專利名稱：一種整體柱及其制備方法與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種整體分離介質(zhì)的制備方法，特別是一種整體柱及其制備方法與 應(yīng)用。
背景技術(shù)：
隨著蛋白組學(xué)的發(fā)展，對分離科學(xué)快速、高效、高通量的要求越來越高。僅就 高效液相色譜在分離科學(xué)研究中的應(yīng)用而言，人們已在硬件(高壓輸液泵、色譜柱、 檢測器)和軟件(數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)和處理軟件)方面進(jìn)行了相應(yīng)的改進(jìn)。其中色譜分 離的核心部分是色譜柱，傳統(tǒng)的填充柱在柱效與通量之間無法取得平衡，也就是提 高柱效的同時(shí)柱背壓也隨之增加，無法滿足快速、高效、高通量分離的要求。在這 種背景下，整體住應(yīng)運(yùn)而生(又被稱為連續(xù)床)，整體柱柱體本身具有相互貫通的 微米級通孔，因此具有良好的通透性；并且，因整體柱體表面殘留的基團(tuán)容易進(jìn)行 化學(xué)修飾等特點(diǎn)，故自上世紀(jì)九十年代初誕生以來，目前整體柱已能適用于各種分
離模式。如反相色譜、正相色譜、親和色譜、疏水相互作用色譜等模式。
目前制備整體柱的方法多采用普通自由基原位聚合的方法，此方法取材廣泛， 制備過程簡單。但由于普通自由基聚合本身的反應(yīng)機(jī)理，如反應(yīng)速度快、分子量不 可控、易發(fā)生鏈轉(zhuǎn)移等，而使制備的柱體結(jié)構(gòu)多為顆粒堆積的結(jié)構(gòu)，這種結(jié)構(gòu)的柱 體存在許多缺點(diǎn)如結(jié)構(gòu)不均一、孔徑不易精確控制、機(jī)械性能差等。為了克服這
些缺點(diǎn)，人們采用逐步縮聚(Macromolecules， 2005， 38， 9901-9卯3)和氮氧自由 基調(diào)節(jié)聚合(AdvancedMaterials, 2006， 18， 2407-2411)的方法制備出了具有三維 連續(xù)骨架結(jié)構(gòu)的整體柱。但是，這兩種方法仍存在著一些局限性，如逐步縮聚方法 選材范圍較窄；氮氧自由基調(diào)節(jié)聚合所需溫度較高(〉100°C)，操作不方便等。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種整體柱及其制備方法與應(yīng)用。 本發(fā)明提供的制備整體柱的方法，包括如下步驟
1) 將聚合單體、致孔劑、引發(fā)劑和催化劑混合，除氧后加入催化劑配體，于色 譜柱管中密封，發(fā)生活性自由基聚合反應(yīng)，反應(yīng)完畢后將所述色譜柱管與高壓輸液 泵連接去除致孔劑等可溶物，得到具有三維連續(xù)骨架結(jié)構(gòu)的整體柱；
2) 將功能單體的有機(jī)溶液、催化劑、催化劑配體和抗氧化劑的混合物注入到所 述步驟l)得到的整體柱中，發(fā)生活性自由基聚合反應(yīng)，反應(yīng)完畢得到所述整體柱。
4該方法的步驟l)中，聚合單體為具有雙乙烯基的丙烯酸酯類及苯乙烯類單體;
優(yōu)選的，所述丙烯酸酯類單體為甲基丙烯酸乙二醇酯；所述苯乙烯類單體為二乙烯 基苯。致孔劑為有機(jī)溶劑混合物，優(yōu)選的所述致孔劑為甲醇與正己垸的混合物或甲 苯與十二醇的混合物。引發(fā)劑為卣代酯類，優(yōu)選的所述引發(fā)劑為溴代丙酸乙酯(BPE) 和氯代丙酸乙酯(CPE)。催化劑為鹵化物，優(yōu)選的所述鹵化物為溴化亞銅和氯化 亞銅。催化劑配體為多胺類和聯(lián)吡啶類，優(yōu)選的，所述多胺類催化劑配體為五甲基 二亞乙基三胺(PDMETA);所述聯(lián)吡啶類催化劑配體為2， 2-聯(lián)吡啶(BPY)。
引發(fā)劑的摩爾用量為所述聚合單體的1.0%-20.0%，優(yōu)選16.0%;所述催化劑與 催化劑配體的摩爾用量為1-3:1-3，優(yōu)選1:1;致孔劑中，甲醇與正己垸的體積比為 1-3:1-3;甲苯與十二醇的體積比為1-3:1-3。
步驟2)中，所述功能單體為丙烯酸酯類，優(yōu)選的所述丙烯酸酯類為甲基丙烯 酸正丁酯、甲基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸乙酯或甲基丙烯酸十二酯；所述功能單體 的有機(jī)溶液中，有機(jī)溶劑為甲醇、正己垸或四氫呋喃；催化劑為CuBr2或CuCl2，催 化劑配體為五甲基二亞乙基三胺(PDMETA)或2， 2-聯(lián)吡啶(BPY)，抗氧化劑為 抗壞血酸或辛酸亞錫(簡稱Sn (II))。功能單體的有機(jī)溶液、催化劑、催化劑配 體和抗氧化劑的摩爾用量比為50-100:1-2:1-2:1-5，優(yōu)選70:1:1:4。
上述步驟1)中，反應(yīng)溫度為室溫，可為5-25°C;反應(yīng)時(shí)間為10-100 h，優(yōu)選 24 h。步驟2)中，反應(yīng)溫度為室溫，可為5-25"C;反應(yīng)時(shí)間為4-20h，優(yōu)選14h。
另外，步驟l)中，在將所述色譜柱管與高壓輸液泵連接后，還進(jìn)行如下處理 用有機(jī)溶劑沖洗色譜柱管與高壓輸液泵；步驟2)中，在反應(yīng)完畢后，還進(jìn)行如下處 理用有機(jī)溶劑沖洗所述整體柱。所用有機(jī)溶劑均為甲醇、正己烷或四氫呋喃。
另外，利用上述方法制備得到的整體柱及該整體柱在制備用于分離類固醇類激 素藥物(包括氫化可的松、睪酮、黃體酮)或蛋白質(zhì)整體柱中的應(yīng)用，也屬于本發(fā) 明的保護(hù)范圍。
活性原子轉(zhuǎn)移自由基聚合法(簡稱ATRP)，是上世紀(jì)九十年代出現(xiàn)的一種活 性/可控自由基聚合技術(shù)，具有取材廣泛、反應(yīng)條件溫和、可控能力強(qiáng)等特點(diǎn)，廣泛 地應(yīng)用于功能高分子合成、材料制備、表面修飾等方面。本發(fā)明正是采用ATRP的 可控性來實(shí)現(xiàn)制備具有三維連續(xù)骨架結(jié)構(gòu)的整體柱。
本發(fā)明提供的制備具有三維連續(xù)骨架結(jié)構(gòu)的整體柱的方法，可在室溫下聚合， 大大改善了柱體由于聚合溫度高造成的柱體結(jié)構(gòu)不均一以及體積收縮等問題，制備 過程簡單、易操作、制備方法重現(xiàn)性好。制備所得整體柱具有三維連續(xù)骨架結(jié)構(gòu)， 與傳統(tǒng)的普通自由基制備的顆粒堆積的整體柱的結(jié)構(gòu)有明顯的不同，可適用于分離類固醇類激素藥物(包括氫化可的松、睪酮、黃體酮)或蛋白質(zhì)等生物大分子。


圖1為ATRP制備柱體材料內(nèi)部形貌掃描電鏡顯微圖 圖2為普通自由基制備柱體材料內(nèi)部形貌掃描電鏡顯微圖 圖3反相模式下分離類固醇類藥物混合物的色譜圖 圖4反相模式下分離蛋白質(zhì)混合物的色譜圖
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明，但本發(fā)明并不限于以下實(shí)施例。
本發(fā)明提供的制備整體柱的方法，所用聚合物整體分離介質(zhì)是由雙乙烯基聚合 單體甲基丙烯酸乙二醇酯和二乙烯基苯聚合而成，該聚合體系還包括由甲醇與正己
垸兩種有機(jī)物組成的復(fù)合致孔劑和由甲苯與十二醇組成的復(fù)合致孔劑、引發(fā)劑、催 化劑及催化劑配體。
該方法的具體步驟如下
1) 整體柱的合成
將上述各物質(zhì)混勻后的反應(yīng)液注入模具中，如50X4.6 mm i.d.， 100X4.6 mm i.d.
不銹鋼色譜柱管，在室溫下反應(yīng)足夠的時(shí)間，然后連接在高壓輸液泵上用有機(jī)溶劑 沖洗柱體中的致孔劑及其他可溶物；
2) 整體柱的修飾
將功能單體丙烯酸酯類單體溶于甲醇與正己烷的混合溶劑或四氫呋喃溶劑中， 除氧后，再依次加入催化劑、催化劑配體、抗氧化劑，超聲混勻；用注射泵將上述 混勻后的反應(yīng)液注入待修飾的色譜柱中，在室溫下連續(xù)反應(yīng)；
將修飾完后的柱體仍用注射泵注入有機(jī)溶劑進(jìn)行沖洗，去除柱體中未反應(yīng)的可 溶物，待沖洗完畢后測試其色譜性能。
下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明，但本發(fā)明并不限于以下實(shí)施例。
實(shí)施例1 試劑及溶劑
聚合單體為甲基丙烯酸乙二醇酯(EDMA);致孔劑為甲醇和正己烷；引發(fā)劑為溴 代丙酸乙酯(BPE);催化劑為CuBr和CuBr2;多胺為五甲基二亞乙基三胺 (PDMETA)，聯(lián)吡啶為2， 2-聯(lián)吡啶(BPY)，抗氧化劑為抗壞血酸(維生素C， Vc)，修飾的功能單體為甲基丙烯酸正丁酯。
柱體制備過程
第一步、柱體合成EDMA0.50mL (2.64 mM) ， 0.50 mL甲醇，0.50 mL正己烷，0.050 mL (0.39 mM)BPE， 0.056 g (0.39 mM)CuBr， 0.080 mL (0.39 mM) PDMETA混合在一起，超 聲混勻后注入不銹鋼色譜柱管中，室溫反應(yīng)24h后，柱管兩端安裝上色譜柱柱頭， 然后連接于高壓輸液泵上，先以100mL四氫呋喃(THF)沖洗色譜柱，然后再以50 mL 甲醇與正己烷(1:1, v/v)混合溶劑沖洗，完畢后進(jìn)行ATRP表面引發(fā)接枝聚合乙烯 基單體。
第二步、柱體修飾
接枝反應(yīng)液配比為68 mg (0.39 mM) CuBr2， 87 mg (0.39 mM) PMDETA，甲醇與 正己烷(1:1, v/v) 50.0 mL，甲基丙烯酸正丁酯3.88 g (27.3 mM) ， Vc 0.27 g (1.56 mM)，超聲混勻后，用注射泵以3.0mL/h流速注入色譜柱中在室溫下反應(yīng)14h。接 枝聚合完畢后，以50mL甲醇與正己垸(1:1， Wv)混合溶劑做沖洗液沖洗柱體后備 用。
用掃描電子顯微鏡觀察上述制備得到的整體柱的柱體微觀形貌，所得結(jié)果如圖 l所示，從SEM照片上可以看出，材料具有微米級的通孔和1-3微米的三維連續(xù)骨架。
在其它條件相同的情況下，以普通自由基聚合引發(fā)劑偶氮二異丁腈(AIBN)代 替ATRP引發(fā)劑BPE，在6(TC水浴中反應(yīng)24h，除去致孔劑后得到的柱體的內(nèi)部結(jié) 構(gòu)圖如圖2所示，可以看出柱體的骨架由大量堆積的球形顆粒形成。經(jīng)對比圖l和 圖2，可以看出利用本發(fā)明提供的制備方法得到的整體柱與用普通自由基聚合法制備 出的整體柱，具有明顯不同的內(nèi)部結(jié)構(gòu)。
利用接枝后的柱體分離了三種具有不同疏水性的類固醇類藥物混合物，其色譜 分離譜圖如圖3所示，按照出峰順序依次為1、氫化可的松；2、睪酮；3、黃體酮。 其色譜條件為流動(dòng)相為50%甲醇水溶液，流速為lmL/min，檢測波長為254nm。
另外，利用接枝修飾后的柱體分離了兩種蛋白混合物，其色譜分離譜圖如圖4
所示，按照出峰順序依次為1、核糖核酸酶A; 2、卵清蛋白。其色譜條件為流
動(dòng)相為60%乙腈+0.1%三氟乙酸水溶液，流速為lmL/min,檢測波長為280nm。
實(shí)施例2 試劑及溶劑
聚合單體為甲基丙烯酸乙二醇酯(EDMA);致孔劑為甲醇和正己烷；引發(fā)劑為溴 代丙酸乙酯(BPE);催化劑為CuBr和CuBr2;多胺為五甲基二亞乙基三胺 (PDMETA)，聯(lián)吡啶為2， 2-聯(lián)吡啶(BPY)，抗氧化劑為抗壞血酸(維生素C，Vc)，修飾功能單體為甲基丙烯酸乙酯。 柱體制備過程-第一步、柱體合成
該步驟與實(shí)施例1的第一步完全相同。 第二步、柱體修飾
接枝反應(yīng)液配比為68mg(0.39mM)CuBr2， 87 mg (0.39 mM)PMDETA，甲醇與 正己垸O:l， v/v)50.0mL，甲基丙烯酸乙酯3.12 g (27.3 mM) ， Vc 0.27 g (1.56 mM)， 超聲混勻后，用注射泵以3.0mL/h流速注入色譜柱中在室溫下反應(yīng)14h。接枝聚合 完畢后，以50mL甲醇與正己垸(1:1， Wv)混合溶劑做沖洗液沖洗柱體后備用。
用掃描電子顯微鏡觀察上述制備得到的整體柱的柱體微觀形貌，可以得知材料 具有微米級的通孔和1-3微米的三維連續(xù)骨架。
利用接枝后的柱體同樣可以分離上述實(shí)施例1種所述的三種具有不同疏水性的 類固醇類藥物混合物和兩種蛋白的混合物，其分離條件亦同。
實(shí)施例3 試劑及溶劑
聚合單體為二乙烯基苯(DVB);致孔劑為甲苯和十二醇；引發(fā)劑為溴代丙酸乙 酯(BPE);催化劑為CuBr和CuBr2;多胺為五甲基二亞乙基三胺(PDMETA)， 聯(lián)吡啶為2， 2-聯(lián)吡啶(BPY)，抗氧化劑為抗壞血酸(維生素C， Vc)，修飾的功 能單體為甲基丙烯酸正丁酯。
柱體制備過程 第一步、柱體合成
0.50 mL (8.56 mM)DVB， 0.50 mL甲苯，0.50 mL十二醇，0.068 mL(0.53 mM) BPE， 0.077 g (0.53 mM) CuBr， 0.111 mL (0.53 mM) PDMETA混合在一起，超聲混 勻后注入不銹鋼色譜柱管中，室溫反應(yīng)24h后，柱管兩端安裝上色譜柱柱頭，然后 連接于高壓輸液泵上，先以100mL四氫呋喃(THF)沖洗色譜柱，然后再以50mL甲 醇與正己垸(1:1， v/v)混合溶劑沖洗，完畢后進(jìn)行ATRP表面引發(fā)接枝聚合乙烯基 單體。
第二步、柱體修飾
接枝反應(yīng)液配比為68 mg (0.39 mM) CuBr2， 87 mg (0.39 mM) PMDETA，甲醇與 正己烷(1:1， v/v) 50.0 mL，甲基丙烯酸正丁酯3.88 g (27.3 mM) ， Vc 0.27 g (1.56 mM)，超聲混勻后，用注射泵以3.0mL/h流速注入色譜柱中在室溫下反應(yīng)14h。接枝聚合完畢后，以50mL甲醇與正己烷(1:1， v/v)混合溶劑做沖洗液沖洗柱體后備 用。
用掃描電子顯微鏡觀察上述制備得到的整體柱的柱體微觀形貌，可以得知材料 具有微米級的通孔和1-2.5微米的三維連續(xù)骨架。
利用接枝后的柱體同樣可以分離上述實(shí)施例1種所述的三種具有不同疏水性的 類固醇類藥物混合物和兩種蛋白的混合物，其分離條件亦同。
實(shí)施例4 試劑及溶劑
聚合單體為二乙烯基苯(DVB);致孔劑為甲苯和十二醇；引發(fā)劑為氯代丙酸乙
酯(CPE);催化劑為CuCl和CuCl2;多胺為五甲基二亞乙基三胺(PDMETA)， 聯(lián)吡啶為2， 2-聯(lián)吡啶(BPY)，抗氧化劑為抗壞血酸(維生素C， Vc)，修飾的功 能單體為甲基丙烯酸正丁酯。
柱體制備過程
第一步、柱體合成
DVB 0.50 mL (8.56 mM)， 0.50 mL甲苯，0.50 mL十二醇，0.067 mL (0.53 mM) CPE， 0.053 g (0.53 mM) CuCl， 0.111 mL (0.53 mM) PDMETA混合在一起，超聲混 勻后注入不銹鋼色譜柱管中，室溫反應(yīng)24h后，柱管兩端安裝上色譜柱柱頭，然后 連接于高壓輸液泵上，先以100 mL四氫呋喃(THF)沖洗色譜柱，然后再以50 mL甲 醇與正己烷(1:1， v/v)混合溶劑沖洗，完畢后進(jìn)行ATRP表面引發(fā)接枝聚合乙烯基 單體。
第二步、柱體修飾
接枝反應(yīng)液配比為52 mg (0.39 mM) CuCl2， 87 mg (0.39 mM) PMDETA，甲醇與 正己烷(1:1， v/v) 50.0 mL，甲基丙烯酸正丁酯3.88 g (27.3 mM) ， Vc 0.27 g (1.56 mM)，超聲混勻后，用注射泵以3.0mL/h流速注入色譜柱中在室溫下反應(yīng)14h。接 枝聚合完畢后，以50mL甲醇與正己烷(1:1, v/v)混合溶劑做沖洗液沖洗柱體后備 用。
用掃描電子顯微鏡觀察上述制備得到的整體柱的柱體微觀形貌，可以得知材料 具有微米級的通孔和1-3微米的三維連續(xù)骨架。
利用接枝后的柱體同樣可以分離上述實(shí)施例1種所述的三種具有不同疏水性的 類固醇類藥物混合物和兩種蛋白的混合物，其分離條件亦同。實(shí)施例5 試劑及溶劑-
聚合單體為二乙烯基苯(DVB);致孔劑為甲苯和十二醇；引發(fā)劑為氯代丙酸乙
酯(CPE);催化劑為CuCl和CuCl2;多胺為五甲基二亞乙基三胺(PDMETA)， 聯(lián)吡啶為2， 2-聯(lián)吡啶(BPY)，抗氧化劑為辛酸亞錫(Sn(II))，修飾的功能單體 為甲基丙烯酸正丁酯。
柱體制備過程
第一步、柱體合成
該步驟與實(shí)施例4的第一步完全相同。 第二步、柱體修飾
接枝反應(yīng)液配比為52 mg (0.39 mM) CuCl2， 87 mg (0.39 mM) PMDETA，甲醇與 正己烷(1:1 ， v/v) 50.0 mL，甲基丙烯酸正丁酯3.88 g (27.3 mM) ， Sn(II) 0.63 g (1.56 mM)，超聲混勻后，用注射泵以3.0mL/h流速注入色譜柱中在室溫下反應(yīng)14h。接 枝聚合完畢后，以50mL甲醇與正己烷(1:1， v/v)混合溶劑做沖洗液沖洗柱體后備 用。
用掃描電子顯微鏡觀察上述制備得到的整體柱的柱體微觀形貌，可以得知材料 具有微米級的通孔和1-3微米的三維連續(xù)骨架。
利用接枝后的柱體分離了同樣可以分離上述實(shí)施例1中所述的類固醇類藥物混 合物以及蛋白混合物，其分離條件亦同。
由上述實(shí)驗(yàn)結(jié)構(gòu)可知，利用本發(fā)明提供的方法制備得到的整體柱，具有三維連 續(xù)骨架結(jié)構(gòu)，并可在室溫下聚合，大大改善了柱體由于聚合溫度高造成的柱體結(jié)構(gòu) 不均一以及體積收縮等問題。
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權(quán)利要求
1、一種制備整體柱的方法，包括如下步驟1)將聚合單體、致孔劑、引發(fā)劑和催化劑混合，除氧后加入催化劑配體，于色譜柱管中密封，發(fā)生活性原子轉(zhuǎn)移自由基聚合反應(yīng)，反應(yīng)完畢后將所述色譜柱管與高壓輸液泵連接去除可溶物，得到具有三維連續(xù)骨架結(jié)構(gòu)的整體柱；2)將功能單體的有機(jī)溶液、催化劑、催化劑配體和抗氧化劑的混合物注入到所述步驟1)得到的整體柱中，發(fā)生活性原子轉(zhuǎn)移自由基聚合反應(yīng)，反應(yīng)完畢得到所述整體柱。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟l)中，聚合單體為甲基 丙烯酸乙二醇酯或二乙烯基苯，致孔劑為甲醇與正己垸的混合物或甲苯與十二醇的混 合物，引發(fā)劑為溴代丙酸乙酯或氯代丙酸乙酯，催化劑為溴化亞銅或氯化亞銅，催化 劑配體為五甲基二亞乙基三胺或2， 2-聯(lián)吡啶；所述步驟2)中，所述功能單體為甲基丙烯酸正丁酯、甲基丙烯酸甲酯、甲基丙 烯酸乙酯或甲基丙烯酸十二酯，功能單體的有機(jī)溶液中，有機(jī)溶劑為甲醇、正己烷或 四氫呋喃中的任意一種或任意幾種以任意比例混合的混合物；催化劑為CuB&或 CuCl2，催化劑配體為五甲基二亞乙基三胺或2， 2-聯(lián)吡啶，抗氧化劑為抗壞血酸或辛 酸亞錫。
3、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述步驟l)中，引發(fā)劑的摩爾用量為所述聚合單體的1.0%-20.0%，優(yōu)選10%-20%，更優(yōu)選16.0%; 所述催化劑與催化劑配體的摩爾用量為1-3:1-3，優(yōu)選l:l;所述甲醇與正己烷的混合物或甲苯與十二醇的混合物中，甲醇與正己垸或甲苯與十二醇的體積比為1-3: 1-3;所述致孔劑與所述聚合單體的體積比為1-3: 1-3;所述步驟2)中，功能單體的有機(jī)溶液、催化劑、催化劑配體和抗氧化劑的摩爾 用量比為50-100:1-2:1-2:1-5，優(yōu)選70:1:1:4。
4、 根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的方法，其特征在于所述步驟l)和步驟2)中， 反應(yīng)溫度均為室溫，反應(yīng)時(shí)間分別為10-100小時(shí)和4-20小時(shí)，分別優(yōu)選為24小時(shí)和 14小時(shí)。
5、 根據(jù)權(quán)利要求l-4任一所述的方法，其特征在于所述步驟l)中，在將所述 色譜柱管與高壓輸液泵連接后，還進(jìn)行如下處理用有機(jī)溶劑沖洗色譜柱管與高壓輸液泵； 所述步驟2)中，在反應(yīng)完畢后，還進(jìn)行如下處理用有機(jī)溶劑沖洗所述整體柱。
6、 根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述有機(jī)溶劑為甲醇、正己垸或 四氫呋喃中的任意一種或任意幾種以任意比例混合的混合物。
7、 權(quán)利要求l-6任一所述方法制備得到的整體柱。
8、 根據(jù)權(quán)利要求7所述的整體柱，其特征在于所述整體柱為三維連續(xù)骨架結(jié)構(gòu)。
9、 權(quán)利要求7所述整體柱在制備用于分離類固醇類激素藥物或蛋白質(zhì)整體柱中的應(yīng)用。
10、 根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于所述類固醇類激素藥物為氫化可的松、睪酮或黃體酮。
全文摘要
本發(fā)明公開一種整體柱及其制備方法與應(yīng)用。該方法包括如下步驟1)將聚合單體、致孔劑、引發(fā)劑和溴化亞銅混合，除氧后加入催化劑配體，于色譜柱管中密封反應(yīng)，反應(yīng)完畢后將所述色譜柱管與高壓輸液泵連接，用有機(jī)溶劑沖洗去除致孔劑等可溶物，得到具有三維連續(xù)骨架結(jié)構(gòu)的整體柱；2)將功能單體的有機(jī)溶液、催化劑、催化劑配體和抗氧化劑的混合物注入到上述整體柱中，柱體表面殘留的基團(tuán)溴引發(fā)乙烯基單體進(jìn)行表面接枝聚合反應(yīng)。該方法可在室溫下聚合，大大改善了柱體由于聚合溫度高造成的柱體結(jié)構(gòu)不均一以及體積收縮等問題，所得整體柱與傳統(tǒng)整體柱的結(jié)構(gòu)明顯不同，適用于分離類固醇類激素藥物或蛋白質(zhì)等生物大分子。
文檔編號C07K1/00GK101537344SQ200910082659
公開日2009年9月23日 申請日期2009年4月23日 優(yōu)先權(quán)日2009年4月23日
發(fā)明者娟 喬, 姚春荷, 張榮月, 辛培勇, 魏曉奕, 莉 齊 申請人:中國科學(xué)院化學(xué)研究所