專利名稱：2-苯基丙酸衍生物及含有它們的藥物組合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及新穎的4_(三氟甲磺酰氧基苯基)丙酸衍生物及含有它們的藥物組合 物，它們可作為多形核和單核細胞的趨化性抑制劑，特別是在治療嗜中性白細胞依賴性病 變中的應用。
背景技術：
特定血細胞(巨噬細胞，粒細胞，中性白細胞，多形核細胞)對化學刺激(引起刺 激的物質稱為趨化因子)的應答反應是沿著刺激性因子的濃度梯度方向移行，此過程稱 為趨化。目前已知的主要刺激因子或趨化因子的代表是補體5a的分解產(chǎn)物，細菌表面溶 解或合成來源的肽所產(chǎn)生的某些N-甲?；?，例如甲酰-甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸 (f-MLP)，主要是各種細胞因子，包括白細胞介素-8(IL-8，也稱為CXCL8)。白介素-8是一 種內(nèi)源性趨化因子，它由大多數(shù)有核細胞，比如成纖維細胞和巨噬細胞產(chǎn)生。在某些病理學狀況下，嗜中性白細胞的不良募集標志著嗜中性白細胞滲入的相關 部位發(fā)生了更嚴重的組織損傷。近年來，嗜中性白細胞活化在決定局部缺血后再灌注和肺 部高含氧量相關損傷中的作用已被廣泛得到證明。白介素-8的生物學活性是通過白介素與屬于七次跨膜受體家族的CXCRl和CXCR2 膜受體相互作用而介導的，這些受體表達在人嗜中性白細胞和某些類型T細胞的表面上 (L. Xu 等，J. Leukocyte Biol.，57，335，1995)。已知可以區(qū)分 CXCRl 與 CXCR2 的選擇性配 體是GRO- α，它是CXCR2選擇性趨化因子的一個例子。IL-8通過CXCR2受體通道在肺部疾病(肺損傷、急性呼吸窘迫綜合征、哮喘、慢性 肺炎和囊性纖維化)，特別是在慢性阻塞性肺病發(fā)病機制中有潛在致病作用已有廣泛描述 (D. WP Hay 禾口 H. Μ. Sarau. ，Current Opinion in Pharmacology 2001，1 :242_247)。特征性嗜中性白細胞聚集發(fā)生在急性和慢性病理學狀態(tài)下，例如發(fā)生在高度發(fā)炎 和治療上難以對付的牛皮癬損傷區(qū)域。趨化因子，白介素_8，受刺激的角質細胞釋放出的 Gro-α的協(xié)同作用以及可選擇的補體旁路激活作用所產(chǎn)生的C5a/C5a-脫精氨酸組分的 協(xié)同作用導致了嗜中性白細胞的趨化吸引和活化(T. Terui et al.，Exp. Dermatol. ,9,1, 2000)。我們近年描述了一類新穎的物質“R-2-芳基丙酸的ω-氨基烷酰胺”，可作為多形 核和單核細胞趨化性抑制劑(W0 02/068377)。這類新物質包括的化合物是選擇性C5a抑制 劑和C5a/IL-8雙重抑制劑。而且，這類新穎的R-2-芳基丙酸酰胺和N-?；酋０方?jīng)證明是白介素_8誘導的 嗜中性白細胞趨化和脫粒的有效抑制劑(W0 01/58852 ；WO 00/24710)。

發(fā)明內(nèi)容
我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)一類新的2-(R)-苯基丙酸衍生物，可作為多形核和單核細胞趨化 性抑制劑。具體說，本發(fā)明的化合物是白介素_8誘導的嗜中性白細胞趨化性和C5a誘導的 嗜中性白細胞和單核細胞趨化性的強效抑制劑，具有改善的藥物動力學特性和藥理學活性 性能。本發(fā)明提供通式(I )所示的2-(R)-苯基丙酸衍生物及其藥學上可接受的鹽 其中R'選自H和0H，當R'為H時，R選自-H、C1-C5 烷基、C3-C6 環(huán)烷基、C2-C5 烯基、C1-C5 烷氧基；-雜芳基，選自取代和未取代的吡啶、嘧啶、吡咯、噻吩、呋喃、吲哚、噻唑、噁唑基；-氨基酸殘基，它由被另一個羧基(COOH)取代的直鏈或支鏈C1-C6烷基、(3_(6環(huán) 燒基、C2-C6烯基、C1-C6苯基燒基組成；-通式-CH2-CH2-Z-(CH2-CH2O)nR'所示的殘基，其中R'是 H 或 C1-C5 烷基，η 是 0 至2的一個整數(shù)，Z是0或S;-通式-(CH2)n-NRaRb所示的殘基，其中η是0至5的一個整數(shù)，Ra和Rb可以是相同 或不同的C1-C6烷基、C2-C6烯基，或者Ra和Rb與它們所結合的氮原子一起形成如通式(II) 所示的3至7元雜環(huán)， 其中，W表示單鍵、0、H、N-Rc, Rc代表H、C1-C6烷基或C1-C6烷基苯基，η是0至3 的一個整數(shù)；-通式-SO2Rd所示的殘基，其中Rd是C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基、C2-C6烯基、芳基和 雜芳基；當R'為OH時，R選自H、C1-C5烷基、C3-C6環(huán)烷基、C2-C5烯基。本發(fā)明還提供通式(I)化合物在藥物方面的應用，具體說，這類藥物可作為多形 核和單核細胞趨化性的抑制劑。通式(I)化合物屬于先前WO 01/58852，WO 00/24710和WO 02/068377描述的白 介素_8和補體5a抑制劑的通式內(nèi)。與以上所提到發(fā)明的特別優(yōu)選化合物相比，通式(I)化合物顯現(xiàn)了顯著優(yōu)異的特性。
本發(fā)明化合物在化學分類上屬于芳基三氟甲磺酸。在藥物化學研究中，三氟甲磺 酸基被認為是酚羥基或甲氧基的共同生物電子等排取代；令人驚訝的是，盡管相應的4-羥 基和4-甲氧基類似物效力極低，但通式(I)化合物是白介素_8誘導的人多形核嗜中性白 細胞趨化性的強效抑制劑。另外，苯環(huán)上的三氟甲磺酸基團對白介素-8受體CXCRl和CXCR2 有特別高的親和力。與已知的白介素_8和/或補體5a誘導的多形核嗜中性白細胞趨化性 抑制劑相比，發(fā)現(xiàn)通式(I)化合物是抑制GRO-α誘導的多形核嗜中性白細胞趨化性很有效 的抑制劑，從而表明其對CXCR2介導的途徑有特異性作用。與脂肪族三氟甲磺酸的反應活性特征相反，已知芳族的三氟甲磺酸(芳基三氟甲 磺酸)在化學和生物學上都穩(wěn)定。由于三氟甲磺酸基團的吸電子性能和親脂性，因此它能 防止芳環(huán)被細胞色素P450同工酶系統(tǒng)氧化。三氟甲磺酸部分能增強通式(I)化合物的代 謝穩(wěn)定性，減慢其新陳代謝速率(芳環(huán)/取代基的羥基化和然后的偶聯(lián))，這種情況一般發(fā) 生在當體內(nèi)給予攜帶有供電子基團的同類物時。與此性能相關，這類新穎的化合物與上面所提到發(fā)明的化合物種類相比，顯示了 更高的口服生物利用度，更長的半衰期和較低的蛋白結合。這些特性使這些藥物具有最佳的整體藥理學性能，而且可用于不同的慢性或急性 疾病的治療。當R'是H時，R基團宜選自-H、C1-C5烷基、C3-C6環(huán)烷基、C1-C5烷氧基、C1-C2羧基烷基；-選自取代和未被取代的吡啶、噻唑、噁唑的雜芳基；-通式-(CH2)n-NRaRb所示的殘基，其中，η是2至3的一個整數(shù)，更優(yōu)選3，基團NRaRb 是N，N- 二甲胺、N，N- 二乙胺、1-哌啶基、1-吡咯烷基、4-嗎啉基、1-吡咯烷基、1-哌嗪基、 1-(4-甲基)哌嗪基；-通式-SO2Rd所示的殘基，其中Rd是C1-C2烷基、C3-C6環(huán)烷基。當R'是OH時，優(yōu)選的R基團是H、C1-C5烷基、C3-C6環(huán)烷基。本發(fā)明特別優(yōu)選的化合物是l、R(-)-2_[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-甲磺?；０?；la、R(-)-2_[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]_N_甲磺?；０封c鹽；2、R(-)-2_[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]丙酰胺；3、R(-)-2_[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]_N_甲基丙酰胺；4、R(-)-2_[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]_N_異丙氧基丙酰胺；5、R(-)-2_[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]_N_環(huán)戊基丙酰胺；6、R(-)-2_[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N_[3_(N'-哌啶基)丙基]丙酰胺；6a, R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N_[3_(N'-哌啶基)丙基]丙酰 胺鹽酸鹽；7、R(-)-2_[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N_[2_(N'-吡咯烷基)乙基]丙酰 胺；7a, R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]_N-[2_(N'-吡咯烷基)乙基]丙 酰胺鹽酸鹽；8、R(-)-2_[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]_N_[3_(N'-吡咯烷基)丙基]丙酰胺；8a、R(3-)-2_[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]_N_[3_(N'-吡咯烷基)丙基]丙 酰胺鹽酸鹽；9、R(+)-2_[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-(2-羥基乙氧基乙基)丙酰胺；10、R(-)-2_[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N_[2_(4'-三氟甲基)噻唑基]丙 酰胺；ll、R(-)-2_[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]_N_甲基_N_羥基丙酰胺。在所列化合物中，最優(yōu)選的是化合物1及其相關的鈉鹽la。本發(fā)明化合物是白介素_8誘導的人多形核嗜中性白細胞趨化性的強效抑制劑。 當R是通式-(CH2)n-NRaRb所示的殘基時，本發(fā)明化合物是補體5a和白介素_8誘導的多形 核嗜中性白細胞趨化性的雙重抑制劑。通常分離得到的本發(fā)明通式(I)化合物是其與藥學上可接受的有機和無機酸或 堿的加成鹽形式。所述的酸選自鹽酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、富馬酸、檸檬酸。所述堿有氫氧 化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣、(D，L)-賴氨酸、L-賴氨酸、氨基丁三醇。按照先前W 01/58852，WO 00/24710 和 W 02/068377 所述的方法，以 R(-)-2-(4' _三氟甲磺酰氧基苯基)丙酸為起始材料可獲得通式(I)化合物。例如，可通 過以下方法獲得其中R是SO2Rd，Rd是C1-C2烷基或C3-C6環(huán)烷基的通式(I)化合物，該方法 包括在惰性溶劑中，同時存在等分子量或輕微過量的縮合劑例如碳二亞胺(比如二環(huán)己基 碳二亞胺)、可溶性碳二亞胺(比如N-(3-二甲基-氨基-丙基)-N'-乙基碳二亞胺鹽酸 鹽)或1，1'-羰基二咪唑以及選自三乙胺、4-(N，N-二甲氨基)-吡啶、1，8-二氮雜二環(huán) [5.4.0]十一-7-烯或1，5-二氮雜二環(huán)[4. 3.0]壬_5_烯的相對應的堿，用等分子量的合 適的磺胺RdSO2NH2處理等分子量的R(-)-2-(4'-三氟甲磺酰氧基苯基)丙酸?！绑w外”評估通式(I )化合物抑制由白介素-8、GR0_a和補體5a組分誘導的多形 核白細胞(下文用PMN表示)和單核細胞趨化性的能力。為此，從身體健康的成人志愿者身 上抽取肝素化人血液，從該血液分離出PMN，通過葡聚糖沉降去除單核細胞(按照W. J. Ming 等人公開的方法，J. Immunol.，138，1469，1987)，通過低滲溶液處理去除紅血細胞。以錐蟲 藍排除法計算細胞活力，用Diff Quick染色后再估算細胞離心產(chǎn)物中的循環(huán)多形核比率。在趨化性試驗中采用重組的人白介素_8 (英國P印ro Tech公司產(chǎn)品)作為刺激 劑，實際上獲得相同的結果將凍干蛋白溶解在一定體積含有0.2%牛血清蛋白(BSA)的 HBSS中，配成ICT5M的母液，用HBSS稀釋至ICT9M用于趨化性試驗。在類似試驗中評價對GRO-α誘導的趨化性的抑制作用。在補體5a誘導的趨化試驗中，采用組分hr-補體5a和hr補體5a_脫精氨酸 (Sigma)作為趨化實驗的刺激劑，實施時獲得了相同的結果。將凍干補體5a溶解于一定體 積含0. 2%牛血清白蛋白的HBSS中，獲得濃度為ICT5M的貯存液，趨化試驗時用HBSS稀釋 至濃度1(Γ9Μ。在趨化實驗中，37°C在含5% CO2的空氣中，使PMN與本發(fā)明通式(I)化合物一起 培育15分鐘。補體5a的趨化活性在含濃度為1. 5X106PMN/毫升的重懸于HBSS的人循環(huán)性多形 核白細胞(PMNs)上評價。
在趨化試驗時(按W. Falket 等，J. Immunol. Methods, 33, 239,1980),采用適合更 換的含5 μ m孔徑和微室的無PVP (聚乙烯吡咯烷酮)過濾器。對濃度范圍在10_6到ICTkiM之間的本發(fā)明通式(I)化合物進行了評價。為此 目的，將它們以相同濃度加入微室底孔和頂孔。按照Van Damme J.等人所述方法(Eur. J. Immunol.，19，2367，1989)，評價了本發(fā)明通式(I)化合物抑制人單核細胞趨化性的能 力。蛋白結合測定方法如下取兩份相同的大鼠血漿樣品在濃度為50μ g/ml的各化 合物中37°C培養(yǎng)20分鐘，同時溫和地振搖。然后將樣品通過Centrifree 微粒裝置超 濾，1500g離心15分鐘。得到的超濾液用高效液相色譜-質譜聯(lián)用(HPLC-MS/MS)進行定 量分析(色譜柱為Luna C18，150x2mm,內(nèi)徑5um(phenomenex)，流動相洗脫液A)0. 02M !10)0_冊4+(用甲酸調(diào)？!1為4.3)；洗脫液B)甲醇。雄性小鼠靜脈注射和口服給藥后對所述化合物的藥物動力學特征(半衰期、口服 生物利用度等)進行評價。用不同時間化合物的血漿濃度進行藥物動力學分析。數(shù)據(jù)利 用 Kinetica 2000 . 3. 0 版軟件進行評價[InnaPhase Corporation, World headquarters, 1700 Race Street, Philadelphia, PA 19103USA]。按照 Patrignani 等，J. Pharmacol. Exper. Ther.，271，1705,1994 所沭的方法，評 價了通式(I)化合物，發(fā)現(xiàn)其作為環(huán)氧合酶(COX)抑制劑，在活體外的血液中完全無效。多數(shù)情況下，通式(I )化合物在10_5至10_7M濃度范圍內(nèi)不會干擾脂多糖(LPS，1 微克/毫升)刺激小鼠巨噬細胞誘導產(chǎn)生PGE2?？捎涗浀膶GE2產(chǎn)生的抑制通常低于統(tǒng)計 學顯著性的極限，一般不超過基數(shù)值的15-20%。抑制COX的效率降低是本發(fā)明化合物在治 療應用中的一個優(yōu)點，其作用與抑制前列腺素合成是巨噬細胞刺激增強TNF-α合成(LPS 或過氧化氫誘導)一樣大，TNF-α是中性粒細胞激活的重要介導劑，也是細胞因子IL-8產(chǎn) 生的刺激物。發(fā)現(xiàn)抑制CXCRl和CXCR2激活的抑制劑，如上文詳述，可用于特別是治療慢性炎癥 疾病(如牛皮癬)，認為白介素_8兩種受體的激活在疾病發(fā)展上起著重要的病理生理作用。事實上，已知CXCRl的激活是白介素_8介導的PMN趨化性所必須的(Hammond M 等，J Immunol，155，1428，1995)。另一方面，有人提出，CXCR2的激活是白介素-8介導牛 皮癬患者表皮細胞增殖和血管生成所必須的(Kulke R等，J Invest Dermatol, 110 90， 1998)。此外，CXCR2拮抗劑特別用于治療重要肺部疾病，例如慢性阻塞性肺病(D. WP Hay and H. Μ. Sarau. , Current Opinion in Pharmacology 2001,1 :242_247)?？紤]到上述討論的實驗結果和白介素-8(IL_8)及其同源物在涉及嗜中性白 細胞激活和浸潤過程中的作用，本發(fā)明的化合物特別適用于治療某些疾病，例如牛皮癬 (R. J. Nicholoff等人，Am. J. Pathol.，138，129，1991)?？捎帽景l(fā)明化合物治療的的其它 疾病是慢性腸炎癥病理，例如潰瘍性結腸炎(Y. R. Mahida等人，Clin. Sci.，82，273，1992) 慢性阻塞性肺病(COPD)、大皰性天皰瘡、類風濕性關節(jié)炎(M. Selz等人，J. Clin. Invest.， 87，463，1981)、特發(fā)性纖維增生(前面引用的Ε. J. Miller和P. C. Carre等人，J. Clin. Invest.，88，1882，1991)、腎小球腎炎(Τ. Wada 等人，J. Exp. Med.，180，1135，1994)。本發(fā)明化合物對局部缺血和再灌注引起的損傷的預防和治療也有效，特別對器官
8移植，尤其是腎移植造成的機能損傷有保護作用。在大鼠腎移植實驗模型中，證明本發(fā)明化合物對同系基因腎移植后的局部缺血/ 再灌注損傷后立即腎功能保存具有活性，可防止局部缺血再灌注后發(fā)生的白細胞滲入移植 物。大鼠腎移棺的實驗樽型本研究在同系基因腎移植模型中進行，采用大鼠作為供體和移植受體。在受體和 供體腎動脈之間進行端端吻合術，以及腎靜脈的端端吻合術。30分鐘(溫熱缺血)后松開 血管夾，取出原來的右腎。將大鼠放置在各個獨立的代謝籠中，測量每日的排尿量作為腎功 能恢復的指標。在16和24小時后，測定血漿肌酐濃度評估腎功能。腎移植后24小時，處死 大鼠。取出移植的腎，放在Dubosq-Brazil溶液中切片，然后用光學顯微鏡作常規(guī)組織學分 析。另外，在液氮中凍存其它腎碎片用于炎癥細胞滲透(多形核細胞，MHCII類陽性細胞) 的免疫組織化學分析。本發(fā)明的所有化合物在5mg/Kg到30mg/Kg濃度范圍內(nèi)，在腎移植前靜脈注射和移 植兩小時后皮下注射治療顯示對移植大鼠的損傷有保護作用。此外，本發(fā)明化合物對黑色素瘤和血管生成的治療特別有用。對黑色素瘤細胞的體外活性測定如下黑餼素瘤細胞的增殖以所選用的本發(fā)明化合物預先處理96孔板(2 6xl03個黑色素瘤細胞/孔)，以 白介素-8(CXCL-8)刺激后，培養(yǎng)3-4天。然后各孔加入3-(4，5-二甲基噻唑基-2)-2，5-聯(lián) 苯四唑溴化物(MTT :400μ g/ml)，培養(yǎng)2小時。除去培養(yǎng)基，加入100 μ 1 二甲基亞砜溶解 的細胞。在微孔板讀數(shù)儀上測定吸光值，測定細胞增殖變化。通過基質膠的侵襲試驗把黑色素瘤細胞放置在六孔板上(5χ103個細胞/孔)，使它們粘附24小時。以所 選用的本發(fā)明化合物處理5天后，使細胞與胰島素-EDTA短暫接觸而從板中釋放出來，進行 計數(shù)和離心。按照制造廠家的指導，對Biocoat基質膠侵襲小室進行預處理。將溶于無血 清培養(yǎng)基的CXCL8置于下排孔內(nèi)作為趨化引誘物，將含3χ103個細胞的500 μ 1無血清培養(yǎng) 基放置在基質膠平板上室內(nèi)，37°C培養(yǎng)22小時。用Diff-Quick染色過濾器下表面的細胞， 用顯微鏡附帶的圖象分析儀定量。因此本發(fā)明的另一個目的是提供通式(I)化合物在制備治療牛皮癬、潰瘍性結腸 炎、黑色素瘤、血管生成、慢性阻塞性肺病(COPD)、大皰性天皰瘡、類風濕性關節(jié)炎、特發(fā)性 纖維增生、腎小球腎炎藥物中的應用以及在預防和治療由局部缺血和再灌注引起的損傷中 的應用。表I列出了本發(fā)明示范性化合物與上文提到專利文獻所述的示范性化合物生物 活性的比較。表 I # 以 KT6M 測試表II列出了通式(I)示范性化合物與上文提到專利文獻所述的示范性化合物的物理化學、藥理學和藥物動力學特征的比較。通式(I)化合物與這些示范性化合物相比，顯 示了更高的口服生物利用度，更長的半衰期，較低的蛋白結合。表II 含有本發(fā)明化合物和合適載體的藥物組合物也包括在本發(fā)明范圍之內(nèi)。本發(fā)明化合物可與常規(guī)使用的佐劑、載體、稀釋劑或賦形劑一起構成藥學組合物 及其單位劑量，其劑型可以是口服用的固體(如片劑或膠囊)或者液體(如溶液、懸浮液、 乳濁液，酏劑或裝有所述液體的膠囊)，或是供腸胃道外(包括皮下)應用的無菌注射溶液。 這種藥物組合物及其單位劑型可包含常規(guī)比例的諸成分，包括或不包括其它活性化合物或 要素物質，其單位劑型可含合適的有效量的活性成分，相當于預期每日的劑量范圍。當用作藥物時，本發(fā)明化合物通常以藥物組合物形式給藥。這種組合物可用制藥 領域熟知的方法制備，含有至少一種活性化合物。一般說，本發(fā)明化合物以藥學有效量給 藥。此化合物的實際給藥量根據(jù)相關情況決定，包括所治療的疾病、所選擇的給藥途徑、實 際給藥的化合物、病人個體的年齡、體重和反應、患者癥狀的嚴重性等等。本發(fā)明的藥物組合物可通過許多種途徑進行給藥，包括口服的、經(jīng)直腸、透皮、皮 下、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)的和鼻內(nèi)給藥。取決于給藥途徑，宜將該化合物應配制成可注射的或口 服組合物。供口服給藥的組合物可制成大包裝溶液或懸浮液，或者大包裝粉劑。然而更常 見，所述組合物以單位劑型提供，以有利于準確的定量給藥。術語“單位劑型”指適于人和 其它哺乳動物單次劑量的完全分開的單位，各單位含可產(chǎn)生所需的治療作用的預定計算量 的活性物質及合適的藥物賦形劑。通常單位劑型包含預裝填、預計量的安瓿或裝有液體組 合物的注射器，或固體組合物的丸劑、片劑、膠囊等等。在這樣的組合物中，該酸性化合物通 常是少量成分(占重量的0. 1 50%或優(yōu)選占重量的1 40% )，而其余物質是各種介質 或載體和有助于形成所需劑型的加工助劑。適用于口服給藥的液體制劑可包含合適的水性 或非水性載體和緩沖劑、懸浮劑、分散劑、著色劑、香料等等。包括可注射的組合物的液體制劑，如下所述，通常避光貯存以避免光線的催化作用，例如過氧化氫或過氧化物的形成。固 體制劑可包括例如以下任何一種成分或具有相似性質的化合物粘合劑如微晶纖維素、黃 蓍膠或明膠；賦形劑如淀粉或乳糖；崩解劑如褐藻酸、Primogel或玉米淀粉；潤滑劑如硬脂 酸鎂；助滑劑如膠態(tài)二氧化硅；甜味劑如蔗糖或糖精；調(diào)味劑如薄荷、水楊酸甲酯或桔子香 料?？勺⑸浣M合物通常以無菌注射鹽水或磷酸鹽緩沖的鹽水或本領域已知的其它可 注射的載體為基礎。如上所述，這種組合物中的通式(I)酸衍生物通常是少量成分，通常占 重量的0.05 10%，其余為可注射載體等。每日平均劑量取決于多種因素，如疾病的嚴重 性和病人的情況(年齡、性別和體重)。每日劑量一般為Img或幾毫克至多達1500mg的通 式(I)化合物，可任選將其分成多劑給藥。也可以更高劑量給藥，因為本發(fā)明的化合物在長 時間內(nèi)低毒性。上述用于口服給藥或可注射組合物的組分只是代表性的。更多資料包括加工 技術等 ^ "Remington' s Pharmaceutical Sciences Handbook，，(第 18 版，1990, Mack Publishing Company, Easton，Pennsylvania)的第八部分有闡述，其內(nèi)容列入本說明書作 為參考。本發(fā)明化合物也可以緩釋劑型給藥或采用緩釋給藥系統(tǒng)。在上述雷明頓手冊中的 摻入材料中也可找到代表性緩釋材料的描述。下面將結合實施例對本發(fā)明作進一步闡述，但這些實施例不構成對本發(fā)明范圍的 限制。
具體實施例方式實施例中的縮寫THF是四氫呋喃，DBU是1，8_ 二氮雜二環(huán)[5.4.0] i^一 _7_烯。實施例中所述的所有化合物可以按先前WO 03/043625所述的制備方法以 R(-)-2-(4' _三氟甲磺酰氧基苯基)丙酸為原料獲得。實施例1R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-甲磺酰基丙酰胺室溫下，在R(-)_2-(4'-三氟甲磺酰氧基苯基)丙酸(13. 28g，44. 5mmol)的無水 CH2Cl2溶液(130ml)中，加入1，1_羰基二咪唑(7.21g，44. 5mmol)。將形成的溶液在攪拌下 保存1小時30分鐘。然后加入甲磺酰胺(4. 23g，44. 5mmol)，室溫1小時后加入DBU (6. 65ml， 44. 5mmol)。將形成的混合液室溫攪拌過夜。有機相用0. 5M HCl (2x50ml) ,5% NaH2PO4溶 液(3x50ml)和水洗滌至中性。用Na2SO4干燥并蒸發(fā)掉溶劑后，得到的殘留物用異丙醚處 理。濾去形成的沉淀物，母液減壓蒸發(fā)得到粗制固體，室溫下，將粗制固體在正己烷(50ml) 中打漿2小時，得到白色粉末狀的純R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-甲磺?；?丙酰胺(13. 2g，35. 15mmol)(得率 79% )。熔點:98-100°Co[α ]D = -49. 4(c = 0. 5 ；CH3OH)。1H-WR(CDCl3) δ 7. 40(d，2H， J = 7Hz) ；7. 23 (d, 2H, J = 7Hz) ；3. 68 (q, 1H, J = 7Hz) ；3. 15 (s, 3H) ；1. 42 (d, 3H, J = 7Hz)。實施例laR(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-甲磺?；０封c鹽把R(-)_2-(4' _三氟甲磺酰氧基苯基)丙酸-N-甲磺?；０?6.89g，18. 35mmol)溶于乙醇(35ml)中，滴加IM NaOH(標準體積)(18. 35mL)。溶液于室溫下攪拌 30分鐘。減壓蒸去乙醇，水溶液凍干過夜。得到白色粉末狀的純鈉鹽(7. 29g，18. 35mmol)。[α ]D = -27. 2 (c = 0. 5 ；CH3OH)實施例2R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]丙酰胺室溫下，在R(-)_2-(4'-三氟甲磺酰氧基苯基)丙酸(10g，33. 5mmol)的無水甲 苯(IOmL)溶液中，加入亞硫酰氯(4.8mL，67mmol)。攪拌下回流該溶液2小時。室溫冷卻 后，減壓蒸去甲苯，將粗制油狀殘留物溶于CH2Cl2 (25mL)，鼓泡通入氨氣1小時。有機溶液用 水洗滌(3xl5mL)，用Na2SO4干燥，然后減壓蒸發(fā)得到微棕色的粗制固體，在正己烷(IOOmL) 中打漿2小時進行純化。最后抽真空過濾分離得到白色粉末狀的純R(-)_2-[(4'-三氟甲 磺酰氧基)苯基]丙酰胺(8. Ig, 27. 2mmol)(得率81% )。熔點:67-69°Co[a]D = -12(c = 1 ；CH3OH)。1H-NMR(CDCl3) δ 7. 69(d,2H, J = 7Hz) ；7. 22(d，2H，J = 7Hz) ；5. 37(bs，2H，CONE,) ；3. 63 (q, 1H, J = 7Hz) ；1. 53(d，3H，J = 7Hz)。實施例3R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-甲基丙酰胺室溫下，在R(-)_2-(4' _三氟甲磺酰氧基苯基)丙酸(lg，3. 35mmol)的無水甲 苯(2.5mL)溶液中，加入亞硫酰氯(4mL)。攪拌下回流該溶液2小時。室溫冷卻后，減壓 蒸去甲苯，將粗制的油狀殘留物溶于CH2Cl2(IOmL)15將此有機溶液滴加到甲胺(0. 414mL， 10. OSmmol)的CH2Cl2 (5mL)溶液中，所得混合液室溫攪拌3小時。減壓蒸去溶劑，蒸餾除去過 量胺，將得到的粗制品再用CH2Cl2(IOmL)稀釋，用飽和NaHCO3溶液(2x5mL)和水(3xl5mL) 洗滌，用NaSO4干燥，減壓蒸發(fā)得到橙色油狀粗制殘留物。粗制物用快速層析法(洗脫劑 CH2CL2/CH30H 98 2)進行純化，得到透明油狀的純R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯 基]-N-甲基丙酰胺(0. 78g，2.51mmol)(得率 75% )0[a ]D =-19(c = 0. 5 ;CH30H)。1H-WR(CDCl3) δ 7. 48(d,2H, J = 7Hz) ；7. 24(d, 2H，J = 7Hz) ；5. 35 (bs, 1H,C0NH) ；3. 55 (q, 1H, J = 7Hz) ；2. 72 (d，3H，J = 3Hz) ； 1.55(d，3H， J = 7Hz)。實施例4R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-異丙氧基丙酰胺在N-異丙基羥胺鹽酸鹽(0. 14g，1. 67mmol)和 NaHCO3(0. 19g，3. 34mmol)的無 水THF (5mL)懸浮液中加入如實施例3所述的以相應酸(0. 5g，1. 67mmol)為原料制備 的R(-)-2-(4' _三氟甲磺酰氧基苯基)丙酰氯，將所得溶液室溫攪拌3小時。溶劑蒸 發(fā)后，粗制物用CH2Cl2(IOmL)稀釋，用水(2xl0mL)洗滌，再用NaSO4干燥后減壓蒸發(fā)得 到一種油狀殘留物。該粗制物用正己烷處理，形成的沉淀物過濾后得到白色粉末狀的純 R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-異丙氧基丙酰胺(0.45g，1.28mmOl)(得率 77% )。[a ]D =-24(c = 0. 5 ;CH30H)。1H-WR(CDCl3) δ 8. 15 (bs, 1H,C0NH) ;7.45(d，2H， J = 7Hz) ；7. 20(d,2H, J = 7Hz) ；3. 65 (m, 1H) ；3. 50 (q, 1H, J = 7Hz) ； 1. 55(d,3H, J = 7Hz)； 1. 2(d，6H，J = 3Hz)。
根據(jù)實施例3中所述的相同方法，從購買的胺或從按照WO 01/58852 ；WO 00/24710和WO 02/068377所述方法制備的胺為原料合成了以下酰胺。實施例5R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-環(huán)戊基丙酰胺[Cod = -Ss(C = I5CH3OH)q1H-WR(CDCI3) δ 7. 52 (d, 2Η, J = 7Hz) ;7.28(d，2H，J =7Hz) ；5. 55 (bs, 1H,C0NH) ；3. 58 (q, 1H, J = 7Hz) ；3. 48 (m, 1H) ；2.85(m，4H) ；2.36(m，4H)；
1.58(d，3H，J = 7Hz)。實施例6R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-[3-(N'-哌啶基)丙基]丙酰胺[a ]D = -26 (c = 2 ； CH3OH)。1H-WR(CDCl3) δ 8. 11 (bs，1H，CONH) ;7.72(d，2H， J = 7Hz) ;7.25(d，2H，J = 7Hz) ；3. 88 (q, 1H, J = 7Hz) ；3. 55 (m, 2H) ；3. 30-2. 95 (m，3H)；
2.48 (m, 2H) ； 2. 25 (m, 2H) ；2. 05 (m, 2H) ；2· 00-1. 74 (m，2H) ； 1· 54 (d，3H，J = 7Hz)。實施例6aR(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-[3-(N'-哌啶基)丙基]丙酰胺鹽 酸鹽把R(-)-2_[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-[3-(N'-哌啶基)丙基]丙酰胺 (0. 15g,0. 35mmol)溶于CH2Cl2 (3mL)。加入3N HCl (0. 5mL)，室溫攪拌1小時，減壓蒸去溶 劑，得到的粗制物用無水乙醚(5mL)稀釋。抽真空過濾除去形成的沉淀物，得到白色粉末狀 的純R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-[3-(N'-哌啶基)丙基]丙酰胺鹽酸鹽 (0. 128g，0. 28mmol)。[α ]D =-12(c = 2 ;CH30H)。實施例7R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-[2-(N'-吡咯烷基)乙基]丙酰胺[a ]D =-34(c = 1 ;CH30H)。1H-WR(CDCl3) δ 8. 65 (bs, 1Η, CONH) ;7.75(d，2H，J =7Ηζ) ；7. 22 (d, 2Η, J = 7Ηζ) ；4. 02 (m, 2Η) ；3. 85-3. 74 (m, 3H) ；3. 31 (m, 2H) ；3. 0-2. 80 (m, 2H) ；2. 41-2. 12(m，4H) ； 1. 65 (d，3H，J = 7Hz)。實施例7aR(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-[2-(N'-吡咯烷基)乙基]丙酰胺 鹽酸鹽按實施例6a中所述方法制備此化合物。[ α ]D = -22 (c = 1 ；CH3OH)。實施例8R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-[3-(N'-吡咯烷基)丙基]丙酰胺[ α ]D = -41 (c = 1 ；CH3OH)。1H-WR(CDCl3) δ 8. 01 (bs, 1H, CONH) ；7. 62(d，2H，J =7Hz) ；7. 15 (d, 2H, J = 7Hz) ；3. 80 (q, IH, J = 7Hz) ；3. 52 (m, 2H) ；3. 31 (m, 2H) ；2. 95 (m, 2H) ；2.78(m，2H) ；2. 15-1. 90 (m，6H) ； 1. 55 (d，3H，J = 7Hz)。實施例8aR(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-[3-(N'-吡咯烷基)丙基]丙酰胺 鹽酸鹽
按實施例6a中所述方法制備此化合物。[a ]D =-17(c = 1 ;CH30H)。實施例9R(+)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-(2-羥基乙氧基乙基)丙酰胺攪拌下回流R(-)_2-(4' _三氟甲磺酰氧基苯基)丙酸(0. 53g，l. 79mmol)的亞硫 酰氯(ImL)溶液2小時。室溫冷卻和減壓蒸發(fā)后，把粗制油狀殘留物溶解于CH2Cl2 (2mL)，將 其滴加至溶于CH2Cl2 (4mL)的2-羥基乙氧基乙胺(0. 36mL, 3. 58mmol)溶液中。將所得混合 液于室溫下攪拌過夜。溶液用水(3xl0mL)洗滌，用NaSO4干燥，并減壓蒸發(fā)得到粗制油狀殘 留物。將粗制物用異丙醚處理純化(室溫過夜)，過濾后得到蠟狀固體R(+)-2_[(4'-三 氟甲磺酰氧基)苯基]-N-(2-羥基乙氧基乙基)丙酰胺(0.48g，L25mmol)(得率70%)。[a ]D =+6(c = 1 ;CH30H)。1H-WR(CDCl3) δ 7. 78(d,2H, J = 7Hz) ;6.95(d，2H， J = 7Ηζ) ；5. 92 (bs, 1Η, C0NH) ；3. 68(m，2H) ；3. 55-3. 44 (m, 7H) ； 1. 52 (d，3H，J = 7Hz)。實施例10R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-[2-(4‘-三氟甲基)噻唑基]丙酰 胺攪拌下回流R(-)_2-(4'-三氟甲磺酰氧基苯基)丙酸(1.012g，3.39mmOl)的亞 硫酰氯(2mL)溶液2小時。室溫冷卻和減壓蒸發(fā)后，把粗制油狀殘留物溶于CH2Cl2 (2mL)，將 其滴加至溶于CH2Cl2 (4mL)的2-氨基-4-三氟甲基噻唑(1. 14g,6. 78mmol)溶液中。2-氨 基-4-三氟甲基噻唑的制備方法如 Moazzam M.等，Indian J. Chem.，27B (11)，1051-1053 頁(1988)所述。將形成的混合液于室溫下攪拌過夜。該溶液用飽和NaHCO3溶液(2x5mL) 和水(3xl0mL)洗滌，用NaSO4干燥，減壓蒸發(fā)得到粗制油狀殘留物。用異丙醚室溫處理粗 制物過夜后，過濾形成的沉淀物，分離得到微棕色固體純R (_) "2"[(4'-三氟甲磺酰氧基) 苯基]-N-[2-(4‘-三氟甲基)噻唑基]丙酰胺(0.94g，2. IOmrnol)(得率62% )。熔點138-141°C。[Cod= -So(C = O-S5CH3OH)01H-WR(CDCI3) δ 10. 68 (bs, 1H, C0NH) ；7. 45 (d, 2H, J = 7Hz) ；7. 28 (d, 2H, J = 7Hz) ；7. 06 (s, 1H) ；3. 88 (q, IH, J = 7Hz)； 1. 67(d，3H，J = 7Hz)。實施例11R(-) -2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-甲基_N_羥基丙酰胺將二甲基甲酰胺(0. 42mL, 5. 42mmol)的CH2Cl2 (4mL)溶液在溫度_20°C下冷卻，滴 加入溶于CH2Cl2 (5mL)中的草酰氯(0. 16mL ；1. 83mmol)溶液。滴加完畢時，溫度升至0°C，攪 拌30分鐘后，加入R (-)-2-(4 ‘ _三氟甲磺酰氧基苯基)丙酸(0. 5g,1.67mmol)和4-甲基 嗎啉(0. 185mL, 1. 67mmol)。0°C攪拌30分鐘后，加入N-甲基羥胺鹽酸鹽(0. 27g，3. 3mmol) 和4-甲基嗎啉(0.73mL，6.6mmol)。將溫度升至室溫，攪拌過夜。形成的沉淀物過濾除去， 減壓蒸去母液。把粗制油狀殘留物溶于CH2Cl2 (5mL)中，用IN HCl(2x5mL)、水(2xl0mL)和 飽和NaHCO3溶液(2xl0mL)洗滌，用NaSO4干燥，減壓蒸發(fā)得到粗制油狀殘留物。該粗制物 用快速層析法(CH2CL2/CH30H 99 1)純化得到微黃色油狀1 (-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧 基)苯基]-N-甲基-N-羥基丙酰胺(0. 355g，1. 08mmol)(得率65% )。[α ]D = -23 (c = 1· 5 ;CH30H)。1H-WR(DMSO-Cl6) δ 10. 05 (bs, 1Η, OH) ；7. 48 (s, 4H) ；4. 40 (q, IH, J = 7Hz) ；3. 10 (s, 3H) ；1. 40 (d, 3H, J = 7Hz)。
表III列出了實施例1-11的化合物的化學名稱和結構式。表 III
權利要求
如通式(I)所示的2 (R) 苯基丙酸衍生物及其藥學上可接受的鹽在制備治療黑色素瘤和血管生成的藥物中的應用其中R′選自H，R選自 H、C1 C5烷基； 雜芳基，選自吡啶、嘧啶、噻唑、噁唑基； 通式 CH2 CH2 Z (CH2 CH2O)nR′所示的殘基，其中R′是H或C1 C5烷基，n是0至2的一個整數(shù)，Z是O或S； 通式 (CH2)n NRaRb所示的殘基，其中n是0至5的一個整數(shù)，Ra和Rb是相同或不同的C1 C6烷基，或者Ra和Rb與它們所結合的氮原子一起形成如通式(II)所示的3至7元雜環(huán)，其中，W表示單鍵、O、S、N Rc，Rc代表H、C1 C6烷基或C1 C6烷基苯基，n是0至3的一個整數(shù)； 通式 SO2Rd所示的殘基，其中Rd是C1 C6烷基或C6環(huán)烷基。FSA00000240768400011.tif,FSA00000240768400012.tif
2.如權利要求1所述的應用，其中，在如通式(I)所示的化合物中， R'是H，R選自-H、C1-C5 燒基；-雜芳基，選自吡啶、噻唑、噁唑基；-通式-(CH2)n-NRaRb所示的殘基，其中，η是整數(shù)2或3，基團NRaRb是N，N- 二甲胺、N， N-二乙胺、1-哌啶基、1-吡咯烷基、4-嗎啉基、1-哌嗪基、1-(4-甲基)哌嗪基； -通式-SO2Rd所示的殘基，其中Rd是C1-C2烷基或C6環(huán)烷基。
3.如權利要求1或2所述的應用，其中，如通式(I)所示的化合物選自 R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-甲磺?；０罚?R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-甲磺?；０封c鹽； R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]丙酰胺；5R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-甲基丙酰胺； R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-異丙氧基丙酰胺； R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-[3-(N'-哌啶基)丙基]丙酰胺； R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-[3-(N'-哌啶基)丙基]丙酰胺鹽酸鹽；R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-[2-(N'-吡咯烷基)乙基]丙酰胺； 10R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-[2-(N'-吡咯烷基)乙基]丙酰胺鹽 酸鹽；R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-[3-(N'-吡咯烷基)丙基]丙酰胺； R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-[3-(N'-吡咯烷基)丙基]丙酰胺鹽酸^rt.；R(+)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-(2-羥基乙氧基乙基)丙酰胺。
4.如權利要求1至3中任一項所述的應用，其中，如通式⑴所示的化合物是 R(-)-2-[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-甲磺酰基丙酰胺及其鈉鹽。
5.2-(R)-苯基丙酸衍生物及其藥學上可接受的鹽在制備治療黑色素瘤和血管生成的 藥物中的應用，其中，所述衍生物是R(-)-2_[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-環(huán)戊基丙 酰胺；或R(-)-2_[(4'-三氟甲磺酰氧基)苯基]-N-[2-(4‘-三氟甲基)噻唑基]丙酰
全文摘要
以通式(I)所示的(R)-2-[4-(三氟甲磺酰氧基)苯基]丙酰胺衍生物及含有它們的藥物組合物，其中通式(I)中各變量如權利要求書所定義，可用于抑制白介素-8(IL-8)與CXCR1和CXCR2膜受體相互作用所誘導的嗜中性白細胞(多形核中性白細胞)的趨化活性。此類化合物可用于預防和治療所述活化產(chǎn)生的疾病。值得注意的是，這些代謝產(chǎn)物對環(huán)氧合酶的活性沒有抑制作用，對治療嗜中性白細胞依賴性疾病如牛皮癬、潰瘍性結腸炎、黑色素瘤、慢性阻塞性肺病(COPD)、大皰性天皰瘡、類風濕性關節(jié)炎、特發(fā)性纖維增生、腎小球腎炎特別有用，并可預防和治療局部缺血和再灌注引起的損傷。
文檔編號C07D277/46GK101912382SQ20101026095
公開日2010年12月15日 申請日期2005年3月21日 優(yōu)先權日2004年3月23日
發(fā)明者F·科洛塔, M·C·切斯塔, M·莫斯卡, M·阿萊格蒂, R·貝爾蒂尼 申請人:冬姆佩制藥股份公司