專利名稱：從馬錢子中提取士的寧的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從馬錢子中提取士的寧的方法。
背景技術(shù)：
馬錢子性味苦、寒，有大毒，歸肝、脾經(jīng)，有散結(jié)消腫、通絡(luò)止痛之功效，用于跌打 損傷、腫痛、風(fēng)濕麻痹、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)痛、麻木癱瘓等病癥。馬錢子主要活性成分為吲哚類生 物堿，總生物堿含量約為3% -5%，其中士的寧(strychnine)和馬錢子堿(brucine)約 占80%，尚含番木鱉次堿、馬錢子新堿、偽番木鱉堿、偽馬錢子堿、番木鱉堿N氧化物、馬錢 子堿N氧化物等多種生物堿。士的寧能競爭性與脊髓甘氨酸受體結(jié)合，阻斷甘氨酸對脊髓 有抑制作用，可提高骨骼肌的緊張度；小劑量應(yīng)用士的寧可興奮大腦皮層的感覺分析器，使 視覺、聽覺及嗅覺更為敏銳。硝酸士的寧注射液為藥典二部收錄品種，規(guī)格為Iml Img, Iml 2mg，臨床上用于巴比妥類藥物中毒、偏癱、弱視的治療。馬錢子水提液十分混濁，是一種復(fù)雜的固液分散體系，由真溶液、膠體溶液、乳濁 液和混懸液組成的混合分散體系。馬錢子水提取液的微粒按組成分為藥渣性微粒(藥材 組織物)、難溶性和不溶性成分的多分子聚集體、細(xì)胞碎片及其聚集物。微粒一般具有親水 性、帶有電荷和雙電層、微粒之間存在范德華力作用、雙電層相互排斥作用、溶劑化作用、疏 水化作用、空間位阻效應(yīng)等相互作用；馬錢子為種子類藥材，含大量淀粉、蛋白質(zhì)等水溶大 分子物質(zhì)，水溶性大分子是天然的表面活性劑，具有增溶、助懸、乳化、潤濕的作用，且可作 為疏水性膠體的保護(hù)物，從而使難溶性成分、乳濁液微滴、固體微粒在水中具有較強(qiáng)的穩(wěn)定 性。馬錢子表面長滿細(xì)密的茸毛，其水提液含有大量茸毛，即使采用乙醇沉淀的方法也難以 除盡。將馬錢子水提液濃縮后，調(diào)節(jié)PH值至堿性，用親脂性有機(jī)溶劑萃取過程中極易乳化， 萃取操作難以完成。有機(jī)絮凝劑是一種高分子聚合物，它的分子量很大，通過長碳鏈上的一 些活性官能團(tuán)可以吸附馬錢子水提液的微粒。由于絮凝劑是較長的線狀結(jié)構(gòu)，有許多官能 團(tuán)，在同一個分子上可吸附多個微粒，因而它在微粒之間起了聯(lián)系的作用，這種作用稱為架 橋作用。因此絮凝劑可以將許多微粒連結(jié)在一起形成一個絮團(tuán)，絮團(tuán)逐漸增長變成較大的 絮團(tuán)，因而加快了微粒的沉降速度。馬錢子水提液吸附澄清后，可以混濁狀態(tài)變?yōu)槌吻宓囊?體，提取液中雜質(zhì)大大減少。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種環(huán)境友好、低成本從馬錢子提取士的寧的方法。本發(fā)明目的通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的，包括以下步驟(1)馬錢子粗粉(全部通過10目篩，通過50目篩粉末不超過20%)，水回流提取， 濃縮提取液；(2)濃縮液加高分子絮凝劑吸附澄清；(3)澄清液加堿調(diào)節(jié)堿性，收集沉淀A ；(4)稀酸溶解沉淀A，濾去不溶物，濾液調(diào)堿性析出沉淀B ；
(5)稀鹽酸溶解沉淀B，結(jié)晶，得鹽酸士的寧粗結(jié)晶；(6)重結(jié)晶。 步驟(1)水用量為馬錢子質(zhì)量5-16倍，加熱到回流提取1-4次，時間60-180 分鐘；濃縮可為常溫或減壓濃縮，優(yōu)選為減壓濃縮；濃縮比例為馬錢子粗粉濃縮液= Ig 2-10ml。步驟(2)絮凝劑可為明膠、海藻酸鈉、瓊脂、甲殼素及其衍生物、殼聚糖、101果汁 澄清劑、聚凝凈、ZTCl十1天然澄清劑、交聯(lián)聚維酮、聚丙烯酸鈉、聚對苯二甲酸乙二醇酪中 的一種，優(yōu)選絮凝劑為殼聚糖；具體的是在IOOml濃縮液加入殼聚糖的乙酸溶液(Ig殼 聚糖溶解于IOOmll %的乙酸溶液中)10-50ml，優(yōu)選20_35ml ；絮凝溫度為20_90°C，較好溫 度為60-80°C，澄清時間為30-300分鐘。步驟(3)所用堿可為氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣及氨水等堿性物質(zhì)，優(yōu)選為 5-15%的氫氧化鈉。步驟(4)所用稀酸可為硫酸、磷酸等0. 1-15%的無機(jī)中強(qiáng)酸，優(yōu)選為1-5%硫酸； 所用堿同步驟(3)。文獻(xiàn)報(bào)道從馬錢子中提取士的寧經(jīng)典方法如下用石灰水浸泡馬錢子，再以苯作 溶劑提取并回收大部分苯后以鹽酸萃取，萃取液析出士的寧粗結(jié)晶，重結(jié)晶獲取高純度的 鹽酸士的寧。缺點(diǎn)為溶劑價格高，環(huán)境污染大，安全性差(苯的毒性大)，而且對設(shè)備要求嚴(yán) 格，需嚴(yán)防溶劑泄露。與傳統(tǒng)的士的寧制備技術(shù)相比，本法使用水為提取溶劑，環(huán)境污染??； 生產(chǎn)設(shè)備要求低，不消耗有機(jī)溶劑，生產(chǎn)成本低。士的寧在水中溶解度極小，馬錢子水提濃 縮液調(diào)PH值至堿性時士的寧沉淀析出，但沉淀含大量雜質(zhì)，后續(xù)制備工作難以開展，所以 對馬錢子水提濃縮液進(jìn)行吸附澄清，澄清液調(diào)PH值至堿性則沉淀物中雜質(zhì)含量大大降低， 便于后續(xù)的精制。同時馬錢子含最較多另一種生物堿——馬錢子堿，馬錢子堿在水中溶解 度明顯比士的寧高，因而在沉淀中含較少。與傳統(tǒng)制備士的寧方法高相比，本法制備的產(chǎn)品 純度高。因此本發(fā)明作為一個整體全新方案，很適合從馬錢子提取制備士的寧。
具體實(shí)施例方式下面通過實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明。應(yīng)該理解的是，本發(fā)明的實(shí)施例是用于說 明而不是對本發(fā)明的限制。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)質(zhì)對本發(fā)明進(jìn)行的簡單改進(jìn)都屬于本發(fā)明要 求保護(hù)的范圍。本發(fā)明各實(shí)施例所得的晶體均采用高效液相色譜法測定士的寧的含量，色 譜條件如下色譜柱C-18柱(4. 6mmX 250mm, 5m)，大連依特公司；流動相為乙腈-水(含 O.Olmol/L磷酸二氫鉀和0.005mol/L庚烷磺酸鈉，10%的磷酸調(diào)PH2.8) (21 79)；檢測波 長:260nm ；柱溫:40°C ；流速0. 8ml/min。實(shí)施例一取馬錢子粗粉200克，第一次加水煎煮2000ml煎煮2小時，第二次加水煎煮 1600ml煎煮1. 5小時，第三次加水煎煮1200ml煎煮1. 0小時。靜置去濾渣，合并濾液，按照 馬錢子粗粉濃縮液=Ig 5ml的濃縮比例濃縮；加入含的殼聚糖的乙酸溶液200ml， 80°C水浴吸附澄清。澄清液用10%的NaOH調(diào)pH值12，靜置收集沉淀物A ；沉淀物A用5% H2SO4溶解，濾過除去不溶物，再用10%的NaOH調(diào)pH值12，收集沉淀B。沉淀B用5% HCl 溶解，過濾后結(jié)晶；粗結(jié)晶物溶解后重結(jié)晶，得95. 3%鹽酸士的寧0. 86克。
實(shí)施例二 取馬錢子粗粉200克，第一次加水煎煮1600ml煎煮2小時，第二次加水煎煮 1200ml煎煮1. 5小時，第三次加水煎煮1200ml煎煮1. 0小時。靜置去濾渣，合并濾液，按照 馬錢子粗粉濃縮液=Ig 4ml的濃縮比例濃縮；加入含的殼聚糖的乙酸溶液250ml， 60°C水浴吸附澄清。澄清液用10%的NaOH調(diào)pH值12，靜置收集沉淀物A ；沉淀物A用3% H2SO4溶解，濾過除去不溶物，再用10%的NaOH調(diào)pH值12，收集沉淀B。沉淀B用5% HCl 溶解，過濾后結(jié)晶；粗結(jié)晶物溶解后重結(jié)晶，得94. 9%鹽酸士的寧0.81克。實(shí)施例三 取馬錢子粗粉200克，第一次加水煎煮2000ml煎煮2小時，第二次加水煎煮 1600ml煎煮1. 5小時。靜置去濾渣，合并濾液，按照馬錢子粗粉濃縮液=Ig 5ml的濃 縮比例濃縮；加入含的殼聚糖的乙酸溶液220ml，80°C水浴吸附澄清。澄清液用10%的 NaOH調(diào)pH值12，靜置收集沉淀物A ；沉淀物A用5% H2SO4溶解，濾過除去不溶物，再用10% 的NaOH調(diào)pH值12，收集沉淀B。沉淀B用5% HCl溶解，過濾后結(jié)晶；粗結(jié)晶物溶解后重 結(jié)晶，得94. 7%鹽酸士的寧0. 73克。實(shí)施例四取馬錢子粗粉200克，第一次加水煎煮2000ml煎煮2小時，第二次加水煎煮 1600ml煎煮1. 5小時。靜置去濾渣，合并濾液，按照馬錢子粗粉濃縮液=Ig 4ml的濃 縮比例濃縮；加入含的殼聚糖的乙酸溶液180ml，80°C水浴吸附澄清。澄清液用10%的 NaOH調(diào)pH值12，靜置收集沉淀物A ；沉淀物A用5% H2SO4溶解，濾過除去不溶物，再用10% 的NaOH調(diào)pH值12，收集沉淀B。沉淀B用5% HCl溶解，過濾后結(jié)晶；粗結(jié)晶物溶解后重 結(jié)晶，得95. 7%鹽酸士的寧0.71克。對照例取馬錢子粗粉200克，加300ml的石灰水浸泡后，第一次加氯仿煎煮2000ml煎煮2 小時，第二次加氯仿煎煮1600ml煎煮1. 5小時，第三次加氯仿煎煮1200ml煎煮1. 0小時， 合并濾液，回收氯仿至400ml，40ml6% HCl萃取，萃取液結(jié)晶；粗結(jié)晶物溶解后重結(jié)晶，得 91. 3%鹽酸士的寧0. 92克。
權(quán)利要求
從馬錢子中提取士的寧的方法，其特征在于，包括以下步驟(1)馬錢子粗粉，水回流提取，提取液濃縮，濃縮比例為馬錢子粗粉∶濃縮液＝1g∶2-10ml；(2)濃縮液加高分子絮凝劑吸附澄清；(3)澄清液調(diào)節(jié)pH值至10-13，收集沉淀A；(4)0.1-15％硫酸或磷酸溶液溶解沉淀A，濾去不溶物，濾液調(diào)節(jié)pH值至10-13，析出沉淀B；(5)稀鹽酸溶解沉淀B，結(jié)晶，得鹽酸士的寧粗結(jié)晶；(6)重結(jié)晶即得終產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的馬錢子粗粉全部通過10目篩，通過 50目篩粉末不超過20wt%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)水用量為馬錢子粗粉質(zhì)量的 5-16倍，加熱回流提取1-4次，每次60-180分鐘。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(2)的絮凝劑包括明膠、海藻酸鈉、 瓊脂、甲殼素及其衍生物、殼聚糖、101果汁澄清劑、聚凝凈、ZTCl十1天然澄清劑、交聯(lián)聚維 酮、聚丙烯酸鈉、聚對苯二甲酸乙二醇酪中的一種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的方法，其特征在于，步驟(2)的絮凝劑為殼聚糖。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，先將Ig殼聚糖溶于IOOml的乙酸中， 得到殼聚糖的乙酸溶液，再在每IOOml濃縮液中加入所述的殼聚糖的乙酸溶液10-50ml，絮 凝溫度為20-90°C，澄清時間為30-300min。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，每IOOml濃縮液加入所述的殼聚糖的乙酸 溶液 20-35ml，溫度為 60-80°C。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(4)中用1-5%硫酸溶解沉淀A。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(3)與步驟⑷調(diào)pH值時用氫氧化 鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣或氨水溶液。
10.根據(jù)權(quán)利要求1或9所述的方法，其特征在于，步驟(3)與步驟(4)調(diào)PH值時用 5-15%的氫氧化鈉溶液。
全文摘要
本發(fā)明公開了從中藥馬錢子中提取士的寧的方法，包括以下步驟(1)馬錢子粗粉，水回流提取，濃縮提取液；(2)濃縮液加入高分子絮凝劑進(jìn)行吸附澄清；(3)澄清液加堿調(diào)節(jié)堿性，收集沉淀A；(4)稀硫酸溶解沉淀A，濾去不溶物，濾液調(diào)堿性析出沉淀B；(5)稀鹽酸溶解沉淀B，結(jié)晶，得鹽酸士的寧粗結(jié)晶；(6)鹽酸士的寧重結(jié)晶。本方法與傳統(tǒng)的士的寧制備技術(shù)相比，具有環(huán)境污染小、生產(chǎn)成本低、產(chǎn)品純度高的優(yōu)勢。
文檔編號C07D491/22GK101838273SQ20101017437
公開日2010年9月22日 申請日期2010年5月17日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月17日
發(fā)明者吳萍, 張令君, 李湘玲, 湯淮波, 王國俊, 龍?jiān)?申請人:湘潭大學(xué)