專利名稱：花生衣中原花色素純化方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種純化方法，具體地說(shuō)，是涉及一種花生衣中原花色素純化 方法。
背景技術(shù)：
原花色素(Proanthocyanidins)是植物界中廣泛存在的 一大類多酚類化合物， 是黃烷-3-醇衍生物的總稱。它是由兒茶素、表兒茶素聚合而成，包括二聚體、 三聚體、四聚體、直至十聚體。原花色素具有很強(qiáng)的生物活性，能夠清除人體 內(nèi)過(guò)剩自由基，并具有較強(qiáng)的抗氧化能力，可作為防癌、抗突變、防治心血管 疾病藥物的主要有效成分，并能抑制微生物的生長(zhǎng)，可用作安全無(wú)毒的新型天 然抗氧化劑和防腐劑。
花生衣中含有豐富的原花色素，含量約占花生衣干重的17%,但 從花生衣中提取的原花色素粗產(chǎn)品用純度較低，為了使發(fā)揮其應(yīng)有的功效, 必須對(duì)粗品進(jìn)行純化。目前，對(duì)原花色素的分離純化，工業(yè)上多釆用層析法， 層析法中大孔吸附樹脂廉價(jià)易得，且具有吸附快、解吸快、吸附容量大、易于 再生、使用壽命長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于公開一種可以純化花生衣原花色素新方法，利用這種新 方法進(jìn)行分離純化，產(chǎn)品純度高、易于再生。 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明釆用如下步驟
(1 )將脫脂花生衣加入到乙醇溶液，微波萃取后抽濾，濾液濃縮，20Pa,-4"C 真空冷凍干燥，得原花色素粗品
(2)將步驟(1)的所得到的粗品配制成原花色素溶液，通過(guò)HPD-826大 孔吸附樹脂填充柱；然后蒸餾水洗脫除去雜質(zhì)，再用乙醇洗脫。.(3)將所得的乙醇洗脫液濃縮、20Pa，-4'C冷凍干燥，得花生衣原花色素精制品。
以香草醛一鹽酸法檢測(cè)該樣品的原花色素的純度為92.05%。
步驟(1)中所述的脫脂花生衣按1: 25 (m:v)的比例加入40%乙醇溶液 中；所述的微波萃取是設(shè)定功率為600W、溫度為40。C,攪拌萃取90S。
步驟(2)所述的原花色素濃度為10-12mg/ml;通過(guò)HPD-826大孔吸附樹 脂填充柱的流速為0.5-lml/min;所述的蒸餾水洗脫4BV;所述的乙醇洗脫為用 5。/o的乙醇洗脫2BV,洗脫流速為0.5-lml/min。
本發(fā)明中未詳細(xì)列出的方法，如抽濾、香草醛一鹽酸法等均為本領(lǐng)域技術(shù) 人員公知的常規(guī)方法。
本發(fā)明提供了一種花生衣原花色素純化的新方法，利用大孔吸附樹脂對(duì)花 生衣中的原花色素進(jìn)行特異性吸附，再根據(jù)不同濃度的乙醇對(duì)吸附樣品的解析 能力的不同，從而達(dá)到原花色素純化的目的。本方法的優(yōu)點(diǎn)是吸附快、解吸快、 吸附容量大、所得產(chǎn)品純度高、易于再生等優(yōu)點(diǎn)。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，以助于理解本發(fā)明的內(nèi)容。 經(jīng)發(fā)明人證實(shí)，本發(fā)明所述的步驟和參數(shù)均能夠?qū)崿F(xiàn)本發(fā)明的目的。 實(shí)施例1
(1) 將脫脂花生衣按1: 25 (m:v)的比例加入40%乙醇溶液，在微波萃 取儀中設(shè)定功率為600W、溫度為40°C,攪拌萃取90S，萃取結(jié)束后抽濾，濾 液濃縮，20Pa,-4i:真空冷凍干燥，得原花色素粗品
(2) 將步驟(1)的所得到的粗品配制成原花色素濃度為10mg/ml的溶液 以0.5ml/min的流速通過(guò)HPD-826大孔吸附樹脂填充柱；然后用蒸餾水洗脫 4BV,除去雜質(zhì)，再用5。/q的乙醇洗脫2BV,洗脫流速為0.5ml/min。
(3) 將步驟(2)所得的5%的乙醇洗脫液濃縮、20Pa，-4。C真空冷凍干燥， 得花生衣原花色素精制品，經(jīng)檢測(cè)該樣品的原花色素的純度為92.05%。實(shí)施例2
(1) 將脫脂花生衣按1: 25 (m:v)的比例加入40%乙醇溶液，在微波萃取儀中設(shè)定功率為600W、溫度為40°C，攪拌萃取90S,萃取結(jié)東后抽濾，濾液濃縮，20Pa,-4t:真空冷凍干燥，得原花色素粗品
(2) 將步驟(1)的所得到的粗品配制成原花色素濃度為12mg/ml的溶液以lml/min的流速通過(guò)HPD-826大孔吸附樹脂填充柱；然后用蒸餾水洗脫4BV，除去雜質(zhì)，再用5。/。的乙醇洗脫2BV，洗脫流速為lml/min。
(3) 將步驟(2)所得的5%的乙醇洗脫液濃縮、20Pa,-4。C真空冷凍干燥，得花生衣原花色素精制品，經(jīng)檢測(cè)該樣品的原花色素的純度為94.25%。實(shí)施例3
(1) 將脫脂花生衣按1: 25 (m:v)的比例加入40%乙醇溶液，在微波萃取儀中設(shè)定功率為600W、溫度為40°C，攪拌萃取90S,萃取結(jié)束后抽濾，濾液濃縮，20Pa,-4t:真空冷凍干燥，得原花色素粗品
(2) 將步驟(1)的所得到的粗品配制成原花色素濃度為11mg/ml的溶液以0.8ml/min的流速通過(guò)HPD-826大孔吸附樹脂填充柱；然后用蒸餾水洗脫4BV，除去雜質(zhì)，再用5。/。的乙醇洗脫2BV，洗脫流速為0.8ml/min。
(3) 將步驟(2)所得的5%的乙醇洗脫液濃縮、20Pa,-4。C真空冷凍干燥，得花生衣原花色素精制品，經(jīng)檢測(cè)該樣品的原花色素的純度為93.0%。實(shí)施例4
(1) 將脫脂花生衣按1: 25 (m:v)的比例加入40%乙醇溶液，在微波萃取儀中設(shè)定功率為600W、溫度為40°C，攪拌萃取90S，萃取結(jié)束后抽濾，濾液濃縮，20Pa，-4。C真空冷凍干燥，得原花色素粗品
(2) 將步驟(1)的所得到的粗品配制成原花色素濃度為10Jmg/ml的溶液以0.6ml/min的流速通過(guò)HPD-826大孔吸附樹脂填充柱；然后用蒸餾水洗脫4BV,除去雜質(zhì)，再用5。/。的乙醇洗脫2BV，洗脫流速為0.6ml/min。
(3) 將步驟(2)所得的5%的乙醇洗脫液濃縮、加Pa,4。C真空冷凍千燥，得花生衣原花色素精制品，經(jīng)檢測(cè)該樣品的原花色素的純度為91."%。實(shí)施例5
(1) 將脫脂花生衣按1: 25 (m:v)的比例加入40%乙醇溶液，在微波萃取儀中設(shè)定功率為600W、溫度為4(TC,攪拌萃取90S,萃取結(jié)東后抽濾，濾液濃縮，20Pa,-4"C真空冷凍干燥，得原花色素粗品
(2) 將步驟(1)的所得到的粗品配制成原花色素濃度為12mg/ml的溶液以0.9ml/min的流速通過(guò)HPD-826大孔吸附樹脂填充柱；然后用蒸餾水洗脫4BV，除去雜質(zhì)，再用5。/。的乙醇洗脫2BV,洗脫流速為0.7ml/min。
(3) 將步驟(2)所得的5%的乙醇洗脫液濃縮、20Pa,-4。C真空冷凍干燥，得花生衣原花色素精制品，經(jīng)檢測(cè)該樣品的原花色素的純度為92.21%。實(shí)施例6
(1) 將脫脂花生衣按1: 25 (m:v)的比例加入40%乙醇溶液，在微波萃取儀中設(shè)定功率為600W、溫度為40°C，攪拌萃取90S,萃取結(jié)束后抽濾，濾液濃縮，20Pa,-4t:真空冷凍千燥，得原花色素粗品
(2) 將步驟(1)的所得到的粗品配制成原花色素濃度為10mg/ml的溶液以0.7ml/min的流速通過(guò)HPD-826大孔吸附樹脂填充柱；然后用蒸餾水洗脫4BV,除去雜質(zhì)，再用5。/。的乙醇洗脫2BV,洗脫流速為0.9ml/min。
(3) 將步驟(2)所得的5%的乙醇洗脫液濃縮、MPa,-fC真空冷凍干燥,得花生衣原花色素精制品，經(jīng)檢測(cè)該樣品的原花色素的純度為94.11%。
權(quán)利要求
1、一種花生衣中原花色素純化方法，包括以下步驟(1)將脫脂花生衣加入到乙醇溶液，微波萃取后抽濾，濾液濃縮，真空冷凍干燥得原花色素粗品；(2)將步驟(1)的所得到的粗品配制成原花色素溶液，通過(guò)HPD-826大孔吸附樹脂填充柱；然后蒸餾水洗脫除去雜質(zhì)，再用乙醇洗脫；(3)將所得的乙醇洗脫液濃縮、冷凍干燥得花生衣原花色素精制品。
2、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的花生衣中原花色素純化方法，其特征在于，步驟 (1)中所述的脫脂花生衣按質(zhì)量體積比1: 25加入40%乙醇溶液中。
3、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的花生衣中原花色素純化方法，其特征在于，步驟·(1) 中所述的微波萃取是設(shè)定功率為600W、溫度為40。C,攪拌萃取90S。
4、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的花生衣中原花色素純化方法，其特征在于，步驟(2) 中所述的原花色素濃度為10-12mg/ml。
5、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的花生衣中原花色素純化方法，其特征在于，步驟 (2)中所述的通過(guò)HPD-826大孔吸附樹脂填充柱的流速為0.5-lml/min。
6、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的花生衣中原花色素純化方法，其特征在于，步驟 (2)中所述的所述的乙醇洗脫為用5%的乙醇洗脫2BV,洗脫流速為·0.5-lml/min。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種花生衣中原花色素純化方法，包括以下步驟(1)將脫脂花生衣加入到乙醇溶液，微波萃取后抽濾，濾液濃縮，真空冷凍干燥得原花色素粗品；(2)將步驟(1)的所得到的粗品配制成原花色素溶液，通過(guò)HPD-826大孔吸附樹脂填充柱；然后蒸餾水洗脫除去雜質(zhì)，再用乙醇洗脫；(3)將所得的乙醇洗脫液濃縮、冷凍干燥得花生衣原花色素精制品。本發(fā)明的方法原花色素吸附量大、產(chǎn)品純度高、樹脂易于再生，適用于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07D311/62GK101665482SQ20091017841
公開日2010年3月10日 申請(qǐng)日期2009年9月24日 優(yōu)先權(quán)日2009年9月24日
發(fā)明者于麗娜, 張初署, 鳳 朱, 楊慶利, 潔 畢, 禹山林 申請(qǐng)人:山東省花生研究所