專利名稱：一種高純度絕經(jīng)期促性腺素及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及蛋白質(zhì)純化和生物醫(yī)藥領(lǐng)域。具體而言，本發(fā)明涉及一種高純度絕經(jīng) 期促性腺素及其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
絕經(jīng)期促性腺素(Human Menopausal Gonadotropins，簡稱HMG)含有卵泡刺激素 (Follicle-stimulating hormone,簡禾爾 FSH)禾口黃體生成激素(leuteinizing hormone,簡 稱LH)兩種活性成分，它們是由垂體產(chǎn)生的糖蛋白激素，都是由α鏈和β鏈兩個(gè)亞基組 成。FSH的α亞基與LH、絨毛膜促性腺素(chorionic gonadotropin，簡稱CG)的α亞基完 全相同，具有92個(gè)氨基酸，分子量約為14500D，第52和78位置上的天冬酰胺是發(fā)生N-糖 基化的氨基酸。FSH的β亞基由111個(gè)氨基酸組成，分子量約為18000D，其中第7和24位 置上的天冬酰胺是發(fā)生N-糖基化的氨基酸。而LH的β亞基由121個(gè)氨基酸組成，分子量 約為14800D ；CG的β亞基則有145個(gè)氨基酸，分子量22000-39000D。臨床上HMG主要用于治療不育癥，它可以從垂體或絕經(jīng)期婦女的尿液中提取出 來，也可通過DNA重組技術(shù)而制備。含有FSH的第一代產(chǎn)品是尿促性素(HMG)，如Serono公司的Pergonal，它是FSH 與LH比例約為1的混合物。但是它的比活和純度都很低，比活一般在40-300IU/mg蛋白， 純度只有2-3%的有效成分，其余約97%都是雜蛋白，由于雜蛋白含量大，對人體有潛在的 副作用，給藥方式也只能局限于肌肉注射。高純度的尿促性素(PHMG)是本領(lǐng)域所特別需要 的，它應(yīng)當(dāng)純度高、雜質(zhì)少，不含有大量的雜蛋白，因此不會(huì)造成人體的過敏反應(yīng)，并且由于 這些優(yōu)點(diǎn)它可以使用皮下注射，提高患者的順應(yīng)性。但是，pHMG的純化很有難度，由于它同時(shí)含有FSH和LH兩種成分，而且需要兩者 按一定的比例構(gòu)成，而FSH和LH的結(jié)構(gòu)性質(zhì)又不相同，因此在后期的純化過程中很容易使 兩者分離從而導(dǎo)致達(dá)不到希望的比例，這在PHMG的純化中尤其突出，目前還沒有關(guān)于直接 獲得高純度HMG的方法的報(bào)道。因此本領(lǐng)域迫切需要開發(fā)出一種制備純度高、雜質(zhì)少的高純度HMG的方法，便于 使用于皮下注射，方便患者的使用、減輕痛苦。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在提供一種純度高、雜質(zhì)少的高純度HMG的制備方法。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供由上述方法純化得到的高純度HMG。本發(fā)明的又一個(gè)目的是提供由上述方法純化得到的高純度HMG的藥物組合物。本發(fā)明的再一個(gè)目的是提供由上述方法純化得到的高純度HMG的用途。在本發(fā)明中，提供了一種高純度絕經(jīng)期促性腺素(purified HumanMenopausal Gonadotropins, pHMG)，其HPLC純度不低于95%，其雜質(zhì)HPLC含量不超過5% ；優(yōu)選HPLC 純度不低于96 %，雜質(zhì)HPLC含量不超過4%。
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在另一優(yōu)選例中，所述的絕經(jīng)期促性腺素來自重組的絕經(jīng)期促性腺素或其變體、 或人尿來源的絕經(jīng)期促性腺素或其變體。在另一優(yōu)選例中，所述的高純度的絕經(jīng)期促性腺素中，卵泡刺激素(FSH)與黃體 生成素(LH)的生物效價(jià)比例為1 0. 1-3。在另一優(yōu)選例中，所述的高純度絕經(jīng)期促性腺素中，卵泡刺激素(FSH)與黃體生 成素(LH)的生物效價(jià)比例為1 0.5-1.4。在本發(fā)明的第二方面，提供了一種如上所述的本發(fā)明提供的高純度絕經(jīng)期促性腺 素(PHMG)的制備方法，所述的方法包括步驟將低純度HMG通過染料親和層析純化，得到高 純度絕經(jīng)期促性腺素；所述的低純度HMG比活在2000FSH國際單位/mg蛋白以下。在另一優(yōu)選例中，所述的方法包括步驟(1)將含有低純度HMG的溶液上樣至染料親和層析的層析柱上；(2)用pH6-ll的緩沖液進(jìn)行洗滌；和(3)用pH6-ll的緩沖液進(jìn)行洗脫，得到高純度絕經(jīng)期促性腺素。在另一優(yōu)選例中，所述含有低純度HMG的溶液中低純度HMG的濃度為0. l-10w/v%o在另一優(yōu)選例中，所述含有低純度HMG的溶液的pH為4-8。在另一優(yōu)選例中，所述的緩沖液選自醋酸鈉溶液、醋酸銨溶液、甘氨酸-NaOH溶 液、Tris-HCl溶液或磷酸鹽溶液。在另一優(yōu)選例中，在步驟(3)中包括下述步驟(3')用pH6-ll的緩沖液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液；(3")濃縮洗脫液后，加入無水乙醇，離心得到沉淀；和(3"‘)將沉淀脫水，得到干燥的高純度絕經(jīng)期促性腺素。在另一優(yōu)選例中，所述染料親和層析的填料的染料配基選自Cibacron Blue、 Orange、Red、Green0在另一優(yōu)選例中，所述染料親和層析的填料的固相載體選自皂土、玻璃微球、石英 微球、羥磷酸鈣、氧化鋁、聚丙烯酰胺凝膠、淀粉凝膠、葡聚糖凝膠、纖維素、或瓊脂糖。在另一優(yōu)選例中，所述染料親和層析的填料選自Blue Sepharose FF或 BlueSepharose 6B。在本發(fā)明的第三方面，提供了一種藥物組合物，所述的組合物中含有治療有效量 的如上所述的本發(fā)明提供的高純度絕經(jīng)期促性腺素，和藥學(xué)上可接受的載體。在本發(fā)明的第四方面，提供了一種如上所述的本發(fā)明提供的高純度絕經(jīng)期促性腺 素的用途，所述高純度絕經(jīng)期促性腺素用于制備治療不育綜合癥的藥物。據(jù)此，本發(fā)明提供了一種制備純度高、雜質(zhì)少的高純度HMG的方法，所得到的高純 度絕經(jīng)期促性腺素便于使用于皮下注射，方便患者的使用、減輕痛苦。


圖1顯示了 pHMG的純度圖譜。
具體實(shí)施例方式發(fā)明人經(jīng)過廣泛而深入的研究，驚奇地發(fā)現(xiàn)通過染料親和層析色譜可以獲得高純度的HMG，其HPLC純度彡95%，雜質(zhì)HPLC含量彡5%，是目前已知純度最高的HMG，并且FSH 和LH的生物效價(jià)比例可以在要求的范圍內(nèi)，如1 0.1-1 3。具體地，本發(fā)明將低純度 HMG通過染料親和層析純化，得到高純度絕經(jīng)期促性腺素。如本文所用，“低純度HMG”是指生物效價(jià)在2000FSH國際單位(IU)/mg以下的HMG， 優(yōu)選生物效價(jià)在40-500FSH IU/mg?？梢酝ㄟ^本領(lǐng)域熟知的方法獲得低純度HMG，例如但不 限于，從絕經(jīng)期婦女尿液中通過高嶺土吸附、洗脫，丙酮沉淀，乙醇溶液抽提，離子交換層析 色譜(包括陽離子、陰離子色譜)，甚至疏水色譜得到。也可以通過商業(yè)渠道獲得。低純度 HMG中FSH和LH的生物效價(jià)比例在1 0. 1_3范圍，更佳地，在1 0.5-1. 4范圍。如本文所用，“絕經(jīng)期促性腺素”、“尿促性素”和“HMG”可以互換使用，都是指一類 由垂體產(chǎn)生的糖蛋白激素或其變體，含有FSH和LH兩種活性成分。可以是重組的絕經(jīng)期促 性腺素或其變體、或是人尿來源的絕經(jīng)期促性腺素或其變體。如本文所用，“卵泡刺激素”和“FSH”可以互換使用，都是指一類用于促進(jìn)精子或卵 泡產(chǎn)生、促進(jìn)卵巢發(fā)育的激素或其變體，其可在天然情況下由垂體前葉分泌，可從絕經(jīng)期婦 女的尿液中提取或可通過重組技術(shù)獲得的。如本文所用，“黃體生成激素”和“LH”可以互換使用，都是指是由腦垂體前葉嗜堿 性細(xì)胞分泌的，作用于成熟的卵胞，能引起排卵并生成黃體的一類激素或其變體。如本文所用，“雜質(zhì)”是指除了絕經(jīng)期促性腺素之外的其它物質(zhì)，是指除FSH、LH以 外的雜蛋白，如降解亞基、聚合亞基等。其含量測定方法與本發(fā)明提供的檢測高純度絕經(jīng)期 促性腺素純度的高效液相色譜(HPLC)方法一樣，在所述HPLC檢測條件下，通過面積歸一法 得到雜質(zhì)含量。制備方法本發(fā)明提供的高純度絕經(jīng)期促性腺素的制備方法，是將低純度HMG通過染料親和 層析純化。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，所述的制備高純度絕經(jīng)期促性腺素的方法包括步驟(1)將含有低純度HMG的溶液上樣至染料親和層析的層析柱上；和(2)用pH6-ll的洗滌液進(jìn)行洗脫，得到高純度絕經(jīng)期促性腺素。染料親和層析的填料可以是本領(lǐng)域所熟知的，例如但不限于，Green瓊脂糖、 Orange瓊脂糖；較佳地為Blue瓊脂糖；更佳地為Blue Sepharose 6B。較佳地，所述洗滌液中的離子濃度在0. 01-5M，洗滌液選自醋酸鈉溶液、甘氨 酸-NaOH溶液、或Tris-HCl溶液。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，所述高純度絕經(jīng)期促性腺素通過以下步驟獲得將含有低純度HMG的溶液上樣至染料親和層析的層析柱上；和用pH6-ll的緩沖液進(jìn)行洗滌和洗脫，得到高純度絕經(jīng)期促性腺素。在本發(fā)明的另一優(yōu)選例中，所述的制備高純度絕經(jīng)期促性腺素的方法包括步驟⑴將含有低純度HMG的溶液上樣至染料親和層析的藍(lán)色瓊脂糖 (BlueSepharose)層析柱上；所述的含有低純度HMG的溶液是將低純度HMG溶解于pH4_8緩 沖液；(ii)用步驟(i)中的緩沖液洗滌；(iii)用 pH6-ll 的 0. 03-0. 07M 甘氨酸-NaOH 緩沖液洗滌；
(iv)用含低濃度鹽的PH6-11的0. 03-0. 07M Tris-HCl緩沖液洗滌；(ν)用含高濃度鹽的ΡΗ6-11的0. 03-0. 07Μ Tris-HC緩沖液洗脫，收集洗脫液；(ν)濃縮洗脫液，加入無水乙醇，離心得到沉淀；和(vi)將沉淀脫水，得到干燥的高純度絕經(jīng)期促性腺素。所述的鹽是鹽酸鹽或硫酸鹽，其中的金屬離子選自Na、K、或銨；一般在步驟(iv) 和步驟(ν)中使用同一種鹽；所述的低濃度為0-0. 5M，較佳地為0. 1-0. 5M，更佳地為0. 3-0. 5M ；所述的高濃度 為0. 5-5M，較佳地為2-5M，更佳地為3-5M。在本發(fā)明提供的制備高純度絕經(jīng)期促性腺素的方法中，所述的含有低純度HMG的 溶液是將低純度HMG溶解于0. 01-0. 03M醋酸鹽緩沖液而得；較佳地，所述含有低純度HMG 的溶液PH為4-8。高純度絕經(jīng)期促性腺素(pHMG)通過本發(fā)明的方法可以制備得到高純度絕經(jīng)期促性腺素，其雜質(zhì)HPLC含量 較佳地，雜質(zhì)HPLC含量< 4%。本發(fā)明制備得到的高純度的絕經(jīng)期促性腺素中，卵泡刺激素(FSH)與黃體生成素 (LH)的生物效價(jià)比例為1 0. 1-3 ；較佳地，卵泡刺激素(FSH)與黃體生成素(LH)的生物 效價(jià)比例為1 0.5-1.4。藥物組合物如本文所用，術(shù)語“藥學(xué)上可接受的載體”指用于治療劑給藥的載體，包括各種 賦形劑和稀釋劑。該術(shù)語指這樣一些藥劑載體它們本身并不是必要的活性成分，且施 用后沒有過分的毒性。合適的載體是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所熟知的。在Remington' s Pharmaceutical Sciences (Mack Pub. Co.，N. J. 1991)中可找到關(guān)于藥學(xué)上可接受的賦形 劑的充分討論。在組合物中藥學(xué)上可接受的載體可包括液體，如水、鹽水、甘油和乙醇。另 外，這些載體中還可能存在輔助性的物質(zhì)，如崩解劑、潤濕劑、乳化劑、PH緩沖物質(zhì)等。所述藥物組合物可以根據(jù)不同給藥途徑而制備成各種劑型。這些劑型以下面方式 之一施用口服、局部用藥、非腸道用藥，如皮下、靜脈、和肌肉注射或輸入，或借助一種外植 儲(chǔ)器用藥。其中優(yōu)選優(yōu)選皮下注射給藥方式。用途通過本發(fā)明的方法制備得到的高純度絕經(jīng)期促性腺素可以用于制備治療不育綜 合癥的藥物，所述的藥物可以通過常規(guī)途徑施用，其中包括(但并不限于)肌注、皮下注射 等。優(yōu)選皮下注射施用。藥物制劑形式應(yīng)與施用方式相匹配。藥物的施用量，按活性物質(zhì)計(jì) 算，通常為每天約0. 01-5μ g/kg體重，較佳地約0. 05-0. 5ug/kg體重，更優(yōu)選為0. 2-0. 4ug/ kg體重。本發(fā)明的藥物可直接使用，也可與其它治療劑或輔劑聯(lián)合使用。本發(fā)明提到的上述特征，或?qū)嵤├岬降奶卣骺梢匀我饨M合。本案說明書所揭示 的所有特征可與任何組合物形式并用，說明書中所揭示的各個(gè)特征，可以任何可提供相同、 均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特別說明，所揭示的特征僅為均等或相似特 征的一般性例子。本發(fā)明的主要優(yōu)點(diǎn)在于
1、提供了一種高純度、雜質(zhì)少的HMG，可應(yīng)用于皮下注射；2、提供了一種高純度HMG的純化方法，方法簡單有效，適合產(chǎn)業(yè)化。下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明 而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條 件或按照制造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則所有的百分?jǐn)?shù)、比率、比例、或份數(shù)按 重量計(jì)。本發(fā)明中的重量體積百分比中的單位是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的，例如是指在 100毫升的溶液中溶質(zhì)的重量。除非另行定義，文中所使用的所有專業(yè)與科學(xué)用語與本領(lǐng)域熟練人員所熟悉的意 義相同。此外，任何與所記載內(nèi)容相似或均等的方法及材料皆可應(yīng)用于本發(fā)明方法中。文 中所述的較佳實(shí)施方法與材料僅作示范之用。本發(fā)明中FSH、LH生物效價(jià)的測定按中國藥典2005版附錄XII M、XII N的方法進(jìn)行。比活是指單位重量的蛋白中所含的效價(jià)，在本發(fā)明中，HMG或pHMG的比活是指每 毫克蛋白中含多少國際單位FSH或LH。其中，蛋白含量的測定方法是按照Lowry法或其衍 生的方法進(jìn)行測定。本發(fā)明中HPLC純度或HPLC含量是指按照面積歸一化法計(jì)算的峰面積百分比。本發(fā)明中絕經(jīng)期促性腺素純度的測定方法如下(檢測限為2. 5IU)色譜柱Superdex7510/300 GL流動(dòng)相乙腈0. 2M磷酸鈉溶液pH7. 0 = 200 1000樣品配制取樣品用流動(dòng)相溶解至500IU/mL進(jìn)樣量100μ L柱溫30°C流速0· 5mL/min檢測波長215nm運(yùn)行時(shí)間60min絕經(jīng)期促性腺素主峰保留時(shí)間約為18-19min。實(shí)施例1制備高純度絕經(jīng)期促性腺素I在本實(shí)施例中，將低純度HMG(購自上海天偉生物制藥有限公司)用作pHMG的起 始原料，其中FSH的生物效價(jià)為273IU/mg，LH的生物效價(jià)為319IU/mg。將5OOmL Blue Sepharose FF (購自 GE Amersham)，裝入層析柱，用平衡液(0. 02M 醋酸鈉，PH7. 0)平衡。將IOg低純度HMG用IL平衡液溶解，用HCl或NaOH溶液調(diào)節(jié)pH約7. 0，然后上樣 至上述Blue Sepharose FF層析柱上，上樣結(jié)束后用平衡液洗滌5倍柱體積，然后用0. 05M Glycin-NaOH pHIO 洗滌 8 倍柱體積，再用 0. 05MTris-HCl, 0. 4M NaCl，pH9 洗滌 8 倍柱體積， 最后用0.05M Tris-HCl,4M NaCl，pH9洗脫，分部收集洗脫液(收集很多份，例如每300mL 為一份)，然后將含有效成分的部分合并，即合并有效成份，用10000MW膜超濾濃縮后，邊攪 拌邊加入5倍體積預(yù)冷的無水乙醇，離心收集沉淀，用無水乙醇脫水，真空干燥得236mg干
7燥品，即高純度絕經(jīng)期促性腺素I。生物效價(jià)的測定方法按照中國藥典2005版附錄XII M、附錄XII N的方法測定 FSH、LH生物效價(jià)。其結(jié)果見表1 表1所得干燥品的生物效價(jià)和純度 結(jié)果表明，采用本發(fā)明的方法進(jìn)行純化，可以使HMG的純度大大提高。實(shí)施例2制備高純度絕經(jīng)期促性腺素II將500mL Blue Sepharose 6B (購自 GE Amersham)，裝入層析柱，用平衡液(0. 02M 醋酸鈉，PH7. 0)平衡。將6g同實(shí)施例1中相同來源的低純度HMG用600mL平衡液溶解，用HCl或NaOH溶 液調(diào)節(jié)PH約7.0，然后上樣至上述Blue Sepharose 6B層析柱上，上樣結(jié)束后用平衡液洗滌 5倍柱體積，然后用0. 05M Glycin-NaOH pHIO洗滌5倍柱體積，再用0. 05M Tris-HCl，0. 2M NaCl，pH9洗滌5倍柱體積，再用0. 05MTris_HCl，0. 5M NaCl，pH9洗滌7倍柱體積，最后用 0.05M Tris-HCl, 4M NaCl，pH9洗脫，分段收集洗脫液，合并有效成份，用10000MW膜超濾濃 縮至IOOmL,即得高純度絕經(jīng)期促性腺素II。對此液體取樣測定FSH、LH生物效價(jià)及蛋白含 量，計(jì)算比活。生物效價(jià)的測定方法按照中國藥典2005版附錄XII M、附錄XII N的方法測定 FSH、LH生物效價(jià)。蛋白質(zhì)含量測定方法按Lowry法進(jìn)行測定。FSH比活的計(jì)算方法比活=FSH生物效價(jià)(IU/mL) +每毫升液體中的蛋白含量 (mg/mL)其結(jié)果見表2:表2所得干燥品的生物效價(jià)和純度
8 結(jié)果表明，采用本發(fā)明的方法進(jìn)行純化，可以使HMG的純度大大提高。實(shí)施例3pHMG凍干針劑的制備用于制造100瓶pHMG凍干針劑，且每瓶含75IU FSH和75IU LH的例子如下將實(shí)施例1所制備的高純度絕經(jīng)期促性腺素I 1. 64mg，溶解于5mL注射用無熱原 水中，用0. 22 μ m過濾器進(jìn)行無菌過濾，并用注射用無熱原水洗滌過濾器。將Ig乳糖溶解于30mL注射用無熱原水中，如果需要的話，用HCl或NaOH調(diào)節(jié) PH6. 5士0. 2，用0. 22 μ m過濾器進(jìn)行無菌過濾。然后加入到上述FSH溶液中，用注射用無熱 原水定容至75mL，混勻。將上述溶液分裝入安瓿瓶中，每瓶0. 75mL，進(jìn)行冷凍干燥。所得到的安瓿瓶中，每瓶含約75IU FSH、75IU LH和IOmg乳糖。以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并非用以限定本發(fā)明的實(shí)質(zhì)技術(shù)內(nèi)容范 圍，本發(fā)明的實(shí)質(zhì)技術(shù)內(nèi)容是廣義地定義于申請的權(quán)利要求范圍中，任何他人完成的技術(shù) 實(shí)體或方法，若是與申請的權(quán)利要求范圍所定義的完全相同，也或是一種等效的變更，均將 被視為涵蓋于該權(quán)利要求范圍之中。
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權(quán)利要求
一種高純度絕經(jīng)期促性腺素(purified Human Menopausal Gonadotropins，pHMG)，其特征在于，其HPLC純度不低于95％，其雜質(zhì)HPLC含量不超過5％；優(yōu)選HPLC純度不低于96％，雜質(zhì)HPLC含量不超過4％。
2.如權(quán)利要求1所述的高純度絕經(jīng)期促性腺素，其特征在于，所述的絕經(jīng)期促性腺素 來自重組的絕經(jīng)期促性腺素或其變體、或人尿來源的絕經(jīng)期促性腺素或其變體。
3.如權(quán)利要求1所述的高純度絕經(jīng)期促性腺素，其特征在于，所述的高純度的絕經(jīng)期 促性腺素中，卵泡刺激素(FSH)與黃體生成素(LH)的生物效價(jià)比例為1 0. 1-3。
4.如權(quán)利要求1所述的高純度絕經(jīng)期促性腺素，其特征在于，所述的高純度絕經(jīng)期促 性腺素中，卵泡刺激素(FSH)與黃體生成素(LH)的生物效價(jià)比例為1 0.5-1.4。
5.一種如權(quán)利要求1-4任一所述的高純度絕經(jīng)期促性腺素(pHMG)的制備方法，其特征 在于，所述的方法包括步驟將低純度HMG通過染料親和層析純化，得到高純度絕經(jīng)期促性 腺素；所述的低純度HMG比活在2000FSH國際單位/mg蛋白以下。
6.如權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述的方法包括步驟(1)將含有低純度HMG的溶液上樣至染料親和層析的層析柱上；(2)用pH6-ll的緩沖液進(jìn)行洗滌；和(3)用pH6-ll的緩沖液進(jìn)行洗脫，得到高純度絕經(jīng)期促性腺素。
7.如權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述含有低純度HMG的溶液中低純度 HMG 的濃度為 0. l-10w/v%。
8.如權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述含有低純度HMG的溶液的pH為4-8。
9.如權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述的緩沖液選自醋酸鈉溶液、醋酸銨 溶液、甘氨酸-NaOH溶液、Tris-HCl溶液或磷酸鹽溶液。
10.如權(quán)利要求5-9任一所述的制備方法，其特征在于，所述染料親和層析的填料的染 料配基選自 Cibacron Blue、Orange、Red、Green。
11.如權(quán)利要求5-9任一所述的制備方法，其特征在于，所述染料親和層析的填料的固 相載體選自皂土、玻璃微球、石英微球、羥磷酸鈣、氧化鋁、聚丙烯酰胺凝膠、淀粉凝膠、葡聚 糖凝膠、纖維素、或瓊脂糖。
12.如權(quán)利要求5-9任一所述的制備方法，其特征在于，所述染料親和層析的填料選自 Blue Sepharose FF 或 Blue Sepharose 6B。
13.一種藥物組合物，其特征在于，所述的組合物中含有治療有效量的如權(quán)利要求1-4 任一所述的高純度絕經(jīng)期促性腺素，和藥學(xué)上可接受的載體。
14.一種如權(quán)利要求1-4任一所述的高純度絕經(jīng)期促性腺素的用途，其特征在于，用于 制備治療不育綜合癥的藥物。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種高純度絕經(jīng)期促性腺素及其制備方法和用途。所述的高純度絕經(jīng)期促性腺素的HPLC純度不低于95％，其雜質(zhì)HPLC含量不超過5％。
文檔編號C07K1/22GK101928342SQ20091005327
公開日2010年12月29日 申請日期2009年6月18日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月18日
發(fā)明者嚴(yán)惠敏, 季斌, 季曉銘, 洪云海, 郭照曄, 高霄梁 申請人:上海天偉生物制藥有限公司