專利名稱：基因編碼的紅色熒光蛋白的分子設(shè)計(jì)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)中熒光蛋白質(zhì)領(lǐng)域，具體涉及基因編碼的可逆光致變色的紅 色熒光蛋白和非可逆光致變色的紅色熒光蛋白的分子設(shè)計(jì)方法。
背景技術(shù)：
綠色熒光蛋白(GFP)是由基因編碼的能在紫外光下發(fā)出綠色熒光的蛋白。通過對(duì) 其分子結(jié)構(gòu)的改造，能改進(jìn)該熒光蛋白發(fā)出熒光的強(qiáng)度和顏色。因此，GFP作為報(bào)告基因被 廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)標(biāo)記、有機(jī)體的可視化等生物學(xué)領(lǐng)域。但是，GFP主要是在紫外光照射下 發(fā)綠光，這會(huì)對(duì)生物體造成突變或傷害，不利于許多領(lǐng)域的應(yīng)用。藻藍(lán)膽素(phycocyanobilin，簡稱PCB)是天然藍(lán)藻中的主要藻膽色素，由血紅素 在血紅素氧化酶(H01)與血紅素還原酶(PcyA)催化下轉(zhuǎn)化而生成，H01與PcyA分別由hoi 與pcyA基因編碼。PCB以硫醚鍵與脫輔基蛋白的半胱氨酸巰基共價(jià)結(jié)合并形成特定的構(gòu) 象，使得PCB色素蛋白能夠吸收較大范圍內(nèi)的可見光，并發(fā)出相應(yīng)的熒光。存在兩種可高效 共價(jià)偶聯(lián)PCB的脫輔基蛋白，一種是藍(lán)藻光敏色素中結(jié)合PCB的色素結(jié)構(gòu)域GAF(基因片 段)，另一種是核膜連接蛋白結(jié)合PCB的色素結(jié)構(gòu)域ApcE (基因片段)?，F(xiàn)有技術(shù)還沒有 公開通過對(duì)這兩類能結(jié)合PCB的脫輔基蛋白基因片段進(jìn)行分子設(shè)計(jì)后，與合成PCB的基因 hoi、pcyA融合，以產(chǎn)生新的分子設(shè)計(jì)的融合功能基因，該融合功能基因能編碼可逆光致變 色或非可逆光致變色的紅色熒光蛋白。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的問題是針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)提出一種新的通過分子設(shè)計(jì)的方法， 設(shè)計(jì)基因片段，編碼出可逆光致變色或非可逆光致變色的紅色熒光蛋白。本發(fā)明為解決上述提出的問題所采用的解決方案為基因編碼的紅色熒光蛋白的 分子設(shè)計(jì)方法，其特征在于包括有以下步驟1)通過分子設(shè)計(jì)方法將血紅素氧化酶基因hoi的終止子突變?yōu)榉墙K止子密碼子， 并在該基因之后設(shè)計(jì)編碼5 15個(gè)氨基酸的DNA片段，將其與血紅素還原酶基因pcyA進(jìn) 行融合連接，得到相應(yīng)的融合基因hol:pcyA，通過該融合基因能夠編碼合成藻藍(lán)膽素PCB ；2)將結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB的脫輔基蛋白色素結(jié)構(gòu)域的基因片段，通過分子設(shè)計(jì)編碼 5 15個(gè)氨基酸的DNA片段，與步驟1)所得融合基因hoi pcyA再次融合，得到完整的融合 功能基因，其能夠編碼可逆光致變色或非可逆光致變色的紅色熒光蛋白；3)將步驟2)得到的融合功能基因，轉(zhuǎn)入外源生物細(xì)胞，在外源生物體正常表達(dá) 時(shí)，得到具有可逆光致變色或非可逆光致變色的紅色熒光蛋白。按上述方案，所述的結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB的脫輔基蛋白色素結(jié)構(gòu)域的基因片段為藍(lán) 藻光敏色素的色素結(jié)構(gòu)域gaf或核膜連接蛋白的色素結(jié)構(gòu)域apcE。本發(fā)明描述了一種基因編碼的紅色熒光蛋白的分子設(shè)計(jì)方法，該方法首先將合成 藻藍(lán)膽素PCB的基因進(jìn)行融合，再與結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB的脫輔基蛋白色素結(jié)構(gòu)域的基因片
3段進(jìn)行融合，可得到基因編碼的紅色熒光蛋白，在綠光或橙光照射下，發(fā)出紅色熒光。如 果結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB的脫輔基蛋白色素結(jié)構(gòu)域的基因片段為藍(lán)藻光敏色素的色素結(jié)構(gòu)域 gaf，則按照本發(fā)明介紹的方法可產(chǎn)生基因編碼的可逆光致變色的紅色熒光蛋白。如果結(jié)合 藻藍(lán)膽素PCB的脫輔基蛋白色素結(jié)構(gòu)域的基因片段為核膜連接蛋白的色素結(jié)構(gòu)域apcE，則 按照本發(fā)明介紹的方法可產(chǎn)生基因編碼的非可逆光致變色的發(fā)持續(xù)強(qiáng)烈紅色熒光的蛋白。 這些紅色熒光蛋白在生物領(lǐng)域能廣泛應(yīng)用。對(duì)于本發(fā)明所得到的具有可逆光致變色的紅色熒光蛋白，當(dāng)用650nm光輻射時(shí)， 表 現(xiàn)為536nm吸收增強(qiáng)，無熒光；當(dāng)用500nm光輻射時(shí)，表現(xiàn)為648nm吸收增強(qiáng)，具有很強(qiáng)的 紅色熒光；即可逆光致變色范圍648 536nm?？梢詰?yīng)用光譜檢測(cè)制備的可逆光致變色的 紅色熒光蛋白(見圖1)。該方法更適合應(yīng)用于熒光探針、生物定位標(biāo)記、光療等功能領(lǐng)域 中。本發(fā)明的有益效果在于通過本發(fā)明的分子設(shè)計(jì)方法所產(chǎn)生的基因編碼的可逆光 致變色的紅色熒光蛋白，具有許多GFP所不具備的優(yōu)點(diǎn)。首先，此紅色熒光蛋白的熒光具有 可逆光致變色的特性應(yīng)用該設(shè)計(jì)得到的具有可逆光致變色的熒光蛋白，在紅光照射下，紅 色熒光消失，在綠光或橙光照射下，發(fā)出強(qiáng)烈的紅色熒光。而類似設(shè)計(jì)的非可逆光致變色的 紅色熒光蛋白，則可以在綠光或橙光照射下持續(xù)發(fā)出強(qiáng)烈紅色熒光。其次，這些紅色熒光蛋 白與GFP—樣都是基因可編碼的，可按照應(yīng)用的需要，編碼出符合要求的紅色熒光蛋白，而 且此紅色熒光蛋白在應(yīng)用時(shí)照射光源是紅光、橙光或綠光，這類可見光對(duì)生物體傷害很小， 故可以得到廣泛應(yīng)用。此紅色熒光蛋白可以應(yīng)用于熒光探針、生物定位標(biāo)記、光療等生物工程領(lǐng)域。通過 分子設(shè)計(jì)將各基因功能片段最大限度縮短并融合成為單個(gè)融合功能基因，使得此紅色熒光 蛋白能像GFP那樣方便而廣泛地應(yīng)用于各種蛋白質(zhì)與組織標(biāo)記示蹤，從而為此紅色熒光蛋 白功能材料應(yīng)用于熒光探針、生物定位標(biāo)記、光療等生物工程領(lǐng)域奠定了基礎(chǔ)。


圖1為本發(fā)明實(shí)施例2制備的可逆光致變色紅色熒光蛋白的熒光光譜；其中實(shí)線 為綠光照射后的紫外可見吸收光譜，而虛線為綠光光照后的熒光光譜，該光譜圖是的融合 功能基因片段編碼的可逆光致變色紅色熒光蛋白的紫外和熒光圖譜，當(dāng)綠光照射后，具有 648nm的可見吸收值，熒光較強(qiáng)。
具體實(shí)施例方式為了更好地理解本發(fā)明，下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步闡明本發(fā)明的內(nèi)容，但本發(fā)明的 內(nèi)容不僅僅局限于下面的實(shí)施。實(shí)施例1 (1)將魚腥藻PCC7120中基因編碼為alr3707的血紅素還原酶基因pcyA，運(yùn)用分 子生物學(xué)的方法克隆于Novagen公司的表達(dá)載體pET30中；再通過分子設(shè)計(jì)方法將基因編 碼為alll897的血紅素氧化酶基因hoi的終止子突變?yōu)榉墙K止子氨基酸，并在血紅素氧化 酶基因hoi之后設(shè)計(jì)編碼5個(gè)氨基酸的DNA片段，將其與血紅素還原酶基因pcyA進(jìn)行融合 連接，得到一個(gè)新的基因hoi pcyA，通過該融合基因編碼合成藻藍(lán)膽素PCB。
(2)在魚腥藻PCC7120中基因編碼為alll069的光敏色素從221-397的色素結(jié)構(gòu) 域的基因片段gaf2的基因片段之后，通過分子設(shè)計(jì)方法設(shè)計(jì)編碼5個(gè)氨基酸的DNA片段連 接，再次與步驟(1)所得基因hoi :pcyA融合，合成能夠表達(dá)出具有可逆光致變色的紅色熒 光蛋白的融合功能基因gaf2:hol:pCyA。(3)將步驟(2)所得的融合功能基因轉(zhuǎn)入外源生物大腸桿菌體內(nèi)，并在相應(yīng)條件 下表達(dá)。如此得到的大腸桿菌合成相應(yīng)的紅色熒光蛋白，可以清晰標(biāo)示該蛋白與大腸桿菌 的狀態(tài)。得到的熒光蛋白用500nm綠光輻射時(shí)，具有很強(qiáng)的紅色熒光；用650nm紅光輻射 時(shí)，無熒光。實(shí)施例2:(1)將集胞藻PCC6803中基因編碼為slr0116的血紅素還原酶基因pcyA，運(yùn)用分 子生物學(xué)的方法克隆于Novagen公司的表達(dá)載體pET30中；再通過分子設(shè)計(jì)方法將基因編 碼為S111184的血紅素氧化酶基因hoi的終止子突變?yōu)榉墙K止子氨基酸，并在血紅素氧化 酶基因hoi之后設(shè)計(jì)編碼5個(gè)氨基酸的DNA片段，將其與血紅素還原酶基因pcyA進(jìn)行融合 連接，得到一個(gè)新的基因hoi pcyA，通過該融合基因編碼合成藻藍(lán)膽素PCB。(2)在集胞藻PCC6803中基因編碼為slrl393的光敏色素從441-596的色素結(jié)構(gòu) 域基因片段gaf3的基因片段之后，通過分子設(shè)計(jì)方法設(shè)計(jì)編碼5個(gè)氨基酸的DNA片段連 接，再次與步驟(1)所得基因hol:pcyA融合，合成能夠表達(dá)出具有可逆光致變色的紅色熒 光蛋白的融合功能基因gaf3:hoi:pcyA。(3)將步驟(2)所得的融合功能基因轉(zhuǎn)入外源生物大腸桿菌體內(nèi)，并在相應(yīng)條件 下表達(dá)。如此得到的大腸桿菌合成相應(yīng)的紅色熒光蛋白，可以清晰標(biāo)示該蛋白與大腸桿菌 的狀態(tài)。得到的熒光蛋白用500nm綠光輻射時(shí)，具有很強(qiáng)的紅色熒光；用650nm紅光輻射 時(shí)，無熒光。實(shí)施例3 (1)將魚腥藻PCC7120中基因編碼為alr3707的血紅素還原酶基因pcyA，運(yùn)用分 子生物學(xué)的方法克隆于Novagen公司的表達(dá)載體pET30中；再通過分子設(shè)計(jì)方法將基因編 碼為alll897的血紅素氧化酶基因hoi的終止子突變?yōu)榉墙K止子氨基酸，并在血紅素氧化 酶基因hoi之后設(shè)計(jì)編碼15個(gè)氨基酸的DNA片段，將其與血紅素還原酶基因pcyA進(jìn)行融 合連接，得到一個(gè)新的基因hoi pcyA，通過該融合基因編碼合成藻藍(lán)膽素PCB。(2)在魚腥藻PCC7120中基因編碼為alll069的光敏色素從221-397的色素結(jié)構(gòu) 域基因片段gaf2的基因片段之后，通過分子設(shè)計(jì)方法設(shè)計(jì)編碼15個(gè)氨基酸的DNA片段連 接，再次與步驟(1)所得基因hoi :pcyA融合，合成能夠表達(dá)出具有可逆光致變色的紅色熒 光蛋白的融合功能基因gaf2:hoi:pcyA。(3)將步驟(2)所得的融合功能基因轉(zhuǎn)入外源生物大腸桿菌體內(nèi)，并在相應(yīng)條件 下表達(dá)。如此得到的大腸桿菌合成相應(yīng)的紅色熒光蛋白，可以清晰標(biāo)示該蛋白與大腸桿菌 的狀態(tài)。得到的熒光蛋白用500nm綠光輻射時(shí)，具有很強(qiáng)的紅色熒光；用650nm紅光輻射 時(shí)，無熒光。
實(shí)施例4:(1)將集胞藻PCC6803中基因編碼為slr0116的血紅素還原酶基因pcyA，運(yùn)用分 子生物學(xué)的方法克隆于Novagen公司的表達(dá)載體pET30中；再通過分子設(shè)計(jì)方法將基因編 碼為S111184的血紅素氧化酶基因hoi的終止子突變?yōu)榉墙K止子氨基酸，并在血紅素氧化 酶基因hoi之后設(shè)計(jì)編碼15個(gè)氨基酸的DNA片段，將其與血紅素還原酶基因pcyA進(jìn)行融 合連接，得到一個(gè)新的基因hoi pcyA，通過該融合基因編碼合成藻藍(lán)膽素PCB。(2)在集 胞藻PCC6803中基因編碼為slrl393的光敏色素從441-596的色素結(jié)構(gòu) 域基因片段gaf3的基因片段之后，通過分子設(shè)計(jì)方法設(shè)計(jì)編碼15個(gè)氨基酸的DNA片段連 接，再次與步驟(1)所得基因hol:pcyA融合，合成能夠表達(dá)出具有可逆光致變色的紅色熒 光蛋白的融合功能基因gaf3:hoi:pcyA。(3)將步驟(2)所得的融合功能基因轉(zhuǎn)入外源生物大腸桿菌體內(nèi)，并在相應(yīng)條件 下表達(dá)。如此得到的大腸桿菌合成相應(yīng)的紅色熒光蛋白，可以清晰標(biāo)示該蛋白與大腸桿菌 的狀態(tài)。得到的熒光蛋白用500nm綠光輻射時(shí)，具有很強(qiáng)的紅色熒光；用650nm紅光輻射 時(shí)，無熒光。實(shí)施例5 (1)將魚腥藻PCC7120中基因編碼為alr3707的血紅素還原酶基因pcyA，運(yùn)用分 子生物學(xué)的方法克隆于Novagen公司的表達(dá)載體pET30中；再通過分子設(shè)計(jì)方法將基因編 碼為alll897的血紅素氧化酶基因hoi的終止子突變?yōu)榉墙K止子氨基酸，并在血紅素氧化 酶基因hoi之后設(shè)計(jì)編碼5個(gè)氨基酸的DNA片段，將其與血紅素還原酶基因pcyA進(jìn)行融合 連接，得到一個(gè)新的基因hoi pcyA，通過該融合基因編碼合成藻藍(lán)膽素PCB。(2)在魚腥藻PCC7120中基因編碼為alr0020的核膜連接蛋白的色素結(jié)構(gòu)域apcE 的基因片段之后，通過分子設(shè)計(jì)方法設(shè)計(jì)編碼5個(gè)氨基酸的DNA片段連接，再次與步驟(1) 所得基因hoi :pcyA融合，合成能夠表達(dá)出非可逆光致變色的紅色熒光蛋白的融合功能基 因 apcE:hol:pcyA。(3)將步驟(2)所得的融合功能基因轉(zhuǎn)入外源生物大腸桿菌體內(nèi)，并在相應(yīng)條件 下表達(dá)。如此得到的大腸桿菌合成相應(yīng)的紅色熒光蛋白，可以清晰標(biāo)示該蛋白與大腸桿菌 的狀態(tài)。得到的熒光蛋白用580nm-620nm橙光或紅光輻射時(shí)，具有很強(qiáng)的紅色熒光。實(shí)施例6:(1)將集胞藻PCC6803中基因編碼為slr0116的血紅素還原酶基因pcyA，運(yùn)用分 子生物學(xué)的方法克隆于Novagen公司的表達(dá)載體pET30中；再通過分子設(shè)計(jì)方法將基因編 碼為S111184的血紅素氧化酶基因hoi的終止子突變?yōu)榉墙K止子氨基酸，并在血紅素氧化 酶基因hoi之后設(shè)計(jì)5個(gè)氨基酸的DNA片段，將其與血紅素還原酶基因pcyA進(jìn)行融合連接， 得到一個(gè)新的基因hol:pcyA，通過該融合基因編碼合成藻藍(lán)膽素PCB。(2)在集胞藻PCC6803中基因編碼為slr0335的核膜連接蛋白的色素結(jié)構(gòu)域apcE 的基因片段之后，通過分子設(shè)計(jì)方法設(shè)計(jì)編碼5個(gè)氨基酸的DNA片段連接，再次與步驟(1) 所得基因hol:pcyA融合，合成能夠表達(dá)出非可逆光致變色的紅色熒光蛋白的融合功能基 因 apcE:hol:pcyA。
(3)將步驟(2)所得的融合功能基因轉(zhuǎn)入外源生物大腸桿菌體內(nèi)，并在相應(yīng)條件下表達(dá)。如此得到的大腸桿菌合成相應(yīng)的紅色熒光蛋白，可以清晰標(biāo)示該蛋白與大腸桿菌 的狀態(tài)。得到的熒光蛋白用580nm-620nm橙光或紅光輻射時(shí)，具有很強(qiáng)的紅色熒光。實(shí)施例7 (1)將魚腥藻PCC7120中基因編碼為alr3707的血紅素還原酶基因pcyA，運(yùn)用分 子生物學(xué)的方法克隆于Novagen公司的表達(dá)載體pET30中；再通過分子設(shè)計(jì)方法將基因編 碼為alll897的血紅素氧化酶基因hoi的終止子突變?yōu)榉墙K止子氨基酸，并在血紅素氧化 酶基因hoi之后設(shè)計(jì)15個(gè)氨基酸的DNA片段，將其與血紅素還原酶基因pcyA進(jìn)行融合連 接，得到一個(gè)新的基因hoi pcyA，通過該融合基因編碼合成藻藍(lán)膽素PCB。(2)在魚腥藻PCC7120中基因編碼為alr0020的核膜連接蛋白的色素結(jié)構(gòu)域apcE 的基因片段之后，通過分子設(shè)計(jì)方法設(shè)計(jì)編碼15個(gè)氨基酸的DNA片段連接，再次與步驟(1) 所得基因hoi :pcyA融合，合成能夠表達(dá)出非可逆光致變色的紅色熒光蛋白的融合功能基 因 apcE:hol:pcyA。(3)將步驟(2)所得的融合功能基因轉(zhuǎn)入外源生物大腸桿菌體內(nèi)，并在相應(yīng)條件 下表達(dá)。如此得到的大腸桿菌合成相應(yīng)的紅色熒光蛋白，可以清晰標(biāo)示該蛋白與大腸桿菌 的狀態(tài)。得到的熒光蛋白用580nm-620nm橙光或紅光輻射時(shí)，具有很強(qiáng)的紅色熒光。實(shí)施例8:(1)將集胞藻PCC6803中基因編碼為slr0116的血紅素還原酶基因pcyA，運(yùn)用分 子生物學(xué)的方法克隆于Novagen公司的表達(dá)載體pET30中；再通過分子設(shè)計(jì)方法將基因編 碼為S111184的血紅素氧化酶基因hoi的終止子突變?yōu)榉墙K止子氨基酸，并在血紅素氧化 酶基因hoi之后設(shè)計(jì)15個(gè)氨基酸的DNA片段，將其與血紅素還原酶基因pcyA進(jìn)行融合連 接，得到一個(gè)新的基因hoi pcyA，通過該融合基因編碼合成藻藍(lán)膽素PCB。(2)在集胞藻PCC6803中基因編碼為slr0335的核膜連接蛋白的色素結(jié)構(gòu)域apcE 的基因片段之后，通過分子設(shè)計(jì)方法設(shè)計(jì)編碼15個(gè)氨基酸的DNA片段連接，再次與步驟(1) 所得基因hol:pcyA融合，合成能夠表達(dá)出非可逆光致變色的紅色熒光蛋白的融合功能基 因 apcE:hol:pcyA。(3)將步驟(2)所得的融合功能基因轉(zhuǎn)入外源生物大腸桿菌體內(nèi)，并在相應(yīng)條件 下表達(dá)。如此得到的大腸桿菌合成相應(yīng)的紅色熒光蛋白，可以清晰標(biāo)示該蛋白與大腸桿菌 的狀態(tài)。得到的熒光蛋白用580nm-620nm橙光或紅光輻射時(shí)，具有很強(qiáng)的紅色熒光。上述實(shí)施例1-8的制備方法適用于采用各種藍(lán)藻中生成PCB的基因與結(jié)合PCB 的脫輔基蛋白或其同源的基因融合后來制備紅色熒光蛋白質(zhì)，但涉及到微生物菌種公開的 問題，本發(fā)明只選用了 GenBank中已公開的藍(lán)藻Anabaena sp. PCC7120和Synechocystis sp. PCC6803為例對(duì)本發(fā)明方法加以說明，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以根據(jù)上述公開的內(nèi)容采用 其它原料實(shí)施本發(fā)明。
權(quán)利要求
基因編碼的紅色熒光蛋白的分子設(shè)計(jì)方法，其特征在于包括有以下步驟1)通過分子設(shè)計(jì)方法將血紅素氧化酶基因hol的終止子突變?yōu)榉墙K止子密碼子，并在該基因之后設(shè)計(jì)編碼5～15個(gè)氨基酸的DNA片段，將其與血紅素還原酶基因pcyA進(jìn)行融合連接，得到相應(yīng)的融合基因hol:pcyA；2)將結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB的脫輔基蛋白色素結(jié)構(gòu)域的基因片段，通過分子設(shè)計(jì)編碼5～15個(gè)氨基酸的DNA片段，與步驟1)所得融合基因hol:pcyA再次融合，得到完整的融合功能基因，其能夠編碼可逆光致變色或非可逆光致變色的紅色熒光蛋白；3)將步驟2)得到的融合功能基因，轉(zhuǎn)入外源生物細(xì)胞，在外源生物體正常表達(dá)時(shí)，得到具有可逆光致變色或非可逆光致變色的紅色熒光蛋白。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基因編碼的紅色熒光蛋白的分子設(shè)計(jì)方法，其特征在于血 紅素氧化酶基因hoi和血紅素還原酶基因pcyA融合后得到的融合基因hoi:pcyA可合成藻 藍(lán)色素PCB。
3.按權(quán)利要求1或2所述的基因編碼的紅色熒光蛋白的分子設(shè)計(jì)方法，其特征在于所 述的結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB的脫輔基蛋白色素結(jié)構(gòu)域的基因片段為藍(lán)藻光敏色素的色素結(jié)構(gòu) 域gaf或核膜連接蛋白的色素結(jié)構(gòu)域apcE。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的基因編碼的紅色熒光蛋白的分子設(shè)計(jì)方法，其特征在于 步驟1)和步驟2)中基因片段融合時(shí)，基因片段間間隔的氨基酸數(shù)目為5 15個(gè)，結(jié)合藻 藍(lán)膽素PCB的脫輔基蛋白色素結(jié)構(gòu)域的基因片段與合成PCB的融合基因再次融合后，生成 基因編碼的紅色熒光蛋白。
全文摘要
本發(fā)明涉及基因編碼的紅色熒光蛋白的分子設(shè)計(jì)方法，包括將血紅素氧化酶基因hol和血紅素還原酶基因pcyA融合后，得到相應(yīng)的融合基因hol:pcyA，通過該融合基因能夠編碼合成藻藍(lán)膽素PCB，融合基因hol:pcyA再次與結(jié)合藻藍(lán)膽素PCB的脫輔基蛋白色素結(jié)構(gòu)域的基因片段融合后，能夠產(chǎn)生基因編碼的可逆光致變色的或非可逆光致變色的紅色熒光蛋白，本發(fā)明的有益效果在于可廣泛應(yīng)用于熒光探針、跟蹤標(biāo)記或定位外源生物體、光療等生物領(lǐng)域。
文檔編號(hào)C07K19/00GK101857874SQ20101014923
公開日2010年10月13日 申請(qǐng)日期2010年4月13日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月13日
發(fā)明者伍賢軍, 周明, 張娟, 趙開弘 申請(qǐng)人:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)