專利名稱：一種分離藏茵陳中*酮化學(xué)成分的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藏茵陳化學(xué)成分的提取方法，更加具體的說涉及一種分離藏茵陳 中口山酮化學(xué)成分的方法。
背景技術(shù)：
藏茵陳是西藏青海、四川、云南、甘肅等地藏醫(yī)常用的民間草藥之一，很早就用于 肝膽疾病，尤以治療急性肝炎黃疽而享譽(yù)中外。而對(duì)于藏茵陳中化學(xué)成分的研究卻較為落后。
中國發(fā)明專利(專利號(hào)=92108809. 4)公開了一種藏茵陳有效成分的提取工藝、 設(shè)備和藏茵陳片劑的生產(chǎn)方法，用藏茵陳草為原料，乙醇為提取劑。連續(xù)提取工序生產(chǎn) 特征是浸膏粉為45 90%，輔料為10 55%的藏茵陳片劑；中國發(fā)明專利(專利號(hào) 200710061832. 4)公開了一種由提取、除雜、濃縮、初步分離、吸附分離、濃縮、干燥、粉碎、 進(jìn)一步精制等工藝制備而成的藏茵陳有效成分的提取方法，采用提取溶劑水、乙醇提取，乙 醇可回收利用，不污染環(huán)境；超聲輔助提取可縮短提取時(shí)間，提高提取效率，減少能源消耗； 采用離心、大孔樹脂吸附等處理可以保留有效成分，最大限度除去雜質(zhì)，將中藥作精、作細(xì)， 減少服用劑量，可以方便的處理成多種劑型；中國發(fā)明專利(專利號(hào)=200710163097. 8)公 開了一種藏茵陳提取物，包含獐牙菜苦苷、龍膽苦苷、獐牙菜苷、芒果苷、異葒草苷，所述五 種成分的質(zhì)量比為(0. 04 0. 71) (20 40) (1 15) (1. 6 26) (0. 01 0. 16)；中國發(fā)明專利申請(qǐng)(申請(qǐng)?zhí)?00910078578.8)公開了一種藏茵陳提取物，其中至少 含總黃酮，以該藏茵陳提取物總重為100%計(jì)，該總黃酮占該藏茵陳提取物的20 75%。但 是上述藏茵陳提取方法只是涉及藏茵陳浸膏的提取。而對(duì)于藏茵陳中化學(xué)成分的提取方法 卻很少有報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述問題，本發(fā)明提供了一種分離藏茵陳中_酮化學(xué)成分的方法，其特 征在于包括以下步驟1)獲取藏茵陳提取物水溶液；2)采用石油醚、汽油、環(huán)己烷或正己烷中的一種或一種以上的混合液對(duì)藏茵陳提 取物水溶液進(jìn)行萃取得到母液I和有機(jī)相I，采用三氯甲烷、四氯甲烷、二氯甲烷、乙醚或 乙酸乙酯中的一種或一種以上的混合液對(duì)母液I進(jìn)行萃取得到母液II和有機(jī)相II，回收有 機(jī)相II得到成分組II ；3)采用溫度為15 85°C乙醇或甲醇溶解成分組II，冷卻，析出絮狀沉淀，過濾絮 狀沉淀得到黃色母液；4)回收黃色母液至干，氯仿加熱溶解殘?jiān)?，上硅膠柱，采用濕法裝柱，濕法上柱，洗 脫條件為依次采用石油醚_氯仿、石油醚_丙酮、氯仿等系統(tǒng)為流動(dòng)相洗脫，根據(jù)色帶分段 接收流動(dòng)相；
5)濃縮每段流動(dòng)相，結(jié)晶得到各個(gè)口山酮成分。步驟5得到的_酮化學(xué)成分包括1、1，5，8_三羥基-3-甲氧基_酮，分子式為C14H1Q06 ；其結(jié)構(gòu)式如下 2、1，7，8-三羥基-3-甲氧基_酮，分子式為C14H1Q06，，其結(jié)構(gòu)式如下 3、1，8-二羥基-3,5-二甲氧基_酮，分子式為(5111206，其結(jié)構(gòu)式如下 4、1_羥基_3，7，8-三甲氧基_酮，化合物分為(16111406，其結(jié)構(gòu)式如下 5、1-羥基-3，5-二甲氧基_酮，化分子式為(15111205，其結(jié)構(gòu)式如下 6,1,8- 二羥基-3, 5- 二甲氧基_酮，化合物分子式為C15H1206，其結(jié)構(gòu)式如下
7、8_羥基-1，3，5-三甲氧基_酮，化合物分子式為C16H1406，其結(jié)構(gòu)式如下
所述的提取藏茵陳提取物水溶液為分別用90%乙醇、60%乙醇、30%乙醇和水 的滲濾同一藥材，合并上述滲漉液，回收至無乙醇?xì)埩?，得到藏茵陳提取物水溶液。本發(fā)明的有益技術(shù)效果是本發(fā)明分離出_酮化學(xué)成分的純品，對(duì)于考察藏茵陳 的藥理作用，和藥品的研發(fā)和生產(chǎn)具有重要的意義?；鶎⒒瘜W(xué)成分分離成為幾個(gè)極異較大 的成分組，對(duì)_酮類化學(xué)成分進(jìn)行柱層析分離，較以浸膏提取物上為后期的柱層析分離成 本更低。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1稱取20kg藏茵陳藥材，烘干，粉碎，用90%乙醇浸潤發(fā)脹，填裝在直徑20cm的滲漉 桶中；浸泡6小時(shí)后，以每分鐘1 2mL的速度，開始滲漉，接收3倍體積，得到90%乙醇滲 漉液；在滲漉桶中添加60%乙醇，浸泡6小時(shí)后，以每分鐘1 2mL的速度，開始滲漉，接收 3倍體積，得到60%乙醇滲漉液；在滲漉桶中添加30%乙醇，浸泡6小時(shí)后，以每分鐘1 2mL的速度，開始滲漉，接收3倍體積，得到30%乙醇滲漉液；在滲漉桶中添加水，浸泡6小 時(shí)后，以每分鐘1 2mL的速度，開始滲漉，接收3倍體積，得到水滲漉液。分別將上述乙醇滲漉液和水滲漉液減壓回收至無醇味，合并，得到藏茵陳提取物 水溶液。采用以60 90°C石油醚或汽油，以有機(jī)相藏茵陳提取物水溶液=1 3的體積 比加入有機(jī)相，萃取藏茵陳提取物水溶液，以母液粘度和水粘度接近為考察標(biāo)準(zhǔn)，決定萃取 次數(shù)，得到母液I和有機(jī)相I ；石油醚萃取效果好，但是成本較高，在小規(guī)模提取時(shí)采用石 油醚為有機(jī)相，大規(guī)模提取時(shí)采用汽油為有機(jī)相。采用三氯甲烷、二氯甲烷中的一種對(duì)母液I進(jìn)行萃取，以有機(jī)相母液I = 1 3 的體積比加入有機(jī)相，萃取藏茵陳提取物水溶液，以_酮的轉(zhuǎn)移率>95%為考察標(biāo)準(zhǔn)，決定 具體萃取次數(shù)，得到母液II和有機(jī)相II ；在室溫較高時(shí)采用氯仿為有機(jī)相，在室溫較低時(shí)采 用二氯甲烷為有機(jī)相。分別減壓回收有機(jī)相II得到成分組II。采用溫度為15 85°C乙醇或甲醇溶解成分組II，冷卻，析出絮狀沉淀，過濾絮狀 沉淀得到黃色母液；成分組II采用濕法裝柱，濕法上柱，洗脫條件為依次采用石油醚氯仿=5 1的 流動(dòng)相1 3個(gè)柱體積、石油醚氯仿=2 1的流動(dòng)相3 6個(gè)柱體積、石油醚丙酮= 1 1的流動(dòng)相1 3個(gè)柱體積、氯仿流動(dòng)相1 2個(gè)柱體積洗脫，每0. 2個(gè)柱體積一段接 收。濃縮每段流動(dòng)相，結(jié)晶得到各個(gè)卩山酮化學(xué)成分。實(shí)施例2
稱取20kg川西獐芽菜藥材，提取方法與實(shí)施例1相同，通過柱層分離，依據(jù)色譜順 序依次得到的_酮化學(xué)成分為下述1-7號(hào)_酮化學(xué)成分1、1，5，8_三羥基-3-甲氧基_酮，分子式為C14H1Q06 ；其結(jié)構(gòu)式如下 FAB-MS m/z :[M+H]+275。UV X maxCH3 nm :257，319，364。IRv/cnT1 :3093，1654，1593， 1471，1157，1093。1H 匪 R(400MHz，DMS0_d6) 8 :11.92(1H，s, 1-0H) ,11. 10 (1H, s，8_0H)， 9. 74 (1H, s，5-0H)，7. 26 (1H, d, J = 8. 8Hz, H_6)，6. 65 (1H, d, J = 8. 8Hz, H_7)，6. 63 (1H, d, J = 2. 4Hz, H-4)，6. 41(1H，d, J = 2.0Hz，H_2)，3. 90 (3H，s，3_0CH3) ； 13CWR(100MHz， DMS0-d6) 8 ;183. 9 (C_9) , 167. 0 (C_3) , 161. 6 (C-l) , 157. 3 (C_4a) , 151. 6 (C_8)， 143. 3 (C-4b) , 137. 1 (C_5) , 123. 7 (C_6) , 109. 3 (C_7) , 107. 4 (C_8a) , 102. 0 (C_8b)， 97. 3 (C-2)，99 (C-4)，56. 2 (3—0CH3)；2、1，7，8_三羥基-3-甲氧基_酮，分子式為C14H1(106，，其結(jié)構(gòu)式如下 EI-MSm/z [M]+2740UV A maxCH30Hnm 268，325，389。IRv/cnT1 :2987，1662，1608，1506， 1166，813。1H-NMR(400MHz，DMS0_d6) 8 11. 89，11. 65 (各 1H，s, 1,8-0H) ,7. 29 (1H, d, J = 8. 8Hz，6-H)，6. 90 (1H, d, J = 9. 2Hz，5_H)，6. 59 (1H, d, J = 2. 4Hz，2_H)，6. 38 (1H, d, J = 2. 0Hz，4-H)，3. 88(3H，s，3-0Me)。13C_WR(100MHz，DMS0_d6) 8 :184. 1 (C_9)，167. 0 (C_3)， 161. 6 (C-l) , 157. 6 (C-4a) , 147. 9 (C_8) , 146. 7 (C_4b) , 140. 2 (C_7) , 124. 0 (C_6)， 107. 3 (C-8a)，106. 0 (C_5)，101. 6 (C_8b)，97 (C-2)，92. 7 (C-4)，56. 1 (3-0CH3)；3,1,8- 二羥基-3，5- 二甲氧基_酮，分子式為C15H1206，其結(jié)構(gòu)式如下 FAB-MSm/z [M]+288。UV A maxCH30Hnm 238. 5，263. 3，328. 6，384. 5。IRv/cnT1 :2960， 1666,1637,1506,1301,958,8310 NMR(400MHz,CDC13) 8 :12. 10(1H，s，8-0H)，11. 96(1H， s, 1-0H) ,7. 26 (1H, d, J = 9. 2Hz，H_6)，6. 84 (1H，dd, J = 0. 8，9. 2Hz，H_5)，6. 38 (1H， d, J = 2. 0Hz, H-4) ,6. 32 (1H, d, J = 2. 4Hz，H_2)，3. 94 (3H，s，7-0CH3)，3. 89 (3H，s， 3-0CH3)。13CWR(100MHz，CDC13) 8 :185. 1 (C_9)，167. 5 (C_3)，163. 0 (C_l)，158. 1 (C_4a)， 150. 3 (C-8) , 149. 7 (C_4b) , 143. 0 (C_7) , 120. 7 (C_6) , 107. 9 (C_8a) , 105. 6 (C_5)， 102. 4 (C-8b)，97. 2 (C-2)，92. 9 (C-4)，57. 2 (7—0CH3)，55. 9 (3-03)；
4、1-羥基-3，7，8-三甲氧基_酮，化合物分子式為C16H1406，其結(jié)構(gòu)式如下 UV A Me0Hnm239. 7,259. 7,313. 1,372. 5 ；IRvKBrcm_12941. 2,2835. 2,2364. 6,1662. 5、 1606. 6,1479. 3,1433. 0,1280. 6,1228. 6,1205. 4,1195. 8,1159. 1,1093. 6,1066. 6,800. 4 ； EI-MS 458、431、395、377、355、318、303、287、272、225、175、133 ；H-NMR 1.573,3.881、 3. 934,6. 341,7. 264、761、13. 266 ；5、1_羥基-3，5-二甲氧基_酮，化合物分子式為(15111205，其結(jié)構(gòu)式如下 UV A Me0Hnm245. 6,308. 3,356. 0 ； IRvKBrcm_12921. 9,2835. 2, 1662. 5, 1635. 5、 1622. 0,1610. 5,1577. 7,1494. 7,1438. 8,1319. 2,1290. 3,1271. 0,1213. 1,1157. 2,1105. 1、 962. 4,802. 3,725. 2,603. 7 ；EI-MS 352、328、311、274、272、257、243、229、202、186、155、 122、107、97、83、69、55 ；H-NMR 1. 253,1.571,3.890,4.037,6.365,6. 571,7. 291,7. 330、 7. 839,1410,12. 002,12. 838 ；6,1,8- 二羥基-3，5- 二甲氧基_酮，化合物分子式為C15H1206，其結(jié)構(gòu)式如下 UV A Me0Hnm 253. 8,277. 5,332. 1 ；IRvKBrcm_13436. 9,3421. 5,1670. 2,1639. 4、 1610.5,1581.5,1510.2,1492. 8,1440.7,1301. 9,1280. 6,1244. 0,1224. 7,1209. 3,1186. 1、 1163. 0,1105. 1,1053. 1,948. 9,825. 5,813. 9,696.3,628.8,545.8 ；EI-MS 288、274、273、 245、230、202、185、167、144、111、97、83、69、57 ；1H-NMR 1.586,3.899,3. 962,6. 360,6. 555、 6. 716,7. 249,11. 409,12. 0 ；7、8_羥基-1，3，5-三甲氧基_酮，化合物分子式為C16H1406，其結(jié)構(gòu)式如下 UV A Me0Hnm 223，232 238，251，274，328，375 ；1&咖01^3100 2600 (弱，寬峰，螯
8合 OH)，2945. 1,2837. 1，1662. 5 (共軛 C = 0)，1602. 7、1571. 9、1483. 2 (芳環(huán) C = C)，1456. 2、 1434. 9,1315. 4,1282. 6,1168. 8,1093. 6,1064. 6,1031. 8,981. 7,962. 4,819. 7,802. 3、 767.6 ；EI-MS 302、288、287、273、259、243、216、201、149、143、123、106、91、69、57 ；
屯-匪1 (0)(13) 13. 57 (1H, S, C8_0H) ；7. 26 (1H, d，J = 9，C6_H) ；6. 33 (1H, d, J = 9，C7-H) ；6. 48 (1H, d, J = 2. 5，C4_H) ；6. 33 (1H, d, J = 2. 5，C2_H) ；3. 99 (S, C” C「0CH3)； 3. 93 (S, C3-OCH3) ；3. 88 (S, C5_0CH3)。
權(quán)利要求
一種分離藏茵陳中酮化學(xué)成分的方法，其特征在于包括以下步驟1)獲取藏茵陳提取物水溶液；2)采用石油醚、汽油、環(huán)己烷或正己烷中的一種或一種以上的混合液對(duì)藏茵陳提取物水溶液進(jìn)行萃取得到母液Ⅰ和有機(jī)相Ⅰ，采用三氯甲烷、四氯甲烷、二氯甲烷、乙醚或乙酸乙酯中的一種或一種以上的混合液對(duì)母液Ⅰ進(jìn)行萃取得到母液Ⅱ和有機(jī)相Ⅱ，回收有機(jī)相Ⅱ得到成分組Ⅱ；3)采用溫度為15～85℃乙醇或甲醇溶解成分組Ⅱ，冷卻，析出絮狀沉淀，過濾絮狀沉淀得到黃色母液；4)回收黃色母液至干，氯仿加熱溶解殘?jiān)?，上硅膠柱，采用濕法裝柱，濕法上柱，洗脫條件為依次采用石油醚-氯仿、石油醚-丙酮、氯仿等系統(tǒng)為流動(dòng)相洗脫，根據(jù)色帶分段接收流動(dòng)相；5)濃縮每段流動(dòng)相，結(jié)晶得到各個(gè)酮化學(xué)成分。FSA00000123850900011.tif,FSA00000123850900012.tif
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離藏茵陳中_酮化學(xué)成分的方法，其特征在于步驟5得 到的_酮化學(xué)成分包括`1、1，5，8_三羥基-3-甲氧基_酮，分子式為=C14HltlO6；其結(jié)構(gòu)式如下 `2、1，7，8-三羥基-3-甲氧基_酮，分子式為C14HltlO6,，其結(jié)構(gòu)式如下 `3、1，8-二羥基-3，5- 二甲氧基_酮，分子式為C15H12O6,其結(jié)構(gòu)式如下 `4、1-羥基-3，7，8-三甲氧基_酮，化合物分子式為C16H14O6,其結(jié)構(gòu)式如下 `5、1-羥基-3，5-二甲氧基_酮，化合物分子式為C15H1205，其結(jié)構(gòu)式如下 ，6、1，8-二羥基-3，5- 二甲氧基_酮，化合物分子式為C15H12O6,其結(jié)構(gòu)式如下 ，7、8_羥基-1，3，5-三甲氧基_酮，化合物分子式為C16H14O6,其結(jié)構(gòu)式如下
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離藏茵陳中_酮化學(xué)成分的方法，其特征在于所述的提 取藏茵陳提取物水溶液為分別用90%乙醇、60%乙醇、30%乙醇和水的滲濾同一藥材，合 并上述滲漉液，回收至無乙醇?xì)埩?，得到藏茵陳提取物水溶液?br> 全文摘要
本發(fā)明公開了一種分離藏茵陳中酮化學(xué)成分的方法，包括提取藏茵陳提取物水溶液、依據(jù)極性梯度萃取粗分和柱層析分離純化三個(gè)工藝步驟；分離出酮化學(xué)成分的純品，對(duì)于考察藏茵陳的藥理作用，和藥品的研發(fā)和生產(chǎn)具有重要的意義。
文檔編號(hào)C07D311/86GK101845037SQ20101017613
公開日2010年9月29日 申請(qǐng)日期2010年5月19日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月19日
發(fā)明者周華容, 王昌華, 王欣, 羅維早, 覃瑤, 鐘國躍, 陽勇 申請(qǐng)人:重慶市中藥研究院