專利名稱：一種高純度的抗生素類藥物化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種高純度的抗生素類藥物化合物的精制方法，具體地說，涉及一種
內(nèi)酰胺青霉素類抗生素藥物化合物的精制方法。屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。 抗生素是微生物的代謝產(chǎn)物或合成的類似物，在體外能抑制微生物的生長和存 活，而對宿主不會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的毒副作用。在臨床應(yīng)用上，多數(shù)抗生素是抑制病原菌的生長， 用于治療大多數(shù)細(xì)菌感染性疾病。 抗生素的種類繁多，結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜，其中13-內(nèi)酰胺青霉素類抗生素是比較常見、 應(yīng)用廣泛的一類抗生素，尤其是式(I)結(jié)構(gòu)的抗生素類藥物化合物， 是一種13-內(nèi)酰胺青霉素類抗生素，分子中含有四個(gè)原子組成的13-內(nèi)酰胺環(huán)作 為發(fā)揮生物活性的必需基團(tuán)，在和細(xì)菌作用時(shí)，13-內(nèi)酰胺環(huán)開環(huán)與細(xì)菌發(fā)生?；饔?，抑 制細(xì)菌的生長。 如式(I)結(jié)構(gòu)的抗生素類藥物化合物包含阿洛西林鈉、美洛西林鈉、哌拉西林鈉、 阿莫西林鈉、氨芐西林鈉、苯唑西林鈉、氟氯西林鈉、氯唑西林鈉、雙氯西林鈉等，只是由基 團(tuán)R的不同而分別代表著不同的化合物。 如式(I)結(jié)構(gòu)的抗生素類藥物為半合成青霉素類化合物，利用Penicillin G為原 料，在偏堿性條件下，經(jīng)青霉素?；高M(jìn)行酶解，生成6-氨基青霉烷酸(6-APA)，再與相應(yīng) 的側(cè)鏈酸進(jìn)行縮合，即可得各種半合成青霉素，然后通過與堿性溶液反應(yīng)生成各種鹽。其縮 合方法通常有三種①酰氯法是較常用的方法，將側(cè)鏈酸制成酰氯，在低溫，中性或近中 性(pH6. 5-7. 0)條件下進(jìn)行；②酸酐法將側(cè)鏈酸制成酸酐或混合酸酐來進(jìn)行反應(yīng)；③DCC 法將側(cè)鏈酸和6-APA在有機(jī)溶劑中進(jìn)行縮合，以N，N' - 二環(huán)己碳亞胺(DCC)作為縮合劑。
目前，如式(I)結(jié)構(gòu)的青霉素類抗生素化合物，其大都通過上述合成方法制得，制 得的化合物普遍存在純度低的缺點(diǎn)，導(dǎo)致了制劑穩(wěn)定性大幅下降，影響了其臨床應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種抗生素類藥物化合物的精制方法，提高了其純度，改善 了產(chǎn)品制劑質(zhì)量。 為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明技術(shù)方案如下
背景技術(shù)：
本發(fā)明提供了一種e -內(nèi)酰胺青霉素類抗生素藥物化合物的精制方法，其特征在 于包括如下步驟 (1)將|3 -內(nèi)酰胺青霉素類抗生素藥物化合物的粗品溶于水，調(diào)節(jié)水溶液的pH值 為酸性，收集所析出的固體； (2)將步驟(1)所得到的固體用有機(jī)溶劑溶解后，上大孔吸附樹脂柱，用洗脫劑進(jìn) 行洗脫，收集含內(nèi)酰胺青霉素類抗生素藥物化合物的洗脫液； (3)調(diào)節(jié)步驟(2)所得洗脫液的pH值至堿性或中性，收集所析出的固體，即得到精 制后的13-內(nèi)酰胺青霉素類抗生素藥物化合物。 其中，上述所述的精制方法，其中所述的13-內(nèi)酰胺青霉素類抗生素藥物化合物，
優(yōu)選是具有如下式(I)所示結(jié)構(gòu)的抗生素類藥物化合物
(I) 其中，R為抗生素類藥物化合物所含有的其他基團(tuán)。 進(jìn)一步地，本發(fā)明上述所述的精制方法，其中所述的13-內(nèi)酰胺青霉素類抗生素 藥物化合物選自阿洛西林鈉、美洛西林鈉、哌拉西林鈉、阿莫西林鈉、氨芐西林鈉、苯唑西林 鈉、氟氯西林鈉、氯唑西林鈉或者雙氯西林鈉。 優(yōu)選地，上述所述的精制方法，其中所述步驟(1)中，用酸調(diào)節(jié)溶液的pH值為 2. 0 4. 5，優(yōu)選為3. 0 4. 0，所述的酸可以選自鹽酸、硫酸、硝酸、枸櫞酸、醋酸、硼酸、磷酸
中的一種或者兩種以上。 優(yōu)選地，上述所述的精制方法，其中所述步驟(2)中，所述的大孔吸附樹脂為苯乙 烯型大孔吸附樹脂；優(yōu)選所述大孔吸附樹脂為D101型大孔吸附樹脂或AB-8型大孔吸附樹 脂。 優(yōu)選地，上述所述的精制方法，其中所述步驟(2)中，所述的洗脫劑選自三氯甲 烷、二氯甲烷、乙醇、異丙醇、叔丁醇、乙酸乙酯、丙酮、石油醚中的一種或兩種以上；優(yōu)選所 述的洗脫劑為三氯甲烷和異丙醇的混合物，二者的體積比為3 : 1。 優(yōu)選地，上述所述的精制方法，其中所述步驟(2)中，所述的有機(jī)溶劑選自二氯甲 烷、乙醇、甲醇、三氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、石油醚中的一種或兩種以上；優(yōu)選所述的有機(jī)溶 劑為乙醇和丙酮的混合物，二者體積比為5 : 1。 優(yōu)選地，上述所述的精制方法，其中所述步驟(3)中，采用堿調(diào)節(jié)所得洗脫液的pH 值為5. 0 9. O，優(yōu)選為5. 5 7. 0，所述的堿選自氫氧化鈉、碳酸氫鈉、碳酸鈉、醋酸鈉、磷 酸氫二鈉、枸櫞酸鈉中的一種或兩種以上。 作為本發(fā)明最優(yōu)選實(shí)施方案之一，本發(fā)明上述所述的精制方法，其特征在于包括如下步驟 (1)將待精制的13 -內(nèi)酰胺青霉素類抗生素藥物化合物粗品溶于水，加入酸調(diào)節(jié) 溶液的PH值為3. 0 4. O，攪拌析出不溶物，過濾，經(jīng)純水洗滌后得到固體；
(2)將步驟(1)所得固體用有機(jī)溶劑溶解后，上D101大孔吸附樹脂或者AB-8大孔 吸附樹脂，用洗脫劑進(jìn)行洗脫，收集含藥物化合物的洗脫液，其中，所述的有機(jī)溶劑為乙醇 和丙酮的混合物，二者體積比為5 : l，所述的洗脫劑為三氯甲烷和異丙醇的混合物，二者 體積比為3:1; (3)用堿調(diào)節(jié)步驟(2)所收集的洗脫液的pH值為5.5 7.0，收取所析出的固體， 用異丙醇洗滌，50 6(TC真空干燥3 5小時(shí)，得精制品。 其中，所述的13 -內(nèi)酰胺青霉素類抗生素藥物化合物，優(yōu)選是阿洛西林鈉、美洛西 林鈉、哌拉西林鈉、阿莫西林鈉、氨節(jié)西林鈉、苯唑西林鈉、氟氯西林鈉、氯唑西林鈉或者雙 氯西林鈉。通過上述方法精制所述的e-內(nèi)酰胺青霉素類抗生素藥物化合物。所得精制品 的純度不低于99.9%。 與現(xiàn)有抗生素類藥物化合物制備方法相比，本發(fā)明方法，通過將調(diào)酸堿pH、大孔吸 附樹脂分離結(jié)合，并在特定工藝參數(shù)下，可以精制得到高純度的精制品，純度達(dá)99. 9%以 上，而且收率收率超過90%，取得令人意外的純化效果。本發(fā)明方法還可以獲得一種高純 度e-內(nèi)酰胺青霉素類藥物化合物，從而可以提高其相應(yīng)制劑穩(wěn)定性和臨床用藥效果。本 發(fā)明方法簡單、成本低廉、易于操作，適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。 本發(fā)明所述的13 -內(nèi)酰胺青霉素類抗生素藥物化合物純度的檢測方法為
取樣品適量，精密稱定，用流動(dòng)相A溶解并定量稀釋成每lml中含2mg的溶液，作 為供試品溶液；另取對照品適量，精密稱定，用流動(dòng)相A溶解并定量稀釋制成每lml中含 20 ii g的溶液作為對照溶液。照高效液相色譜法(中國藥典附錄V D)測定，用十八烷基硅 烷鍵合硅膠為填充劑；流動(dòng)相A為0. 05mol/L磷酸鹽緩沖液(取0. 05mol/L磷酸二氫鉀溶 液，用2mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至5.0)-乙腈(99 : 1);流動(dòng)相B為0. 05mol/L磷酸 鹽緩沖液(pH值5. O)-乙腈(80 : 20);流速為每分鐘1. Oml ;檢測波長為254nm。先以流 動(dòng)相A-流動(dòng)相B(92 : 8)等度洗脫，待主峰洗脫完畢后立即按下表進(jìn)行線性梯度洗脫。理 論塔板數(shù)按主峰計(jì)算不低于2000。取對照溶液20 ii 1注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使 主成分色譜峰的峰高為滿量程的20% -25% 。再精密量取供試品溶液和對照溶液各20 iU， 分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰，單個(gè)雜質(zhì)峰面積不 得大于對照溶液主峰面積(1. 0% )，各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積的3倍 (3. 0% )。(供試品溶液中任何小于對照溶液主峰面積0. 05倍的峰可忽略不計(jì))
時(shí)間(分鐘)流動(dòng)相A (%)流動(dòng)相B (%)
0928
250100
400100
41928
55928
具體實(shí)施例方式
以下通過具體實(shí)施方式
進(jìn)一步解釋或說明本發(fā)明內(nèi)容，但實(shí)施例不應(yīng)被理解為對本發(fā)明保護(hù)范圍的限制。 以下實(shí)施例所用D101大孔樹脂和AB-8大孔樹脂購自蚌埠市遼源新材料有限公司。HPLC檢測精制前粗品純度分別為阿洛西林鈉96. 5%，美洛西林鈉95. 8%，哌拉西林鈉96.0%，阿莫西林鈉96. 3 % ，氟氯西林鈉95.2%，氨節(jié)西林鈉94. 4 % 。
實(shí)施例1阿洛西林鈉的精制 (1)將100g阿洛西林鈉溶于1000ml水，加入lmol/L的鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值為3.0，攪拌析出不溶物，過濾，經(jīng)純化水洗滌后得到固體； (2)將步驟(1)所得固體用乙醇和丙酮(5 : 1)的混合物1500ml溶解，加入填有D101大孔樹脂的柱子通過，再用三氯甲烷和異丙醇(3 : 1)混合物500ml洗脫純化，收集洗脫液； (3)將步驟(2)所得洗脫液用10X醋酸鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為5. 5，析出固體，離心機(jī)離心10min，用500ml異丙醇洗滌，5(TC真空干燥5小時(shí)，得精制品94. 5g，收率94. 5% ，HPLC檢測純度為99. 96%。
實(shí)施例2美洛西林鈉的精制 (1)將100g美洛西林鈉溶于1000ml水，加入5mol/L的磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值為4. 0，攪拌析出不溶物，過濾，經(jīng)純化水洗滌后得到固體； (2)將步驟(1)所得固體用乙醇和丙酮(5 : 1)的混合物1300ml溶解，加入填有AB-8大孔樹脂的柱子通過，再用三氯甲烷和異丙醇(3 : 1)混合物600ml洗脫純化，收集洗脫液； (3)將步驟(2)所得洗脫液用10X枸櫞酸鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為7. O，析出固體，離心機(jī)離心20min，用500ml異丙醇洗滌，6(TC真空干燥3小時(shí)，得精制品92. 8g，收率92. 8%，HPLC檢測純度為99. 94% 。
實(shí)施例3哌拉西林鈉的精制 (1)將100g哌拉西林鈉溶于800ml水，加入2mol/L的硝酸溶液調(diào)節(jié)pH值為3. 5，攪拌析出不溶物，過濾，經(jīng)純化水洗滌后得到固體； (2)將步驟(1)所得固體用乙醇和丙酮(5 : 1)的混合物1200ml溶解，加入填有AB-8大孔樹脂的柱子通過，再用三氯甲烷和異丙醇(3 : 1)混合物500ml洗脫純化，收集洗脫液； (3)將步驟(2)所得洗脫液用0. lmol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為6. 0，析出固體，離心機(jī)離心10min，用500ml異丙醇洗滌，55。C真空干燥4小時(shí)，得精制品93. 7g，收率93.7%， HPLC檢測純度為99. 93 % 。
實(shí)施例4阿莫西林鈉的精制 (1)將100g阿莫西林鈉溶于1000ml水，加入2%枸櫞酸溶液調(diào)節(jié)pH值為2. 5，攪拌析出不溶物，過濾，經(jīng)純化水洗滌后得到固體； (2)將步驟(1)所得固體用乙醇和丙酮(5 : 1)的混合物1600ml溶解，加入填有D101大孔樹脂的柱子通過，再用三氯甲烷和異丙醇(3 : 1)混合物800ml洗脫純化，收集洗脫液； (3)將步驟(2)所得洗脫液用5X碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為5.0，析出固體，離心機(jī)離心20min，用500ml異丙醇洗滌，5(TC真空干燥4小時(shí)，得精制品95. 2g，收率95. 2% ，HPLC檢測純度為99. 97%。
實(shí)施例5氟氯西林鈉的精制 (1)將100g氟氯西林鈉溶于1200ml水，加入lmol/L的醋酸溶液調(diào)節(jié)pH值為2.0，攪拌析出不溶物，過濾，經(jīng)純化水洗滌后得到固體； (2)將步驟(1)所得固體用乙醇和丙酮(5 : 1)的混合物800ml溶解，加入填有AB-8大孔樹脂的柱子通過，再用三氯甲烷和異丙醇(3 : 1)混合物400ml洗脫純化，收集洗脫液； (3)將步驟(2)所得洗脫液用0. 2mol/L磷酸氫二鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為7. 5，析出固體，離心機(jī)離心10min，用500ml異丙醇洗滌，6(TC真空干燥4小時(shí)，得精制品91. 8g，收率91. 8%， HPLC檢測純度為99. 95%。
實(shí)施例6氨芐西林鈉的精制 (1)將100g氨芐西林鈉溶于1000ml水，加入0. lmol/L的鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值為4. 5，攪拌析出不溶物，過濾，經(jīng)純化水洗滌后得到固體； (2)將步驟(1)所得固體用乙醇和丙酮(5 : 1)的混合物1000ml溶解，加入填有D101大孔樹脂的柱子通過，再用三氯甲烷和異丙醇(3 : 1)混合物600ml洗脫純化，收集洗脫液； (3)將步驟(2)所得洗脫液用5X碳酸鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為6. 5，析出固體，離心機(jī)離心20min，用500ml異丙醇洗滌，5(TC真空干燥3小時(shí)，得精制品92. 2g，收率92. 2% ，HPLC檢測純度為99. 92%。 應(yīng)當(dāng)理解，這些實(shí)施例僅僅是對本發(fā)明優(yōu)選方案的說明，而并不以任何方式限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。本領(lǐng)域技術(shù)人員在本發(fā)明所公開內(nèi)容的教導(dǎo)下，在不背離本發(fā)明精神和主旨的前提下，可以對本發(fā)明進(jìn)行適當(dāng)?shù)男揎椇透倪M(jìn)，這些都將落入本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
一種β-內(nèi)酰胺青霉素類抗生素藥物化合物的精制方法，其特征在于包括如下步驟(1)將β-內(nèi)酰胺青霉素類抗生素藥物化合物的粗品溶于水，調(diào)節(jié)水溶液的pH值為酸性，收集所析出的固體；(2)將步驟(1)所得到的固體用有機(jī)溶劑溶解后，上大孔吸附樹脂柱，用洗脫劑進(jìn)行洗脫，收集含β-內(nèi)酰胺青霉素類抗生素藥物化合物的洗脫液；(3)調(diào)節(jié)步驟(2)所得洗脫液的pH值至堿性或中性，收集所析出的固體，即得到精制后的β-內(nèi)酰胺青霉素類抗生素藥物化合物。
2. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的精制方法，其中所述的P-內(nèi)酰胺青霉素類抗生素藥物化合 物是具有如下式(I)所示結(jié)構(gòu)的抗生素類藥物化合物其中，R為抗生素類藥物化合物所含有的其他基團(tuán)。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的精制方法，其中所述的e-內(nèi)酰胺青霉素類抗生素藥物化合 物可以為阿洛西林鈉、美洛西林鈉、哌拉西林鈉、阿莫西林鈉、氨芐西林鈉、苯唑西林鈉、氟 氯西林鈉、氯唑西林鈉或者雙氯西林鈉。
4. 根據(jù)權(quán)利要求l-3所述的精制方法，其特征在于所述步驟(1)中，用酸調(diào)節(jié)溶液的 pH值為2. 0 4. 5，優(yōu)選為3. 0 4. 0，所述的酸可以選自鹽酸、硫酸、硝酸、枸櫞酸、醋酸、硼 酸、磷酸中的一種或者兩種以上。
5. 根據(jù)權(quán)利要求l-4所述的精制方法，其特征在于所述步驟(2)中，所述的大孔吸附樹 脂為苯乙烯型大孔吸附樹脂；優(yōu)選所述大孔吸附樹脂為D101型大孔吸附樹脂或AB-8型大 孔吸附樹脂。
6. 根據(jù)權(quán)利要求l-5所述的精制方法，其特征在于所述步驟(2)中，所述的洗脫劑選自 三氯甲烷、二氯甲烷、乙醇、異丙醇、叔丁醇、乙酸乙酯、丙酮、石油醚中的一種或兩種以上； 優(yōu)選所述的洗脫劑為三氯甲烷和異丙醇的混合物，二者的體積比為3 : 1。
7. 根據(jù)權(quán)利要求l-6所述的精制方法，其特征在于所述步驟(2)中，所述的有機(jī)溶劑選 自二氯甲烷、乙醇、甲醇、三氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、石油醚中的一種或兩種以上；優(yōu)選所述 的有機(jī)溶劑為乙醇和丙酮的混合物，二者體積比為5 : 1。
8. 根據(jù)權(quán)利要求l-7所述的精制方法，其特征在所述步驟(3)中，采用堿調(diào)節(jié)所得洗脫 液的PH值為5. 0 9. O，優(yōu)選為5. 5 7. 0，所述的堿選自氫氧化鈉、碳酸氫鈉、碳酸鈉、醋 酸鈉、磷酸氫二鈉、枸櫞酸鈉中的一種或兩種以上。
9. 根據(jù)權(quán)利要求l-8所述的精制方法，其特征在于包括如下步驟(1)將待精制的P-內(nèi)酰胺青霉素類抗生素藥物化合物粗品溶于水，加入酸調(diào)節(jié)溶液的pH值為3. 0 4. 0，攪拌析出不溶物，過濾，經(jīng)純水洗滌后得到固體；(2) 將步驟(1)所得固體用有機(jī)溶劑溶解后，上D101大孔吸附樹脂或者AB-8大孔吸附 樹脂，用洗脫劑進(jìn)行洗脫，收集含藥物化合物的洗脫液，其中，所述的有機(jī)溶劑為乙醇和丙 酮的混合物，二者體積比為5 : l，所述的洗脫劑為三氯甲烷和異丙醇的混合物，二者體積比為3 : 1 ;(3) 用堿調(diào)節(jié)步驟(2)所收集的洗脫液的pH值為5.5 7.0，收取所析出的固體，用異 丙醇洗滌，50 6(TC真空干燥3 5小時(shí)，得精制品。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的精制方法，其中所述的e-內(nèi)酰胺青霉素類抗生素藥物化合 物為阿洛西林鈉、美洛西林鈉、哌拉西林鈉、阿莫西林鈉、氨節(jié)西林鈉、苯唑西林鈉、氟氯西 林鈉、氯唑西林鈉或者雙氯西林鈉，所得精制品的純度不低于99. 9%。
全文摘要
本發(fā)明提供一種高純度的抗生素類藥物化合物，具體地說，提供一種β-內(nèi)酰胺青霉素類抗生素藥物化合物的精制方法。通過將酸堿pH法、大孔吸附樹脂法有效地結(jié)合，并在特定工藝參數(shù)下進(jìn)行精制純化，得到高純度的β-內(nèi)酰胺青霉素類抗生素藥物化合物，純度達(dá)99.9％以上，而且收率收率超過90％，取得令人意外的純化效果。本發(fā)明方法可以獲得一種高純度β-內(nèi)酰胺青霉素類藥物化合物，從而可以提高其相應(yīng)制劑穩(wěn)定性和臨床用藥效果。方法簡單、成本低廉、易于操作，適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C07D499/18GK101696210SQ200910169648
公開日2010年4月21日 申請日期2009年8月28日 優(yōu)先權(quán)日2009年8月28日
發(fā)明者邱民 申請人:海南美大制藥有限公司;