專利名稱：一種能夠準(zhǔn)確控制銨根含量的甘草酸二銨鹽的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種能夠準(zhǔn)確控制銨根含量的甘草酸二銨鹽的制備方法，以及能夠準(zhǔn) 確監(jiān)測(cè)銨根含量的靛酚藍(lán)比色法在制備過(guò)程中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
甘草酸為中藥甘草中最主要的活性物質(zhì)。甘草酸母核分子結(jié)構(gòu)如下該分子結(jié)構(gòu)具有如下兩個(gè)特點(diǎn)其一、結(jié)構(gòu)中存在三個(gè)羧基，可能形成單銨鹽、二銨鹽或者三銨鹽。其二、在18H處(結(jié)構(gòu)圖中標(biāo)“*”部分)存在一個(gè)異構(gòu)中心，可以形成18 α、18 β
兩種構(gòu)型的異構(gòu)體，這兩種異構(gòu)體分子結(jié)構(gòu)分別如下 18 α -甘草酸18 β -甘草酸甘草酸類化合物通常為上述兩種構(gòu)型的混合物。甘草酸類藥物具有廣泛的藥理活性，通過(guò)作用于激素受體，影響離子通道，激活或 抑制酶活性，調(diào)節(jié)物質(zhì)代謝，調(diào)節(jié)膽堿能神經(jīng)的興奮性，具有腎上腺皮質(zhì)激素樣作用而無(wú)其 副作用，抗炎抗變態(tài)反應(yīng)明顯，并有抗病毒、免疫調(diào)節(jié)、保護(hù)膜結(jié)構(gòu)、抗?jié)兒徒獐d作用。臨 床上主要用于伴有谷丙轉(zhuǎn)氨酶升高的急、慢性病毒性肝炎的治療，取得了顯著的效果。已知天然甘草中甘草酸構(gòu)型以18β為主，在早期開(kāi)發(fā)的以甘草甜素片及甘草酸 單銨注射液為代表的甘草酸類藥物的第一、第二代產(chǎn)品中，其甘草酸構(gòu)型均以18β為主。隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)因立體構(gòu)象的不同，甘草酸藥物的療效及不良反應(yīng)存在一 定的差異，18 α構(gòu)型比18 β構(gòu)型抗D-氨基半乳糖肝損害作用更好，腎上腺皮質(zhì)激素樣副作 用更低。二十世紀(jì)九十年代，以18 α構(gòu)型為主的甘草酸二銨原料及其注射液成功開(kāi)發(fā)上 市，屬甘草酸類藥物的第三代產(chǎn)品。甘草酸二銨與甘草酸單銨的結(jié)構(gòu)差別主要表現(xiàn)在銨根含量以及18 α _、18 β _甘
3同顧名思義，甘草酸單銨為單銨鹽，而甘草酸二銨應(yīng)為二銨鹽；同 時(shí)，甘草酸單銨以18 β構(gòu)型為主(ΕΡ5. 0規(guī)定其含18 α -甘草酸< 10% )，而甘草酸二銨 以18α構(gòu)型為主。然而，令人遺憾的是，我們?cè)谘芯恐邪l(fā)現(xiàn)，目前上市的甘草酸二銨產(chǎn)品對(duì) 于銨根的含量以及18α、18β構(gòu)型的組成均未能加以明確控制目前國(guó)內(nèi)現(xiàn)有甘草酸二銨 標(biāo)準(zhǔn)中僅包含對(duì)銨根的定性鑒別，缺少專屬性強(qiáng)的可以區(qū)分甘草酸單銨鹽與二銨鹽的定量 鑒別方法；同時(shí)，國(guó)內(nèi)藥品標(biāo)準(zhǔn)方法均不能分離18 α _、18 β -甘草酸，標(biāo)準(zhǔn)中也未明確規(guī)定 18α、18β構(gòu)型的組成比例，從而造成產(chǎn)品內(nèi)在質(zhì)量控制的嚴(yán)重缺失。甘草酸二銨的水溶性優(yōu)于甘草酸單銨，給制劑帶來(lái)便利。然而甘草酸分子結(jié)構(gòu)中 存在三個(gè)羧基，在甘草酸二銨的合成中，如何確保其得到的產(chǎn)物為二銨鹽，而不是單銨鹽或 者三銨鹽，是合成工藝中亟待解決的問(wèn)題。由于缺少有效的監(jiān)測(cè)手段，目前大多數(shù)生產(chǎn)廠家 的制備工藝中事實(shí)上無(wú)法對(duì)銨根的含量進(jìn)行準(zhǔn)確的控制，由于銨基易于分解，往往在結(jié)晶 及干燥過(guò)程中已成為甘草酸單銨，并不能獲得真正意義上的二銨鹽。要解決這一問(wèn)題，首先 必須建立銨根的定量檢測(cè)方法。然而由于甘草酸二銨中銨根含量很低，給其定量檢測(cè)帶來(lái) 了難度?？上驳氖牵覀兏鶕?jù)靛酚藍(lán)比色法的原理，創(chuàng)造性地用于甘草酸二銨分子中銨根 含量的測(cè)定，方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，解決了甘草酸二銨合成工藝及質(zhì)量控制中銨根含量的控制問(wèn) 題，從而確保制備得到真正意義上的甘草酸二銨。同時(shí)，18位構(gòu)型組成也是甘草酸二銨鹽的關(guān)鍵質(zhì)量指標(biāo)之一。然而由于18 α _、 18 β-甘草酸結(jié)構(gòu)非常接近，給其分離測(cè)定帶來(lái)了難度。在甘草酸二銨的合成工藝中，有 的生產(chǎn)廠家通過(guò)不同構(gòu)型最大吸收波長(zhǎng)及比旋度的差異控制構(gòu)型的組成，然而其方法較為 粗陋，不能明確測(cè)定混合物中構(gòu)型的組成比例。我們通過(guò)實(shí)驗(yàn)，建立了能有效分離18 α-、 18 β -甘草酸的高效液相色譜方法，用于甘草酸構(gòu)型組成的定量分析并用于合成工藝中甘 草酸構(gòu)型的監(jiān)控，從而使得我們可以采用18α構(gòu)型的甘草酸單銨，或者18β構(gòu)型的甘草 酸單銨，或者18α和18β任意比例組成的混合物為起始原料最終制得具有明確的構(gòu)型組 成的甘草酸二銨。該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，成功解決了甘草酸二銨合成工藝及質(zhì)量控制中18α、 18 β構(gòu)型組成比例的控制問(wèn)題。發(fā)明人采用上述質(zhì)量控制方法對(duì)部分上市甘草酸二銨產(chǎn)品進(jìn)行了銨鹽含量及構(gòu) 型組成的分析。令人震驚的是，我們發(fā)現(xiàn)所測(cè)定的上市甘草酸二銨產(chǎn)品實(shí)際上基本為單銨 鹽；更令人擔(dān)擾的是，我們發(fā)現(xiàn)所測(cè)定的已上市甘草酸二銨產(chǎn)品實(shí)際上均為18α、18β構(gòu) 型的混合物(其中18 α-構(gòu)型約占70% 80%，18 β-構(gòu)型約占30% 20% )，然而不同 廠家產(chǎn)品的構(gòu)型組成存在較大的差異。本發(fā)明采用的制備工藝及監(jiān)測(cè)方法突破性地解決了目前工藝制備甘草酸二銨銨 根含量錯(cuò)誤的問(wèn)題，同時(shí)減少結(jié)晶步驟，大大提高了二銨鹽的收率，適合于工業(yè)化生產(chǎn)。本 方法制備得到的甘草酸二銨鹽還具有明確的18α、18β構(gòu)型組成，從而確保甘草酸二銨產(chǎn) 品使用安全、療效穩(wěn)定、質(zhì)量可控。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在從根本上解決目前甘草酸二銨產(chǎn)品銨根含量錯(cuò)誤的問(wèn)題，提供一種簡(jiǎn) 單可行、收率高的能夠制備得到具有正確的銨根含量的甘草酸二銨鹽的制備方法。同時(shí)，本 發(fā)明制備得到的甘草酸二銨還具有明確的18α、18β構(gòu)型組成。
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為制備得到具有正確的銨根含量與明確的18α、18β構(gòu)型組成的甘草酸二銨鹽， 首先需要建立準(zhǔn)確可靠的能夠檢測(cè)銨鹽中銨根含量以及能夠分離18 α _、18 β -甘草酸的 檢測(cè)方法。然而由于甘草酸二銨中銨根含量很低，以及18 α-、18 β-甘草酸結(jié)構(gòu)非常接近， 為上述方法的建立帶來(lái)了難度。為了建立簡(jiǎn)便有效的監(jiān)測(cè)方法，發(fā)明人進(jìn)行了大量的摸索 實(shí)驗(yàn)，最終突破性地解決了上述問(wèn)題。本發(fā)明根據(jù)靛酚藍(lán)比色法的原理，創(chuàng)造性地用于甘草酸二銨分子中銨根含量的測(cè) 定。方法原理在亞硝基鐵氰化鈉及次氯酸鈉存在下，銨根吸收在稀硫酸中，與水楊酸生成 藍(lán)綠色的靛酚染料，40°C放置30分鐘使反應(yīng)完全，在698nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收值，通過(guò)顯色后 樣品管與已知銨根濃度對(duì)照管吸收值的比對(duì)，根據(jù)顯色深淺，比色定量。其標(biāo)準(zhǔn)操作如下(1)吸收液0. 005mol · Γ1硫酸溶液。吸取2. 8mL硫酸加入水中，并用水稀釋至 1L。臨用時(shí)，再用水稀釋10倍。(2)50g · L-1水楊酸溶液稱取10. Og水楊酸[C6H4(OH)COOH]和10. Og檸檬酸鈉 (Na3C6H5O7 · 2H20)，加水約50mL，再加2mol · Γ1氫氧化鈉溶液55mL，用水稀釋至200mL。此
試劑稍呈黃色，室溫下可穩(wěn)定一個(gè)月。(3) IOg · Γ1亞硝基鐵氰化鈉溶液稱取1. Og亞硝基鐵氰化鈉 [Na2Fe (CN) 5 · NO · 2H20]，溶于IOOmL水中，冷藏條件下貯存，可穩(wěn)定一個(gè)月。(4)0. 05mol 次氯酸鈉溶液次氯酸鈉試劑(有效氯不低于5. 2% )，用碘量法 標(biāo)定濃度。(5)氨的標(biāo)準(zhǔn)溶液準(zhǔn)確稱取0. 3142g經(jīng)105°C干燥2h的氯化銨(NH4Cl)，用少量 水溶解，移入IOOmL容量瓶中，用吸收液稀釋至刻度。此溶液ImL含Img的氨。臨用時(shí)，再 用吸收液稀釋成ImL含1 μ g氨的標(biāo)準(zhǔn)溶液。(6)樣品標(biāo)準(zhǔn)溶液取甘草酸單銨或二銨樣品適量，用適量吸收液溶解，根據(jù)樣品 中理論氨的含量進(jìn)行計(jì)算，用吸收液稀釋得到理論氨含量約1 μ g -mL-1的樣品溶液。如現(xiàn) 有甘草酸二銨注射液濃度為5mg ^mr1,已知甘草酸二銨分子量857，氨分子量17，則注射液 中標(biāo)示氨濃度應(yīng)為(5 + 857) X 17X2 = 198 ( μ g · mL—1)，因此，將注射液用吸收液稀釋198 倍，即得理論氨含量為1 μ g · mr1的樣品標(biāo)準(zhǔn)溶液。(7)顯色測(cè)定取氨的標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品標(biāo)準(zhǔn)溶液，依下表分別加入上述試劑，混 勻，40°C條件下放置30分鐘，以水作為參比，在波長(zhǎng)698nm下，測(cè)定各管溶液吸光度
加入量/mL
試劑
對(duì)照管樣品管
(70 %-
(8)結(jié)果判定樣品管的吸光度應(yīng)與相應(yīng)氨含量對(duì)照管的吸光度基本一致 120% )。
發(fā)明人對(duì)本方法進(jìn)行了溶液穩(wěn)定性、線性關(guān)系、專屬性等方法學(xué)考察，結(jié)果表明測(cè) 定結(jié)果準(zhǔn)確，專屬性好，甘草酸及其他常規(guī)物料對(duì)銨根的測(cè)定無(wú)干擾。本發(fā)明還采用高效液相色譜法分離測(cè)定18α-、18β_甘草酸，具體為以十八烷 基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以水相[水60% HClO4 (48 0.5，ν/ν)，用氨水調(diào)節(jié)ρΗ值至 8.0]-甲醇(48 52)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)250nm，柱溫50°C。上述色譜條件必要時(shí)可以根 據(jù)系統(tǒng)適用性的要求進(jìn)行方法學(xué)上周知的調(diào)整。發(fā)明人對(duì)本方法進(jìn)行了樣品溶液穩(wěn)定性(含構(gòu)型穩(wěn)定性)、系統(tǒng)耐用性等方法學(xué) 研究，結(jié)果表明在檢測(cè)過(guò)程中18 α _、18 β -甘草酸不會(huì)發(fā)生構(gòu)型的轉(zhuǎn)化，從而確保測(cè)定結(jié) 果的準(zhǔn)確，采用本方法18 α _、18 β -甘草酸之間分離度不小于1. 2，經(jīng)不同實(shí)驗(yàn)室重復(fù)驗(yàn) 證，方法耐用性好。上述質(zhì)量控制方法的建立，為合成具有正確的銨根含量與明確的18α、18β構(gòu)型 組成的甘草酸二銨鹽提供了有力的武器。發(fā)明人將上述質(zhì)量控制手段成功應(yīng)用于甘草酸二 銨合成過(guò)程中間體的質(zhì)量監(jiān)測(cè)，對(duì)合成路線中各步反應(yīng)的時(shí)間、溫度、投料摩爾比等因素進(jìn) 行了考察與優(yōu)化，確立了甘草酸二銨鹽的最佳合成工藝；同時(shí)，上述監(jiān)測(cè)手段的應(yīng)用，使得 合成過(guò)程中可以根據(jù)中間體的質(zhì)量情況，適時(shí)調(diào)整與優(yōu)化相關(guān)工藝參數(shù)，從而確保制備得 到具有正確的銨根含量與明確的18α、18β構(gòu)型組成的甘草酸二銨鹽。本發(fā)明的制備工藝包含如下步驟(1)采用甘草酸單銨鹽為起始原料，必要時(shí)在堿性條件下加熱回流使18 β構(gòu)型轉(zhuǎn) 化為18α構(gòu)型，直至獲得所需要的構(gòu)型組成。本發(fā)明制備工藝采用的起始原料可以為以18β構(gòu)型為主的甘草酸單銨鹽，也可 以為以18α構(gòu)型為主的甘草酸單銨鹽。在進(jìn)行甘草酸二銨的合成前，首先對(duì)起始原料的18 α、18 β構(gòu)型組成情況進(jìn)行監(jiān) 測(cè)，如果采用的起始原料已經(jīng)符合所需要的構(gòu)型組成，則可以不經(jīng)構(gòu)型轉(zhuǎn)化直接制備甘草 酸二銨；如果不符合所需要的構(gòu)型組成，則在堿性條件下加熱回流進(jìn)行構(gòu)型轉(zhuǎn)化。構(gòu)型轉(zhuǎn)化所采用的堿性條件可以為氫氧化鈉溶液、氫氧化鉀溶液或者藥學(xué)上周知 的其他強(qiáng)堿性溶液。在構(gòu)型轉(zhuǎn)化過(guò)程中采用本發(fā)明所述的高效液相色譜法對(duì)中間體的構(gòu) 型組成進(jìn)行監(jiān)測(cè)，適時(shí)控制堿性溶液強(qiáng)度或者加熱回流時(shí)間，直至獲得所需要的18α、18β 構(gòu)型組成。發(fā)明人考察了不同的加熱回流時(shí)間對(duì)轉(zhuǎn)化率的影響。結(jié)果表明隨著反應(yīng)時(shí)間的延 長(zhǎng)，18β構(gòu)型逐步向18α構(gòu)型轉(zhuǎn)化，在反應(yīng)時(shí)間達(dá)到6小時(shí)后趨于穩(wěn)定，結(jié)果見(jiàn)下表 因此，通過(guò)控制適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)條件可以獲得所需要的18α、18β構(gòu)型組成。(2)將明確18 α、18 β構(gòu)型組成的甘草酸單銨鹽用水溶解，加氨水調(diào)適宜ρΗ值。 氨水可以為濃氨水或者稀氨水，調(diào)PH值的范圍可以為4. 5 9. 0。發(fā)明人對(duì)ρΗ值調(diào)節(jié)范圍對(duì)銨根含量的影響進(jìn)行了考察(干燥方式為冷凍干燥)， 結(jié)果見(jiàn)下表
6
(接上表) 因此，加氨水調(diào)pH值的范圍可以為4. 5 9. 0，最優(yōu)為4. 8 6. 0。(3)采用冷凍干燥、噴霧干燥或者80°C以下真空干燥等合適的干燥方法，干燥過(guò) 程中采用本發(fā)明所述的靛酚藍(lán)比色法對(duì)終產(chǎn)品的銨根含量進(jìn)行監(jiān)測(cè)，適時(shí)控制干燥溫度、 干燥時(shí)間等工藝參數(shù)，直至獲得具有正確的銨根含量的甘草酸二銨。發(fā)明人對(duì)不同干燥方式及干燥溫度、干燥時(shí)間等對(duì)銨根含量的影響進(jìn)行了考察， 結(jié)果表明采用常規(guī)的真空冷凍干燥的方法，通過(guò)一次升華、40°C以下二次干燥等步驟，能夠 穩(wěn)定地獲得具有正確的銨根含量的甘草酸二銨，工藝耐用性好，且制得的產(chǎn)品外觀疏松，溶 解性好。發(fā)明人將甘草酸二銨采用80°C以下真空干燥，考察干燥時(shí)間等對(duì)銨根含量的影 響，結(jié)果見(jiàn)下表
80°C真空干燥時(shí)間(h) 01234-
銨根含量91.9% 78.1% 66.2% 56.0% 60.7%可見(jiàn)，隨著干燥時(shí)間的延長(zhǎng)，甘草酸二銨中的銨根逐漸分解，有逐步向甘草酸單銨 轉(zhuǎn)化的趨勢(shì)。但采用本發(fā)明中方法合理控制干燥溫度、干燥時(shí)間等工藝參數(shù)，也可以確保制 備得到具有正確的銨根含量的甘草酸二銨。本發(fā)明制備得到的甘草酸二銨避免了目前甘草酸二銨產(chǎn)品銨根含量錯(cuò)誤的問(wèn)題， 其具有正確的銨根含量。其銨根的含量與根據(jù)分子式計(jì)算的理論銨根的含量基本一致，具 體為采用靛酚藍(lán)比色法測(cè)定，樣品管的吸光度應(yīng)為理論銨根含量對(duì)照管吸光度的70% 120%。本發(fā)明制備得到的甘草酸二銨還具有明確的構(gòu)型組成，其為18α、18β構(gòu)型的混 合物，其構(gòu)型組成比例可以根據(jù)需要進(jìn)行任意范圍的控制，優(yōu)選以18α構(gòu)型為主，具體組 成比例為含18α構(gòu)型70% 80%，18β構(gòu)型30% 20%。本發(fā)明制備甘草酸二銨除如上所述的主要步驟外，根據(jù)需要還包含必要的藥學(xué)上 周知的結(jié)晶、純化等步驟，以使終產(chǎn)品的含量、純度、水分等各項(xiàng)質(zhì)量指標(biāo)符合藥品標(biāo)準(zhǔn)的 要求。本發(fā)明采用的制備工藝及監(jiān)測(cè)方法突破性地解決了目前工藝制備甘草酸二銨銨 根含量錯(cuò)誤的問(wèn)題，同時(shí)減少結(jié)晶步驟，大大提高了二銨鹽的收率，適合于工業(yè)化生產(chǎn)。為進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的能夠準(zhǔn)確控制銨根含量的甘草酸二銨鹽的制備方法所體 現(xiàn)的創(chuàng)新性，特列出以下實(shí)施例，但本發(fā)明的權(quán)利保護(hù)并不僅限于實(shí)施例所描述的內(nèi)容。實(shí)施例1 采用已知符合要求的以18 α構(gòu)型為主的甘草酸單銨鹽制備甘草酸二銨(1)取甘草酸單銨50g，加水lOOmL，加熱攪拌使溶解，加入6. 8%的氨水約IlmL調(diào)pH值至4.6。(2)上述藥液加入到不銹鋼盤中，真空冷凍干燥，抽真空，控制制品溫度-10°C以 下進(jìn)行一次升華，水分基本去除后升溫，控制制品溫度40°C以下進(jìn)行二次干燥。得到終產(chǎn)品 為類白色疏松狀固體。(3)產(chǎn)品收率基本為100%。(4)構(gòu)型及銨根含量檢測(cè)結(jié)果測(cè)得18 α構(gòu)型占76. 4%，銨根含量77. 3%。實(shí)施例2 采用已知符合要求的以18 α構(gòu)型為主的甘草酸單銨鹽制備甘草酸二銨(1)取甘草酸單銨50g，加水lOOmL，加熱攪拌使溶解，加入13. 6 %的氨水約13mL 調(diào)PH值至6.0。(2)上述藥液加入到不銹鋼盤中，真空冷凍干燥，抽真空，控制制品溫度-10°C以 下進(jìn)行一次升華，水分基本去除后升溫，控制制品溫度40°C以下進(jìn)行二次干燥。得到終產(chǎn)品 為類白色疏松狀固體。(3)產(chǎn)品收率基本為100%。(4)構(gòu)型及銨根含量檢測(cè)結(jié)果測(cè)得18 α構(gòu)型占75. 2%，銨根含量106. 7%。實(shí)施例3 采用已知符合要求的以18 α構(gòu)型為主的甘草酸單銨鹽制備甘草酸二銨(1)取甘草酸單銨100(^，加水2000!^，加熱攪拌使溶解，加入6.8%的氨水約 260mL 調(diào) pH 值至 4. 8。(2)上述藥液加入到不銹鋼盤中，真空冷凍干燥，抽真空，控制制品溫度-10°C以 下進(jìn)行一次升華，水分基本去除后升溫，控制制品溫度40°C以下進(jìn)行二次干燥。得到終產(chǎn)品 為類白色疏松狀固體。(3)產(chǎn)品收率基本為100%。(4)構(gòu)型及銨根含量檢測(cè)結(jié)果測(cè)得18 α構(gòu)型占76. 3%，銨根含量88. 7%。實(shí)施例4 采用以18 β構(gòu)型為主的甘草酸單銨鹽制備甘草酸二銨甘草酸單銨(18 β構(gòu)型為主)在堿性條件下加熱回流，轉(zhuǎn)型為18 α構(gòu)型為主，再 經(jīng)過(guò)酸化、單銨鹽、脫色、重結(jié)晶，最后加定量氨水得到甘草酸二銨成品。(1)構(gòu)型轉(zhuǎn)化3.2kg氫氧化鈉溶于20L水中，在攪拌下加入4. Okg甘草酸單銨 (18 β構(gòu)型為主)，加熱回流8小時(shí)，放置冷卻，攪拌下向反應(yīng)液中滴加emoL·!/1鹽酸約14L， 調(diào)PH至2。靜置3小時(shí)后減壓過(guò)濾，用水洗滌3次，每次2000mL，充分抽濾除去母液，真空 干燥，得甘草酸粗品(18 α構(gòu)型為主)3. 4kg。將甘草酸粗品加入2. 5L95%乙醇中，加熱溶 解，靜置，過(guò)濾除去氯化鈉沉淀，用濃氨水(約1.2L)調(diào)pH至8，攪拌20分鐘，過(guò)濾，固體中 加入20L冰醋酸，水浴加熱溶解，靜置過(guò)夜冷卻，析出固體，過(guò)濾，真空干燥，得甘草酸單銨 粗品(18 α構(gòu)型為主)約2. 7kg。(2)精制2.7kg甘草酸單銨粗品(18 α構(gòu)型為主)加入25L80%乙醇中，加熱溶 解，加入200g活性炭，加熱至70°C攪拌脫色30分鐘，趁熱過(guò)濾，收集濾液，靜置冷卻過(guò)夜 (12小時(shí))，過(guò)濾收集結(jié)晶。用85%乙醇反復(fù)重結(jié)晶4 5次，至HPLC純度達(dá)到藥品標(biāo)準(zhǔn)要 求，得甘草酸單銨(18 α構(gòu)型為主)精制品約1kg。(3)甘草酸二銨的制備同實(shí)施例3，得到具有明確的18 α、18 β構(gòu)型組成與正確 的銨根含量的甘草酸二銨約1kg。(4)產(chǎn)品收率比傳統(tǒng)工藝提高約40%。
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(5)構(gòu)型及銨根含量檢測(cè)結(jié)果測(cè)得18 α構(gòu)型占76. 8 %，銨根含量91. 9 %。
權(quán)利要求
一種能夠準(zhǔn)確控制銨根含量的甘草酸二銨鹽的制備方法，其特征在于將甘草酸單銨鹽用質(zhì)子性溶劑溶解，加氨水調(diào)適宜pH值，經(jīng)干燥、銨根含量監(jiān)測(cè)制備得到具有正確銨根含量的甘草酸二銨鹽。
2.如權(quán)利要求1所述的制備方法，起始原料采用18α構(gòu)型的甘草酸單銨，也可以采用 18 β構(gòu)型的甘草酸單銨，或者18α和18β任意比例組成的混合物。
3.如權(quán)利要求1所述的制備方法，質(zhì)子性溶劑為水、C1-C3的烷基醇，包括甲醇、乙醇、 丙醇、異丙醇或者C1-C3的烷基醇與水任意比例的混合溶液，優(yōu)選為水。
4.如權(quán)利要求1所述的制備方法，氨水可以為濃氨水或者稀氨水。
5.如權(quán)利要求1所述的制備方法，加氨水調(diào)ρΗ值的范圍為4.5 9. 0，優(yōu)選范圍4. 8 6. 0。
6.如權(quán)利要求1所述的制備方法，干燥方法為真空冷凍干燥、噴霧干燥或者80°C以下 真空干燥，優(yōu)選真空冷凍干燥。
7.如權(quán)利要求1所述的制備方法，銨根含量的監(jiān)測(cè)采用靛酚藍(lán)比色法，制備過(guò)程中根 據(jù)銨根含量必要時(shí)適時(shí)調(diào)整干燥溫度或者干燥時(shí)間，防止或者促使銨根的分解，以獲得具 有正確的銨根含量的甘草酸二銨。
8.如權(quán)利要求1或7中任一權(quán)利要求所述的銨根含量的監(jiān)測(cè)方法為將待測(cè)甘草酸銨 鹽溶于稀硫酸中，在亞硝基鐵氰化鈉及次氯酸鈉存在下，銨根在稀硫酸中與水楊酸生成藍(lán) 綠色的靛酚染料，在698nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收值，同法將等當(dāng)量的對(duì)照銨鹽平行操作，根據(jù)顯 色深淺，比色定量。
9.如權(quán)利要求1所述的制備方法，制備得到的甘草酸二銨為18α、18 β構(gòu)型的混合物， 其構(gòu)型組成比例可以根據(jù)需要進(jìn)行任意范圍的控制，優(yōu)選以18α構(gòu)型為主，具體組成比例 為含18α構(gòu)型70% 80%，18β構(gòu)型30% 20%。
10.如權(quán)利要求1所述的制備工藝，制備得到的甘草酸二銨中銨根的含量與根據(jù)分子 式計(jì)算的理論銨根的含量基本一致，具體為采用靛酚藍(lán)比色法測(cè)定，樣品管的吸光度應(yīng)為 理論銨根含量對(duì)照管吸光度的70% 120%。
11.如權(quán)利要求1所述的制備工藝，還包含必要的藥學(xué)上周知的結(jié)晶、純化等步驟，以 使終產(chǎn)品的含量、純度、水分等各項(xiàng)質(zhì)量指標(biāo)符合藥品標(biāo)準(zhǔn)的要求。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種能夠準(zhǔn)確控制銨根含量的甘草酸二銨鹽的制備方法，其特征在于以甘草酸單銨鹽為起始原料，加質(zhì)子性溶劑溶解，加氨水調(diào)pH值4.5～9.0，用適宜的方法干燥，采用靛酚藍(lán)比色法監(jiān)測(cè)銨根的含量，從而制備得到具有正確的銨根含量的甘草酸二銨鹽。本發(fā)明采用的制備工藝及監(jiān)測(cè)方法突破性地解決了目前工藝制備甘草酸二銨銨根含量錯(cuò)誤的問(wèn)題，同時(shí)減少結(jié)晶步驟，大大提高了二銨鹽的收率，適合于工業(yè)化生產(chǎn)。本方法制備得到的甘草酸二銨鹽還具有明確的18α、18β構(gòu)型組成。
文檔編號(hào)C07J63/00GK101914126SQ20091023537
公開(kāi)日2010年12月15日 申請(qǐng)日期2009年10月22日 優(yōu)先權(quán)日2009年10月22日
發(fā)明者呂亞光, 呂昭云, 姚瑞, 尹明福, 張世勇, 張猛, 李強(qiáng), 潘顯道, 趙立敏, 陳洋 申請(qǐng)人:北京協(xié)和藥廠