專利名稱：一種金絲桃素的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及金絲桃素的提取純化工藝，特別是一種應(yīng)用樹脂吸附和氧化鋁層析純
化金絲桃素的方法。
背景技術(shù)：
金絲桃素 化學(xué)名4，4'，5，5'，7，7'-六羥基-2，2'-二甲基-中位苯并二蒽酮(4，4'，5，5'， 7， 7' _Hexahydroxy_2， 2' -dimethyl-n即hthodianthrone)
分子式C3。H1608
OH〇 OH
OH〇 OH 分子量504. 43 性狀藍(lán)黑色針狀結(jié)晶(吡啶-含HCl甲醇)，熔點32(TC (分解)，易溶于吡啶或 其他有機(jī)胺類且橙紅色并帶紅色熒光，不溶于多數(shù)有機(jī)溶劑，可溶于堿性水溶液。對光、氧、 熱不穩(wěn)定。 金絲桃素是貫葉連翹的主要活性成分，具有抗病毒、抗癌、抗抑郁等功能，已用于 治療抑郁、艾滋病、肝炎、癌癥等，近年來的研究表明還可高效作用于禽流感H5N1型病毒。
金絲桃素的提取通常用乙醇，然而由于金絲桃素在貫葉連翹中的含量依然相當(dāng) 低(0.01 0.06% )，因此產(chǎn)品提取困難，收得率和純度不高且成本高昂。如中國專利 CN1880328所公開的方法中金絲桃素由大孔樹脂吸附和反膠束萃取劑萃取獲得，萃取劑配 置麻煩，不利于大規(guī)模生產(chǎn)；又如中國專利CN1392130醇提操作重復(fù)次數(shù)多，終點不易判 斷。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是為了提供一種生產(chǎn)工藝簡單，能源消耗少，成本低，金絲桃素純度 達(dá)25%以上，收率大于75% ，產(chǎn)量大，周期短，易于實現(xiàn)工業(yè)化的金絲桃素提取工藝。
本發(fā)明的目的是這樣來實現(xiàn)的 ①水提將新鮮貫葉連翹粉碎，加飽和石灰水浸泡并攪拌1 2小時，趁熱過濾，濾 液冷卻至室溫，用鹽酸調(diào)節(jié)pH為6 7，得粗提液； ②樹脂分離上述粗提液過樹脂柱進(jìn)行飽和吸附，分別用水和乙醇溶液進(jìn)行分段 洗脫，收集金絲桃素洗脫液，減壓濃縮，得浸膏； ③氧化鋁層析將浸膏與氧化鋁拌樣后上層析柱，用乙醇溶液洗脫，得層析液；
重結(jié)晶將層析液減壓濃縮至1/10 1/12，靜置結(jié)晶，再用環(huán)己烷溶解晶體，重 結(jié)晶3 5次，即得。 上述金絲桃素的制備方法，其特征在于所述水提過程飽和石灰水用量為原料重 量的10 20倍，控溫為40 50°C 。 上述金絲桃素的制備方法，其特征在于所述樹脂可選用LSA-5B、 HPD600或 HZ-841。 上述金絲桃素的制備方法，其特征在于所述樹脂的分段洗脫過程如下先用8 IO倍量柱體積的去離子水洗脫無機(jī)雜質(zhì)，后用40 60%的乙醇洗脫至下柱液透明，再用 4 6倍量柱體積80 100%乙醇洗脫金絲桃素。 上述金絲桃素的制備方法，其特征在于所述氧化鋁選用中性氧化鋁。 上述金絲桃素的制備方法，其特征在于所述洗脫氧化鋁的條件濃度30 40%乙
醇除雜，濃度70 90%乙醇洗脫金絲桃素，洗脫終點為流出液透明。 本發(fā)明存在以下優(yōu)點 1)金絲桃素易溶于堿水，因此用石灰水可以比較充分地從原料中提取到金絲桃 素； 2)酸化既能使無機(jī)溶質(zhì)能充分液化，在經(jīng)過樹脂吸附和水洗過程中除去，又能降 低金絲桃素的溶解度，方便樹脂吸附； 3)利用金絲桃素不溶于大多數(shù)有機(jī)溶劑的性質(zhì)，分段洗脫可以使大量的有機(jī)雜質(zhì) 先于金絲桃素洗出； 4)金絲桃素高度稠和，極性很小，因此用非極性溶劑重結(jié)晶使得原含量較少的金 絲桃素濃集，得到較高純度產(chǎn)品。 下面將結(jié)合具體實施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限 于下列實施方式。
具體實施例方式
實施例1 : 將20kg新鮮貫葉連翹(金絲桃素含量0. 028% )粉碎，加入200L飽和石灰水浸泡 加熱至4(TC攪拌1小時，趁熱過濾，濾液冷卻至室溫，加鹽酸調(diào)節(jié)pH為6. 1 ;上述溶液過柱 體積5L的SA-5B樹脂柱進(jìn)行飽和吸附，分別用40L水和足量40%乙醇溶液洗脫樹脂至流出 液透明，再用50L純乙醇洗脫金絲桃素洗脫液，減壓濃縮；所得浸膏與中性氧化鋁拌樣后上 柱，用30%乙醇洗脫至流出液透明，70%乙醇二次洗脫至流出液透明，將第二次洗脫液減壓 濃縮至原體積1/10，靜置結(jié)晶；晶體用環(huán)己烷重結(jié)晶3次，最終得到14. 7g含量為28. 8%的 金絲桃素成品。
實施例2 : 將20kg新鮮貫葉連翹(金絲桃素含量0. 031 % )粉碎，加入220L飽和石灰水浸泡 加熱至45t:攪拌1. 5小時，趁熱過濾，濾液冷卻至室溫，加鹽酸調(diào)節(jié)pH為6. 6 ;上述溶液過 柱體積5L的HPD600大孔樹脂柱進(jìn)行飽和吸附，分別用45L水和足量50%乙醇溶液洗脫樹 脂至流出液透明，再用70L90X乙醇洗脫金絲桃素洗脫液，減壓濃縮；所得浸膏與中性氧化 鋁拌樣后上柱，用35%乙醇洗脫至流出液透明，80%乙醇二次洗脫至流出液透明，將第二次 洗脫液減壓濃縮至原體積1/11，靜置結(jié)晶；晶體用環(huán)己烷重結(jié)晶4次，最終得到13. 5g含量 為31.8%的金絲桃素成品。
實施例3: 將20kg新鮮貫葉連翹(金絲桃素含量0.030% )粉碎，加入240L飽和石灰水浸 泡加熱至5(TC攪拌2小時，趁熱過濾，濾液冷卻至室溫，加鹽酸調(diào)節(jié)pH為7 ;上述溶液過柱 體積5L的HZ-841大孔樹脂柱進(jìn)行飽和吸附，分別用50L水和足量60%乙醇溶液洗脫樹脂 至流出液透明，再用75L80X乙醇洗脫金絲桃素洗脫液，減壓濃縮；所得浸膏與中性氧化鋁 拌樣后上柱，用40%乙醇洗脫至流出液透明，90%乙醇二次洗脫至流出液透明，將第二次洗 脫液減壓濃縮至原體積1/12，靜置結(jié)晶；晶體用環(huán)己烷重結(jié)晶5次，最終得到13. 6g含量為 33. 1%的金絲桃素成品。
權(quán)利要求
一種金絲桃素的制備方法，其特征在于包括以下幾個步驟①水提將新鮮貫葉連翹粉碎，加飽和石灰水浸泡并攪拌1～2小時，趁熱過濾，濾液冷卻至室溫，用鹽酸調(diào)節(jié)pH為6～7，得粗提液；②樹脂分離上述粗提液過樹脂柱進(jìn)行飽和吸附，分別用水和乙醇溶液進(jìn)行分段洗脫，收集金絲桃素洗脫液，減壓濃縮，得浸膏；③氧化鋁層析將浸膏與氧化鋁拌樣后上層析柱，用乙醇溶液洗脫，得層析液；④重結(jié)晶將層析液減壓濃縮至1/10～1/12，靜置結(jié)晶，再用環(huán)己烷溶解晶體，重結(jié)晶3～5次，即得。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述金絲桃素的制備方法，其特征在于所述水提過程飽和石灰水用量為原料重量的10 12倍，控溫為40 50°C。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述金絲桃素的制備方法，其特征在于所述樹脂可選用LSA-5B、 HPD600或HZ-841。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述金絲桃素的制備方法，其特征在于所述樹脂的分段洗脫過程如 下先用8 10倍量柱體積的去離子水洗脫無機(jī)雜質(zhì)，后用40 60%的乙醇洗脫至下柱 液透明，再用10 15倍量柱體積80 100%乙醇洗脫金絲桃素。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述金絲桃素的制備方法，其特征在于所述氧化鋁選用中性氧化鋁。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述金絲桃素的制備方法，其特征在于所述洗脫氧化鋁的條件濃 度30 40%乙醇除雜，濃度70 90%乙醇洗脫金絲桃素，洗脫終點為流出液透明。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種運用大孔樹脂分離和氧化鋁層析技術(shù)分離提純金絲桃素的方法。工藝步驟包括將新鮮貫葉連翹粉碎后用飽和石灰水提取1～2小時，室溫下用鹽酸調(diào)pH為6～7，上樹脂分離，分段洗脫，氧化鋁層析，乙醇洗脫，環(huán)己烷重結(jié)晶得到產(chǎn)物。采用本發(fā)明生產(chǎn)金絲桃素，工藝簡單、能源消耗少、純度較高。
文檔編號C07C50/00GK101759549SQ20091023406
公開日2010年6月30日 申請日期2009年11月20日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月20日
發(fā)明者劉東鋒, 張翼, 楊成東 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司