專利名稱：作為pkc抑制劑的吲哚基馬來酰亞胺衍生物的制作方法
作為PKC抑制劑的吲哚基馬來酰亞胺衍生物本申請是申請日為2005年1月19日、發(fā)明名稱為“作為PKC抑制劑的吲哚基馬來 酰亞胺衍生物”的中國專利申請200580002684. 8 (PCT/EP2005/000502)的分案申請。本發(fā)明涉及新穎的蛋白激酶C(PKC)抑制劑，它們有相對于其他蛋白激酶而言的 選擇性；涉及新穎的PKC抑制劑，它們就PKC的同工型α和β以及任選地θ相對于一種 或多種其他現(xiàn)有PKC同工型而言是選擇性的；還涉及這類PKC抑制劑抑制移植排斥或自身 免疫病的用途。蛋白激酶C(PKC)由密切相關(guān)的酶家族組成，它們充當(dāng)絲氨酸/蘇氨酸激酶。目前 存在至少十種已知的PKC同工酶，它們在組織分布、酶選擇性、對Ca2+的需求和調(diào)節(jié)作用上 有所不同。PKC在細(xì)胞-細(xì)胞信號發(fā)送、基因表達(dá)和細(xì)胞分化與生長的控制中扮演重要角 色。已知有多種PKC抑制劑。有些也已知證明PKC相對于其他蛋白激酶而言是選擇性的。 不過關(guān)于同工酶選擇性知之甚少。由于不同PKC同工酶在生理中的重要角色，需要開發(fā)選 擇性PKC抑制劑，特別是相對于其他蛋白激酶和/或某些特定PKC同工酶而言高度選擇性 的PKC抑制劑。令人驚奇地，現(xiàn)在已經(jīng)鑒定選擇性PKC抑制劑化合物，下文稱之為本發(fā)明化合物。 此外，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)這些選擇性PKC抑制劑顯示令人感興趣的治療性質(zhì)，特別是在移植，和治療 或預(yù)防自身免疫病中顯示令人感興趣的治療性質(zhì)。一方面，本發(fā)明提供這樣一種化合物，它是蛋白激酶C的蛋白質(zhì)_選擇性抑制劑， 例如就PKC相對于一種或多種其他蛋白激酶而言選擇性的抑制劑，例如相對于一種或多 種酪氨酸激酶，例如相對于一種或多種非受體或受體酪氨酸激酶，例如相對于一種或多種 PKA、PKB、Abl.Met, Src、Ins-R, Flt_3、JAK-2、KDR 和 / 或 Ret 蛋白而言選擇性的抑制劑。 本發(fā)明的選擇性PKC抑制劑可以任選地有相對于一種或多種絲氨酸/蘇氨酸激酶，例如相 對于一種或多種不屬于CDK家族的絲氨酸/蘇氨酸激酶而言的選擇性。優(yōu)選地，本發(fā)明化 合物顯示就PKC相對于一種或多種其他蛋白激酶，例如相對于一種或多種酪氨酸激酶，例 如相對于Flt-3、JAK-2、KDR和/或Ret蛋白或者相對于一種或多種不屬于CDK家族的絲氨 酸/蘇氨酸激酶而言至少10倍、更優(yōu)選20倍、最優(yōu)選100倍的選擇性。在本發(fā)明的一種實施方案中，提供了這樣一種PKC抑制劑，它是就PKC相對于不屬 于CDK家族的絲氨酸/蘇氨酸激酶，例如相對于不是CDK-I蛋白質(zhì)的絲氨酸/蘇氨酸激酶 而言是選擇性的?？梢杂嬎鉖KC的選擇性抑制劑相對于其他蛋白激酶的選擇性，其為在下述測定法 中所測量的PKC的IC5tl相對于另一種激酶的IC5tl之比。在本發(fā)明的另一種實施方案中，提供了這樣一種PKC抑制劑，在同種異體混合淋 巴細(xì)胞反應(yīng)(MLR)測定法中所測定的IC5tl值與在BM測定法中所測定的IC5tl值之比高于5、 10、20或30，優(yōu)選地高于20或30。MLR和BM測定法可以按照已知方法進(jìn)行，例如小鼠或者人MLR和BM測定法，優(yōu)選 如下文所公開的。另一方面，本發(fā)明提供蛋白激酶C(PKC)的選擇性抑制劑，也就是同工酶-選擇性PKC抑制劑，其中該化合物具備就PKC的同工型α和β相對于一種或多種其他PKC同工型 而言的選擇性。優(yōu)選地，本發(fā)明化合物是就α和β PKC相對于一種或多種其他PKC同工型而言 選擇性的，例如相對于一種或多種選自δ、ε、η和θ的PKC同工型，優(yōu)選地相對于δ和 ε PKC同工型，更優(yōu)選地相對于δ、ε和IiPKC同工型，進(jìn)而更優(yōu)選地相對于δ、ε、η和 θ PKC同工型而言選擇性的。在本發(fā)明的另一種實施方案中，本發(fā)明化合物就α、β和θ PKC相對于一種或多 種其他PKC同工型而言是選擇性的，例如相對于一種或多種選自δ、ε和η的PKC同工 型，優(yōu)選地相對于S和ε PKC同工型，更優(yōu)選地相對于δ、ε和nPKC同工型是選擇性的。本發(fā)明化合物優(yōu)選地顯示就PKCa和β以及任選地θ相對于一種或多種其他 PKC同工型，例如相對于一種或多種選自δ、ε、η和θ的PKC同工型，優(yōu)選地相對于PKC 同工型δ，更優(yōu)選地相對于PKC同工型ε和η，進(jìn)而更優(yōu)選地相對于PKC同工型δ、ε和 n而言至少10倍、更優(yōu)選20倍、最優(yōu)選100倍的選擇性。就PKC的α、β或θ同工型相對于一種或多種其他PKC同工型而言的選擇性可 以這樣測量比較化合物就α、β或θ PKC而言的IC5tl與該化合物就其他PKC同工型、例 如δ、ε、η而言的IC5Q。優(yōu)選地，選擇性可以這樣測定，計算化合物就δ、ε或nPKC同 工型而言的IC5tl與該化合物就α、β或θ PKC而言的IC5tl之比。IC50值例如可以按照下述PKC測定法獲得。在優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明化合物在下文提到的測定法中顯示出就α和β以 及任選地θ PKC而言1 μ M或以下、優(yōu)選IOnM或以下的IC5tl值。優(yōu)選地，本發(fā)明化合物顯示相對于PKC的α和β以及任選地θ同工型而言的選 擇性，以及相對于一種或多種其他蛋白激酶而言的選擇性，例如相對于一種或多種酪氨酸 激酶，或者相對于一種或多種不屬于CDK家族的絲氨酸/蘇氨酸激酶，例如相對于一種或多 種 PKA、PKB、Abl、Met、Src, Ins_R、Flt_3、JAK-2、KDR 和 Ret 蛋白，例如相對于一種或多種 Flt-3、JAK-2、KDR和Ret蛋白而言的選擇性。本發(fā)明化合物的游離形式或藥學(xué)上可接受的鹽形式可用于治療和/或預(yù)防由T淋 巴細(xì)胞和/或PKC介導(dǎo)的疾病或障礙，例如由α和β以及任選地θ PKC介導(dǎo)的疾病或障 礙，例如器官、組織或細(xì)胞同種異體移植或異種移植的急性或慢性排斥、移植物抗宿主病、 自身免疫病、炎性疾病、感染性疾病、癌癥或心血管疾病，例如心力衰竭。術(shù)語“移植物”以 及“細(xì)胞、組織或器官”包括例如皮膚、眼睛或眼睛的部分(例如角膜、視網(wǎng)膜、晶狀體)、骨 髓、肌肉、心、肺、心肺、肝、腎、胰腺(例如胰島細(xì)胞、β-細(xì)胞)、甲狀旁腺、腸(例如結(jié)腸、小 腸、十二指腸)、神經(jīng)元組織、骨和脈管系統(tǒng)(例如動脈、靜脈)。本發(fā)明的選擇性PKC抑制劑因此可用于治療和/或預(yù)防動脈粥樣硬化、由血管損 傷(例如血管成形術(shù))引起的血管閉塞、再狹窄、肥胖、X綜合征、葡萄糖耐量減低、多囊性卵 巢綜合征、高血壓、心力衰竭、慢性阻塞性肺病、CNS疾病(例如阿爾茨海默氏病或肌萎縮性 側(cè)索硬化)、癌癥、感染性疾病(例如AIDS、膿毒性休克或成人呼吸窘迫綜合征)、局部缺血 /再灌注損傷(例如心肌梗塞、中風(fēng)、腸缺血、腎衰竭或出血性休克)或者創(chuàng)傷性休克(例如 創(chuàng)傷性腦損傷)。本發(fā)明的同工酶選擇性PKC抑制劑也可用于治療和/或預(yù)防T-細(xì)胞介導(dǎo) 的急性或慢性炎性疾病或障礙或者自身免疫病，例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅
8斑狼瘡、橋本氏甲狀腺炎、多發(fā)性硬化、重癥肌無力、I或II型糖尿病和與之有關(guān)的障礙、呼 吸疾病(例如哮喘或炎性肺損傷)、炎性肝損傷、炎性小球損傷、免疫學(xué)_介導(dǎo)障礙或疾病 的皮膚表現(xiàn)、炎性與過度增殖性皮膚疾病(例如牛皮癬、特應(yīng)性皮炎、變應(yīng)性接觸性皮炎、 刺激物接觸性皮炎與進(jìn)一步的濕疹性皮炎、皮脂溢性皮炎)、炎性眼睛疾病(例如Sjoegren 綜合征、角膜結(jié)膜炎或眼色素層炎)、炎性腸疾病、克羅恩氏病或潰瘍性結(jié)腸炎。本發(fā)明的選擇性PKC抑制劑的游離形式或藥學(xué)上可接受的鹽形式表現(xiàn)寶貴的藥 理性質(zhì)，例如如下體外和體內(nèi)試驗所示。A.體外試驗1. PKC抑制劑的特異件和詵擇件的體外測定按照下列方法，測試本發(fā)明化合物對不同PKC同工型的活性。在具有非結(jié)合性表 面的白色透明底384-孔微量滴定平板中進(jìn)行測定。反應(yīng)混合物(25 μ 1)含有1.5 μ M十三 肽接受底物(它模擬PKCa的偽底物序列，并有Ala—Ser置換)、10μΜ 33P-ATPUOmM Mg (NO3) 2、0. 2mM CaCl2、蛋白質(zhì)濃度從25至400ng/ml不等的PKC (依賴于所使用的同位型)、 最終脂質(zhì)濃度為0. 5mM的脂囊泡(含有30mol %磷脂酰絲氨酸、5mol % DAG和65mol %磷脂 酰膽堿)和20mM Tris-HCl緩沖液pH 7. 4+0. 1% BSA。在室溫下溫育60min。加入50 μ 1 終止混合物(IOOmM EDTA, 200 μ M ΑΤΡ,Ο. 1% Triton X-100，0. 375mg/孔鏈霉抗生物素蛋 白-包被的SPA珠粒的磷酸緩沖鹽水溶液w/o Ca, Mg)以終止反應(yīng)。在室溫下溫育IOmin 后，使懸液在300g下自旋lOmin。在Trilux計數(shù)器中測量所摻入的放射性達(dá)lmin。溫育 濃度在l-ΙΟΟΟμΜ之間的抑制劑系列稀釋液，在常規(guī)基礎(chǔ)上進(jìn)行IC5tl測量。利用XX fit 軟件，通過曲線擬合從曲線圖計算IC5tl值。2.蛋白激酶C α測定法從Oxford Biomedical Research獲得人重組PKC α，用在上述Α. 1節(jié)下所述測定 條件下。在本測定法中，本發(fā)明化合物、例如式I化合物抑制PKCa的IC5tl彡ΙμΜ，優(yōu)選 ^ 10ηΜ。3.蛋白激酶Cf 1測定法從Oxford Biomedical Research獲得人重組PKC β 1，用在上述Α. 1節(jié)下所述測定 條件下。在本測定法中，本發(fā)明化合物、例如式I化合物抑制PKCM的IC5tl彡ΙμΜ，優(yōu)選 ^ 10ηΜ。4.蛋白激酶C δ測定法從Oxford Biomedical Research獲得人重組PKC δ，用在上述Α. 1節(jié)下所述測定 條件下。在本測定法中，本發(fā)明化合物、例如式I化合物抑制PKC δ的IC5tl < 1 μ Μ。5.蛋白激_ C ε測定法從Oxford Biomedical Research獲得人重組PKC ε，用在上述Α. 1節(jié)下所述測定 條件下。在本測定法中，本發(fā)明化合物、例如式I化合物抑制PKC ε的IC5tl < 1 μ Μ。6.蛋白激酶C η測定法從PanVera獲得人重組PKC η，用在上述Α. 1節(jié)下所述測定條件下。在本測定法 中，本發(fā)明化合物、例如式I化合物抑制PKC η的IC5tl彡ι μ Μ。7.蛋白激酶C θ測定法在上述測定條件下使用人重組PKC θ。在本測定法中，本發(fā)明化合物、例如式I化
9合物抑制PKC θ的IC5tl < 1 μ Μ。8.⑶28共同刺激測定法如 Baumann G 等在 Transplant. Proc. 1992 ；24 43-8, the β -galactosidase reporter gene being replaced by the luciferase gene(de ffetj.，et al.，Mol. Cell Biol. 1987，7 (2)，725-737)中所述，利用被人白介素_2啟動/報道基因構(gòu)建體轉(zhuǎn)染的 Jurkat細(xì)胞進(jìn)行測定。如下用固相-偶聯(lián)抗體或乙酸肉豆蔻佛波醇(PMA)和Ca++離子載體 離子霉素刺激細(xì)胞。就抗體-介導(dǎo)的刺激而言，在室溫下向Microlite TMl微量滴定平板 (Dynatech)每孔包被3 μ g/ml山羊抗-小鼠IgG Fc抗體(Jackson)的55 μ 1磷酸緩沖鹽水 (PBS)溶液達(dá)三小時。除去抗體后，用2%牛血清白蛋白(BSA)的PBS溶液(300 μ 1每孔) 在RT下溫育2小時，以封閉平板。用300 μ 1 PBS每孔洗滌三次后，加入lOng/ml抗-T細(xì) 胞受體抗體(WT31，Becton & Dickinson)和 300ng/ml 抗-CD28 抗體(15E8)的 50 μ 1 2% BSA/PBS溶液作為刺激性抗體，在4°C下溫育過夜。最后，將平板用300 μ 1 PBS每孔洗滌三 次。在單獨(dú)的平板中制備供試化合物在測定培養(yǎng)基(RPMI 1640/10%胎牛血清(FCS)，含有 50 μ Μ2-巰基乙醇，100單位/ml青霉素和100 μ g/ml鏈霉素)中的七份三倍系列稀釋液， 一式兩份，與所轉(zhuǎn)染的Jurkat細(xì)胞(克隆K22 290_H23)混合，在37°C下和5% CO2中溫育 30分鐘。然后將含有1 X IO5個細(xì)胞的100 μ 1這種混合物轉(zhuǎn)移至抗體-包被的測定平板。 以平行方式溫育100 μ 1與40ng/mlPMA和2 μ M離子霉素。在37°C下和5% CO2中溫育5. 5 小時后，借助生物發(fā)光測量法測定螢光素酶的水平。將平板在500g下離心lOmin，輕輕彈 去上清液。加入溶解緩沖液，其中含有25mM Tris-磷酸鹽pH 7. 8、2mMDTT、2mM 1，2_ 二氨 基環(huán)己烷-N，N，N'，N-四乙酸、10% (ν/ν)甘油和 (v/v) Triton X-100 (20 μ 1 每孔)。 在恒定搖動下，將平板在RT下溫育10分鐘。在自動加入50 μ 1每孔螢光素酶反應(yīng)緩沖液 后，利用生物發(fā)光讀數(shù)器(Labsystem，Helsinki, Finland)評估螢光素酶活性，所述緩沖 液含有 20mMTricine、l. 07mM(MgCO3)4Mg (OH) 2χ5Η20、2. 67mM MgS04、0. lmMEDTA、33. 3mM DTT, 27(^] 輔酶六、47(^]\1螢光素(Chemie BrunschwigAG)、530 μ M ATP, pH 7.8。遲滯時間為 0. 5秒，總測量時間為1或2秒。低對照值是來自抗-T細(xì)胞受體-或PMA-刺激的細(xì)胞的光 學(xué)單位，高對照來自抗-T細(xì)胞受體/抗-CD28-或PMA/離子霉素-刺激的細(xì)胞，沒有任何 供試樣品。從所有數(shù)值中減去低對照。計算在供試化合物的存在下所獲得的抑制作用，其 為高對照的抑制百分比。從劑量-反應(yīng)曲線測定供試化合物導(dǎo)致50%抑制的濃度(IC5tl)。 在本測定法中，式I化合物抑制抗-T細(xì)胞受體/抗-CD28和PMA/離子霉素刺激的Jurkat 細(xì)胞的IC50彡1 μ M。9.骨髓增殖(BM)測定法在100 μ 1 RPMI培養(yǎng)基中溫育來自CBA小鼠的骨髓細(xì)胞(2. 5 X IO4個細(xì)胞每孔，平 底組織培養(yǎng)微量滴定平板)，所述培養(yǎng)基含有10% FCSU00U/ml青霉素、100 μ g/ml鏈霉素 (Gibco BRL,Basel, Switzerland)、50μΜ2_巰基乙醇(Fluka,Buchs, Switzerland)、WEHI_3 條件培養(yǎng)基(7. 5% ν/ν)與L929條件培養(yǎng)基(3% ν/ν)作為生長因子源和經(jīng)過系列稀釋的 化合物。每種供試化合物進(jìn)行七個三倍稀釋步驟，一式兩份。溫育四天后，加入1 μ Ci 3H-胸 苷。另外五小時溫育期后收獲細(xì)胞，按照標(biāo)準(zhǔn)步驟測定所摻入的3H-胸苷。如下制備條件培 養(yǎng)基。使WEHI-3細(xì)胞(ATCC ΤΙΒ68)和L929細(xì)胞(ATCC CCL 1)在RPMI培養(yǎng)基中生長直 至匯合，分別達(dá)四天和一周。收獲細(xì)胞，在同一培養(yǎng)瓶中將WEHI-3細(xì)胞重新懸浮在含有1 %FCS (Schreier and Tees 1981)的培養(yǎng)基C中，將L929細(xì)胞重新懸浮在RPMI培養(yǎng)基中，溫 育兩天(WEHI-3)或一周(L929)。收集上清液，通過0. 2 μ m過濾，以等分試樣貯存在_80°C 下。使用沒有供試化合物并且沒有WEHI-3與L929上清液的培養(yǎng)物作為低對照值。從所有 數(shù)值中減去低對照值。沒有任何樣品的高對照被視為100%增殖。計算樣品的抑制百分比， 測定50%抑制所需濃度(IC5tl值)。10.同種異體混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)(MLR)測定法按照標(biāo)準(zhǔn)步驟進(jìn)行二路MLR(J. Immunol. Methods，1973，2，279 和 Meo Τ. et al.， Immunological Methods, New York, Academic Press，1979，227—39)。簡而言之,在 RPMI 培養(yǎng)基中溫育來自CBA和BALB/c小鼠的脾細(xì)胞(平底組織培養(yǎng)微量滴定平板的每孔中 每種品系1.6XlO5個細(xì)胞，總計3. 2XlO5個)，該培養(yǎng)基含有10% FCSU00U/ml青霉素、 100yg/ml 鏈霉素(Gibco BRL, Basel, Switzerland)、50 μ M 2-巰基乙醇(Fluka，Buchs, Switzerland)和經(jīng)過系列稀釋的化合物。每種供試化合物進(jìn)行七個三倍稀釋步驟，一式兩 份。溫育四天后，加入IyCi 3H-胸苷。另外五小時溫育期后收獲細(xì)胞，按照標(biāo)準(zhǔn)步驟測定 所摻入的3H-胸苷。MLR的背景值(低對照)是僅BALB/c細(xì)胞的增殖。從所有數(shù)值中減去 低對照。沒有任何樣品的高對照被視為100%增殖。計算樣品的抑制百分比，測定50%抑 制所需濃度(IC5tl值)。優(yōu)選地，根據(jù)MLR測定法的測定，本發(fā)明化合物顯示低于100 μ M、優(yōu) 選低于10 μ Μ、更優(yōu)選低于1 μ M的IC50值。B.體內(nèi)大鼠心臟移植術(shù)所使用的品系組合雄性Lewis (RT1單元型)和BN(RT1單元型)。將動物用吸入 性異氟醚(isofluorane)麻醉。用肝素處理供體大鼠的腹部下腔靜脈，同時經(jīng)由主動脈驅(qū) 血之后，打開胸腔，迅速冷卻心臟。結(jié)扎主動脈，在第一分支遠(yuǎn)端分開，在第一分叉處分開頭 臂主干。結(jié)扎左肺動脈，分開，右側(cè)分開但是維持開放。切除所有其他血管，結(jié)扎，分開，取 出供體心臟置于冰鹽水中。受體作如下準(zhǔn)備，切開和交叉夾緊腎下腹部主動脈和腔靜脈。植入移植物，使用 10/0單絲縫合線，在供體頭臂主干與受體主動脈之間和供體右肺動脈與受體腔靜脈之間進(jìn) 行末端-邊側(cè)吻合術(shù)。除去夾子，在腹部后系住移植物，將腹部內(nèi)容物用溫鹽水洗滌，縫合 動物，在加熱燈下恢復(fù)。每日通過腹部壁觸診跳動的供體心臟，監(jiān)測移植物的存活。當(dāng)心臟 跳動停止時，認(rèn)為排斥是完全的。在用口服施用的式I化合物處理的動物中獲得移植物存 活率的增力口，每日劑量為1至150mg/kg bid，優(yōu)選1至30mg/kg bid或10至100mg/kg bid。移植物抗宿主模型將來自Wistar/F大鼠的脾細(xì)胞(2X IO7)皮下注射到(ffistar/F χ Fischer344) F1雜交大鼠的右后足墊內(nèi)。左足墊未作處理。將動物用供試化合物連續(xù)處理4天(0-3)。 在第7天除去胭淋巴結(jié)，測定兩個對應(yīng)淋巴結(jié)之間的重量差異。比較實驗組淋巴結(jié)重量差 異與未用供試化合物處理動物組的對應(yīng)淋巴結(jié)重量差異，結(jié)果表示為對淋巴結(jié)增大的抑制 率(以百分比給出)。選擇性PKC抑制劑化合物的代表性實例例如包括式I的吲哚基馬來酰亞胺衍生物
權(quán)利要求
游離形式或藥學(xué)上可接受的鹽形式的PKC抑制劑化合物的用途，用于生產(chǎn)治療或預(yù)防由T淋巴細(xì)胞和/或PKC介導(dǎo)的疾病或障礙，特別是同種異體移植排斥、移植物抗宿主疾病、自身免疫病、感染性疾病、炎性疾病、心血管疾病或癌癥的藥物，其中所述化合物具有就PKCα、PKCβ和任選地PKCθ相對于一種或多種其他PKC同工型而言至少10倍的選擇性，該選擇性是如通過該化合物對于不是PKCα和PKCβ、并且任選地不是PKCθ的PKC的IC50與該化合物對于PKCα、PKCβ或PKCθ的IC50之比所測量的。
2.游離形式或藥學(xué)上可接受的鹽形式的PKC抑制劑化合物，其中所述化合物具有就 PKC相對于一種或多種不屬于CDK-家族的蛋白激酶而言的選擇性，和如根據(jù)權(quán)利要求1所 測量的就PKC a、PKC β和任選地PKC θ相對于一種或多種其他PKC同工型而言至少10倍 的選擇性。
3.游離形式或藥學(xué)上可接受的鹽形式的PKC抑制劑化合物，其中所述化合物具有就 PKCa ,PKC β和任選地PKC θ相對于一種或多種其他PKC同工型而言至少10倍的選擇性， 并且如根據(jù)同種異體混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)(MLR)測定法所測定的所述化合物的IC5tl值與根據(jù) 骨髓增殖(BM)測定法所測定的所述化合物的IC5tl值之比高于5。
4.游離形式或藥學(xué)上可接受的鹽形式的PKC抑制劑化合物，其中所述化合物具有如根 據(jù)權(quán)利要求1所測量的就PKC a、PKC β和PKC θ相對于一種或多種其他PKC同工型而言至 少10倍的選擇性。
5.式I化合物或其鹽，其中Ra是H ；C1^4烷基；或者被OH、NH2、NHC^4烷基或Ν( 二 烷基)2取代的C1^烷基； Rb、R。、Rd和民之一是鹵素、CV4烷氧基、Cy烷基、CF3或CN，其他三個取代基各自是H ； 或者Rb、Rc、Rd和Re都是H ；R是式(a)、(b)或(c)的原子團(tuán)
6.根據(jù)權(quán)利要求5的化合物，其中Ra是H或甲基；每一R2、R20和R2tla獨(dú)立地是H、Cl、 NO2, F、CF3或甲基；η是0或1 ；Rb、R。、Rd和Re之一是甲基或乙基，其他三個取代基是H ；或 者Rb、R。、Rd和Re都是H ；每一 R3和R4獨(dú)立地是H、甲基、乙基或異丙基；或者R3和R4與它 們所結(jié)合的氮原子一起形成任選被取代的雜環(huán)殘基；每一 RpRltl和Rltla獨(dú)立地是雜環(huán)殘基。
7.游離形式或藥學(xué)上可接受的鹽形式的根據(jù)權(quán)利要求5或6的化合物，其選自3-[5-氯-2-(4-甲基-哌嗪-1-基)_吡啶-4-基]-4-(1Η-吲哚_3_基)-吡咯-2， 5_ 二酮、3- (2-氯-7- 二甲氨基甲基-萘-1-基)-4- (1-甲基-IH-吲哚-3-基)-吡咯-2，5- 二酮、3- (7-氨基甲基-2-氯-萘-1-基)-4- (1-甲基-IH-吲哚-3-基)-吡咯-2，5- 二酮、 3-(2-氯-7-甲氨基甲基-萘-1-基)-4-(1Η-吲哚-3-基)-吡咯-2，5- 二酮、 3- (2-氯-7-甲氨基甲基-萘-1-基)-4- (1-甲基-IH-吲哚-3-基)-吡咯-2，5- 二酮、3- (2-氯-7-甲氨基甲基-萘-1-基)-4- (7-甲基-IH-吲哚_3_基)-吡咯-2，5- 二酮、3- (2-氯-7-甲氨基甲基-萘-1-基)-4- (6-甲基-IH-吲哚_3_基)-吡咯-2，5- 二酮、3- (2-氯-7-甲氨基甲基-萘-1-基)-4- (5-甲基-IH-吲哚_3_基)-吡咯-2，5- 二酮、3- (2-氯-7- 二甲氨基甲基-萘-1-基)-4- (7-甲基-IH-吲哚_3_基)-吡咯-2，5- 二酮、3- (2-氯-7- 二甲氨基甲基-萘-1-基)-4- (1H-吲哚-3-基)-吡咯-2，5- 二酮、 3- (2-氯-7- 二甲氨基甲基-萘-1-基)-4- (6-甲基-IH-吲哚_3_基)-吡咯-2，5- 二酮、3- (2-氯-7- 二甲氨基甲基-萘-1-基)-4- (5-甲基-IH-吲哚_3_基)-吡咯-2，5- 二酮、3-{2-氯-7-[(乙基-甲基-氨基)_甲基]-萘-1-基}-4-(1-甲基-IH-吲 哚-3-基)-吡咯-2，5-二酮、3- (2-氯-7- 二乙氨基甲基-萘-1-基)-4- (1-甲基-IH-吲哚-3-基)-吡咯-2，5- 二酮、3- (2-氯-7-乙氨基甲基-萘-1-基)-4- (1-甲基-IH- B引哚_3_基)-吡咯-2，5- 二酮、3-[2_氯-7-(異丙基氨基-甲基)-萘-1-基]-4-(l-甲基-IH-吲哚-3-基)-吡 咯-2，5-二酮、3-[2-氯-7-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)萘-1-基]-4-(1-甲基-IH-吲哚-3-基)-吡 咯-2，5-二酮、3- (2-氯-7-吡咯烷-1-基甲基-萘-1-基)-4- (1-甲基-IH-吲哚_3_基)-吡咯-2， 5_ 二酮、3-(7-氨基甲基-2-甲基-萘-1-基)_4-(1，7- 二甲基-IH- B引哚_3_基)-吡咯-2， 5_ 二酮、3- (7-氨基甲基-2-甲基-萘-1-基)-4- (7-甲基-IH-吲哚_3_基)-吡咯-2，5- 二酮、3-(7-氨基甲基-2-甲基-萘-1-基)-4-(lH- B引哚_3_基)-吡咯-2，5- 二酮、 3- (7-氨基甲基-2-甲基-萘-1-基)-4- (1-甲基-IH-吲哚-3-基)-吡咯-2，5- 二酮、3- (7-氨基甲基-萘-1-基)-4- (1-Η-吲哚-3-基)-吡咯-2，5- 二酮、3-(7-氨基甲基-萘-1-基)-4-(1-甲基-IH- B引哚-3-基)-吡咯-2，5- 二酮、3- (7-氨基-萘-1-基)-4- (1-甲基-IH- B引哚-3-基)-吡咯-2，5- 二酮、3- (7-氨基-萘-1-基)-4- (1H- B引哚-3-基)-吡咯-2，5- 二酮、3- (7- 二甲氨基甲基-2-氟-萘-1-基)-4- (7-甲基-IH-吲哚_3_基)-吡咯-2，5- 二酮、3- (7- 二甲氨基甲基-2-氟-萘-1-基)-4- (1H- B引哚_3_基)-吡咯-2，5- 二酮、3- (1-甲基-IH-吲哚-3-基)-4- [5- (4-甲基-哌嗪基)-吡啶_3_基]-吡咯-2， 5_ 二酮、3- (1H-吲哚-3-基)-4- [5- (4-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶_3_基]-吡咯-2，5- 二酮、3-(7-甲基-IH-吲哚-3-基)-4-[5-(4_甲基-哌嗪-1-基)_2_三氟甲基-吡 啶-3-基]-吡咯_2，5-二酮、3- (1H-吲哚-3-基)-4-[5- (4-甲基-哌嗪-1-基)-2-三氟甲基-吡啶_3_基]-吡 咯-2，5-二酮、3-(1-甲基-IH-吲哚-3-基)-4-[5-(4-甲基-哌嗪-1-基)_2_三氟甲基-吡 啶-3-基]-吡咯-2，5-二酮、3- (7-甲基-IH-吲哚-3-基)-4- [5- (4-甲基-哌嗪基)-吡啶_3_基]-吡咯-2， 5_ 二酮、3- (1H-吲哚-3-基)-4- [5- (4-甲基-哌嗪-1-基)-2-硝基-吡啶_3_基]-吡咯-2， 5_ 二酮、3- [2-氯-5- (4-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-基]-4- (7-甲基-IH-吲哚_3_基)-吡 咯-2，5-二酮、3- (1H-吲哚-3-基)-4- [5-甲基-2- (4-甲基-哌嗪基)-吡啶_4_基]-吡咯-2， 5_ 二酮、3- (1H-吲哚-3-基)-4- [2- (4-甲基-哌嗪-1-基)-5-硝基-吡啶_4_基]-吡咯-2， 5_ 二酮、3- (1H-吲哚-3-基)-4- [2- (4-甲基-哌嗪-1-基)-5-三氟甲基-吡啶_4_基]-吡 咯-2，5-二酮。
8.游離形式或藥學(xué)上可接受的鹽形式的根據(jù)權(quán)利要求5至7任意一項的化合物，其用 作藥物。
9.根據(jù)權(quán)利要求2至7任意一項的化合物，其用于治療或預(yù)防由T淋巴細(xì)胞和/或PKC 介導(dǎo)的疾病或障礙，特別是同種異體移植排斥、移植物抗宿主疾病、自身免疫病、感染性疾 病、炎性疾病、心血管疾病或癌癥。
10.藥物組合物，其包含游離形式或藥學(xué)上可接受的鹽形式的根據(jù)權(quán)利要求2至7任意 一項的化合物和與之結(jié)合的藥學(xué)上可接受的稀釋劑或載體。
11.游離形式或藥學(xué)上可接受的鹽形式的根據(jù)權(quán)利要求2至7任意一項的化合物或者 根據(jù)權(quán)利要求10的藥物組合物的用途，用于生產(chǎn)治療或預(yù)防由T淋巴細(xì)胞和/或PKC介導(dǎo) 的疾病或障礙，特別是同種異體移植排斥、移植物抗宿主疾病、自身免疫病、感染性疾病、炎 性疾病、心血管疾病或癌癥的藥物。
12.藥物組合，其包含游離形式或藥學(xué)上可接受的鹽形式的根據(jù)權(quán)利要求2至7任意一 項的化合物，和選自免疫抑制劑、免疫調(diào)節(jié)劑、抗炎劑、化學(xué)治療劑、抗增殖劑和抗糖尿病 劑的另一種治療劑。
13.生產(chǎn)根據(jù)權(quán)利要求5或6的化合物的方法，該方法包括將式II化合物
14.治療或預(yù)防需要這種治療的受試者中由T淋巴細(xì)胞和/或PKC介導(dǎo)的障礙或疾病、 特別是同種異體移植排斥、移植物抗宿主疾病、自身免疫病、感染性疾病、炎性疾病、心血管 疾病或癌癥的方法，該方法包括對所述受試者施用有效量的PKC抑制劑或其藥學(xué)上可接受 的鹽，所述PKC抑制劑具有如根據(jù)權(quán)利要求1所測量的就PKC α、PKC β和任選地PKC θ相 對于一種或多種其他PKC同工型而言至少10倍的選擇性。
15.治療或預(yù)防需要這種治療的受試者中由T淋巴細(xì)胞和/或PKC介導(dǎo)的障礙或疾病、 特別是同種異體移植排斥、移植物抗宿主疾病、自身免疫病、感染性疾病、炎性疾病、心血管 疾病或癌癥的方法，該方法包括對所述受試者施用有效量的根據(jù)權(quán)利要求2至7任意一項 的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。
全文摘要
本發(fā)明涉及PKC抑制劑，它們能夠選擇性地抑制PKC的例如α、β和任選地θ同工型，和它們特別是在移植術(shù)中的用途。
文檔編號C07D403/14GK101933926SQ201010159460
公開日2011年1月5日 申請日期2005年1月19日 優(yōu)先權(quán)日2004年1月19日
發(fā)明者J·瓦格納, J-P·埃弗努, M·范艾斯, P·馮馬特, W·舒勒 申請人:諾瓦提斯公司