專利名稱：新型禽星狀病毒的制作方法
新型禽星狀病毒本發(fā)明涉及獸醫(yī)病毒學(xué)和免疫學(xué)的領(lǐng)域。具體地，本發(fā)明涉及新型禽星狀病毒；抗 該新型病毒的抗體或其片段；該新型禽星狀病毒的抗原性制劑、蛋白質(zhì)和DNA分子；該新型 病毒或者其抗原性制劑、蛋白質(zhì)或DNA的疫苗；用于制造此類疫苗的方法以及診斷試劑盒。星狀病毒是小的圓形無(wú)包膜病毒，其具有有義單鏈RNA基因組。大多數(shù)星狀病 毒與引起一些類別的腸炎、產(chǎn)生腹瀉、嘔吐、吸收障礙(malabsorbtion)、全身不適和生長(zhǎng) 遲緩(growth retardation)相關(guān)。感染在不太易于恢復(fù)活力的人或動(dòng)物例如年幼、年老 或免疫減弱的個(gè)體中可以是致命的。參見(jiàn)Matsui和Greenberg(在Fieldsvirology， 第 3 版，1996，ed. :B. Fields 等人，ISBN :781702534，第洸章中)和Moser 和 Schultz-Cherry(2005, Viral Immunology,第 18 卷，p.4-10)。此外，星狀病毒誘導(dǎo)的病狀的嚴(yán)重性可因星狀病毒種類之間或株系本身之間的毒 性差異而變化。這已使得人們相信一些星狀病毒充當(dāng)二級(jí)病原體(secondary pathogen), 它們本身只引起亞臨床疾病，而完全臨床癥狀只有當(dāng)存在來(lái)自另一種病原體的另外的病因 時(shí)才得以體現(xiàn)。籍以獲得抗星狀病毒感染的免疫力的機(jī)制還不完全清楚；病毒中和抗體確實(shí)似乎 在防御和免疫記憶中起作用，但可能不是抗星狀病毒感染的免疫反應(yīng)的唯一效應(yīng)物。這由 M. KocU2005，Virallmmunology，第 18 卷，p. 11-16)進(jìn)行了綜述。已在世界范圍內(nèi)檢測(cè)到星狀病毒，并且從眾多種動(dòng)物分離了星狀病毒。而在感染 某一靶動(dòng)物的星狀病毒種類當(dāng)中，已描述了幾個(gè)血清型。在分類學(xué)上將星狀病毒科分成兩 個(gè)主要的屬，即哺乳動(dòng)物星狀病毒——哺乳動(dòng)物星狀病毒屬(Mamastrovirus)和禽星狀病
毒(avianAstroviruse)-禽星狀病毒屬(Avastrovirus)。現(xiàn)在禽星狀病毒屬包括正式
承認(rèn)的種類禽腎炎病毒(Avian nephritis virus) 1和2(ANV1，2)(來(lái)自雞)和火雞星狀 病毒(turkey Astrovirus) 1 禾口 2(TastVl,2)。已從鴨、雞、駝鳥(niǎo)和火雞分離了幾種另外的禽星狀病毒。例如，雞星狀 病毒 2 (CAstV2)己由 Baxendale 禾口 Mebatsion(2004，Avianpathology,第 33 卷， p. 364-370 ；和于國(guó)際專利公開(kāi)案W02004/027053中)進(jìn)行了描述，Todd等人描述了 CAstV3 (W02007/077464)，其與CAstV2關(guān)系密切。此類星狀病毒仍未被正式分類，如由Koci 和 Schulz-CherrH2002，Avian Pathology 第 31 卷，p. 213-227)所綜述的。星狀病毒在環(huán)境中非常穩(wěn)定，例如，它們可抗常用的脂溶劑(lipid-solvent)和 去垢劑，具有寬廣的PH耐受性，并且具有相當(dāng)?shù)臒岱€(wěn)定性。這一性質(zhì)符合它們的高傳染性 和容易的傳播(通過(guò)糞口途徑)，解釋了可在全世界這么多的人和動(dòng)物中發(fā)現(xiàn)星狀病毒或 抗它們的抗體的原因。當(dāng)需要更新以適合新的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)時(shí)，此類小RNA病毒的分類和命名一直經(jīng)歷頻繁 的改變。例如鴨星狀病毒(DAstV)以前被分類為細(xì)小核糖核酸病毒(Picorna virus)，并 且最初被稱為II型鴨肝炎病毒，因?yàn)槠湟鸶窝?。類似地，ANVl以前被描述為細(xì)小核糖核 酸病毒，特別地腸病毒(enterovirus)，但被重新分類至星狀病毒(Imada等人，2000，J. of Virology，第74卷，p. 8487-8493)。ANVl也被稱為雞星狀病毒1 (CAstVl)，其引起腎炎。
一旦獲得關(guān)于它們的病毒基因組的序列和組織的新信息，則需要重新分類此類病 毒。特別地對(duì)于星狀病毒科，已顯示物理、電子顯微鏡和生物化學(xué)表征通常不足以將星狀病 毒科與其他所謂的“小圓病毒”或“腸病毒樣病毒”例如細(xì)小RNA病毒科(Picornaviridae)、 嵌杯病毒科(Caliciviridae)或肝炎病毒科(戊型肝炎樣病毒)或甚至與引起的疾病 癥狀與星狀病毒非常相似的包膜RNA病毒(enveloped RNAviruse)例如呼腸孤病毒 (Reoviruse)、輪狀病毒(Rotaviruse)或冠狀病毒相區(qū)別。這是因?yàn)檫@些表征的結(jié)果隨使 用的方法和條件變化而變化。因此這些表征的一致性不足以至不能正確確定。在另一個(gè)方面，與免疫學(xué)表征組合的分子生物學(xué)表征例如基因分型的全面性 和重現(xiàn)性足以將微生物分配至恰當(dāng)?shù)姆诸惾?VanRegenmortel等人，2000，在Virus Taxonomy, 7th report of theICTV, Academic press, New York 中)。因此理想地,這樣的 確定基于核苷酸測(cè)序、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)測(cè)定和血清分型測(cè)定。星狀病毒科的RNA基因組大小大致為大約71Λ，該病毒科典型的基因組組織參見(jiàn) Jiang 等人(1993，PNAS-USA，vol. 90，p. 10539-10543)和 Koci 等人(2000，J. of Virology, 第74卷，p.6173-6177)。根據(jù)目前的理解，基因組從5'至3'整合了 3個(gè)明確可辨認(rèn)的開(kāi) 放閱讀框架(ORF)ORF la:大小為大約31Λ，編碼具有絲氨酸蛋白酶基序的非結(jié)構(gòu)蛋白。ORF Ib 大小為大約1. 5kb,與ORF Ia部分重疊，其編碼非結(jié)構(gòu)的RNA依賴性RNA
聚合酶。ORF 2 通過(guò)大約21Λ的亞基因組RNA編碼結(jié)構(gòu)性病毒蛋白。表達(dá)的多蛋白在病毒 裝配之前可能被切割成更小的部分，并且包含a. ο.衣殼或外殼蛋白。在這3個(gè)ORF中，當(dāng)在可公開(kāi)獲得的星狀病毒核苷酸序列之間進(jìn)行比較時(shí)，ORF Ib 具有最保守的核苷酸序列，ORF 2是序列變異性最大的0RF。從1987年至目前，在荷蘭、德國(guó)和阿拉伯聯(lián)合酋長(zhǎng)國(guó)的家禽養(yǎng)殖業(yè)中觀察到一些 特珠疾病問(wèn)題雞和火雞遭受腹瀉、飼料轉(zhuǎn)化和生長(zhǎng)的降低以及遭受關(guān)節(jié)和腿肌腱的腫脹 和疼痛的問(wèn)題。在不同年齡的肉禽、種禽和產(chǎn)蛋型禽中和在不同的無(wú)明顯相互毗連的農(nóng)場(chǎng) 中均發(fā)現(xiàn)了此類問(wèn)題。在禽類中在它們的第一周齡直至數(shù)月齡中觀察到跛行。動(dòng)物表現(xiàn)出腫脹的后踝 (踝)關(guān)節(jié)和小腿的肌腱移位(兩者過(guò)度充盈澄清的輕微粘稠的液體)和關(guān)節(jié)炎的癥狀。 在這些禽類中觀察到飼料轉(zhuǎn)化率和生長(zhǎng)率的減少，最可能地是由運(yùn)動(dòng)問(wèn)題造成的。在最壞 的情況下，這些禽類不再能夠運(yùn)動(dòng)，從而不能獲得飼料或飲水，從而導(dǎo)致死亡。這些腿部畸 形在更重的肉用型禽類中最突出，然而持續(xù)的經(jīng)濟(jì)損失在所有類型的禽類中是相當(dāng)大的。主要在更幼小的禽類中但也在產(chǎn)蛋齡的禽類中觀察到的腹瀉具有甚至更大的影 響。癥狀從消化不良變化至明顯的腸炎，并且導(dǎo)致飼料轉(zhuǎn)化的降低；生長(zhǎng)抑制或甚至體重減 輕；產(chǎn)蛋量下降(“減蛋(egg-drop)”)；質(zhì)量差的蛋的數(shù)目增加；和死亡。在一些農(nóng)場(chǎng)中，在數(shù)年中觀察到這些問(wèn)題，導(dǎo)致持續(xù)的較差產(chǎn)量數(shù)據(jù)而無(wú)明確的 病因。在死后檢查時(shí)，在幾個(gè)情況下發(fā)現(xiàn)除了腸或腿關(guān)節(jié)外的身體部分也受到影響，例 如由砂囊糜爛或肝腫脹所展示的。為了檢測(cè)這些癥狀的病因，對(duì)管理和飲食方面進(jìn)行調(diào)查，但這些方面可與在這些情況下觀察到的問(wèn)題不相關(guān)。此外還研究了可能是造成感染，特別地由呼腸孤病毒引起的 感染的原因的病原體，因?yàn)楸娝苤摬《疽鹞照系K和關(guān)節(jié)問(wèn)題。然而，盡管使用許多 種測(cè)定，但在許多情況下未能檢測(cè)到呼腸孤病毒。還常規(guī)地或特別地檢查了已知引起相似問(wèn)題的幾種其他病原體，例如細(xì)菌: 沙門氏菌(Salmonella)、支原體(Mycoplasma)、嗜血桿菌(Haemophilus)和巴斯德菌 (Pasteurella)；和病毒腺病毒、傳染性支氣管炎病毒Qnfectious Bronchitis virus, IBV)、新城疫病毒(NDV)、傳染性腔上囊病病毒(Infectious Bursal Diseasevirus，IBDV)、 減蛋綜合癥(Egg Drop Syndrome, EDS)和禽流感病毒(AIV)。直至今日，還沒(méi)有致病因子可與觀察到的腿和腸的問(wèn)題(無(wú)論嚴(yán)重度)、動(dòng)物福利 的問(wèn)題以及所造成的這些家禽養(yǎng)殖業(yè)的不利經(jīng)濟(jì)性能相關(guān)聯(lián)。因此需要鑒定與觀察到的疾病癥狀關(guān)聯(lián)的試劑以及提供疫苗和診斷劑，以提供對(duì) 該疾病的預(yù)防和致病因子的鑒定。令人驚訝地，已在患有腸和運(yùn)動(dòng)疾病的雞和火雞中發(fā)現(xiàn)一種新型病毒。該病毒可 從不同年齡、種類和來(lái)源的患病禽類分離到(從關(guān)節(jié)和肌腱以及從各種內(nèi)臟器官分離)。所 分離的病毒反過(guò)來(lái)在感染健康測(cè)試動(dòng)物后誘導(dǎo)相似的疾病癥狀，并且可從患病的測(cè)試動(dòng)物 中再分離到，從而滿足了柯赫氏法則。可將該新型病毒用于開(kāi)發(fā)檢測(cè)和抵抗該病毒和其在家禽中引起的疾病問(wèn)題(特 別地關(guān)節(jié)和肌腱以及胃腸道的疾病)的診斷測(cè)定和疫苗。已用許多方法分析了新型病毒，令人驚訝地該病毒被鑒定為星狀病毒。由于其在 雞和火雞中流行，暫時(shí)將其定性為禽星狀病毒。除許多其他特征外，從兩個(gè)使用氯仿的連續(xù)提取的結(jié)果還發(fā)現(xiàn)本文中描述的新型 病毒是無(wú)包膜的(抽提之后，所抽提的病毒樣品仍然能夠在SPF雞胚蛋中引起特定的致病 作用)?？捎糜谶M(jìn)一步分析的核酸只可在RNA提取和RT-PCR后獲得、而不能在DNA分離和 常規(guī)PCR后獲得這一事實(shí)，揭示了該新型病毒中存在RNA基因組這一特點(diǎn)。令人驚訝地，發(fā)現(xiàn)最接近(然而可區(qū)別的)的親緣病毒為ANVl型病毒，因此本文 中描述的新型禽星狀病毒代表了暫時(shí)分類為ANV3病毒的新型禽腎炎病毒組。然而，本發(fā)明者已令人驚訝地發(fā)現(xiàn)了一些特征，它們可以區(qū)分本文中描述的新型 禽星狀病毒與ANVl和其他(星狀_)病毒，并且將新型禽星狀病毒的不同分離株獨(dú)特地鑒 定為屬于其自己的新的獨(dú)立的組。主要的鑒定特征涉及可通過(guò)核苷酸序列分析和通過(guò)PCR測(cè)定鑒定的特定核苷酸 序列的存在。還觀察到當(dāng)感染胚胎時(shí)誘導(dǎo)的不同的病理學(xué)癥狀。使用VN-或IFT-測(cè)定通過(guò)血 清分型可檢測(cè)到特定的免疫差異。所有這些將在下面通過(guò)實(shí)驗(yàn)結(jié)果和數(shù)據(jù)來(lái)進(jìn)行描述。本發(fā)明涉及具有開(kāi)放閱讀框架(ORF) Ia基因組區(qū)域的分離的新型禽星狀病毒，其 特征在于所述禽星狀病毒的ORF la，當(dāng)與禽腎炎病毒1的ORF Ia相比較時(shí)，包含12個(gè)核苷 酸的插入物，所述插入物位于相應(yīng)于SEQ ID NO 1的第M85和M86號(hào)核苷酸之間。優(yōu)選的“禽類”生物是家禽；更優(yōu)選的禽類生物選自雞、火雞、鴨和鵝。最優(yōu)選是雞。術(shù)語(yǔ)“星狀病毒”顯示了本發(fā)明新型病毒組與目前已描述和/或分類為屬于星狀病毒科分類學(xué)科的病毒的關(guān)系。然而，本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到這樣的分類學(xué)分類可隨時(shí) 間而改變，因?yàn)樾碌闹R(shí)可導(dǎo)致重新分類至新的或其他分類群。然而，由于這不改變本發(fā)明 病毒的特征而只改變其分類，因此這樣的重新分類的生物仍然在本發(fā)明的范圍內(nèi)。特別地，本發(fā)明包括從本發(fā)明禽星狀病毒亞分類至亞種、株系、基因型、血清型、變 體或亞型等的所有病毒。因此，對(duì)于本發(fā)明，“星狀病毒”是具有分類為星狀病毒的病毒的表征特性的病毒。 此類表征特征涉及例如分子、生物化學(xué)和生物學(xué)特征；例如涉及具有包含可辨認(rèn)為la、lb 和2的ORF的有義單鏈RNA基因組；為大約觀-30歷的無(wú)包膜病毒粒；和引起腸炎。術(shù)語(yǔ)“基因組區(qū)域”指本發(fā)明新型禽星狀病毒的遺傳材料的一部分。這樣的區(qū)域 將由核酸組成；在本發(fā)明新型禽星狀病毒的情況下，核酸是RNA。如所有其他星狀病毒科一樣，本發(fā)明新型禽星狀病毒的基因組包括可辨認(rèn)為和相 應(yīng)于ORF la、Ib和2的區(qū)域。然而，令人驚訝地發(fā)現(xiàn)該新型禽星狀病毒在其ORF Ia基因組區(qū)域具有一些不存 在于ANVl或任何其他類型的(禽)星狀病毒ORF Ia中的核苷酸。這些核苷酸以12個(gè)核 苷酸的線性連續(xù)區(qū)段的形式存在，并且當(dāng)與ANVl的ORF Ia序列相比較時(shí)，代表了至該區(qū)域 內(nèi)的插入物。該12個(gè)核苷酸的“插入物”存在于本文中描述的新型禽星狀病毒的組群的所 有檢測(cè)過(guò)的分離株的ORF Ia中。通過(guò)參照對(duì)于ANVl參照株的基因組序列所描述的編號(hào)(所述編號(hào)由Imada等人 (2000，J. of Virology，第74卷，p. 8487-8493)描述)來(lái)標(biāo)示所述12個(gè)核苷酸的插入物在 本文中描述的新型禽星狀病毒分離株的ORFla中存在的位置。該ANVl株的基因組序列的 cDNA序列也可在登錄號(hào)AB033998下從稱為GenBank的美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院的互聯(lián)網(wǎng)核苷 酸數(shù)據(jù)庫(kù)獲得，并且在本文中表示為SEQ ID NO :1。對(duì)于本發(fā)明新型禽星狀病毒的所有分離株，該ORF中的12核苷酸插入物位于相應(yīng) 于SEQ ID NO 1的第M85和M86號(hào)核苷酸的核苷酸之間。目前不知道本發(fā)明新型禽星狀病毒的ORF Ia中的該12核苷酸插入物(其不存在 于ANVl的ORF Ia中)是否或如何影響該新型禽星狀病毒的行為。不受任何理論束縛，本 發(fā)明者假設(shè)，由于此插入物以12個(gè)核苷酸的形式存在，從而存在4個(gè)三聯(lián)體，仍然使ORFl 的翻譯閱讀框保持完整，這一事實(shí)使得將編碼的4個(gè)額外氨基酸整合在從ORF Ia表達(dá)的非 結(jié)構(gòu)蛋白中。這極可能影響病毒的病理-生物學(xué)行為，例如其毒性和其引起腸以及腿、關(guān)節(jié) 和肌腱的疾病的能力。然而，這12個(gè)核苷酸存在于本文中描述的新型禽星狀病毒的ORFIa基因組區(qū)域但不存在于ANVl或其他(禽)星狀病毒的ORF Ia中這一事實(shí)提供 了該新型病毒組群的陽(yáng)性遺傳標(biāo)記。如在本領(lǐng)域中所熟知的，遺傳標(biāo)記是生物體遺傳材料的特征，其位于某一基因組 位置上，可用于進(jìn)行某種區(qū)分或產(chǎn)生某種關(guān)聯(lián)，并且可通過(guò)技術(shù)方法來(lái)檢測(cè)。當(dāng)一個(gè)特征存 在于待鑒定的組群中(如本發(fā)明中的情形)時(shí)，其是該組群的“陽(yáng)性”遺傳標(biāo)記。表征本發(fā)明新型禽星狀病毒的該12核苷酸插入物的核苷酸序列對(duì)于本文中描述 的新型禽星狀病毒的所有分離株而言不是完全相同的，然而大小和位置是相同的。該12核 苷酸插入物的核苷酸序列的共有序列為
5' -TCYG⑶MARYYT-3‘，在本文中表示為 SEQ ID NO :2。因此，在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的特征在于該12核苷酸插入物具有如SEQ ID NO 2中所示的核酸序列。本領(lǐng)域技術(shù)人員將知道，SEQ ID NO :2的序列是所謂的‘變性的’引物序列，表明其 中有一些位置(此處為Y、D、M和R)處可以存在多個(gè)核苷酸中的一個(gè)。用于標(biāo)示變性堿基 的常用代碼是IUPAC代碼(Biochem. J.，1985，第229卷，p. 281-286中公開(kāi)的)，其中R = G 或A;Y = T 或 C;M = A 或C;K = G 或T;S = G或 C;W = A 或T;H = A、C或 T;B = G、T 或 C ;V = G、C 或 A ;D = G、A 或 T ；禾口 N = G、A、T 或 C。對(duì)于本文中描述的新型禽星狀病毒，該可檢測(cè)的遺傳標(biāo)記的存在允許通過(guò)檢測(cè)例 如通過(guò)DNA測(cè)序或PCR進(jìn)行檢測(cè)來(lái)鑒定該新型病毒和其新型組群。DNA測(cè)序是一項(xiàng)熟知的技術(shù)；例如用于高速自動(dòng)化測(cè)序的標(biāo)準(zhǔn)方案和設(shè)備是可廣 泛獲得的。最常見(jiàn)地此類方案利用基于PCR的“循環(huán)-測(cè)序”，然后進(jìn)行高分辨力電泳。為了進(jìn)行RNA病毒例如星狀病毒科病毒的核酸測(cè)序，待檢查的核酸需要以拷貝 DNA(cDNA)的形式存在，因?yàn)镽NA測(cè)序仍然是不可行的。對(duì)于cDNA的制備，有許多標(biāo)準(zhǔn)方案 和商業(yè)試劑盒可供利用。此類方案使用逆轉(zhuǎn)錄酶。通常使用引物起始拷貝過(guò)程。用于RT反應(yīng)的合適引物的一個(gè)實(shí)例是在本文中表示為SEQ ID NO 3的DNA寡核 苷酸，其為5' -TCG WTS CTA CYC-3'。本發(fā)明者將該引物稱為引物17。該引物雜交至許多禽星狀病毒的基因組的遠(yuǎn)端3'區(qū)，該區(qū)域始于相應(yīng)于SEQ ID NO 1第6731號(hào)核苷酸的核苷酸并且反向延伸。在

圖1中，展示了來(lái)自選定數(shù)目的本發(fā)明禽星狀病毒分離株的ORFla部分的cDNA 序列的多重比對(duì)。將這些cDNA序列與SEQ ID NO :1中所示的ANVl參照病毒基因組的相應(yīng) 部分進(jìn)行比對(duì)。如在加框區(qū)域中清楚可見(jiàn)的，所有分離株具有不存在于ANVl ORF Ia中的 一個(gè)12核苷酸區(qū)域。本發(fā)明禽星狀病毒分離株的ORF la cDNA序列的序列編號(hào)SEQID NO 列于表1中。類似地，圖2顯示了通過(guò)圖1中所列cDNA序列的計(jì)算機(jī)翻譯制備的推定氨基酸序 列的多重比對(duì)。如加框的區(qū)域中可見(jiàn)的，由本發(fā)明禽星狀病毒的ORF Ia編碼的蛋白質(zhì)包含 不存在于由ANVl的ORF Ia編碼的蛋白質(zhì)中的4個(gè)氨基酸。本發(fā)明禽星狀病毒分離株的翻 譯ORF Ia序列的序列編號(hào)SEQ ID NO列于表1中。關(guān)于本發(fā)明禽星狀病毒的分離株在一段時(shí)間內(nèi)從遭受上述腿和/或腸疾病的雞 和火雞收集大量野外分離株(field isolate)。分析了這些分離株當(dāng)中的許多株，得到了本 文中描述的新型禽星狀病毒組群這一發(fā)明。然而，在本文中只提供所有經(jīng)分析的分離株中 選出的一些分離株，以在該組群中發(fā)生的天然變異的背景中定義該新型禽星狀病毒。表1提供了本文所述的本發(fā)明禽星狀病毒分離株的描述。此外，表1還列出了來(lái) 自所選分離株的ORF IaUb和2的cDNA和推定蛋白質(zhì)序列的序列編號(hào)SEQ ID NO。表1 所選的本發(fā)明禽星狀病毒分離株的特征；以及已測(cè)序的cDNA區(qū)域(“nt”) 和推定的編碼蛋白質(zhì)(“aa”)的SEQ ID NO。
權(quán)利要求
1.具有開(kāi)放閱讀框架(ORF)Ia基因組區(qū)域的禽星狀病毒，其特征在于所述禽星狀病毒 的ORF la,當(dāng)與禽腎炎病毒1的ORF Ia相比較時(shí)，包含12個(gè)核苷酸的插入物，所述插入物 位于相應(yīng)于SEQ ID NO 1的第M85和M86號(hào)核苷酸的核苷酸之間。
2.權(quán)利要求1的禽星狀病毒，其特征在于所述12個(gè)核苷酸的插入物具有SEQID NO 2中所示的核酸序列。
3.權(quán)利要求1至2的禽星狀病毒，其特征在于所述禽星狀病毒的ORFIa包含與SEQ ID NO 4具有至少88%的核苷酸序列同一性的區(qū)域。
4.權(quán)利要求1至3的禽星狀病毒，其特征在于可在使用SEQID NO 30和31中所示的 一組引物的PCR測(cè)定中從所述禽星狀病毒的ORF Ia產(chǎn)生大約260個(gè)核苷酸的PCR產(chǎn)物。
5.權(quán)利要求1至4的禽星狀病毒，其為以編號(hào)CNCM1-3895保藏在法國(guó)巴黎的巴斯德 研究所國(guó)家微生物菌種保藏中心(CNCM)的病毒。
6.在病毒中和測(cè)定中可中和權(quán)利要求1至5的禽星狀病毒的抗體或其片段。
7.從權(quán)利要求1至5的禽星狀病毒可獲得的抗原性制劑。
8.包含與SEQID NO 4具有至少88%核苷酸序列同一性的區(qū)域的DNA分子。
9.包含與SEQID NO :5具有至少93%氨基酸序列同一性的區(qū)域的蛋白質(zhì)。
10.一種疫苗，其包含權(quán)利要求1至5的禽星狀病毒、權(quán)利要求6的抗體或其片段、權(quán)利 要求7的抗原性制劑、權(quán)利要求8的DNA分子或權(quán)利要求9的蛋白質(zhì)和藥學(xué)上可接受的載 體。
11.權(quán)利要求10的疫苗，其包含至少一種從對(duì)家禽有致病性的微生物可獲得的另外的 抗原。
12.用于家禽的疫苗的化合物或組合物，其中所述化合物或組合物是權(quán)利要求1至5的 禽星狀病毒、權(quán)利要求6的抗體或其片段、權(quán)利要求7的抗原性制劑、權(quán)利要求8的DNA分 子或權(quán)利要求9的蛋白質(zhì)。
13.化合物或組合物用于制造家禽的疫苗的用途，其中所述化合物或組合物是權(quán)利要 求1至5的禽星狀病毒、權(quán)利要求6的抗體或其片段、權(quán)利要求7的抗原性制劑、權(quán)利要求 8的DNA分子或權(quán)利要求9的蛋白質(zhì)。
14.用于制造家禽的疫苗的方法，其中將化合物或組合物與適當(dāng)?shù)乃幬镙d體混合，所述 化合物或組合物是權(quán)利要求1至5的禽星狀病毒、權(quán)利要求6的抗體或其片段、權(quán)利要求7 的抗原性制劑、權(quán)利要求8的DNA分子或權(quán)利要求9的蛋白質(zhì)。
15.一種診斷試劑盒，其包含權(quán)利要求1至5的禽星狀病毒、權(quán)利要求6的抗體或其片 段、權(quán)利要求7的抗原性制劑、權(quán)利要求8的DNA分子或權(quán)利要求9的蛋白質(zhì)。
全文摘要
本發(fā)明涉及獸醫(yī)病毒學(xué)和免疫學(xué)的領(lǐng)域。具體地，本發(fā)明涉及新型禽星狀病毒；抗該新型病毒的抗體或其片段；該新型禽星狀病毒的抗原性制劑、蛋白質(zhì)和DNA分子；該新型病毒或者其抗原性制劑、蛋白質(zhì)或DNA的疫苗；用于制造此類疫苗的方法以及診斷試劑盒。
文檔編號(hào)C07K14/08GK102066407SQ200980113697
公開(kāi)日2011年5月18日 申請(qǐng)日期2009年4月27日 優(yōu)先權(quán)日2008年4月28日
發(fā)明者C·C·斯徹厄, I·萬(wàn)斯特根, 德 拉 M·梵, 威特 S·德 申請(qǐng)人:英特威國(guó)際有限公司