β-ol,結(jié)構(gòu)式如(I)所示。 (I)該化合物具有以下理化和波譜特性無色油狀物；[a]25D-29. 2° (c = 0. 33, CHCl3) ； IR (KBr) cm-1 =3452,2962,2954, 2870，1458，1377，1065 ；核磁共振S譜(1H 匪R，CDCl3, 500ΜΗζ) δ 0. 80 (3Η, d, J = 6. 9Hz， H-12) ,0. 94 (3H, d, J = 6. 9Hz, H-13)，1. 01 (3H，d, J = 6. 5Hz, H-14)，1. 41 (3H，s, H-15)， 3. 46 (1H, br s, H_5)；核磁共振碳譜(13C NMR, CDCl3,125MHz) δ 15. 3 (C—14)，16. 0 (C—12)， 19. 6(C-15) ,21. 8(C-13)，23· 7(C_8)，27· 3 (C_l 1)，29. 4 (C_3)，31. 7 (C_9)，34. 6 (C_2)， 34. 9 (C-IO)，47. 3 (C_7)，56. 0 (C_6)，85. 5 (C_5)，85. 7 (C_4)，87. 1 (C-I) ppm ；電噴霧離子化高分辨質(zhì)譜 HRESIMS m/z 261. 1829 [M+Na]+，計算為 C15H26O2Na, 261. 1830。本發(fā)明海藻倍半萜類化合物應(yīng)用廣泛，可用于有機合成、農(nóng)藥等領(lǐng)域，是這些領(lǐng)域 中重要的化工產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)單元，在許多具有生理活性的分子中也包含了這些結(jié)構(gòu)單元，所 以利用本發(fā)明方法合成制備的海藻倍半萜類化合物可作為進(jìn)一步拒食殺蟲活性藥物開發(fā) 的前體。實施例2采集新鮮的叉開網(wǎng)翼藻(Dictyopteris divaricate)經(jīng)海水清洗，除去表面附著 的沙礫及雜藻，陰涼處涼干備用。取涼干后的樣品，粉碎到60-80目后用乙酸乙酯和乙醇 體積比1 1混合溶劑常溫提取五次，每次48小時，合并提取液，在溫度40°C左右減壓濃 縮、回收乙酸乙酯和乙醇，獲得粗提物。將粗提物加入蒸餾水中使其混懸于水中，再用乙酸 乙酯萃取3次，所得萃取物濃縮得提取物，備用；將濃縮后的乙酸乙酯提取物進(jìn)行硅膠柱 (200-300 目)層析，用石油醚-丙酮以 100 0、50 1、20 UlO 1,3 1 到 0 100 的梯度進(jìn)行洗脫，分別收集洗脫液，再用薄層層析(TLC)檢測(薄層層析(TLC)檢測時用茴 香醛-硫酸作為顯色劑)，根據(jù)Rf值來判斷、合并相同或類似部分，獲得十個組分(I-X)。將 組分VII Rf = 0.5-0. 8 (石油醚-乙酸乙酯3 1展開)，即以石油醚-丙酮3 1梯度 洗脫下的組分再進(jìn)行凝膠柱、反相硅膠柱并用薄層層析分離。凝膠柱層析時用2 1的氯 仿-甲醇進(jìn)行洗脫，TLC檢測，收集Rf = 0.5-0. 7的組分；反相硅膠柱層析時用3 1的甲 醇-水進(jìn)行洗脫，TLC檢測，收集Rf = 0.6-0.7的組分；而后用薄層層析用體積比3 1的 石油醚_乙酸乙酯為展開劑，Rf = 0. 6-0. 7，即得化合物I。實施例3采集新鮮的叉開網(wǎng)翼藻(Dictyopteris divaricate)經(jīng)海水清洗，除去表面附著 的沙礫及雜藻，陰涼處涼干備用。取涼干后的樣品，粉碎到60-80目后用丙酮常溫提取二 次，每次48小時，合并提取液，在溫度40°C左右減壓濃縮、回收丙酮，獲得粗提物。將粗提 物加入蒸餾水中使其混懸于水中，再用乙酸乙酯萃取2次，所得萃取物濃縮得提取物，備 用；將濃縮后的乙酸乙酯提取物進(jìn)行硅膠柱(200-300目)層析，用石油醚-乙酸乙酯以 100 0,50 1,20 1、5 1,2 1到0 100的梯度進(jìn)行洗脫，分別收集洗脫液，再用 薄層層析(TLC)檢測(薄層層析(TLC)檢測時用茴香醛-硫酸作為顯色劑)，根據(jù)Rf值來 判斷、合并相同或類似部分，獲得十個組分(I-X)。將組分VII Rf = 0.5-0.8(石油醚-乙 酸乙酯3 1展開)，即以石油醚-乙酸乙酯2 1梯度洗脫下的組分再進(jìn)行凝膠柱、反相 硅膠柱并用薄層層析分離。凝膠柱層析時用2 1的氯仿-甲醇進(jìn)行洗脫，TLC檢測，收集 Rf = 0.5-0. 7的組分；反相硅膠柱層析時用4 1的甲醇-水進(jìn)行洗脫，TLC檢測，收集Rf =0.6-0. 7的組分；而后用薄層層析用體積比3 1的石油醚-乙酸乙酯為展開劑，Rf = 0. 6-0. 7，即得化合物I。
權(quán)利要求
一種海藻倍半萜類化合物，其特征在于結(jié)構(gòu)式如(I)所示F200910016226XC0000011.tif
2.一種按權(quán)利要求1所述的海藻倍半萜類化合物的制備方法，其特征在于1)將海洋褐藻叉開網(wǎng)翼藻(Dictyopterisdivaricata)沖洗、陰干、粉碎，然后用有機 溶液提取2-5次，合并提取液進(jìn)行濃縮，得到粗提物；2)取步驟1)中所得粗提物的10-15倍體積的水加入步驟1)的粗提物中，并用所述加 入水體積1-1. 5倍的乙酸乙酯萃取2-5次，萃取物濃縮得相應(yīng)的提取物，備用；3)取步驟2)中的提取物進(jìn)行硅膠柱層析，用有機溶劑進(jìn)行梯度洗脫，收集洗脫液，洗 脫液經(jīng)薄層層析檢測；所述有機溶劑可為100 0-0 100梯度的石油醚-乙酸乙酯或石油醚-丙酮；4)將步驟3)中以洗脫液體積比2-3 1梯度洗脫下的組分進(jìn)行凝膠柱、反相硅膠柱并 用薄層層析分離純化得目標(biāo)化合物I。
3.按權(quán)利要求2所述的海藻倍半萜類化合物的制備方法，其特征在于步驟1)中的有 機溶液可為氯仿、丙酮、乙酸乙酯、乙醇或甲醇中一種或幾種。
4.按權(quán)利要求2所述的海藻倍半萜類化合物的制備方法，其特征在于步驟4)中的凝 膠柱洗脫液可為氯仿_甲醇或氯仿_乙醇；步驟4)中的反相硅膠柱洗脫液可為甲醇-水或 乙醇-水。
5.按權(quán)利要求2所述的海藻倍半萜類化合物的制備方法，其特征在于步驟4)所述薄 層層析分離純化時展開劑為體積比3 1石油醚-乙酸乙酯，Rf值為0.6-0. 7的化合物即 為目標(biāo)化合物I。
全文摘要
本發(fā)明涉及海洋天然產(chǎn)物領(lǐng)域，具體地說是一種海藻倍半萜類化合物及其制備方法。具體結(jié)構(gòu)式如(I)所示，其制備方法為將海洋褐藻叉開網(wǎng)翼藻經(jīng)海水沖洗干凈、除去表面附著的沙礫及雜藻，陰干、粉碎后浸取、溶劑分配和反復(fù)的層析分離，得到單體化合物。本發(fā)明通過海洋褐藻叉開網(wǎng)翼藻經(jīng)提取、分離獲得的倍半萜類天然化合物，屬于新的小分子天然有機化合物，容易制備獲得。(I)
文檔編號C07D493/08GK101921281SQ20091001622
公開日2010年12月22日 申請日期2009年6月13日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月13日
發(fā)明者季乃云, 李曉棟, 溫?zé)?申請人:煙臺海岸帶可持續(xù)發(fā)展研究所