專利名稱：一種萃取分離l-辛弗林的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于L-辛弗林分離純化的技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及采用反膠束萃取技術(shù)萃取 分離L-辛弗林的方法。
二背景技術(shù)：
L-辛弗林，又名對羥福林、脫氧腎上腺素等，存在于蕓香科植物酸橙的干燥幼果， 柑橘屬植物橘的幼嫩落果，仙人掌科植物剌仙人球等植物中，屬小分子生物堿丄-辛弗林具 有收縮血管、升高血壓和較強(qiáng)的擴(kuò)張氣管和支氣管的作用，用于休克，心衰，治療支氣管哮 喘；能夠提高新陳代謝、增加能量水平，氧化脂肪，有減肥效果；是一種天然興奮劑，無副作 用。因此辛弗林廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、飲料等保健行業(yè)。 L-辛弗林既可化學(xué)合成又可從植物中提取，化學(xué)合成法雖簡化了從多種物質(zhì)成分 中分離的工序，但合成的辛弗林是DL-外消旋體，尚無高效的分離純化方法，加之D-對映體 可能存在明顯的副作用，這嚴(yán)重制約了化學(xué)合成法在L-辛弗林生產(chǎn)方面的應(yīng)用。因此，從 植物中提取分離成為目前獲得L-辛弗林的唯一方法。但是，L-辛弗林含量較低，即使是在 含量較高的枳實、青皮等植物中，其含量較高也僅為0. 2-0. 4%。因此，高效分離天然L-辛 弗林成為本領(lǐng)域的關(guān)鍵。 現(xiàn)有分離L-辛弗林的方法，如2009年4月8日公開的公開號為CN101402577的 "從個青皮中提取分離左旋-辛弗林的方法"專利，公開的方法是用15 45X乙醇于8(TC 條件下回流提取個青皮細(xì)粉中左旋_辛弗林兩次，將提取液減壓濃縮至含固形物80 85% 后上DIOI大孔吸附樹脂柱，用15%乙醇洗脫；將洗脫液減壓濃縮，噴霧干燥，得左旋-辛弗 林粗品；用純乙醇溶解左旋-辛弗林粗品，加入與粗品等質(zhì)量的硅膠，攪拌均勻，去除乙醇，
制備硅膠吸附樣品，干法上樣，按體積比用二氯甲烷甲醇氨水=6 9 : 2 : o. i配制
的洗脫液洗脫收集左旋-辛弗林組分；將硅膠柱分離洗脫的左旋-辛弗林組分進(jìn)行減壓濃 縮，噴霧干燥，獲左旋-辛弗林產(chǎn)品。該方法的主要缺點是含固形物80 85%的提取液 流動性差，不易上柱，傳質(zhì)阻力大，能耗大，效率較低；對其粗品用硅膠柱分離的能耗大，硅 膠重復(fù)使用性差，資源消耗大；使用甲醇、二氯甲烷等有毒有機(jī)溶劑，污染嚴(yán)重，生產(chǎn)的安全 性差，不利于規(guī)模化生產(chǎn)。
三
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有分離L-辛弗林方法的不足之處，提供一種萃取分離 L-辛弗林的方法，具有在常溫下即可實現(xiàn)對L-辛弗林的高效純化，有機(jī)溶劑可反復(fù)使用， 成本較低，操作簡單，產(chǎn)品純度高，無"三廢"排放等特點。 本發(fā)明的機(jī)理枳實中含有L-辛弗林、多糖、雜蛋白等物質(zhì)。本發(fā)明利用L-辛弗 林易溶于乙醇的特點，用一定濃度的乙醇-水溶液溶解枳實中的L-辛弗林，而多糖則不溶 解，以沉淀形式析出，經(jīng)過過濾，與L-辛弗林分離；又利用超濾使原料液中的溶劑及小分子 溶質(zhì)從高壓進(jìn)料液測透過膜進(jìn)入低壓側(cè)，而大分子則被超濾膜所阻留進(jìn)行分離，除去多糖后，L-辛弗林-乙醇溶液中還含有大分子的雜蛋白，其分子量3000Da以上，故選用合適的 超濾膜除去L-辛弗林-乙醇溶液中大分子雜蛋白，獲得除去雜蛋白的超濾液。超濾液中的 L-辛弗林帶正電荷，可與反膠束中的負(fù)電荷表面活性劑P204形成靜電相互作用，從而實現(xiàn) 反膠束萃取；荷載于反膠束中的卜辛弗林可與反萃取劑中的1(+交換，進(jìn)入反萃取相，從而 實現(xiàn)反萃取，獲得反萃取溶液；反萃取溶液中的鹽類分子量低于100Da，因此通過選取合適 的透析袋可除去分子量較小的鹽類；再經(jīng)過真空濃縮及冷凍干燥，即獲得純度較高的L-辛 弗林凍干粉。 本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的一種萃取分離L-辛弗林的方法，以市售枳實為原 料，經(jīng)溶解及抽濾、超濾分離、反膠束萃取、反萃取，真空濃縮及凍干，制得L-辛弗林凍干 粉。其具體的方法步驟如下
(1)醇溶及抽濾 以市售枳實為原料，以60%的乙醇溶液為溶劑，按枳實的質(zhì)量(g) : 60%的乙醇 溶液體積(mL)之比為1 : 9 10的比例，在枳實中加入體積分?jǐn)?shù)為60%的乙醇溶液，攪 拌溶解20 40分鐘，然后抽濾，分別收集濾液和濾渣。收集的濾液，用于下一步進(jìn)行超濾。 對于濾渣，因含有大量的多糖，經(jīng)干燥后用作食用菌的發(fā)酵添加劑。 [OOW] (2)超濾分離 第(1)步完成之后，先將第(1)步收集的濾液泵入超濾器中，用截留分子量為
3000Da的超濾膜，在0. 1 0. 3MPa下進(jìn)行超濾分離，小分子量的L_辛弗林等透過超濾膜，
大分子的雜蛋白不能透過超濾膜而留在截留液中，分別收集濾過液及截留液。對于截留液，
主要含有雜蛋白，經(jīng)干燥后用作食用菌的發(fā)酵添加劑；對于濾過液，即為L-辛弗林萃取原
液，用于下步反膠束萃取L-辛弗林。 (3)反膠束萃取 ①P204反膠束溶液的制備 在第(2)步完成之后，以P204為萃取劑，正辛醇為稀釋劑，先在P204萃取劑中，加 入正辛醇稀釋劑，攪拌下混合溶解，待形成P204的摩爾濃度為0. 08 0. 12mol/L溶液后， 再加入蒸餾水，進(jìn)行攪拌溶解，而形成透明均勻的P204反膠束溶液。密封保存，備用。其蒸 餾水P204的摩爾比為l : 0. 05 0. 2。
②反膠束萃取 第(3)-①步完成后，按第(3)-①步制備出的P204反膠束溶液第(2)步制備出 的L-辛弗林萃取原液的體積比為1 : 1 3的比例，在萃取器中，加入L-辛弗林萃取原液 和P204反膠束溶液，控制水相的pH值為5. 5 7. O，在攪拌下進(jìn)行萃取，萃取時間為5 20分鐘，再將萃取后的混合液置于分液器中進(jìn)行分離，分別收集下層萃余液和上層萃取有 L-辛弗林的P204反膠束溶液。然后在收集的下層萃余液中，再加入P204反膠束溶液，其 P204反膠束溶液下層萃余液的體積比為1 : 1 3，并控制水相的pH值為5.5 7.0，再 次進(jìn)行萃取分離，再分別收集下層萃余液和上層萃取有L-辛弗林的P204反膠束溶液，如此 重復(fù)萃取2 3次。最后合并各次收集的上層萃取有L-辛弗林的P204反膠束溶液；棄最 后收集的下層萃余液。
(4)反萃取L-辛弗林 第(3)步完成后，將第(3)-②步最后合并收集的上層萃取有L-辛弗林的P204反膠束溶液，轉(zhuǎn)移至另一萃取器中，加入2 3倍體積的蒸餾水，其中氯化鉀的摩爾濃度為 0. 5 0. 7mol/L，控制水相的pH值為10. 5 11. 5，進(jìn)行攪拌反萃取10 20分鐘，再在分 液器中進(jìn)行分離，并分別收集下層反萃取溶液和上層P204反膠束溶液。對收集的上層P204 反膠束溶液，再加入2 3倍體積的蒸餾水，其中氯化鉀的摩爾濃度為0. 5 0. 7mol/L，并 控制水相的PH值為10. 5 11. 5，再進(jìn)行反萃取分離，再分別收集下層反萃取溶液和上層 P204反膠束溶液。如此反復(fù)萃取2 3次。最后合并各次收集的下層反萃取溶液，在旋轉(zhuǎn) 蒸發(fā)儀中，在溫度為60 80°C 、真空度為0. 06 0. 08Mpa的條件下，進(jìn)行真空濃縮，就制備 出L-辛弗林濃縮液。對最后收集的上層P204反膠束溶液，可再生利用。
(5)制備L-辛弗林凍干粉 第(4)步完成后，先將第(4)步制備出的L-辛弗林濃縮液置入截留分子量為 100Da的透析袋中，用蒸餾水透析24 36小時，收集透析袋內(nèi)的L-辛弗林透析液。然后將 收集的L-辛弗林透析液置于冷凍干燥機(jī)中，在25 45Pa真空度、-50 -e(TC溫度下，進(jìn) 行冷凍干燥24 36h，就制備出純度為90. 0 93. 5%的L-辛弗林凍干粉。
(6)反膠束溶液的再生 第(5)步完成后，對第(4)步最后收集的上層P204反膠束溶液，因水量及雜質(zhì)過 多而渾濁，在其中加入干燥劑(如分子篩、氯化鈣等干燥劑)，靜置1 2天后收集上清液， 即為反膠束再生液，可再次使用。 本發(fā)明采用上述技術(shù)方案后，主要有以下效果 1、本發(fā)明方法在常溫下能有效除去枳實中的多糖、雜蛋白等雜質(zhì)，純化效率高， L-辛弗林的純度高，達(dá)93. 5% ，又能降低生產(chǎn)成本。 2、本發(fā)明在生產(chǎn)過程中，脫除的多糖、雜蛋白經(jīng)干燥后用作食用菌的發(fā)酵添加劑， 不排放。這不但有利于環(huán)境保護(hù)，還降低生產(chǎn)成本并充分利用資源。 3、本發(fā)明在生產(chǎn)過程中，主要使用抽濾、超濾及萃取器等簡單設(shè)備，不涉及昂貴的 設(shè)備及儀器，因而生產(chǎn)設(shè)備簡單，操作簡便且易于控制，并且生產(chǎn)安全又降低生產(chǎn)成本。
4、本發(fā)明在生產(chǎn)過程中，主要使用乙醇、蒸餾水等無毒物質(zhì)。這不但在生產(chǎn)過程中 安全、無污染，無"三廢"排放，還進(jìn)一步降低生產(chǎn)成本。 本發(fā)明方法是節(jié)能減排、安全生產(chǎn)且成本低，便于推廣應(yīng)用的理想的方法。采用本 發(fā)明方法制備出的L-辛弗林產(chǎn)品，可廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、飲料、保健品行業(yè)中。有加速 新陳代謝、有效預(yù)防能量過剩而實現(xiàn)減肥，且無副作用；有逐風(fēng)理氣、溫胃促進(jìn)食欲、消除消 化道系統(tǒng)不適；也有輕微興奮、滅菌等功用。
具體實施例方式
下面結(jié)合具體實施方式
，進(jìn)一步說明本發(fā)明。
實施例1 —種萃取分離L-辛弗林的方法，具體方法步驟如下
(1)醇溶及抽濾 以市售枳實為原料，以60%的乙醇溶液為溶劑，按枳實的質(zhì)量(g) : 60%的乙醇 溶液體積(mL)之比為l : 9的比例，在枳實中加入體積分?jǐn)?shù)為60%的乙醇溶液，攪拌溶解 20分鐘，然后抽濾，分別收集濾液和濾渣。收集的濾液，用于下一步進(jìn)行超濾。對于濾渣，因含有大量的多糖，經(jīng)干燥后用作食用菌的發(fā)酵添加劑。 [OO34] (2)超濾分離 第(1)步完成之后，先將第(1)步收集的濾液泵入超濾器中，用截留分子量為
3000Da的超濾膜，在0. IMPa下進(jìn)行超濾分離，小分子量的L_辛弗林等透過超濾膜，大分子
的雜蛋白不能透過超濾膜而留在截留液中，分別收集濾過液及截留液。對于截留液，主要含
有雜蛋白，經(jīng)干燥后用作食用菌的發(fā)酵添加劑；對于濾過液，即為L-辛弗林萃取原液，用于
下步反膠束萃取L-辛弗林。 (3)反膠束萃取 ①P204反膠束溶液的制備 第(2)步完成之后，以P204為萃取劑，正辛醇為稀釋劑，先在P204萃取劑中，加入 正辛醇稀釋劑，攪拌下混合溶解，待形成P204的摩爾濃度為0. 08mol/L溶液后，再加入蒸餾 水，進(jìn)行攪拌溶解，而形成透明均勻的P204反膠束溶液。密封保存，備用。其蒸餾水P204 的摩爾比為1 : 0. 2。
②反膠束萃取 第(3)-①步完成后，按第(3)-①步制備出的P204反膠束溶液第(2)步制備 出的L-辛弗林萃取原液的體積比為1 : 1的比例，在萃取器中，加入L-辛弗林萃取原液 和P204反膠束溶液，控制水相的pH值為5. 5，在攪拌下進(jìn)行萃取，萃取時間為5分鐘，再將 萃取后的混合液置于分液器中進(jìn)行分離，分別收集下層萃余液和上層萃取有L-辛弗林的 P204反膠束溶液。然后在收集的下層萃余液中，再加入P204反膠束溶液，其P204反膠束溶 液下層萃余液的體積比為1 : 1，并控制水相的PH值為5.5，再次進(jìn)行萃取分離，再分別 收集下層萃余液和上層萃取有L-辛弗林的P204反膠束溶液，如此重復(fù)萃取2次。最后合 并各次收集的上層萃取有L-辛弗林的P204反膠束溶液；棄最后收集的下層萃余液。
(4)反萃取L-辛弗林 第(3)步完成后，將第(3)-②步最后合并收集的上層萃取有L-辛弗林的P204 反膠束溶液，轉(zhuǎn)移至另一萃取器中，加入2倍體積的蒸餾水，其中氯化鉀的摩爾濃度為 0. 5mol/L，控制水相的pH值為11. 5，進(jìn)行攪拌反萃取10分鐘，再在分液器中進(jìn)行分離，并分 別收集下層反萃取溶液和上層P204反膠束溶液。對收集的上層P204反膠束溶液，再加入2 倍體積的蒸餾水，其中氯化鉀的摩爾濃度為0. 5mol/L，并控制水相的pH值為11. 5，再進(jìn)行 反萃取分離，再分別收集下層反萃取溶液和上層P204反膠束溶液。如此反復(fù)萃取2次。最 后合并各次收集的下層反萃取溶液，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，在溫度為6(TC、真空度為0. 06Mpa的 條件下，進(jìn)行真空濃縮，就制備出L-辛弗林濃縮液。對最后收集的上層P204反膠束溶液， 用于第(6)步反膠束溶液的再生利用。
(5)制備L-辛弗林凍干粉 第(4)步完成后，先將第(4)步制備出的L-辛弗林濃縮液置入截留分子量為 100Da的透析袋中，用蒸餾水透析24小時，收集透析袋內(nèi)的L-辛弗林透析液。然后將收集 的L-辛弗林透析液置于冷凍干燥機(jī)中，在25Pa真空度、-S(TC溫度下，進(jìn)行冷凍干燥24h， 就制備出純度為90. 0%的L-辛弗林凍干粉。
(6)反膠束溶液的再生 第(5)步完成后，對第(4)步最后所收集的上層P204反膠束溶液，因水量及雜質(zhì)過多而渾濁，在其中加入干燥劑(如分子篩、氯化鈣等干燥劑)，靜置1天后收集上清液，即 為反膠束再生液，可再次使用。
實施例2 —種萃取分離L-辛弗林的方法，具體方法步驟如下
(1)醇溶及抽濾 同實施例l，其中枳實的質(zhì)量(g) : 60%的乙醇溶液體積(mL)之比為1 : 9的
比例，攪拌溶解30分鐘。 (2)超濾分離 同實施例l，其中對第(1)步收集的濾液，在0. 2MPa下進(jìn)行超濾分離。 (3)反膠束萃取 ①P204反膠束溶液的制備 同實施例l，其中P204的摩爾濃度為0. 12mol/L。加入的蒸餾水P204的摩爾
比為1 : 0. 05。 ②反膠束萃取 同實施例l，其中P204反膠束溶液第(2)步制備出的L-辛弗林萃取原液的體 積比為l : 2，水相的pH值為7.0，萃取時間為20分鐘。對收集的下層萃余液中，再加入的 P204反膠束溶液下層萃余液的體積比為1 : 2，水相的pH值為7.0。如此重復(fù)萃取2次。
(4)反萃取L-辛弗林 同實施例l，其中加入2. 5倍體積的蒸餾水，其中氯化鉀的摩爾濃度為0. 7mol/L，
控制水相的pH值為10. 5，進(jìn)行攪拌反萃取15分鐘。對收集的上層P204反膠束溶液，再加入
2. 5倍體積的蒸餾水，其中氯化鉀的摩爾濃度為0. 7mol/L，并控制水相的pH值為10. 5，如此
反復(fù)萃取2次。對置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中的下層反萃取溶液，在溫度為7(TC、真空度為0. 07Mpa
的條件下，進(jìn)行真空濃縮。 (5)制備L-辛弗林凍干粉 同實施例l，其中用蒸餾水透析30小時。對置于冷凍干燥機(jī)中的L-辛弗林透析 液，在35Pa真空度、_55°〇溫度下，進(jìn)行冷凍干燥30h，就制備出純度為91. 2%的L-辛弗林 凍干粉。 (6)反膠束溶液的再生 同實施例l，其中靜置2天后收集上清液。
實施例3 —種萃取分離L-辛弗林的方法，具體方法步驟如下(i)醇溶及抽濾 同實施例l，其中枳實的質(zhì)量(g) : 60%的乙醇溶液體積(mL)之比為1 : 10的 比例，攪拌溶解40分鐘。 (2)超濾分離 同實施例l，其中對第(1)步收集的濾液，在0. 3MPa下進(jìn)行超濾分離。 (3)反膠束萃取 ①反膠束溶液的制備 同實施例l，其中:P204的摩爾濃度為0. 1Omol/L。加入的蒸餾水:P204萃取劑
②反膠束萃取 同實施例l，其中P204反膠束溶液第(2)步制備出的L-辛弗林萃取原液的體 積比為l : 3，水相的pH值為6.5，萃取時間為IO分鐘。對收集的下層萃余液中，再加入的 P204反膠束溶液下層萃余液的體積比為l : 3，水相的pH值為6.5。如此重復(fù)萃取3次。
(4)反萃取L-辛弗林 同實施例l，其中加入3倍體積的蒸餾水，其中氯化鉀的摩爾濃度為0. 6mol/L，控
制水相的pH值為11. O，進(jìn)行攪拌反萃取20分鐘。對收集的上層P204反膠束溶液，再加入
3倍體積的蒸餾水，其中氯化鉀的摩爾濃度為0. 6mol/L，并控制水相的pH值為11. O，如此反
復(fù)萃取3次。對置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中的下層溶液，在溫度為8(TC、真空度為0. 08Mpa的條件
下，進(jìn)行真空濃縮。 (5)制備L-辛弗林凍干粉 同實施例l，其中用蒸餾水透析36小時。對置于冷凍干燥機(jī)中的L-辛弗林透析 液，在45Pa真空度、-e(TC溫度下，進(jìn)行冷凍干燥36h，就制備出純度為93. 5%的L-辛弗林 凍干粉。 (6)反膠束溶液的再生 同實施例l，其中靜置2天后收集上清液。
權(quán)利要求
一種萃取分離L-辛弗林的方法，其特征在于具體方法步驟如下(1)醇溶及抽濾以市售枳實為原料，以60％的乙醇溶液為溶劑，按枳實的質(zhì)量∶60％的乙醇溶液體積之比為1∶9～10的比例，在枳實中加入體積分?jǐn)?shù)為60％的乙醇溶液，攪拌溶解20～40分鐘，然后抽濾，分別收集濾液和濾渣，對濾渣進(jìn)行干燥；(2)超濾分離第(1)步完成之后，先將第(1)步收集的濾液泵入超濾器中，用截留分子量為3000Da的超濾膜，在0.1～0.3MPa下進(jìn)行超濾分離，分別收集濾過液及截留液，對于截留液，進(jìn)行干燥；(3)反膠束萃?、貾204反膠束溶液的制備第(2)步完成之后，以P204為萃取劑，正辛醇為稀釋劑，先在P204萃取劑中，加入正辛醇稀釋劑，攪拌下混合溶解，待形成P204的摩爾濃度為0.08～0.12mol/L溶液后，再加入蒸餾水，進(jìn)行攪拌溶解，其蒸餾水∶P204的摩爾比為1∶0.05～0.2；②反膠束萃取第(3)-①步完成后，按第(3)-①步制備出的P204反膠束溶液∶第(2)步制備出的L-辛弗林萃取原液的體積比為1∶1～3的比例，在萃取器中，加入L-辛弗林萃取原液和P204反膠束溶液，控制水相的pH值為5.5～7.0，在攪拌下進(jìn)行萃取，萃取時間為5～20分鐘，再將萃取后的混合液置于分液器中進(jìn)行分離，分別收集下層萃余液和上層萃取有L-辛弗林的P204反膠束溶液，然后在收集的下層萃余液中，再加入P204反膠束溶液，其P204反膠束溶液∶下層萃余液的體積比為1∶1～3，并控制水相的pH值為5.5～7.0，再次進(jìn)行萃取分離，再分別收集下層萃余液和上層萃取有L-辛弗林的P204反膠束溶液，如此重復(fù)萃取2～3次，最后合并各次收集的上層萃取有L-辛弗林的P204反膠束溶液，棄最后收集的下層萃余液；(4)反萃取L-辛弗林第(3)步完成后，將第(3)-②步最后合并收集的上層萃取有L-辛弗林的P204反膠束溶液，轉(zhuǎn)移至另一萃取器中，加入2～3倍體積的蒸餾水，其中氯化鉀的摩爾濃度為0.5～0.7mol/L，控制水相的pH值為10.5～11.5，進(jìn)行攪拌反萃取10～20分鐘，再在分液器中進(jìn)行分離，并分別收集下層溶液和上層P204反膠束溶液，對收集的上層P204反膠束溶液，再加入2～3倍體積的蒸餾水，其中氯化鉀的摩爾濃度為0.5～0.7mol/L，并控制水相的pH值為10.5～11.5，再進(jìn)行反萃取分離，再分別收集下層溶液和上層P204反膠束溶液，如此反復(fù)萃取2～3次，最后合并各次收集的下層溶液，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，在溫度為60～80℃、真空度為0.06～0.08Mpa的條件下，進(jìn)行真空濃縮；(5)制備L-辛弗林凍干粉第(4)步完成后，先將第(4)步制備出的L-辛弗林濃縮液置入截留分子量為100Da的透析袋中，用蒸餾水透析24～36小時，收集透析袋內(nèi)的L-辛弗林透析液，然后將收集的L-辛弗林透析液置于冷凍干燥機(jī)中，在25～45Pa真空度、-50～-60℃溫度下，進(jìn)行冷凍干燥24～36h；(6)反膠束溶液的再生第(5)步完成后，對第(4)步最后所收集的上層P204反膠束溶液中加入干燥劑(如分子篩、氯化鈣等干燥劑)，靜置1～2天后收集上清液。
2. 按照權(quán)利要求1所述的一種萃取分離L-辛弗林的方法，其特征在于具體步驟中 第(1)步中，枳實的質(zhì)量60%的乙醇溶液體積之比為1 : 9，攪拌溶解20分鐘； 第(2)步中，在O. lMPa下進(jìn)行超濾分離；第(3)-①步中，P204的摩爾濃度為0. 08mol/L，加入的蒸餾水P204的摩爾比為 1 : 0. 2 ;第(3)-②步中，P204反膠束溶液第(2)步制備出的L-辛弗林萃取原液的體積比為 1 : 1，水相的pH值為5.5，萃取時間為5分鐘，對收集的下層萃余液中，再加入的P204反膠 束溶液下層萃余液的體積比為1 : 1，水相的pH值為5.5，如此重復(fù)萃取2次；第(4)步中，加入2倍體積的蒸餾水，其中氯化鉀的摩爾濃度為0. 5mol/L，控制水相的 pH值為11. 5，進(jìn)行攪拌反萃取10分鐘，對收集的上層P204反膠束溶液，再加入2倍體積的 蒸餾水，其中氯化鉀的摩爾濃度為0. 5mol/L，并控制水相的pH值為11. 5，如此反復(fù)萃取2 次，對置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中的下層溶液，在溫度為6(TC、真空度為0. 06Mpa的條件下，進(jìn)行真 空濃縮；第(5)步中，用蒸餾水透析24小時，對置于冷凍干燥機(jī)中的L-辛弗林透析液，在25Pa 真空度、-5(TC溫度下，進(jìn)行冷凍干燥24h ; 第(6)步中，靜置1天后收集上清液。
3. 按照權(quán)利要求1所述的一種萃取分離L-辛弗林的方法，其特征在于具體步驟中 第(1)步中，枳實的質(zhì)量60%的乙醇溶液體積之比為1 : 9，攪拌溶解30分鐘； 第(2)步中，在0. 2MPa下進(jìn)行超濾分離；第(3)-①步中，P204的摩爾濃度為0. 12mol/L，加入的蒸餾水P204的摩爾比為i : o. 05;第(3)-②步中，P204反膠束溶液第(2)步制備出的-辛弗林萃取原液的體積比為 1 : 2，水相的pH值為7.0，萃取時間為20分鐘，對收集的下層萃余液中，再加入的P204反 膠束溶液下層萃余液的體積比為1 : 2，水相的pH值為7.0，如此重復(fù)萃取2次；第(4)步中，加入2.5倍體積的蒸餾水，其中氯化鉀的摩爾濃度為0. 7mol/L，控制水相 的pH值為10. 5，進(jìn)行攪拌反萃取15分鐘，對收集的上層P204反膠束溶液，再加入2. 5倍體 積的蒸餾水，其中氯化鉀的摩爾濃度為0. 7mol/L，并控制水相的pH值為10. 5，如此反復(fù)萃 取2次，對置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中的下層溶液，在溫度為70°C 、真空度為0. 07Mpa的條件下，進(jìn)行 真空濃縮；第(5)步中，用蒸餾水透析30小時，對置于冷凍干燥機(jī)中的L-辛弗林透析液，在35Pa 真空度、-55"溫度下，進(jìn)行冷凍干燥30h ; 第(6)步中，靜置2天后收集上清液。
4. 按照權(quán)利要求1所述的一種富集銀杏黃酮化合物的方法，其特征在于具體步驟如下第(1)步中，枳實的質(zhì)量60%的乙醇溶液體積之比為1 : 10，攪拌溶解40分鐘； 第(2)步中，在0. 3MPa下進(jìn)行超濾分離；第(3)-①步中，P204的摩爾濃度為0. 10mol/L，加入的蒸餾水P204的摩爾比為i : o. 07;第(3)-②步中，P204反膠束溶液第(2)步制備出的L-辛弗林萃取原液的體積比為 1 : 3，水相的pH值為6.5，萃取時間為10分鐘，對收集的下層萃余液中，再加入的P204反 膠束溶液下層萃余液的體積比為1 : 3，水相的pH值為6.5，如此重復(fù)萃取3次；第(4)步中，加入3倍體積的蒸餾水，其中氯化鉀的摩爾濃度為0.6mol/L，控制水相的 pH值為11. O，進(jìn)行攪拌反萃取20分鐘，對收集的上層P204反膠束溶液，再加入3倍體積的 蒸餾水，其中氯化鉀的摩爾濃度為0. 6mol/L，并控制水相的pH值為11. 0，如此反復(fù)萃取3 次，對置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中的下層溶液，在溫度為8(TC、真空度為0. 08Mpa的條件下，進(jìn)行真 空濃縮；第(5)步中，用蒸餾水透析36小時，對置于冷凍干燥機(jī)中的L-辛弗林透析液，在45Pa 真空度、-e(TC溫度下，進(jìn)行冷凍干燥36h ; 第(6)步中，靜置2天后收集上清液。
全文摘要
一種萃取分離L-辛弗林的方法，涉及采用反膠束萃取技術(shù)萃取L-辛弗林的方法。本發(fā)明以市售枳實為原料，經(jīng)溶解及抽濾、超濾分離、反膠束萃取、反萃取、真空濃縮及凍干而得成品。本發(fā)明在常溫下生產(chǎn)出高純度產(chǎn)品，能降低生產(chǎn)能耗；生產(chǎn)設(shè)備簡單、操作簡便；在生產(chǎn)過程中主要使用乙醇、蒸餾水等無毒物質(zhì)，且使用后還能回收利用；脫除的雜質(zhì)還能再利用，因而生產(chǎn)安全、充分利用物質(zhì)資源，無“三廢”排放，生產(chǎn)成本低，是節(jié)能減排的生產(chǎn)方法。采用本發(fā)明方法制備出的L-辛弗林產(chǎn)品，可廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、飲料、保健品等行業(yè)中。
文檔編號C07C215/60GK101792394SQ20101012513
公開日2010年8月4日 申請日期2010年3月16日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月16日
發(fā)明者云芳, 周小華, 張桂羅, 桑魯燕 申請人:重慶大學(xué)