專利名稱：微波輔助二甲基亞砜法蝦青素制備技術(shù)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從紅法夫酵母中提取蝦青素的技術(shù)，具體涉及到微波輔助 二甲基亞砜法破壁處理，利用有機溶劑提取蝦青素的制備技術(shù)，屬于生物技術(shù) 食品添加劑生產(chǎn)領(lǐng)域。(二) 技術(shù)背景蝦青素是一種廣泛存在于鮭魚、三文魚、蝦蟹等甲殼動物等生物體內(nèi)的色 素，研究表明蝦青素具有抗氧化、抗腫瘤和增強免疫力等許多重要的生理和生 物學(xué)功能，在食品添加劑、水產(chǎn)養(yǎng)殖、化妝品、保健品和醫(yī)藥工業(yè)等方面具有 廣闊的應(yīng)用前景。 .紅法夫酵母是目前主要用于生產(chǎn)蝦青素的真菌，由于紅法夫酵母的細(xì)胞壁 異常堅硬，因此紅法夫酵母的破壁情況對蝦青素提取效果起到了很大的影響。 目前對蝦青素破壁提取的研究主要有利用超聲波法、酸熱法、二甲基亞砜法、 堿法破壁然后通過有機溶劑浸提得到蝦青素，從破壁效果及對蝦青素的保護綜 合考慮，二甲基亞砜法是理想的破壁方法，同時也存在著破壁效果低的缺點。 微波作為一種近年來新興的破壁技術(shù)，因具有熱效率高，穿透力強和選擇性高 的特點已經(jīng)在許多領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。本發(fā)明將微波破壁技術(shù)與二甲基亞 砜法有效地結(jié)合，利用有機溶劑提取技術(shù)，得到微波輔助破壁提取紅法夫酵母 中蝦青素的最優(yōu)制備工藝。(三) 發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明將微波破壁技術(shù)成功的應(yīng)用到紅法夫酵母中蝦青素的提取工藝中， 開發(fā)出一種高效快速的紅法夫酵母中蝦青素制備技術(shù)。本發(fā)明通過以下步驟實現(xiàn)紅法夫酵母發(fā)酵液離心后加入二甲基亞砜，置于微波下輔助破壁，再加入 有機溶劑，保溫浸提，使蟲下青素自細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)到細(xì)胞外并溶于有機溶劑中，混合 溶液離心后經(jīng)過低溫真空濃縮得到杯青素濃縮液。所述的二甲基亞砜與紅法夫酵母發(fā)酵液的體積比為2~4: 10;所述的微波輔助破壁時間為2~10分鐘；微波頻率為416. 5MHz 2450MHz。所述的有機溶劑為丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、無水乙醇和石油醚中的一 種，有機溶劑與紅法夫酵母發(fā)酵液的體積比為4~8: 10;所述的保溫浸提溫度為30~70°C,浸提時間為20~40分鐘；本發(fā)明釆用的微波輔助二甲基亞砜法提取4下青素的原理為微波輻射過程 是高頻電磁波穿透萃取介質(zhì)，到達(dá)物料的內(nèi)部維管東和腺胞系統(tǒng)。由于吸收微 波能，細(xì)胞內(nèi)部溫度迅速上升，使其細(xì)胞內(nèi)部壓力超過細(xì)胞壁膨脹承受能力， 細(xì)胞破裂，細(xì)胞內(nèi)有效成分自由流出，同時在二甲基亞砜存在的條件下，相互 協(xié)同作用達(dá)到很好的破壁效果。本發(fā)明作為紅法夫酵母中蝦青素的破壁提取方 法具有以下的好處1本發(fā)明的工藝簡單，搡作容易，降低了能耗，節(jié)約了提取時間。同時增 加了蝦青素的產(chǎn)率，較單獨的二甲基亞砜法破壁提取蝦青素產(chǎn)率可提高21.56%;2本發(fā)明的工藝在較低的溫度下破壁提取，可以更好的防止蝦青素結(jié)構(gòu)破 壞。
3本發(fā)明的工藝中所使用的溶劑價格低廉、易得到、毒性小、用量少，而 且可以循環(huán)使用，節(jié)約成本同時減少污染。 (四)具體實施例本發(fā)明通過以下步驟實現(xiàn) (1)紅法夫酵母發(fā)酵液獲得和菌體制備a. 種子培養(yǎng)取紅法夫酵母斜面種子一環(huán)接入裝有50mL液體種子培養(yǎng)基 (葡萄糖2 0g/L、酵母粉3g/L、蛋白胨5g/L、 10° Brix麥芽汁3 g/L、 pH 5. 0 )的250mL三角瓶中，20°C, 160r/min振蕩培養(yǎng)48h，得到種子液；b. 搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)移取上述種子液5mL接入裝有50mL搖瓶培養(yǎng)基(葡萄 糖20g/L、酵母粉3g/L、蛋白胨5g/L、 pH5. 0)的500ml/的三角瓶中，20°C， 160r/min振蕩培養(yǎng)96h,得到紅法夫酵母發(fā)酵液；c. 菌體制備取上述搖瓶發(fā)酵后的紅法夫酵母發(fā)酵液10mL于離心管中， 離心去菌體，無菌水洗滌菌體兩次，獲得濕菌體。(2)微波輔助二甲基亞砜破壁處理向上述獲得的濕菌體中添加3.0mL二甲基亞砜，置于家用微波爐中，在微波頻率416. 5MHz下，破壁2. 6min。(3 )蝦青素的提取和蝦青素濃縮液制備 ' 向上述破壁得到的溶液中添加12.6mL的無水乙醇，5(TC下恒溫浸提15. lmin，然后離心獲得蟲下青素的初提取液，將初提取液進行低溫真空濃縮，獲得蝦青素濃縮液，同時可將無水乙醇回收再次利用。
權(quán)利要求
1、一種微波輔助二甲基亞砜法蝦青素制備技術(shù)，其特征在于紅法夫酵母發(fā)酵液離心后加入二甲基亞砜，置于微波下輔助破壁，再加入有機溶劑，保溫浸提，使蝦青素自細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)到細(xì)胞外并溶于有機溶劑中，混合溶液離心后經(jīng)過低溫真空濃縮得到蝦青素濃縮液。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的微波輔助二甲基亞砜法蝦青素制備技術(shù)，其特 征在于所述的二甲基亞砜與紅法夫酵母發(fā)酵液的體積比為2-4: 10。
3、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的微波輔助二甲基亞砜法蝦青素制備技術(shù)，其特征 在于所述的微波輔助破壁時間為2一10分鐘；微波頻率為416. 5MHz - 2450MHz。
4、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的微波輔助二甲基亞砜法蝦青素制備技術(shù)，其特征 在于所述的有機溶劑為丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、無水乙醇和石油醚中的 一種，有機溶劑與紅法夫酵母發(fā)酵液的體積比為4~8: 10。
5、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的微波輔助二甲基亞砜法蝦青素制備技術(shù)，其特征 在于所述的保溫浸提溫度為30~7(TC，浸提時間為20~40分鐘。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種微波輔助二甲基亞砜法蝦青素制備技術(shù)，紅法夫酵母發(fā)酵液離心后加入二甲基亞砜，置于微波下輔助破壁，再加入有機溶劑，保溫浸提，使蝦青素自細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)到細(xì)胞外并溶于有機溶劑中，混合溶液離心后經(jīng)過低溫真空濃縮得到蝦青素濃縮液。本發(fā)明將微波破壁技術(shù)與二甲基亞砜破壁成功結(jié)合，降低了成本，提高了效率，節(jié)約了提取時間，可有效防止蝦青素結(jié)構(gòu)不被破壞，提高紅法夫酵母中蝦青素的提取效果。
文檔編號C07C403/00GK101607933SQ20091001732
公開日2009年12月23日 申請日期2009年7月22日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月22日
發(fā)明者劉傳福, 朱傳合, 偉 韓 申請人:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)