專利名稱：Hcv核苷類抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明提供了核苷類化合物及其某些衍生物，其為RNA依賴性RNA病毒聚合酶的 抑制劑。這些化合物為RNA依賴性RNA病毒復(fù)制的抑制劑且適用于治療RNA依賴性RNA病 毒感染。其尤其適用作丙型肝炎病毒(HCV)NS5B聚合酶的抑制劑，用作HCV復(fù)制的抑制劑， 和用于治療丙型肝炎感染。本發(fā)明涉及HCV復(fù)制子RNA復(fù)制的核苷類抑制劑。尤其是，本發(fā)明涉及嘧啶核苷 化合物用作次基因組HCV RNA復(fù)制的抑制劑的用途及含有所述化合物的藥物組合物。
背景技術(shù)：
丙型肝炎病毒為全世界慢性肝病的首要原因。(Boyer，N.等人J. H印atol. 2000 32 :98-112)。感染HCV的患者有發(fā)展成肝硬化及隨后肝細(xì)胞癌的風(fēng)險(xiǎn)，因此，HCV是肝移植 的主要適應(yīng)癥(indication)。HCV已被歸為黃病毒科(Flaviviridae)病毒家族成員之一，該病毒家族包括黃病 毒屬、瘟病毒屬及包括丙型肝炎病毒在內(nèi)的丙型肝炎病毒屬(Rice，C. Μ.，F(xiàn)laviviridae The viruses and their replication,:Fields Virology,Editors :Fields,B. N. ,Knipe, D. M.,禾口 Howley, P.M. , Lippincott-Raven Publishers, Philadelphia, Pa. , Chapter 30, 931-959,1996)。HCV是含有約9. 4kb正義單鏈RNA基因組的包膜病毒。該病毒基因組是 由5'-未翻譯翻譯區(qū)(UTR)、編碼約3011個(gè)氨基酸的多蛋白前體的長開放閱讀框和短 3' UTR組成。5' UTR是HCV基因組的最高保守部分，且對于啟動(dòng)及控制多蛋白翻譯有重 要作用。HCV的遺傳分析已鑒定了 6種主要基因型，其在DNA序列上有超過30%的差異。已 辨別出30種以上亞型。在美國，約70%的感染個(gè)體有Ia型及Ib型感染。Ib型是亞洲最 流行的亞型。(X. Forns 和 J. Bukh，Clinics in Liver Disease 1999 3 :693_716 ;J. Bukh 等人，Semin.Liv.Dis. 1995 15:41-63)。遺憾地，1型感染比2型或3型基因型更抗治療 (N. N. Zein, Clin. Microbiol. Rev.，2000 13 :223_235)。病毒結(jié)構(gòu)蛋白包括核殼核心蛋白(C)及兩種包膜糖蛋白El及E2。HCV還編碼兩種 蛋白酶由NS2-NS3區(qū)編碼的鋅依賴性金屬蛋白酶以及在NS3區(qū)編碼的絲氨酸蛋白酶。這 些蛋白酶是前體多蛋白的特異性區(qū)域裂解為成熟肽所必需的。非結(jié)構(gòu)蛋白5(NS5B)的羧 基部分含有RNA依賴性RNA聚合酶。其余非結(jié)構(gòu)蛋白NS4A和NS4B的功能以及NS5A(非結(jié) 構(gòu)蛋白5的氨基末端部分)的功能仍未知。據(jù)信由HCV RNA基因組編碼的非結(jié)構(gòu)蛋白的大 部分涉及RNA復(fù)制。目前有可用于治療HCV感染的有限數(shù)目的被批準(zhǔn)療法。新的和現(xiàn)存的治療HCV 的治療方法以及HCV NS5B聚合酶的抑制作用已在以下文獻(xiàn)中綜述R. G. Gish, Sem. Liver. Dis. ,1999 19 5 ；Di Besceglie, Α. Μ.禾口 Bacon, B. R. , Scientific American, October 1999 80-85 ；G. Lake-Bakaar,對于慢性丙型肝炎病毒肝病的目前和將來治療，Curr. Drug Targ. Infect Dis. 2003 3(3) :247_253 ;P. Hoffmann 等人，關(guān)于丙型肝炎病毒感染的實(shí) 驗(yàn)治療的近期專利(1999-2002)，Exp. Opin. Ther. Patents 2003 13(11) 1707-1723 ； M. P. Walker等人，治療慢性丙型肝炎的有希望的候選物，Exp. Opin. investing. Drugs 2003 12(8) :1269-1280 ;S.-L. Tan等人，丙型肝炎治療目前的狀態(tài)和新興策略，Nature Rev. Drug Discov. 2002 1 :867_881。
1 ; R-C(K)JNH2 1b:R-C(-NH+)NH2利巴韋林(Ia;l-((2R，3R，4S，5R)-3，4- 二羥基_5_羥基甲基-四氫-呋 喃-2-基)-IH-[1，2，4]三唑-3-甲酸酰胺；病毒唑(Virazole))為合成的非干擾素誘發(fā)的 廣譜抗病毒核苷類似物。利巴韋林具有抗包括黃病毒科物種的若干DNA及RNA病毒的體外 活性(Gary L. Davis,Gastroenterology 2000 118 :S104_S114)。在單一療法中，利巴韋林 在40%患者中使血清氨基轉(zhuǎn)移酶含量降至正常，但其未降低HCV-RNA的血清含量。利巴韋 林還表現(xiàn)出顯著毒性且已知其誘發(fā)貧血。Viramidine Ib是在肝細(xì)胞中轉(zhuǎn)化成Ia的前藥。近十年來干擾素(IFN)可用于治療慢性肝炎。IFN是由免疫細(xì)胞反應(yīng)病毒感染而 產(chǎn)生的糖蛋白。已辨識(shí)兩種不同類型的干擾素1型包括幾種干擾素α以及一種干擾素β， 2型包括干擾素Y。1型干擾素主要由感染細(xì)胞產(chǎn)生，且保護(hù)相鄰細(xì)胞以免再次感染。IFN 抑制包括HCV的許多病毒的病毒復(fù)制，且當(dāng)用作丙型肝炎感染的單獨(dú)治療時(shí)，IFN抑制血清 HCV-RNA至不可檢測的水平。此外，IFN使血清氨基轉(zhuǎn)移酶水平恢復(fù)正常。遺憾地，IFN的 作用是短暫的。停止治療導(dǎo)致70%的復(fù)發(fā)率且僅10-15%表現(xiàn)出持續(xù)的病毒反應(yīng)，以及正 常血清丙氨酸轉(zhuǎn)移酶水平(L. -B. Davis,上述)。早期IFN療法的一個(gè)局限性為該蛋白從血液中快速清除。IFN用聚乙二醇(PEG) 的化學(xué)衍生化作用導(dǎo)致蛋白具有顯著改善的藥物動(dòng)力學(xué)特性。PEGASYS⑧為干擾素α _2a 與40kD分支鏈單甲氧基PEG的綴合物，且PEG-INTR0N⑧為干擾素α -2b與12kD單甲氧 基 PEG 的綴合物。(B. A. Luxon 等人，Clin. Therap. 2002 24(9) :13631383 ;Α· Kozlowski 和 J. Μ. Harris, J.Control. Release, 2001 72 :217_224)。目前用利巴韋林與干擾素-α對HCV的組合療法代表了最佳療法。組合利巴韋 林與PEG-IFN(下文)在54-56%患者中導(dǎo)致持續(xù)的病毒反應(yīng)。對于2型及3型HCV而言， SVR達(dá)到80%。(Walker，上文)。遺憾地，該組合還產(chǎn)生副作用，從而造成了對臨床的挑戰(zhàn)。 抑郁、流感樣癥狀及皮膚反應(yīng)與皮下IFN-α相關(guān)，而溶血性貧血與用利巴韋林持續(xù)治療相關(guān)。目前已確定的用于如抗HCV治療的藥物開發(fā)的許多潛在分子目標(biāo)包括(但不限 于)NS2-NS3自體蛋白酶、N3蛋白酶、N3解旋酶及NS5B聚合酶。RNA依賴性RNA聚合酶對 于單鏈、正義、RNA基因組的復(fù)制完全必需。這種酶激發(fā)藥物化學(xué)家的強(qiáng)烈興趣。NS5B的核苷與非核苷類抑制劑均是已知的。核苷類抑制劑可用作鏈終止劑或用作干擾核苷酸與聚合酶結(jié)合的競爭性抑制劑。 對于用作鏈終止劑而言，核苷類似物必須由細(xì)胞吸收且在體內(nèi)轉(zhuǎn)化成三磷酸酯以競爭聚合 酶核苷酸的結(jié)合位點(diǎn)。這種向三磷酸酯的轉(zhuǎn)化通常是由對潛在核苷聚合酶抑制劑賦予額外 結(jié)構(gòu)要求的細(xì)胞激酶所介導(dǎo)的。此外，此將核苷作為HCV復(fù)制抑制劑的直接評估限制于能 夠原位磷酸化的基于細(xì)胞的測定。在2001 年 11 月 29 日公開的 WO 01 90121 中，J.-P. Sommadossi 及 P. Lacolla 公 開且舉例說明了式2和3的1'-烷基-和2' _烷基核苷的抗-HCV聚合酶活性。在2001 年12月6日公開的WO 01/92282中，J.-P. Sommadossi及P. Lacolla公開且舉例說明了用 式2和3的1'-烷基-和2'-烷基核苷治療黃病毒及瘟病毒。在均公開于2003年4月3 日的WO 03/026675及WO 03/026589中，G. Gosselin等人公開了 4'-烷基核苷4以及使用 4'-烷基核苷治療黃病毒及瘟病毒的方法。在均公開于2004年1月8日的WO 2004003000 及 WO 2004002999 中，J.-P. Sommadossi 等人公開 1' _、2' _、3'-和 4'-取代的 β-D 及β-L核苷的前藥。在公開于2004年1月8日的WO 04/002422中，J.-P. Sommadossi等 人公開了 2' -C-甲基-呋喃核糖基胞嘧啶核苷的3' -O-L-纈氨酸酯及其用于治療HCV 的用途。Idenix已報(bào)導(dǎo)作為胞嘧啶核苷類似物2 (B =胞嘧啶)的纈氨酸酯5的相關(guān)化合物 ΝΜ283 的臨床試驗(yàn)。此外，Idenix Pharmaceuticals, Ltd.還于 WO 04/046331 中公開了由
生物學(xué)活性的2'-支鏈β -D或β -L核苷或其可藥用鹽或前藥所導(dǎo)致的黃病毒科突變。B =腺嘌呤、胸苷、尿嘧啶、胞嘧啶核苷、鳥嘌呤和次黃嘌呤在2002年7月25日公開的WO 02/057425中，S. S. Carroll等人公開了其中碳水 化合物亞單位經(jīng)化學(xué)修飾的RNA依賴性RNA聚合酶的核苷類抑制劑。在2002年7月25日 公開的TO 02/05787中，S. S. Carroll等人公開了相關(guān)的2 α -甲基和2 β -甲基核糖衍生 物，其中堿基為任選經(jīng)取代的7Η-吡咯并[2，3-d]嘧啶基6。該同一申請案公開了 3β-甲 基核苷的一個(gè)實(shí)例。S. S. Carroll 等人(J. Biol. Chem. 2003 278(14) :11979_11984)公開 了 2' -0-甲基胞嘧啶核苷(6a)對HCV聚合酶的抑制作用。在2004年12月23日公開的 美國公開案第2004/0259934號(hào)中，D. B. Olsen等人公開了用核苷化合物抑制冠狀病毒科 (Coronaviridae)病毒復(fù)制及治療冠狀病毒科病毒感染的方法。
在2002 年 12 月 19 日公開的 WO 02/100415 (US 2003/0236216 Al)中，R.R. Devos 等人公開了表現(xiàn)出HCV活性的4' _取代的核苷化合物。明確鑒定的四種化合物包括 4'-疊氮基化合物7a、4'-乙炔基化合物7b、4'-乙氧基化合物7c以及4‘-乙?；?化合物7d。對所舉例說明的核糖部分的修飾包括2'-脫氧衍生物8a、3'-脫氧衍生物 8b,3'-甲氧基衍生物8e、3'-氟衍生物8c以及2' ,2' -二氟衍生物8d。在2004年 6月3日公開的WO 2004/046159 (US 2004121980)中，J. A. Martin等人公開了適用于治療
HCV-介導(dǎo)的疾病的7a的前藥。美國申請案兩者均以引用的方式全文并入本文中。
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8a: R1-OH,R2 .R3-R*-H BbsR3-OHfRi-Ri-R^-H 8c: R3-OH1R2 = F, R'-R4-H 8d:Rl-RJ-H, R3-R4 = F 8e: R1 -OMct Rj - OH, R'-R^-H在2002年6月11日申請的題為“作為HCV RNA復(fù)制抑制劑的4'-取代的核 苷衍生物”的美國申請案第10/167，106中，及在2003年11月19日申請的美國申請案第 10/717，260號(hào)中公開了與本發(fā)明相關(guān)的化合物。所述申請案兩者均以引用的方式全文并入 本文中。Y.-H. Yun 等人(Arch. Pharm. Res. 198518 (5) :364_35)公開了 4 ‘-疊氮 基-2'-脫氧-2'-氟-阿拉伯呋喃糖基核苷(9 :R = H、Me和Cl)的合成及抗病毒活性。
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11B =腺嘌呤、尿嘧啶、胸腺嘧啶G. S. Jeon 及 V. Nair (Tetrahedron 1996 52 (39) :12643_50)公開了合成 4'-疊
氮基甲基-2' ,3' _脫氧核糖核苷10 (B=腺嘌呤、胸腺嘧啶和尿嘧啶)作為HIV逆轉(zhuǎn)錄酶
6抑制劑。已報(bào)導(dǎo)4'-疊氮基核苷的若干計(jì)算研究D，Galisteo等人，J. Mol. Struct. 1996 384 (1) 25-33 J. Pepe 等人，Eur. J. Med. Chem. 1996 32 (10) :775_786 ；E. Estrada 等人，In silico studies toward the discovery of New Anti HIV Nucleoside, J. Chem. Info. Comp. Sci. 2002 42(5) :1194_1203。I. Sugimoto等人公開了 4'-乙炔基-脫氧胞嘧啶核苷(11)以及在4'-位 處的其它二碳取代基的合成及HIV及單純皰疹(H. simplex)生物測定(Nucleosides and Nucleotides. 183. Synthesis of 4' β-Branched Thymidines as a New Type of Antiviral Agent, Bioorg. Med. Chem. Lett. 1999 9 :385_88)。T. Wada 等人(Nucleosides & Nucleotides 1996 15(1-3) 287-304)公開了 4' _C_ 甲基核苷的合成及抗 HIV 活性。在2001年5月10日公開的WO 01/32153中，R. Storer公開了通過給藥核苷的二 氧戊環(huán)類似物治療或預(yù)防黃病毒科病毒感染的方法。在2002年3月7日公開的WO 02/18404中，R. Devos等人公開了新的以及已知的 嘌呤和嘧啶核苷衍生物及其用作次基因組HCV復(fù)制的抑制劑的用途以及含有該等核苷衍 生物的藥物組合物。所公開的化合物是由具有被取代的嘌呤和嘧啶堿基的核苷組成的。EPA公開案第O 352 248號(hào)公開了用于治療HIV、皰疹及肝炎的多種L-呋喃核糖 基嘌呤核苷。類似說明見于由Aktiebolaget Astra申請的WO 88/09001中。K. Kitano 等人(Tetrahedron 1997 53(39) :13315_13322)公開了合成 4'-氟甲 基2-脫氧-D-赤-、核糖-及阿拉伯-呋喃戊糖基胞嘧啶及抗腫瘤活性。已證實(shí)HIV逆轉(zhuǎn)錄酶的非核苷類別構(gòu)抑制劑單獨(dú)使用或與核苷類抑制劑以及與 蛋白酶抑制劑組合使用具有療效。已描述且目前處于各種開發(fā)階段的非核苷類HCV NS5B抑 制劑的若干種類包括苯并咪唑類(H. Hashimoto等人WO 01/47833，H. Hashimoto等人WO 03/000254，P. L. Beaulieu 等人 WO 03/020240 A2 ;P. L. Beaulieu 等人 US 6，448，281 Bi; P. L. Beaulieu 等人 WO 03/007945 Al)；吲哚類(P. L. Beaulieu 等人 WO 03/0010141 Α2)； 苯并噻二嗪類，例如1，(D. Dhanak等人2001年5月10日申請的WO 01/85172 Al ；D. Chai 等人2002年6月7日申請的WO 2002098424, D. Dhanak等人2002年10月28日申請的 WO 03/037262 Α2 ；K. J. Duffy 等人 2003 年 5 月 23 日申請的 WO 03/099801 Al，M. G. Darcy 等人2002年10月28日申請的WO 2003059356 ；D. Chai等人2004年6月24日申請的WO 2004052312，D. Chai 等人 2003 年 12 月 13 日申請的 WO 2004052313 ；D. M. Fitch 等人 2003 年12月11日申請的WO 2004058150 ；D. K. Hutchinson等人2004年8月19日申請的WO 2005019191 J. K. Pratt 等人 2003 年 10 月 31 日申請的 W02004/041818 Al)；
權(quán)利要求
化合物19或者其酸加成鹽。FSA00000259305900011.tif
2.權(quán)利要求1的化合物，其中所述酸加成鹽是可藥用鹽。
3.權(quán)利要求1的化合物在制備用于治療由丙型肝炎病毒(HCV)介導(dǎo)的疾病的藥物中的 用途。
4.權(quán)利要求3的用途，其中所述化合物是以l-100mg/kg患者體重/天的劑量遞送。
5.權(quán)利要求3的用途，其中該治療方案或藥物另外包含至少一種免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)劑和/ 或至少一種抑制HCV復(fù)制的抗病毒劑。
6.權(quán)利要求5的用途，其中所述免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)劑是干擾素、白介素、腫瘤壞死因子或集 落刺激因子。
7.權(quán)利要求6的用途，其中所述免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)劑為干擾素或經(jīng)化學(xué)衍生化的干擾素。
8.權(quán)利要求5的用途，其中其中該治療方案或藥物另外包含至少一種其它抗病毒劑。
9.權(quán)利要求8的用途，其中所述抗病毒化合物選自HCV蛋白酶抑制劑、另一種核苷類 HCV聚合酶抑制劑、非核苷類HCV聚合酶抑制劑、HCV解旋酶抑制劑、HCV引發(fā)酶抑制劑和 HCV融合抑制劑。
10.一種藥物組合物，其包含治療有效量的權(quán)利要求1的化合物以及至少一種可藥用 載體、稀釋劑或賦形劑。
11.權(quán)利要求10的藥物組合物，其包含500-1500mg壓制片劑，所述壓制片劑含有 35-75wt%的權(quán)利要求1的化合物，其余包括至少一種可藥用載體、稀釋劑或賦形劑。
12.權(quán)利要求11的藥物組合物，其包含500-1500mg壓制片劑，所述壓制片劑含有 40-60wt%的權(quán)利要求1的化合物，其余包括至少一種可藥用載體、稀釋劑或賦形劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了HCV核苷類抑制劑。4-氨基-1-((2R，3S，4S，5R)-5-疊氮基-4-羥基-5-羥基甲基-3-甲基-四氫呋喃-2-基)-1H-嘧啶-2-酮(22)為丙型肝炎(HCV)聚合酶抑制劑。本發(fā)明還還公開了用于抑制HCV及治療HCV-介導(dǎo)的疾病的組合物及方法，制備所述化合物的方法及該方法中所使用的合成中間體。
文檔編號(hào)C07H19/073GK101979397SQ20101027400
公開日2011年2月23日 申請日期2007年10月4日 優(yōu)先權(quán)日2006年10月10日
發(fā)明者A·溫奎斯特, D·B·史密斯, G·卡拉亞諾夫, J·A·馬丁, N·-G·約翰遜 申請人:美迪維爾公司