專利名稱：一種從黃芪中提取、分離和純化黃芪甲苷的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從植物中提取、分離和純化功能性有效成分的一種方法，具體是從常
用中藥材黃芪中提取、分離和純化黃芪甲苷的方法。
背景技術(shù)：
黃芪素以"補(bǔ)氣諸藥之最"著稱，是一種名貴的中藥材，首載于我國(guó)古代第一部本 草著作《神農(nóng)本草經(jīng)》，為豆科多年生草本植物蒙古黃芪Astragalusmembranaceus (Fisch.) B皿ge var. mongholicus (B皿ge) Hsiao或膜英黃甚Astragalus membranaceus (Fisch.) Bimge的干燥根。蒙古黃芪分布于東北和華北部分省區(qū)；膜莢黃芪分布于華北、西北、東北 及西南部分省區(qū)。黃芪在我國(guó)主要分布在溫帶和暖溫帶地區(qū)，為深根性植物。在北方地區(qū)， 普遍生長(zhǎng)于東北的東部山區(qū)(長(zhǎng)白山、小興安嶺、完達(dá)山脈和遼寧東部山區(qū))及大興安嶺， 在部分平原地區(qū)亦可見(jiàn)到。此外河北、山西、山東、內(nèi)蒙古、陜西、甘肅、寧夏、青海、新疆等省 區(qū)均有。朝鮮、蒙古、蘇聯(lián)也有分布。黃芪喜涼爽氣候，有較強(qiáng)的抗旱、耐寒能力，不耐熱，不 耐澇。氣溫過(guò)高，常抑制植株生長(zhǎng)，土壤濕度過(guò)大，常引起根部腐爛。宜在土層深厚、肥沃、疏 松、排水良好的砂質(zhì)土壤生長(zhǎng)，在粘土上則根多，生長(zhǎng)緩慢。多生于林緣、灌叢、林間或干旱 向陽(yáng)山坡草地、疏林下及草甸等處。雖然我國(guó)黃芪藥材資源豐富，但是其藥用部分是根，一 旦根部被刨取，整個(gè)植株不再存活，黃芪的野生資源在大量采挖的情況下日漸稀少。因此， 合理開(kāi)發(fā)利用黃芪資源已經(jīng)成為亟待解決的重大問(wèn)題，符合時(shí)代發(fā)展的步伐。
黃芪是名貴中藥材，根據(jù)藥典記載有黃芪味甘，性微溫，具有增強(qiáng)機(jī)體非特異性、 改善心功能、擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈、利尿消腫、益衛(wèi)固表、托瘡生肌、抗菌、抗病毒、抗疲勞、抗衰老、 促進(jìn)造血功能、保護(hù)肝臟等功效。常用于氣虛乏力、食少便溏、中氣下陷、久泄脫肛、便血崩 漏、表虛自汗、氣虛水腫、久潰不斂、慢性腎炎、蛋白尿、糖尿病等癥。由于黃芪療效顯著，應(yīng) 用廣泛，近年來(lái)黃芪年消耗量十分龐大，而且相關(guān)研究報(bào)道也很多，目前已經(jīng)從中分離出皂 苷、異黃酮、多糖、蛋白質(zhì)、維生素P、氨基酸、微量元素、酚性化合物等物質(zhì)，這些活性成分 均與其藥效相關(guān)。其中，黃芪皂苷為黃芪的主要天然活性物質(zhì)，并以黃芪甲苷為主，是目前
評(píng)價(jià)黃芪質(zhì)量和黃芪制劑質(zhì)量的重要指標(biāo)成分。但黃芪甲苷在黃芪中的含量很低，約為 0. 04%，且提取分離十分困難(張宇，呂哲，李鑫昶等，黃芪總皂甙水解為黃芪甲苷的工藝 研究)。隨著研究的不斷深入，有關(guān)黃芪甲苷的研究和開(kāi)發(fā)將成為倍受人們關(guān)注的新熱點(diǎn)。
中國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)?00510020977.0公開(kāi)了一種黃芪甲苷純品的制備方法，是以中
藥黃芪為原料，包括提取、富集、除去雜質(zhì)、堿水解轉(zhuǎn)化、溶劑萃取和純化精制。但此方法步
驟較多，制備方法麻煩，黃芪甲苷純度不高。中國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)?00610012687. 6公開(kāi)了一種
黃芪甲苷的制備方法，采用提取，乙醇脫色、堿水解等步驟得到黃芪甲苷，簡(jiǎn)化了中間步驟，
但是得率不高。中國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)?00710043678. 8公開(kāi)了黃芪甲苷的制備方法，是以中藥黃
芪為原料，包括水提取、堿處理、大孔吸附樹(shù)脂吸附、水洗、稀醇液洗、較高濃度醇液洗脫黃
芪甲苷、濃縮及結(jié)晶。但此步驟黃芪甲苷回收率低，所得黃芪甲苷純度不高。 綜上所述，傳統(tǒng)的制備黃芪甲苷的工藝不能達(dá)到高效利用黃芪資源和獲得高得
4率、高純度黃芪甲苷的目的。因此，有必要對(duì)黃芪中有效成分黃芪甲苷進(jìn)行進(jìn)一步提取、分 離和純化的工藝研究，尋找一種簡(jiǎn)便、安全、經(jīng)濟(jì)、高效的提取、分離和純化黃芪甲苷的方 法，為促進(jìn)我國(guó)黃芪資源的深度開(kāi)發(fā)和利用提供科學(xué)依據(jù)，以及為開(kāi)發(fā)新藥提供有利條件。 本發(fā)明旨在建立一種通過(guò)生物誘導(dǎo)、水解轉(zhuǎn)化等高效提取技術(shù)與分離、純化技術(shù)相結(jié)合的 方法，實(shí)現(xiàn)簡(jiǎn)單快速、高得率的提取、高純度分離純化黃芪甲苷的方法。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)黃芪甲苷在植物中的含量很低(約為0. 04% )、分離純化相當(dāng)困難的問(wèn)題，本
發(fā)明的目的是提供一種以中藥黃芪為原料，通過(guò)獨(dú)創(chuàng)性的勻漿萃取_混合酶誘導(dǎo)生物轉(zhuǎn)化
技術(shù)、負(fù)壓空化混旋提取技術(shù)、皂苷衍生物水解轉(zhuǎn)化技術(shù)、液液萃取技術(shù)、大孔吸附樹(shù)脂富
集技術(shù)、正相硅膠中壓柱層析技術(shù)以及低溫析晶和重結(jié)晶技術(shù)等一系列具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)
的高效提取、分離和純化技術(shù)手段，從而簡(jiǎn)單、快速獲得高得率、高純度黃芪甲苷的方法。為
了達(dá)到本發(fā)明的目的，所采用的技術(shù)方案如下中藥黃芪用蒸餾水浸泡，經(jīng)過(guò)勻漿萃取體系
誘導(dǎo)和混合酶溶液生物誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化，提高黃芪甲苷的含量。然后經(jīng)過(guò)70 80%乙醇負(fù)壓空化
混旋提取和皂苷衍生物水解轉(zhuǎn)化，經(jīng)過(guò)正丁醇液液萃取、大孔吸附樹(shù)脂富集和一次正相硅
膠中壓柱層析后得到黃芪甲苷的產(chǎn)品，純度大于90%，經(jīng)過(guò)低溫析晶和重結(jié)晶得到黃芪甲
苷晶體，其得率大于0. 08%，純度大于95%。 具體方案如下 (1)勻漿破碎酶解將中藥黃芪和配制好的酶溶液按固液比1 : 10 20(g : mL) 混合，連續(xù)勻漿萃取1 3次，每次0. 5 2min。 (2)恒溫酶解將勻槳液放入恒溫?fù)u床中，在25 4(TC酶解12 24h，轉(zhuǎn)速120 150rpm。 (3)負(fù)壓空化提取將酶解液抽濾，濾渣加入70 80%乙醇溶液，壓力為0. 04
0. 06Mpa，固液比為1 : 10 20 (g : mL)，室溫提取1 3次，每次30 90min。 (4)皂苷衍生物水解轉(zhuǎn)化將抽濾后的酶解液和提取液合并，減壓濃縮至干后用
蒸餾水溶解，用氨水調(diào)節(jié)pH值為8 9，水解轉(zhuǎn)化12 24h。在堿性條件下，可以使其它類
型的黃芪皂苷發(fā)生脫乙?；磻?yīng)轉(zhuǎn)化為黃芪甲苷，從而大大提高黃芪甲苷的含量。 (5)溶劑抽提除雜將得到的水解液，以體積比1 : 1 1 : 3的正丁醇為萃取溶
劑，萃取3 5次，減壓濃縮至干得到固形物。 (6)大孔吸附樹(shù)脂富集精制合并正丁醇萃取液，濃縮至干，得到精制的富含皂苷 類活性成分的黃芪提取物。大孔吸附樹(shù)脂采用濕法裝柱，保留液面，將液液萃取所得到的固 形物用蒸餾水溶解后，通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂柱進(jìn)行吸附，上樣量為0. 5 1BV，流速為0. 5 lBV/h。吸附后用10 40X乙醇3 5BV洗雜質(zhì)，然后用50 60%乙醇10 15BV解吸。 收集解吸液，濃縮至干，所得固形物為粗目標(biāo)產(chǎn)物。 (7)正相硅膠中壓柱層析技術(shù)所用樣品為樹(shù)脂富集后所得粗目標(biāo)產(chǎn)物，所用 硅膠為300 400目。預(yù)先稱取質(zhì)量為樣品量的5 IO倍的硅膠，采用濕法裝柱，所用 溶劑包括三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇。將樣品用少量有機(jī)溶劑溶解，加入與浸膏質(zhì)量比為 1 : 1.2(w/w)的層析硅膠拌勻，甲醇溶解后在水浴鍋上炒樣至干，裝入預(yù)先裝好的硅膠柱 中。先后以10 20BV乙酸乙酯(三氯甲烷)、乙酸乙酯(三氯甲烷)甲醇、甲醇連續(xù)中壓洗脫，收集洗脫液，每份1/40 1/20BV。用硅膠薄層l，用10%硫酸染色后烤板。
(8)低溫析晶和重結(jié)晶得到黃芪甲苷溶液，低溫析晶得到產(chǎn)品，重結(jié)晶后得到純 度大于95%的黃芪甲苷。 上述的黃芪中黃芪甲苷的提取純化方法所用的大孔吸附樹(shù)脂分別為DlOl、 AB-8、 AL-1、 AL-2、 ADS-5、 ADS_8、 ADS_17、 ADS_31、 D3520、 HPDIOO、 HPD500、 HPD826、 SA_1、 SA-2和 SA-3型等。 上述的重結(jié)晶所用的溶劑為乙酸乙酉旨、二氯甲烷、三氯甲烷和甲醇，重結(jié)晶所用溶
劑比例為乙酸乙酯(二氯甲烷、三氯甲烷)甲醇=20 : i i : 1，低溫析晶溫度為-10
25°C。 傳統(tǒng)的提取方法如煎煮法、浸漬法、滲漉法、回流提取、超聲提取和索式提取過(guò)程
都是在完整植物細(xì)胞的情況下，通過(guò)浸潤(rùn)與滲透、使溶劑進(jìn)入組織細(xì)胞、溶解細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)并 使其擴(kuò)散至溶劑主體，這使溶劑提取細(xì)胞內(nèi)生物活性成分成為可能。但由于細(xì)胞壁的屏障 作用，決定了中藥材有效成分的提取效率有一定限度，所以傳統(tǒng)提取方法存在提取溫度過(guò) 高，提取率低，成本高，不安全等問(wèn)題。 酶誘導(dǎo)是在提取的基礎(chǔ)上，利用混合酶(如纖維素酶、果膠酶、l3-葡萄糖苷酶等)
將細(xì)胞壁的成分水解或降解，破壞細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，使有效成分充分暴露出來(lái)，溶解、混懸或膠 溶于提取溶劑中，加速有效成分的釋放，從而提高提取效率。 所謂空化(cavitation)，一般是指液體內(nèi)部局部壓力降低時(shí)，液體內(nèi)部或液固交 界面上蒸汽或氣體的空穴(空泡)的形成、發(fā)展和潰滅的過(guò)程。當(dāng)潰滅發(fā)生在固體表面附 近時(shí)，由于空泡瞬間(微秒級(jí))潰滅產(chǎn)生極高的瞬時(shí)壓強(qiáng)，極高壓強(qiáng)的反復(fù)作用，從而破壞 固體表面。因此，負(fù)壓空化提取技術(shù)是利用負(fù)壓空化氣泡產(chǎn)生強(qiáng)烈的空化效應(yīng)和機(jī)械振動(dòng)， 造成樣品顆粒細(xì)胞壁快速破裂，加速了胞內(nèi)物質(zhì)向介質(zhì)釋放、擴(kuò)散和溶解，從而促進(jìn)提取。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn) 1.本發(fā)明對(duì)黃芪資源進(jìn)行高效合理的利用，產(chǎn)品的附加值高。 2.本發(fā)明采用勻漿萃取_混合酶誘導(dǎo)生物轉(zhuǎn)化技術(shù)、負(fù)壓空化混旋提取技術(shù)、皂 苷衍生物水解轉(zhuǎn)化技術(shù)、液液萃取技術(shù)、大孔吸附樹(shù)脂富集技術(shù)、正相硅膠中壓柱層析技術(shù) 以及低溫析晶和重結(jié)晶技術(shù)等一系列具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的高效提取、分離和純化技術(shù)手 段，所得產(chǎn)品得率高、純度高。 3.與傳統(tǒng)提取方法相比，該方法簡(jiǎn)單易行，操作條件溫和，提取溫度低，提取率高， 周期短，耗能低，降低了生產(chǎn)成本，可實(shí)現(xiàn)黃芪甲苷大規(guī)模的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。


圖l為黃芪甲苷的結(jié)構(gòu)
圖2為黃芪甲苷的二級(jí)質(zhì)譜圖
圖3為黃芪甲苷的LC-MS/MS色譜圖
(A)黃芪甲苷標(biāo)準(zhǔn)品LC-MS/MS色譜圖；
(B)黃芪甲苷樣品LC-MS/MS色譜圖
6具體實(shí)施方案
實(shí)施例1 精密稱取中藥黃芪1000g，取0.2X固形物重量的混合酶(纖維素酶、果膠酶、 P-葡萄糖苷酶)溶解于10倍體積溫水中，連續(xù)勻漿萃取3次，每次lmin。將勻漿液放入 3(TC恒溫?fù)u床中恒溫酶解12h，酶誘導(dǎo)液抽濾后，濾渣加入70%乙醇負(fù)壓空化提取，壓力為 0.05Mpa，固液比為l : 10(g : mL)，室溫提取3次，每次45min，將抽濾后的酶解液和提取液 合并，減壓濃縮至干后用水溶解，用氨水調(diào)節(jié)PH值為8，水解轉(zhuǎn)化12h，所得的水解液以等體 積的正丁醇為溶劑，萃取3次，減壓濃縮至干得到固形物。固形物用水溶解后，通過(guò)AB-8大 孔吸附樹(shù)脂柱進(jìn)行吸附，上樣量為0. 5BV，流速為lBV/h。吸附后用10 %和30%乙醇各3BV 洗雜質(zhì)，然后用50%乙醇IOBV解吸。收集解吸液，濃縮至干后用少量甲醇溶解，加入與浸膏 質(zhì)量比為l : 1.2(w/w)的目數(shù)為300 400的層析硅膠炒樣。預(yù)先稱取質(zhì)量為樣品量的 5 10倍的硅膠，用乙酸乙酯濕法裝柱，將拌好樣品的硅膠裝入中壓柱內(nèi)，然后以TLC監(jiān)測(cè) 收集洗脫液，濃縮得到黃芪甲苷，低溫析晶得到產(chǎn)品，重結(jié)晶后得到化合物，經(jīng)MS確定為黃 芪甲苷，質(zhì)量為0. 863mg，得率為0. 0863% ，純度為95% 。
實(shí)施例2 精密稱取中藥黃芪1000g，取0.5X固形物重量的混合酶(纖維素酶、果膠酶、 P-葡萄糖苷酶)溶解于15倍體積溫水中，連續(xù)勻漿萃取3次，每次2min。將勻漿液放入 3(TC恒溫?fù)u床中恒溫酶解24h，酶誘導(dǎo)液抽濾后，濾渣加入80%乙醇負(fù)壓空化提取，壓力為 0.06Mpa，固液比為l : 15(g : mL)，室溫提取3次，每次60min，將抽濾后的酶解液和提取液 合并，減壓濃縮至干后用水溶解，用氨水調(diào)節(jié)PH值為9，水解轉(zhuǎn)化24h，所得的水解液以等體 積的正丁醇為溶劑，萃取4次，減壓濃縮至干得到固形物。固形物用水溶解后，通過(guò)AL-2大 孔吸附樹(shù)脂柱進(jìn)行吸附，上樣量為1BV，流速為0. 5BV/h。吸附后用10 %和30%乙醇各5BV 洗雜質(zhì)，然后用50%乙醇15BV解吸。收集解吸液，濃縮至干后用少量甲醇溶解，加入與浸膏 質(zhì)量比為l : 1.2(w/w)的目數(shù)為300 400的層析硅膠炒樣。預(yù)先稱取質(zhì)量為樣品量的 5 10倍的硅膠，用乙酸乙酯濕法裝柱，將拌好樣品的硅膠裝入中壓柱內(nèi)，然后以TLC監(jiān)測(cè) 收集洗脫液，濃縮得到黃芪甲苷，低溫析晶得到產(chǎn)品，重結(jié)晶后得到化合物，經(jīng)MS確定為黃 芪甲苷，質(zhì)量為0. 935mg，得率為0. 0935% ，純度為95% 。
權(quán)利要求
一種從黃芪中提取、分離和純化黃芪甲苷的方法，其主要特征在于中藥黃芪勻漿萃取后經(jīng)混合酶生物轉(zhuǎn)化以增加目標(biāo)化合物黃芪甲苷的含量，固形物使用70～80％乙醇負(fù)壓空化提取1～3次，酶解液和提取液合并減壓濃縮至干后，加入蒸餾水溶解，用氨水調(diào)節(jié)pH值為8～9，水解轉(zhuǎn)化12～24h，所得水解液經(jīng)正丁醇液液萃取后，采用大孔吸附樹(shù)脂富集和一次正相硅膠中壓柱層析得到黃芪甲苷的產(chǎn)品，經(jīng)過(guò)低溫析晶和重結(jié)晶得到純度大于95％的純品。
2. 按照權(quán)利要求1所述的勻漿萃取_混合酶誘導(dǎo)生物轉(zhuǎn)化技術(shù)，其特征在于勻漿萃 取所用的溶劑為配制好的酶溶液，按固液比1 : 10 20(g : mL)混合，連續(xù)萃取1 3 次，每次0. 5 2min。將勻漿液放入恒溫?fù)u床中，在25 40。C酶解12 24h，轉(zhuǎn)速120 150rpm。勻漿過(guò)程產(chǎn)生的強(qiáng)大剪切力，兼具打破細(xì)胞壁、使植物組織細(xì)胞與酶充分接觸以及 瞬時(shí)剌激誘發(fā)內(nèi)源性酶活性的作用，使目標(biāo)化合物從細(xì)胞內(nèi)向溶劑中充分釋放，增加目標(biāo) 成分的含量。經(jīng)過(guò)勻漿破碎酶解的勻漿液，在恒溫條件下繼續(xù)進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化，利用酶反應(yīng)的 高效性、專一性等特性，將細(xì)胞壁的主要成分纖維素和果膠水解或降解，使有效成分黃芪甲 苷充分的暴露出來(lái)，溶解、混懸或膠溶于提取液中，從而使細(xì)胞內(nèi)有效成分含量顯著提高， 所用的混合酶為纖維素酶、果膠酶、P-葡萄糖苷酶、蛋白酶、漆酶、淀粉酶、木聚糖酶等。在 勻漿機(jī)械脅迫萃取和混合酶的生物轉(zhuǎn)化的雙重作用下可提高黃芪甲苷的含量。
3. 按照權(quán)利要求l所述的負(fù)壓空化混旋提取技術(shù)，其特征在于固形物加入70 80% 乙醇溶液，壓力為O. 04 0. 06Mpa，固液比為1 : 10 20(g : mL)，室溫提取1 3次，每 次30 90min。負(fù)壓空化混旋提取方法是以負(fù)壓為動(dòng)力，利用氣泡產(chǎn)生的空化效應(yīng)、湍流效 應(yīng)而產(chǎn)生的高速傳質(zhì)液固提取工藝。
4. 按照權(quán)利要求1所述的皂苷衍生物水解轉(zhuǎn)化技術(shù)，其特征在于將抽濾后的酶解液 和提取液合并，減壓濃縮至干后用水溶解，用氨水調(diào)節(jié)pH值為8 9，水解轉(zhuǎn)化12 24h。 在堿性條件下，可以使其它類型的黃芪皂苷發(fā)生脫乙?；磻?yīng)轉(zhuǎn)化為黃芪甲苷，從而大大 提高黃芪甲苷的含量。
5. 按照權(quán)利要求1所述的正丁醇液液萃取技術(shù)，其特征在于將得到的水解液，以體積 比l : 1 1 : 3的正丁醇為萃取溶劑，萃取3 5次，減壓濃縮至干得到固形物。
6. 按照權(quán)利要求1所述的大孔吸附樹(shù)脂富集技術(shù)，其特征在于所用樹(shù)脂包括DIOI、 AB-8 、 AL-1 、 AL-2 、 ADS-5 、 ADS-8 、 ADS-17 、 ADS-31 、 D3520 、 HPD100 、 HPD500和HPD826等廣譜 性大孔吸附樹(shù)脂和SA-1、 SA-2和SA-3皂苷類大孔吸附樹(shù)脂。該方法中大孔吸附樹(shù)脂采用 濕法裝柱，保留液面，將液液萃取所得到的固形物用蒸餾水溶解后，通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂柱進(jìn) 行吸附，上樣量為0. 5 1BV，流速為0. 5 lBV/h。吸附后用10 40X乙醇3 5BV洗雜 質(zhì)，然后用50 60%乙醇10 15BV解吸。收集解吸液，濃縮至干，所得固形物為粗目標(biāo)產(chǎn) 物。
7. 按照權(quán)利要求1所述的正相硅膠中壓柱層析技術(shù)，其特征在于所用樣品為樹(shù)脂富 集后所得粗目標(biāo)產(chǎn)物，所用硅膠為300 400目。預(yù)先稱取質(zhì)量為樣品量的5 10倍的 硅膠，采用濕法裝柱，所用溶劑包括三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇。將樣品用少量有機(jī)溶劑溶 解，加入與浸膏質(zhì)量比為l : 1.2(w/w)的層析硅膠拌勻，甲醇溶解后在水浴鍋上炒樣至干， 裝入預(yù)先裝好的硅膠柱中。先后以10 20BV乙酸乙酯(三氯甲烷)、乙酸乙酯(三氯甲 烷)甲醇、甲醇連續(xù)中壓洗脫，收集洗脫液，每份1/40 1/20BV。用硅膠薄層層析檢測(cè)洗脫液成分，合并相同部分，展開(kāi)劑為乙酸乙酯(三氯甲烷)甲醇=20 : i i : i，用 10%硫酸染色后烤板。正相硅膠中壓柱流動(dòng)相包括乙酸乙酯(三氯甲烷)甲醇的不同比 例梯度。
8.按照權(quán)利要求i所述的低溫析晶和重結(jié)晶技術(shù)，其特征在于重結(jié)晶所用的溶劑為 乙酸乙酉旨、二氯甲烷、三氯甲烷和甲醇，重結(jié)晶所用溶劑比例為乙酸乙酯(二氯甲烷、三氯 甲烷)甲醇=20 : i i : i，低溫析晶溫度為-io 25°c。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從常用中藥黃芪中提取、分離和純化功能性有效成分黃芪甲苷的方法，目的是提供一種簡(jiǎn)便、安全、經(jīng)濟(jì)、有效地從黃芪中提取、分離和純化高純度黃芪甲苷的方法，所采取的技術(shù)方案是以中藥黃芪為原料，采用獨(dú)創(chuàng)性的勻漿萃取-混合酶誘導(dǎo)生物轉(zhuǎn)化技術(shù)、負(fù)壓空化混旋提取技術(shù)、皂苷衍生物水解轉(zhuǎn)化技術(shù)、液液萃取技術(shù)、大孔吸附樹(shù)脂富集技術(shù)、正相硅膠中壓柱層析技術(shù)以及低溫析晶和重結(jié)晶技術(shù)等一系列高效提取、分離和純化技術(shù)手段，得到高得率、高純度的黃芪甲苷，其得率可達(dá)0.08％以上，純度可達(dá)95％以上。本發(fā)明所用原料為我國(guó)常用中藥黃芪，資源豐富，黃芪甲苷的生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單易行，目標(biāo)化合物得率高、純度高。適合工業(yè)化生產(chǎn)和應(yīng)用，產(chǎn)品附加值高，具有良好的市場(chǎng)應(yīng)用前景。
文檔編號(hào)C07J53/00GK101775056SQ20101010193
公開(kāi)日2010年7月14日 申請(qǐng)日期2010年1月28日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月28日
發(fā)明者付玉杰, 劉威, 李慶勇, 祖元?jiǎng)? 羅猛, 閆明明, 陳彩云 申請(qǐng)人:東北林業(yè)大學(xué);付玉杰