專利名稱：：新型抗-α5β1抗體及其應用的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及新型α5β工抗體，包括所述抗體的組合物和試劑盒，以及使用所述抗體的方法。
背景技術：
：αδβ整合素是一種細胞膜糖蛋白，其通過其主要配體纖連蛋白介導細胞-ECM相互作用。α5β1整合素在細胞遷移、分化和存活中起作用。在腫瘤血管內(nèi)皮(例如，胃癌、結腸直腸癌、肝細胞癌、子宮宮頸癌、和乳腺癌)和其它血管源性血管中，α5β1整合素水平升高。在血管發(fā)生過程中，α5β1整合素調(diào)節(jié)周細胞與內(nèi)皮細胞的締合以及內(nèi)皮胞外基質(zhì)的裝配。因此，α5β1整合素是抑制血管發(fā)生和使細胞對VEGF拮抗劑的作用敏感的有效靶標。因此，在本領域中存在對于靶向α5β1整合素的組合物和方法的需求。本發(fā)明滿足這一需求和其它的需求。發(fā)明概述本發(fā)明提供來源于單克隆抗體18C12的新型抗-Cij1抗體，包括所述新型抗-α5βi抗體的試劑盒和組合物，以及制備和/或使用它們的方法。本發(fā)明的一個實施方案提供一種抗-α5β工抗體，所述抗體包括VL結構域，其包括含有TL-S/T-S/P/T-Q/N-H-F/S-T/I-Y-K/T-I-G/D/S(SEQIDNO:15)的CDR-Ll；含有L/I-N/T-S-D/H/S-G/S-S/L/T-H/Y-N/K/Q/1-K/F-G/A-D/S/V(SEQIDNO:16)的CDR-L2；含有G/A-S/A/Y-S/Y-Y-S/A/Y-S/Y/T-GY-V/I(SEQIDNO17)的CDR-L3；和VH結構域，其包括含有GFTFS-N/A-RW-I/V-Y(SEQIDNO:18)的CDH-H1；含有GIKTKP-N/A/T-I/R-YAT-E/Q-YADSVKG(SEQIDNO:19)的CDR-H2；和含有L/V-TG-M/K-R/K-YFDY(SEQIDNO:20)的⑶R-Hl。在一些實施方案中，所述抗-α5β工抗體包括VL結構域和VH結構域，所述VL結構域包括分別含有圖3列出的序列的⑶R-L1，⑶R-L2，和⑶R-L3，所述VH結構域包括分別含有圖3列出的序列的⑶R-H1，⑶R-H2，和⑶R-H3，即，這樣的VL結構域，其包括含有SEQIDNO21，22，23，或M列出的序列的CDR-Ll，含有SEQIDNO25，洸，27，或沘列出的序列的CDR-L2，和含有SEQIDNO29，30，31，或32列出的序列的CDR-L3；和這樣的VH結構域，其包括含有SEQIDNO:34或35列出的序列的⑶R-Hl，含有SEQIDNO:36或37列出的序列的CDR-H2，和含有SEQIDNO:38，39，或40列出的序列的CDR-H3。在一些實施方案中，所述抗-Qj1抗體包括含有SEQIDNOS:3_8中任一項的VL結構域和含有SEQIDNOSII-14中任一項的VH結構域。在一些實施方案中，所述抗-aJ1抗體包括含有SEQIDNO:4的VL結構域和含有SEQIDNO:11的VH結構域。在一些實施方案中，所述抗-α5βi抗體包括含有SEQIDNO5的VL結構域和含有SEQIDNO12的VH結構域。在一些實施方4案中，所述抗-Qj1抗體包括含有SEQIDNO6的VL結構域和含有SEQIDNO13的VH結構域。在一些實施方案中，所述抗-aJ1抗體包括含有SEQIDNO:7的VL結構域和含有SEQIDNO:13的VH結構域。在一些實施方案中，所述抗-α5βi抗體包括含有SEQIDNO:8的VL結構域和含有SEQIDNO:14的VH結構域。在一些實施方案中，所述抗-α5βi抗體是人的、人源化的或嵌合的抗體。在一個實施方案中，所述抗-α5β工抗體是單克隆抗體。在一些實施方案中，所述抗-Ci5^抗體與18C12抗體競爭結合Ci5^整合素。在一些實施方案中，所述單克隆抗體是嵌合抗體。在一些實施方案中，所述抗-α5β工抗體是結合Cij1的抗體片段。在一些實施方案中，所述抗-aJ1抗體選自Fab，F(xiàn)ab，，F(xiàn)(ab)，2，單鏈Fv(scFv)，F(xiàn)v片段；雙抗體和線性抗體。在一些實施方案中，所述抗-α5β工抗體是全長IgGl或全長IgG4。在一些實施方案中，所述抗-α5β工抗體是雙特異性抗體或多特異性抗體。在一些實施方案中，所述雙特異性抗體結合VEGF和αJ1，并且是VEGF拮抗劑。在一些實施方案中，所述抗-α5β工抗體具有改變的效應子功能。在一些實施方案中，改變所述抗-aJ1抗體以減少或防止抗體依賴性細胞毒性(ADCC)或補體依賴性細胞毒性(CDC)活性(例如，通過改變編碼抗體Fc部分的核酸序列)。在一些實施方案中，抗體的Fc部分包括擬97Α置換。在一些實施方案中，所述抗-α5β工抗體已被修飾，從而增加或減少其在人中的半衰期(例如，通過改變編碼抗體Fc部分的核酸序列)。在一些實施方案中，所述αJ1抗體是與另一種實體(例如，治療劑或可檢測的標記)綴合的免疫綴合物的一部分。在一些實施方案中，所述治療實體是細胞毒性劑(例如，放射性同位素，毒素，生長抑制劑，或化療劑)。在一些實施方案中，所述可檢測的標記是熒光染料、放射性同位素、或酶。本發(fā)明的其它實施方案提供編碼本文所述的任一種抗-α5βi抗體的核酸分子，包括所述核酸的表達載體，和包括所述核酸的宿主細胞。本發(fā)明的另一些其它實施方案提供產(chǎn)生本文所述的任一種抗-α5β工抗體的方法，所述方法包括培養(yǎng)所述宿主細胞，從而產(chǎn)生所述抗體。在一些實施方案中，所述方法還包括從所述宿主細胞回收所述抗體。本發(fā)明的另一些實施方案提供包括本發(fā)明的αJ1抗體和藥用載體的藥物組合物。在一些實施方案中，所述藥物組合物還包括至少一種、兩種、三種、四種、或多種附加劑，其包括，例如，VEGF拮抗劑。在一些實施方案中，所述附加劑選自細胞毒性劑、化療劑、生長抑制劑、或抗血管發(fā)生劑。在一些實施方案中，所述VEGF拮抗劑是抗-VEGF抗體。在一些實施方案中，所述抗-VEGF抗體是貝伐珠單抗(bevacizumab)。本發(fā)明還提供包括檢測Qj1(例如，在已經(jīng)用VEGF拮抗劑治療的受試者中)的使用說明的制品(articlesαfmanufacture)禾口試劑盒。本發(fā)明的另一個實施方案提供治療患有包括異常血管發(fā)生、血管通透性或血管滲漏的疾病或病癥的受試者的方法。所述方法包括，向受試者施用治療有效量的本文所述的抗-α5βi抗體，由此治療所述疾病或病癥(例如，通過部分或完全抑制異常血管發(fā)生、血管通透性或血管滲漏)。在一些實施方案中，還向受試者施用VEGF拮抗劑。在一些實施方案中，所述VEGF拮抗劑和所述抗-α5βi抗體同時給藥。在一些實施方案中，所述VEGF拮抗劑和所述抗-α5βi抗體相繼地給藥。在一些實施方案中，所述疾病或病癥響應VEGF拮抗劑治療。在一些實施方案中，所述疾病或病癥選自癌癥，免疫疾病或眼科疾病。根據(jù)一個實施方案，所述疾病或病癥選自實體瘤，轉移性腫瘤，軟組織腫瘤，具有眼睛新血管形成的疾病，具有異常血管發(fā)生的炎性病，在移植到受試者后引起的疾病和具有異常的纖維血管組織增生的疾病。根據(jù)另一個實施方案，所述癌癥選自乳腺癌(breastcancer)(包括轉移性乳腺癌)，宮頸癌(cervicalcancer)，結腸直腸癌(colorectalcancer)(包括轉移性結腸直腸癌)，肺癌(lungcancer)(包括非小細胞肺癌(non-smallcelllungcancer))，非霍奇HE*；(non-Hodgkinslymphoma)(NHL),E^ffllfifiifil^l(chroniclymphocyticleukemia),腎細胞癌(renalcellcancer),前列腺癌(prostatecancer)(包括激素拮抗性前列腺癌(homonerefractoryprostatecancer))，月干癌(livercancer)，頭禾口頸癌(headandneckcancer),黑素瘤(melanoma),卵巢癌(ovariancancer),間皮瘤(mesothelioma),軟組織癌(softtissuecancer),胃腸基質(zhì)瘤(gastrointestinalstromaltumor)，多形性成膠質(zhì)細胞瘤(glioblastomamultiforme)和多發(fā)性骨髓瘤(multiplemyeloma)。根據(jù)另一個實施方案，所述疾病選自視網(wǎng)膜病變(retinopathy)，年齡相關的黃斑變性(age-relatedmaculardegeneration)(例如，濕性AMD(wetAMD))，糖尿病性黃斑水月中(diabeticmacularedema)，視網(wǎng)膜靜脈閉塞(retinalveinocclusion)(RVO)，和干性AMD(dryAMD)/地理性萎縮(geographicatrophy)(用于預防濕性AMD進展)發(fā)紅(rubeosis)；銀屑病(psoriasis),炎性腎病(inflammatoryrenaldisease),溶血性尿毒癥綜合征(haemolyticuremicsyndrome)，糖尿病腎病(diabeticnephropathy)(例如，增生性糖尿病腎病(proliferativediabeticretinopathy))，關節(jié)炎(arthritis)(例如，銀屑病關節(jié)炎(psoriaticarthritis)，骨關節(jié)炎(osteoarthritis)，類風濕關節(jié)炎(rheumatoidarthritis))，炎性腸病(inflammatoryboweldisease)，慢性炎癥(chronicinflammation),'11N111(chronicretinaldetachment),'11膜炎(chronicuveitis)，慢性玻璃體炎(chronicvitritis)，角膜移植排斥(cornealgraftrejection)，角HififiIiWifj^(cornealneovascularization),^IM#^SifiliWMl^l(cornealgraftneovascularization),MWi^^Mi(Crohn'sdisease),1(myopia)，目艮睛新血管病(ocularneovasculardisease)，佩吉特病(Pagetsdisease)，類天皰瘡(pemphigoid)，多動脈炎(polyarteritis)，激光放射狀角膜切開術后(post-laserradialkeratotomy),^JlNIMΤiW^)(retinalneovascularization),Sogrens^☆IE(Sogrenssyndrome),MXiS}(ulcerativecolitis),##Jr(graftrejection)，肺部炎癥(lunginflammation),腎病綜合征(nephroticsyndrome),/K月中(edema),與惡性病相關的腹水(ascitesassociatedwithmalignancies),中風(stroke)，血管纖維瘤(angiofibroma)和新血管性青光眼(neovascularglaucoma)。在一個實施方案中，所述方法還包括向受試者施用額外的治療劑(例如，抗腫瘤劑、化療劑、生長抑制劑、或細胞毒性劑)。本發(fā)明的另一實施方案提供了治療受試者中癌癥的方法，所述方法包括向受試者施用治療有效量的VEGF拮抗劑和抗-aJ1抗體。在一些實施方案中，VEGF拮抗劑和抗-aJ1抗體同時施用。在一些實施方案中，VEGF拮抗劑和抗-aJ1抗體依次施用。在一些實施方案中，所述癌癥響應VEGF拮抗劑療法。本發(fā)明的另一實施方案提供了治療患有AMD的受試者中的年齡相關的黃斑變性(age-relatedmaculardegeneration,AMD)(包括，例如、濕性年齡相關的黃斑變性(wetage-relatedmaculardegeneration))的方法，所述方法包括向受試者提供治療有效量的VEGF拮抗劑和抗-α5βi抗體。在一些實施方案中，VEGF拮抗劑和抗-α5βi抗體同時施用。在一些實施方案中，VEGF拮抗劑和抗-aJ1抗體依次施用。在另一實施方案中，提供一種治療受試者的自身免疫病的方法，包括提供同時或依次施用治療有效量的VEGF拮抗劑和Ci5^拮抗劑的步驟。在一些實施方案中，最初向欲治療的受試者施用VEGF拮抗劑，隨后向該受試者施用抗-Qj1抗體。在一些實施方案中，VEGF拮抗劑和αJ1拮抗劑同時施用給受試者。在一些實施方案中，抗-α5β工抗體VEGF拮抗劑最初施用給欲治療的受試者，并且VEGF拮抗劑隨后施用給受試者。在一些實施方案中，用VEGF拮抗劑治療受試者直至受試者對VEGF拮抗劑治療無反應，且隨后用抗-α5β工抗體治療受試者。在一特定實施方案中，當癌癥為非侵襲性或早期時，用VEGF拮抗劑治療受試者，當癌癥為侵襲性時，用抗-α5β工抗體治療受試者。在另一實施方案中，經(jīng)抗-α5β工抗體治療的受試者的患病組織中的α5β工水平與來自未患病的受試者的組織相比或非患病組織相比升高。在此情況下，所述方法可進一步包括檢測受試者中(例如用VEGF拮抗劑治療后的患病組織中)的Cij1的步驟。根據(jù)一個實施方案，侵襲性癌癥為轉移癌。根據(jù)另一實施方案，早期癌癥為借助輔助療法(例如化學療法或外科手術切除)治療的癌癥。根據(jù)本發(fā)明的一個實施方案，將用抗-α5β工抗體治療的受試者在VEGF拮抗劑治療后經(jīng)歷復發(fā)或者已變得難以用VEGF拮抗劑治療痊愈。根據(jù)另一個實施方案，將用抗-aJ1抗體及VEGF拮抗劑治療的受試者患轉移性癌癥或之前已經(jīng)用輔助療法治療。在一個實施方案中，候選患者對化療劑如伊立替康(irinotecan)具復發(fā)性、難治性或抗性。這些疾病的實例包括但不限于，轉移性結腸直腸癌(metastaticcolorectalcancer)、復發(fā)性轉移性結腸直腸癌(relapsedmetastaticcolorectalcancer)、轉移性乳腺癌(metastaticbreastcancer)、復發(fā)性轉移性乳腺癌(relapsedmetastaticbreastcancer)、轉移性HER2+乳腺癌(metastaticHER2+breastcancer)、輔助療法治療的乳腺癌(adjuvantbreastcancer)、輔助療法治療的HER2+乳腺癌(adjuvantHER2+breastcancer)、轉移性胰腺癌(metastaticpancreaticcancer)、輔助療法治療的結腸癌(adjuvantcoloncancer)、輔助療法治療的非小細胞肺癌(adjuvantnon-smallcelllungcancer)、輔助療法治療的直腸癌(adjuvantrectalcancer)、輔助療法治療的非小細胞肺癌(adjuvantnonsmallcelllungcancer)、轉移性非小細胞肺癌(metastaticnonsmallcelllungcancer)、轉移性卵巢癌(metastaticovariancancer)、轉移性腎細胞癌(metastaticrenalcellcancer)及輔助療法治療的腎細胞癌(adjuvantrenalcellcancer)。根據(jù)一個實施方案，在用VEGF拮抗劑治療疾病后向患有本文中所述的疾病的受試者施用維持療法，其中所述維持療法為單獨施用Ci5^拮抗劑或者依次或同時施用αJ1拮抗劑和VEGF拮抗劑。在一些實施方案中，VEGF拮抗劑選自抗體、免疫黏附素、肽體(ρ印tibody)、小分子以及在嚴格條件下雜交編碼VEGF的核酸分子的核酸(例如核酶、siRNA及適配體(apatmer))0在一些實施方案中，VEGF拮抗劑為抗體(例如單克隆抗體)。根據(jù)一個實施方案，抗VEGF抗體能夠被Avastin抗體競爭性抑制與人類VEGF的結合。根據(jù)另一個實施方案，抗VEGF抗體為人類抗體、人源化抗體或嵌合抗體。根據(jù)一個特定實施方案，抗VEGF抗體為Avastin抗體。根據(jù)另一個實施方案，抗VEGF抗體選自由Fab、Fab'、F(ab)‘2、單鏈Fv(ScFv)、Fv片段、雙抗體(diabody)和線性抗體組成的組。根據(jù)另一實施方案，VEGF拮抗劑為結合VEGF和α5β工的雙特異性抗體，并且是α5β工的拮抗劑。本發(fā)明的另一實施方案提供檢測懷疑含有α5βi蛋白的樣品中的α5βi蛋白的方法。所述方法包括(1)使本文中所述的抗體與樣品接觸；及檢測抗-α5β工抗體與α5βi蛋白的復合體的形成。在一些實施方案中，樣品來自經(jīng)診斷患有特征為異常血管發(fā)生、異常血管通透性及/或血管滲漏疾病的患者。本發(fā)明的這些和其他實施方案進一步描述在下文的發(fā)明詳述中。附圖簡要說明圖IA和圖IB描繪下列輕鏈可變結構域的序列比對人類λIII，倉鼠18C12，嵌合18C12.v.1.l、hl8C12.v3、hl8C12.v6、hl8C12.v6.1.Lam3、hl8C12.v6.2Lam3和hl8C12.v6.1.5。圖2A和圖2B描繪下列重鏈可變結構域的序列比對倉鼠18C12、hl8C12.v3、hl8C12.v6、hl8C12.v6.1.Lam3、hl8C12.v6.2Lam3和hl8C12.v6.1.5。圖3描繪hl8C12.v3和hl8C12.v3的親和力成熟變體hl8C12.v6、hl8C12.v7、hl8C12.v9、hl8C12.vl5、hl8C12.vl6、hl8C12.v28、hl8C12.v30、hl8C12.v51、hl8C12.v54、hl8C12.v70和hl8C12.v78的CDR序列。圖4描繪展示hl8C12.v3親本克隆和18C12親和力成熟變體hl8C12.v6、hl8C12.v7、hl8C12.v9、hl8C12.vl5、hl8C12.vl6、hl8C12.v28、hl8C12.v30、hl8C12.v51、hl8C12.v54、hl8C12.v70和hl8C12.v78與人的Q5^1整合素結合的噬菌體競爭ELISA的結果。圖5描繪hl8C12.v3親本克隆和hl8C12.v3親和力成熟變體hl8C12.v6、hl8C12.vl5、hl8C12.v54和hl8C12.v70與人α5β1整合素結合的BIACORE分析的結果。圖6描繪嵌合18C12及hl8C12.v6.1.Lam3與人α5βi整合素結合的BIACORE分析結果。圖7描繪hl8C12.ν6·1克隆hl8C12.v6.1.1、hl8C12.v6.1.2、hl8C12.v6.1.3、hl8C12.v6.1.4及hl8C12.v6.1.5結合的BIACORE分析的結果，并且列出各hl8C12.v6.1克隆在位置50a,50b,50c及50d處的CDR-L2序列。圖8描繪比較嵌合18C12與hl8C12.v6.1在干擾U937細胞與纖連蛋白結合方面的能力的纖連蛋白結合分析的結果。圖9描繪比較倉鼠18C12與hl8C12.v6.1.5在干擾U937細胞與纖連蛋白結合方面的能力的纖連蛋白結合分析的結果。圖10描繪比較倉鼠18C12與hl8C12.v6.1.5在干擾α5βi與纖連蛋白結合方面的能力的纖連蛋白結合分析的結果。圖11描繪比較嵌合18C12與hl8C12.v6.1在干擾HUVEC細胞在纖連蛋白上遷移方面的能力的HUVEC遷移分析的結果。圖12描繪測定hl8C12.v6.1.5+/-抗-VEGF在增強存活方面的能力的腫瘤異種移植研究的結果。圖13描繪測定hl8C12.v6.1.5+/-抗-VEGF在降低腫瘤負荷方面的能力的腫瘤異種移植研究的結果。發(fā)明詳述I.前言本發(fā)明基于結合Cij1整合素的新抗體的鑒別。Ci5^抗體衍生自單克隆抗體18C12，并且可以用于多種治療和診斷方法中。舉例來說，αJ1抗體可單獨使用或與其他藥劑組合使用來治療異常血管發(fā)生、瘤形成、眼疾病及自身免疫病。通過在患者中施用抗Cij1蛋白的抗體，并檢測來自患者的樣品(例如活體內(nèi)或先體外后體內(nèi)(exvivo))中的α5βi蛋白結合的抗-α5βi抗體，或者，通過使抗體與來自患者的樣品接觸并且定性或定量檢測與α5β工蛋白結合的抗-α5β工抗體，所述抗體也可以用來檢測患者或患者樣品中的αι蛋白。II.定義“Alβha5betal”或“α5β1”或“a5bl”或“α5β丨”為包含兩種不同蛋白質(zhì)(即亞基α5禾Πβ1)的整合素。已經(jīng)表明α5β1結合至纖連蛋白、Ll-CAM和纖維蛋白原。α5β1整合素也被稱作極遲活化-5(VeryLateActivation-5)、VLA-5、alpha5betal、CD49e/CD29、纖連蛋白受體、FNR和GPIc-IIa。根據(jù)一個實施方案，α5β1*、α5β1?！唉?”在本文中可與CD49e、α5、整合素α5亞基、VLA-5α亞基、GPIc-IIa的IC亞基及FNRα鏈互換使用，指的是αJ1整合素的一個亞基。α5具有四個由可變剪接產(chǎn)生并且其細胞質(zhì)結構域不同的同工型(A-D)。人α5的同工型的氨基酸序列可分別以例如Genbank登錄號Χ07979、U33879、U33882及U33880發(fā)現(xiàn)。β1也稱作CD29、β1、血小板GPIIa、VLA-3鏈、β_1整合素鏈、0^9、卩殿8、]\0^2、VLAB,GPIIA、MSK12以及VLA5B。人β1的氨基酸序列可以以例如Genbank登錄號Χ06256被發(fā)現(xiàn)。本文中所用的術語VEGF是指165氨基酸的人血管內(nèi)皮細胞生長因子及相關121-、189-及206-氨基酸的人血管內(nèi)皮細胞生長因子(如Leung等人，kience(科學)，2461306(1989)和Houck等人，Mol.Endocrin.，5=1806(1991)所述)，以及其天然存在的等位基因及其經(jīng)過加工的形式。術語VEGF也指來自諸如小鼠、大鼠或靈長類動物的非人類物種的VEGF。有時來自特定物種的VEGF由諸如以下的術語表示人VEGF用hVEGF；鼠VEGF用mVEGF等。術語VEGF也用作指包含165-氨基酸人血管內(nèi)皮細胞生長因子的氨基酸8至109或1至109的多肽的截短形式。在本申請中可以例如以“VEGF(8-109)”、“VEGF(1-109)”或"VEGF165”來表明對VEGF的任何此等形式的提及?！敖囟獭碧烊籚EGF的氨基酸位置如天然VEGF序列中所示進行編號。比如，截短天然VEGF中的氨基酸位置17(甲硫氨酸)亦為天然VEGF中的位置17(甲硫氨酸)。截短天然VEGF具有與天然VEGF相當?shù)膶DR及Flt-I受體的結合親和力。根據(jù)一實施方案，VEGF為人VEGF。"VEGF拮抗劑”是指能夠中和、阻斷、抑制、消除、降低或干擾VEGF活性，包括其與VEGF或一種或多種VEGF受體或編碼其的核酸的結合的分子。VEGF拮抗劑優(yōu)選地結合VEGF或VEGF受體。VEGF拮抗劑包括抗VEGF抗體及其抗原結合片段、結合VEGF及VEGF受體并且阻斷配體-受體相互作用的多肽(例如免疫黏附素、肽體(ρ印tibody))、抗VEGF受體抗體及VEGF受體拮抗劑(如VEGFR酪氨酸激酶的小分子抑制劑)、結合VEGF的適合體(apatmer)和在嚴格條件下雜交編碼VEGF或VEGF受體的核酸序列的核酸(例如RNAi)。根據(jù)一個實施方案，VEGF拮抗劑結合至VEGF并且體外抑制VEGF誘發(fā)的內(nèi)皮細胞增生。根據(jù)一個實施方案，VEGF拮抗劑，以高于對非VEGF或非VEGF受體的親和力，結合至VEGF或VEGF受體。根據(jù)一個實施方案，VEGF拮抗劑以介于1μM與IpM之間的Kd結合至VEGF或VEGF受體。根據(jù)另一實施方案，VEGF拮抗劑以500ηΜ至IpM與VEGF或VEGF受體結合。根據(jù)一實施方案，VEGF拮抗劑選自由例如抗體、肽體、免疫黏附素、小分子或適合體(Apatmer)的多肽組成的組。在一實施方案中，抗體為抗VEGF抗體，例如AVASTIN抗體或抗VEGF受體抗體例如抗VEGFR2或抗VEGFR3抗體。VEGF拮抗劑的其他實例包括VEGF-Trap,Mucagen,ΡΤΚ787,SU11248,AG-013736,Bay439OO6(索拉非尼(sorafenib))、ZD-6474、CP632、CP-547632、AZD-2171、CDP-171、SU-14813、CHIR-258、AEE-788、SB786034、BAY579352、CDP-791、EG-3306、GW-786034、RWJ-417975/CT6758和KRN-633?！翱筕EGF抗體”是以足夠的親和力和特異性結合至VEGF的抗體。優(yōu)選地，本發(fā)明的抗VEGF抗體可以用作用于靶向并且干擾涉及VEGF活性的疾病或狀況的治療劑?？筸VEGF抗體通常不會結合至例如VEGF-B或VEGF-C的其他VEGF同源物，也不會結合至諸如P1GF、PDGF或bFGF的其他生長因子?？筕EGF抗體是與雜交瘤ATCCHB10709產(chǎn)生的單克隆抗VEGF抗體A4.6.1結合至相同抗原表位的單克隆抗體。抗VEGF抗體更優(yōu)選為根據(jù)I^resta等人(1997)CancerRes(癌癥研究).57:4593-4599產(chǎn)生的重組人源化抗VEGF單克隆抗體，包括但不限于稱作貝伐珠單抗(BV；Avastin)的抗體。根據(jù)另一實施方案，可使用的抗VEGF抗體包括但不限于W02005/012359中所揭示的抗體。根據(jù)一實施方案，抗VEGF抗體包含W02005/012359的圖24、25、26、27和29中所揭示的任一抗體(例如G6、G6-23、G6-31、G6-23.1、G6-23.2、B20、B20-4和B20.4.1)的重鏈可變區(qū)及輕鏈可變區(qū)。在另一實施方案中，稱作蘭尼單抗(ranibizumab)的抗VEGF抗體是施用于眼疾病，例如糖尿病視網(wǎng)膜病變(diabeticretinopathy)及濕性AMD的VEGF拮抗劑?？筕EGF抗體“貝伐珠單抗(Bevacizumab，BV)”，也稱作“rhuMAbVEGF”或“Avastin’’是根據(jù)I^esta等人(1997)CancerRes(癌癥研究).57:4593-4599產(chǎn)生的重組人源化抗VEGF單克隆抗體。其包含突變的人類IgGl構架區(qū)和來自阻斷人類VEGF與其受體結合的鼠抗hVEGF單克隆抗體A.4.6.1的抗原結合互補決定區(qū)。貝伐珠單抗的氨基酸序列的大約的93%，包括大部分構架區(qū)，源自人類IgGl，且序列的約7%來自鼠抗體A4.6.1。貝伐珠單抗的分子量為約149，000道爾頓(dalton)且經(jīng)糖基化。其他抗VEGF抗體包括美國專利第6，884，879號和W02005/044853中所描述的抗體?？筕EGF抗體蘭尼單抗(Ranibizumab)或LUCENTIS抗體或rhuFabV2是人源化的親和力成熟的抗人VEGFFab片段。蘭尼單抗通過標準重組技術方法，在細菌發(fā)酵和大腸桿菌(E.coli)表達載體中產(chǎn)生。蘭尼單抗未經(jīng)糖基化且分子質(zhì)量為約48，000道爾頓。參見W098/45331及U.S.2003/0190317?？山柚偁幮砸种?結合分析來鑒別特征為與靶標上的重疊或相似區(qū)域結合的分子，例如抗體。在一個實施方案中，競爭性抑制測定中使用HUVEC或其他表達Cij1的細胞，并且使用FACS來評估兩種抗_α5β工抗體相對于彼此的結合位置。例如，可在錐形管中洗滌HUVEC細胞并且以IOOOrpm旋轉5分鐘。典型地洗滌沉淀兩次。隨后，可將細胞再懸浮，計數(shù)且保持于冰上直至使用?？上蚩字刑砑?00μ1第一抗-α5βi抗體(例如以1μg/ml濃度或更低濃度開始)。接著，可向每一孔中添加100μ1(例如20XIO5個細胞)細胞且于冰上孵育30分鐘。接著，可向各孔中添加100μ1的結合生物素的抗-α5β工抗體(5μg/ml儲備液)且于冰上孵育30分鐘。隨后洗滌細胞且在IOOOrpm下5分鐘形成沉淀。吸出上清液。將與鏈霉親和素(sti^ptavidin)(Jackson016_l10-084)綴合的R-藻紅素(R-Phycoerythrin)添加至孔中(ΙΟΟμΙ，以11000)。接著，以箔包裹板且于冰上孵育30分鐘。孵育后，可將沉淀洗滌且在IOOOrpm下5分鐘形成沉淀?？墒钩恋碓賾腋〔⑥D移至微量滴定管中進行FACS分析。“血管發(fā)生因子或血管發(fā)生物”是參與刺激血管發(fā)育，例如促進血管發(fā)生、內(nèi)皮細胞生長、血管穩(wěn)定性及/或血小管生成等的生長因子或其受體。例如，血管發(fā)生因子包括但不限于，例如VEGF和VEGF家族成員及其受體(VEGF-B、VEGF-C,VEGF-D,VEGFRl、VEGFR2和VEGFR3)、PlGF,PDGF家族、纖維母細胞生長因子家族(fibroblastgrowthfactorfamily,FGFs)、！Ε配體(血管生成素(Angiopoietins)、ANGPTl、ANGPT2)、TIEUΤΙΕ2、蝶素(印hrins)、Bv8、Delta樣配體4(DLL4)、Del_l、纖維母細胞生長因子(fibroblastgrowthfactor)(酸性(aFGF)和堿性(bFGF)、FGF4、FGF9、BMP9、BMP10、卵泡抑素(Follistatin)、粒細胞集落刺激因子(G-CSF)、GM-CSF、肝細胞生長因子(HGF)/分散因子(SF)、白介素-8(IL-8)、CXCL12、瘦素(I^ptin)、中期因子(Midkine)、神經(jīng)纖毛蛋白(neuropilins)、NRP1、NRP2、胎盤生長因子、血小板衍生的內(nèi)皮細胞生長因子(PD-ECGF)、血小板衍生的生長因子，尤其PDGF-BB、PDGFR-α或PDGFR-β、多效生長因子(Pleiotrophin,PTN)、前顆粒蛋白(Progranulin)、增殖蛋白(Proliferin)、轉化生長因子-α(TGF-α)、轉化生長因子-β(TGF-β)、腫瘤壞死因子-a(TNF-a)、Alkl、CXCR4、Notchl、Notch4、Sema3A,Sema3C,Sema3F,Robo4等。其將進一步包括促進血管發(fā)生的因子，例如ESMl和珍珠素(Perlecan)。其也將包括加速創(chuàng)傷愈合的因子，例如生長激素、類胰島素生長因子-I(IGF-I)、VIGF、表皮生長因子(EGF)、EGF樣結構域7(EGF-likedomain,multiple7)(EGFL7)、CTGF及其家族成員，和TGF-α及TGF-β。參見例如Klagsbrun和D‘Amore(199DAnnu.Rev.Physiol.53217-39>StreitRDetmar(2003)Oncogene(癌基因)22:3172-3179,Ferrara及Alitalo(1999)NatureMedicine(自然醫(yī)學)5(12)1359-1364、Tonini等人，(2003)Oncogene(癌基因)22:6549-6556(例如列出了已知血管發(fā)生因子的表1)；和Sato(2003)Int.J.Clin.Oncol.8:200_206?！翱寡馨l(fā)生劑”或“血管發(fā)生抑制劑”是指直接或間接地抑制血管發(fā)生、血小管生成或不當?shù)难芡ㄍ感缘男》肿恿课镔|(zhì)、多核苷酸(包括例如抑制性RNA(RNAi或siRNA))、多肽、分離的蛋白、重組蛋白、抗體或其綴合物或融合蛋白。應理解，抗血管發(fā)生劑包括結合血管發(fā)生因子或其受體并阻斷其血管發(fā)生活性的那些藥劑。例如，抗血管發(fā)生劑為如上所定義的血管發(fā)生劑的抗體或其他拮抗劑，例如VEGF-A或VEGF-A受體(例如KDR受體或Flt-I受體)的抗體、抗PDGFR抑制劑、阻斷VEGF受體信號傳導的小分子(例如PTK787/ZK2284,SU6668、SUTENT/SU11248(蘋果酸舒尼替尼(sunitinibmalate))、AMG706、或例如國際專利申請W02004/113304中所描述的那些)。抗血管發(fā)生劑包括，但不限于以下藥劑VEGF抑制劑(例如VEGF特異性拮抗劑)、EGF抑制劑、EGFR抑制劑、Erbitux(西妥昔單抗(cetuximab),ImCloneSystems,Inc.,Branchburg,N.J·)、Vectibix(帕尼單抗(panitumumab)，Amgen,ThousandOaks,CA)、TIE2抑制劑、IGFlR抑制劑、COX-II(環(huán)加氧酶II)抑制劑、MMP_2(基質(zhì)-金屬蛋白酶2)抑制劑、及MMP_9(基質(zhì)-金屬蛋白酶9)的抑制劑、CP-547,632(PfizerInc.，NY,USA)、阿西替尼(Axitinib)(PfizerInc.AG-013736)、ZD-6474(AstraZeneca)、AEE788(Novartis)、AZD-2171、VEGFTrap(Regeneron/Aventis)、瓦他拉尼(Vatalanib)(也稱作PTK_787、ZK_222584Novartis&ScheringAG)、Macugen(培力口他尼八納(pegaptaniboctasodium)、NX-1838、EYE_001，PfizerInc./Gilead/Eyetech)、IM862(CytranInc.，Kirkland,Wash.，USA)、血管酶(angiozyme),一禾中來自Ribozyme(Boulder,Colo.)及Chiron(Emeryville,Calif.)的合成核酶，及其組合。其他血管發(fā)生抑制劑包括血小板反應蛋白iahrombospondin1)、血小板反應蛋白2、膠原蛋白IV及膠原蛋白XVIII。VEGF抑制劑披露于美國專利第6，534，524號以及第6，235，764號中，兩者均出于所有目的全文并入本文中?？寡馨l(fā)生劑也包括天然血管發(fā)生抑制劑，例如血管抑制素(angiostatin)、內(nèi)皮抑制素(endostatin)等。參見例如Klagsbrun及D'Amore(1991)Annu.Rev.Physiol.53:217-39；Streit及Detmar(2003)Oncogene(癌基因)22:3172-3179(例如列出對惡性黑素瘤的抗血管發(fā)生療法的表3)；Ferrara及Alitalo(1999)NatureMedicine(自然醫(yī)學)5(12):1359-1364；Tonini等人，(200Oncogene(癌基因)22:6549-6556(例如列出已知抗血管發(fā)生因子的表2)；及Sato(2003)Int.J.Clin.Oncol.8:200-206(例如列出臨床試驗中使用的抗血管發(fā)生劑的表1)。術語“抗血管發(fā)生療法”是指適用于抑制血管發(fā)生的療法，其包含施用抗血管發(fā)生劑。在一實施方案中，本發(fā)明的抗VEGF抗體的“Kd”或“Kd值”是通過測定Fab對VEGF的溶液結合親和力的以下分析來測定，以抗體的Fab形式和VEGF分子進行的經(jīng)放射性標記的VEGF結合測定(RIA)，或者通過在未經(jīng)標記的滴度系列的VEGF存在下，使Fab與最小濃度的經(jīng)(125I)標記的VEGF(109)分子平衡，隨后通過抗Fab抗體包被的板捕捉結合的VEGF來測定(Chen等人，(1999)J.MolBiol293:865-881)。為確立分析條件，將微量滴定板(microtiterplates)(Dynex)以*5ug/mlWSfeifiFabJfi#(CappelLabs)^50mM5^@|鈉(pH9.6)包被過夜，隨后在室溫(約23°C)下以含2%(w/v)的牛血清白蛋白的PBS封閉兩小時至五小時。在非吸附性板(Nunc#269620)中，將IOOpM或洸pM[125I]VEGF(109)與相關Fab(例如Fab-12(Presta等人，(1997)CancerRes.(癌癥研究)57:4593-4599))的連續(xù)稀釋液混合。隨后孵育相關Fab過夜；然而，持續(xù)孵育65小時以確保達到平衡。此后，將混合物轉移至捕捉板中以在室溫下孵育1小時。接著去除溶液并用含0.1%Tween-20的PBS洗滌板8次。當板干燥時，添加每孔150ul閃爍體(MicroScint-20；Packard)，且以Topcountyγ計數(shù)器O^ckard)對板計數(shù)10分鐘。選擇提供小于或等于20%最大結合的各Fab濃度用于競爭性結合測定。根據(jù)另一實施方案，在25°C通過利用使用BIACore-2000或BIAcoreTM-3000(BIAcore，Inc.，Piscataway，NJ)的表面等離子共振測定，使用約10響應單位(RU)的固定靶標分子hVEGF(8-109)CM5芯片來測定Kd或Kd值。簡言之，根據(jù)供貨商的說明書用N-乙基-N'-(3-二甲基胺基丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)及N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)活化羧甲基化聚葡萄糖生物感應芯片(CM5，BIAcoreInc.)0用IOmM乙酸鈉(pH4.8)將人VEGF稀釋至5μg/ml(約0.2μΜ)，接著以每分鐘5μ1的流動速率注射，以得到大約10個響應單位(RU)的偶聯(lián)蛋白。注射人VEGF后，注射IM乙醇胺以阻斷未反應的基團。為進行動力學測量，在25°C下以大約25μΙ/min的流動速率將Fab的兩倍連續(xù)稀釋液(0.78nM至500nM)注入含有0.05%Tween20的PBS(PBST)中。使用簡單的一對一朗繆耳結合模型(Langmuirbindingmodel)(BIAcore評估軟件3.2版)通過同時擬合結合與解離感應圖(sensorgram)來計算結合速率(k。n)及解離速率(k。ff)。以k。ff/k。n比率的形式計算平衡解離常數(shù)(Kd)。參見例如Chen，Y.等人，(1999)J.MolBiol293:865-881。若根據(jù)上文表面等離子共振測定的結合速率超過IO6M-1S-1,則結合速率可通過使用熒光淬滅技術如使用光譜儀，例如裝備有終止-流動的光譜儀(AvivInstruments)或具有攪拌光析管的8000系列SLM-Aminco分光光度計(ThermoSpectronic)，來測定在增加濃度的人VEGF截短形式(8-109)或小鼠VEGF存在下，在25°C下20nM抗VEGF抗體(Fab形式)的PBS溶液(ρΗ7·2)的熒光發(fā)射強度(激發(fā)=295nm，發(fā)射=340nm，16nm帶通)增加或減低。可進行類似結合測定來測定抗α5βIFab或使用α5β1作為靶標的抗體的Kd。本文中所用的欲治療的受試者為哺乳動物(例如人類、非人類靈長類動物、大鼠、小鼠、牛、馬、豬、綿羊、山羊、狗、貓等)。受試者可為臨床患者、臨床試驗志愿者、實驗動物等。受試者可能懷疑患有癌癥、免疫疾病或具有異常血管發(fā)生的任何其他疾病，或具有患該等疾病的風險；可能經(jīng)診斷患有癌癥、免疫疾病或具有異常血管發(fā)生的任何其他疾病。本領域已知對于癌癥、免疫疾病或表現(xiàn)出異常血管發(fā)生的任何其他疾病的許多診斷方法的此類疾病的臨床描述。根據(jù)一實施方案，根據(jù)本發(fā)明欲治療的受試者為人類?！爱惓Ｑ馨l(fā)生”發(fā)生在新血管過度生長或在其他方面不當生長(例如根據(jù)醫(yī)學觀點，血管發(fā)生的位置、時序、程度或發(fā)生不當)時的患病狀態(tài)中或使產(chǎn)生患病狀態(tài)。在一些情況下，新血管生長存在時，過度、不受控制或在其他方面不當?shù)难馨l(fā)生發(fā)生促進患病狀態(tài)惡化或造成患病狀態(tài)，例如在癌癥，尤其血管形成性實體腫瘤(vascularizedsolidtumors)及轉移性腫瘤(metastatictumors)(包括結腸(colon)癌、肺(lung)癌(尤其小細胞月市癌(small-celllungcancer))或前列腺癌(prostatecancer))；由目艮部新血管形成(ocularneovascularisation)引起的疾病，尤其糖尿病性失明(diabeticblindness)、視網(wǎng)膜病變(retinopathies,)、主要是糖尿病性視網(wǎng)膜病變(diabeticretinopathy)或年齡才目關的黃斑變個生(age-relatedmaculardegeneration)、脈絡膜新血管形成(choroidalneovascularization,CNV)、糖尿病性黃斑水月中(diabeticmacularedema)、病理性近視(pathologicalmyopia)、vonHippel-Lindau病、眼睛組織漿菌病(histoplasmosisoftheeye)>43^!!^](CentralRetinalVeinOcclusion,CRV0)、角膜新血管形成(cornealneovascularization)、視網(wǎng)膜新血管形成及虹膜紅變(retinalneovascularizationandrubeosis)、15屑_(psoriasis)、15屑生(psoriaticarthritis)、血管母細胞瘤(haemangioblastoma)，如血管瘤(haemangioma)、炎性腎病(inflammatoryrenaldiseases),如腎小球腎炎(glomerulonephritis),尤其是腎小球膜增生性腎小球腎炎(mesangioproliferativeglomerulonephritis)、溶血性尿毒綜合征(haemolyticuremicsyndrome)、糖尿病性腎病(diabeticnephropathy)或高血壓腎硬化(hypertensivenephrosclerosis)、各禾中炎性疾病(imflammatorydiseases),例如關節(jié)炎(arthritis)尤其類風濕性關節(jié)炎(rheumatoidarthritis)、炎性腸病(inflammatoryboweldisease)、銀屑病(psorsasis)、結節(jié)病(sarcoidosis)、動脈硬化(arterialarteriosclerosis)及移植后出現(xiàn)的疾病、子宮內(nèi)膜異位(endometriosis)或慢性哮喘(chronicasthma)及超過70種其他病狀中。新血管可供養(yǎng)患病組織，破壞正常組織，且在癌癥的情況下，新血管可允許腫瘤細胞逃逸至循環(huán)中且進駐其他器官中(腫瘤轉移)。本發(fā)明涵蓋治療具有發(fā)生上述疾病的風險的那些患者?！爱惓Ｑ芡ㄍ感浴卑l(fā)生在血管與血管外隔區(qū)之間的液體流、分子(例如離子和營養(yǎng)物質(zhì))以及細胞(例如淋巴細胞)的流動過度或在其他方面不當(例如，根據(jù)醫(yī)學觀點血管通透性位置、時序、程度或發(fā)作不當)時的患病狀態(tài)中或使產(chǎn)生患病狀態(tài)。異常血管通透性可導致離子、水、營養(yǎng)物質(zhì)或細胞通過血管結構的“滲漏”過度或在其他方面不當。在一些情況下，過度、不受控制或在其他方面不當?shù)难芡ㄍ感曰蜓軡B漏加劇或誘發(fā)疾病狀態(tài)，包括例如與腫瘤相關的水腫，包括例如腦腫瘤、與惡性疾病相關的腹水、梅格斯綜合征(Meigs'syndrome)、肺部炎癥、腎病綜合征、心包積液、肋膜積液；與心血管疾病相關的通透性，例如心肌梗塞及中風后的病狀及其類似疾病。本發(fā)明涵蓋治療已發(fā)生與異常血管通透性或滲漏相關的疾病及病癥或具有患所述疾病及病癥的風險的那些患者。作為接受本發(fā)明的抗體或多肽的候選者的其他患者患有以下疾病或具有患以下疾病的風險纖維血管組織異常增生(fibrovasculartissue)、紅斑痤瘡(acnerosacea)、獲得性免疫缺陷綜合征(acquiredimmunedeficiencysyndrome)、動脈阻塞(arteryocclusionbacterialulcers)、異位性角膜炎(atopickeratitis)、細菌性饋蕩(Bechetsdisease)、白塞病(Bechetsdisease)、血源性月中瘤(bloodbornetumors)、頸動脈阻塞性疾病(carotidobstructivedisease)、脈絡膜新血管形成(choroidalneovascularization)、慢性炎癥(chronicinflammation)、慢性視網(wǎng)膜脫落(chronicretinaldetachment)、f#個生1_HI(chronicuveitis)、f#個生^iMWM.(chronicvitritis)、接角蟲鏡過度磨損(contactlensoverwear)、角膜移植排斥(cornealgraftrejection)、角膜新血管形成(cornealneovascularization)、角膜移植新血管形成(cornealgraftneovascularization)>jioPS[Hi1iit(Crohn'sdisease)、·爾Jff_(Ealesdisease)、流行性角膜結膜炎Epidemickeratoconjunctivitis)、真菌性潰瘍(fungalulcers)(Herpessimplexinfections)^!^^^(Herpeszosterinfections)、高粘度綜合征(hyperviscositysyndrome)、卡波西肉瘤(Kaposi'ssarcoma)、白血病(leukemia)、月旨質(zhì)變性(lipiddegeneration)、萊姆病(Lyme‘sdisease)、邊緣性角質(zhì)層分離(marginalkeratolysis)、蠶食性角膜潰瘍(Moorenulcer)、除麻風病外的分枝桿菌(Mycobacteria)感染、近視(myopia)、眼部新血管性疾病(ocularneovasculardisease)、視窩(opticpits)、奧斯勒韋·{白綜合征(Osier—Webersyndrome)>(Osler-ffeber-Rendu>#^Tii^(osteoarthritis)>(Pagetsdisease)>Jro5F$[5狀體炎(parsplanitis)、類天皰疫(pemphigoid)、皰性角結膜病(phylectenulosis)、多動脈炎(polyarteritis)、激光后并發(fā)癥(post-lasercomplications)、原生動物感^(protozoaninfections)>(pseudoxanthomaelasticum)>S^Wl^(pterygium)、干性角膜炎(keratitissicca)、放身寸狀角膜切開術(radialkeratotomy)、視網(wǎng)膜新血管形成(retinalneovascularization)、早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變(retinopathyofprematurity)>m^XW^^f^^P^^.(retrolentalfibroplasias)(sarcoid)>鞏膜炎(scleritis)、鐮狀細胞貧血癥(sicklecellanemia)、舍格倫綜合征(Sogrenssyndrome)、實體腫瘤(solidtumors)、斯特格氏病(Stargartsdisease)、史蒂芬強生病(Steven‘sJohnsondisease)、上邊緣角膜炎(superiorlimbickeratitis)、梅毒(syphilis)、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemiclupus)、特荷安氏角膜邊緣變性(Terrien'smarginaldegeneration)、弓形體病(toxoplasmosis)、夕卜傷(trauma)、尤文肉瘤(tumorsofEwingsarcoma)、神經(jīng)母細胞瘤(tumorsofneuroblastoma)、骨肉瘤(tumorsofosteosarcoma)、視網(wǎng)膜母細胞瘤(tumorsofretinoblastoma)、橫紋肌肉瘤(tumorsofrhabdomyosarcoma)、饋蕩性結腸炎(ulcerativecolitis)、靜脈阻塞(veinocclusion)、維生素A缺乏(VitaminAdeficiency)及韋格納結節(jié)病(ffegenerssarcoidosis)、與糖尿病相關的不良血管發(fā)生(undesiredangiogenesisassociatedwithdiabetes)、寄生蟲病(parasiticdiseases)、異常創(chuàng)傷愈合(abnormalwoundhealing)、夕卜科手術后月巴大(hypertrophyfollowingsurgery)、損傷或夕卜傷(injury或trauma)、毛發(fā)生長抑制、排卵及黃體形成抑制、植入抑制及子宮內(nèi)胚胎發(fā)育抑制?？寡馨l(fā)生療法適用于下述各項的一般治療移植排斥反應(graftrejection)、肺部炎癥(lunginflammation)、腎病綜合征(nephroticsyndrome)、子癇前癥(preeclampsia)、心包積液(pericardialeffusion)例如與心包炎相關的心包積液、肋膜積液、特征為不良血管通透性或滲漏的疾病及病癥，例如與包括例如腦腫瘤的腫瘤相關的水腫、與惡性疾病相關的腹水、梅格斯綜合征(Meigs'syndrome)、肺部炎癥(lunginflammation)、腎病綜合征(nephroticsyndrome)、心包禾只液(pericardialeffusion)禾口肋膜積液(pleuraleffusion)、與心血管疾病例如心肌梗塞及中風后病狀及其類似疾病相關的通透性。根據(jù)本發(fā)明的其他血管發(fā)生相關性疾病包括血管纖維瘤(angiofibroma)(易于出血的異常血管)、新血管性青光眼(neovascularglaucoma)(眼中血管生長)、動靜脈畸形(arteriovenousmalformations)(動脈與靜脈之間異常連通)、不愈合骨折(nonunionfractures)(不會愈合的骨折)、動脈粥樣硬化斑(atheroscleroticplaques)(動脈硬化)、化膿性肉芽腫(pyogenicgranuloma)(由血管構成的常見皮膚病變)、硬皮病(scleroderma)(結締組織疾病的一種形式)、血管瘤(hemangioma)(由血管構成的腫瘤)、沙眼(trachoma)(第三世界中失明的主要誘因)、血友病性關節(jié)(hemophilicjoints)、血管黍占著及月巴厚性癥痕(vascularadhesionsandhypertrophicscars)(異常癥痕形成)。本文中所用的“治療”(及其語法變形如“treat”或“treating”)是指施用化合物或藥物組合物用于預防及/或治療目的?！爸委熂膊　被蛴糜凇爸委熜蕴幚怼笔侵赶蛞鸦技膊〉氖茉囌呤┯弥委熞愿纳剖茉囌叩牟?。理想的治療效果包括但不限于，預防疾病再發(fā)、減輕癥狀、減少疾病的任何直接或間接病理性后果、預防轉移、降低疾病進展的速率、改善或減緩疾病狀態(tài)，及癥狀緩解或預后改良。在一些實施方案中，本發(fā)明的抗體用于延遲疾病的發(fā)展或減緩疾病的進展。優(yōu)選地，基于對下文所述任何特征性癥狀的鑒別或使用本文中所述的診斷方法，診斷受試者患具有異常血管發(fā)生的疾病?！邦A防疾病”是指對于尚未生病、但易患特定疾病或具有患特定疾病風險的受試者的預防性處理。優(yōu)選地，使用本文中所述的診斷方法，確定受試者具有患具有異常血管發(fā)生的疾病的風險?！爸委熁蚋纳啤币庵冈诓畎l(fā)作前或后改善病狀或病狀的癥狀。如由任何標準技術所測定，比較等同的未經(jīng)治療的對照者，所述改善或治療程度為至少s^uo^do^do^、40%,50%,60%,70%,80%,90%,95%^；100%。術語“再發(fā)”、“復發(fā)”或“復發(fā)性”是指癌癥或疾病在臨床評定疾病消失后重現(xiàn)。遠處轉移或局部再發(fā)的診斷可視作復發(fā)。“難治性”是指疾病或病狀對于治療有抗性或無反應(例如新生性漿細胞的數(shù)目即使在給予治療后也增加)。在某些實施方案中，術語“難治性”是指對于任何先前治療，包括但不限于，VEGF拮抗劑、抗血管發(fā)生劑及化學療法治療有抗性或無反應。在某些實施方案中，術語“難治性”是指疾病或病狀對于任何先前治療，包含VEGF拮抗劑、抗血管發(fā)生劑及/或化學療法治療固有地無反應。在某些實施方案中，VEGF拮抗劑為抗VEGF抗體。“復發(fā)性”是指患者的疾病回歸至其先前患病狀態(tài)，尤其為在明顯恢復或部分恢復后的癥狀重現(xiàn)。在某些實施方案中，復發(fā)性狀態(tài)是指在先前治療，包括但不限于VEGF拮抗劑、抗血管發(fā)生劑及/或化學療法治療之前重現(xiàn)疾病的過程或重現(xiàn)疾病。在某些實施方案中，復發(fā)狀態(tài)是指在對癌癥療法，包含VEGF拮抗劑、抗血管發(fā)生劑及/或化學療法治療的初始強烈反應的后重現(xiàn)疾病的過程或重現(xiàn)疾病。在某些實施方案中，VEGF拮抗劑為抗VEGF抗體。術語“輔助療法”是指在主要療法，通常外科手術，后給予治療。癌癥或疾病的輔助療法可包括免疫療法、化學療法、放射療法或激素療法。術語“維持療法”是指給予的幫助維持先前治療效果的定期再治療。通常給予維持療法以幫助保持癌癥消退或延長對特定療法的反應，無論疾病是否進展。術語“侵襲性癌癥”是指擴散至組織層以外開始進入正常周圍組織中的癌癥。侵襲性癌癥可以是或也可以不是轉移性的。術語“非侵襲性癌癥”是指極早期癌癥或未擴散至起源組織以外的癌癥。腫瘤學中的術語“無進展存活”是指在治療期間及治療后，癌不生長的時間長度。無進展存活包括患者經(jīng)歷完全反應或部分反應的時間量，以及患者經(jīng)歷穩(wěn)定疾病的時間量。腫瘤學中的術語“進展性疾病”可指自治療開始起由于腫瘤質(zhì)量增加或腫瘤中的擴散，腫瘤生長超過20%?！安“Y”是將受益于使用抗體治療的任何狀況。例如，哺乳動物患有或需要預防異常血管發(fā)生(過度、不當或不受控制的血管發(fā)生)或異常血管通透性或滲漏。包括慢性及急性病癥或疾病，包括使哺乳動物易患所述病癥的那些病理性狀況。本文中欲治療的病癥的非限制性實例包括但不限于惡性及良性腫瘤、非白血病及淋巴惡性疾病、神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)、星形細胞、下丘腦及其他腺體、巨噬細胞、上皮、基質(zhì)及囊胚腔病癥；以及炎性、血管發(fā)生及免疫病癥。術語“癌癥”和“癌性”是指或描述特征通常為不受調(diào)節(jié)的細胞生長的哺乳動物生理學病狀。癌癥的實例包括但不限于，癌瘤(carcinoma)、淋巴瘤(lymphoma)、母細胞瘤(blastoma)、肉瘤(sarcoma)和白血病(leukemia)。這些癌癥的更具體實例包括鱗狀細胞癌(squamouscellcancer)、成膠質(zhì)細胞瘤(glioblastoma)、子宮頸癌(cervicalcancer)、卵巢癌(ovariancancer)、月干癌(livercancer)、膀月光癌(bladdercancer)、肝細胞瘤(hepatoma)、乳腺癌(breastcancer)、結腸癌(coloncancer)、結腸直腸癌(colorectalcancer)、子宮內(nèi)膜癌(endometrialcarcinoma)、唾液腺癌(salivaryglandcarcinoma)、腎癌(kidneycancer)、腎臟癌(renalcancer)、前列腺癌(prostatecancer)、陰(vulvalcancer)、(thyroidcancer)、月干|§(hepaticcarcinoma)、頭頸部癌(headandneckcancer)、直腸癌(rectalcancer)、結腸直腸癌(colorectalcancer)、月市·(lungcancer)^llf舌小細Ifi月市·(small-celllungcancer)>非小細胞月市癌(non—smallcelllungcancer)、月市腺癌(adenocarcinomaofthelung)及月市麟狀癌(squamouscarcinomaofthelung)、麟狀細胞癌(squamouscellcancer)(例如上皮鱗狀細胞癌(印ithelialsquamouscellcancer))、前列腺癌(prostatecancer)、月復月莫癌(canceroftheperitoneum)、月干細癌(hepatocellularcancer)、胃癌(gastricorstomachcancer)^llf舌胃1(gastrointestinalcancer)、月夷1I(pancreaticcancer)、成膠質(zhì)細胞瘤(glioblastoma)、視網(wǎng)膜母細胞瘤(retinoblastoma)、星形細胞瘤(astrocytoma)、卵泡膜細胞瘤(thecomas)、卵巢男胚瘤(arrhenoblastoma)、月干細胞瘤(h印atoma)、血液科惡性疾病(hematologicmalignancies)包括非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkinslymphoma,NHL)、多發(fā)性骨髓瘤(multiplemyeloma)及急性血液禾斗惡性疾病(acutehematologicmalignancies)、子宮內(nèi)膜癌(endometrial)或子宮癌(uterinecarcinoma)、子宮內(nèi)膜異位(endometriosis)、纖維肉瘤(fibrosarcomas)>絨膜癌(choriocarcinoma)、唾液腺癌(salivaryglandcarcinoma)、陰門癌(vulvalcancer)、￥^1/IS(thyroidcancer)>3IS(esophagealcarcinomas)、月干(hepaticcarcinoma)、肛門癌(analcarcinoma)、陰蓮癌(penilecarcinoma)、鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma)、喉癌(laryngealcarcinomas)、卡波西肉瘤(Kaposi'ssarcoma)、黑素瘤(melanoma)、皮膚癌(skincarcinomas)、神經(jīng)鞘瘤(Schwannoma)、少枝膠質(zhì)瘤(oligodendroglioma)、神經(jīng)母細胞瘤(neuroblastomas)、橫紋肌肉瘤(rhabdomyosarcoma)、骨肉瘤(osteogenicsarcoma)、平滑月JL肉瘤(leiomyosarcomas)>尿道癌(urinarytractcarcinomas)、甲狀腺癌(thyroidcarcinomas)、威爾姆其jf月中瘤(WiIm'stumor)，以及B細胞淋巴瘤(B-celllymphoma))(包括低級/濾泡性非霍奇金淋巴瘤(lowgrade/follicularnon-Hodgkin‘slymphoma,NHL)、小淋巴球性(smalllymphocytic,SL)NHL、中級/濾泡個生(intermediategrade/follicular)NHL、中級彌漫(intermediategradediffuse)NHL、高級免疫母細(highgradeimmunoblastic)NHL、高級淋巴母細胞(highgradeimmunoblastic)NHL、高級小型無裂細胞(highgradesmallnon-cleavedcell)NHL、巨大腫瘤(bulkydisease)NHL、套細胞淋巴瘤(mantlecelllymphoma)、AIDS相關淋巴瘤和瓦爾登斯特倫氏巨球蛋白血癥(Waldenstrom'sMacroglobulinemia))、f#EitS(chroniclymphocyticleukemiaCLL)、急性淋巴母細胞白血病(acutelymphoblasticleukemia，ALL)、毛細胞白血病(Hairycellleukemia)、慢性骨髓母細胞白血病(chronicmyeloblasticleukemia)和移植后淋巴組織增生病癥(post-transplantlymphoproliferativedisorder,PTLD)，以及與母斑細胞病相關的異常血管增生(abnormalvascularproliferationassociatedwithphakomatoses),及梅格其jf綜合征(Meigs'syndrome)。本文中所使用的“腫瘤”是指惡性或良性的所有新生性細胞生長及增生，以及所有癌前及癌性細胞及組織。術語“抗腫瘤組合物(anti-neoplasticcomposition)”或“抗腫瘤劑(anti-neoplasticagent)”是指適用于治療癌癥的包含至少一種活性治療劑，例如“抗癌劑”的組合物。治療劑(抗癌劑)的實例包括但不限于，例如化療劑、生長抑制劑、細胞毒性劑、放射療法中使用的藥劑、抗血管發(fā)生劑、細胞凋亡劑、抗微管蛋白劑、及治療癌癥的其他藥劑，例如抗HER-2抗體、抗CD20抗體、表皮生長因子受體(EGFR)拮抗劑(例如酪氨酸激酶抑制劑)、HER1/EGFR抑制劑(例如厄洛替尼(erlotinib)(Tarceva))、血小板衍生的生長因子抑制劑(例如GleevecTM(甲磺酸伊馬替尼(ImatinibMesylate)))、C0X-2抑制劑(例如塞來考昔(celecoxib))、干擾素、細胞激素、與一個或多個以下靶標ErbB2、ErbB3、ErbB4、PDGFR-β、BAFF、BR3、APRIL、BCMA或VEGF受體結合的拮抗劑(例如中和抗體)、TRAIL/Apo2及其他生物活性及有機化學劑等。本發(fā)明中也涵蓋其組合。本文中使用的“生長抑制劑”是指體外和/或體內(nèi)抑制細胞生長或增生的化合物或組合物。因此，生長抑制劑可以是顯著減少S期細胞百分比的藥劑。生長抑制劑的實例包括阻斷細胞周期進程(S期外的其他時期)的藥劑，例如誘導Gl停滯和M期停滯的藥劑。經(jīng)典的M期阻斷劑包括長春花屬(vincas)(長春新堿(vincristine)及長春堿(vinblastine))、TAXOL和topoII抑制劑例如多柔比星(doxorubicin)、表柔比星(印irubicin)、柔紅霉素(daunorubicin)、依托泊苷(etoposide)及博來霉素(bleomycin)。使Gl停滯的藥劑也連帶引起S期停滯，例如DNA烷化劑，比如他莫昔芬(tamoxifen)、撥尼松(prednisone)、達卡巴嗪(dacarbazine)、氮芥(mechlorethamine)、順鉬(cisplatin)、甲氨蝶呤(metho-trexate)、5_氟尿嘧啶及ara_C。其他信息可見于TheMolecularBasisofCancer，Mendelsohn禾口Israel編，第1章，標題"Cellcycleregulation,oncogenes,andantineoplasticdrugs",Murakami等人’(WBSaundersPhiladelphia,1995)，尤其第13頁。本文中所用的術語“細胞毒性劑”是指抑制或阻止細胞功能和/或引起細胞破壞的物質(zhì)。該術語意欲包括放射性同位素(例如I131、I125、Y9°及Re186)生長抑制劑、化療劑和毒素例如細菌、真菌、植物或動物來源的酶活性毒素，或其片段?！盎焺笔沁m用于治療癌癥的化合物?；焺┑膶嵗ㄟm用于治療癌癥的化合物?；焺┑膶嵗ㄍ榛瘎?，例如塞替哌(thiot印a)和CYTOXAN環(huán)磷酰胺(cyclosphosphamide)，烷基磺酸酯(alkylsulfonates)如白消安(busulfan)、英丙舒凡(improsulfan)和哌泊舒凡(piposulfan)；吖丙啶類(aziridines)，諸如苯佐替派(benzodopa)、卡波醌(carboquone)、美妥替哌(meturedopa)和烏瑞替哌(uredopa)；乙撐亞胺類(ethylenimines)和甲基蜜胺類(methylamelamines)，包括六甲蜜胺(altretamine)、曲他胺(triethylenemelamine)、三亞乙基磷酰胺(triethylenephosphoramide)、三乙烯硫代憐酸胺(triethylenethiophosphoramide)禾口三輕甲蜜胺(trimethylomelamine)；acetogenins(尤其是布拉他辛(bullatacin)禾口布拉他辛酮(bulIatacinone))；喜樹堿(camptothecin)(包括合成類似物托泊替康(topotecan)；苔蘚抑素(bryostatin)；callystatin;CC_1065(包括其阿多來新(adozelesin)、卡折來新(carzelesin)及比折來新(bizelesin)合成類似物)；隱藻素類(cryptophycin)(特別是隱藻素1和隱藻素8)；多拉司他汀(dolastatin)；倍癌霉素(duocarmycin)(包括合成類似物KW-2189及CB1-TM1)；艾槽素(eleutherobin)；pancratistatin；匍枝珊瑚酉享(sarcodictyin)；海綿素(spongistatin)；氮芥(nitrogenmustards)例如苯丁酸氮芥(chlorambucil)、萘氮芥(chlornaphazine)、膽磷酉先胺(cholophosphamide)、雌莫司汀(estramustine)、異環(huán)磷酰胺(ifosfamide)、氮芥(mechlorethamine)、鹽酸氧氮芥(mechlorethamineoxidehydrochloride)、美法倉(melphalan)、新氮芥(novembichin)、苯芥膽留酉享(phenesterine)、撥尼莫司汀(prednimustine)、曲磷胺(trofosfamide)、尿啼唆氮芥(uracilmustard)；亞硝基脲類(nitrosoureas)例如卡莫司汀(carmustine)、氣月尿菌素(chlorozotocin)、福莫司汀(fotemustine)、洛莫司汀(Iomustine)、尼莫司汀(nimustine)和雷莫司汀(ranimnustine)；抗生素類，例如烯二炔類(enediyne)抗生素(例如加利車霉素(calicheamicin)，尤其是加利車霉素YII和加利車霉素ωIl(參見例如Agnew，ChemIntl.Ed.Engl.,33:183-186(1994))；烯二炔蒽環(huán)類抗生素(dynemicin)，包括烯二炔蒽環(huán)類抗生素AWynemicinΑ)；二膦酸鹽類(bisphosphonates)，諸如氯膦酸鹽(clodronate)；埃斯波霉素(esperamicin)；以及新制癌菌素(neocarzinostatin)生色團和相關色素蛋白烯二炔類抗生素生色團)、阿克拉霉素(aclacinomysins)、方文線菌素(actinomycin)、蒽霉素(anthramycin)、偶氮絲氨酸(azaserine)、博來霉素(bleomycins)、放線菌素C(cactinomycin)、carabicin、洋紅霉素(carminomycin)、嗜癌霉素(carzinophilin)、色霉素(chromomycinis)、放線菌素D(dactinomycin)、柔紅霄素(daunorubicin)、地托比星(detorubicin)、6—重氮-5-氧代-L-正亮氨酸(6-diazo-5-oxo-L-norleucine)、ADRIAMYCIN多柔比星(doxorubicin)(包括嗎啉代多柔比星(morpholino-doxorubicin)、氰基嗎啉代多柔比星(cyanomorpho1ino-doxorubicin)、2_口比口各琳-多柔比星(2-pyrro1ino-doxorubicin)和脫氧多柔比星(deoxydoxorubicin))、表柔比星、依索比星(esorubicin)、伊達比星(idarubicin)、馬塞羅霉素(marcellomycin)、絲裂霉素類(mitomycins)諸如絲裂霉素C、麥考酚酸(mycophenolicacid)、諾拉霉素(nogalamycin)、橄欖霉素(olivomycins)>培洛霉素(ρ印lomycin)、紫菜霉素(porfiromycin)、嘌呤霉素(puromycin)、三鐵阿霉素(quelamycin)、羅多比星(rodorubicin)、鏈黑霉素(str印tonigrin)、鏈佐M(streptozocin),^^tMMM(tubercidin)、^；$_目(ubenimex)>W]ftkT(zinostatin)、佐柔比星(zorubicin)；抗代謝物類，諸如甲氨喋呤(methotrexate)和5_氟尿嘧啶(5-FU)；葉酸類似物，諸如二甲葉酸(denopterin)、甲氨喋呤(methotrexate)、蝶羅呤(pteropterin)、三甲曲沙(trimetrexate)；嘌呤類似物，諸如氟達拉濱(fludarabine)、6-巰基嘌呤(mercaptopurine)、硫咪嘌呤(thiamiprine)、硫鳥嘌呤(thioguanine)；嘧啶類似物，諸如安西他濱(ancitabine)、阿扎胞苷(azacitidine)、6_氮尿苷(azauridine)、卡莫氟(carmofur)、阿糖胞苷(cytarabine)、雙脫氧尿苷(dideoxyuridine)、去氧氟尿苷(doxifluridine)、依諾他濱(enocitabine)、氟尿苷(floxuridine)；雄激素類，諸如卡魯睪酮(calusterone)、丙酸屈他雄酮(dromostanolonepropionate)、環(huán)硫雄醇(印itiostanol)、美雄烷(m印itiostane)、睪內(nèi)酉旨(testolactone)；抗腎上腺藥(anti-adrenals)，諸如氨魯米特(aminoglutethimide)、米托坦(mitotane)、曲洛司坦(trilostane)；葉酸補償劑，諸如亞葉酸(frolinicacid)；醋葡醛內(nèi)酯(aceglatone)、aldophosphamideglycoside、5_氨基酮戊酸(aminolevulinicacid)；恩尿啼唆(eniluracil)；安口丫唆(amsacrine)；bestrabucil；比生群(bisantrene)；依達曲沙(edatraxate)；得弗伐胺(defofamine)；秋水仙胺(demecolcine)；地吖醌(diaziquone)；艾弗尼辛(elfornithine)；依利醋銨(elliptiniumacetate)；印othilone；依托格魯(etoglucid)；硝酸鎵(galliumnitrate)；輕基脲(hydroxyurea)；香多糖(Ientinan)；氯尼達明(Ionidainine)；美坦生類化合物(maytansinoids)，諸如美坦生(maytansine)禾口安絲菌素(ansamitocins)；米托月瓜月宗(mitoguazone)；米托惠酉昆(mitoxantrone)；莫哌達醇(mopidanmol)；尼曲吖啶(nitraerine)；噴司他丁(pentostatin)；異丙嗪(phenamet)；批柔比星(pirarubicin)；洛索蒽酉昆(Iosoxantrone)；鬼白酸(podophyllinicacid)；2-乙基酰胼Q-ethylhydrazide)；丙卡巴胼(procartazine)；PSK多糖復合物(JHS天然產(chǎn)物，Eugene,OR)；雷佐生(razoxane)；利索新(rhizoxin)；西佐喃(sizofiran)；鍺螺胺(spirogermanium)；細交鏈孢菌酮酸(tenuazonicacid)；三亞胺酉昆(triaziquone)；2，2‘，2〃-三氯三乙胺(2,2,2"-trichlorotriethylamine)；單端孢霉烯族毒素(trichothecenes)(尤其T-2毒素、韋拉庫林A(verracurinΑ)、桿孢菌素A(roridinΑ)及anguidine)；烏拉坦(urethan)；長春地辛(vindesine)；達卡巴嗪(dacarbazine)；甘露莫司汀(mannomustine)；二溴甘露酉享(mitobronitol)；二溴衛(wèi)矛酉享(mitolactol)；喊泊漠燒(pipobroman)；gacytosine；阿糖胞昔(arabinoside)(“Ara-C")；環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide)；塞替哌(thiotepa)；紫杉烷類化合物(taxoids),例如TAXOL紫杉醇(paclitaxel)(Bristol-MyersSquibbOncology,Princeton,N.J.)、無克列莫佛(Cremophor)的ABRAXANETM、紫杉醇的白蛋白改造的納米顆粒制劑(AmericanPharmaceuticalPartners,Schaumberg,Illinois)、及TAXOTERE多西他賽(doxetaxel)(Rhone-PoulencRorer,Antony,France)；苯丁酸氮芥(chloranbucil)；GEMZAR吉西他濱(gemcitabine)；6-硫鳥嘌呤(thioguanine)；口票吟(mercaptopurine)；甲氛蝶吟(methotrexate)；怕類^以物，例如順鉬和卡鉬(carboplatin)；長春堿；鉬；依托泊苷(etoposide，VP-16)；異環(huán)磷酰胺(ifosfamide)；米托惠酉昆(mitoxantrone)；長春新喊(vincristine)；NAVELBINE長春瑞濱(vinorelbine)；諾安托(novantrone)；替尼泊苷(teniposide)；依達曲沙(edatrexate)；道諾霉素(daunomycin)；胺基口票呤(aminopterin)；希羅達(xeloda)；伊班膦酸鹽(ibandronate)；伊立替康(Camptosar，CPT-11)(包括伊立替康與5-FU及亞葉酸(leucovorin)的治療方案)；拓撲異構酶抑制劑RFS2000;二氟甲基鳥氨酸(difluorometlhylornithine)(DMFO)；維甲類(retinoids)如視黃酸(retinoicacid)、卡培他濱(capecitabine)、考布他汀(combretastatin)、亞葉酸(LV)；奧沙利鉬(oxaliplatin)，包括奧沙利鉬治療方案(FOLFOX)；降低細胞增生的I3KC-α、Raf、H-Ras和EGFR的抑制劑(例如厄洛替尼(TarcevaTM))及任何上述物質(zhì)的藥學上可接受的鹽、酸或衍生物?；焺┮舶ㄓ靡哉{(diào)控或抑制對腫瘤的激素作用的抗激素劑，例如抗雌激素及選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(SERMs)，包括例如他莫昔芬(包括NOLVADEX他莫昔芬)、雷諾昔芬(raloxifene)、屈洛昔芬(droloxifene)、4_羥基他莫昔芬G-hydroxytamoxifen)、曲沃昔芬(trioxifene)、keoxifene、LY117018、奧那司酮(onapristone)和法樂通·托瑞米芬(FARESTON.toremifene)抑制調(diào)控腎上腺中的雌激素產(chǎn)生的芳香酶的芳香酶抑制劑，例如4(5)-咪唑、氨魯米特(aminoglutethimide)、MEGASE醋酸甲地孕酮(megestrolacetate)、AROMASIN依西美坦(exemestane)、福美坦(formestanie)、法倔唑(fadrozole)、RIVISOR伏氯唑(vorozole)、FEMARA來曲唑(Ietrozole)及ARIMIDEX阿那曲唑(anastrozole)及抗雄激素，例如氟他胺(flutamide)、尼魯米特(nilutamide)、比卡魯胺(bicalutamide)、亮丙立德(Ieuprolide)及戈舍瑞林(goserelin)以及曲沙他濱(troxacitabine)(1，3-二氧戊環(huán)核苷胞嘧啶類似物)；反義寡核苷酸，尤其那些抑制異常細胞增生所涉及的信號傳導路徑中的基因表達的，例如PKC-α、Iaf及Mas核酶，例如VEGF表達抑制劑(例如ANGIOZYME核酶)及HER2表達抑制劑；疫苗，例如基因療法疫苗，例如ALLOVECTIN疫苗；LEUVECTIN疫苗及VAXID疫苗；PROLEUKINrIL-2；LURTOTECAN拓撲異構酶1抑制齊U;ABARELIXrmRH；長春瑞濱(Vinorelbine)及Esperamicins(參見美國專利第4，675，187號)；及任何上述物質(zhì)的藥學上可接受的鹽、酸或衍生物。本申請中所使用的術語“前藥”指藥物活性物質(zhì)的前體或衍生物形式(例如小分子)，該形式比起母體藥物對患病細胞的細胞毒性小，且能夠酶促活化或轉化成更具活性的母體形式。參見例如WiIman,“ProdrugsinCancerChemotherapy"BiochemicalSocietyTransactions，14，第375-382頁，615thMeetingBelfast(1986)及Stella等人，"Prodrugs:AChemicalApproachtoTargetedDrugDelivery,，，DirectedDrugDelivery,Borchardt等人(編)，第M7-267頁，HumanaPress(1985)本發(fā)明的前藥包括但不限于，含磷酸酯基的前藥、含硫代磷酸酯基的前藥、含硫酸酯基的前藥、含肽的前藥、D-氨基酸修飾的前藥、糖基化前藥、含內(nèi)酯胺的前藥、含視情況經(jīng)取代的苯氧基乙酰胺的前藥或含視情況經(jīng)取代的苯基乙酰胺的前藥、5-氟胞嘧啶及其他5-氟尿苷前藥，其可轉化成更具活性的無細胞毒性藥物?？裳苌捎糜诒景l(fā)明的前藥形式的細胞毒性藥物的實例，包括但不限于，上文所述的那些化療劑。“分離的”在用于描述本文中所披露的各種多肽時意指多肽已經(jīng)鑒別且從表達其的細胞或細胞培養(yǎng)物中分離和/或回收。其天然環(huán)境的污染組分是通常會干擾多肽的診斷或治療用途的物質(zhì)，可包括酶、激素及其他蛋白質(zhì)或非蛋白質(zhì)溶質(zhì)。在實施方案中，多肽應純化至(1)足以通過使用旋轉杯測序儀獲得N末端或內(nèi)部氨基酸序列的至少15個殘基的程度；或(使用考馬斯亮藍(Coomassieblue)，或優(yōu)選地，銀染色劑在非還原或還原條件下通過SDS-PAGE獲得均一性。由于多肽天然環(huán)境的至少一種組份將不存在，所以經(jīng)分離的多肽包括重組細胞內(nèi)的原位多肽。然而，通常經(jīng)分離多肽將由至少一個純化步驟來制備?！胺蛛x”的編碼多肽的核酸或其他編碼多肽的核酸是經(jīng)過鑒別并且自至少一種污染核酸分子分離的核酸分子，其在編碼多肽的核酸的天然來源中通常與污染核酸分子相締合。經(jīng)分離的編碼多肽的核酸分子不同于自然界中所見的形式或定位。因此將經(jīng)分離的編碼多肽的核酸分子與天然細胞中所存在的特定的編碼多肽的核酸分子相區(qū)分。然而，經(jīng)分離的編碼多肽的核酸分子包括包含在通常表達多肽的細胞中的編碼多肽的核酸分子，其中例如核酸分子位于不同于天然細胞中的染色體位置的位置。術語“控制序列”是指在特定宿主生物體內(nèi)表達的可操作地連接的編碼序列所需的DNA序列。適于原核生物的控制序列例如包括啟動子、視情況存在的操縱序列和核糖體結合位點。已知真核細胞利用啟動子、聚腺苷酸化信號及增強子。當核酸與另一核酸序列功能相關時，其即經(jīng)是“可操作地連接”。比如，若前序列或分泌性前導序列的DNA表達為參與多肽分泌的前體蛋白，則其與所述多肽的DNA可操作地連接；若啟動子或強化子影響編碼序列的轉錄，則其與該序列可操作地連接；或若核糖體結合位點為了便于翻譯而定位，則其與編碼序列可操作地連接。一般而言，“可操作地連接”指所連接的DNA序列為相鄰的，且在分泌性前導序列的情況下為相鄰的且處于閱讀框中。然而，增強子不必須是相鄰的。連接通過在合適限制性位點處的連接來實現(xiàn)。若這些位點不存在，則根據(jù)常規(guī)操作使用合成寡核苷酸銜接子(adaptors)或接頭(linkers)。本文中所定義的“嚴格條件”或“高嚴格條件”可由以下來鑒別(1)采用低離子強度及高溫進行洗滌，例如在50°C下，0.015M氯化鈉/0.0015M檸檬酸鈉/0.1%十二烷基硫酸鈉；(在雜交期間采用例如甲酰胺的變性劑，例如在42°C下，50%(ν/ν)含有0.牛血清白蛋白的甲酰胺/0.Ficoll/0.聚乙烯吡咯啶酮/含有750mM氯化鈉、75mM檸檬酸鈉的50mM磷酸鈉緩沖液(pH6.5)；或(3)在42°C下在采用50%甲酰胺、5XSSC(0.75MNaCl、0.075M檸檬酸鈉)、50mM磷酸鈉(pH6.8),0.焦磷酸鈉、5X丹哈特氏溶液(Denhardt'ssolution)、聲波處理的鮭魚精DNA(50μg/ml)、0.1%SDS及10%硫酸聚葡萄糖的溶液中雜交過夜，其中在42°C下于0.2XSSC(氯化鈉/檸檬酸鈉)中洗滌10分鐘，接著在下由含有EDTA的0.IXSSC組成的洗滌液中高嚴格洗滌10分鐘。除非另有說明，否則本文中所述的氨基酸序列為相鄰氨基酸序列。本文中所用的術語“免疫黏附素”表示具有異源蛋白(一種“黏附素”)的結合特異性與免疫球蛋白恒定結構域的效應子功能的抗體樣分子。在結構上，免疫黏附素包含具有所需結合特異性的不被抗體的抗原識別及結合位點的(也即為“異源”)氨基酸序列與免疫球蛋白恒定結構域序列的融合。免疫黏附素分子的黏附部分通常是至少包含受體或配體(例如VEGFR或纖連蛋白配體)的結合位點的相鄰氨基酸序列。免疫黏附素中的免疫球蛋白恒定結構域序列可獲自任何免疫球蛋白，例如IgG-l、IgG-2、IgG-3或IgG-4亞型、IgA(包括IgA-I及IgA-2)、IgE、IgD或IgM。通常，包含衍生自與免疫球蛋白的Fc部分融合的進行噬菌體展示選擇所獲得的特異結合靶標的序列的肽體，可被看作是本文中的免疫黏附素。術語“抗體”是以其最廣義使用，且特定涵蓋例如單一的單克隆抗體(包括激動劑、拮抗劑及中和抗體)、具有多抗原表位特異性的抗體組合物、多克隆抗體、單鏈抗抗體、及抗體片段(參見下文)，只要其特異性結合天然多肽和/或表現(xiàn)本發(fā)明的生物活性或免疫學活性即可。根據(jù)一個實施方案，抗體結合至靶蛋白的寡聚形式，例如三聚形式。根據(jù)另一實施方案，抗體特異性結合蛋白質(zhì)，該結合可由本發(fā)明的單克隆抗體(例如本發(fā)明的保藏抗體等)抑制。短語抗體的“功能性片段或類似物”是具有與所提及抗體相同的定性生物活性的化合物。比如，本發(fā)明的抗體的功能性片段或類似物可以是可特異性結合至VEGF或α5β1的。在一個實施方案中，抗體可阻止或基本上降低VEGF誘導細胞增生的能力?！敖?jīng)分離抗體”為已經(jīng)鑒別并且從其天然環(huán)境的組份分離和/或回收的抗體。其天然環(huán)境的污染組份是會干擾抗體的診斷或治療用途的物質(zhì)，且可包括酶、激素和其他蛋白質(zhì)或非蛋白質(zhì)溶質(zhì)。在實施方案中，抗體應純化至(1)如通過Lowry法測定，以重量計大于95%的抗體，且優(yōu)選以重量計大于99%;(幻足以通過使用旋轉杯測序儀獲得N末端或內(nèi)部氨基酸序列的至少15個殘基的程度；或C3)使用考馬斯亮藍或優(yōu)選地銀染色劑在還原或非還原條件下通過SDS-PAGE獲得均一性。由于抗體的天然環(huán)境的至少一種組份將不存在，所以經(jīng)分離抗體包括重組細胞內(nèi)的原位抗體。然而，經(jīng)分離抗體通常將通過至少一個純化步驟來制備?；?鏈抗體單元是由兩條相同輕(L)鏈和兩條相同重(H)鏈組成的異四聚體糖蛋白(IgM抗體由5個基本異四聚體單元和被稱為J鏈的另一多肽組成，因此含有10個抗原結合位點，而分泌型IgA抗體可聚合形成包含2-5個基本4鏈單元以及J鏈的多價集合體)。對于IgGs，4鏈單元通常為約150，000道爾頓。各L鏈通過一個共價二硫鍵連接至H鏈，而根據(jù)H鏈同種型不同，兩條H鏈通過一或多個二硫鍵彼此連接。各H鏈及L鏈也具有規(guī)則間隔的鏈內(nèi)二硫鍵。各H鏈在N端具有可變結構域(Vh)，其后為各α鏈及γ鏈的三個恒定結構域(Ch)及μ和ε同型的四個Ch結構域。各L鏈在N端具有可變結構域(\)，其后是位于其另一端的恒定結構域(CJ。八與Vh比對且Q與重鏈的第一恒定結構域(ChI)比對。認為特定氨基酸殘基在輕鏈與重鏈可變結構域之間形成界面。Vh與\的配對共同形成單一抗原結合位點。關于不同種類抗體的結構及特性，參見例如BASICANDCLINICALIMMUNOLOGY(基礎和臨床免疫學)，第8版，DanielP.Stites,AbbaI.Terr和TristramGParslow(編)，Appleton&Lange，Norwalk，CT，1994，第71頁及第6章。來自任何脊椎動物物種的L鏈可基于其恒定結構域的氨基酸序列歸為被稱作κ及λ的兩個明顯不同類型之一。根據(jù)重鏈恒定結構域(Ch)的氨基酸序列不同，免疫球蛋白可歸于不同種類或同型。存在五種免疫球蛋白IgA、IgD、IgE、IgG及IgM分別具有稱為α，δ，Y，ε和μ的重鏈。基于Ch序列及功能的相對較小的差異，將Y及α類進一步分成亞類，例如人類呈現(xiàn)以下亞類IgGUIgG2、IgG3、IgG4、IgAl及IgA2。術語“可變”是指在抗體中某些可變結構域區(qū)段在序列上極其不同。V結構域介導抗原結合，并且界定特定抗體對其特定抗原的特異性。然而，可變性并非均勻分布在可變結構域的Iio個氨基酸范圍上。而是V區(qū)由15-30個氨基酸的相對不變段(稱作構架區(qū)(FRs))由長度各為9-12個氨基酸的具有極大可變性的較短區(qū)域(稱作“高變區(qū)”)間隔組成。天然重鏈合輕鏈的可變結構域各包含四個FRs，主要采用β桶構象，由三個高變區(qū)連接，其形成環(huán)連接，且在一些情況下形成β折疊結構的一部分。各鏈中的高變區(qū)通過FRs緊密保持在一起，并且與其他鏈的高變區(qū)一起促進抗體的抗原結合位點的形成(參見Kabat等人，SEQUENCESOFPROTEINSOFIMMUNOLOGICALINTEREST(免疫學目的的蛋白質(zhì)序列)，第5版PublicHealthService,NationalInstitutesofHealth,Bethesda,MD.(1991))。雖然恒定結構域并不直接涉及于抗體與抗原的結合，但其展現(xiàn)各種效應子功能，例如使抗體參與抗體依賴性細胞毒性(ADCC)。本文中所使用的術語“高變區(qū)”是指負責抗原結合的抗體氨基酸殘基。高變區(qū)一般包含來自“互補決定區(qū)”或“⑶R”的氨基酸殘基(例如Vl中大約殘基M_34(L1)、50-56(L2)及89-97(L3)中大約殘基31-35B(H1)、50-65(H2)及95-102(H3)(在一實施方案中，Hl為大約31-35)；Kabat等人，同上)和/或來自“高變環(huán)”的那些殘基(例如八中的殘基^-32(L1)、50-52(L2及91-96(L3)及Vh中的殘基洸-32(HI)、53_55(H2)及96-101(H3)；Chothia及Lesk,J.Mol.Biol.(分子生物學雜志)196:901-917(1987))。在本說明書及權利要求范圍內(nèi)，當提及可變結構域中的殘基時，一般使用Kabat編號系統(tǒng)(大約輕鏈中的殘基1-107及重鏈中的殘基1-113)(例如Kabat等人，同上(1991))。當提及免疫球蛋白重鏈恒定區(qū)中的殘基時，一般使用“EU編號系統(tǒng)“或”EU指數(shù)“(例如Kabat等人，同上(1991)中所報道的EU指數(shù)，該文獻以引用的方式明確并入本文中)。除非本文中另有說明，否則提及抗體可變結構域中的殘基編號意思是通過Kabat編號系統(tǒng)的殘基編號。除非本文中另有說明，否則提及抗體恒定結構域中的殘基編號意謂通過EU編號系統(tǒng)的殘基編號。本文中所用的術語“單克隆抗體”是指自實質(zhì)上均一的抗體群落獲得的抗體，也即23構成所述群體的個別抗體除可少量存在的可能天然存在的突變外是相同的。單克隆抗體具有高特異性，是針對單一抗原位點。此外，與包括針對不同決定簇(抗原表位)的不同抗體的多克隆抗體制劑相比，各單克隆抗體是針對抗原上的單一決定簇。除特異性之外，單克隆抗體的優(yōu)勢還在于其可在不受其他抗體污染的情況下合成。修飾語“單克隆”不應理解為需要通過任何特定方法制造抗體。舉例來說，適用于本發(fā)明中的單克隆抗體可通過首先由Kohler等人，Nature(自然)，256=495(1975)描述的雜交瘤方法來制備，或可使用重組DNA方法在細菌、真核動物或植物細胞中制得(參見例如美國專利第4，816，567號)。也可以使用Clackson等人，Nature(自然)，352:624-628(1991)；Marks等人，J.Mol.Biol.(分子生物學雜志)，222:581-597(1991)中所述的技術或使用下文實施例中所描述的方法由噬菌體抗體文庫分離“單克隆抗體”。本文中的單克隆抗體包括“嵌合”抗體，其中重鏈和/或輕鏈的一部分與源自特定物種或屬于特定抗體種類或亞類的抗體中的相應序列一致或同源，而所述鏈的其余部分與源自另一物種或屬于另一抗體種類或亞類的抗體中的相應序列一致或同源；以及這些抗體的片段，只要其表現(xiàn)出本發(fā)明的生物活性即可(參見美國專利第4，816，567號；和Morrison等人，PNASUSA，81:6851-6855(1984))。本文中的相關嵌合抗體包括“靈長類動物化”抗體，其包含源自非人類靈長類動物(例如舊世界猴(OldWorldMonkey)、猿等)的可變結構域抗原結合序列，和人類恒定區(qū)序列?！坝H和力成熟”抗體是在一或多個CDR中具有一或多種變化的抗體，與不具有那些變化的親本抗體相比，那些變化使得抗體對抗原的親和力改善。優(yōu)選親和力成熟抗體將對靶抗原具有納摩爾或甚至皮摩爾親和力。親和力成熟抗體是由本領域中已知的程序制備。Marks等人，Bio/technologylO:779-783(1992)描述通過VH及VL結構域改組(shuffling)獲得的親和力成熟。CDR和/或構架區(qū)殘基的隨機突變于下列文獻中描述=Barbas等人，PNASUSA91:3809-3813(1994)；Schier等人，Gene(基因)169147-155(1995)；Yelton等人，J.Immunol.(免疫學雜志)155:1994-2004(1995)，Jackson等人，J.Immunol.(免疫學雜志)154(7)=3310-9(1995)；及Hawkins等人，J.Mol.Biol.(分子生物學雜志)2:889-896(1992)?！白钄嘈浴笨贵w或“拮抗性”抗體是抑制或降低所結合抗原的生物活性的抗體。舉例來說，阻斷型或拮抗劑抗-α5β1抗體通過結合α5β1而部分或完全地抑制血管發(fā)生?！凹有浴笨贵w是增強或增加所結合抗原的生物活性的抗體。舉例來說，激動劑抗體抗-α5β1抗體通過結合α5β1而增強血管發(fā)生?！巴暾笨贵w是包含抗原結合位點以及Q及至少重鏈恒定結構域Ch1、Ch2及Ch3的抗體。恒定結構域可以是天然序列恒定結構域(例如人類天然序列恒定結構域)或其氨基酸序列變體。完整抗體優(yōu)選具有一或多種效應子功能?！翱贵w片段”包含完整抗體的一部分，優(yōu)選是完整抗體的抗原結合區(qū)或可變區(qū)?？贵w片段的實例包括Fab、Fab'、F(ab')2及Fv片段；雙抗體；線性抗體(參見美國專利第5，641，870號，實施例2;Zapata等人，ProteinEng.8(10)1057-1062[1995])；單鏈抗體分子；及由抗體片段形成的多特異性抗體。表述“線性抗體”一般是指Zapata等人，ProteinEng.，8(10):1057-1062(1995)中所述的抗體。簡言之，這些抗體包含一對串聯(lián)Fd區(qū)段(VH-CH1-VH-CH1)，其與互補輕鏈多肽一起形成一對抗原結合區(qū)。線性抗體可以是雙特異性或單特異性的。用木瓜蛋白酶消化抗體產(chǎn)生兩個稱為“Fab”片段的相同抗原結合片段；和一個殘余“Fe”片段，該命名反映的容易結晶的能力。Fab片段由完整L鏈連同H鏈的可變區(qū)域(Vh)及一個重鏈的第一恒定結構域(Ch1)組成。各Fab片段對于抗原結合來說是單價的，也即其具有單一抗原結合位點。用胃蛋白酶處理抗體產(chǎn)生單一的大F(ab')2片段，其大致對應于具有二價抗原結合活性的兩個二硫鍵連接的Fab片段并且仍能夠與抗原交聯(lián)。Fab'片段不同于Fab片段之處在于，其在Ch1結構域的羧基端具有包括一個或多個來自抗體鉸鏈區(qū)的半胱氨酸的數(shù)個額外殘基。Fab'-SH在本文中指代恒定結構域半胱氨酸殘基帶有游離硫醇基的Fab'。F(ab')2片段最初是中間具有鉸鏈半胱氨酸的Fab‘片段對的形式產(chǎn)生的。也已經(jīng)知道抗體片段的其他的化學偶合。Fc片段包含通過二硫鍵保持在一起的兩個H鏈的羧基端部分。抗體的效應子功能是由Fc區(qū)中的序列決定的，該區(qū)也是在某些類型細胞上發(fā)現(xiàn)的Fc受體(FcR)識別的部分?！白儺怓c區(qū)”包含由于至少一種如本文中所定義的“氨基酸修飾”而與天然序列Fc區(qū)的序列不同的氨基酸序列。優(yōu)選地，與天然序列Fc區(qū)或親本多肽的Fc區(qū)相比較，變異Fc區(qū)具有至少一個氨基酸置換，例如天然序列Fc區(qū)或親本多肽的Fc區(qū)中約1至約10個氨基酸置換且優(yōu)選約1至約5個氨基酸置換。在一個實施方案中，本文中的變異Fc區(qū)將與天然序列Fc區(qū)至少約80%同源、至少約85%同源、至少約90%同源、至少約95%同源、或至少約99%同源。根據(jù)另一實施方案，本文中的變異Fc區(qū)將與親本多肽的Fc區(qū)至少約80%同源、至少約85%同源、至少約90%同源、至少約95%同源或至少約99%同源。術語“包含F(xiàn)c區(qū)的多肽”是指例如抗體或免疫黏附素，包含F(xiàn)c區(qū)的多肽(參見下文定義)。例如，在純化多肽期間或通過重組工程改造編碼多肽的核酸來移除Fc區(qū)的C端賴氨酸(根據(jù)EU編號系統(tǒng)殘基447)。因此，包含本發(fā)明的具有Fc區(qū)的多肽(包括抗體)的組合物可包含移除所有K447殘基的多肽群體、未移除K447殘基的多肽群體或包含有K447殘基與無K447殘基的多肽的混合物的多肽群體。“Fv”是含有完整抗原識別位點及抗原結合位點的最小抗體片段。該片段由一個重鏈可變區(qū)域與一個輕鏈可變區(qū)域緊密、非共價締合的二聚體組成。由者這兩個結構域的折疊產(chǎn)生6個高變環(huán)(H鏈及L鏈各產(chǎn)生3個環(huán))，所述高變環(huán)促進了氨基酸殘基用于抗原結合并且賦予抗體以抗原結合特異性。然而，即使單一可變結構域(或僅包含三個對抗原特異的CDR的半個Fv)也具有識別及結合抗原的能力，但其親和力比完整結合位點低。“單鏈Fv”(也縮寫為“sFv”或“scFv”)是包含連接成單一多肽鏈的Vh及Vl抗體結構域的抗體片段。sFv多肽優(yōu)選在Vh與\結構域之間進一步包含多肽連接子，使得sFv能夠形成抗原結合所需的結構。關于sFv的評述，參見Pluckthun，ThePharmacoloRYofMonoclonalAntibodies(單克隆抗體藥學)，第113卷，Rosenburg和Moore編，Springer-Verlag，NewYork，第269-315頁(1994)；Borrebaeck1995，同下。術語“雙抗體”是指通過在Vh結構域與\結構域之間使用短連接子(約5-10個殘基)建構sFv片段(參見先前段落)以使得V結構域鏈之間而不是鏈內(nèi)配對從而產(chǎn)生二價片段，也即具有兩個抗原結合位點的片段，而制得的小抗體片段。雙特異性雙抗體是兩個“交叉”sFv片段的異二聚體，其中兩個抗體的Vh及\結構域存在于不同多肽鏈上。雙抗體于例如EP404，097；WO93/11161及Hollinger等人，PNASUSA,90:6444-6448(1993)中有更詳盡地描述?！叭嗽椿笨贵w是非人類(例如嚙齒動物)抗體形式，其是含有源自非人類抗體的最小序列的嵌合抗體。在極大程度上，人源化抗體是來自接受者的高變區(qū)的殘基經(jīng)由具有所需抗體特異性、親和力和能力的來自例如小鼠、大鼠、兔或非人類靈長類動物的非人類物種(供體抗體)的高變區(qū)的殘基置換的人類免疫球蛋白(接受者抗體)。在一些情況下，人類免疫球蛋白的構架區(qū)(FR)殘基經(jīng)相應的非人類殘基置換。此外，人源化抗體可以包含接受者抗體或供體抗體中未發(fā)現(xiàn)的殘基。進行這些修飾以進一步改善抗體效能。一般而言，人源化抗體將包含實質(zhì)上所有的至少一個且通常兩個可變結構域，其中所有的或者實質(zhì)上所有的高變環(huán)對應于非人類免疫球蛋白的高變環(huán)，并且所有的或實質(zhì)上所有的FR是人類免疫球蛋白序列的FR。人源化抗體視情況也將包含免疫球蛋白恒定區(qū)(Fe)的至少一部分，通常人類免疫球蛋白恒定區(qū)的至少一部分。關于其他細節(jié)，參見Jones等人，Nature(自然)321:522-525(1986)；Riechmann等人，Nature(自然)332:323-329(1988)和Presta，Curr.Op.Struct.Biol.2:593-596(1992)。“物種依賴性抗體”是對來自第一哺乳動物物種的抗原的結合親和力比其對與其同源物——來自第二哺乳動物物種的結合親和力強的抗體。通常，物種依賴性抗體“特異性結合”至人類抗原(也即，結合親和力(Kd)值不超過約1\10_、、不超過約1\10、或不超過約1X10_9M)，但對來自第二非人類哺乳動物物種的該抗原同源物的結合親和力比其對人類抗原的結合親和力弱至少約50倍或至少約500倍或至少約1000倍。物種依賴性抗體可以是如上定義的各種類型抗體中的任一種，但優(yōu)選是人源化或人類抗體。在這些實施方案中，如由流式細胞分選(FACS)分析或放射免疫沉淀(RIA)測定，多肽、抗體、拮抗劑或組合物與“非靶”蛋白的結合程度將比多肽、抗體、拮抗劑或組合物與其特定靶蛋白的結合程度小約10%。關于多肽、抗體、拮抗劑或組合物與靶分子的結合，術語“特異性結合”或“特異性結合至”特定多肽或特定多肽靶標上的抗原表位或者對特定多肽或特定多肽靶標上的抗原表位“具特異性”是指結合與非特異性相互作用具有可測量程度的差異。可以例如，通過與對照分子，一般是不具有結合活性的類似結構的分子的結合的比較，來測定分子的結合進而測量特異性結合。舉例來說，可通過與類似于靶標的對照分子(例如過量的未經(jīng)標記靶標)競爭來測定特異性結合。在此情況下，若經(jīng)標記靶標與探針的結合由過量未經(jīng)標記靶標競爭性抑制，則指示特異性結合。如本文中所用的術語“特異性結合”或“特異性結合至”特定多肽或特定多肽靶標上的抗原表位或對特定多肽或特定多肽靶標上的抗原表位“其特異性”可由例如分子對靶標的Kd是至少約10_4M、至少約10_5M、至少約1(Γ6Μ、至少約10〃Μ、至少約1(Γ8Μ、至少約1(Γ9Μ、或者至少約1(T1CIM、至少約1(Γ"Μ、至少約10-1或更高來表現(xiàn)。在一實施方案中，術語“特異性結合”是指分子結合至特定多肽或特定多肽上的抗原表位而實質(zhì)上不結合至任何其他多肽或多肽抗原表位的結合。抗體“效應子功能”是指可歸因于抗體的Fc區(qū)(天然序列Fc區(qū)或氨基酸序列變異Fc區(qū))的那些生物活性，且其隨抗體同種型而變化?？贵w效應子功能的實例包括Clq結合及補體依賴性細胞毒性Fc受體結合；抗體依賴性細胞介導的細胞毒性(ADCC)；吞噬作用；細胞表面受體的下調(diào)；及B細胞活化。“天然序列Fc區(qū)”包含與自然界中發(fā)現(xiàn)的Fc區(qū)的氨基酸序列一致的氨基酸序列。Fc序列的實例于例如，但不限于，Kabat等人，同上(1991)中描述。關于本文中所鑒別的多肽及抗體序列的“氨基酸序列一致性百分比(％)”或“同源性”定義是在將任何保守性置換視作序列一致性的一部分對序列進行比對之后，候選序列中與經(jīng)比較的多肽的氨基酸殘基一致的氨基酸殘基百分比。為測定氨基酸序列一致性百分比而進行的比對可以用本領域中的多種方式達成，例如使用可公開獲得的計算機軟件，例如BLAST、BLAST-2、ALIGN或Megalign(DNASTAR)軟件。本領域技術人員可以確定用于測量比對的適合參數(shù)，包括在所比較序列的全長上實現(xiàn)最大比對所需的任何算法。然而，為達成本文的目的，氨基酸序列一致性百分比值是使用序列比較計算機程序ALIGN-2產(chǎn)生。ALIGN-2序列比較計算機程序是由Genentech，Inc.編寫且源代碼已經(jīng)與使用者文件一起歸檔于美國版權辦公室(U.S.CopyrightOffice,WashingtonD.C.，20559)，在其中其是以美國版權登記號第TXU510087號登記。ALIGN-2程序可以通過Genentech，he.(SouthSanFrancisco,California)公開獲得。ALIGN-2程序應經(jīng)編譯以用于UNIX操作系統(tǒng)，優(yōu)選數(shù)字UNIXV4.0D。所有序列比較參數(shù)由ALIGN-2程序設定且不改變。術語“Fe受體”或“FcR”是用于描述與抗體的Fc區(qū)結合的受體。在一個實施方案中，本發(fā)明的FcR是結合IgG抗體的FcR(γ受體)并且包括!7CγRI、FcYRII及FcyRIII亞類的受體，包括這些受體的等位基因變體及可變剪接形式。FcyRII受體包括FcyRIIA(“活化受體”)及FcyRIIB(“抑制受體”)，其主要差異在其細胞質(zhì)結構域的相似氨基酸序列。活化受體FcYRIIA的細胞質(zhì)結構域中含有基于免疫受體酪氨酸的活化基兀(immunoreceptortyrosine-basedactivationmotif,ITAM)。抑制受體FcγRIIB的細胞質(zhì)結構域中含有基于免疫受體酪氨酸的抑制基元(immunoreceptortyrosine-basedinhibitionmotif,ITIM)(參見評述Μ·inDaeron,Annu.Rev.Immunol.(免疫學年度綜述)15:203-234(1997))ο該術語包括異型，例如FcyRIIIA異型FcyRIIIA-Phe158,FcyRIIIA-Vall58、FcyRIIA-R131禾Π/或FcγRIIA-H131。FcR于Ravetch和Kinet，Annu.Rev.Immunol(免疫學年度綜述)9:457-92(1991)；Capel等人，Immunomethods(免疫方法)4:25-34(1994)JPdeHaas等人，J.Lab.Clin.Medd.126:330-41(1995)中評述。本文中的術語“FcR”涵蓋其他FcR包括將來鑒別的那些FcR。該術語也包括新生兒受體i^cto，其負責將母體IgG轉移至胎兒(Guyer等人，J.Immunol.(免疫學雜志)117:587(1976)及Kim等人，J.Immunol.(免疫學雜志)24:249(1994))。術語”FcRn"是指新生兒Fc受體(Fcfoi)。Fcfoi在結構上與主要組織相容性復合物(MHC)類似且由非共價結合至β2_微球蛋白的α鏈組成。新生兒Fc受體Fcfoi的多種功能于Ghetie及Ward(2000)Annu.Rev.Immunol.(免疫學年度綜述)18，739-766中評述。Fcfoi在免疫球蛋白IgG自母體至幼體的被動傳遞及血清IgG水平的調(diào)控中發(fā)揮作用。Fcfoi可充當救助受體，以完整形式結合并轉運在細胞內(nèi)以及橫跨細胞的胞飲IgG，且通過默認的降解途徑將其援救。W000/42072(Presta)和Shields等人，J.Biol.Chem.(生物化學雜志)9)6591-6604(2001)描述與FcR的結合改善或減少的抗體變體。那些公開的內(nèi)容特定地以引用的方式并入本文中。人類IgGFc區(qū)的“CH1結構域”(也稱作“HI”結構域的“Cl”)通常從約氨基酸118延伸至約氨基酸215(EU編號系統(tǒng))。“鉸鏈區(qū)”一般定義是從人類IgGl的Glu216延伸至ftx)230(Burton,Molec.Immunol.(分子免疫學)22=161-206(1985))0通過將形成重鏈間S-S鍵的第一個和最后一個的半胱氨酸殘基置于相同位置可使其他IgG同種型的鉸鏈區(qū)與IgGl序列比對。Fc區(qū)的“下部鉸鏈區(qū)”通常定義為與鉸鏈區(qū)的C端緊鄰的殘基段，也即Fc區(qū)的殘基233至239。在先前的報道中，F(xiàn)cR結合一般是由于IgGFc區(qū)下部鉸鏈區(qū)中的氨基酸殘基。人類IgGFc區(qū)的“CH2結構域”(也稱作“H2”結構域的“C2”)通常自約氨基酸231延伸至約氨基酸340。CH2結構域的獨特之處在于其并不與另一結構域緊密配對。而是兩個N連接的分支糖鏈插入完整的天然IgG分子的兩個CH2結構域之間。已推測糖類可提供結構域-結構域配對的替代并且?guī)椭€(wěn)定CH2結構域。Burton，Molec.Immunol.(分子免疫學)22:161-206(1985)。"CH3結構域”(也稱作“C2”或“H3”結構域)包含F(xiàn)c區(qū)中CH2結構域C端的殘基段(也即約氨基酸殘基341至抗體序列的C端，通常在IgG的氨基酸殘基446或447處)?！肮δ苄訤c區(qū)”具有天然序列Fc區(qū)的效應子功能”。示例性的“效應子功能”包括Clq結合；補體依賴性細胞毒性；Fc受體結合；抗體依賴性細胞介導的細胞毒性(ADCC)；吞噬作用；細胞表面受體(例如B細胞受體；BCR)的下調(diào)等。這些效應子功能一般需要Fc區(qū)與結合結構域(例如抗體可變結構域)組合并且可以例如使用如本文中所揭示的各種測定來評定?！癈lq”是包括免疫球蛋白的Fc區(qū)的結合位點的多肽。Clq與兩種絲氨酸蛋白酶Clr及Cls—起形成復合物Cl，其是補體依賴性細胞毒性(⑶C)途徑的第一組份。人類Clq可購自例如Quidel，SanDiego,CA。術語“結合結構域”是指結合至另一分子的多肽區(qū)域。在FcR的情況下，結合結構域可包含負責結合Fc區(qū)的其多肽鏈(例如其α鏈)的一部分。一種有用的結合結構域是FcRa鏈的細胞外結構域。具有擁有“改變”的FcR結合親和力或ADCC活性的變異IgGFc的抗體或肽體是與親本多肽或包含天然序列Fc區(qū)的多肽相比，具有增強或減低的FcR結合活性(例如FcyR或Fcfoi)和/或ADCC活性的抗體或肽體?！氨憩F(xiàn)增加的結合”至FcR的變體的Fc以高于親本多肽或天然序列IgGFc的親和力(例如表觀Kd或IC50值較低)結合至少一種FcR。根據(jù)一些實施方案，與親本多肽相比，結合提高約3倍，優(yōu)選約5倍、10倍、25倍、50倍、60倍、100倍、150倍、200倍、250倍、300倍、350倍、400倍、450倍或500倍，或結合提高約25%至1000%。“表現(xiàn)減少的結合”至FcR的多肽變體以低于親本多肽的親和力(例如表觀Kd或IC50值較高)結合至少一種FcR。與親本多肽相比，結合減少可以是約5^UOW、20%、30%、40%、50%、60%或更多的結合減少。“抗體依賴性細胞介導的細胞毒性”或“ADCC”指一種細胞毒性形式，其中分泌Ig與存在于某些細胞毒性細胞(例如自然殺傷(NK)細胞、嗜中性粒細胞及巨噬細胞)上的Fc受體(FcR)結合，使這些細胞毒性效應細胞能夠特異性結合至帶有抗原的靶細胞，并且隨后以細胞毒素殺死靶細胞?？贵w“配備”細胞毒性細胞且絕對是該殺傷所需的。用于介導ADCC的初級細胞、NK細胞僅表達FcyRIII，而單核細胞表達FcγRI、FcγRII及FcγRIII。FcR在造血細胞上的表達總結于Ravetch和Kinet，Annu.Rev.Immuno1(免疫學年度綜述)9=457-92(1991)第464頁上的表3中。為評價相關分子的ADCC活性，可進行體外ADCC測定，例如美國專利第5，500,362號或第5，821，337號或下文實施例中所述的測定。適用于這些測定的效應細胞包括外周血單核細胞(PBMC)及自然殺傷(NK)細胞?；蛘?，或另外，可體內(nèi)，例如在例如Clynes等人，PNAS(USA)95:652-656(1998)中所揭示的動物模型中評價相關分子的ADCC活性。當測定中具有變異Fc區(qū)的多肽與具有野生型Fc區(qū)的多肽(或親本多肽)的量基本上相同時，與具有野生型IgGFc的多肽或親本多肽相比，在人類效應細胞存在下“表現(xiàn)增加的ADCC”或更有效介導抗體依賴性細胞介導的細胞毒性(ADCC)的包含變異Fc區(qū)的多肽，是體外或體內(nèi)實質(zhì)上更有效介導ADCC的多肽。一般而言，這些變體將使用如本文中所揭示的體外ADCC測定來鑒別，但涵蓋例如在動物模型等中測定ADCC活性的其他測定或方法。在一個實施方案中，優(yōu)選變體在介導ADCC方面比野生型Fc(或親本多肽)有效約5倍至約100倍，例如約25倍至約50倍?！把a體依賴性細胞毒性”或“CDC”是指在補體存在下溶解靶細胞。經(jīng)典補體活化途徑是通過補體系統(tǒng)的第一組份(Clq)結合至與其同源抗原結合的(適當亞類的)抗體起始。為評定補體活化，可進行⑶C測定，例如如feizzano-Santoro等人，J.Immunol.Methods(免疫學方法雜志)202:163(1996)中所述。具有已變化的Fc區(qū)氨基酸序列和增加或降低的Clq結合能力的多肽變體描述于美國專利第6，194，551號及WO99/51642中。那些專利公開的內(nèi)容特定地以引用的方式并入本文中。也參見Idusogie等人，J.Immunol.(免疫學雜志)164=4178-4184(2000)?！叭祟愋毎笔潜磉_一個或多個FcR且執(zhí)行效應子功能的白細胞。根據(jù)一個實施方案，所述細胞至少表達FcγRIII，并且執(zhí)行ADCC效應子功能。介導ADCC的人類白細胞的實例包括外周血單核細胞(PBMC)、自然殺傷(NK)細胞、單核細胞、細胞毒性T細胞及嗜中性粒細胞；其中PBMC及NK細胞較佳。效應細胞可自其天然來源分離，例如自如本文中所述的血液或PBMC分離。測量與Fcfoi的結合的方法是已知的(參見例如(ihetie1997，Hinton2004)。人類Fcfoi高親和力結合多肽與人類Fcfoi的體內(nèi)結合以及血清半衰期，可例如在表達人類Fcfoi的轉基因小鼠或轉染人類細胞系中測定，或在經(jīng)施用Fc變異多肽的靈長類動物中測定。在一個實施方案中，特定的具有變異IgGFc的本發(fā)明抗-α5β1抗體，與具有野生型IgGFc的多肽相比，表現(xiàn)出對人類Fcfoi的結合親和力增加至少2倍、至少5倍、至少10倍、至少50倍、至少60倍、至少70倍、至少80倍、至少100倍、至少125倍、至少150倍。在一特定實施方案中，對人類Fcfoi的結合親和力增加約170倍。在一個實施方案中，關于對Fcfoi的結合親和力，多肽的EC50或表觀Kd(在ρΗ6.0)小于ΙμΜ，優(yōu)選地小于或等于ΙΟΟηΜ，更優(yōu)選小于或等于ΙΟηΜ。在一實施方案中，關于對FcγRIII(F158，也即低親和力同種型)增加的結合親和力，EC50或表觀Kd小于或等于IOnM且對于FcγRIII(V158；高親和力同種型)，EC50或表觀Kd小于或等于3nM。根據(jù)另一實施方案，若測試抗體與對照抗體結合曲線的中點處吸光值的比率(例如A45(lnm(tt#)/A450nm(對照_))小于或等于40%，則相對于對照抗體(例如Herceptin抗體)，抗體與！^受體結合的降低可看作相對于對照抗體顯著。根據(jù)另一實施方案，若測試抗體與對照抗體結合曲線的中點處吸光值的比率(例如A45tlIim(抗體)/A45(1nm(·抗體))大于或等于125%，則相對于對照抗體(例如Herceptin抗體)，抗體與Fc受體結合的增加可視作相對于對照抗體顯29者?！坝H本多肽”或“親本抗體”是包含滿足以下的氨基酸序列的多肽或抗體自該氨基酸序列產(chǎn)生的變異多肽或抗體，并且針對該氨基酸序列對變異多肽或抗體進行比較。通常親本多肽或親本抗體缺乏一個或多個本文中所揭示的Fc區(qū)修飾，且與本文中所揭示的多肽變體效應子功能不同。親本多肽可包含天然序列Fc區(qū)或具有預先存在的氨基酸序列修飾(例如添加、缺失和/或置換)的Fc區(qū)。本發(fā)明抗體可源自噬菌體展示。本文中所用“文庫”是指復數(shù)個抗體或抗體片段序列，或編碼這些序列的核酸，所述序列在根據(jù)本發(fā)明方法引入這些序列中的變異氨基酸的組合方面不同?！笆删w展示”是使變異多肽以與衣殼蛋白的至少一部分以融合蛋白的形式展示于噬菌體(例如絲狀噬菌體)顆粒表面上的技術。噬菌體展示的效用在于可從隨機化蛋白質(zhì)變體的龐大文庫中快速且有效地分選那些以高親和力結合至靶抗原的序列。在噬菌體上的展示肽和蛋白質(zhì)文庫已經(jīng)用來在數(shù)百萬多肽中篩選具有特異性結合性質(zhì)的多肽。多價噬菌體展示方法已用于通過與絲狀噬菌體的基因III或基因VIII融合來展示小隨機肽和小蛋白質(zhì)。Wells及Lowman，Curr.Opin.Struct.Biol.(當前結構生物學觀點)3355-362(1992)及其中所引用的參考文獻。在單價噬菌體展示中，使蛋白質(zhì)或肽文庫融合至基因III或其一部分，在野生型基因III蛋白質(zhì)存在下，以低程度表達，使得噬菌體顆粒展示融合蛋白的一個拷貝或不展示。相對于多價噬菌體而言，親和力作用降低，因此分選基于固有配體親和力，并且使用簡化了DNA操作的噬菌粒載體。Lowman及狗11MethodsAcompamontoMethodsinEnzymology(方法酶學方法手冊)，3:205-0216(1991)?！笆删！笔蔷哂欣鏑olEl的細菌復制起點及噬菌體的基因區(qū)拷貝的質(zhì)粒載體。噬菌?？捎糜谌魏我阎氖删w，包括絲狀噬菌體和人字形噬菌體。質(zhì)粒一般也將含有抗生素抗性的可篩選標志?？寺≈吝@些載體中的DNA區(qū)段可以以質(zhì)粒復制。當含有這些載體的細胞具有產(chǎn)生噬菌體顆粒所需的所有基因時，質(zhì)粒的復制模式變?yōu)闈L環(huán)復制(rollingcirclereplication)以產(chǎn)生質(zhì)粒DNA的一條鏈的拷貝，且包裝噬菌體顆粒。噬菌?？尚纬筛腥拘曰蚍歉腥拘允删w顆粒。該術語包括含有噬菌體衣殼蛋白基因或其片段的連接至異源多肽基因形成融合體，以使得所述異源多肽展示于噬菌體顆粒表面上的噬菌粒。術語“噬菌體載體”是指含有異源基因并且能夠復制的噬菌體的雙鏈復制形式。噬菌體載體具有允許噬菌體復制及噬菌體顆粒形成的噬菌體復制起點。噬菌體優(yōu)選是絲狀噬菌體，例如M13、fl、fd、Pf3噬菌體或其衍生物；或λ形噬菌體，例如λ、21、phi80、phi81、82、似4、4；34等或其衍生物。多肽，例如肽體、免疫黏附素、抗體和短肽，的共價修飾包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。共價修飾的一種類型包括使多肽的靶向氨基酸殘基與有機衍生物反應，該有機衍生物能夠與多肽的所選的側鏈或N端或C端殘基反應。以雙功能劑衍生適用于，例如將多肽和用于純化抗體的方法中的水不溶性持基質(zhì)或表面交聯(lián)，并且反之亦然。常用交聯(lián)劑包括例如1，1_雙(重氮乙酰基)-2-苯基乙烷、戊二醛、N-羥基-琥珀酰亞胺酯，例如與4-疊氮基水楊酸形成的酯)、同質(zhì)雙官能酰亞胺酯，包括二琥珀酰亞胺基酯，例如3，3'-二硫代雙(琥珀酰亞胺基丙酸酯)、雙官能順丁烯二酰亞胺，例如雙-N-順丁二烯二酰亞胺基-1，8-辛烷)及例如甲基-3-[(對疊氮基苯基)二硫基]丙酰亞胺酯的試劑。其他修飾包括谷氨酰胺?；疤於０孵；鶜埢謩e脫酰胺化成相應谷氨?；疤於滨；鶜埢?；脯氨酸及賴氨酸的羥化；絲氨酰基或蘇氨?；鶜埢慕?jīng)基的磷酸化；賴氨酸、精氨酸及組氨酸側鏈的α-氨基的甲基化[Τ.Ε.Creighton，ProteinsStructureandMolecularProperties(蛋白質(zhì)結構和分子特件),W.H.Freeman&Co.，SanFrancisco，第79-86頁(1983)]；N端氨的乙酰化；及任何C端羧基的酰胺化。其他修飾包括毒素與拮抗劑綴合，例如美坦生及美坦生類化合物、加利車霉素及其他細胞毒性劑。多肽的共價修飾的另一類型包含以美國專利第4，640，835號、第4，496，689號、第4，301，144號、第4，670，417號、第4，791，192號或第4，179，337號中所述的方式使多肽連接至多種非蛋白質(zhì)聚合物，例如聚乙二醇(PEG)、聚丙二醇或聚環(huán)氧烷之一。如果有利，也可以形成包含與另一異源多肽或氨基酸序列(例如免疫黏附素或肽體)融合的多肽的嵌合分子的方式來修飾本發(fā)明多肽。在一個實施方案中，該嵌合分子包含多肽與蛋白質(zhì)轉導結構域的融合體，其使用例如人類免疫缺陷病毒TAT蛋白的蛋白質(zhì)轉導結構域靶向多肽以傳遞至多個組織，并且更特定的穿過腦血障壁(Schwarze等人，1999，Science(科學)285:1569-72)。在另一實施方案中，該嵌合分子包含多肽與標簽多肽的融合體，標簽多肽提供了抗標簽抗體能夠選擇性結合的抗原表位。一般將抗原表位標簽置于多肽的氨基端或羧基端。可使用針對標簽多肽的抗體檢測多肽的這些表位標簽形式的存在。又，提供抗原表位標簽使得多肽能夠輕易地使用抗標簽抗體或另一類型的結合至抗原表位標簽的親和力基質(zhì)通過親和純化純化。本領域中已知多種標簽多肽及其相應抗體。實例包括聚-組氨酸(poly-His)或聚-組氨酸-甘氨酸(poly-His-gly)；fluHA標簽多肽及其抗體12CA5[Field等人，Mol.Cell.Biol.(分子和細胞生物學)，8:2159-2165(1988)]；c-myc標簽及其8F9、3C7、6E10、G4、B7及9E10抗體[Evan等人，MolecularandCellularBiology(分子和細胞生物學)，5:3610-3616(1985)]；及單純性皰疹病毒糖蛋白D(gD)標簽及其抗體[Paborsky等人，ftOteinEngineering(蛋白質(zhì)工程)，3(6)=547-553(1990)]。其他標簽多肽包括Flag-肽[Hopp等人，BioTechnology(生物技術)，6:1204-1210(1988)]；KT3抗原表位肽[Martin等人，Science(科學)，255192-194(1992)]；α-微管蛋白抗原表位肽[Skinner等人，J.Biol.Chem.(生物化學雜志)J66:15163-15166(1991)]；及T7基因10蛋白肽標簽[Lutz-Freyermuth等人，PNASUSA,87:6393-6397(1990)]。在一替代實施方案中，嵌合分子可包含多肽與免疫球蛋白或免疫球蛋白的特定區(qū)域的融合體。對于嵌合分子(例如“免疫黏附素”)的二價形式而言，該融合體可以是與IgG分子的Fc區(qū)的融合體。本發(fā)明的Ig融合體包括包含大約或僅人類殘基94-243、殘基33-53或殘基33-52替代Ig分子內(nèi)的至少一個可變區(qū)的多肽。在一特定實施方案中，免疫球蛋白融合體包括IgGl分子的鉸鏈、CH2及CH3區(qū)，或鉸鏈、CHI、CH2及CH3區(qū)。關于免疫球蛋白融合體的制備，也參見美國專利第5，428，130號。本發(fā)明提供抑制或預防復發(fā)性腫瘤生長或復發(fā)性癌細胞生長的方法及組合物。在各種實施方案中，癌癥是復發(fā)性腫瘤生長或復發(fā)性癌細胞生長，其中癌細胞數(shù)目未顯著減少或已增多，或腫瘤尺寸未顯著減小或已增大，或癌細胞尺寸未能有任何進一步減小或癌細胞數(shù)目未能有任何進一步減少?？赏ㄟ^本領域中已知用于測定對癌細胞治療的有效性的任何方法體內(nèi)或體外確定癌細胞是否是復發(fā)性腫瘤生長或復發(fā)性癌細胞生長。對抗-VEGF治療有抗性的腫瘤是復發(fā)性腫瘤生長的例子。本文中所揭示的多肽、抗體、拮抗劑或者組合物的“有效量”是足以實施特定的聲稱的目的的量?！坝行Я俊笨筛鶕?jù)經(jīng)驗及通過關于所述目的的已知方法確定。術語“治療有效量”是指本發(fā)明的抗體、多肽或拮抗劑可有效“治療”哺乳動物(aka患者)的疾病或病癥的量。在癌癥的情況下，治療有效量的藥物可減少癌細胞的數(shù)目減小腫瘤尺寸或重量；抑制(也即，在一定程度上減緩且優(yōu)選終止)癌細胞浸潤至周邊器官中；抑制(也即，在一定程度上減緩且優(yōu)選終止)腫瘤轉移；在一定程度上抑制腫瘤生長；和/或在一定程度上緩解與癌癥相關的一或多種癥狀。對于藥物可防止現(xiàn)有癌細胞生長和/或殺死現(xiàn)有癌細胞的程度而言，藥物可以是細胞生長抑制劑和/或細胞毒性劑。在一實施方案中，治療有效量是生長抑制量。在另一實施方案中，治療有效量是延長患者存活期的量。在另一實施例中，治療有效量是改善患者的無進展存活的量。在創(chuàng)傷愈合的情況下，術語“有效量”或“治療有效量”是指可以有效加速或改善受試者創(chuàng)傷愈合的藥物量。治療劑量是對患者表現(xiàn)治療作用的劑量，并且低于治療劑量(sub-therapeuticdose)是對所治療患者不表現(xiàn)治療作用的劑量?！奥詣?chuàng)傷”是指不愈合的創(chuàng)傷。參見例如Lazarus等人，Definitionsandguidelinesforassessmentofwoundsandevaluationofhealing(評估創(chuàng)傷禾口評價愈合的定義和指南)，Arch.Dermatol.130:489-93(1994)。慢性創(chuàng)傷包括，但不限于，例如動脈潰瘍(arterialulcers)、糖尿病性潰瘍(diabeticulcers)、壓力性潰瘍(pressureulcers)、靜脈潰瘍(venousulcers)等。急性創(chuàng)傷可發(fā)展成慢性創(chuàng)傷。急性創(chuàng)傷包括，但不限于，由例如熱損傷、外傷、外科手術、大范圍皮膚癌切除、深度真菌及細菌感染、血管炎(vasculitis)、硬皮病(scleroderma)、天皰瘡(pemphigus)、中毒性表皮壞死溶解(toxicepidermalnecrolysis)等弓I起的倉1J傷。參見例如Buford，WoundHealingandPressureSores(創(chuàng)傷愈合和壓力性疼痛)，Healingffell.com,出版于2001年10月M日?！捌胀▌?chuàng)傷”是指經(jīng)歷普通創(chuàng)傷愈合修復的創(chuàng)傷。本發(fā)明多肽、抗體、拮抗劑或是組合物的“生長抑制量”是能夠體外或體內(nèi)抑制細胞，尤其腫瘤，例如癌細胞生長的量?？筛鶕?jù)經(jīng)驗及通過已知方法或通過本文中所提供的實例來確定為抑制新生性細胞生長的本發(fā)明多肽、抗體、拮抗劑或組合物的“生長抑制量”。本發(fā)明多肽、抗體、拮抗劑或組合物的“細胞毒性量”是能夠體外或體內(nèi)引起細胞、尤其腫瘤例如癌細胞破壞的量?？筛鶕?jù)經(jīng)驗及通過本領域中已知的方法來確定為抑制新生性細胞生長的本發(fā)明多肽、抗體、拮抗劑或組合物的“細胞毒性量”。本文中的“自身免疫病”是由受試者自身組織產(chǎn)生且針對受試者自身組織的疾病或病癥，或其共分離(co-segregate)或表現(xiàn)形式或由其產(chǎn)生的病狀。自身免疫病或病癥的例子包括，但不限于關節(jié)炎(arthritis)(類風濕性關節(jié)炎(rheumatoidarthritis)，例如急性關節(jié)炎(acutearthritis)、慢性類風濕性關節(jié)炎(chronicrheumatoidarthritis)、痛風性關節(jié)炎(goutyarthritis)、急性痛風性關節(jié)炎(acutegoutyarthritis)、慢性炎性關節(jié)炎(chronicinflammatoryarthritis)、退行性關節(jié)炎(degenerativearthritis)、感染性關節(jié)炎(infectiousarthritis)、萊姆關節(jié)炎(Lymearthritis)、增生性關節(jié)炎(proliferativearthritis)、銀屑病性關節(jié)炎(psoriaticarthritis)、椎骨關節(jié)炎(vertebralarthritis)、及青少年發(fā)作型類風濕性關節(jié)炎(juvenile-onsetrheumatoidarthritis)、骨關節(jié)炎(osteoarthritis)、f曼t生漸t生關節(jié)炎(arthritischronicaprogrediente)、變形t生關節(jié)炎(arthritisdeformans)、|曼1生原發(fā)性多發(fā)性關節(jié)炎(polyarthritischronicaprimaria)、反應性關節(jié)炎(reactivearthritis)、及僵直性脊椎炎(ankylosingspondylitis)、炎性過增生性皮膚疾病(inflammatoryhyperproliferativeskindiseases)、銀屑病(psoriasis)例如斑塊銀屑病(plaquepsoriasis)、滴狀銀屑病(gutattepsoriasis)、膿皰性銀屑病(pustularpsoriasis)、及指甲銀屑病(psoriasisofthenails)、皮炎(dermatitis)包括接觸性皮炎(contactdermatitis)、慢性接觸性皮炎(chroniccontactdermatitis)、變應性皮炎(allergicdermatitis)、變應性接觸性皮炎(allergiccontactdermatitis)、皰疫樣皮炎(dermatitisherpetiformis)及特應性皮炎(atopicdermatitis)、χ連鎖高IgM綜合征(x-linkedhyperIgMsyndrome)、蕁麻疹(urticaria)例如慢性特發(fā)性蕁麻疹(chronicidiopathicurticaria)，包f舌f曼t生自身；^iSt生尊)*(chronicautoimmuneurticaria)、多發(fā)性肌炎(polymyositis)/皮肌炎(dermatomyositis)、青少年皮肌炎(juveniledermatomyositis)、中毒性表皮壞死松角軍癥(toxicepidermalnecrolysis)>硬皮病(scleroderma)包括系統(tǒng)性硬皮病(systemicscleroderma)、硬化癥(sclerosis)例如系統(tǒng)性硬化癥(systemicsclerosis)、多發(fā)性硬化癥(multiplesclerosis)(MS)例如脊髓-視覺(spino-opticaDMS、原發(fā)性進行性(primaryprogressive)MS及復發(fā)緩解型(relapsingremitting)MS、進行性系統(tǒng)性硬化癥(progressivesystemicsclerosis)、動脈粥樣硬化(atherosclerosis)、動脈硬化(arteriosclerosis)、播散性硬化癥(sclerosisdisseminata)及共濟失調(diào)性硬化癥(ataxicsclerosis)、炎性腸病(inflammatoryboweldisease)(IBD)(例如局限性回腸炎(Crohn'sdisease)、結腸炎(colitis)例如潰瘍性結腸炎(ulcerativecolitis),潰瘍性結腸炎(colitisulcerosa)、微觀結腸炎(microscopiccolitis)、膠原性結腸炎(collagenouscolitis)、息肉狀結腸炎(colitispolyposa)、壞死性小腸結腸炎(necrotizingenterocolitis)及透壁性結腸炎(transmuralcolitis)、及自身免疫性炎性腸病(autoimmuneinflammatoryboweldisease))、壞疽性胺皮病(pyodermagangrenosum)、結節(jié)性紅斑(erythemanodosum)、原發(fā)性硬化性膽管炎(primarysclerosingcholangitis)、鞏膜外層炎(印iscleritis)、呼吸窘迫綜合征(respiratorydistresssyndrome)包括成人或急性呼吸窘迫綜合征(adultoracuterespiratorydistresssyndrome)(ARDS)、腦膜炎(meningitis)、葡萄膜全部或部分發(fā)炎(inflammationofallorpartoftheuvea)、虹膜炎(iritis)、脈絡膜炎(choroiditis)、自身免疫性血液病癥(autoimmunehematologicaldisorder)、類風濕性脊椎炎(rheumatoidspondylitis)、突發(fā)性聽力損失(suddenhearingloss)、IgE介導的疾病，例如過敏反應(anaphylaxis)及變應性和特異性鼻炎(allergicandatopicrhinitis)、腦炎(enc印halitis)，例如拉斯穆森氏腦炎(Rasmussen‘sencephalitis)及邊緣葉禾口/或腦干腦炎(limbicand/orbrainstemencephalitis)、葡萄膜炎(uveitis)，例如前葡萄膜炎(anterioruveitis)、急性前葡萄膜炎(acuteanterioruveitis)、肉芽月中性葡萄膜炎(granulomatousuveitis)、非肉芽月中性葡萄H炎(nongranulomatousuveitis)、晶##原t生葡萄月莫炎(phacoantigenicuveitis)、后葡萄膜炎(posterioruveitis)或自身免疫性葡萄膜炎(autoimmuneuveitis)、伴有及不伴有腎病綜合征的腎小球腎炎(glomeru1onephritis(GN)withandwithoutnephroticsyndrome),例如慢性或急性腎小球腎炎(chronicoracuteglomerulon印hritis)，例如原發(fā)性(primary)GN、免疫介導的(immune-mediated)GN、膜性(membranous)GN(膜性腎病)(membranousnephropathy)、特發(fā)性膜性(idiopathicmembranous)GN、膜性增生性(membranousproliferative)GN(MPGN)(包括I型及11型)及快速進行性(rapidlyprogressive)GN)、過敏性病狀(allergicconditions)、過敏反應(allergicreaction)、濕疹(eczema)，包括過敏性或異位性濕疹(allergicoratopiceczema)、哮喘(asthma)，例如支氣管哮喘(asthmabronchiale,bronchialasthma)及自身免疫性哮喘(auto-immuneasthma)、涉及T細胞浸潤及慢性發(fā)炎反應的病狀、慢性肺部發(fā)炎疾病(chronicpulmonaryinflammatorydisease)、自身免疫性心肌炎(autoimmunemyocarditis)、白細胞黏附缺乏(leukocyteadhesiondeficiency)、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemiclupuserythematosus(SLE)orsystemiclupuserythematodes)(SLE)，例如皮月夫(cutaneous)SLE>M急t生皮月夫紅斑良^(subacutecutaneouslupuserythematosus)、新生兒狼瘡綜合征(neonatallupussyndrome)(NLE)、播散性紅斑狼瘡(lupuserythematosusdisseminatus)、狼疫(lupus)(包括腎炎性(nephritis)、大腦炎性(cerebritis)、兒童性(pediatric)、非腎臟性(non-renal)、圓盤狀(discoid)、脫發(fā)性(alopecia))、青少年發(fā)作型(juvenileonset)(I型)糖尿病(diabetesmellitus)，包括兒童胰島素依賴性糖尿病(pediatricinsulin-dependentdiabetesmellitus)(IDDM))、成人發(fā)作型糖尿病(adultonsetdiabetesmellitus)(II型糖尿病)、自身免疫性糖尿病(autoimmunediabetes)、特發(fā)性尿崩癥(idiopathicdiabetesinsipidus)、與由細胞激素及T淋巴細胞介導的急性及遲發(fā)超敏性相關的免疫應答(immuneresponsesassociatedwithacuteanddelayedhypersensitivitymediatedbycytokinesandT-lymphocytes)、結核病(tuberculosis)、結節(jié)病(sarcoidosis)、肉芽月中病(granulomatosis)，包括淋巴瘤樣肉芽月中病(lymphomatoidgranulomatosis)、韋格納氏肉芽月中(Wegener，sgranulomatosis)、顆粒性白細胞缺乏癥(agranulocytosis)、血管病(vasculitides)，包括血管炎(vasculitis)，包括大血管血管炎(largevesselvasculitis)^MMft^lil^^Siffllfi(polymyalgiarheumaticaandgiantcell)(,安(Takayasu's))動脈炎)、中等血管血管炎(mediumvesselvasculitis)(包括川崎病(Kawasaki‘sdisease)及結節(jié)性多動脈炎(polyarteritisnodosa)、微觀多動脈炎(microscopicpolyarteritis)、CNS血管炎(vasculitis)、壞死性血管炎(necrotizing)、皮膚血管炎(cutaneous)或超敏性血管炎(hypersensitivityvasculitis)、系統(tǒng)性壞死性血管炎(systemicnecrotizingvasculitis)及ANCA相關血管炎(ANCA-associatedvasculitis),例如丘-施(Churg-Strauss)血管炎或綜合征(Churg-Straussvasculitisorsyndrome)(CSS))、最頁動脈炎(temporalarteritis)、再生障礙性貧血(aplasticanemia)、自身免疫性再生障礙性貧血(autoimmuneaplasticanemia)、Coombs陽性貧血(Coombspositiveanemia)、戴-布貧血(DiamondBlackfananemia)、溶血性貧血(hemolyticanemia)或免疫溶血性貧血(immunehemolyticanemia)(包括自身免疫性溶血性貧血(autoimmunehemolyticanemia)(AIHA)、惡性貧血(perniciousanemia(anemiaperniciosa))、艾迪生病(Addison'sdisease)、單純紅細胞性貧血(pureredcellanemia)或發(fā)育不全(aplasia)(PRCA))、因子VIII缺乏(FactorVIIIdeficiency)、A型血友病(hemophiliaA)、自身免疫性嗜中性粒細胞減少癥(autoimmuneneutropenia)、全血球減少癥(pancytopenia)、白細胞減少癥(leukopenia)、涉及白細胞滲出(leukocytediapedesis)的疾病、CNS炎性病癥(inflammatorydisorders)、多器官損傷綜合征(multipleorganinjurysyndrome)例如因敗血病(s印ticemia)、外傷或出血(traumaorhemorrhage)繼發(fā)的多器官損傷綜合征、抗原-抗體復合物介導的疾病、抗腎小球基底膜疾病(anti-glomerularbasementmembranedisease)、抗磷脂抗體綜合征(anti-phospholipidantibodysyndrome)、變應性神經(jīng)炎(allergicneuritis)、白塞病(Bechet's/Behcet‘sdisease)、卡其jf爾曼綜合征(Castleman'ssyndrome)、古德中白斯丘綜合征(Goodpasture‘ssyndrome)>Reynaud's綜合征(Reynaud'ssyndrome)、舍格倫綜合征(Sjogren'ssyndrome)、斯-約二氏綜合征Gtevens-Johnsonsyndrome)、類天皰瘡(pemphigoid)，例如大皰性類天皰瘡(pemphigoidbullous)及皮膚類天皰疫(skinpemphigoid)、天皰疫(pemphigus)(包括尋常型天皰瘡(pemphigusvulgaris)、落葉型天皰瘡(pemphigusfoliaceus)、黏膜類天皰瘡(pemphigusmucus-membranepemphigoid)及紅斑性天皰疫(pemphiguserythematosus))>自身免疫性多內(nèi)分泌病(autoimmunepolyendocrinopathies)、萊特爾(Reiter's)疾病或綜合征、免疫復合物腎炎(immunecomplexη印hritis)、抗體介導性腎炎(antibody-mediatedη印hritis)、慢性神經(jīng)病(chronicneuropathy),例如IgM多發(fā)個生神經(jīng)病(IgMpolyneuropathies)或IgM介導性神經(jīng)病(IgM-mediatedneuropathy)、血小板減少癥(thrombocytopenia)(例如由心肌梗塞(myocardialinfarction)患者發(fā)展而(1]^.]^.^^(thromboticthrombocytopenicpurpura)(TTP)RU身免疫或免疫介導性血小板減少癥(autoimmuneorimmune-mediatedthrombocytopenia),例如特發(fā)性血小板減少性紫癒(diopathicthrombocytopenicpurpura)(ITP)(包括慢性或急性ITP))、睪丸及卵巢的自身免疫病，包括自身免疫性睪丸炎及卵巢炎(autoimuneorchitisandoophoritis)、原發(fā)性甲狀腺功能低下(primaryhypothyroidism)、副甲狀腺低能癥(hypoparathyroidism)、自身免疫性內(nèi)分泌疾病，包括甲狀腺炎(thyroiditis)例如自身免疫性甲狀腺炎(autoimmunethyroiditis)、橋本病(Hashimoto‘sdisease)、慢性甲狀腺炎(chronicthyroiditis)(橋本甲狀腺炎(Hashimoto'sthyroiditis))、或亞急性甲狀腺炎(subacutethyroiditis)、自身免疫性甲狀腺疾病(autoimmunethyroiddisease)、特發(fā)性甲狀腺功能低下(idiopathichypothyroidism)、格雷夫斯病(Grave‘sdisease)、多腺體綜合征(polyglandularsyndromes)例如自身免疫性多腺體綜合征(或多腺體內(nèi)分泌病綜合征)、副腫瘤綜合征(paraneoplasticsyndromes)，包括神經(jīng)性副月中瘤綜合征(neurologicparaneoplasticsyndromes)，例如蘭伯特-伊頓肌無力綜合征(Lambert-Eatonmyasthenicsyndrome)或伊頓-蘭伯特綜合征(Eaton-Lambertsyndrome))、僵人綜合征(stiff-manorstiff-personsyndrome)、腦脊髓炎(encephalomyelitis)，例如變應性腦脊髓炎(allergicencephalomyelitisorencephalomyelitisallergica)及實驗性變應性腦脊髓炎(experimentalallergicencephalomyelitis)(EAE)、重癥肌無力(myastheniagravis)、小腦變性(cerebellardegeneration)、神經(jīng)性肌強直(neuromyotonia)、目艮陣攣-肌陣攣綜合征(opsoclonusoropsoclonusmyoclonussyndrome)(OMS),及感覺神經(jīng)病(sensoryneuropathy)、希恩綜合征(Sheehan‘ssyndrome)、自身免疫性肝炎(autoimmunehepatitis)、慢性月干炎(chronichepatitis)、狼疫狀月干炎(lupoidhepatitis)、巨細胞肝炎(giantcellh印atitis)、慢性活動性肝炎(chronicactivehepatitis)g^'!!]^^(autoimmunechronicactivehepatitis)巴間質(zhì)肺炎(lymphoidinterstitialpneumonitis)、阻塞性細支氣管炎(非移植)對NSIP(bronchiolitisobliterans(non-transplant)vsNSIP)、吉蘭-巴雷綜合征(Guillain-Barr6syndrome)、貝格爾病(Berger'sdisease)(IgA腎病)、特發(fā)性IgA腎病(idiopathicIgAη印hropathy)、線性IgA皮膚病(linearIgAdermatosis)、原發(fā)性膽汁性月干硬化(primarybiliarycirrhosis)、肺硬變(pneumonocirrhosis)、自身免疫性腸病綜合征(autoimmuneenteropathysyndrome)>Mf^(Celiacdisease)、月復月空雙病(Coeliacdisease)(^!^!)(celiacsprue(glutenenteropathy))>Xf口炎性腹瀉(refractorysprue)、特發(fā)性口炎性腹瀉(idiopathicsprue)、冷球蛋白血癥(cryoglobulinemia)、肌萎縮性側索硬化(amylotrophiclateralsclerosis)(ALS；盧蓋里格病(LouGehrig'sdisease))、冠狀動脈疾病(coronaryarterydisease)>[=|身免疫性內(nèi)耳疾病(autoimmuneinnereardisease)(AIED)、或自身免疫性聽力損失(autoimmunehearingloss)、目艮陣擎肌陣擎綜合征(opsoclonusmyoclonussyndrome)(OMS)、多軟骨炎(polychondritis)，例如難治性或復發(fā)性多軟骨炎、肺泡蛋白沉積癥(pulmonaryalveolarproteinosis)、淀粉樣變性(amyloidosis)、鞏膜炎(scleritis)、非癌性淋巴細胞增多癥(non-cancerouslymphocytosis)、原發(fā)性淋巴細胞增多癥(primarylymphocytosis)，其包括單克隆B細胞淋巴細胞增多癥(monoclonalBcelllymphocytosis)(例如良性單克隆丙種球蛋白病(benignmonoclonalgammopathy)禾口意義未明的單克隆丙禾中球蛋白病(monoclonalgarnmopathyofundeterminedsignificance)(MGUS))、夕卜周神經(jīng)病(peripheralneuropathy)、副月中瘤綜合征(paraneoplasticsyndrome)、離子通道病(channelopathies)，例如癥痛癥(epilepsy)、偏頭痛(migraine)、心律不齊(arrhythmia)、肌肉病癥(musculardisorders)、耳毫(deafness)、失明(blindness)、周期性麻痹(periodicparalysi)及CNS離子通道病(channelopathies)、自閉癥(autism)、炎性肌病(inflammatorymyopathy)、局部區(qū)段性腎小球硬化(focalsegmentalglomerulosclerosis)(FSGS)、內(nèi)分泌目艮病(endocrineophthalmopathy),葡萄膜視網(wǎng)膜炎(uveoretinitis)、脈絡膜視網(wǎng)膜炎(chorioretinitis)、自身免疫性月干臟禾斗病癥(autoimmunehepatologicaldisorder)、肌肉纖維疼痛(fibromyalgia)、多發(fā)性內(nèi)分泌衰竭(multipleendocrinefailure)、施密特綜合征(Schmidt'ssyndrome)、腎上腺炎(adrenalitis)、胃萎縮(gastricatrophy)、初老期癡呆(preseniledementia)、脫髓鞘病(demyelinatingdiseases)，例如自身免疫性脫髓鞘病(autoimmunedemyelinatingdiseases)、糖尿病性腎病(diabeticnephropathy)>^ξ^Π:(Dressier'ssyndrome)>3^(alopeciaareata)>CREST綜合征(鈣質(zhì)沉著癥(calcinosis)、雷諾現(xiàn)象(Raynaud'sphenomenon)、食道蠕動異常(esophagealdysmotility)、指端硬化(sclerodactyly)及毛細管擴張(telangiectasia))、胃個生個生g^^^^E(maleandfemaleautoimmuneinfertility)、混合結締組織疾病(mixedconnectivetissuedisease)、恰力口斯病(Chagas'disease)>MM^i(rheumaticfever)、反復、流產(chǎn)(recurrentabortion)、ijk民肺(farmer‘slung)、多形性紅斑(erythemamultiforme)、心切開術后綜合征(post-cardiotomysyndrome)、庫斤文綜合征(Cushing‘ssyndrome)、鳥愛好者月市(bird-fancier'slung)、變應性肉芽月中性血管炎(allergicgranulomatousangiitis)、良性淋巴細胞血管炎(benignlymphocyticangiitis)、奧爾波特綜合征(Alport‘ssyndrome)、肺泡炎(alveolitis)，例如過敏性肺泡炎(allergicalveolitis)及纖維化肺泡炎(fibrosingalveolitis)、間質(zhì)肺病(interstitiallungdisease)、輸血反應(transfusionreaction)、麻風病(leprosy)、痢疾(malaria)、禾丨J什曼體病(leishmaniasis)、維蟲病(kypanosomiasis)、血吸蟲病(schistosomiasis)、蟲回蟲病(ascariasis)、曲霉病(aspergillosis)、薩姆普特氏綜合征(Sampter‘ssyndrome)、卡布蘭綜合征(Caplan'ssyndrome)、登革熱(dengue)、心內(nèi)膜炎(endocarditis)、心內(nèi)膜心肌纖維化(endomyocardialfibrosis)、彌漫性間質(zhì)性肺纖維化(diffuseinterstitialpulmonaryfibrosis)、間質(zhì)性肺纖維化(interstitiallungfibrosis)、特發(fā)性肺纖維化(idiopathicpulmonaryfibrosis)>囊月中性纖維化(cysticfibrosis)>目艮內(nèi)炎(endophthalmitis)、持久性隆起性紅斑(erythemaelevatumetdiutinum)、胎兒紅血球母細胞增多癥(erythroblastosisfetalis)、嗜酸性筋膜炎(eosinophilicfaciitis)、舒爾曼綜合征(Shulman'ssyndrome)、費爾蒂氏綜合征(Felty‘ssyndrome)、絲蟲病(flariasis)、睫狀體炎(cyclitis)，例如慢性睫狀體炎(chroniccyclitis)、異時性睫狀體炎(heterochroniccyclitis)、虹膜睫狀體炎(iridocyclitis)或富克斯睫狀體炎(Fuch'scyclitis)、亨諾赫-舍恩萊茵紫癜(Henochlchonleinpurpura)、人類免疫缺乏病毒(HIV)感染、艾柯病毒感染(echovirusinfection)、心肌病(cardiomyopathy)、阿(Alzheimer'sdisease)(parvovirusinfection)染(rubellavirusinfection)、疫苗接種后綜合征(post-vaccinationsyndromes)、先天個生風疫感染(congenitalrubellainfection)、埃巴病毒感染(Epstein—Barrvirusinfection)、流行性腮炎(mumps)、埃文斯綜合征(Evan'ssyndrome)、自身免疫性性腺衰竭(autoimmunegonadalfailure)、西登哈姆氏舞蹈病(Sydenham'schorea)、鏈球菌感^JnW^t(post-streptococcalnephritis)、PlSifil^ifiliW^(thromboangitisubiterans)、甲狀腺中毒癥(thyrotoxicosis)、脊髓癆(tabesdorsalis)、脈絡膜炎(chorioiditis)、巨細胞多肌痛(giantcellpolymyalgia)、內(nèi)分泌目艮病(endocrineophthamopathy)、個曼性過敏性月市炎(chronichypersensitivitypneumonitis)、干燥性角IIπIIiit(keratoconjunctivitissicca)>M1^f^IIπIIiit(epidemickeratoconjunctivitis)、特發(fā)性腎臟綜合征(idiopathicnephriticsyndrome)、微小腎病變(minimalchangenephropathy),良性家族性及局部缺血再灌注損傷(benignfamilialandischemia-reperfusioninjury)>!網(wǎng)月莫自身；fet生(retinalautoimmunity)、關節(jié)炎癥(jointinflammation)、支氣管炎(bronchitis)、慢性阻塞性氣管疾病(chronicobstructiveairwaydisease)、娃肺(silicosis)、口疫(aphthae)、阿37弗他性口腔炎(aphthousstomatitis)、動脈硬化病癥(arterioscleroticdisorders)、無精子產(chǎn)生癥(aspermiogenese)、自身免疫性溶血(autoimmunehemolysis)、結節(jié)病(Boeck'sdisease)、7令球蛋白血癥(cryoglobulinemia)、迪皮特朗擎縮(Dupuytren'scontracture)、晶&體過_個生目艮內(nèi)炎(endophthalmiaphacoanaphylactica)、過_個生腸炎(enteritisallergica)、麻風結節(jié)性紅斑(erythemanodosum1印rosum)、特發(fā)性面神經(jīng)麻搏(idiopathicfacialparalysis)、個曼'性疲勞綜合征(chronicfatiguesyndrome)、風濕熱(febrisrheumatica)、哈-里綜合征(Hamman-Rich'sdisease)、感覺神經(jīng)性聽力損(sensoneuralhearingloss)>(haemoglobinuriaparoxysmatica)腺低能癥(hypogonadism)、區(qū)域性回腸炎(ileitisregionalis)、白細胞減少癥(Ieucopenia)、傳染性單核細胞增多癥(mononucleosisinfectiosa)、橫斷性脊髓炎(traversemyelitis)、原發(fā)性特發(fā)性黍占液水月中(primaryidiopathicmyxedema)、腎病(nephrosis)、交感性目艮炎(ophthalmiasymphatica)、肉芽月中性辜丸炎(orchitisgranulomatosa)、姨腺炎(pancreatitis)、急性多神經(jīng)根炎(polyradiculitisacuta)、壞疽性膜皮病(pyodermagangrenosum)、奎漢氏甲狀腺炎(Quervain'sthyreoiditis)、后天性脾萎縮(acquiredspenicatrophy)、歸因于抗精子抗體的不孕癥(infertilityduetoantispermatozoanantobodies)>^!1/^(non-malignantthymoma)>[=|3(vitiligo)、SCID及埃巴病毒相關疾病(SCIDandEpstein-Barrvirus-associateddiseases)、獲得性免疫缺陷綜合征(acquiredimmunedeficiencysyndrome)(AIDS)、寄生蟲疾病(parasiticdiseases)，例如利什曼原蟲病(Lesihmania)、中毒性休克綜合征(toxic-shocksyndrome)、食物中毒(foodpoisoning)、涉及T細胞浸潤的病狀(conditionsinvolvinginfiltrationofTcells)、白細胞黍占附缺乏(leukocyte-adhesiondeficiency)、與由細胞因子及T淋巴細胞介導的急性及遲發(fā)過敏性相關的免疫反應、涉及白細胞滲出(leukocytediapedesis)的疾病、多器官損傷綜合征(multipleorganinjurysyndrome)、抗原-抗體復合物介導的疾病、抗腎小球基底膜疾病(antiglomerularbasementmembranedisease)、變應性神經(jīng)炎(allergicneuritis)、自身免疫性多內(nèi)分泌病(autoimmunepolyendocrinopathies)、卵巢炎(oophoritis)、原發(fā)性黏液水腫(primarymyxedema)、自身免疫性萎縮性胃炎(autoimmuneatrophicgastritis)、交感性目艮炎(sympatheticophthalmia)、風濕病(rheumaticdiseases)、混合結締組織疾病(mixedconnectivetissuedisease)、腎病綜合征(nephroticsyndrome)>胰島炎(insulitis)、多發(fā)性內(nèi)分泌衰竭(polyendocrinefailure)、外周神經(jīng)病(peripheralneuropathy)、IM自身；fet生多1胃☆IE(autoimmunepolyglandularsyndrometypeI)、成人發(fā)作型特發(fā)性副甲狀腺低能癥(adult-onsetidiopathichypoparathyroidism)(AOIH)、全頭禿(alopeciatotalis)、擴張型心肌病(dilatedcardiomyopathy)、后天性表皮分解性水皰癥(epidermolisisbullosaacquisita)(EBA)、ifilfeS^SE(hemochromatosis)、月Jl^(myocarditis)、W^π*S(nephroticsyndrome)、原發(fā)性硬化性膽管炎(primarysclerosingcholangitis)、化膿性或非化膿性竇炎(purulentornonpurulentsinusitis)、急性或慢性竇炎(acuteorchronicsinusitis)、ff_、客)、上1或蝶_白勺_炎(ethmoid>frontal>maxilIary>orsphenoidsinusitis)、嗜酸性粒細胞相關病癥(eosinophil-relateddisorder)，例如嗜酸性細胞增多癥(eosinophilia)、肺浸潤嗜酸細胞增多癥(pulmonaryinfiltrationeosinophilia)、嗜酸細胞增多-肌痛綜合征(eosinophilia-myalgiasyndrome)、呂弗勒綜合征(Loffler'ssyndrome)、個曼性嗜酸細胞性月市炎(chroniceosinophilicpneumonia)、熱帶肺部嗜酸細胞增多癥(tropicalpulmonaryeosinophilia)、支氣管肺炎曲霉病(bronchopneumonicaspergillosis)、曲霄月中(aspergilloma)或含有嗜酸粒細胞的肉芽月中(granulomascontainingeosinophils)(anaphylaxis)^ifiiyHJx1^1WHi關節(jié)病(seronegativespondyloarthritides)、多發(fā)性內(nèi)分泌自身免疫病(polyendocrineautoimmunedisease)、硬化性膽管炎(sclerosingcholangitis)、鞏膜、鞏膜外層、慢性粘膜皮膚念珠菌病(sclera,episclera,chronicmucocutaneouscandidiasis)、布魯頓綜合征(Bruton‘ssyndrome)、嬰兒期暫時性低丙種球蛋白血癥(transienthypogammaglobulinemiaofinfancy)、維斯科特-奧爾德里奇綜合征(Wiskott-Aldrichsyndrome)、共濟失調(diào)毛細管擴張癥(ataxiatelangiectasia)、與膠原病有關的自身免疫性病癥、風濕(rheumatism)、神經(jīng)性疾病(neurologicaldisease)、局部缺血性再灌注病癥(ischemicre-perfusiondisorder)、血壓降低反應(reductioninbloodpressureresponse)、血管功能障石導(vasculardysfunction)、血管擴張(antgiectasis)、組織損傷(tissueinjury)iW^iil(cardiovascularischemia)(hyperalgesia)、大腦缺血(cerebralischemia)、及伴隨有血管形成的疾病(diseaseaccompanyingvascularization)、過敏f生病癥(allergichypersensitivitydisorders)、i^l/J、球i^l炎(glomerulonephritides)、再灌注損傷(!^perfusioninjury)、心肌或其他組織的再灌注損傷(reperfusioninjuryofmyocardialorothertissues)、具有急性發(fā)炎成分的皮膚病(dermatoseswithacuteinflammatorycomponents)、急性化月農(nóng)性腦膜炎(acutepurulentmeningitis)或其他中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎性病癥(centralnervoussysteminflammatorydisorders)、f立細Ifif^ilt匿(granulocytetransfusion-associatedsyndromes)、細胞因子誘發(fā)的毒性(cytokine-inducedtoxicity)、急性重度炎癥(acuteseriousinflammation)、慢性難治性炎癥(chronicintractableinflammation)、腎孟炎(pyelitis)、肺硬變(pneumonocirrhosis)、糖尿病性視網(wǎng)膜病變(diabeticretinopathy)、糖尿病個生大云力脈病癥(diabeticlarge-arterydisorder)、云力脈內(nèi)±曾生(endarterialhyperplasia)、消化性潰瘍(ρ印ticulcer)、瓣膜炎(valvulitis)及子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis)。術語“檢測”意欲包括測定物質(zhì)的存在與否或對物質(zhì)的量進行定量。因此該術語是指使用本發(fā)明的材料、組合物及方法來進行定性和定量測定。一般來說，用于檢測的特定技術對于本發(fā)明的實施并不關鍵。舉例來說，根據(jù)本發(fā)明“檢測”可包括觀察α5基因產(chǎn)物、β1基因產(chǎn)物(例如mRNA分子)，或“α5”或“α5β1”多肽存在與否；“α5”或“α5β1”多肽水平或與靶標結合量的變化；α5或α5β1多肽生物功能/活性的變化。在一些實施方案中，“檢測”可包括檢測野生型α5或α5β1水平(例如mRNA或多肽水平)。檢測可以包括定量任何值與對照相比較時至少約5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、100%或更多的變化(例如增加或降低)。檢測可包括定量任何值的至少約2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍或更高，例如20倍、30倍、4-倍、50倍、60倍、70倍、80倍、90倍、100倍或更高的變化。本文中所使用的“標記物”是指直接或間接結合至抗體的可檢測化合物或組合物。標記物自身可通過其自身檢測(例如放射性同位素標記物或熒光標記物)，或在酶促標記物的情況下，可以催化底物化合物或組合物的可檢測的化學變化。III.抗_α5β1抗體本文中提供可結合人類α5β1且競爭性抑制抗α5β118C12抗體與人類α5β1的結合的抗體。因此，本發(fā)明的一個實施方案提供了包含SEQIDN0S:2、3、4、5、6、7或8中任一個可變輕鏈(VL)序列和SEQIDNOS:9、10、11、12、13或14中任一個可變重鏈(VH)序列的抗體。也涵蓋本文中所述抗_α5β1抗體的人類或嵌合(包括例如人源化)形式抗體。根據(jù)一個實施方案，抗體以介于500ηΜ與IpM之間的Kd結合人類α5β1。在某些實施方案中，本文中所提供的抗體具有彡1μΜ、<IOOnM,^10ηΜ、<InM、<0.InM、彡0.OlnM或彡0.OOlnM(例如10—M或以下，例如10、至1(Γ13Μ，例如10、至I(T13M)的解離常數(shù)(Kd)。根據(jù)另一實施方案，抗體不結合ανβ3或ανβ5或ανβ。根據(jù)另一實施方案，抗體包含人類IgG，例如人類IgGl或人類IgG4的Fc序列。在另一實施方案中，F(xiàn)c序列已經(jīng)改變或變化以使得其缺乏抗體依賴性細胞毒性(ADCC)效應子功能，其通常與其與Fc受體(FcRs)的結合有關。存在許多可以改變效應子功能的Fc序列變化或突變的實例。舉例來說，WO00/42072及Shields等人，J.Biol.Chem.(生物化學雜志)9):6591-6604(2001)描述與FcR的結合提高或降低的抗體變體。那些公開的內(nèi)容特定地以引用的方式并入本文中?？贵w可以是Fab、Fab'、F(ab)'2、單鏈Fv(scFv)、Fv片段，以及雙抗體和線性抗體形式。又，抗體可以結合至α5β1且是α5β1拮抗劑，但也結合一種或多種其他靶標并抑制其功能(例如VEGF)的多特異性抗體，或是結合至α5β1上的兩個或兩個以上不同位點的多特異性抗體?？贵w可偶聯(lián)治療劑(例如細胞毒性劑、放射性同位素及化療劑)或結合通過成像檢測患者樣品中或體內(nèi)的α5β1的標記物(例如放射性同位素、熒光染料和酶)。也涵蓋編碼抗-α5β1抗體的核酸分子、包含編碼一個或兩個可變結構域的核酸分子的表達載體和包含所述核酸分子的細胞。這些抗體可用于本文中所述的療法中并且用以檢測患者樣品中(例如使用FACS、免疫組織化學(IHC)、ELISA測定)或患者體內(nèi)的α5β1蛋白。Α.單克隆抗體單克隆抗體可例如使用雜交瘤方法(例如Kohler及Milstein，Nature(自然)，256=495(1975)所述的方法)制備，或可通過重組DNA方法(美國專利第4，816，567號)制得，或可通過下文實例中的本文所述方法產(chǎn)生。在雜交瘤方法中，倉鼠、小鼠或其他適當宿主動物通常經(jīng)免疫劑(例如單獨或與適合載體組合的α5、β1或α5β1多肽)免疫以引出產(chǎn)生或能夠產(chǎn)生將特異性結合至該免疫劑的抗體的淋巴細胞?；蛘撸馨图毎山?jīng)體外免疫。免疫劑典型地包括相關蛋白質(zhì)的多肽或融合蛋白或包含該蛋白質(zhì)的組合物。一般而言，若需要人類來源的細胞，則使用外周血淋巴細胞(“PBLs”)；或若需要非人類哺乳動物來源，則使用脾細胞或淋巴細胞。隨后使用合適的融合劑，例如聚乙二醇，將淋巴細胞與永生細胞系融合以形成雜交瘤細胞。Goding，MONOCLONALANTIBODIESPRINCIPLESANDPRACTICE(單克隆抗體原理和實踐)(NewYork=AcademicPress，1986)，第59-103頁。永生細胞系通常是經(jīng)轉化的哺乳動物細胞，尤其是嚙齒動物、牛及人類來源的骨髓瘤細胞。通常采用大鼠或小鼠骨髓瘤細胞系?？蓪㈦s交瘤細胞在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，其優(yōu)選含有一種或多種抑制未融合的永生細胞生長或存活的物質(zhì)。舉例來說，若親本細胞缺乏酶——次黃嘌呤鳥嘌呤焦磷酸核糖轉移酶(HGPRT或HPRT)，則雜交瘤的培養(yǎng)基通常將包括次黃嘌呤、氨基蝶呤及胸苷(“HAT培養(yǎng)基”)，該物質(zhì)阻止HGPRT缺陷細胞的生長。優(yōu)選的永生細胞系是有效融合、支持通過所選擇的抗體產(chǎn)生細胞穩(wěn)定地高水平表達抗體，并且對例如HAT培養(yǎng)基的培養(yǎng)基敏感的細胞系。更優(yōu)選的永生細胞系是鼠骨髓瘤細胞系，其可獲自例如SalkInstituteCellDistributionCenter,SanDiego,California&_IS胃禾中1#中(AmericanTypeCultureCollection,Manassas,Virginia)0用于產(chǎn)生人類單克隆抗體的人類骨髓瘤及小鼠-人類融合骨髓瘤細胞系也已經(jīng)被描述。Kozber,J.Immunol.(免疫學雜志)，133:3001(1984)；Brodeur等人MONOCLONALANTIBODYPRODUCTIONTECHNIQUESANDAPPLICATIONS(單克隆抗體產(chǎn)生技術和應用)(MarcelDekker,Inc.:NewYork，1987)，第51-63頁。隨后可在培養(yǎng)雜交瘤細胞的培養(yǎng)基中測定針對多肽的單克隆抗體的存在。可通過免疫沉淀或通過體外結合測定，例如放射免疫測定(RIA)或酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)測定由雜交瘤細胞所產(chǎn)生的單克隆抗體的結合特異性。本領域中這些技術和測定是已知的?？衫缤ㄟ^Munson及Pollard，Anal.Biochem.，107:220(1980)的katchard分析來測定單克隆抗體的結合親和力。在鑒別出所需雜交瘤細胞之后，可通過有限稀釋法使克隆形成亞克隆并通過標準方法使其生長。Goding，同上。適合于實現(xiàn)此目的的培養(yǎng)基包括例如杜貝卡氏改良依格爾培養(yǎng)基(Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium)和RPMI-1640培養(yǎng)基?；蛘撸墒闺s交瘤細胞在哺乳動物體內(nèi)以腹水形式進行體內(nèi)生長。由亞克隆分泌的單克隆抗體可通過例如蛋白A-瓊脂糖、羥基磷灰石層析、凝膠電泳、透析或親和層析等常規(guī)免疫球蛋白純化程序自培養(yǎng)基或腹水中分離或純化。也可通過例如美國專利第4，816，567號中描述的重組DNA方法制得單克隆抗體?？墒褂贸Ｒ?guī)程序(例如通過使用能夠與編碼鼠類抗體的重鏈和輕鏈的基因特異性結合的寡核苷酸探針)輕易地分離并測序編碼本發(fā)明單克隆抗體的DNA。本發(fā)明的雜交瘤細胞作為該DNA的優(yōu)選來源。經(jīng)分離后，可將DNA置于表達載體中，隨后將表達載體轉染至不另外產(chǎn)生免疫球蛋白的宿主細胞(例如猿COS細胞、中國倉鼠卵巢(CHO)細胞或骨髓瘤細胞)中，以在重組宿主細胞內(nèi)獲得單克隆抗體的合成。也可以例如通過以人類重鏈和輕鏈恒定結構域的編碼序列替代同源鼠序列(美國專利第4，816，567號；Morrison等人，同上)，或通過將非免疫球蛋白多肽的編碼序列的全部或一部分共價結合至免疫球蛋白編碼序列來修飾DNA。該非免疫球蛋白多肽可替代本發(fā)明抗體的恒定結構域，或可替代本發(fā)明抗體的一個抗原結合位點的可變結構域以產(chǎn)生嵌合二價抗體?？贵w可以是單價抗體。本領域中已經(jīng)知曉制備單價抗體的方法。舉例來說，一種方法涉及免疫球蛋白輕鏈和經(jīng)修飾重鏈的重組表達。一般重鏈在Fc區(qū)中的任一點截短以防止重鏈交聯(lián)?；蛘?，相關半胱氨酸殘基經(jīng)另一氨基酸殘基置換或缺失以防止交聯(lián)。體外方法也適于制備單價抗體?？墒褂玫幌抻?，本領域中已知的技術來實現(xiàn)抗體的消化來制備其片段，尤其Fab片段。B.人類抗體在某些實施方案中，本文中所提供的抗體是人類抗體。可使用本領域中已知的各種技術來制備人類抗體。人類抗體一般描述于vanDijk和vandeWinkel,Curr.Opin.Pharmacol.(當前藥學觀點)5:368-74(2001)以及Lonberg，Curr.Opin.Immunol.(當前免疫學觀點)20=450-459(2008)。可通過向已經(jīng)經(jīng)過修飾因而對于抗原攻擊刺激產(chǎn)生完整人類抗體或具有人類可變區(qū)的完整抗體的轉基因動物施用免疫原，來制備人類抗體。這些動物通常含有全部或一部分人類免疫球蛋白基因座，其替代了內(nèi)源免疫球蛋白基因座，或存在于染色體外或隨機整合于動物染色體內(nèi)。在這些轉基因小鼠中，內(nèi)源免疫球蛋白基因座一般已經(jīng)不活化。關于從轉基因動物獲得人類抗體的方法的綜述，參見Lonberg，Nat.Biotech.(自然生物技術)23:1117-1125(2005)。也參見例如描述XEN0M0USE技術的美國專利第6，075，181號及第6，150，584號；描述HUMAB技術的美國專利第5，770，429號；描述K-MMOUSE技術的美國專利第7，041，870號；及描述VELOCIMOUSE技術的美國專利申請公開文本第US2007/0061900號。這些動物產(chǎn)生的完整抗體的人類可變區(qū)可進一步修飾，例如通過與不同人類恒定區(qū)組合。人類抗體也可通過基于雜交瘤的方法制得。用于產(chǎn)生人類單克隆抗體的人類骨髓瘤及小鼠-人類融合骨髓瘤細胞系已經(jīng)描述。(參見例如KozborJ.Immunol.(免疫學^lU),1333001(1984)BrodeurφA,MonoclonalAntibodyProductionTechniquesandApplications(單克隆抗體產(chǎn)生技術及應用)，第51-63頁(MarcelDekker,Inc.，NewYork,1987)；和Boerner等人，J.Immunol.(免疫學雜志)，147:86(1991))通過人類B細胞雜交瘤技術產(chǎn)生的人類抗體也在Li等人，PNAS.USA,103=3557-3562(2006)中描述。其他方法包括例如美國專利第7，189，826號(描述由雜交瘤細胞系產(chǎn)生單克隆人類IgM抗體)及Ni，XiandaiMianyixue,26(4):265-268Q006)(描述人類-人類雜交瘤)中所述的那些方法。人類雜交瘤技術(Trioma技術)也于Vollmers和Brandlein，HistologyandHistopathology(組織學和組織病理學)，20(3):927-937(2005)；及Vollmers和Brandlein,MethodsandFindingsinExperimentalandClinicalPharmacology(實驗和臨床藥學方法和發(fā)現(xiàn))，27(3)=185-91(2005)中描述。也可通過分離選自源自人類噬菌體展示文庫的Fv克隆可變結構域序列產(chǎn)生人類抗體。隨后可將這些可變結構域序列與所需人類恒定結構域組合。下文描述自抗體文庫選擇人類抗體的技術。C.源自文庫的抗體?？赏ㄟ^在組合文庫中篩選具有所需活性的抗體來分離本發(fā)明抗體。舉例來說，本領域中已知多種用于產(chǎn)生噬菌體展示文庫并且在這些文庫中篩選具有所需結合特征的抗體的方法。這些方法于例如Hoogenboom等人，MethodsinMolecularBiology(分子生物學方法)178:1-37(0'Brien等人編，HumanPress,Totowa,NJ,2001)中評述，并且進一步于例如McCafferty等人，Nature(自然)348:552-554；Clackso等人，Nature(自然)352624-628(1991)；Marks等人，J.Mol.Biol.(分子生物學雜志)222:581-597(1992)；Marks及Bradbury，MethodsinMolecularBiology(分子生物學方法)248:161-175(Lo編，HumanPress,Totowa,NJ,2003)；Sidhu等人，J.Mol.Biol.(分子生物學雜志)338O)299-310(2004)；Lee等人，J.Mol.Biol.(分子生物學雜志)340(5):1073-1093(2004)；Fellouse,PNASUSA101(34):12467-12472(2004)和Lee等人，J.Immunol.Methods(免疫學方法雜志)284(1-2):119-132(2004)中描述。在某些噬菌體展示方法中，VH及VL基因庫(I^pertOire)是通過聚合酶鏈式反應(PCR)分別克隆并且隨機重組于噬菌體文庫中，隨后可如Winter等人，Ann.Rev.Immunol.(免疫學年度綜述)，12:433-455(1994)中所述在其中篩選抗原結合噬菌體。噬菌體通常呈現(xiàn)單鏈Fv(SCFV)片段或Fab片段形式的抗體片段。來自免疫來源的文庫無需構建雜交瘤即可提供免疫原的高親和力抗體?；蛘?，天然庫可經(jīng)克隆(例如自人類)以在無任何免疫的情況下提供針對多種非自體抗原以及自體抗原的抗體單一來源，如Griffiths等人，EMBOJ，12:725-734(1993)所述。最后，也可以通過從干細胞克隆未重排的V基因區(qū)段，并且使用含有隨機序列的PCR引物來編碼高變性CDR3區(qū)，并且實現(xiàn)體外重排來合成制得天然文庫，如Hoogenboom及Winter,J.Mol.Biol.(分子生物學雜志)，227:381-388(1992)所述。描述人類抗體噬菌體文庫的專利公開物包括例如美國專利第5，750，373號，及美國專利公開第2005/0079574號、第2005/0119455號、第2005/0266000號、第2007/0117126號、第2007/0160598號、第2007/0237764號、第2007/0292936號和第2009/0002360號。從人類抗體文庫分離的抗體或抗體片段被視為本文的人類抗體或人類抗體片段。D.嵌合及人源化抗體在某些實施方案中，本文中所提供的抗體是嵌合抗體。某些嵌合抗體于例如美國專利第4，816，567號；及Morrison等人，PNASUSA,81:6851-6855(1984)中描述。在一個實例中，嵌合抗體包含非人類可變區(qū)(例如源自小鼠、大鼠、倉鼠、兔或例如猴的非人類靈長類動物的可變區(qū))及人類恒定區(qū)。在另一實例中，嵌合抗體是種類或亞類已經(jīng)自親本抗體的種類或亞類發(fā)生變化的“種類轉變”抗體。嵌合抗體包括其抗原結合片段。在某些實施方案中，嵌合抗體是人源化抗體。通常，非人類抗體經(jīng)人源化以降低對人類的免疫原性，同時保持親本非人類抗體的特異性及親和力。一般而言，人源化抗體包含一個或多個可變結構域，其中HVRs，例如CDRs(或其部分)源自非人類抗體，且FRs(或其部分)是源自人類抗體序列。人源化抗體視情況也將包含人類恒定區(qū)的至少一部分。在一些實施方案中，人源化抗體中的一些FR殘基經(jīng)來自非人類抗體(例如HVR殘基所源自的抗體)的相應殘基置換，例如以恢復或提高抗體特異性或親和力。人源化抗體及其制備方法于例如Almagro和Fransson，F(xiàn)ront.Biosci.131619-1633(2008)中評述，且進一步于例如Riechmann等人，Nature(自然)332323-329(1988)；Queen等人，PNASUSA86:10029-10033(1989)美國專利第5，821，337號、第7，527，791號、第6，982，321號和第7，087，409號；Kashmiri等人，Methods(方法)36:25-34(2005)(描述SDR(a-CDR)移植)Padlan，Mol.Immunol.(分子免疫學)28489-498(1991)(描述“表面重整”)；Dall'Acqua等人，Methods36:43_6(K2005)(描述"FR重組(shuffling)")及Osboum等人，Methods(方法)36:61-68(2005)和Klimka等人，Br.J.Cancer(英國癌癥雜志)，83=252-260(2000)(描述FR重組(shuffling)的“導向選擇”方法)中描述?？捎糜谌嗽椿娜祟悩嫾軈^(qū)包括，但不限于，使用“最佳擬合”法選擇的構架區(qū)(參見例如Sims等人，J.Immunol.(免疫學雜志)151:2296(1993))；源自特定亞群的輕鏈或重鏈可變區(qū)的人類抗體共同序列的構架區(qū)(參見例如Carter等人，PNASUSA,894285(1992)及I^resta等人，J.Immunol.(免疫學雜志)，151:2623(1993))；人類成熟(體細胞突變)構架區(qū)或人類生殖系構架區(qū)(參見例如Almagro及Fransson，F(xiàn)ront.Biosci.131619-1633(2008))；及源自篩選FR文庫的構架區(qū)(參見例如Baca等人，J.Biol.Chem.(生物化學雜志)272:10678-10684(1997)及Rosok等人，J.Biol.Chem.(生物化學雜志)27122611-22618(1996))。E.多特異性抗體在某些實施方案中，本文中所提供的抗體是多特異性抗體，例如雙特異性抗體。多特異性抗體是對至少兩個不同位點具有結合特異性的單克隆抗體。在某些實施方案中，一種結合特異性是針對α5β1而另一種是針對任何其他抗原(例如VEGF)。在某些實施方案中，雙特異性抗體可結合至α5β1的兩個不同抗原表位。雙特異性抗體也可用于將細胞毒性劑定位于表達α5β1的細胞。雙特異性抗體可制成全長抗體或抗體片段形式。制造多特異性抗體的技術包括，但不限于，具有不同特異性的兩個免疫球蛋白重鏈-輕鏈對的重組共表達(參見Milstein及Cuello，Nature(自然)305:537(1983)；WO93/08829；及Traunecker等人，EMBOJ.10:3655(1991)),及“凸起-入-孔洞(knob-in-hole)”工程改造(參見例如美國專利第5，731，168號)。也可通過以下方法制得多特異性抗體工程改造用于制備抗體Fc-異二聚體的靜電導引作用(W02009/089004A1)；將兩種或兩種以上抗體或片段交聯(lián)(參見例如美國專利第4，676，980號，及Brennan等人Science(科學)，22981(1985))；使用亮氨酸拉鏈來產(chǎn)生雙特異性抗體(參見例如Kostelny等人，J.Immunol.(免疫學雜志)，148(5):1547-1553(1992))；使用“雙抗體”技術來制得雙特異性抗體片段(參見例如Hollinger等人，PNASUSA,906444-6448(1993))；及使用單鏈Fv(sFv)二聚體(參見例如Gruber等人，J.Immunol.(免疫學雜志)，1525368(1994))及如例如Tutt等人，J.Immunol.(免疫學雜志)14760(1991)中所述制備三特異性抗體。本文中也包括具有三個或三個以上功能性抗原結合位點的經(jīng)工程改造抗體，包括“章魚抗體(Octopusantibodies)”(參見例如US2006/0025576A1)。本文中的抗體或片段也包括包含結合至α5β1以及另一不同抗原的抗原結合位點的“雙重作用FAb或“DAF”(例如參見US2008/0069820)。F.抗體變體在某些實施方案中，涵蓋本文中所提供抗體的氨基酸序列變體。舉例來說，可能需要其來提高抗體的結合親和力和/或其他生物特性?？赏ㄟ^在編碼抗體的核苷酸序列中引入適當修飾或通過肽合成來制備抗體的氨基酸序列變體。這些修飾包括例如抗體氨基酸序列內(nèi)的殘基缺失和/或插入其中和/或對其進行置換?？蛇M行缺失、插入和置換的任何組合以獲得最終構建體，其限制條件是最終構建體具有所需特征，例如抗原結合。1.置換、插入和缺失變體在某些實施方案中，提供具有一個或多個氨基酸置換的抗體變體。用于置換性誘變的相關位點包括HVRs和FRs的保守性置換列于表1中的“保守性置換”的標題下。更多實質(zhì)性變化于表1中的“示例性置換”的標題下提供且如下文關于氨基酸側鏈種類進一步描述?？蓪被嶂脫Q引入相關抗體中并篩選具有所需活性，例如保持/提高的抗原結合、降低的免疫原性、或提高的ADCC或CDC的產(chǎn)物。表權利要求1.一種抗抗體，其含有包含CDR-L1、CDR-L2、CDR-L3的VL結構域，和包含CDH-Hl、CDR_H2、CDR-Hl的VH結構域，所述CDR-Ll含有TL-S/T-S/P/T-Q/N-H-F/S-T/I-Y-K/T-I-G/D/S(SEQIDNO:15)；所述CDR-L2含有L/1-N/T-S-D/H/S-G/S-S/L/T-H/Y-N/K/Q/1-K/T-G/A-D/S/V(SEQIDNO16)；所述CDR-L3含有G/A-S/A/Y-S/Y-Y-S/A/Y-S/Y/T-GY-V/I(SEQIDNO17)；禾口所述CDH-Hl含有GFTFS-N/A-RW-I/V-Y(SEQIDNO:18)；所述CDR-H2含有GIKTKP-N/A/T-I/R-YAT-E/Q-YADSVKG(SEQIDNO:19)；禾口所述CDR-Hl含有L/V-TG-M/K-R/K-YFDY(SEQIDNO20)。2.權利要求1所述的抗體，其中所述VL結構域包含⑶R-L1、⑶R-L2和⑶R-L3，其各自包含圖3所示的序列，和所述VH結構域包含⑶R-H1、⑶R-H2和⑶R-H3，其各自包含圖3所示的序列。3.權利要求1所述的抗-Ci5^1抗體，其中所述VL結構域包含SEQIDNOS:3_8中的任一個，和所述VH結構域包含SEQIDNOS:11-14中的任一個。4.權利要求1所述的抗體，其中所述VL結構域包含SEQIDNO:8，和所述VH結構域包含SEQIDNO:14。5.權利要求1-4中任一項所述的抗體，其是人抗體、人源化抗體、嵌合抗體、雙特異性抗體或多特異性抗體。6.權利要求1-4中任一項所述的抗體，其是與α5β1結合的抗體片段。7.權利要求1-4中任一項所述的抗體，其是全長IgGl抗體。8.根據(jù)權利要求7所述的抗體，其中所述抗體含有包含置換的Fc部分。9.一種分離的核酸分子，其編碼權利要求1-8中任一項所述的抗體。10.一種宿主細胞，其包含權利要求9所述的核酸。11.一種產(chǎn)生抗_α5β1抗體的方法，其包括培養(yǎng)權利要求10所述的宿主細胞從而產(chǎn)生所述的抗體。12.一種免疫綴合物，其包含權利要求1-4中任一項所述的抗體和細胞毒性劑。13.一種藥物組合物，其包含權利要求1-4中任一項所述的抗體和藥學上可接受的載體。14.權利要求13所述的藥物組合物，其還包含VEGF拮抗劑。15.權利要求14所述的藥物組合物，其中所述的VEGF拮抗劑是抗-VEGF抗體。16.權利要求15所述的藥物組合物，其中所述抗-VEGF抗體為貝伐珠單抗。17.權利要求1-4中任一項所述的抗體，其還包含可檢測標記。18.權利要求17所述的抗體，其中所述可檢測標記是選自由放射性同位素、熒光染料和酶組成的組的成員。19.權利要求1-4中任一項所述的抗體，其用作藥物。20.權利要求1-4中任一項所述的抗體，其用于治療涉及異常血管發(fā)生和/或血管通透性或滲漏的疾病或病癥。21.權利要求20所述的抗體，其中所述疾病是選自由癌癥、眼病、自身免疫病組成的組的成員。22.權利要求1-4中任一項所述的抗體，其用于抑制血管發(fā)生。23.一種檢測懷疑含有α5β1蛋白質(zhì)的樣品中α5β1蛋白質(zhì)的方法，所述方法包括(a)使權利要求17-18中任一項所述的抗體與所述樣品接觸；和(b)檢測抗-α5β1抗體與所述α5β1蛋白質(zhì)之間的復合體的形成。24.權利要求23所述的方法，其中所述樣品來自診斷患有涉及異常血管發(fā)生、異常血管通透性和/或血管滲漏的疾病的患者。25.一種治療患有涉及異常血管發(fā)生和/或血管通透性或滲漏的疾病或病癥的個體的方法，所述方法包括向所述個體施用有效量的權利要求1-4中任一項的抗體。26.權利要求25所述的方法，其中所述疾病或病癥是選自由癌癥、眼病和自身免疫病組成的組的成員。27.權利要求沈所述的方法，其中所述癌癥選自由結腸直腸癌、肺癌、乳腺癌、腎細胞癌和成膠質(zhì)細胞瘤組成的組。28.權利要求25所述的方法，其中所述疾病或病癥是選自由視網(wǎng)膜病變、年齡相關的黃斑變性、角膜新血管形成、角膜移植新血管形成、視網(wǎng)膜新血管形成和新血管性青光眼組成的組的成員。29.權利要求25所述的方法，還包括向所述個體施用有效量的VEGF拮抗劑。30.權利要求四所述的方法，其中所述VEGF拮抗劑是抗-VEGF抗體。31.權利要求30所述的方法，其中所述抗-VEGF抗體是貝伐珠單抗。32.權利要求四所述的方法，其中所述VEGF拮抗劑在抗-α5β1抗體之前施用。33.權利要求四所述的方法，其中所述VEGF拮抗劑與抗-α5β1抗體同時施用。34.權利要求四所述的方法，其中受試者先用所述VEGF拮抗劑治療直至所述受試者對VEGF拮抗劑治療無反應，然后所述受試者用抗-α5β1抗體治療。35.權利要求四所述的方法，還包括施用選自由抗腫瘤劑、化療劑、生長抑制劑和細胞毒性劑組成的組的治療劑。36.一種用于檢測已經(jīng)用VEGF拮抗劑治療的受試者中的α5β1的試劑盒，所述試劑盒包含(a)權利要求1-4中任一項所述的抗-α5β1抗體；和(b)使用說明書。全文摘要本發(fā)明提供新型抗-α5β1抗體，包括所述抗體的組合物和試劑盒，以及制備和使用所述抗體的方法。文檔編號C07K16/28GK102365297SQ201080013817公開日2012年2月29日申請日期2010年3月23日優(yōu)先權日2009年3月25日發(fā)明者葉蔚藍,吳巖,格雷戈里·D·普洛曼,梁偉慶申請人:霍夫曼-拉羅奇有限公司